CN1189471C

CN1189471C - 膦酰基头孢烯化合物

Info

Publication number: CN1189471C
Application number: CNB018160956A
Authority: CN
Inventors: 石川智康; 桥口昌平; 饭泽佑史
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2000-08-10
Filing date: 2001-08-10
Publication date: 2005-02-16
Anticipated expiration: 2021-08-10
Also published as: EP1310502A1; EP1310502B1; KR100826487B1; EP1310502A4; DE60138760D1; AU2001277753A1; EP2020416A1; KR20030022891A; PT1310502E; CA2418614A1; DK1310502T3; ATE431827T1; CA2418614C; US20050176697A1; WO2002014333A1; US7419973B2; CN1462275A; ES2323759T3; US20040023943A1; US6906055B2

Abstract

一种式[I]表示的头孢烯化合物：其中X为CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN，以及n为0到5。该头孢烯化合物(特别是其结晶)可用作抗菌剂(特别是抗MRSA试剂)，其优点在于它显示高固体稳定性、可长期稳定保存等。

Description

膦酰基头孢烯化合物

技术领域

本发明涉及用作具有优良抗菌活性的膦酰基头孢烯(phosphonocephem)药物试剂的化合物(特别是其结晶)及其生产方法。

背景技术

JP-A-11-255772公开了具有优良抗菌活性的膦酰基头孢烯化合物，其中一个特例为下式表示的7β-[2(Z)-乙氧基亚氨基-2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)乙酰氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓(pyridinio))-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸化物冻干产物：

一般说来，希望药物试剂的以下这些质量是优良的：吸收性，溶解性，纯度，稳定性，易贮存性，易处理等。因此，本发明的任务是提供具有足以满足上述质量要求的抗菌药剂(特别是抗MRSA试剂)。

发明公开

本发明人已经集中地进行了各种研究解决上述难题，从大量膦酰基头孢烯化合物中选择具有上述式(Ia)表示的特殊化学结构的膦酰基头孢烯化合物，发现该化合物与水和特殊的溶剂(CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN)混合并且溶解时，出乎意料地得到具有抗菌活性的、作为药剂质量特别优良的化合物(特别是通过连续结晶得到的晶体)，而且该化合物作为药物具有更高的优良品质(例如，具有高固态稳定性和高纯度，等等)，从而完成了本发明。

因此，本发明涉及

(1)下式化合物：

其中X为CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN，以及n为0到5，

(2)上述(1)的化合物，其中该化合物为晶体形式，

(3)上述(1)的化合物，其中n为1，

(4)上述(1)或(2)的化合物，其中X为CH₃COOH，

(5)上述(4)的化合物，在粉末X射线衍射中具有近衍射角16.32、19.06、19.90、20.98和23.24°的峰，

(6)上述(4)的化合物，在粉末X射线衍射中具有近衍射角11.82、17.16、17.80、19.32、20.00、21.20、21.78、22.94、24.10和27.02°的峰，

(7)上述(1)或(2)的化合物，其中X为CH₃CH₂COOH，

(8)上述(7)的化合物，在粉末X射线衍射中具有近衍射角16.30、16.30、18.84、19.70、21.80和23.18°的峰，

(9)包含上述(1)或(2)的化合物的药物组合物，

(10)上述(9)的药物组合物，它是一种抗菌剂，

(11)下式表示的化合物的结晶的制备方法：

其中X为CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN，以及n为0到5，该方法包括将[i]下式表示的化合物：

和[ii]CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN以及[iii]水混合，使其溶解并且发生结晶，

(12)上述(11)的制备方法，其中CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN∶水为1∶0.1-10，

(13)一种的结晶，通过下述方法得到：将[i]下式表示的化合物：

与[ii]CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN和[iii]水混合，使其溶解，并且发生结晶，

(14)下式表示的化合物的二钠盐：

(15)上述(14)的二钠盐，其中该二钠盐为晶体形式，

(16)上述(14)或(15)的二钠盐，在粉末X射线衍射中具有近衍射角17.02、18.94、22.86、23.36或26.48°的峰，等等。

附图的简要描述

图1表示实施例1得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

图2表示实施例5得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

图3表示实施例6得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

图4表示实施例7得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

图5表示实施例24得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，50kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

发明的详细说明

化合物(I)由1分子化合物(Ia)、1分子乙酸、丙酸或乙腈、和0到5分子水组成。化合物(I)可以是由化合物(Ia)和乙酸或丙酸形成的盐，或者由化合物(Ia)和乙酸，丙酸或乙腈形成的溶剂化物。化合物(I)可以含水，在这种情况下，所含的水可以是结晶水或简单地粘附的水。考虑到纯度和固体稳定性，化合物(I)优选结晶形式。

化合物(I)可以由[i]化合物(Ia)，[ii]乙酸、丙酸或乙腈以及[iii]水产生。作为化合物(Ia)，可以使用JP-A-11-255772公开的冻干制品，或者通过在含化合物(Ia)的二钠盐、二钾盐或二铵盐的溶液中加入例如盐酸、硫酸、硝酸等得到的化合物(Ia)。含上述化合物(Ia)二钠盐的溶液可以是用于合成化合物(Ia)二钠盐的各种反应得到的含化合物(Ia)二钠盐的反应混合物，或者可以是化合物(Ia)二钠盐结晶溶解得到的溶液。通过混合上述[i]、[ii]和[iii]得到一种溶液，并且通过常规分离技术如结晶等从该溶液分离可以制备化合物(I)。混合[i]、[ii]、和[iii]的顺序是任意的。例如，[i]和[ii]首先混合，该混合物可以与[iii]混合，或者[i]和[iii]混合，该混合物可以与[ii]混合，或者[ii]和[iii]混合，该混合物可以与[i]混合。为了得到混合后的溶液优选运用，例如，超声处理(超声波照射)，搅拌等等。在制备溶液时，晶体可以同时产生。没有出现结晶时可以通过，例如，冷却，如超声处理的刺激，搅拌等等，加入种晶，等等而产生结晶。为了控制沉淀的晶体的物理性质，可以在混合物中加入糖引起结晶。

通常，用于结晶的溶剂[ii]和水[iii]混合的体积比[ii]∶[iii]为1∶0.1-10，优选1∶0.5-5，特别优选约1∶1。相对于[i]用于结晶的[ii]和[iii]的量没有特别限制，只要其在结晶允许的范围内即可。相对于[i]的1重量份，通常[ii]和[iii]的总数是2-100重量份，优选3-50重量份，更优选5-30重量份。可以通过结晶技术如冷却上述溶液，在真空中降低[ii]和[iii]的量，加入种晶等等进行结晶。可以在该混合溶液中加入糖，其量可以为溶于[iii]的极限量。相对于[i]，通常加入0.05-10重量份，优选0.1-0.5重量份。通常，糖优选地溶于使用的[iii]。糖的例子包括葡萄糖、甘露糖醇、蔗糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、麦芽糖等等，特别优选葡萄糖和甘露糖醇。

因此得到的化合物(I)可以通过常规分离技术(例如，过滤，离心等等)从该溶液分离以及通过常规纯化技术(例如，溶剂洗涤等等)纯化。

因为由此得到的化合物(I)(特别是其结晶)具有，例如，高纯度和优越的固体稳定性等等，所以它能被用作药物制剂。

根据干燥的程度，化合物(I)结晶可以具有不同的含水率。无水的化合物包含在本发明范围中。

化合物(Ia)可以转变为二碱金属盐如二钠盐、二钾盐、二铵盐等等。化合物(Ia)的二碱金属盐可以通过例如加入如氢氧化钠、碳酸钠、乙酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、碳酸钾、乙酸钾、碳酸氢钾、氨水、碳酸铵、乙酸铵等等来碱化含化合物(Ia)的溶液[例如，制备后立即含化合物(Ia)的反应溶液(不含亲水溶剂时，加入亲水溶剂)，溶于亲水溶剂的化合物(Ia)溶液，等等]而制备。亲水溶剂包括例如有机酸如乙酸、丙酸、乳酸、琥珀酸等，腈如乙腈等，酮如丙酮等，醇如甲醇、乙醇等，醚如二氧六环、四氢呋喃等等，和亲水的有机溶剂如其混合溶剂等，以及与水的混合溶剂。其中，优选乙酸、丙酸、乙腈、甲醇、乙醇、乳酸和它们与水的混合溶剂，特别优选乙腈、甲醇、乙醇、乙酸、丙酸、和它们与水的混合溶剂。

化合物(Ia)的二钠盐的结晶可以通过例如从上述亲水溶剂中结晶化合物(Ia)的二钠盐而制备。

结晶进行时化合物(Ia)的二钠盐的量和所使用的溶剂没有特别的限制，只要可以进行结晶即可。每重量份二钠盐所使用的溶剂通常为2-100重量份，优选3-50重量份，更优选5-30重量份。可以通过结晶技术如冷却上述溶液，降低溶剂和水的量，加入晶种等进行结晶。

