DE2857790C2

DE2857790C2 - Verfahren zur Herstellung von O-geschützten 2-Azido-2-desoxy-glycosylhalogeniden, einige derartige Verbindungen als solche und deren Verwendung

Info

Publication number: DE2857790C2
Application number: DE19782857790
Authority: DE
Inventors: Raymond Urgel Lemieux; Robert Murray Edmonton Alberta Ratcliffe
Original assignee: Chembiomed Ltd
Current assignee: Chembiomed Ltd
Priority date: 1977-04-14
Filing date: 1978-04-14
Publication date: 1983-12-22

Description

2. A)

galactopyranosyl-chlorid,
lid

B) ^
galactopyranosyl-bromid,

C) 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy->D-galactopyranosyl-chlörid,

D) 3,6-Di-O-acetyl-4-O-(2^,4,6-tetra-C)-acetyI-iS^L-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-a-D-glucopyranosyl-chlorid und

E) 3,6-Di-O«cetyl-4-0-(2_>3,4,6-tetra-0-aGetyI-i8-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-ff-D-glucopyranosyl-bromid. -

3. Verwendung der Verbindungen gemäß Anspruch 2 zur Herstellung vot Glycosiden, welche die 2-Acetamido-2-desoxy-alpha-D-galactopyranosylgruppe enthalten.

20

30

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von O-geschützten 2-Azido-2-desoxy-glycosylhalogeniden, wobei Halogen Chlor, Brom oder Jod bedeutet, einige derartige Verbindungen als solche und deren Verwendung, entsprechend den vorstehenden Patentansprüchen.

Es war das ursprüngliche Ziel der Anmelderin, ein praktisches Verfahren für die Synthese von D-Galactosaminhydrochlorid und von D-Lactosaminhydrochlorid und ihren Derivaten zu entwickeln. Sowohl Galactosamin als auch Lactosamin, normalerweise in Form ihrer N-acetylierten Derivate, ftnden sich vielfach in der Natur. Sie kommen in Glycoproteinen, Glycolipiden und Mucopolysacchariden vor. Als solche sind sie wichtige Aufbaueinheiten, die in den antigenen Determinanten der Blutgruppensubstanz gefunden werden.

Die bekannte Hauptquelle für D-Galaclosamin ist die Säurehydrolyse von Chrondroitinsulfat C, das durch Extraktion von Knorpelgewebe, wie Sehnen, Trachea so und Nasensepta erhalten wird. Diese Ausbeuten sind ungewiß und es ist schwierig, ein kristallines Produkt herzustellen. Es gibt chemische Synthesen, bei denen l,6,2,3-Dianhydro-j9-D-taIopyranose mit Ammoniak oder einem Azidion umgesetzt wird. Diese Verfahren umfassen jedoch 6 bis 11 getrennte chemische Umwandlungen, ausgehend von den einfachen Zuckern. Kürzere Verfahren erfordern seltene Zucker als Ausgangsmaterialien.

Die Inversion der (^Konfiguration von Glucosamin ausgehend von dem 4-0-Sulfonat von 2-Acetamido-2-desoxyglucopyranosylderivaten wurde ebenfalls für die Synthese von D-Galactosamin verwendet. Die Umwandlung von Glucosamin in das erforderliche Ausgangsmaterial ist jedoch mühsam.

Die Synthese von Lactosamin ist noch schwieriger, da sie notwendigerweise eine Glycosylierung des Galactosylhalogenids mit einem seltenen Derivat von 2-Acetamido-2-desoxyglucose erfordert. Bei einem bekannten Verfahren sind neun chemische Umwandlungen, ausgehend von 2-Acetamido-2-desoxyglucosamin, vor der Glycosylierungsstufe erforderlich.

