CZ200442A3

CZ200442A3 - Nové heterocyklické sloučeniny jakožto selektivní inhibitory bakteriální DHFR a jejich použití

Info

Publication number: CZ200442A3
Application number: CZ200442A
Authority: CZ
Inventors: Moeáscottát; Clementájacobáj; Faermanácarlos; Perolaáemanuela; Naviaámanueláa; Alaápauláj; Mageeáandrewás; Willápaulám; Marcheseásalvatoreáa; Gazzanigaájohnáv
Original assignee: Plivaźád@D
Priority date: 2001-06-28
Filing date: 2002-06-28
Publication date: 2004-10-13
Also published as: WO2003001887A3; EP1411949A4; EP1411949A2; WO2003002064A3; CZ200443A3; SK302004A3; EA200400094A1; US20030176436A1; YU102303A; US20030181470A1; US20080090847A1; US7345048B2; CN1547472A; HUP0700040A2; EE200400042A; CA2451840A1; EP1432713A4; WO2003001887A2; HUP0700061A2; CA2451800A1

Description

Oblast techniky

Předmětný vynález se týká nových heterocyklických sloučenin a jejich použití například při profylaxi a/nebo medicinální léčbě bakteriálních infekcí a jejich použití například jakožto antiseptických činidel, sterilizačních činidel nebo dezinfekčních činidel.

Dosavadní stav techniky

Za účelem udržení kroku s proliferací rezistentních mikroorganismů dochází trvale ke zvyšování výzkumného úsilí zaměřeného na boj proti infekcím. Bakterie nepřetržitě mutují a vyvíjejí se způsobem, který vede ke zvýšené rezistenci vůči existujícím léčivům. Tento jev je zvlášť alarmující v nemocničních zařízeních, ve kterých je velký podíl zde vyskytujících se patogenů rezistentní vůči jednomu nebo více standardním ošetřovacím režimům. Kromě toho, zvyšující se výskyt oportunních infekcí u pacientů se sníženou imunitou rovněž přispívá ke zvýšené naléhavosti potřeby nových léčiv proti infekčním chorobám a symptomům těchto nemocí. Výsledkem tohoto stavu je skutečnost, že existuje velmi silná poptávka po terapeutických činidlech, která jsou obecně účinnější, jsou více účinnější proti rezistentním kmenům a způsobují méně vedlejších účinků než existující léčiva. Pro uspokojení této poptávky je antimikrobiální výzkum zaměřen mimo jiné na studie nových činidel, která mají nový mechanismus účinku, na studie nových činidel, která překonávají známé profily rezistence a • · na studie nových nebo zlepšených činidel, která účinkují známými mechanismy.

Podstata vynálezu

Předmětný vynález se týká heterocyklických sloučenin, kompozic zahrnujících tyto sloučeniny a způsobů použití uvedených sloučenin a uvedených kompozic. Sloučeniny podle tohoto vynálezu a kompozice zahrnující tyto sloučeniny jsou vhodné pro léčení nemocí nebo symptomů nemocí. Předmětem tohoto vynálezu jsou rovněž způsoby přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu a způsoby identifikace sloučenin s požadovanou biologickou aktivitou.

Předmětný vynález je založen na zjištění, že některé heterocyklické sloučeniny jsou velmi biologicky aktivní. Předmětný vynález se tak týká nových heterocyklických sloučenin a jejich použití při profylaxi a/nebo medicinální léčbě bakteriálních infekcí nebo jakožto antiseptických, sterilizačních nebo dezinfekčních činidel. Předmětný vynález je dále založen na zjištění, že některé heterocyklické sloučeniny, jejíchž skupina obecně zahrnuje substituované pteridinylové heterocykly, chinazolinylové heterocykly a pyrimidopyrimidinylové heterocykly, vykazují silné antíbakteriální účinky a jsou užitečné při léčbě různých lidských onemocnění a mikrobiálních infekcí. Protože uvedené heterocyklické sloučeniny vykazují selektivní inhibiční účinky na bakteriální dihydrofolátreduktasu (bDHFR) vedle lidské DHFR (hDHFR), mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu vhodné pro léčbu mikrobiálních infekcí bez toxických účinků na lidský organismus, který je spojen s inhibicí hDHFR.

• · · ♦ ♦ · · · • «·

Jedním aspektem tohoto vynálezu tak je sloučenina obecného vzorce (I) nebo (II)

nebo

kde

A představuje atom dusíku, skupinu CH, nebo skupinu CR¹⁵;

R¹⁴ představuje skupinu -(CH2)_n~X^_Yr ve které n je číslo 1,

2, 3, 4, 5 nebo 6; X představuje atom kyslíku, skupinu NH, nebo skupinu NR¹⁵; a Y představuje arylovou skupinu nebo heteroarylovou skupinu, přičemž každá skupina Y může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty každá ze skupin R¹⁵ představuje nezávisle nižší alkylovou skupinu;

každá ze skupin R¹⁶ představuje nezávisle atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, hetero4

arylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu

S (0) 2NR¹⁷R^1,7, skupinu S(O)₂R¹⁷, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu

C(O)NH₂ a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰;

každá ze skupin R¹⁷ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S (0) 2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R¹⁸ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, hetero• · » « » « • ·

arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R¹⁹ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)0R²¹, skupinu C (0) NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R²⁰ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být • ·

·· · · · · φ « · · · ···· • · · · · «· ·· · arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹; a každá ze skupin R²¹ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu a heteroarylalkoxylovou skupinu.

Dále se tento vynález týká sloučenin obecného vzorce (III)

(III) kde

A je atom dusíku, skupina CH, nebo skupina CR¹⁵;

každá ze skupin R¹⁴ představuje nezávisle skupinu -(CH₂)_n-X-Y, ve které n je číslo 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6; X představuje atom kyslíku, skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵; a Y představuje arylovou skupinu nebo heteroarylovou skupinu, přičemž každá skupina Y může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶;

každá ze skupin R¹⁵ představuje nezávisle nižší alkylovou skupinu;

každá ze skupin R¹⁶ představuje nezávisle atom halogenu, kyano skupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou • · skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu S (O) ₂NR¹⁷R¹⁷, skupinu

S(O)₂R¹⁷, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu

C (O)NR¹⁹R²⁰;

každá ze skupin R¹⁷ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylové část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C (0) NR²¹R²¹, skupinu S (0) 2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R¹⁸ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylové část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou sku9 9 9

9 9 ··

9 9

9 9 9

99999

9 9

9 · pinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu

C(O)OR²¹, skupinu C (0) NR²¹R²¹, skupinu S (0) 2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R¹⁹ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R²⁰ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S (O) 2NR²¹R²¹ nebo skupinu S(O)2R²¹; a každá ze skupin R²¹ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu a heteroarylalkoxylovou skupinu.

Podle jednoho aspektu jsou sloučeninami (a kompozicemi a souvisejícími způsoby) podle tohoto vynálezu ty sloučeniny, ve kterých jsou skupiny R¹⁴ stejné. Podle jiného aspektu jsou sloučeninami (a kompozicemi a souvisejícími způsoby) podle tohoto vynálezu ty sloučeniny, ve kterých jsou skupiny R¹⁴různé.

Výrazem „halo, „halogen nebo „atom halogenu se v tomto textu rozumí atom fluoru, atom chloru, atom bromu nebo atom j odu.

Výrazem „alkylová skupina se v tomto textu rozumí uhlovodíkový řetězec, který může být lineární nebo rozvětvený a který obsahuje uvedený počet atomů uhlíku. Tak například specifikace „obsahující od 1 do 10 atomů uhlíku označuje, že daná skupina může obsahovat od 1 do 10 (včetně) atomů uhlíku. Výrazem „nižší alkylová skupina se v tomto textu označuje alkylová skupina obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku. Výrazem „alkoxylová skupina se v tomto textu označuje -O-alkylová skupina. Výrazem „alkylenová skupina se v tomto textu označuje dvojvazná alkylová skupina (tj. skupina -R-). Výrazem „alkylendioxoskupina se v tomto textu označuje dvojvazná skupina obecného vzorce -O-R-O-, ve které R představuje alkylenovou skupinu. Výrazem „aminoalkylová skupina se v tomto textu označuje alkylová skupina substituovaná aminoskupinou. Výrazem „merkaptoskupina se v tomto textu označuje zbytek -SH a výrazem „thioalkoxylová skupina se v tomto textu označuje -S-alkylová skupina.

Výrazem „aryl nebo „arylová skupina se v tomto textu rozumí monocyklický aromatický kruh obsahující 6 atomů uhlíku ·· 99

9·

9 9 9 · 9 99

9 · · ·

nebo bicyklický aromatický kruhový systém obsahující 10 atomů uhlíku, přičemž 0, 1, 2, 3 nebo 4 atomy v každém kruhu mohou být substituovány. Jako příklad arylové skupiny je možné uvést fenylovou skupinu, naftylovou skupinu apod. Výrazem „arylalkylová skupina nebo „aralkylová skupina se v tomto textu rozumí alkylová skupina substituovaná arylovou skupinou. Výrazem „arylalkoxylová skupina se v tomto textu rozumí alkoxylová skupina substituovaná arylovou skupinou

Výrazem „heteroaryl nebo „heteroarylová skupina se v tomto textu rozumí 5- až 8členný monocyklický, 8- až 12členný bicyklický nebo 11- až 14členný tricyklický kruhový systém obsahující v případě monocyklického systému 1 až 3 heteroatomy, v případě bicyklického systému 1 až 6 heteroatomů nebo v případě tricyklického systému 1 až 9 heteroatomů, přičemž uvedené heteroatomy jsou vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom dusíku a atom síry, přičemž 0, 1, 2, 3 nebo 4 atomy v každém kruhu mohou být substituovány. Jako příklad heteroarylové skupiny je možné uvést pyridylovou skupinu, furylovou skupinu nebo furanylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, pyrimidinylovou skupinu, thiofenylovou skupinu nebo thienylovou skupinu, chinolinylovou skupinu, indolylovou skupinu, thiazolylovou skupinu apod. Výrazem „heteroarylalkylová skupina nebo „heteroaralkylová skupina se rozumí alkylová skupina substituovaná heteroarylovou skupinou. Výrazem „heteroarylalkoxylová skupina se v to tomto textu označuje alkoxylová skupina substituovaná heteroarylovou skupinou.

Uhlík-, dusík-, síru-, halogen- a/nebo kyslik-obsahující funkční skupinou je substituovaná nebo nesubstituovaná lineár13

ní, rozvětvená nebo cyklická alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina, arylová skupina, aralkylová skupina nebo alkarylová skupina nebo derivát jedné nebo více z těchto skupin, ve kterých je jeden nebo více atomů uhlíku a/nebo atomů vodíku nahrazeno heteroatomy (jako jsou například aminoskupiny, alkylaminoskupiny, hydroxylové skupina a alkoxylové skupiny, thiolové skupiny, halogeny, nitroskupiny, fenolové skupiny nebo jiné substituované aromatické nebo alifatické skupiny).

Další provedení předmětného vynálezu zahrnuje sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina A představuje atom dusíku; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém n je 1; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina Y představuje fenylovou skupinu; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina Y představuje fenylovou skupinu nezávisle substituovanou 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina Y představuje skupinu s

SH ·· · ·· · · · · · * 9 9 9

-I / <·········* 9999 <········· ··· ·· ·· ·· ·· · která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každý substituent R¹⁶ je vybraný ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, amin, alkoxylovou skupinu, arylakoxylovou skupinu a heteroarylalkoxylovou skupinu; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina Y představuje skupinu

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém A představuje skupinu CH nebo skupinu CR¹⁵; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je každý substituent R¹⁶ nezávisle vybraný ze skupiny zahrnující skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰ [přičemž skupina R¹⁹ je nezávisle vybraná ze souboru zahrnujícího aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu a heteroarylalkylovou skupinu; a každá skupina R²⁰ je nezávisle vybraná ze souboru zahrnujícího aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu a arylalkylovou skupinu; ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupínu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylo·« • · · · · · · • · ·· 4 4 9 9 • ·· ♦«· 4 ··*·

9 9 · · · * ·· 99 94 · vou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹]; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém skupina Y představuje heteroarylovou skupinu; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1 a X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ a Y představuje fenylovou skupinu substituovanou jedním substituentem R¹⁶, kterým není karboxylová skupina (-COOH); a sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1 a X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ a Y představuje fenylovou skupinu substituovanou nezávisle 2 až 4 substituenty R¹⁶.

Další provedení předmětného vynálezu zahrnuje sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1 a skupina X představuje atom kyslíku; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ a R¹⁵ je methylová skupina (CH3) ; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo NR¹⁵ (R¹⁵ je CH3) a Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo NR¹⁵, přičemž R¹⁵ je CH₃, a Y představuje skupinu

která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každý substituent R¹⁶ je vybraný ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰; a sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém Y představuje fenylovou skupinu (případně nezávisle substituovanou 1 až 4 substituenty R¹⁶) a A představuje atom dusíku.

Další provedení předmětného vynálezu zahrnuje sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, skupina X představuje atom kyslíku a skupina A představuje atom dusíku; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, skupina X představuje atom kyslíku a skupina Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, skupina X představuje atom kyslíku a skupina Y před17

stavuje fenylovou skupinu, která je nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (kde R¹⁵ je methylová skupina (CH₃) ) a skupina A představuje atom dusíku; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém 1 je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR (kde R¹⁵ je methylová skupina (CH3) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵(kde R¹⁵ je methylová skupina (CH3) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (kde R¹⁵ je methylová skupina (CH3) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každý ze substituentů R¹⁶ je nezávisle vybraný ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH2 a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (kde R¹⁵ je methylová skupina (CH₃) ) , A před• ·

Z········· ····· ·· ·· ·· · stavuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty

R¹⁶, přičemž každý ze substituentů R¹⁶ je nezávisle vybraný ze

-i O souboru zahrnujícího skupiny obecného vzorce C(O)OR ;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (kde R¹⁵ je methylová skupina (CH3) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každý ze substituentů R¹⁶ je nezávisle vybraný ze souboru zahrnujícího skupiny obecného vzorce C(O)OR¹⁸ a každá ze skupin R¹⁸ představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (kde R¹⁵ je methylová skupina (CH3) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každý ze substituentů R¹⁶ je nezávisle vybraný ze souboru zahrnujícího skupiny obecného vzorce C(O)OR¹⁹R²⁰.

