CZ293257B6 - Farmaceutický přípravek obsahující antagonistu receptoru AT1 pro léčení nemocí spojených s nárůstem receptorů AT1 v subepiteliální vrstvě - Google Patents

Farmaceutický přípravek obsahující antagonistu receptoru AT1 pro léčení nemocí spojených s nárůstem receptorů AT1 v subepiteliální vrstvě Download PDF

Info

Publication number
CZ293257B6
CZ293257B6 CZ20012306A CZ20012306A CZ293257B6 CZ 293257 B6 CZ293257 B6 CZ 293257B6 CZ 20012306 A CZ20012306 A CZ 20012306A CZ 20012306 A CZ20012306 A CZ 20012306A CZ 293257 B6 CZ293257 B6 CZ 293257B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
pharmaceutically acceptable
receptor antagonist
receptor
treatment
receptors
Prior art date
Application number
CZ20012306A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20012306A3 (cs
Inventor
Gillian Rosemary Bullock
Gasparo Marc De
Sabina Maria Ganter
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26152118&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ293257(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from EP98811258A external-priority patent/EP1013273A1/en
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of CZ20012306A3 publication Critical patent/CZ20012306A3/cs
Publication of CZ293257B6 publication Critical patent/CZ293257B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/455—Nicotinic acids, e.g. niacin; Derivatives thereof, e.g. esters, amides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/2027—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/205—Polysaccharides, e.g. alginate, gums; Cyclodextrin
    • A61K9/2059—Starch, including chemically or physically modified derivatives; Amylose; Amylopectin; Dextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/16—Central respiratory analeptics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
    • A61K9/2806—Coating materials
    • A61K9/2833—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/286—Polysaccharides, e.g. gums; Cyclodextrin
    • A61K9/2866—Cellulose; Cellulose derivatives, e.g. hydroxypropyl methylcellulose

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Řešení se týká použití antagonistů receptoru AT.sub.1.n. nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu léku pro léčení poruch a nemocí spojených s nárůstem počtu receptorů AT.sub.1.n. v subepiteliální vrstvě, zejména nemocí plicní a prsní tkáně, jakou jsou obstrukční onemocnění dýchacích cest, invazivní rakovina plic a prsu a různé formy poškození plic.ŕ

