CN1277489C - 羊胎盘功能性食品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种羊胎盘功能性保健食品的制备方法，首先采用超滤法或匀浆-透析法将新鲜羊胎盘中的活性物质提取出来制得羊胎盘抽提液(A液)，然后使用木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的双酶组合对活性物质提取中剩余的沉淀部分及羊胎盘贮备原料进行水解制得羊胎盘水解液，并采用酵母发酵法对水解液进行脱腥处理得到脱腥水解液(B液)。最后将A液与B液按适当比例混合得羊胎盘食品原液。羊胎盘食品原液经调配、过滤、灌装、灭菌工艺制得羊胎盘营养多肽口服液；还可以将原液冷冻干燥、包装制得羊胎盘生物活性多肽胶囊。本发明的功能性保健食品，富含羊胎盘生物活性物质及活性多肽，不仅具有免疫调节与抗衰老的功能，而且易于为人体消化吸收。
Description
技术领域 本发明涉及一种食品，特别是山羊系列食品。
背景技术 目前对于羊胎盘的开发应用主要集中在生物制药及化妆品等领域，利用羊胎盘中的活性物质与其它中草药或化学试剂相结合研制出各种羊胎盘生物制剂、保健品或化妆护肤液等。而在食品工业中的开发应用相对较少，已研制出的产品有羊胎盘全粉及活化羊胎盘素等，采用的技术主要有组织匀浆、真空干燥及浸提等。以上开发出的羊胎盘食品虽然有效地保持了其生物活性，但分子量均较大，活性肽及氨基酸含量甚微，因此不利于人体的吸收。
发明内容 本发明是通过羊胎盘天然活性物质的抽提与蛋白质水解两个方面开发羊胎盘功能性食品。首先以新鲜羊胎盘为原料采用超滤或组织研磨-匀浆-透析法进行活性物质的提取，然后将活性物质提取后的沉淀部分及羊胎盘贮备原料进行酶解，合并抽提液与酶解液即得羊胎盘食品原液，再以该原液为基料制成具有羊胎盘生物活性并富含活性肽的功能性系列保健食品。
一、羊胎盘食品原液的制备方法
1、羊胎盘抽提液的制备，它可以通过两种方式来实现
①超滤法
取新鲜羊胎盘，洗净并去除筋膜部分，剪碎后加入1～2倍的生理盐水(W/V)，进行组织匀浆，然后将羊胎盘匀浆在冷冻离心机中于7000～8000r/min离心20～30分钟。取上清液进行超滤，入口压力为20～30Psi，出口压力为2～4Psi。收集未滤过部分即为羊胎盘抽提液(A液)；离心沉淀部分用于制备酶解液。
②组织研磨—匀浆—透析法
取新鲜羊胎盘，洗净并去除筋膜，剪碎后称重，进行组织研磨，加入羊胎盘重量1～2倍的生理盐水，进行高速组织匀浆，匀浆后的胎盘为均匀的肉糜状，然后将羊胎盘匀浆在-30℃～-40℃下冷冻48小时后于25℃下溶化，如此反复冻溶2～3次。再经5000～70000r/min冷冻离心25～30分钟，取上清液静止透析24～48小时或真空透析10～12小时即可得到羊胎盘活性抽提液(A液)；离心沉淀部分用于制备酶解液。
2、脱腥酶解液的制备
将冷冻贮备的羊胎盘溶化后进行清洗、除筋膜、剪碎等处理，然后将其与1中的沉淀部分混合后称重，加入羊胎盘重量的10～15倍水进行组织匀浆，匀浆液加热煮沸10～15分钟，冷却至50～55℃，调节pH值至7.0～7.5，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3000～3200u/g料，酶解时间3小时。酶解结束后于90℃加热10min进行灭酶处理，然后过滤、浓缩至多肽含量为0.10g/ml，得羊胎盘水解液。采用酵母发酵法对羊胎盘水解液进行脱腥处理，方法是在水解液中加入0.8～1.2％的酵母粉于30～35℃下培养50～60分钟。
3、羊胎盘食品原液的配制
将1、2中制备的羊胎盘抽提液与脱腥水解液按适当比例混合制得羊胎盘食品原液。
二、采用上述羊胎盘食品原液可制备下列具有免疫活性并富含低分子肽的功能性保健食品。
1、羊胎盘营养口服液
①调配 为适应不同人群的消费需求，采用多种配方调制不同类型的羊胎盘营养口服液。
a、儿童营养强化型 按羊胎盘食品原液重量添加6～8％的蔗糖，0.023～0.046g/kg乳酸钙、195～545mg/kg葡萄糖酸锌，0.010～0.015％的香精，搅拌均匀后用重量比为1∶1的苹果酸和柠檬酸的混酸调pH值到3～4。