Další provedení tohoto vynálezu zahrnuje sloučeniny které hokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje atom kyslíku, A představuje atom dusíku, Y představuje fenylovou skupinu, která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje atom kyslíku, A představuje atom dusíku, Y představuje skupinu • · • · r’⁶

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje atom kyslíku, A představuje atom dusíku, Y představuje skupinu

kde každý ze substituentů R¹⁶ je nezávisle vybraný ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje atom kyslíku,

A představuje atom dusíku, Y představuje skupinu

• · sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1, X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (ve které R¹⁵ představuje methylovou skupinu (CH3) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje skupinu

která může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každý ze substituentů R¹⁶ je vybraný ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu C (O) NR¹⁹R²⁰; sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém je index n roven 1,

X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵ (ve které R¹⁵představuje methylovou skupinu (CH₃) ) , A představuje atom dusíku, Y představuje skupinu

nebo kteroukoli ze sloučenin uvedených v tabulce 1.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je sloučenina obecného vzorce (III) • · · · • · · ····· • ♦ · ·

(III) kde

A a B jsou nezávisle na sobě vybrané ze skupiny sestávající z atomu dusíku a skupiny CR⁷, ve které R⁷ představuje atom vodíku nebo uhlík-, dusík-, síru-, halogen- a/nebo kyslik-obsahující funkční skupinu;

R¹ a R² představují skupiny -NR⁵R⁶, ve kterých R⁵ a R⁶ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo uhlíkobsahující funkční skupiny;

R³ je atom vodíku;

R⁴ je uhlík-, dusík-, síru-, halogen a/nebo kyslíkobsahující funkční skupina, s tou podmínkou, že

pokud obě skupiny A a B představují atomy dusíku a obě skupiny R⁵ a R⁶ představují atomy vodíku, potom skupina R⁴nepředstavuje skupinu -NH₂, skupinu -N(H)(methyl), skupinu -N(H)(butyl), skupinu -N(H)(hexyl), skupinu -N(H) (fenyl), skupinu -N (H) (benzyl), skupinu -N (Η) (NH₂) , skupinu -N (H) (CH₂CH₂OH) , skupinu -N (CH₂CH₂OH) ₂, fenylovou skupinu, N-piperidinylovou skupinu nebo skupinu

-S(ethyl);

pokud skupina A představuje skupinu CH a skupina B představuje atom dusíku a obě skupiny R⁵ a R⁶ představují atomy vodíku, potom skupina R⁴ nepředstavuje methylovou skupinu, isobutylovou skupinu, fenylovou skupinu, 4-methylfenylovou skupinu, 4-chlorfenylovou skupinu, 4-bromfenylovou skupinu, 2-(2,5-dimethoxyfenyl)ethylovou skupinu nebo skupinu -CH(OCH₃)₂; a pokud obě skupiny A a B představují skupiny CH, potom skupina R⁴ představuje jinou aminoskupinu než je skupina -NH₂, (3,4-dichlorfenyl)methylaminoskupina nebo (3,4-dichlorfenyl)methyleniminoskupina.

Další aspekty tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce (III), ve kterém

R⁵ a R⁶ představují nezávisle na sobě atom vodíku; a

A a B představují nezávisle na sobě atom dusíku;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém R⁴ představuje skupinu NR⁷R⁸;

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou nebo heteroarylovou skupinou; a

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která může být případně substituovaná alkenylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, cykloalkylovou skupinou nebo arylovou skupinou;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou; a

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná heteroarylovou skupinou; a

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná hydroxylovou skupinou nebo alkoxylovou skupinou;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém

R⁴ představuje skupinu NR⁷R⁸;

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku;

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná cykloalkylovou skupinou;

R⁷ představuje nezávisle alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou;

R⁸ představuje nezávisle alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém

R⁷ představuje atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, arylovou skupinu, atom halogenu, thioalkylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, alkoxylovou skupinu, • · • · • · · · · • · · · • · · · · · • · · · · • · ·· aminoskupinu, alkylovou skupinu nebo skupinu NR⁵R⁶; ve které každá ze skupin R⁵ a R⁶ na atomu dusíku nezávisle představuje atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu nebo alkylkarbonylovou skupinu;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterém

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná naftylovou skupinou, jež může být případně substituovaná alkylovou skupinou, atomem halogenu, hydroxylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, thioalkyiovou skupinou nebo aminoskupinou;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterých je uvedená naftylová skupina substituovaná v poloze 2 nebo v poloze 4;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterých

R⁸ představuje methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu;

sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterých

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná benzothienylovou skupinou, jež může být případně substituovaná alkylovou skupinou, atomem halogenu, hydroxylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, thioalkyiovou skupinou nebo aminoskupinou;

ΦΦ φφφφ φφφ Φ··· • · φ φ · φ φ · φ · · φφφφ φφφ φφ φφ · · sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, ve kterých

R⁸ představuje methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je farmaceutická kompozice obsahující sloučeninu kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu a farmaceuticky přijatelný nosič; nebo sloučeninu kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, další terapeutické činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič; nebo sloučeninu kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, další terapeutické činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič, přičemž uvedeným dalším terapeutickým činidlem je antibakteriální činidlo.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob léčby subjektu (např. savce) infikovaného jedním nebo více druhy bakterií (včetně například infekcí močového traktu, systemických a topických infekcí, sepse, antibiotiky zprostředkované kolitidy, vředového onemocnění gastrointestinálního traktu, topického dezinfekčního prostředku, antiseptika, sterilizačního prostředku, péče o rány a chirurgického čištění, bez omezení na uvedené příklady). Uvedený způsob zahrnuje podávání takového množství sloučeniny podle předmětného vynálezu, nebo farmaceutické kompozice podle předmětného vynálezu danému subjektu (včetně subjektu, který byl identifikován jakožto vyžadující uvedenou léčbu), které je účinné pro dosažení uvedeného účinku.

Sloučeniny a farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu jsou rovněž vhodné jakožto antiparazitická činidla. Dalším aspektem předmětného vynálezu tak je způsob léčby subjektu • · • 4 4 (např. savce) infikovaného jedním nebo více parazity. Uvedený způsob zahrnuje podávání takového množství sloučeniny podle předmětného vynálezu, nebo farmaceutické kompozice podle předmětného vynálezu danému subjektu (včetně subjektu, který byl identifikován jakožto vyžadující uvedenou léčbu), které je účinné pro likvidaci parazitů nebo pro léčení nemoci, infekce nebo jejich symptomů.

Dále se tento vynález týká způsobu výroby sloučenin popsaných v tomto textu. Tento způsob zahrnuje reakci 2,4-diaminopteridinylové sloučeniny (nebo 2,4-diaminopyrimidopyrimidinylové sloučeniny) s jedním nebo více chemickými reakčními činidly za vzniku sloučeniny popsané v tomto textu, přičemž uvedená reakce probíhá v jednom nebo více stupních. V alternativním případě uvedený způsob zahrnuje reakci jednoho nebo více meziproduktů popsaných v tomto textu s jedním nebo více chemickými reakčními činidly za vzniku sloučeniny podle předmětného vynálezu, přičemž uvedená reakce opět probíhá v jednom nebo více stupních.

Dále se tento vynález týká produktu (tj. sloučeniny jakéhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu) připraveného shora popsaným způsobem.

Do rozsahu předmětného vynálezu spadá rovněž způsob identifikace sloučeniny s antibakteriálními účinky, který zahrnuje a) navržení struktury sloučeniny zde popsaného obecného vzorce; b) přípravu derivátu sloučeniny ze stupně a); a c) stanovení antibakteriálního účinku uvedeného derivátu; a dále do rozsahu tohoto vynálezu spadá způsob identifikace sloučeniny s antibakteriálními účinky, který zahrnuje a) výběr kandidátské sloučeniny; b) stanovení vazebné afinity uvedené kandidátské sloučeniny v modelu DHFR (jako je např. bDHFR, hDHFR); a c) stanovení antibakterálního účinku uvedené kandidátské sloučeniny. Stanovení antibakterálního účinku je možné provádět různými postupy, které jsou v dané oblasti techniky známé, včetně těch, jež jsou popsány v tomto textu.

Sloučenina, která je schopná inhibovat selektivně bakteriální DHFR vedle lidské DHFR může zajistit výhodnou volbu pro léčbu bakteriálního onemocnění nebo symptomů tohoto onemocnění. V odborné literatuře byly popsány β-substituované pteridiny jakožto potenciální inhibitory buď lidské DHFR (jehož příkladem je methotrexát, jenž se používá jako protirakovinové činidlo) nebo bakteriální DHFR (jehož příkladem je trimetrexát, jenž se používá pro léčení bakteriálních a parazitických infekcí). Existující léčebné režimy využívající sloučeniny, jako je trimetrexát, jsou charakteristické vážnými vedlejšími účinky a toxicitou spojenou s inhibici DHFR. Sloučeniny podle předmětného vynálezu jsou silnými inhibitory bDHFR avšak jsou výrazně méně aktivní vůči hDHFR. Proto tyto sloučeniny mohou selektivně ovlivňovat mikroorganismy (např. zabíjet, inhibovat růst/proliferaci mikroorganismů) prostřednictvím inhibice bDHFR za současného snížení nebo úplného vyloučení výrazných vedlejších účinků na daný subjekt (kterým může být například člověk, zvíře, savec), a to včetně vedlejších účinků souvisejících (zcela nebo jen částečně) s inhibici hDHFR.

Do rozsahu tohoto vynálezu spadají jen takové kombinace a varianty substituentů, které vedou ke vzniku stabilních sloučenin. Výrazem „stabilní se v tomto textu rozumí sloučeniny, které jsou natolik stabilní, aby byla umožněna jejich výroba a

• · w	11	• «	11	•
• · ·	• 1	« ·	1 1	• 1
• · ·	• 1 1	• 11	1 1	1111
				1
• ·« · ·	• 1	11	• ·	•

aby byla zachována integrita dané sloučeniny po dobu, jež postačuje pro použití uvedených sloučenin pro účely podrobně popsané v tomto textu (např. po dobu terapeutického nebo profylaktického podávání subjektu nebo pacientovi, nebo po dobu použití dané sloučeniny jakožto antiseptika, po dobu použití dané sloučeniny pro impregnaci obvazu rány, po dobu použití dané sloučeniny jakožto dezinfekčního činidla).

Pokud není definováno jinak, jsou všechny technické a vědecké výrazy použity v tomto textu ve významech běžně používaných zkušenými odborníky v oboru. Ačkoli je při praktickém užití předmětu tohoto vynálezu nebo provádění testů podle předmětného vynálezu možné použít metody a materiály podobné nebo ekvivalentní metodám a materiálům popsaným v tomto textu, jsou dále v textu popsány vhodné metody a materiály pro uvedený účel. V případě jakéhokoli rozporu je rozhodující znění tohoto popisu, včetně definic v něm uvedených. Kromě toho, materiály, metody a příklady popsané v tomto textu je třeba považovat jen za ilustrativní a neomezující z hlediska rozsahu tohoto vynálezu.

Konkrétní charakteristické rysy a výhody tohoto vynálezu budou zřejmé z následujícího podrobného popisu a ze znění patentových nároků.

Předmětný vynález se týká rovněž konkrétních sloučenin, jež jsou v tomto textu uvedeny jako příklady. Jedním z provedení tohoto vynálezu tak je jakákoli sloučenina konkrétně popsaná v tomto textu, včetně následujících konkrétních příkladů sloučenin podle tohoto vynálezu:

·· 9

9 9

9 9 9

9 999

9 9

9 • *· ·· · · • · · • · · • · · ··· ··

Tabulka 1

Sloučeniny a jejich číselné označení

• ·

• 0

0 ·

0 0 0 0

• · • · • ·

Číslo sloučeniny	Struktura
	nh₂	Cl-/	WA
	N'^xk>_f-	•Άν	A^A
35	A 3	.A.
	H₂N N	N N \|	Ah₃
		CH	3
	nh₂		Chirální
36	nÁ/	A A fA An'AAA


	nh₂		Chirální
		ΠΗ. /A
37		., a3 J	³ K/\A
	h₂n n	N Ν'
		ch₃	LA_f
	nh₂		Chirální
	νΆ/	f-H /A
38	ΛΛ	-A/l	³
	h₂n n	N N \|	II 1
		CH₃
	NH₂	z	'N_x *^T
			-AA
39		ÍA.	Ah₃
	h₂n n	N N 1
		ch₃
	nh₂		.CH, /--
		r
40	H₂N^br	. AJ	\aAa
		N N
		CH₃	LA_f
	nh₂		Chirální
			.CH, .—,

41	Λ	aJ	\A\A
	h₂n n	N N \|	II i
		ch₃	33

• ·

I 1 ·· • · • ·· ·· · · • · · • · · • · · • · · ♦ ·

Číslo sloučeniny	Struktura
		nh₂	Chirální
			-CH,
	N^x H_žfA	Y
42		x.....L 1J
		N N ’τ tí T
			θ^Η3
		nh₂	ch₃
	N	Ύ
43	JJ		A-W
	H/r	N	n n YA γ^ \|
			^CH3
		nh₂	-CH,
	N	Ύγ	A ^!/A
44	JJ		áW
	H₂I\T	N	N N Yf 1
			ch, A -xA.

		nh₂
	N	Ύ·	Ύ CH, rAA
45	H₂í<		.„AA-XJ
	N	N N Yf 1
			J A-J
			h₃c
46		nh₂ II	. „ X) A N \|
		Jí p	A pl s
	HjN''	N	^N (1
			ch₂
		nh₂
	N		'^N CH, A^A
		li	-A AJU
	η₂ιψ	N
47			> v
			A
			A--A

• · ·· «

• 4

4 4 » 4 4· > · · « ► · · «

4«

4

·· · · • · · • * · · • · · «·· 11

9

1 ·

11 « 1 1 · « « ···♦♦

111 ·

* ·· ·» • · · · • · φφ • · · · • · φ · φφ ·· ·· « • * φ • · · · • φ ····· « φ · φφ *

V následující tabulce jsou uvedeny sloučeniny podle jednoho z aspektů předmětného vynálezu, které vykazují silný ahtimikrobiální účinek proti bakterii S. aureus a o kterých se předpokládá, že mají podobné fyzikálně-chemické vlastnosti jako orálně absorbovaná a biologicky dostupná léčiva a léčivům podobné sloučeniny. V tabulce jsou uvedeny účinky jednotlivých sloučenin proti různým bakteriálním kmenům (S. aureus,

S. pneumoniae, E. faecalis, M. catarrhalis a H. influenzae). Buňky kvasinek (S. cerevisiae) v uvedeném souboru mikroorganismů slouží jako indikátor potenciální cytotoxicity v savčích buňkách. Všechny testované analogy vykazovaly „toxicitu při koncentraci vyšší než 32 mikrogramů/mililitr.

V následující tabulce jsou uvedeny sloučeniny podle jednoho z aspektů předmětného vynálezu, které vykazují silný antimikrobiální účinek proti bakterii S. aureus a o kterých se předpokládá, že mají podobné fyzikálně-chemické vlastnosti jako orálně absorbovaná a biologicky dostupná léčiva a léčivům podobné sloučeniny. Hodnoty minimální inhibiční koncentrace (MIC) jsou uvedeny v miligramech/mililitr.

