SI22338A - Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze - Google Patents

Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze Download PDF

Info

Publication number
SI22338A
SI22338A SI200600186A SI200600186A SI22338A SI 22338 A SI22338 A SI 22338A SI 200600186 A SI200600186 A SI 200600186A SI 200600186 A SI200600186 A SI 200600186A SI 22338 A SI22338 A SI 22338A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
branched alkyl
substituted
linear
compounds
unsubstituted
Prior art date
Application number
SI200600186A
Other languages
English (en)
Inventor
Stanislav Gobec
Andreja Kovac
Alja Brajic
Slavko Pecar
Roman Lenarsic
Sergeja Bombek
Marijan Kocevar
Slovenko Polanc
Original Assignee
Univerza V Ljubljani, Fakulteta Za Farmacijo
Univerza v Ljubljani, Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univerza V Ljubljani, Fakulteta Za Farmacijo, Univerza v Ljubljani, Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo filed Critical Univerza V Ljubljani, Fakulteta Za Farmacijo
Priority to SI200600186A priority Critical patent/SI22338A/sl
Priority to EP07468010A priority patent/EP1889831A3/en
Publication of SI22338A publication Critical patent/SI22338A/sl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C281/00—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
    • C07C281/20—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group the two nitrogen atoms of the functional groups being doubly-bound to each other, e.g. azoformamide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C07D213/40—Acylated substituent nitrogen atom

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Opisane so spojine s splosno formulo (I) in farmacevtsko sprejemljive soli teh spojin. Posamezni substituenti so v besedilu in zahtevkih jasno definirani. Spojine so ucinkoviti inhibitorji encima D-alanil-D-alanin ligaza (Ddl).

