CN1634587A - 一种增效治疗急、慢性肝病的复方制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种增效治疗急、慢性肝炎的复方制剂及其制备方法，该复方制剂包括(1)牛磺酸化合物(2)治疗或预防肝炎的药物，本发明复方制剂可以是医学上可以接受的所有剂型，如注射液，粉针，片剂颗粒剂等，本发明还公开了该复方制剂的制备方法。

Description

一种增效治疗急、慢性肝病的复方制剂及其制备方法

技术领域：

本发明涉及医药领域，提供一种增效治疗急、慢性肝炎的复方制剂及其制备方法，其特征在于该复方制剂包括(1)牛磺酸类化合物、(2)治疗或预防肝炎的药物，必要时可加入药物可接受的辅料。

背景技术：

我国是病毒性肝炎的高发地区，尤其是乙型肝炎。从流行病学调查，根据1992-1995年全国血清流行病学调查结果，我国乙肝的感染率约为60％，乙肝表面抗原携带率约为10％，推算全国约有1.2亿人携带乙肝炎毒，几乎占全世界的一半，其中乙肝患者为3000万，部分可进展为肝硬化、肝癌，预后不良。脂肪肝、肝纤维化、肝硬化是慢性肝炎进展的病理过程。近年来由于生活水平提高、饮食结构变化但预防保健措施相对滞后，以及过度饮酒、肥胖症等原因，脂肪肝发病率持续上升，而且其肝纤维化的发生率约高达25％，且约1.5～8.0％的患者可进展为肝硬化。

目前对慢性肝炎目前的治疗采取去除病因，如抗病毒治疗，戒酒，减肥，同时用药物进行保肝治疗，可有效地控制病变的进一步发展。联苯双酯、齐墩果酸、甘草酸二铵、水飞蓟宾葡甲胺、肌醇等都已在临床使用，并且有一定的疗效。动物实验表明，联苯双酯能选择性地降低血清谷丙转氨酶的活性，对化学毒物(如四氯化碳及硫代乙酰胺等)损害肝脏造成的高血清转氨酶有明显的降低作用，本品还能增强肝脏的解毒功能，减轻肝脏的病理损伤，促进肝细胞再生并保护肝细胞，从而改善肝功能。齐墩果酸可以明显降低实验性肝损伤动物的血清丙氨酸氨基转移酶，减轻肝细胞的变性、坏死以及肝组织的炎性反应和纤维化过程，促进肝细胞再生，加速坏死组织的修复，防止肝硬化，还能纠正异常蛋白代谢，降血脂，增强免疫。水飞蓟宾葡甲胺具有较强的保肝作用，能改善肝功能，稳定肝细胞膜，恢复肝细胞的功能，对抗肝细胞坏死，减轻脂肪变性，抑制谷丙转氨酶的增高。甘草酸二铵具有较强的抗炎、保护肝细胞及改善肝功能的作用，能减轻小鼠四氯化碳、硫代乙酰胺和D-氨基半乳糖引起的血清谷丙转氨酶升高，也能明显减轻D-氨基半乳糖对肝脏的病理性损害并改善免疫因子对肝脏形态的慢性损伤。另外本品还有抗过敏、抑制钙离子内流，免疫调节及抗病毒的作用。

牛磺酸(2-氨基乙磺酸)是体内含量最丰富的含磺酸基β-氨基酸，具有广泛的生物学作用，能够调节细胞钙稳定、清除氧自由基、抑制脂质过氧化、维持细胞渗透压、稳定细胞膜等多种作用，临床多用于心脑血管疾病、糖尿病、呼吸道感染、视网膜光损伤等疾病的治疗。此外，药理研究还发现，牛磺酸具有保肝利胆作用，对CCl₄所致的肝细胞损伤具有保护功能，可减轻肝组织水肿，降低血清丙氨酸氨基转移酶，抑制肝细胞凋亡，防止肝纤维化，但是少见有用于临床治疗急、慢性肝炎的报道，更未见有与上述联苯双酯等药理活性物质复方使用的报道。我们的研究发现，将牛磺酸与上述药理活性物质复方使用，能够明显改善动物化学性肝损伤引起的血清转氨酶的升高，升高超氧化物歧化酶的活性，清除自由基，保护肝细胞，保护肝功能，降低慢性肝损伤动物血清转氨酶活性，减轻肝组织脂肪蓄积，降低肝组织羟脯氨酸含量，防止肝纤维化，而且实验研究证实，牛磺酸与上述药理活性物质复方使用，药物之间具有协同作用，可减少药理活性物质的用药剂量，增强疗效。

