背景技术:
胸腺肽α1(Thymosinα1)是胸腺素主要的生物活性成分,为人体内重要的免疫调节物质。研究表明,胸腺肽α1促进骨髓干细胞发育分化为原淋巴细胞及前淋巴细胞;诱导T淋巴细胞分化与成熟,使已成熟的T细胞进一步分化为几个不同的亚群,如杀伤细胞、记忆细胞、效应细胞、辅助T淋巴细胞等,并产生各种可溶性介质;增强淋巴细胞对有丝分裂素的反应,并可增加淋巴组织的蛋白质和核酸的合成;增加r-IFN、a-IFN、IL-2、IL-3和淋巴毒素的生成,增强抗病毒和抗肿瘤的免疫反应;抑制自身免疫反应;恢复抑制性T细胞的功能。
目前胸腺肽α1已被广泛应用于临床,治疗多种疾病,如用于慢性乙型肝炎(HBV)的治疗;用于丙型肝炎(HCV)、肝细胞癌、恶性黑色素瘤的治疗;用于治疗感染性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等的治疗。
目前临床使用的为胸腺肽α1制剂为冻干粉针剂、每瓶含胸腺肽α11.6毫克,使用前用1ml注射用水溶解后立即皮下注射,冻干粉针的生产工艺复杂、成本较高,使用也不方便。
与大多数的肽类药物一样,胸腺肽α1在普通的水溶液中的稳定性很差,本发明所提供的胸腺肽α1注射液,稳定性良好,临床使用方便,在国内外尚无任何报道。
发明内容:
本发明的目的克服现有技术存在的不足,提供一种胸腺肽α1注射液,采用以下方案来实现:
一种胸腺肽α1注射液,它包含约0.02%~约1.0%(W/V)胸腺肽α1、约0.02%~约5.0%(W/V)缓冲剂、约0.5%~约5.0%(W/V)等等渗调节剂、约0.5%~约5.0%(W/V)稳定剂,所述注射液的pH为5.0~7.5。
所述注射液包含约0.02%~约1.0%(W/V)胸腺肽α1,优选浓度为含约0.02%~约0.2%(W/V)胸腺肽α1。
所述注射液包含约0.02%~约5.0%(W/V)缓冲剂,所述的缓冲剂选自磷酸氢二钠、氢氧化钠、碳酸钠和氨水,优选缓冲剂为磷酸氢二钠,所述的缓冲剂可单独使用或联合使用。
所述注射液包含约0.5%~约5.0%(W/V)等渗调节剂,所述的等渗调节剂选自选自碳水化合物、多元醇;其中碳水化合物选自半乳糖、阿拉伯糖、乳糖;多元醇自甘露醇、山梨醇、肌醇、甘油、木糖醇和聚乙二醇;优选等渗调节剂为甘露醇,所述的等渗调节剂可单独使用或联合使用。
所述注射液包含约0.1%~约5.0%(W/V)稳定剂,所述的稳定剂选自甘氨酸、谷氨酸、醋酸铵,优选稳定剂为甘氨酸,所述的稳定剂可单独使用和或联合使用。
所述注射液包含约0.005%~约1.0%(W/V)抗微生物防腐剂,所述的抗微生物防腐剂选自间甲酚、苄醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯和酚,优选抗微生物防腐剂为间甲酚,所述的抗微生物防腐剂可单独使用或联合使用。
所述注射液的pH为5.0~7.5,优选pH为6.5~7.5。
所述胸腺肽α1注射液,其中所述的等渗调节剂可用0.9%的盐水代替。
本发明涉及一种胸腺肽α1注射液的制备方法,其中所述的制备方法包括以下步骤:
(1)按胸腺肽α1注射液配方的配比量称取腺肽α1、药用辅料,混匀。
(2)加80%配比量的注射用水溶解,
(3)用缓冲剂溶液调至pH为5.0~7.5,
(4)补加注射用水至全量,
(5)药液用0.22μm滤膜进行除菌过滤,
(6)测定中间体含量、pH值和澄明度,合格后灌封于西林瓶中,即得。
本发明确定了胸腺肽α1注射液稳定的关键条件,即合理的配方、pH值范围、制备工艺,有利于胸腺肽α1注射液质量的控制,从而制定科学的生产规程,使胸腺肽α1注射液大批量工业化生产成为可能。
具体实施方法
实施例一:配方1
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 1.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为6.5,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例二:配方2
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 1.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例三:配方3
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 1.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100m1
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.5,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例四:配方4
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例五:配方5
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 3.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例六:配方6
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
谷氨酸 1.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例七:配方7
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
谷氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例八:配方8
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
谷氨酸 3.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例九:配方9
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
醋酸铵 0.2g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十:配方10
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
醋酸铵 0.4g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十一:配方11
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
醋酸铵 0.6g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十二:配方12
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 2.0g
醋酸铵 0.4g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十三:配方13
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
谷氨酸 2.0g
醋酸铵 0.4g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十四:配方14
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 1.0g
谷氨酸 1.0g
间甲酚 0.1g
磷酸二氢钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用磷酸二氢钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十五:配方15
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
氢氧化钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氢氧化钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十六:配方16
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
谷氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
氢氧化钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氢氧化钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十七:配方17
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
醋酸铵 0.4g
间甲酚 0.1g
氢氧化钠 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氢氧化钠缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十八:配方18
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
氨水 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氨水缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十九:配方19
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
谷氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
氨水 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氨水缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例二十:配方20
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
醋酸铵 0.4g
间甲酚 0.1g
氨水 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氨水缓冲剂溶液调至pH为7.0,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例二十一:配方21
胸腺肽α1 0.16g
甘露醇 1.0g
甘氨酸 2.0g
间甲酚 0.1g
氨水 适量
注射用水加至 100ml
分装为 100瓶
取胸腺肽α1和辅料,加80ml注射用水,用氨水缓冲剂溶液调至pH为6.5,稀释至100ml,除菌过滤,每瓶分装1.0ml,经加塞、压塞、加盖、扎盖,即得。
实施例十八:注射液稳定性考察
测定方法:采用国家药品食品监督管理局颁发的胸腺肽α1质量标准中的有关物质测定方法。
放置条件:2~8℃。
配方编号 |
注射液中胸腺肽α1的纯度(%) |
0个月 |
1个月 |
6个月 |
12个月 |
配方1 |
98.5% |
98.2 |
97.8 |
97.0 |
配方2 |
98.4% |
98.3 |
97.9 |
96.8 |
配方3 |
98.5% |
97.9 |
97.2 |
95.5 |
配方4 |
98.4% |
98.4 |
98.3 |
97.9 |
配方5 |
98.4% |
98.3 |
98.4 |
98.0 |
配方6 |
98.5% |
97.9 |
96.2 |
95.2 |
配方7 |
98.4% |
98.0 |
96.7 |
95.4 |
配方8 |
98.5% |
98.1 |
97.8 |
95.1 |
配方9 |
98.5% |
98.0 |
97.0 |
95.3 |
配方10 |
98.5% |
98.3 |
97.4 |
96.0 |
配方11 |
98.4% |
98.2 |
97.7 |
96.3 |
配方12 |
98.5% |
98.4 |
98.1 |
97.9 |
配方13 |
98.5% |
98.3 |
97.8 |
97.1 |
配方14 |
98.5% |
98.3 |
97.4 |
96.8 |
配方15 |
98.3% |
98.1 |
97.0 |
96.3 |
配方16 |
98.2% |
97.9 |
96.5 |
95.7 |
配方1 7 |
98.3% |
97.8 |
96.2 |
95.1 |
配方18 |
98.5% |
98.3 |
97.5 |
96.3 |
配方19 |
98.3% |
98.0 |
97.1 |
96.0 |
配方20 |
98.4% |
98.1 |
97.3 |
96.5 |
配方21 |
98.4% |
98.3 |
97.8 |
97.2 |