发明内容
本发明的目的是克服以上现有技术的不足,提供一种高效、速效的茵栀黄制剂,本发明的另一个目的提供该中药制剂的制备检测方法。
为达到上述目的,我们采用了以下的技术方案:
本发明制剂由下述原料制成:
黄芩苷40-90重量份 金银花提取物(以绿原酸计)6-20重量份
栀子提取物5-15重量份 茵陈提取物12-30重量份。
制成本发明制剂的原料最佳比例为:
黄芩苷66.7重量份 金银花提取物(以绿原酸计)13.3重量份
栀子提取物10.7重量份 茵陈提取物20重量份。
为了使本品制成我们所需的滴丸剂,在制剂过程中需加入各种所需辅料,辅料中我们主要选择聚乙二醇其中提取物与辅料聚乙二醇重量比为1∶1-1∶10;两者比例优选为:1∶2-1∶5;其中聚乙二醇为聚乙二醇6000或与聚乙二醇4000二者混合物,优选为聚乙二醇4000和聚乙二醇60001∶1-1∶5的混合物;除聚乙二醇外还可加入吐温、软磷脂、甘油明胶等辅料。每粒滴丸重:30-100mg。
本发明滴丸剂中主要有效成分含量为:
每克滴丸中含有:黄芩苷10-200mg,
每克滴丸中含有:绿原酸4-25mg,
每克滴丸中含有:栀子苷0.5-5mg。
上述有效成分在本发明滴丸中的测定方法为:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml含黄芩苷0.5-5mg的溶液;
供试品溶液的制备 取本品1-10克,精密称定,置50ml量瓶中,加40-70%甲醇10-50ml,在热水中加热使溶解,时时振摇,超声处理10-30分钟,放冷至室温,加40-70%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液1-5ml,置10-50ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.05-2mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品0.2-1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加40-70%的甲醇20-50ml,称定重量,超声10-30min,放冷,再称定重量,用40-70%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量加入棕色量瓶,即得供试品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水溶液为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含0.2-5mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约1-5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加30-70%的甲醇5-50ml,在热水中加热,时时振摇,待溶解,超声处理10-30分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置2-10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
本发明的制备方法为:
将处方量的金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷和茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为70-90℃条件下,以60-150滴/分钟的滴速滴入液体石蜡或二甲基硅油中,除去冷却液,选丸,即得。
金银花提取物的制备方法:取金银花,用30%乙醇回流二次,每次1小时,合并提取液,滤过,滤液回收乙醇至每1ml含生药2g,加乙醇使含醇量达75%,静置24小时,滤过,滤液回收乙醇至每1ml含生药4g,加水至8倍量,冷藏48小时,滤过,滤液浓缩至稠膏状,真空干燥,即得;
栀子提取物的制备方法:取栀子,粉碎成粗粉,加水煎煮三次,第一、二次1小时,第三次0.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至每1ml含生药1g,加乙醇使含醇量达70%,冷藏24小时,滤过,滤液回收乙醇至每1ml含生药3g,再加乙醇使含醇量达85%,冷藏24小时,滤过,滤液回收乙醇至每1ml含水量生药5g,加水约5倍量,冷藏48小时,滤过,滤液浓缩至稠膏状,真空干燥,即得;
黄芩苷的制备方法:黄芩碎断,加水煎煮二次,每次1小时,合并滤液,滤液用盐酸(2mol/L)调PH值至1.0-2.0,在80℃保温30min,静置24h,滤过,沉淀加8倍量水,搅拌,用40%氢氧化钠溶液调PH值至7.0,并加等量乙醇,搅拌使溶解,滤过,滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0,60℃保温30min,静置12h,滤过,沉淀用乙醇洗至PH至4.0,加10倍量水,搅拌,用40%氢氧化钠溶液调PH至6.0,加入0.5%活性炭,充分搅拌,50℃保温30min,加入1倍量乙醇搅拌均匀,立即过滤,滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0,60℃保温30min,静置12h,滤过,沉淀用少量乙醇洗涤后,于60℃以下干燥,即得。
本发明药物在基质中的分散状态是分子状态或胶体状态或微粉状态,因而增加了药物的溶出和吸收速度;且设备简单,操作方便,生产工序少,周期短,自动化程度高,生产效率高,成本低;本发明药物贮存过程中质量稳定,有效成分变化小,无颜色变化;治疗肝炎于原剂型(口服液)相比具有更好的疗效。为表明本发明药物对肝炎的治疗作用和稳定性比原剂型有显著的进步,我们做了大量的实验研究,下面实验例用于进一步说明本发明。
本发明药物稳定性考察:
目的:观察本发明制剂与茵栀黄口服液在储藏期间有效成分的变化。
1.1材料与方法
1.1.1仪器:高效液相色谱;P2A5型液体比重天平(上海第二天平厂);PHS 25型酸度计(上海雷磁仪器厂)、小烧杯、镊子等。
1.1.2药物:本厂留样室提供,茵栀黄口服液:批号030422 1,030422 3,031007 1,031007 2茵栀黄滴丸:批号030422 1,030422 3,031007 1,031007 2