Tabulka reprezentativních sloučenin podle tohoto vynálezu

Číslo sloučeniny	bDHFR Ki/(μΜ) průměr	S. aureus (pg/ml) průměr
20	0, 062	0,5
21	0,082	<0,125
22	0, 002	<0,125
23	0,027	1
24	0,015	0,25
25	0,004	0,25
26	0,02	1
27	0,008	0,5
28	0,02	<0,125
29	0,02	<0,125
30	0,028	<0,125
31	0,024	1
32	0,011	0,5
33	0,012	0,015
34	0,014	1
35	0,037	0,5
36	0,005	<0,125
37	0,003	<0,125
38	0,06	0,5
39	0,015	0,25
40	0,004	<0,125
41	0,037	<0,125
42	0,004	<0,125
43	0,004	<0,125
44	0,004	<0,125

Číslo sloučeniny	bDHFR Ki/(pM) průměr	S. aureus (pg/ml) průměr
45	0,008	2
46	0,093	2
47	0,023	2
48	0,007	2
49	0,02	2
50	0,004	2
51	0,022	2
52	0,022	2
53	0,03	2
54	0,01	2
55	0,019	2
56	0,093	2
57	0,011	2
58	0,015	2
59	0,005	2
60	0,029	2
61	0,013	2

Číslo sloučeniny	Ě © W Ή S ^v	Struktura	S. aureus MIC	S. pneumoniae MIC	E. faecalis MIC	M. catarrhalis MIC	H. influenzae MIC	S.cerevisiae MIC
33	12	nh₂ aAáI h₂n n n n η CH₃ CH₃	<0,125	0,125	1,32	1	8	>64

• ·· ·· · · ·· · ··· · · ·· · · ·· • · · · · ·· · · · · ····· ·· ·· ·· ·

Číslo sloučeniny	ggr w Ή	Struktura	S. aureus MIC	S. pneuaoniae MIC	<0 rl H (fl 0 O (U H <e S H	M. catarrhalis MIC	Φ 1« N G dl 3 υ Η H S^S •H a	S.cerevisiae MIC
62	802	N xA. Ά. JI xJ N N N	<0,125	2	>4	4	64	32
25	<4	nh₂ CH₃ Λ Λ ΑΧΌ H₂N N N N Y/J' ch₃ 'L/	0,5	1	32	4	16	>64
29	<20	nh₂ ^N^_N íf^J ÍH_bxV ^ch₃	0,125	0,5	16	1,2	64	64
36	5	nh₃ 1 ² Chirální ϊιΓ^Ϊ T- H.C¹	1	1,8	32	0,5, 1	16	>64
30	24	nh₂ II ?^H’ Π ™>IA,	0,13	2	8	2	64	64
21	82	Γ² Π Jt A xJ CH, H₂N N N ³	0,25	0, 125	0,015	1	1	>64

Číslo sloučeniny	bDHFR (nM)	Struktura	S. aureus MIC	01 Π) •H tí 0 BS 0) E c & w	(0 •H H Π) □ O 0) H rt E w	M. catarrhalis MIC	H. influenzae MIC 1	S.cerevisiae MIC
63	104	n ^y^cl Yl	0,5	0,25	0, 25	0,25	32	64
64	385	^F\X^F ρψ N	0, 125	0,125	0,125	0,125	64	>64

Sloučeniny podle tohoto vynálezu je možné syntetizovat běžnými postupy. Ve výhodném provedení se uvedené sloučeniny vhodně syntetizují ze snadno dostupných výchozích látek.

Obecně se sloučeniny zde popsaných obecných vzorců vhodně získávají způsoby znázorněnými na níže uvedených schématech a postupy popsanými dále v příkladech provedení vynálezu.

Jedním aspektem předmětného vynálezu je způsob přípravy sloučenin obecných vzorců popsaných v tomto textu, který zahrnuje syntézu kteréhokoli jednoho nebo více meziproduktů znázorněných na níže uvedených syntetických schématech a následnou konverzi tohoto/těchto meziproduktu/meziproduktů na sloučeniny obecných vzorců popsaných v tomto textu. Dalším aspektem tohoto vynálezu je způsob přípravy sloučenin obecných vzorců popsaných v tomto textu, který zahrnuje syntézu kteréhokoli jednoho nebo více meziproduktů popsaných v níže uvedených příkladech provedení vynálezu a následnou konverzi toho• · ···· · · · ·

to/těchto meziproduktu/meziproduktů na sloučeniny obecných vzorců popsaných v tomto textu. Dalším aspektem tohoto vynálezu je způsob přípravy sloučenin obecných vzorců popsaných v tomto textu, který zahrnuje syntézu kteréhokoli jednoho nebo více meziproduktů popsaných v níže uvedených příkladech provedení vynálezu a následnou konverzi tohoto/těchto meziproduktu/meziproduktů na sloučeniny obecných vzorců popsaných v tomto textu, a to s využitím jedné nebo více chemických reakcí popsaných dále na syntetických schématech nebo v příkladech, provedení tohoto vynálezu. Nukleofilní činidla jsou v dané oblasti techniky známá a jsou popsána v odborných chemických statích a monografiích citovaných v tomto textu. Skupina chemikálií používaných při výše zmíněných způsobech může zahrnovat například rozpouštědla, reakční činidla, katalyzátory, činidla pro zavádění a odštěpování chránících skupin apod.

Výše popsané způsoby mohou rovněž zahrnovat další stupně, které se provádějí buď před nebo po stupních, jež jsou konkrétně popsány v tomto textu a které slouží pro zavedení nebo odstranění vhodné chránící skupiny, čímž je v konečném důsledku umožněna syntéza sloučenin obecných vzorců popsaných v tomto textu.

Jak je zkušenému odborníkovi z oblasti organické chemie zřejmé, syntetická schémata v tomto textu nejsou určena pro zahrnutí úplného seznamu prostředků, kterými je možné syntetizovat sloučeniny podle předmětného vynálezu. Další způsoby syntézy těchto sloučenin jsou odborníkovi zřejmé. Kromě toho shora popsané syntetické stupně mohou být provedeny v jiném pořadí za vzniku požadované sloučeniny. Chemické transformace a metodologie týkající se chránících skupin (chránění a odchránění), které jsou vhodné pro syntézu sloučenin popsaných • · · · · · · · · · ·· · · · · ·· · ····· · · ·· ·· · v tomto textu, jsou v dané oblasti techniky známé a jejich skupina zahrnuje například reakce popsané v následujících publikacích:

R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH

Publishers (1989); T. W. Greene a P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser a M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); M.B. Smith a J. March, March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5. vydání, Wiley Interscience (2001); a Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, (editor L. Paquette), John Wiley and Sons (1995), a v následujících vydáních těchto publikací.

Diskuse obecných syntetických metod použitých při přípravě analogů podle tohoto vynálezu

Obecně je možné sloučeniny podle tohoto vynálezu připravit pomocí standardních metod, jež jsou zkušenému odborníkovi v oblasti organické syntézy známé a dále pomocí standardních metod popsaných v odborné literatuře.

Syntéza pyrimidopyrimidinů

Pyrimidopyrimidinové sloučeniny podle předmětného vynálezu je možné připravit pomocí různých syntetických přístupů.

·· · · · · ·· · • « · · · · ··· • · ···· · · · · • ··· · · · · · · · · · · ·· ···· ·· · ··· · · ·· ·· ·· ·

Pyrimidopyrimidinový systém je možné syntetizovat v několikastupňové reakční sekvenci, při které se vychází z vhodně substituovaného amidinu (obecného vzorce R7-C=NHNH2) a R5-substituovaného alkoxymethylenmalonitrilu. Vzniklý kyanoaminopyrimidin může být kondenzován s guanidinem za vzniku pyrimidopyrimidinového kruhového systému. V případě, kdy skupina R7 v uvedeném kyanoaminopyrimidinu představuje atom chloru, atom bromu nebo -S-nižší alkylovou skupinu, mohou být tyto odstupující skupiny nahrazeny dusíkovými nebo kyslíkovými nukleofily za vzniku R7-N(nebo 0)-substituovaných alkylových nebo arylových meziproduktů. Tyto meziprodukty je možné cyklizovat na odpovídající pyrimidopyrimidiny substituované v poloze 7.

Další způsob syntézy 7-amino-substituovaných pyrimidopyrimidinů zahrnuje nukleofilní atak aminů na 6-amino-2-brompyrimidin-5-karbonitril (jako odstupující skupina v poloze 2 může v tomto případě být použit i atom chloru nebo thiomethylová skupina nebo thioethylová skupina) a následnou cyklizaci vzniklého příslušně substituovaného kyanoaminopyrimidinu guanidinem.

Pokud není uvedený atakující, příslušně substituovaný nukleofilní amin komerčně dostupný, je možné jej připravit pomocí standardních metod používaných v organické chemii. Jednou z těchto standardních metod, které se používají při • · » 4 ·· přípravě sloučenin podle předmětného vynálezu, je reduktivní aminace.

Při této všeobecně známé metodě kondenzuje aldehyd nebo keton s příslušně substituovaným aminem, a to v přítomnosti mírného redukčního činidla, jako je kyanoborohydrid sodný nebo kyanoborohydrid zinečnatý.

Metody přímé substituce heterocyklu

Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze připravit rovněž aromatickou nukleofllní substitucí odstupujících skupin v poloze 7 2,4-diaminopyrimidopyrimidinu. Skupina těchto odstupujících skupin (označených jako [LG] ) zahrnuje -Cl, -Br,

-SCH₃, -SC₂H₅ a -N(CH₃)₃, bez omezení na tyto příklady. Uvedeným nukleofilem, jenž se používá při této substituci, může být -N-alkylová skupina, -N-arylová skupina nebo substituované alkyl- nebo arylaminy, nebo -O-alkylová skupina, O-arylová skupina, nebo substituované alkoholy nebo fenoly.

Syntéza pterinových analogů

Obecně je možné 6- nebo 7-substituované pterinové analogy připravit reakcí aktivovaného reakčního činidla, jako je 6- nebo 7-chlormethylpterin, s nukleofily, jako jsou aminy, přičemž je možné použít různé další metody popsané v odborné literatuře a jako syntetická reakční činidla pro přípravu 6- nebo 7-substituovaných analogů je možné použít i jiné funkční skupiny vázané v poloze 6- nebo 7- pterinu, jako je brommethylová skupina, jodmethylová skupina, hydroxymethylová skupina, aktivovaná hydrodroxymethylová skupina, karbonylová skupina, aktivovaná karbonylová skupina, hydroxylové skupina, atom chloru, atom bromu nebo methylová skupina.

Výše uvedené obecné reakční schéma je možné použít pro syntézu širokého rozsahu 7-substituovaných pteridinových analogů. Obecně lze reakci popsat tak, že 7-chlormethylový derivát a příslušný amin spolu dostatečně dlouho reagují ve vhodném rozpouštědle, jako je N,N-dimethylformamid (DMF) nebo 2-methoxyethanol, přičemž doba nezbytná pro proběhnutí dané reakce se stanovuje analýzou reakční směsi pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC), pomocí chromatografie na tenké vrstvě (TLC) nebo pomocí nukleární magnetické rezonance (NMR). Následně se odstraní uvedené rozpouštědlo a surový produkt se čistí vhodnou metodou, obvykle pak srážením, ·* ·· ·· · • · · · · ··· • ···· · · · · ··· · · · · · · · · · · • · · · · ·· · ·· ·· ·· * překrystalováním, opakovaným srážením vhodné soli bází, nebo pomocí chromatografíe.

2,4-Diaminopteridinyl substituovaný na uhlíku C-6 alkylovou skupinou obsahující odstupující skupinu se ve vhodném rozpouštědle a v přítomnosti vhodné báze aduje na amin, anilin, fenol nebo alkoxid, které se chovají jako nukleofily. (Viz. níže uvedené reakční schéma). Odstupující skupinou je chemická skupina, kterou je možné během reakce odštěpit ze sloučeniny. Uvedená odstupující skupina může mít formu iontu vytvořeného odštěpením z původní sloučeniny (jako je např. skupina -OH, skupina -SMe, skupina -OAc, skupina -OTosyl, -Cl -Br, -I) nebo může mít neutrální formu (jako je například H₂0 nebo HOAc). Vzniklý produkt se následně izoluje a čistí pomoc standardních technik.

NH₂

Lv = Odstupující skupina Nu = Nukleofil

Podobně mohou s využitím podobné metodologie reagovat diaminopyrimidinylpyridinylové sloučeniny za vzniku sloučenin obecných vzorců popsaných v tomto textu, ve kterých A představuje skupinu CH nebo C-nižší alkylovou skupinu.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou obsahovat jedno nebo více asymetrických center a mohou tak existovat ve formě racemátů a racemických směsí, ve formě jediného enantiomeru, jednotlivých diastereoizomerů a ve formě diastereoizomerních směsí. Všechny tyto izomerní formy uvedených sloučenin spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Sloučeniny podle předmětného vynálezu mohou rovněž existovat ve více tautomerních formách, přičemž v těchto případech zahrnuje tento vynález všechny tautomerní formy sloučenin popsaných v tomto textu (tak např. alkylace kruhového systému může vést k alkylaci na několika místech, přičemž do rozsahu tohoto vynálezu spadají všechny takovéto reakční produkty). Sloučeniny podle předmětného vynálezu mohou rovněž existovat v cis- nebo trans- nebo E- nebo Z- izomerních formách dvojné vazby. Do rozsahu tohoto vynálezu tak opět spadají všechny izomerní formy takovýchto sloučenin. Do rozsahu tohoto vynálezu spadají rovněž všechny krystalické formy zde popsaných sloučenin.

Substituenty kruhových skupin (jako je například fenylová skupina, thienylová skupina atd.) mohou být znázorněny jako vázané ke konkrétnímu atomu, pokud je žádoucí aby byly vázané právě k tomuto atomu, nebo mohou být znázorněny jako nevázané ke konkrétnímu atomu (viz. níže), přičemž v tomto případě mohou být vázané k jakémukoli dostupnému atomu, který ještě ·· · • ·

0* • 0 0 0 0 ·

C Ο 00 0 0 00* 0 000 θΖ 00 00· ·0 000 0 0000

000 0000 00 0 000 00 00 00 00 ♦ není substituovaný jiným atomem, než je atom vodíku. Tak například struktura znázorněná jako

je určena pro zahrnutí všech (avšak nemusí nutně zahrnovat úplně všechny) následujících struktur:

Obsah všech citovaných materiálů, ať už mají tištěnou for mu, elektronickou formu, formu počítačově čitelného média pro ukládání dat nebo jinou formu, je výslovně zahrnut v tomto textu jako odkazový materiál, přičemž skupina takovýchto materiálů může zahrnovat abstrakta, články, časopisy, publikace, texty, monografie, internetové stránky, databáze, patenty a patentové publikace, bez omezení na tyto příklady.

