CZ423199A3 - Farmaceutický prostředek - Google Patents

Farmaceutický prostředek Download PDF

Info

Publication number
CZ423199A3
CZ423199A3 CZ19994231A CZ423199A CZ423199A3 CZ 423199 A3 CZ423199 A3 CZ 423199A3 CZ 19994231 A CZ19994231 A CZ 19994231A CZ 423199 A CZ423199 A CZ 423199A CZ 423199 A3 CZ423199 A3 CZ 423199A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
nicotinamide
pharmaceutical composition
composition according
antide
peptide
Prior art date
Application number
CZ19994231A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ298825B6 (cs
Inventor
Peter Richardson
Original Assignee
Applied Research Systems Ars Holding N. V.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from EP97108593A external-priority patent/EP0880968A1/en
Application filed by Applied Research Systems Ars Holding N. V. filed Critical Applied Research Systems Ars Holding N. V.
Publication of CZ423199A3 publication Critical patent/CZ423199A3/cs
Publication of CZ298825B6 publication Critical patent/CZ298825B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/25—Growth hormone-releasing factor [GH-RF] (Somatoliberin)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A61K38/09—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH], i.e. Gonadotropin-releasing hormone [GnRH]; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers

Description

Oblast techniky
Vynález se týká farmaceutického prostředku, který obsahuje a) peptid, nesnadno rozpustný ve vodném fyziologickém roztoku chloridu sodného jako účinnou složku, b) neiontovou aromatickou hydrotropní farmaceuticky přijatelnou látku a c) fyziologický roztok chloridu sodného ve vodě. Ve výhodném provedení je peptidem a) analog LHRH nebo peptid typu GRF. Dosavadní stav techniky
Často je zapotřebí zlepšit rozpustnost účinné látky ve fyziologickém prostředí k dosažení dostatečné účinnosti injekčního farmaceutického prostředku s obsahem této látky. Účinné látky typu peptidů jsou často ve fyziologickém prostředí obtížně rozpustné vzhledem k tomu, že obsahují hydrofobní substituenty.
Obtížná rozpustnost může také vést k nedostatečnému vstřebávání při podávání jinými způsoby, v některých případech je tento nedostatek možno odstranit přidáním látek, které usnadní rozpustnost účinné látky, například při perorálním podání nebo při podání nosní sliznicí.
Jako příklady peptidových látek, které jsou ve fyziologickém prostředí obtížně rozpustné je možno uvést analogy LHRH a peptidy typu faktoru pro uvolnění růstového hormonu, GRF.
Hormon pro uvolnění luteinizačního hormonu, LHRH nebo také GnRF je dekapeptid, vylučovaný hypothalamem a schopný vyvolat uvolnění LH a FSH. Je možno jej vyjádřit vzorcem pyroGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.
LHRH může stimulovat sekreci gonadotropinu z hypofýzy nebo může být účinným inhibitorem. Při přesném podání • · • · • φφφφ φ · měnících se dávek může LHRH upravovat normální cyklickou sekreci gonadotropinu. Takové podávání LHRH při použití počítače bylo použito s dobrými výsledky pro vyvolání ovulace u žen s dysfunkcí hypothalamu, u nichž vůbec k ovulaci nedocházelo. Při dlouhodobém podávání se prokázal inhibiční účinek LHRH nebo jeho agonístů na sekreci pohlavních hormonů, takže vzniká dočasná a plně reverzibilní změna, napodobující stav po vynětí hypofýzy.
Až dosud byly syntetizovány tisíce látek, které jsou analogy LHRH a mají agonístický nebo antagonistický účinek. K dosažení produkce antagonistů LHRH, které působí obsazením receptoru je zapotřebí nahradit několik aminokyselin v molekule LHRH. Antagonista musí mít přesné topologické vlastnosti, aby bylo dosaženo vysoké vazné afinity pro receptor. V poslední době bylo syntetizováno velké množství analogů LHRH, v nichž aminokyseliny obsahují aromatickou nebo jinou funkční skupinu, schopnou tzv. hydrotropní interakce. Použití antagonistů LHRH při jejich okamžité inhibici uvolnění gonadotropínu může být využito k léčebným účelům, například při antikoncepci a k léčení hormonálních poruch. V případě nádorů, závislých na hormonech může být použití LHRH zvláště výhodné. Souhrnné informace o jednotlivých látkách tohoto typu je možno nalézt v publikaci Karten a Rivier 1986.
Antid, který je účinným antagonistou LHRH je podrobně popsán včetně svého vzorce, biologické účinnosti a způsobu výroby v EP 377 665.
Z podrobných zkoušek je například známo, že antid má velmi nízkou rozpustnost v 0,9% roztoku chloridu sodného, přibližně 25 mikrogramů/ml a podobnou rozpustnost má také v jiných izotonických prostředích, například ve fyziologickém • · • 9 ··· · · · · ···· ···· · · · ···· · 9999 9 9 9 9 9 9 9 9 9 roztoku chloridu sodného s fosfátovým pufrem, kde rozpustnost je pouze 16 mikrogramů/ml. Dosud připravené vodné prostředky s obsahem antidu měly špatnou biologickou dostupnost i farmakokinetickou reprodukovatelnost. Tento jev je vyvolán přítomnosti antidu v mistě injekčního podání v koncentraci vyšší než 25 mikrogramů/ml, což vede ke vzniku sraženin při styku s fyziologickým prostředím. Tyto sraženiny mohou mít gelovitou povahu a mají nepříznivý vliv na vstřebávání účinné látky, jak bylo prokázáno klinickými zkouškami, prováděnými přihlašovatelem.
Také jiné látky, antagonizující uvolňování hormonů typu gonadotropinu -mohou tvořit ve vodných roztocích gelovité struktury. Dále je známo, že rozpustnost těchto látek stoupá při poklesu pH roztoku vzhledem ke zvyšující se ionizaci molekuly podle Cannon J.B. a další, 1995.
GRF, označovaný také jako Somatorelin je peptid, vylučovaný hypothalamem a vyvolávající uvolnění růstového hormonu z předního laloku hypofýzy. Přirozeně se vyskytuje jako peptid, obsahující 44, 40 nebo 37 aminokyselin. Forma s obsahem 44 aminokyselin pravděpodobně může být převedena na kratší formy, avšak všechny tyto formy jsou účinné, přičemž účinnost je tvořena pravděpodobně řetězcem počátečních 29 zbytků aminokyselin. Peptid, který odpovídá sekvenci aminokyselin 1 až 29 lidského GRF, hGRF(l-29), také označovaný Sermorelin byl připraven rekombinantní technologií DNA a popsán v EP 105 759.
Sermorelin již byl použit ve formě acetátu pro diagnostiku a léčení nedostatku růstového hormonu.
GRF má své použití při léčení některých poruch, souvisejících se sekrecí růstového hormonu. Použití GRF ke • · • · • · • · · · · · · · · · · ··«· · · · · · · · • ·*····· · · · · · · ·
4·· · · · · ♦ · · · ·· · ·· · · · · ·· · » stimulaci uvolnění růstového hormonu GH je fyziologickou metodou pro vyvolání růstu dlouhých kostí nebo k dosažení anabolického účinku.
Je známo, že přírodní forma GRF může podléhat chemické degradaci ve vodných roztocích. Ohrožena je především aminokyselina Asn v poloze 8, což vede ke snížení biologické účinnosti podle Friedman a další, 1991 a Bongers a další,
1992.
Hlavní hydrolytické reakce, k nimž může dojít v GRF jsou citlivé na pH. Může jít zejména o přeskupení Asp3 při pH 4 až 6,5, rozštěpení vazby Asp3-Ala4 při pH 2,5 až 4,5, deamidaci a přeskupení Asn8 při pH vyšším než 7 podle Felix A.M., 1991.Vzhledem k těmto možnostem degradace jsou nestabilizované vodné roztoky GRF nej stálejší při pH 4 až 5. V publikací Bongers a další, 1992 se prokazuje, že deamidace na Asn8 se rychle zvyšuje při zvyšování pH nad hodnotu 3.