Description

DIAZENDIKARBOKSAMIDI KOT INHIBITORJI D-ALANIL-D-ALANIN LIGAZE
Opis izuma
Področje tehnike, na katerega se nanaša izum
Izum spada na področje farmacevtske kemije in se nanaša na nove diazendikarboksamide kot inhibitorje bakterijske D-alanil-D-alanin ligaze (v nadaljevanju Ddl), na postopke za njihovo pripravo, na uporabo in farmacevtske izdelke, ki jih vsebujejo. Novi diazendikarboksamidi so inhibitorji encima Ddl, ki sodeluje pri biosintezi bakterijskega peptidoglikana in imajo protibakterijsko delovanje.
Tehnični problem
Odpornost patogenih bakterij proti protibakterijskim učinkovinam, ki jih dandanes uporabljamo za zdravljenje bakterijskih infekcij, narašča (Ritter, T.K.; Wong, C.-H. Angew. Chem. Int. Ed. 2001, 40, 3508-3533; Davies, J. Nature 1996, 383, 219-220; Levy, S.B. Sci.Am. 1998, 278, 4653). Določeni sevi treh bakterijskih vrst (Enterococcus faecalis, Mycobacterium tuberculosis, Pseudomonas aeuginosa), ki lahko povzročijo življensko nevarna infekcijska stanja, so razvili odpornost na vse v terapiji uporabljane antibiotike. Zato obstaja potreba po novih protimikrobnih učinkovinah, ki bi delovale na še neizkoriščena prijamališča v bakterijah.
Stanje tehnike
Najpomembnejši gradnik bakterijske celične stene, peptidoglikan, je edinstvena struktura, prisotna le v bakterijah. Zgodnje stopnje biosinteze peptidoglikana, ki potekajo v citoplazmi, so še relativno neizkoriščena prijemališča in zato primerna za razvoj novega tipa protimikrobnih učinkovin. Aminokislinske ligaze MurC, MurD in MurE katalizirajo pripenjanje L-alanina (LAla), D-glutaminske kisline (D-Glu) in mezo-diaminopimelinske kisline oz. L-lizina (L-Lys) v nastajajočem UDP-A-acetilmuramoil-pentapeptidu, medtem ko MurE katalizira pripenjanje dipeptida D-alanil-D-alanina (van Heijenoort, J. Nat. Prod. Rep. 2001, 18, 503-519). Za sintezo tega dipeptida sta odgovorna dva encima, alanin racemaza (katalizira pretvorbo L-alanina v D2 alanin) in Ddl. Inhibitorji naštetih encimov so potencialne protibakterijske učinkovine.
Ddl je citoplazmatski encim, ki katalizira tvorbo dipeptida D-alanil-D-alanin v skladu z naslednjo reakcijo:
D-Ala + D-Ala + ATP <-» D-Ala-D-Ala + ADP + Pi
Acil-fosfatni mehanizem reakcije je pri Ddl podoben kot pri drugih od ΑΤΡ-odvisnih ligazah (npr. glutamin sintetaza, glutation sintetaza, Mur ligaze). Encim najprej fosforilira karboksilno skupino D-alaninskega preostanka nukleotidnega substrata z γ-fosfatno skupino ATP tako, da nastane acil-fosfatni intermediat. Tako aktivirano karboksilno skupino napade prosta amino skupina drugega D-alanina. Ob tem nastane tetraedrično prehodno stanje. Sledi eliminacija anorganskega fosfata in nastanek peptidne vezi. Encim za nemoteno delovanje potrebuje tudi Mg2+, ki koordinira pravilno umeščanje substrata v aktivno mesto, ureja nabitost v aktivnem mestu in posledično stabilizira kompleks med substratom in encimom. Acil-fosfatni mehanizem so potrdili tudi s kristalno strukturo kompleksa encim-fosforiliran fosfinatni inhibitor (Fan, C„ Park, I.S., Walsh, C.T., Knox,J.R. Biochemistry 1997; 36: 2531-2538).
Znani sta dve izomorfni obliki Ddl: DdlA in DdlB. Kljub razlikam v velikosti (encim DdlB je manjši) in le 35% homologiji aminokislinskega zaporedja, imata encima zelo podobno katalitično učinkovitost in sposobnost prepoznavanja substratov (Zavvadzke, L. E., Burr, T. D. H., Walsh, C. T.: Biochemistry 1991; 30: 1673-1682). Podobnost obeh encimov se kaže tudi pri občutljivosti na inhibitorje.
Najpomembnejši med inhibitorji Ddl je D-cikloserin, ki se klinično uporablja kot tuberkulostatik (Wargel, R. J., Shadur, C. A., Neuhaus, F. C.: J. Bacteriol 1970; 103: 778-788). D-cikloserin inhibira tudi encim alanin racemazo, s pomočjo katerega nastane substrat za Ddl. Znanih je tudi precej inhibitorjev Ddl, ki delujejo kot mimetiki prehodnega stanja. Sintetizirali so več fosfinatnih inhibitorjev Ddl, s katerimi so tudi potrdili domnevni acil fosfatni mehanizem encima. Omenjene spojine so imele visoko inhibitorno aktivnost, saj s svojo tetraedrično geometrijo po encimski fosforilaciji dobro oponašajo naravni intermediat prehodnega stanja (Chakravarty, P. K.,Greenlee, W. J., Parsons, W. H., Patchett, A. A., Combs, P., Roth, A., Busch, R. D., Mellin, T. N.: J. Med. Chem. 1989; 32: 1886-1890; Busch, R. D., Mellin, T. N., Valiant, M. E., Weissberger, B., Gadebusch, H., Springer, J. P., Combs, P. L., Davidson, J., Taub, D., Schoen, W. R., Buli, H. G., Patchett, A. A., Parsons, W. H.: J. Med. Chem. 1988; 31: \Π2-\ΊΊ8). Leta
1996 so Bartlett in sodelavci pripravili fosfinatne in fosfonatne dipeptidne analoge prehodnega stanja, ki so dobro inhibirali tako DdlA kot DdlB (Tom, N. J., Ellsworth, B. A., Bartlett, P. A.: Chem. & Biol. 1996; 3: 37-44). Pred kratkim so na podlagi računalniško podprtega de novo načrtovanja encimskih inhibitorjev (programsko orodje SPROUT) sintetizirali nov ciklopropilni inhibitor Ddl (Lloyd, A. J., Roper, D. I., Chopra, I., Stubbings, W., Bostock, J. M., Besong, G. E., Fishvvick, C. W. G., Johnson, P.: Angew. Chem. Int. Ed. 2005; 44·. 2-6).
Opis rešitve tehničnega problema z izvedbenimi primeri
Izum se nanaša na nove spojine s splošno formulo (I)
X O O X
1 1 11 11 1 2 2 w—Y— N-C- N= N-C- N-Y-W (i) v kateri pomenijo:
X1, X2: vodik, Ci_6 linearni ali razvejani alkil, (aril) -NH- , -0-, -(CH2)n- (pri čemer je n lahko 0 do 5), Ci_6 razvejani alkil;
Υ1, Y2: -(CH2)n- (pri čemer je n lahko 0 do 5), Ci_6 razvejani alkil; -NH-, -C=O; -NHC0-,
-C0NH-;
W‘, W2: - vodik,
- Ci-6 linearni ali razvejani alkil, kije lahko substituiran z eno ali večimi nitro skupinami, z enim ali večimi halogeni, s trifluorometilno skupino, z eno ali večimi hidroksi skupinami,
- fenil, ki je lahko nesubstituiran ali substituiran z eno ali večimi nitro skupinami, z enim ali večimi halogeni, s trifluorometilno skupino, z eno ali večimi hidroksi skupinami, z enim ali več Ci-8 linearnim ali razvejanim alkilom, z eno ali večimi Ci-g linearno ali razvejano alkoksi skupino, z eno ali večimi nesubstituiranimi oziroma substituiranimi fenilnimi skupinami,
- nesubstituiran ali substituiran naftil,
- fluorenil,
