CZ301504B6 - Benzimidazolové deriváty - Google Patents

Abstract

Predkládaný vynález se týká konkrétních benzimidazolových derivátu a jejich farmaceuticky prijatelných solí a jejich použití pri lécbe zánetlivých, alergických, respiracních, kardiovaskulárních nemocí nebo nemocí metabolismu kostí a chrupavek.

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká benzimidazolových derivátů, zejména benzimidazolových derivátů užitečných jako inhibitory aktivity lidské chymázy.

io Dosavadní stav techniky

Chymáza je jedna z neutrálních proteáz, nacházejících se v žímých buněčných granulích a výrazně se podílí na radě biologických procesů, kterých se zúčastní Žímé buňky. Uvádí se řada účinků, včetně například podpory degranulace žímých buněk, aktivace ínterleukinu-1 β (IL! β), aktivace matricové proteázy, dekompozice fibronektinu a kolagenu typu IV, podpora uvolnění transformačního růstového faktoru-β (TGF-β), aktivace substance P a vasoaktivního intestínálního polypeptidů (VIP), konverze angiotensinu 1 (Ang I) na Ang II, konverze endothelinu a podobně,

Shora uvedené indikuje, že inhibitory aktivity uvedené chymázy mohou být nadějné jako preventivní a/nebo terapeutická činidla pro nemoci dýchacích orgánů, jako je bronchiální astma, zánět a alergické nemoci, například alergická rinitida, atopická dermatitida a kopřivka, kardiovaskulární, například skierozitující vaskulámí leze, vasokonstrikce, porucha periferní cirkulace, renální selhání a srdeční selhání, nemoci metabolismu kostí a chrupavek jako je revmatická artritida a osteoartritida.

Jako inhibitory aktivity chymázy jsou známé deriváty triazinu (japonská patentová přihláška bez průzkumu 8-208654), deriváty hydantoinu (japonská patentová přihláška bez průzkumu 9-31061), deriváty imidazolidinu (přihláška PCT WO 96/04248), deriváty chinazolinu (přihláška

PCT WO 97/11941), deriváty heterocyklických amidů (přihláška PCT WO 96/33974), cefamové sloučeniny (japonská patentová přihláška bez průzkumu 10-087493), fenolové deriváty (japonská patentová přihláška bez průzkumu 10-087567), heterocyklické amidové sloučeniny (mezinárodní patentová přihláška WO 98/18794), acetoamidové deriváty (mezinárodní patentová přihláška WO 98/09949) heterocyklické amidové sloučeniny (japonská patentová přihláška bez průzkumu 10-007661), deriváty anhydridu kyselin (japonská patentová přihláška bez průzkumu 11-049739), heterocyklické amidové sloučeniny (mezinárodní patentová přihláška WO 99/32459) a acetamidové deriváty (mezinárodní patentová přihláška WO 99/41277). Nicméně, struktury těchto sloučenin se podstatně liší od sloučenin podle předkládaného vynálezu.

Popsané inhibitory chymázy mají nízkou užitečnost, což je důsledkem jejich neadekvátní aktivity nebo strukturní nestabilnosti. Avšak sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají extrémně vysokou aktivitu a vykazují vynikající kinetiky v krvi, což je činí užitečnými jako léčiva.

Na druhé straně, sloučeniny známé ve stavu techniky blízké sloučeninám podle předkládaného vynálezu jsou popsány v americkém patentu US 5 124 336. Uvedený dokument popisuje benzimidazolové deriváty mající aktivitu antagonizující tromboxanový receptor. Nicméně sloučenina popsaná v uvedeném dokumentu neuvádí heteroaryl ovou skupinu substituovanou v benzimidazolovém skeletu a rovněž se neuvádí žádná aktivita uvedených sloučenin spočívající v inhibici lidské chymázy. Dále, ačkoli je benzimidazolová sloučenina popsaná jako činidlo proti rakovině v japonské bezprůzkumové přihlášce 01-265089, tato přihláška neuvádí inhibiční aktivitu vůči lidské chymáze.

- 1 C7. 301504 CZ

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezuje poskytnutí nových sloučenin, které jsou silnými a klinicky aplikovatelnými inhibitory lidské chymázy.

Předmětem vynálezu jsou především následující benzimidazolové deriváty

CZ 301504 CZ a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Dále je předmětem vynálezu také farmaceutický prostředek obsahující alespoň jeden benzimidazolový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl a farmaceuticky přijatelný nosič.

Benzimidazolový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli lze mnohostranně použít v medicíně a to např. pro léčení zánětlivých nemocí, alergických nemocí, respiračních nemoci, kardiovaskulárních nemocí nebo nemocí metabolismu kostí a chrupavek.

ΓΊΑΐα Unrlo tontn η<ιlťi-7 nnncQn rwwlmHnAii

I^VLIV vylito » jiiLuvt, v .

io

Detailní popis vynálezu

Po intenzivním výzkumu s cílem dosáhnout shora uvedený předmět, přihlašovatelé předkládaného vynálezu nalezli benzimidazolový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, představovaný následujícím obecným vzorcem 1, který má strukturu, která je naprosto odlišná od známých sloučenin atak kompletovali předkládaný vynález:

r^2XXx (1), kde R^l a R², současně nebo nezávisle představují atom vodíku, atom halogenu, trihalomethylovou 20 skupinu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo R¹ a R² společně tvoří -O-CHr-O-. -O-CH^-CIE-O- nebo

CK₂ C1E CH_?- (tyto skupiny mohou být substituovány jednou nebo více alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 4 atomy uhlíku);

A znamená substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární, cyklickou nebo rozvětvenou alkylenovou skupinu nebo alkeny lenovou skupinu, obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, která může být přerušena jednou nebo více skupinami O--. -S-, -SO₂- a -NR³- (kde R³ znamená atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku); kde substituent, který může být vázán k těmto skupinám se vybere ze souboru, který tvoří atom halogenu, OH, NO₂, CN, lineární nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alkoxyskupina obsahující I až 6 atomů uhlíku (včetně případu, kdy dvě sousední skupiny tvoří acetylovou vazbu, jmenovitě včetně případu, kdy alkylové části geminálních dvou alkoxyskupin jsou vázány za vzniku kruhu), lineární nebo rozvětvená alkylthioskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alky (sulfonylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylskupina, obsahující l až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylaminoskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, trihalomethylová skupina, trihalomethoxyskupina. fenylová skupina, oxoskupina, fenoxyskupina, která může být substituována jedním nebo více atomy halogenu, a kde jeden nebo více substituentů může být nezávisle vázáno k volitelně poloze alkylenové nebo alkenylenové skupiny, svýjim40 kou, že případ, kdy M je jednoduchá vazba a hydroxylová skupina a fenylová skupina jsou současně vázány jako substituenty k těm atomům uhlíku, které jsou vázány k M je vyloučen;

E znamená -COOR³, -SOjR³, CONHR \ -SO?NHR^J, tetrazol-5-ylovou skupinu, 5-oxo--1,2,4- oxadia/.ol-3-ylovou skupinu nebo 5 oxo- 1.2,4-thiadiazol 3-ylo\ou skupinu (kde

R³ má význam uvedený shora);

-3CZ 301504 CZ

G znamená substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární nebo rozvětvenou alkylenovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, která může být přerušena jednou nebo více skupinami

-O-. -S-, -SO₂- a -NR- (kde R³ má význam uvedený shora. Kde tyto atomy nebo atomové skupiny pokud existují, potom nejsou přímo vázané k benzimidazolovému kruhu); a kde substi5 tuent, který může nést uvedená alkylenová skupina se vybere ze souboru, který tvoří atom halogenu, OH, NO₂, CN, lineární nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku (včetně případu, kde dvě sousední skupiny tvoří acetalovou vazbu), trihalomethylová skupina, trihalomethoxyskupina, fenylová skupina nebo oxoskupina;

M znamená jednoduchou vazbu nebo skupinu -S(O)_m-, kde m je celé číslo 0 až 2;

J znamená substituovanou nebo nesubstituovanou heterocyklickou skupinu obsahující 4 až 10 atomů uhlíku a obsahující jeden nebo více heteroatomu vybraných ze skupiny, kterou tvoří atom kyslíku, atom dusíku a atom síry v kruhu, s podmínkou, že imidazolový kruh a nesubstituovaný pyridinový kruh jsou vyčleněny; a kde substituent. který může nést uvedená aromatická heterocyklická skupina se vybere ze souboru, který tvoří atom halogenu, OH, NO₂, CN, lineární nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku (včetně případu, kde dvě sousední skupiny tvoří acetalovou vazbu), lineární nebo rozvětvená alkylthioskupina, obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo alkylsulfonylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylaminoskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná nebo nesubstituovaná ani lidová skupina, trihalomethylová skupina, trihalomethoxyskupina, fenylová skupina, oxoskupina, skupina COOR³ a fenoxyskupina, která může být substituována jedním nebo více atomů halogenu; a jeden nebo více těchto substituentů může být substituováno ve volitelných polohách kruhu; a X znamená methinovou skupinu (—C'H—) nebo atom dusíku.

jo Nej lepší způsob provedení vynálezu

Substituenty ve sloučenině podle předkládaného vynálezu představovaném shora uvedeným obecným vzorcem 1 jsou uvedeny dále.

R¹ a R² mohou být stejné nebo různé a každé nezávisle představuje atom vodíku, atom halogenu, trihalornethylovou skupinu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku. Alternativně R¹ a R² společně tvoří O CH_? O . -O-CHt-CIL-O- nebo -CH₂-CH₂-CH₂-, a v tomto případě mohou být tyto skupiny substituovány jednou nebo více alkylovými skupinami obsahujícími 1 až 4 atomy uhlíku.

Jako specifické příklady al kýlových skupin obsahujících I až 4 atomy uhlíku v R¹ a R² se uvádí methylová skupina, ethylová skupina a n- nebo izopropylová skupina a η-, ίζο-, sek . a terč -butylová skupina, výhodně se uvádí methylová skupina. Jako specifické příklady alkoxyskupin obsahujících 1 až 4 atomy uhlíku se uvádí methoxyskupina, ethoxyskupina, n- nebo izo45 propoxyskupina a η-, ίζο-, sek-, nebo terc-butoxyskupina.

Výhodné příklady R¹ a R zahrnují atom vodíku, atom halogenu, trihalornethylovou skupinu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku. Výhodnější příklady zahrnují atom vodíku, atom halogenu, trihalornethylovou skupinu, kyanoskupinu, alky50 lovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a alkoxyskupinu, obsahující i až 4 atomy uhlíku. Ještě výhodnější příklady zahrnují atom vodíku, atom chloru, atom fluoru, trifluormethylovou skupinu, methylovou skupinu, methoxyskupinu a ethoxyskupinu, zvlášť výhodné příklady zahrnují atom vodíku, methylovou skupinu a methoxyskupinu.

-4CZ 301504 CZ

A znamená substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární, cyklickou nebo rozvětvenou alkylenovou nebo alkeny lenovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku. Jako příklady nesubstituované, lineární, cyklické nebo rozvětvené alkylenové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku se uvádí methylenová skupina, ethylenová skupina, n-· nebo izopropylenová skupina,

2,2-dimethylpropylenová skupina, η-, izo- nebo terc-butylenová skupina, 1,1-dimethylbutylenová skupina, n-pentylenová skupina a cyklohexylenová skupina. Výhodnější příklady zahrnují ethylenovou skupinu, n-propylenovou skupinu, 2,2-dimethylpropylenovou skupinu a n- nebo terc-buty lenovou skupinu. Ještě výhodnější příklady zahrnují n-propy lenovou skupinu a 2 2—dímethvlcropylenovou skupinu. Zejména vvhodnčrn příkladem ie n—nronvlennvá skunina. io Příklady nesubstituované lineární nebo rozvětvené alkylenové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku zahrnují vinylenovou skupinu, propylenovou skupinu, butenylenovou skupinu apentenylenovou skupinu.

Ačkoliv může být uvedená alkylenová nebo alkenylenová skupina přerušena jednou nebo více skupinami -O-, -S-, -SO₂- a -NR³- (kde R³ znamená atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvenou alkylenovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku), tylo atomy nebo atomové skupiny nejsou přímo vázány k M. Specifické příklady zahrnují přerušené ethylenové skupiny, n- nebo terc-buty len ové skupiny. Specifičtější příklady zahrnují -CH2OCH2-, -CH2OCH1CH2-, <H2SCH,-, CH;SCH;CH,, -CH.SO2CH2, <'H;SO;CH;CH- -CH2NR⁴CH220 a -CH₂NR^jCH₂CH₃-. Výhodné příklady zahrnují -CII₂OCH₂-, -CH.SCH.-a -CH.SO.CHr-.

Substituční skupiny, které může nést uvedená alkylenová skupina jsou vy brány ze souboru, který tvoří atom halogenu, OH, NO₂, CN, lineami nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku (včetně případu, kde dvě sousední skupiny tvoří acetalovou vazbu), lineární nebo rozvětvená alkylthioskupina, obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo alkylsu Ifony lová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená aeylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylaminoskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, trihalomethylová skupina, trihalomethoxyskupina, fenylová skupina, oxoskupina, skupina a fenoxyskupina, která může být substituována jedním nebo více atomy halogenu. Jeden nebo více těchto substituentů může být nezávisle vázáno k volitelným polohách alkylenové skupiny nebo alkenylenové skupiny, s výj imkou. že případ, kdy M je jednoduchá vazba a hydroxylová skupina a fenylová skupina jsou současně vázány jako substituenty k těm atomům uhlíku, které jsou vázány k M je vy loučen.

Příklady atomů halogenu zahrnují atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu. Výhodné příklady jsou atom fluoru a atom chloru.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující l až 6 atomů uhlíku zahrnují methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n- nebo izopropylovou skupinu a η-, ίζο-, sek nebo tere-butylovou skupinu, přičemž výhodné příklady jsou methylová skupina a ethylová skupina. Výhodnější je methylová skupina.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkoxyskupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují methoxyskupinu, ethoxyskupinu, n~ nebo izopropoxyskupinu a η- izo-, sek45 a terc-butoxyskupinu, přičemž výhodná je methoxyskupina a ethoxyskupina. Výhodnější je methoxyskupina.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkyIthioskupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují methy Ithioskupinu, ethy Ithioskupinu, n- nebo izopropylthioskupinu a η-, izo-, sek- nebo terc-butylthioskupinu, přičemž výhodná je methylthioskupina a ethylthioskupina. Výhodnější je methylthioskupina.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkylsu Ifony Iskupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují methylsulfonylskupinu, ethylsulfonylskupinu, n- nebo izopropylsulfonylskupinu a

-5CZ 301504 CZ η-, ίζο-, sek- nebo terc-butylsulfonylskupinu, přičemž výhodná je methylsulfonylskupina a ethylsulfonylskupina. Výhodnější je methylsulfonylskupina.

Příklady lineární nebo rozvětvené acylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují acety5 lovou skupinu, ethylkarbonylovou skupinu, n- nebo izopropylkarbonylovou skupinu a nizo-, sek- nebo terc-butylkarbonylovou skupinu, přičemž výhodná je acetylová skupina aethylkarbonylová skupina, Výhodnější je acetylová skupina.

Příklady lineární nebo rozvětvené acylaminové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují io acetylaminovou skupinu, ethy Ikarbony laminovou skupinu, n- nebo izopropy Ikarbony laminovou skupinu a n- izo-, sek- nebo terc-butylkarbonylaminovou skupinu, přičemž výhodná je acetylaminová skupina a ethylkarbonylaminová skupina. Výhodnější je acetylaminová skupina.

Specifické příklady trihalomethylové skupiny jsou triťluormethylová skupina, tribrommethyiová

5 skupina a trichlormethylová skupina. Výhodná je trifluormethylová skupina.

A je výhodně substituovaná nebo nesubstituovaná, lineární, cyklická nebo rozvětvená alkylenová skupina, obsahující 1 až 7 atomů uhlíku {ačkoliv tato skupina může být přerušena jednou nebo více ze skupin -O-, -S-, -SO,- a -NR³- (kde NR³ má význam uvedený shora), přičemž tyto atomy nebo atomové skupiny nejsou přímo vázány k M). Výhodné příklady zahrnují CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂C(=O)CH₂-, -CH₂OCH₂- -ClESCíE-, -CH₂S(=O)CH₂-CH₂CF₂CH,-, -CH,SO₂CH₂- -CH,CH₂CH₂CH₂- -CH₂C(CHJ₂CH₂- -CH,s’o₂CH,CH₂-CH,C(=O)CH,CH₂- -CH,C(-O)(C1IJ₂CH₂- a -CH₂C(O)C(=0)CH₂-. Výhodnější příklady jsou ~-CH,CH₂- -<H₂CH,CH₂- ^CH,C(-O)CI 1,- -<H₂OCH₂~ <H₂SCH₂25 -CH,S(=O)CH,-, <H,CF₂CH,-, ČH₂$O,CH₂- a -CH,Č(CHJ₂CH₂-. Ještě výhodnější příklady jsou -CH,CH,-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH,C(CHJ₂CH₂- Zejména výhodná skupina je -CH₂CH,CH,-.

Jako E se uvádí COOR³, SO2R³, CONHR³, SO2NHR³, tetrazol-5-ylová skupina, 5-oxo-1,2,430 oxadiazol-3-ylová skupina nebo 5-oxo-l,2,4-thiadiazol-3-ylová skupina (kde R³ znamená atom vodíku nebo lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku).

Příklady R³ zahrnují atom vodíku, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n- nebo izopropylovou skupinu a η-, izo-, sek- nebo terc-butylovou skupinu. Výhodné příklady jsou atom vodíku, methylová skupina a ethylová skupina. Zejména výhodný je atom vodíku.

Zejména výhodné příklady skupiny E jsou skupina -COOR³, -SO₂ a tetrazol-5-ylová skupina. Výhodnějším příkladem je skupina COOR'¹, Zvlášť výhodná je skupina-COOH.

G znamená substituovanou nebo nesubstituovanou, lineární nebo rozvětvenou alky lenovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, která může být přerušena jednou nebo více heteroatomy nebo skupinami -O-, -S-, -SO₂- a NR³, kde R³ má význam uvedený shora. Dále, v případě, že G obsahuje tyto heteroatomy nebo skupiny, pak nejsou vázány přímo k benzimidazolo věrnu kruhu. Substituent, který může být nesen touto alkylenovou skupinu je vybrán ze souboru, který tvoří atom halogenu, OH, NO₂, CN, lineární nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku (včetně případu, kde dvě sousední skupiny tvoří aeetalovou vazbu), trihalomethylová skupina, trihalomethoxyskupina, fenylová skupina nebo oxoskupina. Specifické příklady skupiny G zahrnují -CH,CH,- -<H₂-CH₂- -CH₂CCk -<H₂CH,O-, - CH.CONH-, -CO- -SO,-, -CH₂SO,50 -CH₂S- nebo CH,CH,S-, výhodně se uvádí -CH,-, -CH₂-CH₂- -CH,CO- nebo -CH,CH,O-. Zvlášť výhodné příklady jsou -CH,-, -CH₂-CH₂-, zejména výhodná skupina je -CH>- Tylo skupiny jsou vázány na levé straně vzhledem k poloze 1 (atom dusíku) benzimidazolového kruhu, zatímco na pravé straně jsou vázány k J.

-6M znamená jednoduchou vazbu nebo skupinu -S(O)_m- kde m znamená celé číslo 0 až 2.

Výhodné příklady M jsou -S- a -SO?^-· Zejména výhodný příklad je - -S-.

J znamená substituovanou nebo nesubstituovanou heterocyklickou skupinu obsahující 4 až

10 atomů uhlíku a obsahující jeden nebo více heteroatomů vybraných ze skupiny, kterou tvoří atom kyslíku, atom dusíku a atom síry v kruhu, s podmínkou, že imidazolový kruh a nesubstituovaný pyridinový kruh jsou vyčleněny. Dále J je omezeno na skupinu, která se může připravit chemicky.

io Specifické příklady nesubstituovaných heterocyklických skupin, obsahujících 4 až 10 atomů uhlíku a obsahující jeden nebo více heteroatomů v kruhu vybrané ze skupiny, kterou tvoří atom kyslíku, atom dusíku, atom síry a zahrnují furylovou skupinu, thienylovou skupinu, thiazoly lovou skupinu, izoxazoíylovou skupinu, benzofurylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, chinolylovou skupinu, ízochinolylovou skupinu, chinoxalinylovou skupinu, benzoxadiazoly lovou skulí pinu. benzothioazolylovou skupinu, indolylovou skupinu, benzothiazolylovou skupinu, benzothienylovou skupinu a benzoizoxazolylovou skupinu. Výhodným příkladem je bicyklický heterocyklický kruh. Jako výhodnější příklady se uvádí benzofu raný lová skupina, benzimidazolylová skupina, chinolylová skupina, ízochinolylová skupina, chinoxalinylová skupina, benzoxadiazolylová skupina, benzothiazolylová skupina, indolylová skupina, benzothiazolylová skupina, benzo20 thienylová skupina a benzoizoxazolylová skupina, přičemž zejména výhodná je benzothienylová skupina nebo indolylová skupina.

Substituční skupiny, který může nést uvedená aromatická heterocyklická skupina se vyberou ze souboru, který tvoří atom halogenu, OH, NO?, CN, lineární nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující I až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku (včetně případu, kde dvě sousední skupiny tvoří acetalovou vazbu), lineární nebo rozvětvená alkylthioskupina, obsahující I až 6 atomů uhlíku, lineární nebo alkylsůlfonylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, lineární nebo rozvětvená acylaminoskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná nebo nesubstituovaná ani lidová skupina, trihalomethylová skupina, trihalomethoxyskupina, fenylová skupina a fenoxyskupina, která může být substituována jedním nebo více atomy halogenu. Jedna nebo více těchto substitučních skupin může být nezávisle vázána k volitelným polohám kruhu.