发明内容：

本发明提供一种增效治疗急、慢性肝炎的复方制剂及其制备方法。

本发明的复方药物制剂由牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物组成，所述治疗或预防肝炎的药物如：联苯双酯、齐墩果酸、水飞蓟宾葡甲胺、甘草酸二铵、肌醇、氨基酸、促肝细胞生成素中的至少一种组成，必要时加入药物可接受的辅料。牛磺酸与上述治疗或预防肝炎的药物联合组成复方药物，药物之间具有协同作用，可减少治疗或预防肝炎药物的用药剂量，提高疗效。本发明复方制剂可以是适合药用的任何剂型，如注射液，粉针，片剂、颗粒剂等。在制成药物制剂时，可以加入的药物可接受的辅料，包括固体制剂的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂和助流剂；包括注射剂的助溶剂、PH值调节剂及溶剂。

本发明的药物制剂，其中牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物的比例为1∶0.01-100，优选的比例为1∶0.1-10，更优选的比例为1∶0.5-5，特别优选的比例为1∶1。

本发明的药物制剂，其制备方法是制剂学常规方法，包括将牛磺酸类化合物，治疗或预防肝炎的药物和药物可接受的辅料混合的步骤。

本发明的药物制剂，优选的是口服制剂，更优选的是固体口服制剂，如片剂，胶囊剂等，对于片剂和胶囊剂，各组分的重量比可以为：

        牛磺酸类化合物              30-65％

        治疗或预防肝炎的药物        5-30％

        填充剂                      15-40％

        粘合剂                      1-10％

        崩解剂                      1-7％

        矫味剂                      0.001-2％

        润滑剂                      0.1-5％

其中所述填充剂选自：微晶纤维素、甘露醇、乳糖、淀粉、糊精、山梨醇、葡萄糖、木糖醇、果糖、可压性淀粉等。优选微晶纤维素、甘露醇。

粘合剂选自：羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚维酮、8-15％淀粉浆、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素等。优选聚维酮。

崩解剂选自：羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠。优选交联聚维酮。

润滑剂选自：硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉等。优选硬脂酸镁。

本发明的药物制剂，还可以制成颗粒剂，其中各组分的重量比为：

        牛磺酸类化合物                4-15％

        治疗或预防肝炎的药物          0.1-5％

        填充剂                        80-95％

        粘合剂                        0.5-5％

其中填充剂选自：糖粉、糊精。

粘合剂选自：聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、8-15％淀粉浆。

本发明的药物制剂，还可以制成注射剂，其中各组分的重量比为：

        牛磺酸类化合物                3.5-10％

        治疗或预防肝炎的药物          0.5-3％

        PH值调节剂                    ≤1％

        注射用水                      87-95％

其中PH值调节剂选自：氢氧化钠、磷酸盐缓冲液、醋酸钠缓冲液、枸橼酸和枸橼酸钠。

溶剂选自：注射用水、甘油、丙二醇、聚乙烯醇。

本发明的药物制剂，可以经口服用，每日可以服用1-4次，每次1-3个剂量单位；也可非胃肠道给药，每日服用1次，每次1-2个剂量单位。所述剂量单位是指每剂，如片剂的每片，胶囊的每粒等。

本发明优选的配方组成是：牛磺酸和联苯双酯组成的配方、牛磺酸和齐墩果酸组成的配方、牛磺酸和水飞蓟宾葡甲胺组成的配方、牛磺酸和甘草酸二铵组成的配方、牛磺酸+甘草酸二铵+水飞蓟宾葡甲胺组成的配方。以上配方含有生理有效剂量的牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物，如果需要可以加入适量的药物可接受的辅料。辅料加入量可以根据制剂的需要，按照制剂学常规技术手段添加。

