CZ284903B6 - Použití rekombinantního adenoviru zvířecího původu pro přípravu farmaceutického přípravku - Google Patents
Použití rekombinantního adenoviru zvířecího původu pro přípravu farmaceutického přípravku Download PDFInfo
- Publication number
- CZ284903B6 CZ284903B6 CZ953028A CZ302895A CZ284903B6 CZ 284903 B6 CZ284903 B6 CZ 284903B6 CZ 953028 A CZ953028 A CZ 953028A CZ 302895 A CZ302895 A CZ 302895A CZ 284903 B6 CZ284903 B6 CZ 284903B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- human
- adenovirus
- adenoviruses
- recombinant adenovirus
- adenovirus according
- Prior art date
Links
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 title claims abstract description 111
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 24
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 6
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 29
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 55
- 102100038909 Caveolin-2 Human genes 0.000 claims description 26
- 101000740981 Homo sapiens Caveolin-2 Proteins 0.000 claims description 26
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 18
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 17
- 241000282465 Canis Species 0.000 claims description 14
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 14
- 241000598171 Human adenovirus sp. Species 0.000 claims description 13
- 241000701157 Canine mastadenovirus A Species 0.000 claims description 12
- 230000010076 replication Effects 0.000 claims description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 8
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 7
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims description 6
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 4
- 241000188845 Porcine adenovirus Species 0.000 claims description 3
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 241000701792 avian adenovirus Species 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 241000990167 unclassified Simian adenoviruses Species 0.000 claims description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 2
- 241000701168 Murine adenovirus 1 Species 0.000 claims 1
- 241001503524 Ovine adenovirus Species 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 68
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 24
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 23
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 8
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 6
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 6
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 6
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 6
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001135569 Human adenovirus 5 Species 0.000 description 4
- 102100021244 Integral membrane protein GPR180 Human genes 0.000 description 4
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000701533 Escherichia virus T4 Species 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- -1 alpha-ΙΑΤ Proteins 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 108091092328 cellular RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 2
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 2
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102100022464 5'-nucleotidase Human genes 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 description 1
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 101150041731 CAC2 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 101150047856 Cav2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100035888 Caveolin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000004594 DNA Polymerase I Human genes 0.000 description 1
- 108010017826 DNA Polymerase I Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000001039 Dystrophin Human genes 0.000 description 1
- 108010069091 Dystrophin Proteins 0.000 description 1
- 101150005585 E3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150066038 E4 gene Proteins 0.000 description 1
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100031706 Fibroblast growth factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004038 Glia Maturation Factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000495 Glia Maturation Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 101000678236 Homo sapiens 5'-nucleotidase Proteins 0.000 description 1
- 101000715467 Homo sapiens Caveolin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101001055320 Myxine glutinosa Insulin-like growth factor Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000742 Neurotrophin 3 Proteins 0.000 description 1
- 101710149086 Nuclease S1 Proteins 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035028 Nucleic proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 101100379247 Salmo trutta apoa1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100032889 Sortilin Human genes 0.000 description 1
- 241000701093 Suid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 101150115889 al gene Proteins 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N beta-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-FPRJBGLDSA-N 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003914 blood derivative Substances 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N chloroform;phenol Chemical compound ClC(Cl)Cl.OC1=CC=CC=C1 YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037828 epithelial carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Inorganic materials [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009452 underexpressoin Effects 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/55—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/10011—Adenoviridae
- C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
- C12N2710/10341—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/10343—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Použití rekombinantního adenoviru zvířecího původu obsahujícího heterologní sekvenci DNA pro přípravu farmaceutického přípravku určeného k terapeutickému nebo/a chirurgickému ošetření lidského těla.ŕ
Description
Rekombinantní adenovir nelidského zvířecího původu, farmaceutický přípravek tento adenovir obsahující a použití tohoto adenoviru pro přípravu uvedeného farmaceutického přípravku nebo lidské vakcíny
Oblast techniky
Vynález se týká nových virových vektorů, jejich přípravy a jejich použití v genové terapii. Vynález se rovněž týká farmaceutických přípravků obsahujících tyto virové vektory. Vynález se zejména týká použití rekombinantních adenovirů zvířecího původu jako vektorů pro genovou terapii.
Dosavadní stav techniky
Genová terapie spočívá vtom, že se nedostatečnost nebo abnormalita (mutace, aberantní exprese, atd.) koriguje zavedením genetické informace do postižené buňky nebo do postiženého orgánu. Tato genetická informace může být zavedena buď in vitro do buňky izolované z postiženého orgánu, načež se modifikovaná buňka opětovně zavede do organismu, nebo přímo in vivo do příslušné tkáně. Pro tento druhý způsob zavedení genetické informace byly vyvinuty různé techniky, z nichž lze uvést některé transfekční techniky zahrnující použití komplexů DNA a DEAE-dextranu (Pagano a kol., J. Virol. 1 (1967) 891), DNA a nukleových proteinů (Kaneda a kol., Science 243 (1989) 375), DNA a lipidů (Felgner a kol., PNAS 84 (1987) 7413), použití liposomů (Fraley a kol., J. Biol. Chem. 255 (1980) 10431), atd.. V poslední době se jako slibná alternativa uvedených fyzikálních transfekčních technik ukázalo použití viru jako vektoru pro přenos genů. Za tímto účelem již byly testovány četné viry za účelem stanovení jejich schopnosti infikovat určité buněčné populace. Jedná se zejména o retroviry (RSV, HMS, MMS, atd.), vir HSV, adeno-přidružené viry a o adenoviry.
Mezi těmito viry zaujímají adenoviry zvláštní postavení vzhledem k některým vlastnostem, které jsou zajímavé pro použití v genové terapii. V tomto ohledu lze zejména uvést jejich poměrně široké hostitelské spektrum, jejich schopnost infikovat klidové (quiescentní) buňky a neintegrovat se do genomu infikované buňky. Z těchto důvodů již byly adenoviry použity in vivo pro přenos genů. Za tímto účelem byly připraveny různé vektory odvozené od adenovirů a inkorporující různé geny (beta-gal, OTC, alfa-ΙΑΤ, cytokiny, atd.). Všechny tyto vektory odvozené od adenovirů a popsané v rámci dosavadního stavu techniky v souvislosti s jejich použitím v humánní genové terapii byly až dosud připraveny z adenovirů lidského původu. Takové adenoviry se skutečně zdají být nejvhodnější pro uvedené použití. Za účelem omezení rizika množení a tvorby infekčních částic in vivo jsou použité adenoviry obecně modifikovány tak, aby nebyly schopné replikace v infikované buňce. Konstrukce popsané v rámci dosavadního stavu techniky jsou takto tvořeny adenoviry s delecí oblasti El (Ela nebo/a Elb) a případně oblasti E3, v jejichž úrovni jsou inzerovány sekvence tvořící přenášenou genovou informaci (Levrero a kol., Gene 101 (1991) 195; Gosh-Choudhury a kol. Gene 50 (1986) 161). Nicméně, kromě této nutné modifikace mají vektory popsané v rámci dosavadního stavu techniky ještě další nedostatky, které omezují jejich využití v rámci genové terapie, mezi které patří zejména riziko rekombinace s divokými adenoviry. Vynález přináší výhodné řešení tohoto problému.
V patentovém dokumentu WO91/11525 jsou popsány rekombinantní adenoviry obsahující zainteresované geny. Na rozdíl od obsahu tohoto patentového dokumentu však vynález využívá zjištění výhodných vlastností rekombinantních virů zvířecího původu, které jsou schopné infikovat lidské buňky, nejsou schopné se v nich replikovat nejsou schopné komplementace lidskými adenoviry.
