CN109734786B - 植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25及其编码基因和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25及其编码基因和应用。所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，基因序列如SEQ ID No.2所示。本发明的花粉育性恢复相关蛋白及其编码基因对改良、提高产量，加速小麦分子育种进程具有十分重要的理论和实际意义。

Description

植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25及其编码基因和应用

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25及其编码基因和应用。

背景技术

植物雄性不育(male sterility，MS)是指雌配子正常发育，雄配子发育异常，能接受外来正常花粉受精结实的现象，目前为止，有610个植物种被报道存在雄性不育类型，包括细胞质雄性不育(CMS)和细胞核雄性不育(GMS)，前者由线粒体基因偶联核基因共同控制，后者仅由核基因单独导致。细胞质雄性不育(CMS)又称为核质互作雄性不育，由线粒体不育基因和核恢复基因(restorer of fertility,Rf)共同调控。细胞质线粒体基因产物导致雄性不育，而细胞核育性恢复基因(Rf)产物能改变线粒体中不育基因的转录或表达，使不育系恢复育性。迄今为止，细胞质雄性不育现象己经在水稻、玉米、油菜、棉花、小麦、高粱、大豆等主要农作物和洋葱、辣椒、菜豆、向日葵等园艺作物中发现。

线粒体不育基因及其产物是导致CMS的主要原因，抑制CMS基因的表达，或抵消其不育产生的负面作用是恢复育性的重要途径，细胞核育性恢复基因(Rf)在该过程中扮演了重要角色。Rf基因及其产物PPR蛋白可以在不同的分子水平上通过各种机制使育性恢复。

育性恢复基因可以抑制相关CMS基因的转录，从而降低不育基因转录产物，恢复育性。恢复基因也可能通过减少不育基因编码的蛋白质积累量而恢复育性。现有技术中，雄性不育恢复基因在上述水稻、玉米、油菜等植物的研究中较为清楚，而小麦属于异源六倍体，由A、B、D三套基因组组成，基因组较大，目前其全基因组测序工作尚未完成，而涉及小麦中的控制育性相关的基因或QTL定位、克隆并未在分子水平上得到明确的阐释。

发明内容

本发明的目的在于提供一种植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25。

本发明的再一目的提供编码上述植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25的基因。

本发明的再一目的在于提供含有上述编码基因的重组表达载体。

本发明的再一目的在于提供含有上述编码基因的重组菌株。

本发明的再一目的在于提供上述编码基因的应用。

本发明的再一目的在于提供提高植物花粉育性的方法。

本发明提供的植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25，来源于小麦，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示：

本发明的蛋白激酶由1536个氨基酸残基组成，是DNA甲基转移酶。自SEQ ID No.1的氨基末端第742-1048位氨基酸残基是BAH结构域，自SEQ ID No.1的第1096-1528位氨基酸残基为Dcm保守结构域。

本发明提供蛋白TaDMT25编码基因，其cDNA序列如SEQ ID No.2所示：

根据本发明具体实施方式的含有TaDMT25基因的重组表达载体，包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等，还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。

使用基因TaDMT25构建重组表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或组成型启动子，如花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子、玉米的泛素启动子(Ubiquitin)，它们可单独使用或与其它植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等。

为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。

根据本发明具体实施方式的提高植物花粉育性的方法，其包括将含有TaDMT25基因导入植物细胞中的步骤，从而得到花粉育性提高的植物。

将本发明所提供的TaDMT25基因导入植物细胞，可获得对植物花粉育性增强的转基因细胞系及转基因植株。携带有编码基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株。被转化的植物宿主既可以是单子叶植物，也可以是双子叶植物，如：拟南芥、小麦、拟南芥、水稻、玉米、黄瓜、番茄、杨树、草坪草、苜宿等。

本发明以小麦为实验材料，得到了花粉发育相关的TaDMT25基因，并将其导入小麦，显著提高了其花粉育性。本发明的花粉发育相关蛋白及其编码基因对改良、增强小麦产量、加速分子育种进程具有十分重要的理论和实际意义。

