CS248014B2 - Method of ferment hydrolysis of the raffinose - Google Patents
Method of ferment hydrolysis of the raffinose Download PDFInfo
- Publication number
- CS248014B2 CS248014B2 CS81692A CS69281A CS248014B2 CS 248014 B2 CS248014 B2 CS 248014B2 CS 81692 A CS81692 A CS 81692A CS 69281 A CS69281 A CS 69281A CS 248014 B2 CS248014 B2 CS 248014B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cells
- raffinose
- broth
- hydrolysis
- var
- Prior art date
Links
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 title claims description 14
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 14
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 title claims description 14
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 title claims description 9
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 title claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 20
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 20
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 6
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims description 3
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 claims 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 24
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 2
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- XDIYNQZUNSSENW-NUVHGKSTSA-N (2r,3s,4s,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-NUVHGKSTSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235389 Absidia Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- KMJWGKVNGYJJEP-AZAVZNNYSA-N C(C(O)C)(=O)O.OCC(O)CO.C(C)O.C([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO)O Chemical compound C(C(O)C)(=O)O.OCC(O)CO.C(C)O.C([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO)O KMJWGKVNGYJJEP-AZAVZNNYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001450911 Circinella Species 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000002897 organic nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2465—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on alpha-galactose-glycoside bonds, e.g. alpha-galactosidase (3.2.1.22)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/12—Disaccharides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/94—Saccharomyces
- Y10S435/942—Saccharomyces cerevisiae
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
248014
Vynález se týká způsobu enzymatické hyd-rolýzy rafinózy při výrobě cukru.
Rafinóza, trisacharid, který je obsažen vevýznamných množstvích v cukrové řepě, za-braňuje krystalizaci sacharózy, čímž se sni-žují výtěžky extrakce. Tato skutečnost před-stavuje vážný ekonomický problém v cukro-varech, takže hydrolýza rafinózy je nutnápro zlepšení kvality a účinnosti způsobukrystalizace extrahovaného cukru. Četné publikace popisují enzymové způso-by hydrolýzy rafinózy, používající enzymyextrahované z četných druhů mikroorganis-mů rodů Absidia, Aspargillus, Bacillus, Cir-cinella, Escherichia, Micrococcus, Mortierel-la, Penlcilium a dalších.
Avšak buněčné extrakty po kultivaci mno-ha mikroorganismů neobsahují jenom a-ga-laktosidázu, avšak rovněž invertázu, takžepři zpracování melasy z cukrové řepy je hyd-rolýza rafinózy provázena nežádoucí hyd-rolýzou sacharózy.
Tyto nedostatky odstraňuje vynález způ-sobu enzymatické hydrolýzy rafinózy při vý-robě cukru, který spočívá v tom, že se en-zymatická reakce provádí v přítomnosti buď a) buněk, nebo b] surového nebo čištěného enzymu ob-sahujícího extraktu z rozrušených buněknebo cj enzymů imobilizovaných uvedením dostyku s makromolekulárními sloučeninamiza vzniku chemických vazeb s matricí, neboiontovou vazbou, nebo fyzikální imobilizací,nebo d) buněk imobilizovaných fyzikální imo-bilizací mikroorganismu Saccharomyces ce-revisiae var. oleaceus NRRL Y 12 056. Výhoda tohoto vynálezu spočívá v tom, žemikroorganismus vybraný autory a náleže-jící k rodu Saccharomyces šťastným způso-bem spojuje výhodu doby kultivace, která jepozitivně snížena ve srovnání s plísněmi,které mají a-galaktosidázový účinek, a;le ne-mají invertázový účinek.
Tento mikroorganismus, který byl izolo-ván z odpadních vod lisoven olivového ole-je v okolí Monterotonda (Řím, Itálie) bylklasifikován jako Saccharomyces cerevisiae,var. oleaceus a Saccharomycetes cerevisiae,var. oleaginosus a byl řádně uložen u Nor-thern Regional Center, US Department ofAgriculture, Peoria, 111., Spoj. státy americ-ké, kde mu bylo přiděleno depozitní čísloNRRL Y 12 056. Dále jsou uvedeny jeho kultivační, mor-fologické a fyziologické znaky: A — Kultivační znaky: 1. Pevné prostředí (3 dny): sladový agar
Kolonie jsou pastovité, krémově zbarvenéa lesklé. 2. Tekuté prostředí (3 dny): sladový extrakt.
