DE3043409T1 - Prothrombin complex concentrates,preparation and application thereof - Google Patents

Prothrombin complex concentrates,preparation and application thereof

Info

Publication number
DE3043409T1
DE3043409T1 DE803043409T DE3043409T DE3043409T1 DE 3043409 T1 DE3043409 T1 DE 3043409T1 DE 803043409 T DE803043409 T DE 803043409T DE 3043409 T DE3043409 T DE 3043409T DE 3043409 T1 DE3043409 T1 DE 3043409T1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
prothrombin complex
elution
iii
heparin
temperature
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE803043409T
Other languages
English (en)
Other versions
DE3043409C2 (de
DE3043409C3 (de
Inventor
J Liautaud
E Shanbrom
M Chanas
J Pla
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institut Merieux SA
Original Assignee
Institut Merieux SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institut Merieux SA filed Critical Institut Merieux SA
Publication of DE3043409T1 publication Critical patent/DE3043409T1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3043409C2 publication Critical patent/DE3043409C2/de
Publication of DE3043409C3 publication Critical patent/DE3043409C3/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12N9/6429—Thrombin (3.4.21.5)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21005—Thrombin (3.4.21.5)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829—Blood
    • Y10S530/83—Plasma; serum
    • Y10S530/831—Cohn fractions