附图说明

图1显示转基因小麦进行PCR鉴定的结果，其中，M为DL2000Marker，1-12为不同转基因样品，CK为阴性对照；

图2显示成熟期小麦育性鉴定情况，CK为不育系BS366；T2为转基因小麦株系。

具体实施方式

实施例1.克隆小麦抗旱相关TaDMT25基因的cDNA

对生长10天左右的小麦(Triticum aestivum L.)幼苗进行干旱处理5小时，用Trizol提取小麦总RNA。应用5’RACE试剂盒和3’RACE试剂盒获得TaDMT25基因，该基因全长序列4611bp。

用Trizol提取小麦幼苗的总RNA，用superscript II反转录酶反转录获得到cDNA。设计引物P1和P2，以反转录得到的cDNA为模板，用引物P1和P2进行PCR扩增。

引物P1和P2的序列如下：

P1：5’-ATGGTGAAAAGTCCACGTTC-3’，

P2：5’-TCAGGCCTGCTGACGCTTCGC-3’。

对PCR产物进行0.8％琼脂糖凝胶电泳检测，得到分子量约为4.6kb左右的条带，用琼脂糖凝胶回收试剂盒回收该片段。将该回收片段与pGEM-T Easy(Promega)连接，将连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，根据pGEM-T Easy载体上的氨卞青霉素抗性标记筛选阳性克隆，得到含有回收片段的重组质粒。以该重组质粒载体上的T7和SP6启动子序列为引物对其进行核苷酸序列测定，测序结果表明扩增到的TaDMT25基因的开放阅读框(ORF)为SEQ ID No.2的自5’末端第1至4611位脱氧核糖核苷酸，编码氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质。将含序列SEQ ID No.2所示TaDMT25基因的重组载体命名为pTE-TaDMT25。

TaDMT25基因的序列在Genbank上进行比对，在小麦中未发现同源蛋白基因，说明TaDMT25基因是一个新的基因。

进一步用引物P1和P2在小麦基因组中进行扩增，结果显示该基因的基因组序列大小与cDNA长度大小一致，不含有内含子序列。

实施例2.用TaDMT25基因增强植物的花粉育性

1.Ubi-TaDMT25重组表达载体的构建

以小麦的总RNA反转录得到的cDNA为模板，用含有SmaI和SpeI接头序列的特异引物进行PCR扩增；然后SmaI和SpeI双酶切PCR产物回收，将酶切产物正向插入载体pBI221的玉米泛素启动子(Ubiquitin)之后SmaI和SpeI酶切位点之间，得到重组载体pUbi::TaDMT25。

引物序列如下：

TaDMT25[SmaI]5’-TCCCCCGGGG ATGGTGAAAAGTCCACGTTC-3’

TaDMT25[SpeI]5’-GGACTAGT TCAGGCCTGCTGACGCTTCGC-3’

2.转基因小麦的获得

将上述构建的重组表达载体pUbi::TaDMT25分别用冻融法转化根癌农杆菌EHA105，再用pUbi::TaDMT25的根癌农杆菌EHA105转化小麦，用含100mg/L卡那霉素的MS培养基进行筛选，得到阳性转基因植株。将筛选得到的阳性转基因植株用PCR做进一步鉴定筛选，PCR所用的一对引物为P3和P4。

P3(上游引物):5’-CGTATTGAGGACTGGGCAAT-3’，

P4(下游引物):5’-TTACCCCTCTGTTTCTTCAT-3’。

对Ubi::TaDMT25转基因小麦进行PCR鉴定，如图1所示，阳性转基因植株经PCR扩增可获得500bp左右条带，结果获得转Ubi::TaDMT25小麦43株。

同时将pBI221空载体导入小麦，方法同上，作为对照，获得16个株系的转空载体小麦(筛选获得的转基因小麦用T2代表示)。

3.转基因小麦育性表型鉴定

将pUbi::TaDMT25重组表达载体转化农杆菌EHA105，再用含pUbi::TaDMT25的农杆菌EHA105转化小麦不育系材料BS366，通过PCR分子检测得到阳性转基因植株。

对成熟期小麦的结实率统计分析，如图2所示，在可育环境下对照BS366结实率仅为65％左右，而过表达转基因BS366小麦T2株系的结实率达到95％以上，从而证明了过表达TaDMT25基因能够增强转基因小麦的育性及结实率。

序列表

<110> 北京市农林科学院

<120> 植物花粉育性恢复相关蛋白TaDMT25及其编码基因和应用

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1536

<212> PRT

<213> 小麦(Triticum aestivum L.)

