CN1524876A - 盐角草的Na+/H+逆向转动蛋白及其编码基因与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白来源于盐角草(Salicornia europaea L.)，名称为SeNHX1，是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与序列2的氨基酸残基序列相同活性的由序列2衍生的蛋白质。盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的编码基因SeNHX1，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中的SEQ ID №：1；2)编码序列表中SEQ ID №：2蛋白质序列的多核苷酸；3)与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。本发明的基因对培育抗盐植物品种，提高农作物产量具有重要意义。

Description

盐角草的Na+/H+逆向转运蛋白及其编码基因与应用

技术领域

本发明涉及植物基因工程领域中的一种转运蛋白及其编码基因与应用，特别是涉及盐角草的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

盐害是农作物产量的严重限制因素。了解植物的抗盐机理，克隆抗盐基因并转移到盐敏感的农作物中，培育抗盐的转基因作物新品种，对于有5亿多亩盐荒地的中国来说，具有十分重要的意义。

植物为了抵御盐胁迫，形成了一系列的适应机制，主要是通过在细胞质中积累小分子的无毒有机溶质和离子，以及在液泡内区隔化来实现渗透平衡。高等植物细胞液泡占完全膨胀细胞总体积的95％，对于植物来说Na⁺是细胞生长所需要的基本营养成分，Na⁺的区隔化是它在盐环境中生存的必要保障。Na⁺/H⁺逆向转运蛋白(antiporter)是一种Na⁺的逆向转运体，在细胞质膜和液泡膜上均有分布，液泡膜上的Na⁺/H⁺ antiporter将细胞质中的Na⁺逆着Na⁺浓度梯度运送到液泡中区隔化集中，细胞质膜上的Na⁺/H⁺ antiporter将细胞质中的Na⁺逆向运送到胞外高Na⁺环境中，从而减少了钠离子对细胞质中细胞器的毒害，对维持细胞的渗透平衡起重要作用。

植物中Na⁺/H⁺ antiporter最早发现是在大麦质膜上，此后在质膜和液泡膜上均有研究报道，到目前已经在大量的盐生植物及非盐生植物中发现Na⁺/H⁺ antiporter活力。已经从拟南芥(AtNHX1)、水稻(OsNHX1)、北滨藜(AgNHX1)、冰叶午时花(McNHX1)分离了Na⁺/H⁺ antiporter基因，证明该基因的表达产物具有Na⁺/H⁺交换的功能。虽然这些基因绝大多数是从具有低逆向运输活力的甜土植物中分离的，但前人的研究表明盐生植物普遍具有在液泡中高效区隔化Na⁺的机制。

耐盐性属于复杂性状，大量的盐胁迫反应相关基因的存在也支持这个观点。单一基因一般不能显著提高作物的耐盐水平，需要多个耐盐基因的协同作用植物才具有高耐盐性。然而转AtNhx1基因的拟南芥植株在200mM NaCl中能正常生长发育。将拟南芥的AtNhx1基因转入番茄中，过量表达液泡Na⁺/H⁺ antiporter的转基因番茄在200mM NaCl胁迫下能够正常生长、开花和结实。尽管叶片中Na⁺浓度高，但番茄果实中Na⁺浓度很低。说明转Na⁺/H⁺ antiporter单基因能够明显提高植物耐盐性，同时，具有器官表达的特异性，有力支持了Na⁺/H⁺ antiporter在植物耐盐性方面所具有的重要作用。

盐角草是世界上最耐盐的盐生植物，同时是一种最有潜力发展为新型作物的盐生植物，在我国有较广泛的分布，可以在高于海水盐度的条件下正常生长。植物体多汁和肉质化，食之可发现具有很重的咸味，说明植物体蓄盐量高。盐角草这些超乎寻常的耐盐特性表明在该植物中无疑存在极其高效的Na⁺逆向运输和储存机制。

发明内容

本发明的目的是提供盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白及其编码基因。

本发明所提供的盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白来源于盐角草(Salicorniaeuropaea L.)，名称为SeNHX1，是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与序列2的氨基酸残基序列相同活性的由序列2衍生的蛋白质。

序列表中序列2氨基酸残基序列是由560个氨基酸残基组成的蛋白质。

根据GenBank中Na⁺/H⁺逆向转运蛋白保守的氨基酸序列设计合成了2个简并性引物，P1：5′-ATTGG(T/A)GCAAT(A/C)TT(C/T)GCTGC-3′；

P2  5′-(C/T)TCAT(A/G)AgACCAgCCCACCA-3′，通过RT-PCR及RACE方法从盐生植物盐角草中克隆Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因。

盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的编码基因SeNHX1，是下列核苷酸序列之一：

1)序列表中的SEQ ID №：1；

2)编码序列表中SEQ ID №：2蛋白质序列的多核苷酸；

3)与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。

序列表中序列1的DNA序列由2668bp个碱基组成，该基因的读码框为自5’端第492位到第2174位碱基。

利用任何一种可以引导外源基因在植物中表达的载体，将本发明所提供的编码盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白SeNHX1的基因导入植物细胞，可获得对高盐胁迫耐受力增强的转基因细胞系及转基因植株。本发明的基因在构建到植物表达载体中时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强启动子或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子，Ubiqutin启动子，增强子既可以是转录增强子，也可以是翻译增强子。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记(GUS基因、萤光素酶基因等)或具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素，卡那霉素等)。携带有本发明盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白SeNHX1基因的表达载体可以是Ti(Tu mor-induced-癌诱导)质粒、Ri(Root-induced-根诱导)质粒、植物病毒载体等，转化可通过农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法等常规生物技术方法实现，被转化的植物宿主既可以是单子叶植物，也可以是双子叶植物，如：水稻，小麦，玉米，大豆，棉花，蔬菜，树木和草坪草等。本发明的基因对培育抗盐植物品种，提高农作物产量具有重要意义。

附图说明

图1为Na⁺/H⁺逆向转运蛋白cDNA克隆

图2为盐角草(SeNHX1)疏水性分析

图3为植物Na⁺/H⁺逆向转运蛋白氨基酸序列的同源性比较

图4为盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的系统发育树分析

图5为盐角草基因组DNA的Southern杂交分析

具体实施方式

实施例1、RNA和DNA的分离

用Trizol试剂盒(GIBCO-BRL)从盐角草(Salicornia europaea L.)幼苗中提取RNA，随后用无Rnase的DNase(TaKara)除去RNA中残留的DNA。

DNA提取采用CTAB方法。

实施列2、盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白cDNA片段的分离

根据北滨藜、碱蓬、柑桔中Na⁺/H⁺逆向转运蛋白保守的氨基酸序列合成简并性引物

P1：5′-ATTGG(T/A)GCAAT(A/C)TT(C/T)GCTGC-3′；

P2  5′-(C/T)TCAT(A/G)AgACCAgCCCACCA-3′。

为了分离cDNA片段，用逆转录试剂盒(Promega)根据盐角草的RNA合成第一链cDNA。用合成的第一链cDNA作为模板，进行RT-PCR。RT-PCR反应混合物为25μl，含有2μl cDNA模板，0.8mmol/L dNTPs，每条引物0.6μmol/L，1×PCR缓冲液，1U Taq DNA polymerase(Promega)。PCR反应程序：95℃，4min；95℃ 30sec，50℃ 30sec，72℃ 1min，共36个循环；72℃ 10min。得到一个700bp的cDNA片段如图1中的(b)所示。将其与PGEM T-easy vector连接，转化大肠杆菌DH5α，利用蓝白斑筛选，挑取白色单菌落，提质粒，NotI酶切质粒鉴定插有预期大小片段(700bp)的阳性克隆，进行测序。测序结果表明，获得了725bp的cDNA片断，用blast比对盐角草cDNA片断，发现这个cDNA片断与已克隆的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因具有较高的同源性，说明获得的盐角草cDNA片断是Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因的片段。