- 5- do 7- členski monociklični ali 7- do 10- členski biciklični heterociklični obročni sistem, ki je lahko substituiran ali nesubstituiran in ki lahko vsebuje poleg ogljikovih atomov do heteroatome izbrane med N,O, P in S,
- 3- do 10- členski monociklični ali 7- do 10- členski biciklični karbociklični obročni sistem, ki je lahko substituiran ali nesubstituiran in ki lahko vsebuje poleg ogljikovih atomov do 3 heteroatome izbrane med N,O, P in S.
Nekatere spojine tega izuma imajo enega ali več stereogenih centrov, na katerih je lahko absolutna konfiguracija R ali S in se lahko pojavljajo v obliki racematov, konglomeratov, čistih enantiomerov, zmesi diastereoizomerov ali čistih diastereoizomerov.
Izum se nanaša tudi na farmacevtsko sprejemljive soli spojin s formulo I.
Izum se nanša tudi na uporabo spojin s formulo I kot terapevtsko učinkovitih snovi za pripravo zdravil. Nove spojine so inhibitorji encima D-alanil-D-alanin ligaze ter se uporabljajo za zdravljenje infekcij.
Predmet izuma so tudi farmacevtski pripravki, ki vsebujejo spojine s formulo I. Lahko so v obliki različnih injekcij, peroralnih pripravkov ali drugih primernih farmacevtskih oblik. Poleg učinkovine vsebujejo še različne standardne dodatke, odvisno od vrste uporabe. Farmacevtski pripravki so pripravljeni po standardnih postopkih. Lahko so pripravljeni tudi v različnih oblikah, ki zagotavljajo kontrolirano in podaljšano sproščanje učinkovine. Odmerek, pogostost in način uporabe zavisijo od različnih dejavnikov, odvisni pa so tudi od posamezne učinkovine in njenih farmakokinetičnih lastnosti ter bolnikovega stanja.
Izum se nanaša tudi na postopke za pripravo spojin s formulo 1.
Derivate diazendikarboksamida s splošno formulo I pripravimo:
1. Nesimetrični derivat nastane tako, da izocianat s formulo II (ki ga pripravimo iz ustreznega amina s fosgenom, difosgenom ali trifosgenom v aprotičnem suhem topilu v prisotnosti terciarnega amina) reagira s karbazatom III (R = C[.6 linearni ali razvejani alkil) v aprotičnem topilu.
W1—Y—N—C=O
H-N-N—OR 2 H (Π) (III)
Pri tem dobimo ustrezen 1,4-disubstituiran semibarbazid IV. Isto spojino je mogoče pripraviti iz
4-substituiranega semikarbazida V, če le-ta reagira s kloroformatom VI (R = Ci_6 linearni ali razvejani alkil).
X1 O O X1 O , , I II 11 2 2 1 1 1 11 O w—Y-N-C-N-N-C-O-Y-W W—Υ-N-C-N-NH, II
H H H 2 Cl—OR (IV) (V) (VI)
Nastali 1,4-disubstituirani semikarbazid IV pretvorimo s primernim organskim ali pa anorganskim oksidantom v aminokarbonil diazenkarboksilat VII. Slednjega s substitucijo alkoksi skupine s primarnim ali sekundarnim aminom VIII prevedemo v diazendikarboksamid I.
χ2
X1 O O I 2 , . , I II II N—Y—Vv w—Y-N-C-N=N-C-OR H (VII) (VIII)
2. Simetrični derivat diazendikarboksamida I (X1 = X2, Υ1 = Y2, W’ = W2) dobimo, če dialkil diazendikarboksilat obdelujemo z najmanj dvema ekvivalentoma primarnega ali sekundarnega amina VIII v protičnem oziroma aprotičnem topilu, lahko pa tudi brez prisotnosti topila, pri čemer poteče nukleofilna substitucija obeh alkoksi skupin.
Biološki testi
I. Encimska metoda za ugotavljanje učinkovitosti inhibitorjev encima DdlB
1. Princip
Encim DdlB katalizira nastajanje dipeptida, D-alanil-D-alanina (D-Ala-D-Ala) iz D-alanina (DAla) ob prisotnosti ATP, ki pri tem razpada na ADP in fosfat. Nastanek fosfata določamo spektrofotometrično pri 650 nm posredno preko tvorbe zeleno obarvanega kompleksa z malahitno zelenim (reagent Biomol). Katalitično aktivnost encima DdlB ovrednotimo na podlagi množine fosfata, ki nastane pri reakciji. Množina nastalega fosfata mora biti v območju linearnosti umeritvene krivulje za fosfat. Ob dodatku inhibitorja se katalitična aktivnost encima DdlB zniža, zato je množina nastalega fosfata manjša v primerjavi s kontrolo brez inhibitorja. Učinkovitost inhibitorja izrazimo z rezidualno aktivnostjo (RA) encima pri določeni koncentraciji inhibitorja in s konstanto IC50.
2. Reagenti
DdlB: izoliran in povsem očiščen iz seva E.coli JM109 (plazmid pQE-30UA). Očiščen encim hranimo pri - 20 °C. Tik pred uporabo encim razredčimo s pufrom za redčenje encima.
Pufer za redčenje encima z naslednjo sestavo:
Hepes 20,0 mM ditiotreitol (DTT) 1,0 mM pH uravnamo na 7,2 z dodatkom raztopine HCI.
Reakcijska mešanica (RM) za DdlB; Pripravimo reakcijsko mešanico z naslednjo sestavo:
Hepes (pH=8,0)
MgCl2 (NH4)2SO4
ATP
D-Ala
KC1
50,0 mM
5,0 mM
10,0 mM
769,0 μΜ 1077,0 μΜ
15,4 mM
Končne koncentracije sestavin RM na mikrotiterski plošči s testno raztopino so: Hepes 38,5 mM
MgCl2 3,25 mM (NH4)2SO4 6,5 mM
KC1 10,0 mM
ATP 500,0 μΜ
L-Ala 700,0 μΜ
Inhibitorji; pripravimo osnovne raztopine inhibitorjev (preiskovanih učinkovin) v DMSO s koncentracijo 10 mM. V primeru, da preiskovane učinkovine v osnovni koncentraciji niso topne v reakcijski zmesi, jih predhodno ustrezno 2-10 krat redčimo z DMSO. Tudi za določanje IC50 pripravimo delovne raztopine z redčenjem osnovne raztopine z DMSO. Najvišja koncentracija DMSO v testni raztopini ne presega 5%.
3. Postopek oz. potek dela
Meritve izvajamo na mikrotiterskih ploščicah. V posamezno luknjico odpipetiramo 32,5 μΐ reakcijske mešanice (RM), dodamo 2,5 μΐ raztopine inhibitorja v DMSO (oz. v primeru kontrole
2,5 μΐ DMSO) in 15 μΐ raztopine encima (oz. pufra za redčenje encima v primeru testiranja ozadja). Mikrotiterske ploščice z reakcijsko zmesjo nato inkubiramo 30 minut pri 37°C ter nato reakcijo ustavimo z dodatkom 100 μΐ Biomol reagenta. Po 5 minutah pomerimo absorbanco pri 650 nm.
Merjenje rezidualne aktivnosti (RA)
Rezidualna aktivnost encima je razmerje katalitičnih aktivnosti encima z inhibitorjem in brez inhibitorja. Nižja je RA vrednost, v večji meri je inhibitor pri dani koncentraciji upočasnil encimsko reakcijo. Merimo jo v dveh ponovitvah in izračunamo po naslednji enačbi:
RA (%) = (Ai — Aslepal)/(AK-AslepaK)* 1 00
Ai = absorbanca (λ =650 nm) reakcijske zmesi z encimom in z inhibitorjem
Asiepai= absorbanca ozadja reakcijske zmesi brez encima in z inhibitorjem
Ak = absorbanca reakcijske zmesi z encimom in brez inhibitorja
AsiepaK = ozadje reakcijske zmesi brez encima in brez inhibitorja
Ugotavljanje IC50