<400> 1

Met Val Lys Ser Pro Arg Ser Pro Val Thr Thr Gly Thr Lys Arg Cys

1 5 10 15

Arg Ala Lys Pro Gln Lys Lys Gly Glu Glu Ser Thr Ala Gln Gly Lys

20 25 30

Leu Val Asp Gly Pro Gln Asp Ala Thr Asn Gly Val Glu Lys Cys Ala

35 40 45

Gly Ser Ala Thr His Lys Arg Pro Arg Arg Ala Ala Ala Cys Ser Asp

50 55 60

Phe Lys Glu Lys Ser Val Arg Leu Ser Glu Lys Thr Ser Val Val Lys

65 70 75 80

Ile Lys Lys Asn Arg Met Glu Glu Glu Glu Ile Asp Ala Ile Asn Leu

85 90 95

Thr Lys Leu Gly Pro Glu Asp Ser Pro Pro Cys Arg Lys Leu Ile Asp

100 105 110

Phe Ile Leu His Asp Ala Asp Gly Asn Leu Gln Pro Phe Glu Met Ser

115 120 125

Glu Ile Asp Asp Phe Phe Ile Thr Ala Leu Ile Met Pro Met Asp Asp

130 135 140

Asp Leu Glu Lys Glu Arg Glu Arg Gly Val Cys Cys Glu Gly Phe Gly

145 150 155 160

Arg Ile Glu Asp Trp Ala Ile Ser Gly Tyr Asp Glu Gly Thr Ala Val

165 170 175

Val Trp Leu Ser Thr Glu Leu Ala Asp Tyr Glu Cys Val Lys Pro Ala

180 185 190

Ser Asn Tyr Lys Ser Tyr Phe Asn His Phe Tyr Glu Lys Ala Gln Val

195 200 205

Cys Val Glu Val Tyr Arg Lys Leu Met Arg Ser Val Gly Gly Asn Pro

210 215 220

Asn Met Ser Leu Glu Glu Leu Leu Ala Ser Val Val Arg Ser Val Asn

225 230 235 240

Ala Ile Gln Gly Tyr Thr Gly Thr Met Ser Lys Glu Phe Met Ile Ala

245 250 255

Thr Gly Glu Phe Val Tyr Asn Gln Leu Ile Gly Leu Asp Gln Thr Ala

260 265 270

Gly Asn Asp Asp Glu Lys Leu Val Thr Leu Pro Val Leu Leu Ala Leu

275 280 285

Arg Asp Glu Cys Lys Ser Arg Ala Glu Phe Thr Lys Met Pro Leu Ser

290 295 300

Ile Ser Asn Gly Ser Leu Lys Ile Lys Asp Ile Glu Arg Lys Glu Val

305 310 315 320

Ala Glu Asp Asp Asp Glu Lys Leu Ala Arg Leu Leu His Glu Glu Glu

325 330 335

Glu Trp Lys Met Met Lys Lys Gln Arg Gly Asn Arg Gly Val Pro Ser

340 345 350

Gln Lys Asn Val Tyr Ile Lys Ile Ser Glu Ala Glu Ile Ala Asn Asp

355 360 365

Tyr Pro Leu Pro Ala Tyr Tyr Lys Pro Ser Ser Gln Glu Met Asp Glu

370 375 380

Tyr Ile Phe Asp Ser Glu Asp Gly Met Phe Ser Gly Asp Val Pro Val

385 390 395 400

Arg Ile Leu Asn Asn Trp Ala Leu Tyr Asn Ala Asp Ser Arg Leu Ile

405 410 415

Ser Leu Glu Leu Ile Pro Met Lys Ser Gly Ala Glu Asn Asp Ile Val

420 425 430

Val Phe Gly Ser Gly Phe Met Arg Glu Asp Asp Gly Ser Cys Cys Ser

435 440 445

Thr Ala Glu Ser Ala Lys Leu Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ala Asp Asn