Příklady atomů halogenu zahrnují atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu. Výhodné příklady jsou atom fluoru a atom chloru.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n- nebo izopropyfovou skupinu a η- ίζο-, sek- nebo terc-butylovou skupinu, přičemž výhodné příklady jsou methylová skupina a ethylová skupina. Výhodnější je methylová skupina.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkoxyskupiny obsahující Ϊ až 6 atomů uhlíku zahrnují methoxyskupinu, ethoxyskupinu, n- nebo izopropoxyskupinu a n -, izo-, sek - a terc-butoxy45 skupinu, přičemž výhodná je methoxyskupina a ethoxyskupina. Výhodnější je methoxyskupina.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alky lth ioskupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují methylthioskupinu, ethylthioskupinu, n- nebo izopropylthioskupinu a n-. izo~, sek- nebo terc-butylthioskupinu, přičemž výhodná je methylthioskupina a ethylthíoskupína.

Výhodně jší je methy lthioskupina.

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené alkylsul fony Iskupiny obsahující I až 6 atomů uhlíku zahrnují methy lsulfonylskupinu. ethylsulfonylskupinu, n- nebo izopropylsulfonylskupinu a η-, izo-. sek- nebo terč butylsulfonylskupinu, přičemž výhodná je methylsulfonylskupina a ethylsulfonylskupina. Výhodnější je methylsulfonylskupina.

-7 CZ 301504 CZ

Specifické příklady lineární nebo rozvětvené acy lové skupiny obsahující 1 až 6 atomu uhlíku zahrnují acety lovou skupinu, ethy Ikarbony lovou skupinu, n- nebo izopropy Ikarbony lovou skupinu a n-. izo-, sek · nebo terc-butylkarbonylovou skupinu, přičemž výhodná je acetylová skupina a ethylkarbonylová skupina. Výhodnější je acetylová skupina.

Příklady lineární nebo rozvětvené acylaminové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnují aeetylaminovou skupinu, ethylkarbonylaminovou skupinu, n- nebo izopropylkarbonylaminovou skupinu a η-, izo-, sek- nebo terc-butylkarbonylaminovou skupinu, přičemž výhodná je acetylaminová skupina a ethylkarbonylamínová skupina. Výhodnější je acetylaminová skupina.

Specifické příklady trihalomethylové skupiny jsou trifluormethylová skupina, tribrommethylová skupina a trichlormethylová skupina. Výhodná je trifluormethylová skupina.

X znamená skupinu -CH= nebo atom dusíku a výhodně skupinu -Cl 1=.

Výhodné příklady sloučenin představovaných shora uvedeným obecným vzorcem I zahrnují různé skupiny sloučenin složených kombinací těchto skupin shora popsaných ve výhodných příkladech. Ačkoliv neplatí žádné omezení těchto skupin, ty které jsou popsány v následující tabulce jsou zejména výhodné. Zejména výhodné příklady těchto sloučenin v tabulce zahrnují sloučeniny uvedené pod čísly 34, 38, 39, 41, 52, 54, 56,58, 59, 63, 135, 137, 148, 152, 154, 244, 340, 436, 514, 519, 521, 532, 534, 536, 538, 615, 628, 1112 a 1114.

Dále, Al až A3 a JI až J32 jsou v následující tabulce představovány následujícími vzorci. Dále v těchto vzorcích, ačkoliv E, G, M, m a X mají význam jakje uvedeno shora, jsou dále popsány za použití reprezentativních příkladů, jmenovitě E je COOH, G je CIL, M je S (m je 0) nebo jednoduchá vazba (indikována v tabulce) a X je -CH=. Nicméně, předkládaný vynález není těmito sloučeninami omezen.

-8CZ 301504 CZ

f₃c (J19) (Π0)

(J3I) ω2)

E

F OMe (J15) (Bó)

(J23) (^J24)

(J29) (J30)

9CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	*1		A	J	M
1	H	H	Al	JI	S
2	H	H	Al	J2	s
3	B	H	Al	J3	s
4	H	H	Al	J4	s
5	H	H	Al	J5	s
6	H	H	Al	J6	s
7	H	H	Al	J7	s
S	H	H	Al	J8	s
9	H	H	Al	J9	s
10	H	H	Al	J10	s
11	H	H	Al	Jll	s
12	H	H	Al	J12	s
13	H	II	Al	J13	s
14	H	H	Al	J14	s
15	H	H	Al	J15	Ξ
16	H	H	Al	J16	Ξ
17	H	H	Al	J17	s
18	H	H	Al	J18	s
19	H	H	Al	J19	s
20	H	H	Al	J20	s
21	K	H	Al	J21	Ξ
22	H	H	Al	J22	s
23	H	H	Al	J23	s
24	H	H	Al	J24	s

- 10CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	R»	r2	A	J	M
25	H	H	Al	J25	S
2b	H	H	Al	J2S	Ξ
27	H	H	Al	J27	S
28	H	H	Al	J28	s
29	H	H	Al	J2 9	s
30	H	H	Al	J30	s
31	H	H	Al	J31	s
32	H	11	Al	J32	s
33	H	H	A2	JI	s
34	H	H	A2	J2	5
35	H	H	A2	J3	S
36	H	H	A2	J4	S
37	H	H	A2	J5	s
38	H	H	A2	J6	s
39	H	H	A2	J7	s
40	H	H	A2	J3	s
41	H	H	A2	J9	s
42	H	H	A2	J10	s
43	H	H	A2	Jll	s
44	H	H	A2	J12	s
45	H	H	A2	J13	s
46	H	H	A2	J14	s
47	H	H	A2	J15	s
48	H	H	A2	J16	s

-IICZ 301504 CZ

Sloučenina č.	*1	r2	A	J	M
49	H	H	A2	J17	S
50	H	H	A2	J18	s
51	H	H	A2	J19	s
52	H	II	A2	J20	s
53	H	H	A2	J21	s
54	H	H	A2	J22	s
55	H	H	A2	J23	s
56	H	H	A2	J24	s
57	H	H	A2	J25	s
58	H	H	A2	J26	s
59	H	H	A2	J27	£
60	H	H	A2	J28	S
61	H	H	A2	J29	s
62	H	H	A2	J3 0	s
63	H	H	A2	J31	s
64	H	H	A2	J3 2	s
65	H	H	A3	JI	s
66	H	H	A3	J2	s
67	H	H	A3	J3	s
68	H	H	A3	J4	Ξ
69	H	H	A3	J5	s
70	H	H	A3	J6	s
71	H	H	A3	J7	s
72	H	H	A3	J8	s

- 12CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rx	r2	A	J	M
73	H	H	A3	J9	Ξ
74	H	H	A3	J10	S
75	H	H	A3	Jll	Ξ
76	H	H	A3	J12	S
77	H	H	A3	J13	Ξ
78	H	H	A3	J14	S
79	H	H	A3	J15	S
80	H	H	A3	J16	3
81	H	H	A3	J17	S
32	H	H	n_j	J18	O k_J
83	H	H	A3	J19	Ξ
84	íl	ΪΪ	A3	J20	c
85	H	H	A3	J21	3
86	H	H	A3	J22	S
87	H	H	A3	J23	Ξ
88	H	H	A3	J24	3
89	H	H	A3	J25	Ξ
90	H	fí	A3	J26	S
91	H	H	A3	J27	S
92	H	H	A3	J28	s
93	H	H	A3	J29	3
94	ri	II	fl o ZA J	J30	c u
95	H	H	A3	J31	s
96	H	H	A3	J32	s

- 13 CZ 301504 CZ

Sloučenina č.			A	J	M
97	MGO	H	Al	JI	Ξ
98	MeO	H	Al	J2	S
99	MeO	H	Al	J3	S
100	MeO	H	Al	J4	S
101	Meo	H	Al	J5	s
102	MeO	H	Al	J6	s
103	MeO	H	Al	J7	s
104	MeO	H	Al	J8	s
105	MeO	H	Al	J9	s
106	MeO	H	Al	J10	s
107	MeO	H	Al	Jll	s
108	Meo	H	Al	J12	s
109	Meo	H	Al	J13	s
110	MeO	H	Al	J14	s
111	Meo	H	Al	J15	s
112	MeO	H	Al	J16	s
113	MeO	H	Al	J17	s
114	MeO	H	Al	J18	s
115	MeO	H	Al	J19	s
116	Meo	H	Al	J2 0	s
117	MeO	H	Al	J21	s
118	Meo	H	Al	J22	s
119	MeO	H	Al	J23	s
120	MeO	H	Al	J2 4	s

Sloučenina Č.		a2	A	J	M
121	MeO	H	Al	J25	3
122	MeO	E	Al	J26	3
123	MeO	H	Al	J27	S
124	MeO	H	Al	J28	S
1 7	ΜαΓί	H	Al	J29	5
126	MeO	H	Al	J30	S
127	MeO	H	Al	J31	s
128	MeO	H	Al	J32	s
129	MeO	H	A2	JI	s
ί n 1 JU	MeO	H	*	J2	r* O
131	MeO	H	A2	J3	s
132	MeO	H	T\ z-íz.	J 4	r· a
133	MeO	H	A2	J5	s
134	MeO	H	A2	J6	s
135	MeO	H	A2	J7	s
136	MeO	H	A2	J8	Ξ
137	MeO	H	A2	J9	s
138	MeO	H	A2	J10	s
139	MeO	H	A2	Jll	s
140	MeO	H	A2	J12	s
141	MeO	H	A2	J13	3
1 λ □		ti	Λ 9	T 1 A	e
	i ito			U J. **	kJ
143	MeO	H	A2	J15	s
144	MeO	H	A2	J16	s

- 15 CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	R,	*2	A	J	M
145	Meo	H	A2	J17	S
146	MeO	H	A2	J18	S
147	MeO	H	A2	J19	S
148	MeO	H	A2	J20	S
149	MeO	H	A2	J21	S
150	MeO	H	A2	J22	S
151	MeO	H	A2	J23	s
152	MeO	H	A2	J24	s
153	MeO	H	A2	J25	Ξ
154	MeO	H	A2	J26	S
155	MeO	H	A2	J27	s
156	MeO	K	A2	J28	s
157	MeO	H	A2	J29	5
158	MeO	H	A2	J30	s
159	MeO	H	A2	J31	s
160	MeO	H	A2	J32	Ξ
161	MeO	H	A3	JI	S
162	MeO	H	A3	J2	s
163	MeO	H	A3	J3	s
164	MeO	H	A3	J4	s
165	MeO	H	A3	J5	s
166	MeO	H	A3	J6	s
167	MeO	H	A3	J7	s
168	MeO	H	A3	J8	s

- 16CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri		A	J	M
169	MeO	H	A3	J9	S
170	Meo	H	A3	J10	S
171	MeO	H	A3	Jll	S
172	Meo	H	A3	J12	5
173	Meo	II	A3	J13	S
174	MeO	H	A3	J14	S
175	MeO	H	A3	J15	Ξ
17 6	MeO	H	A3	J16	S
177	MeO	H	A3	J17	s
17S	MeO	H	A3	J18	s
179	Meo	H	A3	J19	s
ISO	MeO	H	A3	τη n \J £, V	c
191	MeO	H	A3	J21	s
182	MeO	H	A3	J22	s
183	MeO	H	A3	J23	s
184	Meo	H	A3	J24	s
185	MeO	H	A3	J25	s
186	MeO	H	A3	J26	s
187	MeO	H	A3	J27	Ξ
188	Meo	H	A3	J23	S
189	MeO	H	A3	J29	s
190	MeO	H	A3	J30	s
191	Meo	H	A3	J31	s
192	MeO	H	A3	J32	s

- 17CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rx	Rj	A	J	M
193	CN	H	Al	JI	S
194	CN	H	Al	J2	S
195	CN	H	Al	J3	s
196	CN	H	Al	J4	s
197	CN	11	Al	J5	s
198	CN	H	Al	J6	s
199	CN	H	Al	J7	s
200	CN	H	Al	J8	s
201	CN	H	Al	J9	Ξ
202	CN	H	Al	J10	s
203	CN	H	Al	Jll	Ξ
204	CN	H	Al	J12	S
205	CN	H	Al	J13	£
206	CN	H	Al	J14	S
207	CN	H	Al	J15	s
208	CN	H	Al	J16	s
209	CN	H	Al	J17	s
210	CN	H	Al	J18	s
211	CN	H	Al	J19	s
212	CN	H	Al	J20	Ξ
213	CN	H	Al	J21	S
214	CN	H	Al	J22	S
215	CN	fl	Al	J23	S
216	CN	H	Al	J24	S

- 18CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri		A	j	M
217	CN	H	Al	J25	£
218	CN	H	Al	J2ó	S
219	CN	H	Al	J27	3
220	CN	H	Al	J28	S
221	CN	H	Al	J29	3
222	CN	H	At	J30	S
223	CN	H	Al	J31	3
224	CN	H	Al	J32	S
225	CN	H	A2	JI	S
226	CN	H	A2	J2	s
227	CN	H	A2	J3	s
228	CN	H	A2	J4	s
229	CN	H	A2	J5	s
230	CN	H	A2	J6	s
231	CN	H	A2	J7	£
232	CN	H	A2	JB	s
233	CN	H	A2	J9	s
234	CN	H	A2	J10	s
235	CN	H	A2	Jll	£
236	CN	H	A2	J12	S
237	CN	H	A2	J13	s
238	CN	H	A2	J14	s
239	CN	H	A2	J15	s
240	CN	H	A2	J16	s

- 19CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	R;	r2	A	J	M
241	CN	H	A2	J17	S
242	CN	H	A2	J18	S
243	CN	H	A2	J19	S
244	CN	H	A2	J20	Ξ
245	CN	H	A2	J21	S
246	CN	H	A2	J22	S
247	CN	H	A2	J23	s
248	CN	H	A2	J24	s
249	CN	H	A2	J25	s
250	CN	H	A2	J26	s
251	CN	H	A2	J2 7	s
252	CN	H	A2	J28	s
253	CN	H	A2	J29	s
254	CN	H	A2	J30	s
255	CN	H	A2	J31	s
256	CN	H	A2	J32	s
257	CN	H	A3	Jl	s
258	CN	H	A3	J2	s
259	CN	H	A3	J3	s
260	CN	H	A3	J4	s
261	CN	H	A3	J5	s
262	CN	H	A3	J6	s
263	CN	H	A3	J7	s
264	CN	H	A3	J8	s

-20CZ 301504 CZ

Sloučenina č.			A	J	M
265	CN	H	A3	J9	Ξ
266	CN	H	A3	J10	S
267	CN	H	A3	Jll	S
268	CN	H	A3	J12	s
269	CN	H	A3	JI3	5
270	CN	H	A3	J14	S
271	CN	H	A3	J15	S
272	CN	H	A3	J16	Ξ
273	CN	H	A3	J17	S
274	CN	H	A3	J18	S
275	CN	H	A3	J19	s
276	CN	K	A3	J20	s
277	CN	H	A3	J21	s
278	CN	H	A3	J22	5
279	CN	H	A3	J23	S
280	CN	H	A3	J24	S
281	CN	H	A3	J2 5	S
282	CN	H	A3	J26	S
283	CN	H	A3	J27	S
284	CN	H	A3	J2 8	s
285	CN	H	A3	J2 9	s
286	CN	H	A3	J30	s
287	CN	H	A3	J31	s
288	CN	H	A3	J32	Ξ

-21 CZ 301504 CZ

Cottipound No.	Rx	R;	A	J	M
289	Me	H	Al	JI	S
290	Me	H	Al	J2	s
291	Me	H	Al	J3	s
292	Me	H	Al	J4	s
293	Me	H	Al	J5	s
294	Me	H	Al	J6	s
295	Me	H	Al	J7	s
296	Me	H	Al	J8	s
297	Me	H	Al	J9	s
298	Me	H	Al	J10	s
299	Me	II	Al	Jll	s
300	Me	H	Al	J12	s
301	Me	H	Al	J13	s
302	Me	H	Al	J14	s
303	Me	H	Al	J15	s
304	Me	H	Al	J16	s
305	Me	H	Al	J17	s
306	Me	H	Al	J18	s
307	Me	H	Al	J19	s
308	Me	H	Al	J20	s
309	Me	H	Al	J21	s
310	Me	H	Al	J22	s
311	Me	a	Al	J23	s
312	Me	H	Al	J24	s

CT. 301504 CZ

Sloučenina č.	Rt	*2	A	J	M
313	Me	H	Al	J25	S
314	Me	H	Al	J26	s
315	Me	H	Al	J27	s
316	Me	H	Al	J28	Ξ
317	Me	H	Al	J29	s
318	Me	H	Al	J30	s
319	Me	H	Al	J31	s
320	Me	H	Al	J32	s
321	Me	H	A2	JI	s
32 2	Me	H	A2	J2	o
323	Me	H	A2	J3	3
324	Me	B	A2	J4	3
325	Me	H	A2	J5	S
326	Me	H	A2	J6	s
327	Me	H	A2	J7	s
328	Me	H	A2	J8	s
329	Me	H	A2	J9	3
330	Me	H	A2	J10	3
331	Me	H	A2	Jll	S
332	Me	H	A2	J12	5
333	Me	H	A2	J13	S
334	Me	H	A2	J14	3
335	Me	H	A2	J15	Ξ
336	Me	H	A2	J16	S

-23CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	*3		A	J	M
337	Me	H	A2	J17	S
338	Me	H	A2	J18	S
339	Me	H	A2	J19	S
340	Me	H	A2	J20	s
341	Me	H	A2	J21	s
342	Me	H	A2	J22	s
343	Me	H	A2	J23	£
344	Me	H	A2	J24	s
345	Me	H	A2	J25	s
346	Me	H	A2	J26	s
347	Me	H	A2	J27	s
348	Me	H	A2	J28	s
349	Me	H	A2	J29	s
350	Me	H	A2	J30	s
351	Me	H	Λ2	J31	s
352	Me	H	A2	J32	s
353	Me	H	A3	JI	s
354	Me	H	A3	J2	Ξ
355	Me	H	A3	J3	Ξ
356	Me	H	A3	J4	s
357	Me	H	A3	J5	s
358	Me	H	A3	J6	S
359	Me	H	A3	J7	S
360	Me	H	A3	J8	£

-24r7 micn4 r*7

CL·

Sloučenina č	Ri	r2	A		M
361	Me	H	A3	J9	s
362	Me	H	A3	J10	s
363	Me	H	A3	Jll	s
364	Me	«	A3	J12	s
365	Me	H	A3	J13	Ξ
366	Me	H	A3	J14	S
367	Me	H	A3	J15	S
368	Me	H	A3	J16	s
369	Me	H	A3	J17	s
370	Me	u	A3	J18	5
371	Me	H	A3	J19	s
/ *-	Me	u	A3	J20	c
373	Me	H	A3	J21	s
374	Me	H	A3	J22	s
375	Me	H	A3	J2 3	s
376	Me	H	A3	J24	s
377	Me	H	A3	J25	s
378	Me	H	A3	J26	s
379	Me	H	A3	J27	s
380	Me	H	A3	J28	Ξ
381	Me	H	A3	J29	s
382	tul λ rjfe	H	Λ ~> MJ	J3 0	Γ1 O
383	Me	H	A3	J31	s
384	Me	H	A3	J32	s

-25 CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	R,		A	J	M
385	H	Me	Al	JI	S
386	H	Me	Al	J2	S
387	H	Me	Al	J3	s
388	H	Me	Al	J4	s
389	H	Me	Al	J5	s
390	H	Me	Al	J6	s
391	H	Me	Al	J7	Ξ
392	H	Me	Al	J8	S
393	H	Me	Al	J9	S
394	H	Me	Al	J10	s
395	H	Me	Al	Jll	Ξ
396	H	Me	Al	J12	S
397	H	Me	Al	J13	S
398	H	Me	Al	J14	Ξ
399	H	MG	Al	J15	S
400	H	Me	Al	J16	S
401	H	Me	Al	J17	s
402	H	Me	Al	J18	s
403	H	Me	Al	J19	s
404	H	Me	Al	J20	s
405	H	Me	Al	J21	s
406	H	Me	Al	J22	s
407	H	Me	Al	J23	s
408	H	Me	Al	J24	s

-26CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rx	*2	A	J	M
409	H	Me	Al	J25	S
410	H	Me	Al	J26	S
411	H	Me	Al	J2 7	s
412	H	Me	Al	J28	s
413	n	Me	Al	J29	c w
414	H	Me	Al	J30	s
415	H	Me	Al	J31	s
416	H	Me	Al	J32	Ξ
417	H	Me	A2	JI	s
418	H	Me	A2	J2	3
419	H	Me	A2	J3	S
420	H	Me	A2	J4	s
421	H	Me	A2	J5	s
422	H	Me	A2	J6	s
423	H	Me	A2	J7	s
424	H	Me	A2	J8	s
425	H	Me	A2	J9	s
426	H	Me	A2	J10	s
427	H	Me	A2	Jll	s
428	H	Me	A2	J12	s
429	H	Me	A2	J13	s
430	H	Me	A2	J14	s
431	H	Me	A2	J15	s
432	II	Me	A2	J16	s

-27CZ 301504 CZ

Sloučenina č	Rx	R.	A	J	M
433	H	Me	A2	J17	£
434	H	Me	A2	J18	Ξ
435	H	Me	A2	J19	S
436	H	Me	A2	J20	s
437	H	Me	A2	J21	s
438	H	Me	A2	J22	s
439	H	Me	A2	J23	Ξ
440	H	Me	A2	J24	S
441	H	Me	A3	J25	s
442	H	Me	A2	J26	s
443	H	Me	A2	J27	s
444	H	Me	A2	J28	s
445	H	Me	A2	J29	s
446	H	Me	A2	J30	Ξ
447	H	Me	A2	J31	s
448	H	Me	A2	J32	s
449	H	Me	A3	Jl	s
450	H	Me	A3	J2	s
451	H	Me	A3	J3	s
452	H	Me	A3	J4	s
453	H	Me	A3	J5	s
454	H	Me	A3	J6	s
455	H	Me	A3	J7	s
456	H	Me	A3	J8	Ξ

