DE2843136A1

DE2843136A1 - Acylderivate von 2-eckige klammer auf 3-(2-chloraethyl)-3-nitrosoureido eckige klammer zu -2-desoxy-d-glukopyranose

Info

Publication number: DE2843136A1
Application number: DE19782843136
Authority: DE
Inventors: Shingo Matsumura; Teruya Nakamura; Akira Obayashi; Masakuni Ozaki
Original assignee: Takara Shuzo Co Ltd; Nippon Shinyaku Co Ltd
Current assignee: Takara Shuzo Co Ltd; Nippon Shinyaku Co Ltd
Priority date: 1977-10-03
Filing date: 1978-10-03
Publication date: 1979-04-05
Also published as: GB2005665A; IT1107227B; JPS5455522A; CH637401A5; GB2005665B; US4211866A; DE2843136B2; DE2843136C3; JPS5924997B2; FR2404644A1; FR2404644B1; IT7851315A0

Description

Acylderivate von 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureidoj -2-desoxy-D-glukopyranose

Die Erfindung betrifft Acylderivate von 2-f3-(2-Chloräthyl)· 3-nitrosoureido]-2-desoxy-D-glukopyranose der allgemeinen Formel

CH₂OH

NHCO-N-CH₀CH₀Cl NO

in der R ein Wasserstoffatom oder eine CO(CH₂) CHo-Gruppe ist, wobei η eine ganze Zahl von 8 bis 16 ist, mit der Maßgabe, daß nicht alle Reste R gleichzeitig Wasserstoffatome sind.

Intensive Untersuchungen zur Entwicklung eines Antitumormittels, das die blutzellenbildende Funktion weitgehend nicht beeinträchtigt, was ein wichtiger Faktor für das Ausmaß der Antitumorwirkung ist, haben zur Konzipierung und Entwicklung der vorliegenden Erfindung geführt. Die erfindungsgemäßen Acylderivate von 2-f3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido]-2-desoxy-D-glukopyranose sind neue Verbindungen, die sich nicht nur

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durch eine verminderte Beeinträchtigung der blutzellenbildenden Funktion auszeichnen, sondern auch durch eine beachtlich verminderte akute Toxizität infolge der Acylierung, ein Minimum an Nebenwirkungen auf Nieren, Milz, Leber und andere Organe und hohe Antitumor- und antileukämische Wirksamkeit. Diese Verbindungen stellen somit wertvolle Arzneimittel dar.

Nachfolgend werden die Antitumorwirksamkeit und die akute Toxizität der erfindungsgemäßen Acylderivate im einzelnen erläutert. Pro Maus (SLG-BDF₁, männlich, 18 g i 1 g, 5 Wochen alt) wurden 1 000 000 lymphatische Leukämiezellen von Mäusen (P-388) transplantiert, und nach 24 Stunden wurden in Intervallen von 24 Stunden vorbestimmte Mengen an Acylderivaten von 2~j_3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureidoJ-2-desoxy-D-glukopyranose intraperitoneal in insgesamt 9 Gaben verabreicht.

Die Mäuse wurden unter Beobachtung aufgezogen. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt.

Die behandelten Gruppen zeigten gegenüber der Vergleichsgruppe eine beträchtliche Zunahme ihrer Lebenserwartung. Dies zeigt klar, daß die erfindungsgemäßen Acylderivate eine ausgezeichnete antileukämische Wirksamkeit aufweisen.

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Tabelle 1

Antileukämische Wirksamkeit gegen Leukämie P-388

Verbindung

Dosierung (mg/kg/Dosis)

Mittlere

tiberlebenszeit (Tage)

Anstieg der Lebenserwartung (

2-[3-(2-Chloräthyl)- 3-nitrosoureido]-2- desoxy-D-gluko- pyranose (Chlorozotocin)	1,0 0,5 0,25 0,125	18,8 16,3 14,5 12,3	84,3 59,8 42,2 20,6
Dicaprat	1,0	19,8	94,1
	0,5	18,3	79,4
	0,25	15,7	53,9
	0,125	10,8	5,9
Monopalmitat	1,0	17,5	71,6
	0,5	16,3	59,8
	0,25	15,5	52,0
	0,125	14,8	45,1
DipaImitat	1,0	21,0	105,9
	0,5	19,3	89,2
	0,25	17,8	74,5
	0,125	16,5	61,8
Monomyristat	1,0	17,8	74,5
	0,5	16,0	56,9
	0,25	15,5	52,0
	0,125	14,0	37,3
Dimyristat	1,0	20,8	103,9
	0,5	19,8	94,1
	0,25	17,3	69,6
	0,125	15,3	50,0
Vergleich (Physiologische Kochsalzlösung)		10,2	0