b、糖尿病人专用型 按羊胎盘食品原液重量添加富铬绿豆芽汁4～6％，富铬绿豆芽汁中有机铬的添加量为50μg/ml，木糖醇7～9％，葡聚糖0.2～0.4％，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到3～4。适合糖尿病患者服用。
c、普通型 按羊胎盘食品原液重量添加2％的砂糖，0.04～0.06％的甜蜜素，0.010～0.015％的香精，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到3～4。
②过滤 将上述调味后的羊胎盘营养液经400目筛网过滤。
③罐装、灭菌，用罐装机将上述羊胎盘营养液注入到棕色口服液瓶中，采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺。
由上述方法得到的羊胎盘营养口服液成分如下：
a、儿童营养强化型
固形物 10～20％
蛋白质含量 25％～30％
肽得率 50～60％
超氧化物歧化酶活力 2000～2500u/ml
Ca 2～4mg/ml
Zn 18～50mg/ml
b、糖尿病人专用型
固形物 10～20％
蛋白质含量 25～30％
肽得率 50～60％
超氧化物歧化酶活力 2000～2500u/ml
铬 2～3μg/ml
c、普通型
固形物 5～15％
蛋白质含量 25～30％
肽得率 50～60％
超氧化物歧化酶活力 2000～2500u/ml
2、羊胎盘生物活性胶囊
采用真空冷冻干燥，将上述羊胎盘食品原液置于冷冻干燥机中，于-40℃以下真空度133×10-3Pa进行干燥，使水分含量≤4％，得到羊胎盘多肽粉，再于50～60％的相对湿度下装胶囊即得成品。
由上述方法制得的羊胎盘生物活性胶囊成分如下：
超氧化物歧化酶活力 4000～6000u/g
蛋白质含量 50～60％
酸溶性肽得率 60～70％
水分 4％
E-花环实验结果：羊胎盘生物活性胶囊具有促进人淋巴细胞上绵羊红细胞受体恢复的免疫学活性。
本发明具有如下优点：
1、分别采用膜技术及生物酶解技术进行羊胎盘生物活性物质的提取与水解液的制备，然后将羊胎盘抽提液与水解液合二为一，制成具有生物活性的羊胎盘多肽营养液，进而制备出羊胎盘营养口服液、羊胎盘生物活性胶囊，以满足人们的多种需求。
2、本发明结合活性物质提取与蛋白水解两部分，既克服了水解液中天然活性降低的缺点，也弥补了抽提液虽富含天然活性物质但活性肽及氨基酸含量甚微的不足，做到了对羊胎盘的充分利用，所得产品不但具备免疫调节及抗衰老的功能，更利于消化吸收。
3、本发明采用酵母发酵法进行脱腥，方法简单有效，且作用温度在35℃以下，对羊胎盘中的活性成分几乎无影响。
具体实施方式
例1
羊胎盘抽提液(A液)的制备：取新鲜羊胎盘，洗净，去除血管、脂肪及结缔组织部分，剪碎，加入1倍的生理盐水(W/V)，进行组织匀浆，然后将羊胎盘匀浆在冷冻离心机中于7000r/min离心30分钟。取上清液进行超滤，入口压力为20Psi，出口压力为2Psi。收集未滤过部分即为羊胎盘抽提液(A液)；沉淀部分用于制备酶解液。
脱腥羊胎盘水解液(B液)的制备：将冷冻贮备的羊胎盘溶化后进行清洗、除筋膜、剪碎等处理，然后将其与抽提液制备中的沉淀部分混合后称重，加入羊胎盘重量的10倍水进行组织匀浆，将匀浆加热煮沸10分钟，冷却至52℃，调节pH值至7.0，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3000u/g料，酶解时间3小时。酶解结束后于90℃加热10min进行灭酶处理，然后过滤、浓缩至多肽含量为0.10g/ml得羊胎盘水解液，在水解液中加入1.2％的酵母粉于30℃下培育50分钟，制得去除腥味的羊胎盘水解液(B液)。
将上述制得的A液与B液按1∶10比例混合得羊胎盘食品原液。
例2
羊胎盘抽提液(A液)的制备：取新鲜羊胎盘，洗净，去除血管、脂肪及结缔组织部分，剪碎，加入2倍的生理盐水(W/V)，进行组织匀浆，然后将羊胎盘匀浆在冷冻离心机中于8000r/min离心20分钟。取上清液在进行超滤，入口压力为30Psi，出口压力为4Psi。收集未滤过部分即为羊胎盘抽提液(A液)；沉淀部分用于制备酶解液。