Byla připravena řada analogů GRF náhradou zbytků aminokyselin v přírodní sekvenci GRF jinými zbytky ke zlepšení chemické stálosti, jak je popsáno například v Serono Symposia USA, 1996 a Friedman, 1991. I když takové modifikace mohou zlepšit stálost při zachování biologické účinnosti, může dojít ke změnám imunogenity, a mohou tedy vznikat problémy při chronickém podávání, například při nedostatku růstového hormonu.
Z literatury je známo, že v některých případech může přidání aromatických látek k roztokům bílkovin mít negativní vliv na rozpustnost, takže dojde k vysrážení. Například v případě, že se aromatické látky uvedou do styku s rekombinantním lidským růstovým hormonem rhGH, může dojít k denaturací za tvorby shluků molekul uvedené látky, jak bylo popsáno • · · · · · · ·· ·· • · · · · · · · · · 4
4*· ·· · ···· • ······· 4 · 4 4 ·· · • · · · · · · · · · • 4 · 44 4 · 4 4 44 44 v Maa Y.F. a Hsu C.C., 1996. Nejde však o obecný jev vzhledem k tomu, že bylo prokázáno, že deriváty aromatických aminokyselin zlepšují rozpustnost i vstřebávání růstového hormonu podle Leone Bay A. a další, 1996.
Je známo, že nikotinamid zvyšuje rozpustnost řady farmaceutických látek, zejména nepeptidové povahy s molekulovou hmotností nižší než 1000 tvorbou komplexů za přenosu náboje. Tento jev se označuje jako hydrotropní solubílizace. Může jít o důsledek interakce aromatické skupiny solubilizačního činidla a aromatické nebo jiné vhodné funkční skupiny v molekule účinné látky, například podle Rasool a další, 1991.
Přihlašovatelem však bylo zjištěno, že řada dalších molekul s obsahem aromatických skupin, například typu benzoátu nebo salicylátu, které by mohly působit hydrotropním mechanismem podle Jain N.K. a Patel V.V., 1986 vyvolávají pouze malé zlepšení rozpustnosti analogu LHRH antidu ve fyziologickém roztoku chloridu sodného, jak bude také uvedeno v příkladové části přihlášky.
V EP 649 655 se popisuje solubílizace ve vodě nerozpustné účinné látky s protivředovým účinkem při použití nikotinamidu k získání použitelné injekční formy. Popisuje se řada potenciálních derivátů účinné skupiny, avšak nejsou uváděny žádné výsledky in vivo, které by prokazovaly zlepšení účinnosti.
PCT přihláška WO 96/10417 popisuje společné podávání lidského inzulínu AspB28 a nikotinamidu k dosažení rychlého nástupu hypoglykemického účinku. Uváděná koncentrace nikotinamidu je v tomto případě 0,01 až 1 M, to znamená 0,1 až 1,2 % hmotnostních, s výhodou 0,05 až 0,5 Μ. V přihlášce se uvádí průkazy rychlejšího vstřebávání in vivo u vepřů, z výsledků
• · • · β
« · · » • · · · · · · ···* * ·«····· · ♦ · · · · · ··· · · · · · · · •· · »· ···· ·· ·« však nelze usuzovat na obecné příčiny uváděného jevu a výsledek tedy není možno zobecnit.
Podstata vynálezu
Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že v případě, že se k vodnému roztoku účinné látky typu peptidů přidá neiontová aromatická hydrotropní látka, zvýší se rozpustnost peptidů, obvykle obtížně rozpustného ve vodném fyziologickém roztoku chloridu sodného a výsledný farmaceutický prostředek má velmi dobrou stálost.
Zvláště bylo zjištěno, že v případě, že se k roztoku antidu v 0,9% roztoku chloridu sodného přidá nikotinamid, může dojít ke zlepšení rozpustnosti peptidů. Konečná koncentrace rozpuštěného antidu závisí na koncentraci přidaného nikotinamidu a stoupá exponenciálně se zvyšováním koncentrace nikotinamidu, jak bude dále uvedeno. Je známo, že rozpustnost antagonistů hormonu pro uvolnění gonadotropinu se zvyšuje při poklesu pH roztoku, avšak údaje v příkladové části pro antid prokazují, že dosažená zvýšená rozpustnost není vyvolána změnami pH. Mimo to bylo prokázáno, že nikotinamid může také zvyšovat rozpustnost antidu v čistě vodném prostředí.
Podstatu vynálezu tedy tvoří farmaceutický prostředek, který obsahuje a) jako účinnou složku peptid, obtížně rozpustný ve vodném fyziologickém roztoku chloridu sodného, b) neiontovou aromatickou hydrotropní farmaceuticky přijatelnou látku a c) fyziologický vodný roztok.
Peptid, který je účinnou složkou prostředku, může být analog LHRH nebo faktor pro uvolnění růstového hormonu, GRF.
S výhodou je analogem LHRH látka s antagonistickým účinkem, zvláště výhodný je antid, hGRF nebo jeho konjugáty s PEG.
• · · • · · • · · • · · • ·
V průběhu přihlášky se pod pojmem hGRF rozumí jakýkoliv lidský peptid typu GRF, zvláště peptid, obsahující 1 až 44, 1 až 40 nebo 1 až 29 zbytků aminokyselin a jeho odpovídající amidy, které jsou zakončeny skupinou -NH2. Všechny tyto látky se běžně dodávají. Výhodnou látkou je zejména hGRF(l až 29)-NH2. Peptid typu GRF, užitý v příkladové části je rovněž běžně dodávaná látka, jejíž složení bude dále upřesněno v odstavci Materiály.
Bylo rovněž zjištěno, že přidáním nikotinamidu k vodným roztokům hGRF je možno snížit deamidaci Asn® a množství degradačních produktů, z nichž všechny ani dosud nebyly identifikovány. Je známo, že může dojít ve vodných roztocích k degradaci Asn® za vzniku následujících degradačních produktů: alfa-Asp®, beta-Asp® a sukcinimidyl-Asn®.
Bylo také zjištěno, že je možno GRF rozpustit v nevodných rozpouštědlech a následujícím snížením aktivity vody v roztoku zabránit deamidaci v poloze Asn®. V případě, že GRF byl rozpuštěn v propylenglykolu, bylo však prokázáno, že dochází k jinému typu degradace, který dosud nebyl plně objasněn. Bylo také zjištěno, že přidáním nikotinamidu do nevodného roztoku, například do roztoku v PG je rovněž možno zabránit tvorbě některých dalších degradačních produktů.
Jako příklady vhodných, farmaceuticky přijatelných neiontových aromatických hydrotropních látek je možno uvést látky ze skupiny nikotinamid, kyselina nikotinová, kyselina benzoová, salicylová, gentisová nebo askorbová, histidin, tryptofan, fenylalanin, tyrosin, fenol, kresol, xanthini, pyridoxin, kyselina listová a sacharin. Použitelné jsou rovněž neiontové deriváty kterékoliv z uvedených látek. Výhodnou látkou je zejména nikotinamid.
• ·
Nikotinamid je běžně užívaným zdrojem vitaminu B ve farmaceutických výrobcích a podává se převážně perorálně, je však také možné jej podávat injekčně. Doporučovány jsou dávky až 500 mg denně rozděleně, například Martindalem.
Fyziologickým vodným roztokem může být izotonický roztok chloridu sodného, popřípadě s fosfátovým pufrem, nebo jakýkoliv jiný izotonický roztok s obsahem anorganických solí.
Farmaceutický prostředek podle vynálezu je možno podávat jakoukoliv cestou, například perorálně, parenterálně, nosní sliznicí nebo inhalací. Prostředek může mít kapalnou formu i pevnou formu, která vzniká například po sušení rozprašováním, lyofilizací a podobně. Může tedy jít například o pevnou lékovou formu, jako jsou želatinové kapsle pro perorální podání nebo může jít o prostředek, určený pro podání nosní sliznicí nebo inhalací. Prostředek může mít například formu suspenze, emulze, mikroemulze, mikronizovaného prášku, roztoku, čípku, pesaru, mikrokuliček, implantátu a podobně, rychlost vstřebávání a stálost peptidů se kombinací s neiontovou hydrotropní látkou zvyšuje u všech těchto lékových forem. Zvláště vhodnou lékovou formou je mikroemulze pro perorální podáni.
Prostředky podle vynálezu je možno lyofilizovat a rekonstituovat. Mimo to mohou tyto prostředky obsahovat jedno nebo větší počet stabilizačních činidel a jiných pomocných látek.