450 455 460

Gln Asp Val Gly Val Pro Ile Tyr Leu Ser Pro Ile Lys Glu Trp Val

465 470 475 480

Ile Glu Phe Gly Gly Leu Met Val Cys Ile Thr Ile Arg Thr Asp Val

485 490 495

Ala Trp Tyr Lys Leu Arg Gln Pro Ile Lys Gln Tyr Ala Pro Trp Cys

500 505 510

Glu Pro Val Leu Lys Thr Ala Arg Leu Ala Val Ser Ile Ile Thr Leu

515 520 525

Leu Lys Glu Gln Ser Arg Ala Ser Lys Leu Ser Phe Val Asp Val Ile

530 535 540

Lys Lys Val Ala Glu Phe Asp Lys Glu Asn Pro Ala Phe Ile Ser Ser

545 550 555 560

Asn Ile Val Leu Val Glu Arg Tyr Ile Val Val His Gly Gln Ile Ile

565 570 575

Leu Gln Gln Phe Ala Asp Phe Pro Asp Glu Thr Ile Arg Arg Cys Ala

580 585 590

Phe Ala Thr Gly Leu Leu Met Lys Met Glu Gln Arg Arg His Thr Lys

595 600 605

Leu Phe Met Lys Lys Lys Ala Gln Val Thr Arg Gly Glu Asn Leu Asn

610 615 620

Pro Ile Ala Thr Met Gly Thr Ser Ser Lys Arg Lys Ala Met Arg Ala

625 630 635 640

Thr Thr Thr Arg Leu Ile Asn Arg Ile Trp Ser Asp Tyr Tyr Ala His

645 650 655

His Phe Pro Glu Asp Leu Lys Glu Gly Asp Gly Asn Glu Ala Lys Glu

660 665 670

Val Asp Asp Glu Gln Glu Glu Asn Glu Asp Glu Asp Ala Glu Glu Glu

675 680 685

Val Gln Ile Glu Glu Asp Lys Val Ala Lys Thr Pro Pro Ser Thr Arg

690 695 700

Ser Arg Lys Leu Val Ser Gln Thr Ser Lys Glu Met Arg Trp Lys Gly

705 710 715 720

Glu Pro Ala Gly Lys Thr Thr Ser Gly Glu Ala Leu Tyr Lys Cys Ala

725 730 735

Tyr Ala Arg Glu Leu Arg Ile Asp Val Gly Gly Ala Val Thr Leu Glu

740 745 750

Asp Asp Ser Gly Glu Ile Val Ile Cys Phe Val Glu Tyr Met Phe Gln

755 760 765

Lys Ser Asp Gly Ala Lys Met Val His Gly Arg Ile Leu Gln Lys Gly

770 775 780

Ser Glu Thr Val Leu Gly Asn Ala Ala Asn Glu Arg Asp Ile Phe Leu

785 790 795 800

Thr Asn Asp Cys Leu Glu Phe Glu Leu Lys Asp Ile Lys Glu Leu Val

805 810 815

Ser Val Asn Leu Gln Ser Met Pro Trp Gly His Lys Tyr Arg Lys Glu

820 825 830

Asn Ser Glu Ala Glu Lys Ile Glu Arg Ala Lys Val Gly Glu Arg Lys

835 840 845

Lys Lys Gly Leu Pro Met Glu Tyr Leu Cys Arg Ser Leu Tyr Trp Pro

850 855 860

Glu Lys Gly Ala Phe Phe Ser Leu Pro Cys Asp Lys Leu Gly Leu Gly

865 870 875 880

Asn Gly Val Cys Gly Ser Cys Glu His Arg Glu Pro Asp Cys Asp Glu

885 890 895

Leu Arg Ile Leu Thr Lys Thr Ser Phe Ile Tyr Arg Lys Val Thr Tyr

900 905 910

Ser Val His Asp Phe Leu Tyr Ile Arg Pro Glu Phe Phe Ser Gln Glu

915 920 925

Glu Asp Arg Gly Thr Tyr Lys Ala Gly Arg Asn Ile Gly Leu Lys Pro

930 935 940

Tyr Ala Val Cys His Leu Leu Asp Val Cys Gly Pro Ala Gly Ser Lys