Description

Oblast techniky
Vynález se týká použití antagonistů receptoru ATi nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu léku pro léčení poruch a nemocí spojených s nárůstem receptorů ATi v subepiteliální vrstvě, zejména nemocí plicní a prsní tkáně, jako jsou obstrukční onemocnění dýchacích cest, invazivní rakovina plic a prsu a různé formy poškození plic.
Dosavadní stav techniky
Angiotenzinogen, a2-makroglykoprotein, je štěpen enzymem reninem na dekapeptid angiotenzin I, který sám je jen velmi slabě biologicky aktivní. V dalším kroku kaskády jsou odštěpeny dvě další aminokyseliny působením enzymu konvertuj ícího angiotenzin (ACE), který je vázán především na endotel, a je tak vytvořen angiotenzin Π. Angiotenzin Π je považován za jedno z nejsilnějších přírodních vazokonstrikčních činidel.
Angiotenzin Π interaguje se specifickými receptory na povrchu cílových buněk. Nedávno byly úspěšně identifikovány subtypy receptorů, které byly označeny jako receptory ATi a receptory AT2. Studie systému renin-angiotenzin, zejména ve vztahu k hypertenzi, narůstají v posledním desetiletí téměř exponenciálně. Výsledkem je, že byla identifikována řada receptorů pro angiotenzin Π a některé z nich již byly klonovány a analyzovány. V současné době bylo věnováno značné úsilí identifikaci látek, které se váží na receptor ATi, přičemž účinné sloučeniny této povahy byly nazvány antagonisté angiotenzinu Π. V důsledku inhibice receptoru AT] tito antagonisté mohou být využiti jakožto léky proti hypertenzi nebo léky k léčení městnavého selhání srdečního.
Receptory AT] a AT2 byly také zkoumány z hlediska jejich distribuce a biologických vlastností a bylo ukázáno, že i přes 30% homologii mají velmi odlišnou distribuci a aktivitu.
Receptor AT], který hraje hlavní roli v regulaci krevního tlaku, byl nalezen v kůře nadledvin, ledvinách, děloze atd. Na buněčné úrovni byl nalezen na fibroblastech, makrofágách a buňkách hladkého svalstva (SMC).
Naproti tomu receptor AT2 byl nalezen hlavně ve fetálních tkáních, ale také v dospělých, zejména patologických vzorcích tkání, jako např. při ischemické nemoci srdeční. Zde byl lokalizován na fibroblastech a endotelových buňkách.
Podstata vynálezu
Cílem dále popsaných studií bylo vyhodnotit distribuci receptorů AT] a AT2 v lidských plicích užitím metod imunohistochemie a in šitu hybridizace.
Již dříve byly připraveny specifické protilátky proti epitopům receptoru AT], ale žádný takový specifický nástroj nebyl dostupný pro receptor AT2. Histologické studie byly proto závislé na radioaktivně značených antagonistech receptoru s autoradiografií, což poskytovalo relativně hrubou tkáňovou lokalizaci. V posledních dvou letech se však staly dostupnými dobře charakterizované protilátky specifické k lidským receptorům, a byly proto užity i v následujících studiích.
-1 CZ 293257 B6
Metody a materiály
1. Specifita a titrace protilátky a sondy pro in šitu hybridizaci
Pro potvrzení specifičnosti imunohistochemických studií (ICC) a ISH studií, byly získány parafínové bločky tkání normálních lidských nadledvin (cortex, kůra a medulla, dřeň) z archívu Oddělení patologie Univerzitní nemocnice v Ghentu, Belgie, které byly užity jako testovací materiál. Je známo, že receptory Alj se vyskytují především v kůře nadledvin a receptory AT2 ve dřeni nadlevin.
Pro studie na lidských plicích byl kontrolní materiál získán z autopsií pacientů zemřelých na jiné než plicní nemoci, např. v důsledku smrtelné nehody. Část tohoto materiálu pocházela z univerzní nemocnice v Ghentu (stejně jak bylo uvedeno výše), část pocházela z Oddělení patologie Pensylvánské nemocnice, Philadelphia, USA. Byly vybrány tkáně obsahující malé dýchací cesty, neboť jsou mnohem citlivější k poškození.
Všechny vzorky byly fixovány 10% pufrovaným formalínem co nejdříve post-mortem to bylo možné, dehydratovány a zality do parafínu. Byly nařezány řezy o síle 3-5 pm a upevněny na sklíčka ošetřená silanem.
Aby byly minimalizovány jakékoliv odlišnosti ve zpracování, na sklíčko byly upevněny vždy dva po sobě jdoucí řezy, jeden pro analýzu s protilátkou ATi a druhý s protilátkou AT2. 20 sklíček bylo zpracováno současně, takže až na primární protilátku byly všechny reagencie včetně chromogenu identické. Jedinou veličinou, kterou nebylo možné plně kontrolovat, je tloušťka řezu.
2. Protilátky
Dvě protilátky k receptorů ATi, od firmy Santa Cruz lne., San Diego, CA, USA, (klony N10 a 306) byly testovány a obě poskytly shodné distribuce receptorů v kůře nadlevin.
Hlavní část studie byla provedena s protilátkou proti receptorů AT2, dostupnou také od firmy Santa Cruz (klon Cl8), která byla testována a poskytla stejný profil barvení ve dřeni nadledvin a plicích jako první.
Všechny protilátky byly pečlivě testovány, jak obchodními tak i jednotlivými dodavateli, na specifitu a zkříženou reaktivitu.
3. Sondy ISH
Produkty PCR (Polymerázové řetězové reakce) byly připraveny a použity následujícím způsobem:
Oligonukleotidy specifické pro lidský receptor typu I pro angiotenzin Π (GenBank přístupové číslo M93394) a receptor typu Π pro angiotenzin Π (GenBank přístupové číslo U15592) byly navrženy užitím počítačového programu Oligo 5,0 pro homologní úseky zobou sekvencí (Tab. 1). cDNA z lidské kostní tkáně byla připravena standardním postupem (viz Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2“1 Ed., Cold Spring Harbor Laboratoiy Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989). Pro PCR byly použity následující páry primerů:
Pro receptor typu I angiotensinu Π:
5'-CTggCTgACTTATgCTTTTTACTgACT-3' a 5'-gATgCAggTgACTTTggCTACA-3';
(PCR produkt velikosti 236 párů bází)
-2CZ 293257 B6 a pro receptor typu Π angiotenzinu Π:
5'-ATTTACTCCTTTTggCTACTCTTCCTC-3'a 5'-ggTCACgggTTATCCTgTTCTTC-3' (PCR produkt velikosti 489 párů bází).
PCR amplifikace byly provedeny s 10 ng templátové cDNA užitím PCR cykleru MJ Research s následujícími cykly: 1) 94 °C/2 min, 2) 94 °C/10 sekund, 60 °C/30 sekund, 72 °C/15 sekund, celkem v 35 cyklech, a byla užita High Fidelity Taq polymeráza (Boehringer Mannheim) s reakčními složkami v soupravě od výrobce. Produkty PCR amplifikací byly identifikovány elektroforézou na 0,8% agaróza/TBE gelu (viz Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989). Pro potvrzení identity produktů PCR amplifikací byla DNA eluována z gelu a klonována do A/T klonovacího vektoru pMOSBlue (Amersham). Kolonie obsahující DNA inzert správné velikosti (tab.l) byly plně sekvencovány na obou řetězcích pro potvrzení identity.
Každá sonda, jak „sense“ tak „antisense“ pro ATb a „antisense“ popsané výše, byly značeny fluorescinem (FITC) a přítomnost mRNA v buňkách byla detekována po hybridizaci se sondou užitím detekčního systému myší anti-FITC sondy s alkalickou fosfatázou a anti-alkalickou fosfatázou (APAAP). Tato metoda detekce zesiluje detekci velmi nízkého počtu kopií.
4. Imunocytochemie
Pro všechny protilátky byl užit následující postup. 5 μπι řezy byly nejdříve ošetřeny technikou získání antigenu a exponovány v mikrovlnné troubě, v citrátovém pufru (pH 6,0).
Expozice byla 20 minutová a pak byla sklíčka ponechána zchladnout v pufru. Když byly použity kozí polyklonální protilátky, pro detekci byl užit systém peroxidázy s antiperoxidázou (PAP) s diaminobenzidinem (DAB) jako chromogenem, v ostatních případech pro králičí polyklonální protilátky byl užit systém APAAP s novým fuchsinem. Řezy byly nejdříve 30 minut blokovány 1% hovězím sérovým albuminem (BSA) pro zablokování nespecifických receptorů, pak následovala inkubace s primární protilátkou 30 minut při teplotě místnosti. Každá protilátka byla titrována a optimální ředění byla následující:
Protilátky Plíce Nadledviny
ATi klon N 10 1:200 1:500
Klon N 306 1:200 1:500
AT2 Klon C 18 1:150 1:500
Jako negativní kontroly pro králičí polyklonální protilátky bylo užito negativní sérum od firmy Dako (Prosan, Ghent, Belgie), pro kozí polyklonální protilátky byla vynechána primární protilátka.
ISH
5pm řezy byly deparafinovány a pak hybridizovány in šitu postupem odborníkům známým. Řezy byly ošetřeny nejdříve pre-hybridizačním roztokem 20 minut při 55 °C. Pak byly opláchnuty a inkubovány se sondou přes noc v 55 °C. Po opláchnutí byly inkubovány s myší anti-FITC protilátkou a detekčním systémem APAAP pro lokalizaci specifických mRNA. Pro receptor AT] sloužila jako negativní kontrola „sense“ sonda, pro receptor AT2 byla v negativní kontrole sonda vynechána.
-3CZ 293257 B6
Obrazová analýza
Pro kvantitativní vyhodnocení intenzity barvení byly obarvené řezy analyzovány užitím Leica MR500 a množství barvy na jednotku plochy tkáně bylo zaznamenáno v pixelech podle instrukcí výrobce zařízení Leica. Takto byly stanoveny poměry receptorů ATi k receptorům AT2 v různých oblastech, což byly:
a) epitel dýchacích cest, b) sub-epiteliální intersticium, c) SMC kolem krevních cév, a d) mukózní žlázky.
Výsledky
Studie distribuce v nadledvinách
Distribuce ATb Obě protilátky poskytly v kůře nadledvin distribuční profil, který se vyznačuje charakteristickým zbarvením v okolí buněk hladkého svalstva obklopujících krevní cévy a také vintersticiu na fibroblastech a v jejich okolí, jak je předpokládalo. Endotelové buňky nebyly obarveny.
Distribuce AT2: protilátka byla testována na dřeni nadledvin, kde se ukázalo výrazné barvení feochromocytomových buněk.
ISH: obě „antisense“ sondy poskytly podobný obrázek.
Kontrolní plíce
Distribuce ATi: je patrné velmi jasné barvení intersticiálních buněk ležících pod epitelem dýchacích cest (sub-epitel) a také okraje buněk hladkého svalstva (SMC) obklopujících krevní cévy. Navíc byly pozitivní také makrofágy.
Distribuce AT2: tento receptor se zdá být silně asociován s buňkami epitelu vzdušných cest, s výrazným barvením řasinkového lemu. Pozitivní buňky byly vidět v některých mukózních žlázkách, také některé cévní endotelové buňky a fibroblasty, chondrocyty a makrofágy byly pozitivní. Nebylo pozorováno žádné barvení SMC.
ISH: Opět sondy poskytly podobný obrázek. Zejména sonda AT2 dávala silný signál pouze na endotelových buňkách a některých mukózních žlázách.
Obrazová analýza
Distribuce proteinu a tudíž i receptorů, reprezentovaná intenzitou zbarvení, tj. pixely na pm2 tkáně, je uvedena v následující tabulce.
Protilátka Epitel dýchacích cest Sub-epitel Žlázky SMC
ATi 0,00 8 0,00 10
at2 5 0-1 5 0,00
Přítomnost receptorů angiotenzinu Π v kůře a dřeni nadledvin byla již dříve prokázána jak biochemickými tak i histologickými metodami. Data získaná z pokusů s komerčně dostupnými protilátkami i privátně získanými protilátkami potvrdila tato zjištění a také potvrdila spolehlivost imunocytochemických a ISH metod.
Vzhledem k výsledkům těchto studií bylo potřeba porovnat distribuci receptorů ATi a AT2 v normální a nemocné plicní tkáni, aby byla stanovena specifická distribuce a poměry ATi a AT2.
-4CZ 293257 B6
Přítomnost receptorů ATi v plicích byla již dříve prokázána biochemicky a nyní byla ukázána jejich přesná buněčná lokalizace. Tato informace je nezbytná pro stanovení poměru receptorů
ATi a AT2 v různých oblastech plic za normálních a patologických podmínek.
Tato data zejména týkající se distribuce AT2 jsou zcela nová, neboť dosud žádné takové údaje o jejich výskytu nebo distribuci nebyly k dispozici. Z této studie vyplynulo několik důležitých závěrů.
Za prvé, přítomnost receptorů AT2 na bronchiálních epitelových buňkách v malých dýchacích cestách. Již bylo známo, že tento receptor je anti-fibrotický, anti-proliferativní a proapoptotický. Tudíž nárůst nebo úbytek („up-„ nebo „down-regulace“) tohoto receptorů na epitelových buňkách má výrazný účinek na nahrazování epitelových buněk, rozvoj hyperplazie a dokonce hraje roli i při rozvoji plicní rakoviny.
Za druhé, přítomnost významného množství proteinu na řasinkovém lemu epitelových buněk by mohla být spojena s množstvím mukózní sekrece, jelikož bylo ukázáno, že některé epitelové buňky mukózních žlázek také nesou receptor. Na základě údajů zISH lze soudit, že některé žlázky obsahují vysoké hladiny mRNA.
A nakonec, přítomnost receptor AT2 na cévních endotelových buňkách byla potvrzena jak imunocytochemicky tak hybridizací in šitu. Bylo zjištěno, že distribuce je řídká a také že se nevyskytuje na všech buňkách určité cévy.
