DE3108543A1 - 1-((2-mercaptocycloalkyl)-carbonyl)-l-prolin-verbindungen, verfahren zu ihrer herstellung, zwischenprodukte zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneimittel - Google Patents

Description

Es besteht ein erhebliches Interesse an Weiterentwicklungen auf dem Gebiet zur weiteren Entwicklung der Arzneistoffe zur Behandlung von Hochdruck. Obwohl seit kurzem große Fortschritte bei der Therapie von Hochdruck erzielt worden sind ,ist ein ideales Antihypertensivum zur Zeit noch nicht verfügbar. L-Prolin- und Thia- bzw.. Oxazolxdincarbonsäurederivate als Angiotensin-Converting-Enzym-Inhibitoren sind kürzlich in der wissenschaftlichen Literatur und Patentliteratür beschrieben worden; vgl. M.A. Ondetti u.Mitarb., Science, Bd. 196 (1977), S. 441 bis AAA, DE-OS 2 932 021» BE-PS 879 158 und JP-OS 9060/80.

Diese Verbindungen tragen eine gegebenenfalls substituierte Mercaptoalkanoylgruppe am Stickstoffatom des heterocyclischen Restes.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, 1—[(2-Mercaptocycloalkyl)-carbonyl]-L-prolin-Verbindungen der allgemeinen Formel I

25

(D

COOR

35

1 2

zu entwickeln, in der R, R und R jeweils Wasserstoffatome oder C₁ .-Alkylreste darstellen, η eine ganze Zahl mit einem

"~ 3

Wert von 1 bis 5 ist und R ein Wasserstoffatom oder einen

C -Alkylrest bedeutet/ die sich zur Behandlung von Hochdruck eignen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I enthalten in ihrem Molekül drei Asymmetriezentren, die in der Formel durch Sternchen gekennzeichnet sind. Da die Prolingruppe eine feste absolute Konfiguration besitzt, nämlich die L-Kpnfiguration, können die Verbindungen der allgemeinen Formel I in vier diastereoisomeren Formen existieren nämlich zwei eis-Diastereoisortieren und zwei trans-Diastereo isomeren, wobei eis und trans sich auf die gegenseitige Stellung der Mercapto- und Carbonylgruppe bezüglich der ¹^ Ebene des Cycloalkylrestes beziehen.

Die trans-Isomeren sind diejenigen Verbindungen, bei denen die Carbonylgruppe und die SH-Gruppe zueinander in transStellung zur Ebene des Cycloalkylrestes stehen, während die cis-Isomeren zueinander in cis~Stellung bezüglich der Ebene des Cycloalkylrestes stehen. Die Erfindung umfaßt sämtliche reinen Diastereoisomeren oder deren Gemische.

Die. Verbindungen der allgemeinen Formel I sind wertvolle

Arzneistoffe, die sich zur Behandlung von Hochdruck eignen.

Die Verbindungen der Erfindung können nach folgendem Reaktionsschema hergestellt werden:

• # 4 *

(CR',)

[CR.'₂>_n

R"-C-S

11

COOH '· ^+S0C12

(ID

Stufe A

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R"-C-S

Il 0

■ "coci ,

+ (III)

C00^w Na

Stufe B

COOH (V)

Stufe S

COOR

(I)

■j In. Stufe A wird eine Verbindung der allgemeinen Formel II, in der R, R , R und η die vorstehend angegebene Bedeutung haben und R eine Methyl- oder Phenylgruppe darstellt, mit Thionylchlorid zum Säurechlorid umgesetzt. Thionylchlorid wird bei Temperaturen von O bis 5°C in. geringem Überschuß zur Verbindung der allgemeinen Formel II gegeben. Nach beendeter Umsetzung wird das überschüssige Thionylchlorid abdestilliert. Das Säurechlorid der allgemeinen Formel III wird unter vermindertem Druck destilliert und in der Stufe B ^mit L-Prolin-Natriumsalz umgesetzt. Diese Umsetzung wird bei niedrigen Temperaturen in Wasser und in Gegenwart eines Säureacceptors durchgeführt. Als Säureacceptoren können anorganische Basen oder tertiäre Amine dienen, wie Natriumoder 'Kaliumcarbonat oder hydroxid, Trimethylamine Triäthylamin, Pyridin und Picolin. Vorzugsweise wird L-Prolin-Natrium salz auch als Chlorwasserstoffacceptor und deshalb im Überschuß verwendet. In einer bevorzugten Ausführungsform wird das Acylchlorid der allgemeinen Formel III langsam in eine Lösung einer mindestens doppelt molaren Menge L-Prolin in der stöchiometrischen Menge 1 η Natronlauge eingetragen. Das Reaktionsgemisch wird bei der Zugabe auf O bis 5°C eingestellt. Danach wird die Temperatur auf Raumtemperatur gebracht.. Nach beendeter Umsetzung, was sich durch Dünnschichtchromatographie feststellen läßt, wird die Verbindung der allgemeinen Formel V aus dem Reaktionsgemisch in üblicher Weise isoliert. Zu diesem Zweck wird das Reaktionsgemisch mit einer starken Mineralsäure, wie Schwefelsäure oder Salzsäure angesäuert und mit einem inerten organischen Lösungsmittel, vorzugsweise Diäthyläther, extrahiert. Das erhaltene Produkt kann in üblicher Weise gereinigt werden, beispielsweise durch Umkristallisation aus einem Lösungsmittel, durch Säulenchromatographie oder beide Methoden. Alternativ kann in einer Stufe C die Verbindung der allgemeinen Formel II unmittelbar mit L-P.rolin-tert.-bu ty !ester in Gegenwart eines Kopplungsmittel zum Amid der allgemeinen Formel IV umgesetzt werden. Für diesen Zweck kommen die verschiedensten

r . ₁₀ . π

1 Kupplungsmittel in. Frage, beispielsweise Dicyclohexylcarbodiimid, N,N^f-Carbonyldiimidazol oder N-Äthoxycarbonyl-

2-athoxy-1.,2-dihydrochinolin. Bevorzugt wird Dicyclohexylcarbodiimid. Die Umsetzung wird in Gegenwart eines inerten 5 organischen Lösungsmittels, wie Benzol, Chlorbenzol, Toluol, ^! einem chlorierten niederen Kohlenwasserstoff und vorzugsweise Methylenchlorid, bei Temperaturen von etwa O⁰C bis Raum- '■ temperatur, vorzugsweise bei etwa 0 C, durchgeführt. Nach be-

[ endeter Umsetzung wird das Reaktionsgemisch in üblicher Weise

aufgearbeitet. Ss wird die Verbindung der allgemeinen Formel.

IV erhalten, die durch Abspaltung der tert.-Butylester mit Trifluoressigsäure in die freie Säure der allgemeinen Formel

V überführt wird. Durch Abspaltung der Acylseitenkette wird die entsprechende Verbindung der allgemeinen Formel I erhalten, in der R eiVi Wasserstoffatom darstellt. Je nach der

Bedeutung des Restes R kann die Abspaltung der Acylseitenkette auf verschiedene Weise durchgeführt werden. Wenn der

Rest R eine Methylgruppe ist, wird der Thiolester der allgemeinen Formel V durch basenkatalysierte Alkoholyse mit einem ' niederen Alkanol, wie Methanol oder Äthanol und Natrium- oder Kaliumhydroxid oder -carbonat als Katalysator verseift. Wenn der Rest R eine Phenylgruppe ist mit wäßriger Ammoniaklösung behandelt.

Wenn der Rest R eine Phenylgruppe ist, wird die Verbindung

Zur Herstellung von. Verbindungen der allgemeinen Formel I,

2
in der R einen niederen Alkylrest darstellt, können diese Verbindungen aus dem Thiolester der allgemeinen Formel V durch Veresterung und anschließende Abspaltung der Schutzgruppe aus dem Zwischenprodukt der allgemeinen Formel VI durch Umesterung mit Kaliumcarbonat und einem Alkohol der allge-

2
meinen Formel R OH hergestellt werden.

Die Zwischenprodukte der allgemeinen Formel V und VI, welche die gleiche pharmakologische Aktivität aufweisen wie die Verbindungen der allgemeinen Formel I, sind ein weiterer Gegenstand der Erfindung.

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^Γ 11

Analog den Endprodukten der allgemeinen Formel I können auch die Zwischenprodukte der allgemeinen Formel V und VI in vier diastereoisomeren Formen existieren. Die vorstehend angegebenen allgemeinen Formeln V und VI stellen daher sowohl die einzelnen reinen Diastereoisomeren oder deren Gemische dar. Wenn die trans- oder cis-Formen der Verbindungen der allgemeinen Formel I oder V" oder VI oder die einzelnen Isomeren erwünscht sind, wird das im vorstehenden Reaktionsschema angegebene Verfahren mit einem einzigen Enantiomeren- paar (eis oder trans) der allgemeinen Formel II durchgeführt. In diesem Fall werden ausgehend von einem einzigen Enantior merenpaar (eis oder trans) der allgemeinen Formel II durch Umsetzung mit dem optisch aktiven L-Pro1in die Zwischenprodukte der allgemeinen Formel IV und V sowie das Endprodukt der allgemeinen Formel I als Gemische von zwei eis- oder trans-Diastereoisomeren erhalten, die gegebenenfalls in die einzelnen Komponenten getrennt werden können.