945 950 955 960

Lys Val Asp Pro Ala Ser Thr Lys Val Ser Val Arg Arg Phe Tyr Arg

965 970 975

Pro Asp Asp Ile Ser Ser Ala Lys Ala Tyr Thr Ser Asp Ile Arg Glu

980 985 990

Val Tyr Tyr Ser Glu Asp Ile Ile Asn Val Pro Val Asp Met Ile Glu

995 1000 1005

Gly Lys Cys Glu Val Arg Lys Lys Ile Asp Ile Ser Asn Ser Asp Leu

1010 1015 1020

Pro Val Met Ile Glu His Val Phe Phe Cys Glu His Phe Tyr Asp Arg

1025 1030 1035 1040

Ala Thr Gly Ala Leu Lys Gln Val Leu Pro Trp Gln Leu Pro Ser Asn

1045 1050 1055

Val Lys Leu Met Ser Val Ala Arg Lys Ala Thr Gly Ala Leu Lys Lys

1060 1065 1070

Asn Lys Gly Lys Gln Ile Cys Glu Asn Asn Glu Val Asp Ser Gly Lys

1075 1080 1085

Trp Met Glu Val Pro Lys Glu Ser Arg Ile Ala Thr Leu Asp Ile Phe

1090 1095 1100

Ala Gly Cys Gly Gly Leu Ser Glu Gly Leu Gln Gln Ala Gly Val Ser

1105 1110 1115 1120

Phe Thr Lys Trp Ala Ile Glu Tyr Glu Glu Pro Ala Gly Glu Ala Phe

1125 1130 1135

Arg Gln Asn His Pro Glu Ala Ala Val Phe Val Asp Asn Cys Asn Val

1140 1145 1150

Ile Leu Lys Ala Ile Met Asp Lys Cys Gly Asp Ser Asp Asp Cys Val

1155 1160 1165

Ser Thr Ser Glu Ala Ala Glu Gln Ala Ala Lys Leu Ala Glu Glu Asn

1170 1175 1180

Ile Lys Asn Leu Pro Val Pro Gly Glu Val Glu Phe Ile Asn Gly Gly

1185 1190 1195 1200

Pro Pro Cys Gln Gly Phe Ser Gly Met Asn Arg Phe Asn Gln Ser Pro

1205 1210 1215

Trp Ser Lys Val Gln Cys Glu Met Ile Leu Ala Phe Leu Ser Phe Ala

1220 1225 1230

Glu Tyr Phe Arg Pro Arg Phe Phe Leu Leu Glu Asn Val Arg Asn Phe

1235 1240 1245

Val Ser Phe Asn Lys Gly Gln Thr Phe Arg Leu Ala Val Ala Ser Leu

1250 1255 1260

Leu Glu Met Gly Tyr Gln Val Arg Phe Gly Ile Leu Glu Ala Gly Thr

1265 1270 1275 1280

Phe Gly Val Ala Gln Ser Arg Lys Arg Ala Phe Ile Trp Ala Ala Ala

1285 1290 1295

Pro Gly Glu Ile Leu Pro Asp Trp Pro Glu Pro Met His Val Phe Ala

1300 1305 1310

Ser Pro Glu Leu Lys Ile Thr Leu Pro Asp Gly Lys Tyr Tyr Ala Ala

1315 1320 1325

Ala Lys Ser Thr Ala Gly Gly Ala Pro Phe Arg Ala Ile Thr Val Arg

1330 1335 1340

Asp Thr Ile Gly Asp Leu Pro Lys Val Glu Asn Gly Ala Ser Lys Leu

1345 1350 1355 1360

Ile Leu Glu Tyr Gly Gly Glu Pro Thr Ser Trp Phe Gln Lys Lys Ile

1365 1370 1375

Arg Gly Ser Thr Ile Ala Leu Asn Asp His Ile Ser Lys Glu Met Asn

1380 1385 1390

Glu Leu Asn Leu Ile Arg Cys Lys His Ile Pro Lys Arg Pro Gly Cys

1395 1400 1405

Asp Trp His Asp Leu Pro Asp Glu Lys Val Lys Leu Ser Ser Gly Gln

1410 1415 1420

Met Val Asp Leu Ile Pro Trp Cys Leu Pro Asn Thr Ala Lys Arg His