Tyto studie potvrdily a rozšířily dosavadní údaje o výskytu a distribuci receptorů angiotenzinu Π typu ATi a AT2 v lidských plicích. Přítomnost receptorů AT2 na epitelových buňkách malých dýchacích cest má významné důsledky pro porozumění nemocem, které vznikají v důsledku změn funkcí těchto buněk.
Velmi málo je dosud známo o lokalizaci receptorů AT v lidských plicích a o jejich distribuci, jejich „up“ nebo „down“ regulaci a poměru v normální a nemocné plicní tkáni. Pro tuto studii byly odebrány vzorky z normálních plic a z plic pacientů s chronickou obstrukční plicní chorobou (COPD) ± hypertenze.
Vzorky z plic
Vzorky byly získány od pacientů z následujících klinicky definovaných skupin.
NN
C
COPD
COPD/H
H (n=3) - nekuřáci, normální tkáň (n=5) - kuřáci, ale j inak normální (n=8) - COPD pozitivní, normální krevní tlak (n=3) - COPD plus hypertenze (n=4) - kuřáci se zvýšeným krevním tlakem
Dýchací cesty byly šetrně vypreparovány z plic bezprostředně po vyjmutí plic z pacienta při resekci nádoru nebo při jiné operaci. Pečlivě byla vybrána oblast bez nádorových tkání. Malé bločky byly fixovány ve 4% paraformaldehydu po 2 hodiny při teplotě místnosti a pak byly zality do parafínu. Tím byla zajištěna optimální strukturní integrita a retence antigenní aktivity.
Metody stanovení lokalizace receptorů
a) Imunocytochemie (ICC).
x ATi protilátky (Santa Cruz, klony N-10 a 306) byly testovány. Jedna protilátka AT2 (Santa Cruz, kloj C 18) byla také testována.
-5CZ 293257 B6
Digitální zobrazení ukazuje:
Distribuci receptorů AT2 v bronchiolámích epitelových buňkách včetně řasinkového lemu a buněk mukózních žlázek.
Přilehlé řezy barvené na receptor ATi ilustrují velmi odlišnou distribuci na buňkách hladkého svalstva, fibroblastech/buňkách stromatu a makrofágách.
Analýzy plic z pacientů
Všechny získané vzorky byly nařezány a obarveny ICC na lokalizaci jak ATi tak i AT2 receptorů s odpovídajícími negativními kontrolami.
Obrazová analýza byla zahájena, dosud byl odečten jeden řez na každého pacienta (jde o velmi pomalý proces, neboť se musí velmi přísně sledovat bazální linie). Byla provedena měření epitel v. subepitel a krevní cévy. Tato analýza byla provedena jako „slepá“, takže nebylo možné říci více než že určitý pacient má zřetelně hladiny nad průměrem. Rozdíly dané variabilitou v tloušťce řezů a variabilitou barvení byly minimalizovány simultánním provedením ICC na ATj a AT2 s následnými řezy. Tudíž mohl být také užit chromogen stejné šarže.
Zjištění lokalizace receptorů AT2 na plicním epitelu má řadu důsledků. Jelikož bylo ukázáno, že tento receptor je jak anti-proliferativní tak anti-fibrotický a pro-apoptotický, lze předpokládat, že jeho „up-regulace“ bude mít důsledky pro řadu plicních nemocí, např. takový, že kouření samotné nemá žádný vliv. Může hrát roli v takových fibrotických onemocněních jako je syndrom respirační nedostatečnosti dospělých (ARDS), nebo dokonce při redukci proliferační kapacity epitelu při plicní rakovině.
Výsledky
Lokalizace receptorů
Všechny protilátky a ribosondy byly testovány na kůře a dřeni normálních nadledvin, kde se, jak je známo, oba receptory relativně hojně vyskytující. Stejný postup se opakoval na tkáních z normálních plic, kde bylo možné detekovat jak receptor AT] tak receptor AT2 a také jejich mRNA. Lokalizace byla následující:
ATi: na buňkách hladkého svalstva, fibroblastech/buňkách stromatu, makrofágách. To bylo zjevně předvídatelné, s výjimkou toho, že intenzita a počet receptorů v normálních plicích jsou značně vysoké.
AT2: na bronchiálních epitelových buňkách (zejména kartáčový lem, na mukózních žlázkách (některých). Kromě toho na buňkách cévního endotelu, fibroblastech, makrofágách a buňkách chrupavky.
To je zcela nové a neočekávané zjištění, které vyžaduje další výzkum. Lokalizace v epitelových buňkách a mukózních žlázkách byly potvrzeny jak na základě obsahu proteinu tak i obsahu mRNA, lokalizace na řasinkovém lemu se týká mukózní sekrece.
Distribuce receptorů angiotenzinu ATi a AT2 v plicích pacientů s chronickou bronchitidou ve srovnání s kontrolami
-6CZ 293257 B6
Skupina Epitel Sub-epitel Poměr
AT] at2 AT, at2 ATi (Epitel)/AT2 (Subepitell)
Kontrola (1) Kuřáci N=5 0,02 7,15 4,07 0,01 0,56
Kontrola (2) 0,02 9,49 6,45 1,3 0,67
Nekuřáci N=5
Kontrola (3) Kuřáci Hypertenze 0,1 7,97 11,02 0,04 1,38
COPD Kuřáci bez hypertenze N=7 0,10 6,48 19,64 0,11 2,87
COPD Kuřáci Hypertenze N=3 0,30 6,01 6,12 0,05 1,01
Obrazový analyzátor Leica (Image analyser MR 500) transformuje intenzitu zbarvení do škály šedi (0-250), kdy každá jednotka je jeden pixel. To umožňuje přesnou kvantifikaci dat.
Tato data jsou založena na obrazové analýze vzorků pacientů. Data jsou vyjádřena jako pixely na jednotku plochy pozitivně obarvené tkáně, a sice průměrná hodnota z pěti polí na sklíčku.
Jak je vidět z těchto výsledků, poměr distribuce ATi v subepitelu a AT2 v epitelu normální plicní tkáně je významně menší než 1, zatímco u nemocných plic je tento poměr velmi blízký nebo dokonce vyšší než 1. Epitel tvoří vnitřní výstelku trachey a hlavních bronchů. Zvýšení poměru receptorů ATi/AT2 v bronchiálním subepitelu plic pacientů s chronickou bronchitidou oproti kontrole je způsobeno hlavně zvýšením hladiny ATi receptorů nalezených na fibroblastech a makrofágách v okolí epitelu dýchacích cest a odráží zvýšené hladiny zánětů a fibrózu pozorované při COPD.
Výše uvedené výsledky jasně ukazují, že receptory ATb které modulují angiotenzin Π, jsou lokalizovány v plicní subepitelové tkáni a zejména jejich distribuce v odpovídající nemocné plicní tkáni je zvýšena. Tudíž inhibice angiotenzinu Π prostřednictvím receptorových antagonistů vede ke snížení obstrukcí dýchacích cest.
Dále experimenty ukázaly, že distribuce AT2 vtkáni plicního epitelu, zejména v odpovídající nemocné tkáni, např. zejména na bronchiálních epitelových buňkách, a také na strukturních alveolámích buňkách, např. alveolámích mukózních žlázkách, je zvýšena. Jelikož receptory AT2 jsou anti-proliferativní, anti-fibrotické a pro-apoptotické, jejich modulace je užitečná k léčení specifických forem plicních nemocí, zejména syndromu respirační nedostatečnosti dospělých (ARDS) a k redukci proliferativní kapacity epitelu při rakovině plic nebo rakovině prsu, a dále k léčení septického syndromu, různých forem poškození plic, jako je např. pneumonie, aspirace obsahu žaludku, úraz hrudníku, šok, popáleniny, tukové embolie, kardiopulmonámí bypass, toxicita O2, hemorhagická pankreatitida, intersticiální a bronchoalveolámí záněty, proliferace epitelových a intersticiálních buněk, akumulace kolagenu a fibróza.
Distribuce receptorů v normální a v rakovině prsní tkáni
Vzorky prsní tkáně pro tuto studii byly náhodně vybrány ze souborů vzorků u Oddělení patologie Univerzitní nemocnice v Ghentu, Belgie. Všechny vzorky byly fixovány ve formalinu, zality do parafinu a jejich patologický stav byl diagnostikován patologem u uvedeného Oddělení patologie. Celkem bylo zahrnuto 16 vzorků: 14 x invazivní duktální karcinom, 1 x invazivní koloidní karcinom a 1 x invazivní lobulámí karcinom.
Imunocytochemie byla provedena na tkáňových řezech užitím polyklonálních protilátek pro ATi a AT2, které byly užity ve studii na plicích, s detekcí užitím komplexu streptavidin-biotinperoxidáza, jak bylo popsáno v předchozí studii.
Pro vytváření možného modelu pro testování receptorových antagonistů byly na obsah receptorů také zkoumány buněčné linie pocházející z prsní rakovinné tkáně. To by mohlo vést k vytvoření in vitro funkčního modelu vhodného pro další biochemické a cytologické studie.
Výsledky
Získaná data jasně ukazují přítomnost receptorů typu 1 a 2 angiotenzinu Π v normální prsní tkáni, kdy AT2 byly nalezeny na výstelce kanálků z dlaždicového epitelu a AT] jsou převážně přítomny na myoepitelových buňkách kanálků. Při vynechání primární protilátky při inkubaci nedošlo k žádnému obarvení.
Ve všech případech byla pojivová tkáň pozitivní na receptor ATi společně s žádným (11/16) nebo jen slabým (5/16) zbarvením rakovinných buněk. Opak byl pozorován pro receptor AT2, kdy byly pozitivní všechny rakovinné buňky a nebyla téměř žádná stromatální reaktivita (1/16).
Výsledky testování buněčných linií byly velmi zajímavé, na každé z nich byl pozorován jiný profil barvení. Krátkodobé kultury buněk normálního prsního epitelu byly silně pozitivní na receptor ATb ale jen slabě se obarvily na receptor AT2.
Prsní karcinomy
Vzorek ATJ at2
Karcinom prsu Karcinom Stroma Karcinom Stroma
1 Invazivní, interm. diferencovaný duktální karcinom - 2. St. Podle Bloom-Richardsonovy klasifikace ++ ++
2 Invazivní, interm. diferencovaný duktální adenokarcinom +++ ++ fekální
3 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom - duktální karcinom in šitu ++ +
4 Invazivní, interm. diferencovaný duktální karcinom - extenzivní duktální karcinom in šitu + ++
5 Invazivní koloidní karcinom - ++ ++ —
6 Invazivní, interm. diferencovaný duktální karcinom - duktální karcinom in šitu + + +++
7 8 invazivní, plně diferencovaný duktální karcinom - velký duktální karcinom in šitu Invazivní, málo + ++ ++ ++ +++
diferencovaný duktální karcinom - duktální karcinom in šitu
-8CZ 293257 B6
Tabulka - pokračování
Vzorek ATi at2
Karcinom prsu Karcinom Stroma Karcinom Stroma
9 Invazivní, plně diferencovaný duktální karcinom + ++ fokální
10 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom - duktální karcinom in šitu + +
11 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom - multifokální karcinomy in šitu ++ ++
12 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom +++ ++ +
13 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom + -H- ++
14 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom - několik duktálních karcinomů in šitu ++ fokální ++
15 Invazivní, málo diferencovaný duktální karcinom - několik duktálních karcinomů in šitu + +++ +
16 Invazivní, lobulámí karcinom - kribriformní intraduktální karcinom + + +
Závěry
Jak je patrné z těchto výsledků, přítomnost receptorů ATi na normálních epitelových buňkách se zdá být velmi odlišná od nemocných plic. Avšak typ epitelu je myoepitel, zatímco receptor AT2 v obou typech tkání byl nalezen na buňkách dlaždicového epitelu. Současně pozitivní barvení stromatu na receptor AT] bylo stejné pro obě tkáně. To je jasně spojeno s přítomností fibroblastů v extracelulámí matrix.
Přítomnost receptorů AT2 na karcinomových buňkách takovým extenzivním a reprodukovatelných způsobem je překvapující. Buněčné typy zde popsané nesoucí specifické receptory tak poskytující ideální in vitro model pro takové studie.
Tyto experimenty jasně ukázaly překvapující účinek, a sice že v modelu užívajícím buňky karcinomu prsu jsou receptory AT2 lze zjistit zejména v karcinomových buňkách.
Všechny tyto překvapující výsledky jasně ukázaly, že jakýkoliv antagonista receptorů AT] nebo modulátor receptorů AT2 mohou být použity k léčení nemocí nebo stavů spojených se zvýšením receptorů AT] v sub-epitelu nebo zvýšením receptorů AT2 v epitelu, zejména k léčení obstrukčních onemocnění dýchacích cest. Obstrukční onemocnění dýchacích cest jsou respirační onemocnění charakterizovaná zmenšením velikosti dýchacích cest a zvýšenou sekrecí v dýcha
-9CZ 293257 B6 cích cestách, což vede ke snížené alveolámí ventilaci. K obstrukčním onemocněním dýchacích cest patří reverzibilní i ireverzibilní poruchy, vybrané z chronických obstrukčních pulmonámích onemocnění jako je např. bronchitida, např. chronická bronchitida a emfyzém, dále astma, cystická fibróza, onemocnění plicního intersticia, invazivní plicní rakovina, onemocnění plicních cév, a zvýšený odpor proti toku vzduchu při nuceném výdechu. Všechna uvedená léčení mohou být spojena, avšak není to nutné, současně s léčením hypertenze, a sice jak nekuřáků tak i kuřáků.
Překvapivé výsledky také ukázaly, že jakýkoliv modulátor receptorů AT2 může být použit k léčení nemocí nebo stavů spojených se zvýšením receptorů ÁT2 v plicní epitelové tkáni, zejména k léčení specifických forem plicních onemocnění, jako je zejména syndrom respirační nedostatečnosti dospělých (ARDS), a ke snížení proliferační kapacity epitelu při invazivní plicní rakovině, a dále k léčení septického syndromu, různých forem poškození plic, jako je pneumonie, aspirace obsahu žaludku, trauma hrudníku, šoky, popáleniny, tuková embolie, kardiopulmonámí bypass, toxicita O2, hemorhagická pankreatitida, intersticiální a bronchoalveolámí záněty, proliferace epitelových a intersticiálních buněk, akumulace kolagenu a fibróza.