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Beschreibung
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines Konzentrats des Faktors IX oder, allgemeiner, von einem hochgereinigtem Prothrombin-Komplex sowie neue hochgereinigte Konzentrate von Prothrombin-Komplexen, die gemäß dem Verfahren erhalten werden können.
Es wurden bereits verschiedene Herstellungsverfahren für Prοthrombin-Komplexe (Komplexe, welche die Koagulationsfaktoren II, VII, IX und X enthalten) für die Behandlung verschiedener Koagulationsstörungen vorgeschlagen, insbesondere zur Behandlung von Mangelkrankheiten des Faktors IX (Hämophilie B) oder auch zur Behandlung von Leber-Insuffizienzen.
Man hat auch bereits versucht, den Prothrombin-Komplex ausgehend vom frischen oder frisch durch Verwendung von CaI-ciumphosphat oder Ionenaustauschern-DEAE zur Gerinnung gebrachtem Plasma zu reinigen.
Andere äoenfalls verwendete Verfahren sind bekannt, wie die Adsorption an Bariumsulfat oder ALuniniumhydroxid-Gel.
Es ist ebenfalls vorgeschlagen worden, ein Konzentrat des Faktors IX, ausgehend aus der Fraktion III nach COHN herzustellen, wobei ein frisch durch Äthanol in der Kälte zur Gerinnung gebrachtes Plasma fraktioniert wird.
Die verschiedenen Produkte haben sich als instabil erwiesen, weil sich bestimmte Koagulationsfaktoren im aktivierten oder wirksamen Zustand vorfinden und weil es sich herausgestellt hat, daß etwa 1.1 % der mit dem Konzentraten behandelten Patienten Thrombosen entwickeln.
Um diese Nachteile zu beseitigen hat M. Wickerhauser vorgeschlagen, den in der Fraktion III von COHN vorhandenen aktiven Faktor IX durch Zugabe eines Konzentrats zu inaktivieren, das nach Elution, mittels Heparin und des Co-Eäctors, getrennt über die Fraktion IV von COHN erhalten worden ist.
130617/0028
Hieraus ergab sich, daß ein internationales Komitee formell empfohlen hat, daß weniger gefährliche Präparate durch ,Zugabe von Heparin zum Endprodukt entwickelt werden sollten, um die unheilvollen Wirkungen der Antikoagtüfitionswirkung zu vermeiden.
In anderen Verfahren wurde auch vorgesehen, daß einmal er- .;, haltene Produkt durch Zugabe von Heparin und dessen Cofaktor zu stabilisieren indem man z.B. ein vollständiges Serum aus einem den Cofaktor von Heparin enthaltendem Material verwendet.
Demgegenüber haben die hier vorgeschlagenen Konzentrate einen erheblichen Anteil an dem wirksamen Faktor, trotz der am Schluß erfolgenden Zugabe von Heparin.
Die'Erfindung schlägt vor, ein Herstellungsverfahren für ein Konzentrat eines Prothrombin-Komplexes durchzuführen, das es erlaubt, unmittelbar ein Konzentrat zu erhalten, daß nicht "aktiviert" ist, d. h. welches stabil und ohne Risiko für die Patjaiten ist.
Erfindungsgemäß wird ebenfalls ein einfaches und wenig aufwendiges Verfahren zur Erzeugung eines derartigen Konzentrats geschaffen.
Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung eines Konzentrats des Prothrombin-Komplexes, bei welchem, ausgehend von einem Prothrombin-Komplex enthaltendem Material eine Absorption und danach eine Elution durchgeführt wird, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man ein Prothrombin-Komplex enthaltendes Material und ein Anithrombin III (oder AT III) enthaltendes Material mit einem Absorptionsmittel zusammenbringt, das in der Lage ist, gleichzeitig den Prothrombin-Komplex und das Anti thrombin III zu adsorbieren, daß man mindestens im Elutionsstadium in Gegenwart von Heparin arbeitet und daß man die Elution mit einem Elutinsmittel durchführt, das in der Lage ist, gleichzeitig den Prothrombin-Komplex, das AT III und das Heparin zu eluieren.