实施例3、盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白cDNA末端的分离

根据已克隆的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白cDNA片段的序列合成基因特异引物

3-GSP1：5′-CGGGAACTTCTGTTGCTGTGAG-3′；

3-GSP2：5′-TTACTCATGGTTGGACGAGCAGC-3′；

5-GSP1：5′-CGCATTGAAAAGCACCACCG-3′；

5-GSP2：5′-GCACCACCGAAGTAGCATCATT-3′；

5-GSP3：5′-CAACACCTTCACCATACACCAGACT-3′。

通过cDNA末端快速扩增(GIBCO-BRL)分离Na⁺/H⁺逆向转运蛋白cDNA的3′末端和5′末端。用基因特异引物3-GSP1，3-GSP2和GIBCO-BRL 3′RACE、5′RACE试剂盒分离cDNA3′末端、5′末端。用5′RACE和3′RACE方法克隆的cDNA 5′末端序列如图1中的(a)所示，3′末端序列如图1中的(c)所示，测序结果显示5′和3′端片段的长度分别为1050bp和1124bp，它们与中间725bp cDNA片段相应末端分别有103bp和128bp的重叠区，将这3个片段拼接，得到一个全长2668bp盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因的全长cDNA，如图1中的(d)所示，为序列表中的序列1。

实施例4、盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白cDNA全序列分析

按拼接的序列设计特异引物，用RT-PCR方法克隆盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白全长cDNA，对其测序验证拼接是准确的。该cDNA包括1683bp的开放读码框(openreading fram，ORF)，491个碱基的5’非翻译区(non translated region，NTR)，443个碱基的3’非翻译区和51个碱基的多聚腺苷酸尾。在第2461和2497个碱基处发现一个PolyA加尾信号(AATAAA)。在5’非翻译区+486位置有一个终止密码子(TAA)，而且与编码区的读码框相吻合，说明不存在其它更前的起始密码子。起始密码子和典型的polyA加尾信号表明这个eDNA是全长的，命名为SeNHX1。此cDNA编码一个561个氨基酸的多肽，推测分子量为62.1KD。

实施例5、盐角草基因组DNA的Southern blot

分别用Dra I，XspI，HaeIII酶切40μg盐角草基因组DNA，这3种酶在克隆的725bp cDNA片段上没有酶切位点。完全酶切的DNA经1.2％的琼脂糖电泳分离后，转移到Hybond N⁺尼龙膜上，按Random Primer DNA labeling Kit Ver.2(TaKaRa，Japan)的方法用[³²P]dCTP标记的725bp cDNA片段做探针进行杂交分析。结果如图5所示，在上述3种酶切的DNA中均有1个DNA片段杂交，表明盐角草基因组有一个拷贝的SeNHX1。

实施例6 SeNHX1序列分析

疏水性分析表明SeNHX1具有12个跨膜区，如图2所示。SeNHX1的氨基酸序列与已克隆的其它Na⁺/H⁺逆向转运蛋白具有很高的同源性，SeNHX1的跨膜区与其它Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的跨膜区相似性较高。SeNHX1中⁸⁵LFFIYLLPPI⁹⁴是高度保守的，这是Na⁺/H⁺逆向转运蛋白活力的竞争性抑制剂氨氯吡嗪嘧的结合位点，如图3所示，图中加黑部分是一致性的氨基酸，框起来的是氨氯吡嗪嘧结合位点。AgNHX1，AtNHX1，CNHX1，OsNHX1和TaNHX1 GenBank登陆号分别为：BAB11940，AAF21755，AAK27314，BBA83337，AAK76737。

为了分析不同Na⁺/H⁺逆向转运蛋白之间的遗传关系，发明人进行了系统发育分析。从GenBank中查找一些有代表性的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的氨基酸序列，分析SeNHX1与它们的关系。如图4所示，SeNHX1与液泡型的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的亲缘近，AgNHX1，cNHX1，AtNHX1，OsNHX1，TtNHX1，NHXI，和AtNHX1的功能是在液泡膜上将Na⁺区隔化到液泡中。SeNHX1与AgNHX1属于同一簇，而SeNHX1和AgNHX1都是盐生植物的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白。SeNHX1与质膜型的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白亲缘关系较远。可以看出SeNHX1是液泡型的Na⁺/H⁺逆向转运蛋白。上述逆向转运蛋白氨基酸在GenBank登陆号为：AgNHX1(BAB11940)，A.gmelini；OsNHX1(BBA83337)，O.sativa；TaNHX1(AAK76737)，T.aestivum；NHX1(NP-010744)，S.cerevisiae；Nhap(BM316951)，P.aeruginosa；SOS1(AF256224)，A.thaliana；NhaA(J03879)，E.coli；Sod2(CAA77796)，S.pombe；NHA1(NP-013239)，S.cerevisiae.

                                      序列表

<160>2

<210>1

<211>2668

<212>DNA

<213>盐角草属盐角草(Salicornia europaea L.)

<400>1

atttttttct gtggcttata tttcttcttt ttccttttcg ttgatttatt agtattccct      60

gaattttctg cttcccatcc tatcttcgtc tctcctctct ttcttctaga tatttccaat     120

agcttctatt ttcgtccttg tttttatatc tttttacccc cccaccggaa atttcggtaa     180

tttcctctgt ttttcttcgg gttcataacc cacctgaaaa atcaagaatt gggtgtcttt     240

tgtttagacg caaaaggatt ttggttttgc tgattagttg ctttatgttc tgttttttgg     300

agggaatttg gaggagctta gttgattgat tgtttgaaca atatacaatt tcacttggac     360

ttgcaattga attggtaagg ttatgaattt ctgaaggtgt ttagaaagtt gattttggga     420

agctacaaag aattccacat atcttgttgt gggtattatt ggatttgggt gtgcaaagaa     480

atagataaac aatgttgtca caattgagct ctctatttta tagcaagatg gacatgctat     540

ccacgtccga tcatgcttcc gtggtgtcga tgaatttgtt cgtagcactt ctatgtggct     600

gcattgtaat tggtcatctt ctcgaggaga atcgttggat gaatgagtcc atcaccgctt     660

tactaattgg tttgtgtact ggggttgtga ttctgctgat tagtggagga aaaagctcac     720

atctactagt cttcagtgaa gatcttttct tcatatacct ccttccgcca attatattta     780

atgcagggtt ccaggtaaaa aagaagcaat tcttccgcaa cttcattact attataatgt     840

ttggagccat tggtacactg gtatcattct ccgtcatatc tctaggagca atgactattt     900

ttaagaagat ggatattggt tctctggagt taggagacta tcttgcaatt ggtgcaatat     960

tcgctgcaac cgattctgtt tgcacattgc aggtgcttaa tcaagatgag actcctcttc    1020

tgtacagtct ggtgtttggt gaaggtgttg ttaatgatgc tacttcggtg gtgcttttca    1080

atgcgattca gaacttcgac ctcacgaata ttgatcacag aattgctata cagttttctg    1140

gcaacttctt gtatttgttt ttcgcaagca ctatgcttgg agcgatgacc ggcttgctaa    1200

gtgcttatgt tatcaaaaag ctgtactttg gaaggcattc aactgatcgt gaggttgcct    1260

taatgatgct tatggcttat ctatcataca tgcttgctga actcttctat ttgagcggaa    1320

ttcttacagt attcttctgt gggattgtca tgtcgcatta tacatggcac aatgtgactg    1380

agagttcaag agtaaccacc aagcatgcat ttgcaacact gtcctttgtt gctgagattt    1440

tcctctttct atatgttggt atggatgcat tggacattga gaagtggaga tttgtgagtg    1500

atagtccggg aacttctgtt gctgtgagct ccatattgct tggtttactc atggttggac    1560

gagcagcttt tgttttccct ttatccttgt tgataaactt ttccaaaaaa tcgcatagtg    1620

agaagatcac cttcaatcag cagatagtta tatggtgggc tggtctcatg agaggtgctg    1680

tttccatggc acttgcttat aatcagttta cgaggtcagg gcacacgcag ctgaggggga    1740

atgcaatcat gatcacgagc actataacta ttgtcctttt tagtacgatg gtgtttgggt    1800

tgctgacaaa gccacttata ttatttttgt tgccacattc aaaacacttc aatagtgcca    1860

gcactgtatc agatttgggg agtccaaaat cattatcctt gcctctcctt gatggcggac    1920

aagattccga agctgatatg gacaaccaag acgaagcagt caacaaccgc tatgaaggaa    1980

cccacaaccg gactatagcc cggcctggca gcctccgaat gcttctaaat gcacctactc    2040

acaccgtcca ctattattgg cgcaaattcg atgattcgtt catgcggcct gtatttggtg    2100

gcaggggttt tgtaccgtac gtgcctggct cgcctattga acagaacacc gacaatttgc    2160

tagacagaac ataggacagg gaatccgagg cagttaggca gaaactacta ctaacctact    2220

ggcagtctgc aaggatgtga atgcccgtac cctagaacag tttggggttt ggttcggtct    2280

cacgggcatg acgttaagag ttacagttaa caatggctat tcaatatata tatattcttt    2340

aatttgggtg tagctagagt aatctagcat gttttgatgt tccattggtc tattaggttt    2400

ttacccccac aaaatcttct gtttcaagaa ttagtttggt gtgcttagtg cttactgtag    2460

aataaattgt gagtccgcaa ttgaacagtt gctgtaaata aaatcagtgt tttgtgccga    2520

taattttgtc aagagcacct gtgtataatt aatcattgtt taatagctga ctattatttt    2580

cctaatttta atggagtgtg atgatctttt tgcacccaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa    2640

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa                                       2668

<210>2

<211>560

<212>PRT

<213>盐角草属盐角草(Salicornia europaea L.)

<400>2

Met Leu Ser Gln Leu Ser Ser Leu Phe Tyr Ser Lys Met Asp Met

 1               5                  10                  15

Leu Ser Thr Ser Asp His Ala Ser Val Val Ser Met Asn Leu Phe

                20                  25                  30

Val Ala Leu Leu Cys Gly Cys Ile Val Ile Gly His Leu Leu Glu

                35                  40                  45

Glu Asn Arg Trp Met Asn Glu Ser Ile Thr Ala Leu Leu Ile Gly

                50                  55                  60

Leu Cys Thr Gly Val Val Ile Leu Leu Ile Ser Gly Gly Lys Ser

                65                  70                  75

Ser His Leu Leu Val Phe Ser Glu Asp Leu Phe Phe Ile Tyr Leu

                80                  85                  90

Leu Pro Pro Ile Ile Phe Asn Ala Gly Phe Gln Val Lys Lys Lys

                95                  100                 105

Gln Phe Phe Arg Asn Phe Ile Thr Ile Ile Met Phe Gly Ala Ile

                110                 115                 120

Gly Thr Leu Val Ser Phe Ser Val Ile Ser Leu Gly Ala Met Thr

                125                 130                 135

Ile Phe Lys Lys Met Asp Ile Gly Ser Leu Glu Leu Gly Asp Tyr

                140                 145                 150

Leu Ala Ile Gly Ala Ile Phe Ala Ala Thr Asp Ser Val Cys Thr

                155                 160                 165

Leu Gln Val Leu Asn Gln Asp Glu Thr Pro Leu Leu Tyr Ser Leu

                170                 175                 180

Val Phe Gly Glu Gly Val Val Asn Asp Ala Thr Ser Val Val Leu

                185                 190                 195

Phe Asn Ala Ile Gln Asn Phe Asp Leu Thr Asn Ile Asp His Arg

                200                 205                 210

Ile Ala Ile Gln Phe Ser Gly Asn Phe Leu Tyr Leu Phe Phe Ala

                215                 220                 225

Ser Thr Met Leu Gly Ala Met Thr Gly Leu Leu Ser Ala Tyr Val

                230                 235                 240

Ile Lys Lys Leu Tyr Phe Gly Arg His Ser Thr Asp Arg Glu Val

                245                 250                 255

Ala Leu Met Met Leu Met Ala Tyr Leu Ser Tyr Met Leu Ala Glu

                260                 265                 270

Leu Phe Tyr Leu Ser Gly Ile Leu Thr Val Phe Phe Cys Gly Ile

                275                 280                 285

Val Met Ser His Tyr Thr Trp His Asn Val Thr Glu Ser Ser Arg

                290                 295                 300

Val Thr Thr Lvs His Ala Phe Ala Thr Leu Ser Phe Val Ala Glu

                305                 310                 315

Ile Phe Leu Phe Leu Tyr Val Gly Met Asp Ala Leu Asp Ile Glu

                320                 325                 330

Lys Trp Arg Phe Val Ser Asp Ser Pro Gly Thr Ser Val Ala Val

                335                 340                 345

Ser Ser Ile Leu Leu Gly Leu Leu Met Val Gly Arg Ala Ala Phe

                350                 355                 360

Val Phe Pro Leu Ser Leu Leu Ile Asn Phe Ser Lys Lys Ser His

                365                 370                 375

Ser Glu Lys Ile Thr Phe Asn Gln Gln Ile Val Ile Trp Trp Ala

                380                 385                 390

Gly Leu Met Arg Gly Ala Val Ser Met Ala Leu Ala Tyr Asn Gln

                395                 400                 405

Phe Thr Arg Ser Gly His Thr Gln Leu Arg Gly Asn Ala Ile Met

                410                 415                 420

Ile Thr Ser Thr Ile Thr Ile Val Leu Phe Ser Thr Met Val Phe

                425                 430                 435

Gly Leu Leu Thr Lys Pro Leu Ile Leu Phe Leu Leu Pro His Ser

                440                 445                 450

Lys His Phe Asn Ser Ala Ser Thr Val Ser Asp Leu Gly Ser Pro

                455                 460                 465

Lys Ser Leu Ser Leu Pro Leu Leu Asp Gly Gly Gln Asp Ser Glu

                470                 475                 480

Ala Asp Met Asp Asn Gln Asp Glu Ala Val Asn Asn Arg Tyr Glu

                485                 490                 495

Gly Thr His Asn Arg Thr Ile Ala Arg Pro Gly Ser Leu Arg Met

                500                 505                 510

Leu Leu Asn Ala Pro Thr His Thr Val His Tyr Tyr Trp Arg Lys

                515                 520                 525

Phe Asp Asp Ser Phe Met Arg Pro Val Phe Gly Gly Arg Gly Phe

                530                 535                 540

Val Pro Tyr Val Pro Gly Ser Pro Ile Glu Gln Asn Thr Asp Asn

                545                 550                 555

Leu Leu Asp Arg Thr

                560

Claims (8)

1、盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白SeNHX1，是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与序列2的氨基酸残基序列相同活性的由序列2衍生的蛋白质。

2、根据权利要求1所述的盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白，其特征在于：它是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质。

3、盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的编码基因SeNHX1，是下列核苷酸序列之一：

1)序列表中的SEQ ID №：1；

2)编码序列表中SEQ ID №：2蛋白质序列的多核苷酸；

3)与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。

4、根据权利要求3所述的基因，其特征在于：所述盐角草Na⁺/H⁺逆向转运蛋白的编码基因是序列表中序列1的DNA序列。

5、根据权利要求4所述的基因，其特征在于：该基因的读码框为自5’端第492位到第2174位碱基的DNA序列。

6、含有权利要求4所述基因的表达载体。

7、含有权利要求4所述基因的细胞系。

8、权利要求4所述基因在培育抗盐植物品种中的应用。

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