Erfindungsgemäß wird ein Zwischenprodukt zur Verfugung gestellt, das eine vorteilhafte Herstellung von solchen Glycosiden mit hoher Ausbeute ermöglicht, die die 2-Acetamido-2-despxy-ff-D-galactopyΓanosyIgruppe enthalten, die beispielsweise in der antigenen Determinante der Menschenblutgruppe A und in dem Forssman-Antigen gefunden wird. Das so beanspruchte nützliche Zwischenprodukt ist 3,4,6-Tri-O-acetyI-2-azido-2-desoxy-^-D-galactopyranosylchlorid 1, hergestellt aus D-Galactaltriacetat in hoher Ausbeute.

Man hat lange angenommen, daß die Verwendung von jff-Glycosylhalogenid a-{\,2,-cis)-Glycosid-Bindungen durch eine Walden-Inversion des «reagierenden Zentrums bei Königs-Knorr-Reaktionsbedingungen ergeben würde, wenn der 2-Substituent so gewählt wird, daß er in der Reaktion an dem anomeren Zentrum nicht teilnimmt Beispielsweise haben Wolfrom, Thompson und Linebeck (J. Org. Chem., 28,860 (1963)) Tri-O-acetyl-2-nitro-jS-D-glucopyranosylchlprid entwickelt, um ff-D-Glucopyranoside zu synthetisieren. Es sind Arbeiten bekannt, bei denen 2-Azido-2-desoxy-j?-D-glycopyranosylchloride verwendet werden, wie das auch bei der erfindungsgemäßen Weiterverarbeitung erfolgt, die zur Bildung von 2-Azido-2-desoxy-a-D-gaiactopyranosiden führt Es muß jedoch bemerkt werden, daß die von Paulsen und Mitarbeitern (Angew. Chem., Int Ed., 14, 558 (1975); Tetrahed. Lett, 1493 (1975) und 2301 (1976); Angew. Chem., Int. Ed., 15,440 (1975)) beschriebenen Verfahren einen beschränkten, sofern überhaupt einen technischen Wert besitzen wegen der extremen Schwierigkeit, die Synthese von o-O-Acetyl^-azido^-O-benzyl^-desoxy-jS-D-galactopyranosylchlorid, zu erreichen.

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren der eingangs genannten Art, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man ein O-acyliertes 2-Azido-2-desoxy-gIycosyInί-trat in einem ap ro tischen, inerten Lösungsmittel mit einem Tetraalkyl-, ammonium- oder einem Alkalihalogenid umsetzt. Die nach dem neuen Verfahren herstellbare Verbindung 3,4,6-Tri-0-acetyl-2-azido-2-desoxy-^J-D-galactopyranosylchlorid (1) kann bei Reaktionen mit Alkohol unter Bildung von 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosiden (A) bei geeigneten Königs-Knorr-Bedingungen für die Kondensation eingesetzt werden.

OAc

OR

AcO

Nach dem vorgeschlagenen Verfahren wird die Verbindung 1 zu einem leicht verfügbaren Zwischenprodukt für Reaktionen, die zu den Produkten des Typs A führen. Somit ist es technisch möglich, die terminate antigene Trisacchariddeterminante für menschliches Blut-Α zu synthetisieren, wie sie in den Strukturen B für die Typ-1- und Typ-2-antigenen Determinanten der Menschenblutgruppe A vorhanden ist. Das Trisaccharid wird in einer Form synthetisiert, die für die Herstellung künstlicher Antigene und Immunoabsorbentien, die mit der menschlichen Blutgruppe A verwandt sind, nützlich ist.

OH

HO

(Typ-1-A-Determinante)

NHAc

HO

(Typ-2-Determinante)

Die Bildung von a-Azido-^-nitratoalkanen durch Umsetzung von Olefinen mit Natriumazid und Cer(IV)-ammoniumnitraten wurde von Trahanovsky und Robbins (J. Am. Chem. Soc, 93,5256 (1971)) beschrieben. Das Ausdehnen der obigen Reaktion auf vinylische Ether oder Strukturen, die so komplex sind wie D-Galactaltriacetat, hat jedoch nicht nahegelegen. Überraschenderweise wurde gefunden, daß die Addition von Azid- und Nitratgruppen an 1,2-ungesättigte Zucker in hoher wirtschaftlicher Ausbeute unter Bildung von 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrat abläuft.