1.1.3方法:方法采用自然留样观察法,每隔3个月分别进行性状观察和澄清度检查;每隔6个月分别进行PH、含量检查;连续考察3年。
1.2实验结果
1.2.1 PH值测定试验结果见表1。
表1 茵栀黄口服液不同放置时间pH测定(
x±SD)
批号 1d 6个月 12个月 18个月 24个月 30个月 36个月
030422 1 6.6 6.5 6.5 6.3 6.2 6.0 5.9
030422 3 6.4 6.4 6.3 6.3 6.2 6.0 5.8
031007 1 6.5 6.3 6.2 6.2 6.0 5.9 5.6
031007 2 6.3 6.3 6.2 6.1 6.1 5.9 5.8
由表1可见,茵栀黄口服液在储藏期间PH值变化较大,高压灭菌时PH值变化更严重,本发明制剂由于是固体制剂,PH值变化不大。
1.2.2含量测定试验结果见表2、表3。
表2 不同放置时间样品绿原酸的含量测定
样品 批号 1d 6个月 12个月 18个月 24个月 30个月 36个月
030422 1 11.92 11.81 11.70 11.63 11.54 11.45 11.23
口 030422 3 11.72 11.68 11.58 11.50 11.44 11.20 11.12
服 031007 1 11.96 11.80 11.60 11.45 11.29 11.23 11.18
液 031007 2 11.89 11.82 11.46 11.30 11.18 11.06 10.85
030422 1 11.80 11.72 11.74 11.58 11.40 11.26 11.02
本 030422 1 11.67 11.67 11.66 11.67 11.66 11.66 11.65
发 030422 3 11.84 11.84 11.84 11.82 11.84 11.83 11.81
明 031007 1 11.88 11.88 11.88 11.87 11.86 11.83 11.82
制 031007 2 11.89 11.90 11.88 11.88 11.88 11.86 11.84
剂 030422 1 11.74 11.74 11.73 11.74 11.74 11.70 11.70
030422 1 11.90 11.90 11.89 11.88 11.88 11.86 11.86
由表3可知,茵栀黄口服液在储藏期间绿原酸变化较大,在36个月时绿原酸含量降低接近质量标准值,有效期只能为三年。本发明制剂在储藏期间绿原酸的含量变化不大,表明本发明制剂的有效期在三年期以上。
表3 不同放置时间样品黄芩苷的含量测定
样品 批号 1d 6个月 12个月 18个月 24个月 30个月 36个月
030422 1 23.00 22.95 22.94 22.90 22.88 22.84 22.73
口 030422 3 22.67 22.62 22.54 22.46 22.38 22.30 22.28
服 031007 1 22.89 22.77 22.66 22.56 22.50 22.46 22.39
液 031007 2 22.77 22.68 22.65 22.58 22.50 22.46 22.40
030422 1 23.38 23.30 22.27 22.26 22.27 22.15 22.10
本 030422 1 22.81 22.81 22.81 22.79 22.79 22.78 22.78
发 030422 3 22.86 22.85 22.86 22.84 22.84 22.82 22.81
明 0310071 23.03 23.01 22.96 22.94 22.92 22.90 22.89
制 0310072 22.96 22.89 22.88 22.88 22.88 22.87 22.88
剂 0304221 22.85 22.86 22.85 22.84 22.84 22.83 22.82
0304221 22.87 22.88 22.87 22.86 22.86 22.85 22.85
由表2、表3可知,茵栀黄口服液在储藏期间绿原酸变化较大,在36个月时绿原酸含量降低接近质量标准值,有效期只能为三年。本发明制剂在储藏期间绿原酸含量变化不大;黄芩苷在两种制剂中变化都不大都能显著高于质量标准值,但在本发明制剂中的稳定性要比原制剂好,黄芩苷含量减小值明显小于原制剂,表明黄芩苷在本发明制剂中稳定性增强。
综上所述,本发明制剂有效成分含量高,稳定性好,有效期长。
本发明制剂保肝退黄的药效学研究
临床研究:1999年10月~2004年5月,我们委托山东省临沂市中医医院采用本发明制剂治疗黄疸型肝炎,效果显著。
病例选择:1990年(上海)全国病毒性肝炎学术会议制定的急性黄疽型甲型肝炎的诊断标准,诊断住院的肝炎患者,其中中医分型以肝、胆湿热为主。
病例分组:配对分组,治疗组60例,其中急性黄疽型病毒性肝炎(简称AIH)43例,慢性活动型病毒性肝炎(简称CAH)17例;男38例,女22例;年龄15-63岁,平均27.43±10.72岁;甲型病毒性肝炎24例,乙型病毒性肝炎21例,甲、乙两型肝炎病毒混合感染者6例,乙与丁两型肝炎病毒混合感染者5例,病毒未明者4例。对照组60例,其中AIH40例,CAH20例;男36例,女24例;年龄13-60岁,平均为29.53±9.63岁;甲型病毒性肝炎20例,乙型病毒性肝炎23例,甲、乙两型肝炎病毒混合感染者8例,乙与丁两型肝炎病毒混合感染者3例,病毒未明者5例。经统计分析,无论是AIH的治疗组与对照组,还是CAH的治疗组与对照组,他们在性别、年龄和病原学上的分布,以及两组患者在住院时的症状、体症发生率和病程、肝功能等情况皆具有可比性。
试验药品:
本发明制剂(茵栀黄滴丸),山东鲁南制药厂实验室提供。每次所服生药量是口服液的2/3。
茵栀黄口服液:北京双鹤高科天然药物有限责任公司生产。
方法:治疗组的患者住院后即给于茵栀黄滴丸治疗,急性患者用药20-30d,慢性患者一月左右,必要时延长用药时间。对照组的患者住院后即给予茵栀黄口服液,用药时间同治疗组。无论是治疗组,还是对照组的用药均在综合性治疗用药的基础上,不使用已证明有确切疗效的退黄和降酶的药物。
观察项目:按统一标准逐周观察患者的症状、体症、肝一胆湿热的症候及肝功能的演变。治疗用药前后各查一次相关的血清病毒标志物与血常规,并观察其毒、副反应。
疗效综合判断标准:
显效:急性自觉症状及巩膜、皮肤黄染消失,肝脏恢复正常大小或缩小,肝区叩压痛消失,肝功能恢复正常;慢性自觉症状消失,巩膜、皮肤黄染明显减退或消失,肝脾肿大缩小或稳定不变,肝功能中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及血清总胆红素(BIL1T)恢复正常。
有效:急性自觉症状好转、巩膜及皮肤黄染明显减退,肝区叩压痛消失,肝功能明显好转(AI_T,AST,BIL1T下降达50%以上)但未降至正常;慢性自觉症状好转或消失,巩膜、皮肤黄染减轻,肿大的肝脾及其它慢性体症稳定不变,肝功能中A工,T,AST,BILIT下降达到30%以上。
无效:未达到上述指标者。
结果
综合的疗效:①AIH治疗组患者的显效的36例(占83.7%),有效的有7例(占16.3%);对照组的显效和有效的例数也分别达到了31例(占77.5%)和9例(占22.5%),两组对比无显著差异(p>0.05)。②CAH治疗组显效的有12例(占70.59%),有效5例(占29.41%);对照组的显效和有效的例数也分别达到了14例(占70%)和6例(占30%)。经统计处理,两组差异不明显(p>0.05)。
症状与体征消失时间的比较:无论是AIH、还是CAH相对应的治疗组和对照组患者的主要症状、体症与中医症候消失时间的比较均无明显差异。
肝功能恢复正常的情况比较:见表4
表4 主要肝功能项目复常率及复常时间(X±Sd)
分组 BILT ALT AST GGT
A 治疗组 94.2 11.14±7.04 85.56 20.78±4.61 91.05 17.50±5.98 88.95 17.92±5.33
I 对照组 94.2 13.36±5.08 75.56 18.16±5.63 87.56 18.67±7.92 84.76 19.30±4.67
H P值 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05
C 治疗组 87.76 20.16±4.61 85.65 25.06±6.81 79.24 18.20±6.72 84.57 25.19±8.00
A 对照组 72.35 20.16±4.63 85.56 24.06±7.55 85.76 17.52±8.60 58.92 23.52±4.48
H P值 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05
从表4得知:急性肝炎和慢性肝炎相对应的治疗组和对照组的患者,无论是使用茵栀黄滴丸治疗,还是使用茵栀黄口服液治疗,他们的降酶和退黄的疗效均较为满意。AIH相对应的治疗组和对照组在731LIT,AI_T,AST,GGT的复常率和复常时间比较中皆无明显差异;在CAH治疗组中仅GGT,的复常率高于对照组(P<0.05),而在BILIT,ALT,AST的复常率和复常时间及GGT的复常时间的比较上皆无明显差异(PLO.05)。
用药前后血清病毒标志物和外周血象的变化:无论是急性肝炎,还是慢性肝炎的相对应的治疗组与对照组的患者,在住院用药后与用药前血清病毒标志物和外周血象均未发现有明显的变化,组间亦无明显差异性变化。
结论
应用茵栀黄滴丸治疗了60例急、慢性黄疽型肝炎患者,并与同期使用茵栀黄口服液治疗的60例与上述用药组相似的临床症状、体症的急、慢性肝炎患者作对比,发现两种不同给药途经均取得了较好的疗效,急、慢性肝炎相对应的治疗组与对照组之间的显效率和有效率均无明显差别(P>0.05),他们各自的症状、体症及肝胆湿热症候群的好转与消失时间在急、慢性肝炎相对应的治疗组和对照组间的比较也无明显差别(P>0.05);BILIT,ACT,AST和GGT的好转、复常率和复常的时间,除了慢性肝炎茵栀黄滴丸治疗组GGT的复常率86.67%茵栀黄口服液对照组高出外,皆无明显差别(P>0.05)。
茵栀黄滴丸是在茵栀黄口服液的基础上研制,药物的活性成分的相对少些(减少三分之一);但药物的疗效并没有减弱,反而有所增强,因此可以认为本发明制剂在服用生药量减少的情况下可以起到与原剂型相同的效果,产生了意想不到的效果。本发明制剂(茵栀黄滴丸)对肝、胆湿热的患者有良好的清热、解毒,利胆退黄和降酶作用。
实施例1:
黄芩苷66.7g 金银花提取物(以绿原酸计)13.3g
栀子提取物10.7g 茵陈提取物20g
将以上金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇-600055.35g、聚乙二醇-400055.35加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为70℃条件下,以60滴/分钟的滴速滴入二甲基硅油中,除去冷却液,选丸,即得。
含量测定:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml中含黄芩苷0.5mg的溶液,作为对照品溶液;
供试品溶液的制备 取本品5克,精密称定,置50ml量瓶中,加70%甲醇50ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理10分钟,放冷至室温,加70%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得:
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约0.1g精密称定,置具塞锥形瓶中,加40%的甲醇20ml,称定重量,超声30min,放冷,再称定重量。用40%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含0.2mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约5g精密称定,置具塞锥形瓶中,加30%的甲醇50ml,在热水中加热,时时振摇,超声处理30分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
结果:每克滴丸中含有:黄芩苷200mg,绿原酸4mg,栀子苷5mg。
实施例2:
黄芩苷40g 金银花提取物(以绿原酸计)20g
栀子提取物15g 茵陈提取物30g
将以上金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀;另取辅料聚乙二醇-6000 175g、聚乙二醇-4000 35g加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为90℃条件下,以150滴/分钟的滴速滴入液体石蜡中,除去冷却液,选丸,即得。
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml中含黄芩苷5mg的溶液,作为对照品溶液;
供试品溶液的制备 取本品约1克,精密称定,置50ml量瓶中,加40%甲醇10ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理10分钟,放冷至室温,加40%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液1ml,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加40%的甲醇20ml,称定重量,超声10min,放冷,再称定重量,用40%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含0.2mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加30%的甲醇5ml,在热水中加热,时时振摇使溶解,超声处理10分钟,放冷至室温,加30%甲醇至刻度,摇匀,滤过,蒸干,用流动相溶解,置10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
结果:每克滴丸中含有:黄芩苷10mg,绿原酸25mg,栀子苷5mg。
实施例3:
黄芩苷90g 金银花提取物(以绿原酸计)6g
栀子提取物15g 茵陈提取物30g。
将处方量的金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇-6000 528.75g、聚乙二醇-4000 176.25g加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为80℃条件下,以80滴/分钟的滴速滴入液体石蜡中,除去冷却液,选丸,即得。
含量测定方法:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml中含黄芩苷5mg的溶液,作为对照品溶液;
供试品溶液的制备 取本品约10克,精密称定,置50ml量瓶中,加70%甲醇50ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理30分钟,放冷至室温,加70%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加70%的甲醇50ml,称定重量,超声30min,放冷,再称定重量,用70%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含5mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加70%的甲醇50ml,在热水中加热,时时振摇,超声处理30分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
测定结果:每克滴丸中含有:黄芩苷60mg,绿原酸13.3mg,栀子苷1.4mg。
实施例4:
黄芩苷90g 金银花提取物(以绿原酸计)20g
栀子提取物5g 茵陈提取物30g
将处方量的金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇6000 1450g加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为75℃条件下,以100滴/分钟的滴速滴入二甲基硅油中,除去冷却液,选丸,即得。
含量测定方法:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml中含黄芩苷1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品3克,精密称定,置50ml量瓶中,加50%甲醇25ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理20分钟,放冷至室温,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约0.5g精密称定,置具塞锥形瓶中,加60%的甲醇30ml,称定重量,超声20min,放冷,再称定重量,用60%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量加入棕色量瓶,即得供试品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含2mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约2.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加40%的甲醇25ml,在热水中加热,时时振摇,超声处理20分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置5ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
测定结果:每克滴丸中含有:黄芩苷10mg,绿原酸4mg,栀子苷0.5mg。
实施例5:
黄芩苷90g 金银花提取物(以绿原酸计)20g
栀子提取物15g 茵陈提取物12g
将处方量的金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇-6000 365.33g、聚乙二醇-4000 45.67g加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为75℃条件下,以120滴/分钟的滴速滴入液体石蜡中,除去冷却液,选丸,即得。
含量测定:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷加甲醇制成每1ml中含黄芩苷2mg的溶液,作为对照品溶液;