1425 1430 1435 1440

Asn Gln Trp Lys Gly Leu Tyr Gly Arg Leu Asp Trp Glu Gly Asn Phe

1445 1450 1455

Pro Thr Ser Val Thr Asp Pro Gln Pro Met Gly Lys Val Gly Met Cys

1460 1465 1470

Phe His Pro Asp Gln Asp Arg Ile Ile Thr Val Arg Glu Cys Ala Arg

1475 1480 1485

Ser Gln Gly Phe Pro Asp Ser Tyr Gln Phe Ser Gly Thr Ile Gln Ser

1490 1495 1500

Lys His Arg Gln Ile Gly Asn Ala Val Pro Pro Pro Leu Ala Phe Ala

1505 1510 1515 1520

Leu Gly Arg Lys Leu Lys Glu Ala Val Asp Ala Lys Arg Gln Gln Ala

1525 1530 1535

<210> 2

<211> 4611

<212> DNA

<213> 小麦(Triticum aestivum L.)

<400> 2

atggtgaaaa gtccacgttc tccagttaca acaggaacaa aaaggtgcag agcaaagcca 60

caaaagaagg gtgaagaatc caccgcacaa ggaaaattgg tggatgggcc tcaggatgca 120

acaaatggtg ttgaaaagtg tgctggttct gctactcaca agaggccaag gagggcagca 180

gcctgttctg attttaagga gaaatctgta cgtttatcag aaaaaacttc tgttgtcaag 240

atcaagaaaa atcggatgga agaggaagaa atagatgcaa tcaacctgac aaaattaggg 300

ccagaagatt caccgccttg ccggaagttg attgatttca tcttgcatga tgcagatggg 360

aatctgcagc catttgaaat gtctgaaata gatgattttt tcataacagc tcttatcatg 420

cctatggatg atgatctaga aaaagagcgt gaaagaggtg tatgctgtga aggatttggg 480

cgtattgagg actgggcaat atctggttat gatgaaggta ctgcagtggt ctggctctca 540

acagaacttg ctgattatga atgtgtgaaa ccagcaagca actacaagtc ttacttcaac 600

cacttttatg agaaggcaca ggtatgtgtt gaagtctaca gaaagctcat gagatcagta 660

ggtgggaatc ctaacatgag tctggaagaa ttgcttgcta gtgttgttcg ctctgttaat 720

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gtatacaacc agcttattgg tttggatcag acggcaggca atgatgatga gaagcttgtt 840

acattgccag ttcttcttgc tctaagagat gagtgcaaat ctcgagcaga atttaccaag 900

atgccactta gcatttcaaa tgggagcctg aagatcaagg atattgagcg taaagaggta 960

gctgaggacg atgatgagaa attagcaaga ttattgcatg aagaagaaga atggaagatg 1020

atgaagaaac agaggggtaa ccgtggagtc ccttcccaga aaaatgtcta catcaaaatt 1080

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gaaatggatg aatacatatt tgatagtgag gatggcatgt tctctggtga tgtgccagta 1200

agaatcctca acaactgggc tctatacaat gcagattcta ggcttatttc tctggaatta 1260

atccctatga agtcaggcgc agaaaatgat atagttgtct ttggatctgg ttttatgaga 1320

gaggatgatg gcagttgctg ttccacagct gagtctgcaa agttgtcttc ttcatcaagt 1380

aaagctgata accaggatgt aggagttcca atatatttga gcccaatcaa ggaatgggtt 1440

atagaatttg gtggcttgat ggtttgcata accattcgaa ctgatgtggc ttggtacaag 1500

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cttgctgtta gcatcatcac cctgctaaaa gagcaaagcc gtgcttcaaa gctttctttt 1620

