CZ286032B6 - Polycyklická sloučenina, způsob její výroby, farmaceutický prostředek a biologicky čistá kultura - Google Patents
Polycyklická sloučenina, způsob její výroby, farmaceutický prostředek a biologicky čistá kultura Download PDFInfo
- Publication number
- CZ286032B6 CZ286032B6 CZ961249A CZ124996A CZ286032B6 CZ 286032 B6 CZ286032 B6 CZ 286032B6 CZ 961249 A CZ961249 A CZ 961249A CZ 124996 A CZ124996 A CZ 124996A CZ 286032 B6 CZ286032 B6 CZ 286032B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- compound
- compounds
- medium
- ppm
- fermentation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- -1 Indole diterpene Chemical class 0.000 title claims description 4
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N benzopyrrole Natural products C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 3
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 title claims description 3
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 3
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 5
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 73
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 25
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 25
- 241000856140 Nodulisporium sp. Species 0.000 claims abstract description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims 1
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 abstract description 10
- 229940125687 antiparasitic agent Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000002141 anti-parasite Effects 0.000 abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 6
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000749 insecticidal effect Effects 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 25
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 9
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 9
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 8
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 8
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 8
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 7
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 241000257162 Lucilia <blowfly> Species 0.000 description 3
- 241000382366 Nodulisporium Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000005660 Abamectin Substances 0.000 description 2
- 241000256113 Culicidae Species 0.000 description 2
- 241000150392 Fig mosaic emaravirus Species 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002000 high resolution fast-atom bombardment mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000001418 larval effect Effects 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 2
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 241000254032 Acrididae Species 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 241000256111 Aedes <genus> Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241001124076 Aphididae Species 0.000 description 1
- 241000239290 Araneae Species 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 241000131286 Attagenus Species 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 241000238658 Blattella Species 0.000 description 1
- 241001674044 Blattodea Species 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241001349211 Geniculosporium Species 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 241000143682 Hypoxylon Species 0.000 description 1
- 206010061217 Infestation Diseases 0.000 description 1
- 241000238681 Ixodes Species 0.000 description 1
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 1
- 235000019738 Limestone Nutrition 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241001143352 Meloidogyne Species 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000257159 Musca domestica Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001282442 Nodulisporium sp. MF5954 Species 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000193418 Paenibacillus larvae Species 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241001674048 Phthiraptera Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 241001649229 Psoroptes Species 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 241001299709 Rosellinia Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 241000258242 Siphonaptera Species 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 241001492664 Solenopsis <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000254105 Tenebrio Species 0.000 description 1
- 241001454294 Tetranychus Species 0.000 description 1
- 241000333689 Tineola Species 0.000 description 1
- 241000254086 Tribolium <beetle> Species 0.000 description 1
- 229920001938 Vegetable gum Polymers 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 241001523965 Xylaria Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 1
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- RRZXIRBKKLTSOM-XPNPUAGNSA-N avermectin B1a Chemical class C1=C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 RRZXIRBKKLTSOM-XPNPUAGNSA-N 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000012501 chromatography medium Substances 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000018842 conidium formation Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000006783 corn meal agar Substances 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001984 ectoparasiticidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000006028 limestone Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 230000001617 migratory effect Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 1
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 1
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- RNVYQYLELCKWAN-UHFFFAOYSA-N solketal Chemical compound CC1(C)OCC(CO)O1 RNVYQYLELCKWAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 235000015113 tomato pastes and purées Nutrition 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D491/16—Peri-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Vynález předkládá nové sloučeniny o vzorcích (I-III), které jsou získávány z kvašení, vyvolaného mikroorganismem kmene Nodulisporium sp. Sloučeniny jsou vysoce účinnými antiparazitickými, insekticidními a proti vnějším parazitům působícími činidly.
ŕ
Description
Indolový diterpen, způsob jeho výroby, farmaceutický prostředek a biologicky čistá kultura
Oblast techniky
Vynález se týká nových sloučenin, získaných kvašením mikroorganismu Nodulisporium sp. Sloučeniny vykazují silnou aktivitu vůči vnějším parazitům, jsou antiparazitickými a insekticidními činidly.
Dosavadní stav techniky
Nová antiparazitická činidla jsou již dobře známá, jako například avermectiny, předložené vUS4 310 519 a 4 199 569. Ovšem takové avermectinové sloučeniny, ačkoli jsou účinnými činidly vůči vnitřním i vnějším parazitům, jsou strukturně velmi významně odlišné od nyní předkládaných sloučenin. Avermectiny, které jsou makrocyklickými činidly, izolovanými z aktinomycéty, nejsou příbuzné s polycyklickými metabolity hub podle tohoto vynálezu. V práci Jesuse a spoluautorů vJ. Chem. Soc. Perkin Trans I, str. 697-701 (1984), jsou popsány metabolity hub, určené jako janthitremy, s polycyklickou strukturou, která ovšem postrádá některé strukturní prvky zde uváděných sloučenin.
Podstata vynálezu
Tento vynález se týká přípravy nových antiparazitických činidel a ektoparaziticidních činidel (působících proti vnějším parazitům). Předmětem vynálezu je tedy předložení takových nových sloučenin. Dalším předmětem vynálezu je poskytnutí nové metody pro přípravu takových sloučenin. Ještě dalším předmětem vynálezu je popsání mikroorganismu, používaného k výrobě takových sloučenin a podmínek kvašení, použitelných při této výrobě. Předmětem vynálezu je rovněž popsání prostředků a metod, používajících předkládané sloučeniny jako antiparazitická činidla. Další předměty vynálezu budou zřejmé po přečtení následujícího popisu.
Přehled obrázků na výkresech
Obrázky 1, 2 a 3 jsou spektra protonové nukleární negativní rezonance sloučenin 1, 2 a 3. Na obrázcích je několik rezonančních maxim (píků) označeno pomocí „x“. Tato maxima jsou způsobena přítomností rozpouštědla a nejsou významná pro strukturu sloučenin.
Obrázek 1 je spektrum nukleární magnetické rezonance sloučeniny 1, zaznamenané při 500 MHz v CD2CI2 na spektrometru Varian Unity 500 NMR při 25 °C. Chemické posuny jsou znázorněny v ppu vzhledem k TMS při 0 ppu za použití maxima rozpouštědla při δ 5,32 jako interního standardu. Uváděna jsou jen diagnostická maxima.
Obrázek 2 je spektrum nukleární magnetické rezonance sloučeniny 2, zaznamenané při 400 MHz v CD2CI2 na spektrometru Varian Unity 400 NMR při 25 °C. Chemické posuny jsou znázorněny v ppu vzhledem kTMS při 0 ppu za použití maxima rozpouštědla při δ 5,32 jako interního standardu. Uváděna jsou jen diagnostická maxima.
Obrázek 3 je spektrum nukleární magnetické rezonance sloučeniny 3, zaznamenané při 300 MHz v CD2C12 na spektrometru Varian XL 300 NMR při laboratorní teplotě. Chemické posuny jsou
-1 CZ 286032 B6 znázorněny v ppu vzhledem k TMS při 0 ppu za použití maxima rozpouštědla při δ 7,24 jako interního standardu. Počítána jsou jen diagnostická maxima.
Předkládaný vynález se týká nových sloučenin s jedinečnou strukturou. Rovněž se týká nového 5 způsobu přípravy předkládaných sloučenin v kvasném médiu mikroorganismu Nodulisporium sp. nebo jeho mutantu.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají následující struktury:
sloučenina 1 ch3
h2c
HjC sloučenina 3
Výše uvedené strukturní vzorce jsou znázorněny bez konečného stereochemického uspořádání v určitých polohách a s konečným stereochemickým uspořádáním v jiných polohách a předkládaný vynález by měl být pojímán jako zahrnující všechny takové stereoisomery. 15 Konkrétně stereoisomery v různých asymetrických centrech mohou být orientovány buď v uspořádání α-, nebo β-, která představují takové skupiny, jenž jsou pod anebo nad obecnou rovinou molekuly.
-2CZ 286032 B6
Sloučeniny podle tohoto vynálezu nacházejí své prvotní použití jako antiparazitická činidla při léčbě a/nebo prevenci a léčbě nemocí, vyvolávaných parazity, například parazitickými členovci, jako jsou klíšťata (čmelíci), vši, blechy a jiným kousavým hmyzem na domácích zvířatech a drůbeži, jako kmenem Tenophalides, Ixodes, Psoroptes, Lucilia a Hemotobia. Jsou rovněž účinné při léčbě parazitických onemocnění, která se projevují u jiných zvířat a také u člověka. Optimální množství, které by mělo být použito pro získání nej lepších výsledků, bude samozřejmě záviset na druhu léčených zvířat a na typu a závažnosti parazitární infekce nebo infestace.