130617/0028
~A~ 3043408
Das Heparin aktiviert das Antithrombin III. Das Antithroi ibin III, das aktiviert ist, Schutzbund stabilisiert den Prothrombin-Komplex. In dem Fall, daß das den Prothrombin-Komplex enthaltende Material auch AT III in ausreichender Menge enthält, werden die beiden Ausgangsmaterialien zu einem" einzigen verschmolzen. :
In dem Fall, in dem die Quelle für den Prothrombin-Komplex kein AT III enthält oder eine zur otabilisierung unzureichende Menge enthält, ist es zweckmäßig,eine ausreichende Menge AT III vor der Elution zuzugeben. Vorzugsweise gibt man AT III der Quelle für den Prothrombin-Komplex vor der Adsorption zu.
Die Zugabe von Heparin wird vor der Elution durchgeführt. Anders gesagt ist es möglich, das Heparin dem Elutionsmittel zuzugeben und im Anschluß daran eine Elution durchzubohren. Vorzugsweise wird jedoch das Heparin zur Quelle für den Prothrombin-Komplex oder der Quelle für das AT III vor der Adsorption zugegeben. Man kann auch das Heparin in Kontakt mit dem Adsorptionsmittel bringen und danach dieses in Kontät mit dem oder den Ausgangsstoffen bringen.
Wenn es notwendig ist, das AT III zur Quelle für den Prothrombin-Komplex zuzugeben, wird diese Zugabe vorzugsweise gleichzeitig mit der Zugabe von Heparin bewerkstelligt.
Eine ebenfalls bevorzugte Ausführungsform, besteht darin, den Prothrombin-Komplex während der Dauer des Verfahrens zu schützen.
Als Ausgangsmaterial verwendet man vorzugsweise eine Fraktion, die von einem von Gerinnungsprodukten befreiten Plasma nach dem Eliminieren von Ausfällungen bei der Tiefkühlung erhaltenen Plasma erhalten worden ist, welche Fraktion als
cyro poor plasma" bezeichnet wird.
130617/0028
In gleicher Weise kann man ein frisches Plasma verwenden, das gegebenenfalls geronnen ist. Man kann auch als Ausgangsprodukt die Fraktion III von COHN verwenden, welcher man zweckmäßig das Antithrombin AT III zufügt, z.B. in der Form der Fraktion IV von COHN. Man kann in gleicher Weise als Ausgangsprodukt die Fraktion IV allein verwenden, denn diese Fraktion IV ist auch eine Quelle für den Prothrombin-Kompiex.
Vorzugsweise fügt man, wenn man von einem Plasma ausgeht, so viel Heparin wie möglich hinzu und ebenso, falls möglich, vor der Gerinnung.
Die zuzufügende Heparinmenge ist eine Funktion der Qualität der Quelle für den Prothrombin-Kompiex. Diese Menge schwankt im'allgemeinen von 0,1 I.E. bis 1 I.E., berechnet ungefähr auf einen cnr der Quelle.
Die Adsorption kann auf Aluminiumhydroxid-Gel bewirkt werden, das sich als besonders zweckmäßig für die Ads>rption herausgestellt hat, und nachfolgende Elution des geschützten Prothrombin-Kompiex gemäß der Erfindung.
Man kann jedoch auch andere Adsorptionsmittel verwenden, sofern sich die Bedingungen erfüllen, daß sie in der Lage
mitr
sind, das Konzentrat/dessen Cofaktor (AT III), der durch Heparin aktiviert ist, zu adsorbieren.
