CN1169774C - 具有改进水溶性的蜂胶提取物及制备方法和组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蜂胶提取物,该提取物的制备是通过调整蜂胶的pH至5.5-7.0,以改进蜂胶有效成分的水溶性,还公开了一种含有蜂胶提取物的组合物以及用于改进蜂胶提取物水溶性的方法。
Description
本发明涉及一种具有改进水溶性的蜂胶提取物,更具体地说,本发明涉及的一种蜂胶提取物是通过调节蜂胶提取物的PH值至5.5-7.0改进其中蜂胶有效成分的水溶性,本发明还涉及蜂胶提取物的制备和用途,以及改进蜂胶提取物水溶性的方法。
如Propolis in Natural Therpeutics(1983),第二次修订版,法国巴黎Librairie Maloine S.A.Editeur出版、Fragrance Journal,No.83,PP.20-28和PP.36-43(1987)以及Apidologie,第22卷,PP.155-162(1991)中描述的,蜂胶是树脂状制品,由蜜蜂储存在蜂巢中,含有树脂、蜂蜡、香精油、花粉和类黄酮并且长期用于各种民间药物。
已知蜂胶的主要活性是防腐活性、抗氧化活性、抗炎活性、局部麻醉、抑制病毒生长活性、免疫调节活性和巨噬细胞活化活性,并且蜂胶的主要成分是类黄酮、芳香羧酸和芳香醛。
在作出本发明之前,本发明者们研究了蜂胶的有效成分。结果发现了有效成分3-[4-羟基-3,5-双(3-甲基-2-丁烯基)苯基]-2-丙烯酸,别名“Artepillin C”(此后说明书通篇称作“物质C”),它显示出防腐活性、生发活性和抗癌活性,以及认定了物质C用途的有关发明:例如日本专利特许公开256,177/94公开了含有物质C作为有效成分的防腐剂,日本专利特许公开312,918/94公开了含有物质C作为有效成分的头发修补剂,以及,日本专利特许公开191,015/95公开了含有物质C作为有效成分的抗癌剂。
如上所述,本发明者早已明白物质C是蜂胶中一个重要的成分。
由于蜂胶是黑褐色的大块制品而且由于它主要由水不溶性疏水产物组成,因此它不易使用,并且常常以溶解的液体蜂胶提取物或蜂胶酊的形式使用,它是用易溶于水的高浓度有机溶剂溶液提取得到的,有机溶剂的例子有丙酮、乙酸和诸如甲醇、乙醇、异丙醇(或异丙基醇)的低级醇。一般说来,最适合使用乙醇。
但是,当这种蜂胶提取物用于诸如健康食品的食物制品、抗易感染病试剂如用于易感染病症的治疗剂和/或预防剂以及诸如皮肤清洁剂和皮肤漂白剂的化妆品时,具有以下缺陷,并且这些缺陷使蜂胶在各领域中的应用变得困难起来。
(1)蜂胶提取物的成分如树脂和蜡很容易结晶。当蜂胶提取物用唾液稀释时,这些成分很容易结晶,且强烈抑制了活体对它们的吸收和利用。当蜂胶提取物用水稀释时,这些成分大量地结晶,且使得操作性能非常困难。
(2)蜂胶提取物的颜色不令人满意并且提取物容易变成黑褐色或不透明;且
(3)蜂胶提取物的气味和味道不令人满意,即它具有泥浆味以及刺激或尖锐的味道。
为了解决常规蜂胶提取物的这些缺陷,本发明者在易溶于水的无机溶剂浓度方面继续作了研究。
结果,发明者在日本专利特许公开316,968/93中确认并公开了经过提纯的蜂胶提取物,以干固体为基准,当它在310nm和660nm下的吸收度转化成2w/w%的蜂胶提取物浓度下的吸收度,其吸收度比A330nm/A660nm超过4,000(说明书通篇中用语“以干固体为基准”缩写成“d.s.b”并且以上的提纯蜂胶提取物可以称为“蜂胶提取物”),该专利还给出用30-55v/v%浓度的易溶水性无机溶剂溶解蜂胶的有效成分,蜂胶提取物可以从溶解部分获得。
经过进一步研究蜂胶提取物,本发明者发现当根据常规方法用水稀释时,部分蜂胶提取物变得不溶解并且提取物变成含有不溶蜂胶成分的白色悬浮液。详细地研究表明大部分蜂胶有效成分特别是物质C变得不可溶了。
进一步的研究揭示了蜂胶有效成分容易溶解于具有相对高浓度或中等浓度的易溶水性无机溶剂,但当用水稀释时它们几乎或基本上是不溶于无机溶剂的,这带来严重的后果,造成妨碍蜂胶有效成分发挥其活性的缺陷。
本发明的目的是确认具有改进水溶性、生物活性和稳定性并具有令人满意气味和味道的蜂胶提取物,还有其制备方法及其用途。为了给出这种蜂胶提取物,本发明者对蜂胶提取物作了有力的研究。
结果,发明者发现作为蜂胶有效成分的物质C,其水溶性可以得到很大的改进,并且通过添加PH控制剂将正常PH约5.0的蜂胶的PH值调至PH5.5或更高,优选至PH5.5-7.0更优选至PH5.8-6.4,其固有活性就很容易显示出来,并且得到具有改进稳定性、气味和味道的蜂胶提取物。
再具体地说,本发明者发现当具有正常PH值约5.0并在50v/v%含水乙醇溶液中含有10w/w%蜂胶提取物d.s.b.的未经PH控制的蜂胶提取物根据常规方法用水稀释约100倍时,物质C在25℃下仅以0.03ppm的浓度溶于含水稀乙醇溶液,当把含水稀乙醇的PH从大约5.0提高到5.5-7.0,物质C在该溶液中的溶解度至少提高了15-100倍,物质C的固有活性也容易表现出来。