Farmaceutické prostředky, kompozice a prekurzory léčiv

Sloučeniny podle tohoto vynálezu, včetně sloučenin zde popsaných obecných vzorců jsou v tomto textu definovány tak, že zahrnují i jejich farmaceuticky přijatelné deriváty nebo deriváty, které jsou prekurzory léčiv. Výrazem „farmaceuticky přijatelný derivát nebo derivát, který je prekurzorem léčiva

1 « · · • 111

11111

111

1

11

1

11

11 • ·* ·· · ·

11

1 11

11

911 19 ··

11 se v tomto textu rozumí jakákoli farmaceuticky přijatelná sůl, ester, sůl esteru nebo jiný derivát sloučeniny podle tohoto vynálezu, který je po podání pacientovi schopen poskytnout (přímo nebo nepřímo) sloučeninu podle tohoto vynálezu. Zvlášť výhodnými deriváty a prekurzory léčiv podle tohoto vynálezu jsou ty deriváty a prekurzory léčiv, které zvyšují biologickou dostupnost sloučenin podle tohoto vynálezu po podání takovýchto sloučenin savci (například tím, že umožní aby orálně podaná sloučenina byla snadněji absorbována do krve) nebo které zvyšují přísun základní sloučeniny do biologického systému (např. do mozku nebo lymfatického systému) v porovnání se základními sloučeninami. Skupina výhodných derivátů, které jsou prekurzory léčiv, zahrnuje deriváty, ve kterých je skupina, jež zvyšuje rozpustnost ve vodě nebo jež aktivuje transport skrz střevní stěnu, vázaná ke sloučeninám obecných vzorců popsaných v tomto textu.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu je možné modifikovat navázáním vhodných funkčních skupin za účelem zlepšení vybraných biologických vlastností. Typy takovýchto modifikací jsou v dané oblasti techniky známé a jejich skupina zahrnuje modifikace za účelem zvýšení biologické penetrace dané sloučeniny do daného biologického systému (jako je například krev, lymfatický systém, centrální nervový systém), za účelem orální dostupnosti dané sloučeniny, za účelem zvýšení rozpustnosti pro umožnění injekčního podávání dané sloučeniny, za účelem změny metabolismu dané sloučeniny a za účelem změny rychlosti vylučování dané sloučeniny.

Skupina farmaceuticky přijatelných solí sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnuje soli odvozené od farmaceuticky ·· · · · · 4 · ·

4 · · ·· *444 • 4 4 4 ·· 4·· 44444

4 4444 44 4

444 44 44 44 4 přijatelných anorganických a organických kyselin a bází. Jako konkrétní příklad vhodné soli odvozené od kyseliny je možné uvést acetát, adipát, alginát, aspartát, benzoát, benzensulfonát, bisulfát, butyrát, citrát, kafran, kafrsulfonát, cyklopentanpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, ethansulfonát, formiát, fumarát, glukoheptanoát, glycerofosfát, glykolát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxyethansulfonát, laktát, maleát, malonát, methansulfonát, 2-naftalensulfonát, nikotinát, nitrát, palmoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, fosfát, pikrát, pivalát, propionát, salicylát, sukcinát, sulfát, vínan, thiokyanát, tosylát a undekanoát. Ostatní kyseliny, jako je kyselina šťavelová, je možné použít při přípravě solí, které jsou vhodné jakožto meziprodukty při přípravě sloučenin podle tohoto vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelných kyselých adičních solí, a to i přes skutečnost, že samotné tyto kyseliny nejsou farmaceuticky přijatelné. Skupina solí odvozených od příslušných bází zahrnuje soli alkalických kovů (například sodné soli), soli kovů alkalických zemin (například hořečnaté soli), amonné solí a N (alkyl) ₄ ⁺soli. Do rozsahu tohoto vynálezu rovněž spadají kvarternizace kterýchkoli bazických, dusík-obsahujících skupin sloučenin popsaných v tomto textu. Uvedenou kvarternizací je možné získat produkty rozpustné nebo dispergovatelné ve vodě nebo v olej i.

In vitro testy antíbakteriálního účinku

Sloučeniny podle předmětného vynálezu je možné s použitím standardních metod hromadně testovat na antibakteriální účinek.

• · · · · · · · · · • ····· ··· ····· ····· ·· ·· ·· ·

Při příkladu jednoho z těchto testů, který je popsán níže, se používá technika mikroředění živné půdy za účelem měření in vitro účinku sloučenin podle tohoto vynálezu proti dané bakteriální kultuře, přičemž pomocí tohoto testu je možné zjistit hodnoty minimálních inhibičních koncentrací (MIC). Hodnoty minimálních inhibičních koncentrací (MIC) některých reprezentativních sloučenin podle tohoto vynálezu jsou uvedeny v tabulce 2.

Tabulka 2 MIC (mikrogram/mililitr) některých sloučenin pro různé bakterie (n. t.= netestováno)

Sloučenina číslo	E. coli	S. aureus	E. faecalis	S. pneumoniae	M. catarrhalis	H. influenzae	P. aeruginosa	S. cerevisiae
1	>64	16-64	16-64	<2	2-8	2-8	>64	>64
3	>64	2-8	2-8	2-8	2-8	2-8	>64	>64
4	>64	16-64	2-8	2-8	16-64	2-8	>64	>64
5	>64	16-64	2-8	2-8	2-8	2-8	>64	>64
6	>64	2-8	2-8	2-8	2-8	2-8	>64	>64
7	>64	<2	<2	<2	<2	<2	>64	>64
8	>64	2-8	2-8	2-8	2-8	2-8	>64	>64
9	>64	2-8	<2	<2	2-8	<2	>64	>64
10	>64	2-8	<2	2-8	<2	16-64	>64	16-64
11	>64	<2	<2	<2	<2	>64	>64	>64
12	>64	>64	n. t.	<2	16-64	2-8	>6 4	>64
14	>64	<2	<2	<2	<2	<2	>64	>64

• · • · ·

Sloučenina číslo	•rl H 0 0 w	S. aureus	E. faecalis	S. pneumoniae	M. catarrhalis	H. influenzae	«1 0 c H &» 3 H Φ n) (i	S. cerevisiae
15	>64	<2	<2	<2	<2	<2	>64	2-8
16	>64	<2	<2	<2	<2	>64	>64	>64
17	>64	<2	<2	<2	<2	<2	>64	>64

Mikrozřeďovací test antimikrobiálního účinku

Byly připraveny zásobní roztoky testovaných sloučenin v Ν,Ν-dimethylformamidu (DMF) o koncentraci 5 miligramů/mililítr. Pracovní roztoky testovaných sloučenin byly připraveny z uvedených zásobních roztoků, a to v Můller-Hintonově živné půdě (MHB), přičemž výchozí koncentrace dané sloučeniny byla 64 mikrogramů/mililitr.

Bakteriální inokula byla připravena z kultury pěstované přes noc (tj. z čerstvé kolonie pěstované na agarovém platu v 5 mililitrech MHB; kmen H. influenzae byl pěstován v MHB s přídavkem kvasného extraktu, hematinu a NAD), která byla odstřeďována 2x5 minut při 3000 otáčkách za minut (v případě S. pneumoniae a H. influenzae 2 x 10 minut při 3000 otáčkách za minutu) a která byla rozředěna vždy v 5 mililitrech čerstvé živné půdy MHB tak, aby po naředění takto získané bakteriální suspenze v jímce mikroplata (na celkový objem 100 mikrolitrů) bylo získáno 100 kolonii tvořících jednotek (CFU).

• ·· ·· ·· ·· · • · · · · ·· · · ·· ·· · · · · · · · · · • · · · · ·· · · · ····· • · · · · · · ·· · • ·· · · · · ·· ·· ·

Jímky mikroplata byly plněny vždy 50 mikrolitry dvojnásobně ředěných roztoků testované sloučeniny, přičemž výchozí koncentrace testované sloučeniny byla vždy 64 mikrogramů/ mililitr. Poté byly jímky naplněny 50 mikrolitry bakteriálního inokula, takže konečný objem směsi obsažené v každé jímce činil 100 mikrolitrů. Plata byla inkubována 18 až 24 hodin při teplotě 37 °C (kmen S. pneumoniae byl inkubován v atmosféře obohacené oxidem uhličitým).

Poté byla pomocí přístroje TECAN SpectroFluor Plus® měřena optická hustota obsahu každé jímky při vlnové délce 590 nanometrů (OD590) a hodnota minimální inhibiční koncentrace (MIC) byla definována jako koncentrace, pří které došlo k 90procentní inhibici růstu bakterií.

Biochemické testy pro stanovení účinku proti bakteriální a lidské DHFR

Materiály a postupy

Lidská a bakteriální DHFR: DHFR kmene E. coli laskavě poskytl pan Eric Brown z MacMaster University.

Klonování, exprese, čištění lidské DHFR cDNA lidské DHFR byla klonována metodou PCR z Human Universal Quickclone® cDNA získané od společnosti Clontech. PCR primery byly vytvořeny z lidské sekvence deponované v GenBank (1) pod přístupovým číslem XM_003991. Struktura zmíněných příměrových sekvencí je uvedena níže a jejich použití vedlo k amplifikaci 186 aminokyselin oblasti kódující hDHFR:

···«· ·· ·· · · oAlt-92(5^ř) PCR primer:

gatcgatcgatccatatggttggttcgctaaactgc oAlt-93 (3') PCR primer:

gatcgatcaagcttcattaatcattcttctcatatacttc.

Uvedený PCR fragment byl zpracován restrikčními enzymy Ndel a HindlII a následně navázán do derivátu expresního vektoru pKK223-3 (jenž byl získán od společnosti Amersham Pharmacia) . Výsledný expresní vektor (pFW96.2) byl transformován do ToplO F' bakterie E. Coli a protein hDHFR byl indukován přidáním lmM IPTG s následnou 4hodinovou inkubací při teplotě 37 °C. Rekombinantní lidská DHFR byla čištěna postupem na bázi dříve publikované metody (2).

Enzymové testy

Kyselina dihydrofolová a NADPH byly získány od společnosti Sigma. Enzymové testy popsané v dřívějších publikacích (2, 3) byly přizpůsobeny pro mikrotitrový formát. Všechny testy byly provedeny v objemu 250 mikrolitrů na 96jímkových platech. Typická testovací směs se skládala z 20 nM DHFR (lidské nebo E. coli), 100 μΜ NADPH a 50 μΜ kyseliny dihydrofolové ve 100 mM HEPES o pH 8, 10 mM KC1 a 10 mM MgCl₂. Test byl spektrofotometricky monitorován na přeměnu NADPH na NADP+, která se projevuje v poklesu absorbance při vlnové délce 340 nanometrů. Pro převod absorbance na koncentraci produktu byl použit extinkční koeficient pro uvedenou reakci při vlnové délce 340 nanometrů (jehož hodnota byla 12 300 M~¹cm’¹) (4).

• · ·

Stanoveni Κχ

Sloučeniny byly sériově zředěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) na koncentraci v rozmezí od 25 mM do 1 μΜ. Ke 120 mikrolitrům roztoku enzymu (který obsahoval 40 nM DHFR a 200 μΜ NADPH) bylo přidáno 5 mikrolitrů inhibitorové sloučeniny rozpuštěné v dimethylsulfoxidu (DMSO). Reakce byla iniciována přidáním 125 mikrolitrů ΙΟΟμΜ roztoku kyseliny dihydrofolové. Výsledné koncentrace jednotlivých látek při tomto testu byly následující: 20 nM DHFR, 100 MM NADPH, 50 μΜ kyseliny dihydrofolové a 500 μΜ až 20 nM inhibitorové sloučeniny. Výsledná koncentrace DMSO činila 2 procenta z celkového objemu. Rekce byly monitorovány výše popsaným postupem.

Pozorované reakční rychlosti (v nanomolech/sekundu) byly v vynášeny do grafu proti koncentraci inhibitoru v logaritmickém měřítku a hodnoty Ki byly stanoveny proložením získaných křivek do následující rovnice:

V = (V_max[S] ) / (K_m(l + I/Ki) + [S] ) kde S = dihydrofolát, K_m = Michaelisova konstanta pro dihydrofolát, I = koncentrace inhibitoru.

Sloučeniny podle předmětného vynálezu jsou obecně účinnější pro inhibici bakteriální DHFR (bDHFR) než pro inhibici lidské DHFR (hDHFR). Tato selektivita inhibice je užitečnou vlastností antibakteriálníchj léčiv. Příkladem antibakteriálního léčiva je trimethoprim. Trimethoprim inhibuje bakteriální DHFR při koncentraci <0,002 μΜ, přičemž trimethoprim je v podstatě v podstatě neúčinný při inhibici lidské DHFR.

·· · • · · · · · · ·· · · ···· · « · • · · ···· ···· • · ··· ·· · · · · ···· 19 1 1111 11 1

11119 11 11 11 Λ

Inhibice lidské DHFR způsobuje u lidských pacientů výrazné vedlejší účinky. Sloučeniny s vysokým poměrem inhibice lidské DHFR ku inhibici bakteriální DHFR mohou být považovány za „bezpečnější z hlediska jejich primárního mechanismu vyvolání vedlejších účinků; tj. inhibice hDHFR. Methotrexát je léčivo, které se používá při léčbě rakoviny. Jeho primární mechanismus účinku spočívá v inhibici hDHFR přítomné v rakovinových buňkách. Mnoho vedlejších účinků této formy chemoterapie rakoviny je výsledkem inhibice hDHFR. Léčiva, jako je trimetrexát (jehož struktura není v tomto textu uvedena) jsou antimikrobiální činidla (ze skupiny 6-substituovaných chinazolinů), které výrazně inhibují hDHFR. Je proto nezbytné danému pacientovi podávat/současně podávat léčivo označované jako „záchranné, jako je např. leukovorin, a to za účelem eliminace silných, život ohrožujících vedlejších účinků inhibice hDHFR. Podle jednoho provedení tak je sloučeninou podle předmětného vynálezu sloučenina kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu, která inhibuje bakteriální DHFR při mnohem nižší dávce (tj. s vyšším účinkem), než je dávka, při které dochází k inhibici hDHFR, neboli sloučenina, jejíž terapeutický index (tj. poměr hDHFR Kí/bDHFR Ki) je větší než 10 (např. > 50, > 100, > 1000, > 10 000, > 20 000, > 25 000).

Porovnání hodnot Ki pro bakteriální a lidskou DHFR reprezentativních sloučenin podle předmětného vynálezu je uvedeno v tabulce 3. Vysoká selektivita sloučenin podle předmětného vynálezu k bakteriální DHFR vedle lidské DHFR je známkou toho, že tyto analogy mají vysoký terapeutický index, co se týče poměru účinnosti (antimikrobiálního účinku) v • ·*> ·< ·* ·4 9 f · · · · · · · · *

9 1 1111 119 1

II 19 1 19 111 1 1111

III 1111 11 1

191 91 ·· ·· »·· porovnání s toxicitou (vedlejších účinků u lidských pacientů souvisejících s inhibicí hDHFR).