-28CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri	*2	A	J	M
457	H	Me	A3	J9	S
458	H	Me	A3	J10	s
459	H	Me	A3	Jll	3
460	H	Me	A3	J12	S
461	8	Me	A3	JI 3	n O
462	H	Me	A3	J14	s
463	H	Me	A3	J15	s
464	H	Me	A3	J16	s
465	H	Me	A3	J17	s
466	H	Me	A3	J18	s
467	H	Me	A3	J19	s
468	H	Me	A3	J20	s
469	H	Me	A3	J21	s
470	H	Me	A3	J22	s
471	H	Me	A3	J23	s
472	H	Me	A3	J24	Ξ
473	H	Me	A3	J25	s
474	H	Me	A3	J26	s
475	H	Me	A3	J27	Ξ
476	H	Me	A3	J28	s
477	H	Me	A3	J2 9	s
478	H	Me	A3	J30	s
479	H	Me	A3	J31	s
480	H	Me	A3	J32	s

-29CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri	r2	A	J	M
481	Me	Me	Al	JI	S
482	Me	Me	Al	J2	s
483	Me	Me	Al	J3	s
484	Me	Me	Al	J4	s
485	Me	Me	Al	J5	s
486	Me	Me	Al	J6	s
487	Me	Me	Al	J7	s
488	Me	Me	Al	J8	s
489	Me	Me	Al	J9	s
490	Me	Me	Al	J10	s
491	Me	Me	Al	Jll	s
492	Me	Me	Al	J12	s
493	Me	Me	Al	J13	Ξ
494	Me	Me	Al	J14	s
495	Me	Me	Al	J15	s
496	Me	Me	Al	J16	s
497	Me	Me	Al	J17	s
498	Me	Me	Al	J18	s
499	Me	Me	Al	J19	s
500	Me	Me	Al	J20	s
501	Me	Me	Al	J21	s
502	Me	Me	Al	J22	s
503	Me	Me	Al	J23	s
504	Me	Me	Al	J24	s

-30CZ 381504 CZ

Sloučenina č.		r2	Λ J M
505	Me	Me	Al	J25	s
506	Me	Me	Al	J26	s
507	Me	Me	Al	J27	s
508	Me	Me	Al	J28	s
509	Me	Me	Al	J29	Ξ
510	Me	Me	Al	J30	S
511	Me	Me	Al	J31	S
512	Me	Me	Al	J32	s
513	Me	Me	A2	JI	s
514	Me	Me	A2	J2	c už
515	Me	Me	Λ2	J3	£
5i6	Me	Me	A2	J4	n O
517	Me	Me	A2	J5	s
518	Me	Me	A2	J6	£
519	Me	Me	A2	J7	S
520	Me	Me	A2	J8	Ξ
521	Me	Me	A2	J9	S
522	Me	Me	A2	J10	s
523	Me	Me	A2	Jll	s
524	Me	Me	A2	J12	s
525	Me	Me	A2	J13	s
526	Me	Me	A2	J14	s
257	Me	Me	A2	J15	s
528	Me	Me	A2	J16	s

-31 Z7. 301504 CZ

Sloučenina č.		*2	A	J	M
529	Me	Me	A2	JI 7	S
530	Me	Me	A2	J18	Ξ
531	Me	Me	A2	J19	S
532	Me	Me	A2	J2 0	Ξ
533	Me	Me	A2	J21	S
534	Me	Me	A2	J22	s
535	Me	Me	A2	J23	s
536	Me	Me	A2	J24	s
537	Me	Me	A2	J25	s
538	Me	Me	A2	J26	s
539	Me	Me	A2	J27	5
540	Me	Me	A2	J28	s
541	Me	Me	A2	J29	Ξ
542	Me	Me	A2	J30	S
543	Me	Me	A2	J31	s
544	Me	Me	A2	J32	s
545	Me	Me	A3	Jl	s
546	Me	Me	A3	J2	s
547	Me	Me	A3	J3	s
548	Me	Me	A3	J4	Ξ
549	Me	Me	A3	J5	S
550	Me	Me	A3	J6	s
551	Me	Me	A3	J7	s
552	Me	Me	A3	J8	s

-32 CZ 301504 CZ

Sloučenina č	Ri	r2	A	J	M
553	Me	Me	A3	J9	S
554	Me	Me	A3	J10	S
555	Me	Me	A3	Jll	S
556	Me	Me	A3	J12	S
557	Me	Me	A3	J13	c w
558	Me	Me	A3	J14	s
559	Me	Me	A3	J15	s
560	Me	Me	A3	J16	s
561	Me	Me	A3	J17	s
562	Me	Me	A3	J18	s
563	Me	Me	A3	J19	o O
564	Me	Me	A3	J20	s
565	Me	Me	A3	J21	s
566	Me	Me	A3	J22	s
567	Me	Me	A3	J23	s
568	Me	Me	A3	J24	s
569	Me	Me	A3	J25	s
570	Me	Me	A3	J26	s
571	Me	Me	A3	J27	s
572	Me	Me	A3	J28	s
573	Me	Me	A3	J29	s
574	Me	Me	A3	J30	s
575	Me	Me	A3	J31	s
576	Me	Me	A3	J32	s

- jj CZ 301504 CZ

Sloučenina č.			A	J	M
577	Cl	Cl	Al	JI	S
578	Cl	Cl	Al	J2	s
579	Cl	Cl	Al	J3	Ξ
580	Cl	Cl	Al	J4	S
581	Cl	Cl	Al	J5	S
582	Cl	Cl	Al	J6	s
583	Cl	Cl	Al	J7	s
584	Cl	Cl	Al	J8	Ξ
585	Cl	Cl	Al	J9	S
586	Cl	Cl	Al	J10	S
587	Cl	Cl	Al	Jll	S
588	Cl	Cl	Al	J12	s
589	Cl	Cl	Al	J13	s
590	Cl	Cl	Al	J14	Ξ
591	Cl	Cl	Al	J15	s
592	Cl	Cl	Al	JI 6	s
593	Cl	Cl	Al	J17	s
594	Cl	Cl	Al	J18	s
595	Cl	Cl	Al	J19	s
596	Cl	Cl	Al	J20	s
597	Cl	Cl	Al	J21	s
598	Cl	Cl	Al	J22	s
599	Cl	Cl	Al	J23	s
600	Cl	Cl	Al	J24	s

-34CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri	r2	A	J	M
601	Cl	Cl	Al	J2 5	S
602	Cl	Cl	Al	J2 6	S
603	Cl	Cl	Al	J2 7	S
604	Cl	cl	Al	u 25	3
605	Cl	Cl	Al	J2 9	S
606	Cl	Cl	Al	J30	3
607	Cl	Cl	Al	J31	S
608	Cl	Cl	Al	J32	s
609	Cl	Cl	A2	JI	s
610	Cl	Cl	A2	J2	s
611	Cl	Cl	A2	J3	s
612	Cl	Cl	A 2	J4	s
613	Cl	Cl	A2	J5	s
614	Cl	Cl	A2	J6	s
615	Cl	Cl	A2	J7	s
616	Cl	Cl	A2	J8	s
617	Cl	Cl	A2	J9	s
618	Cl	Cl	A2	J10	s
619	Cl	Cl	A2	Jll	s
620	Cl	Cl	A2	J12	s
621	Cl	Cl	A2	J13	s
622	Cl	Cl	A2	J14	s
623	Cl	Cl	A2	J15	s
624	Cl	Cl	A2	J16	s

-35CZ 301504 CZ

Sloučenina c.			A	J	M
625	Cl	Cl	A2	J17	Ξ
626	Cl	Cl	A2	J18	S
627	Cl	Cl	A2	J19	S
628	Cl	Cl·	A2	J20	S
629	Cl	Cl	A2	J21	S
630	Cl	Cl	A2	J22	s
631	Cl	Cl	A2	J23	Ξ
632	Cl	Cl	A2	J24	S
633	Cl	Cl	A2	J25	S
634	Cl	Cl	A2	J26	S
635	Cl	Cl	A2	J27	S
636	Cl	Cl	A2	J28	s
637	Cl	Cl	A2	J29	s
638	Cl	Cl	A2	J30	s
639	Cl	Cl	A2	J31	s
640	Cl	Cl	A2	J32	s
641	Cl	Cl	A3	JI	s
642	Cl	Cl	A3	J2	s
643	Cl	Cl	A3	J3	s
644	Cl	Cl	A3	J4	s
645	Cl	Cl	A3	J5	s
646	Cl	Cl	A3	J6	s
647	Cl	Cl	A3	J7	s
648	Cl	Cl	A3	J8	s

-36CZ 301504 CZ

Sloučenina č,	Rx	s2	A	J Μ
649	Cl	Cl	A3	J9	Ξ
650	Cl	ci	A3	J10	S
651	Cl	Cl	A3	Jll	S
652	Cl	Cl	A3	J12	s
653	Cl	Cl	A3	J13	s
654	Cl	Cl	A3	J14	s
655	Cl	cl	A3	J15	3
656	Cl	Cl	A3	J16	s
657	Cl	Cl	A3	J17	s
658	Cl	Cl	A3	J18	s
659	Cl	Cl	A3	J19	s
660	Cl	Cl	A3	J20	s
661	Cl	Cl	A3	J21	s
662	Cl	Cl	A3	J22	s
663	Cl	Cl	A3	J23	s
664	Cl	Cl	A3	J24	s
665	Cl	Cl	A3	J25	s
666	Cl	Cl	A3	J26	s
667	Cl	Cl	A3	J27	s
668	Cl	Cl	A3	J2 8	s
669	Cl	Cl	A3	J29	s
670	Cl	Cl	A3	J30	Ξ
671	Cl	Cl	A3	J31	s
672	Cl	Cl	A3	J32	s

-37CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rx	r2	A	J	M
673	H	H	Al	Jl	-
674	H	H	Al	J2	-
675	H	H	Al	J3	-
676	H	H	Al	J4	-
677	H	H	Al	J5	-
678	H	H	Al	J6	-
679	H	H	Al	J7	-
680	H	H	Al	J8	-
681	H	H	Al	J9	-
682	H	H	Al	J10	-
683	H	H	Al	Jll	-
684	H	H	Al	J12	-
685	H	H	Al	J13	-
686	H	H	Al	J14	-
687	H	H	Al	J15	-
688	H	H	Al	J16	-
689	H	H	Al	J17	-
690	H	H	Al	J18	-
691	H	H	Al	J19	-
692	H	H	Al	J20	-
693	H	H	Al	J21	-
694	H	H	Al	J22	-
695	H	H	Al	J23	-
696	H	H	Al	J24	-

- 38 CZ 301504 CZ

Sloučenina c	Ri		A	J	M
697	H	H	Al	J25	-
698	H	H	Al	J26	-
699	H	H	Al	J27	-
700	H	H	Al	J28	-
701	Fí	H	Al	J29	-
702	H	H	Al	J30	-
703	H	H	Al	J31	-
704	H	H	Al	J32	-
705	H	H	A2	JI	-
706	H	u 4 J	A2	J2	-
707	H	H	A2	J3	-
708	H	II	A2	J4	-
709	H	H	A2	J5	-
710	H	H	A2	J6	-
711	H	H	A2	J7	-
712	H	H	A2	J8	-
713	H	H	A2	J9	-
714	H	H	A2	J10	-
715	H	H	A2	Jll	-
716	H	H	A2	J12	-
717	H	H	Az	J13	-
7 18	H	H	A2	J14	-
719	H	H	A2	J15	-
720	H	H	A2	Jl6	-

-39CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri	r2	A	J	M
721	H	H	A2	J17	-
722	K	H	A2	J18	-
723	H	H	A2	J19	-
724	H	H	A2	J2 0	-
725	H	H	A2	J21	-
726	H	H	A2	J22	-
727	H	H	A2	J23	-
728	H	H	A2	J24	-
729	H	H	A2	J25	-
730	H	H	A2	J26	-
731	H	H	A2	J27	-
732	H	H	A2	J28	-
733	H	H	A2	J29	-
734	H	H	A2	J30	-
735	H	H	A2	J31	-
736	H	K	A2	J32	-
737	H	H	A3	Jl	--
738	H	H	A3	J2	-
739	H	H	A3	J3	-
740	H	H	A3	J4	-
741	H	H	A3	J5	-
742	H	H	A3	J6	-
743	H	H	A3	J7	-
744	H	H	A3	J8	--

-40CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rx	1%	A	J	M
745	H	H	A3	J9	-
746	H	H	A3	J10	-
747	H	H	A3	Jll	-
748	H	H	A3	JI 2	-
749	H	H	A3	J13	-
750	H	H	A3	J14	-
751	H	H	A3	J15	·
752	H	H	A3	J16	-
753	H	H	A3	J17	-
754	H	H	A3	J18	-
755	H	H	A3	J19	-
756	íí	H	A3	J2O	-
757	H	H	A3	J21	-
758	H	H	A3	J22	-
759	H	H	A3	J2 3	-
760	H	H	A3	J2 4	-
761	H	H	A3	J25	-
762	H	H	A3	J2 6	-
763	H	H	A3	J27	-
764	H	H	A3	J28	-
765	H	H	A3	J29	-
766	H	H	A3	J30	-
767	H	H	A3	J31	-
768	H	H	A3	J32	-

-41 CZ 301504 CZ

Sloučenina c.			A	J	M
769	MeO	H	Al	JI	-
770	MeO	H	Al	J2	-
771	MeO	H	Al	J3	-
772	MeO	H	Al	J4	-
773	MeO	H	Al	J5	-
774	MeO	H	Al	J6	-
775	MeO	H	Al	J7	-
776	MeO	H	Al	J8	-
777	MeO	H	Al	J9
778	MeO	H	Al	J10	-
779	MeO	H	Al	Jll	-
780	MeO	H	Al	J12	-
781	MeO	H	Al	J13	-
782	MeO	H	Al	J14	-
783	MeO	H	Al	J15	-
784	MeO	H	Al	J16	-
785	MeO	H	Al	J17	-
786	MeO	H	Al	J18	-
787	MeO	H	Al	J19	-
788	MeO	H	Al	J20	-
789	MeO	H	Al	J21	-
790	MeO	H	Al	J22	-
791	MeO	H	Al	J23	-
792	MeO	Π	Al	J2 4	-

-42CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Pn	p2	A	J	M
793	Meo	H	Al	J25	-
794	MeO	H	Al	J26	-
795	MeO	H	Al	J27	-
796	MeO	H	Al	J28	-
797	MeO	H	Al	J2 9	-
798	Meo	H	Al	J30	-
799	MeO	H	Al	J31	-
800	MeO	H	Al	J32	-
801	MeO	H	A2	JI	-
802	MeO	H	A2	J2	-
803	MeO	II	A2	J3	-
804	MeO	H	A2	J4	-
805	MeO	H	A2	J5	-
806	Meo	H	A2	J6	-
807	Meo	H	A2	J7	-
808	Meo	H	A2	J8	-
809	MeO	H	A2	J9	-
810	MeO	H	A2	J10	-
811	MeO	H	Ά2	Jll	-
812	MeO	H	A2	J12	-
813	Meú	H	A2	J13	-
814	MeO	H	A2	J14	-
815	MeO	H	A2	J15	-
816	MeO	H	A2	J16	-

-43CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	R.	r2	A	u	M
817	MeO	H	A2	J17	-
818	MeO	H	A2	J18	-
819	MeO	H	A2	J19	-
820	MeO	H	A2	J20
821	MeO	H	A2	J21	-
822	MeO	II	A2	J22	-
823	MeO	H	A2	J23	-
824	MeO	H	A2	J24	-
825	MeC	H	A2	J25	-
826	MeO	H	A2	J26	-
827	MeO	H	A2	J27	-
828	MeO	H	A2	J28	-
829	MeO	H	A2	J2 9	-
830	MeO	H	A2	J30	-
931	MeO	H	A2	J31	-
832	MeO	H	A2	J32	-
833	MeO	H	A3	JI	-
834	MeO	H	A3	J2	-
835	MeO	H	A3	J3	-
836	Meo	H	A3	J4	-
837	MeO	H	A3	J5	-
838	MeO	H	A3	J6	-
839	MeO	H	A3	J7	-
840	MeO	H	A3	J8	-

-44 CZ 301504 CZ

Sloučenina č	Ri	ft •'2	A	j	M
841	MeO	H	A3	J9	--
842	MeO	H	A3	J10	-
843	MeO	H	A3	Jll	-
844	MeO	H	A3	J12
O Λ C U J	MeO	u	Λ T A i*1	-J13	-
846	MeO	H	A3	J14	-
847	MeO	H	A3	J15
848	MeO	H	A3	J16	-
849	MeO	H	A3	J17	-
850	MeO	H	A3	J18	-
851	MeO	H	A3	J19	-
852	MeO	H	A3	J20	-
853	MeO	H	A3	J21	-
854	MeO	H	A3	J22	-
855	MeO	H	A3	J23	-
856	MeO	H	A3	J24	-
857	MeO	H	A3	J25	-
858	MeO	H	A3	J26	-
859	MeO	H	A3	J27	-
860	MeO	H	A3	J28	-
861	MeO	H	A3	J2 9	-
862	MeO	H	A3	J30
863	MeO	H	A3	J31
864	MeO	H	A3	J32	-

-45CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri		A	J	M
865	CN	H	Al	JI	-
866	CN	H	Al	J2	-
867	CN	H	Al	J3	-
868	CN	H	Al	J4	-
869	CN	H	Al	J5	-
870	CN	H	Al	J6	-
871	CN	H	Al	J7	-
872	CN	H	Al	J8	-
873	CN	H	Al	J9	-
874	CN	H	Al	J10	-
875	CN	H	Al	Jll	-
876	CN	H	Al	J12	-
877	CN	H	Al	J13	-
878	CN	H	Al	J14	-
879	CN	H	Al	J15	-
880	CN	H	Al	J16	-
881	CN	H	Al	J17	-
882	CN	H	Al	J18	-
883	CN	H	Al	J19	-
884	CN	H	Al	J2O	-
885	CN	H	Al	J21	-
886	CN	H	Al	J22	-
887	CN	H	Al	J23	-
888	CN	H	Al	J24	-

-46CZ 301504 CZ

Sloučenina č.		R,	A	J	M
889	CN	H	Al	J25	-
890	CN	H	Al	J2 6	-
891	CN	H	Al	J27	-
892	CN	ří	Al	J28	-
893	CN	H	Al	J29	-
894	CN	H	Al	J30	-
895	CN	H	Al	J31	-
896	CN	H	Al	J32	-
897	CN	H	A2	Jl	-
898	CN	H	A2	J2	-
899	CN	H	A2	J3	-
900	CN	H	A2	J4	-
901	CN	H	A2	J5	-
902	CN	H	A2	J6	-
903	CN	H	A2	J7	-
904	CN	H	A2	J8	-
905	CN	H	A2	J9	-
906	CN	H	A2	J10	-
907	CN	H	A2	Jll	-
908	CN	H	A2	J12	-
909	CN	H	A2	J13	-
910	CN	H	A2	J14	-
911	CN	H	A2	J15	-
912	CN	H	a2	J16	-

-47CZ 301504 CZ

Sloučenina č.		r2		A	u		M
913	CN	H		A2	J17		-
914	CN	H		A2	J18		-
915	CN	H		A2	J19		-
916	CN	H		A2	J2 0		-
917	CN	11		A2	J21		-
918	CN	H		A2	J22		-
919	CN	H		A2	J23		-
920	CN	H		A2	J24
921	CN	H		A3	J25		--
922	CN	H		A2	J26		-
923	CN	H		A2	J27		-
924	CN	H		A2	J28		-
925	CN	H		A2	J29		-
926	CN	H		A2	J30		-
927	CN	H		A2	J31		-
928	CN	H		A2	J32		-
929	CN	H		A3	JI		-
930	CN	H		A3	J2		-
931	CN	H		A3	J3		-
932	CN	H		A3	J4		-
933	CN	H		A3	J5		-
934	CN	H		A3	J6		-
935	CN	H		A3	J7		-
936	CN	H		A3	J8		-

-48CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Ri		A	J	M
937	CN	H	A3	J9	*-
938	CN	H	A3	J10	-
939	CN	H	A3	Jil	-
940	CN	H	A3	J12	-
941	CN	H	A3	J13	-
942	CN	H	A3	JÍ4	-
943	CN	H	A3	J15	-
944	CN	H	A3	Jló	-
945	CN	H	A3	J17	-
946	CN	π	A3	J18	-
947	CN	H	A3	J19	-
948	CN	H	A 3	J?0	-
949	CN	H	A3	J21	-
950	CN	H	A3	J22	-
951	CN	H	A3	J23	-
952	CN	H	A3	J24	-
953	CN	H	A3	J25	-
954	CN	H	A3	J26	-
955	CN	H	A3	J27	-
956	CN	H	A3	J28	-
957	CN	H	A3	J29	-
958	CN	H	A3	J30	-
959	CN	H	A3	J31	-
960	CN	H	A3	J32	-

