DE2858732C2 - - Google Patents

Info

Publication number
DE2858732C2
DE2858732C2 DE2858732A DE2858732A DE2858732C2 DE 2858732 C2 DE2858732 C2 DE 2858732C2 DE 2858732 A DE2858732 A DE 2858732A DE 2858732 A DE2858732 A DE 2858732A DE 2858732 C2 DE2858732 C2 DE 2858732C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
deoxy
azido
galactopyranosyl
tri
acetyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE2858732A
Other languages
English (en)
Inventor
Raimond Urgel Lemieux
Robert Murray Edmonton Alberta Ca Ratcliffe
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chembiomed Ltd
Original Assignee
Chembiomed Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chembiomed Ltd filed Critical Chembiomed Ltd
Application granted granted Critical
Publication of DE2858732C2 publication Critical patent/DE2858732C2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
    • C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
    • C07H5/06—Aminosugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
    • C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
    • C07H13/08—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals directly attached to carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
    • C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Die Erfindung betrifft 3-O-(2-Acetamido-2-desoxy-α-D- galactopyranosyl)-β-D-galactopyranid-Derivate und ihre Verwendung zur Herstellung eines Immunoadsorbens oder eines Antigens.
Die DE-OS 26 30 596 offenbart an Trägerstoffe knüpfbare β-Glykosidderivate, wie 2-Acetamido-2-desoxy-β-D- glucopyranosid.
Die erfindungsgemäßen Disaccharide besitzen die Formel
in der R -OCH₃ oder -NHNH₂ und n 3 bis 19 bedeuten.
Es ist bekannt, daß Kohlehydratstrukturen verschiedener komplexer Zusammensetzungen antigene Determinantien sind. Es ist weiterhin sichergestellt, daß relativ kleine Moleküle, die als Haptene bekannt sind, der Struktur der antigenen Determinante entsprechen können. Die Haptene ergeben, wenn sie an geeignete Trägermoleküle gebunden sind, ein künstliches Antigen, das, wenn es einem Tier unter geeigneten Bedingungen verabreicht wird, die Bildung von Antikörpern mit einer Spezifität für das Hapten bewirkt. Es wurde viel Literatur veröffentlicht, die die Herstellung von Immunoadsorbentien aus Haptenen betrifft. Diese Literatur betrifft die Bildung des Haptens normalerweise durch kovalente Bindungen, eben manchmal auch durch hydrophobe Bindungen, in einem Feststoff, Latex oder gelatineartigen Träger. Das Hapten wird immobilisiert, so daß, wenn das entstehende Immunoadsorbens den Antikörpern mit den Bindungsstellen für die haptenische Struktur ausgesetzt ist, ein Binden der Antikörper an der Oberfläche des Immunoadsorbens stattfindet, und so müssen die Antikörper spezifisch aus der Lösung entfernt werden.
Viele Arten von Feststoff-, Latex- und Gelträgern für die Herstellung von Immunoadsorbentien wurden entwickelt, und viele Wege wurden für die Bindung des Haptens an diese unlöslichen Strukturen vorgeschlagen. Obgleich Verbesserungen bei diesen Materialien möglich sind, liegt die Hauptschwierigkeit darin, daß ein einfacher Zugang zu dem gewünschten Hapten in einer Form, die für die Bindung bzw. Haftung an dem Trägermolekül geeignet ist, fehlt.
Sowohl Galactosamin als auch Lactosamin, normalerweise in Form ihrer N-acetylierten Derivate, finden sich vielfach in der Natur. Sie kommen in Glycoproteinen, Glycolipiden und Mucopolysacchariden vor. Als solche sind sie wichtige Aufbaueinheiten, die in den antigenen Determinanten der Blutgruppensubstanz gefunden werden.
Die bekannte Hauptquelle für D-Galactosamin ist die Säurehydrolyse von Chrondroitinsulfat C, das durch Extraktion von Knorpelgewebe, wie Sehnen, Trachea und Nasensepta erhalten wird. Diese Ausbeuten sind ungewiß, und es ist schwierig, ein kristallines Produkt herzustellen. Es gibt chemische Synthesen, bei denen 1,6,2,3,-Dianhydro-β-D-talopyranose mit Ammoniak oder einem Azidion umgesetzt wird. Diese Verfahren umfassen jedoch 6 bis 11 getrennte chemische Umwandlungen, ausgehend von den einfachen Zuckern. Kürzere Verfahren erfordern seltene Zucker als Ausgangsmaterialien.
Die Inversion der C-4-Konfiguration von Glucosamin durchgehend von dem 4-O-Sulfonat von 2-Acetamido-2-desoxyglucopyranosylderivaten wurde ebenfalls für die Synthese von D-Galactosamin verwendet. Die Umwandlung von Glucosamin in das erforderliche Ausgangsmaterial ist jedoch mühsam.
Die Synthese von Lactosamin ist noch schwieriger, da sie notwendigerweise eine Glycosylierung des Galactosylhalogenids mit einem seltenen Derivat von 2-Acetamido-2-desoxyglucose erfordert. Bei einem bekannten Verfahren sind neun chemische Umwandlungen, ausgehend von 2-Acetamido-2-desoxyglucosamin, vor der Glycosylierungsstufe erforderlich.