本发明的药物制剂，必要时可以制成缓控释制剂，以利于方便的使用和最好的吸收，缓控释制剂可以按照制剂学常规技术手段制备。

以下通过药理实验资料说明本发明复方药物制剂的有益效果：

试验实例一：

1、牛磺酸与甘草酸二铵复方药物对D-氨基半乳糖(D-GaLN)所致急性肝损伤的保护作用

选用体重2.0-3.0kg新西兰纯种兔48只，随机分为四组，即模型组、甘草酸二铵治疗组、牛磺酸+甘草酸二铵治疗组和空白对照组，每组12只。将牛磺酸与甘草酸二铵按照5∶3的比例配成混合物，用0.9％的生理盐水溶解，灭菌密封，备用。模型组兔腹腔内注射D-GaLN(600Mg/kg)，同时每8h耳静脉注射生理盐水10ml}共9次；甘草酸二铵治疗组腹腔内注射同量D-GaLN，同时每8h从耳静脉注射甘利欣注射液15mg/次，共9次；牛磺酸+甘草酸二铵组腹腔内注射同量D-GaLN，同时每8h从耳静脉注射组合物注射液15mg/次(每次含牛磺酸9.38mg，甘草酸二铵5.62mg)，共9次；空白对照组兔腹腔内注射生理盐水5ml，以同样方法从耳静脉注射生理盐水10ml。以上各组在腹腔注射D-GaLN前及注射后24h，72h抽血测肝功能(包括血清丙氨酸氨基转移酶、血清总胆红素)及肿瘤坏死因子(TNF-α)，同时在72h后取肝脏，在光镜下作病理检查。统计学分析用t检验。结果见下表：

分组    n      时间      ALT(U/L)     TBil(umol/L)   TNF-α(ug/L)

模型组  10     注射前    28.5±6.4    12.4±3.7      0.81±0.25

               注射后    823.2   ±        35.7±9.7      1.46±0.35

               24h       486.1

               注射后    294.5   ±        31.9±13.4     1.21±0.46

               72h       106.2

牛磺酸  12     注射前    25.6±8.4    9.7±2.6       0.76±0.27

+甘草

酸二铵

组

               注射后    478.6   ±         23.2±5.3      1.02±0.25

               24h       314.5*

               注射后    86.4    ±         13.6±4.6**^#  0.88±0.37**

               72h       58.4**^#

甘草酸  11     注射前    26.3±7.2     10.6±3.4      0.70±0.27

二铵组

               注射后    538.5   ±         29.6±7.6      1.18±0.35

               24h       362.4

               注射后    136.4   ±         19.2±8.4*     0.93±0.34*

               72h       92.6**

空白对  12     注射前    30.5±8.4     10.6±2.1      0.78±0.26

照组

               注射后    30.7    ±          9.7±3.1**     0.76±0.21**

               24h       8.7**

               注射后    31.2    ±          11.2±4.3**    0.73±0.38**

               72h       9.4**

注：与模型组比较，*p＜0.01，**p＜0.01；

    与甘草酸二铵比较，^#p＜0.05。

实验结果显示，各组腹腔注射D-GaLN后24h，模型组、甘草酸二铵组、牛磺酸+甘草酸二铵组动物的血清ALT、TBil、TNF-α值均异常升高，明显高于空白对照组。甘草酸二铵组动物的各项指标与模型组比较，无统计学差异；牛磺酸+甘草酸二铵组动物的血清ALT值明显低于模型组，经t检验，有统计学意义，但与甘草酸二铵组比较无明显差异，该组其他指标与模型组也无明显差异。注射后72h，模型组、甘草酸二铵组、牛磺酸+甘草酸二铵组动物的各项指标均下降，但仍然明显高于空白对照组，甘草酸二铵组、牛磺酸+甘草酸二铵组各指标与模型组比较，均有显著性差异(t检验，P＜0.01，P＜0.05)；牛磺酸+甘草酸二铵组动物的血清ALT、TBil值明显低于甘草酸二铵组，有统计学差异。肝组织病理检查显示，牛磺酸+甘草酸二铵组动物肝组织损伤明显轻于模型组。注射24h、72h牛磺酸+甘草酸二铵组的各项指标均低于甘草酸二铵。TNF-α在机体对肝炎病毒抗原免疫应答引起肝细胞的免疫损伤中占有非常重要的地位，是病毒性肝炎肝坏死的重要介质。结果表明，牛磺酸+甘草酸二铵组方使用能够保护肝功能，降低TNF-α对肝细胞的损伤作用，保护肝细胞，其作用明显强于单用甘草酸二铵，降低了甘草酸二铵的用量，增强了疗效，两者合用，表现出一定的协同作用。