Diese neuen Produkte können aus anomeren Gemischen aus 2-Azido-2-desoxy-glycosyInitraten (DE-OS v> 28 16 340) hergestellt werden und ermöglichen die Herstellung von 2-Amino-2-desoxyglycosiden durch Umsetzung der 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogenide.

Erfindungsgemäß können die 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrate mit einem Halogenidsalz zum Ersatz der Nitratgruppe und unter Bildung der 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogenide behandelt werden. Bei einem bevorzugten Verfahren ergibt die Behandlung mit Jodidionen eines anomeren Gemisches aus Glycosylnitraten thermodynamisch günstigere Anomere, nämlich 2-Azido-2-desoxy-a-D-glycosyljodid. Das ar-Glycosyljodid wird leicht mit einem Äquivalent Chloridion durch Inversion unter Bildung von 2- Azido-2-desoxy-./J-D-glycosylchlorid in hohen ausbeuten substituiert. Dieser Weg zu dem ^-Halogenid ist von Vorteil, da er die Umwandlung von Nitraten in ein Reaktionsprodukt ermöglicht, das hauptsächlich das 2-Azido-2-desoxy-j8-D-galactosylchlorid enthält, das für die Bildung eines 2-Desoxy-ar- D-galactosids, einer integralen Einheit der Determinante der Blutgruppe A, nützlich ist. Das so beanspruchte Reagens ist 3,4,6-Tri-Q-acetyl-2-azido-2-desoxy-jS-D-galactopyranosylchlorid 1.

Die 2-Azido-2-desoxyglycosylhaloßcnide können zur Herstellung von 2-Amido-2-desoxyglycosiden unter Glycosidierungsbedingungen verwendet werden, beispielsweise unter Königs-Knorr-Bedingungen. Diese Reaktionen betreffen die Behandlung von Glycosylhalogenid mit einem Alkohol in Anwesenheit eines Aktivators. Das so erhaltene 2-Azido-2-desoxyglycosid wird nach an sich bekannten Verfahren unter Bildung von 2-Amino-2-desoxy-gtycosiden reduziert. Weiterhin können die Schutzgruppen zur Deblockierung des GIycosids entfernt werden. Insbesondere kann 3,4,6,-Tri-O-acety 1 - 2-azido-2- desoxy -β- D -galactopyranosy lchlorid mit S-Methoxycarbonyloctyl^-O-^^-tri-O-benzyl-tf-L-fucopyranosylH.o-O-benzyliden-^-D-galactopyranosid in Anwesenheit eines Aktivators umgesetzt werden. Das Trisaccharidprodukt wird entblockiert und die Azidogruppe wird zu dem Amin reduziert, das anschließend unter Bildung von S-MethoxycarbonyloctylO-O-(2-acetamido-2-desoxy-a-D-gaIactopyranosyl)-2-O-(ff-L-fucopyranosyl)-jS-D-galactopyranosid acetyliert wird. Dieses letztere Produkt entspricht der antigenen Determinante für die menschliche Blutgruppe A und kann zur Herstellung von Immunoabsorbens verwendet werden, das für die Antikörper A spezifisch ist, durch Haftung bzw. Bindung an einen unlöslichen Träger. Dieses letztere Produkt kann weiterhin zur Inhibierung der Reaktion zwischen den Anti-A-Antikörpern und

menschlichen A-Erythrocyten verwendet werden. Das Produkt kann ebenfalls zur Herstellung künstlicher Antigene verwendet werden, die das Züchten durch Immunisierung von monospeziflschen Anti-A-Antikörpern in Testtieren ermöglichen. Die darauffolgende Isolierung dieser Antikörper unter Verwendung des Immunoabsorbens ergibt dann ein wichtiges und nützliches Reagens für Zeil- und Gewebebestimmungen.

Die Azidonitratisieningsreaktion zur Herstellung der Ausgangsverbindung 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrat wird in der DE-OS 28 16 340 im Einzelnen beschrieben. Im folgenden werden Reaktionsschemata und Formeln der einzelnen Verbindungen aufgeführt.