Ein Zwischenprodukt, das eine wirksame Herstellung von Glycosiden mit hoher Ausbeute ermöglicht, die die 2-Acetamido-2-desoxy-α-D-galactopyranosylgruppe enthalten, die beispielsweise in der antigenen Determinante der Menschenblutgruppe A und in dem Forssman-Antigen gefunden wird, ist 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranosylchlorid, hergestellt einfach aus D-Galactaltriacetat in hoher Ausbeute.
Man hat lange angenommen, daß die Verwendung von β-Glycosylhalogenid α-(1,2-cis)-Glycosid-Bindungen durch eine Walden-Inversion des reagierenden Zentrums bei Königs-Knorr-Reaktionsbedingungen ergeben würde, wenn der 2-Substituent so gewählt wird, daß er in der Reaktion an dem anomeren Zentrum nicht teilnimmt. Beispielsweise haben Wolfrom, Thompson und Linebec (J. Org. Chem., 28, 860 (1963)) Tri-O-acetyl-2-nitro-β-D- glucopyranosylchlorid entwickelt, um α-D-Glucopyranoside zu synthetisieren. Es sind Arbeiten bekannt, bei denen 2-Azido-2-desoxy-β-D-glycopyranosylchloride verwendet werden, die zur Bildung von 2-Azido-2- desoxy-α-D-galactopyranosiden führen. Es muß jedoch bemerkt werden, daß die von Paulsen und Mitarbeitern (Angew. Chem., Int. Ed., 14, 558 (1975); Tetrahed. Lett., 1493 (1975) und 2301 (1976); Angew. Chem., Int. Ed., 15, 440 (1975)) beschriebenen Verfahren einen beschränkten, sofern überhaupt einen technischen Wert besitzen wegen der extremen Schwierigkeit, die Synthese von 6-O-Acetyl-2-azido-3,4-O-benzyl- 2-desoxy-β-D-galactopyranosylchlorid zu erreichen.
Die durch Umsetzung von O-acyliertem 2-Azido-2-desoxy-glycosyl- nitrat in einem aprotischen, inerten Lösungsmittel mit einem Tetraalkylammonium- oder einem Alkalihalogenid erhaltene Verbindung 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β- D-galactopyranosylchlorid kann bei Reaktionen mit Alkohol unter Bildung von 3,4,6-Tri-O-acetyl- 2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosiden (A) bei geeigneten Königs-Knorr-Bedingungen für die Kondensation eingesetzt werden.
Die Verbindung wird zu einem leicht verfügbaren Zwischenprodukt für Reaktionen, die zu den Produkten des Typs A führen. Somit ist es technisch möglich, die terminale antigene Trisacchariddeterminante für menschliches Blut-A zu synthetisieren, wie sie in den Strukturen B für die Typ-1- und Typ-2-antigenen Determinanten der Menschenblutgruppe A vorhanden ist. Das Trisaccharid wird in einer Form synthetisiert, die für die Herstellung künstlicher Antigene und Immunoadsorbentien, die mit der menschlichen Blutgruppe A verwandt sind, nützlich ist.
Die Bildung von α-Azido-β-nitratoalkanen durch Umsetzung von Olefinen mit Natriumazid und Cer(IV)-ammoniumnitraten wurde von Trahanovsky und Robbins (J. Am. Chem. Soc., 93, 5256 (1971)) beschrieben.
Die Addition von Azid- und Nitratgruppen an 1,2-ungesättigte Zucker in hoher wirtschaftlicher Ausbeute läuft unter Bildung von 2-Azido-2-desoxy-glycosylnitrat ab.
Diese Produkte können aus anomeren Gemischen aus 2-Azido-2- desoxyglycosylnitraten (DE-OS 28 16 340) hergestellt werden.
Die 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrate können zu den entsprechenden 2-Amino-2-desoxyzuckern durch Hydrolyse der Nitrat- und Schutzgruppen, und durch Reduktion der Azidogruppe nach an sich bekannten Verfahren umgewandelt werden. Die Hydrolyse kann vor der Reduktion ablaufen oder vice versa. Die N-acetylierten Derivate der Aminozucker können nach an sich bekannten Verfahren erhalten werden.
Die 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrate können mit einem Halogenidsalz zum Ersatz der Nitratgruppe und unter Bildung der 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogenide behandelt werden. Die Behandlung mit Jodidionen eines anomeren Gemisches aus Glycosylnitraten ergibt thermodynamisch günstigere Anomere, nämlich 2-Azido- 2-desoxy-α-D-glycosyljodid. Das α-Glycosyljodid wird leicht mit einem Äquivalent Chloridion durch Inversion unter Bildung von 2-Azido-2-desoxy-β-D-glycosylchlorid in bekannter Weise substituiert. Dieser Weg zu dem β-Halogenid ist von Vorteil, da er die Umwandlung von Nitraten in ein Reaktionsprodukt ermöglicht das hauptsächlich das 2-Azido-2-desoxy-β-D-galactosylchlorid enthält, das für die Bildung eines 2-Desoxy-α-D-galactosids, einer integralen Einheit der Determinante der Blutgruppe A, nützlich ist. Das so beanspruchte Reagens ist 3,4,6-Tri-O- acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranosylchlorid (1).
Die 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogenide können zur Herstellung von 2-Amino-2-desoxyglycosiden unter Glycosidierungsbedingungen verwendet werden, beispielsweise unter Königs-Knorr-Bedingungen.
Diese Reaktionen betreffen die Behandlung von Glycosylhalogenid mit einem Alkohol in Anwesenheit eines Aktivators.