- 1 CZ 284903 B6
Podstata vynálezu
Podstata vynálezu spočívá v použití rekombinantních adenovirů zvířecího původu pro humánní genovou terapii. Vynález je důsledkem zjištění, že adenoviry zvířecího původu jsou schopné s vysokou účinností infikovat lidské buňky. Vynález je rovněž založen na zjištění, že adenoviry zvířecího původu nejsou schopné množení v lidských buňkách, ve kterých byly testovány. Podstatu vynálezu konečně tvoří překvapující objev spočívající vtom, že adenoviry zvířecího původu nejsou nikterak trans-komplementovány adenoviry lidského původu, což eliminuje jakékoliv riziko rekombinace a propagace in vivo v přítomnosti lidských adenovirů, která by mohla vést k tvorbě infekční částice. Vektory podle vynálezu jsou tedy mimořádně výhodné, neboť v jejich případě je riziko spojené s použitím viru jako vektoru v genové terapii a reprezentované například patogenicitou transmisí, replikací a rekombinací silně redukováno a případně zcela potlačeno.
Vynález takto poskytuje virové vektory obzvláště vhodné pro přenos nebo/a expresi požadovaných sekvencí DNA u člověka.
Předmětem vynálezu je rekombinantní adenovir nelidského zvířecího původu schopný infikovat lidské buňky, neschopný replikace v lidských buňkách a obsahující alespoň jeden inzerovaný terapeutický gen kódující terapeutický proteinový produkt, přičemž terapeutickým genem je antimediátorový gen nebo antimediátorová sekvence.
Rekombinantní adenovir podle vynálezu případně obsahuje také promotorovou sekvenci umožňující expresi inzerovaného genu nebo inzerovaných terapeutických genů.
Rekombinantní adenovir podle vynálezu případně také obsahuje signální sekvence umožňující indukovat sekreci produktu exprese terapeutického genu.
Rekombinantní adenovir podle vynálezu je výhodně zvolen z množiny zahrnující psí, hovězí, myší, ovčí, prasečí, ptačí a opičí adenoviry. Výhodně jde o psí adenovir, který je výhodně zvolen z množiny zahrnující kmeny adenovirů CAC2.
Výhodně je adenovir zbaven alespoň sekvencí nezbytných pro replikaci, zejména oblastí El A aElB.
Výhodně adenovir podle vynálezu obsahuje ještě oblasti jiného zvířecího nebo lidského adenoviru, znemožňující produkci nežádoucích virových proteinů u člověka nebo umožňující inzerci heterologních sekvencí DNA, jejichž přenos nebo/a exprese je u člověka žádoucí, nebo/a inzerci stanovených oblastí genomu jiného zvířecího nebo lidského adenovirů.
Předmětem vynálezu je také farmaceutický přípravek, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje alespoň jeden rekombinantní adenovir, který byl definován výše.
Předmětem vynálezu je také použití výše uvedeného rekombinantního adenovirů pro přípravu farmaceutického přípravku určeného k terapeutickému nebo/a chirurgickému ošetření lidského těla, pro přípravu farmaceutického přípravku pro přenos terapeutických genů u člověka a pro přípravu lidské vakcíny.
Adenoviry zvířecího původu, které jsou použitelné v rámci vynálezu, mohou být adenoviry různého specifického původu s výjimkou adenovirů lidského původu. Lidskými adenoviry jsou adenoviry, které jsou přirozeným infekčním faktorem schopným infikovat člověka a které jsou obecně označovány symboly HAd nebo Ad.
-2CZ 284903 B6
Adenoviry zvířecího původu, které jsou použitelné v rámci vynálezu, mohu být adenoviry psího, hovězího, myšího (příklad: Mávl, Beard a kol., Virology 75 (1990) 81), ovčího, prasečího, ptačího nebo také opičího (příklad: SAV) původu.
Z ptačích adenovirů lze zejména uvést sérotypy 1 až 10 dostupné ve sbírce kultur ATCC, přičemž jako příklad takových adenovirů lze uvést kmeny Phelp (ATCC VR-432), Fontes (ATCC VR-280), P7-A (ATCC VR-827), IBH-2A (ATCC VR-828), J2-A (ATCC VR-829), T8-A (ATCC VR-830), K-l 1 (ATCC VR-921) nebo také kmeny uváděné jako ATCC VR-831 až 835. Z hovězích adenovirů lze použít různé známé sérotypy a zejména sérotypy dostupné ve sbírce kultur ATCC (typy 1 až 8) pod označením ATCC VR-313, 314, 639-642, 768 a 769. Rovněž lze uvést myší adenoviry FL (ATCC VR-550) a E20308 (ATCC VR-528), ovčí adenovir typu 5 (ATCC VR-1343) nebo typu 6 (ATCC VR-1340), prasečí adenovir 5359 nebo opičí adenoviry, jakými jsou zejména adenoviry vedené ve sbírce kultur ATCC pod čísly VR-591-594, 941-943, 195-203, atd.
V rámci vynálezu se výhodně použijí adenoviry psího původu a zejména všechny kmeny adenovirů CAV2 (například kmen Manhattan nebo A26/61 (ATCC VR-800)/. Psí adenoviry již byly předmětem četných strukturních studií. V rámci dosavadního stavu techniky byly takto popsány úplné restrikční mapy adenovirů CAV1 a CAV2 (Spibey a kol., J. Gen. Virol. 70 (1989) 165), přičemž byly klonovány a sekvenovány geny Ela a E3, jakož i sekvence ITR (viz zejména Spibey a kol., Virus Res. 14 (1989) 241; Linné, Virus Res. 23 (1992) 119, WO 91/11525). Jinak byly psí adenoviry již použity pro přípravu vakcín určených k imunizaci psů proti vzteklině (parvoviry a pod. (WO 91/11525). Nicméně nebyla až dosud v rámci dosavadního stavu techniky navržena nebo zmíněna možnost použití těchto adenovirů pro genovou humánní terapii, ani nebyl specifikován pokrok, kterého by bylo takovýmto použitím dosaženo.
Adenoviry použité v rámci vynálezu musí být výhodně defektní, tzn. neschopné autonomní propagace v organismu, do kterého byly přeneseny. Jak již bylo uvedeno výše, bylo prokázáno, že adenoviry zvířecího původu jsou schopné infikovat lidské buňky, ale nejsou schopné propagace v těchto lidských buňkách. V tomto ohledu jsou adenoviry zvířecího původu vzhledem ke člověku přirozeně defektní a na rozdíl od použití lidských adenovirů adenoviry zvířecího původu nevyžadují výše uvedenou genetickou modifikaci, která viry činí defektními. Nicméně defektní povaha těchto adenovirů může být posílena genetickými modifikacemi jejich genomu, zejména modifikací sekvencí nezbytných pro replikaci daného viru v buňkách. Tyto oblasti mohou být buď odstraněny (zcela nebo částečně), nebo učiněny nefunkčními nebo modifikovány inzercí dalších sekvencí a zejména heterologní sekvence DNA.
Podle povahy adenovirů se sekvence nezbytné k replikaci mohou poněkud měnit. Nicméně tyto sekvence jsou obecně lokalizovány v blízkosti konců genomu. Takto byla v případě adenovirů CAV-2 identifikována, klonována a sekvenována oblast Ela (Spilbey a kol., Virus Res. 14 (1989) 241). Tato oblast se nachází na fragmentu s délkou 2 kb na levém konci genomu adenovirů.
Nicméně adenoviry mohou být geneticky modifikovány i jinak, zejména za účelem zabránění produkci nežádoucích virových proteinů u člověka, za účelem umožnění inzerce heterologních sekvencí DNA výrazné délky nebo/a za účelem inzerce stanovených oblastí genomu jiného zvířecího nebo lidského adenovirů (příklad: gen E3).
V rámci tohoto vynálezu výraz „heterologní sekvence DNA“ zahrnuje libovolnou sekvenci DNA zavedenou do viru, jejíž přenos nebo/a exprese je u člověka žádoucí.
Taková heterologní sekvence DNA může zejména zahrnovat jeden nebo několik terapeutických genů nebo/a jeden nebo několik genů kódujících antigenní peptidy.
-3CZ 284903 B6
V rámci specifického provedení se tedy vynález zejména týká použití adenoviru zvířecího původu pro přípravu farmaceutických přípravků určených pro přenos terapeutických genů u člověka. Terapeutickými geny, které mohou být takto přeneseny, jsou libovolné geny, jejichž transkripce a případně translace v cílové buňce generuje produkty mající terapeutickou účinnost.
