KR20070026578A

KR20070026578A - 조직 봉합제

Info

Publication number: KR20070026578A
Application number: KR1020067026158A
Authority: KR
Inventors: 타카유키 이마무라; 노리코 쉰야; 료이치 카와무라; 치카테루 노자키
Original assignee: 자이단호진 가가쿠오요비겟세이료호겐쿠쇼
Priority date: 2004-05-21
Filing date: 2005-05-18
Publication date: 2007-03-08
Also published as: WO2005113030A1; EP1759718A1; JPWO2005113030A1; US20070231372A1; EP1759718A4; AU2005244692A1; AU2005244692B2; IL179399A0; CA2567297A1

Abstract

본 발명은 안전하고 유효한 조직 봉합제에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 유효 성분으로서 트롬빈 및 피브리노겐을 함유하며, 지지체로 생체흡수성 합성 부직포를 사용하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합제; 조직 봉합제를 위한 지지체로서의 생체흡수성 합성 부직포 및 유효 성분으로서의 트롬빈 및 피브리노겐의 배합물의 사용; 조직 봉합제를 위한 유효 성분으로서의 트롬빈 고정화 생체흡수성 합성 부직포, 및 유효성분으로서의 피브리노겐의 배합물의 사용; 유효성분으로서의 트롬빈 고정화 생체흡수성 합성 부직포, 및 유효 성분으로서의 피브리노겐을 포함하는 용기를 포함하는 조직 봉합 키트; 및 기질로 트롬빈을 포함하는 용기 및 유효성분으로 피브리노겐을 포함하는 용기를 포함하는 조직 봉합 키트가 제공된다.

Description

조직 봉합제 {TISSUE SEALANT}

본 발명은 지지체로 생체흡수성 합성 부직포를 사용함을 특징으로 하는 유효성분으로서 트롬빈 및 피브리노겐을 포함하는 조직 봉합제에 관한 것이다.

다양한 외과적 수술에 있어, 조직 봉합은 많은 경우에 필요한 처치법의 하나 이다. 예를 들면, 조직 봉합은 장기 및 조직의 결손 부위 또는 절개된 표면, 또는 절개된 조직 사이의 접합부 또는 절개된 조직과 보철 물질 (prosthetic material) 사이의 접합부에 요구된다.

예로서, 점막 조직의 결손 부위의 경우에 있어서, 심막의 경우에는 심장 또는 복막의 경우에는 내장관에 주변 조직과의 점착 또는 협착 유도를 야기하여 그 곳에 기능부전을 초래할 수도 있다. 그러므로, 보철 물질을 이용한 결손부위 봉합은 때때로 시행된다. 그러나, 점착 또는 만성 염증 또는 감염과 같은 해로운 작용들이 이러한 보철 물질들에 의해 초래된다는 보고가 적지 않다.

결손 부위나 장기 및 조직의 절개된 표면을 봉합하기 위하여, 예를 들면 폐 또는 소화기관과 같은 장기의 경우, 불완전한 봉합은 기능부전에 기인하는 치명적인 위험이 수반될 수도 있고, 또는 치명적인 위험을 피하더라도, 생명의 질(QOL)에 있어서 상당한 감퇴를 가져올 수 있다. 조직 봉합을 위하여 봉합선 또는 봉합선과 지지체의 배합물이 때때로 선택된다. 그러나, 연약한 조직의 경우, 바늘로 꼬맸을 때 조직이 찢어지는 일이 적지 않고, 봉합하고, 봉합을 다시 하면, 조직이 찢어진 상태로 남아있어 수술시간이 연장되는 결과를 초래하기도 한다. 게다가, 이러한 연약한 조직에서는, 조직 봉합이 완전히 되었다 하더라도, 이의 효과가 불충분할 수 있고 재발이 종종 일어날 수 있으며, 그 결과 환자가 억지로 또 다른 외과적 수술을 받게 될 수도 있다. 이러한 문제점은 절개된 조직 사이 또는 절개된 조직과 보철물질 사이의 접합부를 봉합하기 위한 혈관의 외과적 수술에서 또한 나타날 수 있다.

효과적인 조직 봉합을 보증하기 위하여, 지지체 또는 피브린 봉합제가 봉합선과 함께 종종 사용될 수 있으나, 여기에는 더 향상될 여지가 있다. 기존의 조직 봉합은 본 발명에 의해 해결하고자 하는 문제점들 뿐만 아니라 기존의 조직 봉합법들에 대하여 하기에서 심혈관계 및 호흡기 수술 분야를 예로 들어 자세히 설명하고 있다.

심혈관계 수술 분야에서 조직 봉합과 관련하여 해결되기 위한 문제점들 중의 하나는 심장의 외과적 수술 이후 심막의 봉합이다. 심막의 결손은 심장의 외과적 수술 이후 종종 발생할 수 있으며, 심막에 있어서의 결손 부위를 봉합하는 방법은 재수술이 시행될 경우 특히 심각하게 영향을 미칠 수 있다.