1. Umwandlung der Azidonitrate in Azidohalogenide

OAc ο ^OAc

3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-

2-desoxy-ar-D-galacto-

pyranosylnltrat

Acetonitril

+ N(C₂Hj)₄Cl

S^ö-Tri-O-acetyl^-azido- Tetraäthylammoniumchlorid

2-desoxy-j8-D-galactopyrans5yl-

nitrat

OAc

AcO

3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-

2-desoxy-ff-D-galacto·-

pyranosylchlorid OAc

AcO

3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxyjff-D-galactopyranosylchlorid

2. Umwandlung von Glycosylhalogeniden in Glycoside OAc ο

AcO

Ag₂CO₃ + CF₃SO₂O⁶Ag⁸ + (CH₃O₃COH

3,4,6-Tri-O-acetyl- Silber- Silbertrifluor-

3-azido-2-desoxy- carbonat methansulfonat

jS-D-galactopyranosylchlorid

OAc

AcO

t-Butanol

AcO^ OC(CH₃),

t-Butyl-3,4,6-tri-0-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosid

OAc ο

AcO-^
SAo-Tri-O-rtcetyl^-azido^-desoxy-a-D-galactopyranosylchlorid

23 57

AcO

OAc ο

AcO
SAö-Tri-O-acetyl^-azido^-desoxy-a-D-galactopyranosylbromid

OAc ο

AcO
3,4,6-Tri-0-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosylchIorid

OAc
AcO

AcO
3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosyljodid

AcO

OAc

5 AcO

OAc ο

Cl

OAc ° AcO-

3,6-Di-0-acetyl-4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-^-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-ar-D-glucopyranosylchlorid

AcO

OAc

6 AcO

OAc ο

Br

OAc ° AcO-

3,6-Di-0-acetyl-4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-j8-D-galactopyTanosyl)-2-azido-2-desoxy-a-D-glucopyranosyIbromi'1

Umwandlung der Azidonitrate in Azidohalogenide ^5:>

Die stark elektronegativ wirkende Nitratgruppe dient als gut austretende Gruppe und insbesondere, wenn sie an dem anomeren Zentrum der Zuckerstrukturen vorhanden ist, wird sie leicht durch Nucleophile ersetzt ω Von besonderem Interesse ist die Herstellung von 2-Azido-desoxylglycosylhalogeniden aus 2-Azido-2-desoxyglycosylnitraten, da die ersteren fur die Herstellung von 2-Azido-2-desoxyglycosiden unter üblichen Bedingungen verwendet werden können.

Diese Substitutionsreaktion erfolgt bei Behandlung der 2-Azido-2-desoxyglycosylnitrate mit einem Halogenidsalz. Diese Reaktion fuhrt zur Bildung von neuen 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogeniden.

Ähnlich wie bei den Nitraten sind die ff-Glycosylhalogenide stabiler als ihre entsprechenden ^-Anomeren. Dies folgt aus den Beispielen 1 bis 4, wo das cr-Anomere das überwiegende Produkt ist Die ^Glycosylhalogenide werden zu der stabileren α-Form in Anwesenheit einer hohen Konzentration an Halogenidionen anomerisiert Die Anomerisierungsrate der Halogenide nimmt in der Reihenfolge ab:

Jodid > Bromid > Chlorid

Wie es im Beispiel 5 erläutert wird, kann dasjS-Anomere in hoher Ausbeute bei Bedingungen, bei denen

eine kinetische Kontrolle stattfindet, gebildet werden. Die 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogenide sind nützlich für die Herstellung von 2-Amino-2-desoxyglycosiden. Die «-Glycoside sind wichtige Baueinheiten in biologischen Systemen, sie können in guter Ausbeute über den Weg der/-Halogenide erhalten werden.

Die für die Halogenierungsreaktion eingesetzten Halogenide sind die Tetraalkylammoniumhalogenide bnd die Alkalimetallhalogenide.