脱腥羊胎盘水解液(B液)的制备：将冷冻贮备的羊胎盘溶化后进行清洗、除筋膜、剪碎等处理，然后将其与抽提液制备中的沉淀部分混合后称重，加入羊胎盘重量的15倍水进行组织匀浆，将匀浆加热煮沸10分钟，冷却至55℃，调节pH值至7.5，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3200u/g料，酶解时间3小时。酶解结束后于90℃加热10min进行灭酶处理，然后过滤、浓缩至多肽含量为0.10g/ml得羊胎盘水解液(B液)。在水解液中加入0.8％的酵母粉于35℃下培育55分钟，制得去除腥味的羊胎盘水解液(B液)。
将上述制得的A液与B液按1∶5比例混合得羊胎盘食品原液。
例3
羊胎盘抽提液(A液)的制备：取新鲜羊胎盘，洗净并去除筋膜部分，剪碎后称重，进行组织研磨，再加入羊胎盘重量1倍的生理盐水，进行高速组织匀浆，匀浆后的胎盘为均匀的肉糜状，然后将羊胎盘匀浆在-30℃下冷冻48小时后于25℃下溶化，如此反复冻溶3次。再经5000r/min冷冻离心30分钟，取上清液静止透析24小时或真空透析12小时即可得到羊胎盘活性抽提液(A液)。沉淀部分用于制备酶解液。
脱腥羊胎盘水解液(B液)的制备：将冷冻贮备的羊胎盘溶化后进行清洗、除筋膜、剪碎等处理，然后将其与抽提液制备中的沉淀部分混合后称重，加入羊胎盘重量的15倍水进行组织匀浆，将匀浆加热煮沸15分钟，冷却至50℃，调节pH值至7.0，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3000u/g料，酶解时间3小时。酶解结束后于90℃加热10min进行灭酶处理，然后过滤、浓缩至多肽含量为0.10g/ml，得羊胎盘水解液，在水解液中加入0.8％的酵母粉于35℃下培育55分钟，制得去除腥味的羊胎盘水解液(B液)。
将上述制得的A液与B液按1∶10比例混合得羊胎盘食品原液。
例4
羊胎盘抽提液(A液)的制备：取新鲜羊胎盘，洗净并去除筋膜部分，剪碎后称重，进行组织研磨，再加入羊胎盘重量2倍的生理盐水，进行高速组织匀浆，匀浆后的胎盘为均匀的肉糜状，然后将羊胎盘匀浆在-40℃下冷冻48小时后于25℃下溶化，如此反复冻溶2次。再经70000r/min冷冻离心25分钟，取上清液静止透析48小时或真空透析10小时即可得到羊胎盘活性抽提液(A液)。沉淀部分用于制备酶解液。
脱腥羊胎盘水解液(B液)的制备：将冷冻贮备的羊胎盘溶化后进行清洗、除筋膜、剪碎等处理，然后将其与1中的沉淀部分混合后称重，加入羊胎盘重量的10倍水进行组织匀浆，将匀浆加热煮沸15分钟，冷却至55℃，调节pH值至7.5，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3200u/g料，酶解时间3小时。酶解结束后于90℃加热10min进行灭酶处理，然后过滤、浓缩至多肽含量为0.10g/ml，得羊胎盘水解液。在水解液中加入1.2％的酵母粉于30℃下培育60分钟，制得去除腥味的羊胎盘水解液(B液)。
将上述制得的A液与B液按1∶5比例混合得羊胎盘食品原液。
例5
取由例1获得的羊胎盘食品原液，按重量添加6～8％的蔗糖，0.023g/kg乳酸钙，195mg/kg葡萄糖酸锌，0.010％的香精，搅拌均匀后用重量比为1∶1的苹果酸和柠檬酸的混酸调pH值到3，经400目筛网过滤后，使用罐装机将其注入到棕色口服液瓶中，最后采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺，即制得“儿童营养强化型”羊胎盘营养口服液。其成分如下：
固形物 10％
蛋白质含量 25％
肽得率 55％
超氧化物歧化酶活力 2000u/ml
Ca 2mg/ml
Zn 18mg/ml
例6
取由例2获得的羊胎盘食品原液，按重量添加8％的蔗糖，0.046g/kg乳酸钙，545mg/kg葡萄糖酸锌，0.015％的香精，搅拌均匀后用重量比为1∶1的苹果酸和柠檬酸的混酸调pH值到3，经400目筛网过滤后，使用罐装机将其注入到棕色口服液瓶中，最后采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺，即制得“儿童营养强化型”羊胎盘营养口服液。其成分如下：
固形物 20％
蛋白质含量 30％
肽得率 55％
超氧化物歧化酶活力 2500u/ml
Ca 4mg/ml
Zn 48mg/ml
例7
取由例3获得的羊胎盘食品原液，按重量添加富铬绿豆芽汁4％，富铬绿豆芽汁中有机铬的添加量为50μg/ml，木糖醇7％，葡聚糖0.2％，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到3。经400目筛网过滤后，使用罐装机将其注入到棕色口服液瓶中，最后采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺，即制得“糖尿病人专用型”羊胎盘营养口服液。适合糖尿病患者服用。其成分如下：
固形物 15％
蛋白质含量 28％
肽得率 55％
超氧化物歧化酶活力 2000u/ml
铬 2μg/ml
例8
取由例4获得的羊胎盘食品原液，，按重量添加富铬绿豆芽汁6％，富铬绿豆芽汁中有机铬的添加量为50μg/ml，木糖醇9％，葡聚糖0.4％，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到4。经400目筛网过滤后，使用罐装机将其注入到棕色口服液瓶中，最后采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺，即制得“糖尿病人专用型”羊胎盘营养口服液。适合糖尿病患者服用。其成分如下：
固形物 20％
蛋白质含量 30％
肽得率 55％
超氧化物歧化酶活力 2500u/ml
铬 3μg/ml
例9
取由例1获得的羊胎盘食品原液，按重量添加2％的砂糖，0.04％的甜蜜素，0.010％的香精，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到3。经400目筛网过滤后，使用罐装机将其注入到棕色口服液瓶中，最后采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺，即制得“普通型”羊胎盘营养口服液。其成分如下：
固形物 5％
蛋白质含量 25％
肽得率 50％
超氧化物歧化酶活力 2000u/ml
例10
取由例2获得的羊胎盘食品原液，按重量添加2％的砂糖，0.06％的甜蜜素，0.015％的香精，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到4。经400目筛网过滤后，使用罐装机将其注入到棕色口服液瓶中，最后采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺，即制得“普通型”羊胎盘营养口服液。其成分如下：
固形物 15％
蛋白质含量 30％
肽得率 60％
超氧化物歧化酶活力 2000u/ml
例11
取由例3获得的羊胎盘食品原液，放入冷冻干燥机中，控制温度在-40℃、真空度133×10-3Pa，使水分≤4％。将冷冻干燥制得的羊胎盘多肽粉装入胶囊中，即为羊胎盘生物活性胶囊，其成分如下：
超氧化物歧化酶活力 5000u/g
蛋白质总量 50％
酸溶性肽得率 70％
水分 ≤4％
例12
取由例4获得的羊胎盘食品原液，放入冷冻干燥机中，控制温度在-40℃、真空度133×10-3Pa，使水分≤4％。将冷冻干燥制得的羊胎盘多肽粉装入胶囊中，即得羊胎盘生物活性胶囊，其成分如下：
超氧化物歧化酶活力 6000u/g
蛋白质总量 60％
酸溶性肽得率 70％
水分 ≤4％
注：选用的羊胎盘经卫生检验符合国家有关规定。
Claims (9)
1、羊胎盘食品原液的制备方法，其特征在于：
①活性物质提取
a、加入新鲜羊胎盘重量1～2倍的生理盐水，进行组织匀浆，
b、将上述羊胎盘匀浆在冷冻离心机中于7000～8000r/min离心20～30分钟，
c、取上清液进行超滤，入口压力为20～30Psi，出口压力为2～4Psi，
②脱腥酶解液制备
a、原料处理：加入羊胎盘重量的10～15倍水进行组织匀浆，
b、酶解：将上述匀浆加热煮沸10～15分钟，调节温度至50～55℃、pH值至7.0～7.5，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3000～3200u/g料，酶解时间3小时，
c、灭酶：将上述酶解液于90℃加热10min，
d、过滤、浓缩：酶解液灭酶后过滤，浓缩至多肽含量为0.10g/ml，得羊胎盘水解液，
e、水解液脱腥处理：向羊胎盘水解液中加入0.8～1.2％的酵母粉于30～35℃下培养50～60分钟，
③羊胎盘食品原液的制备
按1∶5～1∶10的比例混合①、②中所得抽提液与脱腥水解液即得羊胎盘食品原液。
2、一种羊胎盘食品原液的制备方法，其特征在于：
①活性物质提取