Tabulka 3

Porovnání hodnot Ki (v nanomolech) pro bakteriální a lidskou DHFR reprezentativních sloučenin podle předmětného vynálezu (n.t. = netestováno)

Číslo sloučeniny	bDHFR Ki	hDHFR Κ_±
1	<100	500-999
2	100-499	1000-4999
3	<100	1000-4999
4	<100	500-999
5	<100	500-999
6	1000-4999	>5000
7	100-499	>5000
8	1000-4999	>5000
9	100-499	>5000
10	100-499	>5000
11	500-999	>5000
12	100-499	1000-4999
13	500-999	>5000
14	<100	>5000
15	100-499	>5000
16	<100	>5000
17	<100	n. t.
21	<100	>5000
22	<2	>75 000
66	<1000	>500 000

• · • φ» φ* ·* • ΦΦΦ φφφφ • · φ φ φ φφ φφ φφφ φφ φ φφφ φφφφ φφφ φφ φφ φφ φφ · φ φ φ φ · φ φφφφ φ φ φφ φ

In vivo testy antibakteriálního účinku

Sloučeniny podle předmětného vynálezu je rovněž možné testovat na antibakteriální účinky v laboratorních zvířatech. Skupina těchto in vivo studií zahrnuje systemické a topické modely infekce, modely infekce močového traktu, modely helikobakteriální infekce, včetně vředového onemocnění gastrointestinálního traktu, modely sepse, antibiotiky zprostředkované kolitidy a péče o ránu, bez omezení na tyto příklady. Sloučeniny podle tohoto vynálezu je rovněž možné testovat ve zvířatech za účelem stanovení jejich farmakokinetických profilů, jako je například orální biologická dostupnost, orální absorpce, chemický poločas rozpadu, identifikace metabolitů, stanovení koncentrací v séru v různých časech po podání dané sloučeniny a rychlost vylučování dané sloučeniny.

Zvířecí model systemické bakteriální infekce

Systemické modely infekce jsou popsány v odborné literatuře. Pro testování sloučenin podle tohoto vynálezu je možné použít následující podmínky: Bakterie se 24 hodin pěstují v Muller-Hintonově agaru při teplotě 37 °C. Pro každý experiment se připraví bakteriální suspenze, a to tak, že se 4 až 5 bakteriálních kolonií inokuluje na Muller-Hintonovu živnou půdu (MHB) a tato se následně inkubuje 24 hodin při teplotě 37 °C, čímž je získáno přibližně 10⁹ CFU/mililitr. Samice myší BalbC se získají od společnosti Charles River, SRN. Zvířata se infikují podáním jedné dávky suspenze bakteriální kultury, která odpovídá LDioo (tj . každému zvířeti je podáno 1 χ 10⁸ CFU/ 100 mikrolitrů suspenze), do ocasní žíly. Myši se několikrát denně pečlivě klinicky vyšetřují a zaznamenávají se zřejmé

klinické symptomy a mortalita. Počet přeživších zvířat se sleduje po dobu 6 dní. Azithromicin se rozpustí v 0,5procentním roztoku methocelu ve fyziologickém roztoku a vzniklý roztok se podává orálně. Testované sloučeniny se mikronizují pomocí třecí misky a tloučku a následně se rozpustí v roztoku methocelu ve fyziologickém roztoku s přídavkem 3 procent Ν,Ν-dimethylformamidu (DMF). První dávka se podává 30 minut po infekci a další dávky se podávají každých 12 hodin po dobu následujících 3 dnů.

In vivo testy účinnosti - myší model septikemie způsobené kmenem S.aureus

Účinnost několika sloučenin byla testována na myších modelech ochránění proti infekci S. aureus. Dvě sloučeniny, a to sloučenina číslo 25 a 62, ochránily při orálním podávání 40 procent léčených zvířat před smrtelnou infekcí.

Klinické použití heterocyklíckých sloučenin podle tohoto vynálezu

Sloučeniny podle předmětného vynálezu je možné použít terapeuticky nebo profylakticky při léčení nebo prevenci bakteriálních infekcí a/nebo nemocí.

Předmětný vynález se rovněž týká způsobu narušení vnitřní regulace mikrobiálního růstu nebo respirace u subjektu, který zahrnuje stupeň, ve kterém se uvedenému subjektu podává sloučenina kteréhokoli z obecných vzorců popsaných v tomto textu nebo farmaceutická kompozice zahrnující sloučeninu kteréhokoli z obecných vzorců popsaných v tomto textu. V

jednom provedení se předmětný vynález týká způsobu inhibice mikrobiální nebo bakteriální aktivity u subjektu, který zahrnuje stupeň, ve kterém se uvedenému subjektu podává sloučenina kteréhokoli z obecných vzorců popsaných v tomto textu nebo farmaceutická kompozice zahrnující sloučeninu kteréhokoli z obecných vzorců popsaných v tomto textu. Ve výhodném provedení je uvedeným subjektem člověk nebo zvíře.

V jiném provedení se tento vynález týká způsobu léčby nemoci nebo symptomů onemocnění u subjektu, který zahrnuje stupeň, ve kterém se uvedenému subjektu podává sloučenina kteréhokoli z obecných vzorců popsaných v tomto textu nebo farmaceutická kompozice zahrnující sloučeninu kteréhokoli z obecných vzorců popsaných v tomto textu. Ve výhodném provedení je uvedeným subjektem člověk nebo zvíře.

Infekce a infekční onemocnění jsou způsobeny různými mikroorganismy. Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou, nalézt uplatnění medicinální léčbě infekčních onemocnění bakteriálního původu.

Sloučeniny, které hubí mikroorganismy nebo omezují růst mikroorganismů mohou nalézt uplatnění při léčbě infekcí a infekčních onemocnění. Je známo, že konkrétní bakteriální mikroorganismy jsou spojeny s určitým typem infekce nebo infekčního onemocnění. Příklady bakteriálních infekcí a patogenů, které je nej častěji způsobují, jsou uvedeny v následujících odstavcích.

Skupina infekčních onemocnění horních a dolních cest dýchacích zahrnuje bronchitidu, sinusitidu, pneumonii, bolest

v krku, chronické streptokokové infekce, difterii, akutní epiglotitidu, chřipku, chronickou bronchitidu, záněty středního ucha (otitis media),pneumonii, bronchopneumonii, legionářskou nemoc, atypickou pneumonii, černý kašel a tuberkulosu, bez mezení na uvedené příklady.

Skupina mikroorganismů způsobujících infekce dýchacích cest zahrnuje kmeny S. pyogenes, S. pneumoniae, S. aureus,

H. influenzae, M. catarrhalis, N. meningitidis, B. pertussis, Enterobacteriaceae, anaerobes, Nocardia, Pseudomonas, C. psittaci a C. diphtheriae, bez omezení na uvedené příklady.

Skupina infekcí močového traktu zahrnuje uretritidu, cystitidu, pyelonefritidu (zánět ledvin), asymptomatickou bakterurii, zánět močového měchýře, akutní uretrální syndrom a opakované infekce močového traktu, bez omezení na uvedené příklady.

Skupina mikroorganismů způsobujících infekce močového traktu zahrnuje kmeny E. coli, Próteus, Providentia,

Pseudomonas, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Coag. neg. Staphylococci, Enterococci a C. trachomatis, bez omezení na uvedené příklady.

Skupina kožních infekcí a infekcí ran zahrnuje erythrazmu, panaritium, impetigo, folikulitidu, erysipel, celulitidu a nekrotizující fascitis, bez omezení na uvedené příklady.

Skupina mikroorganismů způsobujících kožní infekce a infekce ran zahrnuje kmeny Streptococci, Staphylococci,

P. aerugínosa, P. acnes, Clostridia, anaerobes, B. fragilis.

Skupina mikroorganismů způsobujících systemické infekce (bakteremie) zahrnuje kmeny Streptococcl, Staphylococci,

Enterobacteriaceae, Pseudomonas, Bacteroides sp. , Neisseria,

H. influenzae, Brucella, Listeria a S. typhi, bez omezení na tyto příklady.

Skupina pohlavně přenosných nemocí bakteriálního původu zahrnuje adnexitidu, cervicitidu, chanchroidu, uretritidu, balanitidu, kapavku, lymphogranuloma venereum, syfilis a ingvinální granulom, bez omezení na tyto příklady.

Skupina mikroorganismů způsobujících pohlavně přenosné nemoci zahrnuje kmeny Chlamydía, N. gonorrhoeae, U. urealyticum, T. pallidium, G. vaginalis, H. ducreyi, C. granulomatis, Streptococcl, Staphylococci a Enterobacteriae, bez omezení na tyto příklady.

Skupina gastrointestinálních infekcí bakteriálního původu zahrnuje infekce pocházející' z potravy, kolitidu, enteritidu, žaludeční vředy, vřed na dvanáctníku, pankreatitidu, infekce žlučníku, choleru a tyfus, bez omezení na tyto příklady.

Skupina mikroorganismů způsobujících gastrointestinální infekce zahrnuje kmeny H. pylori, C. pylori, C. duodeni,

S. typhi, S. paratyphi, V. cholerae, anaerobes, Enterobacteriaceae, Staphylococci a Streptococcl, bez omezení na tyto příklady.

·· ·

Způsoby léčby pacientů

Heterocyklické sloučeniny zde popsaných obecných vzorců je možné podávat pacientovi, a to například za účelem léčby infekce, jako je bakteriální infekce. Heterocyklické sloučeniny podle předmětného vynálezu je možné podávat například ve farmaceuticky přijatelném nosiči, jako je fyziologický roztok, v kombinaci s jinými léčivy a/nebo spolu s vhodnými excipienty. Heterocyklické sloučeniny zde popsaných obecných vzorců mohou být podávány například injekcí, intravenozně, intraarteriálnš, subdermálně, intraperitoneálně, intramuskulárně nebo subkutánně; nebo orálně, bukálně, nasálně, transmukosálně, topicky, v očním nebo ušním farmaceutickém přípravku nebo inhalačně, přičemž uvedená sloučenina se podává v dávce v rozmezí od přibližně 0,001 miligramu/kilogram tělesné hmotnosti do přibližně 100 miligramů/kilogram tělesné hmotnosti, výhodně v dávce od 10 miligramů/dávku do 5000 miligramů/dávku, která se podává každé 4 hodiny až každých 120 hodin, nebo podle požadavků konkrétního léčiva. Způsoby podle tohoto vynálezu zahrnují podávání takového množství sloučeniny podle předmětného vynálezu nebo kompozice obsahující sloučeninu podle předmětného vynálezu, které je účinné pro dosažení požadovaného nebo uváděného účinku. V obvyklém případě se farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu podávají přibližné lkrát až přibližně 6krát denně nebo, alternativně, ve formě kontinuální infúze. Uvedené podávání je možné použít jako trvalou nebo akutní terapii. Množství aktivní složky, které je možné kombinovat s nosnými materiály za vzniku jediné dávkové formy, se mění podle léčeného hostitele a podle konkrétního způsobu podávání. Typický farmaceutický přípravek podle tohoto vynálezu obsahuje od přibližně 5 hmotnostních

♦ · ·	• 0	• ·	0 0 0
• · ·	•	• · ·	0 0 0 0
• · · 0 0	• ·	• ·	0 0 0

procent do přibližně 95 hmotnostních procent aktivní složky. V alternativním případě obsahují uvedené farmaceutické přípravky od přibližně 20 procent do přibližně 80 procent aktivní sloučeniny.

Jak je zkušenému odborníkovi zřejmé, může být třeba pacientovi podávat nižší nebo vyšší než shora popsané dávky sloučenin podle tohoto vynálezu. Konkrétní velikost dávky sloučeniny podle předmětného vynálezu a léčebné režimy pro konkrétního pacienta jsou závislé na různých faktorech, jejichž skupina zahrnuje účinnost konkrétně použité sloučeniny, věk pacienta, tělesnou hmotnost pacienta, celkový zdravotní stav pacienta, pohlaví pacienta, dietu pacienta, dobu podávání sloučeniny, rychlost vylučování sloučeniny, kombinaci jiných léčiv, závažnost a průběh dané nemoci, daného stavu nebo symptomů, pacientovu dispozici k danému onemocnění, danému stavu nebo symptomům a posouzení ošetřujícího lékaře.

Po zlepšení pacientova stavu může být v případě nutnosti podávána udržovací dávka sloučeniny, kompozice nebo kombinace podle předmětného vynálezu. Později je možné v závislosti na symptomech snížit velikost dávky nebo frekvenci podávání dané sloučeniny nebo obojí, a to na požadovanou úroveň, která postačuje pro udržování zlepšeného stavu pacienta, a když uvedené symptomy ustoupí na požadovanou úroveň může být daná léčba úplně ukončena. Avšak u pacientů může být po opakovaném výskytu symptomů onemocnění třeba aplikovat dlouhodobou intermitentní léčbu.

V alternativním provedení se předmětný vynález týká způso bů léčení, prevence nebo tlumení symptomů nemoci u subjektu, • · · · · ·· · · · • · · · ·· · · · · ··· ···· · · · · • · · · · ·· ··· ····· • ·· · · ·· ·· ·· · který zahrnuje stupeň, ve kterém se uvedenému subjektu podávají shora popsané farmaceutické kompozice a kombinace. Ve výhodném provedení je uvedeným subjektem člověk. Pokud farmaceutická kompozice podle tohoto vynálezu zahrnuje jako aktivní složku pouze sloučeninu podle předmětného vynálezu, mohou uvedené způsoby dále zahrnovat stupeň, ve kterém se uvedenému subjektu podává další terapeutické činidlo, jako jsou například sulfa-léčiva nebo sulfonamidy (jejichž příkladem je sulfamethoxazol), makrolidová antibiotika (jejichž příkladem je klaritromycin), inhibitory protonové pumpy (jejichž příkladem je omeprazol), rifamyciny (jako je například rifampin), aminoglykosidy (jejichž příkladem je streptomycín, gentamycin, tobramycin), peniciliny (jako je například penicilín G, penicilín V, tikarcilin), inhibitory β-laktamasy, cefalosporiny (jako je například cefazolin, cefaklor, ceftazidim) a antimykobakteriální činidla (jako je například isoniazid, ethambutol). Další vhodná činidla jsou uvedena ve statích a publikacích týkajících se infekčních onemocnění, jejichž skupina zahrnuje například publikaci Principles and Practice of Infectious Diseases, editoři G. L. Mandeli a spolupracovníci, 3. vydání, Churchhill Livingstone, New York, (1990) . Uvedené další terapeutické činidlo může být subjektu podáno před, souběžně s nebo po podání farmaceutické kompozice obsahující sloučeninu kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu.