Může se zejména jednat o geny kódující proteinové produkty mající terapeutický účinek. Takto kódovaným proteinovým produktem může být protein, peptid, aminokyselina a podobně. Tento proteinový produkt může být homologní vůči cílové buňce (což znamená, že tento produkt se normálně exprimuje v cílové buňce v případě, že tato buňka nevykazuje žádnou patologii).
V tomto případě exprese proteinu umožňuje například léčit nedostatečnou expresi v uvedené buňce nebo expresi neúčinného nebo málo účinného proteinu, způsobenou modifikací buňky, nebo také umožňuje nadměrnou expresi uvedeného proteinu. Terapeutický gen může také kódovat mutant buněčného proteinu mající zvýšenou stabilitu, modifikovanou účinnost a podobně. Proteinový produkt může být rovněž heterologní vůči cílové buňce. V tomto případě může exprimovaný protein na příklad kompletovat nebo poskytovat dostatečnou činnost buňky, což jí umožní bojovat proti dané patologii.
Jako terapeutické produkty ve smyslu tohoto vynálezu lze zejména uvést enzymy, krevní deriváty, hormony, lymfokiny: interleukiny, interferony a podobně (FR 9203120), růstové faktory, přenašeče nervových vznětů nebo jejich prekurzory nebo syntézní enzymy, trofické faktory: BDNF, CNTF, NGF, IGF, GMF, aFGF, bFGF, NT3, NT5 a podobně, apolipoproteiny: ApoAI, ApoAIV, ApoE a podobně (FR 93 05125), dystrophin nebo minidystrophin (FR 9111947), geny potlačující nádory: p53, Rb, Rapi A, DCC, k-rev a podobně (FR 93 04745), geny kódující faktory uplatňující se při koagulaci: faktory VII, VIII, IX, a podobně.
Terapeutickým genem může být také antimediátorový gen nebo antimediátorová sekvence, jehož resp. jejíž exprese reguluje expresi genů nebo transkripci buněčných RNAm. Takové sekvence mohou být například přepsány do cílové buňky jako RNA komplementární k buněčným RNAm a mohou takto blokovat jejich translaci na protein, a to podle techniky popsané v evropském patentovém dokumentu EP 140 308.
Jak již bylo uvedeno výše, může heterologní sekvence DNA rovněž obsahovat jeden nebo několik genů kódujících antigenní peptid, který je schopen generovat u člověka imunitní odezvu.
V rámci tohoto specifického provedení vynález umožňuje realizaci vakcíny umožňující imunizovat člověka, zejména proti mikroorganismům a virům. Zejména se může jednat o specifické antigenní peptidy viru Epsteina a Barrové, viru hepatitidy B (EP 185 573), viru pseudovztekliny nebo také specifických nádorových virů (EP 259 212).
Obecně heterologní sekvence DNA také obsahuje sekvence umožňující expresi terapeutického genu nebo/a genu kódujícího antigenní peptid v infikované buňce. Může se jednat o sekvence, které jsou přirozeně zodpovědné za expresi uvažovaného genu za předpokladu, že jsou tyto sekvence schopné funkce v infikované buňce. Rovněž se může jednat o sekvence různého původu (zodpovědné za expresi dalších proteinů) nebo dokonce o syntetické sekvence. Zejména se může jednat o promotorové sekvence eukaryotických nebo virových genů. Například se může jednat o promotorové sekvence pocházející z genomu buňky, která má být infikována. Stejně tak se může jednat o promotorové sekvence pocházející z genomu viru, včetně použitého adenoviru.
V tomto ohledu lze například citovat promotory genů E1A, MLP, CMV, RSV a podobně. Kromě toho mohou být tyto expresní sekvence modifikovány zavedením aktivačních, regulačních a podobných sekvencí. V případě, že inzerovaný gen neobsahuje expresní sekvence, potom může být inzerován do genomu defektního viru za takovou sekvenci.
Jinak heterologní sekvence DNA může rovněž obsahovat, a to zejména před terapeutickým genem, signální sekvenci směřující syntetizovaný terapeutický produkt do sekrečních cest cílové buňky. Touto signální sekvencí může být přirozená signální sekvence terapeutického produktu,
-4CZ 284903 B6 i když se může také jednat o libovolnou jinou funkční signální sekvenci nebo o umělou signální sekvenci.
Defektní adenoviry podle vynálezu mohou být připraveny libovolnou známou technikou. Zejména mohou být připraveny podle protokolu popsaného v patentové přihlášce WO 91/11525. Klasická technika přípravy spočívá v homologní rekombinaci mezi zvířecím adenovirem a plazmidem nesoucím mezi jiným heterologní sekvenci, která má být inzerována. Tato homologní rekombinace proběhne po ko-transfekci uvedených adenovirů a plazmidu ve vhodné buněčné řadě. Použitá buněčná řada musí být výhodně transformovatelná uvedenými prvky a v případě, že se použije modifikovaný adenovir zvířecího původu, může buněčná řada případně obsahovat sekvence, které jsou schopné komplementovat část genomu defektního adenovirů, výhodně v integrované formě za účelem eliminace rizika rekombinace. Jako příklady uvedených buněčných řad lze uvést renální buněčnou řadu chrta GHK (Flow laboratoires) nebo buněčnou řadu MDCK. Podmínky, za jakých se provádí kultivace buněčných řad a příprava virů nebo virové DNA, byly rovněž popsané v literatuře (viz zejména Macatney a kol., Science 44 (1988)9; Fowlkes a kol., J. Mol. Biol. 132 (1979)163).
Multiplikované vektory se potom izolují a purifikují klasickými technikami molekulární biologie.
Dalším předmětem vynálezu je rekombinantní adenovir zvířecího původu obsahující heterologní sekvenci DNA zahrnující alespoň jeden výše definovaný terapeutický gen.
Předmětem vynálezu je rovněž každý farmaceutický přípravek obsahující výše definovaný rekombinantní adenovir zvířecího původu. Tyto farmaceutické přípravky mohou být formulovány s ohledem na topické, perorální, parenterální, intranasální, intravenózní, intramuskulámí, subkutánní, intraokulámí a ostatní podání.
Výhodně farmaceutický přípravek obsahuje farmaceuticky přijatelné nosiče pro injikovatelnou formulaci. Může se zejména jednat o roztoky solí (sekundární a terciární fosforečnan sodný, chlorid sodný, draselný, vápenatý nebo hořečnatý a podobně nebo směsi těchto solí) ve sterilní isotonické formě, nebo o suché kompozice, zejména lyofilizované, které po přidání sterilizované vody nebo fyziologického roztoku poskytují injikovatelné roztoky.
Dávky viru použité pro injekci mohou být závislé na různých parametrech, zejména na použitém způsobu podání, na typu léčeného patologického stavu, na genu, který má být exprimován nebo také na požadované době léčení. Obecně jsou rekombinantní adenoviry podle vynálezu formulovány a podány ve formě dávek obsahujících mezi 104 a 104 pfu/ml a výhodně mezi 106 a 1010 pfu/ml. Výraz pfu („plaque forming unit“) odpovídá infekční potenci roztoku viru a je stanoven infikováním vhodné buněčné kultury a určením (obvykle po 5 dnech) počtu oblastí infikovaných buněk. Technika stanovení veličiny pfu virového roztoku je velmi dobře dokumentována v literatuře.
Podle inzerované heterologní sekvence DNA mohou být adenoviry podle vynálezu použity pro léčení nebo prevenci četných patologických stavů, zahrnujících genetická onemocnění (dystrofie, cystická fibróza a podobně), neurodegenerativní onemocnění (Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc, ALS a podobně), rakoviny, patologické stavy spojené s poruchami koagulace a s dyslipoproteinemiemi, patologické stavy sdružené s virovými infekcemi (hepatitida, AIDS a podobně) a podobné patologické stavy.
V následující části popisu bude vynález blíže objasněn na příkladech jeho konkrétních provedení, přičemž tyto příklady mají pouze ilustrační charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen formulací patentových nároků.