Obecně se dobré výsledky s novou sloučeninou získávají při orálním podávání v množství od asi 0,001 mg na kg tělesné hmotnosti zvířete, přičemž se tato celková dávka podává vcelku anebo v jednotlivých dávkách během poměrně krátké doby, jako během 1 až 5 dnů. Snovou sloučeninou podle vynálezu se vynikající kontrola takových parazitů u zvířat získá podáním přibližně 0,025 až 50 mg látky na kilogram tělesné hmotnosti v jediné dávce. Opakovaná léčba je používána, pokud je požadováno potlačení opakovaných infekcí a závisí na druhu parazita a na použitých technikách chovu. Techniky podávání takovýchto látek zvířatům jsou známé odborníkům ve veterinárním oboru.
Předkládaná sloučenina je rovněž aktivní vůči domácímu škodlivému hmyzu, jako jsou švábi, Blatella sp., mravenci Solenopsis, mol šatní, Tineola sp., kožojed (kožešinožrout), Attagenus sp., a moucha domácí, Musea domestica.
Sloučenina podle tohoto vynálezu je rovněž vhodná vůči hmyzu, škodícímu skladovanému zrní, jako je Tribolium sp. a Tenebrio sp. a zemědělským plodinám, jako sviluškám (Tetranychus sp.), mšicím, Acyrthiosiphon sp., stěhovavému hmyzu jako jsou kobylky a nezralým stádiím hmyzu, žijícím v rostlinné tkáni. Sloučeniny jsou vhodné jako prostředky vůči hlístům ke kontrole půdních hlístic a rostlinných parazitů jako je Meloidogyne sp., kteří mohou mít význam pro zemědělství.
Předkládané sloučeniny mohou být podávány orálně v jednotce dávkovači formy, jako je kapsle, bolus (kulovitá pilulka obsahující větší dávku) nebo tableta, nebo jako podávaná kapalina, kterou je normálně roztok, suspenze nebo disperze aktivní složky, obvykle ve vodě, spolu se suspendujícím činidlem jako je bentonit a zvlhčovacím činidlem, nebo jako vehikulum. Podávané tekutiny obecně obsahují také protipěnicí činidlo. Tekutiny k podávání orálně obecně obsahují přibližně 0,001 až
1,0 hmotnost. % aktivních složek. Upřednostňované prostředky tekutin k podávání orálně mohou obsahovat přibližně 0,01 až 0,1 hmotn. % aktivních složek. Kapsle a bolusy zahrnují aktivní složku, smíšenou s nosičovým vehikulem jako je škrob, talek, stearát hořečnatý nebo fosforečnan vápenatý.
Tam, kde je žádoucí podávat sloučeniny podle tohoto vynálezu v suché, pevné jednotce dávkování, se obvykle používají kapsle, bolusy nebo tablety, obsahující požadované množství předkládaných sloučenin. Tyto dávkovači formy se připravují známým a jednotným smísením aktivní složky s vhodnými, jemně dělenými ředícími činidly, plnivy, dezintegračními činidly a/nebo pojivý, jako jsou škrob, laktóza, talek, stearát hořečnatý, rostlinné guma a podobně. Takové přípravky jednotek dávkování se mohou široce různit co do celkové hmotnosti a obsahu antiparazitického činidla v závislosti na faktorech, jako je typ hostitelského zvířete, které má být léčeno, závažnosti a typu infekce a hmotnosti hostitele.
Pokud mají být sloučeniny podle tohoto vynálezu podávány prostřednictvím krmivá zvířat, jsou důkladně rozptýleny do potravy nebo použity jako povrchová zálivka nebo ve formě pelet, které se pak mohou přidávat ke konečnému krmivu nebo být podle volby krmeny odděleně. Jinou možností je podávání antiparazitické sloučeniny podle vynálezu zvířatům parenterálně, například
-3CZ 286032 B6 intraruminální, intramuskulámí, intratracheální, nebo subkutánní injikací (do žaludku, svalu, průdušnice či pod kůži), přičemž v tomto případě je aktivní složka rozpuštěna nebo rozptýlena ve vehikulu kapalného nosiče. Pro parenterální podání je aktivní látka vhodně smísena s přijatelným vehikulem, výhodně s takovým druhem rostlinného oleje, jako je podzemnicový olej, olej z bavlněného semínka a podobně. Používají se i jiná parenterální vehikula, jako organické přípravky, využívající solketal, glycerol, formal a vodné parenterální přípravky. Sloučeniny podle vynálezu jsou rozpuštěny nebo suspendovány v parenterálních přípravcích pro podávání; takové přípravky obecně obsahují přibližně 0,55 až 5 hmotn. % předkládané sloučeniny.
Pokud se zde popsané sloučeniny podávají jako složky krmivá zvířat, anebo rozpuštěné či suspendované ve vodě k pití, jsou zajišťovány prostředky, v nichž jsou aktivní složky důkladně rozptýleny v inertním nosiči nebo rozpouštědle. Inertním nosičem je míněn takový nosič, který nebude reagovat s antiparazitickým činidlem a takový nosič, který může být bezpečně podáván zvířatům. Nosičem pro podávání v krmivu je s výhodou takový nosič, který je, nebo může být, složkou zvířecí krmné dávky.
Vhodné prostředky zahrnují krmné směsi či doplňky, v nichž jsou předkládané sloučeniny přítomny v poměrně velkých množstvích a které se hodí pro přímé krmení zvířat, nebo pro přidání do krmivá buď přímo, nebo po předchozím kroku naředění či smísení. Typické nosiče či ředidla, vhodné pro takové prostředky, zahrnují například lihovarské sušené zrní, kukuřičnou moučku, citrusovou moučku, kvasné zbytky, mleté ústřičné skořápky, pšeničné otruby, rozpustnou melasu, moučku z kukuřičných klasů, mleté krmivo z jedlých fazolí, sojové krupky, drcený vápenec a podobně. Sloučeniny podle vynálezu jsou známým způsobem rozptýleny do nosiče postupem, jako je rozdrcení, rozmíchání, mletí nebo převracení. Pro krmné směsi se zvláště hodí prostředky, obsahující přibližně 0,005 až 2,0 hmot. % předkládaných sloučenin. Krmivové doplňky, přímo zkrmované zvířetem, obsahují přibližně 0,002 až 0,3 hmot. % předkládaných sloučenin.
Takové doplňky jsou do krmivá přidávány v množství, poskytujícím v konečném krmivu takovou koncentraci aktivní složky, která je žádoucí pro léčbu a kontrolu parazitického onemocnění. I když se požadovaná koncentrace sloučenin podle vynálezu bude lišit v závislosti na výše uvedených faktorech a v závislosti na konkrétní použité sloučenině, jsou k zajištění požadovaného antiparazitického působení sloučeniny podle vynálezu obvykle do krmivá dodávány v koncentracích přibližně od 0,001 % do 0,2 %.
Navíc, má-li být sloučenina přidávána do krmivá pro zvířata, je možné použít sušený myceliální koláč z kvasného bujónu. Mycelia obsahují převážnou část aktivity a ježto aktivita mycelií může být stanovena, mohou se přidávat přímo do krmivá pro zvířata.
Sloučeniny podle vynálezu se rovněž hodí k boji se zemědělskými škůdci, poškozujícími úrodu během růstu nebo skladování. Sloučenina se aplikuje, za použití známých technik, jako je sprejové rozprašování, mlžení, emulze a podobně, na rostoucí či skladovanou úrodu k vyvolání ochrany před zemědělskými škůdci.
Antiparazitická aktivita předkládaných sloučenin může být určena orálním podáním v krmivu, podáním jednotlivé sloučeniny, směsi takových sloučenin, koncentrovaného extraktu a podobně myši, která byla infikována o tři dny dříve vhodným parazitem. V 11., 12. a 13. den po začátku medikace se v myších výkalech testuje přítomnost vajíček a další den je myš usmrcena a stanoví se počet červů, přítomných v proximální části tenkého střeva. O aktivní sloučeninu se jedná, pokud je zde významné snížení počtu vajíček a červů ve srovnání s infikovanými a neléčenými kontrolami.