2、牛磺酸与甘草酸二铵复方药物对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化的抑制作用

选用体重140-160g的雄性Wistar大鼠，腹腔注射0.5％二甲基亚硝胺(DMN)造成肝纤维化模型，分为模型组、甘草酸二铵治疗组(7.5mg/100g，腹腔注射)、牛磺酸+甘草酸二铵治疗组(7.5mg/100g，含牛磺酸4.69mg，甘草酸二铵2.81mg，两者比例为5∶3)，每组12只，连续治疗4周。另设正常大鼠对照组，腹腔注射等量生理盐水。治疗结束后，处死动物，取血清和肝脏，测定血清ALT、总蛋白(TP)、层粘连素(LN)、透明质酸(HA)的含量，测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)的含量，并对肝组织进行光镜下病理检查。结果见下表：

组别         n     ALT(U/L)       TP(g/L)    Hyp(ng/mg)    LN(ug/L)   HA(ug/L)

模型组       1     68.6±7.9      61.02±         46.28±6.4    136.8±          88.3±19.7

             1                    2.5                      56.7

牛磺酸+甘    1     27.3    ±            59.56±         29.64    ±        61.2 ±          49.3±

草酸二铵组    2    5.2**^#       3.7        4.2**^#     32.4**^#      16.4**^#

甘草酸二铵    1    36.4     ±        61.22   ±    35.68   ±       86.5     ±         68.5±

组            2    6.5*          4.2         5.2*        47.9*          22.4*

空白对照组    1    25.4     ±        60.68   ±    29.10   ±       24.6±14.5     26.4±12.4

              2    5.2**         3.9         7.33

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与甘草酸二铵组比较，^#p＜0.05。

病理检查显示，模型对照组肝脏表面粗糙，散在汇管区炎性细胞浸润，纤维组织大量增生，多数形成假小叶，纤维间隔宽，肝窦内连续性环状胶原减少或断续；肝细胞气球样变性明显，散见与少量肝细胞坏死灶。牛磺酸+甘草酸二铵组、甘草酸二铵组均有明显减轻，以前者减轻情况最显著。

结合各检测指标和病理检查，说明肝纤维化发生了，牛磺酸+甘草酸二铵复方制剂具有抑制肝纤维化的作用，其机制可能与其具有保肝降酶，减轻肝脏炎症，抑制肝脏羟脯氨酸与胶原生成有关，而且其作用优于单独使用甘草酸二铵，组方用药具有协同作用。

试验实例二：

1、牛磺酸与联苯双酯复方药物对四氯化碳(CCl₄)所致的急性肝损伤的保护作用

取体重为(20±2)g的昆明种小鼠48只，随机分为对照组、模型组、联苯双酯治疗组、牛磺酸+联苯双酯治疗组，每组12只。联苯双酯组灌胃给予联苯双酯(200mg/100g/d)，牛磺酸+联苯双酯治疗组灌胃200mg/100g/d(每10mg含牛磺酸5mg，联苯双酯5mg，按1∶1配制)，给药一周。对照组及模型组小鼠灌胃等量自来水。末次给药后2h，除对照组小鼠外，按10ml/kg一次性腹腔注射0.1％CCl₄花生油溶剂，禁食不禁水，造成急性肝损伤模型。16h后眼眶取血，离心取血清，测定肝功能(ALT、AST)，以及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果见下表：

组别    n      ALT        AST        SOD          MDA

              (U/L)      (U/L)      (NU/ml)      (umol/L)

                 54.29     ±         211.63     ±        604.32     ±       7.21     ±

对照组    12

                 6.42**          34.24**         72.41**        1.54**

                 483.62±

模型组    12                     714.57±92.74   284.64±53.78  20.55±2.35

                 59.44

牛磺酸+联        115.91     ±        315.41     ±        541.72     ±      10.57    ±