本发明涉及一种具有改进水溶性的蜂胶提取物,更具体地说,本发明涉及的一种蜂胶提取物是通过调节蜂胶或其提取物的PH值至5.5-7.0改进其中蜂胶有效成分的水溶性,本发明还涉及蜂胶提取物的制备和用途,以及改进蜂胶提取物水溶性的方法。
只要将蜂胶PH调节至5.5-7.0,优选5.8-6.4便能获得本蜂胶提取物,任何方法都可以用于本发明。
通常本蜂胶提取物通过以下两种方式获得:将蜂胶和没有作PH调整的易溶水性有机溶剂的水溶液接触,溶解并提取蜂胶的有效成分,用PH控制剂将蜂胶提取物的PH调整至5.5-7.0,并收集提取物;或者将蜂胶和PH调整至5.5或更高优选至PH5.5或更高但低于8.0的易溶水性有机溶剂的水溶液接触,溶解并提取蜂胶的有效成分,并且可以在选择收集提取物之前用PH控制剂将蜂胶提取物的PH调整至5.5-7.0。这时,易溶水性有机溶剂在含水溶液中的浓度通常为70v/v%或更高。为了获得纯化的蜂胶提取物,根据日本专利特许公开316,968/93的方法,使用30-55v/v%易溶水性有机溶剂的水溶液。下面是将蜂胶和这种水溶液接触以及提取蜂胶有效成分的方法:溶解和提取方法包括将蜂胶放在容器内,将易溶水性有机溶剂倾入容器中。逆流提取方法包括串联的阶式柱,柱已用蜂胶作用过,并将易溶水性有机溶剂输入进去,由于该方法提取效率高,它们利于适合用在工业规模的生产过程中。如果需要的话,用水稀释含有蜂胶有效成分的30-5 5v/v%易溶水性有机溶剂的水溶液,并将稀释液和大孔合成吸附剂接触,吸附其中的有效成分,接着从吸附剂中洗脱成分,获得具有改进水溶性的蜂胶提取物。
将蜂胶提取物的PH调整到PH5.5-7.0优选5.8-6.4,以便获得具有改进水溶性、稳定性、气味和味道的高质量蜂胶提取物。当蜂胶提取物的PH低于5.5,物质C的水溶性不令人满意。当蜂胶提取物的PH超过7.0,提取物颜色更重并且变质,同时其它有效成分如苯丙酸4-(2-羧乙烯基)-2-(3-甲基-2-丁烯基)苯基酯和类黄酮变得不稳定。这些都将在储藏期间使提取物的质量、气味和味道变劣。
只要可以控制蜂胶提取物的PH,任何PH控制剂都可用于本发明,具体说是那些可以将具有不小于2w/w%d.s.b.浓度的蜂胶提取物调节至本发明指定的PH范围。例如可以使用各种碱,如氧化镁、氧化钙、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化镁、氢氧化钙、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钠和碳酸镁。如果需要,这些碱可以和其它金属盐结合使用,如氢氧化亚铁、碳酸锌和碳酸铜,并且还可以选择性地和酸结合使用,如盐酸、磷酸、醋酸和柠檬酸。
在PH控制剂中,可食用及药学可接受的缓冲剂能够较令人满意地用于本发明,用量以实现本发明目的为准,通常是以小于10w/w%蜂胶提取物d.s.b.的用量。经PH控制后,如果需要可以将蜂胶提取物过滤并且离心,以获取含有蜂胶有效成分如物质C的部分。
这样得到的本蜂胶提取物是2-25w/w%的蜂胶溶液d.s.b.,作为蜂胶有效成分的物质C具有改进的水溶性,并且如果需要,可以将溶液任意浓缩并粉碎成粉末蜂胶提取物。此外,可以将液体形式的蜂胶浓缩物任意脱水并且通过混合无水糖类粉碎,例如可以和无水麦芽糖、无水海藻糖和无水乳糖以及/或者如α-,β-和γ-环糊精的物质混合。在粉碎过程中,通过使用PH控制剂如碳酸氢钠和碳酸镁可以进一步提高最终产物中所含蜂胶有效成分的水溶性。
由于本蜂胶提取物含有可容易被活体吸收和同化的蜂胶有效成分,它可以单独使用,也可以和其它一种或多种物质结合使用,如抗氧化剂、稳定剂、味道赋予剂、着色剂、气味赋予剂、填料、辅助剂和赋形剂。特别是和一种或多种维生素、有机酸和糖类一起使用时,蜂胶提取物的活性、效果、稳定性和操作性可以得到令人满意地改进,维生素的例子有生育酚(维生素E)、类胡萝卜素、L-抗坏血酸(维生素C)、α-糖基-L-抗坏血酸、芸香苷和α-糖基芸香苷;有机酸的例子有柠檬酸和马来酸;糖类的例子有葡萄糖、麦芽糖、海藻糖、乳糖和麦芽糖醇。
由于本蜂胶提取物具有蜂胶有效成分的固有活性,它可以单独用在或和其它一种或多种原料结合用在如食物制品、化妆品和抗易感染病试剂的组合物中,作为保健食品、防腐剂、抗氧化剂、抗炎剂、局部麻醉剂、病毒生长抑制剂、免疫调节剂、巨噬细胞活化剂、抗癌剂、头发修补剂、antilipemics、紫外线吸收剂、黄色赋予剂、维生素P补充剂、质量改进剂或味道赋予剂的补充剂,以保持和促进健康,防止和/或治疗疾病,由病症恢复健康,并且保持和改进皮肤条件。