Man bewirkt die Adsorption bei einer Temperatur, die am günstigsten ist und die in erster Linie von der Art des Adsorptionsmittels abhängt. Allgemein arbeitet man bei einer Temperatur unterhalb der Umgebungstemperatur <£0 bis 220C), z. B. bei 0 bis 150C. Bei Verwendung von Aluminiumhydroxid-Gel liegt die Temperatur vorzugsweise um etwa 2 bis 80C.
Man führt die Elution mit jedem Mittel durch, das in der Lage ist, gleichzeitig den Prothrombin-Kompiex und
13061770028
das AT III zu eluieren. Im allgemeinen verwendet man einen Puffer mit zweckmäßiger Ionenstärke.
Gemäß einer besonderen Ausführungsform wird die Quelle für den Prothrombin-Komplex, z. B. eine Fraktion CPP, welcher Heparin zugefügt worden ist, an das Aluminiumhydroxid-Gel adsorbiert und anschließend die Elution zwischen O0C und Umgebungstemperatur (20 - 22°C) durchgeführt.
Die eluierte Fraktion kann etwa beim pH-Wert 7 mittels einer oder mehrer Zugaben von Polyäthylenglykol (PEG) (5 bis 10;%) gereinigt werden, welche die unerwünschten Proteine ausfällt. Vorzugsweise bewirkt man die Ausfällungen mittels PEG bei einer Temperatur unterhalb der Umgebungstemperatur, z.B. bei 0 bis 80C und insbesondere bei etwa 2 bis 40C.
Nachdem man durch Zentrifugieren den Niederschlag der verunreinigenden Proteine entfernt hat, stellt man den ρΉ-Wert der Flüssigkeit auf einen Wert in der Größenordnung von 4,8 bis 5,2 ein, fügt das PEG hinzu bis zu einer Konzentration von 12 bis 20 % und isoliert den Niederschlag, der den Prothrombin-Komplex enthält. Diese Ausfällung wird ebenfalls bei niedriger Temperatur durchgeführt. Der erhaltene Prothrombin-Komplex wird danach erneut gelöst und danach wird diese letzte Lösung gegebenenfalls einer Filtration, einer Verteilung (Gegenstromverteilung oder einem chromatographischen Verteilungsverfahren) und der Gefriertrocknung unterworfen.
Die Erfindung hat ebenfalls zun Ziel, ein Konzentrat des Prothrombin-Komplexes, das dadurch gekennzeichnet ist, daß es praktisch frei von aktiven Prothrombin-Komplexen ist. Ein derartiges Konzentrat kann nach der beschriebenen Verfahrensweise erhalten werden. Es unterscheidet sich von den bisher erhaltenen Produkten, welche im allgemeinen wesentliche oder sehr wesentliche Anteile des Komplexes im Aktivierten" Zustand enthalten.
130617/0028
Das Konzentrat des Prothrombin-Komplexes gemäß der Erfindung ist als Arzneimittel brauchbar, insbesondere zur Behandlung von Koagulationsstörungen, besonders bei Mangelerscheinungen an Faktor IX, aber auch bei der Erkankung der Hämorragie beim Neugeborenen, bei Überdosierungen von kumarinhaltigen Arzneimitteln und bei Leberkrankheiten im fortgeschrittenen Zustand. Es wird auf den gewöhnlichen Wegen und Verabreichungsweisen verabreicht.
Der Komplex besitzt pharmakologische Eigenschaften und die gewöhnliche Unschädlichkeit anderer gereinigter Konzentrate von Prothrombin-Komplexen, unterscheidet sich aber durch die Abwesenheit oder quasi-Abwesenheit von unerwünschten thromboseartigen Komplikationen.
Die Erfindung wird im folgenden näher erläutert anhand eines Beispiels, das jedoch nicht als Beschränkung aufzufassen ist.
Das Ausgangsmaterial ist die Fraktion, die CPP genannt wird, d. h. die auf einem geronnenen und anschließend von der Gerinnung befreitem Plasma beruht, von welchem man anschließend den Niederschlag bei Tiefkühlung entfernt hat.