Vytváří se sediment (u S. cerevisiae var.oleaginosus se pozoruje vznik slabého prs-tence ). B — Morfologické znaky: 1. Pevné prostředí (3 dny): sladový agar.
Buňky jsou elipsoidní, válcovité a někdyprotáhlé. 2. Tvorba pseudomycelia nebo pravého my-celia2
Za anaerobních podmínek je přítomno ru-dimentární pseudomycelium. C — Sexuální znaky:
Vegetativní buňky se přeměňují přímo veváčky (asky), které obsahují jednu ažčtyři kulovité spory. D — Fyziologické znaky: 1. Využívání zdrojů uhlíku: a) fermentace: ........ S. cerevisiae var. oleaceus S. cerevisiae var. oleaginosus glukóza 3? + galaktóza — — nialtóza — + trehalóza — melibióza + rafinóza — + 248014 s 6 b) asimilace: S. cerevisiae var. oleaceus S. cerevisiae var. oleaginosus glukóza galaktóza maltóza trehalóza melibióza rafinóza D-manit D-glucit ethanol glycerin kyselina DL-mléčná + + i± :+ .— + 1 + + + .+ í + + + •i i± — ;+ ± ±· ± % —
Jiné uhlíkaté sloučeniny nejsou asimilo-vány. 2. Asimilace dusíkatých sloučenin:
Dusičnan draselný: negativní 3. Růst při teplotě 37 °C: pozitivní.
Klasifikace byla provedena podle schéma-tu popsaného J. P. Van der Waltem v práci„The Yeasts“, druhé vydání, redigované J.Lodderovou.
Kultury kmenů, které náležejí k tomutovynálezu, lze připravit za aerobních podmí-nek některou známou metodou, napříkladpovrchovou kultivací nebo s výhodou v sulb-merzních kulturách za použití fermentorůs míchadly.
Kultivační prostředí, které může být pev-né nebo tekuté, obsahuje zdroj asimílova-telného uhlíku, zdroj dusíku a minerálnísoli.
Jako zdroje uhlíku lze použít glukózy, me-libiózy, rafinózy i jiných cukrů, glycerolu aoctanu sodného.
Jako zdroje dusíku lze použít anorganic-kých a organických dusíkatých sloučenin,například masového extraktu, kvasničnéhoextraktu, peptoinu, triptonu, kaseinovýchhydrolyzátů s aminokyselinami, sójové mou-ky a amonných solí.
Jinou obzvláštní výhodou plynoucí z po-užití zmíněných mikroorganismů je skuteč-nost, že enzym je produkován při jejich kul-tivaci na glukóze (enzym je konstitutivní).
Vhodné kultivační médium má napříkladnásledující složení:
Kvasničný extrakt: 5 až 20 g/1 (gramy v litru)Glukóza: 10' g/1
Stopy NaHáPCh
MgSOi, (NHíJaSOd 1 g/1
Rozsah hodnot pH pro kultivaci je od 4do 7 a s výhodou je od 5,0 do 5,5, teplotamezi 20 °C a 40 °C, s výhodou mezi 25 a 28 0Celsia.
Produkci enzymu lze zvýšit přidáním ma-lých množství melibióžy, o níž je známo, žeje disacharidem získaným parciální hydrolý-zou rafinózy. Melibiózu lze přidávat přímo do kultivačního prostředí před inokulem ne-bo po logaritmickém stadiu růstu. Doba in-dukce se může pohybovat od 16 do 72 ho-din a je s výhodou mezi 40 a 48 hodinami.
Buňky shromážděné během fermentacenebo po jejím dokončení lze používat jakotakové nebo ve formě suchého prášku. Al-ternativně lze použít surových nebo čiště-ných extraktů takových buněk. K tomuto ú-čelu se buňky některým známým způsobemdesintegrují a použije se surového nebo pře-čištěného extraktu obsahujícího enzym.
Posléze lze dalšího technického a ekono-mického zlepšení docílit imobilizací enzymujeho spojením s makromolekulárními slou-čeninami za vzniku chemických vazeb s no-sičem nebo iontovou vazbou nebo rovněž fy-zikální imobilizací enzymu nebo buněk.