Jako příklad možného složení prostředku pro injekční podání je možno uvést:
antid nebo hGRF nikotinamid
0,1 až 20,0 mg 10 až 300 mg » 9
ΦΦΦΦ φφ ΦΦ • «Φ Φ Φ ΦΦ *
Φ Φ Φ ΦΦΦΦ
Φ Φ φ Φ ΦΦ ΦΦ Φ • Φ Φ φ Φ φ Φ ·· ΦΦΦΦ ΦΦ ΦΦ propylenglykol 0 až 800 mg vodná fáze do 1,0 ml.
Pod pojmem peptid se v průběhu přihlášky rozumí jakákoliv sloučenina, která obsahuje nejméně 2 aminokyseliny. V peptidu je aminoskupina jedné aminokyseliny vždy spojena s karboxylovou skupinou druhé aminokyseliny za vzniku peptidové vazby. Aminokyseliny se mohou vyskytovat přírodně, mohou být syntetizovány nebo modifikovány. Peptidy podle vynálezu obvykle obsahují až 100 aminokyselin, s výhodou až 50 a zvláště až 20 aminokyselin.
Pod pojmem obtížná rozpustnost ve vodných fyziologických roztocích solí se rozumí, že při teplotě místnosti bez přidání kyselin nebo baží má peptid rozpustnost nižší než 1 mg/ml a/nebo že rozpustnost ve vodném fyziologickém roztoku chloridu sodného je o řád nižší než rozpustnost v čisté vodě za stejných podmínek.
Vynález bude popsán v souvislostí s přiloženými výkresy.
Přehled obrázků na výkrese
Obr. 1 znázorňuje vztah mezi rozpustností antidu v 0,9% roztoku chloridu sodného a koncentrací nikotinamidu. Semilogaritmický vztah ukazuje, že rozpustnost antidu se stoupající koncentrací nikotinamidu se mění na logaritmický vztah. Důležitá je lineární povaha této závislosti, která dovoluje přesně stanovit účinek ředění.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.
Μ • ·
» »9 »
9 9 9
9«99
9 · · * • · 9 · ♦ · ··
Příklady provedení vynálezu
Materiály
Antid (Bachem), šarže 8901 a 9001 hGRF(1 až 29)-NH2 (Bachem), šarže 1299201 a 1299202 Dulbecco fyziologický roztok chloridu sodného s fosfátovým pufrem (Sigma, D-8537)
Histidin hydrochlorid (Merck, 1.04351 pro biochemií)
Nikotinamid (Fluka, 72345), USP
Fenylalanin (Merck, 7256) pro biochemii
Benzoát sodný (Merck, 6290) Ph.Eur/NF
Salicylát sodný (Sigma, S-3007), reakční činidlo
35H1207 .
Thiaminhydrochlorid (Merck, 8181) pro biochemii Pryžové zátky z butylové pryže (Pharmagummi, typ 1779
W1816 šedé).
Lékovky ze skla, 3 ml, DIN 2R typ 1 (Nuova Ompi) Všechna další reakční činidla byla analyticky čistá, není-li výslovně uvedeno jinak.
Vybavení
K uskutečnění zkoušek byla užita následující zařízení:
Merck Hitachi HPLC systém (L-6200 čerpadlo, L-4250 detektor, AS-2000 A automatický odběr vzorků, počítač Compaq, Software HPLC-Manager 2000).
Waters HPLC systém (626 čerpadlo, 600S řidiči jednotka, 994 detektor, 717 automatický odběr vzorků, počítač NEC, Software Maxima Baseline).
Vymrazovací zařízení (Edwards, Lyoflex model 06 a 04) Analytický postup pro antid • · • · * • · · · « · < ♦ · • ··«·*·»
Analýza se provádí vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi, RP-HPLC při gradientově elucí na sloupci C-18 (například Vydac 218 TP54, 250x4,6 mm) detekce UV při 215 nm, vstřikovaný objem 15 mikrolitrů, mobilní fáze
A:fosfátový pufr o pH 4,5, 0,1 M, mobilní fáze B: acetonitril, rychlost průtoku 1,0 ml/min, doba průtoku 23 minut. Koncentrace standardního roztoku byla 100 mikrogramů/ml. Tento roztok byl vstřiknut v průběhu analýzy. Použitý gradient byl 77 % A a 23 % B až 52 % A a 48 % B v průběhu 30 minut.
Analytický postup pro hGRF
Pro analýzu GRF (1 až 29)-NH2 byl vyvinut postup
RP-HPLC, jímž je možno odlišit následující degradační produkty:
Oxidace: na Met27
Volná kyselina: GRF (1 až 29)OH
Deamídace: alfa-Asp8, beta-Asp8 a sukcinimidyl-Asn8 Acetylace: acetyl Tyr1
Izomerace: beta-Asp3 a sukcinimidyl-Asp3 Zkrácení: hGRF(4 až 29)-NH2, GRF (9 až 29)-NH2
Postup byl užit pro stanovení chemické čistoty řady roztoků hGRF v průběhu jejich skladování při teplotě 4 až 40 °C, jak bude shrnuto v následujících tabulkách.
Podmínky byly podobné jako pro antid, mobilní fází byla směs acetonitrilu a vody a místo fosfátového pufru byla užita kyselina trifluoroctová.Gradientově eluce byla prováděna 60 minut, celková doba analýzy byla 80 minut.
Stálost antídu ve vodných roztocích
Byly provedeny předběžné zkoušky na stálost roztoků s obsahem antidu 0,1 mg/ml při teplotě -20, 4, 25 a 40 °C, aby bylo možno vyhodnotit stálost těchto roztoků při pH 2, 3 a 4.
·» · 44 4« 4* ·4 • 44 · · 4 ♦ t · 4 *
4444 ·4 · 4444
4 4444 44 4 4 ·4 44 4
4 444 4444 • 4 4 44 4 4 4 4 44 4 4
Roztoky s obsahem antidu 0,1 mg/ml byly připraveny rozpuštěním této látky ve vodě a úpravou pH při použití 0,01 M roztoku kyseliny chlorovodíkové.
Stálost hGRF ve vodných roztocích 5 Zkoušky na stálost byly prováděny na vodných roztocích, obsahujících hGF v množství 2,0 mg/ml, 5,0 a 10,0 mg/ml při teplotě 4 a 40 °C a byl přidáván nikotinamid při pH 7,5. Vyhodnoceno bylo také přidávání propylenglykolu.
Zkoušky na solubilizaci antidu
Byly provedeny solubilizační zkoušky, aby bylo možno stanovit vliv pH (roztoky byly okyseleny kyselinou octovou nebo chlorovodíkovou) a vliv hydrotropních látek (užit byl nikotinamid, sodná sůl sacharinu, salicylátu a benzoátu, histidinhydrochlorid, thiamínhydrochlorid a fenylalanin).
Solným roztokem pro tyto zkoušky byl 0,9% vodný roztok chloridu sodného.
Na základě výsledků předchozích zkoušek byl k sledovaným roztokům přidán přebytek antidu a roztoky byly sledovány k vyhodnocení rozpustnosti po dosažení rovnovážného stavu přes noc při teplotě 25 °C. Na základě vizuální analýzy byly pak vybrány roztoky pro další kvantitativní stanovení rozpustnosti. Tyto roztoky byly zfiltrovány přes filtry s průměrem otvorů 0,45 mikrometru a po příslušném ředění analyzovány pomocí RP-HPLC svrchu.
Solubilizační zkoušky pro hGRF
Obdobné zkoušky byly prováděny také ke stanovení rozpustnosti hGRF ve fosfátovém pufru při pH 7.
Kvantitativní stanovení množství rozpuštěného hGRF bylo provedeno po filtraci roztoku přes filtr s průměrem otvorů 0,45 mikrometru a po zředění pomocí HPLC.
·♦ 9 9» 9· 9· 99 · 9 99·· 9999
9 9 9 99 9 999·
9 9999 99 9 9 » · 99 9
9 9 · 9 9 9999
9 99 9999 ·9 99
Příprava lyofilizovaného prostředku s obsahem antidu lahviček s obsahem lyofilizované směsi antidu a nikotinamidu bylo připraveno následujícím způsobem:
1) naváží se 0,7 g acetátu antidu, vyjádřeno jako suchý prášek, 3,5 g mannitolu a přidá se přibližně 50 ml vody pro injekční podání (WFI),
2) obě látky se rozpustí za opatrného míchání,
3) přidáním WFI se hmotnost doplní na 70 g
4) do každé lahvičky se vloží 1 ml roztoku
5) uskuteční se následující lyofilizační cyklus: cyklus se zahájí při teplotě místností, obsah se zchladí na -40 °C na 1,5 h a pak se užije podtlak, směs se suší 2 hodiny, teplota se zvýší na 20 °C na 16 hodin, cyklus se ukončí při 40 °C na 5 hodin.
Výsledky a diskuze
Stálost antidu ve vodných roztocích 20 V následujících tabulkách 1 a 2 jsou shrnuty výsledky zkoušek na stálost roztoku antidu s obsahem 0,1 mg/ml při pH 2, 3 a 4 po úpravě kyselinou chlorovodíkovou a po skladování při teplotě -20, 4, 25 a 40 °C po dobu 3 měsíce. Je zřejmé, že množství degradovaného produktu v % se zvyšovalo při sni25 žování pH. Je také možno pozorovat, že uložení při teplotě
-20 °C negativně ovlivnilo stálost výrobku při pH nižším než .
Solubilizační zkoušky pro antid Vliv pH • · 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 9
9 9999 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9 99 9999