Das so erhaltene 2-Azido-2-desoxyglycosid wird nach an sich bekannten Verfahren unter Bildung von 2-Amido-2-desoxyglycosiden reduziert. Weiterhin können die Schutzgruppen zur Deblockierung des Glycosids entfernt werden. Insbesondere kann 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranosylchlorid mit 8-Methoxycarbonyloctyl-2-O-(2,3,4-tri-O-benzyl-α-L-fucopyranosyl)- 4,6-O-benzyliden-β-D-galactopyranosyl in Anwesenheit eines Aktivators umgesetzt werden. Das Trisaccharidprodukt wird entblockiert, und die Azidogruppe wird zu dem Amin reduziert, das anschließend unter Bildung von 8-Methoxycarbonyloctyl-3-O-(2-acetamido-2- desoxy-α-D-galactopyranosyl)-2-O-(α-L-fucopyranosyl)-β-D-galactopyranosid acetyliert wird (siehe DE-OS 28 57 791). Dieses Produkt entspricht der antigenen Determinante für die menschliche Blutgruppe A und kann zur Herstellung von Immunoadsorbens verwendet werden, das für die Antikörper A spezifisch ist, durch Fixierung an einen unlöslichen Träger.
Es kann weiterhin zur Inhibierung der Reaktion zwischen den Anti-A-Antikörpern und menschlichen A-Erythrocyten verwendet werden. Das Produkt kann ebenfalls zur Herstellung künstlicher Antigene verwendet werden, die das Züchten durch Immunisierung von monospezifischen Anti-A-Antikörpern in Testtieren ermöglichen. Die darauffolgende Isolierung dieser Antikörper unter Verwendung des Immunoadsorbens ergibt dann ein wichtiges und nützliches Reagens für Zell- und Gewebestimmungen.
Die Azidonitrierungsreaktion zur Herstellung der Ausgangsverbindung 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrat wird in der DE-OS 28 16 340 im einzelnen beschrieben.
Im folgenden werden Reaktionsschemata und Formeln der einzelnen Verbindungen aufgeführt.
Die Umwandlung der Azidonitrate in Azidohalogenide wird in der DE-OS 28 57 790 im einzelnen beschrieben.
Umwandlung von Glycosylhalogeniden zu Glycosiden
Die Glycosidierung unter Königs-Knorr-Bedingungen umfaßt die Behandlung der Glycosylhalogeniden mit einem Alkohol, ROH, in Anwesenheit eines Aktivators. Der Aktivator ist üblicherweise ein Salz oder eine Verbindung, die ein schweres Atom, wie Silber, Blei oder Quecksilber, enthält, das sich mit dem Halogenatom koordinieren kann, so daß die Spaltung seiner Bindung mit dem anomeren Kohlenstoffatom erleichtert wird. Das Halogen wird durch die Gruppe -OCH₃ oder -NHNH₂ unter Bildung des Glycosids ersetzt.
Die α-Glycosylhalogenide von 2-Azido-2-desoxy-D-galactose XX und 2-Azido-2-desoxy-D-lactose XXV und XXVI der 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranoside (Beispiele 1, 2) und 2-Azido-2-desoxy-β-D-lactoside (Beispiel 3) unter den Bedingungen der Königs-Knorr-Reaktion verwendet werden.
Das vollständige Verfahren für die Herstellung der Glycoside umfaßt somit beispielsweise:
Umsetzung von 3,4,6-Tri-O-acetyl-D-galactal mit Cer(IV)- ammoniumnitrat und einem Amidsalz in einem geeigneten Lösungsmittel unter Rühren unter Bildung von 3,4,6-Tri-O-acetyl- 2-desoxy-D-galactopyranosylnitraten;
Umsetzung der 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylnitrate mit einem Halogenidsalz, beispielsweise einem Iodidsalz, in einem geeigneten Lösungsmittel unter Herstellung von 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosylhalogenid, beispielsweise Iodid;
gegebenenenfalls Umsetzung, wenn das Iodid verwendet wurde, des 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyliodids mit einem Mol Äquivalent eines Chloridsalzes in einem geeigneten Lösungsmittel unter Bildung von 3,4,6-Tri- O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranosylchlorid; und
Umsetzung von 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranosylhalogenid, beispielsweise Chlorid, mit einem Alkohol in Anwesenheit eines Aktivators unter Bildung von 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosid.
Der Alkohol besitzt bevorzugt die Formel ROH, worin R′ = (CH₂)nCO R bedeutet, n=3 bis 19 bedeutet und R eine -OCH₃ oder -NHNH₂-Gruppe bedeutet oder worin R′ ein geeignet geschütztes Monosaccharid oder sein Disaccharid der Struktur
ist, worin n=3 bis 19 bedeutet und R eine -OCH₃ oder -NHNH₂-Gruppe, beispielsweise 8-Methoxycarbonyloctyl-2-O-(2, 3,4-tri-O-benzyl-α-L-fucopyranosyl)-4,6-O-benzyliden-β-D- galactopyranosid, bedeutet.
Ein anderes Ausgangsmaterial ist ein peracycliertes 2- Azido-2-desoxy-α-D-lactosylhalogenid das, wenn es mit einem Alkohol in Anwesenheit eines Aktivators umgesetzt wird, peracylierte 2-Azido-2-desoxy-β-D-lactoside ergibt.
Im speziellen wird 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D- galactopyranosylchlorid (XXIII) mit 8-Methoxycarbonyloctyl- 2-O-(2,3,4-tri-O-benzyl-α-L-fucopyranosyl)-4,6-O-benzyliden- β-D-galactopyranosid (XLVIII) in Anwesenheit von Silbertrifluormethansulfonat und Silbercarbonat in dem Lösungsmittel Dichlormethan unter Bildung von 8-Methoxycarbonyloctyl-3-O- (3,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)-2- O-(2,3,4-tri-O-benzyl-α-L-furopyranosyl)-4,6-O-benzyliden-β- D-galactopyranosid (XLIX) umgesetzt. Dieses Produkt wird nach an sich bekannten Verfahren isoliert und behandelt, so daß die folgenden Reaktionen ablaufen: Abspaltung, d. h. Umwandlung der Acetyl-, Benzyl- und Benzylidengruppen in Hydroxylgruppen, Reduktion der Azidogruppe in ein Amin und Acetylierung des Amins. Das Endprodukt dieser Stufen ist 8-Methoxy carbonyloctyl-3-O-(2-acetamido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)- 2-O-(α-L-fucopyranosyl)-α-D-galactopyranosid, die terminale bzw. endständige Trisaccharid-Antigendeterminante für die menschliche Blutgruppe A.