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Die Werte für die akuten Toxizitäten sind in der folgenden Tabelle 2 zusammengestellt:

Tabelle 2 Verbindung LD₅₀*) (mg/kg)

Chlorozotocin 45-47

Monocaprat 17,7

Dieaprat 141,4

Tricaprat > 400

Monomyristat 61,5

Dimyristat >800

Trimyristat >800

Monopalmitat 162,5

Dipalmitat > 800

Tripalmitat >800

Monostearat 187

Distearat >800

Tristearat >800

*) - Intraperltoneal, einfache Gabe, Mäuse, Überlebenszeit 7 Tage

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können nach einigen unterschiedlichen Verfahren hergestellt werden. So können die Verbindungen nach der Erfindung beispielsweise durch Suspendieren von 2-[3-(2-Chloräthyl)ureido] -2-desoxy-D-glukopyranose in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Pyridin, Umsetzen mit einem Fettsäurehalogenid, vorzugsweise einem Chlorid, oder einem Fettsäureanhydrid bei oder unterhalb von Raumtemperatur und Umsetzen des erhaltenen Acylierungsproduktes mit einem geeigneten Nitrosierungsmittel, wie Natriumnitrit, das entweder zuvor in Wasser gelöst oder dem Reaktionssystem in fester Form zugesetzt wird, in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Essigsäure, bei einer Raumtemperatur nicht überschreitenden Temperatur hergestellt

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— ο —

werden. Alternativ kann man 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureidoJ-2-desoxy-D-glukopyranose mit einem Fettsäurechlorid oder -anhydrid umsetzen. Gemäß dem Umesterungsverfahren kann die gewünschte Verbindung durch Zusetzen eines Fettsäureesters zu 2-[3-(2-Chloräthyl)ureidoJ-2-desoxy-D-glukopyranose in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Dimethylformamid, und in Gegenwart von Kaliumcarbonat, Erhitzen des Reaktionssystems und Nitrosieren des erhaltenen Acylderivats auf die vorstehend beschriebene Weise erhalten werden. Wenn die Anzahl der Kohlenstoffatome bei der an der Reaktion teilnehmenden Fettsäure weniger als 8 beträgt, hat das Acylderivat eine hohe akute Toxizität, insbesondere ist das Monoacylderivat sehr stark toxisch und somit ungeeignet.

Anhand der folgenden Beispiele wird die Erfindung im einzelnen erläutert.

Beispiel 1

In 30 ml Pyridin wurden 1,5 g 2-[3-(2-Chloräthyl)-ureidoJ-2-desoxy-D-glukopyranose suspendiert, und unter Rühren bei Raumtemperatur wurden 3,6 g Palmitoylchlorid zugetropft. Nach 1-stündigem Rühren wurde das Reaktionsgemisch in Eiswasser gegossen, der pH-Wert mit konzentrierter Schwefelsäure auf 3 eingestellt und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, entwässert und das Lösungsmittel abdestilliert. Der Rückstand wurde mit 45 ecm Essigsäure aufgenommen, und unter Rühren bei Raumtemperatur wurde 1 g NaNO₂ zugesetzt. Das Gemisch wurde 30 Minuten lang gerührt, und nach Zusetzen einer kleinen Menge Wasser wurde der Niederschlag abfiltriert, gut mit Wasser gespült, getrocknet und der Silikagelchromato-

(R)
graphie unterzogen (Wakogel^v ' C-200). Eluieren mit Benzol ergab den Tetraester; mit Benzol-Ä'thylacetat (15:1) wurde der Triester, mit Benzol-Äthylacetat (5:1) der Diester und mit Benzol-Äthylacetat (5:2) der Monoester erhalten.

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(1) 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureidoJ -2-desoxy-D-glukopyranose-tripalmitat:

Ausbeute 120 mg, Fp. 95-97° C, Summenformel C₅₇

Analyse: Berechnet: C = 66,57 % H = 10,58 % N = 3,87 % Gefunden: C= 66,85 % H - 10,38 % N = 4,08 %

IR-Spektrum (KBr, cm"¹): 3500, 3375, 2920, 2855, 1760, 1740,

1715, 1535, 1495, 1470

(2) 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido] -2-desoxy-D-glukopyranose-dipalmitat:

Ausbeute 900 mg, Fp. 116-118° C, Summenformel C₄₁H₇₆ClN₃O₉;