gttgatgtca tcaagaaagt ggcagagttt gacaaagaga atcctgcttt tatatcgtcc 1680

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atggagcaga gaaggcatac aaagttgttc atgaagaaaa aggctcaagt aacaagagga 1860

gagaatctga acccaattgc aacaatggga acatcatcaa aaagaaaagc aatgcgtgca 1920

accacaacaa gattgatcaa cagaatatgg agtgattact atgcacacca tttccctgaa 1980

gatttgaagg agggagatgg aaatgaagca aaagaagttg atgatgaaca agaagaaaat 2040

gaagatgagg atgctgagga agaggtacag attgaggaag acaaggttgc aaagactcca 2100

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ctcagaatag atgttggagg ggcagtcaca ctggaagatg attcaggaga aatagtcata 2280

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caatcaatgc cttggggtca caagtataga aaagagaatt ctgaagctga gaagattgag 2520

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tcatctgcta aagcttatac atctgatatc agagaggtat actatagtga agatataatt 3000

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aataatgaag ttgattcagg caaatggatg gaagtgccca aagagagccg tattgcaact 3300

cttgacattt ttgctggctg tggaggttta tcagaagggt tgcagcaagc tggtgtgtca 3360

tttacaaaat gggccattga atatgaggaa ccagctggtg aagcatttag gcaaaatcat 3420

ccggaagctg ctgtgtttgt ggataactgc aatgtgattt taaaggcaat catggacaaa 3480

tgtggggatt ctgatgactg tgtctcaact tctgaagctg ctgaacaagc agctaaactt 3540

gctgaagaga atattaaaaa ccttcctgtc cctggtgaag tagaattcat aaatggtggt 3600

cctccctgtc agggcttttc tggcatgaac agattcaacc aaagcccatg gagtaaagtt 3660

cagtgtgaga tgattttagc attcctctct tttgcggagt attttcgtcc cagattcttt 3720

cttttagaaa atgtcaggaa ttttgtttcc ttcaacaaag gacagacctt ccgactggca 3780

gttgcatctc ttctggaaat gggataccag gttcgttttg gaatcttaga agcaggtact 3840

tttggtgttg ctcagtccag gaaaagggca ttcatttggg ctgctgctcc tggagagatt 3900

cttcctgatt ggccagaacc gatgcacgtg tttgctagcc ctgaactgaa aataacactg 3960

cctgatggca aatactatgc agctgccaaa agcactgctg gtggggcgcc tttccgtgca 4020

ataactgtta gagatacaat tggggatttg ccgaaagtgg aaaatggtgc aagtaaactc 4080

atacttgagt atggaggtga gcctacctct tggtttcaga agaagatcag aggtagcact 4140

attgcattga acgatcacat atctaaggag atgaatgaat taaatctcat aagatgcaaa 4200

cacattccca aacgacctgg ttgtgactgg catgacctgc cagatgagaa ggtgaagcta 4260

tcttctgggc aaatggtgga cctgatacct tggtgcttgc ctaacaccgc taaaaggcac 4320

aatcagtgga agggtctgta tgggaggtta gattgggagg gcaatttccc cacttctgtg 4380

actgatcctc agccgatggg caaggttggc atgtgcttcc atcctgacca ggacaggatt 4440

atcacggtcc gtgaatgtgc gcgatctcag ggctttcctg acagctacca gttttcgggc 4500

accattcaga gcaagcacag gcagattggc aacgctgtgc caccccctct tgcctttgcg 4560

cttgggagga agctgaagga agccgtcgat gcgaagcgtc agcaggcctg a 4611

Claims (4)

1.植物花粉育性恢复相关基因TaDMT25在增强小麦的育性及结实率方面的应用，其特征在于，所述植物花粉育性恢复相关基因TaDMT25编码氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物花粉育性恢复相关基因TaDMT25的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.恢复植物花粉育性的方法，其特征在于，所述方法中包括向小麦中导入植物花粉育性恢复相关基因TaDMT25的步骤，所述植物花粉育性恢复相关基因TaDMT25编码氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白。

4.根据权利要求3所述的恢复植物花粉育性的方法，其特征在于，所述植物花粉育性恢复相关基因TaDMT25的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

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