本蜂胶提取物可以直接用于尿疗法,该疗法已广泛被人所知并且近来很盛行,它作为尿疗法的补充剂以提高效果并且降低难闻的尿臭味。
本蜂胶提取物具有人们偏爱的颜色、气味和味道,以致于它与具有咸、涩、苦或滋味的物质非常协调,它还具有强烈的防腐活性。因此,蜂胶提取物不仅可以用于特定的健康食品还可用于普通的各种如食品的组合物,以改进它们的气味、味道、货架期和质量稳定性,这些食品包括调味料、日本糖食、西方糕点、冰糕、冰淇凌、饮料、涂抹食品、糊状食品、泡菜、加工肉、加工鱼肉、奶和蛋制品、加工蔬菜、加工水果以及加工的系列产品。
本蜂胶提取物还可以作为防腐剂、肠控制剂、维生素P补充剂、压力消除剂或味道改进剂用于饲料和宠物食品,用于家养动物、猪、蜜蜂、蚕和鱼。
此外,本蜂胶提取物可以任意用于包括化妆品和药品在内的固体、糊状或液体形式的产品,例如烟草、香烟、糖锭、复合维生素、舌下剂、口服清新剂、口香片和漱口剂、用于插管喂食的营养物品、天然药物、内服药剂、注射液、洁牙剂、包括那些用于皱裂唇的口红、遮晒霜、洗面皂、香波、染发液、浴用盐、抗易感染病试剂、皮肤清洗剂、皮肤增白剂和头发修补剂。
本发明涉及的用语“抗易感染病试剂”意思是指用来防止和/或治疗易感染疾病的试剂,而涉及的用语“易感染疾病”在本发明中的意思是指可以通过本蜂胶提取物防止和/或治疗的疾病:这种易感染疾病的例子是病毒性疾病、细菌性疾病、创伤性疾病、免疫性疾病、风湿病、糖尿病、循环系统疾病、恶性肿瘤和神经性疾病。
该抗易感染疾病的试剂可以根据其最终用途制成适当的形式:例如它可以制成液体形式的试剂,如喷剂、洗鼻剂、喷雾剂、漱口液、注射剂;膏状形式的试剂,如软膏、软食、乳油;以及固体形式的试剂,如粉、颗粒、胶囊或片剂。
可以根据蜂胶提取物的含量、施药途径或施药频率控制该试剂的剂量。通常它的范围是约0.0001-10g/天/成人。
对化妆品和食物制品而言,它们可以按相似于上面抗易感染病试剂的情况使用。
用于本发明将蜂胶提取物掺加到组合物中的方法包括那些能够掺加蜂胶提取物的方法:这些方法包括混合、捏合、溶解、浸泡、渗透、喷雾、敷、涂抹和注入。
以下,本发明将进行详细地描述:
实验1
不溶物质C的证明实验
将蜂胶块破碎,注入3个柱中并且通过逆流抽提方法加入50v/v%含水乙醇溶液,溶解并提取蜂胶的有效成分。过滤提取液得到含有约20w/w%干固体的液体蜂胶提取物,干固体得率约为原料蜂胶的30%,d.s.b.。
作为样品,蜂胶提取物的A310nm */A660nm吸收度比是7,365。在整个说明书中,该样品用50v/v%含水乙醇溶液稀释成2w/w%的溶液,d.s.b.,并且使用1-cm光程小室在660nm下测量吸收度。相似地,将样品稀释成0.004w/w%的溶液,d.s.b.,并且在310nm下测量吸收度。将310nm下的吸收度倍增500倍,使其换算成2w/w%溶液的d s.b.吸收度,然后计算A310nm/A660nm的比值。
用PH测量计测定时,样品的PH为5.0。将样品放入烧杯并用水稀释101倍成为白色悬浮液形式的含水乙醇稀溶液,然后在轻微搅拌条件下于25℃放置该悬浮液1小时,离心得到上清液。根据Bioscience,Biotechnology和Biochemistry,58卷No.5,pp.945-946(1994)中描述的方法,使用高效液体色谱(HPLC)定量分析物质C在上清液中的浓度。样品用乙醇代替水稀释101倍,以此作为空白样。这时,样品不变成悬浮液,并且按以上测定物质C浓度的相似方式处理稀释液。表1显示结果。
表1
物质C浓度(ppm)
用水稀释的稀释上清液 0.03
用乙醇稀释的稀释上清液 46.7(空白样)
很明显,用水稀释蜂胶提取物101倍得到含水乙醇稀溶液的悬浮液时,从表1结果可以判断出能够溶于该悬浮液上清液的物质C的浓度为0.03ppm。其浓度仅是用乙醇稀释101倍得到的空白样上清液的物质C浓度46.7ppm的0.06%,其中,这意味着当用水稀释时大部分物质C不溶解。
用乙醇溶解经过离心收集的沉淀,用相似方法测定沉淀中物质C的量,表现出来的是样品中至少99%的物质C含在沉淀中。
结果证明了用水将蜂胶提取物稀释成稀的乙醇水溶液使得大部分物质C不溶解。
实验2
改进物质C的水溶性
将实验1中的样品和等量的50v/v%含水乙醇溶液混合,同时还和适当量的氢氧化钠混合或者不与其混合,在制备成约10w/w%液体蜂胶提取物,d.s.b.之前,将混合物PH5.0调整至PH5.2,5.5,5.8,6.0,6.2,6.4,6.8,7.0,7.2,7.5或8.1,以此作为下面实验用的样品。
实验2-(1)
蜂胶提取物的不溶性
将实验2制备的不同PH值的样品稀释101倍,成为白色悬浮液形式的含水乙醇稀溶液,并且使用1-cm光程小室在720nm下测量混浊度或吸收度,研究PH对蜂胶提取物不溶性的影响。
实验2-(2)
蜂胶提取物中物质C的水溶性