Nové sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou vyráběny kvašením kmene hub rodu Nodulisporium. Jedna taková kultura je označena jako MF-5954 ve sbírce kultur Měrek and Co.,
-4CZ 286032 B6 lne., Rahway, New Jersey. Produkční kmen MF-5954 byl uložen ve stálé sbírce Americké sbírky typů kultur (Američan Type Culture Collection) v 12301 Parklawn Drive, Rockville, Md. 20852, a získal přírůstkové číslo 74245. Uložení bylo provedeno 21.9. 1993 podle Budapešťské dohody o Mezinárodním uznání ukládání mikroorganismů pro účely patentového řízení.
Morfologické a kultivační charakteristiky Nodulisporium sp. MF-5954 jsou následující:
MF-5954 (vytváří L-954, 967) byl isolován jako JP337, endofytní houba z dřevité rostlinné tkáně metodou povrchové sterilizace Billse a Polishooka (1991). V následujícím popisu jsou velkými písmeny označeny názvy barev z publikace R. Ridgwaye (1912).
Kolonie dosahující na agaru kukuřičné moučky (Difco) průměru 42 mm po 6 dnech při 25 °C, 50% relativní vlhkosti a 12 hodinové fotoperiodě fluorescenčního světla. Submerzně rostoucí chomáč kolonie, s povrchem smáčknutým do plstnatá, veskrze (všude) nezbarvené, exudát a rozpustné barvivo nejsou přítomné, rub nezbarvený, přítomna sladká aromatická vůně.
Kolonie dosahující na agaru ovesné moučky (Difco) průměru 42 mm po 6 dnech za stejných podmínek. Chomáč kolonie vyhlížející řídce bavlněné, střed kolonie žlutohnědý (Maršově žlutá, Hrubá Sienna) až světle žlutohnědý (Světle oranžově žlutá, Antimonová žluť) v polovině vzdálenosti k okraji, okraj celistvý, bílý; exudát, vůně a rozpustná barviva nepřítomny; rub světle hnědý.
Kolonie dosahující průměru 43 mm na bramborovo - sacharózovém agaru (Singleton a spol., 1992) po 6 dnech kultivace za stejných podmínek. Chomáč kolonie vyhlížející řídce bavlněné, červenavě hnědý (Světle hnědočervený - Vínový) ve středu kolonie, přecházející do průsvitného u jejích okrajů, okraj nezřetelný, exudát, vůně a rozpustné barvivo nepřítomné; rub červenohnědý (Tmavě vínový).
Při 37 °C, na agaru kukuřičné moučky a ve tmě dosahuje kolonie průměru 82 mm po 6 dnech; chomáč kolonie cele bavlnitý kromě bodu zaočkování, kde je chomáč smáčknutý, bílý, okraj celistvý, bílý, exudát a rozpustné barvivo nepřítomné, rub nezbarvený, sladká aromatická vůně.
Hyfy průsvitné až světle hnědé, s přepážkami, se stěnami hladkými až slabě zdrsněnými, tlustostěnnými, 2,5 až 3,5 pm širokými. Konidiofery mononematoidní, vzpřímené, 150 — 400 x 3,0-4,0 pm, penicilinové větvené, průsvitné až světlehnědé, s přepážkami, tlustostěnné, hladké až jemně zdrsněné do bradavičnatosti, někdy s olivovitými, zaoblenými výčnělky (o průměru 2,5 pm). Konidiogenní buňky holoblastické, terminální, 16-24 x 1,5-2,0 pm, jemně zdrsnělé k bradavičnatosti, válcovité, nepravidelné na vrcholu. Konidie vejcovité až podélně eliptické se zkráceným bodem přichycení, 4,1-5,7 x 1,6-2,5 pm, průsvitné, bez přepážek, tenkostěnné, vytvářené sympodiálně z apexu (vrcholu) konidiogenní buňky, hromadící se jako vrcholový hrozen na zářezech (denticals).
MF-5984 patří do rodu hub AW»Zzsporzzz/M(Hvphonivcetes. Deuteromycotina). Klíčové taxonomické charakteristiky tohoto rodu zahrnují mononematoidní konidiofory, které jsou typicky větvené, a sympodiální tvorbu konidií. Navíc jsou oblasti, které nesou konidie, koncové (terminální) nebo vmezeřené a nodulosní díky bohaté tvorbě konidií (Jong a Rogers, 1972). Tyto znaky odlišují rod Nodulisporium od jiných podobných hub, jako jsou Geniculosporium, Xvlocladium a Ustilina. Tyto rody jsou asexuálním (anamorfním stádiem mnoha xylematózních (Ascomykotických) hub jako jsou Hypoxylon, Xylaria, Rosellinia a podobně.
Na rozdíl od většiny izolátů mikroorganismu Nodulisporium roste MF-5954 dobře při 37 °C, ale nevykazuje v kultuře žádné další rozlišovací znaky pro přiřazení ke známým druhům. Proto se označuje jako Nodulisporium sp.
-5CZ 286032 B6
Uváděná literatura
1. G. F. Bills a J. D. Polishook: „Microfungi from Carpinus caroliniana“, Can. J. Bot. 69 (7), 1477-1482, 1991.
2. S. C. Jong a J. D. Rogers: „Illustrations and descriptions of conidial states of some Hypoxylon species“, Wash. Statě Agric. Exp. Sta. Těch. Bull. 71, 51, 1972.
3. R. Ridgway: „Color standards and color nomenclature“, publikováno autorem, Washington, D. C., str. 43 a 53, 1912.
4. L. L. Singleton, J. D. Mihail a C. M. Rush (edit.): „Methods for research on soilbome phytopathogenic fimgi“, dodatek A, str. 247, APS Press, St. Paul, Minnesota, 1992.
Předkládané sloučeniny jsou tvořeny během aerobního kvašení vhodného pevného nebo vodného živného média, za podmínek popsaných dále, produkčním kmenem Nodulisporium sp.
Vodná a pevná média, jako jsou tak, používaná k produkci mnoha antibiotických sloučenin, jsou vhodná pro použití v postupu výroby těchto polycyklických sloučenin.
Taková výživná média obsahují zdroje uhlíku a dusíku, asimilovatelné mikroorganismem, a obecně nízké hladiny anorganických solí. Navíc mohou kvasná média obsahovat stopy kovů, nezbytných pro růst mikroorganismů a tvorbu požadovaných sloučenin. Ty jsou obvykle přítomné v dostatečných koncentracích v komplexních zdrojích uhlíku a dusíku, kterých lze použít jako zdrojů výživy, ale mohou být samozřejmě přidávány, pokud je to žádoucí, k médiu odděleně.
Obecně jsou dobrými zdroji asimilovatelného uhlíku ve výživných médiích sacharidy jako cukry, např. glukóza, sacharóza, maltóza, laktóza, dextrin, cerelóza, kukuřičná moučka, ovesná mouka a podobně, a škroby. Přesné množství zdroje uhlíku, používaného v médiu, bude částečně záviset na ostatních přísadách v médiu, ale obvykle je množství uhlovodanu od 1 do 150 g/1 shledáno jako dostačující. Tyto zdroje uhlíku lze použít buď jednotlivě, nebo může být v médiu kombinováno několik takových zdrojů uhlíku.
Různé zdroje dusíku, jako kvasné hydrolyzáty, kvasné autolyzáty, buňky kvasinek, rajčatová pasta, kukuřičný moučka, ovesná mouka, sojová moučka, kaseinové hydrolyzáty, kvasničné extrakty, kukuřičné výluhy, lihovarské rozpustné výluhy, moučka z bavlníkových semen, masový extrakt, a podobně jsou snadno asimilovatelné mikroorganismem Nodulisporium sp. při výrobě předkládaných sloučenin. Různé druhy dusíku mohou být užívány samy o sobě, nebo v kombinaci v množstvích, pohybujících se od 1 do 5 g/1 média.
Z výživných anorganických solí, které mohou být začleněny do kultivačního média, jsou obvyklými solemi ty, které jsou schopné poskytovat sodné, draselné, hořečnaté, amonné, vápenaté, fosfátové, sulfátové, chloridové, uhličitanové a podobné ionty. Začleňovány jsou také stopové kovy, jako železo, zinek, mangan, měď, bór, molybden a podobně.
Je třeba zmínit, že média, popsaná viz níže a v Příkladech, jsou pouze ilustrací širokého výběru médií, která mohou být použita a nemají být považována za vymezující.