Analog dazu wird zur Herstellung des Disaccharids XLVII die Verbindung XXIII mit der Verbindung XLVI umgesetzt, wie im nachstehenden Beispiel 1 angegeben. Die Hydrierung, N-Acetylierung und Entblockierung wird wie in Beispiel 2 zur Herstellung der Verbindung L durchgeführt. Die Herstellung der Immunoadsorbentien und Antigene aus dem Disaccharid wird analog zu dem Verfahren, das in Beispiel 3 für die Trisaccharid-Antigendeterminante L beschrieben ist, durchgeführt.
Beispiel 1 Herstellung von 8-Methoxycarbonyloctyl-3-O-(2-acetamido-2- deoxy-α-D-galactopyranosyl)-β-D-galactopyranosid (XLVII)
Eine Lösung von 0,335 g (0,96 mMol) frisch hergestelltem 3,4,6- Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-β-D-galactopyranosylchlorid XXIII in 1 ml Dichlormethan wird zu einem Gemisch aus 0,022 g (0,085 mMol) Silbertrifluormethansulfonat, 1,06 g (3,85 mMol) Silbercarbonat, 0,70 g 4Å-Molekularsieben und 0,250 g (0,461 mMol) 8-Methanoxycarbonyloctyl-4,6-O-benzyliden-2-O-benzoyl-β-D- galactopyranosid XLVI in 4 ml Dichlormethan gegeben. Nach 4 h bei Umgebungstemperatur wird das Gemisch durch Diatomeenerde filtriert, die mit 10 ml Dichlormethan gewaschen wird. Diese Lösung wird eingedampft. Man erhält einen Sirup, der in einer geringen Menge von 1 : 1(V/V)-Benzol/Äthylacetat gelöst und an 15 g neutralem Aluminiumoxid in einer Säule (10 × 2 cm) unter Elution mit dem gleichen Lösungsmittel chromatographiert wird. Man erhält 0,524 g Sirup. Die Kristallisation dieses Sirups aus Äthylacetat/Pentan ergibt rohes 8-Methoxycarbonyloctyl- 3-O-(3,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)- 4,6-O-benzyliden-2-O-benzoyl-β-D-galactopyranosid (0,324 g) in 79%iger Ausbeute. Die Umkristallisation ergibt die reine Verbindung, Fp 175 bis 176°C, [α] + 119,7° (c 1, Chloroform), IR (Film) 2120 cm-1 (-N₃).
Das PMR-Spektrum dieser letzteren Verbindung in CDCl₃ zeigt teilweise bei 4,62 ppm ein Doublett mit J1,2 = 8,0 Hz, das dem H-1 zugeordnet wurde. Das Signal für H-1′ wurde teilweise durch die Signale für H-3′ und H-4′ überlagert. Daß die neu gebildeten Interzuckerglycosidbindungen α sind, wurde durch die Anwesenheit des Signals in dem ¹³C-Spektrum der Verbindung in CDCl₃ bei 95,4 ppm, das dem C-1′ zugeordnet wurde, gezeigt. Das dem C-1 zugeordnete Signal wird bei 100,7 ppm beobachtet. Die Hydrierung, gefolgt von der N-Acetylierung und Entfernung der Acetyl- und Benzoylschutzgruppen, wie im Beispiel 27 für die Herstellung der Verbindung L gezeigt, ergibt kristallines 8-Methoxycarbonyl-3-O-(2-acetamido-2-deoxy- α-D-galactopyranosyl)-β-D-galactopyranosid (XLVII). Die Umkristallisation aus Methanol/Äthyläther ergibt reines XLVII. Fp. 214 bis 216°C, [α] + 126,3° (c 0,98, Wasser).
Beispiel 2 Herstellung von 8-Methoxycarbonyloctyl-3-O-(2-acetamido-2- desoxy-α-D-galactopyranosyl)-2-O-(α-L-fucopyranosyl)-β-D-galactopyranosid L
In diesem Beispiel besitzt der Alkohol eine Disaccaridstruktur und das Glycosidierungsprodukt wird durch Umwandlung der Acetyl-, Benzyl- und Benzoylgruppen in Hydroxylgruppen (Schutzgruppenabspaltung) behandelt und dann wird die Azidogruppe zu Amin reduziert, das dann acetyliert wird. Die Verfahren, die für die Schutzgruppenabspaltung, Reduktion und Acetylierung verwendet werden, sind dem Fachmann geläufig.
Eine Lösung aus 0,588 g (1,6 mMol) frisch hergestelltem 3,4,6- Tri-O-acetyl-2-azido-2-deoxy-β-D-galactopyranosylchlorid (XXIII), gelöst in 2 ml Dichlormethan, wird zu einer Lösung von 0,035 g (0,136 mMol) Silbertrifluormethansulfonat, 1,70 g (6,18 mMol) Silbercarbonat, 1,12 g 4Å-Molekularsieben und 0,787 g (0,9 mMol) 8-Methoxycarbonyloctyl-2-O-(2,3,4-tri-O- benzyl-α-L-fucopyranosyl)-4,6-O-benzyliden-β-D-galactopyranosid (XLVIII) in 5 ml Dichlormethan gegeben. Nach 4 h bei Umgebungstemperatur wird das Gemisch mit 10 ml Dichlormethan verdünnt und durch Diatomeensilica filtriert. Das Filtrat wird eingedampft und man erhält 1,25 g Sirup. Dieser Sirup wird an einer Säule (44 × 2 cm) von Silicagel mit 2 : 1 (V/V)-Benzol/ Äthylacetat als Eluierungsmittel chromatographiert. Man erhält 0,780 g (75%ige Ausbeute) reines 8-Methoxycarbonyloctyl- 3-O-(3,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)- 2-O-(2,3,4-tri-O-benzyl-α-L-fucopyranosyl)-4,6-α-benzyliden- β-D-galactopyranosid XLIX, [α] + 15,5° (c 1, Chloroform), IR (Film) 2110 cm-1 (-N₃).
Das PMR-Spektrum der Verbindung XLIX in CDCl₃ besitzt teilweise 5,47 (d, J1′′,2′′ 3,4 Hz, H-1′′), 5,32 (d, 1, J1′,2′ 3 Hz, H-1′). Ihr ¹³-C-NMR-Spektrum in CDCl₃ zeigt klar die beiden α-Glycosidinterzuckeranomer-Kohlenstoffatome mit Signalen bei 97,9 ppm und 94,0 ppm für C-1′ der Fucosyleinheit und C-1′′ der 2-Azido-2-desoxygalactosyleinheit. Das Signal, das dem C-1 der Galactosyleinheit zugeordnet wird, tritt bei 100,5 ppm auf.