按实验1相似方式,将不同PH值的样品用水稀释101倍,离心所形成的白色悬浮液,并且测定所得上清液中物质C的浓度,研究PH对蜂胶提取物中物质C水溶性的影响。
实验2-(3)
色度
即使在用乙醇稀释21倍后,不同PH值的样品仍保持溶液的形式,使用1-cm光程小室在480nm下测定所得的稀释液,研究PH对蜂胶提取物色度和恶化的影响。
实验2-(4)
A 310nm /A660nm 的吸收度比
作为保持蜂胶提取物质量稳定的条件,研究样品不同PH对A310nm/A660nm吸收度比的影响。
实验2-(5)
在25℃下放置1个月后,按实验2-(1)-2-(4)的相似方法对样品进行实验,并且由12个批判组进行感官评价。数据列于表2中。
表2
表2中,符号“X”“A” B”“C”“D”和“E”表示如下:X:蜂胶提取物的PH;A:720nm下的混浊度(A720nm);B:上清液中物质C的浓度(ppm);C:上清液中物质C与试验NO.1中的物质C的浓度比,即与不作PH调整的含水乙醇溶液中物质C的浓度比;D:480nm下的色度(A480nm);E:A310nm/A660nm吸收度比。符号“*”和“**”分别表示“没有PH控制”和“12个评判组中10或更多的评价概状”。
试验编号 | 制备时 | 放置1个月后 | 总体评价 | |||||||||||
X | A | B | C | D | E | A | B | C | D | E | 风味和味道 | |||
1 | 5.0 | 0.224 | 0.03 | 1 | 0.197 | 7,365 | 0.230 | 0.03 | 1 | 0.210 | 6,918 | 令人满意 | 不好 | 空白样 |
2 | 5.2 | 0.202 | 0.06 | 2 | 0.197 | 7,187 | 0.205 | 0.07 | 2 | 0.213 | 6,729 | 令人满意 | 不好 | 空白样 |
3 | 5.5 | 0.188 | 0.45 | 15 | 0.198 | 6,514 | 0.188 | 0.45 | 15 | 0.215 | 6,375 | 令人满意 | 好 | 本发明 |
4 | 5.8 | 0.176 | 2.30 | 77 | 0.204 | 6,434 | 0.180 | 2.38 | 79 | 0.224 | 6,213 | 令人满意 | 极好 | 本发明 |
5 | 6.0 | 0.144 | 4.28 | 143 | 0.210 | 6,378 | 0.148 | 4.37 | 146 | 0.231 | 6,023 | 令人满意 | 极好 | 本发明 |
6 | 6.2 | 0.134 | 8.40 | 280 | 0.221 | 6,015 | 0.136 | 8.48 | 283 | 0.245 | 5,682 | 令人满意 | 极好 | 本发明 |
7 | 6.4 | 0.101 | 13.6 | 453 | 0.248 | 5,659 | 0.102 | 13.8 | 460 | 0.266 | 5,054 | 令人满意 | 极好 | 本发明 |
8 | 6.8 | 0.078 | 18.7 | 623 | 0.260 | 5,401 | 0.078 | 18.9 | 630 | 0.282 | 4,868 | 大部分令人满意 | 好 | 本发明 |
9 | 7.0 | 0.058 | 24.1 | 803 | 0.283 | 4,973 | 0.059 | 24.2 | 807 | 0.305 | 4,054 | 大部分令人满意 | 好 | 本发明 |
10 | 7.2 | 0.051 | 28.3 | 943 | 0.303 | 4,614 | 0.053 | 28.3 | 943 | 0.399 | 3,860 | 稍微刺激 气味差 | 不好 | 空白样 |
11 | 7.5 | 0.049 | 31.4 | 1,047 | 0.329 | 4,303 | 0.050 | 31.0 | 1,033 | 0.458 | 3,675 | 刺激 气味差 | 不好 | 空白样 |
12 | 8.1 | 0.041 | 36.4 | 1,213 | 0.464 | 2,935 | 0.044 | 36.2 | 1,207 | 0.588 | 2,320 | 刺激 气味差 | 不好 | 空白样 |
表2结果很明显显示出蜂胶提取物的PH(PH5.0)从5.0增加到5.5-7.0,特别优选增加到5.8-6.4时,能够产生提高物质C水溶性和满意稳定性、风味及味道的高质量蜂胶提取物。
实验2-(1)显示随样品PH值的增加,它们的混浊度降低,水溶性提高,特别是最大达到PH约7.0时,混浊度得到降低和水溶性得到改进,并且在PH超过约7.0时混浊度几乎不再降低,即基本上不再发现有水溶性的提高。实验2-(2)显示当PH调整至超过5.5,蜂胶的一种有效成分-物质C的水溶性得到极大的增加。实验2-(3)显示样品特别是在PH超过7时颜色更深,并且这种趋势在保存期间更加明显,造成样品变劣。它还表明当在PH超过7保存时,样品发出刺激味道、不愉快气味和/或变劣的风味和味道。