최근 몇년 사이에, 열린 심장 수술이 청소년 및 수술에 진전이 있는 복잡한 케이스들에 대해서조차 시행되어 왔으나, 반면 설계에 의한 분리 수술들은 치료에 선택적으로 일상적으로 수행된다. 따라서, 따라서, 재수술이 필요한 경우가 증가할 수 있고, 소아에게 특히 그러한 경향이 강하다. 심막 및 흉골과 같은 심장 주변 조직 사이 및 심장 사이의 점착 및 외심막에 있어서의 반흔형성(cicatrization)은 그 다음의 수술에 있어서 문제가 된다. 점착이 일어나면, 점착된 조직의 분리 및 지혈에 많은 시간이 필요하게 될 수 있고, 분리 동안 심장과 거대 혈관이 손상될 가능성이 높아 사망율이 높아질 수 있다. 외심막 반흔형성이 점착 또는 만성 심막염으로부터 발생하는 경우에는, 관상동맥의 관이 육안으로 관찰되지 않을 수 있어서 관상동맥의 재수술이 어렵게 된다. 이러한 경우에 있어서 재수술시의 문제에 한정하지 않고, 수렴성 심장 내막염에 응용하기 위해, 심장이완 장애에 의한 심장 마비에도 증명될 것이다.

상기 언급한 바와 같은 수술후 점착 또는 외심막 반흔형성의 주된 원인은 외과적 수술 동안 심막의 처치에서 나타난다. 이식 또는 심장이 심막의 봉합에 의해 압축되는 경우, 예를 들면, 관상 동맥 바이패스 수술 또는 심외도관사용수술과 같은 경우에는, 심막이 때때로 봉합되지 않을 수 있다. 그러나, 만약 심막이 봉합되지 않으면, 점착이 일어날 수 있어 재수술을 하는 동안 치사 위험성이 증가할 수 있고, 그러므로 재수술의 가능성이 높은 경우에는, 심막의 결손 부위가 EPTFE제 쉬트로 채워진다. 그러나, EPTFE로 이루어진 쉬트가 사용되어도, 점착 또는 외심막에 있어서의 반흔형성은 어떤 경우, 여전히 발생할 수 있고, 게다가 쉬트는 그것이 비흡수성인 것에 기인하여 감염의 병소가 될 수 있다는 점 및 환자의 성장에 맞지 않을 수 있다는 점에서 문제가 있다. 따라서, 생적합성이 좋고, 과도한 점착 또는 염증을 유도하지 않으며, 그리고 점차적으로 분해되고 심막의 봉합을 효과적으로 유 지하기 위해 체내에서 대체되는 동안 신체에 흡수되는 봉합 물질이 요구된다.

호흡기 수술 분야에 있어서의 조직 봉합은 전형적으로 내장 늑막 (visceral pleura)의 벗겨진 표면, 폐 또는 기관지의 기둥의 절개된 표면으로부터의 공기 누출을 봉합하는 것이다. 임상적으로, 공기 누출을 봉합하는 것은 피브린 봉합제 단독으로 또는 피브린 봉합제를 지지체와 함께 봉합한 후 피브린 봉합제를 적용함에 의해 수행된다. 그러나, 공기 누출의 재발이 수술 후 빈번하게 발생될 수 있고, 어떤 기관에서는 재발이 열 외과 환자 중 여덟의 비율로 나타난다. 수술후 공기 누출의 재발은 배농관의 조기 제거, 조기퇴원을 방해할 수 있고, 또한 농흉 (empyema)과 같은 수술 후 합병증을 초래할 수도 있다. 심한 공기 누출은 때때로 호흡기 상태를 악화시켜서 재수술이 필요하게 만들 수도 있다. 게다가, 폐엽의 절제 또는 전체 폐의 적출 후 폐출혈이 발생했을 때, 재수술이 불가능하고 처치불가능하게 되는 경우가 많다. 최근 몇 년 사이에, 노년층에서 폐기종이 수반된 폐암 케이스의 수가 증가함에 따라, 수술 후 공기 누출의 재발은 중대한 관심사가 되어왔다. 이의 가능한 원인은 수술 동안의 조직의 불충분한 봉합이라고 생각되어진다. 그러므로, 보다 효과적인 봉합 수단은 압력 저항성을 가지고 또한 공기 누출이 일어나지 않을 수 있게 하는 것이 기대된다.

최근 몇 년 사이에, 부분 절제는 소형폐암 또는 비전형적 미코박테륨증 (mycobacteriosis)에 점점 많이 시행되어 왔으며, 그러므로 남아 있는 폐의 모양을 유지하고 폐의 기능을 보존하기 위한 부분의 절개된 표면을 봉합하는 것이 불필요한 봉합법이 기대되어 왔다. 조직이 연약해서 봉합이 어려운, 폐기종에 의해 수반 되는 케이스의 증가로 그 필요성이 증대되었다.

피브린 봉합제는 피브리노겐 및 트롬빈 용액을 상처 부위에 씌움에 의하여 또는 피브리노겐 및 트롬빈의 혼합 용액을 스프레이 장치로 적용함에 의하여 조직 점착, 봉합 및 조직의 지혈에 사용된다. 그러나, 피브린 봉합제가 씌움에 의해 적용될 때, 피브린 및 트롬빈 용액은 모두, 특히, 높은 경사도를 가진 표면에서 종종 흘러내릴 수 있다. 게다가, 형성된 피브린 겔은 균질하지 않게 될 수 있다. 다른 한편으로, 혼합 용액이 스프레이에 의해 적용될 때, 용액은 쉽게 흐르지 않을 수 있고, 형성된 피브린 겔은 균질하지만 용액이 조직의 안으로 깊이 침투하기 전에 응고되는 경향이 있다고 보고된 바 있다. 그러므로, 비록 조직이 무엇인지에 따라 다르지만, 충분한 봉합은 때때로 어렵다. 게다가, 피브린 봉합제가 단독으로 사용되는 경우, 지지체 없이 압축하기 어렵거나 강도가 만족스럽지 못한 문제점이 있다.