-5CZ 284903 B6
Příklady provedení vynálezu
Na připojených výkresech obr. 1 znázorňuje restrikční mapu kmene Manhattan adenoviru CAV2 (podle výše uvedeného odkazu Spilbey a kol.), obr. 2 znázorňuje mapu plazmidů pl, p2 (obr. 2a) a p3 (obr. 2b) a obr. 3 znázorňuje konstrukci rekombinantního psího adenoviru obsahujícího heterologní sekvenci DNA.
Obecné techniky molekulární biologie
Klasické metody používané v molekulární biologií, jakými jsou preparativní extrakce plazmidové DNA, odstřeďování plazmidové DNA v gradientu chloridu česného, elektroforéza na agarosovém gelu nebo na akrylamidovém gelu, purifikace fragmentů DNA elektroelucí, extrakce proteinů fenolem nebo soustavou fenol-chloroform, precipitace DNA v solném prostředí ethanolem nebo isopropanolem, transformace v Escherichia coli a další metody, jsou velmi dobře známé a hojně popsané v literatuře /Maniatis T. a kol. „Molecular Cloning, a Labolatoiy Manual“, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N. Y., 1982; Ausubel F. M. a kol. (eds), „Current Protocols in Molecular Biology“, John Wiley and Sons, New York, 1987/.
Plazmidy typu pBR322, pUC a fagy řady M13 jsou komerčně dostupné u firmy Bethesda Research Laboratories.
Pro ligace mohou být fragmenty DNA separovány podle velikosti elektroforézou na agarosovém nebo akrylamidovém gelu, extrahovány fenolem nebo soustavou fenol/chloroform, vysráženy ethanolem a potom inkubovány v přítomnosti DNA-ligázy fagu T4 (Biolabs) podle doporučení dodavatele.
Naplnění proeminentních konců 5' může být provedeno Klenowovým fragmentem ADNpolymerázy I Escherichia coli (Biolabs) podle údajů dodavatele. Destrukce proeminentního konce 3' se provede v přítomnosti DNA-polymerázy fágu T4 (Biolabs) použité podle doporučení výrobce. Destrukce proeminentního konce 5' se provede zpracováním za použití nukleázy Sl.
Mutageneze provedení in vitro syntetickými oligodeoxynukleotidy může být provedena metodou vyvinutou Taylor-em a kol. /Nucleic Acids Res. 13 (1985) 8749-8764/ za použití soupravy distribuované firmou Amersham.
Enzymatická amplifikace fragmentů DNA technikou nazvanou PCR /Polymerase-catalyzed Chain Reaction, Saiki R. K. a kol., Science 230 (1985) 1350-1354; Mullis K. B. a Faloona F. A., Meth. Enzym. 155 (1987) 335-350/ může být provedena za použití činidla označeného jako „DNA thermal cycler“ (Perkin Elmer Cetus) podle údajů výrobce.
Ověření nukleotidových sekvencí může být provedeno metodou vyvinutou Sanger-em a kol. /Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 74 (1977) 5463-5467/ za použití soupravy distribuované firmou Amersham.
El Infekce lidských buněk adenoviry psího původu
Tento příklad demonstruje schopnost adenovirů zvířecího (psího) původu infikovat lidské buňky.
-6CZ 284903 B6
E1.1 Použité buněčné řady
V tomto příkladu byly použity následující buněčné řady:
- řada z ledviny lidského embrya 293 (Graham a kol., J. Gen. Virol. 36 (1977)59); tato buněčná řada obsahuje zejména integrované ve svém genomu levou část genomu lidského adenoviru Ad5(12%),
- lidská buněčná řada KB: tato buněčná řada pochází z lidského epidemického karcinomu a je dostupná ve sbírce kultur ATCC (ref. CCL17), stejně jako podmínky umožňující její kultivaci,
- lidská buněčná řada Hela: tato buněčná řada pochází z lidského epiteliálního karcinomu a je dostupná ve sbírce kultur ATCC (ref. CCL2), stejně jako podmínky umožňující její kultivaci,
- psí buněčná řada MDCK: podmínky kultivace této buněčné řady MDCK byly zejména popsané Macatney-em a kol. v Science 44 (1988)9.
El.2 Infekce
Výše uvedené buněčné řady byly infikovány virem CAV2 (kmen Manhattan). Za tím účelem byly tyto buňky (asi 107/miska) inkubovány po dobu jedné hodiny při teplotě 37 °C v přítomnosti 10 pfu viru/buňka. Potom bylo přidáno 5 ml kultivačního prostředí a v kultivaci se pokračuje při teplotě 37 °C po dobu asi 48 hodin. Po této době byla analyzována DNA přítomná v infikovaných buňkách v episomní formě. Získané výsledky ukazují, že všechny buněčné řady mají ve svých jádrech DNA adenoviru CAV2, což dokazuje jejich infikovatelnost psími adenoviry.
E2 Absence propagace adenovirů psího původu v lidských buňkách
Tento příklad demonstruje skutečnost, že i když jsou psí adenoviry schopné infikovat lidské buňky, nedochází k jejich propagaci v těchto lidských buňkách.
Po infekci buněk podle příkladu 1 bylo sledováno množství DNA adenoviru CAV2 v závislosti na čase podle následujícího protokolu: Episomní DNA přítomná v buňkách se izoluje technikou popsanou HIrt-em a kol. (J. Virol. 45 (1983)91), přičemž množství DNA bylo stanoveno porovnáním se škálou etalonů. Získané výsledky ukazují, že se množství virové DNA v buňkách KB a 293 nezvětšuje, což dokazuje úplnou absenci replikace adenoviru CAV2 v těchto buňkách.
V buňkách MDCK a Hela dochází k mírnému zvětšení množství virové DNA adenoviru CAV2. Nicméně stanovení tvorby virových částic ukazuje, že k žádné propagaci adenoviru CAV2 nedochází v buněčných řadách 293, KB a Hela, přičemž k této propagaci dochází výlučně v psí buněčné řadě MDCK. Uvedená propagace byla stanovena sběrem infikovaných buněk, uvolněním případných virů zmražením a rozmražením a infikováním buněk MDCK takto získaným supematantem za výše popsaných podmínek. Po 48 hodinách kultivace dokazuje nepřítomnost virové DNA v takto infikovaných buňkách, že v lidských buňkách nedošlo k žádné virové propagaci.
Uvedené výsledky jednoznačně dokazují, že psí adenoviry jsou neschopné propagace v lidských buňkách.
E3 Prokázání absence trans-komplementace psích adenovirů lidskými adenoviry
Tento příklad prokazuje, že absence propagace psích adenovirů v lidských buňkách není transkomplementována přítomností lidských adenovirů.
-7CZ 284903 B6
Buňky lidských buněčných řad 293, KB a Hela a psí buněčné řady MDCK byly ko-infikovány adenovirem CAV2 a lidským adenovirem Ad5. Přítomnost virové DNA (psí a lidské) v buňkách byla stanovena stejně jako v příkladu El a v závislosti na čase bylo sledováno množství DNA a uvedená propagace. Získané výsledky ukazují, že v buňkách KB a 293 se množství DNA adenoviru CAV2 v průběhu času nezvětšuje, což dokazuje, že přítomnost lidského adenoviru Ad5 neindikuje trans-komplementací replikaci adenoviru CAV2 v těchto buňkách. Nepřítomnost virové DNA v buňkách MDCK infikovaných případnými viry pocházejícími z buněk KB, 293 a Hela dokazuje stejným způsobem, že v lidských buněčných řadách nedochází k žádné propagaci adenoviru CAV2 a to dokonce ani v přítomnosti lidského adenoviru.
