CS241502B2

CS241502B2 - Method of bandage cloth production

Info

Publication number: CS241502B2
Application number: CS82938A
Authority: CS
Inventors: Eberhard Zimmermann; Ulrich Schiele
Original assignee: Hormon Chemie Muenchen
Priority date: 1981-02-16
Filing date: 1982-02-11
Publication date: 1986-03-13
Also published as: EP0059265A1; HU183823B; DD206936A1; CA1181689A; DE10199040I1; ATE15143T1; JPS57153645A; ZA82123B; DE3105624A1; DE10199040I2; US4453939A; DE3172087D1; GR75042B; EP0059265B1; EG15603A; JPS6134830B2

Description

Řešení se týká způsobu výroby obvazového materiálu s obsahem kolagenu a látek, nutných k dosažení srážlivosti krve, vyznačující se tím, že se na kolagenový nosič nanese alespoň z jedné strany směs fibrinogenové složky ' . s obsahem fibrinogenu v množství 0,05 až . 20 mg/cm², fibrinogenu s obsahem faktoru . . XIII nebo směsi těchto látek, složky s obsahem trombinu v množství 1 pg až 5 mg/cm², složky, obsahující trombin, látky, uvolňující trombin v uvedeném množství za přítomnosti tělesných tekutin, například protrombin a srážecí faktor Xa, nebo směs těchto látek a mimoto obvyklé přísady, například ionty vápníku, inhibitory proteázy, například protaminchlorid a látky, podporující vznik a růst fibroblastů, například fibronektin a léčiva, bránící infekci, například penicilín, cefalošporin, aminoglykosidy, lincomycin, tetracykliny nebo sulfonamidy.

Vynález · se. týká způsobu výroby obvazového materiálu tak, že se na kolagenový nosič· navrství fibrinogenová složka a tromblnová složka.

Je známo používat kolagen, který je základní bílkovinou pojivové tkáně k ošetřování kůže a šlach různých živočichů fyzikálními a chemickými způsoby a je možno jej modifikovat a takto získaný kolagenový film, kolagenové rouno nebo· pěna se pak nanáší na rány, viz například DAS 16 17 780.

Je dále známo, že je možno dosáhnout místní zástavy krvácení pomocí srážecích faktorů, jako jsou například fibrinogen, trombin a srážecí faktor XIII.

Bylo již také popsáno použití kombinace fibrinogenu a kolagenu k · zástavě krvácení v srdeční chirurgii, tento způsob popisuje publikace Wien. med. Wschr. 7, 86 až 89 (1976). Tento způsob je náročný na čas i materiál, postupuje se tak, že · ·se · lyofilizovaný lidský fibrinogen zahřeje na teplotu 37 °C, načež se nanese na kolagenové rouno· a tam se vysráží s přísadou vodného · roztoku trombinu a vodného roztoku faktoru XIII, načež se kolagen přitlačí takto zpracovanou stranou s obsahem fibrinu na krvácející místo. Je však obtížné vystihnou pravý okamžik k nanesení takto získaného prostředku · na ránu. V případě, že se prostředek nanese příliš brzy, · -dostávají-se · srážecí faktory do oblastí, kde jsou naprosto nežádoucí, například do krevních cév. V případě, že se získaný materiál přiloží příliš pozdě, nedochází již k dostatečnému srážení. V případě, že se při operaci předpokládá možnost většího neočekávaného krvácení, musí být vždy k dispozici velké množství kolagenu, nasyceného fibrinem, přičemž se stává, že tento materiál vůbec není použit a je znehodnocen.

Také materiál, popsaný v DOS 29 14 822 obsahuje srážecí faktor XIII a trombin, avšak nemůže vyřešit uvedený problém, protože fibrinogen, který je rovněž nutný ke srážení není v materiálu obsažen, což znamená, že v některých případech nedostatečné srážlivosti není možno tento materiál vůbec použít.

Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že je možno v těchto případech s výhodou užít materiál, který obsahuje vedle sebe všechny faktory, nutné k dostatečnému srážení, tyto faktory však spolu reagují až v případě použití, takže tento materiál je možno skladovat po delší dobu. Pak je možno nanést nutné faktory k dosažení srážlivosti na kolagenový nosič tak, aby tyto faktory na kolagenovém nosiči lnuly, takže k tvorbě fibrinu před použitím nedochází vůbec nebo k němu nedochází ve významnějším měřítku.

Předmětem vynálezu je tedy způsob výroby obvazového materiálu s obsahem kolagenu a látek, nutných k dosažení srážlivosti krve, vyznačující se tím, že se na kolagenový nosič nanese alespoň z jedné strany směs fibrinogenové složky s obsahem fibrinogenu v množství 0,05 až 20 mg/cm², fibrinogenu s obsahem faktoru XIII nebo směsi těchto látek, složky s obsahem trombinu v množství s gg až 5 mg/cm2, složky, obsahující trombin, látky, uvolňující trombin v uvedeném množství za přítomnosti tělesných tekutin, například protrombln a srážecí faktor Xa, nebo směs těchto látek a mimoto obvyklé přísady, například ionty vápníku, inhibitory proteázy, například aprotinin, antagonisty heparinu, například protamlnchlorid a látky, podporující vznik a růst fibroblastů, například fibronektin a léčiva, brzdící infekci, například penicilín, cefalosporin, aminoglykosidy, lincomycin, tetracykliny nebo sulfonamidy.

K výrobě materiálu podle vynálezu · je možno užít různé typy kolagenu, například nativní kolagen nebo chemicky modifikovaný kolagen, jako zesítěný kolagen, esterifikovaný kolagen nebo kolagen s modifikovanými aminoskupínami.

Kolagenový nosič je možno užít ve formě pěny, rouna nebo filmu, přičemž zvláště výhodná je kolagenová pěna.

Jako fibrinogenovou složku je možno užít fibrinogen lidského nebo živočišného původu, s výhodou v množství 0,05 až 20 mg/cm², zvláště 0,5 až 5 mg/cm². Fibrinogen může být vysoce čištěný, může obsahovat malá množství srážecího faktoru XIII nebo · může být tímto faktorem, záměrně obohacen. · Obvykle se užívá fibrinogen s obsahem 0,5 až 20 jednotek/cm², s výhodou 1 až 10 jednotek/cm²faktoru XIII. Srážecí faktor XIII je možno také dodatečně přidávat. Fibrinogen je · možno užít · v krystalické formě, · amorfní formě nebo jako· lyofilizát.

Trombinová složka může být živočišného nebo lidského původu a užívá se · 1 ^^g až 5 mg/cm², s výhodou 50 ug až · 1 mg/cm².· Je také možné užít kombinace faktorů, které trombin uvolňují. Těmito faktory mohou být například protrombin a srážecí faktor Xa.

Kromě srážecích faktorů mohou být naneseny na kolagenový nosič také látky,· příznivě ovlivňující srážení a také hojení rány. Zvláště výhodné je užít inhibitoru proteázy,· například aprotinin v množství 1 až 1000 jednotek/cm² a antagonisty heparinu, například protaminchlorid v množství 0,01 až 5 · · mg/cm²nebo faktory, které podporují vznik a růst fibroplastů a tím i hojení rány, například fibronektin. Je také možno užít zdroje iontů vápníku, například chlorid vápenatý · v množství 2 nmoly až 2 ^moly/cm2.

Obvazový materiál, vyrobený způsobem podle vynálezu může obsahovat také léčiva, sloužící k potírání infekcí, například · baktericidní prostředky.

K odlišení účinné vrstvy materiálu, vyrobeného způsobem podle vynálezu je ·· možno na tuto vrstvu nanést vhodné barvivo, například hemin.

Podstatným cílem vynálezu je zajistit, aby byly v jediném materiálu vedle sebe přítomny částice fibrinogenu a částice trombinu nebo látky, z níž se trombin uvolňuje na kolagenovém nosiči, aniž by do použití tyto složky spolu reagovaly. Toho je možno dosáhnout tak, že se fibrinogen a trombin nebo látky uvolňující trombin smísí ve formě krystalů, v lyofilizované nebo v amorfní formě s organickým rozpouštědlem a k dosažení důkladného promísení se užije mixéru, přičemž obvykle dochází k rozrušení větších krystalů a dosáhne se vzniku suspenze. Tento pochod je možno provádět pro oba srážecí faktory odděleně nebo také v jediném stupni. Také ostatní faktory, příznivě ovlivňující srážlivos a hojení rány, ionty a léčiva mohou být v rozpouštědle již přítomny v suspenzi nebo v roztoku. Pak se tato suspenze nanese z jedné nebo ze všech stran na kolagenový nosič postřikem, natřením nebo namočením a rozpouštědlo se nechá odpařit při teplotě místnosti nebo za chlazení, za atmosférického tlaku nebo ve vakuu. Částice fibrinogenu a trombinu přilnou k povrchu kolagenu.

Při výrobě suspenze srážecích faktorů je možno užít velký počet organických rozpouštědel. Rozpouštědla mohou obsahovat malé množství vody, musí být dostatečně těkavá a nesmí inaktivovat srážecí faktory. Takovými rozpouštědly a prostředky pro výrobu suspenze jsou například nižší alkoholy s přímým nebo rozvětveným řetězcem o 1 až 5 atomech uhlíku, zvláště n-propanol, isopropanol, n-butanol, isobutanol a ethanol, ketony, například aceton nebo methylethylketon, alifatické nebo cykloalifatické ethery jako dimethylether nebo diethylether, tetrahydrofuran nebo dioxan, estery, například ethylester kyseliny octové, nitrily jako acetonitril nebo alifatické halogenované uhlovodíky, například tetrachlormethan, methylenchlorid nebo chloroform.

Další možností výroby svrchu uvedeného materiálu je · způsob při němž se kolagenový nosič zvlhčí rozpouštědlem, vhodným pro vznik suspenze, popřípadě s malým množstvím vody a fibrinogenová složka a trombinová složka, jakož i pomocné látky se současně nebo jedna po druhé nanesou v pevné formě rovnoměrně na zvlhčenou kolagenovou vrstvu, načež se rozpouštědlo nechá odpařit. Také v tomto případě zůstanou částice jednotlivých složek pevně lnout na povrchu kolagenového nosiče.

Je také možno postupovat tak, že se kolagenový nosič zvlhčí velmi malým množstvím vody, které stačí pouze k tomu, aby částice fibrinogenu a částice trombinu byly fixovány na povrchové vrstvě kolagenového nosiče.

Kolagenový nosič může obsahovat svrchu uvedené látky na jedné straně nebo na všech stranách. V případě, že se nanesou účinné látky pouze na jedné straně, je to výhodné pro případ, že půjde o uzavření operačních ran, protože v tomto případě je zapotřebí přiložit na ránu pouze jednu stranu obvazového materiálu, avšak v případě, že materiál, vyrobený způsobem podle vynálezu je určen k uzavření a hojení dutého prostoru, je výhodnější ponořit předem tvarovaný úsek kolagenové pěny do suspenze srážecích faktorů.

Oproti dosud známé kombinaci použití roztoku fibrinu ve vodném základě a kolagenu poskytuje obvaz, vyrobený . způsobem podle vynálezu, následující výhody.

Protože fibrinogenová složka a trombinová složka se při výrobě obvazového materiálu způsobem podle vynálezu nanášejí pří použití organického rozpouštědla, to znamená v podstatě v nepřítomnosti vody na kolagenový nosič, dochází k jejich rozpuštěnní a k výrobě fibrinu teprve tehdy, až se obvazový . materiál dostane do styku se serózní kapalinou nebo s krví. Tvorba fibrinu se tedy dostaví ve správnou dobu . a na správném místě. Také v případě, že kolagenový .nosiš se zvlhčí velmi malým množstvím vody · a pak se na něj nanese v pevném stavu fibrinogen a trombin, nedochází ve významnějším . měřítku ke vzniku fibrinu, protože voda slouží ' pouze jako pojivo mezi kolagenovým nosičem a jednotlivými částicemi srážecích faktorů.

Zacházení s materiálem, vyrobeným způsobem podle vynálezu je velmi jednoduché. Je možno jej užít v suchém stavu, takže nelne k operačním rukavicím a nástrojům a má vhodnou, elasticky formovatelnou . konzistenci. K přilnutí dochází až na ráně. Protože se fibrin tvoří pouze na kolagenovém nosiči, je možno užít také heterologních srážecích faktorů jiného než lidského původu. Výhoda spočívá v tom, že odpadá nebezpečí vzniku sérové žloutenky.

Také skladování uvedeného materiálu je jednoduché. Skladuje se v lednici nebo při teplotě místnosti za nepřístupu vlhkosti sterilně, s výhodou zatavený ve fólii.

Materiál ' je vhodný pro všechny typy ošetření ran. Je vhodný zejména jako obvaz na vnitřní i vnější rány, k zajištění operačních ran, plochých ran i dutých ran, zejména v případě operativně nebo traumaticky vzniklých velkých i malých otvorech v kostech, k zástavě krvácení tam, kde je ’ to často velmi obtížné, například při extrakcích zubů, při ušních operacích nebo při zlomeninách.

Vynález bude osvětlen následujícími příklady.

Příklad 1

000 mg fibrinogenu skotu s obsahem faktoru XIII, 25 mg trombinu skotu, 5 mg chloridu vápenatého x 2HzO, 250 000 jednotek aprotininu a 10 . mg protaminu, například ve formě chloridu se smísí v úzké a vysoké nádobě za chlazení s tak velkým množstvím chlazeného ethanolu, aby uvedené látky byly převrstveny kapalinou. Pak se celá směs homogenizuje 30 sekund pomocí ultrazvuku.

••'Vzniklá --suspenze ' se pak - stříká na kolagenovou - pěnu - o- ploše 500 cm². Pak se ethanol nechá'·· - odpařit. Částice užitých materiálů zůStanou lnout na povrchu kolagenové pěny.

Příklad 2 ¹ Ό00 mg - fibrinogenu skotu s obsahem faktoru XIII se smísí v úzké a vysoké nádobě s takovým množstvím n-propanolu, aby látka byla - převrstvena kapalinou. Pak se směs 60 sekund homogenizuje. 50 mg ' trombinu skotu se -ve - vysoké úzké nádobě smísí s tak velkým množstvím n-propanolu, aby trombin byl převrstven kapalinou. Pak -se směs homogenizuje - 10 sekund - stejným způsobem jako svrchu.

Obě suspenze se slijí a nastříkají se - na kolagenový film - ó ploše 500 cm2. Pak se n-propanol odpaří ve vakuu. Částice fibrinogenu a - částice - trombinu pevně lnou k povrchu kolagenu.

Př-íkla d - - - 3

1500- mg '-fibrinogenu skotu s- ' obsahem faktoru XII-I, - 50 - mg - trobinu skotu a 10 mg protaminu ve formě chloridu se smísí v úzké a vysoké nádobě - s tak velkým množstvím chlazeného -tetrachlormethanu, že látky jsou převrstveny kapalinou. Pak se směs homogenizuje 30 - sekund. - Suspenze se nanese postřikem na kolagenové rouno o ploše 500 cm2 Tetrachlormethan se nechá odpařit. Částice lnou k povrchu kolagenového rouna.

Přikládá

500 cm2 kolagenového rouna se - postříká ethylesterem kyseliny octové tak, že povrch je - pouze - zvlhčen. Na takto zpracovaný povrch - - se rovnoměrně nanese směs následujících látek v jemně mleté formě:

000 mg - - fibrinogenu skotu s obsahem faktoru XII mg trombinu skotu mg čhk)rddu vápenatého χ

250 000 jednotek aprotininu a mg - protammchlofidu.

Ethylester kyseliny octové se nechá odpařit. částice lnou na povrchovou vrstvu kolagenové pěny.

Příklad 5

000 mg lidského fibrinogenu s obsahem faktoru XIII, 30 mg lidského trombinu a - 10 miligramů ptrtaminchloridu se za chlazení smísí v úzké vysoké nádobě s tak - velkým množstvím n-butanolu o teplotě 0 až 4 °C, že směs je zcela převrstvena kapalinou. Výsledná směs se 30 sekund homogenizuje (Ultra-Turrax). Suspenze se stříká na 500 cm2 kolagenové pěny. Pak se n-butanol odpaří ve vakuu. Částice lnou k povrchové vrstvě kolagenové pěny.

Příklad 6

500 - mg fibtinrgenu skotu s obsahem faktoru XIII, 25 mg trombinu skotu, 10 mg protaminchloridu se smísí v úzké vysoké nádobě za chlazení s tak velkým množstvím ethanolu o teplotě 0 až 4 °C, že pevné látky jsou právě převrstveny kapalinou. Pak se směs 30 sekund homogenizuje. Do této suspenze se namáčejí kuželovité úseky kolagenové pěny, určené k vyplnění otvorů po extrakci zubů. Ethanol se nechá odpařit. Částice účinných látek lnou k povrchu kolagenu.

Příklad 7

500 mg fibrinogenu skotu, 25 mg trombinu skotu, 1 000 jednotek faktoru XIII a 5 mg ptotaminchlrrrdu se za chlazení smísí s tak velkým množstvím acetonitrilu, že pevné látky jsou kapalinou převrstveny. Po homogenizaci se suspeneze uloží do nádoby, opatřené měnitelnou výstupní štěrbinou a tímto způsobem se roztok rovnoměrně - nanese na 500 cm2 kolagenové pěny a rozpouštědlo se nechá odpařit. Nanesené částice lnou na povrchovou vrstvu kolagenové pěny.

Příklad 8

500 cm2 kolagenové pěny se pomocí příslušného zařízení postříká vodou tak, aby na 1 cm2 kolagenové pěny bylo naneseno přibližně 1 mg vody. Voda je ihned pohlcena povrchovou vrstvou kolagenové pěny, aniž by přitom byla změněna makrostruktura kolagenu. Na takto připravenou lepivou povrchovou vrstvu se nanese 500 mg fibrinogenu skotu, 20 mg trombinu skotu, 200 000 jednotek/cm2 aprotininu a 5 mg protaminu ve formě chloridu jako jemné částice. Po krátkém - skladování na vzduchu ztrácí povrchová vrstva kolagenu svoji lepivost. Nanesené částice k této povrchové vrstvě lnou.

Claims

PŘEDMĚT

1. Způsob výroby obvazového materiálu s obsahem kolagenu a látek, nutných k dosažení srážlivosti krve, vyznačující se tím, že se na kolagenový nosič nanese alespoň z jedné strany směs fibrinogenové složky s obsahem fibrlnogenu v množství 0,05 až 20 mg/cm², . fibrinogenu s obsahem faktoru XIII nebo směsi těchto látek, složky s obsahem trombinu v množství 1 μξ až 5 mg/cm2 složky obsahující trombin, látky, uvolňující trombin v uvedeném množství za přítomnosti tělesných tekutin, například prótrombin a srážecí faktor Xa, nebo směs těchto látek a mimoto obvyklé přísady, například ionty vápníku, inhibitory proteázy, například aprotinin, antagonlsty heparinu, například· protaminchlorid a látky, podporující vznik a růst fibroblastů, například fibronektin a léčiva, bránící infekci, · například penicilín, cefalosporin, aminoglykosidy, lincomycin, tetracykliny nebo sulfonamidy.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že složka s . obsahem fibrinogenu a složka s obsahem trombinu se uvede v suspenzi v prostředí organického rozpouštědla, například alkoholu a po promíchání se suspenze nanese na kolagenový nosič a rozpouštědlo se odpaří. ,