          12

苯双酯组         24.51**^#       42.26**^#       54.7**^#       2.87**^#

联苯双酯         168.74     ±        383.31     ±        358.49     ±       14.38    ±

          12

组               38.23**         39.27**         48.71**         2.61**

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与联苯双酯组比较，^#p＜0.05。

实验结果表明，牛磺酸与联苯双酯复方药物能够明显降低模型动物的血清ALT、AST，说明该组合药物具有保护肝细胞，维护肝功能的作用；其机制可能与降低MDA含量，防止SOD的下降，清除氧自由基有关。从实验结果可以看出，该复方药物的疗效优于单独使用联苯双酯治疗，而且降低了联苯双酯的用量，增强了疗效。

2、牛磺酸与联苯双酯复方药物对CCl4诱导大鼠肝纤维化的抑制作用

取体重(180±20)g雄性SD大鼠55只，随机分成4组：空白对照组(10只)、CCl₄模型组(15只)、牛磺酸+联苯双酯组(15只)和联苯双酯组(15只)。60％CCl₄橄榄油溶液0.3ml/100g体重皮下注射，制备肝纤维化模型。在造模开始时，联苯双酯组每日灌胃给予联苯双酯100mg/100g体重，牛磺酸+联苯双酯组牛磺酸每日灌胃给予复方药物100mg/100g体重(每10mg复方药物含牛磺酸5mg，联苯双酯5mg，按1∶1配制)其他组灌胃给予等量自来水。各组动物在最后一次CCl₄注射后48小时处死，取血分离血清，同时取少许肝组织，测定肝功能指标(ALT、白蛋白)和肝纤维化指标(Hyp、HA、LN)，对肝组织作病理检查。结果见下表。

组别          n      ALT       白蛋白     Hyp        HA        LN

                     (U/L)     (g/L)      (ug/g)     (ug/L)    (ug/L)

空白对照组    15   136.4   ±   27.5   ±     219.5   ±    23.4   ±    25.4±

                    56.2**       1.6**        122.4**      7.5**      15.3**

模型组        11    664.5    ±      20.4±1.9    1380.6   ±     105.4   ±    159.6    ±

                    123.4                     361.5        26.4       60.8

牛磺酸+联     15    325.7    ±      24.9    ±       720.5    ±      42.8    ±     56.7    ±

苯双酯组            26.7**^#     1.2**^#     86.4**^#     12.5**^#   19.4**^#

联苯双酯组    13    394.1    ±      22.4    ±       883.6    ±      66.4    ±     79.6    ±

                    36.8**       1.5*         110.8*       16.9*       13.7**

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与联苯双酯组比较，^#p＜0.05。

上述结果显示，牛磺酸+联苯双酯复方药物能明显的降低血清ALT水平，减轻血清白蛋白的下降，降低肝纤维化指标，说明该复方药物具有保护肝功能，抑制肝纤维化的作用。

病理检查结果显示，CCl₄模型组肝表面布满细小结节，镜下见典型假小叶，纤维间隔宽，牛磺酸+联苯双酯组肝炎变程度较轻，肝表面较光滑，少数标本有细小结节，镜下见纤维组织增生，但多数呈不完全分隔，且纤维间隔细窄，病变程度比联苯双酯组也轻。

综上所述，牛磺酸+联苯双酯复方药物相对与单独使用联苯双酯具有用量小，疗效高的特点。

试验实例三：

1、牛磺酸与齐墩果酸复方药物对D-GaLN所致小鼠肝损伤的保护作用

取小鼠48只，体重(18±2)g雌雄各半，随机分为4组，：空白对照组、模型组、牛磺酸+齐墩果酸组和齐墩果酸组，每组12只。齐墩果酸组每天灌胃给药齐墩果酸30mg/kg体重，牛磺酸+齐墩果酸组每天灌胃给予复方药物30mg/kg体重(每30mg含牛磺酸18mg，齐墩果酸12mg，按照3∶2配制)，连续3天。其他组灌胃等量自来水。除正常对照组外，其余各组均于末次给药后12h腹腔注射D-氨基半乳糖800mg/kg一次，24h后断头取血测定ALT、TBil，肝脏做病理形态学检查。病理检查显示，模型组肝细胞明显气球样变及脂肪变性，牛磺酸+齐墩果酸治疗组、齐墩果酸治疗组肝细胞明显气球样变及脂肪变性明显减轻，而且前者优于后者。病理检查指标阳性动物计数及化验结果见下表。