9 *
9 9
9 9
9 9 9
99
V tabulkách 3 až 7 jsou shrnuty výsledky zkoušek na rozpustnost antidu ve vodě pro injekční podání WFI, dále ve WFI po okyselení kyselinou chlorovodíkovou nebo octovou, ve fyziologickém roztoku chloridu sodného, popřípadě po okyselení kyselinou octovou. V souladu s předchozími zkouškami se rozpustnost antidu zvyšovala při snížení pH.
Z tabulky 3 je zřejmé, že přirozené pH octanu antidu v roztoku je 4,4 až 5,0 v závislosti na rozpuštěném množství. Antid mohl být snadno rozpuštěn ve vodě až do koncentrace 1,0 mg/ml, avšak bez dalšího okyselení byla mez rozpustnosti 8,1 mg/ml. Po vytvoření gelu již pH nebylo měřeno.
V případě, že byl antid přidán v množství 50 mg/ml k vodě, jejíž pH bylo upraveno kyselinou chlorovodíkovou na 3,0 došlo k vytvoření gelu, což prokazovalo částečnou rozpustnost. Na základě těchto výsledků by pravděpodobně bylo nezbytné přidat další kyselinu k úplnému rozpuštění látky při této koncentraci.
Z tabulek 4 a 5 je zřejmé, že značné množství kyseliny octové nevedlo k účinnému rozpouštění antidu ve vodě. Po přidání 2 % kyseliny octové ve vodě za vzniku 0,33 M roztoku v případě injekčního podání bylo možno účinně rozpustit 10 až 20 mg/ml uvedené látky.
Přidáním antidu do množství 5 mg/ml k 1% roztoku kyseliny octové vznikl roztok o pH 3,12 v přítomnosti fyziologického roztoku chloridu sodného. V roztoku přetrvávala opalescence, což prokazuje, že rozpustnost účinné látky byla nižší než 5 mg/ml. Přesné množství nebylo stanoveno, jak je zřejmé z tabulky 6.
Z tabulky 7 je zřejmé, že antid v množství 10 mg/ml ve fyziologickém roztoku chloridu sodného není rozpustný při ♦ A <A 99
AAA · A A · A A A A • · · A ·· · A A A A
A A A··· 9 9 9 9 9 9 · 9 ·
A A · AAA A » A A
A· A A A A A A A 9 9 99 pH 3,0 nebo 4,6 po snížení pH přidáním 4% roztoku kyseliny octové. Hodnota pH byla měřena při přípravě roztoku, po částečném vytvoření gelu, což prokazuje částečnou rozpustnost účinné látky. Při pH 3,0 byla rozpustnost účinné látky v roz5 toku chloridu sodného 2,2 mg/ml, při přírodním pH 5,04 byla tato rozpustnost 0,025 mg/ml.
Vliv hydrotropních látek na rozpustnost antidu Byl vyhodnocen vliv různých hydrotropních látek v koncentraci 1,5 a 15 % hmotnostních v roztocích chloridu sod10 ného, výsledky jsou shrnuty v tabulkách 8 a 9. Bylo prokázáno, že nejúčinnějšími solubilizačními látkami jsou nikotinamid a thiaminhydrochlorid.
Z tabulky 8 je zřejmý účinek nižší koncentrace 1,5 % hmotnostních hydrotropních látek při pH roztoku před přidáním a po přidání hydrotropní látky. Je zřejmé, že uvedené látky nebyly v tomto případě účinné při solubilizaci antidu v množství 10 mg/ml roztoku chloridu sodného.
Zkoušky z tabulky 8 byly opakovány při použití nižší koncentrace účinné látky a vyšší koncentrace hydrotropní lát20 ky, jak je shrnuto v tabulce 9. Při kvantitativním stanovení množství rozpuštěného antidu bylo zjištěno, že nikotinamid je velmi dobrým solubilizačním činidlem pro antid a bylo dosaženo množství 3,3 mg/ml v roztoku chloridu sodného s obsahem 15 % hmotnostních nikotinamidu při pH 5,8. Thiaminhydrochlo25 rid za těchto podmínek rovněž solubilizoval značné množství antidu v roztoku chloridu sodného, bylo dosaženo množství 3,0. mg/ml v roztoku chloridu sodného s obsahem 15 % hmotnostních thiaminhydrochloridu. V tomto případě však okyselení, vyvolané solí thiaminu vyvolalo značné snížení pH až na 3,3 a solu30 bilizační účinek byl částečně vyvolán okyselením roztoku. Při «« · *· ·· ·· ·· « · e « « · · · » · · • · · · · · * ···· • 9 9999 · 9 · 9 9 9 · 9 9 • 99 9 9 9 9 9 9 9
9 99 9999 99 99 použití roztoku iontových hydrotropních látek nedošlo ke zlepšení solubilizace antidu v roztoku chloridu sodného.
Nikotinamid
Další zkoušky byly provedeny k potvrzení solubilizač5 ního účinku nikotinamidu na antid v roztoku chloridu sodného a ke stanovení nejúčinnější koncentrace. Vliv koncentrace nikotinamidu na rozpustnost antidu je uveden v tabulce 10 a bylo prokázáno, že 20 % koncentrace nikotinamidu v roztoku chloridu sodného zvýší rozpustnost antidu až na 8,5 mg/ml.
Uvedené výsledky jsou graficky znázorněny na obr. 1.
Je zřejmé, že se semilogaritmický vztah pro rozpustnost antidu mění na logaritmický při zvyšování koncentrace nikotinamidu. Důležitý je lineární průběh, který dovoluje přesné nastavení rozpouštěného množství. Mimo to tento vztah dovoluje zjištění, zda bylo dosaženo rovnovážného stavu pro rozpustnost účinné látky v použitém roztoku.
Vzhledem k tomu, že nikotinamid byl zjištěn jako velmi dobré solubilizační činidlo pro antid, byly provedeny další zkoušky k ověření chemické kompatibility nikotinamidu a antidu. Byly připraveny 4 prostředky s obsahem antidu a nikotinamidu v různých koncentračních poměrech, pH bylo upraveno na hodnotu 5 a prostředky byly uloženy na 3 měsíce při teplotě 40, 25 a 4 °C. Údaje o stálosti prostředků jsou uvedeny v tabulce 11.
Zvýšenou viskozitu a tvorbu sraženiny bylo možno pozorovat v prostředku s obsahem 10 mg/ml antidu a 5 % nikotinamidu po jednom týdnu při teplotě 40 a 25 °C. K žádné změně nedošlo ve vzorku, uloženém při teplotě 4 °C. Z toho je zřejmé, že se rozpustnost antidu v roztoku chloridu sodného s obsahem nikotinamidu snižuje při zvyšování teploty. Po třech
ΦΦ φ φφ ·· ·· φφ φ φ φ · · · · «ΦΦΦ φφφφ φ φ · φφφφ φ φ φφφφ · · · * · · · · · φ φ · ΦΦΦ φφφφ φφ φ φφφφφφ φφ φ* měsících nebylo možno pozorovat v prostředcích žádou degeneraci účinné látky, což prokazuje, že neexistuje žádná chemická inkompatibilita mezi oběma látkami ve sledovaných poměrech. Chromatografické záznamy antídu byly totožné se stan5 dardními záznamy kromě vrcholu pro nikotinamid, který se objevuje jako první po době retence 3,2 minut.
Množství nikotinamidu, jehož je zapotřebí k solubilizaci antidu po injekčním podání může být vyšší než je izotonická koncentrace nikotinamidu, která je 4,5 %. To znamená, že po injekčním podání mimo cévy budou tělesné tekutiny vyvolávat vyrovnání osmotického tlaku a ředit solubilízačni činidlo. K napodobení potenciálního ředění prostředku po jeho injekčním podání byl tento vliv sledován in vitro následujícím způsobem. Ředění bylo provedeno až do koncentrace nikoti15 namidu 5 % přidáním fyziologického roztoku chloridu sodného s obsahem fosfátového pufru. Roztoky antidu s jeho obsahem 1 až 5 mg/ml byly připraveny v 15% nikotinamidu ve WFI, načež byl roztok 3x zředěn roztokem chloridu sodného s fosfátovým pufrem, PBS. Směsi byly pozorovány 3 hodiny, vliv ředění přidá20 ním PBS je shrnut v tabulce 12.
Výsledky jsou v dobrém souladu s měřením rozpustnosti antidu v těchto systémech podle tabulky 10, kde 5% roztok nikotinamidu ve fyziologickém roztoku chloridu sodného může solubilizovat antid v množství 0,5 mg/ml. Údaje prokazují, že je možné připravit mírně přesycený roztok antídu pro aplikaci do tělesných tekutin, obsahující například antid v množství 2 mg/ml v 15% níkotinamidu.Po ředění na 5 % bude roztok obsahovat antid v množství 0,67 mg/ml, takže antid v průběhu zkoušek zůstane rozpuštěný.
• · • ♦ • 9 • ·♦*· • · ·