Dieser Fraktion gibt man Heparin derart zu, daß man in der Mischung etwa O, 5 Einheiten je cm' des Plasmas CPP hat.
man
Anschließend bewirkt/bei niedriger Temperatur, nämlich zwischen 0 und 80C und vorzugsweise zwischen 2 und 4°C die Adsorption in einem Aluminiumhydroxid-Gel unter Verwendung von 10 bis 20 cnr des Aluminiumhydroxid-Gels/l
mit ■ ;
des /Heparin versetzten Plasmas.
Das Gel wird gerührt, danach zentrifugiert und gesammelt.
Anschließend wird das Gel mit Hilfe eines klassischen zweckmäßigen gepufferten Blutionsmittels eluiert. Beispielsweise kann man einen Puffer verwenden,· der 0,25 m Kalum-
130617/0028
phosphat, 0,17 m Trinatriumcitrat χ 5 HpO und 0^003 m EDTA Äthylendiamintetraessigsäure enthält. Der pH-Wert wird auf einen Wert in der Gegend von 7,5 bis 8,5 eingestellt und anschließend wird mit einem Puffervolumen in der Größenordnung von 1/30 des Volumens des Plasma CPP eluiert. Die E3ution wird in üblicher Weise durchgeführt, indem man das Gel mit dem zum Eluieren verwendeten Puffer in eine Suspension bringt und rührt. Anschließend wird zentrifugiert und das Eluat gesammelt.
Danach wird der pH-Wert des Eluats auf einen Wert von etwa 7 eingestellt, auf eine Temperatur in der Gegend von 2 bis 40C gebracht und anschließend mit 5 bis 10 Gew.—% je Volumen PEG (Polyäthylenglykol) versetzt. Es wird gerührt und anschließend zentrifugiert und der Niederschlag eliminiert und die überstehende Flüssigkeit gesammelt.
Der pH-Wert der überstehenden Flüssigkeit wird auf einen relativ geringen Wert in der Größenordnung von 4,8 bis 52 gesenkt und danach PEG zugeführt bis zu einem Gehalt von 12 bis 20 % PEG, wobei dies auf die anfangs zugefügte Menge und die Volumenhöhe angerechnet wird, wonach gerührt und zentrifugiert wird, um den Niederschlag zu isolieren. Dieses Stadium wird in gleicher Weise bei niedriger Temperatur durchgeführt.
Der Niederschlag wird anschließend vorzugsweise bei Raumtemperatur in einer Lösung wieder augelöst, die beispielsweise Natriumchlorid oder Trinatriumcitrat enthält, wobei das Volumen der zum Auflösen verwendeten Flüssigkeit etwa 1/2 bis 1/3 des Eluats beträgt. Nach dem Auflösen wird der pH-Wert so eingestellt, bis eine klare Lösung erhalten wird, die eine vollständige Lösung anzeigt und die einen pH-Wert in der Nähe von 7 zeigt.
Schließlich wird noch filtriert, vazugsweise durch eine Membran, wobei die letzte Filtration mindestens in steriler Weise durchgeführt wird.
130617/0028
■■..;■ . ■: ■; ' -AD" ' .
Das erhaltene Produkt wird unter sterilsiBedingungen in alignote Anteile in gewünschter Weise aufgeteilt und anschließend gefriergetrocknet,und zwar sofort nach der Gerinnung.
Es wird ein Konzentrat des Faktors IX erhalten, das praktisch von unerwünschten Aktivitäten befreit ist.
Das beschriebene Beispiel ist offensichtlich in keiner Weise beschränkend.
Die Verabreichung des gefriergetrockneten Konzentrats wird parenteral durchgeführt. Das Konzentrat ist nicht toxisch in üblichen wirksamen Dosierungen.
Die Erfindung hat ebenfalls ein Behandlungsverfahren für Koagulationskrankheiten zum Gegenstand, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man einer Person, die ein solches Leiden hat, eine wirksame Menge eines Konzentrats des Prothrombin-Komplexes gemäß der Definition der Erfindung verabreicht.
13 0617/0028