Da die Diastereoisomeren unterschiedliche physikalisch-chemisehe Eigenschaften besitzen, läßt sich diese Trennung bzw. Spaltung leicht nach üblichen Methoden erreichen, beispielsweise durch fraktionierende Umkristallisation aus einem Lösungsmittel oder durch Chromatographie. Zur Herstellung der einzelnen Diastereoisomeren der allgemeinen Formel I, V oder VI kann es zweckmäßig sein, sofern die Ausgangsverbindung der allgemeinen Formel II in die zwei Enantiomerenpaare getrennt ist, jedes einzelne Paar mit einer optisch aktiven Base umzusetzen, die beiden entstandenen Diastereoisomeren zu trennen und die freie Säure wieder herzustellen und nach dem Reaktionsschema weiter umzusetzen.

Die Ausgangsverbindungen der allgemeinen Formel II können nach verschiedenen Methoden hergestellt v/erden, je nach der Bedeutung der Reste R , R und n. Wenn η eine ganze Zahl mit einem Wert von 2 bis 5 bedeutet, und R ein Wasserstoffatom darstellt, wird die Ausgangsverbindung der allgemeinen For-

mel II durch Umsetzung der entsprechenden 1-Cycloalken-1-carbonsäure oder einer 2-(C_1-.)-Alkyl-1.-cycloalken-1-carbonsäure mit überschüssiger Thioessigsäure oder Thiobenzoesäure (R = Methyl- oder Pheny!gruppe) hergestellt. Es wird eine . Verbindung der allgemeinen Formel II erhalten, in der R ein Wasserstoffatom darstellt, η eine ganze Zahl mit einem Wert von 2 bis 5 ist, R ein Wasserstoffatom oder einen C*.-Alkylrest und R eine Methyl- oder Phenylgruppe bedeutet. Die Umsetzung kann in Abwesenheit oder in Gegenwart eines

JO Lösungsmittels durchgeführt werden. Bei Verwendung eines Lösungsmittels werden vorzugsweise aprotische, polare oder unpolare organische Lösungsmittel verwendet, die bei der Anlagerungsreaktion nicht stören. Spezielle Beispiele für verwendbare Lösungsmittel sind Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Chlorbenzol, chlorierte niedere Kohlenwasserstoffe und Benzol. Die Umsetzung wird vorzugsweise bei Temperaturen von Raumtemperatur bis zur Rückflußtemperatur des Reaktionsgemisches durchgeführt. Die Reaktionsgeschwindigkeit nimmt mit steigender Temperatur zu. Die Umsetzung ist im allgemeinen innerhalb etwa 1 bis 10 Stunden beendet.

In speziellen Fällen kann die Umsetzung auch bei niedrigeren Temperaturen durchgeführt werden, sofern längere Reaktionszeiten möglich sind. Nach beendeter Umsetzung wird das gege— benenfalls vorhandene Lösungsmittel und die überschüssige Thiocarbonsäure abdestilliert und der Rückstand chromatographisch gereinigt.

Im allgemeinen führt die Anlagerung der Thiocarbonsäure an

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die Doppelbindung zu zwei diaste-i*?öisomeren Paaren von Enantiomeren, von denen zwei als trans-Isomere angegeben werden, da

die -COOH-Gruppe und die -SCOR -Gruppe zueinander in transStellung stehen. Ferner entstehen zwei cis-Isomere, die in der cis-Stellung zueinander stehen. Das Mengenverhältnis der eis- zu den trans-Isomeren bei der Anlagerungsreaktion läßt sich nicht vorhersagen. Ss hängt von der Struktur der einge-

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setzten 1-Cycloalken-i-carbonsäure, von der Thiocarbonsäure und von den speziellen Reaktionsbed-ingungen ab. Im allgemeinen wurde festgestellt, daß die Anlagerung nicht stereospezifisch verläuft, da beide Isomeren erhalten werden, daß jedoch überwiegend die trans-Isomeren gebildet werden. Eine

Modifikation der vorstehend beschriebenen Reaktionsbedingungen, wie niedrigere Temperatur, längere Reaktionszeit und die. Verwendung eines speziellen Lösungsmittels, kann jedoch dieses Mengenverhältnis sehr stark beeinflussen. 10

Zur Herstellung eines einzigen Paares von Enantiomeren (eis oder trans) der Verbindung der Formel II kann das Gemisch der beiden diastereoisomeren Paare der Enantiomeren nach üblichen Methoden in die trans- und cis-Isomeren gespalten werden.

Bei der fraktionierenden Umkristallisation werden bessere Ergebnisse erhalten, wenn man das Gemisch der eis- und trans- - Verbindungen der allgemeinen Formel II in ein cis-trans-Gemisch der entsprechenden Salze mit sterisch raumerfüllenden Basen überführt, beispielsweise mit Dicyclohexylamin. Die eis- und trans-Salze werden getrennt und sodann werden die Carboxylgruppen in Freiheit gesetzt. Bei Verwendung der cis- und träns-Isomeren in den Stufen A und B oder C und D wer-

den die jeweiligen eis- und trans-Isomeren der allgemeinen

4 Formel V erhalten, die nach Abspaltung der R CO-Gruppe die eis— und trans- Verbindungen der allgemeinen Formel I liefern.

Die eingesetzten 1-Cycloalken-i-carbonsäuren können aus den entsprechenden Cycloalkanonen in einem mehrstufigen Verfahren hergestellt werden. Zunächst wird mit einem Alkalimetallcyanid das Cyanhydrin hergestellt, das mit Phosphoroxychlorid in Pyridin dehydratisiert wird- Anschließend wird

die Cyanogrup'pe durch Säurehydrolysc in die Carboxylgruppe überführt. In einer Alternativmethode wird ein 2-0xo-cyclo-

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alkylcarbonsaurealkylester mit einem Reduktionsmittel, wie . Natriumborhydrid, in den entsprechenden 2-Hydroxycycloalkylcarbonsäurealkylester überführt. Danach wird der Ester mit Phosphoroxychlorid in Pyridin dehydratisiert und die Carbalk-

5 oxygruppe durch alkalische Hydrolyse in die Carboxylgruppe überführt.

Wenn der Rest R ein C., ₄~Alkylrest darstellt, kann dieses Verfahren zur Herstellung der 2-(C₁_₄)-Alkyl-1-cycloalken-1-carbonsäure modifiziert werden. In diesem Fall wird der 2-Oxocycloalkylcarbonsäurealkylester mit Phosphorpentachlorid zu einem 2-Chlor-1-cycloalken-1-carbonsäurealkylester umgesetzt, der anschließend mittels eines Lithium-di—(C...)-al— kylcuprats in den entsprechenden 2-(C_1-4)-Alkyl-1-cycloalken- !-carbonsäurealkylester überführt wird. Schließlich wird durch alkalische Hydrolyse die Carbalkoxygruppe verseift. Es wird die 2-(C._.)-Alkyl-1-cycloalken-1-carbonsäure erhalten. Diese Methoden sind bekannt oder analog aus den aus der Literatur bekannten Verfahren; vgl. z.B. J.Org. Chem., Bd." 43, (1978), S. 3974. und die dort zitierte Literatur.

. Verbindungen der allgemeinen Formel II, in der η eine ganze

ι Zahl mit einem Wert von 2 bis 5 ist und R einen C, .-Alkylrest darstellt, können aus 1-(C₁ .-Alkyl—2-hydroxy-cycloalkancarbonsäure hergestellt werden. Zunächst werden diese mit Thionylchlorid in die entsprechenden Carbonsäurechloride überführt, die mit tert.-Buty!alkohol zu den entsprechenden tert.—Buty!estern umgesetzt werden. Diese werden mit Thioessigsäure oder Thiobenzoesäure behandelt. Anschließend wird die tert.-Buty!estergruppe abgespalten. Die 1-(C J-Alkyl-2-hydroxy-cycloalkancarbonsäuren können aus den entsprechenden 2-Oxo-cycloalkancarbonsäure-nieder-a.lkylestern durch Alkylierung mit R —J/NaH und anschließende selektive Reduktion der Ketogruppe zur Hydroxylgruppe und milde alkalische Hydrolyse der Estergruppe zur Carbonsäure hergestellt werden.

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Verbindungen der allgemeinen Formel II, in der η den Wert 1 hat, können aus Propyolsäure durch Anlagerung von Phenylmethanthiol, anschließende Veresterung der Carboxylgruppe mit tert.-B.utylalkohol, Bildung des Cyclopropylringes mit in Dijodmethan/Sn-Cu nach der Simmons-Smith-Reaktion, Abspaltung der Benzylgruppe mit flüssigem Ammoniak und Natrium analog der Birch-Reduktion, Umsetzung mit Benzoylchlorid oder Acetylchlorid in Pyridin und Abspaltung der tert.-Butyl-

estergruppe mit Trifluoressigsäure hergestellt werden. 10

Alternativ können Verbindungen der allgemeinen Formel II, in der η den Wert 1 hat, folgendermaßen hergestellt werden:

Ein Acrylsäure-tert.-b.utylester der allgemeinen Formel

3 1 3 1

CR -CR COO-tert.-butyl, in der R und R die vorstehend an-_1ς * über photographische Cyclopropanbildung

gegebene Bedeutung haben, wird/mit Trijodmethan in die entsprechende Cyclopropylverbindung überführt, sodann wird der erhaltene Z-Jod-cyclopropancarbonsäure-tert.-butylester mit Thioessigsäure oder Thiobenzoesäure umgesetzt und die tert.-

Butylgruppe abgespalten.
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Sofern eine Spaltung der Diastereoisomeren der Endprodukte nicht erforderlich ist, können die Zwischenprodukte der allgemeinen Formel IV, in der η eine ganze Zahl mit einem Wort von 2 bis 5 ist, ausgehend von 2-Oxo-1-(C_1-4)-alkyl-cycloalkan-

carbonsäure-nieder-alkylestern folgendermaßen hergestellt werden: Zunächst wird die Ketogruppe zur Hydroxylgruppe selektiv reduziert, danach die Estergruppe zur Carboxylgruppe verseift, die Hydroxylgruppe mit Essigsäureanhydrid in Pyridin acetyliert, das erhaltene Produkt mit L-Prolin-tert.-butyl-

ester kondensiert und die erhaltene Verbindung mit der Thiocarbonsäure in alkalischem Medium umgesetzt.