通过上述结晶得到的结晶通过常规分离技术(例如，过滤，离心等等)从该溶液分离以及可以通过常规纯化技术(例如，溶剂洗涤等等)纯化。

因为由此得到的化合物(Ia)二钠盐结晶具有高纯度，所以它能被用于制备化合物Ia)等。例如，当制备化合物(Ia)时，化合物(Ia)作为其二钠盐结晶，将该结晶分离并且溶于上述亲水溶剂，在其中加入盐酸、硫酸、硝酸等而转变为化合物(Ia)，因此可以得到高纯度和高产量的化合物(Ia)。

因为化合物(I)具有优良的抗菌活性以及广谱的抗菌活性并且显示低毒性，所以它能被安全地用于预防或者治疗各种哺乳动物(例如，小鼠，大鼠，兔，狗，猫，牛，猪等)包括人类由病菌所引起的各种疾病，如窦肺感染和尿路感染。化合物(I)用作抗菌剂时，靶细菌没有特别的限制，只要化合物(I)对其显示抗菌活性即可，各种各样的革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌都可以为靶细菌。化合物(I)对葡萄球菌和对二甲氧基苯青霉素抗药的金黄色葡萄球菌(MRSA)显示特别优良的抗菌活性。人们认为化合物(I)在生物有机体中转变为下式表示的化合物：

[下文简单地称为化合物(II)]并且显示抗菌活性。

化合物(I)(特别是它的结晶)显示优良的稳定性并且可以像已知的青霉素制剂和头孢菌素制剂一样作为注射剂、胶囊、片剂或颗粒胃肠外或口服给药，特别优选作为注射剂给药。当作为注射剂给药时，化合物(I)的剂量通常为例如每1公斤感染上述病菌的人类或动物体重0.5-80mg/天，更优选2-40mg/天，通常给药以分剂量形式每天2或3次。

当被用作注射剂时，化合物(I)结晶和溶剂(例如，蒸馏水，生理盐水，5％葡萄糖溶液等)通常分别地包装从而提供一个注射剂，给药时化合物(I)结晶被溶于溶剂。化合物(I)也可与药物输注溶液如临床营养液等混合后给药。优选的注射剂通常含pH值调节剂，其例子包括碱金属或碱土金属的碳酸盐、磷酸盐、醋酸盐和柠檬酸盐(例如，碳酸盐如碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钙等，磷酸盐如磷酸三钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢钙、磷酸二氢钙等，醋酸盐如乙酸钠、乙酸钾、乙酸钙等，柠檬酸盐如柠檬酸二钠、柠檬酸钠、柠檬酸二氢钠、柠檬酸钙等)，碱性氨基酸(例如，L-精氨酸、L-赖氨酸等)，N-甲基葡糖胺等，而且其中更优选含碱金属或碱土金属的碳酸盐和碱性氨基酸的注射剂。L-精氨酸是特别优选的。上述的pH值调节剂的用量为能使注射剂溶液在使用时的pH值为4到10，优选4.5到8.5，更优选5.0到8.0，还优选5.0到7.5的量。当使用L-精氨酸时，其用量相对于活性组分通常为0.1当量-5.0当量，优选2.0-3.5当量，更优选2.5-3.2当量。这些pH值调节剂通常的包装状态为溶于溶剂的状态。然而，它们可以与化合物(I)结晶混合并且包装，或可以与化合物(I)结晶和溶剂分开包装，在使用时混合。而且，在上述注射剂中加入具有还原性的增溶剂可以增强注射溶液的使用稳定性。具有还原性的增溶剂的例子包括亚硫酸钠、连二亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸等。这些还原剂的用量相对于活性组分通常为0.001当量-2.0当量，优选0.01-0.5当量，更优选0.05-0.2当量。这些具有还原性的增溶剂通常的包装状态为分散在溶剂中的状态。然而，它们可以与化合物(I)结晶混合，可以与pH值调节剂混合，或可以与化合物(I)结晶、pH值调节剂以及溶剂分开包装，并且在使用时混合。

按照化合物(Ia)计算，注射制剂中化合物(I)结晶的含量是100-2000毫克，优选200-1000毫克。

以化合物(I)结晶作为1计算，溶剂在注射制剂中的重量比是10-500，优选20-300。按照化合物(Ia)计算，相对于1当量化合物(I)结晶，pH值调节剂的比例通常是1.0-3.0当量。

本发明药物组合物可以只含化合物(I)，或者可以含有通常用于药物试剂的载体(例如，注射剂中的溶剂和上述pH值调节剂)等。

化合物(I)中，优选其中X是CH₃COOH或CH₃CH₂COOH的化合物及其结晶。当X是CH₃COOH时，在粉末X射线衍射中，特别优选具有近衍射角为16.32、19.06、19.90、20.98和23.24°的峰的化合物和近衍射角为11.82、17.80、19.32、20.00、21.20、21.78、22.94、24.10和27.02°的峰的化合物。当X为CH₃CH₂COOH时，特别优选的化合物为在粉末X射线衍射中具有近衍射角为16.30、18.84、19.70、21.80和23.18°的峰的化合物。上述衍射角中的“近”表示±0.2°。

现在公开用作本发明原料的化合物(Ia)的制备方法。

式(III)，(V)和(VII)中，Ph表示苯基，BH表示二苯甲基，式(VIII)中，BH表示二苯甲基，式(IV)中，M表示碱金属原子如锂、钠、钾等或碱土金属原子如镁、钙、钡等，以及i-BuOH表示异丁醇。

首先，化合物(III)和式(IV)化合物[下文简单地称为化合物(IV)]反应得到式(V)化合物[下文简单地称为化合物(V)]。化合物(III)为已知化合物，公开于，例如，J.Org.Chem.1989，54，4962-4966。该反应通常在溶剂的存在下进行，优选的溶剂为惰性溶剂如烃(例如甲苯等)、酯(例如乙酸乙酯等)、酮(例如丙酮等)、卤代烃(例如氯仿、二氯甲烷等)、醚(例如乙醚、四氢呋喃、二氧六环等)、腈(例如乙腈等)、醇(例如甲醇、乙醇、正丙醇等)、酰胺(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等)、亚砜(例如二甲亚砜等)等。可以使用这些溶剂中的2或3种的混合物，也可以使用上述溶剂与水的混合物作为溶剂。其中，优选四氢呋喃、乙腈、甲醇等，特别优选的四氢呋喃、甲醇以及二者的混合物。化合物(IV)的用量通常为每1摩尔化合物(III)1到3摩尔，优选1到2摩尔。反应温度为-40℃到80℃，优选-20℃到50℃。反应时间为5分钟-12小时，优选30分钟-8小时。如果需要，可在该反应中加入碱和盐，它们可以加速该反应。上述碱和盐的例子包括无机碱如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠等，醇盐如甲醇钠、叔丁醇钾、叔丁醇钠等，以及有机胺如三烷基胺(例如三乙胺、乙基二异丙基胺等)。其中，优选氢氧化钠和甲醇钠。季铵盐如四丁铵盐等作为盐使用。

化合物(VII)可以通过化合物(V)和用于形成季铵的试剂如式(VI)表示的碘代甲烷[下文简单地称为化合物(VI)]等反应制备。该反应通常在溶剂的存在下进行。溶剂的例子通常包括惰性溶剂如烃(例如甲苯等)、酮(例如丙酮等)、卤代烃(例如氯仿、二氯甲烷等)、醚(例如乙醚、四氢呋喃、二氧六环等)、腈(例如乙腈等)、醇(例如甲醇、乙醇、正丙醇等)、酰胺(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等)、亚砜(例如二甲亚砜等)等。可以使用这些溶剂中的2或3种的混合物，也可以使用上述溶剂与水的混合物作为溶剂。其中，优选四氢呋喃、二甲基甲酰胺、乙腈和二甲亚砜，特别优选四氢呋喃和二甲基甲酰胺。用于形成季铵的试剂的量通常为每1摩尔化合物(V)1-20摩尔，优选1-10摩尔。反应温度为-5℃到80℃，优选0℃到50℃。反应时间为30分钟-48小时，优选2小时-20小时。

式(VIII)表示的化合物[下文简单地称为化合物(VIII)]可以通过使化合物(VII)氨基脱保护制备。相对于化合物(VII)，该反应使用1-10摩尔，优选1-5摩尔五氯化磷和1-10摩尔，优选1-5摩尔叔胺(例如吡啶、N，N-二甲苯胺、甲基吡啶、二甲基吡啶等)进行，该化合物在惰性溶剂中反应并且与2-200摩尔，优选3-125摩尔的醇(例如甲醇、乙醇、异丁醇、异丙醇等)反应。优选的叔胺的例子为吡啶和N，N-二甲苯胺，并且特别优选吡啶。优选的醇的例子为甲醇、乙醇和异丁醇，并且特别优选甲醇和异丁醇。惰性溶剂的例子通常包括烃(例如甲苯等)、酯(例如乙酸乙酯等)、酮(例如丙酮等)、卤代烃(例如氯仿、二氯甲烷等)、醚(例如乙醚、四氢呋喃、二氧六环等)、腈(例如乙腈等)、酰胺(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等)、和亚砜(例如二甲亚砜等)。2或3种上述溶剂的混合物可以用作溶剂。其中，优选卤代烃如氯仿，二氯甲烷等，特别优选二氯甲烷。反应温度为-40℃到80℃，优选-20℃到50℃。反应时间为30分钟-48小时，优选2小时-24小时。