E4 Konstrukce banky genomové DNA adenoviru CAV2
Z restrikčních fragmentů genomu adenoviru CAV2 byla vytvořena banka plazmidů. Tato banka byla získána digescí adenoviru CAV2 enzymy Smál a Pstl a klonováním fragmentů Smál: A, B, C, D, E, F, I a J a Pstl: A, B, C, D, E, F, G, H (obr. 1) do vektoru pGem3Zf+ (Promega). Plazmid nesoucí fragment Smál C se potom podrobí ko-transfekci v buňkách MDCK s plazmidem pUC4KIXX (Pharmacia) nesoucím gen resistence proti neomycinu za vzniku řady MDCK, která konstitučně exprimuje geny El A a E1B adenoviru CAV2. Tato řada umožňuje konstrukci rekombinantních virů s delecemi v těchto oblastech (viz E5.2).
E5 Konstrukce psího rekombinantního adenoviru nesoucího gen interleukinu-2 pod kontrolou promotoru MLP adenoviru Ad2
Byly vypracovány dvě strategie konstrukce psích rekombinantních adenovirů nesoucích gen interleukinu-2 pod kontrolou promotoru MLP adenoviru Ad2 lidského původu.
E5.1 První z těchto strategií spočívá v inzerci požadované sekvence heterologní DNA (promotor MLP - gen interleukinu-2) mezi oblast E4 a pravou oblast ITR celého genomu adenoviru CAV2 v úrovni restrikčního místa Smál. Konstrukce takového rekombinantu se provádí buď ligací, nebo rekombinací in vivo mezi plazmidem nesoucím požadovanou heterologní sekvenci DNA a genomem adenoviru CAV2. Plazmidy použité pro získání rekombinantních adenovirů nesoucích gen interleukinu-2 pod kontrolou promotoru MLP se konstruují následujícím způsobem (obr. 2):
- první plazmid mající označení pl se získá klonováním fragmentu Sáli B adenoviru CAV2 (obr. 1) obsahujícího zejména pravou oblast ITR, místo Smál a gen E4 v plazmidů pGem3Zf+ (promega), přičemž místo Smál se výlučně nachází na plazmidů pl,
- v úrovni místa Smál plazmidů pl se zavede heterologní sekvence DNA (promotor MLP-gen interleukinu-2) za vzniku plazmidů p2 a
- fragment Pst-I-Sall obsažený ve fragmentu Pstl D genomové banky a nesoucí část genu E3 se potom klonuje v odpovídajícím místě v plazmidů p2 za vzniku plazmidů p3 (obr. 2).
Takto získané plazmidy se použijí pro přípravu rekombinantních adenovirů podle následujících dvou protokolů (viz obr. 3):
a) ligace in vitro plazmidů p2 digerovaného působením Sáli ve fragmentu Sáli A adenoviru CAV2 a transfekce ligačního produktu v buňkách MDCK (obr. 3a),
b) rekombinace mezi plazmidem p3 a fragmentem Sáli A adenoviru CAV2 po kotransfekci v buňkách MDCK (obr. 3b). Získané rekombinantní adenoviry se potom izolují aamplifíkují o sobě známými technikami.
-8CZ 284903 B6
Tyto manipulace umožňují konstrukci psích rekombinantních adenovirů nesoucích gen interleukinu-2 a použitelných pro přenos tohoto terapeutického genu u člověka (obr. 3).
E5.2 Druhá vypracovaná strategie spočívá v použití buněčné řady MDCK, která konstitučně exprimuje geny El A a E1B adenovirů CAV2 (viz příklad E4). Tato buněčná řada umožňuje trans-komplementovat psí adenoviry s delecí v těchto oblastech a takto konstruovat rekombinantní víry, ve kterých je heterologní sekvence DNA substituována v oblasti El. Za tím účelem se konstruuje plazmid obsahující levý konec (sekvence ITR a enkapsidační sekvence) genomu adenovirů CAV2 a heterologní sekvence DNA. Tento plazmid se podrobí ko-transfekci ve výše uvedených buňkách MDCK v přítomnosti genomu adenovirů CAV2 s delecí jeho vlastního levého konce. Produkované rekombinantní psí adenoviry se izolují, případně amplifikují a konzervují s ohledem na následné použití v humánním lékařství.
Claims (11)
1. Rekombinantní adenovir nelidského zvířecího původu schopný infikovat lidské buňky, neschopný replikace v lidských buňkách a obsahující alespoň jeden inzerovaný terapeutický gen kódující terapeuticky proteinový produkt, přičemž terapeutickým genem je antimediátorový gen nebo antimediátorová sekvence.
2. Rekombinantní adenovir podle nároku 1, obsahující rovněž promotorové sekvence umožňující expresi inzerovaného terapeutického genu nebo inzerovaných terapeutických genů.
3. Rekombinantní adenovir podle nároku 1 nebo 2, obsahující rovněž signální sekvence umožňující indukovat sekreci produktu exprese terapeutického genu.
4. Rekombinantní adenovir podle nároků 1 až 3, zvolený z množiny zahrnující psí, hovězí, myší, ovčí, prasečí, ptačí a opičí adenoviry.
5. Rekombinantní adenovir podle nároku 4, tvořený psím adenovirem, výhodně zvoleným z množiny zahrnující kmeny adenovirů CAV2.
6. Rekombinantní adenovir podle některého z nároků 1 až 5, zbavený alespoň sekvencí nezbytných pro replikaci, zejména oblastí E1A a E1B.
7. Rekombinantní adenovir podle nároku 6 obsahující oblasti jiného zvířecího nebo lidského adenovirů, znemožňující produkci nežádoucích virových proteinů u člověka nebo umožňující inzerci heterologních sekvencí DNA, jejichž přenos nebo/a exprese je u člověka žádoucí, nebo/a inzerci stanovených oblastí genomu jiného zvířecího nebo lidského adenovirů.
8. Farmaceutický přípravek, vyznačený tím, že obsahuje alespoň jeden rekombinantní adenovir podle některého z nároků 1 až 7.
9. Použití rekombinantního adenovirů podle některého z nároků 1 až 7 pro přípravu farmaceutického přípravku určeného k terapeutickému nebo/a chirurgickému ošetření lidského těla.
10. Použití rekombinantního adenovirů podle některého z nároků 1 až 7 pro přípravu farmaceutického přípravku určeného pro přenos terapeutických genů u člověka.