Vhodné prostředky tohoto typu budou obsahovat například 15 % nikotinamidu a antid v množství 2 mg/ml nebo 5 % nikotinamidu a 0,5 mg/ml antidu, což může snížit nebezpečí vysrážení v místě injekčního podání. Další vhodné prostředky, například ty, které již byly svrchu uvedeny, je možno stanovit z profilu rozpustnosti na obr. 1 a tvoří výhodná provedení farmaceutického prostředku podle vynálezu.
Výsledkem, který vyplývá z uvedených příkladů je tedy možnost účinné solubilizace antidu celou řadou látek typu neiontových, aromatických hydrotropních sloučenin, kdežto přidání ionizovaných látek rozpustnost ve vodě snižuje . Rozpustnost antidu se také zvyšuje při poklesu pH, kdežto jeho chemická stálost se snižuje při poklesu pH pod 4.
Bylo také prokázáno, že v přítomnosti nikotinamidu zůstává antid chemicky stálý.
Zkoušky na solubilizaci hGRF
Rozpustnost hGRF byla měřena při 25 °C ve vodě, v roztoku chloridu sodného vždy po jednom týdnu k dosažení rovnovážného stavu a v PBS po skladování 5 dnů. Byla zjištěna následující rozpustnost:
WFI více než 1 mg/ml
0,9% NaCl 0,042 mg/ml’
PBS 0,032 mg/ml
Po uložení na 1 týden při 40 °C bylo možno pozorovat následující rozpustnost:
0,097 mg/ml 0,875 mg/ml
0,9% NaCl
0,9% NaCl + 5% nikotinamid Roztoky hGRF s obsahem 5 a 20 mg/ml této látky byly připraveny ve vodě po úpravě pH na 3,0 a bylo přidáno 5 nebo 20 % nikotinamidu. Při zvyšování pH byl stanoven bod srážení
9* 9 99 99 99 99 »99 9999 9999
9999 99 9 999*
9 9999 99 9 · 99 99 9
9 999 9999
9 99 9999 99 99 pro hGRF. Výsledky zkoušky prokazují schopnost nikotinamidu solubilizovat hGRF i při vyšším pH a jsou shrnuty v následující tabulce 13.
Stabilita hGRF ve vodných roztocích 5 Přidáváním nikotinamidu do vodných roztoků hGRF bylo zjištěno, že tato látka má schopnost dramaticky snižovat chemickou degradaci tohoto peptidu. Je známo, že dochází k rychlé degradaci GRF jeho deamidací ve vodných roztocích, přičemž rychlost tohoto rozkladu se zvyšuje při pH vyšším než 4 až 5. Připravené vodné roztoky hGRF s obsahem 0,5 nebo 20 % nikotinamidu byly upraveny na pH 7,5 a uloženy na 12 týdnů při teplotě 4 a 40 °C.
Výsledky, uvedené v tabulkách 14 a 15 ukazují, že se rychlost deamidace podstatně snižuje v přítomnosti nikotina15 midu, zvláště jde o rychlost deamidace na zbytku asparaginu v poloze 8 v hGRF, přičemž roztoky jsou stálejší při nižších teplotách.
Vzhledem k tomu, že k deamidaci dochází v roztoku, je aktivita vody důležitým faktorem pro rychlost degradace.
Vzhledem k tomu, že hGRF je rozpustný v propylenglykolu, byla sledována stálost hGRF v roztoku v tomto rozpouštědle, aby bylo možno pochopit deamidační reakci.
Údaje z tabulek 16 a 17 prokazují, že v použitém roztoku došlo ke značnému snížení degradace deamidací asparaginu v poloze 8. Údaje rovněž prokazují, že po rozpuštění hGRF v propylenglykolu dochází ke značné degradaci dosud ne zcela stanoveným způsobem a vytvářejí se nové degradační produkty, které lze prokázat chromatografií.
Z uvedených údajů je zřejmé, že i po přidání nikoti30 namidu k roztoku hGRF v propylenglykolu dochází ke snížení
99
9, 9 9 9
9 9 9
9 9 9 9
9 9 *
ΦΦ 99 «φ ··
ΦΦ · • φ φ φ · · · • · φφφφ • φ φ φφ φ φ φ · φ
9 ·
Φ · · ·
ΦΦΦ 99 9999 koncentrace těchto degradačních produktů. Také v tomto případě byly stálejší roztoky, uložené při 4 °C než roztoky, uložené při 40 °C.
K vyhodnocení kombinace nikotinamidu a propylenglyko5 lu ve vodném roztoku hGRF bylo 10 mg hGRF rozpuštěno v roztoku s obsahem 60 % propylenglykolu a 20 % nikotinamidu, roztok byl doplněn vodou na požadovaný objem a pH bylo upraveno na
7,5.
Získané údaje, shrnuté v tabulkách 18, 19 a 20 proka10 zují, že došlo ke snížení degradace deamidací asparaginu v poloze 8 na velmi nízkou úroveň a při 4 °C byla degradace dostatečně nízká pro použití ve farmacii.
Získané údaje prokazují možnost stabilizace vodných roztoků hGRF použitím nikotinamidu za současného použití pro15 pylenglykolu. Pro různé farmaceutické použití bude pravděpodobně možno dosáhnout optimální koncentrace nevodného rozpouštědla ke snížení aktivity vody.
Stabilizační působení nikotinamidu je však nezbytné k dosažení farmakologíckého účinku.
·* · ♦· »» ·· ·· ··· *·»· *«·« ···« ·· ·,·«.· • · ·«·· « · « « t * ·· « • · · · · . ···· • · < «< * I »« * « · *
Tabulka 1
Stálost roztoků antidu o,lmg/ml při pH 2.3.4Teplota +4 á -20°C
-20°C +4°C
Test T=0 5W 5W 12W
pH=2
c :istols(%) 99.60 87.50 98.80 98.20
pH=3
c 1 StotíSv'^) 99.60 93.50 99.40 99.10
pH=4
c iatO-ta, ’/o) 99.50 99.30 99.2 99.20
Tabulka 2
Stálost roztoků antidu O,lmg/ml při pH 2,3,4,teplota +25°a +40°C
+25°C +40°C
Test T=0 5W 12W 5W 12W
pH=2
v- q istota (%) 99.6 95.8 92.0 83.4 65.0
pH=3
č istota (%) 99.6 99.0 98.8 97.7 · 95.6
-
pH=4
Č istota (%) 99.5 99.6 99.4 99.4 99.1
*· »· ·· · • · · • · · · • · ···· · • · 9 • · 9
9
0 0
9
9900
9 9
9 9
9 0
9 9
99
Tabulka 3
Rozpustnost antidu ve WFI
Antid,přidané množství mg/ml Vzhled pH (mg/ml) Rozpustnost
50 gel ND ND
10 opalescence 4.40 8.13
1 čirý 5.00 1.00
Tabulka 4
Rozpustnost antidu ve WFI + 4% kyselina octová
Antid, pni dané množství Vzhled pH
100 gel ND
50 gel ND
33 gel ND
25 opalescence 3.18
Tabulka 5
Rozpustnost antidu ve WFI + 296 kyselina octová
Antid,přidané množství mg/ml-------- , ‘ Vzhled pH
40 gel .....................ND ~.............
20 opalescence 3.31
10 - 1 - - . 3.31
čirý
• ···· · ·
Tabulka 6
Rozpustnost antidu ve fyziologickém roztoku NaCI + 1% kyselina oorová
Antid,přidané množství mg/ml Vzhled pH
10 gel ND
5 opalescence 3.12
Tabulka 7
Vliv pH na rozpustnost antidu ve fyziologickém roztoku Na Cl
Antid,přidané množstv mg/ml [ pH - - Vzhled Rozpustnost
1 5.04 Opalescenc 0.025 a
10 4.61 gel ND
10 3.01 Opalescenc 3 2.23
Tabulka 8
Vliv 1,5% hydrotropních látek na rozpustnost antidu ve fyziologickém roztoku NaCI
Antid,přidané množství mg/ml Hydrotropní látka pH Vzhled Rozpustnosti g/ ntl)
10 nicotinamidf 4.89 gel ND
10 saccharin 4.61 ' gel ND
10 salicylát sodný 5.08 gel ND
10 thiamin. hydrochloriď 3.94 gel ND
• · 4
4
4 · a φ • · · · • · · • · · ·
Tabulka 9
Vliv 15% hydrotropních látek na rozpustnost antidu ve fyziologickém roztoku Na Cl
Antid, přidané množství mg/ml Hydrotropní látka pH Vzhled Rozpustnos(mg/rnl)
5 niitotinamid 5.79 opalescen.ce 3.32
5 salicylát sodný 5.81 opalescente 0.21
5 thiamin hydrochlorid ; 3.30 opalescence 3.01
5 benzoát sodný 6.69 opalescence 0.072
5 histidinhydrochlorid ; (5%) 4.17 opalescence 0.076
5 f^nylalanin (1.7%) 4.59 opalescence 0.066
Tabulka 10
Vliv koncentrace nikotinamidu na rozpustnost antidu ve fyziologickém roztoku NaCl
Antid,'přidaně množství mg/ml NkOtinamid (%) PH Vzhled.....í íožpushnost(mg/mi)
1 5 ND opalescence 0.47
5 10 5.68 opalescence 1.40
5 15 5.76 opalescence 3.23
10 20 5.64 opalescence 8.49
• · • · • · * ···· · ·
25__
Tabulka 11
Stálost prostředků s obsahem nikotinamid/antid při 4°, 25° a 40°
+4°C +25 °C +40°C
antiď (mg/ml) Nicotinamid (%) T=0 1W 4W 12W 1W 4W 12W 1W 4W 12W
1 5 1.0 ND 0.9 1.0 0.9 0.9 1.0 1.0 0.9 1.0
1 25 1.0 ND 1.0 1.1 1.0 1.0 l.l 1.0 1.0 1.1
10 5 9.7 10.3 10.0 10.5 gel gel gel gel gel gel
10 25 9.8 ND 10.1 ND 9.8 9.5 11.1 10.7 9.4 10.2
Tabulka 12
Vliv ředění 1:3 roztoků antidu 15% hmot. nikotinamidu v PBS
Ant. 5mg/ml nik 15% Ant. 4mg/ml nik.. 15% Ant. 3 mg/ml nik. 15% Ant. 2mg/ml íikl 15% Ant. 1 mg/ml nik. 15%
Čas (min) Ředění 1:3 (PBS) Ředění 1-3 (PBS) Ředění P3 (PBS) ředění 1;3 (PBS) ředění j i;3 (PBS)
0 opalescerpe opalescen ce Čirý čirý čirý
5 sraženina sraženina Sirý čirý Sirý