Následující příklady médií, vhodných pro růst kmenů mikroorganismu Nodulisporium sp.MF5954, ATCC 74245:
-6CZ 286032 B6
Příklady provedení vynálezu
Složení šikmého média:
kvasničný extrakt4 g sladový extrakt10 g glukóza4 g baktoagar20 g destilovaná voda 1000 ml pH 7,0
Složení očkovacího a produkčního média:
Zárodečné médium:
| složka | g/1: |
| kvasničný extrakt | 4,0 |
| sladový extrakt | 8,0 |
| glukóza | 4,0 |
| Junlon | 1,5 |
Médium bylo připraveno za použití destilované vody, pH bylo upraveno na hodnotu 7,0 před sterilizací a rozděleno po 50 ml do 250 ml nedělených Erlenmeyerových buněk. Používány byly mulové uzávěry a sterilizace byla prováděna 20 minut při teplotě 121 °C.
Produkční médium A:
1. Pevná část:
Přidá se 1250 cm3 vermiculitu do 4 litrové válcovité láhve. Ta se uzavře gumovým uzávěrem a autoklávuje se po dobu 60 minut; dalších 30 minut se vysouší.
2. Kapalná část:
| složka | g/1: |
| glukóza | 150,0 |
| močovina | 4,0 |
| N Z amin typu A | 4,0 |
| K2HPO4 | 0,5 |
| MgSO4.7H2O | 0,25 |
| KC1 | 0,25 |
| ZnSO4.7H2O | 0,9 |
| CaCO3 | 16,5 |
Médium bylo připraveno za použití destilované vody (pH nebylo upravováno). Bylo rozděleno po 425 ml do 1 litrových Erlenmeyerových baněk. Použit byl mulový uzávěr a médium bylo sterilizováno 15 minut při teplotě 121 °C.
Produkční médium B:
složkag/1:
glycerol75,0 glukóza10,0
Ardamin PH5,0 (NH4)2SO42,0 moučka ze sojových bobů5,0 rajčatová pasta5,0 citrát sodný2,0
Médium bylo připraveno za použití destilované vody, pH bylo upraveno na 7,0 před sterilizací a rozděleno po 50 ml do 250 ml nedělených Erlenmeyerových baněk. Používány byly mulové uzávěry a sterilizace byla prováděna 20 minut při teplotě 121 °C.
Kvašení za použití mikroorganismu Nodulisporium sp. může být prováděno při teplotách, pohybujících se od asi 20 °C do asi 40 °C. K získání optimálních výsledků je nejvýhodnější provádět toto kvašení při teplotě přibližně od 22 °C do 36 °C. Největší přednost se dává teplotám přibližně od 22 °C do 27 °C. Hodnota pH výživného média, vhodného k tvorbě předkládaných sloučenin, se může pohybovat přibližně od 6,5 do 8,0, upřednostňované rozmezí činí přibližně 6,8-7,3.
Kvašení v malém rozsahu se výhodně provádějí umístěním vhodného množství výživného média do baňky za použití známých sterilních technik, zaočkováním baňky buď sporami, nebo vegetativním buněčným růstem mikroorganismu Nodulisporium sp., volným utěsněním baňky mulem a ponecháním kvasného procesu vyvíjet se při stálé laboratorní teplotě přibližně 25 °C v rotační třepačce při 95 až 300 otáčkách za minutu po dobu asi 7 až 35 dnů. Pro větší rozsah práce se dává přednost tomu, provádět kvašení ve vhodných tancích, vybavených míchadlem a prostředky k provzdušňování kvasného média. Výživné médium je připraveno v tanku a po sterilizaci je zaočkováno zdrojem vegetativních buněk růstu mikroorganismu Nodulisporium sp.. Kvašení se ponechá probíhat 7 až 25 dnů za protřepávání nebo provzdušňování výživného média při teplotě v rozmezí od asi 22 °C do 27 °C. Stupeň provzdušňování závisí na několika faktorech, jako je velikost fermentoru (tanku), rychlost protřepávání a podobně. Obecně se větší objemy kvašení protřepávají při asi 95 až 300 otáčkách za minutu a dodávání přibližně 50 až 500 litrů za minutu (LZM) vzduchu.
Oddělení předkládaných sloučenin od plného kvasného bujónu a získání sloučeniny se provádí extrakcí rozpouštědlem a použitím chromatografické frakcionace za využití různých chromatografíckých technik a systémů rozpouštědla.
Předkládané sloučeniny jsou slabě rozpustné ve vodě, ale rozpouštějí se v organických rozpouštědlech. Tato vlastnost může být vhodně použita k opětnému získání sloučeniny z kvasného bujónu. V jedné metodě opětného získání se tedy plný kvasný bujón spojí s přibližně stejným objemem organického rozpouštědla. I když lze použít jakékoli organické rozpouštědlo, přednost se dává použití rozpouštědla nemísitelného s vodou, jako je ethylacetát, methylenchlorid, chloroform a podobně. Obecně je k dosažení maximálního zisku žádoucí provedení několika extrakcí. Rozpouštědlo odstraní předkládané sloučeniny, stejně jako jiné látky, postrádající antiparazitickou aktivitu předkládané látky. Pokud je rozpouštědlo s vodou nemísitelné, vrstvy jsou odděleny a organické rozpouštědlo se zahustí za sníženého tlaku. Zbytek je nanesen na chromatografickou kolonu, s výhodou obsahující silikagel. Kolona zadržuje požadovaný produkt a určité nečistoty, ale mnoho nečistot, zvláště nečistoty nepolární, jí prochází. Pak se kolona promyje slabě polárním organickým rozpouštědlem, jako je methylenchlorid či chloroform, k dalšímu odstranění nečistot, následně směsí methylenchloridu či chloroformu a organického rozpouštědla, přičemž se dává přednost acetonu, methanolu,
-8CZ 286032 B6 ethanolu a podobně. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se opět chromatografuje za použití chromatografie na koloně, na tenké vrstvě, preparativní tenkovrstevné chromatografie, vysoce účinné kapalinové chromatografie (HPLC) a podobně, se silikagelem, oxidem hlinitým, iontově výměnnými pryskyřicemi, dextranovými gely a podobně jako chromatografickým médiem a s různými rozpouštědly a směsmi rozpouštědel jako eluentem. Tenkovrstevná chromatografie, HPLC, kapalinová a preparativní chromatografie ve vrstvě mohou být použity ke stanovení přítomnosti, anebo k isolaci předkládané sloučeniny.
Použití dříve uvedených technik, stejně jako jiných, známých odborníkovi v oboru, poskytne vyčištěné prostředky, obsahující předkládanou sloučeninu. Přítomnost požadované sloučeniny se stanovuje analyzováním biologické aktivity či fyzikálně-chemických charakteristik v různých chromatografických podílech. Obě sloučeniny byly určeny podrobnou analýzou různých spektrálních charakteristik sloučenin, zejména jejich spektra nukleární magnetické rezonance (NMR), hmotových, ultrafialových a infračervených spekter.
Příklad 1
1. KULTURA: Kultura MF-5954 byla získána na šikmé agarové ploše a byla použita k přípravě FVM (zamražených vegetativních mycelií, frozen vegetative mycelia). Část agarové šikmé plochy byla asepticky převedena do zárodečného média A (50 ml, nedělená baňka o obsahu 250 ml). Ta byla inkubována v okružní třepačce o výkyvu 5 cm při 220 otáčkách za minutu po dobu 3 dnů a při teplotě 25 °C za 85% relativní vlhkosti k získání biomasy. Část biomasy byla převedena do sterilních zkumavek, obsahujících glycerol a zamražených (jako FMV). Ty byly udržovány při teplotě -75 °C a za výsledné koncentrace glycerolu v hodnotě 10 až 15%. Druhotné (sekundární) FMV byly připraveny z primárních FVM přenosem 1,0 ml rozmražených primárních FVM do zárodečného média a inkubací po 2-3 dny při teplotě 25 °C, 220 otáčkách za minutu a zamražením jako v předchozím případě.
2. ZAOČKOVÁNÍ: Zamražená zkumavka s kulturou byla rozmražena až na laboratorní teplotu a použita kzaočkování zárodečných kultur MF-5954 pomocí 0,5 až l,0ml na 50 ml zárodečného média A. Kultury byly pěstovány na okružní třepačce (220 ot. za minutu) po 2-3 dny, při 25 °C a 85% relat. vlhkosti. Někdy bylo použito zaočkování v sekundárním stádiu. Kjeho vývoji byl 1 ml výše uvedeného zaočkování v prvotním stádiu naředěn do 50 ml čerstvého zárodečného média A a vzniklý roztok byl inkubován 24 až 30 hodin při 25 °C, 220 otáčkách za minutu a 85% relativní vlhkosti.