Antagonisté receptorů ATi nebo modulátory receptorů AT2 jsou agens, která modifikují příjemcovu biologickou reakci na nádorové buňky s výsledným terapeutickým prospěchem. Zvýšená exprese receptorů ATj v prsním duktálním myoepitelu a zvýšená exprese receptorů AT2 v prsním dlaždicovém epitelu ukázaly, že jakýkoliv antagonista receptorů ATi nebo modulátor receptorů AT2 se mohou využít k léčení invazivního karcinomu prsu. K takovým karcinomům patří scirhózní, infiltrující, papilámí, duktální, medulámí a lobulámí karcinom prsu, a také metastázy v plicích, pleuře, kostře a játrech. Lze uvažovat o adjuvantní léčbě v kombinaci s chirurgickým zásahem, radioterapií, nebo o paliativní léčbě s hormonální terapií nebo terapií jinými modifikátory biologické reakce jako jsou interferony, interleukony, nádorové nekrotické faktory, monoklonální protilátky apod.
Zatímco klinické vyšetření a mamografie mohou jen předpokládat rakovinu, prsu, pouze vyšetření tkáňové biopsie umožní stanovit diagnózu. Distribuční profil receptorů ATj a AT2 může být využit jako markér pro hyperplázii (lokalizace receptorů ATi) a pro invazivní rakovinu (lokalizace receptorů AT2) a tudíž pro diagnostiku malignity nádorů.
K antagonistům receptorů AT! patří sloučeniny mající odlišné strukturní vlastnosti. Tak např. lze zmínit sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce č. 443983 (EP 443983), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodnou sloučeninou je (S)-2V-(l-karboxy-2-methylprop-l-yl)-V-pentanoyl-N-[2'-(177tetrazol-5-yl)bifenyl-4-ylmethyl]amin [Valsartan] mající vzorec I:
CH,
(I) a její farmaceuticky využitelné soli.
- 10CZ 293257 B6
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 253 310 (EP 253 310), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [Losartan] mající následující vzorec:
a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 403 159 (EP403 159), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [Eprosartan] mající následující vzorec:
a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Mezinárodní (PCT) patentové přihlášce WO 91/14 679, zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [Irbesartan] mající následující vzorec:
-11CZ 293257 B6 a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 420 237 (EP 420 237), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [E—1477] mající následující vzorec:
COOH a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 502 314 (EP 502 314), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [Telmisartan] mající následující vzorec:
COOH a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 459 136 (EP 459 136), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [Candesartan] mající následující vzorec:
-12CZ 293257 B6
a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 504 888 (EP 504 888), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [SC-52 458] mající následující vzorec:
a j ej í farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 514 198 (EP 514 198), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [Saprisartan] mající následující vzorec:
-13CZ 293257 B6
a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Evropské patentové přihlášce 475 206 (EP 475 206), zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina mající následující vzorec:
a její farmaceuticky využitelné soli.
Dále sloučeniny uvedené v Mezinárodní (PCT) patentové přihlášce WO 93/20 816, zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Výhodná je sloučenina [ZD-8731 ] mající následující vzorec:
a její farmaceuticky využitelné soli.
-14CZ 293257 B6
K ligandům (modulátorům) receptorů AT2 patří sloučeniny mající odlišné strukturní vlastnosti.
Tak např. lze zmínit sloučeniny uvedené v Mezinárodní patentové přihlášce WO 94/13651, zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nárokuje formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
A dále sloučeniny uvedené v Mezinárodní patentové přihlášce WO 94/13 642, zejména sloučeniny uvedené v nárocích a výsledné produkty příkladů, přičemž uvedená přihláška, zejména předmět nároků, je formou odkazu součástí předkládané přihlášky.
Antagonisté receptorů AT] nebo ligandy receptorů AT2 mající alespoň jedno bazické centrum mohou tvořit kyselé adiční soli. Ty se tvoří užitím např. silných anorganických kyselin jako jsou minerální kyseliny, např. kyselina sírová nebo fosforečná nebo halogenvodíkové kyseliny, nebo užitím silných organických karboxylových kyselin, jako jsou např. alkankarboxylové kyseliny s alkanovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, a to buďto nesubstituované nebo substituované, např. halogenem, jako je např. kyselina octová, nebo saturovaných nebo nesaturovaných dikarboxylových kyselin, jako např. kyselina šťavelová, malonová, jantarová, maleinová, fumarová, fialová nebo tereftalová, nebo hydroxykarboxylových kyselin jako je např. kyselina askorbová, glykolová, mléčná, jablečná, vinná nebo citrónová, nebo aminokyselin, jako je např. kyselina asparagová nebo glutamová, nebo užitím kyseliny benzoové, nebo užitím organických sulfonových kyselin, jako jsou např. alkansulfonové kyseliny s alkanovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,nebo arylsulfonové kyseliny, nesubstituované nebo substituované, např. halogenem, jako je např. metansulfonová kyselina nebop-toluensulfonová kyselina. K příkladům vhodných bazických solí patří kovové soli, jako např. soli bází alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin, jako jsou např. sodné, draselné nebo hořečnaté soli, nebo soli s amoniem nebo organickou aminovou skupinou, jako je např. morfolin, thiomorfolin, piperidin, pyrrolidin, mono-, di- nebo tri-alkylamin s nižší alkylovou skupinou, např. ethyl-, terc-butyl-, diethyldiizopropyl-, triethyl-, tributyl- nebo dimethylpropylaminy, nebo mono-, di- nebo tri— hydroxyalkylamin s nižší alkylovou skupinou, např. mono-, di- nebo triethanolamin. Kromě toho se mohou tvořit i odpovídající vnitřní soli.
Předkládaný vynález se týká farmaceutických přípravků, které obsahují antagonistu receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, pro léčení poruch nebo nemocí spojených s nárůstem receptorů AT] v subepitelové vrstvě.
Předkládaný vynález poskytuje použití antagonisty receptorů ATt nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutických přípravků pro léčení poruch nebo nemocí spojených s nárůstem receptorů ATi v subepitelové vrstvě.
Vynález se dále týká léčení poruch nebo nemocí spojených s nárůstem receptorů ATi v subepitelové vrstvě, které spočívá v tom, že se podává terapeuticky účinné množství antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí.
Vynález se také týká použití antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro léčení poruch nebo nemocí spojených s nárůstem receptorů ATi v subepitelové vrstvě.
Farmaceutické přípravky obsahující antagonisty receptorů AT] nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli jsou určeny pro enterální podávání, např. perorální, nebo také pro rektální či parenterální podávání, homeotermním živočichům, a obsahují farmakologicky účinnou látku buďto samotnou nebo společně s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami. Tak např. farmaceutický přípravek obsahuje 0,1 až 100 %, výhodně 1 až 80 % účinné látky. Farmaceutické přípravky pro enterální nebo parenterální podávání, a také pro okulámí podávání, jsou v jednotkových lékových formách, jako jsou např. obalované tablety, tablety, tobolky, čípky nebo ampulky. Tyto lékové formy se připravují postupy, které jsou odborníkům známy, např. obvyklým mícháním, granulací, obalováním, solubilizací nebo lyofilizací. Farmaceutické přípravky pro
- 15CZ 293257 B6 perorální podávání mohou být připraveny smícháním účinné látky s pevnými excipienty, pak podle potřeby granulací získané směsi, a pokud je to žádoucí nebo nutné, po přidání vhodných pomocných látek dalším zpracováním směsí nebo granulátu do tablet nebo jader pro obalované tablety.
Dávkování účinné látky závisí na různých faktorech, jako je způsob podávání, druh homeotermního živočicha, věk a individuální stav. Normálně v případě perorálního podávání, je denní dávka 10 až 360 mg, např. v případě přípravku Valsartan je stanovena na 40, 80,160 nebo 320 mg, pro pacienta s hmotností přibližně 75 kg.
Mezinárodní patentová přihláška WO 97/49 394 (jejíž obsah je vložen formou odkazu, zejména, avšak ne výlučně, jde o předmět definovaný nároky) popisuje lisované tuhé perorální lékové formy valsartanu (volitelně ve formě jeho soli), připravené např. lisováním prášku, volitelně smíchaného s hydrochlorthiazidem (HCTZ).
Podle dokumentu WO 97/49 394 je výhodné množství přidané celulózy 10 až 30 %, např. 21 %, pro přípravky obsahující valsartan/HCTZ, a nebo 5% pro přípravky obsahující Valsartan samotný. Výhodné množství zesítěného polyvinylpyrrolidonu (Crospovidon) je 10 až 20 %, tedy např. 13 %.
Po intenzivním testování bylo překvapivě zjištěno, že bylo možné u známých tuhých přípravků valsartanu zlepšit charakteristiky biologické dostupnosti tím, že se zvětšil podíl mikrokrystalické celulózy. Dále bylo také překvapivě zjištěno, že bylo možné zlepšit kvalitu, např. zlepšit hmotnostní uniformitu a zlepšit lisovatelnost tablet, u uvedených známých tuhých přípravků valsartanu, tím, že se snížil podíl zesítěného PVP (Crospovidon).
Dále se popisují tuhé lékové formy, které obsahují valsartan jakožto účinnou látku, a více než % (hmotn.) mikrokrystalické celulózy, vzhledem k celkové hmotnosti složek jádra uvedené tuhé lékové formy, tedy např. 31 až 65 %, např. 50 %.
Dále jsou popsány tuhé lékové formy, které obsahují valsartan jakožto účinnou látku, a mikrokrystalickou celulózu, přičemž poměr hmotnosti valsartanu a mikrokrystalické celulózy je 2,5:1 až 0,3:1, tedy např. 2:1 až 1:1, např. 1,4:1.
Perorální tuhá léková forma obsahuje méně než 13 % crospovidonu, např. 2 až 10 % (hmotn.), vzhledem k celkové hmotnosti složek jádra uvedené tuhé lékové formy.
Výhodně je poměr hmotnosti valsartanu a crospovidonu 7:1 až 3:1, např. 6:1 až 4:1, např. 5,3:1.
Výhodně je poměr hmotnosti mikrokrystalické celulózy a crospovidonu 7:1 až 1:1, např. 4:1 až 2:1, např. 3,6:1.
Tuhá perorální léková forma obsahuje 20 až 360 mg valsartanu, např. 40, 80, 160 nebo 320 mg. S tímto rozmezím dávek je možné zvýšit flexibilitu a účinnost léčení, např. při redukci krevního tlaku.
Dále se popisují tuhé perorální lékové formy, která obsahují:
až 65 % valsartanu až 65 % mikrokrystalické celulózy až 13 % crospovidonu.
Přitom typický přípravek obsahuje:
až 65 % valsartanu až 50 % mikrokrystalické celulózy
-16CZ 293257 B6 až 10 % crospovidonu až 10 % stearanu hořečnatého
0,5 až 5 % koloidního bezvodého oxidu křemičitého.
Pokud je to třeba, může se přidat 1 až 10 % (hmotn.), např. 5 až 10 %, vztaženo na hmotnost jádra, přípravku Cutina, nebo 1 až 10 % (hmotn.), např. 5 až 10 %, vztaženo na hmotnost jádra, kyseliny stearové.
Tuhá perorální léková forma je výhodně lisovaná tableta.
Dále se popisují tuhé perorální lékové formy, např. lisované tablety, které obsahují více než 250 mg až do 360 mg, tedy např. 320 mg valsartanu.
Mohou být použity další excipienty jako např. lubrikanty a kluzné látky obecně užívané v tuhých perorálních přípravcích, které jsou popsány v obsáhlé odborné literatuře, např. lze odkázat na Fiedlerův „Lexikon der Hilfstoffe“, 4* Edition, ECV Aulendorf 1996, nebo „Handbook of Pharmaceutical Excipients“ Wade and Weller Ed. (1994).
Tuhá perorální léková forma je také dražé. V takovém případě je tuhá léková forma opatřena obalem, typicky z cukru nebo šelaku nebo jiné filmotvomé látky, které jsou odborníkovi známy. V oboru jsou známy mnohé metody obalování, např. rozprachové obalování na fluidním loži, např. užitím zařízení od firmy Aeromatic, Glatt, Wurster nebo Hůttlin, na perforované pánvi metodou podle Accela Cota method, nebo balování metodou ponořených nožů. Při těchto metodách obalování se užívají pomocné látky běžně používané při výrobě cukrovinek. Např. lze užít obalování popsané v dokumentu WO 97/49 394, Opadry apod.