然后，化合物(VIII)羧基脱保护，得到式(IX)化合物[下文简单地称为化合物(IX)]。该反应通常在溶剂中使用酸进行。溶剂的例子通常包括惰性溶剂如烃(例如甲苯等)、酮(例如丙酮等)、卤代烃(例如氯仿、二氯甲烷等)、醚(例如乙醚、四氢呋喃、二氧六环等)、腈(例如乙腈等)、酯(例如乙酸乙酯等)、醇(例如甲醇、乙醇、正丙醇等)、酰胺(例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等)、亚砜(例如二甲亚砜等)等。2或3种上述溶剂的混合物可以用作溶剂。其中，优选卤代烃如氯仿、二氯甲烷等，腈如乙腈等，和酯如乙酸乙酯等，并且特别优选乙腈、乙酸乙酯和二者的混合物。作为酸，优选盐酸或三氟乙酸，并且特别优选盐酸。相对于化合物(VIII)，使用的酸量为2-200摩尔，优选3-50摩尔。在这种情况下，优选地加入作为阳离子净化剂的苯甲醚，苯酚等加速反应。反应温度为-40℃到80℃，优选-20℃到50℃。反应时间为30分钟-48小时，优选2小时-24小时。

通过该制备方法得到的化合物(IX)通常为一个或两个酸的加成盐，并且可以作为一种或两种酸的加成盐从有机溶剂、水或二者的混合物得到。作为一种或两种酸的加成盐的酸，可以为无机酸和有机酸。其中，优选盐酸，硫酸和三氟乙酸，特别优选盐酸。使用的有机溶剂的例子为上述惰性溶剂。其中，优选乙腈，乙酸乙酯，乙醇，二氧六环和四氢呋喃，特别优选乙腈，乙酸乙酯和乙醇。

然后，化合物(IX)和式(X)表示的化合物[下文简单地称为化合物(X)]反应得到化合物(Ia)。

作为化合物(IX)，优选使用一个酸的加成盐的结晶。在该反应中，通常1-5摩尔，优选1-2摩尔化合物(X)与1摩尔化合物(IX)在可以俘获反应期间产生的酸的除酸剂的存在下，在不抑制反应的溶剂中反应。溶剂，优选例如，四氢呋喃，乙腈，二氧六环，丙酮和这些溶剂与水的混合物，并且特别优选乙腈，四氢呋喃，乙腈与水的混合物，和四氢呋喃与水的混合物。除酸剂的例子包括通常使用的盐(例如碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、乙酸钠、乙酸钾、磷酸钠等)、叔胺(例如三乙胺、三丙胺、三丁胺、乙基二异丙基胺、吡啶、二甲基吡啶、N，N-二甲苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吡咯烷、N-甲基吗啉等)、环氧烷(例如环氧丙烷、表氯醇等)等。可以使用其中两或三种的混合物。其中，优选碳酸氢钠，碳酸钠，乙酸钠，三乙胺或乙酸钠与三乙胺的组合，并且特别优选的碳酸氢钠，乙酸钠，三乙胺或乙酸钠与三乙胺的组合。在该反应中，二氯磷酰基依次水解成为膦酰基。反应温度为-40℃到80℃，优选-20℃到50℃。反应时间为20分钟-48小时，优选30分-24小时。化合物(X)可以通过JP-A-255772公开的方法，从相应式(XI)表示的化合物[下文简单地称为化合物(XI)]和五氯化磷合成。

在该反应中，1-5摩尔，优选1到3摩尔五氯化磷通常与1摩尔化合物(XI)在溶剂中起反应。作为溶剂，优选四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醚、二氧六环、甲苯和这些溶剂的混合物，并且特别优选四氢呋喃、乙酸乙酯、异丙醚和这些溶剂的混合物。反应温度为-40℃到60℃，优选-10℃到25℃。反应时间为10分钟-8小时，优选20分-4小时。对于反应后的分离，可以使用的一般方法包括用水萃取，或在反应混合物中直接加入溶解度低的溶剂或溶解度低的溶剂和水，得到固体沉淀的方法。被加入的溶解度低的溶剂优选甲苯、异丙醚、正己烷、环己烷或这些溶剂的混合物，特别优选甲苯、异丙醚、正己烷或这些溶剂的混合物。

实施例

本发明通过下列参考例，实施例和实验例子被详细说明，它们仅仅是实施例并不限制本发明。本发明可以在不背离本发明范围内修改。

在下面参考例，实施例和实验例中，室温表示10-25℃。

使用YANAKO MP-J3测量熔点。¹H-NMR光谱使用四甲基硅烷(CDCl₃，DMSO-d₆)或3-三甲基甲硅烷基-丙酸钠-2，2，3，3-d₄(D₂O)作为内标准，并且使用VARIAN Gemini-200(200 MHz)测量，所有δ值使用ppm显示。

超声波处理使用SHARP UT-204(水浴型)和TAITEC VP-60(角锥形)进行。

硅胶柱使用kieselgel 60(70-230目，Merck & Co.，Inc.生产)。HPLC柱填充物质ODS由YMC Co.，Ltd.生产，以及Diaion HP-20SS和SP-207由Mitsubishi Chemical Corporation生产。

柱层析洗脱在TLC(薄层色谱法)或HPLC监控下进行。在TLC监控中，Merck & Co.生产的60F254被用作TLC板，展开剂使用使目的化合物Rf值在0.1-0.8范围内的溶剂或相似的其他溶剂，以及检测方法使用UV检测方法。对于混合溶剂，括号中的数字值是各溶剂体积混合比。溶液的％表示在100毫升溶液中的g(克)的数目。在参考例和实施例中，下列符号表示的意思如下。

s：单峰

d：双峰

t：三重峰

q：四重峰

ABq： AB型四重峰

dd：双重双重峰

m：多重峰

J：偶合常数

实施例1

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸与乙酸的结晶

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(100毫克，0.151毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(0.5毫升)和乙酸(0.5毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解。将该溶液在室温下放置过夜。用刮勺研磨沉淀的晶体并且过滤收集。将该结晶用注射用蒸馏水(1.2毫升)洗涤。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重，得到种晶。

产量：79毫克(73％)

熔点：221-223℃(分解)

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(350毫克，0.51毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(2.38毫升)和乙酸(2.38毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解。加入种晶，在室温下进行4小时的结晶，接着在冰箱中放置过夜。加入注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)的混合物(0.8毫升)，并且用刮勺研磨沉淀的结晶，过滤收集，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(0.8毫升)洗涤3次以及用注射用蒸馏水(1.0毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：260毫克(68％)

熔点：221-223℃(分解)

元素分析计算值C₂₄H₂₅N₈O₁₀S₄P·1.0H₂O：C 37.79，H 3.57，N 14.69，P4.06。

实测值：C 37.97，H 3.30，N 14.37，P 3.88。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.24(3H，t，J＝7Hz)，1.91(3H，s)，3.58，3.95(2H，ABq，J＝17Hz)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，4.34(3H，s)，5.32(1H，d，J＝5Hz)，5.92(1H，dd，J＝5&8Hz)，8.51(2H，d，J＝6Hz)，8.99(3H，m)，9.30(1H，m)，9.70(1H，d，J＝8Hz)。

IR(KBr)cm^-1：3202，1755，1668，1645，1537，1392，1273，1039。

在图1中，显示了该实施例得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

实施例2

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物与乙酸的结晶

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸(60克，87.6毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(408毫升)和乙酸(408毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解。加入实施例1得到的种晶，在室温下进行5小时的结晶，接着在冰箱中放置过夜。通过过滤收集沉淀的结晶，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(68毫升)洗涤两次以及用注射用蒸馏水(85毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：44.5克(68％)

熔点：221-223℃(分解)

元素分析计算值C₂₄H₂₅N₈O₁₀S₄P·1.0H₂O：C 37.79，H 3.57，N 14.69，P 4.06.实测值：C 37.97，H 3.30，N 14.37，P 3.88。

IR(KBr)cm^-1：3202，1755，1668，1645，1537，1392，1273，1039。

实施例3

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(58克，84.7毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(208毫升)和乙酸(208毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解。加入实施例1得到的种晶，将该混合物在室温下进行30分钟的超声作用(角锥形超声波设备)。加入注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(108毫升)，研磨该结晶以及将该混合物在室温下搅拌1小时。加入注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(108毫升)，研磨该结晶以及将该混合物在室温下搅拌1小时。重复上述步骤，接着在冰箱中放置过夜。通过过滤收集沉淀的结晶，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(120毫升)洗涤两次以及用注射用蒸馏水(120毫升)洗涤5次。使用五氧化二磷作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：42.6克(68％)

熔点：221-223℃(分解)

实测值：C 37.97，H 3.30，N 14.37，P 3.88。

IR(KBr)cm^-1：3202，1755，1668，1645，1537，1392，1273，1039。

实施例4

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(2.0克，2.92毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(7.5毫升)和乙酸(7.5毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解。将该溶液室温放置16小时，进行结晶。通过过滤收集沉淀的结晶，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(5毫升)洗涤两次以及用注射用蒸馏水(5毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：1.41克(65％)