Farmaceutické kompozice podle předmětného vynálezu zahrnují sloučeninu zde popsaných obecných vzorců nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl; další činidlo vybrané ze skupiny zahrnující protirakovinové činidlo, antivirové činidlo, antifungální činidlo, antibiotikum, inhibitory protonové pumpy; a

IQ

farmaceuticky přijatelný nosič, pomocnou látku nebo vehikulum. Alternativní farmaceutické kompozice podle předmětného vynálezu zahrnují sloučeninu zde popsaných obecných vzorců nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl; a farmaceuticky přijatelný nosič, pomocnou látku nebo vehikulum. Uvedené kompozice mohou případně rovněž zahrnovat další terapeutická činidla, jejichž skupina zahrnuje například další činidlo vybrané ze skupiny zahrnující protirakovinové činidlo, antivirové činidlo, antifungální činidlo, antibiotikum; a jakýkoli farmaceuticky přijatelný .nosič, pomocnou látku nebo vehikulum. V alternativním případě zahrnují farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu sloučeninu kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl; a farmaceuticky přijatelný nosič, pomocnou látku nebo vehikulum. Uvedené kompozice mohou případně zahrnovat další terapeutická činidla, jejichž skupina zahrnuje například další činidlo vybrané ze skupiny zahrnující protirakovinové činidlo, antimikrobiální činidlo, antivirové činidlo, antifungální činidlo, inhibitor protonové pumpy a antibiotikum. Zde popsané farmaceutické kompozice obsahují sloučeniny obecných vzorců popsaných v tomto textu a další terapeutická činidla, pokud jsou tato v nich přítomna, v množstvích, jež jsou účinná pro dosažení modulace mikrobiálních nebo bakteriálních hladin.

Výrazem „farmaceuticky přijatelný nosič nebo pomocná látka se rozumí nosič nebo pomocná látka, které mohou být podávány pacientovi spolu se sloučeninou podle tohoto vynálezu, přičemž nelikvidují farmakologický účinek sloučeniny podle tohoto vynálezu a nejsou toxické při podání v dávkách dostatečných pro dodání terapeuticky účinného množství dané sloučeniny podle tohoto vynálezu do organismu.

• ·· ·« ·· ·· · tt · · ···· ··♦ ··· ···♦ · · · · • * · · · · · · · · ····· • · · ···· ·· · ··· · · ·· ·· ·· ·

Skupina farmaceuticky přijatelných nosičů, pomocných látek a vehikul, které mohou být použity ve farmaceutických kompozicích podle tohoto vynálezu, zahrnuje měniče iontů, oxid hlinitý, stearát hlinitý, lecitin, samoemulgační systémy pro dopravu léčiv (SEDDS), jako je d-a-tokoferolpolyethylenglykol 1000 sukcinát, povrchově aktivní látky používané ve farmaceutických dávkových formách, jako jsou produkty typu Tween nebo podobné polymerní matrice pro dopravu léčiv, sérové proteiny, jako je lidský sérový albumin, pufrovací látky, jako jsou fosfáty, glycin, kyselinu sorbovou, sorbát draselný, směsi parciálních glyceridů nasycených rostlinných mastných kyselin, vodu, soli neboli elektrolyty, jako je protaminsulfát, hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidní oxid křemičitý, trikřemičitan hořečnatý, polyvinylpyrrolidon, látky na bázi celulosy, polyethylenglykol, sodnou sůl karboxymethylcelulosy, polyakryláty, vosky, polyethylen-polyoxypropylenové blokové polymery, polyethylenglykol a lanolin, bez omezení na tyto příklady. Za účelem usnadnění dodávání sloučenin zde popsaných obecných vzorců do organismu je rovněž možné výhodně použít cyklodextriny, jako je a-, β- a γ-cyklodextrin, nebo jejich chemicky modifikované deriváty, jako jsou hydroxyalkylcyklodextriny, včetně 2- a 3-hydroxypropyl-p-cyklodextrinů, nebo další rozpuštěné deriváty.

Farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu je možné podávat orálně, parenterálně, pomocí inhalačního spreje, topicky, rektálně, nasálně, bukálně, vaginálně nebo prostřednictvím implantovaného zásobníku, výhodně se pak farmaceutická kompozice podle tohoto vynálezu podává orálně nebo injekčně.

·· · • ·

9 9 4 4 ·· · « · · • · · · 9 9 9 9 4 • · · 4 4

Farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu mohou obsahovat jakékoli obvykle používané netoxické, farmaceuticky přijatelné nosiče, pomocné látky nebo vehikula. V některých případech může být pH dané kompozice upraveno pomocí farmaceuticky přijatelných kyselin, bází nebo pufrů, a to za účelem zvýšení stability sloučeniny nebo její formy pro dodání do organismu obsažené v uvedené kompozici. Výraz „parenterální tak, jak je použit v tomto textu, v sobě zahrnuje subkutánní, intrakutánní, intravenózní, intramuskulární, intraartikulární, intraarteriální, intrasynoviální, íntrasternální, intratekální, intralezionální a intrakraniální injekční nebo infúzní techniky.

Farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu mohou mít formu sterilního injikovatelného přípravku, jako je například sterilní injikovatelná vodná nebo olejnatá suspenze. Tyto suspenze je možné formulovat v souladu s postupy, které jsou v dané oblasti techniky známé a při kterých se používají vhodná dispergační nebo smáčecí činidla (jako je například činidlo Tween 80) a suspendační činidla. Uvedeným sterilním injikovatelným přípravkem může rovněž být sterilní injikovatelný roztok nebo suspenze v netoxickém, parenterálně přijatelném ředidle nebo rozpouštědle, jako je například sterilní roztok v 1,3-butandiolu. Mezi uvedená přijatelná vehikula a rozpouštědla, která je možné použít podle tohoto vynálezu, patří manitol, voda, Ringerův roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Dále se jako rozpouštědlo nebo suspendační médium běžně používají sterilní netuhnoucí oleje. Za tímto účelem je možné použít jakýkoli nedráždivý netuhnoucí olej, včetně syntetických mono- a diglyceridú. Pro přípravu injikovatelných přípravků je možné použít mastné kyseliny, jako je kyselina • ·

9« ·9 ·· · • · · · · · · • 9 99 9 · · ·

9 9 9 · · 9 9 · · ·

9 9 9 9 9 9 9 9 9 999 99 9999 99 » olejová a její glyceridové deriváty, a rovněž tak přírodní farmaceuticky přijatelné oleje, jako je olivový olej nebo ricinový olej, a to zejména v jejich polyoxyethylovaných formách. Tyto olejové roztoky nebo suspenze mohou rovněž obsahovat ředidlo nebo dispergační činidlo, kterým je alkohol s dlouhým řetězcem, nebo karboxymethylcelulosu nebo podobná dispergační činidla, která se běžně používají při formulování farmaceuticky přijatelných dávkových forem, jako jsou emulze a/nebo suspenze. Pro formulování kompozic podle tohoto vynálezu je možné použít i další běžně používané povrchově aktivní látky, jako jsou činidla typu Tween nebo Spán, a/nebo další podobná emulgační činidla nebo činidla pro zvýšení biologické dostupnosti, která se běžně používají při výrobě farmaceuticky přijatelných pevných, kapalných nebo jiných dávkových forem.

Farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu mohou být podávány orálně v jakékoli orálně přijatelné dávkové formě, jejichž skupina zahrnuje kapsle, tablety, emulze a vodné suspenze, disperze a roztoky, bez omezení na uvedené příklady. V případě tablet pro orální použití patří mezi běžně používané nosiče laktosa a kukuřičný škrob. Do uvedených tablet se také obvykle přidávají lubrikační činidla, jako je stearát hořečnatý. Mezi vhodná ředidla pro použití v kapslích pro orální podávání patří laktosa a sušený kukuřičný škrob. Pokud se orálně podávají vodné suspenze a/nebo emulze, může být daná aktivní složka suspendována nebo rozpuštěna v olejové fázi a smíchána s emulgačními a/nebo suspendačními činidly. V případě potřeby mohou být do těchto farmaceutických kompozic přidána určitá sladící a/nebo chuťová a/nebo barvicí činidla.

• ·

Farmaceutické kompozice podle předmětného vynálezu se mohou rovněž podávat ve formě rektálních čípků. Tento typ kompozic je možné připravit smícháním sloučeniny podle tohoto vynálezu s vhodným nedráždivým excipientem, jenž je pevný při teplotě místnosti, avšak který je kapalný při rektální teplotě, takže v rektu dochází k jeho rozpuštění a uvolnění daných aktivních složek. Skupina takovýchto materiálů zahrnuje kakaové máslo, včelí vosk a polyethylenglykoly, bez omezení na tyto příklady.

Topické podávání farmaceutických kompozic podle tohoto vynálezu je zvlášť vhodné pokud požadovaná léčba zahrnuje plochy nebo orgány snadno přístupné topickou aplikací. Pro topickou aplikaci na kůži by měla být farmaceutická kompozice podle tohoto vynálezu formulována ve formě vhodné masti obsahující aktivní složky suspendované nebo rozpuštěné v nosiči. Skupina nosičů pro topické podávání sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnuje minerální olej, kapalný petrolej, bílou vazelínu, propylenglykol, polyoxyethylenpolyoxypropylenovou sloučeninu, emulgační vosk a vodu, bez omezení na tento výčet. V alternativním případě je možné farmaceutickou kompozici podle tohoto vynálezu formulovat ve formě vhodného pleťového roztoku nebo krému obsahujícího aktivní sloučeninu suspendovanou nebo rozpuštěnou v nosiči spolu s vhodnými emulgačními činidly. Skupina vhodných nosičů zahrnuje minerální olej, monostearát sorbitanu, polysorbát 60, cetylesterový vosk, cetearylalkohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol a vodu. Farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu mohou být topicky aplikovány rovněž do spodní části intestinálního traktu, a to ve formě rektálních čípků nebo ve vhodné klystýrové formě. Do »· ·

• 9 ·

· • *♦ ·· · · • * · • · ·

9 1 • ·· · · ·

• 9 9

9 19

1 t ···« • 9 1

1 rozsahu tohoto vynálezu spadají i farmaceutické kompozice ve formě topických transdermálních náplastí.

Farmaceutické kompozice podle předmětného vynálezu mohou být podávány ve formě nasálního aerosolu nebo inhalaci. Tento typ kompozic se připravuje v souladu s postupy, které jsou v oboru formulování farmaceutických kompozic dobře známé, přičemž mohou být připraveny ve formě roztoků ve fyziologickém roztoku s použitím benzylalkoholu nebo jiných vhodných konzervačních látek, látek podporujících absorpci za účelem zvýšení biologické dostupnosti, fluoruhlovodíků a/nebo rozpouštěcích nebo dispergačních činidel, jež jsou v dané oblasti techniky známé.

Sloučeniny a kompozice podle tohoto vynálezu jsou vhodné pro použití jako sterilizační činidla, antiseptika, pomocné látky (adjuvans) v obkladech ran (např. v bandážích) a jako pomocné látky při metodách čištění ran (žaludeční sondy atd.).

Pokud sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnují kombinaci sloučeniny kteréhokoli ze zde popsaných obecných vzorců a jednoho nebo více dalších terapeutických nebo profylaktických činidel, měla by každá z těchto složek, tj. sloučenina podle tohoto vynálezu a uvedené další činidlo, být přítomna v dávce odpovídající přibližně 1 až 100 procentům, výhodněji přibližně 5 až 95 procentům dávky normálně podávané při monoterapeutickém léčebném režimu. Uvedená další činidla se mohou podávat odděleně od sloučenin podle tohoto vynálezu jakožto část vícedávkového léčebného režimu. V alternativím případě mohou uvedená činidla být částí jediné dávkové formy a mohou

být smíchána se sloučeninami podle tohoto vynálezu v jediné farmaceutické kompozici.

Jako příklad potenciální aplikace tohoto vynálezu při kombinované terapii je možné uvést použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s makrolidovým antibiotikem a inhibitorem protonové pumpy pro léčbu gastritidy a souvisejících onemocnění způsobených kmenem Helicobacter pylori; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s antibakteriálními činidly (jako je například sulfamethoxazol, ciprofloxazin a amoxicilin) pro léčbu infekcí močového traktu; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s rifamyciny pro léčbu stafylokokových infekcí; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s rifamyciny, isoniazidem, ethambutolem nebo aminoglykosidy pro léčbu mykobakteriálních infekcí; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s tikarcilinem, gentamycinem nebo tobramycinem pro počáteční léčbu neutropenických pacientů s předpokládanou infekcí; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s peniciliny nebo aminoglykosidy pro léčbu enterokokové endokarditidy; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s antibiotiky pro léčbu intraperitoneálních, pánevních nebo jiných polymikrobiálních infekcí; použití sloučeniny kteréhokoli obecného vzorce popsaného v tomto textu v kombinaci s jinými inhibitory DHFR (jako je například trimethoprim a inhibitory DHFR zmíněné v tomto textu).

• · · · · · · · ··· • · ··· ·· ··· ····· • · · · · · · · · « • ·· · · ·· ·· ·· ·

Předmět vynálezu bude dále popsán pomocí následujících příkladů. Uvedené příklady slouží jen pro ilustraci a nijak neomezují rozsah tohoto vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Údaje týkající se kapalinové chromatografíe byly získány pomocí kapalinového chromatografu Hewlett-Packard (HP)

Series 1090, který byl připojen k detektoru s diodovým polem,, přičemž vlastní chromatografíe byla prováděna za následujících podmínek: kolona Restek Allure C-18; velikost částic 5 mikrometrů; délka kolony 150 milimetrů; průměr kolony 4,6 milimetru; průtok 1 mililitr/minutu; gradientově eluce směsí 95 procent vody (obsahující 0,1 hmotnostního procenta kyseliny trifluooctové (TFA))/5 procent acetonitrilu (obsahující 0,1 hmotnostního procenta kyseliny trifluooctové (TFA)) až 100 procent acetonitrilu (obsahujícího 0,1 hmotnostního procenta kyseliny trifluoroctové (TFA)), přičemž k uvedené změně polarity došlo během 8 minut, s následnou 3minutovou izokratickou elucí kolony; detekční vlnová délka 254 nanometrů. Hmotnostní spektra byla měřena buď na zařízení Agilent 1100 LC/MS nebo na LC/MS systému Thermofinigan AQA/Gilson.

¹H NMR a ¹³C NMR spektra byla měřena na zařízení Bruker AC-300 MHz. Střednětlaká mžiková chromatografíe byla prováděna na systému Combiflash SglOOc od společnosti Isco, lne. Chromatografíe na tenké vrstvě byla prováděna na plastových TLC platech EM Science silica gel 60 F254. Teploty tání byly měřeny v otevřených kapilárách v zařízení Melttemp II. Pro detekci sloučenin na TLC platech bylo použito ultrafialové záření. Reakční činidla použitá při jednotlivých reakcích byla pořízena od společností Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI,

USA), Sigma Chemical Co. (Saint Louis, MO, USA), Fluka Chemical Corp. (Milwaukee, WI, USA), Fisher Scientific (Pittsburg, PA, USA), TCI America (Portland, OR, USA), Transworld Chemicals, lne. (Rockville, MD, USA), Maybridge Chemical Ltd. (Londýn, Velká Británie) nebo od společnosti Lancaster Synthesis (Windham, NH, USA) .