-9CZ 284903 B6
11. Použití rekombinantního adenoviru podle některého z nároků 1 až 7 pro přípravu lidské vakcíny.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9305954A FR2705361B1 (fr) | 1993-05-18 | 1993-05-18 | Vecteurs viraux et utilisation en thérapie génique. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ302895A3 CZ302895A3 (en) | 1996-02-14 |
| CZ284903B6 true CZ284903B6 (cs) | 1999-04-14 |
Family
ID=9447235
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ953028A CZ284903B6 (cs) | 1993-05-18 | 1994-05-06 | Použití rekombinantního adenoviru zvířecího původu pro přípravu farmaceutického přípravku |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6294377B1 (cs) |
| EP (1) | EP0698108B2 (cs) |
| JP (2) | JP3995259B2 (cs) |
| KR (1) | KR100379569B1 (cs) |
| CN (1) | CN1067722C (cs) |
| AT (1) | ATE209686T1 (cs) |
| AU (1) | AU696495B2 (cs) |
| BR (1) | BR9406720A (cs) |
| CA (1) | CA2163256C (cs) |
| CZ (1) | CZ284903B6 (cs) |
| DE (1) | DE69429260T3 (cs) |
| DK (1) | DK0698108T4 (cs) |
| ES (1) | ES2167365T5 (cs) |
| FI (1) | FI118538B (cs) |
| FR (1) | FR2705361B1 (cs) |
| HU (1) | HU221340B1 (cs) |
| IL (1) | IL109644A (cs) |
| NO (1) | NO320818B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ266475A (cs) |
| PL (1) | PL182814B1 (cs) |
| PT (1) | PT698108E (cs) |
| RU (1) | RU2233333C2 (cs) |
| SK (1) | SK282354B6 (cs) |
| UA (1) | UA66417C2 (cs) |
| WO (1) | WO1994026914A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA943358B (cs) |
Families Citing this family (122)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992015680A1 (en) | 1991-03-06 | 1992-09-17 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the selective inhibition of gene expression |
| US5747469A (en) | 1991-03-06 | 1998-05-05 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions comprising DNA damaging agents and p53 |
| US6410010B1 (en) | 1992-10-13 | 2002-06-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Recombinant P53 adenovirus compositions |
| IL113052A0 (en) | 1994-03-23 | 1995-06-29 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Recombinant viruses, their preparation and their use in gene therapy |
| CA2192442C (en) | 1994-06-10 | 2007-09-25 | Imre Kovesdi | Complementary adenoviral vector systems and cell lines |
| FR2722507B1 (fr) * | 1994-07-12 | 1996-08-14 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Adenovirus comportant un gene codant pour une no synthase |
| FR2724320B1 (fr) * | 1994-09-13 | 1996-12-20 | Transgene Sa | Nouvel implant pour le traitement des maladies acquises |
| FR2725213B1 (fr) * | 1994-10-04 | 1996-11-08 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Vecteurs viraux et utilisation en therapie genique |
| FR2726285B1 (fr) * | 1994-10-28 | 1996-11-29 | Centre Nat Rech Scient | Adenovirus depourvus de particules contaminantes viables, preparation et utilisation |
| FR2727689A1 (fr) | 1994-12-01 | 1996-06-07 | Transgene Sa | Nouveau procede de preparation d'un vecteur viral |
| EP0760682A4 (en) | 1995-02-28 | 1998-09-09 | Univ California | ANGIOGENIC THERAPY BY GENE TRANSFER |
| US6752987B1 (en) | 1995-02-28 | 2004-06-22 | The Regents Of The University Of California | Adenovirus encoding human adenylylcyclase (AC) VI |
| FR2731710B1 (fr) * | 1995-03-14 | 1997-04-30 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Virus recombinants exprimant la lecithine cholesterol acyltransferase et utilisations en therapie genique |
| FR2732357B1 (fr) * | 1995-03-31 | 1997-04-30 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Vecteurs viraux et utilisation pour le traitement des desordres hyperproliferatifs, notamment de la restenose |
| US6281010B1 (en) | 1995-06-05 | 2001-08-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adenovirus gene therapy vehicle and cell line |
| US5756283A (en) * | 1995-06-05 | 1998-05-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for improved production of recombinant adeno-associated viruses for gene therapy |
| AU6261696A (en) | 1995-06-05 | 1996-12-24 | Trustees Of The University Of Pennsylvania, The | A replication-defective adenovirus human type 5 recombinant as a vaccine carrier |
| US5698202A (en) * | 1995-06-05 | 1997-12-16 | The Wistar Institute Of Anatomy & Biology | Replication-defective adenovirus human type 5 recombinant as a rabies vaccine carrier |
| US6265212B1 (en) | 1995-06-15 | 2001-07-24 | Introgene B.V. | Packaging systems for human recombinant adenovirus to be used in gene therapy |
| IL122614A0 (en) | 1995-06-15 | 1998-08-16 | Introgene Bv | Packaging systems for human recombinant adenovirus to be used in gene therapy |
| US6783980B2 (en) | 1995-06-15 | 2004-08-31 | Crucell Holland B.V. | Packaging systems for human recombinant adenovirus to be used in gene therapy |
| AUPN477695A0 (en) * | 1995-08-14 | 1995-09-07 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Gene therapy |
| FR2740344B1 (fr) * | 1995-10-31 | 1997-11-21 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Application de la proteine gax au traitement de cancers |
| EP0979101B1 (en) * | 1996-07-03 | 2010-10-27 | Merial, Inc. | Recombinant canine adenovirus 2 (cav2) containing exogenous dna |
| US6083716A (en) * | 1996-09-06 | 2000-07-04 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Chimpanzee adenovirus vectors |
| BR9808697A (pt) | 1997-04-28 | 2000-07-11 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Processo para inibir o crescimento de um tumor, vetor de adenovìrus defeituoso, vetor de vìrus, uso do mesmo, e, composição farmacêutica |
| EP2386629A1 (en) | 1997-10-14 | 2011-11-16 | Darwin Molecular Corporation | Thymidine kinase mutants and fusion proteins having thymidine kinase and guanylate kinase activities |
| US6875606B1 (en) | 1997-10-23 | 2005-04-05 | The United States Of America As Represented By The Department Of Veterans Affairs | Human α-7 nicotinic receptor promoter |
| US6653088B1 (en) | 1997-10-24 | 2003-11-25 | Aventis Pharma S.A. | Interaction test for the investigation of inhibitory molecules of the interaction between a presenilin and the β-amyloid peptide |
| ATE302267T1 (de) | 1998-01-08 | 2005-09-15 | Aventis Pharma Inc | Transgenes kaninchen, dass ein funktionelles menschliches lipoprotein(a) exprimiert |
| US6670188B1 (en) | 1998-04-24 | 2003-12-30 | Crucell Holland B.V. | Packaging systems for human recombinant adenovirus to be used in gene therapy |
| US6225456B1 (en) | 1998-05-07 | 2001-05-01 | University Technololy Corporation | Ras suppressor SUR-5 |
| US6506889B1 (en) | 1998-05-19 | 2003-01-14 | University Technology Corporation | Ras suppressor SUR-8 and related compositions and methods |
| AU5559499A (en) | 1998-08-11 | 2000-03-06 | Darwin Discovery Limited | Identification of the gene causing the mouse scurfy phenotype and its human ortholog |
| ATE338120T2 (de) | 1998-11-27 | 2006-09-15 | Ucb Sa | Zusammensetzungen und verfahren zur erhöhung der knochenmineralisierung |
| US20040009535A1 (en) | 1998-11-27 | 2004-01-15 | Celltech R&D, Inc. | Compositions and methods for increasing bone mineralization |
| US7063850B1 (en) | 1998-12-22 | 2006-06-20 | University Of Tennessee Research Foundation | Protective antigen of group A Streptococci |
| US6441156B1 (en) | 1998-12-30 | 2002-08-27 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Calcium channel compositions and methods of use thereof |
| FR2794771B1 (fr) | 1999-06-11 | 2001-08-10 | Aventis Pharma Sa | Adenovirus recombinants codant pour le transporteur specifique de l'iode (nis) |