Wie vorstehend bereits erwähnt, ist es ein weiteres Merkmal der Erfindung, die neuen Verbindungen der allgemeinen Formel

I sowie ihre Zwischenprodukte der allgemeinen Formel V und VI als Arzneistoffe zur Behandlung von Hochdruck einzusetzen.

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Zu diesem Zweck werden diese Verbindungen zu Arzneipräparaten verarbeitet.

Die blutdrucksenkende Wirkung der Verbindungen beruht zumindest zum Teil auf ihrer Hemmung des Angiotensin-Converting-Enzyms. Diese Verbindungen hemmen das Enzym, das Arigiotensin I in das biologisch aktive Angiotensin II umwandelt. Angiotensin II ist die wesentliche gefäßverengende

Komponente des renalen Pressorsystems. 10

Angiotensin H stimuliert auch die Nebennieren .und erhöht die Äldosteronkonzentration im Blut. Unabhängig von dem Mechanismus, an dem Angiotensin II bei der Erhöhung des Blutdruckes teilnimmt, ist die Hemmung der Bildung des Angiotensin II von erheblichem Wert bei der Therapie bestimmter Arten von Hochdruck. Die Aktivität der Verbindungen der Erfindung sowie der Zwischenprodukte der allgemeinen Formel V als Inhibitoren des Converting-Enzyms kann sowohl in vitro als auch in vivo festgestellt werden. Die in vitro-Aktivität wird

^ nach dem Radioimmuntest nach der Methode von K. Poulsen, J. Lab. Clin. Med., Bd. 78 (1971), S. 309 bis 315, bestimmt. Die in vitro-Aktivität wird quantitativ folgendermaßen bestimmt:

50 μΐ Rattenplasma, das Angiotensinogen, Renin und Converting-Enzym in physiologischen Mengen,- " ' . jedoch kein endogenes Angiotensin I und Angiotensin II enthält, sowie 10 μΐ Angiotensin II Antikörper in der Verdünnung 1 : 120

werden 30 Minuten bei 37 C inkubiert.

Während dieser Inkubation wird in Abwesenheit von Converting Enzym-Inhibitoren das gebildete Angiotensin I unter der Einwirkung des Converting—Enzyms in Angiotensin II überführt. Dieses wird durch den entsprechenden Antikörper eingefangen.

Auf diese Weise wird der Abbau des Angiotensin II durch die Angiotensinasen unterdrückt. Nach dem Abkühlen des Gemi-

ρ ( üb J 4 \J—J

sches auf 0°C wird die gebildete und vom Antikörper eingefangene Menge an Angiotensin II durch den Radioiiniauntest bestimmt; vgl. K. Poulsen und J. Jörgensen, J. Clin. Endocrinol. Metab., Bd. 39 (1974), S. 816 bis 825.

Das gleiche Verfahren wird wiederholt, jedoch wird das Rattenplasma nicht nur in Gegenwart des Antikörpers sondern auch in. Gegenwart unterschiedlicher Konzentrationen der zu untersuchenden Verbindungen inkubiert, um die Wirkung der zu untersuchenden Verbindung bei der Hemmung des Converting-Enzyms zu bestimmen.

Die. Versuche, einschließlich der Kontrollversuche, die in Abwesenheit der zu untersuchenden Verbindungen durchgeführt ^ wurden, werden gleichzeitig durchgeführt, um identische Versuchsbedingungen sicherzustellen, damit ein echter Vergleich der Ergebnisse möglich ist.

Wie bereits erwähnt, wird die Menge des antikörpergebundenen Angio-

tensin II durch den Radioimmuntest folgendermaßen bestimmt: 1 ml einer Lösung von markiertem Angiotensin II (etwa-100. pg/1ml) wird bei 4°C in sämtliche Reagenzgläser gegeben. Danach wird mindestens 18 Stunden bei 4°C inkubiert. Dies ist der Mindestzeitraum zu einer Gleichgewichtseinstellung zwischen markiertem und nicht markiertem Angiotensin II und dem Antikörper. Freies und antikörpergebundenes Angiotensin II werden sodann mittels 200 μΐ Dextran-beschichteter Aktivkohle voneinander getrennt. Die Aktivkohle, die vorher in die Reagenzgläser gegeben wird, wird gleichzeitig

in allen Proben durch mehrmaliges Kippen während 30 Sekunden vermischt. Nach 30minütigem Zentrifugieren bei 3000 g wird der Überstand, der das antikörpergebundene Angiotensin II enthält, in Zählgefäße dekantiert, und sodann wird jede Probe gezählt.

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Zur Bestimmung des entwickelten Angiotensin II aus der Menge des antikörpergebundenen markierten Angiotensin II wird eine Angiotensin II-Eichkurve mit 50 μg Standard Angiotensin II (enthaltend 0 bis 7,5 pg Angiotensin II) und 10 μΐ

^ Angiotensin II Antikörper in Verdünnung 1 : 120 aufgestellt. Das gleiche Verfahren wie vorstehend beschrieben von der Inkubation bei 37 C während 30 Minuten bis zur Zählung des antikörpergebundenen markierten Angiotensin II wird befolgt, vorzugsweise gleichzeitig mit den anderen Tests. Durch Auftragen der Mengen des antikörpergebundenen markierten Angiotensin II gegen bekannte Mengen des ursprünglich anwesenden Angiotensin II läßt sich eine Eichkurve aufstellen, die eine unmittelbare Beziehung zwischen der Menge des antikörpergebunde— nen markierten Angiotensin II, das in jedem Test bestimmt

'

wird, und der Menge des erzeugten Angiotensin II erlaubt. Die prozentuale Hemmung der Bildung von Angiotensin II bei unterschiedlichen Konzentrationen der zu untersuchenden Verbindung gegenüber der Kontrollprobe läßt sich leicht berechnen. Man erhält einen ICL· -Wert, d.h. die Konzentration, bei

der eine 50prozentige Hemmung der Bildung von Angiotensin II gegenüber der Kontrollprobe erfolgt. In typischen Versuchen zeigen die Verbindungen der Beispiele 2, 5B und 6A einen IC_5Q-Wert von 0,57, 0,23 bzw. 0,21 μg/ml.

Um sicherzustellen, daß der Wirkungsmechanismus der Verbindungen der Erfindung tatsächlich die Umwandlung des Angiotensin I in das Angiotensin II betrifft jedoch nicht die Bildung . von Angiotensin I, wird der gleiche Versuch mit 10 μΐ Angiotensin I Antikörper in der Verdünnung 1 : 60 anstelle des Angiotensin II Antikörpers durchgeführt. Der Versuch wird gleichzeitig mit dem vorstehend beschriebenen Versuch und unter den gleichen Bedingungen durchgeführt. Der Endwert des antikörpergebundenen markierten Angiotensin I , der unbeeinflußt ist von der Gegenwart der zu untersuchenden Ver-35

bindungen, zeigt die Wirkungsspezifität der erfindungsgemäßen Verbindungen. Die in-vitro Aktivität der

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r _ ₁₉ _ π

Verbindungen der Erfindung als Angiotensin-Converting-Enzym-Inhibitoren wird auch durch in-vivo Versuche an normotensiven Ratten unter folgenden Bedingungen bestimmt: Gruppen von jeweils drei Ratten werden mit Nembuthal betäubt. Eine Kanüle wird in die Karotis eingeführt und an ein Gerät zur Aufzeichnung des arteriellen Blutdrucks angeschlossen. Eine weitere Kanüle wird in die Jugularvene eingeführt, um Angiotensin I sowie die zu untersuchenden Verbindungen zu injizieren.
10

Es wird der Basalblutdruckwert jeder Ratte aufgezeichnet. Sodann werden in die Jugularvene 0,1 μg/kg Körpergewicht Angiotensin I injiziert. Diese Dosis erzeugt eine sofortige und deutliche Blutdruckerhöhung. Die Maximalwerte werden

'

aufgezeichnet. Aus diesen Werten und dem Basalwert wird die durch Angiotensin I hervorgerufene Blutdruckerhöhung bei jeder Ratte berechnet.

Sodann werden die zu untersuchenden Verbindungen in unter-

schiedlichen Dosen an die verschiedenen Gruppen der Ratten gegeben.· Nach ausreichender Zeit, im allgemeinen 15 Minuten, werden die Angiotensin I-Injektionen wiederholt, und der Blutdruck wird bestimmt. Die prozentuale Hemmung der Zunahme des Blutdrucks durch Angiotensin I durch unterschiedliche

Dosen der zu untersuchenden Verbindung läßt sich berechnen.