Das bevorzugte Lösungsmittel ist Acetonitril, aber andere aprotische, inerte Lösungsmittel, wie Aceton, Dimethylformamid und Äthylacetat, sind ebenfalls geeignet.

Ein bevorzugtes Beispiel dieses Verfahrens ist eins, bei dem das Glycosylnitrat 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylnitrat oder 3,6-Di-O-acetyl-4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-/-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-D-glucopyranosylnitrat ist.

Das Chloridsalz kann durch Umsetzung eines acylierten 2-Azido-2-desoxy-glycosylhalogenids, bevorzugt des Iodids, mit einem Chloridsalz, beispielsweise einem Alkalimetallchlorid oder einem Tetraalkylammoniumchlorid in einem Moläquivalent, in einem geeigneten Lösungsmittel unter Bildung des acylierten 2-Azido-2-desoxyglycosylchlorids hergestellt werden.

Das iodidsalz kann ebenfalls durch Umsetzung des Glycosylnitrats mit einem Überschuß an Lithiumiodid, vorzugsweise in Acetonitril, hergestellt werden.

Genauer wird ein anomeres Gemisch aus 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylnitrat mit Tetraäthylammoniumchlorid in Acetonitril unter BiI-uung eines anomeren Gemisches aus 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylchlorid umgesetzt.

Nach einer bevorzugten Ausführungsform wird das /-Chlorid in hoher Ausbeute durch Umsetzung eines anomeren Gemisches aus 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-ga!ac!opyranosy!riitrai mit wasserfreiem Lithiumjodid in Acetonitril unter Bildung von 3,4,6-Tri-0-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosyljodid (4) als Hauptprodukt hergestellt Das Produkt wird sofort mit einem molaren Äquivalent von Tetraäthylammoniumchlorid in Acetonitril behandelt. Das Gemisch wird abgekühlt und die Extraktion ergibt 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-jS-D-galactopyranosylchlorid (1) in einer Ausbeute von etwa 60%.

Die 2-Azido-2-desoxyglycosylhalogenide sind nützlich bei der Herstellung von 2-Azido-2-desoxyglycosiden unter Königs-Knorr-Bedingungen für die Glycosidierung.

Die Glycosidierung unter Königs-Knorr-Bedingungen umfaßt die Behandlung der Glycosylhalogenide mit einem Alkohol, ROH, in Anwesenheiteines Aktivators. Der Aktivator ist üblicherweise ein Salz oder Verbindung, die ein schweres Atom, wie Silber, Blei oder Quecksilber enthält, das sich mit dem Halogenatom koordinieren kann, so daß die Spaltung seiner Bindung mit dem anomeren Kohlenstoffatom erleichtert wird. Das Halogen wird durch die Alkoxygnippe -OR unter Bildung des Glycosids ersetzt.

Die neuen <r-Glycosylhalogenide von 2-Azido-2-desoxy-D-galactose 2 und 3, hergestellt wie in den Beispielen 1 und 2 aufgeführt, und von 2-Azido-2-desoxy-D-lactose 5 und 6, wie in den Beispielen 3 und 4 gezeigt, können für die Herstellung von SAö-Tri-O-acetyl^-azido-2-desoxy-jS-D-gaIactopyranosiden und 2-Azido-2-desoxy-/-D-Iactosiden unter den Bedingungen der Königs-Rnorr-Reaktion verwendet werden.

Beispiel 1

3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-ff-D-galactopyranosylbromid (2)

0,50 g (1,34 mMol) 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosylnitrat werden in 4 ml wasserfreiem Acetonitril bei Zimmertemperatur, das 0,80 g (9,38 mMol) Lithiumbromid enthält, gelöst. Nach 40 min wird die Lösung mit 25 ml Dichlormethan verdünnt und mit 25 ml eiskaltem Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 0,40 g klaren Sirup. Das PMR-Spektrum dieses Sirups besitzt ein Doublett bei J = 4 Hz, bei 6,51 ppm, was dem anomeren Proton von 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-e-D-galactopyranosylbromid (2) zuzuordnen ist. Diese Verbindung konnte nicht kristallisiert werden.