따라서, 피브린 봉합제를 사용한 방법들 및 수단들에 대해서는 다양한 연구 및 향상을 위한 시도가 있어왔다. 예로서, 호흡기 수술 분야에서, 공기 누출 예방을 위한 다양한 장치가 있어 왔다. 모리카와 (Morikawa) 등은 폐누 (pulmonary fistula)에 트롬빈 용액이 적용되고, 피브리노겐 용액에 적신 폴리락틴 메쉬 조각을 거기에 댄다 (예: 비특허문헌 1 참조). 비록, 이러한 방법은 널리 채택되어왔지만, 공기 누출 재발을 완벽하게 방지하는 것은 여전히 어렵다. 먼저 트롬빈 용액을 적용한 때부터, 폐의 실질조직 (parenchyma)에 존재하는 자가 피브리노겐이 이 부위를 덮기 위해 혈전을 형성할 수 있고, 이는 점착성 제제인 피브리노겐 용액이 조 직 안으로 침투하는 것을 막을 수 있기 때문에 봉합의 효과가 불충분하게 나타날 수 있다고 여겨진다. 모리카와 등에 따른 방법과는 반대로, 폐누 안에서 피브리노겐 용액이 먼저 문질러지고, 그 다음 그 곳에 피브린 봉합제가 스프레이됨에 의해 적용되는 또 다른 방법이 고안되었다. 비록 상기 접근법은 피브린 봉합제를 단독으로 사용함으로써, 고압 저항성을 가졌지만, 강도가 불충분하고, 병변 부위에 고정되지 않는 이유로 인해, 폐기종에 효과적이지 않다.

피브린 봉합제는 동결건조된 피브리노겐 및 트롬빈을 각각 사용시, 용해하여 사용된다. 그러므로, 피브린 봉합제는 용해에 시간이 필요하므로 긴급 수술에의 사용 또는 즉각적 사용을 위한 목적에 적합한 제형이 아니다.

이러한 피브린 봉합제 구성성분들 각각의 제조하는 것의 생략을 위하여, 다양한 기질 위에 구성성분을 고정화하여 쉬트 타입의 제제를 생산하기 위한 시도들이 있다. 이러한 기질들로는, 젤라틴 또는 콜라겐과 같은 천연 요소들 또는 폴리에칠렌 글리콜 또는 폴리글리콜산과 같은 합성 고분자량 물질들을 포함하는 생체흡수성/생분해성 물질들이 사용되어왔다. 대표적인 예로서, 말-유래 콜라겐이 피브린 및 트롬빈을 고정화하고 있는 쉬트가 실용화 되어있다 (예: 특허문헌 1). 그러나, 상기 쉬트 제제의 기질인 콜라겐은 다소 걸쭉하고 다소 딱딱해서 쉬트 제제 봉합이 필요한 상처 부위에 찔러 넣기 어렵게 되어, 효과적인 봉합이 어렵게 된다. 게다가, 상기 쉬트 제제는 말 유래 콜라겐 및 소 유래 트롬빈으로 이루어진 기질, 즉 비-인간, 동물 종 유래 물질의 기질이 사용되므로, 인간에게 사용될 때에는, 이종의 단백질에 대항한 항체가 유도되거나 또는 프리온 질병 (prion disease)과 같은 동물성 감염의 발의 가능성이 있어, 이상적인 경우와는 멀다.

이러한 문제들을 해결하기 위한 한 가지 방법은 단시간 내의 봉합을 보증할 수 있는 피브린 봉합제의 개발이다. 이러한 피브린 봉합제는 인간에게 사용될 때, 감염제로부터 자유로운 인간과 같은 응고인자로 이루어질 것이 요구될 것이고, 봉합 효과가 충분히 발현될 수 있도록 쉬트 형태로 존재할 것이 요구될 것이며, 엄격하게 선택된 물질로 이루어진 쉬트를 사용하고, 생체에 안전하게 고안된 쉬트를 사용할 것이 요구된다.

특허문헌 1: Japanese patent publication No. 34830/1986

비특허문헌 1: 토쉬아키 모리카와 (Toshiaki Morikawa) 등., 1994, 일본호흡기외과학회집 (TheJapaness Associaton for chest Surgery), 8권, p. 288

상기 언급한 바와 같이, 비록 조직 봉합에 다양한 제제 및 방법들이 다양한 외과적 수술 분야에 적용되어왔지만, 유효성과 편리성을 모두 갖춘 효과적인 조직 봉합제는 없었다.

상기 언급된 다양한 문제점들의 관점에서, 본 발명의 발명가들은 심도 있는 연구를 수행해 왔고, 그 결과로서, 유효 성분으로 트롬빈 및 피브리노겐을 포함하는 조직 봉합제로서, 생체흡수성 합성 물질이 부직포의 형태로 가공된, 생체흡수성 합성 부직포를 지지체로 사용하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합제가 극히 우수한 조직 봉합효과를 나타낼 수 있다는 것을 밝혔고, 그럼으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

보다 명확하게, 본 발명은 다음 구체예들을 포함한다.

(1) 유효성분으로 트롬빈 및 피브리노겐을 포함하는 조직 봉합제로서, 생체흡수성 합성 부직포가 지지체로서 사용되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합제;

(2) 조직 봉합제를 위한, 유효성분으로 트롬빈 및 피브리노겐을 포함하는 조직 봉합제로서, 생체흡수성 합성 부직포가 지지체로서 사용되는 것을 특징으로 하는 용도;

(3) 조직 봉합제에 있어서, 유효성분으로서의 트롬빈이 고정화된 생체흡수성 합성 부직포 및 유효성분으로서의 피브리노겐 성분의 배합물의 용도;

(4) 유효성분으로서 트롬빈이 고정화된 생체흡수성 합성 부직포 및 유효성분으로서 피브리노겐을 함유하는 용기를 포함하는 조직 봉합 키트; 및

(5) 기질로서 생체흡수성 합성 부직포, 유효성분으로서 트롬빈을 함유하는 용기 및 유효성분으로서 피브리노겐 성분을 함유하는 용기를 포함하는 조직 봉합 키트.