熔点：221-223℃(分解)

实测值：C 37.97，H 3.30，N 14.37，P 3.88。

IR(KBr)cm^-1：3202，1755，1668，1645，1537，1392，1273，1039。

实施例5

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物与丙酸的结晶

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(100毫克，0.15毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(0.5毫升)和丙酸(0.5毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解。在搅拌及室温下进行结晶2.5小时。通过过滤收集沉淀的结晶，并且用注射用蒸馏水(0.5毫升)洗涤。使用五氧化二磷作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：97毫克(88％)

熔点：227-230℃(分解)

元素分析计算值C₂₅H₂₇N₈O₁₀S₄P·1.0H₂O：C 38.66，H 3.76，N 14.16。

实测值：C 38.51，H 3.76，N 14.16。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：0.99(3H，t，J＝7.6Hz)，1.24(3H，t，J＝7Hz)，2.21(2H，q，J＝7.6Hz)，3.59，3.95(2H，ABq，J＝18Hz)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，4.33(3H，s)，5.31(1H，d，J＝5Hz)，5.91(1H，dd，J＝5&8Hz)，8.52，8.98(每个2H，d，J＝6Hz)，9.00(1H，s)，9.24(1H，m)，9.68(1H，d，J＝8Hz)。

IR(KBr)cm^-1：3088，1757，1668，1537，1392，1234，1190，1043。

在图2中，显示了该实施例得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(2θ)以及垂直轴显示峰强度。

实施例6

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物与乙腈的结晶

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(100毫克，0.15毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(1.2毫升)和乙腈(1.2毫升)的混合物中，并且通过超声作用溶解以及温热至50℃。将该溶液在室温下放置过夜。通过过滤收集沉淀的结晶，用水/乙腈(4∶1)洗涤，以及空气干燥至恒重。

产量：63毫克(59％)

熔点：210-215℃(分解)

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.23(3H，t，J＝7Hz)，2.07(3H，s)，3.58，3.95(2H，ABq，J＝17Hz)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，4.33(3H，s)，5.32(1H，d，J＝5Hz)，5.91(1H，dd，J＝5&8Hz)，8.51(2H，d，J＝6Hz)，8.99(3H，m)，9.34(1H，m)，9.71(1H，d，J＝8Hz)。

在图3中，显示了该实施例得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(3θ)以及垂直轴显示峰强度。

实施例7

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐

搅拌下将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(400毫克，0.834毫摩尔)溶于蒸馏水(24毫升)。搅拌及冰冷却下，加入2M乙酸钠水溶液(4.18毫升)。将2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氯(294毫克，0.836毫摩尔)溶于乙腈(2毫升)，并且立刻在搅拌及冰冷却下加入到上述反应混合物中。将该混合物在室温下搅拌1小时15分。加入乙酸乙酯(20毫升)分配该反应混合物。分离的水层通过膜滤器(0.45m)。减压下将滤液浓缩至接近干燥。将残存固相溶于蒸馏水(4毫升)。加入乙醇(4毫升)并且搅拌该混合物。结晶逐渐地沉淀。逐渐地加入乙醇(4毫升)促进晶体生长。将该混合物冰冷却30分钟后，通过过滤收集沉淀的结晶。将该结晶依次用蒸馏水/乙醇(1∶2，4毫升)和乙醇(4毫升)洗涤，并且在漏斗上空气干燥。

产量：554毫克(91％)

熔点：217-222℃(分解)

¹H-NMR(DMSO-d₆∶D₂O＝8∶2)δ：1.27(3H，t，J＝7Hz)，3.40，3.89(2H，ABq，J＝17Hz)，4.24(2H，q，J＝7Hz)，4.30(3H，s)，5.23(1H，d，J＝5Hz)，5.79(1H，d，J＝5Hz)，8.37，8.77(每个2H，d，J＝7Hz)，8.66(1H，s)。

IR(KBr)cm^-1：3184，1761，1643，1614，1537，1390，1346，1190，1041。

在图4中，显示了该实施例得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，40kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(4θ)以及垂直轴显示峰强度。

实施例8

搅拌下将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸盐(60克，125毫摩尔)溶于蒸馏水(3.6L)。搅拌及冰冷却下，加入2M乙酸钠水溶液(700毫升)。将2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氯(52.8克，150毫摩尔)溶于乙腈(300毫升)，并且立刻在搅拌及冰冷却下加入上述反应混合物。将该混合物在室温下搅拌1小时。加入乙酸乙酯(3L)分配该反应混合物。分离的水层通过膜滤器(0.45μm)。减压下将滤液浓缩至600毫升。加入乙醇(600毫升)，结晶逐渐地沉淀。逐渐地加入乙醇(600毫升)并且将该混合物冰冷却30分钟。过滤收集沉淀的结晶并且将该结晶依次用蒸馏水/乙醇(1∶2，450毫升)和乙醇(600毫升)洗涤。洗涤后，将其在漏斗上空气干燥。

产量：128.7克(定量)

熔点：217-222℃(分解)

IR(KBr)cm^-1：3184，1761，1643，1614，1537，1390，1346，1190，1041。

实施例9

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸盐与乙酸的结晶

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸盐(4.0克，5.84毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(12毫升)中，加入2M乙酸钠水溶液(5.84毫升)，将该混合物溶解。加入乙酸(24毫升)，然后加入1M硫酸(5.78毫升)并且加入种晶。将该混合物在室温下放置24小时。研磨沉淀的晶体并且过滤收集。将得到的结晶用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(4毫升)洗涤3次以及用注射用蒸馏水(4毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：1.48克(38％)

熔点：221-223℃(分解)

元素分析计算值：C₂₄H₂₅N₈O₁₀S₄P·1.0H₂O：C 37.79，H 3.57，N 14.69，P4.06。

实测值：C 37.97，H 3.30，N 14.37，P 3.88。

IR(KBr)cm^-1：3202，1755，1668，1645，1537，1392，1273，1039。

实施例10

除注射用蒸馏水改为5％葡萄糖注射液以外，用和实施例9一样的方法得到标题化合物。

产量：1.34克(35％)

实施例11

除注射用蒸馏水改为20％右旋甘露糖醇注射液以外，用和实施例9一样的方法得到标题化合物。

产量：1.88克(48％)

实施例12

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(4.0克，5.84毫摩尔)悬浮在5％葡萄糖注射液(12毫升)中，加入2M乙酸钠水溶液(5.84毫升)用于溶解。加入乙酸(24毫升)，然后加入1M硫酸(5.78毫升)并且加入种晶。将该混合物在室温下搅拌24小时。通过过滤收集沉淀的结晶，将得到的结晶用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(4毫升)洗涤3次以及用注射用蒸馏水(4毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：2.01克(52％)

物理化学数据与实施例1中的相同。

实施例13

除2M乙酸钠水溶液改为2M乙酸铵水溶液以外，用和实施例12一样的方法得到标题化合物。

产量：1.44克(37％)

实施例14

除注射用蒸馏水改为20％右旋甘露糖醇注射液以外，用和实施例12一样的方法得到标题化合物。

产量：2.33克(60％)

实施例15

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(10克，14.6毫摩尔)悬浮在5％葡萄糖注射液(30毫升)中，加入2M乙酸钠水溶液(14.6毫升)用于溶解。加入乙酸(60毫升)，然后加入1M硫酸(14.46毫升)并且加入种晶。将该混合物在室温下搅拌2小时并且放置22小时。研磨沉淀的晶体并且过滤收集。将得到的结晶用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(10毫升)洗涤3次以及用注射用蒸馏水(10毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：6.90克(71％)

物理化学数据与实施例1中的相同。

实施例16

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(10克，14.6毫摩尔)悬浮在注射用蒸馏水(30毫升)中，加入2M乙酸钠水溶液(14.6毫升)用于溶解。加入乙酸(60毫升)，然后加入1M硫酸(14.46毫升)并且加入种晶。将该混合物在室温下搅拌5小时并且放置1小时。过滤收集沉淀的结晶。将得到的结晶用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(10毫升)洗涤3次以及用注射用蒸馏水(10毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：5.55克(57％)

物理化学数据与实施例1中的相同。

实施例17

除注射用蒸馏水改为5％葡萄糖注射液以外，用和实施例16一样的方法得到标题化合物。

产量：5.70克(59％)

实施例18

除注射用蒸馏水改为20％右旋甘露糖醇注射液以外，用和实施例16一样的方法得到标题化合物。

产量：6.21克(64％)

实施例19

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(80克，116.8毫摩尔)逐渐地加入20％右旋甘露糖醇注射液(160毫升)和2M乙酸钠水溶液(116.8毫升)的混合物，使其溶解。加入乙酸(400毫升)，然后加入1M硫酸(115.7毫升)，并且加入种晶。将该混合物在室温下搅拌3小时。过滤收集沉淀的结晶。将得到的结晶用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(80毫升)洗涤3次以及用注射用蒸馏水(160毫升)洗涤5次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该结晶在减压下干燥，直到它们达到恒重。

产量：50克(64％)