Takto získané buňky se přidávají jako ta-kové nebo imobilizované k reakční směsi,která obsahuje melasu, při hodnotě pH vrozsahu 4 až 7 a při teplotě 30 až 60 qC. Ra-finóza, která je obsažena v melase se potomhydrolyzuje na galaktózu a sacharózu, jejížvýtěžek se takto zlepšuje. Následující příklady ilustrují způsob pro-vedení vynálezu, aniž by jej omezovaly.Přikladl Připraví se živná půda následujícího slo-žení: (NH4)aSO4 5 g/1 MgSOí. 7 HzO 5 g/1 NazHPCU. 12 HaO 4,6 g/1 KH2PO4 3 g/1 NaCl 0,1 g/i CaCl2 0,05 g/1 kvasničný extrakt 10 g/1 melibióza 10 g/1
Tyto sloučeniny se rozpustí v deionizova-né vodě a okyselí na hodnotu pH 3,5 kyse-linou chlorovodíkovou.
Takto připravené kultivační prostředí by-lo rozděleno do širokohrdlých 500 ml Erlen-meyerových baněk (100 ml živného pro-středí v baňce, sterilizace při 116 °C po do-bu 30 minut). Baňky byly očkovány po 1 248014 mililitru ikmene Saccharomyces cerevisiae,var. oleaceus ve 250ml baňkách, obsahují-cích stejnou živnou půdu a kultivace bylavedena při teplotě 25 °C po dobu 16 hodinza míchání (180 otáček za minutu).
Fermentační baňky byly umístěny k inku-baci za míchání (180 otáček za minutu) přiteplotě 25 °C.
Po 40 hodinách od inokulace byly buňkyze živného prostředí izolovány Odstředěníma promytým fosfátovým pufrem (0,1 M, hod-nota pH 5,6). Ze 100 ml živného prostředíbylo získáno 0,55 g sušených buněk.
Vlhké buňky izolované ze 100 ml živnépůdy byly resuspendovány pe 100 ml fosfá-tového pufru (0,1 M, hodnota pH 5,6) a bylahodnocena enzymová aktivita. 1 g sušenýchbuněk obsahoval asi 1.107 enzymových jed-notek. Enzymová aktivita byla měřena ná-sledujícím způsobem. K 1 ml pufrované buněčné suspenze bylypřidány 4 ml fosfátového pufru (0,1 M, hod-nota pH 5,6) a několik kapek toluenu k roz-bití buněčných stěn. Po 15 minutách inku-bace za míchání při teplotě 40 C,C byla sus-penze doplněna 10 ml 1% roztoku (hmot-nost/objem) melibiózy ve fosfátovém pufru(0,1 M, hodnota pH 5,6).
Reakce byla inkubována při teplotě 40 °Cpo dobu 2 hodin ve vodní lázni za míchánía byla přerušena zahřátím vzorků odebra-ných z reakční směsi k teplotě varu.
Koncentrace glukózy získané hydrolýzoumelibiózy během reakce byla stanovena ko-lorimetrickou GOD-Peridovou metodou po-dle firmy Boehringer Mannheim GmbH.
Optická hustota barevných vzorků bylaměřena při teplotě místnosti na Parkin-El-mer-Colemanově 55 spektrofotometru, op-tická dráha lodičky = 0,1 dm (decimetr) přivlnové délce 436 milimikronů.
Jestliže se definuje jako jedna jednotkato množství enzymu, které produkuje 1 mik-rogram glukózy za dobu 2 hodin při výšeuvedených pokusných podmínkách, jednot-ky enzymu v 1 gramu sušených buněk lzevypočítat z následujícího vzorce: . U . = tE2h — Eoh) . 18,2 . 15 . 100
gramy. ~ Estandard C sušených buněk kde E2h značí optickou hustotu vzorku ode-braného po 2 hodinách, EOh značí optickou hustotu vzorku ode-hraného při nula hodinách,
Estandard značí optickou hustotu standard-ního roztoku glukózy, který obsahuje 18,2mikrogramu glukózy v 1 mililitru, C značí gramy sušených buněk ve 100 mlživné půdy. Příklad 2
Byla připravena kultivační půda následu- jícího složení: (NH4)2SO4 5 g/i MgSCU. 7 HzO 0,5 g/1 NazHPOé. 12 HaO 4,6 g/1 KH2PO4 3 g/1 NaCl 0,1 g/1 CaCk 0,05 g/1 kvasničný extrakt 10 g/1 glukóza 10 g/1 Výše uvedené sloučeniny byly rozpuštěnyv deionizované vodě a hodnota pH bylapotom upravena na 5,3 kyselinou chlorovo-díkovou.
