JPS58211661A - 癌関連糖鎖の測定法及び癌診断用試薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は癌関連糖鎖の測定法及び癌診所用キッ１−１詳
しくは、α−７コビラノシルー（１→３）−１−（１→
４）−又は−（１→６）−がラグ１〜ピラノシル基を特
異的に認識できる抗体を利用しＣ免疫殴応（抗原抗体反
応）にＪ、つ（、癌細胞ニ特異的に発現りるα−）］］
ピラノシルー（１→３）−１，−（１−１／ｌ　）−”
Ｒは−（１＞６）−ガラク１〜ピラノシル基を有りる癌
関連糖鎖を測定りるｈ法、これによつ゛（癌を診！Ｉｉ
？ｌるｈ法並びにこれらｌｊ法に用いる癌診断用キット
に関する。 最近細胞分化のある段階において、哺乳動物細胞表１面
上に特異な馳折原が表現され、かかる馳折原と反応性を
右する抗体としく、全細胞をイムノーグンとして用いた
細胞融合技術により得られるモノクロナール抗体（Ｃｅ
ｌｌ、Ｖｏｌ、１４．７７５−７８３（１９７８）　　
’、　　　Ｐｒｏｃ、、　　　Ｎａｔｌ、、　　　Ａｃ
ａｄ、、　　　Ｌノ　ＳＡ。 Ｖ　ｏｆ、７５．　Ｎ　Ｏ，１１，５５６５−５５６９
（１９７８）及びｊ’４ａｔｌｌｒｅ　。 Ｖｏｌ、２９２，１５６．１５８（１９８１）　）及び
ある患者の面清中に存在する抗体（Ｅｘｐ、　０ｅｌｆ
　Ｒｅｓ、、　１３１．１８５１９５　（１９８１）　
）が提案された。本発明者らは上記各報告に関連しく、
独自に研究を手ねる過程において、特定の糖鎖を有機合
成し、これをハブラン基としく馳折原を作成した所、該
馳折原由来の抗体が消化器癌等の癌細胞特にヒ１〜大腸
癌及びマウス　ｉシ１〜カルシノーン細胞ど１１Ｉ〜〒
選択的に反応し、ｆ＋Ｅ　−、）　（該抗体の利用によ
れば癌細胞の認識、測定等及びこれに１、る癌の診Ｆｌ
ｉ　／Ｊ−行ない得るという新しい知見をｆ！ｉ　／Ｊ
　、本発明はこの知見を基礎としＣ完成されたしのＣあ
る。 即ム“）本発明は（Ｘ〜）」ピラノシル−（１→３）、
−（１→４）−又は−〈１−）６）−万うク１〜ピラノ
シル基を特５Ｔ的に認識（・きる抗体を用い、免疫険路
にＪ、すα−）］］ピラノシルー（１−３）−１−（１
→４）−又は−　（１謝６）−ガラクトピラノシル基を
イ１′する癌関連糖鎖を測定りることを特徴どりる癌Ｉ
！ｌ連糖鎖の測定法及びα−フニ１ビースノシルー　〈
１−・隻３）−１−、（’Ｉ　　）／Ｉ　”）　　−又
１．ｔ　−（１−令６　）−ガラクトピラノシル基を特
異的に認識Ｃきる抗体を３右りる癌診断用１ツ１−　ｋ
−係る。 以下本発明におりるフコース抗原の製造、該抗原からの
抗体の製造並びに該抗体を含む癌診断用キラ１−１−ｆ
の利用による層間）ル糖鎖の測定乃至癌の診断法（、ｌ
−’）さ順次説明りる。 本発明（こ係るフコース抗原の製造においＣは、ハ／ｊ
ンと１）（（χ　〕＝、＋ピラノシル　（ｉ　　）３＞
−、、−（１１）−又は−（１−６）　　−ノＪラクト
ピラノシル基を含イｊ田るＡす、ｆ糖を用いることを必
須どＩる。」記Ａリイ糖の必須構成糖とりる一ノ」ピラ
ノースと刀）９１〜ピラノースとの結合は、α１−）３
、α１−）４叉はα１−）６結合を示

【ノ、特′にα１
→３結合がＱｒましい。また土間Ａリイ糖はイのガラク
トピラノシル基に更に他の糖鎖が結合しもいでもよく、
該他の糖鎖を構成りる糖としくは代表的には例えばグル
」ピラノースを挙げることがＣきる。該ガラクトピラノ
シルとグル１ビークノースとの結合は、α又はβのいず
れでもよい。 また、１−記名構成糖は、０体又は１体のいずれＣあっ
てもよい。 本発明に好適なＡリボ糖の具体例とじＣは、例えば以下
のものを例示できる。 ・　Ｑ　−ａ−１−フーＪピラノシル−（１ν３）０−
β−Ｄ−ガラクトピラノシル〜＜１　１４）−α−１）
−グルー１ピラノース（３−−（Ｘ−Ｌ−フ」ピラノシ
ル−α−プラク１〜−ス０−α−１−７−］］ピラノシ
ルー１→４）−〇−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１
−１４）−α−１）−グルコピラノース（／１′−α−
１−−１）」ピラノシル−α−ラクトース）０−α−１
−７」ピラノシル−（１−→６）−〇−β−１〕−ガラ
クトピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコビラノー
ス（６−−−α−１−−７、Ｊピラノシル−α−ラク（
・−ス）」−記ＡリゴＩＩ！ｉは公知であるかまメこは
公知の各種り法により容易に製造づることができる（Ｃ
ｈｅｍ。 Ｐｂａｒｍ、　Ｂｕｌｌ　、　２９　（４）　Ｈ＋７６
−１０８２　（１９８１）及び第３回ｌｉｔ質シンポジ
ウム講演要旨集第９０〜９１頁、演題４３［人乳オリゴ