组别             n      ALT          TG            气球    脂肪

                        (U/L)        (mg/g肝重)    样变    变性

空白对照组       12     326.5    ±       136.5     ±        0*      0*

                        143.7**       44.1**

模型组           10     2158.6   ±       286.4±89.2    9       8

                        893.4

牛磺酸+齐墩果酸  12     449.4    ±       106.5     ±        2*      0*

组                      136.8*^#      43.6**^#

齐墩果酸组       11     833.7    ±       183.2     ±        3*      0*

                        235.6*        54.7*

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与齐墩果酸组比较，^#p＜0.05。

药理研究已经证实，齐墩果酸能明显降低实验性肝损伤动物的血清ALT的升高，减轻肝细胞的变性、坏死。此外，还有降脂作用，而减轻肝脏脂肪蓄积对肝炎病人是有利的。上述实验结果与以往的报道相一致，而且牛磺酸+齐墩果酸复方使用显示出优于单用齐墩果酸的疗效。

2、牛磺酸与齐墩果酸复方药物对对CCl₄诱导大鼠肝纤维化的抑制作用

取Wistar雄性大鼠48只，体重(180±20)g，随机分为4组，每组12只，分别为空白对照组、模型组、牛磺酸+齐墩果酸组、齐墩果酸组。齐墩果酸组每天灌胃给药20mg/kg体重，牛磺酸+齐墩果酸组每天灌胃给予复方药物20mg/kg体重(每30mg含牛磺酸18mg，齐墩果酸12mg，按照3∶2配制)，其他组灌胃等量自来水。连续给药3天后，各组动物均按5ml/kg体重皮下注射10％CCl₄油液，2次/周，连续四周，造成肝纤维化模型。造模期间仍每天灌胃给药，末次给药24小时后，处死动物取血，测血清ALT、AST、Hyp，取肝组织做病理检查。病理检查显示，模型组动物肝脏表面粗糙，光镜下发现，形成典型肝假小叶，肝细胞脂肪变性明显，散见坏死的肝细胞，肝间质纤维增生明显。牛磺酸+齐墩果酸组较模型组可明显减轻上述病变，间质纤维增生轻于齐墩果酸组。各指标测定结果见下表。

组别          n     ALT              AST              Hyp

                    (U/L)            (U/L)            (ug/g)

空白对照组    12    126.4±43.6**    326.5±57.1**    235.5    ±

                                                      141.5**

模型组        10    1248.1±293.7    1126.4±329.5    1424.7   ±

                                                      344.9

牛磺酸+齐墩果 12    406.4      ±          421.6      ±          697.5    ±

酸组                116.7**^#        145.8**^#        74.2**^#

齐墩果酸组    11    531.3      ±          543.3      ±          832.4    ±

                    145.3**          174.6**           94.7*

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与齐墩果酸组比较，^#p＜0.05。

实验结果显示，牛磺酸+齐墩果酸复方使用能够明显降低血清ALT、AST，说明该复方具有保肝降酶的作用；能够明显降低肝组织Hyp含量，减轻病理改变，表明其具有抑制CCl4诱导的肝纤维化的作用，且牛磺酸+齐墩果酸复方药物的作用强于单独使用齐墩果酸。

试验实例四：

1、牛磺酸与水飞蓟宾葡甲胺复方药物对CCl4所致急性肝损伤的保护作用

取体重为(20±2)g的昆明种小鼠48只，随机分为对照组、模型组、牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺组、水飞蓟宾葡甲胺组，每组12只。水飞蓟宾葡甲胺组灌胃给予水飞蓟宾葡甲胺(90mg/kg/d)，牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺治疗组灌胃45mg/100g/d(每90mg含牛磺酸54mg，水飞蓟宾葡甲胺组36mg，按3∶2配制)，给药一周。对照组及模型组小鼠灌胃等量自来水。末次给药后2h，除对照组小鼠外，按10ml/kg一次性腹腔注射0.1％CCl₄油液，造成急性肝损伤模型。24h后眼眶取血，测定肝功能(ALT、AST)，以及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)，取肝组织做病理学检查。结果见下表：