Kultury kmene Saccharomyces cerevisiae,var. oleaceus, v této půdě, připravené, jakbylo uvedeno v příkladu 1, byly inkuboványza míchání (orbitálně, 180 otáček za minu-tu) při teplotě 27 °C. 39 hodin po inokulaci byly buňky ze živnépůdy izolovány odstředěním a promyty fos-fátovým pufrem (0,1 M, hodnoty pH 5,6).
Ze 100 ml živné půdy bylo získáno 0,546 gsušených buněk. Buňky izolované ze 100 mlživné půdy byly znovu suspendovány ve 100mililitrech fosfátového pufru (0,1 M, hod-noty pH 5,6) a hodnoceny na enzymovouaktivitu: 1 g sušených buněk obsahoval9,4.10e enzymových jednotek. Příklad 3
Bylo připraveno kultivační prostředí ná-sledujícího složení: (NH4)2SO4 5 g/1 MgSO4.7 H2O 0,5 g/1 NazHPOi. 12 H2O 4,6 g/1 KH2PO4 3 g/1 NaCl 0,1 g/i CaCl2 0,05 g/1 kvasničný extrakt 10 g/1 glukóza 10 g/1 melibióza 1 g/1 Výše uvedené sloučeniny byly rozpuště-ny v deionizované vodě a hodnota pH bylaupravena přidáním kyseliny chlorovodíkovéna 5,3.
Kultury kmene Saccharomyces cerevisiae,var. oleaceus, připravené stejně jako v pří-kladu 1, byly inkubovány za orbitálního mí-chání (180 otáček za minutu) při teplotě27 °G. Po uplynutí 43 hodin po inokulaci by-ly buňky izolovány ze živné půdy odstředě-ním a promyty fosfátovým pufrem (0,1 M,hodnoty pH 5,6). Ze 100 ml živné půdy bylozískáno 0,594 g sušených buněk.
Claims (1)
- 248 9 Buňky izolované ze 100 ml živné půdy by-ly znovu suspendovány ve 100 ml fosfáto-vého pufru (0,1 M, hodnoty pH 5,6) a hod-noceny na enzymovou aktivitu: 1 g suše-ných buněk obsahoval 1,6.107 enzymovýchjednotek. Přikládá Bylo připraveno kultivační prostředí ná-sledujícího složení* (NH4)2SOi 5 g/l MgSOi. 7 H2O 0,05 g/l NazHPOd. 12 HaO 4,6 g/l KH2PO1 3 g/l NaCl 0,1 g/l CaCh 0,05 g/l kvasníčný extrakt 10 g/l glukóza 5 g/l melihióza 5 g/l Výše uvedené sloučeniny byly rozpuštěnyv deionizované vodě a hodnota pH byla na- 14 10 stavena na 5,3 kyselinou chlorovodíkovou. Kultury Saccharomyces cerevisiae, var.oleaceus v této půdě, připravené stejně jakov příkladu 1, byly inkubovány za orbitální-ho míchání (180 otáček za minutu) při tep-lotě 29 C,C. 48 hodin od inokulace živné pů-dy byly buňky izolovány odstředěním a pro-myty fosfátovým pufrem (0,1 M, hodnotapH 5,6). Ze 100 ml kultivační půdy bylozískáno 0,365 g sušených buněk. 6 ml kultivační půdy bylo přidáno 50 mlmelasy hustoty 35° Brixiho, obsahující 1,6hmotnostních procent rafinózy, vztaženo naobsah sušiny, a bylo nastaveno na hodnotupH 5,2 kyselinou sírovou. Zpracování byloprováděno při teplotě 40 °C za míchání podobu 16 hodin. Koncentrace galaktózy, pro-duktu hydrolýzy rafinózy během reakce by-la stanovena způsobem UF-testu laktózo/ga-laktóza podle firmy Boehringer MannheimGmbH. Za výše uvedených podmínek vznik-lo 153 mikromolů galaktózy ekvivalentníchhydrolýze 30 % celkově přítomné rafinózy. pRedmět Způsoib enzymatické hydrolýzy rafinózypři výrobě cukru, vyznačující se tím, že sereakce provádí v přítomnosti buď a) buněk,nebo b) surového nebo čištěného enzymu ob-sahujícího extrakt z rozrušených buněk,nebo c) enzymů imobilizovaných uvedením do YNÁLEZU styku s makromolekulárními sloučeninamiza vzniku chemických vazeb s matricí, ne-bo iontovou vazbou, nebo fyzikální imobi-lizací, nebo d) buněk imobilizovaných fyzikální imo-bilizací mikroorganismu Saccharomyces ce-revisiae var. oleaceus NRRL Y 12 056.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT19618/80A IT1130242B (it) | 1980-02-01 | 1980-02-01 | Procedimento per la produzione dell'enzima alfa-galattosidasi e per l'idrolisi del raffinosio mediante l'impiego dell'enzima stesso |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS248014B2 true CS248014B2 (en) | 1987-01-15 |