Für jede Dosis wird ein Wert aus dem Durchschnittswert von drei Tieren der Gruppe berechnet. Beim Auftragen der Konzentrationen der zu untersuchenden Verbindung auf einer

logarithmischen Skala gegen die prozentuale Hemmung zeigt 30

sich eine lineare Beziehung, aus der dor ED^-Wcrt berechnet werden kann, d.h. diejenige Dosis der zu untersuchenden Verbindung, die eine 50prozentige Hemmung der Zunahme des Blutdrucks durch Angiotensin I bewirkt.

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Für die Verbindungen der Beispiele 2 und 6B beträgt dieser SD₅ -Wert 2,3 bzw. 1,8 mg/kg. Ändere in-vivo Versuche wurden durchgeführt, um die blutdrucksenkende Wirkung der Verbindungen der Erfindung zu bestimmen. Diese Versuche wurden an Hunden mit renalem Hochdruck durchgeführt. Die Versuchsmethodik ist von H. Goldblatt et al. in J. Exp. Med., Bd. (1934), S. 347 beschrieben.

Die zu untersuchenden Verbindungen werden den Tieren oral in wirksamen Dosen an sieben aufeinanderfolgenden Tagen gegeben. Der systolische arterielle Blutdruck wird nach der indirekten Methode am Schwanz vor sowie 1, 3,5 und 7 Stunden nach der Behandlung bestimmt. Die Ergebnisse dieser . Versuche zeigen, daß die Verbindungen den Blutdruck wirksam vermindern. Der Abfall des systolischen Blutdrucks beträgt 10 bis 25 % des Basalwertes, je nach der untersuchten Verbindung und der Zeit, zu der der Blutdruck bestimmt wurde. Mit den. Verbindungen der Erfindung wird der maximale Blutdruckabfall erst allmählich erreicht. Dieser hängt von der Dosis und der untersuchten Verbindung ab und kann 2, 3 oder sogar 6 Tage dauern. Infolge dieser allmählichen Abnahme des Blutdrucks auf den Normalwert werden sämtliche in Betracht kommende Kreislaufparameter durch die blutdrucksenkende Wirkung der Verbindungen der Erfindung nicht allzustark beeinträchtigt, und unerwünschte Nebenwirkungen, wie sie die meisten bekannten Antihypertensiva aufweisen, werden vermieden.

Die bei diesen Versuchen erhaltenen Ergebnisse zeigen, daß die 1-[(2-Mercaptocycloalkyl)-carbonyl]-L-prolin-Derivate und die 1-[(2-Acetyl- und 1-[(2-Benzoyl-thiocycloalkyl)-carbonyl]-L-prolin-Derivate der Erfindung sich zur Behandlung bestimmter Arten von Hochdruck eignen.

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Die Verbindungen der Erfindung der allgemeinen Formel I, V oder VI können in Form üblicher Arzneimittel oral oder parenteral gegeben werden.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1
1- [.(2-Äcetylthiocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

19,5 g (2-Acetylthio)-eyelopentanearbonsäure werden bei O C in 8 ml (12 g) Thionylchlorid gelöst. Nach beendeter Zugabe wird die Lösung 20 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Danach wird das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck destilliert. Es werden 18,5 g (91% d^Th.) [(2-Acetylthio)-cyciopentyll-c.arbonylchlorid vom Kp. 130 bis 135°C/4 bis 2,8 Torr erhalten.

Eine Lösung von 18 g (0,156 Mol) L-Prolin in 156,5 ml (0,156 Mol) 1 η Natronlauge wird tropfenweise mit 16g (0,0774 Mol) des Säurechlorids versetzt. Während der Zugabe und zwei weitere Stunden wird das Gemisch bei 5°C gehalten. Nach 15 bis 18stündigem Stehen bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch abgekühlt und mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-Wert von 1 angesäuert. Danach wird das Gemisch mit Diäthyläther extrahiert. Der Ätherextrakt wird eingedampft. Es werden 21 g der Titelverbindimg erhalten.

Die eingesetzte (2-Acetylthio)-eyelopentanearbonsäure kann

folgendermaßen hergestellt werden:
30

Methode A;

Eine Lösung von 62,4 g (0,4 Mol) 2-rOxo-cyclopen ty !carbonsäurearylester in 200 ml Methanol wird auf O⁰C abgekühlt und mit 10 g Natriumborhydrid versetzt. Die Umsetzung wird dünnschichtchromatographisch verfolgt. Nach beendeter Umsetzung wird das Reaktionsgemisch vorsichtig in gesättigte wäßrige

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^Γ - 22 -

Natriumdihydrogenphosphatlösung gegossen. Das Gemisch wird mit Diäthyläther extrahiert. Der Ätherextrakt wird eingedampft und der Rückstand unter vermindertem Druck destilliert. Es werden 44 g 2—Hydroxy-cyclopentylcarbonsäureäthylester vom Kp. 87°C/O,3 Torr erhalten.

3,2 g (O,O2 Mol) des Äthylesters werden in 21 ml Pyridin gelöst. Diese Lösung wird bei 5 C langsam mit 3 ml Phosphoroxychlorid versetzt. Nach 45 Minuten wird das Reaktionsgemisch in Eiswasser gegossen und mit Salzsäure angesäuert. Danach wird mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird eingedampft. Es werden 2,3 g (82 % d.Th.) 1-Cyclopenten-1-carbonsäureäthylester erhalten.

Eine Lösung von 2,3g(O,O164 Mol) der erhaltenen Verbindung und 1,3 g (0,032 Mol) Natriumhydroxid in 50 ml Wasser und 80 ml Methanol wird etwa 20 Minuten' unter Rückfluß erhitzt. Danach wird das Methanol unter vermindertem Druck abdestilliert. Die wäßrige Lösung wird mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Beim Abkühlen kristallisieren 1,03 g 1-Cyclopenten-1-carbonsäure aus; P. 120 bis 121°C.

2,24 g (0,02 Mol) 1-Cyclopenten-i-carbonsäure werdem mit 6 ml Thioessigsäure versetzt. Das Gemisch wird 1 Stunde unter Rückfluß erhitzt und danach 15 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Hierauf wird überschüssige Thio— essigsäure unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wird durch Säulenchromatographie an Kieselgel, das vorher mit Salzsäure gewaschen worden war, gereinigt. Es wird

mit einem Gemisch aus Petroläther und zunehmenden Mengen an Diäthyläther eluiert. Das Eluat wird eingedampft. Es werden 2,5 g (66 % d. Th.)(2-Acetylthio)-cyclopentancarbonsäure erhalten. Wenn bei der vorstehend beschriebenen Umsetzung das Gemisch 8 Stunden erhitzt wird, beträgt die Ausbeute 81 % d. Th..

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Methode B:

Ein Gemisch aus 30 g (0,357 Mol) Cyclopentanon, 48 g (0,738 Mol) Kaliumcyanid und 150 ml Wasser wird mittels einer Eis-Kochsalzmischung auf -10 bis -15°C abgekühlt und unter kräftigern Rühren mit einer Lösung von 69 g (O,363 Mol) Natriumpyrosulfit in 180 ml Wasser versetzt. Danach wird das Gemisch auf Raumtemperatur erwärmt und weitere 4 Stunden gerührt. Hierauf wird das Reaktionsgemisch mit Diäthyläther extrahiert. Der 'Ätherextrakt wird eingedampft. Es werden 39 g (0,35 Mol) des Cyanhydrine erhalten.

Eine Lösung des erhaltenen Cyanhydrins in 75 ml Benzol und 75 ml Pyridin wird tropfenweise mit einem Gemisch aus 90 ml Phosphoroxychlorid in 90 ml Pyridin versetzt. Nach beendeter Zugabe wird das Gemisch 30 Minuten unter Rückfluß erhitzt, danach abgekühlt und in Eiswasser gegossen. Das Gemisch wird mit Diäthyläther extrahiert. Der Ätherextrakt wird mit lOprozentiger Salzsäure und Wasser gewaschen. Danach wird '. das Lösungsmittel abdestilliert. Es hinterbleiben 31,7 g Rohprodukt. Dieses Produkt wird unter vermindertem Druck destilliert. Es werden 25 g 1-Cyan-i-cyclopenten erhalten.

18 g dieses Produktes werden 6 Stunden mit 60 ml 85prozentiger Phosphorsäure unter Rückfluß erhitzt. Danach wird das Re-

aktionsgemisch abgekühlt, mit 60 ml Wasser verdünnt und mit Kochsalz gesättigt. Das wäßrige Gemisch wird mit Diäthyläther extrahiert. Der Ätherextrakt wird mit gesättigter wäßriger Kochsalzlösung gewaschen. Danach wird das Lösungsmittel abdestilliert und der Rückstand aus Pentan umkristallisiert. Es werden 4,
erhalten.

werden 4,7 g 1-Cyclopenten-i-carbonsäure vom F. 120 bis 121 C

Die Umsetzung mit Thioessigsäure wird gemäß Methode A durchgeführt.

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- 24 -

Beispiel2 T- [.(2-Mercaptocyclopentyl·) -carbonyl] -L.-p.rolin

Ein Gemisch aus 100 ml wasserfreiem Methanol und 100 ml mit Ammoniak gesättigtem wasserfreiem Methanol wird in eine auf O⁰C abgekühlte Lösung von 24,5 g (0,086 Mol) 1-[(2-Acetylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin in 50 ml Methanol eingetropft- Das Gemisch wird unter Stickstoff als Schutzgas gerührt. Nach beendeter Zugabe wird das Reaktionsgemisch weitere 4 Stunden unter Stickstoff bei Raumtemperatur ge-• rührt. Hierauf wird das Lösungsmittel abdestilliert und der Rückstand durch Säulenchromatographie an Dowex 50 (einem sulfonierten Polystyrolharz) gereinigt. Es wird mit destilliertem Wasser eluiert. Das Eluät wird eingedampft. Es werden 18,5 g (88 % d.Th.) der Titelverbindung erhalten. '[a]^⁵ -139,3° (c = 1 % in CHCl₃).