实验2-(4)显示样品必须在PH7.0或更低条件下保存,使它们在放置甚至一个月后仍保持高质量或保持A310nm/A660nm比超过4,000。
综上所述,通过添加PH控制剂,将蜂胶提取物的PH调整至5.5-7.0,更优选调整至5.8-6.4,很容易生产令人满意的蜂胶提取物,并且还具有满意效果的稳定性、风味和味道,其中作为蜂胶有效成分-物质C具有改进的水溶性。
实验3
急性毒性试验
使用七周龄的dd-种小鼠,将通过实施例A-1方法获得的具有PH6.4的液体蜂胶提取物的冷冻干燥制品口服施用给用于急性毒性试验的小鼠。结果剂量达到2.5tg/kg鼠时,没有小鼠死亡。这表明制品具有极低的毒性。使用实施例A-4方法获得的具有PH6.2的液体蜂胶提取物冷冻干燥制品进行相似试验,得到相似结果,这意味着制品在毒性方面也极低。
下面的实施例A和B说明本发明具有改进水溶性的蜂胶提取物以及含有这种蜂胶提取物作为有效成分的组合物:
实施例A-1
按常规方式将蜂胶浸泡在95v/v%含水乙醇溶液中并且提取,获得提取物,并且用少量水洗涤沉降物,以便提取沉降物,将这些提取物汇集成80v/v%含水乙醇溶液中含有约20w/w%干固体的粗蜂胶提取物,然后用水混合以降低乙醇浓度至50v/v%。稀释液在50℃下放置一小时分成两层,上层具有蜂胶的有效成分,而剩下的下层具有粘性沉降物。让这两层在室温下过夜放置,并且收集上层和碳酸氢钠混合,调整PH至6.4,接着回收具有8,425 A310nm/A660nm吸收度比和改进水溶性的液体蜂胶提取物,得率为粗蜂胶提取物的约45%,d.s.b.。
含有其改进水溶性物质C和满意稳定性、风味和味道的产品可以任意单独使用或和其它用于食品、抗易感染疾病和化妆品原料结合使用,作为辅助保健食品、防腐剂、抗氧化剂、免疫调节剂、巨噬细胞活化因子、抗肿瘤剂或头发修补剂。
实施例A-2
将蜂胶块破碎,注入两个柱中然后加入50v/v%含水乙醇溶液溶解,通过逆流抽提方法提取蜂胶的有效成分。过滤所得的提取液,并和碳酸钠混合,将PH调整至6.2。这样,得到具有6,015 A310nm/A660nm吸收度比和改进水溶性的液体蜂胶提取物,得率为原料蜂胶的约32%,d.s.b.。
与实施例A-1的制品相似,该产品含有具改进的水溶性物质C,具有满意稳定性、风味和味道。因此,该产品可以任意单独使用或和其它用于食品、抗易感染疾病和化妆品原料结合使用,作为辅助保健食品、防腐剂、抗氧化剂、免疫调节剂、巨噬细胞活化因子、抗肿瘤剂或头发修补剂。
实施例A-3
将蜂胶块破碎,注入三个柱中,然后加入预先用碳酸钠将PH调整至7.8的50v/v%含水乙醇溶液溶解,以便通过逆流抽提方法提取蜂胶的有效成分。用PH控制剂将提取物的PH调整至6.0,并且过滤得到具有6,438 A310nm/A660nm吸收度比和改进水溶性的液体蜂胶提取物。得率为原料蜂胶的约32%,d.s.b.。
与实施例A-1的制品相似,该产品含有改进的水溶性物质C,具有满意稳定性、风味和味道。因此,该产品可以任意单独使用或和其它用于食品、抗易感染疾病和化妆品原料结合使用,作为辅助保健食品、防腐剂、抗氧化剂、免疫调节剂、巨噬细胞活化因子、抗肿瘤剂或头发修补剂。
实施例A-4
由实施例A-1方法得到粗蜂胶提取物,根据实施例A-1的方法将含有该粗蜂胶提取物的80v/v%含水乙醇溶液的乙醇浓度降低至45v/v%,以便分成两层,即上层和下层,然后让其在室温下放置5小时。收集上层并用等量水稀释,并将稀释液送入一个填充有“AMBERLITE XAD-7”(一种从美国费城Rohm&Haas公司商购的合成大孔树脂)的柱中,用水洗涤,并且送入95v/v%含水乙醇溶液,洗脱蜂胶的有效成分。所得洗脱液和碳酸氢钠混合,调整PH至6.2,得到具有21,892 A310nm/A660nm吸收度比和改进水溶性的液体蜂胶提取物。得率为粗蜂胶提取物的约22%,d.s.b.。
与实施例A-1的制品相似,该产品含有改进的水溶性物质C,具有满意稳定性、风味和味道。因此,该产品可以任意单独使用或和其它用于食品、抗易感染疾病和化妆品原料结合使用,作为辅助保健食品、防腐剂、抗氧化剂、免疫调节剂、巨噬细胞活化因子、抗肿瘤剂或头发修补剂。
实施例B-1
胶质糖果
将一百重量份的“MABIT”(从日本Okayama,Hayshibara Shoji公司商购的加氢麦芽糖浆)和50重量份“TREHAOSETM”(从日本Okayama,HayshibaraShoji公司商购的高纯度含水海藻糖晶体)加热并减压浓缩成具有约15w/w%水分含量的浓缩物。按常规方式将浓缩物和溶于18重量份水的13重量份明胶、一重量份的实施例A-1方法获得的液体蜂胶提取物、2重量份柠檬酸钠和适当量的着色剂和风味剂混合。将这样获得的混合物加工成形并且包装成所需的产品。