Přesná dávka účinné látky a konkrétní léková forma, které se podají, závisí na řadě různých faktorů, jako je např. konkrétní nemoc, která má být léčena, požadované trvání léčení a rychlost uvolňování účinné látky. Tak např. požadované množství účinné látky a rychlost jeho uvolnění se mohou stanovit na základě známých in vitro nebo in vivo testů, kterými se stanoví, jak dlouho zůstává koncentrace určité účinné látky v krevní plazmě nad hladinou potřebnou pro terapeutický účinek.
Přípravek podle vynálezu měl v klinických testech srovnatelnou biologickou dostupnost s komerčně dostupným přípravkem Diovan®.
Výhodně je rychlost rozpouštění tuhé formy podle vynálezu více než 90 % za 30 minut.
Užijí se např. dávky v rozmezí 10 až 360 mg valsartanu na den v případě savce o hmotnosti 75 kilogramů, např. pro člověka, nebo pro standardní zvířecí model. Na standardních zvířecích modelech nebo v klinických testech byla pozorována výborná snášenlivost valsartanu formulovaného do přípravku podle vynálezu.
Další aspekt vynálezu poskytuje způsob výroby tuhé perorální lékové formy, která je popsána výše. Takový tuhý perorální lék lze vyrobit zpracováním jednotlivých složek, jak bylo popsáno v Mezinárodní patentové přihlášce WO 97/49 394 (vložena formou odkazu), např. zpracováním složek, jak byly popsány výše, ve vhodných množstvích do jednotkové lékové formy.
Tak např. způsob výroby výše popsaného léku v tuhé perorální formě obsahuje kroky, kdy i) rozmělní účinná látka a farmaceuticky přijatelné pomocné látky, ii) rozmělněná směs účinné látky a pomocných látek se lisuje do komprimátu (slisovaná práškovitá hmota), iii) komprimát se zpracuje na granulát, a iv) granulát se lisuje do tuhé perorální lékové formy.
-17CZ 293257 B6
Výše popsaný způsob se provádí bez přítomnosti vody, tj. suchým lisováním. Lze ho provádět za podmínek teploty a vlhkosti okolního prostředí, není nutné zajistit suchou atmosféru.
Počáteční krok i) rozmělňování lze provádět obvyklým mletím nebo mikronizací.
Účinná látka a aditiva se melou buďto samostatně nebo společně na částice o velikosti přibližně 0,1 až 1500 pm, např. 1,0 až 900 pm, tedy např. 60 až 600 pm. Alespoň 90 % krystalů jak účinné látky tak i pomocných látek spadá do výše uvedeného rozsahu. Částice požadované velikosti se získají obvyklými metodami rozmělňování, např. mletím v proudovém, kladivovém, dopadovém, kulovém nebo vibračním mlýnu.
Mikronizace se provádí výhodně užitím ultrazvukového dizintegrátoru, např. typu BRANSON Sonifíer, nebo mícháním suspenze ve vysokorychlostní třepačce, např. typu HOMOREX.
Rozmělněné částice se v tomto stadiu případně mohou prosévat a míchat známými metodami.
Lisování do komprimátu vyžaduje lisovat suché rozmělněné složky. To se provádí „slugging“ metodou nebo výhodně užitím válcových kompaktorů. Toto zařízení obvykle užívá dva válce, které se točí směrem k sobě. Hydraulické pěchovadlo tlačí válce proti sobě, aby byla zajištěna lisovací síla proti rozmělněným částicím, které jsou přiváděny do kompaktorů spirálovým dopravníkem. Lze užít lisovací sílu 25 až 65 kN, např. 25 až 45 kN. V tomto rozsahu bylo překvapivě zjištěno, že pro konkrétní formulaci podle vynálezu musí být použita minimální síla pro získání tuhé perorální lékové formy, kde se granulát rozpadá na jednotlivé primární částice požadovanou rychlostí, tj. rozpad probíhá přibližně 6x rychleji než při lisování tuhé perorální lékové formy vyšší než minimální silou. Taková vysoká rychlost rozpadu je netypická pro tablety a blíží se spíše rychlosti rozpadu tobolek. Konkrétní minimální síla lisování závisí na obsahu účinné látky v daném přípravku a také závisí na množství a povaze přítomných pomocných látek. Na základě těchto informací je odborník schopen stanovit minimální lisovací sílu užitím rutinních testů bez nadměrného experimentování. Rychlost válců je nastavena na 1 až 20 ot./min a výhodně 9 až 15 ot/min. Po průchodu válci slisovaná hmota (komprimát) připomíná tenkou lištu v segmentech.
Komprimát se pak drtí na sítech nebo mele na granulát. Prosévání je nejjednodušší způsob, kdy se vytvářený komprimát tlakem protlačuje přes síto. Výhodně se komprimát prosévá užitím oscilačního mlýnu, např. MGI624 Frewitt (Key Intemational lne.).
Lisování granulátu do jader pro tablety se provádí na obvyklých tabletovacích zařízeních, jako je např. EK-0 Korsch excentrický tabletovací stroj nebo rotační lisovací stroj, s lisovací silou např. vyšší než 2 kN. Jádra tablet mohou být různých tvarů, jsou např. kulatá, oválná, podlouhlá, válcovitá nebo jakéhokoliv jiného vhodného tvaru, a jsou také různé velikosti, v závislosti na koncentraci účinné látky. Charakteristikou tablet podle vynálezu je jejich malá velikost vzhledem k množství účinné látky v nich obsaženému.
Ve výhodném provedení vynálezu tablety získané lisováním výše popsaným jsou oválné. Hrany tablet jsou zkosené nebo zakulacené.
Ve zvláště výhodném provedení vynálezu je tuhá perorální léková forma lisovaná tableta protáhlého tvaru s poměrem délka:šířka:výška např. 2,5 až 5,0:0,9 až 2,0:1,0, přičemž vrchní a spodní strana tablety jsou navzájem nezávisle rovné plochy nebo konvexně zakřivené k podélné ose, boční strany jsou rovné plochy a koncové plochy jsou jakéhokoliv tvaru, a hrany jsou buďto zkosené nebo zakulacené.
Ve zvláště výhodném provedení je tuhá perorální léková forma lisovaná z granulátu do formy tablety podlouhlého tvaru s délkou 10,0 až 15,0 mm, šířkou 5,0 až 6,0 mm a výškou 3,0 až 4,0 mm.
-18CZ 293257 B6
V jiném zvláště výhodném provedení je tuhá perorální léková forma lisovaná z granulátu do formy tablety podlouhlého tvaru s délkou 15,0 až 18,0 mm, šířkou 6,0 až 9,0 mm a výškou 3,5 až 5,0.
V ještě dalším zvláště výhodném provedení tuhá perorální léková forma tvoří tabletu v podstatě diskovitého tvaru, kde homí a spodní strana tvoří mírně konvexní plochy. Výhodně má tableta průměr 8 až 8,5 mm a tloušťku 3 až 3,5 mm, nebo průměr 16 mm a tloušťku 6 mm. Tablety mají objem 0,1 až 1 cm3, např. 0,1 až 0,45 cm3, např. 0,2 až 0,3 cm3, tedy např. 0,125 nebo 0,25 cm3.
Tablety jsou transparentní, bezbarvé nebo zbarvené, případně také označené, aby měly individuální vzhled a byly okamžitě rozeznatelné. Použití barviv slouží ke zlepšení vzhledu a také k identifikaci léku. K vhodným farmaceutickým barvivům typicky patří karotenoidy, oxidy železa nebo chlorofyl.
Následující příklady ilustrují výše popsaný vynález, avšak nijak neomezují rozsah vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Filmem obalované tablety
Složky Obsah na jednotku (mg) Standardy
Granulace
Valsartan [= účinná složka] 80,00
Mikrokrystalická celulóza Avicel PH 102 54,00 NF, Ph. Eur
Crospovidone 20,00 NF, Ph. Eur
Koloidní bezvodý oxid křemičitý/ koloidní oxid křemičitý/Aerosil 200 0,75 Ph. Eur/ NF
Stearan hořečnatý 2,5 NF, Ph. Eur
Míchání
Koloidní bezvodý oxid křemičitý/ koloidní oxid křemičitý/Aerosil 200 0,75 Ph. Eur/ NF
Stearan hořečnatý 2,00 NF, Ph. Eur
Obal
Purifikovaná voda ** —
DIOLACK, světle červený 00F34899 7,00
Celková hmotnost tablety 167,00
> Odstraněna v průběhu zpracování
Filmem obalené tablety se vyrábějí následujícím způsobem:
Směs valsartanu, mikrokrystalické celulózy, crospovidonu, části koloidního bezvodého oxidu křemičitého/koloidního oxidu křemičitého/Aerosile 200, oxidu křemičitého a stearanu hořečnatého je předem smíchán v difuzním mixéru a pak proseta v sítovém mlýnu. K vzniklé směsi se přidá zbytek koloidního bezvodého oxidu křemičitého/ koloidního oxidu křemičitého/Aerosile 200 a v difuzním mixéru se připraví výsledná směs. Tato směs se pak lisuje v rotačním tabletovacím zařízení a tablety se obalují filmem pomocí světle červeného Diolacku na perforovaných pánvích.
-19CZ 293257 B6
Příklad 2
Filmem obalované tablety
Složky Obsah na jednotku (mg) Standardy
Granulace
Valsartan [= účinná složka] 160,00
Mikrokrystalická celulóza Avicel PH 102 108,00 NF, Ph. Eur
Crospovidon 40,00 NF, Ph. Eur
Koloidní bezvodý oxid křemičitý/ koloidní oxid křemičitý/Aerosil 200 1,50 Ph. Eur/ NF
Stearan hořečnatý 5,00 NF, Ph. Eur
Míchání
Koloidní bezvodý oxid křemičitý/ koloidní oxid křemičitý/Aerosil 200 1,50 Ph. Eur/ NF
Stearan hořečnatý 4,00 NF, Ph. Eur
Obal
Opadry světle hnědý 00F33172 10,00
Celková hmotnost tablety 330,00
Filmem obalené tablety jsou vyráběny např. jak bylo popsáno v příkladu 1.
Příklad 3
Filmem obalované tablety
Složky Obsah na jednotku (mg) Standardy
Jádro: Vnitřní fáze
Valsartan [= účinná složka] 40,00
Koloidní bezvodý oxid křemičitý [= kluzná látka] 1,00 Ph. Eur, USP/NF
Stearan hořečnatý [= lubrikant] 2,0 USP/NF
Crospovidon [rozvolňovací činidlo] 20,00 Ph. Eur
Mikrokrystalická celulóza [= pojidlo] 124,00 USP/NF
Vnější fáze
Koloidní bezvodý oxid křemičitý [= kluzná látka] 1,00 Ph. Eur, USP/NF
Stearan hořečnatý [= lubrikant] 2,00 USP/NF
Obalový film
Opadry hnědý OOF 1671P 9,40
Purifikovaná voda”J —
Celková hmotnost tablety 199,44
Složení barviva Opadry® hnědý OOF16711 je uvedeno níže Odstraněna v průběhu zpracování
-20CZ 293257 B6
Složení barvicího přípravku Opadry®
Složka Přibližné % v přípravku
Železitá čerň (C.l. No. 77499, E 172) 0,50
Železitá hněď (C.l. No. 77499, E 172) 0,50
Železitá červeň (C.l. No. 77491, E 172) 0,50
Železitá žluť (C.l. No. 77492, E 172) 0,50
Makrogol (Ph. Eur) 4,00
Oxid titaničitý (C.l. No. 77891, E 171) 14,00
Hypromelóza (Ph. Eur) 80,00
Filmem obalené tablety jsou vyráběny např. jak bylo popsáno v příkladu 1.
Příklad 4
Tobolky
Složka Obsah na jednotku (mg)
Valsartan [= účinná složka] 80,00
Mikrokrystalická celulóza 25,10
Krospovidon 13,00
Povidon 12,50
Stearan hořečnatý 1,30
Laurylsulfát sodný 0,60
Pouzdro tobolky
Železitá červeň (C.l. No. 77491, EC No. E 172) 0,123
Železitá žluť(C.l. No. 77492, EC No. E 172) 0,123
Železitá čerň (C.l. No. 77499, EC No. E 172) 0,245
Oxid titaničitý 1,540
Želatina 74,969
Celková hmotnost tobolky 209,50
Tobolky se vyrábějí následujícím způsobem:
Granulace/sušení
Valsartan a mikrokrystalická celulóza jsou rozprachově granulovány v granulátoru s fluidním ložem užitím granulačního roztoku obsahujícího povidon a laurylsulfát sodný rozpuštěné v purifikované vodě. Získaný granulát je usušen v sušičce s fluidním ložem.
Mletí/míchání
Suchý granulát se mele s crospovidonem a stearanem hořečnatým. Vzniklá hmota se pak mísí v mixéru s kónickým šroubem přibližně 10 minut.
Plnění tobolek
Prázdné tobolky z tvrdé želatiny se plní surovým granulátem v podmínkách řízené teploty a vlhkosti. Naplněné tobolky jsou zbaveny prachu, vizuálně kontrolovány, je zkontrolována jejich hmotnost a pak postoupeny útvaru jištění jakosti.
-21 CZ 293257 B6
Příklad 5
Tobolky
Složka Obsah na jednotku (mg)
Valsartan [= účinná složka] 160,00
Mikrokrystalická celulóza 50,20
Krospovidon 26,00
Povidon 25,00
Stearan hořečnatý 2,60
Lauiylsulfát sodný 1,20
Pouzdro tobolky
Železitáčerveň (C.l.No. 77491, EC No. E 172) 0,123
Železitá žluť(C.l. No. 77492, EC No. E 172) 0,123
Železitá čerň (C.l. No. 77499, EC No. E 172) 0,245
Oxid titaničitý 1,540
Želatina 74,969
Celková hmotnost tobolky 342,00,50
Přípravek se vyrábí např. postupem popsaným pro přípravek v příkladu 4.
Příklad 6
Tvrdé želatinové tobolky
Složka Obsah na jednotku (mg)
Valsartan [= účinná složka] 80,00
Laurylsulfát sodný 0,60
Stearan hořečnatý 1,30
Povidon 12,50
Krospovidon 13,00
Mikrokrystalická celulóza 21,10
Celková hmotnost tobolky 130,00
Příklady 7 až 11 (na následující straně)
Příklad 7 8 9 10 11
Složky Obsah na jednotku (mg)
Granulace
Léčivo valsartan 80,000 160,000 40,000 320,000 320,000
Mikrokrystalická celulóza (NF, Ph.Eur.)/Avicel PH 102 54,000 108,000 27,000 216,000 216,000
Crospovidon (NF, Ph. Eur.) 15,000 30,000 7,500 80,000 60,000
Koloidní bezvodý oxid křemičitý/ koloidní oxid křemičitý/Aerosil 200 1,500 30,000 0,750 3,000 6,000
Stearan hořečnatý (NF, Ph.Eur.) 3,000 6,000 1,500 10,000 12,000
Míchání
Koloidní bezvodý oxid křemičitý/ koloidní oxid křemičitý/Aerosil 200 — — — 3,000 —
Stearan hořečnatý NF, Ph.Eur 1,500 3,000 0,750 8,000 6,000
Jádro (mg) 155,000 310,000 77,500 640,000 620,000
Obal - - 3,800 15,000 16,000
-22CZ 293257 B6
Příklad 12
Rozpouštění filmem obalených tablet
Kritéria akceptovatelnosti jsou Q = 75 % ve 30 min (rychlost lopatek míchadla 50 ot./min., fosfátový pufr s pH 6,8)
Sílaz 10 mg Síla 320 mg
Rozpouštění filmem obalených tablet
- hladina + hladina - hladina + hladina
průměr [%] 98 97 93 89
rel. směrodatná odchylka [%] 1,06 2,48 2,12 2,34
min. [%] 96 94 90 86
Max. [%] 99 99 95 92
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (8)