Beispiel 3

1-[(2-Acetylthiocyclohexyl)-carbonyl]-L-prolin 20

Beispiel 1 wird wiederholt, jedoch wird die (2-Acetylthio)-cyclohexancarbonsäure eingesetzt. Es wird die Titelverbindung als Gemisch von vier Diastereoisomeren erhalten.

Die eingesetzte (2-Acetylthio)-cyclohexancarbonsäure wird aus Cyclohexanon gemäß Beispiel 1, Methode B, hergestellt.

Beispiel 4

1-[(2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl]-L-prolin 30

Beispiel 2 wird wiederholt, jedoch wird die in Beispiel 3 eingesetzte Carbonsäure verwendet. Es wird die Titelverbindung als Gemisch von vier Diastereoisomeren erhalten.

114° (c = 1 % in CHCl₃).

L J

] Beispiel 5

1-[,(2pBenzoylthio,cyclop,entyl !-carbonyl 3-L-prolin. (trans-D.iastereoisomere)

Ä) 6,85 g L-Prolin-tert.-buty!ester und 8,25 g Dicyclohexylcarbodiimid werden unter Rühren in 55 ml wasserfreiem Dichlormethan gelöst. Die Lösung wird auf O C abgekühlt und mit 10 g trans-(2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure versetzt.

Das. Reaktionsgemisch wird 15 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und danach abfiltriert. Das Lösungsmittel wird eingedampft und der Rückstand in wenig Dichlormethan aufgenommen und mit wenig Magnesiumsulfat getrocknet. Danach wird die Lösung abfiltriert und eingedatnpft. Es werden 18,28 g eines Rückstandes erhalten, der aus einem Gemisch der zwei trans-Diastereoisomeren von 1-[ (2-B.enzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin-tert.-butylester besteht. Das Gemisch wird durch präparative Plüssigkeitschromatographie (Waters) in die einzelnen Komponenten getrennt. Eluiert wird mit einem 1 : 3 Gemisch aus Äthylacetat und Hexan.

Das trans-Diastereoisomer, das zuerst eluiert wird (8,0 g) wird als 1-[ (2-B.enzoylthiocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolintert.-butylester TUS (trans, oberer Fleck) bezeichnet. Es schmilzt nach dem Umkristallisieren aus Hexan bei 73,5 C; [a]p° -107,5° (c = 1,03 % in CHCl₃). Das andere trans-Diastereoisomer wird als 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl] -L-prolin-t.ert.-butylester TLS (trans, unterer Fleck), bezeichnet. Die Verbindung schmilzt nach dem Umkristallisieren aus Hexan bei 67°C; [a]^⁰ + 4,8° (c =0,98 % in CIlCl₃). Eine weitere kristalline Form, die durch Zerreiben der vorstehend beschriebenen. Verbindung in einem Mörser erhalten

wird, schmilzt bei 79°C.

L j

B) Eine Lösung von 53 ml Anisol und 77 ml Trifluoressigsäure wird zu 1 —[ (2-B.enzoylthiocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin-tert.-buty!ester TUS gegeben. Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Danach wird das Reaktionsgemisch bei etwa 35°C zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in Äthylacetat aufgenommen und mit gesättigter wäßriger Natriumbicarbonatlösung extrahiert. Die wäßrige Phase wird mit I.Oprozentiger Salzsäure angesäuert, mit Kochsalz "versetzt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird eingedampft ..und der Rückstand in einem Gemisch aus Benzol und Dichlormethan gelöst und getrocknet. Diese Maßnahme wird mehrmals wiederholt, um Spuren . von Trifluoressigsäure möglichst vollständig abzutrennen. Danach wird der Rückstand aus Äthylacetat umkristallisiert.

*° Es wird eines der beiden trans—Diastereoisomeren von 1-[.(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L—prolin in einer Ausbeute von 7 g als reines einheitliches Prodakt mit folgenden Eigenschaften erhalten:
F. 105 - 106⁰C;

[a]p° - .119,9° (c = 0,99 % in CHCl₃) NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl₃ (6-Einheiten): 1,7 -.2,6 (m, 10 H, CH₂-CH₂); 3,08 (m, 111, CHCO); 3,54 (m, 2H, CH₂N); 4,26 (d.fc., 1H, J_CH__CH = 7,5, J_CH__CH = 6,5, CHS); 4,73 (m, 1H, COCH-N); 7,4-8,0 (m, 5H, CO-0); ²

10,0-5,6 (b, 1H, COOH)[m = Multiplett, d.t. =Dublett von Tripletts; b = breit].

C) Stufe B wird wird mit 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-car-

TLS
bonyl]-L-prolin-tert.-butylester/wiederholt. Es wird das

andere trans-Diastereoisomer von 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl) -carbonyl1-L-prolin als reines einheitliches Produkt mit folgenden Eigenschaften erhalten: F. 88⁰C,-

[αή° - 81,8°;
35

NMR-Spektrum,aufgenommen bei 270 MHz in CDCl₃ (δ-Einheiten):

L -J

^Γ · . -27-

1^-2,6 (m, 1OH, CH₂-CH₂) ; 3,12 (d.t-, IH, ^J _CH__CH ⁼⁷/⁵' J =5.5, CHCO); 3_?4-3,8 (m, 2H, CH N); 4_r23 (d.t.,IH,

J =7_T5, CH-S); 4,64 (m, IH, CO-CH-N); 7,4-8,0 (m, 5H, CH-CH_

CO0);. 11,0-6,5 (b, IH, COOH).

Die eingesetzte trans-(2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure wird folgendermaßen hergestellt:

Ein Gemisch aus 21 g 1-Cyclopenten-i-carbonsäure (Beispiel 1, Methode B) und 105 ml Thiobenzoesäure wird in einem Ölbad unter Stickstoff 7 Stunden auf 120⁰C erhitzt. Danach wird das Gemisch 15 bis 18 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen. Danach wird das Gemisch eingedampft und der Rückstand durch Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt. Das Kieselgel ist vorher mit Salzsäure gewaschen worden. Eluiert wird mit einem Gemisch aus Petroläther und zunehmenden Mengen Diäthyläther. Es werden 26,5 g eines 3:7 cis/trans-Gemisches der (2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure erhalten. Nach fraktionierender Umkristallisation aus Diäthyläther werden 13,45 g reine trans-(2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure vom F. 100⁰C erhalten.

25 Beispie· 16

1- [.(2-MBrCaPtOCyClOPe^yI) -carbonyl] -L-prolin (trans-D.iastereoisomere)

A) in einem 250 ml Kolben werden 9 g trans-Diastereoisomer von 1- [.(2-Benzoylthiocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin vom F. 105 bis 106°C und [α]-⁰ - 119,9°C vorgelegt und unter Argon und unter Rühren mit einer Lösung von 24,7 ml Wasser und 16 ml 32prozentiger Ammoniaklösung versetzt. Nach beendeter Zugabe wird das Gemisch weitere 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach werden 100 ml einer gesättigten wäßrigen Kochsalzlösung zugegeben, und das entstandene Benz-

L J

amid wird abfiltriert. Das Filtrat wird mit Äthylacetat gewaschen, mit 1Oprozentiger Salzsäure angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand aus Diäthyläther umkristallisiert. Ausbeute 4,35 g eines der beiden trans-Diastereoisomeren von 1-[(2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 117 bis 118°C.
^° -2.37,4° (c = T % in CHCl₃

NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl₃ (5-Einheiten):

1.5-2.4 (m, 1OH ,CH -CH ); 1,79 (d, lH,J_{n o} =8, SH);

£ £ CH-S H

2,80 (d.t., IH, J =8, J =8, CHCO); 3.4-3,8 (m, 3H, CH₃N + CHS); 4_;62 (m, IH, CO-CH-N); 8,38 (b.s., IH, COOH).

B) Stufe A) wird mit dem trans-Diastereoisomer von 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 88⁰C und [ct.1 - 81,8° wiederholt. Es wird das andere der beiden trans-D.iastereoisomeren von 1-[.(2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin als einheitliche Verbindung erhalten. F. 107 bis 109°C.

[α]^° = - 62,2° · (c =1,02 % im CHCl₃ NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl-. (δ-Einheiten)

!1,5-2,5 (m, 1OH, CH -CH ); 1,94 (d, IH, J =8, SH);2,85

j (d.t., IH, J

CH-CH

8., J =8, CHCO); 3,52 (d.d..t_w IH,

J ! CH-CH

=8, CHS); 3,5-4^0 (m, 2H,CH N); 4,60 (m,lH, CO-CH-N);

1876-6,8 (b, IH, COOH)

Beispiel 7

1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (cis-Diastereoisomere)

A) Beispiel5 A) wird mit eis-(2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure wiederholt. Es werden die beiden cis-Diastereoisome-

r π

- 29 -

' ren von 1- [.(2-Benzoylthiocyclopentyl) -carbonyl ]-L-prolin-,tert.-buty!ester erhalten. Das erste eluierte Produkt wird als 1- [ (2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin-tert,-butylester CUS (eis, oberer Fleck) bezeichnet. Es schmilzt nach dem Umkristallisieren aus Hexan bei 8O°C. [a]p° -153,5° (c = T % in CHCl₃).