본 발명에 다른 조직 봉합제는 다음의 특성을 가지고 그러므로 이상적인 조직 봉합제일 수 있다.

·탁월한 봉합 효과를 갖는다;

·이것의 고유의 끈적거리는 특성으로 인해 적용될 수 있고, 그러므로 봉합선이 단순해지거나 또는 불필요하게 될 수도 있다.

·광범위한 환부라도 형태를 유지하고, 병변부위 면을 회복할 수 있다.

·용해에 어떤 곤란함도 없고, 적용이 간편하다;

·안전성 면에서 우수하다;

·임상적으로 문제가 되는 점착을 야기하지 않는다;

·시간이 지나면 흡수된다;

·유동성과 탄성력이 우수하다; 및

·단지 약간의 염증 반응만을 야기한다.

본 발명에 따르면, 안전하고, 신속하며, 다양한 임상 분야, 전형적으로 다양한 분야의 수술 중 외과적 수술에, 철저한 조직 봉합이 가능한 생체흡수성 합성 부직포를 포함하는 조직 봉합제의 제공이 가능하게 된다.

본 발명의 용도를 위한 생체흡수성 합성 부직포는 생체흡수성 합성 섬유로 만들어진 임의의 부직포일 수 있다. 여기에서 사용되는 생체흡수성 합성 섬유는 생체 내에서 외부물질로서 염증반응을 쉽게 유도하지 않고, 시간이 지나면 생체 내에서 흡수 또는 분해될 수도 있는 합성 섬유를 말한다. 어떤 병변 부위에도 붙어서 떨어지지 않을 수 있는 것을 보증하기 위해, 부직포는 바람직하게는 적당한 유동성 및 탄성을 갖는다. 예를 들면, 이러한 부직포를 형성할 수 있는 합성 섬유는 폴리글리콜산, 폴리락트산, 또는 글리콜산과 락트산의 공중합체 등을 포함한다. 이들 중에서, 부직포로 프로세싱됨에 의한 폴리글리콜산으로 이루어진 생체흡수성 합성 부직포는 본 발명의 목적에 가장 적합한 물질이다.

부직포은 임의의 모양일 수 있으나, 다양하게 적용하기 위한 다양성의 관점에서, 바람직하게는 쉬트 형태일 수 있다.

한편 유효성분, 약학적으로 허용되는 안정제 및 첨가제가 또한 첨가될 수 있다. 이러한 안정제 및 첨가제의 예들로는, 예를 들면, 바람직하게는 인간 혈액에서 유래하거나 또는 유전공학을 통해 얻어진 팩터 XIII (Factor XIII), 염화칼슘, 프로테아제 저해제 (예: 아프로티닌), 알부민, 아미노아세트산, 폴리에칠렌 글리콜, 아르기닌, 소디움 히알유로네이트, 글리세롤, 만니톨 및 기타 등등이다.

트롬빈, 피브리노겐 및 팩터 XIII는 바람직하게는 인간 혈액으로부터 유래하거나 또는 유전공학을 통해 얻어진 것일 수 있다.

본 발명의 조직 봉합제는 유효 성분으로서 트롬빈 및 피브리노겐이 생체흡수성합성 부직포 안에 궁극적으로 함유되어 있는 한 임의의 제형일 수 있다. 수술 세팅시 손쉬운 간편성의 측면에서, 그러나, 미리 트롬빈을 고정화한 생체흡수성 합성 부직포는, 유동성을 유지하며, 조직 봉합 유효성 뿐만 아니라 그것의 손쉬운 편리성의 측면에서 바람직한 구체예들 중의 하나이다.

트롬빈 및 피브리노겐 모두를 미리 고정화한 생체흡수성 합성 부직포의 경우에 있어서, 부직포는 각 트롬빈 및 피브리노겐이 각각 반응하지 않아서 피브린을 안정화할 수 있는 다음의 상태로 고정화하여야 하는데, 즉, 각 구성요소들이 분리되어 있거나 또는 가루 형태에 있는 각 구성요소들이 유기용매 중에 현탁되고, 각 현탁액이 부직포에 스프레이된 상태로 고정화하여야 한다.

본 발명의 조직 봉합제는 어느 한쪽을 포함하는 키트로서 형성될 수 있다.

(A) 트롬빈 및 피브리노겐이 고정화된 생체흡수성 합성 부직포; 또는

(B) 생체흡수성 합성 부직포, 트롬빈 및 피브리노겐;

여기에서, 상기 언급한 바와 같은 하나의 안정제 및 하나의 첨가제가 선택적으로 (A) 및 (B) 모두에 첨가될 수 있다.

(A)의 경우에 있어서 사용을 위해, 피브리노겐이 병변 부위에 적용된 후, 트롬빈 고정화 흡수성 합성 부직포가 씌워지거나, 또는 택일적으로 피브리노겐이 스프레잉 또는 적심에 의해 트롬빈 고정화 생체흡수성 합성 부직포에 적용된다. 상기 트롬빈 고정화 생체흡수성 합성 부직포는 (1) 생리식염수 또는 완충액에 트롬빈을 용해하는 방법 및 그 결과 얻어진 트롬빈 용액에 임의적으로 첨가제로서 염화칼슘을 첨가하는 방법을 통해 조제할 수 있고, 또한 (2) 상기 트롬빈 용액에 생체흡수성 합성 부직포를 담그고, 그 다음 영하 80℃에서 2시간 동안 동결건조시키는 방법에 의해 만들 수 있다.