糖の合成Ｊ、ｌ１ｒ（和５５８Ｔ８月参照）。 十記オリゴ糖をパノ″ｊ゛ンとし、Ｃれに結合されるギ
Ａ７リアー蛋白としＣは、通常抗原の作成に当り慣用さ
れる高分子の天然もしくは合成の蛋白質を広く使用でき
る。例えば馬面消ｊフルＩミン、生血清アルゾミン〈１
３ＳΔ）、ウリギ自消アルグミン、ヒ１〜面清アルブミ
ン、ヒツジ自消アルブミン、卵白アルブミン等の動物の
フルブミン類、馬面）′＾グロブリン、”９−自消グ［
］プリン、つ１Ｊギ而清グ【１１リン、ヒ［〜自消グＯ
−、ｆリン、ヒツジ面、清グ１１７リン、卵グロブリン
等の動物のグロブリン類、馬プログｉコノリン、牛ヂ【
」グロブリン、つ１ｔギｆ−ＬＪグロゾリン、ヒトチロ
グ［１プリン、ヒツジヂログロプリン等の動物のヂ１］
グ１．’ｊ−ｆリン類、馬へモグｕ−ｆリン、生へ１グ
ロブリン、ウリＹヘモグ１１プリン、ヒトｌ＼［グ［１
／リン、ヒツジへ七グロ１リン等の動物のヘモグロブリ
ン類、動物のへ［シアニン類、回虫より抽出された蛋白
質（７スカーリス抽出物、特開昭５６−１６４１４号参
照）、エデスヂン（ｅｄｅｓｔｉｎ　）　、ポリリジン
、ポリグルタミン酸、リジン−グルタミン酸共重合体、
リジン又はオルニチンを含む共重合体等を挙げることが
できる。 １訂ハブアン（Ａリボ糖）とキレリアー蛋白との反応は
公知の各種方法例えば（△）イソｆ７１シアネー１−カ
ップリング法、（Ｂ）ジアゾカップリング法、（Ｃ）ア
ミド結合法、（Ｄ）ｉ元的１ミノ化ａ＜、（「）グアー
ジンＪＪツノリング法等に従い実ｔｍ　ｒきる〔△ｄｖ
ａｎｃｅｓ　　ｉｎ　　に　ａｒｂｏｔ＋ｙｄｒａｊｅ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　　ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ、Ｖｏｌ、３７．ｐ２２５−２８１（１９８０）　
、　Ｍｅｔｂｏｄｓ　　ｉｎ　　［ｒ＋ｚｙｍｏｌｏｇ
ｙ、Ｖｏｌｌ、にｏＩｌｌｐｌｅｘ　　Ｃａｒｌ＋ｏｂ
ｙｄｒａｔｅｓ、　　［’ａｒｔ　　□、ｐ１５５−１
７５（１９７８）　、％自質核酸醇素　Ｖ　０１．２５
．　Ｎ　ｏ、ｓ。 ｐ７（ＩＬ−７２４（１９８（１）及びＡ　ｒｃ１１ｉ
ＶＯ３ｏｒ　　Ｆ３　ｉｏ−ｃｈｅｍｉｓＬｒｙ　ａ面
１３１ｏｐｈｙｓｉｃｓ、Ｖｏｌ、２０５．　Ｎｏ、２
　。 ｐ３３８−３９５　（１９８０）　）。 上記イソＩＡシＩネートカップリング法（Δ法）は、還
元的ノアミノ化反応（例えばハプテンにβ−（ｐ−アミ
ノフェニル）１−プールｊ′ミン等のジアミン誘導体及
びＮａ　ＢＨａ　、Ｎａ　１３Ｈ３ＣＮ等の還元剤を反
応さける）により製造される化合物にブＡフＡスグンを
反応さけたのも、得られるイソチオシア礼体ト休にキＡ
７リアー蛋白をカップリング反応させることにより実施
される。１−配還元的アミノ化反応は、適当な不活性溶
媒例えば０．２″Ｕニルリン酸カルシウム（ＤＩ−１＝
Ｐ３）等の緩衝液、水、１１１１食塩水又はメタノ−ゲ
ル、］タノール等のアルコール申、０・〜４０℃にで３
時間へ・３Ｆ１間ｒ好適に進行づる。；ｌ：ｔこ還元的
？ミノ化反応により行られる化合物とチオーノオスゲン
との反応は、適当な不活性溶媒例えば水、０．１モル炭
酸水素ツートリウム水溶液（ｐＬｌ＝＝８）又は生理食
塩水中　１０℃〜室濡に（３０分〜２時間Ｃ好適【こ進
行する。 更にイゾチＡジノ７ネート体とキＡ７リアー蛋白との反
応は、適当な不活性溶媒例えば水、生理食塩水又は０．
ＩＵル炭酸水索）１〜リウム水溶液（ｐｌｌ−９，５）
　ｉｍｐ　−１（’）℃へ・室温にて１５−２０時間で
好適に進（ｊづる。 ジアゾカップリング法（Ｂ法）は、例えば上記Δ法の還
元的アミン化反応により製造された化合物に亜硝酸ナト
リウム゛と塩酸又は硫酸等の、ジアゾ化剤を反応さし′
Ｃ製造されるジアゾ゛化合物に、二１ヤリアー蛋白をカ
ップリング反応させることにより実施される。上記ジア
ゾ化反応は、適当な不活性溶媒例えば水、生理食塩水又
は塩酸水溶液等の鉱酸水溶液中、−１０〜−２０℃に（
１０〜６０　　　分ぐ好適に進行覆る。またジアゾ化合
物とキャリ）Ｊ−蛋白とのカップリング反応は−１０へ
・２０℃にＩ２〜６時間で好適に進行づる。 ノ′ミド結合法（Ｃ法）は例えばハｌｊンのアルデヒド
纂を酸化銀等の酸化剤て゛酸化して糖カルボン酸とした
の６、該糖カルボン酸とキＡ７すｉｌ−蛋白のアミノ基
とをアミド結合反応さけることにより実施される１、ノ
アミド結合反応は、通常のベブタイドのアミド結合生成
反応により、例えば１−エヂル−３−（ジメチＪしアミ
ノ−ｆ　Ｄビル）−カルボジイミド等の脱水剤を用いた
１１２水綜合反応により実施できる。この脱水縮合反応
は、適当４「不活性溶媒例えば１七ル酢酸す１−リウム
緩衝液（Ｉｌｌ−１＝５．５）等の緩衝液中、０℃〜♀