IC50 nam pove koncentracijo inhibitorja, potrebno za znižanje hitrosti z MurD katalizirane reakcije na polovico. Določamo jo pri 700 μΜ koncentraciji D-Ala in pri 500 μΜ koncentraciji ATP. Ugotavljamo jo tako, da merimo RA encima DdlB pri najmanj 7 različnih koncentracijah inhibitorja. Za vsak RA izračunamo logit RA (logit RA = ln (RA / (1-RA)), ter za vsako koncentracijo inhibitorja, izraženo v μΜ, izračunamo njen desetiški logaritem. Na podlagi teh podatkov določimo enačbo premice logit RA = k log c(I) + n. Če je logit RA enak nič, potem je log c(I) enak log IC50. IC50 izračunamo po formuli: IC50 = 10 n/k.
II. Ugotavljanje občutljivosti bakterij na potencialne protimikrobne spojine
Za določanje minimalne inhibitome koncentracije (MIC) potencialnih protimikrobnih učinkovin smo bakterije gojili in redčili v mediju IsoSensitest (Oxoid, Basingstoke, UK), tako da smo uporabili 104 celic/ml bakterij Escherichia coli in 106 celic/ml bakterij Staphylococcus aureus. Potencialne protimikrobne spojine smo pripravili v dveh koncentracijah v 50 % DMSO (SigmaAldrich, Dorset, UK). Na mikrotiterske plošče z 96 luknjicami (Nune, Fisher Scientific, Loughborough, UK) smo nanesli preiskovano spojino in suspenzijo bakterij ter nato inkubirali 16 ur v Spectramax 384 plus mikrotiterskem čitalcu (Molecular Devices, Abingdon, UK), pri čemer smo uporabili program SOFTmax PRO 3.1.1. Merjenje optične gostote je potekalo vsakih 10 min pri 600 nm. Pred vsakim merjenjem smo plošče stresali za 30 sekund. MIC vrednosti so koncentracije inhibitorjev, ki popolnima preprečijo rast bakterij.
Izum pojasnjujejo, vendar nikakor ne omejujejo naslednji izvedbeni primeri:
PRIMER 1
Sinteza A1-(4-/z<7-propilfenil)-A2-(2-kloroetil)-l,2-diazendikarboksamida (H3C)2CH
NHC
N=N
CNHCH2CH2CI
O
Korak 1
Metil (4-izopropilanilino)karbonilhidrazinkarboksilat
Raztopini trifosgena (1.10 g, 3.7 mmol) v diklorometanu (25 ml) in v argonovi atmosferi, med močnim mešanjem pri sobni temperaturi, počasi s kapalnikom dodajamo raztopino 4-izopropilanilina (1.45 ml, 10 mmol) v diklorometanu (25 ml). Nastalo suspenzijo postavimo na ledeno kopel in ji dodamo trietilamin (3 ml, 23.3 mmol). Po 5 min dodamo še metil hidrazinkarboksilat (900 mg, 10 mmol). Nastalo rumenkasto raztopino mešamo 10 min pri 0 °C in 10 min pri sobni temperaturi. Dodamo HCI (30 ml, IM) in izloči se bela oborina, ki jo odnučamo, speremo z vodo (10 ml) in s hladnim dietil etrom (15 ml) ter posušimo na nuči. Dobimo 2.01 g (80%) produkta.
Ttal. = 169.5-172.3 °C (etil acetat)
IR (KBr) 3357, 3306, 3251, 2959, 1737, 1705, 1686, 1610, 1548, 1517, 1244 cm'1.
'H NMR (DMSO-£/d) δ 1.17 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 2.81 (h, J =6.8 Hz, IH), 3.60 (s, 3H), 7.11 (m, 2H), 7.35 (m, 2H), 7.95 (razš. s, IH), 8.60 (s, IH), 8.93 (razš. s, IH).
13C NMR (DMSO-d«) δ 24.0, 32.7, 51.8, 118.6, 126.2, 137.3, 141.8, 155.6, 157.3.
MS (FAB) m/z (%) 252 (M+ + H, 70), 91 (100).
Elem. anal.: izračunana za CI2HI7N3O3 (M = 251.28 g/mol): 57.36% C, 6.82% H, 16.72% N; ugotovljena: 57.15% C, 7.02% H, 17.01% N.
Korak 2
Metil (4-izopropilanilino)karbonildiazenkarboksilat
Suspenziji metil (4-izopropilanilino)karbonilhidrazinkarboksilata (1.76 g, 7 mmol) v diklorometanu (20 ml) dodamo piridin (1.13 ml, 14 mmol) ob močnem mešanju pri sobni temperaturi. Med počasnim dodajanjem NBS (1.37 g, 7.7 mmol) suspenzija preide v rdečo raztopino, kateri po 1 h mešanja pri sobni temperaturi dodamo vodno raztopino HCI (1 : 1, 10 ml). Fazi ločimo, organsko pa speremo s 5% vodno raztopino Na2S2O3 x 5H2O (15 ml), z nasičeno vodno raztopino NaHCO3 (15 ml) in z vodo (15 ml). Organsko fazo sušimo z brezvodnim Na2SO4, odparimo topilo in dobimo 1.70 g (98%) produkta.
Ttai. = olje pri sobni temperaturi
IR (NaCI) 3271,2961, 1773, 1732, 1602, 1559, 1519, 1437, 1417, 1251 cm'1.
‘H NMR (DMSO-7rt) δ 1.20 (d, 7= 7.2 Hz, 6H), (h, 7= 7.2 Hz, IH), 4.07 (s, 3H), 7.29 (m, 2H), 7.64 (m,
2H), 11.45 (s, IH).
13C NMR (DMSO-7fi) δ 23.8, 32.9, 55.6, 119.7, 126.8, 134.9, 145.4, 156.9, 161.9.
MS (FAB) m/z (%) 250 (M+ + H, 53), 154 (61), 91 (68), 69 (80), 55 (100).
Elementna sestava: Ci2Hi5N3O:
M = 249.27 g/mol
Korak 3 /V1-(4-feo-propilfenil)-/V2-(2-kloroetil)-l,2-diazendikarboksamid
Suspenziji metil (4-/zo-propilaniIino)karbonildiazenkarboksiIata (1.16 g, 4.65 mmol) in Na2CO3 (477 mg, 4.5 mmol) v diklorometanu (7 ml) po porcijah dodajamo 2-kloroetilamin hidroklorid (522 mg, 4.5 mmol), ob močnem mešanju pri 0 °C. Po 2 h mešanja pri 0 °C odparimo topilo preostanek pa suspendiramo v etil acetatu (15 ml). Organsko fazo stresemo z vodo (2 χ 10 ml), fazi ločimo, organsko pa sušimo z brezvodnim Na2SO4 in odparimo topilo. Dobimo 1.09 g (82%) produkta.
Ttai. = 148.5-150.4 °C (diklorometan)
IR (KBr) 3245, 2962, 1737, 1709, 1536, 1415, 1255, 1062, 830 cm’1.
'H NMR (DMSO-7,) δ 1.20 (d, 7 =7.1 Hz, 6H), 2.88 (h, 7 =7.1 Hz, IH), 3.63 (m, 2H), 3.78 (t, 7= 5.8 Hz, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.64 (m, 2H), 9.23 (razš. t, 7= 5.6 Hz, IH), 11.27 (s, IH).
13C NMR (DMSO-7J δ 23.8, 32.9, 42.1,42.9, 119.7, 126.8, 135.2, 145.1, 158.1, 161.9.
MS (FAB) m/z (%) 299 ((M + 2)+ + H, 47), 194 (85), 138 (100), 120(61).
Elem. anal.: izračunana za Ci3H|7C1N4O2 (M = 296.75 g/mol): 52.62% C, 5.77% H, 18.88% N; ugotovljena: 52.60% C, 5.97% H, 18.64% N.
PRIMER 2
Sinteza/Vl-(4-.vi?/£-butilfeniI)-N2-(2-kIoroetil)-l,2-diazendikarboksamida ch- V h3ch2cch nhc
N=N cnhch2ch2ci
Korak 1 π
Metil (4-sčA-butilanilino)karbonilhidrazinkarboksilat
Raztopini trifosgena (1.10 g, 3.7 mmol) v diklorometanu (10 ml) in v argonovi atmosferi, med močnim mešanjem pri sobni temperaturi, počasi s kapalnikom dodajamo raztopino 4-sekbutilanilina (1.53 ml, 10 mmol) v diklorometanu (10 ml). Nastalo suspenzijo postavimo na ledeno kopel in ji dodamo trietilamin (3 ml, 23.3 mmol). Po 5 min dodamo še metil hidrazinkarboksilat (900 mg, 10 mmol). Nastalo rumenkasto raztopino mešamo 30 min pri 0 °C in 30 min pri sobni temperaturi. Dodamo HCI (15 ml, IM) in izloči se bela oborina, ki jo odnučamo, speremo z vodo (7 ml) in s hladnim dietil etrom (2x5 ml) ter posušimo na nuči. Dobimo 2.14 g (81%) produkta.