Analyse: Berechnet: C « 62,29 % H - 9,69 % N = 5,31 % Gefunden: C - 62,13 % H - 9,64 % N - 5,20 %

\ 1725,

IR-Spektrum (KBr, cm ): 3380, 2920, 2855,/1715, 1550, 1495,

1465

(3) 2- [3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureidoJ -2-desoxy-D-glukopyranose-monopalmitat:

Ausbeute 300 mg, Fp. 119° C (Zers.), Summenformel C₃₅H₄₆CIN₃O₈;

Analyse: Berechnet: C - 54,39 % H= 8,40 % N- 7,61 % Gefunden: C - 54,45 % H - 8,67 % N - 7,67 %

IR-Spektrum (KBr, cm"¹): 3480, 3400, 2925, 2850, 1730, 1690,

1535, 1490, 1465

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(4) 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido] -2-desoxy-D-gluko pyranose-Tetrapalmitat:

Ausbeute 10 mg, Fp. 73-75° C, Summenformel C₇₃

Analyse: Berechnet: C = 69,18 % H= 10,82 % N = 3,32 %

Gefunden: C = 69,01 % H = 10,77 % N = 3,51 %

IR-Spektrum (KBr, cm"¹): 3500, 3380, 2920, 2855, 1780, 1755,

1730, 1715, 1535, 1495, 1470

Beispiel 2

In 20 ml Pyridin wurde 1 g 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido]-2-desoxy-D-glukopyranose gelöst, und unter Rühren bei Raumtemperatur wurden 2,2 g Palmitoylchlorid zugetropft. Das Gemisch wurde 1 Stunde lang gerührt, und danach wurden Äthanol und Benzol zugesetzt. Das Gemisch wurde unter vermindertem Druck bei 30° C zur Trockne eingedampft, und der Rückstand wurde wie in Beispiel 1 säulenchromatographisch mit Silikagel gereinigt. Auf diese Verfahrensweise wurden die Mono-, Di- und Tripalmitate erhalten, die in IR-Spektren, Analysenwerten und Schmelzpunkten mit den gemäß Beispiel 1 erhaltenen entsprechenden Verbindungen identisch waren.

Beispiel 3

In 20 ml Pyridin wurde 1 g 2-[3-(2-Chloräthyl)ureidoJ-2-desoxy-D-glukopyranose suspendiert und mit einer katalytischen Menge p-Toluolsulfonsäure versetzt. Unter Rühren bei Raumtemperatur wurden 3,5 g Palmitinsäureanhydrid, gelöst in Pyridin, zugesetzt. Das Gemisch wurde 5 Stunden lang gerührt, wonach das Pyridin unter vermindertem Druck abdestilliert wurde. Der Rückstand wurde mit Äther aufgenommen, die unlöslichen Bestandteile abfiltriert und der Äther abdestilliert. Der ^ckstand wurde mit 30 ml Essigsäure aufgenommen und unter Rühren bei Raumtemperatur mit 0,8 g Natriumnitrit versetzt. Das Gemisch wurde 30 Minuten

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lang gerührt, wonach eine kleine Menge Wasser zugesetzt und der Niederschlag abfiltriert wurde. Dieser wurde gut mit Wasser gespült und wie in Beispiel 1 säulenchromatographisch mit Silikagel gereinigt. Diese Verfahrensweise ergab die Mono-, Di-, Tr i- und TetrapaImitate, welche in IR-Spektren, Schmelzpunkten und Analysenwerten mit den gemäß Beispiel 1 erhaltenen entsprechenden Verbindungen identisch waren.

Beispiel 4

In 20 ml Pyridin wurde 1 g 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido]-2-desoxy-D-glukopyranose gelöst und mit einer katalytischen Menge p-Toluolsulfonsäure versetzt. Unter Rühren bei Raumtemperatur wurden 3,4 g Palmitinsäureanhydrid, gelöst in Pyridin, zugesetzt. Das Gemisch wurde gerührt, eingedampft, der Rückstand mit Äther aufgenommen, abfiltriert, das Filtrat eingedampft und der Rückstand gereinigt. Diese Verfahrensweise ergab die Mono-, Di-, Tri- und Tetrapalmitate, welche in IR-Spektren, Schmelzpunkten und Analysenwerten mit den gemäß Beispiel 1 erhaltenen entsprechenden Verbindungen identisch waren.