Das andere cis-Diastereoisomer wird als 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl ) -carbonyl ]-L-prolin-tert.-butylester CLS (eis, unterer Fleck) bezeichnet. Die Verbindung schmilzt nach dem •Umkristallisieren aus Hexan bei 68 bis 70°C; [a]p° = -2,7° (c = 1 % in CHCl₃).

B) Beispiel 5 B) wird mit dem 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin-t.ert.-butylester CUS vom F. 8O⁰C und ta]_D - .153,5 wiederholt. Es wird eines der beiden cis-Diastereoisomeren vom 1-[(2-B.enzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin als reines einheitliches Produkt mit folgenden Eigenschaften erhalten:
F. 152⁰C₇

[a]^° = - 183,4° (c = 1,05 % in CHCl₃) NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl₃ (δ-Einheiten)

1,6-2,5 (m,lOH, CH₃-CH₂); 3_f44 (d.t., IH,

CHCO); 3,59 (m, 2H, CH N) ; 4,27 (d.t. ,1H, J =8,CHS) ;

■ CH"CH

4,49 (m,-IH, C

(b, IH, COOH).

CH"~CH 4,49 (m,-IH, CO-CH-N); 7,4-8,0 (m, 5H, CO-^); 9,5-5,5

C) Beispiel 5 B) wird mit 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin-tert.-butylester CLS wiederholt. Ss wird das andere der beiden cis-Diastereoisomeren von 1-[(2-Benzoyl thiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin als Öl mit folgenden Eigenschaften erhalten:

[cc] ^⁰ =-5.9,7° (c = 1,03 % in CHCl₃)

NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl₃ (δ-Einheiten):

L -J

W ίί

- 30 - .

, 1,6-2,6 (m,10H, CH₂-CH₂); 3,4-3,7 (m, 3Η., CH₃N + CHCO) ;4,25 j (d.t., IH, J_0n-0J₁=S, ^j _ch__ch=8/ CHS); 4,60 (ΐη,ΙΗ, CO-CH-N); 17,4-8,0 (m, 5Η, CO-^); 8,6-I₁I (b, IH, COOH).

Die eingesetzte eis-(2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure wird folgendermaßen hergestellt:

Die Umsetzung der 1-Cyclopenten-1-carbonsäure mit Thiobenzosäure wird auf die vorstehend in Beispiel 5 beschriebene Weise durchgeführt.

Die trans-Verbindung wird durch fraktionierende ümkristallisation abgetrennt. Die "Mutterlaugen werden zur Trockene eingedampft und mit einem geringen Überschuß Dicyclohexylamin in Äthylacetat versetzt. Das Gemisch wird bei niedriger Temperatur gerührt. Es wird das Salz in nahezu quantitativer Ausbeute erhalten, abgetrennt und aus 100 ml Äthylacetat pro g Salz umkristallisiert. Es werden 8,8 g reines cis-(2-Benzoylthio)-cyclopentancarbonsäure-Dicyclohexylaminsalz vom F. 175,5°C erhalten.

Eine Suspension des erhaltenen Salzes in 150 ml Äthylacetat wird mit 70 ml 5prozentiger Natriumsulfatlösung versetzt. Es werden 3,7 g der entsprechenden freien Säure vom P. 93,5°C erhalten.

Beispiel 8

1- [ (2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (cis-Diastereoisomere).

A) Beispiel 6A) wird mit dem cis-Diastereoisomer von 1-[.(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 152°C und [ot]_D - 183,4° wiederholt. Es wird eines der beiden cis-Diastereoisomeren von 1-[(2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin als reines einheitliches Produkt erhalten.

L J

Γ . 31 -

F. 89°C;

^° - .149,6° (c = 1,04 % in CHCl₃) NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl., (δ-Einheiten) :

1,5-2,6 (m,10H, CH -CH ).; 1,65 (d_#lH, J__ _ =10,SH) ; 3,1-3.4

2 * Cxi—oH

(m,2H, CHCO + CHS); 3,62 (t, 2H, J «=7, CH N); 4,67

Cn -C-H„ 2. '

<m, IH, CO-CH-N); 8,8-5,7 (, IH, COOH).

B) Beispiel 6A) wird mit dem cis-Diastereoisomer von 1-[(2-Benzoylthiocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin [a]_ - 59,7 wiederholt. Es wird das andere der beiden cis-Diastereoisomeren von 1- [.(2-Mercaptocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin als reines einheitliches Produkt erhalten.

F. 97°C;

[a]p° - .181,7°.
NMR-Spektrum, aufgenommen bei 270 MHz in CDCl₃ (δ-Sinheiten):

1,5-2,5 (m, 1OH, CH₂-CH₃); 1,82 (d, IH, ^J _CHI_SH=9, SH); 3,18 (d.t., IH, ^J _CH__CH=7, J_CH__CH=7, CHCO); 3,36 (d.d.t., ^1H' ^JCH-CH ⁼⁸' ^{CHS); 3}f⁴~³J^{9 (m}' ^2H' ^CH ₂N); 4,61 (m, IH, CO-CHN); ² 9,00 (b.s., IH, COOH).

Beispiel 9

1~ [.(2—Benzpylthio-3,3-dimethyl-cyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (trans-Diastereoisomere)

A) Eine Lösung von 2,20 g L-Prolin-tert.-butylester und 2,63 g Dicyclohexylcarbodiimid in 18 ml wasserfreiem Dichlormethan wird bei 0°C mit 3,55 g trans-2-Benzoylthio-3,3-dimethylcyclopentylcarbonsäure versetzt. Das Gemisch wird.6 Stunden bei 0 C und 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach wird der auskristallisierte Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat zur Trockene eingedampft.

3108541,

\ Aus dem Rückstand werden durch präparat!ve Flüssigkeitschromatographie die einzelnen trans-Kpmponenten abgetrennt. Es· wird mit einem 7 : 3-G.emisch aus Hexan und Äthylacetat eluiert. Es werden 1,62 g 1-[ (2-B.enzoylthio-3,3-dimethylcyclopentylJ-L-prolin-tert.-butylester TUS vom F. 17O°C erhalten; [a]^° - 82,5° (c =Ί,Ο35'% in CHCl₃). Ferner werden 0,90 g 1~[(2-Benzoylthio-3_r3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl] -L-prolin-tert.-butylester/erhalten, der nach dem Umkristallisieren aus Diäthyläther bei 126 C schmilzt? [a]p° - 34,6° (c = 1,01 % in CHCl₃).

B) 9,5 g 1-[.(2-Benzoylthio-3,3-dimethylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin-tert.-b.utylester TUS werden mit 40 ml Anisol und 65 ml Trifluoressigsäure versetzt. Nach 2stündigem Stehen bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch bei 35 C unter . vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in Diäthyläther aufgenommen und zur Trockene eingedampft. Es hinterbleiben 8,3 g eines weißen Feststoffes, der aus Äthylacetat umkristallisiert wird. Es wird eines der beiden trans-Diastereoisomeren von 1-[.(2-Benzöylthio-3,3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl]—L-prolin als einheitlich reines Produkt vom F. 187°C erhalten,
[a]Q⁰ - 90,5° (c = 1,16 % in CHCl₃).

c) 12,1 g 1- [.(2-Benzoylthio-3.,.3-dimethylcyclopentyl) -carbonyl] -L-p.rolin-tert.-buty!ester TLS werden mit 40 ml Anisol und 65 ml Trifluoressigsäure versetzt. Nach 2 1/2stündigem Stehen bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch bei 35 C unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der erhaltene Rückstand wird in Äthylacetat gelöst und mit wäßriger Natriumbicarbonatlosung extrahiert. Die wäßrig alkalische Lösung wird mit lOprozentiger Salzsäure angesäuert, mit Kochsalz versetzt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird aus Diäthyläther umkristallisiert. Es werden 7,75 g des anderen der beiden

L ' J

Γ Π

- 33 -

trans-Diastereoisomeren von 1-[.(2-B.enzoylthio-3,3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl]-L-p.rolin von F. 153 C erhalten.

[a]^° - .141,2° (c = 1,08' % in CHCl₃). 5

Die eingesetzte trans-2rB.enzoylthio-3 , 3-dimethylcyclopentylcarbonsäure wird-folgendermaßen hergestellt:

Ein 1 Liter fassender Kolben wird mit 33,6 g 2,2-Dimethyl-'0 cyclopentanon und einigen ml Dimethylcarbonat beschickt .und unter Stickstoff als Schutzgas langsam mit 15,73 g 65prozentigem Natriumhydrid und 390 ml Dimethylcarbonat versetzt. Das Gemisch wird 5 Stunden auf 80 bis 82°C erhitzt. Danach wird das Reaktionsgemisch auf 0°C abgekühlt und mit 15ml Methanol sowie 28 g Essigsäure versetzt. Nach 15 bis 18stündigem Stehen bei Raumtemperatur werden 200 ml Wasser zugegeben und das Gemisch wird dreimal mit jeweils 120 ml Chloroform extrahiert. Die Chloroformextrakte werden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und einge-

dampft. Es hinterbleibt der 2-Oxo-3,3-dimethylcyclopentylcarbonsäuremethylester als Öl* der durch Destillation gereinigt wird; Kp. 105 bis 1O8°C/15 Torr.