-49CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rx	r3	A	u	M
961	Me	Me	Al	Jl	-
962	Me	Me	Al	J2	-
963	Me	Me	Al	J3	-
964	Me	Me	Al	J4	-
965	Me	Me	Al	J5	-
966	Me	Me	Al	J6	-
967	Me	Me	Al	J7	-
968	Me	Me	Al	J8	-
969	Me	Me	Al	J9	-
970	Me	Me	Al	J10	-
971	Me	Me	Al	Jll	-
972	Me	Me	Al	J12	-
973	Me	Me	Al	J13	-
974	Me	Me	Al	J14	-
975	Me	Me	Al	J15	-
976	Me	Me	Al	J16	-
977	Me	Me	Al	J17	-
978	Me	Me	Al	J18	-
979	Me	Me	Al	J19	-
980	Me	Me	Al	J20	-
981	Me	Me	Al	J21	-
982	Me	Me	Al	J22	-
983	Me	Me	Al	J23	-
984	Me	Me	Al	J24	·-

- 50 CZ 301504 CZ

Sloučenina Č.	Rt	r2	A	J	M
985	Me	Me	Al	J25	-
986	Me	Me	Al	J26	-
987	Me	Me	Al	J27	-
988	Me	Me	Al	J28	-
989	Me	IM Λ nc	Al	J29	-
990	Me	Me	Al	J30	-
991	Me	Me	Al	J31	-
992	Me	Me	Al	J32	-
993	Me	Me	A2	Jl	-
994	Me	Me	A2	J2	-
995	Me	Me	A2	J3	-
996	Me	Me	A2	J4	-
997	Me	Me	A2	J5	-
998	Me	Me	A2	J6	-
999	Me	Me	A2	J7	-
1000	Me	Me	A2	J'8	-
1001	Me	Me	A2	J9	-
1002	Me	Me	A2	J10	-
1003	Me	Me	A2	Jll	-
1004	Me	Me	A2	J12	-
1005	Me	Me	A2	J13	-
1006	Me	Me	A2	J14	-
1007	Me	Me	A2	J15	-
1008	Me	Me	A2	J16	-

-51 CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	R1	Ra	A	σ	M
1009	Me	Me	A2	J17	-
1010	Me	Me	A2	J18	-
1011	Me	Me	A2	J19	-
1012	Me	Me	A2	J20	-
1013	Me	Me	A2	J21	-
1014	Me	Me	A2	J2 2	-
1015	Me	Me	A2	J23	-
1016	Me	Me	A2	J24	-
1017	Me	Me	A3	J25	-
1018	Me	Me	A2	J26	-
1019	Me	Me	A2	J2 7	-
1020	Me	Me	A2	J2 8	-
1021	Me	Me	A2	J29	-
1022	Me	Me	A2	J30	-
1023	Me	Me	A2	J31	-
1024	Me	Me	A2	J32	-
1025	Me	Me	A3	JI	-
1026	Me	Me	A3	J2	-
1027	Me	Me	A3	J3	-
1028	Me	Me	A3	J4	-
1029	Me	Me	A3	J5	-
1030	Me	Me	A3	J6	-
1031	Me	Me	A3	J7	-
1032	Me	Me	A3	J8

- 52 CZ 301504 CZ

Sloučenina č.		R?	A	J	M
1033	Me	Me	A3	J9	-
1034	Me	Me	A3	J10	-
] 035	Me	Me	A3	Jll	-
1036	Me	Me	A3	J12	-
1037	Me	Me	A3	J13	-
1038	Me	Me	A3	J14	-
1039	Me	Me	A3	J15	-
1040	Me	Me	A3	J16	-
1041	Me	Me	A3	J17	-
1042	Me	Me	A3	J18	-
1043	Me	Me	A3	J19	-
1044	Me	Me	A3	J20	-
1045	Me	Me	A3	J21
1046	Me	Me	A3	J22	-
1047	Me	Me	A3	J23	-
1048	Me	Me	A3	J24	-
1049	Me	Me	A3	J25	-
1050	Me	Me	A3	J26	--
1051	Me	Me	A3	J2 7	-
1052	Me	Me	A3	J28	-
1053	Me	Me	A3	J29	-
1054	Me	Me	A3	J30	-
1055	Me	Me	A3	J31	-
1056	Me	Me	A3	J32	-

-53CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Rl		A	J	M
1057	H	MeO	Al	JI	S
1058	H	MCO	Al	J2	s
1059	H	MeO	Al	J3	s
1060	H	MgO	Al	J4	s
1061	H	MeO	Al	J5	s
1062	H	MeO	Al	J6	s
1063	H	MeO	Al	J7	s
1064	H	MeO	Al	J8	Ξ
1065	H	MeO	Al	J9	S
1066	H	MeO	Al	J10	s
1067	H	MeO	Al	Jll	s
1068	H	MeO	Al	J12	s
1069	H	MeO	Al	J13	Ξ
1070	H	MeO	Al	J14	S
1071	H	MeO	Al	J15	S
1072	H	MeO	Al	J16	S
1073	H	MeO	Al	J17	s
1074	H	MeO	Al	J18	Ξ
1075	H	MeO	Al	J19	Ξ
1076	H	MeO	Al	J2 0	S
1077	H	MeO	Al	J21	Ξ
1078	H	MeO	Al	J22	Ξ
1079	H	MeO	Al	J23	S
1080	H	MeO	Al	J24	S

-54CZ 30Í504 CZ

Sloučenina č,	R,	*2	A	J	M
1081	H	MeO	Al	J25	S
1082	H	Meo	Al	J26	£
1083	H	MeO	Al	J27	S
1084	H	Meo	Al	J28	S
1085	H	MeO	Al	J29	s
1086	H	MeO	Al	J30	S
1087	H	MeO	Al	J31	S
1088	H	Meo	Al	J32	S
1089	H	MeO	A2	JI	s
1090	H	MeO	A2	J2	s
1091	H	MeO	A2	J3	s
1092	H	MeO	A2	J4	£
1093	H	MeO	A2	J5	s
1094	H	MeO	A2	J6	s
1095	H	MeO	A2	J7	s
1096	H	MeO	A2	J8	s
1097	H	MeO	A2	J9	s
1098	H	MeO	A2	J10	s
1099	H	MeO	A2	Jll	s
1100	H	MeO	A2	J12	s
1101	H	MeO	A2	J13	s
1102	H	MeO	A2	J14	s
1103	H	MeO	A2	J15	Ξ
1104	II	MeO	A2	J16	s

-55 CZ 301504 CZ

Sloučenina Č,	Ri	r2	A	J	M
1105	H	MeO	A2	J17	S
1106	H	MeO	A2	J18	S
1107	H	MeO	A2	J19	S
1108	H	MeO	A2	J20	s
1109	H	MeO	T\ 9	J21	o
1110	H	MeO	A2	J22	Ξ
1111	H	MeO	A2	J23	S
1112	H	MeO	A2	J24	S
1113	H	MeO	A3	J25	Ξ
1114	H	MeO	A2	J26	S
1115	H	MeO	A2	J2 7	S
1116	H	MeO	A2	J2 8	s
1117	H	MeO	A2	J2 9	s
1118	H	MeO	A2	J30	s
1119	H	MeO	A2	J31	Ξ
1120	H	MeO	A2	J32	s
1121	H	MeO	A3	JI	Ξ
1122	H	MeO	A3	J2	S
1123	H	MeO	A3	J3	s
1124	H	MeO	A3	J4	s
1125	H	MeO	A3	J5	s
1126	H	MeO	A3	J6	s
1127	H	MeO	A3	J7	s
1128	H	MeO	A3	J8	s

-56CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Pi	ρ?	A	J M
1129	H	MeO	A3	J9	S
1130	Π	MeO	A3	J10	s
1131	H	MeO	A3	Jll	s
1132	H	MeO	A3	J12	s
1133	π	MeO	A3	J13	£
1134	H	MeO	A3	J14	s
1135	H	MeO	A3	J15	s
1136	H	MeO	A3	J16	s
1137	H	MeO	A3	J17	s
1138	H	Meo	A3	J18	s
1139	H	Meo	A3	J19	s
1140	H	MeO	A3	J20	s
1141	H	MeO	A3	J21	s
1142	H	MeO	A3	J22	s
1143	H	MeO	A3	J23	s
1144	H	MeO	A3	J24	s
1145	H	MeO	A3	J25	s
1146	H	MeO	A3	J26	s
1147	H	MeO	A3	J27	s
1148	H	MeO	A3	J28	s
1149	H	MeO	A3	J29	s
1150	H	Meo	A3	J30	Ξ
1151	H	MeO	A3	J31	s
1152	H	MeO	A3	J32	s

-57CZ 301504 CZ

Benzimidazolový derivát obecného vzorce 1 podle předkládaného vynálezu, kde E je COOR' a M je S se může připravit syntetickou metodou A nebo B uvedenou dále:

Sy ntetická metoda A

R¹

-NO₂ (»I) cs,

Z-^G-J {>0

Fl^£ X NH₂

R¹ γγ ^řfy. _S ^A coo η^Λ

P

J (>7) taj ^{B x} 8 03) >-SH

Z...COOH¹ A (U) :ta ^{R x} íí (»5)

N ACOOR³ Ή5

Η² X N ť

J (*«) kde Z znamená atom halogenu nebo amoniovou skupinu a R¹, R³, R\ A, G, J a X mají význam definovaný shora.

Konkrétně, nitroskupina 2-nitroanilinového derivátu al se redukuje za získání orthofenylen1» diaminu a2. CS₂ reaguje s touto sloučeninou za vzniku sloučeniny a3, se kterou reaguje derivát halogenovaného esteru a4 za vzniku a5. Potom reaguje tato sloučenina s halogenovým derivátem nebo amoniovou solí a6 za získání sloučeniny a7 podle vynálezu. Dále, benzimidazolový derivát a8, kde R' je atom vodíku se může získat hydrolýzou této sloučeniny.

Redukce nitroskupiny se může provést za standardních podmínek katalytické redukce. Například se reakce provede s plynným vodíkem v přítomnosti katalyzátoru, jako je Pd-C při teplotě místnosti až 100°C a při kyselých, neutrálních nebo alkalických podmínkách. Alternativně se může použít způsob, využívající zinek nebo cín v kyselých podmínkách nebo se může použít zinkový prášek v neutrálních nebo alkalických podmínkách.

Reakce orthofenylenového diaminového derivátu a2 s CS? se může provést za použití například metody popsané v J. Org. Chem., 1954, 19, str. 631-637 (pyridinový roztok) nebo J. Med. Chem., 1993, 36, str. 1175-1187 (ethanolový roztok).

Reakce thiobenzimidazolu a3 a halogenového esteru a4 se může provést pří teplotě od 0 do 200 °C a za míchání za přítomnosti báze, jako jc NaH, EfyN, NaOH nebo K?CO₃ za podmínek obvyklé S-alkylační reakce.

Reakce thiobenzimidazolu a5 a halogenového derivátu nebo amoniové soli a6 se může provést za míchání při teplotě 0 až 200 °C v přítomnosti báze, jako je NaH, Et₃N, NaOH, K₂CO₃ nebo Cs₃CO.i za podmínek obvykle N-alkylační nebo N-acylační reakce.

Eliminační reakce karboxyiové chránící skupiny R' se výhodně provede hydrolýzou za použití al kalíc, jako je hydroxid lithný nebo kyselina, jako je kyselina chlorovodíková nebo trifluor35 octová kyselina.

-58CZ 301504 CZ

Syntetická metoda B

noj	7-Ο., (i6)	R^X^NL	π’υύν°2 “ α’ΛΛνη Šj
ου	(bl)	02)	03)
	RyyH! cS,		Z.,,COOR3 -i _ M *·<> yyvz .1
	G-, nebpKSCt-SJOEí	G .1
	(M)	05)	on
r2^x nh2	z,7 -fí2~Xnl4H } 0H0b'J G.j f
< on	Oí) (V3) J

Aminoskupina 2-nitroanilinového derivátu al může být chráněna vhodnou chránící skupinou L za získání bl. l ato sloučenina potě reaguje s halogenovým derivátem nebo amoniovou solí aó za získání b2 a sloučenina b3 se získá odstraněním chránící skupiny L. Orthofenylendiaminový derivát b4 se získá redukcí nitroskupiny b3. Po reakci této sloučeniny s CS₂ nebo KCS(-S)0et a získání sloučeniny b5, tato sloučenina reaguje s halogenovým esterovým derivátem a4 za získání benzimidazolového derivátu a7 podle vynálezu. Tato sloučenina se může hydrolyzovat, pokud to je nezbytné, za vzniku benzimidazolového derivátu podle vynálezu, kde R je atom tn vodíku.

Sloučenina b3 se může také získat přímo reakcí nechráněného halogenového derivátu, amoniové soli a6 nebo aldehydového derivátu b6 s 2-nitroanilinovým derivátem al. Příklady chránící skupiny L zahrnují trifluoracetylovou skupinu, acetylovou skupinu, terc-butoxykarbony lovou skupinu a benzylovou skupinu.

Reakce 2-nitroanilinového derivátu al a aldehydového derivátu bó se může provést při podmínkách konvenční reduktivní aminace za použití redukčního činidla, jako je například LiAlH, NaBH₄, NaB-iCN, NaBH(OAc)₂, nebo diboranu, v rozpouštědle, jako je ethanol, methanol a dichlormethan při teplotě od 0 do 200 °C. Dále, reakce mezi orthofenylendiaminovým derivátem b4 a CS₂ se může provést stejným způsobem, jako při syntézní metodě A, zatímco reakce KCS(=S)OEt se může provést podle metody popsané například v Organic Synthesis (OS), 1063, díl 4, str. 569-570. Další reakce se mohou provést stejným způsobem jako syntézní metoda A.

Benzimidazolový derivát 1 podle předkládaného vynálezu, kde E je COOR³, M je S a G je amidová vazba se může připravit syntetickou metodou C uvedenou dále:

Syntetická metoda C ^rV>Vs^a'^coor3

05) ^ζ°ου^{018υ n} °COQtBu (c2)

A-COOA³

HOOC

C3)

(c5)

-59CZ 301504 CZ kde Q znamená methylenovou skupinu, fenylenovou skupinu, atd., a Z znamená atom halogenu, a R¹, R\ R\ A, J a X mají význam uvedený shora, s tím, že R³ je neaktivní chránící skupina, jako je methylová skupina, ethylová skupina, při kyselých podmínkách.

Jmenovitě, sloučenina c2 se získá reakcí thiobenzimidazolové sloučeniny a5 s terč butylesterhalogenovým derivátem Cl. Tato sloučenina se poté může hydrolyzovat v kyselých podmínkách za získání c3. Tato sloučenina se kondenzuje s aminovým derivátem c4 za získání sloučeniny c5 podle vynálezu. Dále, tato sloučenina se muže hydrolyzovat, pokud to je nezbytné, za získání benzimidazolového derivátu podle předkládaného vynálezu, kde R je atom vodíku.

io

Kondenzační amidace se může provést konvenčním způsobem použitím kondenzačního činidla. Jako kondenzační činidla se mohou použít DCC, DIPC, EDC=WSCI, WSCLHC1, BOP a DPPA atd., která se mohou použít samotná nebo v kombinaci s HONSu, HOBt, HOOBt, přičemž tato činidla se mohou použít samotná nebo v kombinaci s HONSu, HOBt nebo HOOBt. Reakce se υ může provést ve vhodném rozpouštědle, jako je THF, chloroform nebo terc-butanol, při teplotě od 0 do 200 °C. Ostatní reakce se můžou provést stejným způsobem jako v syntézní metodě A.

Benzimidazolový derivát 1 podle předkládaného vynálezu, kde E je COOR³, M je S a G je etherová vazba se může připravit podle syntetické metody D uvedené dále:

Syntetická metoda D

(i5) td2) (<M) kde Z znamená halogen, R¹, R², R³, A, J a X mají význam uvedený shora.

Tak thiobenzimidazolová sloučenina a5 reaguje s například halogenovým alkoholovým derivátem d 1 za vzniku sloučeniny d2. Fenolový derivát d3 reaguje s touto sloučeninou za získání sloučeniny d4, který se může, pokud to je nezbytné, podrobit hydrolýze za získání benzimidazolového derivátu, kde R³ je atom vodíku.

Etherifikace se může provést Mitsunobuovou reakcí a podobnými reakcemi při teplotě 0 až 200 °C ve vhodném rozpouštědle, jako je N-methylmorfolin nebo THF, za použití ťosťínové sloučeniny, jako je trifenylfosfin a tributylfosfin a azosloučenina, jako je DEAD a TMAD. Další reakce se mohou provést stejným způsobem jako v syntetické metodě A,

Benzimidazolový derivát 1 podle předkládaného vynálezu, kde E znamená tetrazol-5-yl a M je S sc může připravit syntetickou metodou E popsanou dále:

Syntetická metoda E

kde R¹, R², A, G, J a X mají význam uvedená shora.

Nitril el reaguje s různými azidovými sloučeninami, za vzniku tetrazolové formy e2.

-60CZ 301504 CZ

Jako azidová sloučenina se uvádí trialkyItinazidová sloučenina, jako je trimethyltinazid a hydrazoová kyselina a její amonná sul. Jestliže se použije organický azid cínu, potom se použije v 1 až 4 násobném množství vzhledem ke sloučenině al. Jestliže se použije kyselina hydrazoová nebo její amonná sůl, pak se může použít 1 až 5 násobek molámího množství azidu sodného a chloridu amonného nebo terciárního aminu, jako je triethylaminu, vzhledem ke sloučenině el. Každá reakce se může provést při teplotě od 0 do 200 °C v rozpouštědle, jako je toluen, benzen a DMF.

Benzimidazolový derivát obecného 1 podle předkládaného vynálezu, ve kterém M je SO nehn io SO₂ se může připravit syntetickou metodou F uvedenou dále:

Syntetická metoda F

COCR³ * Y^N_0_A COOr3

G G

J J í«) (fit) kde R¹, R², R'\ A, J a X mají význam uvedený shora.

Tak sulfoxidový derivát fl a/nebo sulfonový derivát f2 se získají reakcí benzimidazolového derivátu a7 s peroxidovou sloučeninou ve vhodném rozpouštědle. Jako peroxidová sloučenina se může použít kyselina perbenzoová, m-chlorperbenzoová kyselina, peroctová kyselina, peroxid vodíku, a jako rozpouštědlo se může použít chloroform a dichlormethan. Neplatí žádné zvláštní omezení, pokud se týká použití poměru a7 a peroxidové sloučeniny, a ačkoliv výhodný poměr je vybrán v širokém rozsahu, obvykle se použije 1,2 k 5 molům. Každá reakce se provádí obecně při teplotě okolo 0 až 50 °C, výhodně při teplotě od 0°C do teploty místnosti a obecně se dokončí během 4 až 20 hodin.

Benzimidazolový derivát 1 podle předkládaného vynálezu, ve kterém M je jednoduchá vazba se může získat podle následující syntetické metody G:

Syntetická metoda G

ÍO nh₂

NH

G., (M) jy·^{000 5}

G J (fi2)

Fr ^rÝT\-a-^cooh

J (g3) kde X, A, G, J a R³ mají význam uvedený shora.

Jmenovitě, benzimidazolový derivát g2 podle předkládaného vynálezu se může získat reakcí známého chloridu kyseliny gl sdiaminovou sloučeninou b4. Dále, pokud to je nezbytné, hydrolýzou skupiny -COOR¹ sloučeniny g2, se může získat benzimidazolový derivát g3, kde R³ je atom vodíku.

Dále, cyklizační reakce je popsána v J. Med. Chem, 1993, díl 36, str. 1175 -1187.

Dále, sloučenina Z-G-J popsaná v syntézníeh metodách A až F se může připravit odkazem na 40 velké množství publikací.

-61 CZ 301504 CZ

Například halogenid benzothiofenu se může připravit 5 odkazem na následující literaturu a patent.

J. Chem, Soc. (1965), 774

J. Chem, Soc. Perkin Trans 1, (1972), 3011

JACKS, 74, 664, (1951); Patent US 4 282 227

Tyto sloučeniny se mohou také připravit s odkazem na následující literaturu a patenty. Jmenovitě, tyto sloučeniny se mohou připravit nejen reakcemi popsanými v následující literatuře, ale také kombinací typických reakcí, jako jsou oxidačně-redukční nebo OH halogenační reakce.

J. Chem. Soc., (1965), 774; Bull. Chem. Soc. Jpn. (1968), 41,2215; japonská patentová přihláška o bez průzkum 10-298180; Sulfur Reports, (1999), díl 22, 1 47; J. Chem. Soc. Comm., (1988),

888; J. Heterocyclic Chem., 19, 859, (1982); Synthetic Communication, (1991), 21, 959; Tetrahedron Letters, (1992), díl 33, č. 49, 7499; Synthetic Communications, (1993), 23(6), 743; japonská patentová přihláška bez průzkumu 2000-239270; J. Med. Chem., (1985), 28, 1896; Arch. Pharm. (1975), 308, 7, 513; Khim. Gerotsikl. Soedin., (1973), 8, 1026; Bull. Chem. Soc.

Jpn., (1997), 70, 891; J. Chem. Sioc. Perkin 1, (1973), 750; J. Chem. Soc. Chem. Comm., (1974), 849; J. Chem. Soc. Comm. (1972), 83.

Zejména hydroxymethylová forma v poloze 3 benzothiofenu může být snadno syntetizována s odkazem na J. Chem. Soc. Chem. Comm., (1974), 849.

o

Pokud se týká jodidů, Cl a Br formy mohou být získány výměnou halogenu s Nal a tak dále.