Ttal. = 184-185.7 °C (etanol)
IR (KBr) 3362, 3308, 3250, 2959, 1736, 1707, 1686, 1609, 1549, 1248 cm1.
'H NMR (DMSO-č/6) δ 0.76 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 1.16 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 1.51 (qd, J, = 7.3 Hz, J2 = 1.9 Hz, 2H), 2.51 (qt, J3 = 7.0 Hz, J2 = 1.9 Hz, IH), 7.07 (m, 2H), 7.38 (m, 2H), 7.97 (razš. s, IH), 8.61 (s, IH), 8.95 (razš. s, IH).
I3C NMR (DMSO-i/«) δ 12.0,21.8, 30.6, 45.5, 51.8, 118.6, 126.8, 137.4, 140.5, 155.6, 157.3. MS (El) m/z (%) 265 (M+, 20), 175 (40), 146 (100), 90 (95).
HRMS; izračunan za C13Hi9N3O3: 265.1426; ugotovljen: 265.1433.
Elem. anal.: izračunana za C13Hi9N3O3(M = 265.31 g/mol); 58.85% C, 7.22% H, 15.84% N; ugotovljena; 58.72% C, 7.42% H, 15.84% N.
Korak 2
Metil (4-seA-butilanilino)karbonildiazenkarboksilat
Suspenziji metil (4-s<?£-butilanilino)karbonilhidrazinkarboksilata (1.33 g, 5 mmol) v diklorometanu (15 ml) dodamo piridin (810 pl, 10 mmol) ob močnem mešanju pri sobni temperaturi. Med počasnim dodajanjem NBS (979 mg, 5.5 mmol) suspenzija preide v rdečo raztopino, kateri po 1 h mešanja pri sobni temperaturi dodamo vodno raztopino HCI (1 : 1, 10 ml). Fazi ločimo, organsko pa speremo s 5% vodno raztopino Na2S2O3 χ 5H2O (15 ml), z nasičeno vodno raztopino NaHCO3 (7 ml) in z vodo (10 ml). Organsko fazo sušimo z brezvodnim Na2SO4, odparimo topilo in dobimo 1.01 g (77%) oljnatega produkta. Ttai. = olje pri sobni temperaturi
IR (NaCI) 3274, 2961, 1776, 1736, 1730, 1602, 1560, 1516, 1437, 1417, 1251 cm'1.
'H NMR (DMSO-ί/β) δ 0.77 (t, J= 7.3 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.55 (m, 2H), 2.60 (m, IH), 4.07 (s, 3H), 7.25 (m, 2H), 7.64 (m, 2H), 11.45 (s, IH).
13C NMR (DMSO-<4) δ 12.1, 21.7, 31.1,41.2, 55.4, 119.7, 127.9, 133.6, 145.8, 155.0, 162.1.
MS (FAB) m/z (%) 264 (M+ + H, 41), 176 (100), 148 (85), 92 (65).
Elementna sestava: C13Hi7N3O3 M = 263.29 g/mol
Korak 3
A1-(4-seA-butilfenil)-/V2-(2-kloroetil)-l,2-diazendikarboksamid
Suspenziji metil (4-seA-butilanilino)karbonildiazenkarboksilata (1.00 g, 3.8 mmol) in Na2CO3 (403 mg, 3.8 mmol) v etil acetatu (15 ml) po porcijah dodajamo 2-kloroetilamin hidroklorid (441 mg, 3.8 mmol), ob močnem mešanju pri 0 °C. Po 4 h mešanja pri 0 °C reakcijo prekinemo z dodatkom vode (5 ml). Močno stresemo in fazi ločimo, organsko pa sušimo z brezvodnim Na2SO4 in odparimo topilo. Dobimo 1.11 g (94%) produkta.
Ttai. = 115.8-119 °C (petroleter/etil acetat)
IR (KBr) 3246, 2965, 2928, 1735, 1708, 1601, 1532, 1416, 1317, 1308, 1247, 1190, 1059 cm’1.
‘H NMR (DMSO-7,) δ 0.77 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.55 (qd, J, = J2 = 7.2 Hz, 2H), 2.59 (m, IH), 3.63 (m, 2H), 3.78 (t, 7= 5.9 Hz, 2H), 7.24 (m, 2H), 7.64 (m, 2H), 9.23 (razš. t, J= 5.5 Hz, IH), 11.27 (s, IH).
13C NMR (DMSO-</6) δ 12.0, 21.7, 30.5, 40.4, 42.1, 42.9, 119.6, 127.4, 135.2, 143.9, 158.1, 161.9.
MS (FAB) m/z (%) 313 ((M + 2)+ + H, 3), 185 (97), 93 (100).
Elem. anal.: izračunana za C14H19CIN4O2 (M = 310.78 g/mol): 54.11% C, 6.16% H, 18.03% N; ugotovljena: 54.30% C, 5.96% H, 17.91% N.
PRIMER 3
Sinteza/V*-(4-/erc-butilfenil)-/V2-(2-kloroetil)-l,2-diazendikarboksamida cnhch2ck2ci
Korak 1
Metil (4-terc-butilanilino)karbonilhidrazinkarboksilat
Raztopini trifosgena (549 mg, 1.85 mmol) v diklorometanu (10 ml) in v argonovi atmosferi, med močnim mešanjem pri sobni temperaturi, počasi s kapalnikom dodajamo raztopino 4-tercbutilanilina (800 μΐ, 5 mmol) v diklorometanu (10 ml). Nastalo suspenzijo postavimo na ledeno kopel in ji dodamo trietilamin (1.5 ml, 11.7 mmol). Po 5 min dodamo še metil hidrazinkarboksilat (450 mg, 5 mmol). Nastalo rumenkasto raztopino mešamo 30 min pri 0 °C in 30 min pri sobni temperaturi. Dodamo HCI (20 ml, IM) in izloči se bela oborina, ki jo odnučamo, speremo z vodo (7 ml) in s hladnim dietil etrom (3x5 ml) ter posušimo na nuči. Dobimo 1.20 g (91%) produkta.
Ttal = 185-187 °C (diklorometan/metanol)
IR (KBr) 3304, 2959, 1731, 1686, 1609, 1553, 1314,1259 cm’1.
‘H NMR (DMSO-dtf) δ 1.25 (s, 9H), 3.61 (s, 3H), 7.25 (m, 2H), 7.37 (m, 2H), 7.96 (razš. s, IH), 8.62 (s, IH), 8.94 (razš. s, IH).
13C NMR (DMSO-iL) δ 31.2, 33.8, 51.9, 118.3, 125.1, 137.0, 144.1, 155.6, 157.4.
MS (El) m/z (%) 265 (M+, 20), 175 (32), 160 (100), 90 (95).
HRMS izračunan za C13H19N3O3: 265.1426; ugotovljen: 265.1431.
Elem. anal.: izračunana za C13H19N3O3 (M = 265.31 g/mol): 58.85% C, 7.22% H, 15.84% N; ugotovljena: 59.13% C, 7.47% H, 16.03% N.
Korak 2
Metil (4-/erc-butiIaniIino)karbonildiazenkarboksilat
Suspenziji metil (4-ferc-butilanilino)karbonilhidrazinkarboksilata (1.06 g, 4 mmol) v diklorometanu (10 ml) dodamo piridin (645 μΐ, 8 mmol) ob močnem mešanju pri sobni temperaturi. Med počasnim dodajanjem NBS (783 mg, 4.4 mmol) suspenzija preide v rdečo raztopino, kateri po 30 min mešanja pri sobni temperaturi dodamo vodno raztopino HCI (1 : 1, 10 ml). Fazi ločimo, organsko pa speremo s 5% vodno raztopino Na2S2O3 χ 5H2O (3 ml), z nasičeno vodno raztopino NaHCCh (10 ml) in z vodo (10 ml). Organsko fazo sušimo z brezvodnim Na2SO4, odparimo topilo in dobimo 963 mg (92%) oljnatega produkta.
Ttai. = olje pri sobni temperaturi
IR (NaCI) 3270, 2960, 1773, 1730, 1601, 1560, 1522, 1437, 1406, 1252 cm’1.
'H NMR (DMSO-ί/β) δ 1.28 (s, 9H), 4.07 (s, 3H), 7.44 (m, 2H), 7.65 (m, 2H), 11.45 (s, IH). ,3C NMR (DMSO-i/6) δ 31.0, 34.1,55.6, 119.4, 125.8, 134.6, 147.6, 157.0, 161.8. Elementna sestava: Ci3H|7N3O3 M = 263.29 g/mol
Korak 3 yVI-(4-ii>z-f-butilfenil)-A?2-(2-kloroetil)-l,2-diazendikarboksamid
Suspenziji metil (4-/erc-butilanilino)karbonildiazenkarboksilata (920.5 mg, 3.5 mmol) in Na2CO3 (371 mg, 3.5 mmol) v diklorometanu (5 ml) po porcijah dodajamo 2-kloroetilamin hidroklorid (406 mg, 3.5 mmol), ob močnem mešanju pri 0 °C. Po 2 h mešanja pri 0 °C odparimo topilo preostanek pa suspendiramo v etil acetatu (15 ml). Organsko fazo stresemo z vodo (2 x 10 ml), fazi ločimo, organsko pa sušimo z brezvodnim Na2SO4. Odparimo topilo in dobimo 980 mg (90%) produkta.
TW| = 125.9-127.7 °C (etil acetat/petroleter)
IR (KBr) 3236, 3040, 2962, 1735, 1699, 1536, 1518, 1365, 1267, 835 cm’1.