Beispiel 2

galactopyranosylchlorid (3)

0,377 g (1,01 mMol) eines 1 :2-Gemisches aus den a- und /-Anomeren von 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylnitrat werden in 6 ml Acetonitril, das 0,924 g (5,05 mMol) Tetraäthylammoniumchlorid enthält, gelöst und die Lösung wird bei Zimmertemperaturwährend 48 h stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird mit 25 ml Dichlormethan verdünnt, mit 25 ml Wasser gewaschen und getrocknet. Das Verdampfen des Lösungsmittels im Vakuum ergibt 0,325 g eines Sirups, der Doubletts mit Abständen von 9,0 und 3,5 Hz bei δ 5,15 und 6,20 ppm in dem in CDCI3 gemessenen PMR-Spektrum zeigt. Diese Signale werden den/- (1) _J5 und a-Anomeren (3) für 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-D-galactopyranosylchlorid zugeordnet. Aus den relativen Intensitäten der Signale kann man schließen, daß das Produkt fast ein 10 : 1-Gemisch der a- und /-Anomeren (3 und 1) ist.

Dieser Sirup wurde in Diäthylether gelöst und mit Hexan versetzt. Es ergab 0,289 g der Verbindung 3. Fp 86,5 bis 88⁰C, [a]'a + 145° (c 1, Chloroform).

Die a- und/-Anomeren können nach üblichen Verfahren getrennt werden.

Beispiel 3

^y^A
j5-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxyff-D-glucopyranosylchlorid (5)

1,0 g (1,5 mMol) eines Gemisches von a- und/-Anomeren von 3,6-Di-O-acetyl-4-O-acetyl-ß-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-D-glucopvranosyinitrat wird mit einer Lösung aus 20 ml Acetonitril, die 1,30 g (7,8 mMol) Tetraäthylammoniumchlorid enthält, bei Umgebungstemperatur während 1 h behandelt. Danach wird die Lösung mit 50 ml Dichlormethan verdünnt und zweimal mit 50 ml Wasser gewaschen. Die organische Schicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, nitriert und eingedampft. Man erhält einen Sirup, der sich schnell verfestigt Die Umkristallisation dieses Feststoffs aus Äthylacetat/Diäthyläther ergibt 3,6-Di-O-acetyl-4-O-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-/-D-galactopyranGsyl)-2-azido-2-desoxy-ff-D-gIucopyranosylchlorid (5), Fp 167 bis 168°C, [a] ⁷S + 593° (c 1, Chloroform), in 66%iger Ausbeute.

Das Partial-PMR-Spektrum der Verbindung 5 in

CDCI₃ ist (ppm) 6,08 (d, 1, J, ₂ 3,9 Hz, H-I), 3,74 (q, 1, J₂₃ 10 Hz, H-2).

Beispiel 4

3,6-Di-O-acetyl"4-O-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-

j8-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-flf-D-gluco-

py.anosylbromid (6)

Die Behandlung von 1,0 g (1,5 mMol) eines Gemisches aus den a- und ji-Anomeren von 3,5-Di-O-acetyl-4-O-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-j8-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-D-glucopyranosylnitrat mit 2 ml einer Lösung aus Acetonitril, die 0,130 g (1,5 mMol) Lithiumbromid enthält, bei Umgebungstemperatur während 2 bis 3 h und die anschließende Aufarbeitung des Produktgemisches nach dem im Beispiel 12 beschriebenen Verfahren ergibt 0,850 g weißen Schaum beim Verdampfen. Die Kristallisation dieses Materials aus Äthylacetat/Didthyiätfier ergibt reines 3,5-Di-O-acetyi-4-O-acetyl-4-O-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-^-D-galactopyranosyl)-2-azido-2-desoxy-flf-D-glucopyranosylbromid (6), Fp 156 bis 157⁰C, [α]ϊ + 87° (c0,93, Chloroform), in 41%iger Ausbeute.