3. PRODUKCE: Prostředkem produkčního média A je kvasné médium s pevným substrátem. Alikvotní část (18 až 24 ml) zárodku byla umístěna do 425 ml produkčního média A. Tato baňka byla důkladně vířivě míchána k rozptýlení biomasy. Obsah byl rozdělen nalitím do 4 litrové válcovité kultivační nádoby, obsahující 1250 cm3 vermiculitu o velké velikosti částic. Obsah válcovité lahve byl protřepáván/promícháván k zajištění homogenního zaočkování a pokrytí. Válcovité lahve byly inkubovány v horizontální poloze, za otáčení rychlostí přibližně 4 ot. za minutu ve Wheatonově rotačním přístroji při 22 až 25 °C a 50 až 75% relativní vlhkosti po 19 až 28 dnů k získání sekundárního metabolitu v kvasném médiu.
Pro výrobu předkládaných sloučenin bylo testováno množství kapalných médií, ktomu, aby kvašení mohlo být snáze prováděno ve větších nádobách. Produkce byla nalezena pouze u malého počtu testovaných médií. Použito bylo kapalné produkční médium B. Zárodečné kultury byly zaočkovány tak, jak bylo popsáno výše a byly pěstovány při 220 ot. za minutu na okružní třepačce po 3 dny při teplotě 25 °C a relativní vlhkosti 85 %. Alikvotní podíl zárodečné kultury byl použit k zaočkování každé produkční baňky, obsahující 50 ml (2% inokulum). Baňky byly inkubovány na okružní třepačce (220 ot. za minutu) po 21 až 28 dnů při teplotě 25 °C a 50% relativní vlhkosti.
-9CZ 286032 B6
Dvě uvedené produkční metody byly v zásadě rovnocenné, pokud se týká množství vytvořeného produktu. Ovšem druhá metoda (kapalné produkční médium B) má tu výhodu, že může být rozšířena do míchaných nádob, takže lze vyrábět větší množství. Metoda pevné produkce (otáčející se lahve média A) činí rozšíření obtížným.
K výrobě předkládaných sloučenin z této kultury byly použity také větší nádoby (22 1 tanky).
Příklad 2
Čištění a předběžná charakterizace
Dvanáct 2 litrových otáčejících se (rotujících) lahví s obsahem kultury, rostoucí v médiu po dobu 21 dní, bylo extrahováno 650 ml methylethylketonu (MEK), každá po dobu 4 hodin na otočném zařízení při 100 otáčkách za minutu. Extrakty byly zfíltrovány a spojeny a odpařeny do sucha ve vakuu do hmotnosti 8 g. Tento materiál byl rozpuštěn ve 20 ml methylenchloridu a naplněn na kolonu 800 ml silikagelu (E. Měrek) v soustavě methylenchlorid:methanol o poměru 95:5. Pro eluci byl použit jeden objem kolony každého z následujících rozpouštědel: methylenchlorid: methanol v poměru 95:5, 9:1, 3:1 a 1:1 a samotný methanol. Podíly byly shromážděny, přičemž většina aktivity se nacházela v podílech 51-55, jak bylo určeno biologickým stanovením {Lucilid}. Podíly byly spojeny a odpařeny do sucha ve vakuu a vykazovaly hmotnost 200 mg. Tento vzorek byl rozpuštěn v 8,5 ml methanolu, naplněn na kolonu Sephadexu LH20 (Pharmacia) v methanolu a při rychlosti toku 6,5 ml/minutu byly shromažďovány podíly o objemu 13 ml. Aktivita byla nalezena v podílech 41 až 50 a tyto podíly byly spojeny a vysušeny do hmotnosti 90 mg. Tento materiál byl rozpuštěn v 0,5 ml methanolu a dva nástřiky na kolonu HPLC Eka Nobel C-18 (9,6 mm x 250 mm) při laboratorní teplotě byly sledovány při 270 nm a rychlosti toku 4 ml/minutu. Použitým systémem rozpouštědla byl systém acetonitrilu a vody s 0,1% TFA v poměru 70:30 a aktivní materiál byl isolován z podílů 26-27 v první isolaci a podílů 27-28 ve druhé isolaci. Čistota sloučenin byla ověřena analytickou HPLC na koloně Eka Nobel (4,6 x 250 mm C—18) při rychlosti toku 1 ml/minutu a 40 °C, stejně jako tenkovrstevnou chromatografií v různých systémech rozpouštědel. Spojené podíly byly zakoncentrovány ve vakuu, extrahovány do methylenchloridu, vysušeny a poskytly 4,8 mg čisté sloučeniny (Sloučenina 1).
Pozdější podíly ze silikagelové, výše popsané kolony, byly rovněž biologicky aktivní; byly spojeny a vysušeny ve vakuu na hmotnost 1,4 g. Pevná látka byla několikanásobně promyta methanolem a obsahovala složky se spektrem v ultrafialové oblasti, které se podobalo spektru Sloučeniny 1. Tato spektroskopická vlastnost byla použita ke sledování dalších kroků čištění a biologická aktivita byla nakonec ověřena u čistých sloučenin. Methanolový roztok, obsahující hmotnost 500 mg, byl tedy frakcionován na koloně 250 ml Sephadexu LH-20 v methanolu. Většina hmotnosti byla obsažena v těchto spojených frakcích. Materiál byl vysušen a znova rozpuštěn ve 3 ml methanolu a byl proveden nástřik 1 ml na preparativní kolonu Zorbax C-18 (22,5 mm x 250 mm) při laboratorní teplotě za použití systému rozpouštědla acetonitril: voda (s 0,1% TFA) v poměru 80:20 při rychlosti toku 8 ml/minutu. UV detekce byla prováděna při 270 nm a odebírané podíly byly spojeny k poskytnutí sloučeniny 2 a podíly 21-22 obsahovaly sloučeninu 3.
Oba roztoky byly zahuštěny a extrahovány ethylacetátem, promyty vodou a vysušeny. Sloučenina 2 vykazovala hmotnost 1,8 g a sloučenina 3 hmotnost 1,0 mg. Obě sloučeniny byly charakterizovány jako analogy sloučeniny 1 pomocí stanovení hmotnostních spekter.
Hmotnostní spektra při ostřelování rychlými atomy (Fast Atom Bombardment, FAB mass spectra) byla zaznamenávána na hmotnostním spektrometru JEOL HX110. FAB spektrum bylo
-10CZ 286032 B6 získáno za použití matrixu dithiothreitolu a dithioerythritolu v poměru 20:80. Přesná hmotnostní měření byla provedena při vysokém rozlišení s ultraznačkou 1960 (Fomblin) jako srovnávací sloučeninou. Kritické údaje o rozložení jsou uvedeny níže.
Sloučenina 1
| nalezeno 680,3891 662,3790 | vypočteno 680,3951 662,3845 | vzorce C43H53NCVH C43H51NO5+H | označení M+H 68O-H2O |
| Sloučenina 2 | |||
| nalezeno 695,3806 | vypočteno 695,3822 | vzorec C43H53NO7 | označení M+ |
Údaje z 13C NMR
Spektra 13CNMR byla zaznamenána vCD2C12 při 100 a 125 MHz na spektrometrech Varian Unity 400 a 500 NMR při 25 °C. Chemické posuny jsou uvedeny v ppm (dílech z milionu) vzhledem k tetramethylsilanu (TMS) při 0 ppm za využití vrcholu (píku) rozpouštědla při 53,8 ppm jako vnitřního standardu.
Sloučenina 1 (125 MHz): 198,0; 172,6; 162,0; 154,7; 154,6; 140,8; 140,0; 138,4; 135,9; 134,0; 125,9; 125,1; 122,7; 122,0; 121,8; 117,5*; 116,7; 113,1; 76,8; 76,4*; 75,3; 73,9; 72,6; 58,2; 56,1; 48,0; 47,8; 45,2; 39,1; 32,3; 32,0; 30,1; 29,9; 27,8; 26,0; 25,7; 24,7; 23,5; 19,6; 18,1’; 15,1; 12,6; 11,2 ppm.
Počet uhlíků, rovnající se 43, souhlasí s molekulárním vzorcem C43H53NO6, získaným pomocí HR FAB-MS.
Sloučenina 2 (100 MHz): 198,1; 172,0; 162,0; 154,8; 147,1; 140,1; 138,3; 135,9; 134,0; 126,8; 122,6; 122,0; 121,8; 117,8*; 116,7; 113,2; 106,9; 76,6*; 75,3; 73,9; 73,3; 72,7; 58,2; 55,5; 49,6;, 48,1; 44,5; 41,3; 39,5; 32,0; 30,4; 30,1; 30,0; 29,9; 27,8; 26,0; 24,8; 23,4; 18,0*; 17,7; 16,7; 15,3; 12,5 ppm.