组别       n      ALT      AST      SOD      MDA

                    (U/L)            (U/L)          (NU/ml)       (umol/L)

                                     193.63    ±       618.54    ±      7.12     ±

对照组       12     44.28±5.42**

                                     36.27**        67.43**       1.24**

                                     684.47    ±       267.36    ±

模型组       12     568.62±89.57                                 21.83±2.62

                                     82.79          47.22

牛磺酸+水    12     126.72     ±         235.47     ±       562.43    ±      10.63    ±

飞蓟宾葡            34.29**^#        68.54**^#      48.64**^#     2.17**^#

甲胺

水飞蓟宾     12     218.77     ±         317.72     ±       367.83    ±      15.27    ±

葡甲胺组            49.67**          75.17**        54.81**       2.11**

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与水飞蓟宾葡甲胺组比较，^#p＜0.05。

实验结果表明，牛磺酸与水飞蓟宾葡甲胺复方药物能够明显降低模型动物的血清ALT、AST，说明该组合药物具有保护肝细胞，维护肝功能的作用。药理研究证实，作为有效成分的水飞蓟宾为抗氧自由基活性物质，具有清除氧自由基，抗脂质过氧化作用，我们的研究表明，牛磺酸与水飞蓟宾葡甲胺复方药物也可以降低MDA水平，防止SOD的下降，而且作用强于水飞蓟宾葡甲胺，这也可能是该复方药物保肝作用的机制之一。从实验结果可以看出，该复方药物的疗效优于单独使用水飞蓟宾葡甲胺，而且降低了水飞蓟宾葡甲胺的用量，增强了疗效。

2、牛磺酸与水飞蓟宾葡甲胺复方药物对CCl4诱导大鼠肝纤维化的抑制作用

取体重(200±20)g雄性SD大鼠48只，随机分成4组，每组12只，分别为空白对照组、CCl₄模型组、牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺组和水飞蓟宾葡甲胺组。按0.3ml/100g体重皮下注射60％CCl₄橄榄油溶液，每周2次，共四周，制备肝纤维化模型。在造模开始时，水飞蓟宾葡甲胺组每日灌胃给予水飞蓟宾葡甲胺60mg/kg体重，牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺组牛磺酸每日灌胃给予复方药物60mg/kg体重(每30mg复方药物含牛磺酸18mg，水飞蓟宾葡甲胺12mg，按3∶2配制)。其他组灌胃给予等量自来水。各组动物在最后一次CCl₄注射后48小时处死，取血和肝组织，测定ALT、AST、白蛋白、Hyp，对肝组织作病理检查。结果见下表。

组别            n       ALT          AST         白蛋白      Hyp

                        (U/L)        (U/L)       (g/L)       (ug/g)

空白对照组      12      128.2    ±      317.6    ±     28.4    ±      224.8    ±

                        58.3**       64.5**       1.4**       116.3**

模型组          10      684.2    ±      1263.4   ±     20.2±1.7   1361.7   ±

                        134.6        314.6                    342.7

牛磺酸+水       12      314.5    ±      394.7    ±     25.9    ±      687.3    ±

飞蓟宾葡甲              21.8**^#     135.7**^#   1.3**^#     77.5**^#

胺组

水飞蓟宾葡      12      426.4    ±      567.3    ±     22.7    ±      827.2    ±

甲胺组                  23.1**       155.4**      1.1*        125.8*

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；

    与水飞蓟宾葡甲胺组比较，^#p＜0.05，^##p＜0.01。

镜下见正常肝小叶结果被破坏，出现典型假小叶，间质纤维增生，牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺组组肝炎变程度较轻，较水飞蓟宾葡甲胺组也轻。

上述结果显示，牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺复方药物具有明显的保护肝功能的作用，抑制肝纤维化的作用，其疗效优于单独使用水飞蓟宾葡甲胺。