(B)의 경우에 있어서 사용을 위해, 상업적으로 구할 수 있는 피브린 봉합제 (예: 자이단호진 가가쿠오요비겟세이료호겐쿠쇼 (Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute)에서 제조한 볼힐 (제품명: 화학급혈청액법연구소제))의 제조방법으로 제조된 피브리노겐이 병변 부위에 적용된 후 트롬빈 용액 중에 담긴 생체흡수성 합성 부직포가 적용되거나, 또는 택일적으로, 트롬빈 및 피브리노겐 용액 각각을 동시에 부직포에 스프레이 하여 적용한다.

(A) 또는 (B) 의 어느 경우에 있어서, 팩터 XIII 또는 프로테아제 저해제가 피브리노겐을 포함하는 용액에 첨가될 수 있다.

높은 점착성, 적당한 강도, 유동성 및 탄력성을 갖는 본 발명에 따라 얻어진 조직 봉합제는 생체내의 점막성 조직의 결손 부위, 장기나 조직들의 결손 부위 또는 절개된 표면 또는 임의의 모양의 접합부에 붙어 떨어지지 않을 것이다. 게다가, 본 발명의 조직 봉합제는 우수한 생적합성을 가지며, 그것 고유의 끈적거리는 성질로 인해 간편하게 조직을 봉합하는 것을 가능하게 되거나 또는 봉합선을 만들지 않게 된다. 본 발명의 봉합 물질에 있어 기질로 사용되는 폴리글리콜산 생체흡수성 부직포는 이미 임상 목적으로 사용되어 온 것으로, 생체 내에서 흡수되고 물 및 이산화탄소 중에서 분해되기 때문에 안전성이 높다.

이와 같이, 본 발명에 따른 조직 봉합제는 생체내의 점막성 조직의 결손 부위, 장기 및 조직들의 결손 부위 또는 절개된 부위 또는 접합부에 쉽고 신속하게 적용될 수 있고, 혈액 응고 반응을 통해 조직 봉합을 효과적으로 할 수 있게 한다. 게다가, 여기에서 사용되는 모든 물질들은 생체에 안전하기 때문에 주의 없이 임상적으로 이용될 수 있다.

그림 1은 개의 심막 결손 모델을 사용한 봉합 효과를 평가하기 위한 테스트로서 처치로부터 1 개월 후 외심막의 반응을 보여주는 그림이다. 그림 1에서, 양수 (사선)는 임상적으로 허용되는 정도 (근소한 또는 보다 적은)를 나타내며, 반면에 음수 (격자모양)는 임상적으로 바람직하지 못한 정도 (보통 또는 그 이상)를 나타낸다.

그림 2는 개의 심막 결손 모델을 사용한 봉합 효과를 평가하기 위한 테스트로서 처치로부터 2 개월 후 외심막의 반응을 보여주는 그림이다. 그림 2에서, 양수 (사선)는 임상적으로 허용되는 정도 (근소한 또는 보다 적은)를 나타내며, 반면에 음수 (격자모양)는 임상적으로 바람직하지 못한 정도 (보통 또는 그 이상)를 나타낸다.

다음 실시예는 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위를 한정하지 않는다.

실시예 1 : 트롬빈 고정화 쉬트 조제

본 발명에 따른 트롬빈 고정화 쉬트는 하기 방법에 따른 과정에 따라 조제된다.

5% 인간 혈청 알부민을 함유하는 용액에 40 mM의 염화칼슘을 첨가하고, 그 다음에 트롬빈을 넣어 최종 농도가 500 U/mL이 되게 한다. 용액을 폴리글리콜산 (네오빌 (Neoveil), 건즈 리미티드 (Gunze Limited), 두께 0.15 mm)로 이루어진 생 체흡수성 합성 부직포가 바닥에 깔려 있는 깊이가 1 mm인 용기에 붓는다. 그 쉬트를, 영하 80℃에서 2시간 동안 동결건조시킨 후, 트롬빈 (트롬빈은 50 U/㎠ 담겨 있음)이 고정화된 쉬트 샘플로서 이용된다.

이 실시예에서 사용되는 트롬빈은 유전 공학에 의하여 조제된다 (비교. WO 03/004641). 간략하게, 여기에서는 인간 프레트롬빈 (prethrombin) 유전자를 함유하고 있는 동물세포를 배양해서, 프레트롬빈을 이 배양액으로부터 정제한다. 다른 한 편으로, 이카린 (ecarin) 유전자가 함유되어 있는 동물 세포 배양액 중에서 정제된 이카린은, 프레트롬빈의 활성화에 사용되며, 그 때문에 트롬빈의 정제가 가능하게 된다. 실시예 2 : 개의 심막 결손 모델에서 봉합 효과를 평가하는 테스트

이 실시예는 하기 과정 1 부터 7에 따라 수행된다.

1. 비글스 (Beagles)를 질라진 (xylazine) 및 케탈라(Ketalar)로 마취시킨다.

2. 기관내 삽관이 시행되고, 튜브는 호흡기에 연결된다.

3. 좌측 부분에 늑간 개흉술 (intercostal thoracotomy)이 시행된다.

4. 심막이 제거된다 (12 mm X 12 mm).