'H NMR (DMSO-i/tf) δ 1.28 (s, 9H), 3.63 (m, 2H), 3.78 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 7.43 (m, 2H), 7.64 (m, 2H), 9.23 (razš. t, J =5.6 Hz, IH).
13C NMR (DMSO-</6) δ 31.1, 34.1, 42.1, 42.9, 119.4, 125.7, 134.9, 147.4, 158.1, 161.9.
MS (FAB) m/z (%) 313 ((M + 2)+ + H, 23).
Elem. anal.: izračunana za C)4H19C1N4O2 (M = 310.78 g/mol); 54.11% C, 6.16% H, 18.03% N; ugotovljena: 54.39% C, 6.42% H, 17.97% N.
PRIMER 4
Sinteza/V1-(2-kIoroetil)-N2-(2-piridilmetil)-l,2-diazendikarboksamida
cnhch2ch2ci o
Raztopini 2-pikolilamina (155 pl, 1.5 mmol) v acetonitrilu (3 ml) po porcijah dodajamo metil (2kloroetilamino)karbonildiazenkarboksilat (290.3 mg, 1.5 mmol; pripravljen po Bombek, S.; Požgan, F.; Kočevar, M.; Polanc, S., J. Org. Chem. 2004, 69, 2224-2227.), ob močnem mešanju pri O °C. Po 45 min mešanja pri 0 °C odnučamo izločeno oranžno oborino in jo speremo s hladnim acetonitrilom (1 ml). Dobimo 337.9 mg (83%) produkta.
Ttai = 142.6-144.1 °C (etil acetat/metanol)
IR (KBr) 3247, 1746, 1712, 1594, 1537, 1474, 1437, 1360, 1265, 1225, 1192, 1063 cm’1.
'H NMR (DMSO-d,;) δ 3.60 (m, 2H), 3.77 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 4.55 (d, 7= 6.0 Hz, 2H), 7.30 (ddd, J, = 7.5 Hz, J2 = 4.9 Hz, J3 = 1.1 Hz, IH), 7.38 (ddd, 7; = 7.7 Hz, Λ = 1.1 Hz, J3 = 0.9 Hz, IH), 7.80 (ddd, J, = 7.7 Hz, J2 = 7.5 Hz, J3 = 1.9 Hz, IH), 8.54 (ddd, J, = 4.9 Hz, J2 = 1.9 Hz, J3 = 0.9 Hz, IH), 9.09 (razš. t, J = 5.7 Hz, IH), 9.41 (razš. t, J= 6.0 Hz, IH).
13C NMR (DMSO-dd) δ 42.0, 43.0, 45.3, 121.3, 122.5, 136.9, 149.1, 157.1, 161.8, 162.0.
MS (FAB) m/z (%) 270 (M+ + H, 43), 154 (51), 135 (100).
Elem. anal.: izračunana za C10H12CIN5O2 (M = 269.69 g/mol): 44.54% C, 4.48% H, 25.97% N; ugotovljena: 44.43% C, 4.53% H, 26.03% N.
PRIMER 5
Sinteza jV-fenil-7V'-(3-pikoIil)diazendikarboksamida a o ch2nhc
N=N
CNHPh n
O
Raztopini 3-pikolilamina (0.610 ml, 6 mmol) v acetonitrilu (3 ml) ob mešanju, pri 0 °C, po porcijah dodajamo etil fenilaminokarbonildiazenkarboksamid (1.327 g, 6 mmol; pripravljen po Knight, G. T.; Loadman, J. R.; Saville, B.; Wildgoose, J., J. Chem. Soc., Chem. Commun. 1974, 193-194.). Nastalo gosto rumeno oborino po 15 min odnučamo, speremo z acetonitrilom in dobimo 1.472 g (87%) produkta.
Tta). = 156-157 °C (etil acetat).
IR (KBr) 3300, 2940, 1710, 1590, 1515, 1440, 1315, 1250, 1030 cm1.
'HNMR(DMSO-76)6 4.53 (d, 2H,7=5.9 Hz), 7.19(m, IH), 7.41 (m, 3H), 7.72 (m, 2H), 7.77 (ddd, IH, 7, = 7.8 Hz, 72 = 2.3 Hz, 73 = 1.6 Hz), 8.51 (dd, IH, 7, = 4.8 Hz, J2 = 1.6 Hz), 8.59 (dd, IH, 7, = 2.3 Hz, 72 = 0.8 Hz), 9.57 (t, IH, 7 =5.9 Hz), 11.31 (s, IH).
13C NMR (DMSO-76) δ 41.2, 119.6, 123.6, 124.9, 129.1, 133.6, 135.4, 137.4, 148.6, 148.9, 158.2, 161.9.
MS (FAB) m/z (%) 284 (M+ + H, 30), 120 (14), 107 (25).
Elem. anal.; izračunana za Ci4H13N5O2 (M = 283.29 g/mol): 59.36% C, 4.63% H, 24.72% N; ugotovljena: 59.64% C, 4.53% H, 24.88% N.
PRIMER 6
Sinteza A-(3-klorofenil)-A'-(3-pikolil)diazendikarboksamida
Korak 1
Etil (3-klorofenil)aminokarbonildiazenkarboksilat
Suspenziji etil (3-klorofenil)aminokarbonilhidrazinkarboksilata (3.865 g, 15 mmol; pripravljenega po Bollbuck, G.; Stroh, H-H. Bamikow, G., J. Prakt. Chem. 1971, 313, ΊΤ3-ΊΎ1.) in piridina (2.43 ml, 30 mmol) v diklorometanu (60 ml) med močnim mešanjem, pri sobni temperaturi po porcijah dodajamo NBS (2.723 g, 15.3 mmol). Nastane rdeča raztopina. Po 45 min dodamo HCI (1:1, 40 ml), ločimo fazi in organsko fazo speremo z vodno raztopino Na2S2O3*5H2O (1.5 g, 60 ml), z nasičeno vodno raztopino NaHCO3 (60 ml) in z vodo (60 ml). Organsko fazo sušimo z brezvodnim Na2SO4, odparimo topilo in dobimo 3.731 g (97%) produkta.
Ttai. = 49.5-50.5 °C (cikloheksan/toluen).
IR (KBr) 3300, 3000, 1780, 1740, 1600, 1490, 1250, 1030 cm'1.
'H NMR (DMSO-J6) δ 1.38 (t, 3H, J= 7.2 Hz), 4.53 (q, 2H, J= 7.2 Hz), 7.29 (ddd, IH, 7, = 8.0 Hz, J2 = 2.1 Hz, 7 = 1.0 Hz), 7.46 (dd, IH, 7 = 8.0 Hz, J2 = 8.2 Hz), 7.66 (ddd, IH, 7 = 8.2 Hz, J2 = 2.0 Hz, 7 = 1.0 Hz), 7.85 (dd, IH, 7 =2.1 Hz, 7 = 2.0 Hz), 11.71 (s, IH).
13C NMR (DMSO-7) δ 13.9, 65.5,118.2, 119.2, 124.9, 130.8, 133.4, 138.7, 157.0, 161.2.
MS (FAB) m/z 256 (M+ + H, 16), 167 (9), 107 (25).
Elem. anal.: izračunana za C10H10CIN3O3 (M = 255.66 g/mol): 46.98% C, 3.94% H, 16.44% N;
ugotovljena: 47.20% C, 3.97% H, 16.36% N.
Korak 2 /V-(3-Klorofenil)-7V'-(3-pikoIil)diazendikarboksamid
Raztopini 3-pikolilamina (0.610 ml, 6 mmol) v acetonitrilu (2 ml) ob mešanju, pri 0 °C, po porcijah dodajamo etil (3-klorofenil)aminokarbonildiazenkarboksamid (1.534 g, 6 mmol). Nastalo gosto rumeno oborino po 15 min odnučamo, speremo z acetonitrilom in dobimo 1.412 g (74%) produkta.
Tla|. = 129-130 °C (etil acetat).
IR (KBr) 3338, 2939, 1741, 1713, 1546, 1504, 1428, 1189 cm'1.
'HNMR(DMSO-7) δ 4.54 (d, 2H, J= 6.0 Hz), 7.27 (ddd, IH, 7 = 8.0 Hz, J2 = 2.1 Hz, J3 = 1.0 Hz), 7.41 (ddd, IH, 7 = 7.8 Hz, J2 = 4.8 Hz, 7 = 0.9 Hz), 7.45 (dd, IH, 7 = 8.2 Hz, J2 = 8.0 Hz), 7.66 (ddd, IH, 7 = 8.2 Hz, J2 = 2.0 Hz, Λ = 1.0 Hz), 7.78 (ddd, IH, 7 = 7.8 Hz, J2 = 2.4 Hz, J3 = 1.7 Hz), 7.86 (dd, IH, 7 = 2.1 Hz, 7 = 2.0 Hz), 8.52 (dd, IH, 7, = 4.8 Hz, J2 = 1.7 Hz), 8.60 (dd, IH, 7 = 2.4 Hz, J2 = 0.9 Hz), 9.63 (t, IH, J= 6.0 Hz), 11.55 (s, IH).
I3C NMR (DMSO-7) δ 41.2, 118.1, 119.0, 123.6, 124.7, 130.9, 133.4, 133.6, 135.4, 138.9, 148.6, 148.9, 158.2, 161.7.
MS (FAB) m/z (%) 318 (M+ + H, 30), 123 (22), 107 (33).
Elem. anal.: izračunana za C14H12CIN5O2 (M = 317.73 g/mol): 52.92% C, 3.81% H, 22.04% N; ugotovljena: 53.14% C, 3.88% H, 21.72% N.
PRIMER 7
Rezultati bioloških testov ugotavljanja učinkovitosti inhibitorjev Ddl:
Struktura Ddl MIC
E.coli 1411 E.coli SM 1411 S. aureus 8325-4
N H >1 Y 0 IC50=119pM >256 >256 >256
p n==n /° /=C V7 ICS0=158pM >256 >256 >256
0 ICS0=49pM >256 >256 >256
H Ϊ 0 ICS0=25pM >256 >256 >256
χ-γ\κΧζΝγκ\^Ο IC50=123pM >256 >256 >256
α o IC50=187pM >256 >256 >256
0 c,\ /K. ψ Cl 0 IC50=133pM >256 >256 >256
0 α --'r'O HBF4 N ΙΟ50=76μΜ >256 >256 >256
Struktura Ddl MIC
E.coli 1411 E.coli SM 1411 S.aureus 83254
CH, Lch- Axx· N H II ° Y 0 ICS0=37pM >256 >256 >256
Cu«y qV ΙΟ50=111μΜ 64 64 64
0 q^A-y~q Cl IC5o=15pM 64 64 256
0 IC50—3611M 64 64 128
CUVYyO ICsos41pM >256 >256 >256
PATENTNI ZAHTEVKI