具体实施方式：

以下的实施例是说明本发明的，但并不意味这限制本发明的范围。

实施例1：

制备牛磺酸+甘草酸二铵注射剂(1000支)

名称	投料量(g)
		牛磺酸	500g
甘草酸二铵	150g
		1％氢氧化钠	适量
注射用水	加至5000ml

制备方法：称取牛磺酸、甘草酸二铵，加入到80％的注射用水中，搅拌溶解，用1％氢氧化钠调节PH值至3.0-4.5之间，过滤，补加蒸馏水至足量，冷冻干燥，即得。

实施例2：

制备牛磺酸+甘草酸二铵+促肝细胞生长素注射液(1000支)

名称	投料量(g)
		牛磺酸	500g
甘草酸二铵	150g
		促肝细胞生长素	120g
1％氢氧化钠	适量
		注射用水	加至5000ml

制备方法：称取牛磺酸、甘草酸二铵、促肝细胞生长素加入到80％的注射用水中，搅拌溶解，用1％氢氧化钠调节PH值至3.5-5.5之间，过滤，补加蒸馏水至足量，即得。

实施例3：

制备牛磺酸+联苯双酯(75mg)的片剂

处方：                            1000片

    牛磺酸                        500g

    联苯双酯                      75g

    微晶纤维素                    185g

    交联羧甲基纤维素钠            24g

    聚维酮                        12g

    硬脂酸镁                      4g

    阿司帕坦                      1g

制备方法：称取牛磺酸、联苯双酯、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠混合均匀，用5％的聚维酮95乙醇溶液，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁、阿司帕坦混匀，直接压片即得。

实施例4：

制备牛磺酸+联苯双酯(150mg)的片剂

处方：                             1000片

    牛磺酸                         500g

    联苯双酯                    150g

    微晶纤维素                  300g

    交联羧甲基纤维素钠          30g

    聚维酮                      15g

    硬脂酸镁                    5g

    阿司帕坦                    2g

制备方法参照实施例3。

实施例5：

制备牛磺酸+水飞蓟宾葡甲胺颗粒

处方：                          5g/袋

    牛磺酸                      0.5g

    水飞蓟宾葡甲胺              0.1g

    糖粉                        4.35g

    3％羧甲基纤维素钠水溶液     适量

制备方法：称取牛磺酸、水飞蓟宾葡甲胺、糖粉混匀，用3％羧甲基纤维素钠水溶液制粒，干燥，整粒，即得。

Claims (10)

1、一种复方药物制剂，其特征在于，由牛磺酸，治疗或预防肝炎的药物及药用可接受的辅料组成。

2、权利要求1的药物制剂，所述治疗或预防肝炎的药物选自联苯双酯、齐墩果酸、水飞蓟宾葡甲胺、甘草酸二铵、肌醇、氨基酸、促肝细胞生成素。

3、权利要求1的药物制剂，其中的药物可接受的辅料选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、助溶剂、PH值调节剂及溶剂。

4、权利要求1的药物制剂，其中牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物的比例为1∶0.01-100。

5、权利要求1的药物制剂，其中牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物的比例为1∶0.1-10。

6、权利要求1的药物制剂，其中牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物的比例为1∶0.5-5。

7、权利要求1的药物制剂，其中牛磺酸和治疗或预防肝炎的药物的比例为1∶1。

8、权利要求1的药物制剂，是片剂或胶囊剂，其中各组分的重量比为：

            牛磺酸                         30-65％

            治疗或预防肝炎的药物           5-30％

            填充剂                         15-40％

            粘合剂                         1-10％

            崩解剂                         1-7％

            矫味剂                         0.001-2％

            润滑剂                         0.1-5％

9、权利要求1的药物制剂，是颗粒剂，其中各组分的重量比为：

            牛磺酸                         4-15％

            治疗或预防肝炎的药物           0.1-5％

            填充剂                         80-95％

            粘合剂                         0.5-5％

10、权利要求1的药物制剂，是注射剂，其中各组分的重量比为：

            牛磺酸                         3.5-10％

治疗或预防肝炎的药物                    0.5-3％

PH值调节剂                              ≤1％

注射用水                                87-95％