Family
ID=11159686
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS81692A CS248014B2 (en) | 1980-02-01 | 1981-01-30 | Method of ferment hydrolysis of the raffinose |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4376167A (cs) |
| JP (1) | JPS56121485A (cs) |
| BE (1) | BE887293A (cs) |
| BG (1) | BG42525A3 (cs) |
| CA (1) | CA1163939A (cs) |
| CS (1) | CS248014B2 (cs) |
| DD (1) | DD157564A5 (cs) |
| DE (1) | DE3049308C2 (cs) |
| DK (1) | DK153410C (cs) |
| FI (1) | FI70596C (cs) |
| FR (1) | FR2481315A1 (cs) |
| GB (1) | GB2068972B (cs) |
| HU (1) | HU183303B (cs) |
| IE (1) | IE51009B1 (cs) |
| IT (1) | IT1130242B (cs) |
| LU (1) | LU83094A1 (cs) |
| NL (1) | NL8100476A (cs) |
| NO (1) | NO162347C (cs) |
| PL (1) | PL127026B1 (cs) |
| RO (1) | RO80915A (cs) |
| SE (1) | SE453836B (cs) |
| SU (1) | SU1090262A3 (cs) |
| TR (1) | TR21577A (cs) |
| YU (1) | YU42232B (cs) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1140312B (it) * | 1981-12-03 | 1986-09-24 | Anic Spa | Procedimento per la produzione di alfa-galattosidasi e impieghi dell'enzima cosi' ottenuto |
| US4643901A (en) * | 1983-06-10 | 1987-02-17 | Universal Foods Corporation | Yeast strains, method of production and use in baking |
| JPS61231993A (ja) * | 1985-04-09 | 1986-10-16 | Oriental Yeast Co Ltd | 新規パン酵母 |
| US5055401A (en) * | 1987-04-10 | 1991-10-08 | Alko Ltd. | Construction of new α-galactosidase producing yeast strains and the industrial application of these strains |
| NZ233582A (en) * | 1989-05-16 | 1992-05-26 | Akpharma Inc Formerly Aek Dev | Oral composition comprising alpha-galactosidase |
| JPH07102138B2 (ja) * | 1989-07-19 | 1995-11-08 | 日本甜菜製糖株式会社 | 新規組換えプラスミド |
| US5356804A (en) * | 1990-10-24 | 1994-10-18 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City Of New York | Cloning and expression of biologically active human α-galactosidase A |
| US5401650A (en) * | 1990-10-24 | 1995-03-28 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Cloning and expression of biologically active α-galactosidase A |
| WO2006007560A2 (en) * | 2004-07-01 | 2006-01-19 | University Of Pennsylvania | Targeted protein replacement for the treatment of lysosomal storage disorders |
| EP3741384A1 (en) | 2011-09-07 | 2020-11-25 | Mount Sinai School Of Medicine | Ceramidase and cell differentiation |
| WO2013181530A1 (en) | 2012-06-01 | 2013-12-05 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Ceramide levels in the treatment and prevention of infections |
| PL2968479T3 (pl) | 2013-03-14 | 2019-10-31 | Icahn School Med Mount Sinai | Kompozycje terapeutyczne ceramidazy kwasowej i sposoby ich wytwarzania i stosowania |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1485502A (en) * | 1974-06-05 | 1977-09-14 | Aarhus Oliefabrik As | Process for removal of water-soluble carbohydrates in the production of plant protein products |
| CH627626A5 (fr) * | 1978-01-04 | 1982-01-29 | Nestle Sa | Procede d'elimination des sucres flatulents du soja. |
-
1980
- 1980-02-01 IT IT19618/80A patent/IT1130242B/it active
- 1980-12-05 US US06/213,657 patent/US4376167A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-12-29 DE DE3049308A patent/DE3049308C2/de not_active Expired