Dále, derivát kvartémi amoniové soli benzothiofenu se může připravit reakcí vhodného aminu, jako je dimethylamin s dříve uvedeným halogenovým derivátem benzothiofenu. Dále se může také připravit následujícím způsobem:

Syntetická metoda H

kde R znamená jeden nebo více substituentů ve shora uvedené J, počet substituentů je volitelný o a substituenty mohou být nezávislé substituenty,

-62CZ 301504 CZ

Jmenovitě, cyklický benzothiofenový derivát h3 se získá konverzí aminoskupiny 2-nitroanilinového derivátu hl na kyanovou formu h2 a reakcí s ethyl 2-merkaptoacetátem. Navíc, kyselina karboxylová h5 se získá kyanací aminoskupiny na kyanovou formu h4 a následnou hydrolýzou esteru. Karboxylová kyselina se poté dekarboxyluje za získání h6. Kyanoskupina se redukuje za vzniku aminové formy h7 a následnou N-dimethylací se získá h8 a poté následuje N-methylace za získání kvartémí soli h9.

io

Kyanacc aminoskupiny 2 nitrcan:Hnovéhe derivátu hl se provádí konverzí aminoskupiny na diazoniovou skupinu, za použití například kyseliny chlorovodíkové nebo siřičitanu sodného a následnou reakcí s chloridem měděným a kyanidem draselným.

Reakce z kyano vé formy h2 na benzothiofenový' derivát h3 k získání cyklického benzoíhiofenového derivátu h3 se provede zahříváním s ethyl 2-merkaptoacetáteui ve vhodném rozpouštěli dle, jako je DMF v přítomnosti vhodného zásaditého činidla, s odvoláním na metodu popsanou například v Synthetic Communications, 23(6), 743-748 (1993); nebo Farmacol, Ed. Sci., 43,

1165 (1988).

Pokud se týká kyanacc h3, může se h3 převést na kyanovou formu h4 reakcí kyanidu mědi 20 a terc-butyl siřičitanu ve vhodném rozpouštědle, jako je například DMSO při vhodné teplotě.

Hydrolýza esteru se může provést za použití obvyklých metod. Například karboxylová kyselina h5 se může získat hydrolýzou esteru ve vhodném rozpouštědle, jako je THF-MeOH v přítomnosti vhodného alkalického činidla, jako je například hydroxid sodný.

Dekarboxylace karboxylové kyseliny se může provést zahříváním ve vhodném rozpouštědle, jako je chinolinové rozpouštědlo v přítomnosti měděného katalyzátoru.

Redukce kyanoskupiny na aminoskupinu se může provést za získání aminové formy, například 30 redukcí ve vhodném rozpouštědle, jako je EÍ2O-THF při vhodné teplotě a za použití vhodného redukčního činidla, jako je lithiumaluminiumhydrid.

Methylace aminoskupiny se může provést zahříváním, například v kyselině mravenčí nebo vodném roztoku formalinu.

Konverze aminové skupiny na kvartémí sůl se provede například reakcí s methy Ijodidem v ethanolovém rozpouštědle.

Derivát indolové kvartémí aminové soli se může připravit například následující metodou: 40

Syntetická metoda K

kde R znamená jeden nebo více substituentů ve shora uvedeném J, přičemž počet substituentůje volitelný a substituenty mohou být nezávislé substituenty.

-63CZ 301504 CZ

Jmenovitě, nitro forma kl se konvertuje na enamin k2 enaminací a následnou konverzí na indolovou formu k3 indolovou cyklizací podle metody Reisserta. Dále, dimethy lam inomethy lovů forma v poloze 3 sloučeniny vzorce k5 se získá podle Mannichovy reakce a následnou

N-Jimethylací, která je následována N-methylací za zisku kvartémí aminové soli kó.

Enaminační reakce se může provést například zahříváním O-nitrotoluenového derivátu kl s dimethylacetalem Ν,Ν-dimethylformamidu a pyrrolidinem ve vhodném rozpouštědle, jako je DMF.

io

Indolová cyklizační reakce se může provést pří teplotě místnosti za použití plynného vodíku v přítomnosti Raney niklu ve vhodném rozpouštědle, jako je toluen.

N-methylace sc může provést například zahříváním v rozpouštědle DMF za použití terc-butoxidu draselného nebo dimethyloxalátu.

Dimethylaminomethylace ve 3. poloze se může provést například za použití Mannichovy reakce a reakcí při teplotě místnosti v rozpouštědlové směsi dioxanu a kyseliny octové za použití vodného formalinového roztoku nebo vodného dimethylaminového roztoku.

Dále, indolový derivát se může připravit postupem, uvedeným v Heterocycles, díl 22, č. 1, 195, (1984).

Dále, benzothiofenové, indolové a ostatní heterocyklické halogen idy a kvartémí soli se mohou

2í připravit jak je popsáno v literatuře, jako Hcterocyclic Compound Chemistry, (Kondansha Scientific, vyd. H. Yamanaka).

Benzimidazolové deriváty podle vynálezu mohou být konvertovány, je-li to žádoucí, na své lékařsky přijatelné, netoxické soli. Jako takové soli se mohou uvést soli iontů alkalického kovu, jako je Na* K’; soli iontů kovu alkalických zemin, jako Mg² a Ca²⁺; ionty kovů, jako je Al^u aZn²\ nebo organická báze, jako je amoniak, triethylamin, ethylendiamin, propandiamin, pyrrolidin, piperidin, piperazin, pyridin, lysin, cholin, ethanolamin, Ν,Ν-methylglukamin. Mezi nimi jsou výhodné soli Na\ Ca²\ lysin, cholin, N,N-d i methy lethano lamin a N-methylglukamin.

Benzimidazolové deriváty podle předkládaného vynálezu inhibují aktivitu lidské chymázy. Konkrétně, !C$o je 1000 nM nebo menší, výhodně 0,01 nM nebo více až menší než 1000 nM a výhodněji je 0,05 nM až menší než 500 nM. Benzimidazolové deriváty podle vynálezu, které mají takové vynikající inhibiční působení na lidskou ehymázu se mohou použít jako klinicky to použitelná preventivní a/nebo terapeutická činidla pro různé nemoci.

Benzimidazolové deriváty podle předkládaného vynalezu mohou být podávány jako farmaceutické prostředky spolu s farmaceuticky přijatelnými nosiči orální nebo neorální cestou, poté co byly tvarovány do různých dávkových forem. Jako parenterální podání se zde může uvést intra45 venózní podání, subkutánní, intramuskulámí, perkutánní, rektální, nazální podání a podání pomocí očních kapek.

Příklady dávkových forem pro uvedené farmaceutické prostředky zahrnují tablety, pilulky, granule, prášky, roztoky, suspenze, sirupy a kapsle.

Kapsle jsou tvarovány konvenčními technikami za použití farmaceuticky přijatelného nosiče, jako je vehikulum, pojivo a dezintegrační činidlo. Pilulky, granule a prášky mohou být tvarovány za použití konvenčních metod s použitím vehikula, jak je uvedeno u tablet. Roztoky, suspenze a sirupy mohou být formovány za použití konvenčních metod, za použití esterů glycerinu,

-64CZ 301504 CZ alkoholů, vody nebo rostlinných olejů. Kapsle mohou být formovány naplněním granulí, prášků a roztoků do kapslí zhotovených ze želatiny atd.

Neorální preparáty se mohou podávat ve formě injekčního preparátu intravenózně, subkutánně a intramuskulámě. Příklady injekčního preparátu zahrnují případ, kdy se benzimidazolový derivát podle vynálezu rozpustí v kapalině rozpustné ve vodě, jako je fyziologický roztok nebo v nevodné kapalině, zahrnující organický ester, jako je rostlinný olej.

io

V případě perkutánního podání se použijí dávkové formy. jako jsou masti a krčmy. Masti se mohou připravit smícháním benzimidazolového derivátu podle vynálezu stukem nebo lipidem, vazelínou atd. a krémy se mohou připravit smícháním benzimidazolového derivátu podle vynálezu s emulgátorem.

V případě rektálního podání se podání provede ve formě čípků, za použití měkkých želatinových kapslí atd.

V případě nazálního podání se mohou použít formulace zahrnující kapalnou nebo práškovou kompozici. Jako báze pro kapalnou formulaci se může použít voda, fyziologický roztok, fosfátový pufr, acetátový pufr a dále mohou také obsahovat povrchově aktivní látky, antioxidanty, ?o stabilizátory, konzervační činidla a zahušťovadla. Jako báze pro práškové formulace se uvádějí báze absorbující vlhkost, jako jsou ve vodě rozpustné polyakryláty, nižší aikylethery celulózy, polyethylenglykol, polyvinylpyrrolidon, amylóza, pullulan nebo ve vodě nerozpustné báze. jako celulóza, škrob, proteiny, kaučuk a síťované vinylpolymery, ačkoliv výhodné jsou ve vodě rozpustné báze. Dále, tyto báze se mohou použít jako směs. Dále, v případě práškových formulací se mohou přidat antioxidanty, barviva, konzervační činidla, antiseptická činidla nebo polysaprobická činidla. Uvedené kapalné formulace a prášky se inohou podávat za použití například rozprašovacího zařízení.

V případě očních kapek se mohou použít vodné nebo nevodné oční kapky. Pro vodné oční kapky 30 se používá jako rozpouštědla sterilní čištěná voda, fyziologický roztok. Jestliže se použije jako rozpouštědlo sterilní čištěná voda, potom se při přípravě očních kapek ve formě suspenzí může přidat suspenzační činidlo jako povrchově aktivní činidlo a polymemí zahušťovadlo atd. Alternativně, při přípravě očních kapek ve formě roztoku se může použít solubilizaění činidlo, jako je neiontová povrchově aktivní látka. Pro nevodné oční kapky se může použít nevodné rozpouštědlo pro injekce jako rozpouštědlo a mohou se použít také ve formě nevodných očních kapek.

V případě, kdy podání do očí se provádí jiným způsobem než použitím očních kapek, použijí se oční masti, aplikační roztoky, spreje a inserty.

to V případě inhalace nosem nebo ústy, benzimidazolový derivát podle předkládaného vynálezu může být inhalován za použití například aerosolového spreje pro inhalaci společně s obvykle používanými pomocným i látkami, ve formě roztoku nebo suspenze. Dále, benzimidazolový derivát podle předkládaného vynálezu může být podáván ve formě suchého prášku, za použití inhalátoru, který umožňuje přímý kontakt s plícemi.

K takovým různým formulacím se mohou přidávat, podle potřeby, farmaceuticky přijatelné nosiče, jako jsou isotonická činidla, konzervační činidla, dezinfekční činidla, smáčedla, pufry, emulgátory, dispergátory a stabilizátory.

Dále, tyto různé preparáty' mohou být sterilizovány přidáním antimikrobiálních činidel, filtrací přes filtr zadržující bakterie, zahříváním nebo ozářením. Alternativně se mohou připravit sterilní pevné formulace, které se mohou použít jejich rozpuštěním nebo suspendováním ve vhodném sterilním roztoku bezprostředně před použitím.

-65CZ 301504 CZ

Ačkoliv se dávky benzimidazolového derivátu podle předkládaného vynálezu liší v závislosti na typu nemoci, cestě podání a symptomech, věku, pohlaví, tělesné hmotnosti atd. pacienta, obecně jsou v rozsahu 1 až 500 mg/den/pacienta a výhodně 10 až 300 mg/den/pacienta v případě orálního podání. V případě parenterálního podání, jako je intravenózní, subkutánní, intramusku5 Jarní, perkutánní, rektální, nazální, oční kapky a inhalace, jsou dávky v rozsahu 0,1 až 100 mg/den/paeienta, výhodně 0,3 až 30 mg/den/pacienta.

Jestliže je benzimidazolový derivát podle předkládaného vynálezu použit jako preventivní činidlo, může se podat podle známých metod, závisejících na konkrétním stavu.

io

Pokud se týká nemocí, při kterých mohou být sloučeniny podle vynálezu použity jako preventivní a/nebo terapeutická činidla, uvádí se například nemoci respiračních orgánů, jako například bronehiální astma, zánětiivé a alergické nemoci, jako je alergická rinitida, atopická dermatitida, a kopřivka, nemoci cirkulačních orgánů, jako jsou sklerotizujíeí vaskulámí leze, vasokonstrikce, poruchy periferního oběhu, renální selhání a srdeční selhání; nemoci metabolismu kostí a chrupavek, jako je revmatická artritida a osteoartritída.

Příklady provedení vynálezu

Předkládaný vynález bude nyní podrobněji vysvětlen s odkazy na preparativní příklady, pracovní příklady a testovací příklady. Je třeba uvést, že tyto příklady v žádném případě neomezují rozsah vynálezu.

Referenční příklad 1

Příprava 5,6-d imethy lbenzimidazol-2-thiolu ^nh2 CS₂, pyridin-----------------J T xý__SH

NH_Ž reflux, 18 hod., 70 %

40 ml (0,66 mmol) sulfidu uhličitého se přidá k pyridinovému roztoku (40 ml) 4,5 g (33 mmol)

5,6-dimethylorthofenylendiaminu. Po míchání výsledného roztoku po dobu 18 hodin při zahřívání při zpětném toku se přidá voda a poté následuje extrakce ethylacetátem. Po sušení ethylacetátové fáze bezvodým síranem horečnatým se směs koncentruje za sníženého tlaku a suší se 6 hodin při 80 °C za sníženého tlaku a tak se získá 4,1 g cílové sloučeniny (výtěžek: 70 %).

'lí-NMR (270 MHz, DMSO-d^ó) (ppm): 12,30 (br, lH>, 6.91 (s, 2H>, 2,21 (s, 6H)

Referenční příklad 2

Příprava ethylesteru 4-{5,6-dimethylbenzimidazol-2-yllhio)butanoátu

N Er-''-^-CO,E!

VSH —--->- J T fj NElj, DMF, SďC hod, W % μΙ (0,25 mmol) triethylaminu a 36 μΐ (0,25 mmol) ethyl 4-brombutanoátu se přidá k 36 mg (0,20 mmol) 5,6-dimethylbenziinidazol-2-thiolu. Po míchání výsledného roztoku po dobu

12 hodin při 80 °C se přidá voda a poté následuje extrakce diethyletherem. Po sušení diethy 1etherové fáze bezvodým síranem hořečnatým se směs koncentruje a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (směs hexan/ethylacetát v poměru 4:1) a tak se získá 54 mg cílové

- 66 CZ 30Í504 CZ sloučeniny (výtěžek: 92 %). Potvrzení sloučeniny se uskuteční jejím identifikováním z molekulární váhy za použití LC-MS. Vypočtená hodnota M - 292,12, změřená hodnota (M+H)‘ = 293,40

Referenční příklad 3

Následující sloučeniny se syntetizují podle stejné metody jako v referenčním příkladu 2. Potvrzení sloučenin se uskuteční jejich identifikován íni z molekulární váhy za použití LC MS,

Ethyl 4-íbenzimidazol-2-ylthio)butanoát

Vypočtená hodnota M = 264,09, změřená hodnota (M+H)' = 293,40 Ethyl 4-(5,6-difluorbenzimidazol-2-ylthio)butanoát Vypočtená hodnota M = 300,07, změřená hodnota (M+H)¹ - 301,3 ?o Referenční příklad 4

Příprava 3-brom methyl-5-methy lbenzofbjthiofenu

Výroba 3-hydroxymethyl-p-nitrotoluenu HO

BH₃-SMC₂

THF, 80^2

HO

NO₂

5,02 g (27,7 mmol) kyseliny 5-methyi-2-nitrobenzoové se rozpustí v 20 ml THF, poté se roztok přidá po kapkách do 11,1 ml 10,2M komplexu boran-dimethylsulfidu a směs se zahřívá při

80 °C. Po 1,5 hodině se do tohoto reakčního systému přidá po kapkách 30 ml IM kyseliny chlorovodíkové za ochlazování ledem a za míchání, Tento systém se poté koncentruje za sníženého tlaku a tak se získá 100 ml vodné fáze a následuje extrakce ethylacetátem (2x100 ml). Po promytí ethylacetátové fáze nasycenou solankou se organická fáze suší síranem hořečnatým a následuje koncentrace za sníženého tlaku a sušení a tak se získá 3,91 g cílové sloučeniny

3? (výtěžek: 85 %).

Krok 2

Výroba 3-fonnyl-p-nitrotoluenu

HO

OMS O, (COC1)₂, Et₃N

YX._40

5,5 ml (63,2 mmol) oxalylchloridu se přidá k 50 ml dichlormethanu a ochladí se na -60 °C. Po 20 minutách se přidá 9,13 ml (138,6 mmol) DMSO a směs se míchá pri 60 °C, o 15 minut později se přidá 3,91 g (23,3 mmol) 3-hydroxymethyl-p-nitrotoluenu získaného v kroku 1 při -60 °C a za míchání. Po 30 minutách se po kapkách přidá 45 ml triethylaminu při -60 °C a poté se teplota vrátí zpět na teplotu místnosti. Po koncentrování za sníženého tlaku se přidá ke zbytku 0,lM kyselina chlorovodíková a poté následuje extrakce ethylacetátem (2x150 ml). Organická

-67CZ 301504 CZ fáze se poté suší síranem hořečnatým a koncentruje se za sníženého tlaku a tak se získá 5,02 g cílové sloučeniny (surový výtěžek: 130 %).

Krok 3

Příprava 2-karboxyethyi--5--methy Ibenzofbjthiofenu '^₀ HS^COOEt

NO₂ K₂CO₃, DMF 50*C

Γ

5,02 g (63,2 mmol) 3-formyl-p-nitrotoluenu získaném v kroku 2 se rozpustí v 50 ml DMF a poté následuje přidání 3,06 ml (28,1 mmol) ethylmerkaptoacetátu a 4,85 g (35,1 mmol) uhličitanu io draselného a míchání při 50 °C. Po 9,5 hodině se teplota zvýší na 80 °C a poté se směs zahřívá ještě dalších 100 minut. Po skončení reakce se k reakčnímu roztoku přidá 250 ml vody a poté následuje extrakce ethyíacetátem (3x100 ml) a sušení síranem hořečnatým. Po koncentrování rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek čistí sloupcovou chromatografii na silikagelu (hexan/ethylacetát v poměru 8:1) a poté se zbytek dále čistí sloupcovou chromatografii na silikagelu (hexan/ethylacetát v poměru 10:1) a tak se získá 2,48 g (11,2 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 48 %).

'H-NMR (400 MHz, CDCfi) (ppm): 7,98 (s, III), 7,73 (d, IH, J - 8,28 Hz), 7,65 (s, IH). 7,27 (d, 1 H,J = 8,32 Hz), 4,39 (q,2H), 2,47 (s,3H), 1,41 (s,3H)

Krok 4

Příprava 2-karboxy~5--rnethylbenzo[b]thiofenu aq.NaOH-THF-MeOH' ^5 o reflux, 2(hnin

K

30 ml roztoku methanolu, THF a 2M vodného roztoku hydroxidu sodného (1:1:1) se přidá k 2,17 g (9,87 mmol) 2 kaibo\ye(hyl-5 rnethylbenzo]b|thioíenu získaného v kroku 3 a zahřívá se při zpětném toku. Po 20 minutách se roztok neutralizuje kyselinou a poté následuje koncentrace za sníženého tlaku a regenerace sraženiny. Ta se poté promyje 50 ml vody a suší se a tak se získá 2,03 g (10,5 mmol) cílové sloučeniny (surový projekt: 107 %).

'H-NMR (400 MHz, CDCh) (ppm): 7,94 (s, IH), 7,74 (d, IH, J = 8,56 Hz), 7,69 (s. IH), 7,27 (d, IH, J = 8,30 Hz), 2,47 (s, 311)

Krok 5 55

Příprava 5-methylbenzo[bJthiofenu

OH Cu, chinolin O 190*C, l,5h

2,03 g (9,87 mmol) 2-karboxy-5-methylbenzo[b]thiofenu získaného v kroku 4 se rozpustí v 10 ml chinolinu a poté následuje přidání 799,2 mg měďného prášku a zahřívání na 190 °C. Po

100 minutách se roztok ochladí a poté se přidá 40 ml 0,5M kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se ethyíacetátem (2x 40 ml). Organická fáze se promyje 40 ml vody a poté se suší síranem hořečnatým. Po koncentrování rozpouštědla za sníženého tlaku se provede čištění sloupcovou chromatografii na silikagelu (hexan/ethylacetát v poměru 20:1) a tak se získá 1,41 g (9,51 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek dvou kroků z kroku 4: 96 %).

-68CZ 301504 CZ 'H-NMR (270 MHz, CDCl,) (ppm): 7,76 (d, IH, J= 8,24 Hz), 7,62 (s, IH), 7,40 (d, IH.

J ' 5,44 Hz). 7.24 (tn, III), 7,17 (d, IH, J = 8,24 Hz), 2,47 (s. 3H)

Krok 6

Příprava 3-chlormethylkarbonyl-5-methylbenzo[b]thiofenu

CCljCOC!, AíCíj

CH₂CI₂, -65°C.4h

ml dichlormethanu se přidá k 1,33 g (9.97 mmol) chloridu hlinitého a následuje ochlazení na -65 °C suchým ledem a acetonem. Po 10 minutách se po kapkách přidá 1,12 ml (10,0 mmol) tn trichloracetylchloridu. Po dalších 20 minutách se po kapkách přidá 10 ml roztoku dichlormethanu obsahujícího 1,41 g (9,51 mmol) 5-methylbenzo[bjthiofenu získaného v kroku 5 a poté se míchá při zhruba -65 °C. Po 1 hodině a 10 minutách se teplota zvýší na 0 °C. Po další 1 hodině a 40 minutách se přidá 10 ml IM kyseliny chlorovodíkové a směs se míchá. Po přidání 20 ml vody k reakčnímu systému, odstranění dichlormethanové fáze kapalinovou separací a poté extrakcí vodné fáze ethylacetátem se vodná fáze spojí s dichlormethanovou fází a poté se koncentruje za sníženého tlaku. 3.2 g výsledného zbytku se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (silikagel; 120 g, hexan) a tak se získá 686,7 mg (2,34 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek; 24 %).