a、组织研磨：使用组织研磨器将剪碎后的羊胎盘进行组织研磨，
b、匀浆：胎盘研磨后，加入其重量1～2倍的生理盐水，进行组织匀浆，
c、冻溶：将羊胎盘匀浆在-30℃～-40℃下冷冻48小时后于25℃下溶化，如此反复冻2～3次，
d、离心：冻溶后的匀浆经5000～70000r/min冷冻离心25～30分钟，
e、透析：取上清液静止透析24～48小时或真空透析10～12小时即可得到羊胎盘活性抽提液，
②脱腥酶解液制备
a、原料处理：加入羊胎盘重量的10～15倍水进行组织匀浆，
b、酶解：将上述匀浆加热煮沸10～15分钟，调节温度至50～55℃、pH值至7.0～7.5，按1∶1的酶活比同时加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶组合水解，总加酶量为3000～3200u/g料，酶解时间3小时，
c、灭酶：将上述酶解液于90℃加热10min，
d、过滤、浓缩：酶解液灭酶后过滤，浓缩至多肽含量为0.10g/ml，得羊胎盘水解液，
e、水解液脱腥处理：向羊胎盘水解液中加入0.8～1.2％的酵母粉于30～35℃下培养50～60分钟，
③羊胎盘食品原液的制备
按1∶5～1∶10的比例混合①、②中所得抽提液与脱腥水解液即得羊胎盘食品原液。
3、一种儿童营养强化型羊胎盘营养口服液的制备方法，其特征在于：
a、调配：根据权利要求1或2的方法制得的羊胎盘食品原液，按其原液重量添加6～8％的蔗糖，0.023～0.046g/kg乳酸钙、195～545mg/kg葡萄糖酸锌，0.010～0.015％的香精，搅拌均匀后用重量比为1∶1的苹果酸和柠檬酸的混酸调pH值到3～4，
b、过滤：将上述调味后的羊胎盘营养液经400目筛网过滤，
c、罐装、灭菌：将上述羊胎盘营养液通过罐装机注入棕色口服液瓶中，采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺进行灭菌。
4、根据权利要求3所述的方法制成的儿童营养强化型羊胎盘营养口服液，其特征在于：
固形物 10～20％
蛋白质含量 25％～30％
肽得率 50～60％
超氧化物歧化酶活力 2000～2500u/ml
Ca 2～4mg/ml
Zn 18～50mg/ml
5、一种糖尿病人专用型羊胎盘营养口服液的制备方法，其特征在于：
a、调配：根据权利要求1或2的方法制得的羊胎盘食品原液，按其重量添加富铬绿豆芽汁4～6％，富铬绿豆芽汁中有机铬的添加量为50μg/ml，木糖醇7～9％，葡聚糖0.2～0.4％，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到3～4，
b、过滤：将上述调味后的羊胎盘营养液经400目筛网过滤，
c、罐装、灭菌：将上述羊胎盘营养液通过罐装机注入棕色口服液瓶中，采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺进行灭菌。
6、根据权利要求5所述的方法制成的糖尿病人专用型羊胎盘营养口服液，其特征在于：
固形物 10～20％
蛋白质含量 25～30％
肽得率 50～60％
超氧化物歧化酶活力 2000～2500u/ml
铬 2～3μg/ml
7、一种普通型羊胎盘营养口服液的制备方法，其特征在于：
a、调味：根据权利要求1或2的方法制得的羊胎盘食品原液，按其重量添加2％的砂糖，0.04～0.06％的甜蜜素，0.010～0.015％的香精，搅拌均匀后用柠檬酸调pH值到3～4，
b、过滤：将上述调味后的羊胎盘营养液经400目筛网过滤，
c、罐装、灭菌：将上述羊胎盘营养液通过罐装机注入棕色口服液瓶中，采用63℃，30分钟的巴氏杀菌工艺。
8、根据权利要求7所述的方法制成的普通型羊胎盘营养口服液，其特征在于：
固形物 5～15％
蛋白质含量 25～30％
肽得率 50～60％
超氧化物歧化酶活力 2000～2500u/ml
9、一种羊胎盘生物活性胶囊的制备方法，其特征在于：
a、干燥：根据权利要求1或2的方法制得的羊胎盘食品原液，将其置于冷冻干燥机中，于-40℃以下真空度133×10-3Pa进行干燥，使水分含量≤4％，
b、包装：将羊胎盘多肽粉于50～60％的相对湿度环境下调至室温然后装胶囊。
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