0,10 g (0,085 mMol) Verbindung L werden in 2 ml Äthylacetat, das 0,2 ml Essigsäureanhydrid enthält, gelöst und in Anwesenheit von 5%igem Palladium auf Kohle (0,06 g) bei 7,03 kg/cm² (100 psig) und Umgebungstemperatur hydriert. Nach 23 h wird die Lösung filtriert und eingedampft. Man erhält einen Schaum. Das Infrarotspektrum dieser Verbindung zeigt die Abwesenheit einer Azidgruppe. Die Verbindung wird von ihren Schutzgruppen befreit und deacetyliert mit Natriummethoxid in 5 ml wasserfreiem Methanol bei Umgebungstemperatur während 15 h. Nach der Deionisierung und Filtration sowie Verdampfen des Lösungsmittels erhält man 0,08 g Schaum. Die Hydrierung dieses Materials in 3 ml Äthanol in Anwesenheit von 0,065 g 5%igem Palladium auf Kohle bei Umgebungstemperatur und 7,03 kg/cm² während 40 h, gefolgt von der Filtration und Verdampfung, ergibt 0,046 g (78%ige Ausbeute) 8-Methoxycarbonyloctyl-3-O-(2-acetamido-2- desoxy-α-D-galactopyranosyl)-2-O-(α-L-fucopyranosyl)-β-D-galactopyranosid (XLIX) als weißen Feststoff.
Das PMR-Spektrum der Verbindung L in D₂O ist in Übereinstimmung mit der zugeordneten Struktur und zeigt teilweise (ppm) 5,62 (d, 1, J1′,2′ 1 Hz, H′), (d, 1, J1′′,2′′ 3,5 Hz, H-1′′), 2,24 (s, 3, NAc). Diese Verbindung ist die antigene Trisacchariddeterminante für die menschliche Blutgruppe A.
Beispiel 3 Herstellung eines Immunoadsorbens (LIII), das für die Anti-A- Antikörper spezifisch ist
Die antigene Trisacchariddeterminante (L) für die menschliche Blutgruppe A kann zur Herstellung eines künstlichen Antigens durch Fixierung an einem löslichen Trägermolekül, wie Proteine, rote Blutzellen, Polypeptide und lösliche aminierte Polysaccharide, unter Verwendung bekannter Verfahren verwendet werden.
Das Glycosid L kann ebenfalls zur Herstellung eines Immunoadsorbens verwendet werden, das für die Anti-A-Antikörper spezifisch ist, durch Fixierung an einen unlöslichen Träger, wie aminiertes Glas, aminiertes Polyacrylamid, aminiertes Polyvinyl, aminierter Agarose und andere unlösliche aminierte Polysaccharide (aminiert = dem angelsächsischen Ausdruck aminated). Dieses Verfahren wird im folgenden erläutert.
0,044 g (0,063 mMol) 8-Methoxycarbonyloctyl-3-O-(2-acetamido- 2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)-2-O-(α-L-fucopyranosyl)-β-D- galactopyranosid (L) werden mit 2 ml 85%igem Hydrazinhydrat bei Zimmertemperatur während 90 min gerührt. Die Prüfung durch Dünnschichtchromatographie des Reaktionsgemischs an Silicagel zeigt bei der Entwicklung mit 7 : 1 : 2(V/V)-Isopropanol/Ammoniumhydroxid/ Wasser kein restliches Ausgangsmaterial. Diese Lösung wird mit 1 ml 50%igem Äthanol verdünnt und zur Trockene eingedampft. Man erhält 0,044 g eines weißen Schaums. Das Material wird in 2 ml Wasser gelöst und gegenüber destilliertem Wasser in einer Ultrafiltrationszelle dialysiert, wobei fünfmal ausgetauscht wurde, und die Zelle mit einer Membran mit einem Molekulargewichtsschnitt von 500 ausgerüstet ist. Es wird dann gefriergetrocknet. Man erhält 0,039 g des entsprechenden Hydrazids LI als weißen Feststoff.
Das PMR-Spektrum der Verbindung L in D₂O steht in Übereinstimmung mit der zugeordneten Struktur und zeigt teilweise (ppm) 5,38 (d, 1, J 1 Hz, H-1′), 5,44 (d, 1, J1′′,2′′ 3,5 Hz, H-1′′), 2,30 (s, 3, NAc).
0,35 g (0,05 mMol) des Hydrazids LI werden in 0,7 ml Dimethylformamid gelöst und auf -25°C abgekühlt. Eine Lösung von 0,057 ml Dioxan, die 3,5 N-Chlorwasserstoffsäure enthält, wird zugegeben und dann werden 0,007 g (0,069 mMol) t-Butylnitrat, gelöst in 0,1 ml Dimethylformamid, zugegeben. Dieses Gemisch wird 30 min bei -25°C gerührt, danach werden 0,0049 g (0,052 mMol) Sulfamidsäure zugegeben. Nach 15 min wird diese Lösung tropfenweise zu 5,0 g silylaminierten Glasperlen, die in 25 ml Pufferlösung, 0,08 M in Na₂B₄O₇ und 0,35 M in KHCO₃ bei 0°C suspendiert sind, zugegeben. Die Suspension wird langsam bei 3 bis 5°C 26 h in einer Trommel bewegt, danach wird der Träger abfiltriert und mit 500 ml Wasser gewaschen. Die Perlen werden in 30 ml gesättigter Natriumbicarbonatlösung suspendiert und 30 ml 5%iges wäßriges Essigsäureanhydrid werden zugegeben. Dann wird 15 min gerührt. Die Perlen werden dann filtriert und mit 500 ml Wasser gewaschen und in 25 ml phosphatgepufferter Salzlösung (pH 7) suspendiert und 15 min reduziertem Druck ausgesetzt. Die Filtration und Waschen mit 100 ml Wasser ergibt 11,2 g hydratisiertes Immunoadsorbens LIII. Eine Phenol/Schwefelsäure-Analyse für die Gesamthexose dieses Immunoadsorbens vor der Acetylierung zeigt eine Beladung von 6 µMol Hapten pro g Träger.
Es wurde gefunden, daß das Immunoadsorbens LIII selektiv Anti- A-Blutgruppenantikörper aus Menschensera entfernt. Beispielsweise werden durch Behandlung von 1 ml Serum, das wirksam Menschen- A-Blutzellen agglutiniert, mit 200 mg des Immunoadsorbens LII diese Antikörper, die für die Agglutination verantwortlich sind, innerhalb 20 min entfernt. Die Verwendung des Immunoadsorbens in Form der gepackten Säule ist noch wirksamer.