物理化学数据与实施例1中的相同。

实施例20

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(1600克，2.34摩尔)溶于乙酸钠(428.2克，5.14摩尔)，右旋甘露糖醇(425.7克，2.34摩尔)和注射用蒸馏水(6.1L)的溶液，并且加入乙酸(8L)和2M硫酸(1864毫升，3.73摩尔)。将该混合物在室温下搅拌30分钟，并且加入种晶(16克)。将该混合物进一步搅拌2小时。通过过滤收集得到的结晶，并且用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(20L)洗涤。将该结晶通流干燥直到它们达到恒重。

产量：1390克(74％)

实施例21

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(94.8克，138毫摩尔)溶于25％氨水(10.4克，153毫摩尔)和注射用蒸馏水(406毫升)，并且加入乙酸(500毫升)和10％硫酸(88.3克，90毫摩尔)溶液。加入种晶(80毫克)并且将该混合物在室温下搅拌2.5小时。此后5小时内每30分将该混合物一次，并且放置过夜。加入注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)的混合物(500毫升)。通过过滤收集得到的结晶，并且用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(200毫升)洗涤3次。将该结晶通流干燥直到它们达到恒重。

产量：75.5克(71.5％)

物理化学数据与实施例1中的相同。

实施例22

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(10克，14.6摩尔)溶于25％氨水(2.18克，32.1毫摩尔)，右旋甘露糖醇(2.66克，14.6摩尔)和注射用蒸馏水(38毫升)的，并且加入乙酸(50毫升)和2M硫酸(1 2毫升，24.0摩尔)。将该混合物在室温下搅拌30分钟，并且加入种晶(0.1克)。将该混合物进一步搅拌1.5小时。过滤收集得到的结晶，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物洗涤两次，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶4)混合物(50毫升)洗涤两次，以及用乙醇/乙酸(1∶1)混合物(50毫升)洗涤一次。将该结晶通流干燥直到它们达到恒重。

产量：6.53克(60％)

物理化学数据与实施例1中的相同。

实施例23

将根据参考例25的柱层析得到的的3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐水溶液减压浓缩至52.2克(含量19.2％，13.7毫摩尔)。在该溶液中加入乙酸(52.2毫升)和1M硫酸(27.4毫升，27.4毫摩尔)。加入种晶，并且将该混合物在室温下搅拌5小时并且放置1小时。过滤收集结晶，并且用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(100毫升)和注射用蒸馏水(200毫升)于洗涤。将该结晶通流干燥直到它们达到恒重。

产量：7.02克(68.8％)

实施例24

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物

在乙酸钠(1001克，12.2摩尔)的注射用蒸馏水(15L)溶液中加入3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-2-(5-磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸盐(3740克，5.46摩尔)溶解。混合物通过0.2μm膜滤器，用注射用蒸馏水(9L)洗涤。在滤液和洗涤液的混合物中加入乙酸(28L)，然后加入2M硫酸(4.35L)和种晶(3.74克)。将该混合物在30℃搅拌5小时。过滤收集沉淀的结晶，用注射用蒸馏水/乙酸(1∶1)混合物(75L)，注射用蒸馏水/乙酸(1∶4)混合物和乙醇/乙酸(1∶1)混合物(19L)洗涤。通过-5℃露点的空气，干燥结晶。

产量：2011克(49％)

在图5中，显示了该实施例得到的化合物的X射线衍射谱(Cu，50kV，50mA)，其中水平轴显示衍射角(5θ)以及垂直轴显示峰强度。

参考例1

7β-氨基-3-[4-(4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯

将7β-苯基乙酰氨基-3-[4-(4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(4.15克，6.0毫摩尔)溶于二氯甲烷(60毫升)，在冰冷却下依次加入吡啶(0.726毫升，9.0毫摩尔)和五氯化磷(1.87克，9.0毫摩尔)。将该混合物在冰-冷却下搅拌1小时。将异丁醇(8.0毫升)立刻加入反应混合物，将该混合物在室温下搅拌1小时。滴加异丙醚(300毫升)，将该混合物搅拌10分钟。通过倾析除去溶剂。将残余油悬浮在乙酸乙酯(600毫升)中，将该混合物搅拌15分钟后，滴加碳酸氢钠饱和水溶液(200毫升)。分离地得到有机层，用硫酸镁干燥，并且过滤。减压蒸除溶剂。在残余物中加入异丙醚(60毫升)，过滤收集沉淀的粉末，用异丙醚(20毫升)洗涤，减压下干燥。

产量：3.18克(95％)

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：3.51，3.77(2H，ABq，J＝18Hz)，4.82(1H，d，J＝5Hz)，5.02(1H，d，J＝5Hz)，7.01(1H，s)，7.2-7.5(10H，m)，7.71(1H，s)，7.73，8.68(每个2H，d，J＝6Hz)。

参考例2

7β-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯

将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(3.0克，5.37毫摩尔)悬浮在四氢呋喃(40毫升)中，加入二丁基二碳酸酯(2.34克，10.7毫摩尔)。将该混合物在室温下搅拌18小时并且减压浓缩。将该残余物溶于乙酸乙酯(30毫升)并且上硅胶柱(30克)。收集含标题化合物的用乙酸乙酯洗脱的流分，减压蒸除溶剂。在残余物中加入异丙醚(50毫升)，过滤收集沉淀的粉末，用异丙醚(10毫升)洗涤，减压下干燥。

产量：1.4克(40％)

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.45(9H，s)，3.51，3.74(2H，ABq，J＝18Hz)，5.04(1H，d，J＝5Hz)，5.40(1H，d，J＝10Hz)，5.69(1H，dd，J＝5&10Hz)，7.00(1H，s)，7.1-7.5(10H，m)，7.70-7.74(3H，m)，8.67(2H，d，J＝6Hz)。

参考例3

7β-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯碘化物

将7β-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(1.3克，1.97毫摩尔)溶于二甲基甲酰胺(2.6毫升)中，加入碘代甲烷(1.23毫升，19.7毫摩尔)。将该混合物在室温下搅拌5小时。减压浓缩反应混合物，在残余物中加入乙醚(100毫升)。将该混合物搅拌10分。通过过滤收集沉淀的粉末，用乙醚(20毫升)洗涤并且减压干燥。

产量：1.57克(99％)

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.41(9H，s)，3.68，3.97(2H，ABq，J＝18Hz)，4.34(3H，s)，5.29(1H，d，J＝5Hz)，5.67(1H，dd，J＝5&8.6Hz)，6.96(1H，s)，7.1-7.5(10H，m)，8.16(1H，d，J＝8.6Hz)，8.53，9.00(每个2H，d，J＝6.6Hz)，9.02(1H，s)。

参考例4

7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸·二盐酸化物

将7β-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯碘化物(1.3克，1.62毫摩尔)溶于乙腈(3毫升)，并且加入浓盐酸(3毫升)。将该混合物在35-40℃下搅拌2小时。减压浓缩反应混合物，在残余物中加入乙醇(30毫升)。通过过滤收集沉淀的粉末，用乙醇(10毫升)洗涤并且减压干燥。

产量：239毫克(31％)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：3.82，3.96(2H，ABq，J＝18Hz)，4.35(3H，s)，5.27(1H，d，J＝5Hz)，5.40(1H，d，J＝5Hz)，8.61，9.06(每个2H，d，J＝6Hz)，9.16(1H，s)。

参考例5

4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐

将4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇(194克，1.0摩尔，粉末)加入8N氢氧化钠水溶液(1.25L，10摩尔)，并且将该混合物搅拌30分钟。通过过滤收集沉淀的结晶，并且用8N氢氧化钠水溶液(0.4L)洗涤。用异丙醇(200毫升)将得到的湿结晶重结晶，得到黄色结晶状标题化合物(166克，0.77摩尔)。

产率：77％。

熔点：272℃(分解)。

元素分析计算值：C₈H₅N₂S₂Na·0.75H₂O：C 41.82，H 2.85，N 12.19。

实测值：C 41.78，H 2.98，N 12.11。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：7.35(1H，s)，7.71(2H，d，J＝6.2Hz)，8.48(2H，d，J＝6.2Hz)。

参考例6

4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐

将4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇(194克，1.0摩尔，粉末)悬浮在甲醇(1L)中，在25℃加入甲醇钠粉末(71.5克，1.2摩尔)。将该混合物搅拌30分钟并且减压浓缩至50-60毫升。将该混合物在冰箱中保存过夜。过滤收集沉淀的结晶，在40℃及五氧化二磷的存在下真空干燥，得到标题化合物(160克，0.74摩尔)。

产率：74％。

参考例7

7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[(甲磺酰)氧基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯

将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-羟基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(500克，1摩尔)溶于乙腈(2L)，在-40℃及10分钟内滴加乙基二异丙基胺(183毫升，1.05摩尔)。然后在10分钟内滴加甲磺酰氯(86毫升，1.1摩尔)，将该混合物在-40℃搅拌40分钟。将该反应混合物倒入冰水(8L)，过滤收集沉淀。将该沉淀用水(2L)和乙酸乙酯(300毫升)洗涤，减压干燥，得到浅黄色结晶状标题化合物(544克，0.94摩尔)。