15 sraženina sraženina: opalescence čirý Sirý
30 sraženina sraženina sraženina čirý Sirý
60 sraženina sraženina sraženina čirý sirý
120 sraženina sraženina sraženina čirý Sirý
180 sraženina sraženina sraženina čirý Čirý
Tabulka 13
Rozpustnost hGRF._ve vodných roztocích nikotinamidu
Roztoky F ocáteční pH Bod srážení (pH).
GRF (5 mg/ml v Η2ΟρίφΗ 3) 4.93 10.09
GRF (20 mg/ml v H2O při pH, 3) 4.94 7.20
GRF (5 mg/ml v H2O při pH 3 5% nicotinamid:) 5.65 12.28
GRF (20 mg/mlv H2G při pH 3 5% nicotinamid') .. 5.30 10.10
GRF (5 mg/ml v H2O pPi pH 3 20% nicotinamid^ 6.76 12.01
GRF (20 mg/mlv ,H20 při pH 3 20% nicotinamid ) 5.52 12.38
Vysvětlivky pro zkratky v tabulkách 1 až 13 5 ND = nestanoveno, W = týdny, Temp = teplota, WFI = voda pro inj. podání
Ant. = antid, nik.= nikotinamid
Tabulka 14
Stabilita při +40°C pro roztoky GRF (2mg/ml)”+ nikotinami d :po úpravě na pH 7,5
1 tvden Plochv pod vrcholv oři chromatografii (%) v pořadí eluce..
% Nikotinamidi rtr= 0.76 p-Asp8 TD t ΙΛ T3 GJ Succ-N8 ? GRF1-29 Succ-D3 + Asp 8
0 0.8 16.7 3.8 0.3 68.0 nr 5.2
5 0.5 13.4 3.5 0.3 73.9 0.9 3.9
20 0.5 11.5 3.6 0.3 77.1 0.9 3.1
4 týdny Plocha pod vrcholy při chromatograf i i (%)
% Nikotinamidi rtr= 0.76 P-Asp8 P-Asp3 Succ-N8 ? GRF1-29 Succ-D3 ? + Asp8
0 6.2 37.8 5.7 2.7 22.2 2.9 10.4
5 4.9 33.3 6.4 1.9 31.5 2.4 9.0
20 4.2 28.6 7.5 2.1 39.5 2.6 7.6
Tabulka 15
Stálost při +4 c pro roztoky hGRF (2mg/ml) + nikotinamid po úpravě na pH 7,5 • · · • · · * • · ·♦·<
• · · ♦ · ·
Plochv Dod vrcholv jeři chromatoarafii (°/o] v nořafh ρΊπγα -
% Nicotinamid 4-29? β-Asp8 β-Asp3 Succ-N8 ? GRF1-29 Succ-D3 ? + Asp5
Gsr 0 0.1 0.2 0 0.3 97.6 nr 0.6
4 týdny
0 0 1.4 0.1 0.1 95.4 nr 0.8
5 0 0.9 0.1 0 96.8 nr 0.6
20 0 0.8 0.1 0 97.4 nr 0.6
8 ťvdnú
0 0 2.4 0.2 0.1 93.2 nr 1.1
5 0 1.5 0.2 0.1 95.8 nr 0.9
20 0 1.4 0.2 0.1 96.3 nr 0.8
12 týdnů
0 1.06 3.39 0.27 0.07 89.9 nr 1.29
5 0.28 2.12 0.26 0.11 94.0 nr 0.97
20 0.15 1.95 0.26 0.10 95.1 nr 0.97
Vysvětlivky pro zkratky v tabulkách 14 a 15
O nr= nerozděleno. Succ-i)3 + Asp . se mohou vymývat v překrývajících se vrcholech ? = nutná další charakterizace k. potvrzení identity vrcholu 10 rtr= poměr dob re tence
• · • · · • · · · ·
Tabulka 16'
Stálost při +4°C pro roztoky hGRF (5mg/ml)v propylenglykolu + níkotinamid po úpravě na pH 7,5
itýden 4°( . P-lg-Qř 1Y_rod_VFChol.V PjM chrnrnflfnapflf-i i nnhartn c. t
% Ni lotinamidí Met-Ox β-Asp8 Succ-N8 Í-29OH GRF1-29 Succ-D3 + Asp8 rtr 1.07
bulk 1299201 0.04 0 0.6 0.3 97.7 0.4 0.4 0
0 0.2 0 0.2 0.4 95.4 0.5 1.0 -
20 0.3 0 0.4 0.4 97.5 0.4 0.7 ' -
2. týden 4°C Plochy pod vrcho.lv nři <?h rornatncfňfi i ( %) v pořadí el
-pokračování rtr 1.08 rtr 1.11 rtr 1.13 rtr 1.17 rtr 1.18“ rtr 1.20 rtr 1.23 rtr 1.39
0 0.2 0.2 0.4 - 0.9 0.4 0.1
20 - - - - 0.3 0.2 • 0.2
týdnv 4°C- Plochy pod vrcholy nri chromatnor >« f*i i (
% Nicotinamid Met-Ox P-Asp8 Succ-Ň8 ' 1-29OH GRF1-29 —--- - ,.» ,,--- Succ-D3 + Asp8 rtřT.07
0 0.1 0 0.2 0.3 95.0 0.4 0.9 0.4
20 0.4 0 0.3 0.3 97.1 0.4 1.0 0.1
4 týdny 4UC Plochy pod vrcholy pri chromatoerrafii (Sál v pořadí e'
pokračování rtr 1.08 rtr 1.11 rtr 1.13 rtr 1.17 rtr 1.18 rtr 1.20 rtr 1.23 rtr 1.36
0 0.2 0.6 - 1.6 - 0.3 0.1
20 0.1 0.1 - 0.1 • 0.1
8 týdnů 4 C Plochy pod vrcholy při chromatopr ‘afii (%} v pořadí. _el
% Nicotinamid» Met-Ox β-Asp8 Succ-N8 1-29OH GRF1-29 Succ-D3 + Asp8 rtr 1.07
0 0.3 0 0.2 0.3 92.2 1.2 nr 0.7
20 0.5 0 0.3 0.3 95.7 1.8 nr 0.1
IL-týdnu 4°G Plochy pod vrcholv dpi ch omatcCTcsfi-i /ishv poradí elu
pokračování rtr 1.10 rtr 1.11 rtr 1.13 rtr 1.17 rtr 1.18“ rtr 1.20 . ' rtr 1.23 rtr 1.36
0 0.5 0.9 - 2.6 - 0.5 - 0.1
20 0.1 0.1 - 0.2 - 0.1 - 0.1
Tabulka 17
Stálost při t 40°C pro roztoky hGRF (5mg/ml) v propylengly kolu + nikotinamid pó''úpravě na pH 7,5
1 tvden 40° 0 Plochy pod vrcholy oři ohromat-orrrafu i (%) v pořadí eluc
% Nicotinamid Met-Ox β-Asp8 Succ-N8 1-29OH GRF1-29 Succ-D3 + Asp8 rtr 1.07
0 0.3 0 0 0.1 82.9 1.1 1.2 -
20 1.6 0 0.3 0.2 88.0 1.3 1.6 -
1 týden 40^ 0 Plochy pod vrchol·' / Při chromatograf i i (%) v pořadí rí i
pokračování rtr 1.08 rtr 1.11 rtr 1.13 rtr 1.17 rtr 1.18 rtr 1.20 rtr 1.23 rtr 1.39 .
0 0.5 3.2 1.4 0.3 3.9 2.6 1.37 0.3
20 0.3 1.4 0.4 0 1.8 1.0 1.2 0
4 týdny 40C Plochy pod'vrcholy. při chromatografií (%) v pořadí eluc
% Nicotinamidi Met-Ox β-Asp8 Succ-N8 1-29OH GRF1-29 Succ-D3 + Asp8 rtr 1.07
0 0.5 0 0 0 44.6 1.7 1.5 15.1
20 . 10.9 0.9 0 0-4 43.1 1.3 4.2 10.3
4 týdny 40C Plochy pod vrcholy při chromatografií (%) v pořadí eluc
pokračování rtr 1.08 rtr 1.11 rtr 1.13 rtr 1.17 rtr 1.18 rtr 1.20 rtr 1.23 jiné
0 15.3 8.4 1.4 3.4 1.4 2.1 1.2 3.4 (n=8)
20 8.9 4.3 - 2.5 2.0 2.0 0.9 8.4 (n=7)
n= po'Čet .přídatných vrcholů v chromatografií
Tabulka 18
Stálost při +4°C pro roztoky hGRF (lOmg/ml) v 60% propylenglykolu + 20% nikotinamidu, 20% H20 po úpravě na pH 7,5
Plochy pod vrcholy při chromatografii (%) v pořadí elu<
GRF 1-29 Oxidační vrz^bnl y > ( 4-29 ? VT β-Αβρδ β-Αδρ3 Succ-N8 Succ-D3 + Asp8
poměr RT 0.65 - 0.67 ' 0.87 0.89 0.96 0.98 1.06
T=0 98.17 0.07 - 0.07 - 0.04 . 0.38 0.60
4 tý dny 97.97 0.06 - 0.07 0.03 0.03 0.03 0.28 0.84
& týdnů 97.97 0.07-0.11 0.03 0.04 0.03 0.21 0.93
_12 týdnů 97.62 0.07 - 0.07 0.08 0.06 0.09 0.16 0.93
Tabulka 19
Stálost při + 25°C pro roztoky hGRF (lOmg/ml) v 60% propylenglykolu + 20% nikotinamidu, 20% H20 po úpravě na pH 7,5
Plochy pod vrcholy při chromatografií
GRF 1-29 Oxidační vrcholy % 4-29 ? 3-Asp8 P-Asp3 Succ-N8 Succ-D3 + Asp8
Poměr RT 0.65 - 0.67 0.87 0.89 0.96 0.98 1.06
T=0 98.17 0.07 - 0.07 - 0.04 - 0.38 0.60
4 týdny 96.28 0.08 - 0.09 0.03 0.27 0.85 0.15 1.34
8 týdnů 93.69 0.12-0.15 0.03 0.47 2.34 0.08 1.57
12 týdnů 90.94 0.12-0.14 0.10 0.60 3.54 0.10 1.73
Tabulka 20
Stálost při +40°C pro roztoky hGRF (lOmg/ml) v 6o% propylenglykolu + 20% nikotinamidu, 20% HgO po úpravěna'pH 7,5
Plochv pod vrchole při chromatoprafi i(%)
GRF 1-29 Oxidační vrcholv °k rtr= 0.76 P-Asp8 3-Asp3 Succ-N8 Succ-D3 + Asp8
T=0 98.17 0.07 - 0.07 - 0.04 - 0.38 0.60
4 týdny 84.06 0.15-0.16 0.22 1.75 8.59 0.10 2.18
Succ-D3 + Asp se mohou vymývat jako ne.rozdělený vrchol • 444 · · · · · · · • ······* 9 9 9 9 99 · ··< «99 9999 ·· · 44 9499 99 99
Literatura:
Bongers, J., et al., Int. J. Peptide. Protein Res. 39, 364-374, 1992;
Cannon I.B., J. Pharm. Sci., 84, 953-958, 1995;
Felix A.M. et al., Peptides, editors: Giralt E. and Andreu D., pp 732-733, Escom Publishers 1991;
Friedman, A.R. et al., Int. J. Peptide. Protein Res., 37, 14-20, 1991;
Golightly L., et al., Med. Toxicol., 3, 128-165, 1988;
Graham C.W. et al., Anaesthesia & Analgesia, 56, 409-13, 1977;
Jain N.K. et al., The Eastern Pharmacist, November, 51-54, 1986 Physicians Desk Reference, Librium monograph, 47th Edition, 1993;
Leone Bay A, et al., J. Med. Chem., 39(13), 2571-2578, 1996;
Maa Y.F. et al., Int. J. Pharm., 140 (2): 155-168, 1996;
Rasool et al., J. Pharm. Sci., 80(4), 387- 393, 1991;
Sasaki H., Biol. Pharm. Bull. (Japan), 18/1, 169-171, 1995;
Serono Symposia USA, Growth hormone secretagogues, Chapter 3, editors, B.B. Bercu & R.F. Walker, Springer-Verlag, New York, 1996;
Spiegel A.J. et al., J. Pharm. Sci., 52, 917-927, 1963;
Wang Y-C.J. et al., J. Pareníer. Drug Assoc., 34, 452-462, 1980;
Yalkowsky S .H. et al., Drug Int. Clin. Pharm., 11, 417-419, 1977;
Yalkowsky S.H. et al., J. Pharm. Sci., 74, 416-412, 1986.