该产品为具有令人满意结构和风味并且不会引起龋齿的胶质糖果。
实施例B-2
口香糖
通过加热将三重量份的胶基熔化,直至其软化,所得物和4重量份蔗糖及3重量份“TREHAOSETM”、0.02重量份由实施例A-1方法获得的液体蜂胶提取物和适当量的着色剂混合,通过棍子捏合混合物,成形并包装得到所需产品。
由于含有蜂胶的有效成分,该产品为具有令人满意结构、风味和味道并且不会引起龋齿的口香糖。
实施例B-3
Gyuhi(淀粉糊)
将一重量份的糯米淀粉和1.2重量份水混合,并且通过加热使混合物胶凝,再和1.5重量份“TREHAOSETM”、0.7重量份“SUNMALT”(从日本Okayama,Hayshibara Shoji公司商购的含水麦芽糖晶体)、0.3重量份淀粉氢化物和0.02重量份由实施例A-2方法获得的液体蜂胶提取物混合。按常规方式将如此得到的混合物加工成形并包装成所需产品。
该产品是具有自然风味和味道的日本糖食,此外由于蜂胶的有效成分,它还具有令人满意的咀嚼特性、相对长的货架期和稳定性。
实施例B-4
奶油糖膏馅
按常规方式将一千重量份“FINETOSE”(从日本Okayama,HayshibaraShoji公司商购的无水晶体麦芽糖)、200重量份脱水晶体海藻糖、1,000重量份的起酥油、50重量份可可块、3重量份由实施例A-3方法获得的液体蜂胶提取物和一重量份卵磷脂混合,得到奶油糖膏馅。
由于蜂胶有效成分而具有满意稳定性和货架期的该产品具有合意的咀嚼特性和适口的熔化性。
实施例B-5
奶油蛋糕
将五十重量份未加盐奶油、50重量份起酥油、50重量份蜂蜜和130重量份糖充分混合,再与150重量份鸡蛋进一步混合和搅拌。所得混合物和135重量份小麦面粉、75重量份牛奶、4重量份碳酸氢钠和适当量的香草风味剂混合。按常规方式将如此得到的混合物倾入模具,焙烤并冷却至室温。将1.5重量份由实施例A-1方法获得的液体蜂胶提取物、20重量份日本杏甜酒和20重量份康涅克白兰地混合制得的浆液用刷子涂抹在上面焙烤制品的表面,得到所需产品。
具有满意风味和味道并含有蜂胶有效成分的该产品可以任意使用,来维持和/或促进健康并预防和/或治疗疾病,还可以促进从疾病中恢复健康。
实施例B-6
冰淇凌
将两千三百重量份的牛奶加热至约60℃,并在此温度下和200重量份蛋黄、50重量份鸡蛋、420重量份果糖、30重量份淀粉氢化物、200重量份新鲜乳脂、20重量份淡炼乳、3重量份由实施例A-2方法获得的液体蜂胶提取物和一重量份明胶粉混合。混合物在75℃下加热灭菌15分钟、冷却、在搅拌条件下和20重量份的日本杏甜酒混合、倾入容器并冷冻,得到所需产品。
含有蜂胶有效成分的该产品可以任意使用,来维持和/或促进健康并预防和/或治疗疾病,还可以促进从疾病中恢复健康。
实施例B-7
粉末蜂胶提取物
五重量份由实施例A-2方法获得的液体蜂胶提取物和7重量份脱水晶体麦芽糖混合,并将混合物通过加热至40℃进行干燥1小时,与3重量份脱水晶体海藻糖和0.05重量份碳酸氢钠进一步混合均匀,得到粉末蜂胶提取物。将1g等分的粉末分布在分层的铝容器中。
由于该产品很容易分散和溶解在水中,并且具有满意味道的优点,它可以单独作为保健食品、防腐剂、药物、风味赋予剂、除臭剂和用于尿疗法试剂任意使用,也可以作为其它组合物的原料使用。该产品还可以用来维持和/或促进健康并预防和/或治疗疾病,还可以促进从疾病中恢复健康。
当作为保健食品使用时,该产品可以单独使用或者以每200ml液体0.2-1g的量分散和溶解在诸如茶、牛奶或果汁等液体之后使用。该产品还可以每100ml尿0.5-2g的量溶解在新鲜尿液中,以尿疗法的方式使用。
实施例B-8
粉末蜂胶提取物
向5重量份由实施例A-4方法获得的液体蜂胶提取物中添加2重量份γ-环糊精和5重量份的脱水晶体海藻糖。通过加热至40℃的空气干燥混合物一小时,然后和7重量份脱水晶体麦芽糖粉混合至均匀,得到粉末蜂胶提取物。将1g等分的粉末分布在分层的铝容器中。
与实施例B-7的产品相似,该产品很容易分散和溶解在水中并且具有合意味道的优点。因此,该产品可以单独作为保健食品、防腐剂、药物、风味赋予剂、除臭剂和用于尿疗法试剂任意使用,也可以作为其它组合物的原料使用。该产品还可以用来维持和/或促进健康并预防和/或治疗疾病,还可以促进从疾病中恢复健康。
实施例B-9
配合饲料
通过将30重量份麦麸粉、30重量份由实施例B-7方法获得的粉末蜂胶提取物、10重量份脱脂奶、10重量份含有乳蔗糖的粉末、10重量份复合维生素、5重量份的鱼粉、5重量份的磷酸氢钙、3重量份的液体油和脂肪、3重量份碳酸钙、2重量份盐和2重量份矿物质混合,制备配合饲料。