Eine Lösung von 47,6 g des Methylesters in 150 ml Methanol

wird zu einer Lösung von 27,0 g Citronensäure und 5,5g Natriumhydroxid in 300 ml Wasser gegeben. Das erhaltene Gemisch wird allmählich mit 19,6 g Natriumborhydrid und 24 g Citronensäure versetzt, und die Temperatur wird bei 18 bis

23°C und der pH-Wert bei 5 bis 6,5 gehalten. 30

Nach beendeter Umsetzung wird das Methanol unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit Dichlormethan extrahiert. Der Dxchlormethanextrakt wird über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck ein-35

gedampft. Es wird der 2-Hydroxy-3,3-diroethylcyclopentylcarbonsäuremethylester als öl erhalten, der durch Destilla-

^Γ - 34 -

tion gereinigt wird; Kp. 65°C/O,8 Torr.

33 g des erhaltenen Esters werden in einem 1 Liter fassenden Kolben vorgelegt, der 330 g Kaliumhydroxid enthält. Nach 2 Stunden wird das Gemisch 2 1/2 Stunden in einem Ölbad auf 180°C erhitzt und danach langsam auf O⁰C abgekühlt. Schließlich werden 700 ml Wasser zugegeben und die Lösung wird auf 0 bis 10°C abgekühlt und mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Danach wird bei 0 bis 10°C filtriert. Der feste FiI-terrückstand wird mit 200 ml kaltem Wasser gewaschen. Es werden 2,5 g 3,3-Dimethyl-i-cyclopentencarbonsaure erhalten, die nach dem Umkristallisieren aus Wasser bei 67 bis 69°C schmilzt.

2g der Carbonsäure und 2,37 g Thiobenzöesäure werden 14 Stunden unter Argon als Schutzgas auf 120°C erhitzt. Hierauf wird das Reaktionsgemisch abgekühlt, mit wenig Cyclohexan versetzt und abfiltriert. Es werden 2,05 g trans-2-Benzoylthio-3., 3-dimethylcyclopentylcarbonsäure, die nach dem Umkristallisieren aus Hexan bei 131⁰C schmilzt, erhalten.

Die Mutterlaugen werden zur Trockene eingedampft. Es wird ein cis/trans-Gemisch der 2-Benzoylthio-3,3-dimethylcyclopentylcarbonsäure isoliert, das durch Säulenchromatographie

in die eis- und trans-Enantiomeren getrennt werden kann.

Beispiel 10
1-[(2-Mercapto-3,S-dimethyl-cyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin

(trans-Diastereoisomere)
30

A) 5,25 g des trans-Diastereoisomers von 1-[(2-Benzoylthio-3 , 3-dimethy lcyclopentyl ) -carbonyl]-L-prolin vom F. 187°C werden unter Argon aus Schutzgas und unter Rühren mit 81 ml

Wasser und 54 ml 32prozentiger Ammoniaklösung versetzt. Das 35

Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen, die Umsetzu chtöfhih flt id

_M , , , . die Umsetzung chromatögfaphisch verfolgt wird. Nach beendeter Umsetzung/wird das Reaktionsgemisch mi

d,

mit Di-

3 ί 085 r _ 35 -

chlormethan extrahiert, mit Salzsäure angesäuert, mit Kochsalz versetzt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird eingedampft und der Rückstand erneut in Äthylacetat aufgenommen und mit wäßriger Natriumbicarbonatlösung extrahiert. Die wäßrig alkalische Phase wird mit Kochsalz versetzt und mit Äthylacetat extrahiert, bis das bei der Umsetzung gebildete Benzamid vollständig abgetrennt ist. Hierauf wird die wäßrige Phase mit Salzsäure angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird eingedampft. Der Rückstand wird aus Diäthyläther umkristallisiert. Es werden 2,5 g eines der beiden trans-Diastereoisomeren .von 1-[(2-Mercapto-3,3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin
erhalten;

L-prolin als reine einheitliche Verbindung vom F. 139 C

° - 132,8°(c =1,01% in CHCl₃).

B) 5,25 g des trans-Diastereoisomers von 1-[(2-Benzoylthio-3,3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin vom P. 153°C werden unter Argon als Schutzgas mit 27 ml Wasser und 18 ml 32prozentiger Ammoniaklösung versetzt. Das Gemisch wird 2 1/2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach werden 45 ml einer gesättigten wäßrigen Ammoniumsulfatlösung zugegeben, und das Gemisch wird bei O bis 5°C gerührt. Nach 30 Minuten wird das Reaktionsgemisch abfiltriert und das Filtrat mit Äthylacetat gewaschen. Die wäßrige Lösung wird mit 10prozentiger Salzsäure angesäuert und mit Äthylacetat extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wird eingedampft und der Rückstand aus Diäthyläther umkristallisiert. Es werden 3,05g des anderen der beiden trans-Diastereoisomeren von 1-[ (2-Mercapto-3,3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 147 C erhalten. [a]p° - .63,7° (c = 1,055 % in CHCl₃).

Beispiel 11

1 - [ ^-Benzoylthio-S., 3-dimethylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (eis—Dias tereoisomere),

Beispiel 9 wird mit cis-2-Benzoylthio-3,3-diraethylcyclopen-

L -J

ty!carbonsäure wiederholt. Es werden die beiden cis-Diastereoisomeren der Titelverbindung erhalten.

Beispiel 12 1 ~ [. (2-Mercapto-3,3-dime.thylcy.clopentyl) -carbonyl ] -L-prolin (cis-Diastereoisomere)

Beispiel 10 wird mit dem cis-Diastereoisomeren von 1-[(2-Benzoylthio-3,3-dimethylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin wiederholt. Es werden die einzelnen cis-Diastereoisomeren der Titelverbindung erhalten.

Beispiel 13

1 - [. (2-Benzoylthiocyclobutyl) -carbonyl ] —L-prolin (trans-Diastereoisomere.)

A) Beispiel 5A) wird mit trans-(2-Benzoylthio)-cyclobutancarbonsäure wiederholt. Es werden die einzelnen trans-Diastereoisomeren des 1-[(2-Benzoylthiocyclobutyl)-carbonyl]-L-prolin-tert.-butylester erhalten. Das trans-Diastereoisomer, das zuerst eluiert wird, wird als 1-[(2-Benzoylthiocyclobutyl) -carbonyl]-L-prolin-tert.-butylester TUS vom F. 102 bis 103°C bezeichnet; [a]^° - 138,8° (c = 1 % in CHCl₃).

Das andere trans-Diastereoisomer wird als 1—[(2-Benzoylthiocyclobutyl) -carbonyl]-L-prolin-tert.-butylester TLS vom F. 112 bis 113°C bezeichnet; [a]^⁰ + 12,7° (c = 1,01 % in CHCl₃).

B) Beispiel 5B) wird mit 1-[(2-Benzoylthiocyclobutyl)-carbonyl] -L-prolin-tert.-butylester TUS wiederholt. Es wird eines der beiden trans-D.iastcreoisomeren von 1-Γ (2-Benzoylthiocyclobutyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 106 bis 107°C erhalten; [al^° -.119,6° (c ='1,005 %.in CHCl₃).

L J

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- 37 -

C) Beispiel 5C) wird mit 1-[(2-Benzoylthiocyclobutyl)-carbonyl] --L-prolin-tert.-butylester TLS wiederholt. Ss wird das andere der beiden trans-D.iastereoisomeren von 1-[(2-Benzoylthiocyclobutyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 123 bis

124°C erhalten [a]j*° - .86,33° (c = 0,995 % in CHCl₃).

Die eingesetzte trans-(2-Benzoylthio)-cyclobutancarbonsäure wird folgendermaßen hergestellt:

Ein Gemisch aus 2,8 g 1-Cyclobuten-i-carbonsäure und 5,6 ml Thiobenzoesäure wird unter Argon als Schutzgas auf 120 C erhitzt. Nach 6 Stunden wird das Reaktionsgemisch abgekühlt, in wenig Cyclohexan aufgenommen und filtriert. Das Filtrat wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand durch Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt. Eluiert wird mit Petroläther, der 15 % .Diäthyläther enthält. Ausbeute 1,05 g reine trans-(2-Benzoylthio)-cyclobutancarbonsäure, die nach dem Umkrii

schmilzt.
20

dem Umkristallisieren aus Diäthyläther bei 106 bis 107°C

Wenn man mit einem Lösungsmittelsystem mit geringerem Gehalt an Diäthyläther eluiert, wird die eis-(2-Benzoylthio)-cyclobutancarbonsäure erhalten.

Beispiel 14

1- [.(2-Mercaptocyclpbutyl) -carbonylI-L-prolin (trans—Diasteroisomere)

Beispiel 6A) wird mit der Verbindung von Beispiel 13B) wie-

derholt. Es wird eines der beiden trans-Diastereoisomeren

von 1-[.(2-Mercaptocyclobutyl)-carbonyl]-L-prolin vom F. 145 bis 146°C erhalten; Ea]^⁰ - .192,3° (c = 1,065 % i-n CKCl₃).

B) Beispiel 6A) wird mit der Verbindung von Beisoiel 13C wie-35

derholt. Es wird das andere der beiden trans-Diastereoisomeren der Titelverbindung vom F. 137 bis 138°C erhalten;

[α]ρ⁰ - .44,16° (c = 0,985 % in CHCl₃).