产率：94％。

熔点：157℃。

元素分析计算值：C₂₉H₂₆N₂O₇S₂：C 60.19，H 4.53，N 4.84，S 11.08。

实测值：C 59.86，H 4.72，N 4.73，S 10.77。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：2.79(3H，s)，3.48-3.75(4H，m)，5.02(1H，d，J＝5.2Hz)，5.90(1H，dd，J＝5.2Hz，8.8Hz)，6.24(1H，d，J＝8.8Hz)，6.93(1H，s)，7.24-7.41(15H，m)。

参考例8

将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-羟基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(500克，1摩尔)溶于丙酮(2L)，在-20℃及10分钟内滴加甲磺酰氯(86毫升，1.1摩尔)。然后在30分钟内滴加乙基二异丙基胺(183毫升，1.05摩尔)，将该混合物在-20℃搅拌40分钟。将该反应混合物倒入冰水(8L)，过滤收集沉淀。将该沉淀用水(2L)和乙酸乙酯(300毫升)洗涤，减压干燥，得到标题化合物(523克，0.90摩尔)。

产率：90％。

参考例9

7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯

将根据参考例5方法制备的4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇钠盐(194克，1摩尔)悬浮在四氢呋喃(1.5L)中，在冰冷却下在30分钟内滴加溶于四氢呋喃(3.0L)的7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[(甲磺酰)氧基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(1 96克，0.91摩尔)。将该混合物在0℃搅拌2小时，加入饱和盐水(7L)。用乙酸乙酯(5L)萃取该混合物。将有机层用饱和盐水(5L)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压浓缩溶剂，得到结晶状标题化合物。将该结晶悬浮在乙酸乙酯(0.5L)中，使用玻璃过滤器过滤收集并且用甲醇(1L×2)洗涤。将该结晶真空干燥，得到标题化合物(412克，0.71摩尔)。

产率：78％。

熔点：134℃。

元素分析计算值：C₃₆H₂₈N₄O₄S₃·0.5H₂O：C 63.05，H 4.11，N 8.17，S 14.02。

实测值：C 63.16，H 4.15，N 8.27，S 13.98。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.41-3.73(4H，m)，5.02(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，dd，J＝4.8Hz，8.8Hz)，6.23(1H，d，J＝8.8Hz)，6.97(1H，s)，7.27-7.72(17H，m)，7.73(1H，s)，8.67(1H，d，J＝6.2Hz)。

参考例10

将4-(4-吡啶基)-1.5，3-噻唑-2-硫醇(225克，1.16摩尔)悬浮在四氢呋喃(1.5L)中，在25℃在10分钟内加入28％甲醇钠甲醇溶液(235.5克，1.22摩尔)。将该混合物搅拌1小时。将反应混合物冷却，在30分钟内滴加溶于四氢呋喃(3.5L)的7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[(甲磺酰)氧基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(479克，0.83摩尔)。将该混合物在0℃搅拌1小时，并且在30分钟内滴加乙酸(50毫升)，甲醇(5L)和水(7L)的混合物。将该混合物在0℃搅拌2小时，过滤收集沉淀的结晶。用甲醇(1L×2)洗涤得到的结晶，真空干燥，得到标题化合物(438克，0.63摩尔)。

产率：76％。

参考例11

7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶基)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯碘化物

将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(300克，0.43摩尔)溶于四氢呋喃(0.6L)中，在25℃加入碘代甲烷(324克，2.17摩尔)。搅拌8小时后，将反应混合物倒入乙酸乙酯(6L)。过滤收集沉淀。将得到的沉淀用乙酸乙酯(0.5L)和乙醚(1L)洗涤，真空干燥，得到黄色粉末状标题化合物(351克，0.42摩尔)。

产率：97％。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：3.58(2H，dd，J＝4.8Hz，6.6Hz)，3.74(2H，brs)，4.35(3H，s)，5.11(1H，d，J＝4.8Hz)，5.89(1H，d，J＝4.8Hz)，6.95(1H，s)，7.18-7.42(15H，m)，8.30(2H，d，J＝6.6Hz)，8.41(1H，s)，8.75(2H，d，J＝6.6Hz)。

参考例12

将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-吡啶基-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(300克，0.43摩尔)溶于N，N-二甲基甲酰胺(0.6L)中，在25℃加入碘代甲烷(648克，4.34摩尔)。搅拌16小时后，将反应混合物倒入乙酸乙酯(6L)，过滤收集沉淀。将该的沉淀用乙酸乙酯(0.5L)和乙醚(1L)洗涤，真空干燥，得到黄色粉末状标题化合物(317克，0.39摩尔)。

产率：89％。

参考例13

7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯氯化物一盐酸化物

将五氯化磷(312克，1.44摩尔)悬浮在二氯甲烷(2.8L)中，在冰冷却下在10分钟内滴加吡啶(115克，1.44摩尔)。将该混合物搅拌30分。然后，在10分钟内加入7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶基)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯碘化物粉末(400克，0.48摩尔)，将该混合物搅拌1小时。将反应混合物冷却至-10℃，加入异丁醇(5.6L)。将该混合物在25℃下搅拌3小时。然后加入乙酸乙酯(6L)，将该混合物进一步搅拌3小时。通过玻璃过滤器过滤收集沉淀，用乙酸乙酯(0.5L)和乙醚(1L)洗涤，真空干燥，得到浅黄色粉末状标题化合物(270克，0.42摩尔)。

产率：87％。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：3.94(2H，brs)，4.35(3H，s)，5.32(1H，d，J＝5.0Hz)，5.45(1H，d，J＝5.0Hz)，6.99(1H，s)，7.25-7.40(10H，m)，8.59(2H，d，J＝7.0Hz)，9.07(2H，d，J＝7.0Hz)，9.19(1H，s)。

参考例14

将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯氯化物一盐酸化物(430克，0.66摩尔)悬浮在乙腈(3.5L)中，并且加入浓盐酸(3.5L)。将该混合物搅拌10分钟。然后在反应混合物中加入乙酸乙酯(7L)，将该混合物搅拌5小时。过滤收集沉淀，用乙腈(1L×2)洗涤，真空干燥，得到浅黄色结晶状标题化合物(236克，0.49摩尔)。

产率：74％。

熔点：202℃(分解)

元素分析计算值：C₁₆H₁₄N₄O₃S₃·2HCl：C 40.08，H 3.36，N 11.69，S 20.07。

实测值：C 39.83，H 3.43，N 11.78，S 20.03。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：3.90(2H，dd，J＝17.2Hz，17.6Hz)，4.35(3H，s)，5.26(1H，d，J＝5.0Hz)，5.42(1H，d，J＝5.0Hz)，8.61(2H，d，J＝7.0Hz)，9.05(2H，d，J＝7.0Hz)，9.17(1H，s)。

参考例15

将五氯化磷(31.2克，144毫摩尔)悬浮在二氯甲烷(2.8L)中，在冰冷却下在10分钟内滴加吡啶(11.5克，144毫摩尔)。将该混合物搅拌30分钟。然后，在10分钟内加入7β-[(苯基乙酰基)氨基]-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸碘化物，将该混合物搅拌1小时。将反应混合物冷却至-10℃，加入异丁醇(250毫升)。将该混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物浓缩至约100毫升，加入乙腈(250毫升)，然后加入浓盐酸(250毫升)。将该混合物在40℃下搅拌2小时。过滤收集沉淀，用乙腈(100毫升×2)洗涤，真空干燥，得到状标题化合物(14.5克，0.30摩尔)。

产率：63％。

参考例16

7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸一盐酸化物

将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶基)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸冻干制品溶于水(290毫升)，在冰冷却下加入1N盐酸调整pH值至1.3。将该溶液减压浓缩至约30毫升，冰冷却及摇动下逐渐地加入乙醇(70毫升)。将该混合物在冰-冷却下放置2小时。通过过滤收集沉淀的结晶，用乙醇/水(5∶1，30毫升)洗涤并且减压干燥。

产量：4.1克(65％)。

熔点：120-140℃(分解)。

元素分析计算值：C₁₆H₁₅N₄O₃S₃Cl·3.0H₂O：C 38.67，H 4.26，N 11.27，Cl8.00。

实测值：C 38.58，H 3.92，N 11.26，Cl 8.18。

¹H-NMR(D₂O)δ：3.64，3.99(2H，ABq，J＝18Hz)，4.37(3H，s)，5.23(1H，d，J＝5Hz)，5.44(1H，d，J＝5Hz)，8.31，8.76(each 2H，d，J＝7Hz)，8.51(1H，s)。