Claims (4)

1. 3-O-(2-Acetamido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)-β-D- galactopyranid-Derivate der allgemeinen Formel in der R -OCH₃ oder -NHNH₂ und n bis 19 bedeuten.
2. Disaccharid nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es 8-Methoxycarbonyloctyl- 3-O-(2-acetamido-2-desoxy-α-D-galactopyranosyl)-β-D- galactopyranosid ist.
3. Verwendung eines Disaccharides nach einem der Ansprüche 1 oder 2 zur Herstellung eines Immunoadsorbens, indem man in an sich bekannter Weise das Disaccharid an einen aminierten unlöslichen Träger fixiert.
4. Verwendung eines Disaccharides nach einem der Ansprüche 1 oder 2 zur Herstellung eines Antigens, indem man in an sich bekannter Weise das Disaccharid an Proteine, Polypeptide oder aminierte Polysaccharide als lösliche Träger fixiert.
DE2858732A 1977-04-14 1978-04-14 Expired - Lifetime DE2858732C2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB15536/77A GB1603609A (en) 1977-04-14 1977-04-14 O-protected 2-azido-2-deoxy-glycosyl nitrates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE2858732C2 true DE2858732C2 (de) 1992-05-14

Family

ID=10060864

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2857791A Expired DE2857791C2 (de) 1977-04-14 1978-04-14
DE2858732A Expired - Lifetime DE2858732C2 (de) 1977-04-14 1978-04-14
DE2816340A Expired DE2816340C2 (de) 1977-04-14 1978-04-14 Verfahren zur Herstellung von 0-geschützten 2-Azido-2-desoxyglycosylnitraten 3,4,6-Tri-0-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylnitrat und 3,6-Di-0-acetyl-4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-β-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-D-glucopyranosylnitrat sowie deren Verwendung

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2857791A Expired DE2857791C2 (de) 1977-04-14 1978-04-14

