CS231964B2 - Manufacturing process of flavanoe derivatives - Google Patents

Description

Vynález se týká způsobu výroby protivirových látek, vhodných jako· účinná složka farmaceutických přípravků, účinných proti rhinovirům.

Rhinoviry způsobují přibližně 70 °/o. onemocnění, obvykle vnímaných jako nachlazení nebo zánět horních cest dýchacích, přestože tyto· choroby mohou být způsobeny i jinými příčinami, například enteroviry, coronaviry a alergickými reakcemi. Na viry jsou citliví všichni lidé a nákaza těmito viry je nejčastější příčinou absence v zaměstnání a má proto velký hospodářský význam.

Infekce se přenáší při kašli nebo kýchání, kapénkovou infekcí tak, že kapénky jsou vdechovány dalším člověkem a vyvolají nákazu dýchacích cest. Po inkubační době 48 hodin až 2 týdny se vyvinou u infikované osoby příznaky jako bolest v krku, kašel, kýchání, zánět sliznic a herečka vzhledem k sekundární bakteriální infekci.

Po· nákaze určitým sérotypem rhinoviru zůstává určitá odolnost, která však se netýká odlišných sérotypů. Při kontinuální reinfekci sérotypy, které v určité společnosti převažují, se tímto, způsobem udržuje odolnost proti virům u většiny členů této· společnosti. K další nákaze dojde pouze v případě, že . se· objeví nový sériotyp, což se stává průměrně dvakrát až třikrát za rok.

Protože neexistuje zkřížená imunita a vzhledem k tomu, že je známo- alespoň 120 od sebe odlišných imunologicky zjistitelných rhinovirů, není možno převádět očkování. Jako jeden ze způsobů snižování počtu onemocnění byl v některých případech v uzavřených .prostorách dezinfikován vzduch, toto· opatření však bylo· neúspěšné. Je zřejmé, že jediná použitelná prevence by mohla spočívat v objevení sloučeniny, kterou by bylo· možná podávat po delší dobu a která by byla účinná proti všem nebo alespoň téměř všem běžným sérotypům rhinovirů. Přes rozsáhlý výzkum se prozatím takovou sloučeninu nepodařila najít, takže zatím neexistuje žádná chemoterapeutická· látka, kterou by bylo· možno zajistit ochranu proti nákaze.

Nyní bylo zjištěno, že flavan a různé deriváty této sloučeniny jsou účinné proti některým virům, včetně těch, které způsobují infekci dýchacích cest, jako· jsou picornaviry, mengeviry, arboviry, myxoviry, coronaviry, viry způsobujjící herpes a adenoviry. Tyto- sloučeniny jsou zvláště účinné proti rhinovirům, zvláště proti sérotypům 1B, 2 a 9. Kromě sloučenin, které spadají do· této třídy, byly dále připraveny a zkoumány nové deriváty těchto· látek. Bylo· pozorováno, že tyto sloučeniny · mohou inhibovat rhi noviry in vitro v tkáňové kultuře a některé z . nich byly - účinné i proti jiným virům, například proti virům, způsobujícím opar, chřipku a -spalničky.

Mimoto¹ bylo možno· prokázat, že některé sloučeniny jsou účinné proti rhinovirům in vivo, zejména .v případě, že se podávají v dostatečné dávce lidem a jiným savcům. Flavan sám má dobrou účinnost proti rhinovirům, substituované deriváty mají účinnost podobnou nebo- ještě lepší v závislosti na povaze a poloze jednotlivých substituentů.

Uvedené látky mají velmi nízkou toxicitu, LDso je vyšší než 500 mg/kg. Účinnost může být zjišťována běžnými testy na agarových plotnách s použitím- kotoučů, při nichž se měří snížení počtu plaků po aplikaci účinné látky. Postupuje se tak, že se v Petriho misce vytvoří jednovrstevná buněčná kultura, která se infikuje suspenzí viru a pak se převrství živným agarem ve formě gelu. Tentogel zajistí, že se virus dále nešíří a vzniknou lokalizovaná poškození buněk nebo- se tvoří plaky.

Při inhibici plaků se uloží na - povrch .gelu kotouč - filtračního papíru, který při impregnaci roztokem účinné sloučeniny zadrží 0,01 ml použitého- roztoku. Účinná látka pak může difundovat gelem tak, že nejvyšší koncentrace této- látky bude v oblasti kotouče a nejnižší koncentrace u periférie- použité misky. Účinnost použité -sloučeniny je možno měřit poloměrem inhibice tvorby plaků - od středu kotouče.

Při testu na snížení tvorby plaků se měří zjistitelná účinnost. Do gelu, kterým je kultura převrstvena, se - včlení různé koncentrace účinných -látek, -obvykle jde o zlomky mo-lární koncentrace. Potlačení tvorby plaků je -obvykle přímo- závislé na koncentraci použité - sloučeniny. Počet plaků se obvykle uvádí v % - ve srovnání s kontrolními zkouškami,. - takže je - možno- vytvořit křivku závislosti inhibice na koncentraci účinné látky. Z - této¹ - křivky je- možno stanovit účinnou dávku ED50, - při níž- - je počet plaků potlačen- na 50 %.

V -chemické - literatuře - je známa celá řada flavanů, o - žádném z nich však dosud nebylo uváděno, že je možno- jej užít k léčebným účelům s výjimkou 3,3‘,4,4‘,5,7-hexahydroflavanu, kterého- je možno- užít při žilních onemocněních, mimoto byl 3-hydroxyflavan úspěšně užit proti virovému zánětu jater [Lancet, 2, 1153 (197-7)], dále byly 3,6-dialkyl- nebo- 3,6-dialkoxylflávany (US patent č. 3 -555 047) užívány pro snížení hladiny cholesterolu v krvi, l-epi-3‘,4‘,5\5,7-pentahydroxyflavan-3-ol [J. M. Gazave, Fruits, 32, 275 až 284 (197*7)], byl užit jako- látka, zabraňující vzniku kurdějí, a 3,3‘,4‘,5,7-pentahydroxyflavan (francouzské patentové spisy č. 988 332 a 988 333) má vitamínům podobný účinek na krevní kapiláry.

Claims (6)

1. Předmětem vynálezu je tedy způsob výroby flavanů nebo· jejich derivátů obecného vzorce I nebo- z farmaceutického- hlediska použitelných solí těchto- sloučenin. Tyto látky je možno užít k prevenci nebo -léčbě - virových infekcí po předběžném zpracování na farmaceutické prostředky při použití nosiče, přijatelného· z farmaceutického- hlediska.

   V obecném -vzorci I obecně

   R¹ znamená atom vodíku nebo až 4 sub stituenty a

   R² znamená atom vodíku nebo- až 5 substituentů, přičemž R¹ a R
2. 2 mají význam vysvětlený dále.

   S výhodou znamenají substituenty R¹ a R² až 2 substituenty, zvláště pak znamená každý z těchto symbolů 1 substituent.

   Sloučeniny obecného vzorce I mají s výhodou substituent R1 v poloze 6 nebo- 7 a/nebo substituent R2 v polohách 2‘,
3. 3‘,
4. 4‘,
5. 5‘ nebo- 6‘, zvláště výhodné polohy jsou polohy 6 a 4‘. Bylo¹ rovněž zjištěno, že může- záviset na velikosti substituentu. Například v případě, že se substituenty nacházejí v polohách 4‘ a >6, je vyšší účinnost spojena se substituentem, jehož hodnota [R]d je nižší než 15, s výhodou nižší než 10.

   Hodnota [ R ]D - je opravený molekulární -objem tak, jak je uvedeno v publikaci S. Glasstone, Tex-bcok of Physical Chemistry, 2. vydání 1948, MacMillan, Londýn, str. 528. Je možno- ji vypočítat z molární hmotnosti M, hustoty p a refrakčního- indexu n -podle rovnice:

   [RJd = n2 — 1 n² + 2

   Hodnoty -pro¹ celou řadu -substituentů byly stanoveny Vogelem a uveřejněny - v J. Chem. Soc. v průběhu roku 1948.

   Výhodnými substituenty jsou atomy halogenu, - nitroskupiny, - kyanoskupiny, trifluormethylové skupiny, nižší alkyl, nižší alkoxyl, aminoskupiny nebo- hydroxylové skupiny. Zvláště výhodnými skupinami jsou atomy chloru, nitroskupiny, kyanoskupiny a hydroxylové skupiny, nejvýhodnějším substituentem je atom chloru.

   Volba počtu substituentů, jejich polohy a jejich typu se provádí tak, - aby bylo možno· zvýšit - pravděpodobnost vyšší účinnosti. Je však třeba uvážit, že výsledné vlastnosti sloučeniny - závisí také na jiných fyzikálních a biologických podmínkách.

   Předmětem vynálezu je způsob výroby flavanových derivátů obecného- vzorce II jakož i jejich z farmaceutického· hlediska přijatelných solí, kde

   R^1A až R^1D a R^2A až R^2E znamenají atomy vodíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kyanoskupiny, trifluormethylové skupiny, alkylové zbytky o· 1 až 4 atomech uhlíku, ' alkoxylové zbytky o· 1 až 4 atomech uhlíku, aminoskupiny, mtfno- a dialkylaminoskupiny vždy o· 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové skupině nebo hydroxyskupiny za předpokladu, že alespoň jedna ze skupin, avšak nejvýš 4 ze skupin R^M až Ri° a R2A až R2E jsou odlišné od atomu vodíku, s výjimkou následujících derivátů
6. 6-aminofiavan, 4‘-hydrO'xyflavan,