该产品除了表现出蜂胶有效成分的活性外,还对双歧杆菌表现出令人满意的生长促进活性,它可以任意使用以预防家养动物的传染病和腹泻,促进它们的食欲和生长,并且防止它们粪便的不令人满意的气味。如果需要,该产品可以和其它饲料原料如谷物、小麦面粉、淀粉、油粕粉和酒泥或粗粉等浓缩物、以及用于粗糙纤维素食物的原料如稻草麦秆、干草、甘蔗渣、玉米芯及其青储饲料结合使用。
实施例B-10
片剂
将30重量份由实施例B-7方法获得的粉末蜂胶提取物、20重量份“NYUKAOLIGOLS-55P”(从日本Okayama,Hayshibara Shoji公司商购的含有乳蔗糖的粉末)、10重量份乳酸钙、5重量份L-抗坏血酸、5重量份茁霉多糖、1重量份α-糖基芸香苷、0.2重量份碳酸镁、1重量份四磷酸钙、1重量份糖酯和适当量的粉末香精混合至均匀。通过具有20R穿孔和12mm直径的制片机将混合物制成片,得到片剂。使用糖衣机按常规方式用加热至55℃含有55w/w%“TREHAOSETM”和0.2w/w%茁霉多糖的水溶液涂敷片剂,并且干燥。重复涂敷步骤,以便得到含结晶含水晶体海藻糖的具有光滑表面的糖包衣片剂。
通常,这个不会破碎并具有满意稳定性和吞咽性能的产品以约1-40片剂/天/成人的剂量给人口服施用,优选约2-20片剂/天/成人的剂量。由于该产品具有蜂胶有效成分的活性并且富含乳蔗糖和茁霉多糖,因此它表现出强烈的肠控制活性。所以该产品令人满意地作为可口服施用的制品使用以预防结肠癌。因为该产品富含钙盐,所以它可以适宜作为可口服施用的制品以预防和/或治疗骨质疏松,并且因为该产品富含L-抗坏血酸和α-糖基芸香苷,所以还可以令人满意地作为可口服施用的制品使用以促进健康和预防衰老。
实施例B-11
片剂
将10重量份由实施例B-8方法获得的粉末蜂胶提取物、70重量份的海藻糖、62重量份的玉米淀粉和8重量份脂肪酸蔗糖酯混合至均匀,并且按与实施例B-10相似的方法制成片,得到片剂。为了制成可容易溶解于胃的片剂,上述产品在用5w/w%羧丙基甲基纤维素预涂敷后进行糖包衣,同时用10w/w%的羧丙基甲基纤维素涂敷上述产品,制成肠包衣片剂。
这些片剂可以适宜作为治疗人恶性肿瘤的试剂使用,如治疗胃癌、肺癌、肝癌、子宫癌、胸癌、结肠癌和黑素瘤。
实施例B-12
外用药物
往300重量份麦芽糖粉末和200重量份海藻糖中添加20重量份由实施例A-4方法获得的含有蜂胶有效成分上层溶液和33重量份甲醇,进一步添加200重量份10w/w%的茁霉多糖溶液,得到具有合适伸展性和粘性的用于外伤的软膏。
该产品由于蜂胶有效成分而表现出令人满意的防腐、抗炎、抗肿瘤和局部麻醉活性,并且由于麦芽糖和海藻糖而表现出给活性细胞补充能量的活性。由于这些活性,该产品缩短愈治时间并且令人满意地使受伤的皮肤组织得以痊愈。
实施例B-13
注射液
将由实施例A-4方法获得的液体蜂胶提取物溶于30v/v%乙醇水溶液,按常规方式对所得溶液进行膜过滤,得到不含焦精的溶液,然后分配至20ml安瓿,得到5mg/安瓿的蜂胶提取物,d.s.b.,将其冻干并密封,得到所需产品。
在给人经肌肉或静脉内施用之前,该产品可以单独或和其它维生素及/或矿物质结合使用。该产品可以任意使用以促进疾病的治疗,如治疗免疫性疾病、循环性疾病、神经性疾病和恶性肿瘤,并且常常用于从这些疾病中恢复健康。
实施例B-14
注射液
将六重量份的氯化钠、0.3重量份氯化钾、0.2重量份氯化钙、3.1重量份乳酸钠、45份海藻糖和0.1重量份由实施例A-4方法获得的液体蜂胶提取物溶解于1,000重量份2v/v%乙醇水溶液。所得溶液按常规方式进行膜过滤,得到不含焦精的溶液,将其25ml等分分配到塑料容器中,得到所需产品。
该产品可以作为维生素P补充剂、能量补充剂或矿物补充剂使用,以促进疾病的治疗和促进从疾病中恢复健康。
实施例B-15
插管喂入试剂
通过将20重量份脱水海藻糖、1.1重量份甘氨酸、0.18重量份谷氨酸钠、1.2重量份盐、一重量份柠檬酸钠、0.4重量份乳酸钙、0.1重量份碳酸镁、0.1重量份由实施例B-7方法获得的粉末蜂胶提取物、0.01重量份硫胺素和0.01重量份核黄素混合,制备组合物。将组合物24g等分分配至多层铝小袋中,并加热密封袋,得到用于插管喂入的试剂。
该产品可以作为能量补充溶液使用,将一袋产品溶解于约300-500ml水之后可口服或通过插管喂入而不经肠胃施用给鼻腔、胃或肠。
实施例B-16
浴用盐
将21重量份的DL-乳酸钠、8重量份丙酮酸钠、3重量份海藻糖、5重量份由实施例A-3方法获得的液体蜂胶提取物及37重量份乙醇和26重量份精制水、以及适当量的着色剂及香精混合,得到浴用盐。
该产品可以通过热水在浴台(tab)中溶解,使其稀释100-10,000倍,作为皮肤清洗剂或皮肤增白剂使用。与上相似,该产品可以在清洗液或洗液中稀释后在使用。
实施例B-17
洗涤乳