Syntéza pterinových analogů

Obecně je možné β-substituované analogy pterinu připravit reakcí aktivovaného reakčního činidla, jako je 6-chlormethylpterin, s nukleofily, jako jsou aminy (např. amin obecného vzorce HNR'R'', kterým může být amin obecného vzorce HNHY nebo HNR¹⁶Y) . Jakožto syntetické reagenty pro přípravu 6-substituovaných analogů je možné využít další funkční skupiny vázané v poloze 6 pterinu, jako je brommethylová skupina, jodmethylová skupina, hydroxymethylová skupina, aktivovaná hydroxymethylová skupina, karbonylová skupina (např. ketoskupina nebo aldehydová skupina), aktivovaná karbonylová skupina (např. esterová skupina, amidová skupina nebo anhydridová skupina), hydroxylové skupina, atom chloru, atom bromu nebo methylová skupina.

Syntéza 6-(3,5-dichlorfenyl)aminomethyl-2, 4-diaminopteridinu

K roztoku 324 miligramů (2 milimoly) 3,5-dichloranilinu v 5 mililitrech suchého Ν,Ν-dimethylformamidu (DMF) bylo přidáno 100 miligramů (0,4 milimolu) hydrochloridu 2,4-diaminopteridinu. Reakční nádoba byla propláchnuta dusíkem, těsně uzavřena a umístěna na 3 dny do hliníkového topného bloku, jehož teplota byla 85 °C. Rozpouštědlo bylo odpařeno na rotační odparce. Ke zbytku bylo přidáno 2 x 15 mililitrů ethanolu a ze vzniklé směsi bylo vždy na rotační odparce odpařeno rozpouštědlo. K získanému surovému produktu byly přidány 3 mililitry vody, 0,3 mililitru kyseliny octové (HOAc) a 0,1 mililitru lmolární kyseliny chlorovodíkové, takže pH směsi bylo přibližně 2. Uvedená směs byla odstředěna za účelem odstranění nerozpustných nečistot. Supernatant byl izolován a pomocí přibližně 0,1 mililitru lmolárního roztoku hydroxidu sodného bylo jeho pH upraveno na hodnotu přibližně 5, čímž došlo k vysrážení produktu. Vysrážený produkt byl izolován, promyt 3 mililitry ethanolu a vysušen ve vysokém vakuu, čímž byl získán přečištěný produkt. HPLC R_t - 6,1 minuty, MS m/z.

Měřením nukleární magnetické rezonance (NMR) bylo získáno spektrum odpovídající struktuře požadovaného produktu.

K roztoku 3,35 gramu (4,85 milimolů) 3-amino-4-methylbenzotrifluoridu v 10 mililitrech Ν,Ν-dimethylformamidu (DMF) bylo přidáno 1,57 gramu (6,35 milimolů) hydrochloridu 2,4-diamino-6-chlormethylpteridinu a 1,76 gramu (12,7 milimolů) uhličitanu draselného. Reakční směs byla promyta argonem a zahřívána za intenzivního míchání 24 hodin v těsně uzavřené lékovce na teplotu 60 až 65 °C. Následně byla reakční směs ponechána zchladnout na teplotu místnosti a vylita do přebytku 0,5molární kyseliny chlorovodíkové (jejíž objem činil přibližně 120 mililitrů). Vzniklá směs (jejíž pH bylo 0 až 1; měřeno pomocí pH papírku) byla '15 minut míchána a následně přefiltrována. Izolovaná sraženina byla promyta 5procentní kyselinou chlorovodíkovou, směsí methanol/dichlormethan a diethyletherem. Produkt byl vysušen ve vakuu, čímž bylo získáno 170 miligramů požadované sloučeniny ve formě žluté pevné látky. Získaný produkt byl podle analýzy vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii s reverzními fázemi (RP-HPLC) čistý, R_t = 3,25 minuty, m/z = 350 (poz.).

···· ···· · · · ··· ♦··· 9 9 9 9 • 9 999 9 9 999 9999 ···.·· ·· · · ··

Příprava sloučeniny 63

K roztoku 3,70 gramu (20,8 milimolu) 4-chlor-l-naftylaminu v 10 mililitrech N,N-dimethylformamidu (DMF) bylo přidáno 1,58 gramu (6,39 milimolu) hydrochloridu 2,4-diamino-6-chlormethylpteridinu a 1,81 gramu (13,0 milimolu) uhličitanu draselného. Reakční směs byla promyta argonem a zahřívána 34 hodin v těsně uzavřené lékovce na teplotu 60 až 65 °C. Následně byla reakční směs ponechána zchladnout na teplotu místnosti a vylita do přebytku 0,5molární kyseliny chlorovodíkové. Pomocí hydroxidu amonného byla pH získané směsi upraveno na hodnotu 5 (měřeno pomocí pH papírku) a poté byla směs přefiltrována. Izolovaná sraženina byla promyta vodou, směsí methanol/dichlormethan a diethyletherem. Pevná látka byla suspendována v diethyletheru a ke směsi bylo přidáno 6 mililitrů 2molárního roztoku chlorovodíku v diethyletheru. Vzniklá směs byla těsně uzavřena v reakční nádobě a 30 minut míchána. Odpařením s následným vysušením ve vakuu byl získán produkt ve formě pevné hnědé látky, jehož čistota podle analýzy vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) byla přibližně 90 procent, přičemž byla zároveň zjištěna přítomnost výrazného množství nečistot.

Uvedená pevná hnědá látka byla dále přečištěna tak, že byla suspendována ve 120 mililitrech 0,5molární kyseliny chlo82

• · • · ·· · • * 0 • · · · · · · · rovodíkové a ke vzniklé soli bylo s cílem pokusit se o rozpuštění pevné látky přidáno přibližně 5 mililitrů koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Navzdory vysoké kyselosti (pH < 0, měřeno pomocí pH papírku) zůstalo výrazné množství látky nerozpuštěno. Uvedená sraženina byla izolována a promyta vodou, směsí methanol/dichlormethan a diethyletherem. Produkt byl vysušen, čímž bylo získáno 1,33 gramu požadovaného produktu ve formě červené pevné látky, který měl podle vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) vysokou čistotu, R_t = 3,39 minuty; m/z = 353 (poz.).

Syntéza pyrimidopyrimidinových analogů

Příprava sloučeniny 25

Směs 2,8 9 gramu (14,5 milimolu) pyrimidinu 11, 2,87 gramu (15 milimolů) methylaminu la a 2,5 mililitru (18 milimolů) triethylaminu ve 25 mililitrech 2-methoxyethanolu byla 2 hodiny míchána při teplotě 80 °C. Reakční směs byla ponechána zchladnout na teplotu místnosti a bylo z ní odpařeno rozpouštědlo za vzniku olej ovitého zbytku. K tomuto zbytku bylo přidáno 30 mililitrů ethylacetátu a vzniklý roztok byl třikrát promyt vodou a následně vysušen nad bezvodým síranem sodným.

• ·

Odpařením byl získán olejovitý zbytek, jenž byl následně přečištěn krystalizaci ze směsi diethylether/hexan. Bylo získáno

3,95 gramu produktu lb ve formě bílého prášku.

K roztoku 3,71 gramu sloučeniny la ve 40 mililitrech 2-methoxyethanolu bylo přidáno 24 mililitrů lmolárního roztoku guanidinu v methanolu a 16 mililitrů 1,5molárního roztoku CH₃ONa v methanolu. Vzniklá směs byla míchána 12 hodin při teplotě 140 °C v aparatuře vybavené Dean-Starkovým nástavcem pro odstraňování methanolu. Poté byla reakční směs ochlazena a odpařena ve vakuu za vzniku olej ovitého zbytku, jenž byl rozpuštěn ve 30 mililitrech methanolu. K získanému roztoku bylo přidáno 50 mililitrů vody, čímž došlo k vysrážení produktu. Uvedený produkt byl poté přečištěn překrystalováním z methanolu s následným trojím mícháním v methanolu. Bylo získáno 920 miligramů požadovaného produktu ve formě bílého prášku. Na základě analýzy vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií bylo stanoveno, že čistota tohoto produktu byla 98,52 procenta.

Příprava sloučeniny 62

Pro přípravu sloučeniny 62 byl použit podobný postup jako pro přípravu sloučeniny 25. Bylo získáno 860 miligramů konec• · · • ···« ného produktu ve formě bílého prášku, jehož čistota podle ana lýzy vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii byla 98,80 procenta .

·· ·

Postupy pro přípravu sloučeniny 33

Příprava sloučeniny 1

K roztoku 4,25 gramu (27,2 milimolu) naftaldehydu ve 30 mililitrech suchého etheru, který byl umístěn v ledové láz ni, bylo pomalu přidáno 13 mililitrů (3 moly) roztoku ethylmagnesiumbromidu v etheru. Směs byla míchána dalších 30 minut při teplotě místnosti a následně rozložena 40 mililitry lmolárního roztoku kyseliny chlorovodíkové. Organická vrstva byla promyta 20 mililitry vody, 2 x 20 mililitry nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, 20 mililitry solanky a poté vysušena nad bezvodým síranem sodným. Odpařením této organické vrstvy byl získán surový produkt jL, který byl bez dalšího přečištění použit v následujícím reakčním stupni.

Příprava sloučeniny 2

Surový produkt _1 byl rozpuštěn ve 30 mililitrech acetonu a ke vzniklé směsi, jež byla umístěna v ledové lázni, bylo pomalu přidáváno Joneovo činidlo až do trvale hnědého zabarvení reakční směsi. Roztok byl dále 15 minut míchán při teplotě místnosti a poté k němu bylo přidáno 5 mililitrů isopropylalkoholu. Po přidání 50 mililitrů ethylacetátu byla výsledná směs promyta 30 mililitry vody, 2 x 30 mililitry nasyceného roztoku hydrogenuhličitanů sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného a organická vrstva byla vysušena nad bezvodým síranem sodným. Odpařením organických rozpouštědel byl získán olejovitý zbytek, který byl přečištěn chromatografií na sloupci silikagelu, čímž bylo získáno 4,01 gramu ketonu 2.

Příprava sloučeniny 3

Ke směsi 4,01 gramu ketonu 2 a 16,3 mililitru (2 moly) methylaminu v methanolu bylo přidáno 1,61 gramu kyanoborohydridu sodného a 160 mililitrů chloridu zinečnatého. Vzniklá směs byla míchána přes noc při teplotě 50 °C a následně rozložena Imolární kyselinou chlorovodíkovou. Po odstranění většiny methanolu ve vakuu byl zbytkový roztok extrahován 2 x 15 mililitry dichlormethanu. Hodnota pH vodné vrstvy byla upravena pomocí 2molárního roztoku hydroxidu sodného na přibližně 9 .a následně byl produkt extrahován 3 x 15 mililitry dichlormethanu. Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem chloridu sodného a vysušeny nad bezvodým síranem sodným. Odpařením rozpouštědla bylo získáno 3,54 gramu sloučeniny 3.

·· • · ♦ · • · • fc • 9 ·*··

Příprava sloučeniny 4

Směs 2,8 9 gramu (14,5 milimolu) pyrimidinu 11, 3,54 gramu (15 milimolů) sloučeniny 3 a 2,5 mililitru (18 milimolů) triethylaminu ve 25 mililitrech 2-methoxyethanolu byla 2 hodiny míchána při teplotě 80 °C. Výsledná směs byla ochlazena na teplotu místnosti a odpařením rozpouštědla byl získán olejovitý zbytek. Tento zbytek byl rozpuštěn ve 30 mililitrech ethylacetátu a vzniklý roztok byl třikrát promyt vodou a vysušen nad bezvodým síranem sodným. Odpařením roztoku byl získán olejovitý zbytek, který byl přečištěn chromatografií na sloupci silikagelu, čímž bylo získáno 3,95 gramu produktu £ ve formě bílého prášku.

Příprava sloučeniny 33

K roztoku 3,60 gramu sloučeniny 4_ ve 40 mililitrech 2-methoxyethanolu bylo přidáno 24 mililitrů lmolárního roztoku guanidinu v methanolu a 16 mililitrů l,5molárního roztoku CH₃ONa v methanolu. Směs byla 12 hodin míchána při teplotě 140 °C, přičemž během této doby z ní byl pomocí Dean-Starkova nástavce odstraňován methanol. Poté byla reakční směs ponechána zchladnout a odpařena ve vakuu, čímž byl získán olejovitý zbytek, jenž byl rozpuštěn ve 30 mililitrech methanolu.

K uvedenému roztoku bylo pro vysrážení produktu přidáno 50 mililitrů vody. Vysrážený produkt byl následně přečištěn krystalizací z methanolu a překrystalovaný produkt byl třikrát míchán v methanolu. Tímto postupem bylo získáno 1,95 gramu produktu ve formě bílého prášku. Čistota tohoto produktu byla podle analýzy vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) vyšší než 99 procent.

• ftft ·» ftft ftft ft ···· · · · v ftftft

4 4 4 · ftft «ftftft ·· · · · ftft · · · · ftftftft • ftft ftftftft ftft ft

Ačkoli byl předmětný vynález popsán ve spojení s jeho podrobným popisem, je třeba výše uvedený popis chápat jen jako ilustrativní a nijak neomezující rozsah předmětného vynálezu, který je definován následujícími patentovými nároky. Další aspekty, výhody a modifikace vyplývající nebo provedené na základě předcházejícího textu spadají do rozsahu následujících patentových nároků.

Claims

4 v

PATENTOVÉ NÁROKY

• · · • · · · • · · • · · • · ·· • · · · • · · • · · · · • · · · · · • · · · · • · · · • · ·

1.

Sloučenina obecného vzorce (I) nebo (II) nebo (III) (I) (II) kde

A představuje atom dusíku, skupinu CH, nebo skupinu CR¹⁵;

R¹⁴ představuje skupinu -(CH₂)_n~X-Y, ve které n je číslo 1,
2,
3, 4, 5 nebo 6;

X představuje atom kyslíku, skupinu NH, nebo skupinu NR¹⁵; a

Y představuje arylovou skupinu nebo heteroarylovou skupinu, přičemž každá skupina Y může být případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶;

každá ze skupin R¹⁵ představuje nezávisle nižší alkylovou skupinu;

každá ze skupin R¹⁶ představuje nezávisle atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendi• · · · • · · · · ··· ·· ·· ·· oxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu S (0) 2NR¹⁷R¹⁷, skupinu S(O)2R¹⁷, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰;

každá ze skupin R¹⁷ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylové část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C (0) NR²¹R²¹r skupinu S(O)₂NR²¹R²¹ a skupinu S(O)₂R²¹;

každá ze skupin R¹⁸ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylo90 ····· ·· ·· ·· · vou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(O)NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹;

každá ze skupin R¹⁹ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou • 4 ·· 4 4 4 · · • · · 4 4 · · *··
4 444 44 444 44444

44444 44 44 44 4 skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu

C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C (0) NR²¹R²¹, skupinu

S(O)₂NR²¹R²¹ a skupinu S(O)₂R²¹;

každá ze skupin R²⁰ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C (0) NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹a skupinu S(O)2R²¹; a každá ze skupin R²¹ představuje nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu, ve kterých může být arylová nebo heteroarylová část případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyano·· ···· ft··· • ftftft ·· ftftft ftft··· ····· ftft ftft ftft · skupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylo vou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou sku pinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu a heteroarylalkoxylovou skupinu.