Počet uhlíků, rovnající se 43, souhlasí s molekulárním vzorcem C43H53NO7, získaným pomocí HR FAB-MS.
Uhlíky označené hvězdičkou (*) byly pozorovány v podobě široké rezonance.
Údaje z’H NMR
Spektra 'HNMR byla zaznamenána spektrometry o 300, 400 či 500 MHz. Chemické posuvy jsou uvedeny v ppm vzhledem k TMS při 0 ppm za využití vrcholů (píků) rozpouštědla jako vnitřního standardu.
Sloučenina 1 (viz obrázek 1) (500 MHz):6 0,96 (3H, s), 1,07 (3H, s), 1,12 (3H, s), 1,14 (3H, s), 1,31 (3H, s), 1,33 (3H, s), 1,42 (3H, s), -1,46 (3H, br.s), 1,96 (3H, d, J=1 Hz), 2,32 (1H, dd, >11,14 Hz), 2,75 (1H, dd, >6,5, 14 Hz), 2,81 (1H, dd, >3, 6,0 Hz), 2,85 (1H, m), 3,43 (1H, m), 4,96 (1H, br.s), 5,09 (1H, s), 5,20 (1H, br.s), 5,22 (1H, d, >6,0 Hz), 5,95 (1H, d, >15,0 Hz), 6,06 (1H, d, >3,0 Hz), 6,40 (1H, dd, >11,15 Hz), 7,33 (1H, br.d, >11,0 Hz), 7,71 (lH,s).
-11CZ 286032 B6
Sloučenina 2 (viz obrázek 2) (400 ΜΗζ):δ 0,95 (3H, s), 1,07 (3H,s), 1,122 (3H,s), 1,126 (3H, s), 1,31 (3H, s), 1,34 (3H, s), 1,42 (6H, s), 1,73 (1H, dd, J=9,5, 12,5 Hz), 1,86 (3H, d, J=l,5 Hz), 2,34 (1H, br.dd, J=7,5, 12,5 Hz), 2,36 (1H, dd, J=11, 14 Hz), 2,78 (1H, dd, J=6,5, 14 Hz), 2,81 (1H, dd, J=3, 6,5 Hz), 2,93 (1H, m), 4,88 (H, br.q J~8 Hz), 5,00 (1H, br.s), 5,10 (1H, s), 5,20 (1H, dq, J~1 Hz), 5,21 (1H, d, J=6,5 Hz), 6,06 (1H, d, >3,0 Hz), 6,93 (1H, dq, >8,1,5), 7,72 (lH,s).
Sloučenina 3 (viz obrázek 3) (300 ΜΗζ):δ 0,91 (3H, s), 1,05 (3H, s), 1,09 (3H, s), 1,11 (3H, d, >7,5 Hz), 1,13 (3H, s), 1,33 (3H, s), 1,47 (3H, s), 2,30 (1H, dd, >10,5, 13,5 Hz), 2,72 (1H, dd, >6,5, 13,5 Hz), 2,87 (1H, dd, >3, 6,0 Hz), 4,00 (1H, dd, >2,5, 10,5 Hz), 4,58 (1H, m), 5,02 (1H, br.s), 5,07 (1H, s), 5,17 (1H, br.s), 5,23 (1H, d, >6,0 Hz), 6,02 (1H, d, >3 Hz), 7,67 (lH,s).
Zkratky: s = singlet, d = dublet, q = kvartet, br = široký, m = multiplet, J = *Η-*Η vazebná konstanta v Hertzech (±0,5 Hz, ~ = přibližně).
Biologická účinnost sloučenin podle vynálezu
A. Larvy komárů
Postup
Jeden den staré larvy komárů Aedes aegyptii se vystaví ve vodném médiu doplněném pekařským droždím působení testovaného materiálu v dimethylsulfoxidu. O 24 a 48 h později se odečítá počet pohybů larev a v 48 h se zaznamená počet larev, které ztratily ochlupení. Hodnocení účinnosti je založeno na odečtu ve 48. hodině: 3 - žádný pohyb larev, 2 - alespoň 50 % larev se nepohybuje, 1 - alespoň 50 % se pohybuje, ale žádné úplně neztratily ochlupení, 0 - více než 50 % larev se pohybuje a některé ztratily ochlupení.
Výsledky
Sloučenina 1: koncentrace 0,4 ppm a vyšší (do 50 ppm) hodnocena 3; koncentrace 0,1 ppm a nižší hodnocena 0.
Sloučenina 2: koncentrace 2 ppm a vyšší (do 50 ppm) hodnocena 3; koncentrace 0,4 ppm a nižší hodnocena 0.
Sloučenina 3: koncentrace 2 ppm a vyšší (do 50 ppm) hodnocena 3; koncentrace 0,2 ppm a nižší hodnocena 0.
B. Larvy Lucillia
Postup
První instarstadia larev Lucillia serricata se kultivují v médiu s jehněčím sérem a krví které obsahuje malou vatovou zátku. Testované materiály se zavádějí do kultur v DMSO, MEK a MEČI. Určení účinnosti je založeno na tom, zda larvy pokračují v pohybu nebo ne a zda rostou normálně 48 hod po vystavení působení sloučeniny. Účinnost se vyhodnocuje následujícím způsobem: 3 = plná účinnost, 2 = částečná účinnost, 1 = mírná účinnost, 0 = žádná účinnost.
-12CZ 286032 B6
Výsledky
Sloučenina 1: koncentrace 0,8 ppm a vyšší (do 200 ppm) hodnocena 3; při 0,2 ppm, hodnocení 2; koncentrace 0,02 a nižší hodnocena 0.
Sloučenina 2: koncentrace 20 ppm a vyšší (do 200 ppm) hodnocena 3; při 4 ppm bylo hodnocení 1; koncentrace 2 ppm a nižší hodnocena 0.
Sloučenina 3: koncentrace 20 ppm a vyšší (do 200 ppm) hodnocena 3; koncentrace 4 ppm a nižší hodnocena 0.
Claims (5)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Indolový diterpen vzorce nebo a jeho stereoizomery.-13CZ 286032 B6
- 2. Způsob výroby polycyklické sloučeniny podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje kvašení v médiu se zdroji uhlíku, dusíku, stopových prvků a produkčním kmenemNodulisporium sp. MF-5954, ATCC 74245 a isolaci sloučenin.5
- 3. Farmaceutický prostředek pro léčbu parazitární infekce u zvířat, vyznačující se tím, že obsahuje inertní nosič a sloučeninou podle nároku 1.