IR(KBr)cm^-1：3400，1800，1770，1640，1530，1405，1330，1190，1020。

参考例17

2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氯

将五氯化磷(1.46克，7.0毫摩尔)悬浮在乙酸乙酯(4.17毫升)中，将该混合物在冰冷却下搅拌5分钟。将2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酸(600毫克，2.77毫摩尔)立刻在搅拌及冰冷却下加入以便溶解。将该混合物在冰-冷却下搅拌30分。将该反应混合物在冰冷却下用甲苯(16.8毫升)稀释以便溶解。在该溶液中加入冷却至不高于-5℃的饱和盐水(11.1毫升)，将该混合物在冰冷却下搅拌5分钟。将反应混合物转入分液漏斗，没有摇动的情况下分离有机层。将有机层用硫酸镁干燥。过滤后，减压蒸发母液，并将残余物在冰冷却下放置30分钟(结晶从残余油中沉淀)。加入二异丙醚/正己烷(1∶1，5.67毫升)，用刮勺研磨结晶。将该混合物在冰-冷却下放置15分钟。通过过滤收集沉淀的结晶，用二异丙醚/正己烷(1∶1，5.67毫升)洗涤并且减压干燥。

产量：631毫克(64％)。

熔点：116-119℃。

元素分析计算值：C₆H₆N₄O₃SCl₃P：C 20.50，H 1.72，N 15.94，P 8.81。

实测值：C 20.52，H 1.77，N 15.99，P 8.90。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.42(3H，t，J＝7Hz)，4.45(2H，q，J＝7Hz)，8.81(1H，brs)。

IR(KBr)cm^-1：3063，2984，1784，1593，1223，1057。

参考例18

将五氯化磷(78克，375毫摩尔)悬浮在乙酸乙酯(225毫升)中，并且在冰冷却及搅拌下加入2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酸(32.4克，150毫摩尔)。将该混合物在冰-冷却下搅拌30分钟。将该反应混合物在冰冷却下用甲苯(900毫升)稀释以便溶解。在该溶液中加入冷却至不高于-5℃的饱和盐水(600毫升)，将该混合物在冰冷却下搅拌10分钟。将反应混合物转入分液漏斗，分离有机层。将有机层用硫酸镁干燥。过滤后，减压蒸发母液(结晶沉淀)。加入二异丙醚(300毫升)，用刮勺研磨结晶。将该混合物在冰-冷却下搅拌30分钟并且放置30分钟。通过过滤收集沉淀的结晶，用二异丙醚(20毫升)洗涤并且减压干燥。

产量：23.5克(45％)。

熔点：116-119℃。

实测值：C 20.52，H 1.77，N 15.99，P 8.90。

IR(KBr)cm^-1：3063，2984，1784，1593，1223，1057。

参考例19

将2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酸(1.0千克，4.6摩尔)悬浮在乙酸乙酯(2.4L)和二异丙醚(1.6L)中，随着氮气置换冷却至不高于-1℃。在不高于5℃的情况下加入五氯化磷(2.0千克，9.6摩尔)，将该混合物搅拌30分钟。在不高于2℃的情况下加入二异丙醚(2.0L)，水(120毫升)和正己烷(12L)，将该混合物在相同的温度下搅拌1小时。在氮气流下过滤收集沉淀的结晶，用二异丙醚/正己烷(1∶2，2.0L)和正己烷(2.0L)洗涤并且在氮气流下通流干燥。

产量：876.0克(49.7％)。

参考例20

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物

在室温下，将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠(1.43克，1.96毫摩尔)逐渐地溶于1％(v/v)乙酸水溶液(14毫升)中。将该溶液填充SP-207柱(60毫升)。用2％(w/v)盐水(180毫升)和3％(v/v)乙醇水溶液(60毫升)连续洗脱后，将用10％(v/v)乙醇水溶液洗脱的含标题化合物的馏分(1500毫升)收集并且减压浓缩至约20毫升。冰冷却下，随着摇动逐渐地加入6N盐酸(约1.5毫升)调整pH值至0.5。沉淀出白色粉末。将其在冰冷却下放置30分钟，过滤收集沉淀的粉末，用蒸馏水(2毫升)洗涤3次。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该粉末在减压下干燥至恒重。

产量：800毫克(59％)。

元素分析计算值：C₂₂H₂₁N₈O₈S₄P·2.0H₂O：C 36.66，H 3.50，N 15.55，P4.30。

实测值：C 36.94，H 3.46，N 15.57，P 3.95。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.23(3H，t，J＝7Hz)，3.58，3.94(2H，ABq，J＝18Hz)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，4.33(3H，s)，5.32(1H，d，J＝5Hz)，5.90(1H，dd，J＝5&8Hz)，8.51(2H，d，J＝6Hz)，8.99(3H，m)，9.30(1H，m)，9.70(1H，d，J＝8Hz)。

IR(KBr)cm^-1：3055，1778，1682，1643，1520，1385，1190，1038。

参考例21

在室温下，将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠(128克，1.96毫摩尔)逐渐地溶于1％(v/v)乙酸水溶液(1.28L)中。将该溶液填充SP-207柱(2.5L)。用1％(v/v)乙酸水溶液(9L)洗脱后，收集用0.1M乙酸钠∶0.1M乙酸∶乙醇(960∶30∶110)洗脱的含标题化合物的流分(32L)并且在减压下浓缩至约700毫升。冰冷却下，随着摇动逐渐地加入6N盐酸(480毫升)调整pH值至0.5。沉淀出白色粉末。将其在冰冷却下放置30分钟，过滤收集沉淀的粉末，用蒸馏水(300毫升)洗涤。使用分子筛3A(1/16)作为干燥剂，将该粉末在减压下干燥至恒重。

产量：60.9克(68％)。

实测值：C 36.94，H 3.46，N 15.57，P 3.95。

IR(KBr)cm^-1：3055，1778，1682，1643，1520，1385，1190，1038。

参考例22

在冰冷却下，将1.30千克(2.71摩尔)7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸化物悬浮在水(7.80L)中，并且依次加入3M乙酸钠(1.81L，5.42摩尔)和三乙胺(2.0L，14.4摩尔)。将2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氯(1143.7克，3.25摩尔)溶于四氢呋喃(3.1L)，并且冷却至不高于-20℃并且加入上述反应混合物。将该混合物的温度提升至15-25℃，依次加入3M乙酸钠(5.78L，17.4摩尔)和乙酸乙酯(6.50L)以便分配。在水层中滴加乙醇(30L)，冰冷却后，过滤收集沉淀的粉末，依次用水/乙醇(1∶2，6.5L)和乙醇(13L)洗涤。通流干燥后，将该粉末溶于稀盐水(19.5L)，溶液用于柱层析的储备溶液。

产量：23.3千克(含量6.61％，产率：78％)。

参考例23

将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(5.0克，10.41毫摩尔)悬浮在水/四氢呋喃(5∶1，30毫升)中，并且滴加3M乙酸钠(6.9毫升，20.8毫摩尔)。冰冷却下加入三乙胺(7.2毫升，52.0毫摩尔)。将2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氯(5.87克，16.7毫摩尔)溶于四氢呋喃(12毫升)，并且滴入上述反应混合物。将该混合物的温度提升至15-30℃，依次加入3M乙酸钠(28.4毫升，85.3毫摩尔)和乙酸乙酯(25毫升)以便分配。在水层中滴加乙醇(120毫升)，冰冷却后，过滤收集沉淀的粉末，依次用水/乙醇(1∶2)和乙醇洗涤，并且通流干燥。

产量：7.78克(含量66.2％，产率：70％)。

参考例24

将7β-氨基-3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸化物(5.00克，10.4毫摩尔)悬浮在水/乙腈(10∶1，33毫升)中，并且在冰-冷却下加入3M乙酸钠(19.1毫升，70.7毫摩尔)。将2-(5-二氯磷酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氯(5.87克，16.6毫摩尔)溶于乙腈(12毫升)，并且滴入上述反应混合物，同时滴入其余的三乙胺。将该混合物的温度提升至25℃，依次加入3M乙酸钠(19.1毫升，57.2毫摩尔)和乙酸乙酯(25毫升)以便分配。将乙醇(120毫升)滴入该水层，冰冷却后过滤收集沉淀的粉末。将该粉末依次用水/乙醇(1∶2，25毫升)和乙醇(50毫升)洗涤，并且通流干燥。

产量：6.78克(含量73.1％，产率：68％)。

参考例25

3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐的纯化

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐水溶液(7.33千克，含量4.98％，0.516摩尔)进行SP-207柱层析(18L)，依次用稀盐水和乙醇水溶液洗脱。通过蒸发器浓缩所得主要洗脱溶液。

回收量：2.16千克(含量14.4％，产率：83％)。

参考例26

将活性碳(15.3克)加入3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐水溶液(1.89千克，含量16.1％，0.419摩尔)并且搅拌该混合物。滤除活性碳后，用水洗涤残余物。在滤液中加水至3.96千克。并且加入乙酸(95.0毫升，1.68摩尔)和乙醇(4L)。加入6N盐酸(154毫升，0.922摩尔)，将该混合物冰冷却。过滤收集沉淀的粉末。将该粉末依次用水/乙醇(1.0∶1.1，0.71L)和乙醇(2.1L)洗涤，并且通流干燥。

产量：249.7克(含量90.8％，产率：80％)。

参考例27

在3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐水溶液(57.3克，含量8.73％，6.86毫摩尔)中加水至65克。在室温下加入乙酸(1.57毫升，26.2毫摩尔)和乙醇(65毫升)，滴加10％硫酸(8.7毫升，8.88毫摩尔)。冰冷却下搅拌后，过滤收集沉淀的粉末。将该粉末依次用水/乙醇(1∶1，10毫升)和乙醇(30毫升)洗涤，并且真空干燥。