Claims (21)

Patentansprüche
1. Verfahren zur Herstellung eines Konzentrats eines Prothrombin-Komplexes, bei welchem, ausgehend von einem den Prothrombin-Komplex enthaltenden Material, eine Absorption und anschließend eine Elution durchgeführt wird, dadurch gekennzeichnet, daß man ein den Prothrombin-Komplex enthaltendes Material und ein Antithrombin III (oder AT III) enthaltendes Material mit einem Adsorptionsmittel in Berührung bringt, welches in der Lage ist, gleichzeitig den Prothrombin-Komplex und das Antithrombin III zu adsorbieren, daß man mindestens im EIutionsstadium in Gegenwart von Heparin arbeitet und daß man die Elution mit einem Elutionsmittel durchführt, welches in der Lage ist, gleichzeitig den Prothrombin-Komplex, daß AT III und· das Heparin zu eluieren.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch g e k e η nz ei c h η e t, daß man das Heparin vor der Adsorption dem Prothrombin-Komplex enthaltenden Material oder dem das AT III enthaltenden Material zufügt.
3. Verfahren nach Anspruch 1 * dadurch gekennzeichnet, daß man das Absorptionsmittel mit dem Heparin in Kontakt bringt, bevor man diese mit der oder den Ausgangsmaterialien in Kontakt bringt.
4. Verfahren nach Anspruch . 1, dadurch gekennzeichnet, daß man vor der Elution das Heparin und das Elutionsmittel vermischt.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, d ad urch gekennzeichnet, daß man ein Heparin mit einem Titer zwischen O, 1 und 1 I.E. je cnr Ausgangsmaterial einsetzt.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß man als den Prothrombin-Komplex enthaltendes Mterial eine Plasmafraktion verwendet, die nach der Eliminierung des nach
130617/0028
.- ; 30A3A09
Tiefkühlung erhaltenen Niederschlags erhalten worden ist. ■
7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß man als Ausgangsmaterial frisches Plasma verwendet.
8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5» d adurch gekennzeichnet, daß man als den Prothrombin-Komplex enthaltendes Material die Fraktion III nach COHN verwendet.
9. Verfahren nach vorstehenden Ansprüchen, dadurch gekennzeichnet, daß man als Prothrombin-Komplex enthaltendes Material und/oder AT III enthaltendes Material die Fraktion IV gemäß COHN verwendet.
10. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 8, d adurch gekennzeichnet, daß man als Ausgangsmaterial ein Material verwendet, das gleichzeitig den Prothrombin-Komplex und das AT III enthält.
11. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, dadurch g e k e η η ζ e i c h η et, daß man die Absorption bei einer Temperatur durchführt, die unter der Umgebungstemperatur (20 bis 22°C) liegt.
12. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch g ekennz eichnet, daß man die Absorption bei einer Temperatur von 0 bis 150C durchführt.
13. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch g e-
k enn ζ e ic hne t, daß man die Absorption bei einer Temperatur zwischen etwa 2 und 80C durchführt.
14. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, d adurch gekennzeichnet, daß man als Adsorptionsmittel ein Aluminiumhydroxid-Gel verwendet.
130617/0028
15. Verfahren nach den vorstehenden Ansprüchen, d adurch gekennzeichnet, daß man die Elution bei einer Temperatur zwiscin temperatur (20 bis 220C) durchführt.
Elution bei einer Temperatur zwischen O0C und Umgebungs-
16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, daß man die Elution bei Umgebungstemperatur (20 bis 22°C) durchführt.
17. Verfahren nach jedem der vorstehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß man nach der Elution das Eluat durch Behandeln mit Polyäthylenglykol bei einem pH-Vfert von etv;ä 7 bei einer Temperatur unterhalb der Umgebungstemperatur reinigt, um die unerwünschten Proteine auszufällen.
18. Verfahren nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dai3 man nach der Entfernung des Protein-Niederschlags den pH-Wert der überstehenden Flüssigkeit auf einen Wert in der Größenordnung von 4,8 biö 5,2 einstellt und danach das Polyäthylenglykol zufügt, um den Prothrombin-Komplex auszufällen.
19. Konzentrat eines Prothrombin-Komplexes, dadurch gekennzeichnet, daß es praktisch frei ist von wirksamen Prothrombin-Komplex.
20. Konzentrat eines Prothrombin-Komplexes nach Anspruch 19, dadurch gekennzeichnet, dies gemäß dem Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 18 erhalten worden ist.
21. Verwendung eines Konzentrats eines Prothrombin-Komplexes gemäß einen oder mehreren der Ansprüche 19 bis 20 als Mittel zur Behandlung von Störungen der Blutkoagulation.
130617/00 28
DE3043409T 1979-05-04 1980-05-05 Verfahren zur Herstellung eines Konzentrats eines Prothrombin-Komplexes Expired - Fee Related DE3043409C3 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR7911272A FR2472390A1 (fr) 1979-05-04 1979-05-04 Procede de preparation de concentres de complexe prothrombinique hautement purifies, et concentres obtenus
PCT/FR1980/000069 WO1980002426A1 (fr) 1979-05-04 1980-05-05 Concentres de complexe prothrombinique, preparation et application