- 4. Farmaceutický prostředek pro léčbu parazitárních infekcí rostlin, vyznačující se tím, že obsahuje inertní nosič a sloučeninu podle nároku 1.o
- 5. Biologicky čistá kultura mikroorganismu Nodulisporium sp. MF - 5954, ATCC 74245 schopná vytvořit sloučeniny podle nároku 1.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/146,638 US5399582A (en) | 1993-11-01 | 1993-11-01 | Antiparasitic agents |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ124996A3 CZ124996A3 (en) | 1996-10-16 |
| CZ286032B6 true CZ286032B6 (cs) | 1999-12-15 |
Family
ID=22518283
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ961249A CZ286032B6 (cs) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | Polycyklická sloučenina, způsob její výroby, farmaceutický prostředek a biologicky čistá kultura |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5399582A (cs) |
| EP (1) | EP0726902B1 (cs) |
| JP (1) | JP3557212B2 (cs) |
| KR (1) | KR100333017B1 (cs) |
| CN (2) | CN1046943C (cs) |
| AT (1) | ATE188476T1 (cs) |
| AU (1) | AU688405B2 (cs) |
| CA (1) | CA2174645C (cs) |
| CZ (1) | CZ286032B6 (cs) |
| DE (1) | DE69422526T2 (cs) |
| DK (1) | DK0726902T3 (cs) |
| ES (1) | ES2143558T3 (cs) |
| FI (2) | FI110871B (cs) |
| GR (1) | GR3032493T3 (cs) |
| HU (1) | HU221276B1 (cs) |
| NO (1) | NO315942B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ275339A (cs) |
| PL (1) | PL178879B1 (cs) |
| PT (1) | PT726902E (cs) |
| RU (1) | RU2139874C1 (cs) |
| SI (1) | SI0726902T1 (cs) |
| SK (1) | SK281510B6 (cs) |
| WO (1) | WO1995012599A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA948542B (cs) |
Families Citing this family (75)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5399582A (en) * | 1993-11-01 | 1995-03-21 | Merck & Co., Inc. | Antiparasitic agents |
| US5541208A (en) * | 1994-01-24 | 1996-07-30 | Merck & Co., Inc. | Indole diterpene alkaloid compounds |
| US6221894B1 (en) | 1995-03-20 | 2001-04-24 | Merck & Co., Inc. | Nodulisporic acid derivatives |
| US5595991A (en) * | 1995-03-20 | 1997-01-21 | Merck & Co., Inc. | Anthelmintic use of nodulisporic acid and analogs thereof |
| CN1082814C (zh) * | 1995-03-20 | 2002-04-17 | 麦克公司 | 球孢子酸衍生物 |
| US5962499A (en) * | 1995-03-20 | 1999-10-05 | Merck & Co., Inc. | Nodulisporic acid derivatives |
| US5834260A (en) * | 1996-08-30 | 1998-11-10 | Merck & Co., Inc. | Antiparasitic agents |
| PT931082E (pt) * | 1996-09-19 | 2003-06-30 | Merck & Co Inc | Derivados de acido nodulisporico |
| AU1155499A (en) * | 1997-10-09 | 1999-05-03 | Rhone-Poulenc Agro | Pesticidal combination |
| ES2359973T3 (es) * | 1998-03-19 | 2011-05-30 | MERCK SHARP & DOHME CORP. | Composiciones poliméricas líquidas para la liberación controlada de sustancias bioactivas. |
| US6787342B2 (en) | 2000-02-16 | 2004-09-07 | Merial Limited | Paste formulations |
| US6586452B1 (en) | 2000-07-14 | 2003-07-01 | Merck & Co., Inc. | C1 to C4 side chain modified nodulisporic acid analogs |
| US6399786B1 (en) * | 2000-07-14 | 2002-06-04 | Merck & Co., Inc. | Nonacyclic nodulisporic acid derivatives |
| US20040077703A1 (en) * | 2002-10-02 | 2004-04-22 | Soll Mark D. | Nodulisporic acid derivative spot-on formulations for combating parasites |
| US8362086B2 (en) | 2005-08-19 | 2013-01-29 | Merial Limited | Long acting injectable formulations |
| KR101437704B1 (ko) | 2006-07-05 | 2014-09-04 | 아벤티스 애그리컬쳐 | 1-아릴-5-알킬 피라졸 유도체 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 사용 방법 |
| PL3428148T3 (pl) | 2007-05-15 | 2020-12-28 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Związki aryloazol-2-ilo-cyjanoetyloaminowe, sposób ich wytwarzania i sposób ich stosowania |
| TWI556741B (zh) | 2007-08-17 | 2016-11-11 | 英特威特國際股份有限公司 | 異唑啉組成物及其作為抗寄生蟲藥上的應用 |
| MX337367B (es) | 2007-12-21 | 2016-02-29 | Merial Ltd | El uso de compuestos de 6-halogeno-[1,2,4]-triazolo-[1,5-a]-pirimi dina para combatir pestes en y sobre animales. |
| AU2009313920B2 (en) | 2008-11-14 | 2014-10-23 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Enantiomerically enriched aryloazol- 2 -yl cyanoethylamino paraciticidal compounds |
| KR101660068B1 (ko) | 2008-11-19 | 2016-09-26 | 메리얼 인코포레이티드 | 기생충 감염 치료를 위한 1-아릴피라졸 단독 또는 포름아미딘과의 조합을 포함하는 조성물 |
| CA2745434C (en) | 2008-12-04 | 2017-06-20 | Merial Limited | Dimeric avermectin and milbemycin derivatives |
| MX2012001170A (es) | 2009-07-30 | 2012-07-20 | Merial Ltd | Compuestos de 4-amino-tieno [2,3-d]pirimidina insecticidas y metodos para su uso. |
| CA2782902C (en) | 2009-12-04 | 2017-10-17 | Merial Limited | Pesticidal bis-organosulfur compounds |
| NZ600845A (en) | 2009-12-17 | 2014-08-29 | Merial Ltd | Compositions comprising macrocyclic lactone compounds and spirodioxepinoindoles |
| ME02432B (me) | 2009-12-17 | 2016-09-20 | Merial Inc | Antiparazitska jedinjenja dihidroazola i kompozicije koje ih sadrže |
| US20120295931A1 (en) | 2010-02-05 | 2012-11-22 | Lutz Juergen | Spiroindoline compounds for use as anthelminthics |
| UA108641C2 (uk) | 2010-04-02 | 2015-05-25 | Паразитицидна композиція, яка містить чотири активних агенти, та спосіб її застосування | |
| WO2012041872A1 (en) | 2010-09-29 | 2012-04-05 | Intervet International B.V. | N-heteroaryl compounds with cyclic bridging unit for the treatment of parasitic diseases |
| EP2621903B1 (en) | 2010-09-29 | 2017-03-01 | Intervet International B.V. | N-heteroaryl compounds |
| US8822528B2 (en) | 2010-11-16 | 2014-09-02 | Merial Limited | Monensin derivatives for the treatment and prevention of protozoal infections |
| JP2014520151A (ja) | 2011-06-20 | 2014-08-21 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー | 蠕虫感染を処置するためのヘテロ環式化合物 |
| EP2723716B1 (en) | 2011-06-27 | 2017-01-11 | Merial, Inc. | Amido-pyridyl ether compounds and compositions and their use against parasites |
| US20120329832A1 (en) | 2011-06-27 | 2012-12-27 | Jean Delaveau | Novel Insect-Repellent Coumarin Derivatives, Syntheses, and Methods of Use |
| EP2739626B1 (en) | 2011-08-04 | 2016-05-04 | Intervet International B.V. | Novel spiroindoline compounds |
| PH12018501647A1 (en) | 2011-09-12 | 2019-02-27 | Merial Inc | Parasiticidal compositions comprising an isoxazoline active agent, methods and uses thereof |
| US20130079394A1 (en) | 2011-09-23 | 2013-03-28 | Cnrs (Centre National Recherche Scientifique) | Indirect modeling of new repellent molecules active against insects, acarids, and other arthropods |
| US9173404B2 (en) | 2011-11-17 | 2015-11-03 | Merial, Inc. | Compositions comprising an aryl pyrazole and a substituted imidazole, methods and uses thereof |
| WO2013081783A1 (en) | 2011-11-28 | 2013-06-06 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | N- (4 -quinolinylmethyl) sulfonamide derivatives and their use as anthelmintics |
| WO2013082373A1 (en) | 2011-12-02 | 2013-06-06 | Merial Limited | Long-acting injectable moxidectin formulations and novel moxidectin crystal forms |
| PL230178B1 (pl) | 2012-02-06 | 2018-09-28 | Merial Ltd | Weterynaryjne miękkie, nadające się do żucia kompozycje przeciwpasożytnicze obejmujące działające systemowo substancje czynne oraz zastosowania je obejmujące |
| JO3626B1 (ar) | 2012-02-23 | 2020-08-27 | Merial Inc | تركيبات موضعية تحتوي على فيبرونيل و بيرميثرين و طرق استخدامها |
| EP2830615A1 (en) | 2012-03-28 | 2015-02-04 | Intervet International B.V. | Heteroaryl compounds with cyclic bridging unit for use in the treatment helminth infection |
| WO2013144179A1 (en) | 2012-03-28 | 2013-10-03 | Intervet International B.V. | Heteroaryl compounds with a-cyclic bridging unit |
| CN105884693B (zh) | 2012-04-20 | 2019-11-01 | 梅里亚有限公司 | 包含苯并咪唑衍生物的杀寄生物的组合物，其方法和用途 |
| SG11201503959VA (en) | 2012-11-20 | 2015-06-29 | Merial Inc | Anthelmintic compounds and compositions and method of using thereof |
| WO2014099837A1 (en) | 2012-12-18 | 2014-06-26 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Sulfonamide anthelmintics |