Claims (12)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje a) jako účinnou složku peptid, obtížně rozpustný ve fyziologickém roztoku chloridu sodného a b) neiontovou aromatickou hydrotropní farmaceuticky přijatelnou látku a c) fyziologický vodný roztok.
  2. 2. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako peptid a) obsahuje analog LHRH nebo peptid GRF.
  3. 3. Farmaceutický prostředek podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že jako peptid a) obsahuje látku, antagonizující LHRH.
  4. 4. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    3, vyznačující se tím, že jako peptid a) obsahuje antid nebo lidský GRF.
  5. 5. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    4, v němž se neiontová aromatická hydrotropní látka volí ze skupiny nikotinamid, kyselina nikotinová, kyselina benzoová, salicylová, gentisová nebo askorbová, histidin, tryptofan, fenylalanin, tyrosin, kresol, fenol, xanthiny, pyridoxin, kyselina listová, sacharin a neiontové deriváty těchto látek.
  6. 6. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až 25
    5, vyznačující se tím, že jako neiontovou aromatickou hydrotropní látku obsahuje nikotinamid.
  7. 7. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    6, vyznačující se tím, že je v lyofilisované
    30 rekonstituovatelné formě a obsahuje stabilizační látky.
    • 99 *· ·· 99 99 • 99 9999 9999
    9 9 9 9 99 9 9999
    9 9 9999 99 9 9 99 99 9 *· 9 «99 9999 ·· 9 99 9999 99 99
  8. 8. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    7, vyznačující se tím, že dále obsahuje propylenglykol.
  9. 9. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    8, vyznačující se tím, zejeve formě pro parenterální, perorální podání nebo pro podání nosní sliznicí nebo inhalací do plic.
  10. 10. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    IQ 9, vyznačující se tím, že dále obsahuje nejméně jednu farmaceuticky přijatelnou pomocnou látku.
  11. 11. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 1 až
    10, vyznačující se tím, že je ve formě, vhodné pro injekční podání.
  12. 12. Farmaceutický prostředek podle nároku 10, vyznačující se tím, že v jednom mililitru vodné fáze' obsahuje 0,1 až 2,0 mg antidu nebo hGRF, 10 až 300 mg nikotinamidu a 0 až 800 mg propylenglykolu.
CZ0423199A 1997-05-28 1998-05-26 Farmaceutický prostredek CZ298825B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP97108593A EP0880968A1 (en) 1997-05-28 1997-05-28 Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium
EP97121246A EP0880969A1 (en) 1997-05-28 1997-12-03 Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ423199A3 true CZ423199A3 (cs) 2000-05-17
CZ298825B6 CZ298825B6 (cs) 2008-02-20