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE3043409T1 true DE3043409T1 (de) 1982-02-18
DE3043409C2 DE3043409C2 (de) 1993-12-23
DE3043409C3 DE3043409C3 (de) 1993-12-23

Family

ID=9225039

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE3043409T Expired - Fee Related DE3043409C3 (de) 1979-05-04 1980-05-05 Verfahren zur Herstellung eines Konzentrats eines Prothrombin-Komplexes

Country Status (18)

Country Link
US (1) US4465623A (de)
JP (1) JPH0424360B2 (de)
AR (1) AR227021A1 (de)
AT (1) ATA903980A (de)
BE (1) BE883096A (de)
CA (1) CA1157375A (de)
CH (1) CH654329A5 (de)
DE (1) DE3043409C3 (de)
DK (1) DK157169C (de)
ES (1) ES8100763A1 (de)
FR (1) FR2472390A1 (de)
GB (1) GB2061287B (de)
IT (1) IT1131109B (de)
MX (1) MX5960E (de)
NL (1) NL8020152A (de)
NO (1) NO155477C (de)
SE (1) SE452250C (de)
WO (1) WO1980002426A1 (de)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4663164A (en) * 1980-01-28 1987-05-05 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Aqueous compositions for treating blood clotting factor inhibitors
WO1981002105A1 (en) * 1980-01-28 1981-08-06 Baxter Travenol Lab Therapeutic compositions & methods for manufacture and use
AT379310B (de) * 1983-05-20 1985-12-27 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines antithrombin iii-heparin- bzw. antithrombin iii-heparinoidkonzentrates
US4786726A (en) * 1986-01-06 1988-11-22 Blood Systems, Inc. Factor IX therapeutic blood product, means and methods of preparing same
DE3622642A1 (de) * 1986-07-05 1988-01-14 Behringwerke Ag Einkomponenten-gewebekleber sowie verfahren zu seiner herstellung
DE3625090A1 (de) * 1986-07-24 1988-01-28 Behringwerke Ag Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung
DE3727610A1 (de) 1987-08-19 1989-03-02 Behringwerke Ag Synthetische peptide, gegen diese gerichtete antikoerper und deren verwendung
US6541275B1 (en) 1988-02-03 2003-04-01 Dade Behring Inc. Immunoassay for F1.2 prothrombin fragment
JPH0219400A (ja) * 1988-07-07 1990-01-23 Green Cross Corp:The トロンビンまたはプロトロンビンの製造方法
WO1994022471A1 (en) * 1993-04-05 1994-10-13 The Green Cross Corporation Liquid antithrombin iii preparation and method of stabilizing the same
US6491965B1 (en) 1995-11-30 2002-12-10 Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. Medical device comprising glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates
US6562781B1 (en) * 1995-11-30 2003-05-13 Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. Glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates
US7045585B2 (en) * 1995-11-30 2006-05-16 Hamilton Civic Hospital Research Development Inc. Methods of coating a device using anti-thrombin heparin
US20080306610A1 (en) * 2007-06-07 2008-12-11 Zimmer Orthobiologics, Inc. Tissue processing for nonimmunogenic implants
US8435305B2 (en) 2010-08-31 2013-05-07 Zimmer, Inc. Osteochondral graft delivery device and uses thereof
USD863685S1 (en) 2017-11-27 2019-10-15 Mary Kay Inc. Cosmetic compact
USD850006S1 (en) 2017-11-27 2019-05-28 Mary Kay Inc. Cosmetic compact
USD843660S1 (en) 2017-11-27 2019-03-19 Mary Kay Inc. Cosmetic compact

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2867567A (en) * 1955-01-21 1959-01-06 Nat Res Dev Process of preparing anti-haemophilic globulin
US3560475A (en) * 1969-06-19 1971-02-02 Baxter Laboratories Inc Prothrombin complex prepared by precipitation with polyethylene glycol
JPS5314604B2 (de) * 1972-12-20 1978-05-18
US4087415A (en) * 1976-06-09 1978-05-02 William L. Wilson Antithrombin III
US4081432A (en) * 1977-07-25 1978-03-28 Monsanto Company Method of separating a Factor IX preparation from plasma using ethylene-maleic anhydride polymers
JPS6040859B2 (ja) * 1977-07-27 1985-09-12 喜温 三浦 抗血栓性人工医療材料
AT359646B (de) * 1979-04-19 1980-11-25 Immuno Ag Verfahren zur herstellung von nebenwirkungs- freien plasmafraktionen
DE3101752A1 (de) * 1981-01-21 1982-08-26 Behringwerke Ag, 3550 Marburg "verfahren zur reinigung der blutgerinnungsfaktoren ii, vii, ix und/oder x und danach hergestellte praeparationen"