| FR2799472B1 (fr) | 1999-10-07 | 2004-07-16 | Aventis Pharma Sa | Preparation d'adenovirus recombinants et de banques adenovirales |
| WO2001048164A2 (en) | 1999-12-27 | 2001-07-05 | The Regents Of The University Of California | Modified adenylylcyclase type vi useful in gene therapy for congestive heart failure |
| GEP20063830B (en) | 2000-01-12 | 2006-05-25 | Univ Yale | Nogo Receptor-Mediated Blockade of Axonal Growth |
| DE01918975T1 (de) | 2000-03-24 | 2006-04-13 | Biosphere Medical, Inc., Rockland | Mikrokügelchen zur aktiven Embolisierung |
| GB0018307D0 (en) | 2000-07-26 | 2000-09-13 | Aventis Pharm Prod Inc | Polypeptides |
| US7060442B2 (en) | 2000-10-30 | 2006-06-13 | Regents Of The University Of Michigan | Modulators on Nod2 signaling |
| EP1355918B9 (en) | 2000-12-28 | 2012-01-25 | Wyeth LLC | Recombinant protective protein from $i(streptococcus pneumoniae) |
| WO2002090600A2 (en) | 2001-05-08 | 2002-11-14 | Darwin Molecular Corporation | A method for regulating immune function in primates using the foxp3 protein |
| AUPR518501A0 (en) | 2001-05-22 | 2001-06-14 | Unisearch Limited | Yin yang-1 |
| WO2003004088A2 (en) | 2001-07-05 | 2003-01-16 | Aventis Pharma S.A. | Method of administration of a gene of interest to the heart and vasculature |
| US7582425B2 (en) | 2001-09-21 | 2009-09-01 | The Regents Of The University Of Michigan | Atlastin |
| US7108975B2 (en) | 2001-09-21 | 2006-09-19 | Regents Of The University Of Michigan | Atlastin |
| US20040023910A1 (en) * | 2001-09-28 | 2004-02-05 | Zhiming Zhang | Use of cyr61 in the treatment and diagnosis of human uterine leiomyomas |
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| WO2003060143A2 (en) | 2001-10-26 | 2003-07-24 | Id Biomedical Corporation Of Washington | Efficient protein expression system |
| JP4550421B2 (ja) | 2001-12-12 | 2010-09-22 | メイン・ファ−マ・インタ−ナショナル・プロプライエタリ−・リミテッド | ウイルスの保存のための組成物 |
| US20030158112A1 (en) | 2002-02-15 | 2003-08-21 | Johns Hopkins University School Of Medicine | Selective induction of apoptosis to treat ocular disease |
| JP4563171B2 (ja) | 2002-05-24 | 2010-10-13 | シェーリング コーポレイション | 中和ヒト抗ｉｇｆｒ抗体 |
| US7785608B2 (en) | 2002-08-30 | 2010-08-31 | Wyeth Holdings Corporation | Immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
| FR2845395B1 (fr) * | 2002-10-08 | 2008-05-30 | Agronomique Inst Nat Rech | Vecteurs adenoviraux recombinants et leurs applications |
| US9532994B2 (en) | 2003-08-29 | 2017-01-03 | The Regents Of The University Of California | Agents and methods for enhancing bone formation by oxysterols in combination with bone morphogenic proteins |
| US7432057B2 (en) | 2004-01-30 | 2008-10-07 | Michigan State University | Genetic test for PSE-susceptible turkeys |
| KR101169109B1 (ko) | 2004-05-26 | 2012-07-26 | 싸이오서스 테라퓨틱스 엘티디. | 암 치료에 사용하기 위한 키메릭 아데노바이러스 |
| US7604798B2 (en) | 2004-07-15 | 2009-10-20 | Northwestern University | Methods and compositions for importing nucleic acids into cell nuclei |
| JP4772045B2 (ja) | 2004-07-16 | 2011-09-14 | アメリカ合衆国 | Ｃｍｖ／ｒ核酸コンストラクトを含むａｉｄｓに対するワクチン |
| SG162726A1 (en) | 2005-05-27 | 2010-07-29 | San Raffaele Centro Fond | Gene vector comprising mi-rna |
| EP1993558B1 (en) | 2006-02-27 | 2014-07-30 | The Regents of The University of California | Oxysterol compounds and the hedgehog pathway |
| BRPI0714981A2 (pt) | 2006-07-28 | 2013-08-13 | Sanofi Aventis | composiÇço, mÉtodo para fazer a mesma a qual compreende um inibidor que inibe a atividade de uma proteÍna do complexo iii, um veÍculo e um membro da superfamÍlia da fator de necrose de tumor, mÉtodo para conduzir um ensaio para determinar se um composto É um inibidor de atividade de supressço de tnf de uma proteÍna do complexo iii e uso de um composto |
| CN101588816B (zh) | 2006-10-19 | 2013-06-19 | Csl有限公司 | 白介素-13受体α1的高亲和性抗体拮抗物 |
| EP2068922B1 (en) | 2006-10-19 | 2012-06-27 | CSL Limited | Anti-il-13r alpha 1 antibodies and their uses thereof |
| AR064642A1 (es) | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
| AU2008331808B2 (en) | 2007-03-16 | 2014-08-21 | The Regents Of The University Of California | Oxysterols for activation of hedgehog signaling, osteoinduction, antiadipogenesis, and Wnt signaling |
| RU2478396C2 (ru) | 2008-11-05 | 2013-04-10 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | МНОГОКОМПОНЕНТНАЯ ИММУНОГЕННАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ, ВЫЗВАННОГО β-ГЕМОЛИТИЧЕСКИМИ СТРЕПТОКОККАМИ (БГС) |
| WO2010065613A2 (en) | 2008-12-03 | 2010-06-10 | The Johns Hopkins University | Annexina2 as immunological target |
| EP2370579B1 (en) * | 2008-12-04 | 2017-03-29 | CuRNA, Inc. | Treatment of erythropoietin (epo) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to epo |
| WO2010096561A1 (en) | 2009-02-18 | 2010-08-26 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Synthetic hiv/siv gag proteins and uses thereof |
| AU2011227050B2 (en) | 2010-03-19 | 2016-12-08 | University Of South Alabama | Methods and compositions for the treatment of cancer |
| DK2576783T3 (en) * | 2010-05-26 | 2018-03-12 | Curna Inc | TREATMENT OF ATONAL HOMOLOGY 1- (ATOH1) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENCE TRANSCRIPTS AT ATOH1 |
| PL2585596T3 (pl) * | 2010-06-23 | 2021-06-28 | Curna, Inc. | Leczenie chorób związanych z podjednostką alfa kanału sodowego bramkowanego napięciem (SCNA) poprzez hamowanie naturalnego transkryptu antysensownego SCNA |
| EP3246044B2 (en) | 2010-08-23 | 2024-04-10 | Wyeth LLC | Stable formulations of neisseria meningitidis rlp2086 antigens |
| ES2864635T3 (es) | 2010-09-10 | 2021-10-14 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis |
| US9458456B2 (en) | 2011-04-01 | 2016-10-04 | University Of South Alabama | Methods and compositions for the diagnosis, classification, and treatment of cancer |
| WO2013103401A1 (en) | 2012-01-06 | 2013-07-11 | University Of South Alabama | Methods and compositions for the treatment of cancer |
| MY167723A (en) | 2012-03-09 | 2018-09-21 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| CA2872751A1 (en) | 2012-05-07 | 2013-11-14 | The Regents Of The University Of California | Oxysterol analogue oxy133 induces osteogenesis and hedgehog signaling and inhibits adipogenesis |
| WO2014107739A1 (en) | 2013-01-07 | 2014-07-10 | Eleven Biotherapeutics, Inc. | Antibodies against pcsk9 |
| JP2016505267A (ja) * | 2013-01-15 | 2016-02-25 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | アデノウイルスおよびその使用 |
| ES2685894T3 (es) | 2013-03-08 | 2018-10-15 | Pfizer Inc. | Polipéptidos de fusión inmunogénicos |
| US10981961B2 (en) | 2013-03-11 | 2021-04-20 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Delivery of card protein as therapy for occular inflammation |
| CN105263500A (zh) | 2013-05-02 | 2016-01-20 | 加利福尼亚大学董事会 | 骨选择性成骨性氧固醇-骨靶向剂 |
| WO2015033251A2 (en) | 2013-09-08 | 2015-03-12 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| SG11201602887QA (en) | 2013-10-25 | 2016-05-30 | Psioxus Therapeutics Ltd | Oncolytic adenoviruses armed with heterologous genes |
| US11053291B2 (en) | 2014-02-19 | 2021-07-06 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Delivery of Nrf2 as therapy for protection against reactive oxygen species |
| ES2765463T3 (es) | 2014-06-17 | 2020-06-09 | Nippon Shinyaku Co Ltd | Acido nucleico antisentido para usar en el tratamiento de la distrofia muscular de Duchenne |
| CA2975447C (en) | 2015-01-30 | 2021-02-23 | The Regents Of The University Of California | Spinal subpial gene delivery system |