1. Použití antagonisty receptorů AT! nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení poruch a nemocí spojených s nárůstem receptorů ATi v subepitelové oblasti, které zahrnují
a) obstrukční onemocnění dýchacích cest, jako je emfyzém, astma, cystickou fibrózu, onemocnění plicního intersticia, onemocnění plicních cév, zvýšený odpor k toku vzduchu při nuceném výdechu, případně ve spojení s hypertenzí, a to jak nekuřáků tak i kuřáků,
b) specifické formy plicních poruch a nemocí, invazivní rakovinu epitelu, invazivní rakovinu plic a invazivní rakovinu prsu,
c) syndrom respirační nedostatečnosti u dospělých (ARDS), a
d) septický syndrom, různé formy poškození plic jako je pneumonie, vdechnutí obsahu žaludku, úraz hrudníku, šok, popáleniny, tuková embolie, kardiopulmonámí bypass, toxicita O2, hemoragická pankreatitida, intersticiální a bronchoalveolámí záněty, proliferace epitelových a intersticiálních buněk, akumulace kolagenu a fibróza.
2. Použití antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení chronických obstrukčních plicních onemocnění.
3. Použití antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení astmatu.
4. Použití antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení fibrózy.
5. Použití antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení invazivní rakoviny plic.
6. Použití antagonisty receptorů ATi nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí pro výrobu farmaceutického přípravku pro léčení invazivní rakoviny prsu.
-23CZ 293257 B6
7. Použití podle kteréhokoliv z předchozích nároků 1 až 6, kdy antagonista receptorů AT] je vybrán ze skupiny obsahující:
CH, gh2 (a)
-24CZ 293257 B6 (c):
-25CZ 293257 B6
-26CZ 293257 B6 a v každém z případů i odpovídající farmaceuticky přijatelné soli.
8. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, kdy antagonista receptorů ATi je valsartan 5 mající vzorec
CH, CH, / 3 nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
CZ20012306A 1998-12-23 1999-12-22 Farmaceutický přípravek obsahující antagonistu receptoru AT1 pro léčení nemocí spojených s nárůstem receptorů AT1 v subepiteliální vrstvě CZ293257B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP98811257 1998-12-23
EP98811258A EP1013273A1 (en) 1998-12-23 1998-12-23 Use of AT-1 receptor antagonist or AT-2 receptor modulator for treating diseases associated with an increase of AT-1 or AT-2 receptors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20012306A3 CZ20012306A3 (cs) 2001-12-12
CZ293257B6 true CZ293257B6 (cs) 2004-03-17