温にて３・・・１２時間で好適に進行りる。 還元的アミン化法（］〕法）は例えばハプテンにキャリ
アー蛋白及びＮａ　Ｂ１１Ａ、Ｎａ　Ｂ）Ｉ、＋　ＣＮ
等の還元剤を反応さけることにＪ、り実施される。 還元的ｐミノ化反応の条イ′１としＣは、前記Ａ法の還
元的アミノ化及応の条件を採用Ｃさる。 」−記Ａ・〜［）法においＣ各試薬の使用Φは、原料に
対しく少’Ｊ　＜とら等七ル且稈度、通常ＩＪ、Ｔまし
くｔよ過剰量とさ−れる。 かくしてオリゴ糖とキャリアー蛋白とが結合した所望の
馳折原（）〕−ス抗原）を製造できる。 反応終了１η得られる馳折原は常法に従い、例えば透析
法、ゲル濾過法、分割比１Ｆｌｔ等により容易に甲離精
製できる。１゜記のごとくして１ηられる馳折原のうら
Ｃは、特にキ１７すｊ７−蛋白１七ルに対してＡリボ糖
が平均２０〜２５モル結合したものが好適（゛ある。 、に記ぐ得られる馳折絵による抗体の作成は、常法に従
い該抗原を哺乳動物に投勺し、生体内に産生される抗体
を採取するｈ法を採用できる。抗体の製造に供される哺
乳動物としでは、特に制限はなく１列えばウリギ、七ル
モツ１−、マウス、ヒツジ、ヤギ、−ウシ、ウマ等を例
示できる。抗°体の産生は例えばト記抗原の所定量を生
理食塩水で適当ＩＳＩ島に希釈し、これば必要に応じて
７０インドの不完全アジコ、パン１〜又はフロイントの
完全アジ−２パン１へ等のアジ１バントを混合し、得ら
れる懸濁液を投りりることにより行なわれる。　ｌ　ｉ
＋＋！投りは皮下。 筋ｉ＋、腹腔内、静脈内、経口等、好ましくは皮下、腹
腔内、静脈内軒路（行なわれる。投与回数、投与ｍ等は
常法に従い適宜に決定できる。例えばウリギに１記懸濁
液を皮内注＠（抗原のωとして０．０５〜５ｍ！Ｊ／’
回）し、以後２週間毎に１〜１０　’を月、好ましくは
１へ・３ケ月間投与し免疫化さＵればよい。抗体の採取
は、１−開墾濁液の最終段！ｊ後抗体が多重産生される
簡明、通常−１−記最終投りの１〜２週間経過後、免疫
化された動物から採面し、これを遠心分離後血清を分ｍ
１ｌｌ採取づることｋより行われる。また上記血清は史
に塩析、吸収法、アーノイニアイクげ７１〜グラフイー
等の通常の精製手段により精製しくもよい。 かクシ（精製された抗体は、α　）：１ピラノシル−（
１→３）−１−（１→４）−又は−（１→６）−万うク
１〜ピラノシル基を特異的に認識′Ｃさる抗体である。 特に本発明におい（ハブテンとしＵ３′−α−１−〜）
」ピラノシル−α−プラク１〜−ス用いた時には、〇−
α−し一ノ」ピラノシル−（１→３）−〇−β−］）−
万うク１〜ピラノシル基を認識でき、る特異性の高い抗
体が、ハブ１ンとしく″４″−α−１−フ：］ピラノシ
ル−α−ラク１−−スを用いた時には、０−α−１−７
］ピラノシル−（１→４）−〇−β−１）−ガラク１〜
ピラノシル基を認識できる特異抗体が、またハブテンと
して５　”　−ａ　−ｌ−ノー、Ｉピラノシル、−α−
ラク［・−スを用いた時には、０−α−１−−フコピラ
ノシル−（１→６）−０β−Ｄ−ガラクトピラノシル基
を認識できる特異抗体が各々製造Ｃきる。 上記で製造された抗体は、消化器癌等の癌細胞例えばヒ
ト大腸癌細胞及びマウス　テラトカルシノーマ幹細胞と
は結合Ｊるが、正常組織例えば大賜粘躾、肝臓、刺青、
膵臓、肺臓、甲状線、胸腺、リンパ節、筋肉、結合組織
、面精等のヒト１Ｆ常組織や小腸、大腸、肝臓、腎臓、
ＩＩＩ翠丸、卵巣等の７ウスｉｔ−常ＩＩＩ！等とは結
合しない特徴をイ４　Ｌ、　’ｉ（いる。 更に本発明省らの研究によれば、消化器癌等の癌腫特に
大腸癌細胞によつＣ１α−７１ピラノシル−（１→３）
　　、（１→４）−又は　（１”６）−力う９１−ピラ
ノシル基を右りる癌関連糖鎖が産生され、かつ癌患者の
体液中にもこれが存右りることが見出された。従ってα
−７」ピラノシル−（１→３）−、−（１→４）−又は
−・（１→６）−月）り１ヘビラノシル基を特異的に認
識できる抗体の利用によれば、癌細胞もしくは癌組織上
の又は体液中の癌関連糖鎖を免疫反応（抗原抗体反応）
にＪ、り測定づることができ、これにＪ、り癌の診断を
することができる。本発明はかかる癌関連糖鎖の測定方
法乃至癌の診断方法及びこれらに利用（る癌診断用キラ
Ｉ−をも提供するものである。 本発明の七記癌１１Ｉｌ連糖鎖の測定及び癌の診断に利
用される抗体としては、前記のごとくして得られる抗体
即らａ−７コヒラノシルー　（１→３）−１−（１→４
）−又は−（１−６）　　がラフ１〜ピラノシル基を特
異的に認識できる抗体をいずれも使用できる。具体的に
はＯ−α−１−７コビラノシル２−（１→３）−０−β
−Ｄ−ガラク１−ピラノシル基を認識（る抗体（以下「
抗体−１１とづる）、０−α−１ノー１ピラノシル−（
Ｌ）／１）−０β−［）−ガラクトピラノシル基を認識
する抗体く以下１抗体−■」とりる）、０−α　１−　