Family

ID=26145485

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0423199A CZ298825B6 (cs) 1997-05-28 1998-05-26 Farmaceutický prostredek

Country Status (27)

Country Link
US (1) US6331520B1 (cs)
EP (2) EP0880969A1 (cs)
JP (1) JP2002502384A (cs)
KR (1) KR100552546B1 (cs)
CN (1) CN1159062C (cs)
AR (1) AR012868A1 (cs)
AT (1) ATE252909T1 (cs)
AU (1) AU743152B2 (cs)
BG (1) BG64668B1 (cs)
BR (1) BR9809708A (cs)
CA (1) CA2291765A1 (cs)
CZ (1) CZ298825B6 (cs)
DE (1) DE69819322T2 (cs)
DK (1) DK0984788T3 (cs)
EA (1) EA002227B1 (cs)
EE (1) EE04001B1 (cs)
ES (1) ES2210772T3 (cs)
HK (1) HK1029928A1 (cs)
IL (2) IL133176A0 (cs)
NO (1) NO323697B1 (cs)
NZ (1) NZ500777A (cs)
PL (1) PL192647B1 (cs)
PT (1) PT984788E (cs)
SI (1) SI0984788T1 (cs)
SK (1) SK284640B6 (cs)
TR (1) TR199902865T2 (cs)
WO (1) WO1998053844A1 (cs)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8343186B2 (en) 2004-04-06 2013-01-01 Arthrex, Inc. Fully threaded suture anchor with transverse anchor pin
EP1064934A1 (en) 1999-06-30 2001-01-03 Applied Research Systems ARS Holding N.V. GRF-containing lyophilized pharmaceutical composition
US20020061838A1 (en) * 2000-05-17 2002-05-23 Barton Holmquist Peptide pharmaceutical formulations
US20040229334A1 (en) * 2003-05-15 2004-11-18 Mendoza Christine B. Process for manufacture of nematode-extracted anticoagulant protein (NAP)
EP2142207A4 (en) * 2007-04-04 2013-01-16 Theratechnologies Inc PHARMACEUTICAL FORMULATIONS OF GHRH MOLECULES
JP6224586B2 (ja) 2012-07-10 2017-11-01 武田薬品工業株式会社 注射用製剤
US9107853B2 (en) 2012-10-12 2015-08-18 L'oreal S.A. Compositions containing phenolic compounds and hydrotropes for cosmetic use
JP6295261B2 (ja) * 2012-10-12 2018-03-14 ロレアル 少なくとも一種のヒドロトロープ及び少なくとも一種の活性化合物を含む化粧品組成物
US9018177B2 (en) 2012-10-12 2015-04-28 L'oreal S.A. Cosmetic compositions for increasing bioavailability of the active compounds baicalin and/or vitamin C
US9072919B2 (en) 2012-10-12 2015-07-07 L'oreal S.A. Synergistic antioxidant cosmetic compositions containing at least one of baicalin and taxifolin, at least one of caffeine and nicotinamide, at least one of vitamin C and resveratrol and ferulic acid
US9023826B2 (en) 2012-10-12 2015-05-05 L'oreal S.A. Compositions containing adenosine and the hydrotropes caffeine and nicotinamide for cosmetic use
US9669242B2 (en) 2013-07-01 2017-06-06 L'oreal Compositions containing at least two phenolic compounds, a lipid-soluble antioxidant and at least one hydrotrope for cosmetic use
JP6634758B2 (ja) * 2015-09-25 2020-01-22 ニプロ株式会社 液体組成物及び凍結乾燥製剤
JP7030720B2 (ja) 2016-02-16 2022-03-07 ストロングブリッジ ダブリン リミテッド 先端巨大症、先端巨大症がん、ｓｓｔ－ｒ５発現腫瘍、２型糖尿病、高血糖症、及びホルモン関連腫瘍の治療において使用するための、生理学的条件において難溶性であるベルドレオチド

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4563352A (en) * 1982-10-04 1986-01-07 The Salk Institute For Biological Studies Human pancreatic GRF
US4935491A (en) * 1987-08-24 1990-06-19 Board Of Regents, The University Of Texas System Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine
EP0374120A3 (en) * 1988-12-13 1991-07-31 Monsanto Company Comosition for controlled release of polypeptides
DE69019534T2 (de) * 1989-12-21 1995-09-21 Novo Nordisk As Insulinzubereitungen, die nikotinsäure oder nikotinamid enthalten.
AU653026B2 (en) * 1991-06-07 1994-09-15 Teikoku Seiyaku Kabushiki Kaisha Physiologically active polypeptide-containing pharmaceutical composition
US5487898A (en) * 1991-08-26 1996-01-30 Abbott Laboratories Compositions and method for the sublingual or buccal administration therapeutic agents
ES2153362T3 (es) * 1991-08-26 2001-03-01 Abbott Lab Composiciones y procedimientos de administracion sublingual o bucal de agentes terapeuticos.
US5446025A (en) * 1992-06-12 1995-08-29 Abbott Laboratories Formulations and method of the percutaneous administration of leuprolide
CA2123144A1 (en) * 1993-05-10 1994-11-11 David Bodmer Stabilisation of pharmacologically active compounds in sustained release compositions
TW280770B (cs) * 1993-10-15 1996-07-11 Takeda Pharm Industry Co Ltd
WO1996010417A1 (en) * 1994-10-04 1996-04-11 Novo Nordisk A/S PREPARATIONS CONTAINING AspB28 HUMAN INSULIN AND NICOTINAMIDE
KR100236393B1 (ko) * 1996-02-02 1999-12-15 나까니시 히로유끼 사람성장호르몬을 함유하는 의약제제

Also Published As

Publication number Publication date
ATE252909T1 (de) 2003-11-15
DE69819322D1 (de) 2003-12-04
US6331520B1 (en) 2001-12-18
SI0984788T1 (en) 2004-02-29
CZ298825B6 (cs) 2008-02-20
DK0984788T3 (da) 2004-03-08
AU8106298A (en) 1998-12-30
EE04001B1 (et) 2003-04-15
JP2002502384A (ja) 2002-01-22
EP0984788A1 (en) 2000-03-15
AR012868A1 (es) 2000-11-22
EE9900545A (et) 2000-06-15
EP0880969A1 (en) 1998-12-02
CN1159062C (zh) 2004-07-28
WO1998053844A1 (en) 1998-12-03
NO995763D0 (no) 1999-11-24
AU743152B2 (en) 2002-01-17
TR199902865T2 (xx) 2000-05-22
EA002227B1 (ru) 2002-02-28
ES2210772T3 (es) 2004-07-01
PL192647B1 (pl) 2006-11-30
BR9809708A (pt) 2000-07-11
PT984788E (pt) 2004-01-30
SK159799A3 (en) 2000-07-11
NO323697B1 (no) 2007-06-25
NZ500777A (en) 2001-09-28
EA199901089A1 (ru) 2000-06-26
SK284640B6 (sk) 2005-08-04
HK1029928A1 (en) 2001-04-20
PL336982A1 (en) 2000-07-31
BG64668B1 (bg) 2005-11-30
CN1263469A (zh) 2000-08-16
NO995763L (no) 1999-11-24
IL133176A0 (en) 2001-03-19
EP0984788B1 (en) 2003-10-29
CA2291765A1 (en) 1998-12-03
BG103884A (en) 2000-07-31
DE69819322T2 (de) 2004-07-29
IL133176A (en) 2006-08-01
KR20010012253A (ko) 2001-02-15
KR100552546B1 (ko) 2006-02-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2003217367B2 (en) Polymer-based compositions for sustained release
EP1136068B1 (en) Powder containing physiologically active peptide
CZ423199A3 (cs) Farmaceutický prostředek
JP2003519195A (ja) Ｇｌｐ−２製剤
HU225691B1 (en) Aqueous formulations of peptides
KR100633280B1 (ko) 약제학적 활성 펩티드의 서방형 투여 형태 및 이의 제조 방법
JP2022535556A (ja) Ｇｌｐ１／２二重アゴニストの非経口医薬組成物
US8431534B2 (en) GRF-containing lyophilized pharmaceutical compositions
EP1297850B1 (en) Medicinal preparations for treating sex hormone-dependent diseases
EP0880968A1 (en) Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium
MXPA99010863A (en) Pharmaceutical compostions of peptides having low solubility in physiological medium
AU2005200879B2 (en) GRF-containing lyophilized pharmaceutical compositions

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 19980526