供试品溶液的制备 取本品约5克,精密称定,置50ml量瓶中,加55%甲醇25ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理15分钟,放冷至室温,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加55%的甲醇25ml,称定重量,超声25min,放冷,再称定重量,用55%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量,加入棕色量瓶即得供试样品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含3mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加55%的甲醇25ml,在热水中加热,时时振摇,超声处理15分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置5ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
测定结果:每克滴丸中含有:黄芩苷15mg,绿原酸4mg,栀子苷5mg。
实施例6:
黄芩苷66.7g 金银花提取物(以绿原酸计)13.3g
栀子提取物10.7g 茵陈提取物20g。
将处方量的金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇-6000 249.08g、聚乙二醇-4000 83.03g加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为85℃条件下,以75滴/分钟的滴速滴入二甲基硅油中,除去冷却液,选丸,即得。
含量测定方法:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml中含黄芩苷1.5mg的溶液,作为对照品溶液;
供试品溶液的制备 取本品约3克,精密称定,置50ml量瓶中,加60%甲醇30ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理15分钟,放冷至室温,加60%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约1g精密称定,置具塞锥形瓶中,加45%的甲醇30ml,称定重量,超声20min,放冷,再称定重量,用45%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量,加入棕色量瓶即得供试样品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含1mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加50%的甲醇30ml,在热水中加热,时时振摇,超声处理15分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
测定结果:每克滴丸中含有:黄芩苷50mg,绿原酸10mg,栀子苷2mg。
实施例7:
黄芩苷66.7g 金银花提取物(以绿原酸计)13.3g
栀子提取物10.7g 茵陈提取物20g
将处方量的金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎,混匀,另取辅料聚乙二醇6000 332.1g、吐温-80 100g加热熔融后加入浸膏粉混匀,移入滴丸机储罐中,在滴头温度为80℃条件下,以60滴/分钟的滴速滴入液体石蜡中,除去冷却液,选丸,即得。
含量测定方法:
(1)黄芩苷的测定方法:
色谱条件 用十八烷基键合硅胶为填充材料,以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相,检测波长280nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品加甲醇制成每1ml中含黄芩苷2mg的溶液,作为对照品溶液;
供试品溶液的制备 取本品约5克,精密称定,置50ml量瓶中,加60%甲醇25ml,在热水中加热溶解,时时振摇,超声处理20分钟,放冷至室温,加60%甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜,滤过,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(2)绿原酸的测定方法:
色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相,检测波长为327nm;
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,摇匀,即得;
供试品溶液的制备 取本品约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加50%的甲醇25ml,称定重量,超声15min,放冷,再称定重量,用50%的甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液;
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得;
(3)栀子苷的测定方法:
色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以比例为10∶90的乙腈-0.05%三氟乙酸水为流动相,检测波长为239nm;
对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的栀子苷对照品适量,用流动相制成每1ml含3mg的溶液,即得;
供试品溶液的制备 取本品约4g精密称定,置具塞锥形瓶中,加50%的甲醇30ml,在热水中加热,时时振摇,超声处理25分钟,放冷至室温,滤过,蒸干,用流动相溶解,置5ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得;
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。
测定结果:每克滴丸中含有:黄芩苷40mg,绿原酸8mg,栀子苷2mg。