ノー１ピラノシル−（１−’　６　）　−０−β−［）
−ガラク１〜ピラノシル基を１する抗体（以ト［抗体−
ＩＩ　１とする）を挙げることができる。これらの−）
ちひは抗体−Ｆが々ｆましい。まｌＪ癌関連糖鎖とは、
α−７」ピラノシル−（１→３）−１−（１→４）−又
は−（１→６）゛−ガラクトピラノシル基を右づる糖蛋
白及び／又は糖脂質を挙げることが′Ｃきる。 本発明の癌関連糖鎖の測定は、通常の方法に従い、例え
ば具体的には以Ｆの如くして行なわれる。 即ち測定Ｈ料としｒｓ胞及び／又は組＃Ａ片を使用づる
場合は、通常の間接免疫法に従い行われる。 この方法によれば、生理食塩水叉は通常のリン酸塩緩衝
液（ＰＢＳ）等の緩衝液中に浮遊した細胞に、又はガラ
ススライドｌに固定化した組織切１１に、本発明の抗体
を免疫反応さけ、細胞又は組織片を上記緩％ｉ液で充分
に洗浄後、常法通りに標識抗体法により、又は標識プ［
Ｊ″ｊｊイン使用により、細胞又は組織片に結合した本
発明抗体の有無を調べればよい。 標識抗体法においては、本発明の抗体を製造した動物種
の抗原に対づる標識抗体、例えば標識抗つリギ免疫グ［
］プリンＧ抗体、同抗マウス免疫グ［］プリンＧ抗体、
同抗Ｖギ免疫グ１１プリンＧ抗体等を適宜選択して使用
（ることがｅきる。Ｉ記標識１１′Ｌ体及び標識ブ１−
１ディン△の標識剤としては、各種の螢光標識物質又は
酵素標識物質を利用（′さる。代表的螢光物質としくは
、例えば゛ノルＡレツし、イン・イソヂＡシー７ナート
（ｒ　ｌ　Ｔ　Ｃ＞　、テ１〜ラメデル１］−ダミン・
イソ７−　Ａシアツー−Ｉ・（ＩＲ１１’Ｃ）、ビ換【
］−ダミン・イソヂＡジノ７ノーー１−　（ＸＲＩ　Ｔ
’Ｃ）　、Ｄ−ダミン１３・イソチＡシｊ’　Ｊ−−！
−、ジクロｕトリアジンノルＡレツセイン（ＤＴＡＦ）
等を、酵素標識物質としては、例えばバーＡ１シダーぜ
（ＰＯＸ）、マイクロパーＡ　＋シダーゼ、キモトリプ
シノーゲン、プロカルボ１シベ１ヂダーＵ、グリ上１１
アルデヒドー３−リン酸脱水塾酵素、ノアミラーＵ、ホ
スホリラービ、Ｄ−Ｎａｓｅ　、４）−Ｎａｓｅ等をぞ
れぞれ挙げルコトができる。これらで標識化・された抗
体又はプ＋−＋　−フィンＡとしくは、市販のもの又は
常法に従つ（作成したもののいイれを使用しくしよい〔
△ｃｔａ。 ［、’　ｎｄｏｃｒｉ＋＋ｏ１．３　ｕｐｐｌ、、　１
（３８，２０（ｉ　（１９７２）及びｐ　ｒｏｃ、Ｎ　
ａｔ、△ｃａｄ、３ｃｉ、、Ｕ　ＳＡ、　５７，７１３
　（１９６７）参照１１木法においては、前記本発明の
抗体で処理した細胞又は組織片に、前記ど同様の緩衝液
ぐ予め希釈し１．：標識抗体あるいは標識プロティン八
を反応させ、前記と同様にして細胞又は組織ハを充分に
洗浄後、細胞又は組織片上に存在づる標識活性（螢光活
性又は酵素活性）を常法に従い０測定づる。 測定材料としＣ体液を使用する場合もまた常法に従うこ
とがぐきる′、−ここぐ体液としては例えば血液、細胞
組ｍａ、リンパ液、膨水、腹水、イ水、胃液、尿、肝液
、髄液、唾液等又は前記の細胞又は組ｌｉ１片の可溶化
後の遠心１滴等を使用りることができる。上記細胞又は
１１１１ハの可溶化後の運心十消は、通常の方法例えば
ホｔジネート法や可溶化剤を用いる可溶化の後、これを
遠心分離して」ニ消を採取りることにＪ、り冑るｉ−と
がＣさる。また血液を使用りる場合は、通常白酒■は面
切として使用りるのが好ましい。測定に用いられる体液
の量は、０．１〜１０１程度採取１ればよい。 Ｌ記各種体液を測定材料とりる本発明方法は、通常の競
合法によるラジオイムノアラ廿イ法（Ｉ？１へ）又は酵
素免疫測定法（１１△）により行うのが好ましい。これ
ら方法の操作、手順等は通常の方法に従うことがＣきる
。即ち通常の溶媒中、一定早の標準抗原、標識抗原及び
抗体を競合反応させ、次いで抗原抗体結合物（免疫複合
体）及び非結合抗原を分１１１　ｔ、、そのいずれか一
方の標識活性を測定し、既知１１葭の標準抗原に対りる
標準曲線を作成づる。同様に標準抗原の代りにＷＪ度未
知の被検試料（体液）を使用してイの標識活性を測定し
、前記標準曲線より被検試料中の使用した抗体に対りる
免疫感受性物質（癌関連糖鎖）量を定ｍｌることができ
る。 標準抗原どじＣは、使用りる抗体に免疫感受性を有（る
物ｖ１（抗原乃至そのハブテン）を使用りることが（・
きる１、該ハノランとじ−（は、例えば抗体−１を使用
ηる場合には、３−−ａ−Ｌ−−’ノニ」ピラノシル　
α　ラクｉ〜−スを、抗体−Ｉ＋を使用りる場合には、
４′−σ　１−　ノニ１ピラノシル−（Ｘ　　／り１−
−スを、抗体　■を使用りる場合には、６′−α−Ｌ−
７］ピラノシルーａ−ラク１−−スを例示ぐきる。また
抗原どしＣは１記各ハｌアンに対応づる抗原、具体的に
は後記づる抗原の製造例ｅ得られる如き」−記ハブテン
と４ニヤリアー蛋白、例えばＰ　Ｉ　Ｐ−Ｂｓへとの結
合物を例示することがｒきる。 標識抗原としては、標準抗原を例えば１２５　Ｉもしく
は３１−（等の放射性物質又・は前述した各種酵素標識
物質等で標識化したものを使用覆ればＪ、い。 標準抗原に１−記放射性ヨードを導入して標識化覆る場
合は、例えば前２抗原の製造におい（説明しｔｇイソチ
オシアネート体（ハブテンーイソチＡシアネーｉ・結合
物）又はこれとキＶリノ７−蛋白との結合物、具体的に
は後記゛する抗原の製造例で冑られる如き３’　　、／
Ｉ−−−又は６−−　（Ｘ−１−ノー１ピラノシル−σ
　ラフ１−−ス　ｌ−’　Ｉ　１）、又はこれとＢＳ八
との結合物を、ポル（−ノーハンター（１３（ｌｉｔ（
１１１−’　１１旧）ｔｅｒ）試薬を用いて常法通りに
標識化ηることができる（　Ｊ　、　（３ｉｏｌ、Ｃｈ
ｅｌｌｌ、、２５４゜９３４！ｌ−９３５１（１９７９
）参照〕。まｌこり【量ラミン−１を用いる酸化的ヨー
ド化法（Ｎａｔ旧・ｅ、−貝す−、４９５頁（１９６２
）　、１３　ｉｏｃｈｅｍ、　　Ｊ　、　８９，１１４
頁（１９６３）　）によつ（−１Ｊ−ド化されたすＬ１
シン基を前記のイソチオシアイー（・カップリング法に
より前記Ｐ　Ｉ　Ｐ％（−結合さく！たもの、あるいは
１１５Ａｌｉの１０シン残基を同様にヨード化したもの
を使用づることｂできる。また、３１１を導入りる場合
も常法に従い前記標準抗原を例えばＮａ　ｒ３３１Ｌを
用い１．：還元反応に付りことにより又は（０３１１３
ＧＯ＞２０により／７ｐデル化することにより標識化さ
れた標識抗原を得ることができる。前記測定系の溶媒と
しては、免疫反応に悪影響を与えないもの、例えば水、
生理食塩水、０．１七ルトリス塩１％ｔ！ｌ衝液（＋）
　Ｉｔ　＝　７．５　）　、０．　’１モルリン酸塩１
１Ｗｉ液（ｐト１＝７．、／Ｉ）等のｐ　Ｆｔが６〜７
．Ｅ３の＃ｇ衛液が好ましい。上記免疫反応は、常法に
従い４５℃以下、好ましくは４へ一４０℃、１へ一４０
時間程但で行われる。反応によって生成した免疫複合体
と非結合抗原との分Ｍ　４Ｊ、公知の／ｊｖ、によ−）
で例えばｆｌ−ストシン　活ｆ’を炭法の後、あるいは
前記抗体に対づる第２抗体例えばＦ開方法においｒ　’
ｙ　４ｊギ抗体を使用りる場合ＩＪ　％ｙギ抗ウつギ１
すＧ抗・体等を反応さした後、遠心分蛸法によつ（分１
ｌＩＩＩＪればよい。 以下、１゛記測定法の一具体例を挙げ（更に詳述する。 後記抗原の製造例′ｃｖ４られる３′−α−１−一〕」
ピラノシル−α−ラク１〜−スーＰＩＰの５・〜・１０
μＱをポルトンハンター試薬を用い＋２５１で標識しで
（室温、約６０秒）、標識抗原を製造づる。ｍ準抗原と
しＣ３−−−ａ−１−−フ」ビンフシルーα−ラクトー
スを、また抗体として抗体−■を使用づる。０．５％Ｂ
ＳＡ及び０．０２％Ｎａ　ＮｉをａむＯ，ＩＭリンＭ　
塩Ｒ抄ｉ液（＋＋　Ｈ−＝７）０．２ｍｌ、Ｊ記標識抗
用１（Ｌｌ＋ｌ（約１００００Ｃ１１ＩＮ　）　、適当
ｌ１度の抗体−Ｂ）、１ｍｌ及び各種淵麿の標孝抗原０
．１１を４℃、２４時間インキュベー１〜りる。次いで
、０　、１　ｍ　ｌ　ｉＴ’、常ブタ血清及び０　、５
Ｉｌｌ　ｌ　）−キス１−ランー活ｔ’ｌ炭靜濁液を加
え（４”ＣＩ−３０分敢防後逮心ブ）１１　（３ｏｏｏ
ｒｏｍ　、　３０分）りるかあるいは、適当ｍ度の１ア
ギ抗ウサｉ”　Ｉ　ＩＪ　Ｇ抗体０．１ｍｌを加え４℃
、２１１時間インｔ−１べ一１−後同様にし゛′Ｃ遠心
分離しく、免疫複合体及び非結合抗原を分離し、イの放
射活性を測定りる。標準抗原の各濃度に対してその放Ｉ
Ｉ活性を求めるか、あるいは明いた抗体の１１価に相当
りる抗体と標準抗原との結合串（ＢＯ）を１００％とし
たときの抗１４ｔと標識ベブーヂードどの結合１本（Ｆ
３　）の百分率を求め、標ｔν曲線を作成づる。また濃
嗅未知の試料＼ を標卑抗１京の代りに使用し１１１１様にして敢射活性
父は自分率を求め、この（１自から前記標準曲線を利用
しＣ１試ｆｉｌ中の癌関連糖鎖の定Φを行なうことがＣ
゛きる。まｌこｌ−記り法にＪ、−）（、体液中の３−
−α−１、−）１ピラノシル　α−ガラクトピラノシル
塞を有づる癌関連糖鎖の測定が可能Ｃある。 更に１−記におい゛（抗体−■又は抗体　■を使用し、
対応づる抗原系（標識抗原及び標準抗原）を使用しく同
様にしＣ測定りるＣとにｊ、す、体液中の４′−α−し
一フ］ピラノシルーα−ガノクｈピラノシル基又は６′
−α−１−−−ノー１ピラノシル−（Ｘ−ガラクトピラ
ノシル塞を右覆る癌関連糖鎖を測定Ｃきる。 本光明の」開側定法を実施りるのに特に便利な方法は、
血漿や自消のような体液中の癌関連糖鎖吊を決定りるた
めのキス１−を使用Ｊるｈ法′Ｃある。 このようなキットには、癌関連糖鎖と特異的に抗原抗体
反応をりる抗体即ちα−）」ピラノシル−（１→３）−
１−（１→４）−又は−（１→６）−ガラクトピラノシ
ル基を特異的に認識できる抗体を含有Ｕしめることが重
要である。この抗体試薬には、グリレ１」−ルやウシ自
消蛋白のような安定化剤及び／叉は保存剤を添加づるこ
とかぐきる。 好ましくは、この抗体試薬は凍結融解したものであり、
キットには水溶性らしくは水と混和しつる溶媒を含有さ
１！ることがＣきる。史にこの抗体試薬には、再構成さ
れた試薬系を　定のｐ　Ｉｔに保−）ための緩衝液及び
／′又は使用前に試料が悪化づるのを防ぐための保存〜
１及び２′父は安定剤を添加づることがＣきる。緩衝液
はキラ１−試薬の必須成分とは考えられないが、本発明
の測定法を実／１Ｉｌｉづる際に、１）１１を６・〜７
．８とづるちのを用いるのがθｆましい。また再構成剤
は好ましくは水を含ｌυだものぐあるが、水の一部ｙμ
全部を水と混和しつる溶ｔ装置き換えることもＣぎる。 水と混和しうる溶媒は当業者に周知であり、例えばグリ
セリン、フル、Ｉ−ル類、グリコール類、グリ」−ル■
−ラル類等を使用ぐきるが、もらろ／Ｖこれらに限定さ
れない。 か＜Ｌ、Ｕ本発明によれば癌関連糖鎖を有利に測定覆る
ことができる。測定された癌関連糖鎖レベルを健庫人の
当該レベルと比較りることにより、被検者にお（Ｊる初
期から未明の泊化器等の癌腫、特に大腸癌を診断りるこ
とがＣさる。従つ（木り法は特に癌の早期発見に極ダ）
（ｈ用（゛ある。。 以下本発明−を更に詳しく説明Ｊるため馳折１１ｋ（ノ
ーコース抗原）及び抗体の製造例を挙げる。 抗原の製造例１ （１）３＝−α−１７］ピラノシル　α−ラクト−スー
フーｌネチルアミン誘導体の製造３′−α−１−フ：ｌ
ピラノシルーα−ラク１〜−ス０．１ミリモル及びβ−
（ｐ−アミツノ」ニル）エチルアミン３．５ミリしルを
密閉容器に入れ、室温で１５時間撹拌して反応さけた。 純１−タノール０．５１を反応混合液に加え、次い−Ｃ
＊素化ホウ素Ｊトリウｌ＼１２Ｉｌ１ｇを懸濁さけた純
１タノール１１を加え室温で５時間撹拌した。次いＣ水
／１ｍｌを加えて希釈し、水冷下に氷酢酸を滴下しくｌ
］Ｈ５，６にＳＩ！ｉ整した。減圧下に「タノールを留
人後水を加え′Ｃ５１とした反応混合液をけファデック
スＧ１（、）カラム（２，５ｘ１００ｃｍ）に通し、１
Ｍ酢酸−ビリジン緩衝液（Ｄ　Ｈ＝５．０）’Ｃ溶出し
た。溶出液を５１づつ分画して、各両分につきフＪノー
ルＭ１酸反応による中性糖の測定及びＣ，）　ｌ）　２
ｓ　５１１＋１１ぐの吸光度測定を行／、「い、それぞ
れのピークが　致づる画分を染めで、凍結乾燥した。 凍結試料を２１１１Ｍ酌酸−ビリジンＩ衝液（ｐ１１５
．０）に溶解し、ワットジンｃＭ５２カラム（０，５Ｘ
２（）ａｍ）に通じ、同緩衝液で未反応１京ｒｌ　（３
−−ａ−１・−）］］ピラノシルーα−ンク］−ス）を
溶出後、０．ＩＮｉ’ンをニア／水で溶出した。溶出液
を２０滴（約０．６ｍ１）づつ分画し、各両分に−〕さ
上記とｌ１ｉ１様にしく中性糖測定、及び０ｒ）２ｓ　
５ｓｍｒ（７）吸光ａ　１ｔｌｌｌ　定ヲ’ｆｒ　ｌｊ
　イ、ピークカ一致する画分を採取し凍結乾燥した。 かくして３３′″−α−１−ノー】ピラノシル−α−プ
ラク１ヘースーノ１ネチルノ１ミン導体を１！１ｋ。こ
のらのの糖組成は、ガスクロ？トゲラフイー（Ｌ３１ｏ
ｃｌ＋ｅｍ、　Ｂ　ｉｏ面ｙｓ、　Ａ　ｃｌａ、、２２
２，３３９−３４７３及び高速液体りＬＬＩ　ＮＦ　１
−グラノィ−（１）　ｅｖｅ　ｌｏｐｍｅｎｔａ　ＩＢ
　１ｏｌｏｕ、　９０．４４１−４４４　　（１９８２
）　）により確認できＩ、：。 （２）３′−α−１−フ二１ピラノシルーα−ラクｉ〜
−スー、ｐ−イソチＡシ１ネー１−−フ１ネヂルアミン
Ｘ　３９休（３″　α　１　　ノーピラノシル−α−プ
ラク１−−スーＰＩ　Ｉ）　）の製造 上記（１）で得た３′−α−１−−一フ］ピラノシルー
α−ラク１−−スーフエネチルアミン誘尋体の２５μし
ルを、０．１Ｍ炭酸水素ナト１戸ンム水溶液（ｐ　１Ｉ
＝８．０）　２ｍｌに溶解しＣ、チオホスゲン６５μ七
ルを含むクロロホルム２．５１上に重層し、１時間激し
ぐ撹拌した。反応混合物を遠沈管に移し、りＬ：Ｊ　Ｄ
ホルム２１で２回抽出し、過剰のヂＡホスゲンを除去し
、水層を集め、窒素ガスヲ通しＵ残存づるクロロホルム
を除去した。 か＜　Ｌ　ｔ　３　′−α−１−フ］℃ラノシルーα−
ラクトース−１）−・イソチＡシアネートーフ丁ネチー
ルアミン誘導体を水性液とし１収骨した。 （３）３＝−α−Ｌ−フコピラノシルーα　ラフ１−−
スーｐ−イソチＡシアネー１−−フ］二、ンプルアミン
誘導体とｔ１血清アルブミンとのカップリング反応によ
る馳折原（３′−α−１−フニＪピラノシルーα−ラク
トース−１）Ｉ＋〕−Ｏ３へ）の製３も 上記（２）Ｃ得た水性液を、牛自消アルブミン（１３Ｓ
Δ）０．２μモルを含む０．５Ｍ塩化ノトリウムー〇、
１Ｍ炭酸水素す１−リｒ“ツム水溶液（１１１Ｉ＝９．
５）に加え、室温で１８＋１：’を間撹拌しＣ反応させ
た。反応混合液をダルベラ：】−処理の１）ＩＩｓ　（
−）　　（生理食塩水−リン酸塩緩衝液）２１に対しく
透析して、未反応の３−−−　ｔｘ−１−−７＝］ピラ
ノシル−α−プラク１〜−スーｐ−イソブＡシＩネＩ〜
−−ノー［ネヂルアミン誘導体を除去した。 透析液を′１２時間旬に３回交換後、透析された液につ
き、［」−り一法及びフェノール橘酸反応を行４丁い、
それぞれの蛋白ｍ及び中性糖の定畢を行なった。その結
果得られｌζ糖抗原は、生面漬フルブミン（１３ＳＡ）
１モルに対して３−−ｒｘ−１−フ」ピラノシル糖鎖が
約２０モル結合し−Ｃいた。 か＜　Ｌ　’（−１−１的とηる馳折原液を百だ。これ
を凍結保存しＩこ（これを「抗原−■」とりる）。 抗原の製造例２ 前記抗原の製造例１において、３′−α−１ノーＪピラ
ノシル　α−ラクトースに変え′ｃ／Ｉ＝α−１−ノー
１ビー７ノシルー（Ｘ−ラフ１〜−スを用いて同様にし
く目的どりる馳折原液を得ＩＣ，ごねを凍結保存した（
これを［抗原−ＩＩ　Ｊとづる）。 この馳折原は、牛自消アルゾミン（ｒ３　ＳΔ）１モル
に３；１シ（４’　　、ｔｘ−ｌ−）」ピラノシル糖鎖
が約２５モル結合していた。 抗原の製造例３ 前記抗原の製造例１におい（，３−一−α−１−一）」
ピラノシル−α−ラクトースに変えて６′−α−１−−
７１ピラノシル−α−ラク１〜−スを用いて同様にして
目的どする馳折原液を得ＩＣ６これを凍結保存したくこ
れを［抗ｍ　−ｍ−＋どりる）。 この馳折原は、牛自消アルブミン（ＢＳＡ）１１ルに対
し’（６＝−＋？−Ｌ□°−ノニ１ピラノシル糖鎖が約
２３′Ｅル結合しでいた。 抗体の製造例′に 」−シーラント白兎のフッ１−パッド（ｆｏｏｔｐａｄ
ｓ）に、上記抗原の製造例１で得た抗原−１の０、／Ｉ
Ｉ＋！（＋を含む）Ｉ−Ｊインド完全補助液１１を往側
しＩこ。３３週間後同ｍの抗原−［含（１月：１インド
完全補助液を汀則し、この操作を２週間毎に３回繰り返
した。第３同ｆ、Ｊ　（最終）のＦＪ用から１０日後に
、試験動物がら採面し、遠心分離して抗面消を採取しく
目的の抗体を得た。これを［抗体−ＩＪとづる。抗体−
・Ｔは−７０℃に保存される。また１記で得られた抗面
清を凍結乾燥して抗体−１の乾燥品を智Ｉこ。 抗体の製造例２ 前記抗原の製造例２で得た抗助−１１を用い、抗体の製
造例１と同様にしく目的の抗体（抗自消）をｌ：ノた。 これを１抗体−Ｉｔ　Ｊとりる。 抗体の製造例３ 前記抗原の製造ｆｙ４３　’ｔ’得た抗原−■を用い、
抗体の製造例１と同様にして目的の抗体（抗自消）を１
９だ。これを［抗体−■１どりる。 以下、抗体の特異性試験例１つき詳述する。 く抗体の特異性試験　１〉 （１）　各種細胞を遠心分ｌｌｌｌｌ（５０ｏＸｇ）し
、　□リンＦｌ！ｆ　３３　Ｈ！ｉｉ生理食塩水（カル
シウムイオン及びマグネジウムイオン含杓、ｐｔ−１＝
７．２＞の５０倍Ｉｒ２回洗浄りる。得られる細胞を上
記リン酸塩緩衝生理食塩水に１％（Ｖ　、／　Ｖ　）淵
疫となるＪ、うに＠濁さけ、この懸濁液５０μｍｋ、抗
体の製造例１〜３　ｃ′１１　／ｊ抗体（抗体−［・〜
・　■）のそれぞれを予めリン酸塩緩衝生理食塩水（カ
ルシラ１１イＡン及びマグネシウムイオン含イ１）ｒ２
０容積倍に希釈し／、＝　（Ｊの、又は対照として同様
に希釈され１＝　ｉＥ常兎而自消混合し、各混合液を４
℃Ｆ１時間インキュベー１−　する。その後置細胞をリ
ン酸塩緩衝生理食塩水（カルシウムイオン及びマグネジ
ウムイオン含石、ｐト１＝７．２）の１００倍φひ洗浄
し、次にＦ　Ｉ　Ｔ　Ｃが共有した羊抗兎Ｉす０〔マイ
ルスーイエーダ（Ｍｉｌｅｓ−Ｙｅｄａ　）ネ１製〕の
１／１０希釈液を用いて４℃下１時間インキコベート１
６゜引き続き、上記リンＭ塩緩雨生理食塩水（ｐＨ＝７
．２）の１００倍Φで２回洗浄後、各細胞を落剣留光顕
微鏡（Ａリンバスｔγル１３　Ｈ−ＲＦ　ｌ−、−１−
Ｂ　、　７１リンバス光学拐製）Ｃ観察し、富士カラー
フィルムＡＳＡ１００（富十フイルムン１製）て、ｂ （２）　癌又は正常ＩＩＩＩを迅速に凍結し、クリオ；
ｌ’１−（ＡＩｌｃｒｉｃａｎ　　Ｑ　ｐｔｉｃａ１７
１製）により、超薄切片を賀る。これをガラススライド
上にアセミーンて１分間固定しく検体とし、更に、ｒ　
Ｉ　１’Ｃ−羊抗兎］すＧの代りに［−ＩＴＣ−羊抗免
１すＧ−Ｖ　（ａｂ＞　’−２（Ｃａｐｐｅｌ礼製）を
使用して、上記と同様にして試験覆る。 一１記（１）及び（２）におい（、用いた各ｌＩＩ胞又
は組織片と抗体−１〜−■との反応性を調べた結果を各
抗体ｌｌ１ｌｌに下記第１表に承り。第１表にお１）る
各反応性についての評価記号は、それぞれ次のことを承
り。 ト・・・・染色像が認められる。 −・・・・染色像が認められ４Ｉいっ 第　　１　　表 正常細胞 ンウス赤面球　　　　　　　　− マウスリンパ球　　−− ７ウス牌細胞　　　　　　　　　−− マウス胸腺細胞　　−− ヒ１−赤面球 （タイ７Ｌｌ＞　　　−−−− （タイプ１−ｅａ）− ！ウスアラトカルシノーマ 「−９＋　　　　　　　　　　−−−−３Ｓ１−Ｍ　−
＋−＋　十 十−指腸　　　　　− 肝　　臓　　　　　　　　　　−−− 厚」のう　　　　　　−−−− 膵　　賛　　　　　　　　　　　− 肺　　臓　　　　　　　　　　〜 甲状線　　　　　　− 胸　　腺　　　　　　　　　　　　　　　　　　−リン
パ節　　　　　− 筋　　肉　　　　　　　　　　　−− 結合組織　　　　　− 而　　管　　　　　　　　　　　　− 癌　　細　　胞 ヒ１〜大腸アＴノ ノコ　ル　シ　ノ　−　マ　　　　　　　　＋　　　　
　　　　　　ト　　　　　　　　　　奢−（手術片） 尚１′配におい−Ｃ抗体−Ｔ−・　■の代りに対照とし
く使用したｉ［常兎自消の場合は、リヘて染色像は認め
られ４′Ｋか−）　／、＝　。 （３）　上記（２）の試験で染色像が認められｌこヒＩ
〜人腸入眠　、ｊ’ツノノルジノーン（ｆ南Ｊ１）を検
体としく、抗体　■を使用し、第−険路時にｒ）、２Ｍ
３−　　ｃｘ　−ｌ　　　ノー］ビ）ノシルーα　ラフ
１〜−ス、０．２Ｍラク１−−ス、０．２Ｍノー１−ス
又は１０＋１１０／ＲＩＩＢＳ△を存在させ、１−記（
２）と同様にして試験した。その結果、染色像は３−　
α　Ｌ　−ノコピラノシル−α−ラクトースにより減弱
されるが、ラフ１〜−ス、フニ」−ス及びＢ　Ｓ　Ａ　
ｔ’は染色像に変化は認められなかった。 〈抗体の筒周性試験　■〉 Ａ−チラ［］ニイ（Ｑ　ｕｃｈｔｅｒｌｏ＋＋ｙ）二手
拡散分析法により、抗体−■〜・抗体−■の特異性を以
１；の通り調べた。即ち、１％寒天ゲル（０，０１Ｅル
トリス塩酸緩衝液（１１Ｈ＝７．６＞中に２％１〜す１
−ンＸ−１００，０，１５ｔＶｌ−Ｎａ　Ｃ１、−〕］
ニルメチルスルホニルフルＡライド５０μす、、’　ｍ
　Ｉ及び０．０５％Ｎａ　Ｎ３を含む寒天ゲル）をスラ
イドグラス上に積層し、その中央に抗体を同き、周辺に
それぞれ２０μ９の、３′−α−し一フ：１ピラノシル
ーσ−＝ラク１〜−スーＰ　Ｉ　Ｐ−Ｂ　ＳΔ、４−一
α−１−−ノ」ピラノシル−α−プラク１−−スーＰＩ
Ｐ−ＢＳＡ６′−α−＝１−−ノー１ピラノシルーα−
ラフ１〜−スーＰＩＰ−ＢＳＡ、α、−ラク１へ−／、
　−１）ｌ　Ｉ’　　１３５ＡＨ１，ヒＩ：３　ＳＡ　
ヲ’ｆｉｔｉ木？ＦＷ？＆ヲ買さ、拡散試験を行なった
。 結宋含第１図〜・第３図に小り。第１図は抗体−１の拡
散状的を示す図ｅあり、第２図は抗体−■■の拡散状態
を示４図である。各図においＵ（ａ）は３゛　α−１−
ノ」ピラノシル−α−ラクトース−Ｐ　Ｉ　Ｐ　−Ｂ　
ＳＡ、（（））は４′−α−し　−ツー１ピラノシルー
α−ラクトース−１’）　Ｉ　Ｐ　、−Ｂ　ＳＡ、（Ｃ
）は６′−α−１−）　’ｊピラノシルーα−ラク１〜
−ス−ｒ）　Ｉ　１）　−＋３　Ｓ　Ａ、（ｄ　）はα
−ラクト−ス−Ｉ）　Ｉ　Ｐ−１３ＳＡ及び（ｅ）はＢ
ＳＡをそれぞ゛れ示り。各図より次のことが判る。即ち
、抗体−１は、３′−α−１−イに１ピラノシル　α−
ラク１−−スー１）　＋　１．１−Ｂ　Ｓ　Ａとは沈降
線を形成りるが、他の抗原とは沈降線を形成しない。抗
体−■は、４′−α−１−ノコピラノシル−α−・ラフ
１〜−スーＰ　Ｉ　Ｐ−ｒ３　Ｓ　Ａとは沈降ＦＡ４形
成するが、他の抗原とは沈１ｔ’ｌ線を形成しない。抗
体−ｍは、６−−α、−１−ノコ１ピラノシル−α−ラ
クトース抗原とは沈降線を形成しない。尚に記試験にＤ
’Ｓい（、抗体　Ｈは前記抗体の製造例′Ｃ得られたし
の１１当り０．４．ｍ（ＨのＢＳＡを加えて４°０、−
晩加ｉＭ後遠心分前しく１−清を採取し、抗日ｓ△抗体
を除去した後に、上記試験に使用した。

【図面の簡単な説明】

第１図乃〒第９３図は、本発明の抗１本−１−抗体一■
の二手拡散分析法にょる拡ｊ１９状態を示４図である。 （以　１）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ■　（Ｘ−７コピラノシル＝（１→３）−１−（１−→
   ／Ｉ）−又は−（１→６）−万うク１−ピラノシル基を
   特異的に認識できる抗体を用い、免疫反応にＪ、すα−
   ７］ピラノシル−（１→３）−１＝（１→４）−又は−
   、（１→６）−万うクＩ−ピラノシル基を有する癌関連
   糖鎖を測定づることを特徴と号る癌関連糖鎖の測定法。 Ｑ）　α−ノ゛」ピラノシル−（１−）３）−１−（１
   −〉４）−又は−（１→６）−がラグ１〜ピラノシル基
   を特異的に認識できる抗体を含りづる癌診断用キット。