Claims (6)

1. Spojine s splošno formulo I,
X1 O O X2 i ! I II II I 9 9
W—Y— N-C- N= N-C- N-γ-W2 (I) v kateri pomenijo:
1 Ύ
X , X : vodik, Ci.6 linearni ali razvejani alkil, (aril) -NH- , -0-, -(CH2)n- (pri čemer je n lahko 0 do 5), Ci_6 razvejani alkil;
Υ1, Y2: -(CH2)n- (pri čemer je n lahko 0 do 5), Ci-6 razvejani alkil; -NH-, -C=O; -NHCO-,
-C0NH-;
W\ W2: - vodik,
- Ci_6 linearni ali razvejani alkil, ki je lahko substituiran z eno ali večimi nitro skupinami, z enim ali večimi halogeni, s trifluorometilno skupino, z eno ali večimi hidroksi skupinami,
- fenil, ki je lahko nesubstituiran ali substituiran z eno ali večimi nitro skupinami, z enim ali večimi halogeni, s trifluorometilno skupino, z eno ali večimi hidroksi skupinami, z enim ali več Ci.g linearnim ali razvejanim alkilom, z eno ali večimi Ci-8 linearno ali razvejano alkoksi skupino, z eno ali večimi nesubstituiranimi oziroma substituiranimi fenilnimi skupinami,
- nesubstituiran ali substituiran naftil,
- fluorenil,
- 5- do 7- členski monociklični ali 7- do 10- členski biciklični heterociklični obročni sistem, ki je lahko substituiran ali nesubstituiran in ki lahko vsebuje poleg ogljikovih atomov do 3 heteroatome izbrane med N,O, P in S,
- 3- do 10- členski monociklični ali 7- do 10- členski biciklični karbociklični obročni sistem, ki je lahko substituiran ali nesubstituiran in ki lahko vsebuje poleg ogljikovih atomov do
3 heteroatome izbrane med N,O, P in S.
2. Spojine s formulo I po zahtevku 1 označene s tem, da se uporabljajo kot terapevtsko aktivne snovi.
3. Postopek za pripravo spojin s formulo I po zahtevku 1 označem s tem, da
a) nesimetrični derivat nastane tako, da izocianat s formulo II (ki ga pripravimo iz ustreznega amina s fosgenom, difosgenom ali trifosgenom v aprotičnem suhem topilu v prisotnosti terciarnega amina) reagira s karbazatom III (R = Cj.6 linearni ali razvejani alkil) v aprotičnem topilu,
W1— Y—N—C=O (Π)
O
H,N-N— 2 H
OR (III) pri tem dobimo ustrezen 1,4-disubstituiran semibarbazid IV; isto spojino je mogoče pripraviti iz 4-substituiranega semikarbazida V, če le-ta reagira s kloroformatom VI (R = Ci_6 linearni ali razvejani alkil);
X1 O O X1 O . . I II II 2 , 1 1 I II O
W1—Y—N—C—N—N—C—O—Y—Vv W—Υ^-Ν-Ο-Ν-ΝΚ II
H H H 2 Cl—U— OR (IV) (V) (VI) nastali 1,4-disubstituirani semikarbazid IV pretvorimo s primernim organskim ali pa anorganskim oksidantom v aminokarbonil diazenkarboksilat VII, slednjega s substitucijo alkoksi skupine s primarnim ali sekundarnim aminom VIII prevedemo v diazendikarboksamid I;
X1 O
Ν-Υ-VV2
H
W1— Y1-N-C-N=N-C-OR (VII) (Vlil)
b) simetrični derivat diazendikarboksamida I (X1 = X2, Υ1 = Y2, W' = W2) dobimo, če dialkil diazendikarboksilat obdelujemo z najmanj dvema ekvivalentoma primarnega ali sekundarnega amina VIII v protičnem oziroma aprotičnem topilu, lahko pa tudi brez prisotnosti topila, pri čemer poteče nukleofilna substitucija obeh alkoksi skupin.
4. Uporaba spojin s splošno formulo I po zahtevku 1 za pripravo zdravil, ki se uporabljajo za zaviranje Ddl pri bakterijskih infekcijah.
5. Farmacevtski pripravki, označeni s tem, da vsebujejo terapevtsko učinkovito množino spojine s formulo I po zahtevku 1 in farmacevtsko sprejemljive pomožne snovi.
6. Farmacevtski pripravki po zahtevku 5 označeni s tem, da se uporabljajo za zaviranje Ddl pri bakterijskih infekcijah človeka in drugih sesalcev.
SI200600186A 2006-08-18 2006-08-18 Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze SI22338A (sl)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SI200600186A SI22338A (sl) 2006-08-18 2006-08-18 Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze
EP07468010A EP1889831A3 (en) 2006-08-18 2007-08-07 Diazenedicarboxamides as inhibitors of D-alanine: D-alanine ligase (Ddl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SI200600186A SI22338A (sl) 2006-08-18 2006-08-18 Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SI22338A true SI22338A (sl) 2008-02-29