2. Sloučenina atom dusíku. podle nároku 1, ve které A představuj e 3. Sloučenina podle nároku 1, ve které n je rovno 1. 4. Sloučenina podle nároku i, ve které Y představuj e

fenylovou skupinu, která je případně nezávisle substituo váná 1 až 4 substituenty R¹⁶.
5. Sloučenina podle nároku 3, ve které X představuje atom kyslíku.
6. Sloučenina podle nároku 5, ve které A představuje atom dusíku.
7. Sloučenina podle nároku 6, ve které Y představuje fenylovou skupinu, která je případně nezávisle substituo váná 1 až 4 substituenty R¹⁶.
8.

Sloučenina podle nároku 7, skupinu obecného vzorce ve které Y představuje

R'⁶

R¹⁶
9. Sloučenina podle nároku 8, ve které je každá skupina

R¹⁶ nezávisle vybraná ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰.
10. Sloučenina podle nároku 9, ve které Y představuje skupinu vzorce
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.

Sloučenina podle nároku 5, ve které Y představuje fenylovou skupinu, která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶.

Sloučenina podle nároku 11, ve je uvedená fenylová skupina nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶.

Sloučenina podle nároku 3, ve které X představuje skupinu NH nebo skupinu NR¹⁵, přičemž R¹⁵ představuje methylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 13, ve které A představuje atom dusíku.

Sloučenina podle nároku 14, ve které Y představuje fenylovou skupinu, která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶.

Sloučenina podle nároku 15, ve které Y představuje fenylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 15, ve které je každá skupina R¹⁶ nezávisle vybraná ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, hetero• · arylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰.
18.

Sloučenina podle nároku 17, kterou je

HO.

.NOj

HjN'

H₂N‘

N‘ ‘N

CH₃ •NOj • 9 ·9 • 9

99 9
19.
20.
21.
22.
23.

9 9 9 9 99 9 9 9 9

9 999 .99 999 9 9 999

9 9 9 9 9 9 · · · • 9 9 9 99 9 9 9

Sloučenina podle nároku 17, ve které každý substituent R¹⁶ představuje skupinu obecného vzorce C(O)OR¹⁸.

Sloučenina podle nároku 19, ve které každý substituent R¹⁸ představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 20, ve které každý substituent R¹⁸ představuje methylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 17, ve které každý substituent R¹⁶ představuje skupinu obecného vzorce C(O)NR¹⁹R²⁰.

Sloučenina podle nároku 22, kterou je

H • * která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každá skupina R¹⁶ je vybraná ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, • ftft ·* ·· ·· · • ftft 4 4 · · · · ftft, ftftft · · ·· 4 9 4 9

9 9 9 · 9 4 9 4 4 9 · ftft·· • ftft ftftftft ftft « ··· ftft ·· ·· ftft 4

25.

alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu C(O)NR¹⁹R²⁰.

Sloučenina podle nároku 24, ve které Y představuje skupinu vzorce

26.

27.

Sloučenina podle nároku 13, ve které Y představuje fenylovou skupinu, která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶.

Sloučenina podle nároku 13, ve které Y představuje skupinu obecného vzorce která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁵, přičemž každá skupina R¹⁶ je vybraná ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxy99

28.

29.

30.

31.

alkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)OR¹⁸, skupinu C(O)NH₂ a skupinu C (0) NR¹⁹R²⁰.

Sloučenina podle nároku 4, ve které skupina A představuje atom dusíku.

Sloučenina podle nároku 4, ve které Y představuje fenylovou skupinu, která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶.

Sloučenina podle nároku 4, ve které Y představuje fenylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 1, ve které Y představuje skupinu obecného vzorce která je případně nezávisle substituovaná 1 až 4 substituenty R¹⁶, přičemž každá skupina R¹⁶ je vybraná ze souboru zahrnujícího atom halogenu, alkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, aralkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptosku100

32 .

pinu, amin, alkoxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu a heteroarylalkoxylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 31, ve které Y představuje skupinu vzorce

33.

34.

35.

Sloučenina podle nároku 1, ve které A představuje skupinu CH nebo skupinu CR¹⁵.

Sloučenina podle nároku 1, ve které každá skupina R¹⁶představuje nezávisle skupinu obecného vzorce C(O)NR¹⁹R²⁰.

Sloučenina podle nároku 34, ve které je každá skupina R¹⁹ vybraná nezávisle ze souboru zahrnujícího aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu a heteroarylalkylovou skupinu; a každá skupina R²⁰ je nezávisle vybraná ze souboru zahrnujícího aminoalkylovou skupinu, arylovou skupinu a arylalkylovou skupinu; přičemž každá arylová skupina nebo heteroarylová skupina může být případně substituovaná 1 až 4 substituenty vybranými nezávisle na sobě ze skupiny zahrnující atom halogenu, kyanoskupinu, alkylovou skupinu, trifluormethylovou skupinu, hydroxyalkylovou skupinu, alkylendioxoskupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, merkaptoskupinu, aminoskupinu, alkoxylovou skupinu,

101 • · ·· ·· · · · • · · · · · · * · · • ··· ·· ··· ····· «···· · · · · ·· ·

36.

37.

38.

39.

40.

41.

thioalkoxylovou skupinu, trifluormethoxylovou skupinu, aryloxylovou skupinu, heteroaryloxylovou skupinu, arylalkoxylovou skupinu, heteroarylalkoxylovou skupinu, skupinu C(O)R¹⁵, skupinu C(O)OR²¹, skupinu C(0) NR²¹R²¹, skupinu S(O)2NR²¹R²¹ a skupinu S(O)2R²¹.

Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.

Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 1, další terapeutické činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič.

Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 1, další terapeutické činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič, přičemž uvedeným dalším terapeutickým činidlem je antíbakteriální činidlo.

Způsob profylaxe bakteriální infekce a/nebo léčby bakteriálně infikovaného organismu, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému organismu.

Způsob léčby infekce u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podávání farmaceutické kompozice podle nároku 36.

Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje reakcí 2,4-diamínopteridinylové

102 • ·· ·· ·· ·· · • · · · · · · · · · · • · · · · ♦ · · * · · • · ··· · · · · · ····· ··· · · · · · « · ····· ·· ·· · · · sloučeniny s jedním nebo více chemickými reakčními činidly, a to v jednom nebo více reakčních stupních, za vzniku sloučeniny podle nároku 1.

42. Produkt připravítelný způsobem podle nároku 41.

43. Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci jednoho nebo více meziproduktů popsaných v tomto textu s jedním nebo více chemickými reakčními činidly, a to v jednom nebo více reakčních stupních, za vzniku sloučeniny podle nároku 1.

44. Produkt připravítelný způsobem podle nároku 43.

45. Způsob identifikace sloučeniny s antibakteriálním účinkem, vyznačující se tím, že zahrnuje

a) navržení struktury sloučeniny podle nároku 1;

b) přípravu derivátu sloučeniny ze stupně a); a

c) stanovení antibakteriálního účinku uvedeného derivátu.

46. Způsob identifikace sloučeniny s antibakteriálním účinkem, vyznačující se tím, že zahrnuje

a) výběr kandidátské sloučeniny podle nároku 1;

b) stanovení vazebné afinity uvedené kandidátské sloučeniny v modelu DHFR; a

103

47 .

c) stanovení antibakterálního účinku uvedené kandidátské sloučeniny.

Sloučenina obecného vzorce kde

A a B jsou nezávisle na sobě vybrané ze skupiny sestávající z atomu dusíku a skupiny CR⁷, ve které R⁷představuje atom vodíku nebo uhlík-, dusík-, síru-, halogen- a/nebo kyslík-obsahující funkční skupinu;

R¹ a R² představují skupiny -NR⁵R⁶, ve kterých R⁵ a R⁶představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo uhlík-obsahující funkční skupiny;

R³ je atom vodíku;

R⁴ je uhlík-, dusík-, síru-, halogen a/nebo kyslik-obsahující funkční skupina, s tou podmínkou, že

104

48.

49.

pokud obě skupiny A a B představují atomy dusíku a obě skupiny R⁵ a R⁶ představují atomy vodíku, potom skupina R⁴ nepředstavuje skupinu -NH₂, skupinu -N(H)(methyl), skupinu -N(H)(butyl), skupinu -N(H)(hexyl), skupinu -N(H) (fenyl), skupinu -N(H) (benzyl), skupinu -N(Η) (NH₂) , skupinu -N (H) (CH₂CH₂OH) , skupinu -N (CH₂CH₂OH) ₂, fenylovou skupinu, N-piperidinylovou skupinu nebo skupinu -S(ethyl);

pokud skupina A představuje skupinu CH a skupina B představuje atom dusíku a obě skupiny R⁵ a R⁶ představují atomy vodíku, potom skupina R⁴ nepředstavuje methylovou skupinu, isobutylovou skupinu, fenylovou skupinu, 4-methylfenylovou skupinu, 4-chlorfenylovou skupinu, 4-bromfenylovou skupinu, 2-(2,5-dimethoxyfenyl)ethylovou skupinu nebo skupinu -CH(OCH₃)₂; a pokud obě skupiny A a B představují skupiny CH, potom skupina R⁴ představuje jinou aminoskupinu než je skupina -NH₂, (3,4-dichlorfenyl)methylaminoskupina nebo (3,4-dichlorfenyl)methyleniminoskupina.

Sloučenina podle nároku 47, ve které R⁵ a R⁶ představují nezávisle na sobě atom vodíku; a A a B představují nezávisle na sobě atom dusíku.

Sloučenina podle nároku 48, ve které

Λ 7 fi

R představuje skupinu NRR ;

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do

6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou nebo heteroarylovou skupinou; a

105 • ·

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do

6 atomů uhlíku, která může být případně substituovaná alkenylovou skupinou, hydroxylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, cykloalkylovou skupinou nebo arylovou skupinou.

50. Sloučenina podle nároku 49, ve které

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou; a

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku.

51. Sloučenina podle nároku 49, ve které

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do

6 atomů uhlíku, která je substituovaná heteroarylovou skupinou; a

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku.

52. Sloučenina podle nároku 49, ve které

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou; a

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do

6 atomů uhlíku, která je substituovaná hydroxylovou skupinou nebo alkoxylovou skupinou.

53. Sloučenina podle nároku 48, ve které

R⁴ představuje skupinu NR⁷R⁸;

105

54.

55.

56.

R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do

6 atomů uhlíku;

R⁸ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do

6 atomů uhlíku, která je substituovaná cykloalkylovou skupinou.

Sloučenina podle nároku 48, ve které R⁴ představuje skupinu NR⁷R^S;

R⁷ představuje nezávisle alkylovou skupinu obsahující od

1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou;

R⁸ představuje nezávisle alkylovou skupinu obsahující od

1 do 6 atomů uhlíku, která je substituovaná arylovou skupinou.

Sloučenina podle nároku 48, ve které R⁷ představuje atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, arylovou skupinu, atom halogenu, thioalkylovou skupinu, hydroxylovou skupinu, alkoxylovou skupinu, aminoskupinu, alkylovou skupinu nebo skupinu NR⁵R⁶; ve které každá ze skupin R⁵ a R⁶ na atomu dusíku nezávisle představuje atom vodíku, alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu nebo alkylkarbonylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 50, ve které R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku substituovanou naftylovou skupinou, jež může být případně substituovaná alkylovou skupinou, atomem halogenu, hydro107

57.

58.

59.

60.

61.

62.

63.

• ·· ·® ·φ φφ φ • ΦΦΦ φφφφ φφφ • φ φ φφφφ φφφφ ·· ··· ·· φφφ φ φφφφ • φφ φφφφ φ φ φ • ΦΦΦΦ φφ φφ φφ φ xylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, thioalkylovou skupinou nebo aminoskupinou.

Sloučenina podle nároku 56, ve které je uvedená naftylová skupina substituovaná v poloze 2 nebo 4.

Sloučenina podle nároku 57, ve které R⁸ představuje methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu.

Sloučenina podle nároku 51, ve které R⁷ představuje alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku sub stituovanou benzothienylovou skupinou, jež může být případně substituovaná alkylovou skupinou, atomem halogenu, hydroxylovou skupinou, alkoxylovou skupinou, thioalkylovou skupinou nebo aminoskupinou.

Sloučenina podle nároku 59, ve které R⁸ představuje methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu.

Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 47 a farmaceuticky přijatelný nosič.

Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 47, další terapeutické činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič.

Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 47, další terapeutické činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič, přičemž • « • 0

108

00 0 • · 0

0 · · 0

0 0 0 0 0 0 uvedeným dalším terapeutickým činidlem je antibakteriální činidlo.

64. Způsob profylaxe bakteriální infekce a/nebo léčby bakteriálně infikovaného organismu, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 47 uvedenému organismu.

65. Způsob léčby infekce u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podávání farmaceutické kompozice podle nároku 61.

66. Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 47, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci 2,4-diaminopyrimidopyrimidinylové sloučeniny s jedním nebo více chemickými reakčními činidly, a to v jednom nebo více reakčních stupních, za vzniku sloučeniny podle nároku 47.

67. Produkt připravítelný způsobem podle nároku 66.

68. Způsob přípravy sloučeniny podle nároku 47, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci jednoho nebo více meziproduktů popsaných v tomto textu s jedním nebo více chemickými reakčními činidly, a to v jednom nebo více reakčních stupních, za vzniku sloučeniny podle nároku 47.

69. Produkt připravítelný způsobem podle nároku 68.

109 ·· ·« ·· ·· « • * · · · · ··· • · · · ·· 4 4 4 4

4 4 9 4 99 9 4 4 4 9444

4 4 4 4 4 9 4 4 ·

44 44 44 94 4

70.

71.

Způsob identifikace sloučeniny s antibakteriálním účinkem, vyznačující se tím, že zahrnuje

a) navržení struktury sloučeniny podle nároku 47;

b) přípravu derivátu sloučeniny ze stupně a); a

c) stanovení antibakteriálního účinku uvedeného derivátu.

Způsob identifikace sloučeniny s antibakteriálním účinkem, vyznačující se tím, že zahrnuje

a) výběr kandidátské sloučeniny podle nároku 47;

b) stanovení vazebné afinity uvedené kandidátské sloučeniny v modelu DHFR; a cj stanovení antibakterálního účinku uvedené kandidátské sloučeniny.

Zastupuj e

Dr. Pavel Zelený