’H-NMR (400 MHz, CDCh) (ppm): 8,89 (s, 1H), 8,51 (s, IH), 7,78 (d, IH, J = 8,28 Hz), 7,30 (d, IH, J-8,32 Hz), 2,53 (s, 3H)

Krok 7

Příprava 3-karboxy-5-methyIbenzo[b]thiofenu

686,7 mg (2,34 mmol) 3-chlormethylkarbonyl--5--methylbenzo[b]thiofenu získaného v kroku 6 se rozpustí v 2,0 ml THF a 3,0 ml MeOH a poté se přidá 2 ml 2M vodného roztoku hydroxidu sodného a směs se míchá při teplotě místnosti. Po 2 hodinách a 45 minutách se přidá 5 ml 2M vodného roztoku hydroxidu sodného a poté se směs zahřívá na 60 °C. Po ochlazení o 30 minut později a přidání 10 ml 2M kyseliny chlorovodíkové a 30 ml vody se roztok extrahuje ethylacetátem a poté následuje koncentrace za sníženého tlaku a sušením se získá 438,9 mg (2,28 mmo!) cílové sloučeniny (výtěžek: 97 %).

'H-NMR (400 MHz, CDCl·,) (ppm): 8,44 (s, IH), 8.36 (s, 1H), 7,74 (d, IH, J - 8,04 Hz), 7,22 (d, 1 H,J-8,28 Hz), 2,50 (s,3H)

-69CZ 301504 CZ

Krok 8

Výroba 3-hydroxymethyk5-methylbenzo[b]thiofenu

OH r^0H

BH_rTHF, THF tm.,75mín

438,9 mg (2,28 mmol) 3-karboxy-5--methy lbenzo[b]thiofenu získaného v kroku 7 se rozpustí v 5 ml THF a poté se přidá komplexní roztok BHj.THF a směs se míchá při teplotě místnosti. Po 1 hodině a 15 minutách se přidají 4 ml 2M kyseliny chlorovodíkové a směs se míchá, přidá se 50 ml ethylacetátu. Organická fáze se promyje 30 ml vody a suší se síranem hořečnatým a poté následuje koncentrace za sníženého tlaku. Výsledný zbytek se čistí Biotagem (hexan/ethylacetát io v poměru 4:1) a tak se získá 347,6 mg (1,95 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 86 %).

‘H-NMR (400 MHz, CDCl,) (ppm): 7,74 (d, IH, J- 8,04 Hz), 7,65 (s, 1H), 7,34 (s, IH), 7,19 (d, 111, J 8,28 Hz), 4,89 (s, 2H), 2,48 (s, 3H) is Krok 9

Příprava 3-brommethyl-5-methylbenzo[blthiofenu

OH Br ^FBr3» CH₂C1₂ tm₇30min.

326 mg (1,83 mmol) 3-hydroxymethyK5 -methylbenzo[b]thiofenu získaného v kroku 8 se 20 rozpustí v 10 ml dichlormethanu a poté se přidá 0,262 ml bromidu fosforitého a směs se míchá při teplotě místnosti. Po 30 minutách se přidá 30 ml vody a poté se směs míchá 10 minut a extrahuje se dichlormethanem (2x 30 ml). Organická fáze se poté koncentruje za sníženého tlaku a suší se a tak se získá 379,5 mg (1,65 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 90 %).

¹ H-NMR (270 MHz, CDCl,) (ppm): 7,74 - 7,67 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,22 (d, 1H, J = 8,24 Hz),

4.74 (s, 2H), 2,51 (s, 3H)

Referenční příklad 5

Příprava ((4-methylbenzo[b]thiofen-3 -yl)methyl)trimethylarnoniumjodidu

Krok 1

Příprava 2-kyano-3-nitrotoluenu

NH,

1) NaNO₂, HClaq,

2) CuCl(2cq.)-KCN(8cq,)

CN

NO;

H₂O, Q°C, 12h 'NO

76,07 g (500 mmol) 2-amino 3 nitrotoluenu se přidá k 100 g (990 mmol) 36% kyseliny chlorovodíkové a 500 g ledu a následuje intenzivní míchání při 0 °C. Poté se po kapkách pomalu přidá 80 ml vodného roztoku obsahujícího 37,95 g (550 mmol) dusitanu sodného, přičemž teplota se udržuje při 0 až 5 °C. Po dokončení přidávání se přidá 100 ml toluenu a poté se směs míchá 30 minut při 0 °C. Reakční roztok se umístí do ledové lázně s NaCl a poté se pomalu přidá hydro-70CZ 301504 CZ genuhličitan sodný, přičemž se směs intenzivně míchá a směs se neutralizuje na pH okolo 6 (roztok diazoniové soli 1).

Vodný roztok (550 ml) obsahující 260,5 g (4000 mmol) kyanidu draselného se pomalu při 0 °C přidá k vodnému roztoku (650 ml) obsahujícím 99,0 g (1000 mmol) chloridu mědného a poté se směs míchá 90 minut a poté se přidá 200 ml ethylacetátu. Poté se přidá po kapkách během 30 minut roztok diazoniové soli 1 přičemž se teplota udržuje na 0 až 5 °C, Roztok se poté míchá 12 hodin v ledové lázni a poté se zahřeje na teplotu místnosti. Po extrahování reakčního roztoku ethyiacctáíe-iri a promyt: organické fáze vodou se směs suší síranem hořečnatým a poté se koncentruje rozpouštědlo za sníženého tlaku. Zbytek se poté čistí sloupcovou chromatografií na silíkagelu (hexan/ethylacetát v poměru 20:1 —» 10: 1 —> 7:1 -> 5:1 -> 3:1) a tak se získá 58,63 g (362 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 72 %).

'H-NMR (270 MHz, CDCh) (ppm): 7.68 (2H, m). 8.13 (IH, m), 2,715 (3H, s) !5

Krok 2

Příprava 3-am i no-2-ethoxy karbony M-methylbenzo[bJthiofenu ά:

HS CO₂E1

K₂CO₃, DMF, WC, 12h

COOEt

Roztok DMF (250 ml) obsahující 58,63 g (362 mmol) 2-kyano-3-nitrotoluenu získaný v kroku 1, 47,5 g (395 mmol) ethyl 2-merkaptoacetátu a 57,5 g (416 mmol) uhličitanu draselného se míchá 12 hodin při 100 °C. Reakční roztok se poté koncentruje jako takový za sníženého tlaku a do určitého stupně se odstraní DMF. Poté se přidá voda a tak se rozpustí neorganické substance a poté se směs extrahuje ethylacetátem. Po promytí organické fáze vodou se směs suší síranem hořečnatým a poté se koncentruje rozpouštědlo za sníženého tlaku. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silíkagelu (hexan/ethylacetát v poměru 10:1) a tak se získá 62,86 g (267 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 74 %).

’H-NMR (270 MHz, CDCh) (ppm): 7,54 (d, IH), 7,29 (t, IH), 7,03 (d, IH), 6,28 (s, 2H), 4,35

3tí (q, 2H), 2,82 (s, 3H), 1,39 (t,3H)

Krok 3

Příprava 3--kyano-2-ethoxykarbonyl-4-methylbenzo[b]thíofenu

^íBuONO(3,Ocq.), CuCN(l.3 eq.) DMSO, Ó0⁶C,1.5h

COOEt

Po nahrazení reakčního systému dusíkem se přidá 82,0 g (795 mmol) t-butylnitritu a 30,9 g (345 mmol) kyanidu měďnatého k 250 ml DMSO a směs se rozpustí za míchání po dobu 30 minut při teplotě 55 °C. Poté se pomalu přidá po kapkách v průběhu 2 hodin roztok DMSO (100 ml) obsahující 62,2 g (265 mmol) 3-amino-2-ethoxykarbonyM-methylbenzo[bjthiofenu získaného v kroku 2, přičemž teplota se udržuje na 55 °C. Po ohřátí reakčního roztoku na 60 °C a míchání po dobu 140 minut se směs ochladí na 0 °C a poté se pomalu přidá voda a směs se 1 hodinu míchá při 0 °C. Reakční roztok se poté filtruje Celitem a tak se odstraní nečistoty a po extrahování dichlormethanem a promytí organické fáze vodou se směs suší síranem hořečnatým a poté se koncentruje rozpouštědlo za sníženého tlaku. Zbytek se poté čistí sloupcovou chromatografií na silíkagelu (hexan/ethylacetát v poměru 20:1 -> 15:1 -> 10:1) a tak se získá 15,59 g (63,6 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 24 %).

-71 CZ 301504 CZ 'H-NMR (270 MHz, CDCh) (ppm): 7,73 (d, 1H), 7,44 (t, IH), 7,30 (d. 1H), 4,50 (q, 2H), 2.95 (s,3H), 1,47 (t,3H)

Krok 4

Příprava 3-kyano-4-methylbenzo[b]thiofenu

MeOH-TIIF-HjO, tm., 30 min. chinolin, 150 ’C, 1 hod.

15,59 g (63,6 mmol) 3-kyano-2-ethoxykarbonyH4-methylbenzo[b]thiofenu získaného v kroku io 3 se rozpustí v směsi methanolu (150 ml), THF (150 ml) a vody (150 ml) a poté se přidá 30 ml

5M vodného roztoku hydroxidu sodného a míchání pokračuje 2 hodiny při teplotě místnosti. Po koncentrování rozpouštědla za sníženého tlaku se pH sníží na 4 přidáním 1M kyseliny chlorovodíkové a po extrahování směsi ethylacetátem a promytí organické fáze vodou se směs suší síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se poté koncentruje za sníženého tlaku a tak se získá 315 kyano-2-karboxy-4-methylbenzo[b]thiofenu. Tento produkt a 1,27 g (20 mmol) měďnatého prášku se přidá k 18 ml ehinolinu a poté následuje míchání po dobu 2 hodin při 150 °C. Po ochlazení reakčního roztoku se směs filtruje Celitem a pH filtrátu se sníží na 3 přidáním kyseliny chlorovodíkové, přičemž se chinolin převede jako rozpouštědlo do vodné fáze a poté následuje extrakce ethylacetátem. Po promytí organické fáze vodou se směs suší síranem hořečnatým a zo rozpouštědlo se koncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se poté čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexan/ethylacetát 20:1) a tak se získá 9,10g (52,6 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek těchto dvou kroků: 83 %).

'H-NMR (270 MHz, CDCh) (ppm): 8,15 (s, IH), 7,74 (d, IH), 7,36 (t, IH), 7,25 (d, IH), 2,91 (s, 3H)

Krok 5

Výroba 3-((N-d imethy lam ino)methyl)-4-methylbenzo[blthiofenu /

io

Po přidání po kapkách roztoku diethyletheru (20 ml) a THF (20 ml) obsahujícího 9,10 g (52,6 mmol) 3-kyano-4-methylbenzo[blthiofenu získaném v kroku 4 do 50 ml diethyletherové suspenze 2,0 g (53 mmol) lithiumaluminiumhydridu během 15 minut při teplotě místnosti se roztok míchá 30 minut při teplotě místnosti. Po dokončení reakce se přebytek LAH v reakční směsi zpracuje kyselinou chlorovodíkovou a poté se přidá vodný roztok hydroxidu sodného do alkalické reakce. Po nasycení vodné fáze uhličitanem draselným, extrakci s dichlormethanem a promytí organické fáze vodou se produkt suší síranem horečnatým. Rozpouštědlo se koncentruje za sníženého tlaku a získá se 3-aminomethyh4-methylbenzo[b]thiofen. K tomuto produktu se postupně přidá 11,5 g (250 mmol) kyseliny mravenčí a 10,0 g (123 mmol) 37% vodného roztoku formaldehydu a následuje míchání 5 hodin při teplotě 80 °C. Po skončení reakce přidáním vodné kyseliny chlorovodíkové k reakční mu roztoku se tento roztok koncentruje za sníženého tlaku, aby se odstranily kyselina mravenčí a formaldehyd. Potom se přidá do alkalické reakce roztok hydroxidu sodného a následuje extrakce dichlormethanem, Po promytí organické fáze vodou se organická fáze suší síranem horečnatým a rozpouštědlo se koncentruje za sníženého tlaku. Získaný zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexairethyl-72 CZ 301504 CZ acetát = 10:1) a získá se 2,61 g (12,8 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek dvou stupňů: 24 %).

Potvrzení sloučeniny bylo provedeno identifikací¹ H-NMR.

'H-NMR (270 MHz, CDCb) (ppm): 7,66 (s, IH), 7,26 - 7,09 (m, 3H), 3,65 (s, 2H), 2,85 (s, 3H), 5 2,27 (s, 6H).

Krok 6 !0 γί ιμιανα ((*+—niLiny y !)methy IjírimethvlamonÍumjodidu /

3,69 g (26 mmol) methyljodidu se přidá k 20 ml ethanolového roztoku obsahujícího 2,61 g (12,8 mmol) 3-{N,N-dimethy!amino)rnethyl)-4-rnethylbenzo[b]thiofenu, získaném v kroku 5 a poté následuje míchání 18 hodin při teplotě místnosti. Vzniklá bila suspenze se filtruje k odstranění přebytku methyljodidu a rozpouštědla, následuje promytí ethanolem (2x 10 ml) a diethyletherem (3x 10 ml) a získá se 3,08 g (8,88 mmol) cílové sloučeniny ve formě bílé pevné látky (výtěžek; 69 %).

Ή-NMR (270 MHz, DMSO) (ppm): 8,19 (s, IH), 7,93 (d, IH), 7,36 - 7,25 (m,2H), 4,91 (s, 2H), 4,91 (s, 2H)> 3,05 (s. 9H). 2.77 (s. 3H).

Referenční příklad 6

Příprava ((1,4- dimethylindol-3-yl)methyl)methylamoniumjodidu

Krok I

Příprava 4-methy 1 indolu

MeíNCH{QMe)_a, pyrrolidin no, DMF, 120 C, 72 hod.

uC

NMe₂

H_2l Raney Ni

Toluen, tm., 20 hod. ^67%(2 stupni)

30,5 g (256 mmol) N,N-dirnethylformarniddirnethylacetalu a 10,9 g (153 mmol) pyrrolidinu se přidá ke 150 ml N,N-d i methyl formám ido vého roztoku obsahujícího 19,4 g (128 mmol) 2,3-dimethylnitrobenzenu. Výsledný roztok se míchá 72 hodin při teplotě 120 ^CC a koncentruje se jako takový. Ke vzniklé hnědé olejové suspenzi se přidá 100 ml toluenu a poté 11 g Raney niklu (50%, vodná kaše, pH > 9) a směs se míchá. Vnitřek reakční nádoby se nahradí plynným vodí35 kem a následuje míchání po dobu 20 hodin při teplotě místnosti v atmosféře vodíku. Po filtraci reakční směsi přes Celit se filtrát koncentruje a získá se 30 g černého roztoku. Tento roztok se poté čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexan:ethylacetát = 10:1) a získá se 11,33 g (86 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek dvou stupňů: 67 %). Potvrzení sloučeniny bylo provedeno identifikací za použití 'H-NMR.

'H-NMR (270 MHz, CDCf) (ppm): 7,28- 7,07 (m, 3H), 6,93 (m, IH), 6,57 (m, IH), 2,57 (s, 3H)

-73CZ 301504 CZ

Krok 2

Příprava 1,4-dimethylindolu (COOMe);, KOfeu

DMF, 120 °C, 5,5 bod,

94%

12,7 g (134 mmol) terc-butoxidu draselného a 80 ml Ν,Ν-dimethylformamidu se vloží do předem vysušené reakční nádoby. Potom se přidá 8,9 g (67,9 mmol) 4-methylindolu získaném v kroku 1 a následuje míchání 35 minut při teplotě místnosti. K této směsi se přidá i 5,8 g (134 mmol) dimethyloxalátu a následuje míchání 5 hodin a 30 minut při teplotě 120 °C. Po koncentraci za sníženého tlaku se přidá 200 ml vody a poté se provede zpracování s 1M id kyselinou chlorovodíkovou do kyselé reakce (pH = 3) a následně se provede extrakce ethylacetátem (2x 200 ml) a sušení bezvodým síranem hořečnatým. Po oddestilování rozpouštědla za sníženého tlaku se zbytek čistí sloupcovou chromatografíi na silikagelu (hexan:ethylacetát = 5:1) a získá se 9,24 g (53 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 94 %). Potvrzení sloučeniny se provede identifikací za použití 'H-NMR.

'H-NMR (270 MHz, CDCU) (ppm): 7,25- 7,09 (m, 2H), 7,03 (m, IH), 6,90 (m, IH), 6,49 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,55 (s, 3H).

Krok 3

Příprava 1,4-d imethy 1-3--(Ν,Ν-dimelhy lam inomethyl )indolu i _rNMe₂

37%HCHOaq..50%Me₂NHaq. .L/

1.VDioxan, AcOH, tm., 2 hod. N

5,9 ml (72,0 mmol) 37% vodného roztoku fórmaldehydu a 7,08 ml (78 mmol) 50% vodného roztoku dimethylaminu se postupně přidá ke směsnému systému, obsahujícímu 25 ml 1,4-di25 oxanu a 25 ml kyseliny octové. Po ochlazení na teplotu místnosti, vzhledem k tomu, že dochází k vývoji tepla, se přidá 10 ml 1,4-dioxanového roztoku obsahující 9,24 g (63,6 mmol) 1,4-dimethylindolu získanému ve stupni 2 a poté následuje míchání po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Reakční roztok se koncentruje takový jako je. Ke zbytku se přidá 5M vodný roztok hydroxidu sodného do alkalické reakce (pH = 12), obsah se upraví na celkový objem 100 ml a poté se provádí extrakce ethylacetátem (2x 100 ml). Organická fáze se suší bezvodým síranem hořečnatým a koncentruje se za sníženého tlaku a získá se 12,93 g (63,9 mmol) cílové sloučeniny (surový výtěžek; 100,4%). Potvrzení sloučeniny se provede provedením identifikace za použití 'H-NMR.

'H-NMR (270 MHz, CDCf) (ppm): 7,15-7,06 (m, 2H), 6,91 (m, IH), 6,85 (m, IH), 3,71 (s, 3H), 3,59 (s, 2H), 2,74 (s, 3H), 2,27 (s, 6H).

Krok 4

Příprava ((1,4 -dimethylindol-3-yl)methyl)trimethylamoniumjjodidu

NMe₂

Mel

NMeJ

EtOH, tm., 2 hod. 76 % (2 stupně)

-74CZ 301504 CZ

12.93 g (63,6 mmol) 1.4-dimethyI-3-(N,N-dimethylaminornethyl)indolu získaném v kroku 3 se rozpustí v 60 ml ethanolu a poté následuje přidání 4,36 ml (70 mmol) methyljodidu. Po 2 hodinovém míchání při teplotě místnosti se vytvoří bílá sraženina. Tato sraženina se odfiltruje, promyje se dvakrát 10 ml ethanolu a po vysušení ve vakuu se získá 16,66 g (48,4 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek ve 2 stupních: 76 %). Potvrzení sloučeniny se provede provedením identifikace za použití 'H-NMR.

'lI-NMR(270 MHz, DMSO) (ppm): 7,65 (s, IH), 7,36 (d, IH), 7,13 (t, 1H), 6,91 (d, IH), 4,74

-i o a /_ , ai <„ nn\ A ilja itlj, J,or (č, Jii), J,ui v a, ziij, h,\}j v o, .7117.

Referenční příklad 7

Příprava hydrobromidové soli 4 (5 metho\yben/imida/oi-2-_vithio)buíanoatu

Br^/v^^'CO₂Et

Y T kh-I Γ vsWW . WSj

H

EtOH, 80 ”C, l hod. 90%

H H-Br 'CO₂Et

6,48 g (33,2 mmol) ethyl 4-brombutanoátu se přidá k 10 ml ethanolového roztoku, obsahujícímu 5,0 g (27,7 mmol) 5--methoxybenzimidazol-2--thiolu a poté se směs míchá 1 hodinu při teplotě 80 °C a přidá se 90 ml ethylacetátu. Teplota reakčního roztoku se vrátí na teplotu místnosti a vytvořené krystaly se odfiltrují a po vysušení se získá 9,34 g cílové sloučeniny (výtěžek: 90 %).

H NMR (270 MHz. CDCh) (ppm): 7,65 (d. 1H. J = 8.91 Hz), 7,24 (s, IH), 7,00 (dd, IH,

J = 2,43, 8,91 Hz), 4,21 (q, 2H. .1 = 7.29 Hz), 3,83 (s, 3H), 3,74 (m, 2H), 2,61 (m, 211), 2,10 (m,2H). 1.30 (t,3H,J = 7,29 Hz).

Příklad 1

Příprava sloučeniny č. 39 ód

NM.-J

CO,El

NaOHiq

THF, CsíCOj, 80 ’C 6 hod., 67%

MeOH, tnu 16 hod. 100% so 480 mg (2,49 mmol) a 10 ml tetrahydrofúranu se vloží do předem vysušené reakční nádoby. Potom se přidá 505 mg (1,91 mmol) ethyl 4-{benzimidazol-2-yÍthio)butanoátu získaném v referenčním příkladu 3 a 274 mg (2,10 mmol) ((l,4-dimethylindol-3-yl)mcthyl)trimethylamoniumjodidu a následuje míchání po dobu 6 hodin při teplotě 80 °C. Po filtraci roztoku přes Celit se tento roztok koncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silika35 gelu (dichlormethan :ethylacetát = 8:1) a získá se 540 mg (1,28 mmol) ethyl 4-( 1-((1,4-dimethylindol-3-yl)methyl)benzimidazol-2-ylthio)butanoátu (výtěžek: 67 %).