Beispiel 15

1-[(2-Benzoylthiocyclobutyl3-L-prolin (cis-Diastereoisomere)

Beispiel 5 wird mit eis-(2-Benzoylthio)-cyclobutancarbon-

einzelnen säure wiederholt. Es werden die beiden/cis-D.iastereoisome-

ren der Titelverbindung erhalten.
10

Beispiel 16

1- [.(2-Mercaptocyclobutyl) -carbonyl] — L-prolin-(cis-Diastereoisomere)

^ Beispiel 6 wird mit den beiden einzelnen cis-Diastereoisomeren von 1 - [.(2-Benzoylthiocyclobutyl) -carbonyl] -L-prolin wiederholt. Es werden die beiden cis-Diastereoisomeren der Titelverbindung erhalten.

Auf die in den vorstehenden Beispielen beschriebene Weise werden noch folgende Verbindungen hergestellt:

1—[(Z-Mercapto-Z-methylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin

(trans-Diastereoisomere)
1- [.(2-Mercapto-2-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

(cis-Diastereoisomere)
1- [ ^-Benzoylthio^-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (trans-Diastereoisomere)

1- [ U-Benzoylthio^-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

30

(cis-Diastereoisomere)

1— [.(2-Benzoylthio—3., 3-d.iäthylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

(trans-Diastereoisomere)
1- [ (2-Benzoylthio-3 , 3-d.iäthylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (cis-Diastereoisomere)

35

1-[(3,3-Diäthyl-2-mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (trans-Diastereoisomere)

Γ . Π

- 39. -

- [.(3, S-Diäthyl^-mercaptocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

(cis-Diastereoisomere) 1- [.(2-B.enzoylthio-3,3-dibutylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

(trans-D.iastereoisome) 1- L(2-B.enzoylthio-3,3-dibutylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (cis-Diastereoisomere) ~ Li3/ S-Diäthyl^-niercapto-cyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (trans-Diastereoisomere) - [ (3,3-Diäthyl·-2-Inercapto-cyclopentyl) -carbonyl] —L-prolin

(eis—Diastereoisomere) T*- i.(2-Benzoylthio-3,3-dipropylcyclopentyl) -carbonyl {-L-prolin

(trans-Diastereoisomere) 1-[(2-Benzoylthio-3_f3-dipropylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (cis-Diastereoisomere)

1-ί(2-Mercapto-3.,3-dipropylcyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (trans-Diastereoisomere)·

1-[.(2-Mercapto-3_/ S-dipropylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (cis-Diastereoisomere)

1-[(2-Benzoylthio-3,S-dimethylcyclopropyl)-carbonyl]-L-prolin 20

(trans-Diastereoisomere)

1-t(2-Benzoylthio-3,S-dimethylcyclopropyl)-carbonyl]-L-prolin

(cis-Diastereoisomere) 1-i.(2-Mercapto-3,3-dimethylcyclopropyl)-carbonyl]-L-prolin-

(trans-Diastereoisomere) 25

1- [.(2—Mercapto—3., 3-dimethylcyclopropyl) -carbonyl] -L-prolin

{cis-Diastereoisomere) 1-[(2-Benzoylthiocyclopropyl)-carbonyl]-L-prolin

{trans-Diastereoisomere) 1-t(2-Benzoylthiocyclopropyl)-carbonyl]-L-prolin

(cis-Diastereoisomere) 1- t (2-Mercaptocyclopropyl) -carbony.TJ-L-prolin

{trans-Diastereoisomere) . 1-[.(2-Mercaptocyclopropyl) -carbonyl] -L-prolin

(cis-Diastereoisomere) 3

^Γ - 40 -

1- [.(2-Mercapto-i-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

(trans-Diastereoisomere) 1- [.(2-Mercapto-i-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (cis-Diastereoisomere) 1- [ ^-Benzoylthio-i.-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (trans-Diastereoisomere)

1- [.(2-B.enzoylthio-i-methylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin 1- [.(2-B.enzoylthio-1 -äthylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (trans-Diastereoisomere) 1- [ (2-Benzoylthio-irätIiylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin

(cis-Diastereoisomere) 1-[(1-Äthyl-2-mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (trans-Diastereoisomere) - [. (1 -Äthyl-2-mercapto cyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (cis-Diastereoisomere) — [.(1 -Isopropyl—2-mercaptocyclopenty 1) -carbonyl] -L-prolin

(trans-Diastereoisomere) 1-[(1-Isopropyl-2-mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin (cis-Diastereoisomere) 1~ [.(2—Benzoylthio—1 -isopropylcyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin (trans-Diastereoisomere) — [. (2 -Benz oy 1 thio-1 -i sopr opylcyclopentyl) -carbonyl ] -L-prolin (cis-Diastereoisomere).

L . J

Claims (1)

1. VOSSlUS VOSSIUS- TAUCrt-NtR -H E*UNE*MAN N ■ RAUH

   PATENTANWÄLTE

   SIEBERTSTRASSE 4 · 8OOO MÜNCHEN 86 · PHONE: (O89) 47 4Ο75 CABLE: BEN ZOLPATENT MDNCHEN ■ TELEX 5-29453 VOPAT D

   u.Z.: R 030 Case: LP 578

   6. März 1981

   GRDPPO LEPETIT SPA Mailand, Italien

   " 1 -1. (2-Mercaptocycloalkyl) -carbonyl ] -L-p.rolin-Verb indungen, Verfahren zu ihrer Herstellung, Zwischenprodukte zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel " .

   Patentansprüche

   1. 1 - [.(2-Mercaptocycloalkyl) -carbonyl] -L-prolin-Verbindungen der allgemeinen Formel I

   (D

   COOR

   1 2

   in der R, R und R jeweils Wasserstoff atome oder C_-, ^-Alkylreste darstellen, η eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis

   3
   5 ist, und R ein Wasserstoffatom oder einen C, .-Alkylrest

   bedeutet.

   310854^

   2. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Carbonylgruppe und die Mercaptogruppe zueinander in trans-S.tellung bezüglich der Ebene des Cycloalkylrestes stehen.

   3. 1—[(2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin.

   4. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1i dadurch gekennzeichnet, daß man eine 2-Acylthio cycloalkylcarbonsäure der allgemeinen Formel II

   R⁴ -C-S /

   COOH

   (ID

   1 3
   in der R, R , R und η die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung

   4
   haben und R eine Methyl- oder Phenylgruppe ist, mit einer L-Prolinverbindung umsetzt und zwar entweder mit L-Prolintert.-buty!ester in Gegenwart eines Kondensationsmittels und anschließend die tert.-Buty!gruppe abspaltet, oder die Verbindung der allgemeinen Formel II in das entsprechende Säurechlorid überführt und dieses mit dem Natriumsalz von L-Prolin kondensiert und die erhaltene Verbindung der allgemeinen Formel V

   (V)

   in der R, R , R , R und η die vorstehende Bedeutung haben, gegebenenfalls in einen C, ,-Alky!ester der allgemeinen Formel VI

   3100543

   COOR

   (VI)

   überführt und sodann die Schutzgruppe

   R⁴-C-

   Il

   O
   in üblicher Weise abspaltet.

   5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man ein einziges Bnantiomerenpaar eis- oder trans der allgemeinen Formel II als Ausgangsverbindung einsetzt.

   6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Gemisch der beiden Diastereoisomeren, eis oder trans, die bei der Kondensation der Verbindung der allgemeinen Formel II· mit der optisch aktiven L-P.rolinverbindung erhält, in die Komponenten spaltet.

   7. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als Verbindung der allgemeinen Formel II ein einsiges Enantiomer verwendet.

   8. Verfahren nach Anspruch 6 zur Herstellung von trans-1-[(2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl]-L-prolin.

   9. Verbindungen der allgemeinen Formel VI

   • · -t ·

   R⁴-C-

   (VI)

   COOR

   ι 2

   in der R_r R und R jeweils Wasser stoff a tome oder C ,,-Al-

   4 I"⁴

   kylreste darstellen, R eine Methyl- oder Phenylgruppe ist, η eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 5 ist und R ein Wasserstoffatom oder einen C, .-Alkylrest bedeutet.

   10. Verbindungen nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Carbonylgruppe und die Acylthiogruppe zueinander in trans-Stellung bezüglich der Ebene des Cycloalkylrestes stehen.

   11. 1-[.(2-Benzoylthiocyclopentyl) -carbonyl] -L-prolin.

   12. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine 2-Acylthiocycloalkylcarbonsäure der allgemeinen Formel II

   (II)

   ,1

   in der R, R', R , R und η die in Anspruch 9 angegebene Bedeutung haben, mit einer L-Prolinverbindung umsetzt, und zwar entweder durch unmittelbare Umsetzung der Säure der allgemeinen Formel II mit L-Prolin-tert.-b.utylester in Gegenwart eines Kondensationsmittels und anschließende Äbsoal-

   • * ι*

   31.0.8541

   10

   20 25 30

   tung der tert.-Butylgruppe oder durch Umwandlung der Säure der allgemeinen Formel II in das entsprechende Säurechlorid und anschließende Kondensation mit L-Prolin-Natriumsalz unter Bildung einer Verbindung der allgemeinen Formel V

   (V)

   COOH

   in der R, R , R , R und η die vorstehende Bedeutung haben, und gegebenenfalls Umwandlung dieser Verbindung in einen C.. _^-Älkylester.

   13. Arzneimittel mit blutdrucksenkender Wirkung, gekennzeichnet durch eine Verbindung nach Anspruch 1.

   35