- 1980-12-30 IE IE2742/80A patent/IE51009B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-12-30 DK DK557080A patent/DK153410C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-12-31 CA CA000367758A patent/CA1163939A/en not_active Expired
- 1980-12-31 FI FI804090A patent/FI70596C/fi not_active IP Right Cessation
-
1981
- 1981-01-08 BG BG050349A patent/BG42525A3/xx unknown
- 1981-01-08 PL PL1981229117A patent/PL127026B1/pl unknown
- 1981-01-13 YU YU58/81A patent/YU42232B/xx unknown
- 1981-01-20 TR TR21577A patent/TR21577A/xx unknown
- 1981-01-23 RO RO81103195A patent/RO80915A/ro unknown
- 1981-01-27 LU LU83094A patent/LU83094A1/fr unknown
- 1981-01-27 GB GB8102439A patent/GB2068972B/en not_active Expired
- 1981-01-28 FR FR8101643A patent/FR2481315A1/fr active Granted
- 1981-01-29 NO NO810306A patent/NO162347C/no unknown
- 1981-01-29 BE BE0/203642A patent/BE887293A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-01-30 SU SU813288200A patent/SU1090262A3/ru active
- 1981-01-30 JP JP1178881A patent/JPS56121485A/ja active Granted
- 1981-01-30 HU HU81220A patent/HU183303B/hu not_active IP Right Cessation
- 1981-01-30 SE SE8100741A patent/SE453836B/sv not_active Application Discontinuation
- 1981-01-30 NL NL8100476A patent/NL8100476A/nl not_active Application Discontinuation
- 1981-01-30 CS CS81692A patent/CS248014B2/cs unknown
- 1981-02-02 DD DD81227378A patent/DD157564A5/de not_active IP Right Cessation
-
1982
- 1982-11-05 US US06/439,378 patent/US4450238A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5294546A (en) | Method for production of a growth factor for Bifidobacterium sp. | |
| SE462394B (sv) | Foerfarande foer framstaellning av cellulolytiska enzym | |
| CS248014B2 (en) | Method of ferment hydrolysis of the raffinose | |
| US6255085B1 (en) | Production of chitosan and chitin | |
| IL24529A (en) | Process for preparing cephalosporin derivatives | |
| JPS6196989A (ja) | Ｄ‐α‐アミノ酸アミドの相応するＤ‐α‐アミド酸への酵素加水分解法 | |
| GARG et al. | Continuous production of citric acid by immobilized whole cells of Aspergillus niger | |
| Yi et al. | Formation of α, ω-dodecanedioic acid and α, ω-tridecanedioic acid From different substrates by immobilized cells of a mutant of Candida tropicalis | |
| US6485946B1 (en) | Production of chitosan and chitin | |
| US4011135A (en) | Production of L(+)-tartaric acid | |
| Lakshmi et al. | Rapid relase of protoplasts from Eremothecium ashbyii in comparison with Trichoderma reesei and Penicillium chrysogenum using Novozyme and Funcelase | |
| JPH0121957B2 (cs) | ||
| EP0262858B1 (en) | Method for production of a growth factor for bifidobacterium Sp. | |
| JP3433300B2 (ja) | 酵母細胞壁溶解酵素高生産菌及びこれを用いる酵母細胞壁の溶解方法 | |
| US5565343A (en) | Process for the production of dulcitol from lactose | |
| CN113862316A (zh) | 一种生物转化合成5-氟尿嘧啶的方法 | |
| CN116656502A (zh) | 一种出芽短梗霉变种h026及其应用 | |
| CN115838747A (zh) | 一种褐藻胶裂解酶的基因、重组细胞、其构建方法及应用 | |
| CN111893106A (zh) | 一株异源表达纤维素酶基因egⅴ的毕赤酵母工程菌株及应用 | |
| JPS6178384A (ja) | セルラ−ゼの製造方法 | |
| JPH04325096A (ja) | （Ｒ）−２−ハロプロピオン酸および（Ｒ）−２−ハロ−ｎ−酪酸の製造法 | |
| JPS63309196A (ja) | β−１，４−マンノトリオ−スの製造方法 | |
| Benattouche et al. | Optimization, purification and characterization of invertase by Pseudomonas sp, isolated from the cane molasse | |
| JPS5811195B2 (ja) | 好熱菌、チエラビアテレストリスによるセルラ−ゼ及びその製法 | |
| CZ9904340A3 (cs) | Způsob výroby kyseliny lysergové |