2,0 ml 2M vodného roztoku hydroxidu sodného se poté přidá k 6 ml methanolového roztoku obsahujícího 540 mg (1,28 mmol) vznikajícího 4-( 1-((1,4-dimethyl indol—3—yl jmethyl )benz40 imidazoÍ-2-ylthío)butanoátu. Směs se míchá 16 hodin při teplotě místnosti a přidá se 6M kyselina chlorovodíková, aby se zastavila reakce. Rozpouštědlo se odstraní na určitý stupeň koncentrací za sníženého tlaku a poté se provede extrakce s ethylacetátem. Následuje pro mytí ethy Iaeetátové fáze nasycenou solankou a sušení této fáze bezvodým síranem hořečnatým. Po oddesti-75CZ 301504 CZ lování rozpouštědla za sníženého tlaku se provede čištění sloupcovou chromatografii na silikagelu (dichlormethammethanolu = 8:1) a získá se 502 mg (1,28 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 100%), Potvrzení sloučeniny se provede provedením identifikace molekulové hmotnosti za použití LC-MS.

Vypočtená hodnota M = 393,15, naměřená hodnota (M+H) = 394,2

Příklad 2 io

Následující sloučeniny a sloučeniny v následující tabulce se připraví podle metody příkladu 1, za použití sloučenin indikovaných v referenčním příkladu 2 nebo 3 a rovněž ve formě různých kvartérních amoniových solí nebo halogenových derivátů připravených s odkazem na referenční příklady 4 až 6 a ostatní reference popsané v textu. Potvrzení sloučenin se provede provedením identifikace jejich molekulární hmotnosti za použití LC-MS, Nicméně, některé ze sloučenin se připraví za podmínek, které se poněkud liší od podmínek příkladu 1, včetně podmínek jako je použití DMF a tak dále jako rozpouštědla a použití uhličitanu jako báze při kondenzaci, použití 1HF a EtOH jako rozpouštědla při hydrolýze a použití teploty od teploty místnosti do 50 °C.

Dále byly připraveny podobně následující sloučeniny. 4-( l-( 1-methylindol-3-yl)ethyl)benzimidazol-2-ylthio)butanová kyselina (sloučenina ě, 1153)

V tomto případě se použije methansulfonátový ester 2-( l-methylindol-3-yl)ethanolu místo kvartérní amoniové soli a halogenového derivátu. Potvrzení sloučeniny se provede provedením identifikace molekulové hmotnosti za použití LC-MS.

Vypočtená hodnota M = 393,15, naměřená hodnota (M-H) = 394,0

4-( l-(4-methyl-7-chlorbenzo[b]thiofen--3-yl)methyl)benzimidazol--2-ylthio)butanová kyselina (sloučenina ě, 1154)

Výtěžek: 15 % (dva stupně N-alkyiace a esterová hydrolýza)

Vypočtená hodnota M = 430,06, naměřená hodnota (Μ · H) - 431,2 'H-NMR (270 MHz, DMSO <16) (ppm): 12,17 (br, IH), 7,63 (d, IH, J = 7.83 Hz), 7,47-7,40 (m, 2H), 7,26 (d, IH. J 8,10 Hz), 7,22 - 7,11 (m, 2H), 6,46 (s, 1H), 5,86 (s, 2H), 3,34 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 2,84 (s, 311), 2,34 (t, 2H, J = 7,29 Hz), 1.94 (m, 2H) to 4--(1-J4--methyl--Ί-bromben/o[b]thiofen-3-yl )methyl)benzimidazol--2--ylthio)butanová kyselina (sloučenina ě. 1155)

Výtěžek: 56 % (dva stupně N-alkylace a esterová hydrolýza)

Vypočtená hodnota M = 474,01, naměřená hodnota (M+H)' = 477,0 'H-NMR (270 MHz, DMSO) (ppm): 12,18 (br, 1H), 7,63 (d, IH, J- 7,56 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 7,56 Hz), 7,46 (d, IH, J= 7,56 Hz), 7,22- 7,11 (m, 3H), 6,46 (s, 1H), 5,85 (s, 2H), 3,34 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 2,83 (s, 3H), 2,34 (t. 2H, J - 7,29 Hz), 1,97 (m, 2H)

-76CZ 301504 CZ

Sloučenina č.	Vypočtená hodnota M	Naměřená hodnota (M+H) +	Výtěžek stupně)	(dva %
35	393,15	394,2	10
36	393,15	394,2	15
3?	393.15	3 94,1	25
38	393,15	394,1	19
39	393,15	394,2	67
40	407,17	408,2	3
41	413,10	414,3	74
42	397,13	398,3	26
43	409,15	410,1	3
44	455,17	456, 2	1
45	517,18	518,1	8
46	413,10	414,1	53
47	397,13	398,1	56
48	409,15	410,3	81
49	404,13	405,2	31
50	409,15	410, 1	24
52	382,08	383,2	65
54	416,04	417,3	100
56	396,10	397,3	63
58	396,10	397,1	95
59	416,04	417,1	44
63	410,11	411,3	33
514	408,17	408,3	83
519	421,18	422,2	36
521	441,13	442,3	58
532	410,11	411,3	65
534	444,07	445,3	80
536	424,13	425,3	7 3
538	424,13	424,2	1 1
615	461,07	462,0	89
628	450,00	451,0	78

-77C7. 301504 CZ

Příklad 3

Příprava sloučeniny č. 148

Stupeň 1

Příprava ((benzothiofen-3-yl)methyl)(4-methoxy-2-nitrofenyl)am inu

h,co^no,

DMF. CsiCOj, 100 °C 0'^cF, 12 hod., 44 % ,co_n

740 mg (2,8 mmol) 4-methoxy--2--nitrofluoranilidu se rozpustí v 5 ml dimethylformamidu a poté ío se postupně přidá 503 mg (3,64 mmol) uhličitanu draselného a 773 mg (3,4 mmol) 3-brotnmethylbenzothiofenu a směs se zahřívá na 100 °C, Po 12 hodinách se přidá 5 ml 5M vodného roztoku hydroxidu sodného a směs se zahřívá při zpětném toku l hodinu. Po 15 minutách se roztok ochladí na teplotu místnosti, přidá se 10 ml vody a směs se extrahuje chloroformem. Po promytí organické fáze dvakrát 25 ml nasycené solanky a sušení síranem hořečnatým se směs koncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexan:ethylacetát - 60:1) a získá se 400 mg ((benzothiofen-’3’-yl)methyl)(4-methoxy-2-nitroťenyl)aminu ve formě oranžového prášku (výtěžek 44 %).

Stupeň 2

Příprava 1-((benzothiofen-3-yl)methyl)-5-(methoxybenzimidazol-2-thiolu

H₃CO

NO_} Sh'-N»0Haq

Dioxin. EtOH, rcílux 15 rain.

S

Zn

H_aCQ.

í _bpd.

CS}

EtOH, reftux, IShixi 30 %, (2

>-SK ml ethanolu a 4 ml 1.4 dioxanu se přidají k 400 mg (1,23 mmol) ((benzothiofen-3-yl)incthyl)(4- metho\y 2 -nitroťenvl)aminu a poté se přidá 0,34 ml 5M vodného roztoku hydroxidu sodného a směs se zahřívá při zpětném toku. Po 15 minutách se reakční roztok odstaví z olejové lázně a následuje přidávání po částech 320 mg (4,9 mmol) zinkového prášku. Reakční roztok se opět zahřívá při zpětném toku 1 hodinu. Po ochlazení na teplotu místnosti se zinkový prášek odfiltruje a filtrát se koncentruje za sníženého tlaku a následuje extrakce chloroformem. Organická fáze se promyje dvakrát 5 ml nasyceného roztoku solanky a následuje sušení síranem ϊο hořečnatým, koncentrace za sníženého tlaku a získá se 309 mg hnědého oleje.

Vzniklý hnědý olej se rozpustí v 10 ml ethanolu, poté se přidá 2,5 ml (42 mmol) sulfidu uhličitého a směs se zahřívá při zpětném toku. Po 12 hodinách se teplota roztoku vrátí na teplotu místnosti a směs se koncentruje za sníženého tlaku. Přidají se 2 ml ethanolu provede se ozáření ultrazvukovými vlnami, aby došlo k rozdrobení produktu na jemné zlomky, které se poté odfiltrují. Vzniklý prášek se promyje dvakrát s 2 ml ethanolu a poté se suší a získá se 120 mg (0,37 mmol) H(benzothiofen-3-yl)methyl)-5-methoxybenzimidazol 2-ylthiolu (výtěžek ve dvou stupních: 30 %).

-78CZ 301504 CZ

Stupeň 3

Příprava ethyl 4-( 1--((benzothiofen-3-yl)methyl)-5-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoátu

OMF, KjCOj, aot:, 12h. 45%

Bts^x^COjEI ^hjCO

101 mg l-{(benzothiofen-3 -yl)methyl)-5-{methoxybenzimidazol-2-thiolu se rozpustí ve 2 ml dimethylformamidu a poté se přidá 62 mg (0,45 mmol) uhličitanu draselného a 53 mg (0,40 mmol) ethyl 4-brombutanoátu a směs se zahřívá na teplotu 80 ^UC. Po 12 hodinách se reakční roztok koncentruje za sníženého tlaku a extrahuje se diethyletherem a poté se směs promyje dvakrát 10 ml nasycené solanky a suší se síranem horečnatým. Rozpouštědlo se poté io odpaří za sníženého tlaku a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexamethylacetát = 1:1) a získá se 60 mg (0,136 mmol) ethyl 4-{1-((benzothiofen-3-yl)methyl)-5methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoátu (výtěžek: 45 %).

Stupeň 4

Příprava 4-(l-benzoihiofen-3-yl)methyl)-5-[nethoxybenzÍmidazol-2-ylthio)butanové kyseliny (Γ V >-S'^*^XV'CO_íEI 4H 00Han *

EtOH, 50 ’C. 3 hod. 36 % mg (0,136 mmol) ethyl 4-4j-((benzthiofen-3-yl)methyl)-5-methQxybenzimidazol-2 -ylthio)butanoátu se rozpustí ve 2 ml methanolu a poté se přidá 0,5 ml 4M vodného roztoku hydroxidu sodného. Směs se míchá 3 hodiny při 50 ^QC, k zastavení reakce se přidá 6M kyselina chlorovodíková a poté se provede koncentrace za sníženého tlaku a extrakce zbytku chloroformem. Po promytí organické fáze nasycenou solankou se organická fáze suší bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se koncentruje za sníženého tlaku a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií (ethylacetát) a získá se 20 mg (0,048 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 36 %).

Potvrzení sloučeniny se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití LC-MS. Vypočtená hodnota M - 4 i 2,09, naměřená hodnota (M+H)* =413,1 jo Příklad 4

Příprava sloučeniny 135

Cílová sloučenina se získá stejným způsobem jako v příkladu 3.

Avšak, ((l,4-dimethylindol-3-yl)methyl)trÍmethylamoniumjodid se použije při reakci odpovídající kroku 1.

Potvrzení sloučeniny se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití LC-MS.

Vypočtená hodnota M = 423,16 naměřená hodnota (M111) = 424,3

-79CZ 301504 CZ

Příprava sloučeniny č. 137

Cílová sloučenina se získá stejným způsobem jako v příkladu 3.

Avšak, ((1 -methyl-4-chlorindol-3-yl)methyl)trimethylamoniumjodid se použije při reakci odpovídající kroku 1.

Potvrzení sloučeniny se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití LC-MS. Vypočtená hodnota M = 443,11 naměřená hodnota (M+H)^f = 444,3

Příklad 5

Příprava sloučeniny č. 244

Cílová sloučenina se získá za stejných podmínek jako v příkladu 3. Avšak, 4-kyano-2-nitrotrifluoracetonitri 1 se použije jako reakční složka odpovídající kroku 1. Dále, krok, ve kterém se

2-nitroanilinový derivát redukuje na orthoťenylendiaminový derivát a krok, ve kterém se tento produkt cyklizuje na benzimidazoI-2-thiolový derivát se provede za použití metod popsaných dále.

EtOH. KjOOfcPd-C «I

IQ bod.

NC

KSCfrS)OEl ΕΙΟΜ-Η,Ο, rtUux, hoď. 43 % (2 Stapoi)

ml ethanolu se přidá k 1,1 g (3,56 mmol) ((3-benzothiofenyl)methyl)(4-kyano-2-nitrofenyl)aminu a poté se přidá 2,4 g (17,8 mmol) uhličitanu draselného. Po náhradě reakčního systému dusíkem se přidá 220 mg 10% palladia na uhlí a následuje náhrada reakčního systému vodíkem a zahřívání na 60 °C.

Po 4 hodinách a 30 minutách se přidá dalších 220 mg 10% palladia na uhlí a provede se náhrada reakčního systému vodíkem a zahřívání na 60 °C. 5 hodin a 10 minut po začátku reakce se reakční systém ochladí na teplotu místnosti. Reakční roztok se poté filtruje přes Celit a koncentruje se za sníženého tlaku a získá se 0,93 g kapalného zbytku. Poté se 0,93 g (2,63 mmol) ((2-benzothiofenyl)methyl)(2-amino-4-methylfenyl)arninu rozpustí v 10 ml ethanolu a 2 ml vody a směs se zahřívá při zpětném toku po přidání 2,1 g (13,3 mmol) ethylxantátu draselného. Po 11 hodinách se po kapkách přidá 12,5 ml 40% vodného roztoku kyseliny octové. Po ochlazení na teplotu místnosti a koncentraci za sníženého tlaku se zbytek čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexamaeeton = 2:1) a získá se 491,7 mg I-((2-benzothiofenyl)methyl)-6-kyanobenzimidazol-2-thiolu (výtěžek ve dvou stupních: 43 %). Potvrzení sloučeniny se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití 'H-NMR a LC-MS.

Vypočtená hodnota M = 407,8 naměřená hodnota (M+H)* = 408,2 ‘H-NMR (400 MHz, CDCL) (ppm): 7.94 (s, IH), 7,76 (dd, IH), 7,52 (dd, IH), 7,42 (m, 3H), 7,31 (d, IH), 7,00 (s, 1H), 5,56 (s, 2H). 3,35 (t, 2H), 2,47 (t, 2H), 2.15 (p, 2H) i?

-80CZ 301504 CZ io

Příklad 6

Za použití stejného způsobu jako v příkladu 5 se získají následující cílové sloučeniny Příprava sloučeniny č. 340

Jako reakční složka odpovídající kroku 1 se použije 4-methyl-2-nitrofIuoracetanilid.

Potvrzení sloučeniny č. 340 se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití LC-MS, Vypočtená hodnota M = 396,10 naměřená hodnota (M+H)' = 397,0

Příprava sloučeniny č. 436

Jako reakční složka odpovídající kroku 1 se použije 5-methyl-2-nitrofluoracetaniiid.

Potvrzení sloučeniny č. 436 se provede identifikací z molekulové hmotností za použití LC-MS. Vypočtená hodnota M - 396.10 naměřená hodnota (M+H)^f 397,0

Příklad 7

Příprava sloučeniny č. 34 25

Krok 1

Příprava ((l-inethylindol-3-yl)methyl)(2-aminofenyl)aminu

829 mg (6 mmol) 2-nitroanílinu a 1242 mg (7,8 mmol) 1-methylindolkarboxaldehydu se rozpustí v 20 ml tetrahydrofuranu a poté se postupně přidá 200 μΐ kyseliny octové a 5087 mg (24 mmol) NaBH(OAc)3 a směs se míchá přes noc pří teplotě místnosti. Po přidání nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, extrakci ethylacetátem a sušení síranem hořečnatým se rozpouštědlo oddestiluje a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexan:ethylacetát = 95:5) a získá se 264 mg ((1 -methylindol-3-yl)metliyl)(2-nitrofenyl)aminu (výtěžek: 18 %). Poté se 264 mg ((l-methylindol-3-yl)methyl)(2-nitrofenyl)aminu rozpustí v 10 ml ethanoiu a následuje přidání 50 mg (0,047 mmol) 10% ru-C a míchání 6 hodin při teplotě místností v atmosféře vodíku. Po skončení reakce se Pd-~C odfiltruje a rozpouštědlo se oddestiluje za sníženého tlaku a získá se 212 mg ((1 -methylindol—3—yljmethyl)(2-aminofenyl)40 aminu (výtěžek: 90 %).

-81 CZ 301504 CZ

Krok 2

Příprava 1-((1 -methy lindol-3-yl)methyl)benzimidazol-2-thiolu

212 mg (0,845 mmol) ((Í-rnethylindol-3-yl)methyl)(2-aminofeny1)aminu se rozpustí v 1 ml pyridinu a poté se přidá 1 ml (16,9 mmol) sulfidu uhličitého a směs se zahřívá při zpětném toku t hodinu v atmosféře dusíku. Rozpouštědlo se oddestiluje a poté následuje čištění zbytku sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexamethylacetát = 2:1) a získá se 96 mg l-((l-methylÍndol-3“yl)methyl)benzimidazol-2-thiolu (výtěžek: 39 %).

Krok 3

Příprava -4(1((1 -methylindol-3-yl)methylbenzimidazol-2-ylthio)butanové kyseliny

βι'^^χχ·αο,Εΐ N*H. THF, »Ú., 40mtn

TUF-McOK Hutí % (2 stupni)

mg (0,342 mmol) hydridu sodného a 2 ml tetrahydrofuranu se vloží do předem vysušené reakční nádoby. Poté se přidá do reakční nádoby 50 mg (0,171 mmol) l-(( I-methy li ndo 1-3-yl)methyl)benzimidazol-2-thiolu a 34 μΐ (0,23 mmol) ethyl 4-brombutanoátu a směs se míchá 40 minut pri teplotě 60 ^QC. Přidá se voda a směs se extrahuje ethylacetátem. Po sušení ethylacetátové fáze bezvodým síranem hořečnatým se reakční roztok koncentruje za sníženého tlaku a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (hexan:ethylaeetát = 3:1) a získá se ethyl 4-(14(l-methylindol-3-yl)methylbenzimidazol-2-ylthio)butanoát. Poté se přidá 0,25 ml 4M vodného roztoku hydroxidu líthného k 1 ml obsahujícímu tento ethyl 4-( l-(( 1-methylindol3-yl)methylbenzimidazol-2-ylthio)butanoát a 0,5 ml methanolu. Směs se míchá přes noe při teplotě místnosti, k zastavení reakce se přidá 6M kyselina chlorovodíková a následuje extrakce s ethylacetátem. Po promytí ethylacetátové vrstvy nasycenou solankou se tato vrstva suší síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se poté oddestiluje za sníženého tlaku a získá se 16 mg (0,042 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 25 %).

Potvrzení sloučeniny se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití LC-MS. Vypočtená hodnota M = 379,14 naměřená hodnota (M+H)' = 380,2

Příklad 8

Příprava 5(1 ((l,4-dimethylindol-3-yl)methyl)benzimidazol-2-yl)pentanové kyseliny

Krok 1

4ΰ Příprava ethyl 5-(benzimidazor2 yl)pentanoátu

NH, „CO, El

NH, TEA, CHCh, im., I2hod konc. HCl, £tOH/rel]«x 10 bod.. 30%

-82 CZ 301504 CZ

696 μ| (5,0 mmol) triethylaminu a 893 mg (5.0 mmol) methyladipochloridu se přidá po kapkách k 10 ml chloroformového roztoku obsahujícího 540 mg (5,0 mmol) ortho -fenylendiaminu a poté se směs míchá při teplotě místnosti 12 hodin. Přidá se 20 ml ethanolu a 4 mt koncentrované kyseliny chlorovodíkové a směs se míchá 10 hodin za zahřívání při zpětném toku. Reakční roztok se poté neutralizuje za použití 5M vodného roztoku hydroxidu sodného a následuje extrakce ethylacetátem. Po promytí vodou a koncentrací za sníženého tlaku se zbytek čisti sloupcovou chromatografií (pouze ethylacetát) a získá se 359 mg 5-(benzimidazol-2-yl)pentanoátového ethylesteru (výtěžek: 30 %).

io Krok 2

Příprava 5 (1 ((l,4-dnnethylindol -3-ylimethyl)henzimida/.ol 2 yl)pentanove kyseliny

mg (0,3 mmol) uhličitanu draselného a 103 mg (0,3 mmol) ((1,4-d i methy lín do 1-3-y!)ni ethyl )15 trimethylamoniumjodidu se přidá ke 2 ml DMF roztoku, obsahujícího 50 mg (0,2 mmol) výsledného ethyl 5-(benzimidazol-2-yl)pentanoátu a směs se 2 hodiny míchá při teplotě 120 °C. Vzniklý roztok se extrahuje dichlormethanem, promyje se vodou, koncentruje se a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií (hexan.ethylacetát = 1:2). Poté se přidá 5 ml ethanolu a 0,5 ml 4M vodného hydroxidu sodného a směs se míchá 10 hodin při teplotě 50 °C a poté se přidá 6M kyselina chlorovodíková, aby se zastavila reakce. Roztok se extrahuje chloroformem, promyje se vodou a koncentruje se do sucha za sníženého tlaku, zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (chlorofomrmethanol = 10:1) a získá se 35 mg cílové sloučeniny (výtěžek ve dvou stupních: 47 %).

Potvrzení sloučeniny se provede identifikací z molekulové hmotnosti za použití LC-MS. Vypočtená hodnota M = 375,19 naměřená hodnota (M^H) = 376,5

Příklad 9

Příprava sodné soli sloučeniny č. 519

11,9 ml (1,19 mmol) 0,lM vodného roztoku hydroxidu sodného se přidá ke 100 ml vodného 35 roztoku, obsahujícího 503 mg (1,19 mmol) shora uvedené sloučeniny č. 519 a poté se směs míchá při teplotě místnosti. Poté se reakční roztok suší vymrazováním a získá se 470 mg (1,05 mmol) sodné soli (výtěžek: 89 %).

'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7,37 (s, IH), 7,19 (d, IH, J- 8,24 Hz), 7.09-7,01 40 (m, 2H), 6,80 (d, IH, J - 7,09 Hz), 6,32 (s, 1H), 5,66 (s, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,26 (m, 2H), 2,66 (s, 3H), 2,27 (s, 3H). 2,21 (s, 311), 1,95 (m, 2H), 1,81 (m, 2H).