Family

ID=26152118

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20012306A CZ293257B6 (cs) 1998-12-23 1999-12-22 Farmaceutický přípravek obsahující antagonistu receptoru AT1 pro léčení nemocí spojených s nárůstem receptorů AT1 v subepiteliální vrstvě
CZ20032559A CZ297795B6 (cs) 1998-12-23 1999-12-22 Tablety obsahující valsartan

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20032559A CZ297795B6 (cs) 1998-12-23 1999-12-22 Tablety obsahující valsartan

Country Status (26)

Country Link
EP (3) EP1140071B1 (cs)
JP (2) JP2002533390A (cs)
KR (1) KR100646716B1 (cs)
CN (2) CN1304000C (cs)
AT (2) ATE354364T1 (cs)
AU (4) AU3043000A (cs)
BR (1) BR9916576A (cs)
CA (2) CA2351357A1 (cs)
CY (2) CY1106581T1 (cs)
CZ (2) CZ293257B6 (cs)
DE (1) DE69935249T2 (cs)
DK (2) DK1588706T3 (cs)
ES (2) ES2281978T3 (cs)
HK (1) HK1038888B (cs)
HU (1) HUP0104780A3 (cs)
ID (1) ID29856A (cs)
IL (5) IL143233A0 (cs)
NO (2) NO328775B1 (cs)
NZ (3) NZ511938A (cs)
PL (1) PL199100B1 (cs)
PT (2) PT1588706E (cs)
RU (3) RU2271809C2 (cs)
SI (2) SI1140071T1 (cs)
SK (1) SK9132001A3 (cs)
TR (7) TR200101784T2 (cs)
WO (1) WO2000038676A1 (cs)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SK18062002A3 (sk) * 2000-06-22 2003-07-01 Novartis Ag Pevné orálne farmaceutické kompozície obsahujúce valsartan
JP4972847B2 (ja) * 2000-10-11 2012-07-11 住友化学株式会社 コラーゲン蓄積抑制剤
WO2002083127A1 (fr) * 2001-04-09 2002-10-24 Tokai University Educational System Compositions inhibant la modification proteique
AU2002257970B2 (en) 2001-05-31 2007-08-02 Vicore Pharma Ab Tricyclic compounds useful as angiotensin II agonists
WO2003041739A1 (en) 2001-11-13 2003-05-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Anticaner agents
EG24716A (en) 2002-05-17 2010-06-07 Novartis Ag Combination of organic compounds
PL382044A1 (pl) * 2003-11-03 2007-08-06 Zentiva, A.S. Preparat zawierający walsartan
EA015108B1 (ru) 2004-12-24 2011-06-30 КРКА, д.д., НОВО МЕСТО Способ получения твердой фармацевтической композиции, содержащей валсартан
RS52927B (en) * 2004-12-24 2014-02-28 Spinifex Pharmaceuticals Pty Ltd TREATMENT OR PROPHYLAX PROCEDURE
WO2006136916A2 (en) * 2005-06-20 2006-12-28 Glenmark Pharmaceuticals Limited Substantially pure micronized particles of telmisartan and pharmaceutical compositions containing same
GT200600371A (es) 2005-08-17 2007-03-21 Formas de dosis sólidas de valsartan y amlodipina y método para hacer las mismas
ES2246742B1 (es) * 2005-09-06 2007-02-01 Prous Institute For Biomedical Research S.A. Uso de un derivado de imidazol.
US8080534B2 (en) 2005-10-14 2011-12-20 Phigenix, Inc Targeting PAX2 for the treatment of breast cancer
CA2681708A1 (en) * 2007-03-29 2008-10-09 Alembic Limited Valsartan tablet formulations
TR200703568A1 (tr) 2007-05-24 2008-07-21 Sanovel �La� Sanay� Ve T�Caret Anon�M ��Rket� Valsartan formülasyonları
CA2701695A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Novartis Ag Pharmaceutical formulation of valsartan
PT3067043T (pt) 2007-11-06 2023-03-01 Novartis Ag Composições farmacêuticas baseadas em superestruturas de antagonista/bloqueador de receptores da angiotensina (arb) e inibidores da endopeptidase neutra (nep)
WO2009092052A2 (en) 2008-01-18 2009-07-23 Massachusetts Eye And Ear Infirmary Methods and compositions for treating polyps
GB0802931D0 (en) * 2008-02-18 2008-03-26 Queen Mary & Westfield College Synthetic scFv analogue to the 6313/G2 (anti angiotensin II type 1 receptor) monoclonal anitbody variable regions
WO2010104485A2 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Sanovel Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi Valsartan formulations
WO2011102702A2 (en) 2010-02-16 2011-08-25 Krka, D. D., Novo Mesto Process for the preparation of oral solid dosage forms comprising valsartan
EP2455388A1 (en) 2010-11-23 2012-05-23 LanthioPep B.V. Novel angiotensin type 2 (AT2) receptor agonists and uses thereof.
CN102266307B (zh) * 2011-08-01 2012-10-24 海南锦瑞制药股份有限公司 一种缬沙坦胶囊及其制备方法
WO2013098578A1 (en) 2011-12-31 2013-07-04 Abdi Ibrahim Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi Immediate release pharmaceutical composition of valsartan hydrochlorothiazide
WO2013098576A1 (en) 2011-12-31 2013-07-04 Abdi Ibrahim Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi Immediate release pharmaceutical composition of valsartan
EA018867B1 (ru) * 2012-11-01 2013-11-29 Лаборатория Тютор С.А.С.И.Ф.И.А. Способ получения фармацевтической композиции и продукт способа
US20220257698A1 (en) 2019-08-02 2022-08-18 Lanthiopep B.V. Angiotensin type 2 (at2) receptor agonists for use in the treatment of cancer
EP4295839A1 (en) 2022-06-20 2023-12-27 KRKA, d.d., Novo mesto Combination of valsartan and indapamide
WO2024026528A1 (en) * 2022-08-02 2024-02-08 Dimerix Bioscience Pty Ltd Dosage regimen for the treatment of copd