Also Published As

Publication number Publication date
ES491042A0 (es) 1980-12-01
NO155477B (no) 1986-12-29
IT1131109B (it) 1986-06-18
DE3043409C2 (de) 1993-12-23
CA1157375A (fr) 1983-11-22
SE8009157L (sv) 1980-12-29
US4465623A (en) 1984-08-14
NL8020152A (nl) 1981-02-27
WO1980002426A1 (fr) 1980-11-13
MX5960E (es) 1984-09-06
FR2472390A1 (fr) 1981-07-03
ATA903980A (de) 1982-05-15
JPH0424360B2 (de) 1992-04-24
BE883096A (fr) 1980-11-03
GB2061287B (en) 1983-09-14
SE452250B (sv) 1987-11-23
DK157169B (da) 1989-11-20
DK157169C (da) 1990-04-23
GB2061287A (en) 1981-05-13
DE3043409C3 (de) 1993-12-23
JPS56500569A (de) 1981-04-30
SE452250C (sv) 1998-04-06
NO810009L (no) 1981-01-02
NO155477C (no) 1987-04-08
ES8100763A1 (es) 1980-12-01
AR227021A1 (es) 1982-09-15
FR2472390B1 (de) 1983-07-08
DK1281A (da) 1981-01-02
IT8021723A0 (it) 1980-05-02
CH654329A5 (fr) 1986-02-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69213421T2 (de) Verfahren zur Herstellung eines aktivierten Faktor VII-Konzentrates mit einer hohen Reinheit
DE3043409T1 (de) Prothrombin complex concentrates,preparation and application thereof
DE2243688C3 (de) Verfahren zur Isolierung von Antithrombin
EP0511234B1 (de) Stabile injizierbare lösungen von faktor viii
DE3877529T2 (de) Herstellung von hoch-gereingtem menschlichen Faktor IX sowie anderem Plasmaproteinkonzentrat und dessen therapeutische Verwendung.
DE68907124T3 (de) Verfahren zum Stabilisieren von menschlichen Albuminlösungen und so erhaltene Lösung.
EP0888386B1 (de) STABILER FAKTOR VIII/vWF-KOMPLEX
EP0124506B1 (de) Verfahren zur Inaktivierung von vermehrungsfähigen Krankheitserregern
DE2734821C3 (de) Blutgerinnungsfördernde Präparation und Verfahren zu ihrer Herstellung
EP0447585B1 (de) Verfahren zur Herstellung eines intravenös verträglichen Immunglobulin-G-Präparates
DE3686475T2 (de) Verfahren zur herstellung des alpha-1-proteinase-inhibitors.
DE3686470T2 (de) Verfahren zur herstellung des alpha-1-proteinase-inhibitors.
DE2429191A1 (de) Isolierung von koagulationsfaktoren aus biologischem material
DE2854381A1 (de) Verfahren zur gewinnung des antihaemophilen faktors viii aus blut, blutplasma oder blutplasma-fraktionen
DE3129987A1 (de) Verfahren zur herstellung eines faktor viii(ahf)-hochkonzentrates
EP0111777B1 (de) Gerinnungsaktive Plasmaproteinlösung, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Behandlung von Störungen des Hämostasesystems
EP0137428B1 (de) Verfahren zur Pasteurisierung von Plasma oder von Konzentraten der Blutgerinnungsfaktoren II, VII, IX, und X
DE1054405B (de) Verfahren zur Gewinnung von Urokinasekonzentraten
EP0049861B1 (de) Thrombininhibitor, seine Herstellung und Verwendung
EP0120835B1 (de) Verfahren zur Inaktivierung von Unverträglichkeitsreaktionen verursachenden Substanzen
EP0367840A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines hochreinen, nicht infektiösen Antihämophiliefaktors mittels Chromatographie
DE2715748C3 (de) Gereinigte aktive Verbindung des Plasminogen-Typs menschlichen Ursprungs und ihre Verwendung
DE2428955C3 (de) Verfahren zur Abtrennung der enzymatischen Komponente mit in vivo antikoagulierender und in vitro koagulierender Wirkung aus dem Gift der Schlange Ancistrodon rhodostoma und daraus hergestellte Mittel
EP0255651A2 (de) Mittel zur Therapie faktor VIII-resistenter Hämophilie A und Verfahren zu seiner Herstellung
DE602005003426T2 (de) Therapeutische Humanalbuminlösungen mit niedriger Präkallikreinaktivator- (PKA)-Aktivität und Verfahren zu deren Herstellung

Legal Events

Date Code Title Description
D2 Grant after examination
8363 Opposition against the patent
8366 Restricted maintained after opposition proceedings
8305 Restricted maintenance of patent after opposition
D4 Patent maintained restricted
8328 Change in the person/name/address of the agent

Free format text: DERZEIT KEIN VERTRETER BESTELLT

8328 Change in the person/name/address of the agent

Free format text: KERN, W., DIPL.-ING. BREHM, H., DIPL.-CHEM. DR.PHIL.NAT. VOLPERT, M., DIPL.-ING. DR.-ING., PAT.-ANWAELTE, 81369 MUENCHEN

8339 Ceased/non-payment of the annual fee