| JP6484641B2 (ja) | 2013-11-01 | 2019-03-13 | メリアル インコーポレイテッド | 駆虫性かつ殺有害生物性のイソオキサゾリン化合物 |
| CA2945766C (en) | 2014-04-17 | 2023-09-26 | Merial, Inc. | Use of malononitrile compounds for protecting animals from parasites |
| NZ726874A (en) | 2014-05-19 | 2018-03-23 | Merial Inc | Anthelmintic compounds |
| BR122020023385B1 (pt) | 2014-06-19 | 2021-05-25 | Merial, Inc | composições parasiticidas compreendendo derivados de indol, métodos e usos dos mesmos |
| AU2015339096B2 (en) | 2014-10-31 | 2018-08-02 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Parasiticidal composition comprising fipronil |
| UY36570A (es) | 2015-02-26 | 2016-10-31 | Merial Inc | Formulaciones inyectables de acción prolongada que comprenden un agente activo isoxazolina, métodos y usos de las mismas |
| MX395486B (es) | 2015-05-20 | 2025-03-25 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Compuestos depsipeptidicos como anthelminticos |
| UY37137A (es) | 2016-02-24 | 2017-09-29 | Merial Inc | Compuestos antiparasitarios de isoxazolina, formulaciones inyectables de acción prolongada que los comprenden, métodos y usos de los mismos |
| WO2018039508A1 (en) | 2016-08-25 | 2018-03-01 | Merial, Inc. | Method for reducing unwanted effects in parasiticidal treatments |
| CN110381738B (zh) | 2016-10-14 | 2021-07-16 | 勃林格殷格翰动物保健美国公司 | 农药的和杀寄生物的乙烯基异噁唑啉化合物 |
| WO2018093920A1 (en) | 2016-11-16 | 2018-05-24 | Merial, Inc. | Anthelmintic depsipeptide compounds |
| AR111260A1 (es) | 2017-03-31 | 2019-06-19 | Intervet Int Bv | Formulación farmacéutica de la sal de crotonil amino piridina |
| AU2018318945A1 (en) | 2017-08-14 | 2020-03-05 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Pesticidal and parasiticidal pyrazole-isoxazoline compounds |
| US11453882B2 (en) | 2017-09-29 | 2022-09-27 | Victoria Link Limited | Heterologous biosynthesis of nodulisporic acid |
| EP3749096A1 (en) | 2018-02-08 | 2020-12-16 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Parasiticidal compositions comprising eprinomectin and praziquantel, methods and uses thereof |
| WO2020002593A1 (en) | 2018-06-29 | 2020-01-02 | Intervet International B.V. | Compound for use against helminthic infection |
| KR20250044476A (ko) | 2018-07-09 | 2025-03-31 | 베링거잉겔하임베트메디카게엠베하 | 구충성 헤테로시클릭 화합물 |
| US11773066B2 (en) | 2018-11-20 | 2023-10-03 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Indazolylcyanoethylamino compound, compositions of same, method of making, and methods of using thereof |
| NZ776819A (en) | 2019-01-16 | 2023-04-28 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Topical compositions comprising a neonicotinoid and a macrocyclic lactone, methods and uses thereof |
| AR118215A1 (es) | 2019-03-01 | 2021-09-22 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Composiciones inyectables de clorsulón, sus métodos y usos |
| CN119285648A (zh) | 2019-03-19 | 2025-01-10 | 勃林格殷格翰动物保健有限公司 | 驱虫的氮杂-苯并噻吩和氮杂-苯并呋喃化合物 |
| JP2023507173A (ja) | 2019-12-18 | 2023-02-21 | インターベット インターナショナル ベー． フェー． | キノリン構造を含む駆虫剤化合物 |
| CN114846014B (zh) | 2019-12-18 | 2025-06-13 | 英特维特国际股份有限公司 | 包含氮杂吲哚结构的驱虫化合物 |
| US11964977B2 (en) | 2020-05-29 | 2024-04-23 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Anthelmintic heterocyclic compounds |
| AU2021395477A1 (en) | 2020-12-11 | 2023-06-22 | Intervet International B.V. | Anthelmintic compounds comprising a thienopyridine structure |
| CN116897044A (zh) | 2020-12-21 | 2023-10-17 | 勃林格殷格翰动物保健有限公司 | 包含异噁唑啉化合物的杀寄生虫环 |
| CN118715163A (zh) | 2022-02-17 | 2024-09-27 | 勃林格殷格翰动物保健有限公司 | 用于提供流体制品邮寄封的方法和系统 |
| WO2025027117A1 (en) | 2023-08-02 | 2025-02-06 | Intervet International B.V. | Carboxamide-4-quinoline compounds with anthelmintic activity |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE434277B (sv) * | 1976-04-19 | 1984-07-16 | Merck & Co Inc | Sett att framstella nya antihelmintiskt verkande foreningar genom odling av streptomyces avermitilis |
| US4199569A (en) * | 1977-10-03 | 1980-04-22 | Merck & Co., Inc. | Selective hydrogenation products of C-076 compounds and derivatives thereof |
| US4378353A (en) * | 1981-02-17 | 1983-03-29 | Merck & Co., Inc. | Novel C-076 compounds |
| DE3611168C2 (de) * | 1985-04-02 | 1994-01-20 | Asahi Chemical Ind | Hydroxybenzoesäurephenylester, deren Herstellung und deren Verwendung als physiologisch wirksame Substanzen |
| US4873247A (en) * | 1987-11-27 | 1989-10-10 | Goegelman Robert T | Derivatives of paraherquamide isolated from a fermentation broth active as antiparasitic agents |
| JP2805564B2 (ja) * | 1992-08-13 | 1998-09-30 | 明治製菓株式会社 | 新規物質ｐｆ１１０１ｂ物質及びその製造法 |
| US5399582A (en) * | 1993-11-01 | 1995-03-21 | Merck & Co., Inc. | Antiparasitic agents |
-
1993
- 1993-11-01 US US08/146,638 patent/US5399582A/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-10-27 DE DE69422526T patent/DE69422526T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 CN CN94194524A patent/CN1046943C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 RU RU96112175A patent/RU2139874C1/ru active
- 1994-10-27 CA CA002174645A patent/CA2174645C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 SK SK539-96A patent/SK281510B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-10-27 HU HU9601138A patent/HU221276B1/hu unknown
- 1994-10-27 PL PL94314190A patent/PL178879B1/pl unknown
- 1994-10-27 WO PCT/US1994/012302 patent/WO1995012599A1/en active IP Right Grant
- 1994-10-27 ES ES94932063T patent/ES2143558T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 CZ CZ961249A patent/CZ286032B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-10-27 DK DK94932063T patent/DK0726902T3/da active
- 1994-10-27 AU AU80929/94A patent/AU688405B2/en not_active Expired
- 1994-10-27 JP JP51328695A patent/JP3557212B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 PT PT94932063T patent/PT726902E/pt unknown
- 1994-10-27 AT AT94932063T patent/ATE188476T1/de active
- 1994-10-27 NZ NZ275339A patent/NZ275339A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-10-27 KR KR1019960702262A patent/KR100333017B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 EP EP94932063A patent/EP0726902B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 SI SI9430297T patent/SI0726902T1/xx unknown
- 1994-10-31 ZA ZA948542A patent/ZA948542B/xx unknown
- 1994-12-20 US US08/359,666 patent/US5614546A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-04-30 FI FI961839A patent/FI110871B/fi not_active IP Right Cessation
- 1996-04-30 NO NO19961748A patent/NO315942B1/no not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-04-24 CN CN99106438A patent/CN1082543C/zh not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-01-27 GR GR20000400187T patent/GR3032493T3/el unknown
-
2001
- 2001-11-27 FI FI20012318A patent/FI112503B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ286032B6 (cs) | Polycyklická sloučenina, způsob její výroby, farmaceutický prostředek a biologicky čistá kultura | |
| JP4258575B2 (ja) | 新規ａ８３５４３化合物及びそれらの製造法 | |
| EP0170006B1 (en) | Method and compositions for helmintic, arthropod ectoparasitic and acaridal infections with novel agents | |
| CS207397B2 (en) | Method of preparation of the new anthelmintic compounds | |
| JPS61233686A (ja) | アベルメクチン生物学的変換生成物 | |
| JPH01193269A (ja) | 発酵培地中より単離された駆虫剤として活性のあるパラハークアミド誘導体 | |
| US5164389A (en) | Anthelmintic bioconversion products | |
| US5317030A (en) | Method and compositions for helmintic, arthropod ectoparasitic and acaridal infections with novel agents | |
| AU642295B2 (en) | 28-hydroxy ivermectin aglycone | |
| US5198464A (en) | Method and compositions for helmintic, arthropod ectoparasitic and acaridal infections with novel agents | |
| JPH07505280A (ja) | ストレプトマイセス アベルミチリス株によりグリコシル化されたアベルメクチン化合物 | |
| JPH0586065A (ja) | 既知の微生物から生産される新規アベルメクチン | |
| JPH0219383A (ja) | 新規ミルベマイシン類およびその製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20141027 |