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3146168A (en) * 1962-04-10 1964-08-25 Fmc Corp Manufacture of pharmaceutical preparations containing cellulose crystallite aggregates
CA1334092C (en) 1986-07-11 1995-01-24 David John Carini Angiotensin ii receptor blocking imidazoles
ATE108996T1 (de) * 1988-02-25 1994-08-15 Brocades Pharma Bv Verfahren zur herstellung eines pharmazeutischen granulats.
CA2018438C (en) 1989-06-14 2000-08-08 Joseph Alan Finkelstein Imidazolyl-alkenoic acids
IE70593B1 (en) 1989-09-29 1996-12-11 Eisai Co Ltd Biphenylmethane derivative the use of it and pharmacological compositions containing same
DK0443983T3 (da) * 1990-02-19 1996-03-18 Ciba Geigy Ag Acrylforbindelser
NZ237476A (en) 1990-03-20 1994-01-26 Sanofi Sa N-substituted heterocyclic compounds and pharmaceutical compositions.
US5196444A (en) 1990-04-27 1993-03-23 Takeda Chemical Industries, Ltd. 1-(cyclohexyloxycarbonyloxy)ethyl 2-ethoxy-1-[[2'-(1H-tetrazol-5-yl)biphenyl-4-yl]methyl]benzimidazole-7-carboxylate and compositions and methods of pharmaceutical use thereof
IL99246A0 (en) 1990-09-10 1992-07-15 Abbott Lab Angiotensin ii receptor antagonists and pharmaceutical compositions containing them
EP0551432A1 (en) * 1990-10-02 1993-07-21 Warner-Lambert Company 4,5,6,7-tetrahydro-1h-imidazo 4,5-c]pyridine derivatives and analogues as angiotensin ii receptor antagonists
DE4038335A1 (de) * 1990-12-01 1992-06-04 Boehringer Mannheim Gmbh Neue pyridinderivate, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung als arzneimittel
US5614519A (en) * 1991-02-06 1997-03-25 Karl Thomae Gmbh (1-(2,3 or 4-N-morpholinoalkyl)-imidazol-4-yl)-benizimidazol-1-yl-methyl]-biphenyls useful as angiotensin-II antagonists
SI9210098B (sl) * 1991-02-06 2000-06-30 Dr. Karl Thomae Benzimidazoli, zdravila, ki te spojine vsebujejo, in postopek za njihovo pripravo
US5196537A (en) 1991-03-21 1993-03-23 G. D. Searle & Co. 5-apylheteroarylalkyl-1,3,5-trisubstituted-1,2,4-triazole compounds for treatment of circulatory disorders
GB9110636D0 (en) 1991-05-16 1991-07-03 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
DE4132632A1 (de) * 1991-10-01 1993-04-08 Bayer Ag Substituierte imidazolyl-propensaeurederivate
DE4309968A1 (de) * 1993-03-26 1994-09-29 Bayer Ag Phenylglycinamide von heterocyclisch substituierten Phenylessigsäurederivaten
ATE181830T1 (de) 1992-04-13 1999-07-15 Zeneca Ltd Angiotensin-ii-antagonisten gegen erkrankungen; die mit einer eingeschränkten; neuronalen leitungsgeschwindigkeit verbunden sind, insbesondere diabetische neuropathie
EP0673371A1 (de) 1992-12-11 1995-09-27 Novartis AG Benzazepinon-derivate
AU685767B2 (en) * 1992-12-11 1998-01-29 Novartis Ag Substituted benzazepinones
DE4309963A1 (de) * 1993-03-26 1994-09-29 Hubert Kamperschroer Faß zum Austragen von Gülle
FR2716882B1 (fr) * 1994-03-04 1996-04-05 Roussel Uclaf Utilisation de dérivés de l'imidazole au traitement d'affections impliquant les récepteurs AT1 et AT2 de l'Angiotensine, certains de ces produits, leur préparation, compositions pharmaceutiques.
DE4408497A1 (de) * 1994-03-14 1995-09-21 Thomae Gmbh Dr K Benzimidazole, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
CA2184712A1 (en) 1994-03-17 1995-09-21 Marc De Gasparo Treatment of diabetic nephropathy with valsartan
DE4432860A1 (de) * 1994-09-15 1996-03-21 Merck Patent Gmbh Imidazopyridine
JPH11513395A (ja) 1995-10-06 1999-11-16 ノバルティス・アクチエンゲゼルシャフト 虚血後腎不全の予防および処置並びに虚血腎臓の保護のためのａｔ１−レセプターアンタゴニスト
AU2316997A (en) 1996-02-27 1997-09-16 David H Thompson Liposomal delivery system
JP4369994B2 (ja) 1996-02-29 2009-11-25 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト アポトーシスの刺激のためのａｔ▲下１▼レセプターアンタゴニスト
GB9613470D0 (en) * 1996-06-27 1996-08-28 Ciba Geigy Ag Small solid oral dosage form
DE19628617A1 (de) * 1996-07-16 1998-01-22 Basf Ag Direkttablettierhilfsmittel
CN1234357C (zh) 1998-07-10 2006-01-04 诺瓦提斯公司 缬沙坦和钙通道阻断剂的抗超敏组合
ID29818A (id) * 1999-01-26 2001-10-11 Novartis Ag Penggunaan antagonis reseptor angiotensin ii untuk mengobati infarksi miokardial
SK18062002A3 (sk) * 2000-06-22 2003-07-01 Novartis Ag Pevné orálne farmaceutické kompozície obsahujúce valsartan
WO2005039637A2 (en) 2003-10-17 2005-05-06 Novartis Ag Combinations of an aldosterone receptor antagonist, a diuretic and an angiotensin blocker
JP2009018990A (ja) 2005-10-25 2009-01-29 Univ Kurume Ｃ型肝炎ウイルス由来ペプチド

Also Published As

Publication number Publication date
IL143233A0 (en) 2002-04-21
EP2298298A2 (en) 2011-03-23
AU2009220022A1 (en) 2009-10-15
CZ297795B6 (cs) 2007-03-28
AU2003266433A1 (en) 2004-01-08
DK1588706T3 (da) 2012-01-16
RU2271809C2 (ru) 2006-03-20
RU2361575C2 (ru) 2009-07-20
PT1140071E (pt) 2007-05-31
AU2003266433B2 (en) 2006-08-10
RU2005124363A (ru) 2007-02-10
NO328775B1 (no) 2010-05-10
AU2006203077A1 (en) 2006-08-10
CA2622805C (en) 2011-05-10
SI1588706T1 (sl) 2012-01-31
CZ20012306A3 (cs) 2001-12-12
NO20100041L (no) 2001-08-16
HUP0104780A2 (hu) 2002-04-29
KR20010089681A (ko) 2001-10-08
IL143233A (en) 2007-07-24
SI1140071T1 (sl) 2007-08-31
ATE354364T1 (de) 2007-03-15
AU3043000A (en) 2000-07-31
TR200805740T1 (tr) 2010-06-21
PL199100B1 (pl) 2008-08-29
DE69935249T2 (de) 2007-10-31
DE69935249D1 (de) 2007-04-05
ID29856A (id) 2001-10-18
EP1588706A2 (en) 2005-10-26
IL179017A0 (en) 2007-03-08
TR200805741T2 (tr) 2008-10-21
EP2298298A3 (en) 2011-05-11
CN1331590A (zh) 2002-01-16
BR9916576A (pt) 2001-10-02
JP2010090169A (ja) 2010-04-22
EP1588706A3 (en) 2005-12-07
AU2009220022B2 (en) 2011-11-03
HUP0104780A3 (en) 2002-11-28
EP1588706B1 (en) 2011-09-14
CA2622805A1 (en) 2000-07-06
TR200101784T2 (tr) 2001-10-22
EP1140071B1 (en) 2007-02-21
NZ553010A (en) 2008-09-26
CY1112395T1 (el) 2015-12-09
EP1140071A1 (en) 2001-10-10
JP5254258B2 (ja) 2013-08-07
CN1636561A (zh) 2005-07-13
NZ511938A (en) 2004-02-27
DK1140071T3 (da) 2007-06-04
CA2351357A1 (en) 2000-07-06
IL179016A0 (en) 2007-03-08
KR100646716B1 (ko) 2006-11-17
TR200805275T2 (tr) 2008-09-22
NO20013143D0 (no) 2001-06-22
CY1106581T1 (el) 2012-01-25
PL349424A1 (en) 2002-07-29
AU2006203077B2 (en) 2009-10-08
NZ587909A (en) 2012-05-25
TR200200764T2 (tr) 2002-07-22
SK9132001A3 (en) 2002-01-07
ATE524176T1 (de) 2011-09-15
HK1038888B (zh) 2007-09-21
IL179015A0 (en) 2007-03-08
HK1038888A1 (en) 2002-04-04
JP2002533390A (ja) 2002-10-08
NO20013143L (no) 2001-08-16
ES2281978T3 (es) 2007-10-01
PT1588706E (pt) 2011-12-21
TR200605471T2 (tr) 2006-11-21
CN1304000C (zh) 2007-03-14
TR200605472T1 (tr) 2007-02-21
WO2000038676A1 (en) 2000-07-06
RU2008143545A (ru) 2010-05-10
ES2373556T3 (es) 2012-02-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ293257B6 (cs) Farmaceutický přípravek obsahující antagonistu receptoru AT1 pro léčení nemocí spojených s nárůstem receptorů AT1 v subepiteliální vrstvě
US20100120877A1 (en) Additional therapeutic use
JP6860949B2 (ja) 癌の処置方法
TW202120086A (zh) 治療癌症之方法
EP1013273A1 (en) Use of AT-1 receptor antagonist or AT-2 receptor modulator for treating diseases associated with an increase of AT-1 or AT-2 receptors
US20240173293A1 (en) Treatment of Breast Cancer with Amcenestrant and Palbociclib
TW202245786A (zh) 喹唑啉化合物及藥物組合物的應用
WO2022036267A1 (en) Compositions and methods of treatment
TW202206074A (zh) 藥物配製物
EA046114B1 (ru) Ингибитор киназы atr bay 1895344 для применения для лечения гиперпролиферативного заболевания

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20141222