Family

ID=38777962

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI200600186A SI22338A (sl) 2006-08-18 2006-08-18 Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze

Country Status (2)

Country Link
EP (1) EP1889831A3 (sl)
SI (1) SI22338A (sl)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102408359A (zh) * 2011-08-30 2012-04-11 中平能化集团开封东大化工有限公司 一种偶氮二甲酰胺的清洁生产方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB873597A (en) * 1959-01-05 1961-07-26 Wallace & Tiernan Inc Manufacture of azo compounds
GB976552A (en) * 1960-10-25 1964-11-25 Whiffen & Sons Ltd Preparation of azoamides
US3634493A (en) * 1968-04-11 1972-01-11 Rohm & Haas Oil-soluble azo compounds
CH539281A (it) * 1968-09-09 1973-07-15 Minnesota Mining & Mfg Emulsione fotografica e sua utilizzazione
BE754709A (fr) * 1969-08-12 1971-02-11 American Cyanamid Co Procede de preparation d'azobisformamides et de produits intermediairesde leur synthese
EP0749038A1 (en) * 1995-06-16 1996-12-18 Minnesota Mining And Manufacturing Company Light-sensitive photographic materials comprising tabular silver halide grains and azodicarbonamide derivatives
US6153633A (en) * 1998-08-11 2000-11-28 Rohm And Haas Company Stable 3-isothiazolone compositions
EE200400042A (et) * 2001-06-28 2004-10-15 Essential Therapeutics, Inc. 8/17 heterotsüklilised ühendid ning nende kasutamine D-alanüül-D-alaniini ligaasi inhibiitoritena

Also Published As

Publication number Publication date
EP1889831A2 (en) 2008-02-20
EP1889831A3 (en) 2008-10-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Altintaş et al. Synthesis of Mannich bases of some 2, 5-disubstituted 4-thiazolidinones and evaluation of their antimicrobial activities
NO20076006L (no) Acetylenderivater
NO20073956L (no) Pyrazolderivater for inhibering av CDK og GSK
NO20071125L (no) Substituerte indolyl-alkyl-aminoderivater som nye inhibitorer av histondeacetylase
ATE111499T1 (de) Überzugszusammensetzungen.
Da Costa et al. Synthesis and antitubercular activity of novel amino acid derivatives
PA8478301A1 (es) Derivados ftalacinicos inhibidores de la fosfodiesterasa 4
Supuran et al. Sulfenamido-sulfonamides as inhibitors of carbonic anhydrase isozymes I, II and IV
Salehi Ashani et al. Synthesis, Biological Evaluation and Molecular Docking of Deferasirox and Substituted 1, 2, 4‐Triazole Derivatives as Novel Potent Urease Inhibitors: Proposing Repositioning Candidate
Scozzafava et al. Carbonic anhydrase activators: part 24. High affinity isozymes I, II and IV activators, derivatives of 4-(4-chlorophenylsulfonylureido-amino acyl) ethyl-1H-imidazole
SI22338A (sl) Diazendikarboksamidi kot inhibitorji d-alanil-d-alanin ligaze
NO20080858L (no) Inhibitorer av kreftcelle-, T-celle- og keratinocytt-prolifirering
Modranka et al. Synthesis and Structure–Activity Relationship Studies of Benzo [b][1, 4] oxazin‐3 (4H)‐one Analogues as Inhibitors of Mycobacterial Thymidylate Synthase X
Granchi et al. Bioreductively activated lysyl oxidase inhibitors against hypoxic tumours
Mancuso et al. Synthesis and biological evaluation of sulfonamide‐based compounds as inhibitors of carbonic anhydrase from Vibrio cholerae
Sinha et al. Anticancer activity of aminoacid linked novel 4-methylumbelliferone derivatives
Supuran et al. Carbonic anhydrase inhibitors: N-cyanosulfonamides, a new class of high affinity isozyme II and IV inhibitors
Vullo et al. New pyridinium salt derivatives of 2-(hydrazinocarbonyl)-3-phenyl-1H-indole-5-sulfonamide as selective inhibitors of tumour-related human carbonic anhydrase isoforms IX and XII
ATE208766T1 (de) (2-morpholinylmethyl)benzamid-derivate
Shulaeva et al. Synthesis and antimycobacterial activity of pyridinium compounds with sulfonylacetamide substituent in N-alkyl chain
Maddipatla et al. Exploring rhodanine linked enamine–carbohydrazide derivatives as mycobacterial carbonic anhydrase inhibitors: Design, synthesis, biological evaluation, and molecular docking studies
Ripain et al. NEW 2, 4, 5-TRISUBSTITUTED-1, 3-THIAZOLE DERIVATIVES: SYNTHESIS, IN VITRO ANTIMICROBIAL ACTIVITY AND IN SILICO STUDY
WO2006077139A2 (en) Peptide deformylase inhibitors, their use, and pharmaceutical compositions containing the same
Daniel et al. IN SILICO DOCKING STUDIES, SYNTHESIS AND CHACTERIZATION OF SOME NOVEL 1, 3, 4 THIADIAZOLE ANALOGUES OF 4-AMINO HIPPURIC ACID AS POTENT ANTIMICROBIAL AGENTS
DK1098901T3 (da) Nye 6-deoxyerythromycinderivater, fremgangsmåde til deres fremstilling samt deres anvendelse som lægemidler

Legal Events

Date Code Title Description
OO00 Grant of patent

Effective date: 20061122

KO00 Lapse of patent

Effective date: 20100422