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2816340A Expired DE2816340C2 (de) 1977-04-14 1978-04-14 Verfahren zur Herstellung von 0-geschützten 2-Azido-2-desoxyglycosylnitraten 3,4,6-Tri-0-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylnitrat und 3,6-Di-0-acetyl-4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-β-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-D-glucopyranosylnitrat sowie deren Verwendung

Country Status (8)

Country Link
US (2) US4195174A (de)
JP (4) JPS53130617A (de)
CA (1) CA1105011A (de)
DE (3) DE2857791C2 (de)
FR (3) FR2411841A1 (de)
GB (1) GB1603609A (de)
NL (1) NL7803918A (de)
SE (3) SE450124B (de)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4767845A (en) * 1980-07-10 1988-08-30 Chembiomed, Ltd. Synthesis of tumor antigenic determinant
US4794176A (en) * 1981-06-26 1988-12-27 Chembiomed Synthesis of tumor antigenic determinant
CA1203532A (en) * 1980-07-10 1986-04-22 Chembiomed Ltd. Synthesis of tumor antigenic determinant
DE3106815A1 (de) * 1981-02-24 1982-09-09 Behringwerke Ag, 3550 Marburg "chemische verbindungen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als antigene oder immunadsorbentien"
JPS58213722A (ja) * 1982-06-03 1983-12-12 Otsuka Pharmaceut Co Ltd フコ−ス抗原の製造法
JPS58211660A (ja) * 1982-06-03 1983-12-09 Otsuka Pharmaceut Co Ltd フコ−ス抗原を識別する抗体の製造法
JPS58211661A (ja) * 1982-06-03 1983-12-09 Otsuka Pharmaceut Co Ltd 癌関連糖鎖の測定法及び癌診断用試薬
WO1983004311A1 (en) * 1982-06-03 1983-12-08 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Process for preparing fucose antigen and antibody for distinguishing it, measurement of tumor-associated sugar chain utilizing the same, and kit for the measurement
US4629692A (en) * 1982-12-06 1986-12-16 Miles Laboratories, Inc. Immunoassay for nonenzymatically glucosylated proteins and protein fragments an index of glycemia
US4570531A (en) * 1984-02-09 1986-02-18 Allied Corporation Extensible piston with breakable or displaceable coupler
US4568399A (en) * 1985-03-22 1986-02-04 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Propellant compositions
US5034516A (en) * 1987-08-04 1991-07-23 University Of Ottawa Synthetic antigens of sialic acid and derivatives thereof
US5192661A (en) * 1987-08-04 1993-03-09 University Of Ottawa Multicomponent kit containing an antibody to a synthetic antigen of sialic acid
US5141648A (en) * 1987-12-02 1992-08-25 Neorx Corporation Methods for isolating compounds using cleavable linker bound matrices
US4935503A (en) * 1988-05-05 1990-06-19 Biomira, Inc. Azidochlorination and diazidization of glycals
US5104982A (en) * 1990-03-23 1992-04-14 Yale University Route to glycals in the allal and gulal series
US5646123A (en) * 1991-06-10 1997-07-08 Alberta Research Council Time dependent administration of oligosaccharide glycosides related to blood group determinants having a type I or type II core structure in reducing inflammation in a sensitized mammal arising form exposure to an antigen
US5352670A (en) * 1991-06-10 1994-10-04 Alberta Research Council Methods for the enzymatic synthesis of alpha-sialylated oligosaccharide glycosides
WO1993024505A1 (en) * 1992-05-26 1993-12-09 Alberta Research Council Reducing inflammation by time dependent administration of oligosaccharides glycosides related to blood group determinants
AU667530B2 (en) * 1992-05-28 1996-03-28 New York Blood Center, Inc., The Removal of antibodies from blood-derived compositions while retaining coagulation factors
DK76193D0 (da) * 1993-06-25 1993-06-25 Astra Ab Kulhydratderivater
AU7613794A (en) * 1993-08-30 1995-03-22 Bayer Aktiengesellschaft Glycosyl amides of 2-aminoacylamino-2-deoxy sugars
US5527891A (en) * 1994-03-09 1996-06-18 Biomira, Inc. Stereodirected process for synthesis of α-N-acetylgalactosaminides
WO1995029927A2 (en) * 1994-05-02 1995-11-09 Biomira, Inc. Process for preparation of glycosides of tumor-associated carbohydrate antigens
DE59812518D1 (de) * 1997-08-08 2005-03-03 Aventis Pharma Gmbh Substituierte tetrahydropyranderivate sowie verfahren zu deren herstellung
US10697982B2 (en) 2015-09-08 2020-06-30 Merck Patent Gmbh Methods of evaluating quality of a chromatography media which binds anti-A or anti-B antibodies
US10697983B2 (en) 2015-09-08 2020-06-30 Merck Patent Gmbh Methods of evaluating quality of media suitable for removing anti-A or anti-B antibodies
EP3421480A1 (de) * 2017-06-30 2019-01-02 Sinutron KG Verfahren zur trennung von chromatographisch nicht unterscheidbaren azidonitraten

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2630596A1 (de) * 1975-07-08 1977-01-20 Canadian Patents Dev An traegerstoffe knuepfbare beta- glykosidderivate, verfahren zu deren herstellung und verwendung derselben als kuenstliche antigene oder immunabsorbantien