产量：3.8克(81％)。

参考例28

在3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸二钠盐水溶液(664克，含量12.1％，0.114摩尔)中加水至1044克。在不高于10℃的情况下滴加6N盐酸(56.9毫升，0.341摩尔)，搅拌后，过滤收集沉淀的粉末。用水(563毫升)洗涤该粉末并且真空干燥。

产量：81.4克(含量81.6％，产率81％)。

参考例29

4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇

在氮气流下，将4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇氢溴酸盐(89.3克，0.32摩尔)悬浮在水(627毫升)中，加入25％氢氧化钠水溶液(110.5克，0.69摩尔)以便溶解。过滤不溶性物质并且用水(100毫升)洗涤。在该滤液中加入35％盐酸(31毫升)调节pH值至6.8。通过过滤收集沉淀的结晶，并且用水(20毫升)并且甲醇(20毫升)洗涤。将得到的结晶悬浮在甲醇(627毫升)中。搅拌2小时后，滤液并且干燥该结晶。

产量：47.6克(75.6％)

参考例30

7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[4-(4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯

将7β-[(苯乙酰)氨基]-3-[(甲磺酰)氧基]-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲基酯(900克，1.56摩尔)溶于四氢呋喃(3.6L)并且冷却至-3℃。在保持相同的温度的同时，加入28％甲醇钠，使用与和参考例29同样的方法得到的4-(4-吡啶基)-1，3-噻唑-2-硫醇(362.5克，1.87摩尔)的甲醇溶液(360g，1.87mol)，以及四氢呋喃(720毫升)。将该混合物搅拌1.5小时。加入乙酸(18.7克)，搅拌30分钟后，加入甲醇(9L)和水(5.4L)。将该混合物搅拌2小时。通过过滤收集沉淀的结晶，用甲醇(16L)洗涤并且真空干燥。

产量：884克(84％)

实验例1

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物与乙酸的结晶(102.4毫克，0.131毫摩尔)和碳酸氢钠(27.6毫克，0.328毫摩尔)装入一管形瓶，然后逐渐地加入生理盐水(0.918毫升)。这些化合物溶解时产生二氧化碳气体并且得到透明溶液。将该溶液用生理盐水稀释至2.0毫升，因此制得浓度为50毫克/毫升的药物溶液。

实验例2

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物与丙酸的结晶(101.9毫克，0.129毫摩尔)和碳酸氢钠(27.1毫克，0.322毫摩尔)装入一管形瓶，然后逐渐地加入生理盐水(0.902毫升)。这些化合物溶解时产生二氧化碳气体并且得到透明溶液。将该溶液用生理盐水稀释至2.0毫升，因此制得浓度为50毫克/毫升的药物溶液。

实验例3

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)，碳酸钠(42.7毫克，0.403毫摩尔)和连二亚硫酸钠(29.2毫克，0.168毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入生理盐水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例4

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)，碳酸钠(42.7毫克，0.403毫摩尔)和亚硫酸钠(21.2毫克，0.168毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入生理盐水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例5

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)，碳酸钠(42.7毫克，0.403毫摩尔)和亚硫酸钠(0.42毫克，0.003毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入生理盐水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例6

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)和碳酸钠(42.8毫克，0.403毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入含亚硫酸钠(1.25毫克)的5％葡萄糖溶液水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例7

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)和碳酸钠(42.8毫克，0.403毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入含亚硫酸氢钠(1.25毫克)的5％葡萄糖溶液水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例8

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)和碳酸钠(42.8毫克，0.403毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入含焦亚硫酸钠(1.25毫克)的5％葡萄糖溶液水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例9

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(250毫克，0.336毫摩尔)和碳酸钠(42.8毫克，0.403毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入含L-半胱氨酸(1.25毫克)的5％葡萄糖溶液水(5毫升)，得到透明溶液。

实验例10

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(50-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(567毫克，0.76毫摩尔)，L-精氨酸(381.6毫克，2.19毫摩尔)和亚硫酸钠(4.6毫克，0.036毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入生理盐水(50毫升)，得到透明溶液。

实验例11

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶基)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(50-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(567毫克，0.76毫摩尔)，L-精氨酸(381.6毫克，2.19毫摩尔)和亚硫酸钠(18.4毫克，0.15毫摩尔)装入一管形瓶，然后加入生理盐水(50毫升)，得到透明溶液。

实验例12

将L-精氨酸(81.4毫克，3.2当量)和亚硫酸钠(1.8毫克，0.1当量)加入3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基]-3-头孢烯-4-羧酸.乙酸溶剂化物(113.4毫克)，并且将其装入13P管形瓶。由低湿度空气取代空间得到药物制剂。

将得到的制剂溶于生理盐水(2毫升)，将其放置澄清24小时。

将得到的药物制剂进行稳定性试验。表1中的结果显示该配制是稳定的。

表1

保存条件	剩余比	溶解状态^*
保存条件	剩余比	溶解状态^*	60℃×2周	97.7％	清澈的
60℃×4周	96.4％	清澈的	60℃×2周	97.7％	清澈的
60℃×4周	96.4％	清澈的	40℃/75％RH×1月	99.6％	清澈的
40℃/75％RH×2月	95.8％	清澈的	40℃/75％RH×1月	99.6％	清澈的
40℃/75％RH×2月	95.8％	清澈的	25℃×1月	100.4％	清澈的
25℃×2月	98.0％	清澈的	25℃×1月	100.4％	清澈的

RH：相对湿度

^*：在生理盐水(2毫升)中溶解后24小时的溶解状态。

实验例13

将L-精氨酸(763.3毫克，3.0当量)和亚硫酸钠(18.4毫克，0.1当量)加入3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(1.135克)，并且将其装入35K管形瓶。由低湿度空气取代空间得到药物制剂。

将得到的制剂溶于生理盐水(10毫升)，将其放置澄清24小时。

实验例14

将3-[4-(1-甲基-4-吡啶鎓)-2-噻唑硫基]-7 β-[2-(5-膦酰氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2(Z)-乙氧基亚氨基乙酰氨基]-3-头孢烯-4-羧酸化物·乙酸溶剂化物(1.135克)装入35K管形瓶。由低湿度空气取代空间并且用橡皮罩封口得到药物制剂。

将作为单独使用的溶剂(sole use solvent)，L-精氨酸(763.3毫克，3.0当量)和亚硫酸钠(18.4毫克，0.1当量)溶于10毫升蒸馏水并且装入安瓿(10P)。由氮气取代空间，将安瓿熔化封口。

将上述配制用溶胶使用的溶剂溶解。溶解后24小时，将剩余的溶液澄清24小时，显示与实施例14相同的注射剂的质量水平。

分别通过电位计和离子色谱法测量在121℃×20分钟溶胶使用的溶剂蒸气灭菌后L-精氨酸和亚硫酸钠的含量。如表2所示，甚至在蒸气灭菌后溶胶使用的溶剂并未显示质量降低。

表2

高压灭菌处理	L-精氨酸	亚硫酸钠含量	溶解状态
高压灭菌处理	L-精氨酸	亚硫酸钠含量	溶解状态	使用	100.2％	99.8％	清澈的
未使用	99.0％	99.0％	清澈的	使用	100.2％	99.8％	清澈的

工业实用性

本发明化合物(特别是结晶)显示高固体稳定性，可被用作具有优等品质，如可长期稳定保存等的抗菌剂(特别是抗MRSA试剂)。

本申请基于日本专利申请Nos.247966/2000和354959/2000，其内容在此作为参考编入。

Claims

1.下式化合物：

其中X为CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN，以及n为0到5，

2.权利要求1的化合物，其中该化合物为结晶形式。

3.权利要求1的化合物，其中n是1。

4.权利要求1或2的化合物，其中X是CH₃COOH。

5.权利要求4的化合物，在粉末X射线衍射中该化合物具有近衍射角16.32，19.06，19.90，20.98和23.24°的峰。

6.权利要求4的化合物，在粉末X射线衍射中该化合物具有近衍射角11.82、17.16、17.80、19.32、20.00、21.20、21.78、22.94、24.10和27.02°的峰。

7.权利要求1或2的化合物，其中X是CH₃CH₂COOH。

8.权利要求7的化合物，在粉末X射线衍射中该化合物具有近衍射角16.30、16.30、18.84、19.70、21.80和23.18°的峰。

9.一种药物组合物，包含权利要求1或2的化合物。

10.权利要求9的药物组合物，其中该药物组合物是一个抗菌剂。

11.一种下式表示的化合物的结晶的制备方法：

和[ii]CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN以及[iii]水混合，使它们溶解并且发生结晶。

12.权利要求11的制备方法，其中使用的CH₃COOH，CH₃CH₂COOH或CH₃CN∶水的比例(体积比)为1∶0.1-10。

13.下式表示的化合物的二钠盐：

14.权利要求13的二钠盐，其中该二钠盐为结晶形式。

15.权利要求13或14的二钠盐，在粉末X射线衍射中具有近衍射角17.02、18.94、22.86、23.36和26.48°的峰。