Das Partial-PMR-Spektrum der Verbindung (6) in CDCl₃ ist (ppm) 6,36 (d, 1, J₁₂ 3,9, H-I), 3,65 (q, 1, J_{2 3} 10,2, H-2).

Beispiel 5

3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-jS-D-galactopyranosylchlorid (1)

Obgleich 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-a-D-galactopyranosylbromide und -chloride leicht für die spätere Verwendung hergestellt werden können, hat sich herausgestellt, daß das entsprechende a-Jodid hoch reaktiv ist und nicht leicht gereinigt werden kann. Seine hohe Reaktivität ist jedoch für die Herstellung des yj-Chlorids (1) bei solchen Bedingungen, wo eine kinetische Kontrolle stattfindet, geeignet. Das a-Jodid kann mit Chloridion unter Bildung desjB-Chlorids (1) in einer Rate umgesetzt werden, die wesentlich größer ist als die Anomerisierung desjJ-Chlorids zu dem α-Chlorid 3. Die Herstellung des reinen ^-Chlorids wird in dem folgenden Beispiel erläutert.

0,781 g (2,09 mMol) eines Gemisches aus 3,4,6-Tri-O-acetyl^-azido^-desoxy-ar-undjS-D-galactopyranosylnitraten hergestellt wie im Beispiel 1 oder 1 der DE-OS 28 16 340 beschrieben, werden zu einer Suspension aus 1,86 g (14 mMol) wasserfreiem Lithiumjodid in 3 ml wasserfreiem Acetonitril zugegeben. Das Gemisch wird in der Dunkelheit bei Zimmertemperatur 15 bis 17 min gerührt und dann in einer eiskalten l%igen wäßrigen

υ Lösung aus Natriumthiosulfat gegeben. Ein 1OmI-Dichlormethanextrakt wird über Natriumsulfat getrocknet, nitriert und eingedampft. Man erhält einen wsißen Schaum, der sich beim Stehen verfärbt. Das PMR-Spekirum dieser Verbindung iii CDCl₃ icigi kein fcStii-

-'" ches Ausgangsmaterial und enthält ein Doublet! mit J = 4,0 Hz bei 6,93 ppm, was dem anomeren Proton von SAo-Tri-O-acetyl^-azido^-desoxy-ff-D-galactopyranosyljodid (4) zugeordnet wird. Dieses e-D-Jedid (4) (2,09 mMol) wird unmittelbar mit einem molaren Äqui-

« valent entweder von 0,344 g (2,09 mMol) Tetraäthylammoniumchlorid, gelöst in 2 ml wasserfreiem Acetonitril, oder mit 0,081 g (2,0 mMol) Lithiumchlorid bei Umgebungstemperatur behandelt. Nach 1,5 min wird die Lösung in 10 ml eiskaltes Wasser gegossen und mit

JO 10 ml kaltem Dichlormethan extrahiert. Die organische Lösung wird getrocknet und eingedampft. Man erhält einen hellgelben Sirup, der beim Verreiben mit Diäthyläther kristallines 3,4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-desoxy-^8-D-galactopyranosylchlorid (1) in 50- bis 60%iger Aus-

i> beute, Fp 102 bis 104⁰C, [α]ΐ - 16,5 (c 1, Chloroform).

Das PMR-Spektrum der Verbindung 1 in CDCl₃ ist

teilweise (ppm) 5,91 (q_s 1. J₃₄3 Hz, H-4).5.15 (d. 1. J.,

9 Hz, H-I), 4,86 (q, 1, J_2-310,5 Hz, H-3), 3,88 (q, 1, H-2)!

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zur Herstellung von O-geschützten l-Azido-l-desoxy-glycosylhalogeniden, wobei Halogen Chlor, Brom oder Jod bedeutet, dadurch gekennzeichnet, daß man ein O-acyliertes 2-Azido-2-desoxy-glycosylnitrat in einem aprotischen, inerten Lösungsmittel mit einem Tetraalkylammonium- oder einem Alkalihalogenid umsetzt