5. 심막의 결손 부위는 하기 설명된 그룹들로부터의 쉬트들 각각으로 처치된다.

그룹 1: 심막을 위한 EPTFE 쉬트

심막을 위한 EPTFE 쉬트 (고어-텍스 EPTFE 패취 II (심막을 위한 쉬트)/ JGI, 15 mm X 15 mm)를 EPTFE 실 (고어-텍스 봉합선 (Gore-tex Suture)/JGI)을 사용하여 단일 인터럽티드 봉합선으로 심막을 봉합한다.

그룹 2: 폴리글리콜산 부직포 + 섬유 봉합제

12 mm X 12 mm (바깥쪽 가장자리 3 mm는 페이스팅 업(pasting-up)을 위해 남겨둔다)의 범위 내에서 네오빌 (15 mm X 15 mm)의 양 표면에 피브린 봉합제 (볼힐, 자이단호진 가가쿠오요비겟세이료호겐쿠쇼, 피브리노겐을 포함하는 용액 및 트롬빈을 함유하는 용액; 각각 약 0.25 mL/표면)가 쉬트 조제를 위해 스프레이된다. 심막의 결손 부위 주변에 (약 0.2 mL의) 피브리노겐 용액이 떨어뜨려지고, 그 곳을 손가락 끝으로 문질러준다. 그 곳에 상기 쉬트가 대어지고, 피브린 봉합제 (피브리노겐이 함유된 용액 및 트롬빈이 함유된 용액; 각각 0,5 mL)가 스프레이 된다.

그룹 3: 트롬빈 고정화 쉬트 + 피브리노겐 용액

12 mm X 12 mm (바깥쪽 가장자리 3 mm는 페이스팅 업(pasting-up)을 위해 남겨둔다)의 범위 내의 실시예 1 (15 mm X 15 mm)에서 조제한 트롬빈 고정화 쉬트에 피브리노겐 용액 (볼힐을 함유한; 약 0.5 mL/표면)이 쉬트를 조제하기 위해 스프레이된다. 심막의 결손 부위 주변에 (약 0.2 mL의) 피브리노겐 용액이 떨어뜨려지고, 그 곳을 손가락 끝으로 문질러 준다. 거기에 상기 쉬트를 대고, 피브리노겐 용액이 스프레이 된다.

6. 모든 그룹들의 테스트 동물들은 그룹 1 및 2로부터, 처치 후 1개월, 2개월 뒤에 죽이고, 점착 정도 및 외심막 (백화) 반응을 육안으로 평가한다.

7. 쉬트를 댄 부위 주변의 심막, 심근, 등과 같은 조직에서 점착이 또한 관 찰된다면, 상기 조직은 조직병리학적 실험의 대상이 또한 될 수 있다.

결과적으로, 처치 후 1 개월 및 2 개월이 지났을 때 모두, 심막으로부터 벗겨져 나오거나, 처치된 쉬트에 손상이 간 그룹은 관찰되지 않았다. 표 1에 보여지는 바와 같이 점착 정도는 본 발명에 대응하는 그룹 2 및 3에서 임상적으로 지금까지 이용되어 온 그룹 1과 동등한 정도 또는 더 우수한 정도로 저해될 수 있다. 그림 1에 나타난 바와 같이 외심막의 반응에 관한 한은, 그룹 1에서보다 그룹 2 및 3에서 더 적었다. 조직병리학적 테스트에서, 외심막의 염증은 각 그룹에서 관찰될 수 있었다. 그러나, 그림 2에서 보여지는 바와 같이, 본 발명에 대응하는 그룹 2에서의 염증은 2 개월 후 완화되는 경향이 있는 반면, 외심막에서는 결합조직의 비후가 더 진행되었고, 이는 그룹 2보다 전통적인 방법인 그룹 1에서 더 강하게 나타났다. 심막에서, 결합조직 층이 쉬트 주변에서 형성되었고, 중피세포는 그룹 1의 상기 층 위를 덮었다. 그룹 2 및 3에서, 처치 후 이미 1 개월 후에 결합조직의 비후 및 혈관신생이 주변 뿐만 아니라 쉬트 및 비후조직을 덮고 있는 중피세포들의 내부에서도 관찰될 수 있었다. 그러므로 본 발명에 따른 조직 봉합제의 이용은 살아있는 조직을 신속하게 대체하고 또한 심막의 재생을 가능하게 함이 밝혀졌다.

표 1

[처치한 후 1 개월 뒤]

[처치한 후 2 개월 뒤]

1) 점착정도의 판정기준 및 평점

평점 0: -; 점착없음

평점 1: ±; 극히 작은 정도의 점착 (손가락 끝으로 쉽게 깨짐)

평점 2: +; 경도의 점착 (둔한 해체로 깨짐)

평점 3: ++; 중등도의 점착 (날카로운 해체 요구됨)

평점 4: +++; 중(重)도의 점착 (넓은 범위에서 날카로운 해체가 요구됨)

2) 각각의 점착 부위에서 각각의 점착 정도에 대한 케이스 수

3) (평점 X 총 케이스 수의 총합)/처치된 동물의 수 실시예 3: 개의 폐의 공기 누출 모델에서, 봉합 효과의 평가 테스트

이 실시예는 하기에서 설명하는 바와 같이 과정 1에서 7에 따라 실시된다.

1. 비글즈 (Beagles)를 기관내 삽관을 시행하고 튜브를 호흡기에 연결하며, 넴부탈 (Nembutal)로 마취시킨다.

2. 우측 부위에 늑간개흉술이 실시된다.

3. 폐는 부풀어지고 잡아당겨지게 되는데, 자연 탈기 상태로 하기 위해, 5 mm X 20 mm의 종이 패턴을 따라 가장자리를 베어낸다.

4. 가장자리를 벤 상처 부위의 늑막을 칼을 이용해 벗겨내고 출혈이 만약 있다면, 전기메스 (cautery knife)로 지혈한다.

5. 공기 누출은 하기 소개된 바와 같은 그룹들로부터의 쉬트들 각각으로 처치된다.

그룹 1: 피브리노겐 용액 + 트롬빈 고정화 쉬트

8% 피브리노겐 용액 (약 0.7 mL)가 공기누출 부위에 적용된다. 실시예 1 (10 mm X 25 mm)에서 조제된 트롬빈 고정화 쉬트는 덮어 씌워지며, 8% 피브리노겐 용액 은 거기에 떨어뜨려지고 쉬트는 5분 동안 방치한다.

그룹 2: 피브리노겐 용액 + 트롬빈 용액 + 폴리글리콜산 부직포

8% 피브리노겐 용액 (약 0.7 mL)가 공기누출 부위에 적용된다. 실시예 1에서 지지체로서 사용되는 네오빌 (10 mm X 25 mm)이 덮어 씌워지고, 볼힐에 포함된 것과 같은 트롬빈 (250 U/mL)을 함유하는 용액 0.7 mL을 떨어뜨린다. 그 후, 볼힐에 포함된 것과 같은 피브리노겐을 함유하는 용액 및 트롬빈을 함유하는 용액을 각각 약 0.7 mL를 스프레이에 의해 적용하고, 쉬트를 5분 동안 방치한다.

그룹 3: 콜라겐 쉬트

피브린 봉합제의 성분들이 고정화된 콜라겐 쉬트 제제 (타초콤(TachoComb), 토리 파마슈티컬 (Torii Pharmaceutical) Co., Ltd.); 피브리노겐 및 트롬빈 구성요소들은 지지체로서의 말 유래 콜라겐으로 이루어진 스폰지 쉬트의 한 표면에 동결건조법에 의해 고정된다: 20 mm X 30 mm)를, 생리식염수에 담근 후, 공기 누출 부위에 대고, 5분간 방치한다.

6. 처치 후, 공기누출 부위에 생리식염수를 적용하는 동안 인공 호흡기를 이용하여 압력을 가한다. 공기 누출이 다시 유도될 때의 압력이 압력 저항성으로서 측정된다.

7. 처치 후, 집게로 기관지를 잘라내고, 처치는 다른 엽들에 반복된다. 측정은 세 엽, 즉, 우측 또는 좌측 폐 각각의 전엽, 중엽 및 후엽의 세 엽에서 이루어진다.

그 결과, 표 2에 나와있는 바와 같이, 폴리글리콜산 부직포가 지지체로서 사 용된 그룹 1 및 2가 콜라겐 쉬트 제제가 사용된 그룹 3보다 더 높은 압력 저항성 효과를 나타냈다. 특히, 트롬빈 고정화 쉬트가 사용된 그룹 1은 특히 더 높은 압력 저항성 효과를 나타냈다. 일반적인 호흡기계의 외과수술 후, 환자는 종종 감염방지의 목적에서 기침을 강제적으로 반복하게 하여, 기도 안쪽의 순간 내압이 보고에 의하면 40 내지 50 cm·H₂O가 되게 된다. 콜라겐 쉬트 제제가 사용된 그룹 3은 평균 압력 저항성이 34.6 cm·H₂O로 나타났으며, 그러므로 충분한 봉합 효과가 제공된다고 기대하기 어렵다. 본 발명에 따른 방법에 따르면 임상에서 사용되던 기존의 방법보다 더 간편하고, 더 효과적인 조직 봉합이 가능하게 된다.

표 2

본 발명에 따른 조직 봉합제는 우수한 생적합성을 가지며, 그것 고유의 끈적거리는 성질 때문에 조직 봉합을 간편화할 수 있고 또는 봉합선이 생기지 않는다. 따라서, 폐엽, 심막 또는 장막과 같은 생체내의 점막 조직의 결손 부위, 장기 및 조직들의 결손 부위 또는 절개된 부위 또는 접합부의 봉합에 사용될 수 있다.

Claims

유효성분으로서 트롬빈 및 피브리노겐을 함유하며, 지지체로 생체흡수성 합성 부직포를 사용하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합제.
제 1항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산, 폴리락트산 및 글리콜산 및 락트산의 공중합체로 이루어진 그룹에서 선택되는 물질을 포함하는것을 특징으로 하는 조직 봉합체.
제 2항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산 물질로 이루어진 부직포인 것을 특징으로 하는 조직 봉합제.
제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 트롬빈 및 피브리노겐 중 적어도 트롬빈을 미리 고정화 한 생체흡수성 합성 부직포인 것을 특징으로 하는 조직 봉합제.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합제는 팩터 XIII, 프로테아제 저해제, 또는 염화칼슘 중에서 선택되는 적어도 하나의 첨가제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합제.
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 트롬빈, 피브리노겐 및 팩터 XIII은 각각 인간 혈액에서 유래하거나 또는 유전공학에 의해 생산되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합제.
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 장기 및 조직의 결손 부위 또는 절개된 표면, 또는 절개된 조직 사이의 접합부 또는 절개된 조직과 보철 (prosthetic materials) 사이의 접합부를 봉합하기 위한 조직 봉합제.
조직 봉합제를 위한, 지지체로서의 생체흡수성 합성 부직포 및 유효성분으로서의 트롬빈 및 피브리노겐의 배합물의 용도.
제 8항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산, 폴리락트산 및 글리콜산 및 락트산의 공중합체로 이루어진 그룹에서 선택되는 물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제 8항 또는 제 9항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산 물질로 이루어진 것을 특징으로 하는 용도.
제 8항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 팩터 XIII, 프로테아제 저해제, 또는 염화칼슘으로부터 선택되는 적어도 하나의 첨가제를 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제 8항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 팩터 XIII을 피브리노겐에 첨가되는 것을 특징으로 하는 용도.
제 8항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트롬빈, 피브리노겐 및 팩터 XIII는 인간 혈액에서 유래하거나 또는 유전공학에 의해 생산된 것임을 특징으로 하는 용도.
제 8항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합제는 장기 및 조직들의 결손 부위 또는 절개된 표면, 또는 절개된 조직 사이의 접합부 또는 절개된 조직과 보철 물질 사이의 접합부를 봉합하기 위해 사용되는 것을 특징으로 하는 용도.
조직 봉합제를 위한, 유효 성분으로서 트롬빈 고정화 생체흡수성 부직포 및 유효 성분으로서 피브리노겐의 배합물의 용도.
제 15항에 있어서, 유효성분으로서의 상기 생체흡수성 합성 부직포는 생체흡수성 합성 부직포를 트롬빈을 함유한 용액에 담그는 공정, 이로 인해 얻어진 부직포를 동결건조하는 공정에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 용도.
제 15항 또는 제 16항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산, 폴리락트산 및 글리콜산 및 락트산의 공중합체로 이루어진 그룹에서 선택되는 물질로 만들어진 것을 특징으로 하는 용도.
제 17항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산으로 만들어진 것을 특징으로 하는 용도.
제 15항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합제는 팩터 XIII, 프로테아제 저해제, 또는 염화칼슘 중에서 선택되는 적어도 하나의 첨가제를 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
제 19항에 있어서, 상기 염화칼슘이 트롬빈과 함께 생체흡수성 합성 부직포에 고정되는 것을 특징으로 하는 용도.
제 19항에 있어서 상기 팩터 XIII이 피브리노겐에 첨가되는 것을 특징으로 하는 용도.
제 15항 내지 제 21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트롬빈, 피브리노겐 및 팩터 XIII은 인간 혈액에서 유래하거나 또는 유전공학에 의해 생산되는 것임을 특징으로 하는 용도.
제 15항 내지 제 22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합제는 장기 및 조직들의 결손 부위 또는 절개된 표면을 봉합하기 위하여 또는, 절개된 조직 사이의 접합부 또는 절개된 조직과 보철 물질 사이의 접합부를 봉합하기 위한 것임을 특징으로 하는 용도.
유효성분으로서의 트롬빈 고정화 생체흡수성 합성 부직포, 및 유효성분으로서의 피브리노겐을 함유하는 용기를 포함하는 조직 봉합 키트.
제 24항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산, 폴리락트산 및 글리콜산 및 락트산의 공중합체로 이루어진 그룹에서 선택되는 하나의 물질로 이루어진 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 25항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산 물질로 이루어진 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 24항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합 키트는 팩터 XIII, 프로테아제 저해제, 또는 염화칼슘으로 이루어진 그룹에서 선택되는 적어도 하나의 첨가제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 27항에 있어서, 상기 염화칼슘이 트롬빈의 첨가제로서 생체흡수성 합성 부직포에 첨가되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 27항에 있어서, 상기 팩터 XIII가 피브리노겐이 함유된 용기에 포함되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 24항 내지 제 29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트롬빈, 피브리노겐 및 팩터 XIII는 인간 혈액에서 유래하거나 또는 유전공학에 의해 생산되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 24항 내지 제 30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트롬빈 고정화 생체흡수성 합성 부직포는 생체흡수성 합성 부직포를 트롬빈이 함유된 용액에 담그는 공정, 및 그 결과 얻어진 부직포를 동결건조하는 공정에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 24항 내지 제 31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합 키트는 장기 및 조직들의 결손 부위 또는 절개된 표면을 봉합하기 위하여 또는, 절개된 조직 사이의 접합부 또는 절개된 조직과 보철 물질 사이의 접합부를 봉합하기 위하여 사용되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
기질로서의 생체흡수성 합성 부직포, 유효성분으로서의 트롬빈을 함유하는 용기, 및 유효성분으로서의 피브리노겐을 함유하는 용기를 포함하는 조직 봉합 키트.
제 33항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산, 폴리락트산 및 글리콜산 및 락트산의 공중합체로 이루어진 그룹에서 선택되는 하나의 물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 34항에 있어서, 상기 생체흡수성 합성 부직포는 폴리글리콜산 물질로 이루어진 부직포인 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 33항 내지 제 35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합 키트는 팩터 XIII, 프로테아제 저해제, 또는 염화칼슘 중에서 선택되는 적어도 하나의 첨가제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 36항에 있어서, 상기 팩터 XIII는 피브리노겐을 함유하는 용기에 포함되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 33항 내지 제 37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 트롬빈, 피브리노겐 및 팩터 XIII는 인간 혈액에서 유래하거나 또는 유전공학에 의해 생산되는 것을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.
제 33항 내지 제 38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조직 봉합 키트는 장기 및 조직들의 결손 부위 또는 절개된 표면을 봉합하기 위하여 또는, 절개된 조직 사이의 접합부 또는 절개된 조직과 보철 물질 사이의 접합부를 봉합하기 위한 것임을 특징으로 하는 조직 봉합 키트.