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2039046A (en) * 1934-05-25 1936-04-28 Trojan Powder Co Nitration of sugars
US2094693A (en) * 1935-06-17 1937-10-05 Trojan Powder Co Nitration of sugars and their glycosides
US2105389A (en) * 1935-10-12 1938-01-11 Trojan Powder Co Nitration of organic carbohydrates
US3496196A (en) * 1965-10-02 1970-02-17 Tanabe Pharm Co Ltd 4,6-diazido-4,6-dideoxy-myo-inositol tetraacylates
GB1254724A (en) * 1968-01-31 1971-11-24 Zaidan Hojin Biseibutsu New chemical compound useful as starting substance for amino sugars and process for producing it
US3935184A (en) * 1972-02-22 1976-01-27 Syntex (U.S.A.) Inc. Synthetic polyoxin type nucleosides
US3953422A (en) * 1973-08-17 1976-04-27 Smithkline Corporation Deoxyglucose derivatives
FR2263747B1 (de) * 1974-03-12 1977-12-02 Roussel Uclaf
US4039663A (en) * 1975-03-19 1977-08-02 Societa' Farmaceutici Italia S.P.A. Daunomycins, process for their uses and intermediates
HU172937B (hu) * 1975-12-18 1979-01-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Sposob poluchenija novykh proizvodnykh khondroitin-sernoj kisloty s mestno anestezirujuhhim ehffektom

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2630596A1 (de) * 1975-07-08 1977-01-20 Canadian Patents Dev An traegerstoffe knuepfbare beta- glykosidderivate, verfahren zu deren herstellung und verwendung derselben als kuenstliche antigene oder immunabsorbantien

Also Published As

Publication number Publication date
SE8307205D0 (sv) 1983-12-29
SE463515B (sv) 1990-12-03
FR2414052B1 (de) 1984-11-23
JPS5746997A (en) 1982-03-17
JPS5745196A (en) 1982-03-13
NL7803918A (nl) 1978-10-17
GB1603609A (en) 1981-11-25
DE2857791C2 (de) 1988-04-28
FR2414052A1 (fr) 1979-08-03
SE8307205L (sv) 1983-12-29
CA1105011A (en) 1981-07-14
US4195174A (en) 1980-03-25
SE465624B (sv) 1991-10-07
SE8307206L (sv) 1983-12-29
DE2816340A1 (de) 1978-10-19
SE8307206D0 (sv) 1983-12-29
DE2816340C2 (de) 1983-12-22
FR2414053B1 (de) 1982-11-12
SE450124B (sv) 1987-06-09
JPS6129359B2 (de) 1986-07-05
FR2414053A1 (fr) 1979-08-03
US4308376A (en) 1981-12-29
FR2411841A1 (fr) 1979-07-13
SE7804220L (sv) 1978-10-15
JPS53130617A (en) 1978-11-14
JPS5948840B2 (ja) 1984-11-29
JPS5745175A (en) 1982-03-13
FR2411841B1 (de) 1982-11-19
JPS6127000B2 (de) 1986-06-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2858732C2 (de)
DE2630596C2 (de)
US4362720A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2-deoxyglycosides from glycals
EP0371414B1 (de) Glykosphingolipide mit kopplungsfähiger Gruppe im Sphingoidanteil, ihre Herstellung und Verwendung
DE3444051C2 (de) Neue Retinoide, deren Herstellung und Verwendung
EP0149093B1 (de) N-glycosylierte Harnstoffe, Carbamate und Thiocarbamate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung
EP0934327A1 (de) Saccharid-bibliothek
DE3789043T2 (de) N-Glykoneuraminsäure enthaltendes Glykolipid und Verfahren zu dessen Herstellung.
EP0060999B1 (de) Galactopyranoside Verbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Antigene oder Immunadsorbentien
DE69019086T2 (de) Verfahren zur Herstellung von künstlichen N-verbundenen Glycoconjugaten.
Wolfrom et al. Degradation of glycogen to isomaltotriose1 and nigerose
EP0096292A1 (de) Beta-D-Galactosederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
DE2366288C3 (de) Verfahren zur Herstellung von 3' -Desoxykanamycin B und 3' -Desoxyneamin
DE2638794A1 (de) Aminoglykosid-antibiotika, verfahren zu ihrer herstellung und diese enthaltende arzneimittel
DE69723926T2 (de) Verfahren zur synthese von gm2
Wong et al. The synthesis of derivatives of lactosamine and cellobiosamine to serve as probes in studies of the combining site of the monoclonal anti-I Ma antibody
DE69908919T2 (de) Verfahren zur herstellung von gm3
CA1111417A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2- deoxyglycosides from glycals
DE69331814T2 (de) Salze von Glukopyranosederivate und ihre Zwischenprodukte
CA1111418A (en) Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2- deoxyglycosides from glycals
DE69029900T2 (de) Pradimicin-Derivate
KR102166783B1 (ko) 새로운 트레할로스 중심을 갖는 양친매성 화합물 및 이의 활용
CH619967A5 (en) Process for the preparation of nitrosourea derivatives
DE2857790C2 (de) Verfahren zur Herstellung von O-geschützten 2-Azido-2-desoxy-glycosylhalogeniden, einige derartige Verbindungen als solche und deren Verwendung
EP0518270A1 (de) Verfahren zur Herstellung von Zuckerepitopen

Legal Events

Date Code Title Description
Q172 Divided out of (supplement):

Ref country code: DE

Ref document number: 2857791

8110 Request for examination paragraph 44
AC Divided out of

Ref country code: DE

Ref document number: 2857791

Format of ref document f/p: P

AC Divided out of

Ref country code: DE

Ref document number: 2857791

Format of ref document f/p: P

D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee