CN1918303A - 高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法 - Google Patents

高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1918303A
CN1918303A CNA200580004991XA CN200580004991A CN1918303A CN 1918303 A CN1918303 A CN 1918303A CN A200580004991X A CNA200580004991X A CN A200580004991XA CN 200580004991 A CN200580004991 A CN 200580004991A CN 1918303 A CN1918303 A CN 1918303A
Authority
CN
China
Prior art keywords
reagent
compd
cholesterol
salt
test kit
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA200580004991XA
Other languages
English (en)
Inventor
片山有基
藤中真由美
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hitachi Chemical Diagnostics Systems Co Ltd
Original Assignee
Kyowa Medex Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kyowa Medex Co Ltd filed Critical Kyowa Medex Co Ltd
Publication of CN1918303A publication Critical patent/CN1918303A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

一种测定检测样品内高密度脂蛋白中胆甾醇的方法，该方法包含：使检测样品与(i)胆甾醇酯水解酶和胆甾醇氧化酶，或(ii)胆甾醇酯水解酶、氧化型辅酶及胆甾醇脱氢酶，在含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质的水溶性介质中进行反应，生成过氧化氢或还原型辅酶；以及测定所生成的过氧化氢或还原型辅酶。

Description

高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法
技术领域
本发明涉及检测样品中高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法、测定用试剂及测定用试剂盒。
背景技术
生物体中的脂蛋白根据比重分成高密度脂蛋白(以下缩写为HDL)、低密度脂蛋白(以下缩写为LDL)、极低密度脂蛋白(以下缩写为VLDL)、乳糜微粒(以下缩写为CM)，各自由于载脂蛋白的种类不同在生物体内起的作用非常不同，脂质的成分也各式各样。已经了解到，其中HDL由于会接受来自包括动脉血管壁在内的各种组织的胆甾醇，因而和清除积累在细胞内的胆甾醇的作用有关，是预防以冠状动脉硬化为主的各种动脉硬化症等危险的因子，它在血液中的水平作为预测动脉硬化性疾病的有用指标。
现有的测定HDL中的胆甾醇(以下简称HDL胆甾醇)的方法，包括经超速离心法、免疫化学法、电泳法、沉淀法等分离操作和定量胆甾醇的两步。然而分离操作手续烦杂，需时长，在可靠性方面也存在问题。因此这种要同时进行分离操作的测定方法效率很低，在实际应用中不合适。
为了解决上述问题，近来报道了各种测定方法。例如已知有将血清或血浆放在含有胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶，以及胆汁酸盐或胆汁酸衍生物或二辛基磺基琥珀酸盐的缓冲液中，使的与相应的酶反应，VLDL和LDL中的胆甾醇先于HDL发生反应，测定所生成的过氧化氢后，向反应液中加入含有非离子系列的聚氧化乙烯基的表面活性剂，使HDL胆甾醇与相应的酶反应，特异地分别定量HDL胆甾醇的方法(参见专利文献1)，还有一种方法是在特定pH和特定的温度条件下，使血清和含有来自胰脏的胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、胆汁酸类表面活性剂以及非离子系列的表面活性剂的缓冲液中使的与相应的酶反应，测定HDL胆甾醇的方法(参见专利文献2)。在专利文献2所述方法中，首先LDL胆甾醇与相应的酶反应，然后HDL胆甾醇与相应的酶反应，可以测定HDL胆甾醇。然而，这些测定方法需要较长的测定时间，而且未必是特异测定HDL胆甾醇的方法。
作为使HDL以外的脂蛋白凝集然后测定HDL胆甾醇的方法，已知有采用硫酸葡聚糖等使HDL以外的脂蛋白凝集的试剂、二价金属盐及经化学修饰的酶进行测定的方法(参见专利文献3)；有用聚合阴离子等与HDL以外的脂蛋白形成复合体的试剂、聚氧化乙烯聚氧丙烯缩合物等不溶解脂蛋白的表面活性剂的测定方法(参见专利文献4)；有采用硫酸葡聚糖等聚合阴离子、二价金属盐、特定的非离子性表面活性剂及可与来自样品的白蛋白不同的白蛋白进行测定的方法(参见专利文献5)；以及测定血清或血浆中HDL胆甾醇的方法，其特征在于，将血清或血浆用含有脂蛋白分离剂(硫酸葡聚糖等聚合阴离子与锰离子等二价阳离子相组合而成)的溶液处理，将所得的混合液不进行固体和液体的分离处理，在阴离子性表面活性剂(烷基磺酸或胆汁酸及其衍生物)存在的条件下，使其和胆甾醇酯水解酶及胆甾醇氧化酶反应，测定生成的过氧化氢的方法(参见专利文献6)等。
但是，这些使HDL以外的脂蛋白凝集来测定HDL胆甾醇的方法，与以往的标准方法有良好的相关性，但还存在问题，诸如反应产生的凝集物造成的混浊造成不准确性，用碱洗涤反应池时，由于与反应液中的金属盐反应生成的金属氢氧化物析出，造成自动分析装置的负荷过量等。
使HDL以外的脂蛋白不凝集来测定HDL胆甾醇的方法，已知还有例如使生物样品和来自胰脏的胆甾醇酯水解酶及胆甾醇氧化酶，在胆汁酸或其盐以及白蛋白存在的条件下进行反应，测定相应的酶反应消耗的或生成的化合物，从而测定生物样品中HDL胆甾醇的方法(参见专利文献7)；在对HDL部分有反应选择性的HLB为16以上的非离子性表面活性剂存在条件下，使检测样品与优先作用于HDL部分的脂蛋白酯酶和/或胆甾醇酯水解酶，以及胆甾醇氧化酶反应，测定检测样品中的HDL胆甾醇的方法(参见专利文献8)等。另外，已知还有用酰基化聚氧化乙烯山梨聚糖酯优先将HDL以外的脂蛋白中的胆甾醇转变为过氧化氢，除去生成的过氧化氢后，通过添加聚氧化乙烯烷基醚来进行HDL胆甾醇测定的酶测定法(参见专利文献9)。
但是，在这些不使HDL以外的脂蛋白凝集而测定HDL胆甾醇的方法中，有时存在由于HDL以外的脂蛋白中的胆甾醇消除得不完全，及对HDL以外的脂蛋白中的胆甾醇会发生非特异反应产生的测定数据不准确的问题。
专利文献1：特开昭62-69999号公报
专利文献2：特开昭63-126498号公报
专利文献3：特开平8-131197号公报
专利文献4：特开平8-201393号公报
专利文献5：特开平9-285298号公报
专利文献6：特开平8-116996号公报
专利文献7：国际公开第97/40376号快报
专利文献8：国际公开第00/52480号快报
专利文献9：特开平9-299号公报
发明内容
发明所解决的问题
本发明的目的在于，提供可以简便且准确地进行测定的HDL胆甾醇测定方法、测定用试剂和测定用试剂盒。
解决问题的手段
本发明涉及以下[1]～[19]项。
[1]一种测定检测样品内高密度脂蛋白中胆甾醇的方法，该方法包含：使检测样品与(i)胆甾醇酯水解酶和胆甾醇氧化酶，或(ii)胆甾醇酯水解酶、氧化型辅酶及胆甾醇脱氢酶，在含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物等构成的族中的至少一种物质的水溶性介质中进行反应生成过氧化氢或还原型辅酶；以及测定所生成的过氧化氢或还原型辅酶。
[2]第[1]项所述的方法，水溶性介质还包含选自：聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺等构成的族中的至少一种物质。
[3]第[2]项所述的方法，聚合阴离子是硫酸葡聚糖或其盐。
[4]第[2]或[3]项所述的方法，胆汁酸衍生物是选自：胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅脱氧胆酸或其盐、熊脱氧胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-氧代鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱氧胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐、通式(I)[化1]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-SO3 -(I)
[此通式中，R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物和通式(II)
[化2]
Figure A20058000499100101
[此通式中，X表示氢原子或羟基，R3和R43可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的烷酰基]表示的化合物构成的族中的至少一种物质。
[5]第[2]～[4]任一项所述的方法，水性介质还包括白蛋白。
[6]测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂，其特征在于，含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，胆甾醇酯水解酶，胆甾醇氧化酶及过氧化氢的测定用试剂。
[7]测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂，其特征在于，含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基聚氧丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，胆甾醇酯水解酶，胆甾醇脱氢酶及氧化型辅酶。
[8]第[7]项所述的试剂，还含有测定还原型辅酶的试剂。
[9]第[6]～[8]任一项所述的试剂，还含有选自聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质。
[10]第[9]项所述的试剂，聚合阴离子是硫酸葡聚糖或其盐。
[11]第[9]或[10]所述的试剂，胆汁酸衍生物是选自：胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅脱氧胆酸或其盐、熊脱氧胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-氧代鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱氧胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐、通式(I)[化3]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-SO3 -(I)
[此通式中，R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物和通式(II)
[化4]
[此通式中，X表示氢原子或羟基，R3和R4可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的烷酰基]表示的化合物构成的族中的至少一种物质。
[12]第[9]～[11]任一项所述的试剂，还含有白蛋白。
[13]测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂盒，其特征在于，含有第一试剂及第二试剂，在第一试剂及第二试剂中含有测定过氧化氢的试剂，在第二试剂中含有胆甾醇氧化酶，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，以及胆甾醇酯水解酶。
[14]测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂盒，其特征在于，含有第一试剂及第二试剂，在第一试剂中含有氧化型辅酶，在第二试剂中含有胆甾醇脱氢酶，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺，氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，以及胆甾醇酯水解酶。
[15]第[14]项所述的试剂盒，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中还含有还原型辅酶测定用试剂。
[16]第[13]～[15]任一项所述的试剂盒，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中还含有选自：聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质。
[17]第[16]项所述的试剂盒，聚合阴离子是硫酸葡聚糖或其盐。
[18]第[16]或[17]项所述的试剂盒，胆汁酸衍生物是选自：胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅脱氧胆酸或其盐、熊脱氧胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-氧代鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱氧胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐、通式(I)的
[化5]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-SO3 -(I)
[此通式中，R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物和通式(II)
[化6]
[此通式中，X表示氢原子或羟基，R3和R4可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的烷酰基]表示的化合物构成的族中的至少一种物质。
[19]第[6]～[18]任一项所述的试剂盒，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中还含有白蛋白。
发明效果
根据本发明，提供简便且准确地进行HDL胆甾醇测定的方法、测定用试剂和测定用试剂盒。
具体实施方式
本发明的HDL胆甾醇测定方法，是不去除HDL以外的脂蛋白中的胆甾醇而测定HDL胆甾醇的方法。
本发明的测定方法中所用的检测样品例如有：全血、血浆、血清、脊髓液、唾液、羊水、尿、汗、胰液等，优选血浆和血清。
本发明中的胆甾醇酯水解酶，并无特别限制，只要是有水解胆甾醇酯能力的酶即可，例如除来自动物、植物或微生物的胆甾醇酯水解酶，脂蛋白脂肪酶的外等，也可以用通过基因工程手段制造的胆甾醇酯水解酶，脂蛋白脂肪酶等。
胆甾醇酯水解酶既可用未经修饰的胆甾醇酯水解酶，也可用经化学修饰过的胆甾醇酯水解酶。还可以用市售品作为胆甾醇酯水解酶。
市售的胆甾醇酯水解酶，例如有胆甾醇酯水解酶“Amano”2(CHE2；天野酶制剂公司制)、胆甾醇酯水解酶“Amano”3(CHE3；天野酶制剂公司制)、脂蛋白脂肪酶(LPL311；东洋纺织公司制)、脂蛋白脂肪酶“Amano”6(LPL6；天野酶制剂公司制)、43kDa脂蛋白脂肪酶(天野酶制剂公司制)、胆甾醇酯水解酶[COE313(化学修饰的胆甾醇酯水解酶)；东洋纺织公司制]等。另外，本发明中，也可以将两种以上的胆甾醇酯水解酶进行组合应用。
胆甾醇酯水解酶化学修饰时，用以修饰该酶的基团(化学修饰基团)例如有：例如以聚乙二醇为主要成分的基团、以聚丙二醇为主要成分的基团、具有聚乙二醇和聚丙二醇共聚物的基团、含水溶性多糖类的基团、磺丙基、磺丁基、聚氨酯基、有螯合功能的基团等，优选以聚乙二醇为主要成分的基团。水溶性多糖例如有：例如葡聚糖、茁霉多糖、可溶性淀粉等。
化学修饰胆甾醇酯水解酶所用的试剂(化学修饰剂)，例如有同时具有上述化学修饰基，和可以与酶的氨基、羧基、巯基等反应的功能基或结构的化合物等。能与酶中氨基反应的功能基或结构，例如有羧基、活性酯基(N-羟基琥珀酰亚胺基等)、酸酐、酸性氯化物、醛、环氧化物基、1，3-丙基磺内酯、1，4-丁基磺内酯等。能与酶中羧基反应的功能基或结构，例如有氨基等。与酶的巯基具有反应性的功能基或结构，例如有马来酰亚胺基、二硫化物、α-卤代酯(α-碘代酯等)。
化学修饰剂也可以使用市售产品。市售的化学修饰剂，例如有：具有以聚乙二醇为主要成分的基团和N-羟基琥珀酰亚胺基团的サンブライト(阳光)VFM-4101、サンブライト(阳光)ME-050AS、サンブライト(阳光)DE-030AS(均为日本油脂公司制造)；具有以聚亚烷基二醇为主要成分的基团和酸酐结构的サンブライト(阳光)AKM系列(例如サンブライトAKM-1510等)、サンブライト(阳光)ADM系列、サンブライト(阳光)ACM系列(均为日本油脂公司制造)；具有以聚乙二醇为主要成分的基团和环氧基的EPOX-3400、M-EPOX-5000(均为Sheawater Polymers公司制造)；具有螯合功能的基团和酸酐结构的二乙烯基三胺基-N，N，N’，N”-五无水二乙酸(无水DTPA同仁化学公司制造)等。
胆甾醇酯水解酶的化学修饰可以用例如以下方法进行，但并不仅限于这种方法。首先，将胆甾醇酯水解酶溶解在pH8.0以上的缓冲液(例如HEPES缓冲液)中，在0～55℃，以0.01～500倍摩尔量添加化学修饰剂，搅拌5分钟～5小时。在实际的酶反应中，化学修饰过的胆甾醇酯水解酶，不仅是这种反应液本身，也可以使用必要时采用超滤膜等除去未反应的化学修饰剂等的酶。
在本反应的方法中所用的胆甾醇酯水解酶的浓度没有特别限定，只要可以进行本发明的HDL胆甾醇测定即可，不过反应液中浓度优选0.01～400U/mL，更优选0.02～200U/mL。
本发明中的胆甾醇氧化酶没有特别限定，只要是有氧化胆甾醇产生过氧化氢能力的酶即可，例如除来自动物、植物或微生物的胆甾醇氧化酶的外，还可以采用通过基因工程手段制备的胆甾醇氧化酶等，也可以用市售的商品，如胆甾醇氧化酶“Amano”1(CHOD1；天野酶制剂公司制造)、胆甾醇氧化酶(CO-PE；KIKKOMAN公司制造)、胆甾醇氧化酶(COO321；东洋纺织公司制造)、胆甾醇氧化酶协和(协和发酵公司制造)等。另外，在本发明中，也可以将两种以上的胆甾醇氧化酶组合使用。
胆甾醇氧化酶可以是未经修饰的酶，也可以是经化学修饰的酶。经化学修饰的胆甾醇氧化酶可以用例如上述化学修饰剂，通过上述化学修饰方法制备。
在本反应的方法中的胆甾醇氧化酶的浓度，没有特别限定，只要是能够进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，不过反应液中浓度优选0.01～400U/mL，更优选0.02～200U/mL。
本发明中的胆甾醇脱氢酶没有特别限定，只要是当存在氧化型辅酶时有氧化胆甾醇产生还原型辅酶能力的酶即可，除例如来自动物、植物或微生物的胆甾醇脱氢酶以外，还可以采用通过基因工程手段制备的胆甾醇脱氢酶等。也可以用市售的商品，如胆甾醇脱氢酶“Amano”5(CHDH5；天野酶制剂公司制造)等。另外，在本发明中，也可以将两种以上的胆甾醇脱氢酶组合使用。胆甾醇脱氢酶可以是未经修饰的酶，也可以是经化学修饰的酶。经化学修饰的胆甾醇脱氢酶可以用上述化学修饰剂，通过上述化学修饰方法制备。
在本反应的方法中所用的胆甾醇脱氢酶浓度，没有特别限定，只要是能够进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，不过反应液中浓度优选0.01～400U/mL，更优选0.02～200U/mL。
在本发明的采用胆甾醇脱氢酶的测定方法中，采用氧化型辅酶。氧化型辅酶有例如NAD、NADP、thio-NAD和thio-NADP等。
本发明中采用的烷基胺聚氧乙烯聚氧丙烯缩合物、聚氧乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧乙烯酸酰胺、烷基丙烯二胺衍生物并非特别限定，只要能用作本发明的HDL胆甾醇测定即可。
氧化烷基胺，有如氧化烷基二甲胺、氧化二羟基乙烷基胺、氧化聚氧化乙烯二甲胺等。烷基丙烯二胺衍生物例如有烷基丙烯二胺、聚氧化乙烯烷基丙烯二胺等。
在烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物，聚氧化乙烯烷基胺硫酸酯、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺及烷基丙烯二胺衍生物中的烷基是，直链或支链状的碳原子数6～30个的烷基，例如己烷基、庚烷基、辛烷基、异辛烷基、壬烷基、癸烷基、十一烷基、十二烷基(月桂烷基)、十三烷基、十四烷基(肉豆蔻烷基)、十五烷基、十六烷基(棕榈烷基)、十七烷基、十八烷基(硬脂烷基)、十九烷基、二十烷基、二十一烷基、二十二烷基(山嵛烷基)、二十三烷基、二十四烷基、二十五烷基、二十六烷基、二十七烷基、二十八烷基、二十九烷基、三十烷基等。
烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物，聚氧化乙烯烷基胺硫酸酯、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化聚氧化乙烯二甲胺及聚氧化乙烯烷基丙烯二胺中，氧化乙烯链的聚合度优选1～100的，更优选为1～50。
烷基胺聚氧化乙烯聚氧丙烯缩合物的具体物质(包括制剂)，有BLAUNON SAP3004、BLAUNON SAP3010(牛油胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物；均为青木油脂公司制造)、C16EO30PO10[十六胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(氧化乙烯链的聚合度：30，氧化丙烯链聚合度：10)，日本油脂公司制造]、C16EO30PO20[十六胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(氧化乙烯链的聚合度：30，氧化丙烯链的聚合度：20)，日本油脂公司制造]、C16EO40PO10[十六胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(氧化乙烯链的聚合度：40，氧化丙烯链的聚合度：10)，日本油脂公司制造]、C16EO20PO10[十六胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(氧化乙烯链的聚合度：20，氧化丙烯链的聚合度：10)，日本油脂公司制造]等。
聚氧化乙烯烷基胺硫酸酯的具体物质(制剂)，有レベロンA-625X(一方公司油脂公司制造)、ミグノ-ルPA-30(一方公司油脂公司制造)ニユ-ポ-ルPE-61(三洋化成公司制造)等。
聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐的具体物质(制剂)，有ビスノ-ルSK(一方公司油脂公司制造)等。
聚氧化乙烯酸酰胺的具体物质(制剂)，有ニツコ-ルTAMDS15(日光化学公司制造)、ナイミツドMT-215(日本油脂公司制造)等。
氧化烷基胺的具体物质(制剂)，有ユニセ-フA-LE(氧化二羟基乙基月桂基胺；日本油脂公司制造)、ユニセ-フA-LM(氧化烷基二甲基胺；日本油脂公司制造)、ユニセ-フA-LY(氧化聚氧化乙烯椰油烷基二甲基胺；日本油脂公司制造)等。
烷基丙烯二胺衍生物的具体物质(制剂)，有BLAUNON DT03、BLAUNON DT15(烷基丙烯二胺；均为青木油脂公司制造)アスフアゾ-ル#10(聚氧化乙烯牛油丙烯二胺；日本油脂公司制造)等。
另外，在本发明中，使用选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸酯、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺及烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种即可，也可以任意组合使用多种。在本发明的HDL胆甾醇测定方法中，选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸酯、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺及烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，其浓度并无特别限定，只要是能够测定本发明中的HDL胆甾醇的浓度即可，反应液中的浓度优选0.0001～1％，更优选0.001～0.1％。
本发明中使用的聚合阴离子没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的聚合阴离子即可，例如有硫酸葡聚糖或其盐、肝素或其盐、磷钨酸或其盐、硫酸化环糊精或其盐、硫酸化寡糖或其盐等，但以硫酸葡聚糖或其盐为最佳。硫酸葡聚糖例如有分子量为4万、8万、20万、50万、100万、200万等的硫酸葡聚糖。硫酸化寡糖例如有：例如硫酸化琼脂糖、硫酸化海藻糖、硫酸软骨素等。盐例如有钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、锰盐等。此外，本发明中也可以使用两种以上的聚合阴离子。在本发明的HDL胆甾醇测定中聚合阴离子的浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.001～10％，更优选0.01～1％。
在本发明中的胆汁酸衍生物没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的胆汁酸衍生物即可，例如有具有阴离子性表面活性作用的胆汁酸衍生物、具有两性表面活性作用的胆汁酸衍生物、具有非离子性表面活性作用的胆汁酸衍生物等。
有阴离子性表面活性作用的胆汁酸衍生物、例如胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅胆酸或其盐、熊胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱盐胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐等。盐则有例如铵盐、锂盐、钠盐、钾盐、锰盐、钙盐等。有阴离子表面活性作用的胆汁酸衍生物的浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.001～10％，更优选0.01～1％。
有两性表面活性作用的胆汁酸衍生物、有如通式(I)[化7]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-S03 -       (I)
[此通式中，R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物(以下简称化合物(I))
R2是氢原子的化合物(I)，以下称为CHAPS，R2是羟基的化合物(I)，以下称为CHAPSO。有两性表面活性作用的胆汁酸衍生物的浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.001～10％，更优选0.01～1％。
有非离子性表面活性作用的胆汁酸衍生物，有如以通式(II)[化8]
Figure A20058000499100201
[此通式中，X表示氢原子或羟基，R3和R4可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的链烷酰基]表示的化合物(以下简称化合物(II))等。烷基、链烷酰基中的烷基，为1～10个碳原子的直链或支链的基团，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。取代烷基或链烷酰基中的取代基团，有羟基、卤素原子等。卤素原子指氟、氯、溴、碘等各原子。化合物(II)中，R3和R4同时是
[化9]
COCH(OH)CH(OH)CH(OH)CH(OH)CH2(OH)
(以下称为取代基A)的化合物。下文中，把X、R3和R4分别是氢原子、取代基A和取代基A的化合物称为deoxy-BIGCHAP；分别是羟基、取代基A和取代基A的化合物称为BIGCHAP。有非离子性表面活性作用的胆汁酸衍生物浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.001～10％，更优选0.01～1％。本发明中也可以采用两种以上的胆汁酸衍生物。
乙二胺四聚氧化烯烃，有乙二胺聚氧化丙烯聚氧化乙烯缩合物、乙二胺四聚氧化乙烯、乙二胺聚氧化丙烯等。乙二胺四聚氧化烯烃的具体物质(包括制剂)，有アデカプルロニツクTR704、アデカプルロニツクTR701、アデカプルロニツクTR913R(均为乙二胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物；旭电化公司制造)ユニル-ブ32TY-65BI(乙二胺四聚氧化烯烃：日本油脂公司制造)乙二胺PO52EO60(氧化乙烯链的聚合度的总和：60；氧化丙烯链的聚合度的总和：52；日本油脂公司制造)等。乙二胺四聚氧化烯烃的聚合度优选1～100，更优选1～60。本发明中，也可以采用两种以上的乙二胺四聚氧化烯烃。乙二胺四聚氧化烯烃的浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.001～10％，更优选0.01～1％。聚氧化乙烯烷基胺及聚氧化乙烯链烯基胺，有例如通式(III)
[化10]
Figure A20058000499100211
[式中R表示直链或支链的烷基或链烯基，X表示氢原子或(CH2CH2O)nH，m和n表示相同或不同的1～100的整数，m+n为2～200的整数]表示的化合物[以下称为化合物(III)]，化合物(III)中，烷基为直链或支链的6～30个碳原子的化合物，例如己基、庚基、辛基、异辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基(月桂烷基)、十三烷基、十四烷基(肉豆蔻烷基)、十五烷基、十六烷基(棕榈烷基)、十七烷基、十八烷基(硬脂烷基)、十九烷基、二十烷基、二十一烷基、二十二烷基(山嵛烷基)、二十三烷基、二十四烷基、二十五烷基、二十六烷基、二十七烷基、二十八烷基、二十九烷基、三十烷基等。化合物(IN)中的烯基例如有：直链或支链上的碳原子6～30的，例如己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基、香茅基、十一烯基、十二烯基(月桂烷基)、十三烯基、十四烯基、十五烯基、十六烯基、十七烯基、油烯基、十九烯基、二十烯基、二十一烯基、二十二烯基、二十三烯基、二十四烯基、二十五烯基、二十六烯基、二十七烯基、二十八烯基、二十九烯基、三十烯基等。
聚氧化乙烯烷基胺或聚氧化乙烯链烯胺的具体物质(制剂)，例如有ナイミ-ンL201(氧化乙烯十二烷胺；日本油脂公司制造)、ナイミ-ンL207(聚氧化乙烯十二烷胺；日本油脂公司制造)、ナイミ-ンS204、ナイミ-ンS210(聚氧化乙烯十八烷胺；日本油脂公司制造)、ニユ-コ-ルOD420(聚氧化乙烯十八烷胺；日本乳化剂公司制造)、パイオニンD3104(聚氧化乙烯月桂胺；竹本油脂公司制造)、パイオニンD3110(聚氧化乙烯月桂胺；竹本油脂公司制造)、パイオニンD3605[(聚氧化乙烯烷基(大豆)胺；竹本油脂公司制造)]パイオニンD3615T[(聚氧化乙烯烷基(牛油)胺；竹本油脂公司制造)]、BLAUNON O209(聚氧化乙烯油烯基氨基醚；青木油脂公司制造)等聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯胺中氧化乙烯链的聚合度优选1～100，更优选1～60。在本发明中，可以采用两种以上的聚氧化乙烯烷基胺或聚氧化乙烯链烯胺。聚氧化乙烯烷基胺或聚氧化乙烯链烯胺的浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.0001～1％，更优选0.01～1％。
本发明中采用的白蛋白，没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，例如来自牛、马、羊或人的白蛋白等，优选牛血清白蛋白(BSA)。另外，也可以用基因工程手段制造的白蛋白。本发明中，也可以组合使用两种以上的白蛋白。本发明的HDL胆甾醇测定中白蛋白浓度没有特别限定，只要是可以进行本发明的HDL胆甾醇测定的浓度即可，但反应液中的浓度优选0.001～10％，更优选0.01～1％。
本发明的HDL胆甾醇测定方法中使用的水性介质，有诸如去离子水、蒸馏水、缓冲液等，优选缓冲液。缓冲液中所用的缓冲剂，有诸如三(羟甲基)氨基甲烷缓冲剂、磷酸缓冲剂、硼酸缓冲剂、优良缓冲剂等。优良缓冲剂，例如有2-(N-吗啉基)-乙基磺酸(MES)、双(2-羟乙基)氨基三(羟甲基)-甲烷(Bis-Tris)、N-(2-乙酰胺基)-亚氨二乙酸(ADA)、哌嗪-N，N’-双(2-乙磺酸)(PIPES)、N-(2-乙酰胺基)-2-氨乙基磺酸(ACES)、3-吗啉代)-2-羟丙基磺酸(MOPSO)、N，N-双(二羟乙基)-2-氨基乙烷磺酸(BES)、3-(N-吗啉代)丙烷磺酸(MOPS)、N-[3(羟甲基)甲基]-2-氨基乙烷磺酸(TES)、2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]乙烷磺酸(HEPES)、3-[N，N-双(2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙烷磺酸(DIPSO)、N-[3(羟甲基)甲基]-2-羟基-3-氨基丙烷磺酸(TAPSO)、哌嗪-N，N’-双(2-羟基丙烷磺酸)(POPSO)、3-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]-2-羟基丙烷磺酸(HEPPSO)、3-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]丙烷磺酸[(H)EPPS]、N-[3(羟甲基)甲基]甘氨酸(Tricine)、N，N’-双(2-羟乙基)甘氨酸(Bicine)、N-3(羟甲基)甲基-3-氨基丙烷磺酸(TAPS)、N-环己基-2-氨基乙烷磺酸(CHES)、N-环己基-3-氨基-2-羟基丙烷磺酸(CAPSO)、N-环己基-3-氨基丙烷磺酸(CAPS)等。缓冲液的浓度没有特别限定，只要适合测定的浓度即可，优选0.001～2.0mol/L，更优选0.005～1.0mol/L。
以下具体说明本发明的HDL胆甾醇测定方法、测定用试剂和测定用试剂盒。
(HDL胆甾醇的测定方法)
现举以下所述方法为例说明本发明的HDL胆甾醇的测定方法。
测定方法
(1)使检测样品与胆甾醇酯水解酶和胆甾醇氧化酶，或胆甾醇酯水解酶、氧化型辅酶及胆甾醇脱氢酶，在至少含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的一种物质，根据需要含有聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙烯二氨基四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺、聚氧化乙烯链烯胺和白蛋白构成的族中的一种物质的水溶性介质中，进行反应使其生成过氧化氢或还原型辅酶；
(2)测定生成的过氧化氢或还原型辅酶；
(3)根据(2)测定的值和事先制备的标准曲线，通过计算出检测样品中HDL胆甾醇的浓度，可以测定出检测样品的HDL胆甾醇。
本测定方法中，反应(1)可在10～50℃，优选20～40℃下，反应1～60分钟，优选2～30分钟。
生成的过氧化氢的量，可以用诸如过氧化氢测定用试剂进行测定。过氧化氢测定用试剂，是为了把生成的过氧化氢转换成能够检测的物质的试剂。能够检测的物质有例如色素、发光等，优选色素。能够检测的物质是色素时，检测过氧化氢用的试剂含有氧化发色型生色体和过氧化氢酶等过氧化活性物质。氧化发色型生色体有例如下述氧化发色型生色体。当能够检测的物质会发光时，检测过氧化氢用的试剂含有化学发光物质。化学发光物质有如鲁米那、异鲁米那、光泽精、吖啶基酯等。
检测过氧化氢用的试剂，在采用含有氧化发色型生色体和过氧化氢酶等过氧化活性物质时，过氧化氢在过氧化活性物质存在时会和氧化发色型生色体发生反应而生成色素，通过定量所生成的色素，能定量过氧化氢。另外，在采用含有化学发光物质的检测过氧化氢用的试剂时，过氧化氢与化学发光物质反应生成光子，通过定量生成的光子，即能定量过氧化氢。
氧化发色型生色体，例如有无色型生色体、氧化偶合发色型生色体等。无色型生色体在有过氧化氢和过氧化氢酶等过氧化活性物质存在时，单独地向色素转换的物质。具体物质有10-N-羧甲基氨基甲酰基-3，7-双(二甲胺基)-10H-吩噻嗪(CCAP)、10-N-甲基氨基甲酰基-3，7-双(二甲胺基)-10H-吩噻嗪(MCDP)、N-(羧甲基氨基甲酰基)-4，4’-双(二甲胺基)联苯胺钠盐(DA-64)、4，4’-双(二甲胺基)联苯胺、双[3-双(4-氯苯)甲基-4-二甲氨基苯基]胺(BCMA)等。
氧化偶合发色型生色体，是在有过氧化氢和过氧化氢酶等过氧化活性物质存在下，两种化合物通过氧化偶合生成色素的物质。两种化合物的组合，例如有偶合剂和苯胺类的组合、偶合剂和酚类的组合等。偶合剂有例如4-氨基-安替比林(4-AA)、3-甲基-2-苯并噻唑酮肼等。苯胺类则有N-(3-磺基丙烷基)苯胺、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)-3-甲基苯胺(TOOS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)-3，5-二甲基苯胺(MAOS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)-3，5-二甲氧基苯胺(DAOS)、N-乙基-N-(3-磺基丙烷基)-3-甲基苯胺(TOPS)、N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)-3，5-二甲氧基苯胺(HDAOS)、N-N-二甲基-3-甲基苯胺、N-N-二(3-磺基丙烷基)-3，5-二甲氧基苯胺、N-乙基-N-(3-磺基丙烷基)-3-甲氧基苯胺、N-乙基-N-(3-磺基丙烷基)苯胺、N-乙基-N-(3-磺基丙烷基)-3，5-二甲氧基苯胺、N-(3-磺基丙烷基)-3，5-二甲氧基苯胺、N-乙基-N-(3-磺基丙烷基)-3，5-二甲基苯胺、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)-3-甲氧基苯胺、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)苯胺、N-乙基-N-(3-甲苯基)-N’-琥珀酰乙烯二胺(EMSE)、N-乙基-N-(3-甲苯基)-N’-乙酰乙烯二胺、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙烷基)-4-氟-3，5-二甲氧基苯胺(F-DAOS)等。酚类有苯酚、4-氯酚、3-甲基酚、3-羟基-2，4，6-三碘苯甲酸(HTIB)等。
在过氧化氢测定中，过氧化活性物质的浓度没有特别限定，只要是适合测定的浓度即可，在用过氧化氢酶作为过氧化活性物质时，优选1～100kU/L。另外，氧化发色型生色体的浓度没有特别限定，只要是适合测定的浓度即可，优选0.01～10g/L。
还原型辅酶的测定方法，例如有测定所生成的还原型辅酶吸光度的方法、采用测定还原型辅酶用试剂的方法等。测定还原型辅酶吸光度的方法中的吸光度，优选300～500nm，更优选330～400nm间，特别优选340nm附近。测定还原型辅酶用的试剂，是为了把还原型辅酶转变成可检测的物质的制剂。可以检测的物质例如有色素等。可检测的物质是色素时还原型辅酶测定用试剂，例如有含有心肌黄酶、电子载体和还原发色型生色体的试剂。电子载体有如：1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy-5-methylphenazinium methylsulfate)等。在采用含有心肌黄酶、电子载体和还原发色型生色体的试剂作为测定还原型辅酶试剂时，通过定量转换还原发色型生色体而生成的色素，即可定量还原型辅酶。
还原发色型生色体，有例如3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-联苯基-2H-溴代四唑鎓(MTT)、2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基酚)-5-(2，4-二磺苯基)-2H-四唑鎓单钠盐(WST-1)、2-(4-碘苯基)-3-(2，4-二硝基酚)-5-(2，4-二磺苯基)-2H-四唑鎓单钠盐(WST-3)等。
(HDL胆甾醇测定用试剂)
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的一种物质，以及胆甾醇酯水解酶，胆甾醇氧化酶和过氧化氢检测用试剂，必要时还含有选自：聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质。
另外，本发明的HDL胆甾醇测定用试剂含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的一种物质，胆甾醇酯水解酶，胆甾醇脱氢酶及氧化型辅酶，必要时还含有聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质，或者测定还原型辅酶用的试剂。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂例如有以下形式的试剂，但对本发明的范围没有任何限定。
此外，烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺，氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的一种物质，以下称为[化合物A]。
另外，聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺等化合物构成的族中的至少一种物质，以下称为[化合物B]。在本发明的测定试剂中，化合物A可以使用一种或多种，化合物B可以使用一种或多种。
试剂1
含有化合物A、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶和过氧化氢检测用试剂的试剂。
试剂2
含有化合物A、化合物B、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶和过氧化氢检测用试剂的试剂。
试剂3
含有化合物A、化合物B、白蛋白、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶和过氧化氢检测用试剂的试剂。
试剂4
含有化合物A、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶和氧化型辅酶的试剂。
试剂5
含有化合物A、化合物B、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶和氧化型辅酶的试剂。
试剂6
含有化合物A、化合物B、白蛋白、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶和氧化型辅酶的试剂。
试剂7
含有化合物A、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、氧化型辅酶和测定还原型辅酶用试剂的试剂。
试剂8
含有化合物A、化合物B、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、氧化型辅酶和测定还原型辅酶用试剂的试剂。
试剂9
含有化合物A、化合物B、白蛋白、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、氧化型辅酶和测定还原型辅酶用试剂的试剂。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂，可以使用已经在上述本发明的HDL胆甾醇测定方法中列举的烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、胆甾醇脱氢酶、聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺、白蛋白、过氧化氢测定用试剂、氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂。
(HDL胆甾醇测定用试剂盒)
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂，可用试剂盒形式保存、流通和使用。试剂盒的形式并无特别限制，二试剂系统和三试剂系统等均可，但优选二试剂系统。
由第一试剂和第二试剂组成的二试剂系统HDL胆甾醇测定用试剂盒中，胆甾醇酯水解酶和胆甾醇氧化酶或胆甾醇脱氢酶，可以分别含在第一试剂和第二试剂中，也可以全部含在第二试剂中。当分别含在第一试剂和第二试剂中时，最好的形式是胆甾醇酯水解酶可以含在第一试剂中，胆甾醇氧化酶或胆甾醇脱氢酶含在第二试剂中。烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺、聚氧化乙烯链烯基胺和白蛋白含于第一试剂或第二试剂二者的一或二者的中均可。在采用胆甾醇脱氢酶的测定方法中使用的氧化型辅酶，含于第一试剂或第二试剂二者的一或二者的中均可。
过氧化氢测定用试剂含于第一试剂或第二试剂二者的一或二者的中均可，但在该试剂含有氧化偶联型发色体时，优选的形式是将各种氧化偶合型发色体各种化合物含在不同的试剂中。测定还原型辅酶用的试剂可以含于第一试剂或第二试剂二者的一或二者的中均可，优选含于第一试剂和第二试剂二者的中。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂盒，例如有以下形式的试剂盒，但这些对本发明的范围没有任何限定。
试剂盒1
第一试剂
胆甾醇酯水解酶
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒2
第一试剂
胆甾醇酯水解酶
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒3
第一试剂
胆甾醇酯水解酶
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒4
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒5
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒6
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒7
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒8
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒9
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒10、
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒11
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒12
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒13、
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒14
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒15
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒16
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒17
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒18
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒19
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、白蛋白、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒20
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒21
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒22
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒23
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒24
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒25
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒26
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒27
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒28
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒29
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒30
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒31
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒32
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒33
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒34
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒35
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒36
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒37
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒38
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒39
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒40
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白、化合物A
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒41
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒42
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒43
第一试剂
化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒44
第一试剂
化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒45
第一试剂
化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒46
第一试剂
化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒47
第一试剂
化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒48
第一试剂
化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒49
第一试剂
化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒50
第一试剂
化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒51
第一试剂
化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒52
第一试剂
化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒53
第一试剂
化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒54
第一试剂
化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒55
第一试剂
化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒56
第一试剂
化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒57
第一试剂
化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒58
第一试剂
化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒59
第一试剂
化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒60
第一试剂
化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒61
第一试剂
过氧化氢检测用试剂
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒62
第一试剂
过氧化氢检测用试剂
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒63
第一试剂
过氧化氢检测用试剂
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒64
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒65
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、
试剂盒66
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒67
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒68
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒69
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒70
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒71
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒72
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂
试剂盒73
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒74
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物B
试剂盒75
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒76
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒77
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒78
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒79
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A
试剂盒80
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒81
第一试剂
过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、过氧化氢检测用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒82
第一试剂
氧化型辅酶
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒83
第一试剂
氧化型辅酶
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒84
第一试剂
氧化型辅酶
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒85
第一试剂
氧化型辅酶、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒86
第一试剂
氧化型辅酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒87
第一试剂
氧化型辅酶、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒88
第一试剂
氧化型辅酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒89
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒90
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒91
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B、白蛋白
试剂盒92
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒93
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒94
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒95
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒96
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒97
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒98
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒99
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒100
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒101
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒102
第一试剂
氧化型辅酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒103
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒104
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒105
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒106
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒107
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒108
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒109
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒110
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒111
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒112
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒113
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒114
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒115
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒116
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒117
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒118
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒119
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒120
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒121
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒122
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒123
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒124
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒125
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒126
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒127
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒128
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒129
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒130
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒131
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒132
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒133
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物B、白蛋白
试剂盒134
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶
试剂盒135
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶
试剂盒136
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒137
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒138
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒139
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒140
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒141
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒142
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒143
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒144
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒145
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒146
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒147
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒148
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒149
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒150
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒151
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒152
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒153
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒154
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒155
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒156
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒157
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒158
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒159
第一试剂
氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒160
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒161
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒162
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒163
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒164
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒165
第一试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒166
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒167
第一试剂
胆甾醇酯水解酶第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒168
第一试剂
胆甾醇酯水解酶第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒169
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒170
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒171
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒172
第一试剂
胆甾醇酯水解酶
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒173
第一试剂
胆甾醇酯水解酶第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒174
第一试剂
胆甾醇酯水解酶
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒175
第一试剂
胆甾醇酯水解酶第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B、白蛋白
试剂盒176
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒177
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶
试剂盒178
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒179
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物B
试剂盒180
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒181
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒182
第一试剂
胆甾醇酯水解酶
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒183
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒184
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A
试剂盒185
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒186
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、化合物A、化合物B
试剂盒187
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒188
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒189
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒190
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒191
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒192
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒193
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒194
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒195
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒196
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B、白蛋白
试剂盒197
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒198
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂
试剂盒199
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒200
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物B
试剂盒201
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒202
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒203
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
试剂盒204
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒205
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A
试剂盒206
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇脱氢酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
试剂盒207
第一试剂
胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B、白蛋白
第二试剂
氧化型辅酶、胆甾醇酯水解酶、还原型辅酶测定用试剂、化合物A、化合物B
用于本发明HDL胆甾醇测定的试剂盒，可以采用上述本发明HDL胆甾醇测定方法中所列举的试剂：胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、胆甾醇脱氢酶、烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺，氧化烷基胺、烷基丙烯二胺衍生物、聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺、聚氧化乙烯链烯基胺、白蛋白、过氧化氢测定用试剂、氧化型辅酶、还原型辅酶测定用试剂等。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，可根据必要，也可以含有水性介质、稳定剂、防腐剂、干扰物质消除剂、反应促进剂等。水性介质例如有上述水性介质等；稳定剂有如乙二胺四乙酸(EDTA)、蔗糖、氯化钙等；防腐剂例如有如叠氮化钠、抗生素等；干扰物质消除剂例如有消除抗坏血酸干扰的抗坏血酸氧化酶等；反应促进剂例如有共脂肪酶和磷酸酯酶等酶、硫酸钠和氯化钠等盐类等。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒，可以是冷冻干燥状态，也可以是溶解在水性介质的状态。采用冷冻干燥状态的制剂测定检测样品中HDL胆甾醇时，要将该试剂溶解在水性介质中使用。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，胆甾醇酯水解酶、胆甾醇氧化酶、胆甾醇脱氢酶的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.01～1200U/mL，更优选0.02～600U/mL。本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺，氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.0001～3％，更优选0.001～0.3％；本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，聚合阴离子的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.001～30％，更优选0.01～3％。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，胆汁酸衍生物的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.001～30％，更优选0.01～3％。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，乙二胺四聚氧化烯烃的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.001～30％，更优选配成0.01～3％。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，聚氧化乙烯胺或聚氧化乙烯链烯胺的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.0001～3％，更优选配成0.001～0.3％。
本发明的HDL胆甾醇测定用试剂和测定用试剂盒中，白蛋白的含量，在以水性介质溶解状态下的浓度优选配成0.001～30％，更优选配成0.01～3％。
下面用实施例详细说明本发明，但这些实施例对本发明的范围的没有任何限定。另外，在本实施例中，使用了下述制造商的试剂和酶制剂。
HEPES(BDH Laboratory公司制)、EMSE(ダイト化学公司制)、硫酸葡聚糖钠(分子量50万)(Phamaica公司制)、牛血清白蛋白(BSA；东洋纺织公司制)、4-氨基安替比林(埼京化成公司制)、过氧化氢酶(东洋纺织公司制)、COO321(胆甾醇氧化酶；东洋纺织公司制)、CHODI(胆甾醇氧化酶；天野酶制剂公司制)、CHOD协和(胆甾醇氧化酶；协和发酵公司制)、LPL311(胆甾醇酯水解酶；东洋纺织公司制)、LPL6(胆甾醇酯水解酶；天野酶制剂公司制)、43kDa酯酶(胆甾醇酯水解酶；天野酶制剂公司制)、BLAUONON SAP3010、BLAUONON SAP3004(均为牛油胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物；青木油脂公司制)、C16EO30PO10、C16EO30PO20、C16EO40PO10、C16EO20PO10(均为十六烷基聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物；日本油脂公司制)、ビスノ-ル(Bisnol)SK(聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐；一方公司油脂公司制)、ミゲノ-ル(Mignol)PA-30(聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐；一方公司油脂公司制)、ニツコ-ル(Nicol)TAMDS15(聚氧化乙烯硬脂酸酰胺；日光化学公司制)、ナイミツド(Naimizdo)MT-215(聚氧化乙烯酸酰胺；日光化学公司制)、BLAUONON DT03、BLAUNON DT15(均为烷基丙烯二胺；青木油脂公司制)、ユニセ-フ(Unisef)A-LM(氧化烷基二甲胺；日本油脂公司制)、ユニセ-フA-LY(聚氧化乙烯椰子油烷基二甲基氧化胺；日本油脂公司制)、アスフアゾ-ル(Asphazol)#10(聚氧化乙烯牛油丙烯二胺；日本油脂公司制)、乙二胺PO52EO60(乙二胺四聚氧化烯烃；日本油脂公司制)、アデカプルロニツク(Adecarnic)TR704(乙二胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物；旭电化公司制)、ナイミ-ン(Naimin)L207(聚氧化乙烯十二烷基胺；日本油脂公司制)、胆酸钠(阴离子性胆汁酸衍生物；ACROS公司制)、CHAPS(两性胆汁酸衍生物；同仁化学公司制)、BIGCHAP(非离子性胆汁酸衍生物；同仁化学公司制)。
参考例1化学修饰LPL311(经化学修饰的LPL311)的制备
在HEPES缓冲液(pH8.5 0.15mol/L)中加入LPL311使其浓度为33g/L，冷却到5℃后，加入サンブライト(Sanbride)VFM-4101(日本油脂公司制)使其浓度为330g/L，再反应3小时。所得到的修饰酶溶液无需纯化即直接作为化学修饰的LPL311使用。
实施例1
制备了由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                  10mmol/L
EMSE                          0.3g/L
第二试剂(试剂a1)
HEPES(pH7.0)                  10mmol/L
4-氨基安替比林                0.3g/L
过氧化氢酶                    20kU/L
化学修饰的LPL311              0.2kU/L
COO321                        5.0kU/L
BLAUNON SAP3004               0.1g/L
实施例2
制备了由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                  10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
第二试剂(试剂a2)
HEPES(pH7.0)                      10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
化学修饰的LPL311                  0.2kU/L
COO321                            5.0kU/L
BLAUNON SAP3010                   0.5g/L
实施例3
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a3)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
第二试剂(试剂a3)
HEPES(pH7.0)                      10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
化学修饰的LPL311                  0.2kU/L
COO321                            5.0kU/L
C16EO30PO10                       0.5g/L
实施例4
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a4)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
第二试剂(试剂a4)
HEPES(pH7.0)                      10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
化学修饰的LPL311                  0.2kU/L
COO321                            5.0kU/L
C16EO40PO10                       1.0g/L
实施例5
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a5)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
第二试剂(试剂a5)
HEPES(pH7.0)                      10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
化学修饰的LPL311                  0.2kU/L
COO321                            5.0kU/L
C16EO30PO20                       0.5g/L
实施例6
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a6)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                                0.3g/L
第二试剂(试剂a6)
HEPES(pH7.0)                        10mmol/L
4-氨基安替比林                      0.3g/L
过氧化氢酶                          20kU/L
化学修饰的LPL311                    0.2kU/L
COO321                              5.0kU/L
C16EO20PO10                         0.5g/L
实施例7
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a7)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                        10mmol/L
EMSE                                0.3g/L
第二试剂(试剂a7)
HEPES(pH7.0)                        10mmol/L
4-氨基安替比林                      0.3g/L
过氧化氢酶                          20kU/L
化学修饰的LPL311                    0.2kU/L
COO321                              5.0kU/L
ビスノ-ルSK                         0.3g/L
实施例8
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a8)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                        10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
第二试剂(试剂a8)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
ミゲノ-ルPA-30                       0.5g/L
实施例9
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a9)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
第二试剂(试剂a9)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
ニツコ-ルTAMDS15                     0.1g/L
实施例10
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a10)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂a10)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
BLAUNONDT03                           0.5g/L
实施例11
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a11)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂a11)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
BLAUNON DT15                          0.1g/L
实施例12
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a12)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂a12)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
アスフアゾ-ル#10                      0.1g/L
对照例1
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂a)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂a)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
实施例13
用实施例1的试剂盒测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
(1)标准曲线的制备
用实施例1的试剂盒，用生理盐水(HDL胆甾醇浓度：0.0mg/dL)和血清(HDL胆甾醇浓度：80.0mg/dL)作为标准液，在日立7170S型自动分析装置上，制备表示HDL胆甾醇浓度和吸光度的间关系的标准曲线。
此处所谓的「吸光度」，表示根据通过以下反应测定的两个吸光度值(E1和E2)，从E2中扣除E1所得的数值。
在反应池中加入标准液(2μL)和第一试剂(0.15mL)，37℃保温5分钟，用主波长600nm、副波长700nm测定反应液的吸光度(E1)，然后在反应液中加入第二试剂(0.05mL)，再在37℃保温5分钟，用主波长600nm、副波长700nm测定反应液的吸光度(E2)
(2)根据人血清检测样品与实施例1或对照例1的试剂盒反应，算出该检测样品中的吸光度
除用人血清检测样品代替(1)中制备标准曲线使用的标准液外，用计算(1)的吸光度同样的方法，算出该检测样品中的吸光度。
(3)人血清检测样品中的HDL胆甾醇浓度的测定
根据由(2)算出的「吸光度」与由(1)制备的标准曲线，测定各检测样品中HDL胆甾醇的浓度。
实施例14
除用实施例2的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例15
除用实施例3的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例16
除用实施例4的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例17
除用实施例5的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例18
除用实施例6的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例19
除用实施例7的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例20
除用实施例8的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例21
除用实施例9的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例22
除用实施例10的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定3人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例23
除用实施例11的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例24
除用实施例12的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例2
除用对照例1的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
然后，用在实施例13～24和对照例2中使用的人血清30样品，按Clinical Chemisty第45卷10期(1999年)所述的DCM法(DesignatedComparison Method)测定该检测样品中的HDL胆甾醇，并比较各实施例和对照例中的数据。将各实施例和对照例分别的测定，与用DCM法测定所得相关系数，表示在第1表1中。
[表1]
第1表
  测定法          测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例2           对照例1   -0.227
  试剂A   试剂a
  实施例13           实施例1   0.932
  试剂A   试剂a1
  实施例14           实施例2   0.965
  试剂A   试剂a2
  实施例15           实施例3   0.987
  试剂A   试剂a3
  实施例16           实施例4   0.783
  试剂A   试剂a4
  实施例17           实施例5   0.969
  试剂A   试剂a5
  实施例18           实施例6   0.969
  试剂A   试剂a6
  实施例19           实施例7   0.808
  试剂A   试剂a7
  实施例20           实施例8   0.787
  试剂A   试剂a8
  实施例21           实施例9   0.833
  试剂A   试剂a9
  实施例22           实施例10   0.838
  试剂A   试剂a10
  实施例23           实施例11   0.957
  试剂A   试剂a11
  实施例24           实施例12   0.888
  试剂A   试剂a12
根据实施例13～24和对照例2的比较，得知采用了化合物A(特别是乙烯胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺或烷基丙烯二胺衍生物)的试剂盒中，可以得到与用DCM法进行的测定具有有良好的相关系数。
[化合物A和化合物B(聚合阴离子)合并使用的实例]
制备由以下成分组成的第一试剂(试剂B)。
实施例25
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                       1.0g/L
第二试剂(试剂a2)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
BLAUNON SAP3010                      0.5g/L
实施例26
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a5)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0g/L
第二试剂(试剂a5)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
C16EO30PO20                           0.5g/L
实施例27
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a7)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0g/L
第二试剂(试剂a7)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
(Bisnol)ビスノ-ルSK                   0.3g/L
实施例28
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a9)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                            10mmol/L
EMSE                                    0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                          1.0g/L
第二试剂(试剂a9)
HEPES(pH7.0)                            10mmol/L
4-氨基安替比林                          0.3g/L
过氧化氢酶                              20kU/L
化学修饰的LPL311                        0.2kU/L
COO321                                  5.0kU/L
ニツコ-ルTAMDS15                        0.1g/L
实施例29
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a13)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                            10mmol/L
EMSE                                    0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                          1.0g/L
第二试剂(试剂a13)
HEPES(pH7.0)                            10mmol/L
4-氨基安替比林                          0.3g/L
过氧化氢酶                              20kU/L
化学修饰的LPL311                        0.2kU/L
COO321                                  5.0kU/L
ユニセ-フA-LM                           0.5g/L
实施例30
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a10)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                       1.0g/L
第二试剂(试剂a10)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
BLAUNON DT03                         0.5g/L
对照例3
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂a)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                       1.0g/L
第二试剂(试剂a)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
实施例31
除用实施例25的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例32
除用实施例26的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例33
除用实施例27的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例34
除用实施例28的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例35
除用实施例29的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例36
除用实施例30的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例4
除用对照例3的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将实施例31～36和对照例4分别的测定与用DCM法的测定的相关系数，表示在第2表中。
[表2]
第2表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例4            对照例2   0.139
  试剂B   试剂a
  实施例31            实施例25   0.990
  试剂B   试剂a2
  实施例32            实施例26   0.989
  试剂B   试剂a5
  实施例33            实施例27   0.927
  试剂B   试剂a7
  实施例34            实施例28   0.871
  试剂B   试剂a9
  实施例35            实施例29   0.855
  试剂B   试剂a13
  实施例36            实施例30   0.898
  试剂B   试剂a19
由第2表可知，采用含有化合物A的试剂盒进行测定时，即使同时加有化合物B(聚合阴离子)，也未见与DCM测定的相关性。从第2表还得知，采用了化合物A(特别是烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺，氧化烷基胺或烷基丙烯二胺衍生物)及化合物B(聚合阴离子)的试剂盒，与DCM法进行的测定具有良好的相关性。另外还得知，比较实施例31和实施例14、实施例32和实施例17、实施例33和实施例19、实施例34和实施例21以及实施例36和实施例22，通过采用化合物A和化合物B(聚合阴离子)，提高了与DCM法测定的相关系数。
[化合物A和化合物B(非离子性胆汁酸衍生物)合并使用的实例]
实施例37
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂b1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
第二试剂(试剂b1)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
BIGCHAP                              3.0g/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
C16EO30PO20                          0.24g/L
对照例5
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂b)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                        10mmol/L
EMSE                                0.3g/L
第二试剂(试剂b)
HEPES(pH7.0)                        10mmol/L
4-氨基安替比林                      0.3g/L
过氧化氢酶                          20kU/L
BIGCHAP                             3.0g/L
化学修饰的LPL311                    0.2kU/L
COO321                              5.0kU/L
实施例38
除用实施例37的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例6
除用对照例5的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例6和实施例38各自的测定与上述DCM法进行的测定的相关系数，表示在第3表中。
[表3]
第3表
  测定法            测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例6             对照例5   0.976
  试剂A   试剂b
  实施例38            实施例37   0.991
  试剂A   试剂b1
由第3表可见，采用含有化合物B(非离子性胆汁酸衍生物)的试剂盒测定时，通过与化合物A并用，可使其与DCM法测定的相关性更好。另外，比较实施例17与实施例38可知，使烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)与非离子性胆汁酸衍生物(化合物B)共存，可使其与DCM法的测定的相关性更好。
[化合物A和化合物B(阴离子性胆汁酸衍生物)合并使用的实例]
实施例39
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂c1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                            10mmol/L
EMSE                                    0.3g/L
第二试剂(试剂c1)
HEPES(pH7.0)                            10mmol/L
4-氨基安替比林                          0.3g/L
过氧化氢酶                              20kU/L
胆酸钠                                  6.0g/L
化学修饰的LPL311                        0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
C16EO30PO20                           0.2g/L
对照例7
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂c)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂c)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
胆酸钠                                6.0g/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
实施例40
除用实施例39的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例8
除用对照例7的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例6与实施例40各自的测定，与上述DCM法的测定的相关系数，表是在第4表中。
[表4]
第4表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例8             对照例7   0.843
  试剂A   试剂c
  实施例38             实施例39   0.991
  试剂A   试剂c1
由第4表可见，采用含有化合物B(阴离子性胆汁酸衍生物)的试剂盒测定时，通过与化合物A并用，可使其与DCM的相关性更好。另外，比较实施例17与实施例40可知，使烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)与阴离子性胆汁酸衍生物(化合物B)共存，可使其与DCM法测定的相关性更好。
[化合物A和化合物B(两性胆汁酸衍生物)合并使用的实例]
实施例41
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂d1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
第二试剂(试剂d1)
HEPES(pH7.0)                      10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
CHAPS                             6.0g/L
化学修饰的LPL311                          0.2kU/L
COO321                                    5.0kU/L
C16EO30PO20                               0.2g/L
对照例9
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂d)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                              10mmol/L
EMSE                                      0.3g/L
第二试剂(试剂d)
HEPES(pH7.0)                              10mmol/L
4-氨基安替比林                            0.3g/L
过氧化氢酶                                20kU/L
CHAPS                                     6.0g/L
化学修饰的LPL311                          0.2kU/L
COO321                                    5.0kU/L
实施例42
除用实施例41的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例10
除用对照例9的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例10与实施例42各自的测定，与利用上述DCM法测定的褶关系数，表示在表5中。
[表5]
第5表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例10             对照例9   0.988
  试剂A   试剂d
  实施例42            实施例41   0.991
  试剂A   试剂d1
由第5表可见，采用含有化合物B(两性胆汁酸衍生物)的试剂盒测定时，通过与化合物A并用，可使其与DCM法的相关性更好。另外，比较实施例17与实施例42可知，使烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)与两性胆汁酸衍生物(化合物B)共存，可使其与DCM法进行的测定的相关性更好。
[化合物A和两种化合物B(聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物)合并使用的实例]
实施例43
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂c1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                       1.0g/L
第二试剂(试剂c1)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
胆酸钠                            6.0g/L
化学修饰的LPL311                  0.2kU/L
COO321                            5.0kU/L
C16EO30PO20                       0.2g/L
实施例44
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂c2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                    1.0g/L
第二试剂(试剂c2)
HEPES(pH7.0)                      10mmol/L
4-氨基安替比林                    0.3g/L
过氧化氢酶                        20kU/L
胆酸钠                            6.0g/L
化学修饰的LPL311                  0.2kU/L
COO321                            5.0kU/L
ビスノ一ルSK                      0.3g/L
对照例11
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂c)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                      10mmol/L
EMSE                              0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                           1.0g/L
第二试剂(试剂c)
HEPES(pH7.0)                             10mmol/L
4-氨基安替比林                           0.3g/L
过氧化氢酶                               20kU/L
胆酸钠                                   6.0g/L
化学修饰的LPL311                         0.2kU/L
COO321                                   5.0kU/L
实施例45
除用实施例43的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例46
除用实施例44的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例12
除用对照例11的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例12与实施例45和实施例46各自的测定与上述DCM法进行的测定的相关系数，表示在第6表中。
[表6]
第6表
  测定法            测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例12             对照例11   0.839
  试剂A   试剂c
  实施例45             实施例43   0.972
  试剂A   试剂c1
  实施例46             实施例44   0.971
  试剂A   试剂c2
由第6表可见，采用含有聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物(均为化合物B)的试剂盒测定时，通过与化合物A并用，可使其与DCM法的测定的相关性更好。另外，比较实施例17与实施例45，以及实施例19与实施例46可知，使烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)与聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物(2个化合物B)共存，或者使聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐(化合物A)与聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物(2个化合物B)共存，可使其与DCM法进行测定的相关性更好。
[化合物A和2个化合物B(聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物)以及白蛋白合并使用的实例]
实施例47
制备由以下第一试剂(试剂C)和第二试剂(试剂c1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂C)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                         1.0g/L
BSA                                    1.0g/L
第二试剂(试剂c1)
HEPES(pH7.0)                           10mmol/L
4-氨基安替比林                         0.3g/L
过氧化氢酶                             20kU/L
胆酸钠                                 6.0g/L
化学修饰的LPL311                       0.2kU/L
COO321                                 5.0kU/L
C16EO30PO20                            0.2g/L
对照例13
制备由以下第一试剂(试剂C)和第二试剂(试剂c)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂C)
HEPES(pH7.5)                           10mmol/L
EMSE                                   0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                         1.0g/L
BSA                                    1.0g/L
第二试剂(试剂c)
HEPES(pH7.0)                           10mmol/L
4-氨基安替比林                         0.3g/L
过氧化氢酶                             20kU/L
胆酸钠                                 6.0g/L
化学修饰的LPL311                       0.2kU/L
COO321                                 5.0kU/L
实施例48
除用实施例47的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例14
除用对照例13的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例14与实施例48各自的测定与上述DCM法进行测定的相关系数，表示在第7表中。
[表7]
第7表
  测定法            测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例14            对照例13   0.854
  试剂C   试剂c
  实施例48            实施例47   0.993
  试剂C   试剂c1
由第7表可见，采用含有聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物，以及白蛋白(都是化合物B)的试剂盒测定时，通过与化合物A(烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物)并用，可使其与DCM法的相关性更好。另外，比较实施例17与实施例48可知，使烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)与聚合阴离子和阴离子性胆汁酸衍生物(2个化合物B)、白蛋白共存，可使其与DCM法进行的测定的相关性更好。
[化合物A和化合物B(乙二胺四聚氧化烯烃)合并使用的实例]
实施例49
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂e1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
第二试剂(试剂e1)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
アデカプルロニツクTR704              5.0g/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
BLAUNONSAP3010                       0.5g/L
实施例50
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂e2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
第二试剂(试剂e2)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
アデカプルロニツクTR704              5.0g/L
化学修饰的LPL311                     0.2kU/L
COO321                               5.0kU/L
ミグノ-ルPA-30                       0.5g/L
实施例51
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂e3)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂e3)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
アデカプルロニツクTR704               5.0g/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                                5.0kU/L
ユニセ-フA-LY                         0.5g/L
对照例15
制备由以下第一试剂(试剂A)和第二试剂(试剂e)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
第二试剂(试剂e)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
アデカプルロニツクTR704               5.0g/L
化学修饰的LPL311                      0.2kU/L
COO321                           5.0kU/L
实施例52
除用实施例49的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例53
除用实施例50的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例54
除用实施例51的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例16
除用对照例15的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例16、实施例52、实施例53和实施例54各自的测定，与上述DCM法进行的测定的相关系数，表示在第8表。
[表8]
第8表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例16            对照例15   0.922
  试剂A   试剂e
  实施例52            实施例49   0.994
  试剂A   试剂e1
  实施例53            实施例50   0.990
  试剂A   试剂e2
  实施例54            实施例51   0.974
  试剂A   试剂e3
由第8表可见，采用含有乙二胺四聚氧化烯烃(化合物B)的试剂盒测定时，通过与化合物A(烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐或氧化烷基胺)并用，可使其与DCM法的相关性更好。另外，根据比较实施例14与实施例52可知，使乙二胺四聚氧化烯烃与烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)共存，可使其与DCM法进行的测定的相关系数更好。根据比较实施例20与实施例53可知，乙二胺四聚氧化烯烃(化合物B)与聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐(化合物A)共存，与DCM法进行的测定的相关系数得到提高。另外，根据比较实施例53实施例54可知，用氧化烷基胺(化合物A)代替聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐，通过使乙二胺四聚氧化烯烃(化合物B)共存，使其与DCM法进行的测定的相关性更好。
[化合物A和2个化合物B(聚合阴离子和乙二胺四聚氧化烯烃合并使用的实例)
实施例55
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂e1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                             10mmol/L
EMSE                                     0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                           1.0g/L
第二试剂(试剂e1)
HEPES(pH7.0)                             10mmol/L
4-氨基安替比林                           0.3g/L
过氧化氢酶                               20kU/L
アデカプルロニツクTR704                  5.0g/L
化学修饰的LPL311                         0.2kU/L
COO321                                   5.0kU/L
BLAUNON SAP3010                          0.5g/L
实施例56
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂e2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                             10mmol/L
EMSE                                     0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                           1.0g/L
第二试剂(试剂e2)
HEPES(pH7.0)                             10mmol/L
4-氨基安替比林                           0.3g/L
过氧化氢酶                               20kU/L
アデカプルロニツクTR704                  5.0g/L
化学修饰的LPL311                         0.2kU/L
COO321                                   5.0kU/L
ミグノ-ルPA-30                           0.5g/L
实施例57
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂e3)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂A)
HEPES(pH7.5)                              10mmol/L
EMSE                                      0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                            1.0g/L
第二试剂(试剂e3)
HEPES(pH7.0)                              10mmol/L
4-氨基安替比林                            0.3g/L
过氧化氢酶                                20kU/L
アデカプルロニツクTR704                   5.0g/L
化学修饰的LPL311                          0.2kU/L
COO321                                    5.0kU/L
ユニセ-フA-LY                             0.5g/L
实施例58
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂e4)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                               10mmol/L
EMSE                                       0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                             1.0g/L
第二试剂(试剂e4)
HEPES(pH7.0)                               10mmol/L
4-氨基安替比林                             0.3g/L
过氧化氢酶                               20kU/L
アデカプルロニツクTR704                  5.0g/L
化学修饰的LPL311                         0.2kU/L
COO321                                   5.0kU/L
ビスノ-ルSK                              0.3g/L
实施例59
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂e5)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂B)
HEPES(pH7.5)                             10mmol/L
EMSE                                     0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                           1.0g/L
第二试剂(试剂e5)
HEPES(pH7.0)                             10mmol/L
4-氨基安替比林                           0.3g/L
过氧化氢酶                               20kU/L
アデカプルロニツクTR704                  5.0g/L
化学修饰的LPL311                         0.2kU/L
COO321                                   5.0kU/L
ナイミツドMT-215                         0.3g/L
对照例17
制备由以下第一试剂(试剂B)和第二试剂(试剂e)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试B)
HEPES(pH7.5)                             10mmol/L
EMSE                                     0.3g/L
硫酸葡聚糖钠盐                      1.0g/L
第二试剂(试剂e)
HEPES(pH7.0)                        10mmol/L
4-氨基安替比林                      0.3g/L
过氧化氢酶                          20kU/L
アデカプルロニツクTR704             5.0g/L
化学修饰的LPL311                    0.2kU/L
COO321                              5.0kU/L
实施例60
除用实施例55的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例61
除用实施例56的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例62
除用实施例57的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例63
除用实施例58的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例64
除用实施例59的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例18
除用对照例17的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例18与实施例60～64各自的测定，与上述DCM法进行的测定的相关系数表示在第9表中。
[表9]
第9表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例18            对照例17   0.965
  试剂B   试剂e
  实施例60            实施例55   0.991
  试剂B   试剂e1
  实施例61            实施例56   0.991
  试剂B   试剂e2
  对照例62            对照例57   0.982
  试剂B   试剂e3
  实施例63            实施例58   0.997
  试剂B   试剂e3
  实施例64            实施例59   0.996
  试剂B   试剂e3
由第9表可见，采用含有聚合阴离子和乙二胺四聚氧化烯烃(均为化合物B)的试剂盒测定时，通过与化合物A(烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、氧化烷基胺、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐或聚氧化乙烯酸酰胺)并用，使其与DCM法的相关性更好。另外，根据比较实施例14与实施例60可知，使聚合阴离子及乙二胺四聚氧化烯烃2个化合物B)与烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物(化合物A)共存，使其与DCM法进行的测定的相关性更好。根据比较实施例20与实施例61可知，使聚合阴离子及乙二胺四聚氧化烯烃(2个化合物B)与聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐(化合物A)共存，使其与DCM法进行的测定的相关性更好。根据比较实施例61和实施例62可知，即使是用氧化烷基胺代替化合物A聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐，也使其与DCM法进行的测定的相关性更好。
再根据比较实施例19和实施例63可知，用聚合阴离子和乙二胺四聚氧化烯烃(2个化合物B)与聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐(化合物A)共存，使其与DCM法进行的测定的相关性更好。另外，根据比较实施例63和实施例64可知，用聚氧化乙烯酸酰胺代替化合物A聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐时，也其使与DCM法进行的测定的相关性更好。
[化合物A、3个化合物B(聚合阴离子、聚氧化乙烯烷基胺和胆汁酸衍生物)及白蛋白合并使用的实例]
实施例65
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂f1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸钠                                5.0/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0/L
BSA                                         2.0/L
第二试剂(试剂f1)
HEPES(pH7.0)                                10mmol/L
4-氨基安替比林                              0.3g/L
过氧化氢酶                                  20kU/L
ナイミ-ンL207                               0.3g/L
胆酸钠                                      1.5g/L
化学修饰的LPL311                            0.1kU/L
COO321                                      5.0kU/L
BLAUNON SAP3004                             0.15g/L
实施例66
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂f2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                                10mmol/L
EMSE                                        0.3g/L
硫酸钠                                      5.0/L
硫酸葡聚糖钠盐                              1.0/L
BSA                                         2.0/L
第二试剂(试剂f2)
HEPES(pH7.0)                                10mmol/L
4-氨基安替比林                              0.3g/L
过氧化氢酶                                  20kU/L
ナイミ-ンL207                               0.3g/L
胆酸钠                                      1.5g/L
化学修饰的LPL311                            0.1kU/L
COO321                                      5.0kU/L
C16EO30PO10                                 0.3g/L
对照例19
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂f)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸钠                                5.0/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0/L
BSA                                   2.0/L
第二试剂(试剂f)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
ナイミ-ンL207                         0.3g/L
胆酸钠                                1.5g/L
化学修饰的LPL311                      0.1kU/L
COO321                                5.0kU/L
实施例67
除用实施例65的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例68
除用实施例66的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例20
除用对照例19的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例20、实施例67和68各自的测定，与上述DCM法进行的测定的相关系数，表示在第10表中。
[表10]
第10表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例20           对照例19   0.984
  试剂D   试剂f
  实施例67           实施例65   0.996
  试剂D   试剂f1
  实施例68           实施例66   0.995
  试剂D   试剂f2
由第10表可见，采用含有聚合阴离子、聚氧化乙烯烷基胺和胆汁酸衍生物(均为化合物B)以及白蛋白的试剂盒测定时，通过使其与化合物A(烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物)共存，使其与DCM法的相关性更好。
[化合物A和3个化合物B(聚合阴离子、聚氧化乙烯烷基胺和乙二胺四聚氧化烯烃)及白蛋白合并使用的实例]
实施例69
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂g1)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸钠                                5.0g/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0g/L
BSA                                   2.0g/L
第二试剂(试剂g1)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
ナイミ-ンL207                         0.3g/L
乙二胺PO52EO60                        1.0g/L
化学修饰的LPL311                      0.1kU/L
COO321                                5.0kU/L
BLAUNON SAP3004                       0.05g/L
实施例70
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂g2)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸钠                                5.0g/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0g/L
BSA                                   2.0g/L
第二试剂(试剂g2)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
ナイミ-ンL207                        0.3g/L
乙二胺PO52EO60                       1.0g/L
化学修饰的LPL311                     0.1kU/L
COO321                               5.0kU/L
C16EO30PO10                          0.2g/L
实施例71
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂g3)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                         10mmol/L
EMSE                                 0.3g/L
硫酸钠                               5.0g/L
硫酸葡聚糖钠盐                       1.0g/L
BSA                                  2.0g/L
第二试剂(试剂g3)
HEPES(pH7.0)                         10mmol/L
4-氨基安替比林                       0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
ナイミ-ンL207                        0.3g/L
乙二胺PO52EO60                       1.0g/L
化学修饰的LPL311                     0.1kU/L
COO321                               5.0kU/L
ナイミツドMT-215                     0.06g/L
实施例72
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂g4)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸钠                                5.0g/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0g/L
BSA                                   2.0g/L
第二试剂(试剂g4)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                            20kU/L
ナイミ-ンL207                         0.3g/L
乙二胺PO52EO60                        1.0g/L
化学修饰的LPL311                      0.1kU/L
COO321                                5.0kU/L
ビスノ-ルSK                           0.1g/L
对照例21
制备由以下第一试剂(试剂D)和第二试剂(试剂g)组成的HDL胆甾醇测定用试剂盒。
第一试剂(试剂D)
HEPES(pH7.5)                          10mmol/L
EMSE                                  0.3g/L
硫酸钠                                5.0g/L
硫酸葡聚糖钠盐                        1.0g/L
BSA                                   2.0g/L
第二试剂(试剂g)
HEPES(pH7.0)                          10mmol/L
4-氨基安替比林                        0.3g/L
过氧化氢酶                           20kU/L
ナイミ-ンL207                        0.3g/L
乙二胺PO52EO60                       1.0g/L
化学修饰的LPL311                     0.1kU/L
COO321                               5.0kU/L
实施例73
除用实施例69的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例74
除用实施例70的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例75
除用实施例71的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
实施例76
除用实施例72的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
对照例22
除用对照例21的试剂盒代替实施例1的试剂盒外，用与实施例13相同的测定方法，在日立7170型自动分析装置上，测定人血清30检测样品中的HDL胆甾醇。
将对照例22与实施例73～76各自的测定，与上述DCM法进行的测定的相关系数，表示在第11表中。
[表11]
第11表
  测定法           测定试剂盒   相关系数
  第一试剂   第二试剂
  对照例22            对照例21   0.972
  试剂D   试剂g
  实施例73            实施例69   0.998
  试剂D   试剂g1
  实施例74            实施例70   0.997
  试剂D   试剂g2
  对照例75            对照例71   0.999
  试剂D   试剂g3
  实施例76            实施例72   0.998
  试剂D   试剂g4
由第11表可见，采用含有聚合阴离子、聚氧化乙烯烷基胺和胆汁酸衍生物(均为化合物B)以及白蛋白的试剂盒测定时，通过与化合物A(烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐或聚氧化乙烯酸酰胺)共存，使其与DCM法的相关性更好。
工业实用性
根据本发明，提供了对诊断动脉硬化等疾病有用的简便而准确的HDL胆甾醇测定方法、测定试剂及测定用试剂盒。

Claims (19)

1.一种测定检测样品内高密度脂蛋白中胆甾醇的方法，其中，包含：使检测样品与(i)胆甾醇酯水解酶和胆甾醇氧化酶，或(ii)胆甾醇酯水解酶、氧化型辅酶及胆甾醇脱氢酶，在含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少的一种物质的水溶性介质中，进行反应生成过氧化氢或还原型辅酶；以及测定所生成的过氧化氢或还原型辅酶。
2.权利要求1所述的方法，其中，水溶性介质还包含选自：聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质。
3.权利要求2所述的方法，其中，聚合阴离子是硫酸葡聚糖或其盐。
4.权利要求2或3所述的方法，其中，胆汁酸衍生物是选自：胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅脱氧胆酸或其盐、熊脱氧胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-氧代鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱氧胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐、通式(I)
[化11]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-SO3 -    (I)
[此通式中，R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物和通式(II)
[化12]
Figure A2005800049910003C1
[X表示氢原子或羟基，R3和R4可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的烷酰基]表示的化合物构成的族中的至少一种物质。
5.权利要求2～4任一项所述的方法，其中，水性介质还包括白蛋白。
6.测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂，其特征在于，含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，胆甾醇酯水解酶，胆甾醇氧化酶及过氧化氢测定用试剂。
7.测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂，其特征在于，含有选自烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基聚氧化丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，胆甾醇酯水解酶，胆甾醇脱氢酶及氧化型辅酶。
8.权利要求7所述的试剂，其中，还含有测定还原型辅酶的试剂。
9.权利要求6～8任一项所述的试剂，其中，还含有选自聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质。
10.权利要求9所述的试剂，其中，聚合阴离子是硫酸葡聚糖或其盐。
11.权利要求9或10所述的试剂，其中，胆汁酸衍生物是选自：胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅脱氧胆酸或其盐、熊脱氧胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-氧代鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱氧胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐、通式(I)
[化13]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-SO3 -     (I)
[此通式中，R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物和通式(II)
[化14]
Figure A2005800049910004C1
[X表示氢原子或羟基，R3和R4可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的烷酰基]表示的化合物构成的族中的至少的一种物质。
12.权利要求9～11任一项所述的试剂，其中，还含有白蛋白。
13.测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂盒，其特征在于，含有第一试剂及第二试剂，在第一试剂及第二试剂中含有测定过氧化氢的试剂，在第二试剂中含有胆甾醇氧化酶，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺、氧化烷基胺和烷基聚氧丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质以及胆甾醇酯水解酶。
14.测定高密度脂蛋白中胆甾醇的试剂盒，其特征在于，含有第一试剂及第二试剂，在第一试剂中含有氧化型辅酶，在第二试剂中含有胆甾醇脱氢酶，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中含有选自：烷基胺聚氧化乙烯聚氧化丙烯缩合物、聚氧化乙烯烷基胺硫酸盐、聚氧化乙烯苄基烷基季铵盐、聚氧化乙烯酸酰胺氧化烷基胺和烷基氧化丙烯二胺衍生物构成的族中的至少一种物质，以及胆甾醇酯水解酶。
15.权利要求14所述的试剂盒，其中，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中还含有还原型辅酶测定用试剂。
16.权利要求13～15任一项所述的试剂盒，其中，在第一试剂、第二试剂二者中或其中之一中还含有选自：聚合阴离子、胆汁酸衍生物、乙二胺四聚氧化烯烃、聚氧化乙烯烷基胺和聚氧化乙烯链烯基胺构成的族中的至少一种物质。
17.权利要求16所述的试剂盒，其中，聚合阴离子是硫酸葡聚糖或其盐。
18.权利要求16或17所述的试剂盒，其中，胆汁酸衍生物是选自：胆酸或其盐、牛磺胆酸或其盐、甘氨胆酸或其盐、石胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐、鹅脱氧胆酸或其盐、熊脱氧胆酸或其盐、7-氧代石胆酸或其盐、12-氧代石胆酸或其盐、12-氧代鹅脱氧胆酸或其盐、7-氧代脱氧胆酸或其盐、猪胆酸或其盐、猪脱氧胆酸或其盐、脱氢胆酸或其盐、通式(I)
[化15]
R1-CH2-CH(R2)-CH2-SO3 -     (I)
[R1表示3-(3-胆丙酰胺基)二甲氨基，R2表示氢原子或羟基]表示的化合物和通式(II)
[化16]
Figure A2005800049910006C1
[X表示氢原子或羟基，R3和R4可以相同或相异，表示取代或未取代的烷基，或取代或未取代的烷酰基]表示的化合物构成的族中的至少一种物质。
19.权利要求16～18任一项所述的试剂盒，其中，在第一试剂和第二试剂二者中或其中之一中还含有白蛋白。
CNA200580004991XA 2004-04-15 2005-04-15 高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法 Pending CN1918303A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP119927/2004 2004-04-15
JP2004119927 2004-04-15

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1918303A true CN1918303A (zh) 2007-02-21

Family

ID=35150013

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA200580004991XA Pending CN1918303A (zh) 2004-04-15 2005-04-15 高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法

Country Status (3)

Country Link
JP (1) JP4796489B2 (zh)
CN (1) CN1918303A (zh)
WO (1) WO2005100591A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103080239A (zh) * 2010-08-11 2013-05-01 协和梅迪克斯株式会社 含有无色型色原体的水溶液的保存方法
CN104603282A (zh) * 2012-08-31 2015-05-06 协和梅迪克斯株式会社 高密度脂蛋白中的胆固醇的测定方法
CN112578131A (zh) * 2019-09-30 2021-03-30 希森美康株式会社 测定脂蛋白的吸收能力的方法及测定用试剂、以及测定脂蛋白的吸收能力中的稳定化试剂

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101833350B1 (ko) * 2010-07-23 2018-02-28 덴카 세이켄 가부시키가이샤 고밀도 리포단백질3 중의 콜레스테롤의 정량 방법
DK2597158T3 (en) * 2010-07-23 2017-05-22 Denka Seiken Kk PROCEDURE FOR QUANTIFYING THE QUANTITY OF CHOLESTEROL IN HIGH DENSITY LIPOPROTEIN 3
JP6047778B2 (ja) * 2012-01-12 2016-12-21 株式会社シノテスト 測定対象物質の測定方法及び測定試薬、並びにビリルビンに由来する影響の回避方法
CA2921825C (en) 2013-08-30 2021-07-27 Sekisui Medical Co., Ltd. Method for measuring cholesterol in high-density lipoprotein, and reagent for use in said method
JP2017000152A (ja) * 2016-07-14 2017-01-05 株式会社シノテスト 測定対象物質の測定方法、測定対象物質の測定試薬、及びビリルビンに由来する影響の回避方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2653755B2 (ja) * 1994-03-08 1997-09-17 協和メデックス株式会社 高密度リポ蛋白中のコレステロールの定量法
JPH08116996A (ja) * 1994-10-26 1996-05-14 Toyobo Co Ltd 血清または血漿中のｈｄｌ−コレステロールを測定する方法
JP2799835B2 (ja) * 1995-01-31 1998-09-21 第一化学薬品株式会社 コレステロールの定量方法
JP3614514B2 (ja) * 1995-06-21 2005-01-26 国際試薬株式会社 高比重リポ蛋白分画中のコレステロールの定量方法及び定量用試薬キット
JPH09285298A (ja) * 1996-04-22 1997-11-04 Iatron Lab Inc Ｈｄｌ−コレステロールの測定方法及び測定用試薬
WO1997040376A1 (fr) * 1996-04-22 1997-10-30 Iatron Laboratories, Inc. Procede specifique de dosage du cholesterol des lphd et composition utilisee pour le dosage.
JPH1156395A (ja) * 1997-08-27 1999-03-02 Dai Ichi Pure Chem Co Ltd コレステロールの定量法
JP3767232B2 (ja) * 1998-06-08 2006-04-19 和光純薬工業株式会社 Ｌｄｌ−コレステロールの測定法
WO2000052480A1 (fr) * 1999-03-01 2000-09-08 International Reagents Corporation Dosage de composant d'un echantillon biologique
JP4708531B2 (ja) * 2000-06-07 2011-06-22 シスメックス株式会社 Ｈｄｌ亜画分中のコレステロールの測定法
JP3686326B2 (ja) * 2000-11-08 2005-08-24 アークレイ株式会社 高密度リポタンパク質（ｈｄｌ）コレステロール測定用試験片

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103080239A (zh) * 2010-08-11 2013-05-01 协和梅迪克斯株式会社 含有无色型色原体的水溶液的保存方法
CN103080239B (zh) * 2010-08-11 2015-03-25 协和梅迪克斯株式会社 含有无色型色原体的水溶液的保存方法
CN104603282A (zh) * 2012-08-31 2015-05-06 协和梅迪克斯株式会社 高密度脂蛋白中的胆固醇的测定方法
CN112578131A (zh) * 2019-09-30 2021-03-30 希森美康株式会社 测定脂蛋白的吸收能力的方法及测定用试剂、以及测定脂蛋白的吸收能力中的稳定化试剂

Also Published As

Publication number Publication date
JP4796489B2 (ja) 2011-10-19
JPWO2005100591A1 (ja) 2008-03-06
WO2005100591A1 (ja) 2005-10-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1694965A (zh) 高密度脂蛋白中的胆固醇的测定方法以及试剂
CN1918303A (zh) 高密度脂蛋白中胆甾醇的测定方法
CN100343389C (zh) 基因突变检出法
CN1200113C (zh) 脂蛋白中胆固醇的分别定量法和定量用试剂
CN1501981A (zh) 测定糖化蛋白质的组合物
CN1914333A (zh) 极低密度脂蛋白残粒(vldl残粒)中的胆固醇的定量方法、试剂及试剂盒
CN1198942C (zh) 采用氧化还原反应的测定方法
CN1687454A (zh) 基于环介导的等温扩增技术的血液病毒核酸筛查方法
CN1219972A (zh) 短串联重复基因座的多重扩增
CN1505684A (zh) 用于野生生物鉴定的通用引物
CN1764729A (zh) 使用嵌入核酸检测核酸中甲基化改变的分析
CN1694964A (zh) 高密度脂蛋白中的胆固醇的检测方法及试剂
CN1529711A (zh) 检测内毒素的方法和试剂
CN1898395A (zh) 基于引物的核酸的多重扩增的方法和试剂盒
CN1948503A (zh) 一种人乳头瘤病毒检测分型方法及试剂盒
CN1961080A (zh) 基因毒性检测
CN1777684A (zh) 用于多元结合分析的寡核苷酸对
CN1646705A (zh) 检测和分型人乳头瘤病毒的扩增－杂交方法
CN1612932A (zh) 核酸检测方法及其系统
CN1748028A (zh) 用于变异基因检测的信号扩增方法
CN101045945A (zh) 检测多种常见细菌病原体的基因芯片、制备方法、试剂盒
CN1222615C (zh) 根据人呼吸道胰蛋白酶基因多态性分析体质
CN101067149A (zh) Cyp3a检测芯片及其应用
CN1877328A (zh) 用23s核糖体基因探针阵列检测水生动物病原菌的方法
CN1616676A (zh) 稳定的杂交体

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication