SE463515B - Foerfarande foer framstaellning av 0-skyddade-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenider samt 0-acetyl-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenid-derivat - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av 0-skyddade-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenider samt 0-acetyl-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenid-derivatInfo
- Publication number
- SE463515B SE463515B SE8307205A SE8307205A SE463515B SE 463515 B SE463515 B SE 463515B SE 8307205 A SE8307205 A SE 8307205A SE 8307205 A SE8307205 A SE 8307205A SE 463515 B SE463515 B SE 463515B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- deoxy
- azido
- acetyl
- tri
- galactopyranosyl
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 54
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 36
- -1 tetraalkylammonium halide salt Chemical class 0.000 claims description 39
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 17
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 3
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- DOGAQWBZVNXURX-ZIQFBCGOSA-N [(2r,3r,4r,5r,6r)-3,4-diacetyloxy-5-azido-6-chlorooxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@H]1O[C@H](Cl)[C@H](N=[N+]=[N-])[C@@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O DOGAQWBZVNXURX-ZIQFBCGOSA-N 0.000 claims 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 81
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N nitrate group Chemical group [N+](=O)([O-])[O-] NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 73
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 65
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 57
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 56
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 48
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- 239000000047 product Substances 0.000 description 37
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 36
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 32
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 28
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 27
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 25
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- XMPZTFVPEKAKFH-UHFFFAOYSA-P ceric ammonium nitrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[Ce+4].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O XMPZTFVPEKAKFH-UHFFFAOYSA-P 0.000 description 19
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 17
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 17
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 15
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 15
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 14
- XZXLYGAUEAPJET-UHFFFAOYSA-N 5-amino-3h-1-benzofuran-2-one Chemical compound NC1=CC=C2OC(=O)CC2=C1 XZXLYGAUEAPJET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 13
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 12
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 11
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 10
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 10
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 10
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 10
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 10
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 10
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 8
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N Azide Chemical compound [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- UGJBHEZMOKVTIM-UHFFFAOYSA-N N-formylglycine Chemical group OC(=O)CNC=O UGJBHEZMOKVTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 238000006396 nitration reaction Methods 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 7
- HNXRLRRQDUXQEE-ALURDMBKSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-2-[[(2r,3s,4r)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-3,4-dihydro-2h-pyran-3-yl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC=C[C@H]1O HNXRLRRQDUXQEE-ALURDMBKSA-N 0.000 description 6
- ZXSQEZNORDWBGZ-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydropyrrolo[2,3-b]pyridin-2-one Chemical compound C1=CN=C2NC(=O)CC2=C1 ZXSQEZNORDWBGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101100298295 Drosophila melanogaster flfl gene Proteins 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 6
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 6
- HSZCZNFXUDYRKD-UHFFFAOYSA-M lithium iodide Chemical compound [Li+].[I-] HSZCZNFXUDYRKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- LKZMBDSASOBTPN-UHFFFAOYSA-L silver carbonate Substances [Ag].[O-]C([O-])=O LKZMBDSASOBTPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229910001958 silver carbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 5
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 5
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 5
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000002016 disaccharides Chemical group 0.000 description 5
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 5
- 238000005858 glycosidation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 5
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 5
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YMBCJWGVCUEGHA-UHFFFAOYSA-M tetraethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CC[N+](CC)(CC)CC YMBCJWGVCUEGHA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 5
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 5
- URARQBMUQIRZQO-GASJEMHNSA-N (3r,4r,5r,6r)-3-azido-6-(hydroxymethyl)oxane-2,4,5-triol Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](N=[N+]=[N-])[C@@H](O)[C@H]1O URARQBMUQIRZQO-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- PNIWLNAGKUGXDO-UHFFFAOYSA-N Lactosamine Natural products OC1C(N)C(O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 PNIWLNAGKUGXDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 4
- CZKMPDNXOGQMFW-UHFFFAOYSA-N chloro(triethyl)germane Chemical compound CC[Ge](Cl)(CC)CC CZKMPDNXOGQMFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 description 4
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- DOVBXGDYENZJBJ-ONMPCKGSSA-N lactosamine Chemical compound O=C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DOVBXGDYENZJBJ-ONMPCKGSSA-N 0.000 description 4
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- TZLVRPLSVNESQC-UHFFFAOYSA-N potassium azide Chemical class [K+].[N-]=[N+]=[N-] TZLVRPLSVNESQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- QKPLRMLTKYXDST-WYRLRVFGSA-N (2r,3r,4r,5r,6r)-3-amino-6-(hydroxymethyl)oxane-2,4,5-triol;hydrochloride Chemical compound Cl.N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O QKPLRMLTKYXDST-WYRLRVFGSA-N 0.000 description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-VFUOTHLCSA-N 2-amino-2-deoxy-beta-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FZHXIRIBWMQPQF-UHFFFAOYSA-N Glc-NH2 Natural products O=CC(N)C(O)C(O)C(O)CO FZHXIRIBWMQPQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IQSFRQIHAUIEAT-YZJWMTPASA-N [(3r,4r,5s,6r)-2,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-3-yl]azanium;chloride Chemical compound Cl.O[C@@H]1[C@@H](N)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 IQSFRQIHAUIEAT-YZJWMTPASA-N 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 3
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 3
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 3
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-M iodide Chemical compound [I-] XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- AGJSNMGHAVDLRQ-HUUJSLGLSA-N methyl (2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxy-2,3-dimethylphenyl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)CC1=CC=C(O)C(C)=C1C AGJSNMGHAVDLRQ-HUUJSLGLSA-N 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DRSHXJFUUPIBHX-UHFFFAOYSA-N COc1ccc(cc1)N1N=CC2C=NC(Nc3cc(OC)c(OC)c(OCCCN4CCN(C)CC4)c3)=NC12 Chemical compound COc1ccc(cc1)N1N=CC2C=NC(Nc3cc(OC)c(OC)c(OCCCN4CCN(C)CC4)c3)=NC12 DRSHXJFUUPIBHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006945 Knorr synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LLPWGHLVUPBSLP-IJLUTSLNSA-N [(2r,3r,4r)-3,4-diacetyloxy-3,4-dihydro-2h-pyran-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@H]1OC=C[C@@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O LLPWGHLVUPBSLP-IJLUTSLNSA-N 0.000 description 2
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical compound B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- BXDRTMRKSUZYNK-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethyl acetate;hexane Chemical compound CCO.CCCCCC.CCOC(C)=O BXDRTMRKSUZYNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IIPYXGDZVMZOAP-UHFFFAOYSA-N lithium nitrate Chemical compound [Li+].[O-][N+]([O-])=O IIPYXGDZVMZOAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIZOOQYPYGPBOC-UHFFFAOYSA-N methyl 9-hydroxynonanoate Chemical compound COC(=O)CCCCCCCCO RIZOOQYPYGPBOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 1
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700018454 CDC15 Proteins 0.000 description 1
- 150000000703 Cerium Chemical class 0.000 description 1
- YVECGMZCTULTIS-HSUXUTPPSA-N D-galactal Chemical compound OC[C@H]1OC=C[C@@H](O)[C@H]1O YVECGMZCTULTIS-HSUXUTPPSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 241000158526 Nasalis Species 0.000 description 1
- 229910004679 ONO2 Inorganic materials 0.000 description 1
- QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N Vinyl ether Chemical class C=COC=C QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRVCVLFVSDRPOM-UHFFFAOYSA-N [I+].[O-][N+]([O-])=O Chemical compound [I+].[O-][N+]([O-])=O NRVCVLFVSDRPOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOIFTOBIGNZZSO-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethyl acetate;hexane Chemical compound CC(O)=O.CCCCCC.CCOC(C)=O UOIFTOBIGNZZSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005852 acetolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N aldehydo-N-acetyl-D-glucosamine Chemical class CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 229910001514 alkali metal chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001508 alkali metal halide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008045 alkali metal halides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-UHFFFAOYSA-N alpha-D-glucopyranose Natural products OCC1OC(O)C(O)C(O)C1O WQZGKKKJIJFFOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- ZFSFDELZPURLKD-UHFFFAOYSA-N azanium;hydroxide;hydrate Chemical compound N.O.O ZFSFDELZPURLKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSTHIIUXGVJHDH-UHFFFAOYSA-N azido nitrate Chemical class [O-][N+](=O)ON=[N+]=[N-] VSTHIIUXGVJHDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000649 benzylidene group Chemical group [H]C(=[*])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- ZYFYTWZIMOACBS-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO.CCCCO ZYFYTWZIMOACBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 101150081467 cdc15 gene Proteins 0.000 description 1
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002242 deionisation method Methods 0.000 description 1
- URARQBMUQIRZQO-VFUOTHLCSA-N diazonio-[(2r,3r,4r,5r,6r)-2,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]azanide Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](N=[N+]=[N-])[C@@H](O)[C@H]1O URARQBMUQIRZQO-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- CHNUOJQWGUIOLD-NFZZJPOKSA-N epalrestat Chemical compound C=1C=CC=CC=1\C=C(/C)\C=C1/SC(=S)N(CC(O)=O)C1=O CHNUOJQWGUIOLD-NFZZJPOKSA-N 0.000 description 1
- NDUXAYZFYGZISK-UHFFFAOYSA-N ethanol;propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CCO.CC(C)=O NDUXAYZFYGZISK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;methanol Chemical compound OC.CCOCC MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVDYYQXUNAQSNI-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;pentane Chemical compound CCCCC.CCOC(C)=O QVDYYQXUNAQSNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006203 ethylation Effects 0.000 description 1
- 238000006200 ethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 125000002446 fucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O1)C)* 0.000 description 1
- 125000002519 galactosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- YVECGMZCTULTIS-PBXRRBTRSA-N glucal Chemical compound OC[C@H]1OC=C[C@@H](O)[C@@H]1O YVECGMZCTULTIS-PBXRRBTRSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004678 hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229940006461 iodide ion Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000010907 mechanical stirring Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- AGJSNMGHAVDLRQ-IWFBPKFRSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxy-2,3-dimethylphenyl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)CC1=CC=C(O)C(C)=C1C AGJSNMGHAVDLRQ-IWFBPKFRSA-N 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- LNOPIUAQISRISI-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxy-2-propan-2-ylsulfonylethanimidamide Chemical compound CC(C)S(=O)(=O)CC(N)=NO LNOPIUAQISRISI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYMRYCZRMAHYKE-UHFFFAOYSA-N n-diazonitramide Chemical class [O-][N+](=O)N=[N+]=[N-] DYMRYCZRMAHYKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 125000001893 nitrooxy group Chemical group [O-][N+](=O)O* 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- RYVMUASDIZQXAA-UHFFFAOYSA-N pyranoside Natural products O1C2(OCC(C)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C2)C(C)C(C2(CCC3C4(C)CC5O)C)C1CC2C3CC=C4CC5OC(C(C1O)O)OC(CO)C1OC(C1OC2C(C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OCC(O)C(O)C1O RYVMUASDIZQXAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003132 pyranosyl group Chemical group 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- CQLFBEKRDQMJLZ-UHFFFAOYSA-M silver acetate Chemical compound [Ag+].CC([O-])=O CQLFBEKRDQMJLZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940071536 silver acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N sodium;5-ethyl-5-pentan-2-yl-1,3-diazinane-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- AZAKMLHUDVIDFN-UHFFFAOYSA-N tert-butyl nitrate Chemical compound CC(C)(C)O[N+]([O-])=O AZAKMLHUDVIDFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 125000005207 tetraalkylammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- ILJSQTXMGCGYMG-UHFFFAOYSA-N triacetic acid Chemical compound CC(=O)CC(=O)CC(O)=O ILJSQTXMGCGYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DUAJIKVIRGATIW-UHFFFAOYSA-N trinitrogen(.) Chemical compound [N]=[N+]=[N-] DUAJIKVIRGATIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000008135 α-glycosides Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
- C07H5/06—Aminosugars
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
- C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
- C07H13/08—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals directly attached to carbocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
'M4 , . 465 515 2- haptenen i en form som är lämplig för bindning till bärarmolekylen.
I samband med uppfinningens tillkomst var det ursprungligat ändamålet att utveckla ett praktiskt förfarande för syntes av 2-galak- tosamin-hydroklorid (XXXVII) och av 2-laktosamin-hydroklorid (XXXIX) och derivat av dessa. (De med romerska siffror markerade formlernas strukturer kan återfinnas på datablad efter beskrivningstexten.) Både galaktosamin och laktosamin förekommer allmänt i naturen, van- ligen i form av sina N-acetylerade derivat. De uppträder i glyko- proteiner, glykolipider och mukopolysackarider. Som sådana är de viktiga byggstenar som finns i blodgruppernas antigena determinanter.
Den huvudsakliga tidigare kända källan för Q-galaktosamin är syrahydrolysen av chrondroitinsulfat C, som erhålls*genom extraktion av broskvävnad, trakea och septum nasalis. Utbytena är osäkra och det är svårtatt framställa en kristallin produkt. Ett stort antal synteser finns som innefattar öppnande av 1,6:2,}-dianhydro-ß-D-talo- pyranos med ammoniak eller med azidjon. Dessa metoder inbegriper emellertid sex till elva separata kemiska omvandlingar som utgår från de enkla sockerarterna. Kortare metoder grundar sig på ganska sällsynta sockerarter som utgángsmaterial.
Inversion av C-4-konfigurationen av glukosamin genom flytt- ning av ett 4-Q-sulfonat av 2-acetamido-2-deoxi-glukopyranosylderivat har också använts för syntes av 2-galaktosamin. Beredning av glukos- amin till det erforderliga utgàngsmaterialet är emellertid omständlig.
Syntes av laktosamin är svårare, eftersom den nödvändigtvis inbegriper en glykosylering av en galaktosylhalogenid med ett kompli- cerat derivat av 2-acetamido-2-deoxi-glukos. Det senast publicerade förfarandet erfordrar nio kemiska omvandlingar,med utgångspunkt från 2-acetamido-2-deoxi-glukosamin, före glykosyleringssteget.
Enligt föreliggande uppfinning presenteras ett reagens som medger effektiv framställning och höga utbyten av glykosider som innehåller 2-acetamido-2-deoxi-a-Q-galaktopyranosylgruppen, vilken exempelvispåträffas i den antigena determinanten för den humana A-blodgruppen och Forssman-antigenet. Det på detta sätt användbara reagenset är 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-B-2-galaktopyranosyl- -klorid (XXIII) som på enkelt sätt framställs i högt utbyte ut- gående från 2-galaktal-triacetat (I).
Man har sedan länge förutsett att användning av en B-glykosyl- -halogenid skulle ge a-(1,2-cis)-glykosid-bindningen genom Walden- 3 465 515 -inversion av det reagerande centret under Koenings-Knorrs reaktions- betingelser när 2-substituenten är så vald, att den inte deltar i en reaktion vid det anomera centret. Sålunda har exempelvis Wolfrom, Thompson och Linebeck (J.Org.Chem., gå, 860 (1963)) utvecklat tri-Qg -acetyl-2-nitro-ß-Q-glukopyranosyl-klorid i avsikt att syntetisera a-2-glukopyranosider. I själva verket har flera artiklar publicerats pá sistone, enligt vilka man använder 2-azido-2-deoxi-ß-Q-glykopyrano sylklorider som anges i förfarandena enligt uppfinningen_för fram- ställning av 2-azido-2-deoxi-a-Q-galaktopyranosider. Det måste emellertid påpekas att förfarandena enligt Paulsen och hans med- arbetare (Angew. Chem., Int. Ed., li, 558 (l975); Tet. Lett., 1495 (1975) een 2301 (1976); Angew Chem., Int. Ed., iâ, 440 (1975)) har begränsat, om överhuvudtaget något, kommersiellt värde med hänsyn till de extrema svårigheterna att lyckas med syntesen av det önskade 2-azido-2-deoxi-reagenset, nämligen 6-Q-acetyl-2-axido-3,4-Q;bensyl- -2-deoxi-E-2-galaktopyranosylklorid; Föreliggande uppfinning anger ett nytt förfarande för fram- ställning pá ett effektivt sätt av föreningen 3,4,6-tri-Q¿acetyl-2- -azido-2-deoxi-5-2-galaktopyranosylklorid (XXIII) och dess del- 'tagande i reaktioner med alkohol under bildning av },4,6-tri-Q-acety“- -2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosider (A) under lämpliga Koenings- -Khorr-betingelser för kondensationen. Uppfinningen avser delvis upptäckten av förfaranden som gör förening XXIII till ett lättill- gängligt reagens för användning i reaktioner som leder till produkter av typ A. _l,- 'ACO .fAeo f f ÅA - . »_ t bet har eåiunae blivit möjligt ett kommersiellt eyntetieere den antigena determinanten med trisackarid i ändställning för humant A-blod såsom det förekommer i strukturer B för antigena determinanter av typ 1 och typ 2 för den humana A-blodgruppen. Trisackariden synte- tiseras i en form som är användbar för framställning av artificiella antigener och immunabsorbenter som hör samman med den humana Aèblod- gruppen.
L-n § ” 1 463 515 OH ' 0 i “\\ ' AcNH ' (Typ l-determinant) ßå ~ * * NHA V HU - c / (Typ 2-determinant) 5» Framställning av a-azido-B-nitratoalkaner genom reaktion mellan olefiner och natriumazid och ceriumammoniumnitrat har be- skrivits av Trahanovsky och Robbins (J.Am.Chem. Soc. 22, 5256 (1971)). Utsträckning av den ovanstående reaktionen till vinyletrar eller strukturer som är så komplexa som D-galaktal-triacetat är emellertid inte självklar. Grunden för föreliggande uppfinning var upptäckten att addition av azid- och nitratgrupperna till 1,2-omättade sockerarter kan fås att ske under bildning av 2-azido-2-deoxi-g1ykcsylÄH nitrat i högt ekonomiskt utbyte.
. Q)- 463 515 5 Sammanfattningsvis kan sägas att 1 enlighet med den grund- läggande principen för uppfinningen resulterar behandlingen av skyddade glykaler med azidjon i närvaro av ceriumammoniumnitrat i addition av en azidgrupp och en nitratgrupp till C-2- respektive C-l-ställningen i glykalen. Dessa nya produkter, nämligen den ano- mera blandningen av 2-azido-2-deoxi-glykosylnitrater, medger inträde i följande klasser av föreningar: (1) 2-amino-2-deoxi-socker genom hydrolys av nitratgruppen och reduk- tion av azidogruppen, (2) 2-azido-2-deoxi-glykosylhalogenider genom utbyte av glykosyl- nitratet, - (3) 2-amino-2-deoxi-glykosider genom reaktion av 2-azido-2-deoki- -glykosylhalogeniderna.
Det fina med azidogruppen är att den är en icke deltagande progenera- tor av en aminofunktion, och såsom sådan påverkar den inte syntesen av 2-amino-2-deoxi-a-2-glykosiderna.
Enligt uppfinningen kan 2-azido-2-deoxi-glykosyl-nitraterna omvandlas till motsvarande 2-amino-2-deoxi-sosker genom hydrolys av nitratet och de skyddande grupperna och reduktion av azidogruppen enligt metoder som är välkända för faokmannen. Hydrolys kan föregå reduktion eller vice versa. N-acetylerade derivat av aminosockren kan erhållas enligt konventionella metoder. Q Enligt ytterligare en aspekt av uppfinningen kan man behandla 2-azido-2-deoxi-glykosyl-nitrater med ett halogenidsalt för attåstad- komma utbyte av nitratgruppen och framställa 2-azido-2-deoxi-glykosyl- halogenider som är nya föreningar. Enligt ett företrädesvis använt förfarande ger en anomer blandning av glykosylnitraterna genom be- handling med jodidjon den termodynamiskt mer gynnsamma anomeren, 2-azido-2-deoxi-afg-glykosyl-jodid. d-glykosyl-jodiden ersätts lätt med en ekvivalent kloridjon genom inversion, varvid höga utbyten av 2-azido-2-deoxi-6-Q-glykosylkloriden erhålls. Denna väg till ß-halogeniden är fördelaktig, eftersom den medger omvandling av nitraterna till en reaktionsprodukt som till övervägande del består av 2-azido-2-deoxi-B-2-galaktosyl-klorid, som är användbar för fram- ställning av en 2-deoxi-a-2-glykosid, en integral enhet i A-blod- gruppdeterminanten. Det sålunda användbara reagenset är },4,6-tri-Q; -acetyl-2-azido-2-deoxi-B-2-galaktopyranosyl-klorid (XXIII).
A 463 51.5 6 2-azido-2-deoxi-glykosyl-halbgenider kan användas för fram- ställning av 2-amino-2-deoxi-glykosider vid betingelser för glykoside- ring, såsom de som är allmänt kända inom kolhydratkemin som Koenings- -Khorr-betingelser. Dessa reaktioner innefattar behandling av glykosyl- halogeniden med en alkohol i närvaro av en promotor som skall åstad- komma utbyte av halogenen mot alkoxigruppen i alkoholen. Den sålunda erhållna 2-azido-2-deoxi-glykosiden reduceras enligt metoder som är välkända för fackmän på området under bildning av 2-amino-2-deoxi- -glykosfier. Dessutom kan de skyddande grupperna avlägsnas för deblocke- ring av glykosiden. Som exempel kan nämnas att 3,4,6-tri-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-B-2-galaktopyranosylklorid kan bringas att reagera med 8-metoxikarbonyloktvl-2-Q-(2,3,4-tri-Q-bensyl-a-L-fukopyranosyl)- -4,6-Q-bensyliden-B-2-galaktopyranosyl i närvaro av en promotor.
Trisackaridprodukten deblockeras och dess azidogrupp reduceras till aminen som sedan acetyleras under bildning av 8-metoxi-karbonyloktyl- -3-Q-(2-acetamido-2-deoxi-a-D-galaktopyranosyl)-2-Q-(o-L-fukopyrano- syl)-B-Q-galaktopyranosid. Denna sistnämnda produkt motsvarar den antigena determinanten för den humana A-blodgruppen och kan användas för framställning av en immunabsorbent, som är specifik för anti-A- -antikropparna, genom att bindas vid en olöslig bärare. Denna sist- nämnda produkt kan även användas för att förhindra reaktionen mellan anti-A-antikroppar och humana A-erytrocyter. Produkten kan vidare användas för framställning av artificiella antigener, vilka medger uppkomst, genom immunisering, av monospecifika anti-A-antikroppar hos försöksdjur. Efterföljande isolering av dessa antikroppar med användning av immunabsorbenten ger ett viktigt och användbart reagens för cell- och vävnadsbestämning.
Beskrivning av den föredragna utföringsformen av uppfinningen: Azid-nitreringsreaktionen: Strukturformler för föreningarna I-LII är angivna på formel- schemat, och hänvisning till dessa föreningar kommer att ske i be- skrivningen och i bestämda exempel som åskådliggör uppfinningen.
Exemplen I t.o.m. VII visar reaktionen mellan på lämpligt sätt skyddade glykaler och ceriumammoniumnitrat och ett azidsalt under bildning av motsvarande 2-azido-2-deoxi-glykosyl-nitrater.
Beteckningen glykal avser 1,2-omättade sockerarter som känne- tecknas av strukturen \ - W 465 515 Beteckningen skyddad glykal anger att hydroxylsubstituenterna har skyddats genom blockeringsgrupper, såsom acetyl, propionyl och bensoy vilka inte deltar 1 efterföljande reaktioner, eftersom de är mindre reaktiva än hydroxylgruppen. På detta sätt bibehålls glykalens andra egenskaper än de egenskaper som beror på omättnaden.
Som exempel på skyddade glykaler kan nämnas 3,4,6-tri-Q-acety -Q-galaktal", I; 3,4,Ö-tri-Q-acetyl-Q-glukal, VI; Llbö-tri-Q-bensoyl- -Q-ga1akta1, X; nexa-g-acetyl-9-laktal, xIII;_och 3,4-a1-g-acetyí-g- -xylal, XVI. _ g Vid azidnitrering av glykaler, som är visad i exemplen I t.o.
VII; bringas de skyddade glykalerna att reagera med ett överskott av en 2:1 (mol/mol)-blandning av ceriumammoniumnitrat och ett azidsalt.
Det är känt. att dessa båda salter reagerar under bildning av kvävgas som en produkt. Det ringa överskottet av reagens används för att kom- pensera för denna förlust.
För azidnitreringsreaktionen föreslås följande förklaring, .dock utan att den skall anses bindande: CeM +N' --V __ .Ceß +N' .OAc_ 0Ac ^°9 C +4 Aco O-AC '-~ -- _; e' Lim-k - '" .~ __- ' o -t . _ÅCÛ ÛN02 Y - 465 515 g _ Ce(IV) är ett starkt oxidationsmedel och upptar en elektron från den negativt laddade azidjonen. Den erhållna azidradikalen adderas över den 1,2-omättade bindningen i glykalen under bildning av en inter- mediär radikal. En andra Ce(IV)-jon kan oxidera den intermediära radikalen till en oxikarbokatjon. Additionen av en nitratjon till C-l-ställningen ger 2-azido-2-deoxi-glykosylnitratet.
Azidsaltet kan utgöras av vilken som helst av de vanliga alkalimetallaziderna. Natriumazid används företrädesvis, på grund av kostnader och hantering, men litium- och kaliumaziderna är också lämpliga.
En 2-azidosubstituent är önskvärd, eftersom den inte påverkar den efterföljande bildningen av en a-glykosid-bindning vid det anomera centret (C-l) och kan reduceras till en aminofunktion enligt välkända metoder under bildning av 2-amino-2-deoxi-socker.
Man använder ett lösningsmedel, som kan lösa de tre reagensen, den opolära glykalen och jonsalterna, i en sådan mängd som kan ge till- räckliga koncentrationer av dessa reagens i reaktionsblandningen. Lös- ningsmedlet skall dessutom vara i huvudsak inert mot reaktion och resistent mot oxidation medelst ceriumsaltet. Det företrädesvis använda lösningsmedlet är acetonitril pà grund afidess resistens mot oxidation och dess förmåga att ge lämpliga koncentrationer av reagensen i lös- ning. Andra lösningsmedel kan användas, såsom etylacetat eller ättik- syra, men bireaktionerna är ganska kännbara ifråga om det sistnämnda.
Lösningsmedlet torkas företrädesvis före användning, eftersom närvaro av vatten visar sig gynna bireaktionerna.
Pâ grund av olikheten i reagensens löslighet erfordras effektiv omröring för att tillräckliga koncentrationer skall upprätthållas i reaktionsblandningen och för att en effektiv reaktionshastighet skall säkerställas. ' Det lämpligaste reaktionstemperaturintervallet är från -25°C 1 till +25°C. Den undre gränsen bestäms genom fryspunkten för aceto- nitril, det lösningsmedel som helst används; medan den övre gränsen 1 väljs godtyckligt som en gräns, ovanför vilken konkurrerande bireak- tioner blir betydande. Även om reaktionskinetikén blir långsammare vid lägre temperaturer och ger upphov till längre reaktionstider kommer utbytena av de önskade produkterna att bli bättre.
Reaktionen kan genomföras i luft, men man använder företrädes- vis en inert atmosfär, såsom kväve.
Exemplen I och II åskådliggör två olika metoder inom ramen för uppfinningen för framställning av 2-azido-2-deoxi-nitrater av 5,4,6- 9 1 .f7 P41”- -tri-g-acetyi-g-galaxtal. Det första' är ett förfaranâg Éomoaiflaattrak- tivt för kommersiell produktion, medan det andra beskriver det för- sök som ledde till uppfinningen. Uppfinningen innefattar alla varia- tionerna i reaktionsbetingelser och arbetssätt som är uppenbara för kemister som är kompetenta att avgöra och prova effektiviteten av alternativa förfaranden, bland vilka skulle kunna nämnas sådana variationer som ändringar i lösningsmedel för reaktion eller extrak- tion, tillsättningssätt, omröringshastigheter och temperaturintervall.
Exempel I Reaktion mellan 2,5,4-tri-0-acetyl-D-galaktal(I) och ceriumammonium- nitrat i närvaro av natriumazid. _ I en trehalsad, femliters rundkolv försedd med ett tillopps- rör, ett avloppsrör och en effektiv mekanisk omrörare, infördes fast ceriumammoniumnitrat (899, 90 g, 1,64 mol) och fast natriumazid (5},57 g, 0,82 mol), varjämte kolven kyldes till -l5oC under en kväveatmosfär. 2,5,4-tri-Q-acetyl-2-galaktal (I) (150 g, 0,551 mol) löstes i vattenfri acetonitril (5,4 liter) i en trehalsad, fyraliters kolv, som var försedd med ett tilloppsrör och ett avloppsrör. Lös- ningen kyldes till -l5°C under översköljning med kväve. Genom på- läggning av ett positivt kvävetryck pumpades acetonitrillösningen in i kärlet som innehöll de fasta reaktionskomponenterna genom ett inert rör. Efter fullbordad tillsats av acetonitrillösningen (ungefär l minut) påbörjades mekanisk omröring, och den fick fortsätta ca 15 - 20 timmar eller tills reaktionsblandninger inte längre innehöll någon glykal, vilket fastställdes genom undersökning medelst tunn- skiktskromatografering på silikagel eluerad med hexan-etylacetat (v/v) 6:4. Vid denna tidpunkt tillsattes toluen (l liter) och kallt vatten (l liter), varjämte reaktionskärlet avlägsnades från kylbadet.
Blandningen överfördes till en tioliters behållare, och efter tillsats av toluen (2 liter) avskildes det organiska skiktet, vilket överfördes till en separationstratt. Lösningen tvättades med kallt vatten (3 x l liter).Det organiska skiktet filtrerades genom med toluen fuktat filtrerpapper, och filtratet koncentrerades till en sirapsliknande /substans (200 g) i vakuum vid en temperatur under 4000. Kärnspinn- resonansspektret eller NMR-spektret för denna sirapsliknande vätska visade att den i huvudsak bestod av 2-azido-2-deoxi-nitrater. Produk- ten hade följande sammansättning: 57 % 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2- -deoxi-a-Q-galaktopyranosyl-nitrat (II), 55 % 5,4,6-tri-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-B-2-galaktopyranosyl-nitrat (III) och 8 % §,4,6-tri-Q- -acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-talapyranosyl-nitrat (IV). Å0 465 515 _ Det låga utbytet av föreningen (IV) tyder på att azidonitre- ringsreaktionen är starkt stereoselektiv i C-2-ställningen.
Trituration av en del av den sirapsliknande produkten (2l,O g) med kall etyleter gav föreningar II och IV (8,5 g) som kristalliserade tillsammans. Moderluten innehöll nästan rent B-Qfnitrat, (III) (l2,6 g). Föreningen III kunde inte bringas att kristallisera. Infra- rödspektret(pà film) för föreningen III visade absorption vid 2120 cm'l (NB) och 1650 cm"l (ON02); dess partiella NMR-spektrum i CDCl var ppm 5,71 (d, 1, J1,2 9,o Hz, H-1), 5,42 (Q, 1, H-4), 5,08 (q, 1, J3,4 5,2 HZ, H-3), 5,87 (q, l, J2,5 lO,9 HZ, H-2), 2,18, 2,10, 2,05 (58, 9, 3 0Ä0)- , Föreningen II, som var fri från taloaziden (IV), erhölls genom anomerisering av B-2-nitratet (III) med nitratjon. En lösning av det sirapsliknande B-Q-nitratet (III) (9,50 g, 25,5 mol) och vattenfritt litiumnitrat (5,50 g, 50,1 mmol) i 4:1 (v/v) acetonitrilzdimetyl- formamid (55 ml) omrördes 42 timmar vid rumstemperatur, varefter den utspäddes med diklormetan (250 ml) och tvättades med iskallt vatten (5 x l25nfl). Den organiska lösningen torkades och indunstades till en sirapsliknande substans (9,0 g). NMR-spektret för denna sirapsliknande substans visade att den var en blandning av 65 ß o- och 57 % fi-2-nitrater (II och III). Kristallisation ur etyleter gav 6,2 g a-2-nitrat (II) med smältpunkten lO59l04°C, Åêfšs + 1250 (3 l, kloroform). IR-spektret (på film) för föreningen II visade absorption vid 2120 cm'l (N3) och 1650 cm'l (0N02); dess partiella NHR-spektrum i CDC1 var: ppm 6,54 (d, l, Jl,2 4,1 Hz, H-5), 4,12 (q, l, J2,3 ll,5 Hz, H-2); 2,18, 2,09, 2,02 (55, 5 OAC).
En mindre mängd biprodukt (< 10 %) vid reaktionen kunde iso- leras antingen genom kromatografering av reaktionsblandningen på silikagel eller i vissa fall genom indunstningav de tre tvättvattnen som erhölls under den ovan beskrivna bearbetningen av reaktions- produkten. Föreningen kristalliserade lätt ur tvättlösningarna genom indunstning eller efter trituration med etyleter och visade sig vara Q-(5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-o-2-galaktopyranosyl)-acetamid (V); smältpunkt 142-l45,5°C, ¿§]š5 + 68,00 (3 1, kloroform). Dess partiella NHR-spektrum i DMSO-db var: ppm 9,85 (d, 1, JNH,l 9,5 Hz, NH), 5,78 (Q, 1, J1,2 5,5 H2, H~1), 5,48 (1, Q, J2,5 11,3 H2, H-5), 5,22 (1, d, J5,4 3,5 HZ, H-4), 4,22 (q, 1, H-2). v ll 463 515 Exempel II Reaktion mellan 3,4,6-tri-0-acetyl-D-galaktal (I)goch ceriumammonium- nitrat i närvaro av natriumazid.
Destillerad 2,5,4-tri-Q-acetyl-Q-galaktal (I) (2l,l g; o,oo7 M) (xoxpunxt 147°-155°c vid 0,1 mm Hg) löstes 1 torr aceto- nitril (420 ml) och kyldes till -2500 under kväveatmosfär i mörker.
En blandning av fast ceriumammoniumnitrat (l0O,2 g, 0,182 mol) och fast natriumazid (6,043 g, 0,092 mol) tillsattes - allt på en gång - och den erhållna suspensionen omrördes 15 timmar vid -2500. Därefter tillsattes kall etyleter (400 ml), och den erhållna blandningen filtr rades för avlägsnande av eventuella fasta substanser. Filterkakan tvättades med dietyleter (2 x 100 ml) och de förenade filtraten hälldes i isvatten (500 ml). Den organiska lösningen avskildes och tvättades med iskallt vatten (3 x 500 ml), torkades över vatten- fritt natriumsulfat, filtrerades och indunstades till en siraps- liknande substans (2l,0 g), som motsvarade ett 73-procentigt utbyte, räknat på de orena nitraterna (II och III). Tunnskiktskromatografi på silikagel framkallad~ med 6:4 (v/v) hexanzetylacetat visade inget kvarvarande utgångsmaterial. NMR-undersökning visade att produkten var i stort sett identisk med den sirapsliknande produkt som erhölls i exempel I.
På grund av glykosylnitraters reaktivitet i allmänhet måste stor försiktighet iakttas vid hantering av dessa föreningar så att icke önskad nedbrytning eller solvolytiska reaktioner inte förorsakas.
Den erhållna blandningen av Q- och ß-nitrater kan variera, eftersom föreningarna lätt omvandlas sinsemellan i närvaro av nitratjon, såsom framgår av exempel I. Blandningen är lika användbar som vilken som helst av de rena produkterna för ändamålen enligt uppfinningen, såsom skall visas i det följande. Man bryr sig i allmänhet inte om att separera föreningarna (II och III). Det visade sig emeller- tid att a-anomeren (III) lätt erhålls i kristallin form, och om denna substans önskas kan utbytet förbättras genom anomerisering av B-anomeren, som är den termodynamiskt mindre stabila föreningen.
Den i exempel I visade azidonitreringsreaktionen är inte begränsad till den acetylerade galaktalen, I, utan kan användas med på lämpligt sätt Q;skyddade glykaler i allmänhet. Detta visas genom exempel III, vari det utvalda reagenset är tri-Q-acetyl-2-glukal, (IV), en annorlunda hexal, och åskådliggörs vidare genom användningen av hexa-Q-acetyl-Q-laktal (XIII) med en disackaridstruktur i exempel IV och av 3,4-di-ä-acetyl-2-xylal (XVI), en pental, i exempel V. 12 Exempel III visar vidare att den temperatur, vid vilken reak- tionen genomförs, kan varieras, ehuru produktens renhet avtar vid reaktionstemperaturer över OOC. Användningen av kaliumazid visas också.
Exempel III Reaktion mellan 5,4,6-tri-0-acetyl-D-glukal (VI) och ceriumammonium- nitrat i närvaro av kaliumasid. _ Behandling av 2,5,4-tri-Qgacetyl-2-glukal (VI) (5,86 g, 21,5 mmol) med ceriumammoniumnitrat (27,8 g, 50,7 mmol) och kaliumazid (2,59 g, 25,7 mmol) vid 25°C enligt den metod som beskrevs i exempel I för tri-Qgacetyl-2-galaktal gav en blandning av 2-azidonitrater i 60 % utbyte. Den här blandningen visade sig vara sammansatt av 5,4,6-tri-Qfacetyl-2-azido-2-deoxi-B-2-glukopyranosyl-nitrat (VIII) (42,5 %), 3,4,6-tri-Q¿acetyl-2-azido-2-deoxi~a-Q-glukopyranosyl- nitrat (vil) (24 %) och 3,4,6-tri-gfacetyi-2-azšao-2-aeox1-a-p- -mannopyranosyl-nitrat (IX) (55 %). Denna sammansättning baserar sig pá de relativa intensiteterna hos de anomera NHR-signalerna som har tillskrivits föreningarna VII, IX och VIII, vilka var vid 6,4 ppm,, J = 4,0 Hz, 6,28 ppm,J = 1,8 Hz resp. 5,72 ppm., J = 8,8 Hz.
Exempel IV Reaktion mellan hexa-0-acetyl¿Q:laktal (XIII) och ceriumammonium- nitrat i närvaro av natriumazid.
Azidonitreringen av hexa-Qfacetyl-2-laktal (XIII) tjänstgör som en ny väg till den viktiga disackarid som är känd som en laktos- amin och som är en byggnadssten i oligosackarider, vilka bildar kärnstrukturen i oligosackarider som påvisas i human mjölk och de antigena strukturerna hos de humana blodgruppsämnena. .
Behandling av hexa-Q¿acetyl-2-laktal (XIII) (l,0 g, 1,79 mmol) med ceriumammoniumnitrat (2,45 g, 4,48 mmol) och natriumazid (0,l74 g, 8 2,685 mmol) enligt metoden i exempel II gav en blandning av 2-azido- nitraterna (0,89 g) i ett större utbyte än 75 %. NMR-undersökning visade vid 6,50 ppm (d, 4,25 Hz) och 5,56 ppm (d, 8,5 Hz) signaler som tillskrevs de anomera protonerna i 2-azidonitraterna XIV resp.
XV. Trituration av denna sirapsliknande substans med etyleter gav kristallint 5,6-di-Qgacetyl-4-Q¿(2,5,4,6-tetra-Q;acetyl-B-2-galakto- pyranosyl)-2-azido-2-deoxyl-B-2-glukopyranosyl-nitrat (XV) (0,5 g) 1 42 % utbyte; smältpunkt 69i7o°c; ¿§7â5 + 15° (9 1, kioroform). Det infraröda spektret av föreningen XV visade absorption vid 2120 cm'1 463 515 . 15 (N3) och 1650 cm"l (ONO2); dess partiella NNR i CDCl5 var ppm 5,56 (a, 1, JLE 8,5 Hz, H-i), 5,56 (q, 1, Jzå 8,25 Hz, H-e).
Pelarkromatografering av moderluten - efter avlägsnande av kristallin förening XV - på silikagel framkallad. med hexan-etyl- 'acetat-etanol (v/v) lO:lO:l gav ytterligare mängder av föreningen XV (0,05 g) och 5,6-di-Q-acetyl-4-Q-(2,5,4,6-tetra-Q-acety1-ß-2- -galaktopyranosyl)-2-azido-2-deoxi-d-2-glukopyranosyl-nitrat (XIV) (0,5l g), som kristalliserades ur etyleter: smältpunkt 1580-14000; ¿§7š5 + 69,70 (g l, kloroform). Infrarödspektret av föreningen XIV visade absorption vid 2120 cm'l (N5) och 1650 cm_l (0NO2); dess partiella NMR-spektrum i CDCl3 var ppm 6,50 (d, l, Jl,2'4,25 Hz, H-1), 5,72 (q, 1, J2,3 10,5 Hz, H-2).
Exempel V Reaktion mellan 5,4-di-0-acetyl-D-xylal (XVI) och ceriumammonium- nitrat i närvaro av natriumazid.= Exempel V visar att tillämpningen av azidonitreringsprocessen kan utsträckas till pentopyranoglykaler.
Behandling av di-Q-acetyl-Q-xylal (XVI) (29) (0,472 g, 2,56 mmol) med ceriumammoniumnitrat (4,59 g, 8,0 mmol) och natriumazid (0,260 g, 4,0 mmol) enligt det i exempel II beskrivna förfarandet gav en blandning av 2-azido-nitrater ip88 % utbyte. NHR-undersökning av produktblandningen visade signaler vid 5,70 ppm (d, 7,5 Hz), 68 %, 6,28 ppm (d, 4,0 Hz), ==l6 %, och 6,56 ppm (d, 4,5 Hz),:sl6 %.
Den huvudsakliga produkten visade sig vara 5,4-di-Q¿acetyl-2-azido- -2-deoxi-B-2-xylopyranosyl-nitrat XVII vid dubbla strälningsför- sök, som visade närvaro av en grupp om fyra signaler vid 5,70 ppm. med J2,5 = 8,75 Hz och Jl,2 = 7,5 Hz, som tillskrevs H-2 i föreningen XVII. De produkter som utgjorde resterande 52 % av blandningen av 2-azido-2-deoxi-nitrater mäste vara a- och B-2-xyloanomererna XVIII, eftersom anomerisering av blandningen av nitrater enligt den metod som är beskriven i exempel I för föreningen III gav upphov till en ny signal i NMR-spektret för produktblandningen vid 6,51 ppm (d, Jl,2 5,65 Hz). Den här signalen tillskrivs den anomera protonen i 5,4-di- -Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-d-2-xylopyranosyl-nitrat (XVIX).
Exempel VI Reaktion mellan 5,4,6-tri-0-bensoyl-D-galaktal (X) och ceriumammonium- nitrat i närvaro av natriumazid.
Azidonitreringsreaktionen är inte begränsad till acetylerade glykaler utan kan tillämpas på vilken på lämpligt sätt skyddad glykal 465 515 1” som helst. Blockeringsgrupperna kan exempelvis vara propionyl eller bensoyl. Detta visas i det här exemplet, i vilket 3,4,6-tri-Qfbensoyl- -2-galaktal (X) används som utgångsmaterial. ' Behandling av 3,4,6-tri-Q¿bensoyl-Q-galaktal (X) (7,l8 g, 12,2 mmol) med ceriumammoniumnitrat (20,2 g, 36,6 mmol) och natrium- azid (l,l8 g, 18,1 mmol) enligt den metod som är beskriven i exempel I för tri-Qfaoetyl-Q-galaktal gav en blandning av 2-azido-2-deoxi- -nitrater (7,5 g) i 75 % utbyte. En undersökning av NMR-spektret av den orena produkten 1 CDCIB visade att den bestod av 2-azido-5,4,6- -tri-Qfbensoyl-2-deoxi-à-2-galaktopyranosyl-nitrat (XI) (30 %) och 2-azido-3,4,6-tri-Q-bensoyl-2-deoxi-B-2-galaktopyranosyl-nitrat (XII) (45 %). Den anomera signalen för a-2-nitratet iakttogs vid 6,67 ppm med Jl,2 = 4,6 Hz. Ehuru den anomera signalen för ß-2-ano- meren var maskerad, iakttogs H-2-signalen vid 4,20 ppm som en stor grupp på tre med Jl,2 = 9,5 Hz.
Exempel VII Reaktion mellan 5,4,6-tri-O-acetyl-D-galaktal, natriumazid och ceriumammoniumnitrat i etylacetat. = ' Även om acetonitril är det företrädesvis använda lösningsmedlet, är azidonitreringsreaktionen inte begränsad till valet av just det lösningsmedlet. Detta visas i det här exemplet, i vilket etylacetat används som lösningsmedel.
Behandling av tri-Qfacetyl-2-galaktal (I) (O,3O g, 1,09 mmol) med ceriumammoniumnitrat (l,4l g, 2,57 mmol) och natriumazid (0,084 g, 1,29 mmol) i etylacetat (5 ml) enligt det i exempel I beskrivna för- farandet gav en blandning av 2-azido-nitraterna i större utbyte än 60 %. NMR-undersökning av produkten visade att 2-azido-nitratbland- ningen var lik den i exempel I beskrivna. Undersökning genom tunn- skiktskromatografi på silikagel framkallad med 6:4 (v/v) hexanzetyl- gacetat visade emellertid att fler bireaktioner hade ägt rum i det här lösningsmedlet.
Omvandling av azidonitrater till aminosocker De acylerade 2-azido-2-deoxi-nitraterna kan omvandlas till motsvarande 2-amino-2-deoxi-socker genom hydrolys av nitrat- och acylgrupperna och reduktion av azidogruppen enligt för fackmannen välkända metoder. Hydrolys kan föregå reduktion och vice versa.
Aminosockren, särskilt galaktosamin och laktosamin, och deras N-acetylerade derivat är viktiga byggenheter för blodgruppernas antigena determinanter. De N-acetylerade derivaten framställs av aminosockret enligt för fackmän välkända metoder. Aminosockren kan 15 463 515 l också användas för framställning av 2-acetoamido-2-deoxi-glukoser.
Reduktionen av azidogrupper till aminogrupper är välkänd och kan genomföras i nära nog kvantitativt utbyte pà många olika sätt, såsom reduktion med metaller såsom natrium eller zink, reduktion genom katalytisk hydrering med användning av sådana katalysatorer som nickel, platina eller palladium, reduktion med användning av hydrider, såsom natriumborohydrid, boran och litiumaluminiumhydrid,- elektrolytiska reduktioner och reduktion med svavelväte vid alka- liska betingelser.
I stora drag avser uppfinningen ett förfarande för omvand- ling av ett acylerat 2-azido-2-deoxi-glykosylnitrat till en 2-amino- -2-deoxi-glukos, vilket innefattar reduktion av azidogruppen till en aminogrupp och hydrolys av acyl- och nitratgrupperna.
Reduktion av azidgruppen kan ske genom att det angivna nitratet får reagera med en vattenhaltig syra över finfördelad zinkmetall. Den vattenhaltiga syran kan vara ättiksyra. Alternativt innefattar reduktionen av azidgruppen hydrering av nitratet över en katalysator som kan vara palladium, platina eller nickel" I en ytterligare process kan azidogruppen i ett acylerat 2-azido-2-deoxi-glykosylnitrat reduceras till en amin och reduktions- produkten behandlas med en vattenhaltig mineralsyra, såsom klorväte- I syra, för framställning av syrasaltet av 2-amino-2-deoxi-glukos.
Vidare kan nitratgruppen i ett acylerat 2-azido-2-deoxi- -glykosylnitrat ersättas med en acylgrupp, såsom acetyl, och i god- tycklig ordning kan azidogruppen reduceras till amin och hydrolyseras med en vattenhaltig mineralsyra, såsom klorvätesyra, för framställ- _ning av saltet av 2-amino-2-deoxi-glukos.
I ett bestämt exempel på denna process åstadkommas ett ut- byte av nitratgruppen mot ett acetat genom upplösning av en anomer blandning av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranosyl- -nitrat i en lösning av natriumacetat i ättiksyra och uppvärmning av lösningen. Reduktion av azidogruppen till amin sker genom tillsats av zinkstoft och ättiksyraanhydrid under omröring, varvid den anomera blandningen av 2-acetoamido-l,3,4,6-tetra-Q-acetyl-2-galaktopyranos bildas. Produkten kan isoleras genom lösningsmedelsextraktion efter tillsats av vatten eller genom indunstning under vakuum, och produk- ten kan behandlas med vattenhaltig klorvätesyra under bildning av Q-galaktosamin-hydroklorid. _ En process av denna typ kan även genomföras på en-anomer blandning av 5,6-di-Q-acetyl-ÄQ-(2,3,4,6-tetra-Q-acetyl-fi-Q-galakto- 463 515 16 »i pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-2-glukopyranosyl-nitrat. Den sistnämda anomera blandningen kan alternativt ernàs med natriumacetat i ättik- syra för substitution av nitratet, varjämte aziden reduceras och produkten acetyleras och sedan de-Q-acetyleras under bildning av Q-acetyllaktosamin.
Enligt ytterligare en process, som åskådliggör substitutionen av nitratgruppen men inte innefattar något reduktionssteg, behandlas en anomer blandning av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-Q-galakto- pyranosyl-nitrat med natriumacetat i ättiksyra under bildning av 1,3,4,6-tetra-Q¿acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranosyl-acetater, varefter produkten isoleras och hydrolyseras i vattenhaltig syra under bildning av 2-azido-2-deoxi-2-galaktos. 2-azido-2-deoxi-Q- -galaktosen kan sedan reduceras i närvaro av en molär ekvivalent av en syra under bildning av motsvarande syrasalt av Q-galaktosamin.
Nitratgruppen i det acylerade 2-azido-2-deoxiïnitratet kan substitueras med en acylgrupp på vanligt sätt före hydrolys eller reduktion. Nitratföreningen kan exempelvis behandlas med natrium- acetat i ättiksyra, såsom är visat i exemplen XIV-XVI.
Exempel VIII Framställning av de anomera l,§,4,6-tetra-0-acetyl-2-azido-2-deoxi- -D-galaktopyranoserna (XXVII) och(XXVIII)._ = En lösning av rent 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-B-2- -galaktopyranosyl-nitrat (III) (0,l5 g, 0,40 mmol) och natriumacetat (O,65 g, 0,80 mmol) i isättika (2 ml) uppvärmdes till 1000 i 15 minuter, varefter tunnskiktskromatografering på silikagel, framkallad med 6:4 (v/v) hexanzetylaoetat visade en homogen fläck med lägre Rf än föreningen III. Lösningen späddes ut med diklormetan (5 ml) och tvättades med iskallt vatten (5 ml). Avdunstning av lösningsmedlet efter torkning över natriumsulfat och_filtrering gav en siraps- liknande substans (O,l54 g, 90 % utbyte), som kristalliserade spontant vid trituration med etyleter.
' Omkristallisering ur etyleter eller kall etanol gav ett ana- lytiskt rent prov av l,3,4,6-tetra-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2- -galaktopyranos (xxvII), smäitpunkb 114°-115°c, ¿§7â5 + 91,7o (g 1,05, kloroform), IR-spektrum (på film) 2120 cm'l (N3). ' NMR-spektret av föreningen XXVII i CDCl3 visade delvis ppm 6,38 (d, 1, Jm 5,7 Hz, H-l), 5,50 (q, 1, JM 3 Hz, H-lß), 5,36 (q, 1, Jg-'j 7 Hz H'3)I (q: l: H"2)° 17 465 515 En lösning av det orena 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi- -a-Q-galaktopyranosyl-nitratet (II) (1,0l g, 2,70 mmol) och natrium- acetat (0,43 g, 5,20 mmol) i isättika (10 ml) uppvärmdes till 10000 i 20 minuter. Reaktionslösningen Späddes sedan ut med diklormetan (50 ml) och tvättades med iskallt vatten (250 ml). Avdunstning av lösningsmedlet efter torkning över natriumsulfat och filtrering gav en sirapsliknande substans (1,0 g). Undersökning av denna siraps- liknande substans genom NMR-spektroskopering visade att den var sammansatt av föreningen XXVII (50 %) och 1,5,4,6-tetra-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-B-Q-galaktopyranos XXVIII (60 %). Den anomera protonen i ß-anomeren (XXVIII) tillskrevs en dipol med J = 8,5 Hz vid 5,61 ppm- Föreningarna XXVII och XXVIII erhölls i en blandning nära 5:1 genom acetolys i ättiksyra, som innehöll natriumacetat, av en bland- ning av föreningarna Iï och III, framställd enligt det i exempel II beskrivna förfarandet.
Exempel IX Framställning av 1,5,4,6-tetra-0-acetyl-2-azido-2-deoxi-d-D-gluko- och -manngpyranoser (XXIX och XXX). = En blandning av 5,4,6-tri-Q;acetyl~2-azido-2-deoxi-ß-2-manno- pyranosyl-nitrat (IX) och Q» och B-anomererna av 5,4,6-tri-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-Q-glukopyranosyl-nitrat (VII och VIII), erhâllen på i exempel III beskrivet sätt, behandlades med en lösning av natrium- acetat (0,350 g, 4,26 mmol) i ättiksyra (10 ml) vid 10000 en timme.
Bearbetning av produktblandningen enligt det i exe_mpel II beskrivna förfarandet gav ett skum (0,70 g). Pelarkromatografering (30 X 2 cm) på silikagel (70 g) eluerad med hexan-etylacetat-etanol (V/v) l0:10:l åstadkom separation av gluko-(XXIX) och manno-(XXX)-2-azido-2-deoxi- -aoetaten, 0,340 g resp. 0,310 g.
Ren 1,3,4,6-tetra-Qyacetyl-2-azido-2-deoïi-o-2-glukopyranos (XXIX) (0,211 g, 21 %) erhölls genom omkristallisering ur etyleter; smältpunkt ll7°-11800, Åëfšs + 1280 (9 0,9, kloroform). Det partiella NMR-spektret av föreningen XXIX i CDCl5 gav ppm 6,29 (d, 1, Jl,2 3,5 Hz, H-l). 5,45 (t, 1, J3,4'9,o Hz, H-ñ), 5,08 (t, 1, 5,5 9,0 Hz, HJU: (q: l: J2,5 9:0 Hz: H"2)° Ren 15,4,6-tetra-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-mannopyranos (0,220 g, 22 %) erhölls genom omkristallisering ur etyleter; smält- punkt 131°-152°c, Qi? + 78,6 (_o_ 1,02, Kloroform). Det partioila NMR-spektret av föreningen XXX i 00015 gav ppm 6,09 (d, 1, Jl,2 1,8, H-1). 2 465 515 . ___ Exempel X Framställning av de anomera formerna av 1,5,6-tri-O-acetyl-§¿Q¿ ¿§2,5,4,6-tetra-O-acetyl-B-D-galaktopyranosyl)-2-a;ido-2-deoxi;D- -glukopyranos (XIII och XXXII). _ Behandling av en anomer blandning av 5,6-di-Q-acetyl-4-Q- -(2,5,4,6-tetra-Q-acetyl-B-galaktopyranosyl)-2-azido-2-deoxi-2- -glukopyranosyl-nitrat (XIV och XV), bestående till ca 70 % av B-anomeren (XV) (5,5O g),med natriumacetat (2,l6 g, 26,5 mol) i ättiksyra enligt det i exempel IX beskrivna förfarandet gav kristallin l,5,6-tri-Q-acetyl-4-Q;(2,5,4,6-tetra-Qyacetyl-B-D-galakto- pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-a-D-glukopyranos (2,48 g) (XXXI) i 73 % utbyte. Omkristallisering ur etylacetat-pentan gav den rena a-anó- meren (XXXI), smältpunkt 770-7800, ¿§fâ5 + 55,40 (3 l, kloroform).
Det partiella NMR-spektret av föreningen XXXI i CDCl5 var ppm 6,22 (d, 1, _1132 3,65 H-l), 3,46 (q, 1, Ja; 10,5, H-z).
Liknande behandling av det rena d-nitratet,_XIV, på ovan be- skrivet sätt gav kristallin l,5,6-tri-Q-acetyl-4-Q-(2,5,4,6-tetra- -Qfacetyl-B-2-glykopyranos (XXXII) i bra utbyte (70 %).
Utmärkta utbyten av föreningen XXXII erhölls även genom be- handling av 5,6-di-Q-acetyl-4-Q¿(2,5,4,6-tetra-Q-acetyl-B-2-galakto- pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-a-2-glukopyranosyl-klorid (XXV) (O,264 g,\ 0,414 mmol) eller av motsvarande a-bromid (XXVI) med silveracetat (O,l57 g, 1,656 mmol) i ättiksyra (5 ml) vid rumstemperatur en timme.
Därefter späddes reaktionslösningen ut med diklormetan (20 ml), filtrerades och tvättades med vatten (2 x 20 ml). Det organiska I skiktet torkades och indunstades till ett vitt skum (O,25O g), Kristallisation av detta material ur varm metanol gav l,3,6-tri-Qf -acetyl-4-Q-(2,},4,6-tetra-Q-acetyl-B-2-galaktopyranosyl)-2-azido- -2-deoxi-B-2-glukopyranos (XXXII). Det partiella NMR-spektret av föreningen XXXII i CDCl3 gav ppm 5,51 (d, 1, Jl,2, 8,75 Hz, H-1), 5,57 (q, l, J2,3 10,0 Hz, H-2).
Exempel XI Framställning av 2-acetoamido-1,3,4,6-tetra-O-acetyl-2-deoxi-d- och §¿D¿galaktopyranoser (XXIV och XXXV). _ = Detta exempel anger ett effektivt förfarande, baserat på reduktion med zink, för omvandling av blandningen av anomera L§,4,6- -tetra-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galaktoser, XXVII och XXVIII, er- hållna enligt exempel VIII, till en anomer blandning av l,3,4,6-tetra- -Qgacetyl-2-acetamido-2-deoxi-galaktopyranoser, XXIV och XXV, och klargör hur denna blandning kan användas för framställning av 2- -galaktosamin-hydroklorid (XXXVII).
W 465 515 Isättika (200 ml) och natriumacetat (8,2 g, 0,1 mol) sattes till den a- och B-anomera blandningen av 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido- -2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl-nitrater (II och III) (52 g, 0,08 mol) som framställts enligt det i exempel II beskrivna förfarandet, och blandningen emrördee en timme vid 1oo°c. zinkmetali (12,8 g, 0,2 mel) sattes sedan till lösningen, som kyldes till 60°C och omrördes 15 minuter. Ättiksyraanhydrid (17 ml) tillsattes och blandningen upp- värmdes på ett ångbad (l00°C) en timme och filtrerades. Lösningen hälldes i 100 ml vatten och omrördes en timme. Sedan tillsattes 500 ml vatten och blandningen extraherades tre gånger med diklor- metan (100 ml). Extrakten förenades, filtrerades genom papper som fuktats med diklormetan, och indunstades till en tjock, sirapslik- nande vätska, som hårdnade till en kristallin massa vid triturering med eter. NMR-spektret för den här produkten överensstämde med NMR- -spektret för en 4:1-blandning av a- och B-anomererna av 2-acetamido- -1,5,4,6-tetra-Q-acetyl-2-deoxi-2-galaktopyranos.
Omkristallisering ur eter gav den rena Q-anomeren (XXXIV) i 55-procentigt utbyte; smältpunkt 1170-1780; ¿§7š5 + 990 (9 l, kloroform).
Moderlutarna förenades och gav 14 g av en sirapsliknande produkt som visade sig vara en nära 1:1 anomer blandning av tetra- acetaterna XXXIV och XXXV. Blandningen löstes i 4N vattenhaltig klorvätesyra (150 ml) och lösningen uppvärmdes-vid l0O°C i 7 timmar.
Lösningen avfärgades med aktivt kol och späddes ut med n-butanol (500 ml) före indunstning till en brunaktig sirapsliknande substans (10 g). Produkten visade sig vara 2-galaktosamin-hydroklorid (XXXVII) då dess papperskromatografiska rörlighet_och dess NMR- -spektrum i D20 jämfördes med dem för ett autentiskt prov. Ren D-galaktosamin-hydroklorid erhölls lätt genom kristallisation med användning av etanol-vatten-aceton på i litteraturen beskrivet sätt för reningen av denna förening. 2-acetamido-2-deoxi-2-galaktos (XXXVI) kan framställas genom enkel N-acetylering av Q-galaktosamin-hydroklorid enligt metoder som är välkända för fackmannen, men den kan även erhållas som en mellan- produkt vid syrahydrolysen av föreningarna XXXIV och XXXV.
Exempel XII Framställning av 2-acetamido-1,5,4,6-tetra-0-acetyl-2-deoxi-a-P- :galaktopyranos (XXXIQ). _ f Hydrering av l,5,4,6-tetra-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-d-2- -galaktopyranos (XXVII) (0,20 g, 0,556 mmol), löst i etanol (5 ml) f 465 515 20 \ \ _ innehållande ättiksyraanhydrid (O,25 ml) och 5 % palladium på träkol (O,8O g), fullbordades inom en timme vid rumstemperatur under 1 atmos- fär väte. Filtrering genom diatomacêjord och indunstning av lösnings- medlet gav ett vitt skum (O,206 g). Undersökning genom tunnskikts- kromatografering på silikagel, framkallad med 5:5:l (v/v) bensenzetyl- acetatzetanol, visade närvaro av två föreningar, vilka var lätta att separera genom pelarkromatografering på silikagel (20 x l cm), eluerad med samma lösningsmedel. Härvid erhölls 2-acetamido-l,5,4,6-tetra-Q- -acetyl-2-deoxi-a-Qfgalaktopyranos (XXXIV) (0,lO g, 50 % utbyte), som omkristalliserades ur etyleter, smältpunkt 1770-17890, ¿:7š5 + 990 (g 1, kloroform).
NMR-data för föreningen XXXIV överensstämde väl med de tidigare angivna.
Den andra föreningen visade sig vara 2-(N-acety1)-acetamido- -I5,4,6-tetra-Qfacetyl-2-deoxi-a-2-galaktopyranos (0,068 g) vid undersökning av dess NMR-spektrum.och jämförelse mellan dessa data och de tidigare angivna.
Exempel XIII Reduktion av 1,3,4,6-tetra-O-acetyl-2-azido-2-deoxi-q:D-galakto- pyranos (XXVII) med svavelväte i närvaro av trietylamiä.
Det här exemplet anger en alternativ metod för reduktion av azidogruppen till amin. Svavelväte fick bubbla genom en lösning av föreningen XXVII (O,2O g, 0,55 mmol) och trietylamin (O,l55 g, 1,54 mmol) löst i diklormetan (5 ml) vid Oo. Efter .2O minuter visade undersökning av reaktionsblandningen genom tunnskiktskromatografering, framkallad med lO:lO:l (v/v) hexanzetylacetatzetanol, inget kvar: varande utgångsmaterial och en homogen fläck med lågt Rf. En gul fällning uppträdde då reaktionsblandningen stått en tid. Suspensionen indunstades till torrhet, och återstoden löstes i pyridin (2 ml) och ättiksyraanhydrid (0,5 ml). Efter 15 timmar späddes reaktionslös- ningen ut med diklórmetan (20 ml) och vatten (10 ml). Det organiska skiktet separerades, torkades och indunstades till en brun siraps- liknande substans (0,l7 g) som hade samma rörlighet på silikagel som 2-acetamido-l,5,4,6-tetrafg-acetyl-2-deoxi-d-Q-galaktopyranos (XXXIV). NMR-spektret för denna sirapsliknande substans i CDCl5 var identiskt med spektret för föreningen XXXIV.
Exempel XIV Framställning av D-galaktosamin-hydroklorid (XXVII) med utgångspunkt från a- och B-5,4:6-tri-0-acetyl-2-azido-2-deoxi-D-galaktcpyranosvl- -nitraterna II och III. _ T D-galaktosamin-hydroklorid (XXXVII) kan erhållas direkt från 21 463 515 den anomera blandningen av 3,4,6-trilg-acetyl42-azido-2-deoxi-galakto- pyranosyl-nitrater, II och III, genom hydrering under bildning av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-galaktosamin (XXXVIII) och efterföljande sur hydrolys, såsom kommer att åskådliggöras i detta exempel.
En lösning av den anomera blandningen av 2-azido-2-deoxi- -nitrater II och III (1,0 g, 7,68 mmol) hydrerades i ättiksyra (5 ml), som innehöll 5 % palladium på kol (O,lO g), vid l atm och rumstemperatur i 5 timmar. Efter avlägsnande av katalysatorn genom filtrering och avdunstning av lösningsmedlet erhölls 3,4,6-tri-Q- -acetyl-2-galaktosamin (XXXVIII) (O,85 g) som ett skum. Behandling av detta skum med 2 N vattenhaltig klorvätesyra (10 ml) vid rums- temperatur i två till tre timmar och efterföljande utspädning med n-butanol (5 ml) och avdunstning gav Q-galaktosamin-hydroklorid XXXVII (O,5O g) som omkristalliserades ur butanol-etanol-vatten.
Exempel XV Framställning avïyfgalaktosamin-hydroklorid (XXXVII) med utgångspunkt från a- och B-l,5ï4;6-tetra-O-acetyl-2-azido-2-deoxi-D-galakto- pyranoserna (XXVII och XXVIII), É 2-galaktosamin-hydroklorid kan även framställas i höga utbyten från den anomera blandningen av 2-azido-2-deoxi-acetaterna XXVII och XXVIII genom syrahydrolys och efterföljande reduktion. Förfarandet âskådliggörs på följande sätt.
En blandning av de anomera föreningarna XXVII och XXVIII (1,0 g, 2,68 mmol) löstes i 2 N klorvätesyra (10 ml) och omrördes två till tre timmar vid rumstemperatur. Utspädning med n-butanol (5 ml) och avdunstning av lösningsmedlet gav en vit fast substans (O,5l0 g). Omkristallisering av den fasta substansen ur etanol genom indunstning gav ren 2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranos (XL) (0,4O g, 72 9% utbyten smäitpunxt 173°-175°c (sönderaelning), ¿§7š5 + 53,7 -> 76,90 (g 0,98, vatten). Reduktion av'föreningen XL vid sura betingel- ser gav Q-galaktosamin-hydroklorid (XXXVII). kan kan även erhålla.2-azido-2-deoxi-galaktopyranos (XL) genom liknande behandling av N-(3,4,6-tri-Qfacetyl-2-azido-2-deoxi-a-Q- -galaktopyranosyl)-acetamid (V).- Exempel XVI ' _ - Framställning av 2-deoxi-D-laktosamin-hydroklorid (XXXIX).
Exempel XVI beskriver syntes av D-laktosamin-hydroklorid (XXXIX) med utgångspunkt från 2-azido-2-äeoxi-laktosvl-acetaterna, XXXI och XXXII. ~ 465 515 22 En anomer blandning av 2-azido-2-deoxi-laktosacetat, före- ningarna XXXI och XXXII (5,0 g, 7,75 mmol), löstes i vattenfri meta- nol som var 5-procentig med avseende på klorväte (20 ml), och om- rördes tvâ till tre timmar vid rumstemperatur. Utspädning av denna lösning med n-butanol (10 ml) och avdunstning av lösningsmedlet gav en ljusgul, sirapsliknande substans (l§4O g). Reduktion av denna förening med väte i närvaro av palladium och klorvätesyra gav 2-deoxi-2-laktosamin-hydroklorid (XXXIX).
Omvandling av azidonitrater till azidohalogenider.
Nitratgruppen, som är starkt elektronegativ, tjänar som en bra avgående grupp, och särskilt då den befinner sig vid det anomera centret i sockerstrukturer ersätts den lätt med nukleofiler. Av speciellt intresse är framställning med utgångspunkt från de nämnda 2-azido-2-deoxi-glykosylnitraterna av 2-azido-2-deoxi-glykosylhalo- genider, eftersom dessa sistnämnda substanser kan användas för fram- ställning av 2-azido-2-deoxi-glykosider vid de betingelser för glykosidation som är allmänt kända inom kolhydratkemin.
Utbytesreaktionen, som är åskådliggjord i exemplen VIII-XIII, innefattar behandling av de nya 2-azido-2-deoxi-glykosylnitraterna med ett halogenidsalt för åstadkommande av ett utbyte av nitrat- _ gruppen genom substitution medelst halogeniden. Denna reaktion är välkänd för fackmän på omrâdet och leder tack vare det nya utgångs- materialet till bildning av de nya 2-azido-2-deoxi-glykosylhalo- geniderna. 1 ~ Pâ liknande sätt som nitraterna är a-glykosylhalogeniderna mer stabila än deras motsvarande B-anomerer. Detta framgår av exemplen XVII-XXI, vari a-anomeren är den dominerande produkten.
B-glykosylhalogeniderna anomeriserar till den mer stabila dæformen i närvaro av en hög koncentration av halogenidjonen. Anomeriserings- hastigheten för halogeniderna minskar i följande ordning: jodid > bromid > klorid Såsom är visat i exempel XXII kan B-anomeren framställas i högt ut- byte vid betingelser under kinetisk kontroll. 2-azido-2-deoxi-glyko- sylhalogeniderna kan användas för framställning av 2-amino-2-deoxi- -glykosider. a-glykosiderna, som är viktiga byggnadsstenar i biolo- giska system, kan erhållas i gott utbyte via B-halogeniderna.
De företrädesvis använda halogenidsalterna för halogenerings- reaktionen är tetraalkylammoniumhalogeniderna och alkalimetallhaloge- niderna, men processen är inte begränsad till dessa. 23 \ 463 515 Det företrädesvis använda lösningsmedlet är acetonitril, men även andra aprotiska, inerta lösningsmedel, såsom aceton, dimetyl- formamid och etylacetat, är lämpliga.
Kbrt sagt anges ett förfarande för framställning av en 2-azid< -2-deoxi-glykosylhalogenid, vid vilket ett acylerat 2-azido-2-deoxi- -glykosylnitrat bringas att reagera med ett halogenidsalt i ett lämp- ligt lösningsmedel.
I ett lämpligt exempel på förfarandet enligt ovan utgörs glykosyl-nitratet av 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2fdeoxi-2-galakto- pyranosylnitrat eller 5,6-di-Q-acetyl-4-Q¿(2,3,4,6-tetra-Q-acetyl- -ß-Q-galaktopyranosyl)-2-azido-2-deoxi-Q-glukopyranosylnitratl Kloridsaltet kan framställas genom att en acylerad 2-azido-2- -deoxi-glykosyl-halogenid, företrädesvis jodiden, bringas att reagera med ett kloridsalt, såsom en alkalimetallklorid eller en tetraalkyl- ammoniumklorid i ett molärt ekvivalent förhållande, i ett lämpligt lösningsmedel under bildning av den acylerade 2-azido-2-deoxi-glykosyl kloriden.
Jodidsaltet kan framställas genom att glykosylnitratet bringas att reagera med ett överskott av litiumjodid, företrädesvis i aceto- nitril. ' Närmare bestämt bringas en anomer blandning av 5,4,6-tri-Q- -acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranosyl-nitrat, II och III, att reagera med tetraetylammoniumklorid i acetonitril under bildning av en anomer blandning av 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galakto- pyranosyl-klorid. I Enligt en företrädesvis använd utföringsform framställs 6- -kloriden i högt utbyte genom att en anomer blandning av 5,4,6-tri-Q- -acetvl-2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranosyl-nitrat, II och III, bringas att reagera med vattenfri litiumjodid i acetonitril under bildning av BQÄ,6-tri-Q¿acety1-2aazido-2-deoxi-a~2-galaktopyranosyljodid (XXIV) som huvudsaklig produkt. Produkten behandlas omedelbart med en molärt ekvivalent mängd tetraetylammoniumklorid i acetonitril.
Blandningen kyls. Extraktion ger 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi- -6-Q-galaktopyranosyl-klorid (XXIII) i ett utbyte av ca 60 %. _ 2-azido-2-deoxi-glykosylhalogeniderna är användbara för fram- ställning av 2-azido-2-deoxi-glykosider vid betingelser för glykosida- tion som är allmänt kända inom kolhydratkemin som Koenings-Knorr-be- tingelser. Dessa betingelser kommer att diskuteras nedan. [Åeš 515 24 I Exempel XVII Framställning av 5,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-D-galakto- pyranosyl-bromid (XX). _ 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl- -nitrat (II) (O,5O g, 1,34 mmol) löstes vid rumstemperatur i vatten- fri acetonitril (4 ml) som innehöll litiumbromid (8,8O g, 9,38 mmol).
Efter 40 minuter utspäddes lösningen med diklcrmetan (25 ml) och tvättades med iskallt vatten (25 ml), torkades över vattenfritt natriumsulfat och indunstades till en klar, sirapsliknande substans (O,4O g). NMR-spektret för denna sirapsliknande substans hade en dipol, J = 4 Hz, vid 6,51 ppm som tillskrevs den anomera protonen i 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl-bromid (XX).
Den här föreningen kunde inte kristalliseras. ' Exempel XVIII Framställning av 5,4,6-tri-0-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-D;galaktopyrano- gyl-kloria (xxn) . _ _: En ca 1:2-blandning av a- och B-anomererna av 3,4,6-tri-Q- -acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranosyl-nitrat (O,377 g, 1,01 mmol) löstes i acetonitril (6 ml) som innehöll tetraetylammoniumklorid (O,924 g, 5,05 mmol), och lösningen fick stå i rumstemperatur i 48 timmar. Reaktionsblandningen utspäddes med diklormetan (25 ml), tvättades med vatten (25 ml) och torkades. Avdunstning av lösnings- medlet i vakuum gav en sirapsliknande substans (O,325 g) som visade dipoler på avstånden 9,0 och 5,5 Hz vid,¶ 5,15 resp. 6,20 ppm i NMR- -spektret mätt i CDCl . Dessa signaler tillskrevs B- (XXIII)- resp. a-anomererna (XXII) för 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galakto- pyranosyl-klorid. Att döma av signalernas relativa intensiteter ut- gjordes produkten av en nära lO:l-blandning av a- och B-anomererna (XXII resp. XXIII).
Exempel XIX' s _ Framställning av 3,6-di-0-acetyl-4-O-(2,5,4,6-tetra-Q-acetyl-É;Q¿ :galakt opyranos yl ) -2 -az id-o -2 -deoxi -E-D-glukopyranos yl -klorid (XÉV) .
En blandning av a- och B-anomërerna av 3,6-di-Q-acetyl-4-Q- acetyl-ß-2-galaktopyranosyl)-2-azido-2-deoxi-2-glukopyranosyl-nitrat (XIV och XV), (1,0 g, 15 mmol) behandlades med en lösning av aceto- nitril (20 ml), som innehöll tetraetylammoniumklorid (l,5O g, 7,8 mmo1),, en timme vid rumstemperatur, Därefter späddes lösningen ut med diklor-' metan (50 ml) och tvättades med vatten (2 x 50 ml). Det organiska skiktet torkades över vattenfritt natriumsulfat, filtrerades och in- 25 \ 463 515 dunstades till en sirapsliknande substans som snart stelnade. Om- kristallisering av denna fasta substans ur etylacetat-etyleter gav ren 5,6-di-Q-acetyl-4-Q-(2,5,4,6-tetra-Q¿aèetyl-B-Q-galaktopyranosyl) -2-azido-2-deoxi-a-2-glukopyranosyl-klorid (XXV) 1.66 % utbyte. Smält- punkt 1670-16800; ¿§fš5 + 59,3° (3 l, kloroform).
Detpartiella NMR-spektret för föreningen XXV i CDCI3 var: ppm 6,08 (d, 1, Jlß 3,9 Hz, H-i), 3,74 (q, 1, Jzå 10 Hz, H-z).
Exempel XX ' ' Framställning av 3,6-di-0-acetyl-4-0-(2,5,4,6-tetra-0-acetyl-6:2: ¿galaktopyranosyl)-2-azido-2-deoxi-E-D-glukopyranosyl-bromid_§XÉVI).
Behandling av en blandning avâa- och B-anomererna av 5,6-di-Q- -aoetyl-4-Q-(2,3,4,6-tetra-Q-acetyl-B-2-galaktopyranosyl)-2-azido-2- -deoxi-Q-glukopyranosyl-nitrat (XIV och XV), (1,0 g, 1,5 mmol) med en lösning av acetonitril (2 ml), som innehöll litiumbromid (O,l}0 g, 1,5 mmol), vid rumstemperatur i två till tre timmar och efterföljande bearbetning av produktblandningen enligt det i exempel XII beskrivna förfarandet gav ett vitt skum (0,850 g) vid indunstning. Kristallisa- tion av detta material ur etylacetat-etyleter gav ren 3,6-di-Q-acetyl- -4-Q-acetyl-4-Qf(2,5,4,6-tetra-Q-acetyl-B-2-galaktopyranosyl)-2-azido- -2-deoxi-d-2-glukopyranosyl-bromid (XXVI) med smältpunkten 1560-l57°C, lš7š5 + 87°. (g 0,93, Kloroform) 1 41 få utbyte.
Det partiella NMR-spektret för föreningen (XXVI) i CDCI3 var: ppm 6,36 (d, l, JLQ 3,9, H-1), 3,65 (q, l, Jgå 10,2, H-2)- Exempel XXI ' ' Syntes av 3,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-D-galaktopyranosyl- -joaia QcxIvl 1 aoetšn. _: 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl-nitrat (II) (32,5 g, 0,087 mmol) behandlades med en lösning av vattenfri natriumjodid (64,29 g, 0,45 mol) löst i aceton (259 ml) vid rums- temperatur i tjugo minuter. Därefter behandlades reaktionslösningen enligt det i exempel XIX beskrivna förfarandet och gav en sirapslik- nande substans (37,6 g). Undersökning av denna sirapsliknande substans genom NMR visade att den i huvudsak bestod av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-aëg-galaktopyranosyl-jodid (XXIV).
Exemgel XXII ' ' Framställning av 3,4,6-tri-0-acetyl-2-azido-2-deoxi;ß-D-galakto- oyronosyi-xioria (xxIII). _ f: Ehuru 3,4}6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosy1- -bromiderna och -kloriderna med fördel kan framställas för senare bruk, visade sig motsvarande a-jodid synnerligen reaktiv och inte möjligíatt 4-65 515 26 __» rena. Dess höga reaktivitet visade sig emellertid vara användbar för framställning av B-kloriden (XXIII) vid betingelser med kinetisk kontroll. a-jodiden kunde således bringas att reagera med kloridjon under bildning av B-kloriden (XXIII) med en hastighet som är mycket större än anomeriseringen av ß-kloriden till a-kloriden XXII. Fram- ställning av den rena B-kloriden åskådliggörs i följande exempel.
Blandningen av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a- och' -B-2-galaktopyranosyl-nitrater (II och III) (0,78l g, 2,09 mmol), framställda såsom beskrivits i exempel I eller exempel II, sattes till en suspension av vattenfri litiumjodid (l,86 g, 14 mmol) i vattenfri acetonitril (3 ml). Blandningen omrördes i mörker vid rumstemperatur i 15 - 17 minuter och hälldes sedan i en iskall, 1-procentig vattenlösning av natriumtiosulfat. Ett extrakt med di- klormetan (10 ml) torkades över natriumsulfat, filtrerades och in- dunstades till ett vitt skum som missfärgades då det fick stå. Före- ningens NMR-spektrum i CDCl visade inte något kvarvarande utgångs- material och innehöll en dipol med J = 4,0 Hz vid 6,95 ppm som till- skrevs den anomera protonen i 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a- -2-galaktopyranosyl-jodid (XXIV). Denna a-2-jodid (XXIV) (2,09 mmol) behandlades omedelbart med en molär ekvivalent av antingen tetraetyl- ammonium-klorid (O,544 g, 2,09 mmol), löst i vattenfri acetonitril (2 ml), eller litiumklorid (0,08l g, 2,0 mmol) vid rumstemperatur.
Efter 1,5 minuter hälldes lösningen i iskallt vatten (10 ml) och extraherades med kall diklormetan (lO ml). Den organiska lösningen torkades och indunstades till en ljusgul sirapsliknande substans som efter trituration med etyleter gav kristallin 3,4,6-tri-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-B-2-galaktopyranosyl-klorid (XXIII) i 50-60 % utbyte; smältpunkt lO2°-lO4°C, [ë7š5 - 16,5 (5 l, kloroform).
NMR-spektret för föreningen XXIII i CDCl3 visade delvis PPM 5,91 (Q, 1, J3,4 3 HZ, H-4), 5,15 (Ö, 1, Jl,2 9 H2, H-1), 4,86 (q, 1, 5,3 10,5 Hz, H-ñ), 5,88 (q, 1,"H-2)- Omvandling av glykosylhalogenider till glykosider.
Glykosidation vid Kbenings-Khorr-betingelser innefattar be- handling av en glykosylhalogenid med en alkohol, ROH, i närvaro av en promotor. Promotorn utgörs vanligen av ett salt eller en förening som innehåller en tung atom, såsom silver, bly eller kvicksilver, vilken kan koordinera med halogenatomen och på så sätt underlätta upp- brytningen av dess bindning med den anomera kolatomen. Halogenen er- sätts med alkoxigruppen, -OR, under bildning av glykosiden. 27 46: 515 De nya a-glykosylhalogeniderna av 2-azido-2-deoxi-2-galaktos, XX och XXII, framställda på i exemplen XVII och XVIII visat sätt, och av 2-azido-2-deoxi-2-laktos, XXV och XXVI, framställda enligt exemplen XIX och XX, kan användas för framställning av de nya 5,4,6-tri-Q-ace- tyl-2-azido-2-deoxi-ß-2-galaktopyranosiderna (exempel XXIII, XXIV) resp. 2-azido-2-deoxi-B-2-laktosiderna (exempel XXV) vid betingelserna för Koenings-Knorr-reaktionen.
Generellt uttryckt anges ett förfarande som innefattar reak- tion mellan 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-B-Q-galaktopyranosyl- -halogenid, t.ex. klorid (XXllI), och en alkohol i närvaro av en pro- motor under bildning av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-Q-galakto- pyranosider. G _ Ett fullständigt förfarande för framställning av glykosiden innefattar sålunda exempelvis reaktion mellan 3,4,6-tri-Q-acetyl-2- -galaktal, ceriumammoniumnitrat och ett azidsalt i ett lämpligt lös- ningsmedel under omröring, för bildning av },4,6-tri-Q-acetyl-2- -deoxi-2-galaktopyranosyl-nitrater; reaktion mellan 5,4,6-tri-Q- -acetyl-2-azido-2-deoxi-2-galaktopyranosyl-nitrater och ett halogenid- salt, t.ex. ett jodidsalt, i ett lämpligt lösningsmedel för erhållande av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl-halogenid, såsom jodid; eventuellt reaktion, om jodiden används, mellan 5,4,6- -tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl-jodiden och en molärt ekvivalent mängd av kloridsaltet i ett lämpligt lösningsmedel för framställning av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-B-2-galakto- pyranosyl-kloriden; och reaktion mellan 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido- -2-deoxi-B-2-galaktopyranosylhalogenid, t.ex. klorid, och en alkohol i närvaro av en promotor för framställning av 3,4,6-tri-Q-acetyl-2- -azido-2-deoxi-a-Q-galaktopyranosid. I Alkoholen har företrädesvis formeln ROH, vari R = (CH2)nCO2R', n = 5 - 19 och R' är en alkyl- eller arylgrupp eller vari R är en på lämpligt sätt blockerad monosackarid eller en disackarid med struk- turen 28 463 515 vari n = 3 - 19 och R' är en alkyl- eller arylgrupp, exempelvis o8-metoxikarbonyl-oktyl-2-Q¿(2,3,4-tri-Q¿bensyl-a-Lffukopyranosyl)- -4,6-Q;bensyliden-B-2¿ga1aktopyranosid. .
Ett alternativt utgångsmaterial skulle vara en peracylerad 2-azido-2-deoxi-a-Q-laktosylhalogenid, som då den reagerar med en alkohol 1 närvaro av en promotor ger peracylerad 2-azido-2-deoxi- -B-Q-laktosider. _ _ Närmare bestämt bringas 3,4,6-tri-Qgaoetyl-2-azido-2-deoxi- -ß-2-galaktopyranosyl-klorid (XXIII) att reagera med 8-metoxikarbonyl- oktyl-2-Qf(2Qj,4-tri-Qfbensyl-o»š-fukopyranosyl)+4,6-Q¿bensyliden-ß- _ -lg-galaktopyranosid (XLVII) i närvaro av silvertrifluormetansulfonat och silverkarbonat 1 lösningsmedlet diklormetan under bildning av 8-metoxikarbonyloktyl-3-Qf(},4,6-tri-Qgacetyl-2-azido-2-deoki-o+2- -galaktopyranosyI%2-Qf(2,3,Ä-tri-Q;bensyl-a-2-fukopyranosyl)-4,6-gg -bensyliden-B-2-galaktopyranosid (XLVIII). Denna produkt isoleras och behandlas enligt metoder som är välkända för fackmannen för åstad- kommande av följande: deblockering, dvs. omvandling av acetyl-, bensyl- ' och bensylidengrupperna till hydroxylgrupper, reduktion av azido-' gruppen till en amin och aoetylering av aminen. Slutprodukten efter dessa steg är 8-metoxikarbonyloktyl-3-Qf(2-acetamido-2-deoxi-o-Q- galaktopyranosyl)-2-Q-(a-Q-fukopyranosyl)-B-2-galaktopyranosid, den OQn 4653 5'l5 29 slutliga trisackarid som är antigendeterminant för den humana A-blod- gruppen .
Exempel XXIII Framställning av t-butyl-3,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-deoxi-Q¿D¿ ¿galaktopyranosid (XLI). 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosylbromid (XX, 0,90 g, 2,28 mmol), framställd antingen genom reaktion mellan l,3,4,6-tetra-Q-acetyl22-azido-2-deoxi-B-galaktopyranos (XXVII) och vätebromid i metylenklorid eller enligt metoden i exempel XVII, sattes till t-butylalkohol (0,236 ml, 2,40 mmol), löst i metylen- klorid (3 ml) som innehöll silverkarbonat (1,8 g, 6,74 mmol) och 4Å-molekylsiktar. Efter omröring l timme vid rumstemperatur isolera- des produkten på vanligt sätt, varvid en sirapsliknande substans er- hölls. NMR-undersökning av denna sirapsliknande substans visade en dipol vid 4,64 ppm med J1,2 = 9 Hz och en enpol vid 1,31 ppm, som tillskrevs den anomera protonen resp. aglykonen i t-butyl-3,4,6-tri- -Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-B-Q-galaktopyranosid (XLI), erhâllen i 75 % utbyte.
Exempel XXIV Framställning av 8-metoxioktylkarbonyl-3,4,6-tri-O-acetyl-2-acet- amido-2-deoxi-§¿D-galaktgpyranosid (X2).
En lösniäg av 5,4,ó-tri-g-acetyi-z-azido-a-deoxi-e-Q-galaktø- pyranosylbromid (XXI) (1,0 g, 2,54 mmol) löst i diklormetan (2 ml) sattes till en blandning av 8-metoxikarbonyl-oktanol (O,565 g, 2,79 mmol), 4Å-molekylsiktar och silverkarbonat (2,5O g, 8,37 mmol) i diklormetan (5 ml) och omrördes 3 timmar vid rumstemperatur. Därefter filtrerades lösningen och filtratet indunstades, varvid en siraps- liknande substans erhölls (l,5O g). Denna sirapsliknande substans löstes i ättiksyra (10 ml), som innehöll ättiksyraanhydrid (10 ml), och zinkmetall (l,l7 g, 18 mmol) tillsattes under omröring. Efter 20 minuter avlägsnades den fasta substansen genom filtrering och filtra- tet koncentrerades till ca 2 eller 3 ml. Detta utspäddes med diklor- metan (25 ml) och tvättades med en mättad vattenlösning av natrium- vätekarbonat (20 ml) och med vatten (10 ml). Torkning av den orga- niska lösningen och indunstninggav en sirapsliknande substans (1,0 g, 75 % utbyte), som vid undersökning av dess NMR-spektrum i CDCl3 visade sig vara i huvudsak ren 8-metoxioktylkarbonyl-2-acetamido- -3,4,6-tri-Q-acetyl-2-deoxi-B-2-galaktopyranosid (XLII). Ett partiellt 465 51.5 50 NMR- för denna förening i CDCl3 gav: ppm 6,40 (d, 1, JNH, 2 8,2 Hz, NH), 4,70 (d, 1, Jl,2 8,0 Hz, H-1). Denu stora kopplingskonstanten 8,0 Hz för H-1 bekräftade bildningen av B-2-glykosylbindningen.
Exempel XXV . §yntes av_t-butyl-5,6-di-0-acetyl-4-0-(2,5,§,6-tetra-0-acetyl-6:2: -galaktopgranosyl)-2-azid6Ä2-deoxi-ßïä-glukopyranosid:(XLII1). = Behandling av 2-azido-2-deoxblaktosylbromid (XXVI) (1,0 g, 1,46 mmol) (framställd enligt det i exempel XXIII beskrivna förfarandetf två timmar gav efter vanlig bearbetning föreningen XLIII (0,80 g, 80 %).
Deacetylering och reduktion av azidogruppen samt efterföljande N-acetylering av föreningen XLIII enligt den i exempel XI beskrivna metoden gav motsvarande 2-acetamido-2-deoxi-0-Q-galaktopyranosider, såsom är åskådliggjort i formel A. _ I följande exempel används föreningen XXIII för framställning av en enkel glykosid (exempel XXVI), en disackarid (exempel XXVII) och den antigena determinanten (trisackarid) för den humana A-blod- gruppen (exempel XXVIII).
Exempel XXVI e_ §yntes av t-butyl-5,4,6-tri-0-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-D-ga1akto- pvranosid (XLV). _ En lösning av nyframställd 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi- -a-2-galaktopyranosylklorid (XXII, 0,160 g, 0,458 mmol) i diklormetan (1 ml) sattes droppvis till en blandning av silvertrifluormetansulfo- nat (0,0l0 g, 0,059 mmol), silverkarbonat (0,445 g, 1,61 mmol), 4Å- -molekylsiktar (O,150 g) och t-butanol (55/ul, 0,585 mmol) i diklor- metan. Blandningen omrördes 2,5 timmar i mörker och filtrerades sedan.
Det erhållna filtratet indunstades till torrhet, varvid en siraps- liknande substans erhölls (O,l5O g). NMR-spektret för detta material i CDC15 antydde närvaro av ca 60 % Q-t-butyl-glykosid (XLV) genom närvaro av en enpol vid 0,50 ppm. Den anomera protonen skymdes av signaler för H-4 och H-5 nära 5,1 ppm.
Exempel XXVII Framställning av 8-metoxikarbonyloktyl-5:Q¿(2-acetamido-2-deoxi-a-D- galaktopyranosyl)-B-D-galaktopyranosid (XEVII). f En lösning av nyframställd 5,Å,6-tri-Qyacetyl-2-azido-2-deoxi- -B-Q-galaktopyranosyl-klorid XXIII (0,555 g, 0,96 mmol) i diklormetan (1 ml) sattes till en blandning av silvertrifluormetansulfonat (0,022 g, 0,085 mmol), silverkarbonat (1,06 g, 5,85 mmol), 4Å-moleky1- siktar (0,70 g) och 8-metanoxikarbonyloktyl-4,6,0-bensyliden-2-Qf -bensoyl-B-Q-galaktopyranosid (XLV) (0,250 g, 0,461 mmol) i diklor- 51 465 515 metan (4 ml). Efter 4 timmar vid rumstemperatur filtrerades bland- ningen genom diatomacêjord som tvättades med diklormetan (10 ml). Lös- ningen indunstades till en sirapsliknande substans som löstes i en liten mängd bensen:etylacetat (l:l /v/V), kromatograferades på neutral aluminiumoxid (15 g) i en pelare (10 x 2 cm) och eluerades med samma lösningsmedel, varvid en sirapsliknande substans erhölls (0,524 g).
Kristallisering av denna sirapsliknande substans ur etylacetat: pentan gav oren 8-metoxikarbonylokty1-3§Q-(3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido- -2-deoxi-d-2-galaktopyranosyl)-4,6-Q-bensyliden-2-Q-bensoyl-ß-Q-galakt pyranosid (O,524 g) i 79 % utbyte. Omkristallisering gav den rena föreningen med smältpunkten l75°-l76°C, ¿§]š5 + ll9,7° (9 l, kloro- form), IR (film) 212o cnfl (m3).
NMR-spektret för denna sistnämnda förening i CDCl5 innehöll delvis vid 4,62 ppm en dipol med Jlaa = 8,0 Hz, som tillskrevs H-l.
Signalen för H-l' skymdes av signaler för H-5' och H-4'. Att den ny- bildade intersockerglykosidbindningen var a visades genom närvaro av signalen i 150-spektret för föreningen i CDCl5 vid 95.4 ppm som till- skrevs C-l'. Den C-l tillskrivna signalen iakttogs vid 100,7 ppm.
Hydrering och efterföljande Q-acetylering och-avlägsnande av de acetyl- och bensoylblockerande grupperna på det sätt som är beskrivet i exempel XXVII för framställning av föreningen L gav kristallin 8-metoxikarbonyloktyl-5-Q-(2-acetamido-2-deoxi-a-2-galaktopyranosyl)- -B-2-galaktopyranosid (XLVII). Omkristallisering ur metanol-etyleter gav ren XLVIII; smältpunkt 2lÄ°-21600, Åšfšs + 126,30 (5 0,98, vatten) Exempel XXVIII Framställning av 8-metoxikarbonyloktyl-3-O-(2-acetamido-2-deoxi-a-Q; -galaktopyranosyl)-2-0-(d-L-fukopyranosyl)-B-D-galaktopyranosid (L).
I det här exempletšhar alkoholen en dïsackaridstruktur.
Glykosidationsprodukten behandlas för omvandling av acetyl-, bensyl- och bensoylgrupperna till hydroxylgrupper (deblockering) och för reduktion av azidogruppen till amin, som sedan acetyleras. Den metod som används för att genomföra de ovannämnda deblockerings-, reduk- tions- och acetyleringsreaktionerna är välkända för fackmän på om- rådet.
En lösning av nyframställd 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi- -B-Q-galaktopyranosylklorid (XXIII) (0,588 g, 1,6 mmol), löst i di- klormetan (2 ml), sattes till en lösning av silvertrifluormetan- sulfonat (0,055 g, 0,156 mmol), silverkarbonat (l,70 g, 6,18 mmol), 4Å-molekylsiktar 0,12 g) och 8-metoxikarbonyloktyl-2-Q-(2,},Ä-tri- G 465 515 §2 -Q-bensyl-a-å-fukopyranosyl)-4,6-Q-bensyliden-B-2-galaktopyranosid (XLVIII) (0,787 g, 0,9 mmol) 1 diklormetan (5 ml). Efter 4 timmar vid rumstemperatur späddes blandningen med diklormetan (10 ml) och filtre- - rades genom diatomacéjord, och filtratet indunstades sedan till en sirapsliknande substans (l,25 g). Denna sirapsliknande substans kromatograferades på en pelare (44 x 2 cm) av silikagel med 2:1 (v/v) bensenzetylacetat som elueringsmedel, varvid erhölls ren 8-metoxi- karbonyloktyl-5-Q-(5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-2-galakto- pyranosyl)-2-Q-(2,5,4-tri-Q-bensyl-a-E-fukopyranosyl)-4,6-Q-bensyliden- -aàygalazfsopyranosia (XLIX) (o,78o g, 75 æ utbyte), ¿§7§5 + 15,5° (9 1, kloroform), IR (film) 2110 cm-1 (-N5).
' NMR-spektret för föreningen XLIX i CDCl3 hade delvis 5,47 (d, l, Jln 2:: 5,4 HZ, H-lu), 5,§2 (d, 1, Jlf 2/ 5 HZ, H-lI).
Dess lšc-NÉLR-spekcrum i cnclš visade tyaligfide Båda a-glyxosiaiska, anomera intersocker-kolatomernaegšd signaler vid 97,9 ppm och 94,0 ppm för C-1' i fukosylenheten/C-l* i 2-azido-2-deoxi-galaktolys- enheten. Den signal som tillskrivs C-l i galaktosylenheten uppträdde vid 100,5 Ppm.
Föreningen L (0,l0 g, 0,085 mmol) löstes i etylacetat (2 ml), som innehöll ättiksyraanhydrid (0,2 ml), och hydrerades i närvaro av 5 % palladium på träkol (0,06 g) vid ett tryck av 7 kp/cmz och rums- temperatur. Efter 25 timmar filtrerades lösningen och indunstades, varvid ett skum erhölls, Det infraröda spektret för den här före- ningen visade frånvaro av en azidgrupp. Föreningen deblockerades eller deacetylerades med natriummetoxid i vattenfri metanol (5 ml) vid rumstemperatur i 15 timmar. Efter avjonisering och filtrering gav avdunstning av lösningsmedlet ett skum (0,08 g). Hydrering av detta material i etanol (3 ml) i närvaro av 5 % palladium på träkol (0,065 g) vid rumstemperatur och ett tryck av Z kp/cmz i 40 timmar samt efterföljande filtrering och indunstning gav 8-metoxikarbonyl- oktyl-5-Q-(2-acetamido-2-deoxi-a-Q-galaktopyranosyl)-2-Q-(a-š-fuko- pyranosyl)-B-Q-galaktopyranosid (XLIX), (0,046 g, 78 % utbyte) i form av en fast, vit substans. ' ' 9 NER-spektret för föreningen L i D20 överensstämde med den angivna strukturen och visade delvis ppm 5,62 (d, l, Jl,, 2,1 Hz, H'), 5,46 (d, 1, Jl", 2" 5,5 Hz. H-1"), 2,24 (s, 5, NAc). Denna förening är trisackarid-antigendeterminanten för den humana A-blodgruppen. 53 h 465 515 Exempel XXIX Framställning av en immunoabsorbent (LII) som är specifik för anti- -A-antikroppar. _ _ Trisackarid-antigendeterminanten (L) för den humana A-blod- gruppen kan användas för framställning av en artificiell antigen genom att fästas vid en löslig bärarmolekyl, såsom proteiner, röda blodceller, polypeptider och lösliga aminerade polysaokarider med användning av kända metoder. .
Glykosiden L kan även användas för framställning av en immuno- absorbent, som är specifik för anti-A-antikroppar, genom att fästas vid en olöslig bärare, såsom aminerat glas, aminerad polyakrylamid, aminerad polyvinyl, aminerad agaros och andra olösliga aminerade polysackarider. Förfarandet är visat nedan. 8-metoxikarbonyloktyl-5-Q-(2-acetamido-2-deoxi-a-2-galakto- pyranosyl)-1-2-Q-(a-L-fukopyranosyl)-B-Q-galaktopyranosid (L) (0,04Ä g, 0,065 mmol) omrördes med 85 %_hydrazinhydrat (2 ml) vid rumstemperatur i 90 minuter. Undersökning genom tunnskiktskromatogra- fering av reaktionsblandningen på silikagel, framkallad med 7:l:2 (v/v) isopropanol:ammoniumhydroxidzvatten,visade inte något kvar- varande utgångsmaterial. Lösningen späddes med 50 % vattenhaltig etanol (l ml) och indunstades till torrhet, varvid ett vitt skum erhölls (0,044 g). Materialet löstes i vatten (2 ml) och dialysera- des mot fem ombyten av destillerat vatten i en ultrafiltreringscell, som var försedd med ett membran med en molekylviktsavskiljning vid 500, och frystorkades under bildning av motsvarande hydrazid LI i form av en vit fast substans (0,059 g).
NMR-spektret för föreningen L i D20 överensstämde med den angivna strukturen och hade delvis ppm 5,58 (d, l, J'7 l Hz, H-l'), 5,44 (d, 1, al", 2.. 3,5 Hz, H-1"), 2,50 (s, 3, NAC).
Hydraziden LI (0,55 g, 0,05 mmol) löstes i dimetylformamid (0,7 ml) och kyldes till -2500. En lösning av dioxan (0,057 ml), som var 5,5 N med avseende på klorvätesyra, tillsattes först, och där- efter t-butylnitrat (0,007 g, 0,069 mmol), löst i dimetylformamid (0,1 ml). Blandningen omrördes 50 minuter vid -2500, varefter sulfamin- syra (0,0049 g, 0,052 mmol) tillsattes. Efter 15 minuter sattes lös- ningen droppvis till silylaminerade glaspärlor (5,0 g), suspenderade i en buffertlösning (25 ml), som var 0,08 M med avseende pà Na2B¿07 och 0,55 M med avseende på KHCO vid OOC. Suspensionen omrördes långsamt vid 30-500 i 26 timmar, varefter bäraren filtrerades och tvättades med vatten (500 ml). Pärlorna suspenderades sedan i en w -04630515 54 mättad natriumvätekarbonatlösning (50 ml), och en 5-procentig lösning av ättiksyraanhydrid i vatten (50 ml) tillsattes och omrördes 15 minuter. Pärlorna filtrerades sedan, tvättades med vatten (500 ml), suspenderades i fosfatbuffrad saltlösning (pH 7) (25 ml) och utsattes för reducerat tryck 1 l5 minuter. Filtrering och tvättning med vatten (100 ml) gav den hydratiserade immunoabsorbenten LIII (ll,2 g). En fenol-svavelsyra-analys av den totala mängden hexos på denna immuno- absorbent före acetylering angav en bemängning av 6/umol hapten per gram bärare.
Immunoabsorbenten LIII visade sig ha förmåga att selektivt avlägsna anti-A-blodgrupp-antikroppar från humana sera. Behandling av l ml av ett serum, som effektivt agglutinerade humana A-blodoeller, med 200 mg av immunoabsorbenten LII avlägsnade sålunda dessa anti- kroppar, som var ansvariga för agglutineringen, inom 2 minuter. An- vändning av immunoabsorbenten i form av en packad pelare var mer effekt iv . 4 6 5 ._ 1 5 Ok; 3,4,ó-tri-Q-acetyl-lg-galaktal Oka 5,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2- -deoxi-a-D-galaktopyranosyl- I; -nitrat = III'- , 3,Å,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-deo Aç . -B-D-galakïbpyranosyl-nitrat ° . .. .j.- - = 'ícmß ¶'IV 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2- deoxi-a-2-talopyranosyl-nitrat _ ida; DL; /. §g(},4,6-trifiQ¿acetyl-2-azido-2- -deoxi-a-Q-galaktopyranosyl-acet- amid ' T-Ö 36 O gæßaszs Aco 3,4,6-trí-Q-acetyl-2-glukal 3,4,6-tri-Q-àbetyl-2-azido-2- -deoxi-a-Q-glukopyranosyl-nitrat 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2-deoxi- -B-2-glukopyranøsyl-nitrat ¶ 3,4,6-tri-Qgacety1Å2-azido-2-deoxi- -a-2-mannopyranosyL-nitrat 5,4,6-tri-Q¿bensoyl-Qfgalaktal -a-Q-galaktopyranosyl-nitrat 3,4,6-tri-Q-bensoyl-2Äazido-2-deoxi-: 37 465 515 XII 3,4,6-tri-Q-bensoyl-2-azido-2-deoxi-B-Q-galaktopyranosyl- -nitrat “ ok, 0A: . hcp 0 ' l o o M2 _____ OM. í .
OM. . , . q _ _ -qßtnø M {' oNQ¿ xIv 3,6-di-g-acety1-4-o- pyranosy1-)-2-azido- 3,4,6-tetra-o-acety1-s-g;ga1akt0- eoxi-a-2-gluïbpyranosylïnitrat (2, 2-a 465 515 58 XV jåß-di-Q-acetyl-ll-O-Q,},4,6-tetra-Q-acetyi-B-Q-gvaßíakto- - ' pyranøsyl)-2-az1do-2-deoxi-B-Q-glukopyranosyl-ñitrat XVI 3,4-di-Q_-acety].,-1=)-xy1a1 II , ' jß-ai-g-acetyl-z-aziao-z-aeoxi- _ M3 N _ Oz -B-Q-xylopyranosyl-nitrat ' ¶ s , _ » _ " Å . í - - t- - _ ' hp' 0 ~ ¶ [II _ Mp N, - ' ¥ _ 3,4-di-Q-acetyl-Q-azido-Q-deoxi- _ . . ut' 1- “ha Owe,- -fi-Q-xylopyranosyl-nitrater 3,ll-di-Q-acetyl-E-aåido-Q-deoxi- -u-Q-xylopyranosyl-nitrat XXI XXII XXIII XXIV ÅLO Äcb _ OAL oA¿ 39 4-65 515 3,4,6-tri-Q-acety1-2-azido-2- -deoxi-a-Q-galaktopyranosyl- -bromid ' 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2- -deoxi-B-D-galaktopyranosyl- -bromid “ .3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2- f-'-deoxi-a-Q-galaktopyranosyl- “¿¿ -klorid “ tf” 3,4,6-tri-Q-acetyl-2-azido-2- - -deoxi-B-Q-ga1aktopyranosyl- -klorid " I ~ 3,4,ó-tri-Q-acetyl-z-aziaø-e- -deoxi-a-Q-galaktopyranosyl- -jodid ' 40 çæez 515 XXV XXVI I IDR» 3,6-di-Q-acetyl-4-Q-(2,3,4,6-tetra-Q-acetyl-B-Q-galakto- pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-a-Qfglukopyranosyl-Zlorid 'znó-ai-g-acetyl-a-g-(a ,3,11,e-tetra-g-acetyl-ß-g-galaktø- _ pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-a-Q-glukopyranosyl-Bromid 41 463 515 ' 1,14 ,6-tetra-_Q-acety1-2- -azido -2-deoxi-u-Q-galakto- pyranos " í XXVII MO 1 JA , ö-tetra-O-acetyl-Z-azido o AG -â-deoxi-ß-Q-gšlakb opyranos -2 -deoxi -q-Q-gïukopyranos -2-deoxi-a-Q-mannopyranos 1 JJ! , G-tet-ra-O-acetyl-E-azido- l ,3,4 ,ö-tetra-O-aéetyl-Q-azido- ¶ 42 463 515 ALo OP-c.
DN; XXXI l,3,6-tri-Q-acetyl-4-O-(2,3,4,6-tèfira-O-acetyl-B-2-galakto- pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-a-2-glukopyïànos 0A; í XXXII 1,3,6~tri-Q-acetyl-4-Q¿(2,3,4,6-tetra-Q-acetyl-6-Q-galakto- pyranosyl)-2-azido-2-deoxi-5-2-glukopyranos ' - ' XXXIII Inte visad 43 4 6 3 5 'I 5 XXXIV . 2-acetamido-lJßhó-tetra-Q- Å'- 0 -acetyl-E-deoxi-a-Q-galalcto- 0A'- pyranos ' o Ås O Å;NH Oån MO 2-acetamido-l J, 4 ,6-tetra,-_Q- -acetyl -ê-deoxi-B-Q-galakto- MO I 0A; _ pyranos u. E-acetamido -E-deoxi -Q-galakto: Q-galakt øsamin-hydroklorid 44 465 515 " XXXVIII 3,4,ö-trí-O-acetyl-Q-galaktos- arnin _ H,0H 2-azido-2 -deoxi -LQ-galakto- pyranos _ " XLI t -butyl-j ,4 , 6-tr1-Q-acetyl-2 -azido -2-deox1-ß-2-galakt opyranos id xnv f 45 _ 463 515 Å=O ' OA: ¶ 8-metoxiokty1karbonyl-2- Åf-O QQ; “A3 (ga me -acetamido-EAß-tri-Q-acetyl ¶ _ -2-deoxi-ß-2-galaktopyranosid XLII' NH Åc. ,¶ OAL t-butyl-3,6-di-0-acetyl-4-O-(2,3,4,6-tetra-O-acety1-ß-Q- - XLIII ' -galaktqpyranosyl)-2-az1doïä-deoxi-B-2-gluköpyranosid “ i MW :_05 'i xLIv ,¶.tfbutyi-2-acetamiao-2-aeoxi-a-2-laktosyl-glykosia t-butyl-3,4,6-tri-Q-acety1- -2-azido-2-deoxi-a-Q-ga1akto- pyranosid ' ÅQD 46 465 515 ho 081- 0 (f-Hflacoocuå' XLVI 8-metoxikarßonyloktyl-4#6-Q¿bensy1idéfi-2-Q¿bensoyl-B-Q- ' -galaktopyranosid " oußàsçoouß _... _ XLNV_ 8-metoxikarbonyloktyl-3-Q;(5,4,6-tri-Q¿acetyl-2-axido-2- ¶ -deoxi-Q-Q7galaktopyranosyl)-4,6-Q¿bensy1iden-2-Q-bensøy1-_ -ß-2-galafitopyranosid Cøfls 8-metoxikarbonyloktyl-2-Q¿ -(2,3,4-tri-Q¿bensyl-a-L- -fukopyranosyl)-4,6-Q- “ -bensy1iden-B-Q-ga1akto- ' _pyranosid " o (cnàgcoocua Oßn. 47 463 515 Öiçuz) ß coocua ' ggn Üßn oém - .- XLIX 8-metoxikarbony1oktyl-3-Q-(ÉïåëéfiafiíäbïäÄdéókí:d¿§Ûäàlakto- pyranosyl)-2-Q¿(a-Q-fukopyranosyl)-ß-2-galaktopyränosid L I 8-metoxikarbonyloktyl-3-O-(2-aèetamido-ë;àeokiÄ&ÄÉ:šalakto- pyranosyl ) -2 -Q-( a-š-fukošyranosyl ) -ß-Q-galakt opyrfänos id A '9165515 L R LI R LII R LIII R 48 = OCH3 = NH - NH2 bärarmolekyl fast bärare 49 515 ^amusapfinuHæmozafimnfixowuvmnouflnßnmV . n pßnpflca.
|Hhmocænæmovzmfiuwnnhnuflxowunmn -°@fiNß-m-H>p@@ß«ø-flh»-m.à.n 465' ...z .flozo o.4 0.40 _ 0.40 vmnvflcmflzmoswnæmopxßfiæwu ._ @~ |n|u|«xpwu|w-ouHNø| _ _ _ |m|Hhpwom|o|flnp|w.:~n ufluwëßflfipahfl aønvflcëflflnosëßëflflhmo ^~wx>Hw.øßuu>xmv _,;u_ I Hwpxwfiwmn w«n|H»»m°fl|o|fl»»|m.#.n ao7o _ , O 44 . .. .¶ Qwumsmmcflc 1..
Q AHEEÉÉV nzßz + noššmšnozïo + .L «« 0u< Hflnuflzopmod JAO _J h@noflpxamn>onm cofiuxdmhwmsflaohaficouflnq v mf . _ ¶ _ ;:._.. . 50 ^H°=°zHwV Hocßpsnwp moon^nmoV ^u«mocænhQøxæfim|fl#omø|m|omflnm|m cßnwfihvmoßv øflwocæsmmopxwflømhnuduflxowønmuouflußn |~|H>»m0@|o-fi»»|@.=.n|H»»=n|p .Qzßaa _. _ J 0 A Jío . . _h..u . ^ufi:mwofiø: uaamøzhfiwnflxomuflmuoufiußnm cmnmHæumo ^novoEonnv no pßnouflzwnwums pßnopfißg =H>mo=@»»@0 «-u- - Ufl -~w_ IhO5HMHQPISO>HflW lhü>flflm ...OUfiNGIw.ïwn_í.fiw+%fißínfiwíflfiun¶ï%wuäfiwwfi w n _ .M2 _ . w 044 + <|o om av + noomw< + .¿u 1//o u nmøflmoxaflw aflfla nøflflcøwoflmsflwwoaxmw >ß m:fl~w:d>Eo 465 515 ^moxøHw|flKowø|m| uocfiëænm cm >ß ufimm vnßw vpmv | . nu moscnæmo . mun: | | cflëßmouxmfldm D än »Hmm på wonflëdumnfiwpmowmmæmnvwfivwwflmmwnma :K F: + o.. xo . MÅ _ 0 cwnasfiwahou >d mæHo&Uæn.nßw :D _ . 57 U S9 _ ^p@»»«: naæmozhflmaflxomøu _ nmuouflnæum aænøfiæumoøv ^wøx:Hw|flxo@u-m|owfiNm«m øømwfihpmøßv mocdhznopwmfidwumuflxomøuN: |øuflumnmufiæumåwnonchvwvnw.:.M.~ W Qnønwocflëw flfiflu Qmßnm 2 _ voøfinm >d Gofluxßømn u¿0 0J<\ Qmøbmfihoß oE .wmnvflcnfiæwocmuma nopxæflæmannflxnwøxmaocfinøu | -H»»@@@|o-«~»r@.:.n /K i . i 07» nvdd . 0 »S w n än vdhpflfl a020 . u _ . ~ (0 u<Û _ _ . . 04.40 . . 1G.. . hmxoømonfisß Hflfip Qwpwfißflcoufluß >@ wnfifivcwweo ^moxßfiw|fixomu|m|o:fisø|m øææmflæumomv _:- SQ. 463 515 fiflæuwsmwcficmwfl m. vmflflüëmfiv Hfiauflcopøoß ^nmuflswmofiwsafiæmoxäflwnflxdwuumuouflußum mncnmfizumoßv uflnofix øfisofix mflamocwnæmouxßflmw mHæmocmx>mopzwHwm| nnnunfixmmunmuouflnæn znföufifiomuamaoøfiamn |m|Hhvmoæ|o|fln»|m.:.n :m|Hæ»mwm|m|flnu|w.:.n m2 044 JJ + 004 Û 440 Jo 440 Sån _ i _ _ nuficwwoflwnv ^nmumapfløufiæmoxæfiwa«Nomu|m|owfium|m muænmfiaumuav ußhufifi wflnoflx uhflæmocßnæmousßflæm ußnuficuflhmocßnan nssficoëeß nounuflxßwønmxoufluwn. |ouxmHmw|m|d:owflNø| |Hhuman»mv_ |m|flhamoß|o|finu|w.:~n |N|Hævwow|M|fin@|w.:.h m2 _ _ _ 4020 ..
Aovzu aa4 ¶ .Hofmmmovz + + d 2 24/ |fl°sc< avullß|nn|anui||>lil|r \\
Claims (2)
1. Förfarande för framställning av 0-acetyl-, O-bensoyl-2 -azido-2-deoxi-glykosyl-halogenider, k ä n n e t e c k n a t därav, att 0-acetyl-, 0-bensoyl-2-azido-2-deoxi-g1ykosyl- nitrater bringas att reagera med ett alkalimetall- eller tetraalkylammonium-halogenidsalt, varvid halogeniden är vald från gruppen jod, brom och klor, i ett inert aprotiskt lösningmedel.
2. Produkt till användning i glykosyleringsreaktioner vald bland en 3,U,6-tri-0-acetyl-2-azido-2-deoxi-D-galaktopyrano- syl-halogenid, såsom 3,4,6-tri-O-acetyl-2-azido-2-deoxi-a-D- galaktopyranosyl-klorid; 3,U,6-tri-0-acetyl-2-azido-2-deoxi-d. -D-galaktopyranosyl-jodid; 3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxi-4}D- galaktopyranosyl-bromid; 3,ü,6-tri-0-acetyl-2-deoxi-ß-D-ga- laktopyranosyl-klorid; en 3,6-di-0-acetyl-U-0-(2,3,ü,6- tetra-0-acetyl-ß-D-galaktopyranosyl)-2-azido-2-deoxi-d -D-glukopyranosyl-halogenid, såsom 3,6-di-0-acety1-U-0- (2,3,4,6-tetra-O-acetylïß-D-galaktopyranosyl)-2-azido- 2-deoxi-dfD-glukopyranosyl-klorid och 3,6-di-0-aeetyl-U-0- (2,3,4,6-tetra-0-acetylflß-D-galaktopyranosyl)-2-azido-2- deoxi-dfD-glukopyranosyl-bromid.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB15536/77A GB1603609A (en) | 1977-04-14 | 1977-04-14 | O-protected 2-azido-2-deoxy-glycosyl nitrates |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8307205L SE8307205L (sv) | 1983-12-29 |
| SE8307205D0 SE8307205D0 (sv) | 1983-12-29 |
| SE463515B true SE463515B (sv) | 1990-12-03 |
Family
ID=10060864
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE7804220A SE450124B (sv) | 1977-04-14 | 1978-04-13 | Forfarande for framstellning av o-acetyl-(bensoyl)-2-azido-2-deoxi-glykosyl-nitrater och deras anvendning for framstellning av motsvarande glykosylhalogenider resp glykoser och glykosider |
| SE8307206A SE465624B (sv) | 1977-04-14 | 1983-12-29 | Glykosider samt immunoabsorbent och antigen framstaellda daerav |
| SE8307205A SE463515B (sv) | 1977-04-14 | 1983-12-29 | Foerfarande foer framstaellning av 0-skyddade-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenider samt 0-acetyl-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenid-derivat |
Family Applications Before (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE7804220A SE450124B (sv) | 1977-04-14 | 1978-04-13 | Forfarande for framstellning av o-acetyl-(bensoyl)-2-azido-2-deoxi-glykosyl-nitrater och deras anvendning for framstellning av motsvarande glykosylhalogenider resp glykoser och glykosider |
| SE8307206A SE465624B (sv) | 1977-04-14 | 1983-12-29 | Glykosider samt immunoabsorbent och antigen framstaellda daerav |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4195174A (sv) |
| JP (4) | JPS53130617A (sv) |
| CA (1) | CA1105011A (sv) |
| DE (3) | DE2816340C2 (sv) |
| FR (3) | FR2411841A1 (sv) |
| GB (1) | GB1603609A (sv) |
| NL (1) | NL7803918A (sv) |
| SE (3) | SE450124B (sv) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4794176A (en) * | 1981-06-26 | 1988-12-27 | Chembiomed | Synthesis of tumor antigenic determinant |
| CA1203532A (en) * | 1980-07-10 | 1986-04-22 | Chembiomed Ltd. | Synthesis of tumor antigenic determinant |
| US4767845A (en) * | 1980-07-10 | 1988-08-30 | Chembiomed, Ltd. | Synthesis of tumor antigenic determinant |
| DE3106815A1 (de) * | 1981-02-24 | 1982-09-09 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | "chemische verbindungen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als antigene oder immunadsorbentien" |
| WO1983004311A1 (fr) * | 1982-06-03 | 1983-12-08 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Procede de preparation d'antigene de fucose et de l'anticorps permettant de le distinguer, mesure de chaine de sucre associee a des tumeurs utilisant ce procede et kit pour la mesure |
| JPS58211661A (ja) * | 1982-06-03 | 1983-12-09 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | 癌関連糖鎖の測定法及び癌診断用試薬 |
| JPS58211660A (ja) * | 1982-06-03 | 1983-12-09 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | フコ−ス抗原を識別する抗体の製造法 |
| JPS58213722A (ja) * | 1982-06-03 | 1983-12-12 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | フコ−ス抗原の製造法 |
| US4629692A (en) * | 1982-12-06 | 1986-12-16 | Miles Laboratories, Inc. | Immunoassay for nonenzymatically glucosylated proteins and protein fragments an index of glycemia |
| US4570531A (en) * | 1984-02-09 | 1986-02-18 | Allied Corporation | Extensible piston with breakable or displaceable coupler |
| US4568399A (en) * | 1985-03-22 | 1986-02-04 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Propellant compositions |
| US5034516A (en) * | 1987-08-04 | 1991-07-23 | University Of Ottawa | Synthetic antigens of sialic acid and derivatives thereof |
| US5192661A (en) * | 1987-08-04 | 1993-03-09 | University Of Ottawa | Multicomponent kit containing an antibody to a synthetic antigen of sialic acid |
| US5141648A (en) * | 1987-12-02 | 1992-08-25 | Neorx Corporation | Methods for isolating compounds using cleavable linker bound matrices |
| US4935503A (en) * | 1988-05-05 | 1990-06-19 | Biomira, Inc. | Azidochlorination and diazidization of glycals |
| US5104982A (en) * | 1990-03-23 | 1992-04-14 | Yale University | Route to glycals in the allal and gulal series |
| US5352670A (en) * | 1991-06-10 | 1994-10-04 | Alberta Research Council | Methods for the enzymatic synthesis of alpha-sialylated oligosaccharide glycosides |
| US5646123A (en) * | 1991-06-10 | 1997-07-08 | Alberta Research Council | Time dependent administration of oligosaccharide glycosides related to blood group determinants having a type I or type II core structure in reducing inflammation in a sensitized mammal arising form exposure to an antigen |
| WO1993024505A1 (en) * | 1992-05-26 | 1993-12-09 | Alberta Research Council | Reducing inflammation by time dependent administration of oligosaccharides glycosides related to blood group determinants |
| AU667530B2 (en) * | 1992-05-28 | 1996-03-28 | New York Blood Center, Inc., The | Removal of antibodies from blood-derived compositions while retaining coagulation factors |
| DK76193D0 (da) * | 1993-06-25 | 1993-06-25 | Astra Ab | Kulhydratderivater |
| JPH09501940A (ja) * | 1993-08-30 | 1997-02-25 | バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト | ２−アミノアシルアミノ−２−デオキシ糖類のグリコシルアミド類 |
| US5527891A (en) * | 1994-03-09 | 1996-06-18 | Biomira, Inc. | Stereodirected process for synthesis of α-N-acetylgalactosaminides |
| CA2189356A1 (en) * | 1994-05-02 | 1995-11-09 | Ting Chi Wong | Process for preparation of glycosides of tumor-associated carbohydrate antigens |
| ES2235362T3 (es) * | 1997-08-08 | 2005-07-01 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Derivados de tetrahidropirano sustituidos, asi como procedimientos para su preparacion. |
| US10697983B2 (en) | 2015-09-08 | 2020-06-30 | Merck Patent Gmbh | Methods of evaluating quality of media suitable for removing anti-A or anti-B antibodies |
| US20170066839A1 (en) | 2015-09-08 | 2017-03-09 | Merck Patent Gmbh | Novel affinity chromatography media for removal of anti-a and/or anti-b antibodies |
| US10697982B2 (en) | 2015-09-08 | 2020-06-30 | Merck Patent Gmbh | Methods of evaluating quality of a chromatography media which binds anti-A or anti-B antibodies |
| EP3421480A1 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-02 | Sinutron KG | Method for separating chromatographically indistinguishable azidonitrates |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2039046A (en) * | 1934-05-25 | 1936-04-28 | Trojan Powder Co | Nitration of sugars |
| US2094693A (en) * | 1935-06-17 | 1937-10-05 | Trojan Powder Co | Nitration of sugars and their glycosides |
| US2105389A (en) * | 1935-10-12 | 1938-01-11 | Trojan Powder Co | Nitration of organic carbohydrates |
| US3496196A (en) * | 1965-10-02 | 1970-02-17 | Tanabe Pharm Co Ltd | 4,6-diazido-4,6-dideoxy-myo-inositol tetraacylates |
| GB1254724A (en) * | 1968-01-31 | 1971-11-24 | Zaidan Hojin Biseibutsu | New chemical compound useful as starting substance for amino sugars and process for producing it |
| US3935184A (en) * | 1972-02-22 | 1976-01-27 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Synthetic polyoxin type nucleosides |
| US3953422A (en) * | 1973-08-17 | 1976-04-27 | Smithkline Corporation | Deoxyglucose derivatives |
| FR2263747B1 (sv) * | 1974-03-12 | 1977-12-02 | Roussel Uclaf | |
| US4039663A (en) * | 1975-03-19 | 1977-08-02 | Societa' Farmaceutici Italia S.P.A. | Daunomycins, process for their uses and intermediates |
| GB1544908A (en) * | 1975-07-08 | 1979-04-25 | Chembiomed Ltd | Artificial oligosaccharide antigenic determinants |
| HU172937B (hu) * | 1975-12-18 | 1979-01-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | Sposob poluchenija novykh proizvodnykh khondroitin-sernoj kisloty s mestno anestezirujuhhim ehffektom |
-
1977
- 1977-04-14 GB GB15536/77A patent/GB1603609A/en not_active Expired
-
1978
- 1978-04-05 CA CA300,489A patent/CA1105011A/en not_active Expired
- 1978-04-07 US US05/894,366 patent/US4195174A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-04-13 NL NL7803918A patent/NL7803918A/xx not_active Application Discontinuation
- 1978-04-13 SE SE7804220A patent/SE450124B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-04-14 JP JP4410278A patent/JPS53130617A/ja active Pending
- 1978-04-14 DE DE2816340A patent/DE2816340C2/de not_active Expired
- 1978-04-14 DE DE2858732A patent/DE2858732C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1978-04-14 DE DE2857791A patent/DE2857791C2/de not_active Expired
- 1978-04-14 FR FR7811151A patent/FR2411841A1/fr active Granted
-
1979
- 1979-03-16 FR FR7906777A patent/FR2414053A1/fr active Granted
- 1979-03-16 FR FR7906778A patent/FR2414052A1/fr active Granted
- 1979-09-19 US US06/077,014 patent/US4308376A/en not_active Expired - Lifetime
-
1981
- 1981-07-10 JP JP56107176A patent/JPS5746997A/ja active Granted
- 1981-07-10 JP JP56107175A patent/JPS5745175A/ja active Granted
- 1981-07-10 JP JP56107177A patent/JPS5948840B2/ja not_active Expired
-
1983
- 1983-12-29 SE SE8307206A patent/SE465624B/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-12-29 SE SE8307205A patent/SE463515B/sv not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6129359B2 (sv) | 1986-07-05 |
| SE465624B (sv) | 1991-10-07 |
| SE8307206L (sv) | 1983-12-29 |
| JPS6127000B2 (sv) | 1986-06-23 |
| SE8307205L (sv) | 1983-12-29 |
| US4195174A (en) | 1980-03-25 |
| SE7804220L (sv) | 1978-10-15 |
| DE2858732C2 (sv) | 1992-05-14 |
| US4308376A (en) | 1981-12-29 |
| DE2816340C2 (de) | 1983-12-22 |
| NL7803918A (nl) | 1978-10-17 |
| CA1105011A (en) | 1981-07-14 |
| JPS5745175A (en) | 1982-03-13 |
| SE8307205D0 (sv) | 1983-12-29 |
| FR2411841B1 (sv) | 1982-11-19 |
| DE2816340A1 (de) | 1978-10-19 |
| FR2414052A1 (fr) | 1979-08-03 |
| GB1603609A (en) | 1981-11-25 |
| SE8307206D0 (sv) | 1983-12-29 |
| JPS5948840B2 (ja) | 1984-11-29 |
| FR2411841A1 (fr) | 1979-07-13 |
| JPS53130617A (en) | 1978-11-14 |
| DE2857791C2 (sv) | 1988-04-28 |
| JPS5745196A (en) | 1982-03-13 |
| JPS5746997A (en) | 1982-03-17 |
| FR2414053A1 (fr) | 1979-08-03 |
| SE450124B (sv) | 1987-06-09 |
| FR2414052B1 (sv) | 1984-11-23 |
| FR2414053B1 (sv) | 1982-11-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE463515B (sv) | Foerfarande foer framstaellning av 0-skyddade-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenider samt 0-acetyl-2-azido-2-deoxi-glykosyl-halogenid-derivat | |
| US4362720A (en) | Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2-deoxyglycosides from glycals | |
| US4987223A (en) | Derivatives of the uronic acid | |
| WO2015070571A1 (zh) | 一种二糖中间体及其合成方法 | |
| US5380832A (en) | Ganglioside GM3 analogs | |
| Jain et al. | Chemical synthesis of a hexasaccharide comprising the Lewisx determinant linked β-(1→ 6) to a linear trimannosyl core and the precursor pentasaccharide lacking fucose | |
| US5438124A (en) | Glycosylating reagent for the synthesis of linear and other α-L-fucosyl oligosaccharides | |
| CA1111417A (en) | Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2- deoxyglycosides from glycals | |
| CA1111418A (en) | Synthesis of 2-amino-2-deoxyglycoses and 2-amino-2- deoxyglycosides from glycals | |
| Lee et al. | Synthesis of 6′-aminohexyl 2-acetamido-2-deoxy-D-galactoside isomers and a unique isomerization catalyzed by ion exchange resin | |
| Wessel et al. | Selectively Deoxygenated Derivatives of β-Maltosyl-(1→ 4)-Trehalose as Biological Probes | |
| EP0340780A2 (en) | Azidochlorination and diazidization of glycals | |
| Kallin et al. | Synthesis of p-trifluoroacetamidophenylethyl o-(2-acetamido-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl)-(1→ 4)-O-β-D-galactopyanosyl-(1→ 4)-O-β-D-glucopyranoside, containing the trisaccharide portion of the asialo-GM2 glycolipid | |
| JP4346713B2 (ja) | シアル酸含有オリゴ糖の製造方法 | |
| JPH03176497A (ja) | セリン誘導体 | |
| Zhu et al. | A concise synthesis of antigenic factor 4 existing in Candida albicans | |
| Byramova et al. | 1, 6-anhydro-N-acetyl-β-D-glucosamine in oligosaccharide synthesis: II. The synthesis of the spacered Ley tetrasaccharide | |
| MORI et al. | Chemical Modification of Maltose. V. A New Synthesis of 2-Acetamido-2-deoxy-4-O-α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranose (N-Acetylmaltosamine) | |
| US20250206768A1 (en) | Large scale production of n-acetyllactosamine derivatives | |
| Černý et al. | Azido derivatives of 1, 6-anhydro-β-D-hexopyranoses corresponding to 3-deoxy-and 4-deoxy-D-glucosamine | |
| Wiesner et al. | Formation and Anomerization of Glycopyranosyl Fluorides and their Facile Conversion into Glycopyranosyl Azides | |
| Yoshino et al. | Regioselective alkylation of benzyl β-D-lactoside and its derivatives by stannylation | |
| GB1605097A (en) | Glycoside antigens and immunoabsorbents | |
| CZ130093A3 (en) | Polymeric lewis x-saccharides and process for preparing thereof | |
| CN1199977C (zh) | 3,6支化的甘露五糖的简易合成 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NAL | Patent in force |
Ref document number: 8307205-8 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8307205-8 Format of ref document f/p: F |