Beispiel 5

In 30 ml Dimethylformamid wurde 1 g 2-£3-(2-Chloräthyl)ureido]-2-desoxy-D-glukopyranose gelöst, wonach 0,15 g Kaliumcarbonat und 2,4 g Methylpalmitat zugesetzt wurden. Es wurde unter schwach vermindertem Druck bei 80 bis 90° C etwa 6 Stunden lang umgesetzt, wobei das als Nebenprodukt anfallende Methanol kontinuierlich abgezogen wurde. Das Dimethylformamid wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und die unlöslichen Bestandteile durch Extraktion mit zwei 30 ml-Anteilen Ä'thyläther extrahiert. Der Äther wurde abdestilliert, der Rückstand wurde in 30 ml Essigsäure aufgenommen, und 0,8 g Natriumnitritpulver wurden unter Rühren bei Raumtemperatur zugesetzt. Das Gemisch wurde 30 Minuten lang gerührt, wonach mit Wasser versetzt und der Niederschlag abfiltriert, gespült und entwässert wurde. Danach wurde das Produkt wie in Beispiel 1 gereinigt, wobei die Mono-,

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Di- und Tripalmitate sowie eine kleine Menge Tetrapalmitat erhalten wurden.

Auf die vorstehend beschriebene Verfahrensweise konnten noch die folgenden Verbindungen synthetisiert werden:

Summenformel

Schmelzpunkt (⁰C) Analysenwerte Gefunden % (Berech. %)

Monocaprat

Dicaprat

Tricaprat

Monolaureat

Dilaureat

Trilaureat

Monomyristat

Dimyristat

Trimyristat

C₁₉H₃₄ClN₃O₃ 111 (Zers.)

^C29^H52^C1N3°9

C₃₉H₇₀ClN₃O₁₀ 105-106(Zers.

109-110 (Zers.)

_onIIo_öClNoO_Q 21 38 3 8

^C33ⁿ60^C1N3°9

^C45^H82^C1N3°10

₀₀₁₀ClNoO₃ 115-116 20 42 3 8 _(Zers>)

^C37^H68^C1N3°9 ¹⁰⁶-¹⁰⁸

^C51^H94^C1N3^O10-102-104

Monostearat C₀₇H₅₀ClN₃O₈ 112 (Zers.)

Distearat
Tristearat

^C45^H84^C1N3°9 ¹⁰¹-¹⁰⁴

^C63^H118^C1N3°10 ⁸²"⁸⁴ C=48,99 H=7,56 N=8,88 (48,76) (7,32) (8,98)

C=55,71 H=8,70 N=6,87

(55.89) (8,41) (6,74)

)C=60,47 H=9,17 N=5,53 (60,33) (9,09) (5,41)

C=50,71 H=7,66 N=8,45 (50,85) (7,72) (8,47)

C=58,29 H=8,86 N=6,03 (58,43) (8,92) (6,19)

C=62,77 H=9,41 N=4,65 (62,80) (9,60) (4,88)

C=52,80 H=8,35 N=7,75 (52,71) (8,08) (8,02)

C=60,32 H=9,63 N-5,54 (60,51) (9,33) (5,72)

C=64,87 H=IO, 13 N=»4,35 (64,84) (10,03) (4,45)

C=55,84 H-8,71 N=6,98

(55.90) (8,69) (7,24)

C-63, 68 H=IO, 10 N>*4, 77 (63,84) (10,00) (4,96)

C-67,96 H=IO,91 N-3,51 (67,98) (10,68) (3,78)

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Claims

PATENTANWÄLTE

er

D-8 MÜNCHEN 22 · WIDENMAYERSTRASSE 40 D-1 BERLIN-DAHLEM 33 ■ PODBIELSKIALLEE 68

BERLIN: DIPL.-ING. R. MÜLLER-BÖRNER

MÜNCHEN: DIPL.-ING. HANS-HEINRICH WEY

Nippon Shinyaku Co., Ltd. und dipl.-ing. ekkehard körner Takara Shuzo Co., Ltd.

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Patentanspruch

Acylierte 2-[3-(2-Chloräthyl)-3-nitrosoureido] -2-desoxy-D-glukopyranose-Derivate der allgemeinen Formel

RO X OR

NHCO-N-CH₀CH₂Cl
NO

in der R ein Wasserstoffatom oder eine CO(CH₂)_nCH₃~Gruppe ist, wobei η eine ganze Zahl von 8 bis 16 ist, mit der Maßgabe, daß nicht alle Reste R gleichzeitig Wasserstoffatome sind.

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MÜNCHEN: TELEFON (O89) 225585 BERLIN: TELEFON (03O) 8312088

KABEL: PROPINDUS · TELEX O5 24 244 KABEL: PROPINDUS · TELEX O1 84O57