-83CZ 301504 CZ

Příklad 10

Sloučeniny indikované dále se připraví za použití odpovídajících substrátů podle stejné metody jako v příkladu 9.

Sodná sůl sloučeniny č. 39 'H-NMR (400 MHz, DMSO dój (ppm): 7,57 (d, IH, J= Hz), 7,28 (d, IH, J = 7 Hz), 7,20 (d, IH, J = 8 Hz), 7,15 -7,00 (m, 3H), 6,77 (d, IH, J - 7 Hz), 6,47 (s, IH), 5,69 (s. 2H). 3,60 io (s, 311), 3,31 (t, 21L J - 7 Hz), 2,61 (s, 3H), 1,99 (t, 2H, J = 7 Hz), 1,84 (p, 211, J = 7 Hz)

Sodná sůl sloučeniny č. 52 'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7.97 (d, IH), 7,91 (d, IH, J = 6,76 Hz), 7,57 (d, IH, is J 7,75 Hz), 7,44- 7,38 (m, 3H), 7,30 (s, IH), 7,12 (m, 2H), 5,63 (s, 2H), 3,33 (m, 2H), 2,03 (m, 2H), I,87(m, 2H)

Sodná sůl sloučeniny č. 135

2o 'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7,21 - 7,00 (m, 4H), 6,79 (d, IH, J = 7,29 Hz), 6,67 (dd, IH, J 2.43, 8.91 Hz), 6,51 (s, IH), 5,65 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,31 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 1,95 (m, 2H), 1,82 (m, 2H)

Sodná sůl sloučeniny č. 532 'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7,98 (d, IH, J = 7,42 Hz), 7,90 (d, IH, J = 6,43 Hz), 7,44- 7,39 (m, 2H), 7,35 (s, IH), 7,18 (m, 2H), 5,57 (s, 2H), 3,28 (m, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,99 (m,2H), 1,84 (m, 2H)

Příprava ethyl 4-(l-((4-methylbenzothiofen-3-yl)methyl-5-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoátu a ethyl 4-(l-((4-methy lbenzothiofen-3-yl)methyl-6-rnethoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoátu

539 mg (i,44 mmol) ethyl 4-(5-methoxybenziniidazol-2-ylthio)butanoátu se suspenduje ve 4 ml toluenu a poté se přidá 616 μΙ (3,60 mmol) diizopropylethylaminu a 384 mg (1,59 mmol) 4--methyl-3- (bromincthyl)bcnzo[bjthiofcnu a směs se zahřívá při 100 °C. Smčs se nechá reagovat přes noc, přidá se nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného a poté se směs extrahuje ethyíacetátem. Organická fáze se promyje vodou, suší se nad síranem horečnatým a koncentruje se do sucha za sníženého tlaku. Vzniklý zbytek se čistí sloupcovou chromatografii (hexan:ethyl40 acetát = 4:1) a získá se 114 mg ethyl 4-{l-((4-methylbenzothiofen-3 yl)methyl-5-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoátu (výtéžek: 17 %) a 68 mg ethyl 4-(l {(4-methylbenzothioťen3-yl)methyl-6-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoátu (výtěžek: 10 %).

Ethyl 4-( 1 -((4-methy 1 benzothiofen-3-yl) methy l)-5-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoát 'H-NMR (270 MHz, CDCfi) (ppm): 7,71 (d, IH, J- 7,56 Hz), 7,62 (d, IH, J= 8,64 Hz), 7,30-7,18 (m, 2H), 6,87 (dd, IH, 2,43, 8,64 Hz). 6,61 (d, 1H, J = 2,43 Hz), 6,42 (s, IH),

-84CZ 301504 CZ

5,74 (s, 2H), 4,10 (q, 2H, J = 7,29 Hz), 3,75 (s, 3H), 3,38 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 2,89 (s, 3H), 2,45 (t. 2H. J - 7,29 Hz). 2,1 i (m, 2H), 1,23 (t, 3H, J - 7,29 Hz)

Ethyl 4-T 1--((4-methylbenzothiofen-3-yl)methyi)-6-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoát 'lI-NMR (270 MHz, CDCL) (ppm): H-NMR (270 MHz, CDCl·,) (ppm): 7,70 (d, IH, J = 8,10 Hz, 7,29 - 7,17 (m, 3 H), 7,02 (d, 1H, J = 8,91 Hz). 6.80 (dd, t H, J = 2,43. 8,91 Hz), 6,40 A IH), 5,74 (s, 2H), 4,11 (q, 2H, J = 7,29 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,42 (t, 2H, J = 7,02 Hz), 2,88 (s, 3H), 2,46 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 2,10 (m, 211), 1,23 (l, 3H, J

Příklad 11

Podle stejné metody jako v příkladu 10 sc připraví následující sloučeniny

Ethyl 4 (14(5^methylbenzothiof'en-3-yl)methyl)-5-methoxybenzimidazol-2-ylthío)butanoát (výtěžek 24 %) 'H-NMR (270 MHz, CDCl,) (ppm): 7.76 (d. 111, J= 8,10 Hz), 7,62 (s, IH), 7,58 (d, IH, 30 ,1 = 8,64 Hz), 7.25 (lil). 6,84 (dd, III, J = 2,43, 8,91 Hz), 6,81 (s, IH), 6,65 (d, IH, J = 2,16 Hz),

5,47 (s, 2H), 4,11 (q, 2H, J = 7,02 Hz), 3,74 (s. 3H), 3.39 (t, 2H, J = 7.02 Hz). 2,51 (s, 3H). 2,47 (t, 2H, J - 7,56 Hz), 2,11 (m, 2H), 1,24 (t, 3H, J = 7.02 Hz)

Ethyl 4-f1-((5-methylbenzothiofcn-3 yl)methyl)- 6 methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanoát 25 (výtěžek 18 %) 'H-NMR (270 MHz, CDCl·,) (ppm): 7,75 (d, 1H, J = 8,10 Hz), 7,60 (s, 1H), 7,26- 7,22 (m, 2H). 7,04 (d, IH, J-8,91 Hz), 6,83 (s, IH), 6,78 (dd, IH, J-2,43, 8,91 Hz), 5,47 (s, 2H), 4,12(q,2H, J 7,02 Hz), 3,84 (s, 3H), 3,43 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,48 (t, 2H, J = 7,29 Hz), 2,12 (tn, 2H), 1,24 (t, 3H, J - 7,02 Hz)

Příklad 12

Příprava 4-( l-((4-methylbenzothiofen-3-yl)methyl)-5-methoxybefizimidazol-2 -ylthio)butanové kyseliny (sloučenina Č. 154)

HjCO

THF-£IOH[VI).

69*

84,7 mg (0,186 mmol) ethyl 4-(1-((4-methylbenzothiofen-3-yl)methyl)-5-methoxybenzimidazoI-2-ylthio)butanoátu získaném v příkladu 10 se rozpustí ve směsném rozpouštědle 1 ml THF a I ml ethanolu a poté se přidá 1 ml 1M vodného roztoku hydroxidu sodného a směs se míchá 1 hodinu při teplotě 40 ^ŮC. Po skončení reakce se přidá 1,5 ml 1M kyseliny chlorovodíkové a následuje míchání 30 minut při teplotě místnosti. Vzniklá sraženina se odfiltruje, promyje se vodou, ethanolem a suší se a získá se 54,9 mg cílové sloučeniny (výtěžek: 69 %).

LC-MS:

Vypočtená hodnota M = 426,11 naměřená hodnota (M-H) = 427,2

-85CZ 301504 CZ ¹ H-NMR (270 MHz, DMSOdó) (ppm): 7,80 (d, IH, J - 7.29 Hz), 7,60 (d, IH. J - 8,91 Hz),

7,31 -7,20 (m, 3H), 6,95 (dd, IH, J = 2,16, 8,91 Hz), 6,53 (s, IH), 5,94 (s. 2H), 3,73 (s, 3H),

3,37 (t, 2H, 7,29 Hz), 2,86 (s, 3H), 2.34 (t, 2H, J “ 7,29 Hz), 1,90 (m, 2H)

Příklad 13

Podle stejné metody jako v příkladu 12 se připraví následující sloučeniny ίο 4-( 1-((4-methy lbenzothiofen-3-yl)methyl)-6-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanová kyselina (sloučenina č, 1114)

Výtěžek: 60 %

LC-MS::

Vypočtená hodnota M = 426,11, naměřená hodnota (M+H)⁺ = 427,2 ’Η-NMR (270 MHz, DMSO-dó) (ppm): 7,78 (d, IH, J - 7,83 Hz), 7,52 (d, 1H, J - 8,91 Hz), 20 7,34 - 7,17 (m, 3H), 6,77 (dd, IH, J = 2,34, 8,91 Hz), 6,37 (s, 1H), 5,83 (s, 2H), 3,78 (s, 3H),

3,32 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 2,82 (s, 3H), 2,34 (t, 2H, J = 7,76 Hz), 1,93 (tn, 2H)

V tomto případě se však použije po skončení reakce 1M kyselina chlorovodíková a poté se provede extrakce chloroformem a promytí vodou. Po sušení síranem hořečnatým následuje koncentrace rozpouštědla za sníženého tlaku a sušení za získání cílové sloučeniny.

4-(l-((5-methylbenzothiofen-3-yl)methyl)-5-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanová kyselina (sloučenina č, 152)

Výtěžek: 63 %

LC-MS::

Vypočtená hodnota M = 426,11 naměřená hodnota (M+H) = 426,8 'H-NMR (270 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7,88 (d, IH, J “ 8,64 Hz), 7,76 (s, 1H), 7,58 (d, IH, J - 8,64 Hz), 7,28 - 7,24 (m, 3H), 6,94 (dd, IH, J 2,16, 8,64 Hz), 5,72 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,40 (t, 2H, J = 7,29 Hz), 2,42 (s, 3H), 2,36 (t, 2H, J - 7,29 Hz), 1.92 (m, 2H)

4-(1-((5 methylbenzothiofen-3-yl)methyl)-6-methoxybenzimidazol-2-ylthio)butanová kyselina (sloučenina č. 1112)

Výtěžek: 79 %

LC-MS::

Vypočtená hodnota M = 426,11 naměřená hodnota (M -H) = 427,0 'H-NMR (270 MHz, DMSO-dó) (ppm): 7,87 (d, 1H, J = 8,10 Hz), 7,71 (s, 1H), 7,47 (d, IH, 50 J = 8,91 Hz), 7,24 (Μ, 2H), 7,17 (d, IH, J = 2,16 Hz), 6,84 (dd, IH), 5,64 (s, 2H), 3,77 (s, 3H),

3,38 (t, 2H, J = 7,02 Hz), 2,41 (s, 3H), 2,37 (t, 2H, J = 7,56 Hz), 1,95 (m,2H)

-86CZ 301504 CZ

Příklad 14

Příprava HC1 soli sloučeniny 532

1,5 ml 4M roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu se přidá k 50 mg (0.122 mmol) sloučeniny

č. 532 a následuje míchání při teplotě 100 °C. Po skončení reakce se reakční roztok koncentruje za sníženého tlaku a získá se 53 mg (1,05 mmol) cílové sloučeniny (výtěžek: 97 %).

'H-NMR (270 MHz, DMSO-JÓ) (ppm): 8.00 (m, 1H). 7,89 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,45 - 7,42 io (m,2H) 7.32 (m, IH), 5,78 (s, 2H), 4,48 (t, 2H. J 7,42 Hz), 2,37 (m, 2H), 2,34 (s, 3H). 2.30 (s,3H), 1,92 (t,2H, J = 7,09 Hz)

Příklad 15

Příprava HC1 soli sloučeniny 56

Cílová sloučenina se získá stejným způsobem jako v příkladu 14.

'H-NMR (270 MHz, DMSO-d6) (ppm): 7,87 (d, IH, J - 8,08 Hz), 7,74 (s, IH), 7,66 (d, IH, J = 6,76 Hz), 7,58 (d, 1H, J = 8,74 Hz), 7,26 (m, 4H), 5,70 (s, 2H), 3,45 (t, 2H, J - 7,26 Hz), 2,42 (s, 3H), 2,39 (t, 2H, J - 7,26 Hz), 1,98 (m, 2H)

Příklad 16

Příprava rekombinantní chymázy lidské žímé buňky

Rekombinantní chymázy lidské žírné buňky se připraví podle metody, kterou popsal Urata a kol.

(Journal of Biologicai Chemistry 266: 17173, 1991). Chymáza lidské žímé buňky se čistí heparinovou sefarózou (Pharmaciea) z kulturního supematantu hmyzích buněk (Th5) obsahujících cDNA kódující chymázu lidské žírné buňky se čistí heparinovou sefarózou (Pharmacia). Poté po aktivaci metodou, kterou popsal Murakami a kol. (Journal of Biologicai Chemistry 270: 2218, 1995) se čistí lidská žímá buňka heparinovou sefarózou a získá se aktivovaná chymáza lidské žímé buňky.

Příklad 17

Stanovení aktivity inhibice chymázy rekombinantní lidské žímé buňky

DMSO roztok (2 μΐ) obsahující sloučeninu podle předkládaného vynálezu se přidá k 50 μΙ pufru A (0,5 - 3,0M NaCl, 50 mM Tris-HCI, pH 8,0) obsahující 1 až 5 ng aktivované chymázy lidské žímé buňky získané v příkladu 16 a poté se přidá 50 μΙ pufru A obsahujícího 0,5 mM sukcinyl-alanyl-histidyl-prolyl-fenylalanylparanitroanílid (Becchem) jako substrát a směs se nechá reagovat při teplotě místnosti 5 minut. K. hodnocení inhibiční aktivity se měří změny v absorbanci při 405 nm v závislosti na čase.

-87CZ 301504 CZ

Výsledek, IC₅o 1 nM až menší než 10 nM byl pozorován u sloučenin č. 39, 56, 58, 50, 63, 148,

154, 519, 532, 534, 536, 538, 615, 1112 a 1114, zatímco ICso - 10 nM až 100 nm byl pozorován u sloučenin č. 34, 38, 41,42, 52, 54, 135, 137, 152,244,340,436, 514, 521 a 626.

Jak bylo popsáno shora, benzimidazolové deriváty podle předkládaného vynálezu vykazují silnou inhibiční aktivitu vůči chymáze. Tak bylo prokázáno, že benzimidazolové deriváty podle předkládaného vynálezu jsou klinicky použitelnými inhibičními látkami na aktivitu lidské chymázy a mohou se použít pro prevenci a/nebo terapii různých nemocí, na kterých se podílí lidská chymáza.

io Příklad 18

Příprava tablet

Připraví se tablety obsahující na jednu tabletu následující složky:

Sloučenina č. 39 50 mg

Laktóza 230 mg

Bramborový škrob 80 mg

Polyvinylpyrrolidon 11 mg

Stearát hořečnatý 5 mg

Sloučenina podle předkládaného vynálezu (sloučenina z příkladů), laktóza a bramborový škrob se smísí a směs se nechá rovnoměrně nasáknout v 20% polyvinylpyrrolidonu v ethanolu. Směs se proseje přes síto s velikostí ok 840 pm, suší při 45 °C a opět se proseje přes síto s velikostí ok

1100 pm. Takto získané granule se smíchají se stearátem hořečnatým a lisují se do tablet.

Příklad 19

Měření koncentrace v krvi během podávání nitrožaludeční sondou u krys

Sloučeniny indikované shora pod č. 39, 52 a 244 se podávaly nitrožaludeční sondou samcům SD krys v dávce 30 mg/kg (jiná potrava se nepodávala). Poté se odebíraly vzorky krve bezprostředně po podání a 30 minut a 1, 2 a 4 hodiny po podání. Po odebrání vzorku se vzorky bezprostředně separovaly na jednotlivé složky séra a sloučeniny podle vynálezu se extrahovaly obvyklými extrakční mi metodami pro pevnou fázi a výsledné vzorky se analyzovaly za použití HPLC za použití kolony ODS (jako mobilní fáze pro sloučeniny 52 a 244 se použila směs 32% acetonitril/voda - 0,5% TFA), zatímco jako mobilní fáze pro sloučeninu 39 se použila směs 47% acetonitril-voda-IOmM pufr octanu amonného (pH 4,0)). Poté se provedlo měření množství nezměněné formy. Tyto výsledky jsou uvedeny v tabulce dále.

Sloučenina číslo	Po 30 minutách (pg/ml)	1. .........1 |Po 4 hodinách (pg/ml) j
52	60,5	12,7
244	16,5	8,9
39	16,1	6,3

io Na základě shora uvedených výsledků, se sloučeniny podle předkládaného vynálezu rychle absorbovaly po podání a koncentrace nezměněné formy v krvi, jak vyplývá ze shora uvedené tabulky, byla naměřená po 30 minutách. Dále, ačkoli se koncentrace v krvi snižovala postupně po 4 hodinách po podání, značné množství nezměněných forem bylo nalezeno ještě 4hodiny po podání. Z tohoto důvodu se sloučeniny podle vynálezu pokládají za skupinu sloučenin majících vynikající farmakokinetické vlastnosti. Zvlášť vynikající vlastnosti mají sloučeniny ve kterých A je skupina -CH₂CH₂CH₂-88Cz 301504 Cz

Příklad 20

Metabolický test in vitro za použití jatemích mikrosomů (Ms)

Metoda záření:

* Složení reakčního roztoku a reakční podmínky

	Kompozice a postup	Poznámky
ΚΟΠφΟΖΧϋΟ rekonstručního systému	Kompozice	Název reakční složky	Finální koncentrace	Reakční roztok objem: 0,3 ml
Pufr	Fosfátový pufr (pH 7,4)	0,1 M i
Chelatační činidlo	EDTA	1,0 M
Generační systém NADPH	Chlorid hořečnatý	3,0 mM
G6F	5,0 mM
GÓPDH	1,0 IU
Enzym	Jaterní mikrosomy	1,0 mg/ml
Substrát	Substrát (hodnocená sloučenina)	5,0 μΜ
Reakční iniciátor	NADPH	1,0 mM
Reakční podmínky	37 °C, inkubace (vodní lázeň, třepání), reakční doba: 0, 2, 5, 10 a 30 minut
Terminátor reakce (extrakční kapalina)	Acetoni trii	Rovno 3 obj emúm reakčního roztoku
Ueproteinizace	Vzorkování supematantu po odstředění po dobu 10 minut při 3000 ot./min., odstranění rozpouštědla s odpařovačkou
Kapalina pro opětné rozpuštění	Opětné rozpuštění HPLC mobilní fází použitou pro analýzu
Analýza	Detekce píku nezměněné formy pomocí HPLC za použití UV detektoru

* Metoda pro výpočet metabolické rychlosti (MR)

-89CZ 301504 CZ

Metabolická rychlost se stanoví ze snížení množství nezměněné formy při každé reakční době, k množství nezměněné formy při počáteční koncentraci (reakční doba: 0 minut) na začátku reakce, přičemž za 100% se pokládá množství nezměněné formy při počáteční koncentraci.

Metabolická rychlost v době, kdy bylo dosaženo maxima metabolického poměru se hodnotí jako hodnota MR.

MR ^_ (koncentrace substrátu při reakční době: 0 min - koncentrace substrátu po reakci): reakční doba: koncentrace proteinu (nmol/mg proteinu) io Tyto metody byly použity k získání výsledků uvedených dále.

S1oučenina č.	MR	Procento substrátu zbývající po 30 minutách
34	0,260	60,3
38	0,329	29, 8
39	0	80, 1
41	0,129	73,9
52	0,331	47, 5
56	0, 111	41,2
58	0,048	72, 3
135	0,097	55,2
244	0,211	57,9
5Ϊ4	0, 087	48, 7
519	0, 102	52,9
521	0,088	61,1
532	0, 277	36,2
534	0, 102	63, 0
536	0,131	56,3
615	0, 159	62, 3

Podle shora uvedených výsledků, sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou metabolicky stabilními sloučeninami. Skupina sloučenin, kde A je -CH^CHiCHi- byla zjištěna jako skupina

i.s zejména stabilních sloučenin.

Průmyslová využitelnost

Benzimidazolové deriváty podle předkládaného vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelné soli vykazují silnou aktivitu inhibice lidské ehymázy. Tak se mohou uvedené benzimidazolové deriváty a jejich farmaceuticky přijatelné soli použít jako inhibitor lidské ehymázy, který je klinicky použitelný k prevenci a/nebo jako terapeutické činidlo pro zánětlivé nemoci, alergické nemoci, nemoci dýchacích orgánů, nemoci oběhových orgánů nebo nemoci metabolismu kostí a chrupavek.

Claims (7)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Benzimidazolový derivát vybraný ze skupiny skládající se z

   CZ 301504 CZ
2. 2. Benzimidazolový derivát podle nároku 1 vybraný ze skupiny skládající se z ajeho farmaceuticky přijatelné soli.
3. 3. Benzimidazolový derivát podle nároku 1 vzorce o

   ajeho farmaceuticky přijatelné soli. o
4. 4. Benzimidazolový derivát podle nároku 1 vzorce o

   ajeho farmaceuticky přijatelné soli.

   -92CZ 301504 CZ
5. 5. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden benzimidazolový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl podle jakéhokoli z nároků 1 až 4 a farmaceuticky přijatelný nosič.

   5
6. 6. Benzimidazolový derivát nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli podle jakéhokoli z nároku

   1 až 4 pro použití v medicíně.
7. 7. Použití benzimidazolového derivátu nebo jeho medicínsky přijatelných solí podle jakéhokoli l nároků 1 až 4 pro výrobu léčiva prc léčení zánětlivých nemocí, alergických nemocí, resn i račici nich nemocí, kardiovaskulárních nemocí nebo nemocí metabolismu kostí a chrupavek.

   15 -----—

   Konec dokumentu