| KR20190049940A (ko) | 2015-02-19 | 2019-05-09 | 화이자 인코포레이티드 | 나이세리아 메닌지티디스 조성물 및 그의 방법 |
| AU2016256582B2 (en) | 2015-04-30 | 2020-10-29 | Akamis Bio Limited | Oncolytic adenovirus encoding a B7 protein |
| CN108289909A (zh) | 2015-10-19 | 2018-07-17 | 巴尔的摩马里兰大学 | 用于产生工程改造的人原代血液树突细胞系的方法 |
| EA201891021A1 (ru) | 2015-12-17 | 2018-11-30 | Псайоксус Терапьютикс Лимитед | Аденовирус группы b, кодирующий антитело к комплексу tcr или фрагмент указанного антитела |
| CA3018960C (en) | 2016-03-28 | 2023-09-26 | The Regents Of The University Of California | Method and composition for treating neuronal hyper-excitability |
| US11560412B2 (en) | 2016-04-01 | 2023-01-24 | University Of Maryland, Baltimore | Compositions comprising GRIM-19 therapeutics and methods of use |
| ES2885833T3 (es) | 2016-04-20 | 2021-12-15 | Centro De Investig Energeticas Medioambientales Y Tecnologicas O A M P | Composición y métodos para potenciar la expresión génica de PKLR |
| EP4273252A3 (en) | 2016-08-29 | 2024-04-17 | Akamis Bio Limited | Adenovirus armed with bispecific t cell engager (bite) |
| GB201713765D0 (en) | 2017-08-28 | 2017-10-11 | Psioxus Therapeutics Ltd | Modified adenovirus |
| UY37406A (es) | 2016-09-20 | 2018-03-23 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Nuevo sitio de inserción orf70 de ehv |
| EA201990719A1 (ru) | 2016-09-20 | 2019-10-31 | Новые промоторы | |
| KR102566066B1 (ko) | 2016-09-20 | 2023-08-16 | 베링거잉겔하임베트메디카게엠베하 | 신규한 돼지 인플루엔자 백신 |
| TW201823467A (zh) | 2016-09-20 | 2018-07-01 | 德商百靈佳殷格翰維美迪加股份有限公司 | 犬腺病毒載體 |
| AU2018215585B2 (en) | 2017-01-31 | 2022-03-17 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| WO2019079242A1 (en) | 2017-10-16 | 2019-04-25 | Voyager Therapeutics, Inc. | TREATMENT OF AMYOTROPHIC LATERAL SCLEROSIS (ALS) |
| JP7502991B2 (ja) | 2017-10-16 | 2024-06-19 | ボイジャー セラピューティクス インコーポレイテッド | 筋萎縮性側索硬化症（ａｌｓ）の治療 |
| JP7403461B2 (ja) | 2017-10-16 | 2023-12-22 | セントロ デ インベスティガシオンス エネルジェチカス メディオアンビエンタゥス イェ テクノロジカス オー．エイ． エム．ピー． | ピルビン酸キナーゼ欠損症を治療するためのｐｋｌｒ送達用レンチウイルスベクター |
| EP3973973A1 (en) | 2017-10-31 | 2022-03-30 | KaliVir Immunotherapeutics, Inc. | Platform oncolytic vector for systemic delivery |
| WO2020010035A1 (en) | 2018-07-02 | 2020-01-09 | Voyager Therapeutics, Inc. | Cannula system |
| EP3818161A1 (en) | 2018-07-02 | 2021-05-12 | Voyager Therapeutics, Inc. | Treatment of amyotrophic lateral sclerosis and disorders associated with the spinal cord |
| WO2021247995A2 (en) | 2020-06-04 | 2021-12-09 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of treating neuropathic pain |
| MX2023001615A (es) | 2020-08-07 | 2023-03-08 | Spacecraft Seven Llc | Genoterapia con placofilina-2 (pkp2) mediante el uso de vector de aav. |
| BR112023022681A2 (pt) | 2021-04-30 | 2024-01-23 | Kalivir Immunotherapeutics Inc | Vírus oncolíticos para expressão modificada de mhc |
| WO2023069987A1 (en) | 2021-10-20 | 2023-04-27 | University Of Rochester | Rejuvenation treatment of age-related white matter loss cross reference to related application |
| WO2023081633A1 (en) | 2021-11-02 | 2023-05-11 | University Of Rochester | Tcf7l2 mediated remyelination in the brain |
| WO2024091824A1 (en) | 2022-10-26 | 2024-05-02 | Ada Forsyth Institute, Inc. | Differentiation and reprogramming of chondrocyte |
| WO2024163747A2 (en) | 2023-02-02 | 2024-08-08 | University Of Rochester | Competitive replacement of glial cells |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA858044B (en) * | 1984-11-01 | 1987-05-27 | American Home Prod | Oral vaccines |
| IE903130A1 (en) * | 1989-09-15 | 1991-03-27 | Regeneron Pharma | Ciliary neurotrophic factor |
| GB9001766D0 (en) * | 1990-01-25 | 1990-03-28 | Univ Court Of The University O | Vaccines |
| FR2681786A1 (fr) * | 1991-09-27 | 1993-04-02 | Centre Nat Rech Scient | Vecteurs recombinants d'origine virale, leur procede d'obtention et leur utilisation pour l'expression de polypeptides dans des cellules musculaires. |
| FR2688514A1 (fr) * | 1992-03-16 | 1993-09-17 | Centre Nat Rech Scient | Adenovirus recombinants defectifs exprimant des cytokines et medicaments antitumoraux les contenant. |
| AU670933B2 (en) * | 1992-03-27 | 1996-08-08 | Collimore Enterprises Pty Ltd | Formwork device |
-
1993
- 1993-05-18 FR FR9305954A patent/FR2705361B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-05-06 SK SK1447-95A patent/SK282354B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-05-06 NZ NZ266475A patent/NZ266475A/xx not_active IP Right Cessation
- 1994-05-06 ES ES94916259T patent/ES2167365T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 CA CA002163256A patent/CA2163256C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 AU AU67878/94A patent/AU696495B2/en not_active Expired
- 1994-05-06 EP EP94916259A patent/EP0698108B2/fr not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 CZ CZ953028A patent/CZ284903B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-05-06 CN CN94192150A patent/CN1067722C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 PT PT94916259T patent/PT698108E/pt unknown
- 1994-05-06 UA UA95114778A patent/UA66417C2/xx unknown
- 1994-05-06 JP JP52504994A patent/JP3995259B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 DE DE69429260T patent/DE69429260T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 AT AT94916259T patent/ATE209686T1/de active
- 1994-05-06 US US08/553,317 patent/US6294377B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-06 WO PCT/FR1994/000531 patent/WO1994026914A1/fr active IP Right Grant
- 1994-05-06 DK DK94916259T patent/DK0698108T4/da active
- 1994-05-06 RU RU95122419/13A patent/RU2233333C2/ru active
- 1994-05-06 HU HU9503297A patent/HU221340B1/hu unknown
- 1994-05-06 PL PL94311660A patent/PL182814B1/pl unknown
- 1994-05-06 BR BR9406720A patent/BR9406720A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-05-06 KR KR1019950705128A patent/KR100379569B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-05-12 IL IL10964494A patent/IL109644A/xx not_active IP Right Cessation
- 1994-05-16 ZA ZA943358A patent/ZA943358B/xx unknown
-
1995
- 1995-11-07 NO NO19954466A patent/NO320818B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-11-17 FI FI955552A patent/FI118538B/fi not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-02-05 JP JP2004029636A patent/JP2004180689A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ284903B6 (cs) | Použití rekombinantního adenoviru zvířecího původu pro přípravu farmaceutického přípravku | |
| ES2310924T3 (es) | Vectores adenovirales defectivos y utilizacion en terapia genica. | |
| JP3816952B2 (ja) | 治療遺伝子と免疫保護遺伝子とを含む欠陥アデノウイルス | |
| ES2252738T3 (es) | Procedimiento de preparacion de virus adeno-asociados (aav) recombinantes y sus utilizaciones. | |
| JP4733795B2 (ja) | ヒツジアデノウイルスベクターを用いた遺伝子治療 | |
| JPH11507835A (ja) | 組換えアデノウイルス、ａａｖを作製するためのその使用、相補的細胞系、及び、該アデノウイルスを含む医薬組成物 | |
| AU3129400A (en) | Adenovirus vectors and method for reducing homologous recombination phenomena | |
| US6200798B1 (en) | Defective recombinant adenoviruses with inactivated IVa2 gene | |
| MXPA97001766A (en) | Defective recombinant adenovirus with a vat iva2 inactiv | |
| US20220281921A1 (en) | Oncolytic non-human adenoviruses and uses thereof | |
| US7264818B2 (en) | BAV packaging regions and E1 transcriptional control regions | |
| FR2729674A1 (fr) | Cellules pour la production d'adenovirus recombinants |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20140506 |