将半重量份聚氧乙烯山嵛醚、一重量份聚氧乙烯山梨醇四油酸酯、一重量份油溶性甘油一硬脂酸酯、0.5重量份丙酮酸、0.5重量份山嵛醇、一重量份鳄梨油、一重量份由实施例A-2方法获得的液体蜂胶提取物和适当量的维生素E和防腐剂按常规方式通过加热进行溶解。用0.5重量份L-乳酸钠、0.5重量份海藻糖、5重量份1,3-丁烯甘醇、0.1重量份羰基乙烯基聚合物和84.3重量份精制水和上述混合物进行掺和,并且通过均质机进行乳化。将乳化液和适当量的香料混合,得到洗涤乳。
该产品可用作防晒剂、皮肤清洁剂或皮肤增白剂。
实施例B-18
乳油
两重量份聚氧乙烯甘醇一硬脂酸酯、5重量份自身乳化甘油一硬脂酸酯、2重量份由实施例A-3方法获得的液体蜂胶提取物、一重量份液体石蜡、10重量份甘油基三辛酸酯和适当量的防腐剂。加热溶解混合物,然后和2重量份海藻糖、5重量份1,3-丁烯甘醇和66重量份精制水混合,接着通过均质机对混合物进行乳化,并且和适当量的香料掺和,得到乳油。
该产品可以作为遮阳霜、皮肤清洗剂或皮肤增白剂使用。
实施例B-19
香波
通过加热溶解制备香波,将1.0重量份由实施例A-4方法获得的液体蜂胶提取物、0.2重量份烷基二氨乙基甘油氢氯化物溶液、20.0重量份月桂基二甲基氨乙酸甜菜碱、25.0重量份月桂酰甲基牛磺酸化物(tauride)和52.0重量份的精制水、适当量防腐剂和香料加热溶解,得到香波。
由于该产品具有令人满意的洗发性能并较少损害头发,它可以任意使用以促进包括人在内的动物头发或毛发的生长,并且治疗和/或防止头屑、头皮癣和脱发。
实施例B-20
润丝
将两份半重量由实施例A-1方法获得的液体蜂胶提取物、2.0重量份二硬脂酰二甲基铵氯化物、2.0重量份鲸蜡醇、2.0重量份硅氧烷油、1.0重量份聚氧乙烯油醇醚和适当量的香料通过加热溶解。在搅拌条件下用由3.0重量份1,3-丁烯甘醇、89.0重量份精制水和适当量防腐剂组成的混合物和上述混合物混合,并将所得混合物冷却放置,得到润丝。
该产品有效漂洗头发并且能够任意使用以促进包括人在内的动物头发或毛发的生长,并且治疗和/或防止头屑、头皮癣和脱发。
实施例B-21
头发强化剂
将两重量份“αG RUTIN”(由日本Tokyo,Toyo Sugar Refining有限公司商购的α-糖基芸香苷)及20.0重量份甘油和550重量份加热至60℃的精制水混合并溶解,并且将混合物和溶解0.05重量份“KANKOSO 301(6-[2-[5-溴-2-吡啶基)胺]乙烯基]-1-乙基-2-甲基吡啶嗡碘化物)”(由日本Okayama,Photosensitizing Dyes有限公司商购的花青染料)于440重量份乙醇制得的溶液以及10重量份由实施例A-2方法获得的液体蜂胶提取物、及溶解2.0重量份1-薄荷醇于10重量份乙醇制得的溶液混合。过滤所得混合物并且装瓶,得到头发强化剂。
该产品有效促进头发的生长并且治疗和/或防止秃发和脱发,并且它可以令人满意地用来防止头屑和头皮癣,由于它具有令人满意的防腐和抗炎活性,它还用作外伤的治疗剂。
实施例B-22
洗发液
通过将55.0重量份乙醇、20.0重量份聚氧丙烯(40)丁基醚和13.0重量份精制水和1.0重量份由实施例A-1方法获得的液体蜂胶提取物、及3.0重量份2-0-α-D-吡喃型葡萄糖基-L-抗坏血酸混合,制备组合物。按常规方式将组合物和适当量的PH控制剂、香料及防腐剂混合,得到洗发液。
该产品有效促进头发的生长并且治疗和/或防止秃发和脱发,并且它可以令人满意地用来防止头屑和头皮癣,由于它具有令人满意的防腐和抗炎活性,它还用作外伤的治疗剂。
实施例B-23
洗发膏
通过将3.0重量份蜂蜡、15.0重量份凡士林、42.0重量份液体石蜡、3.0重量份聚氧乙烯(5)硬脂酸酯、2.0重量份聚氧乙烯(6)油醇醚、1.0重量份聚氧乙烯(6)鲸蜡醇醚、1.0重量份由实施例A-3方法获得的液体蜂胶提取物、0.3重量份2-0-α-D-吡喃型葡萄糖基-L-抗坏血酸和32重量份精制水混合,制备组合物。按常规方式将组合物和适当量的PH控制剂、香料及防腐剂混合,得到洗发膏。
该产品能够用于促进头发的生长并且治疗和/或防止秃发和脱发,以及头屑和头皮癣。
实施例B-24
牙膏
制备由以下成分组成的牙膏。具有防腐活性的该产品可以令人满意地用于防止口臭和龋齿。组合物
磷酸钙,二价 45.0重量份
茁霉多糖 2.94重量份
月桂基硫酸钠 1.5重量份
甘油 20.0重量份
聚氧乙烯脱水山梨醇月桂酯 0.5重量份
防腐剂 0.05重量份
由实施例A-3方法获得的液体蜂胶提取物 12.0重量份
麦芽糖醇 5.0重量份
水 13.0重量份
正如以上描述的那样,本发明涉及具有改进水溶性蜂胶有效成分具体说是物质C的蜂胶提取物,并且提供容易发挥蜂胶有效成分的活性并且具有令人满意的稳定性、风味和味道的蜂胶提取物。
本蜂胶提取物并不仅仅限制用于常规的高刺激和容易溶于水的有机溶剂高浓度溶液,它还可以随意用于这些有机溶剂的较低浓度的溶液。因此,本蜂胶提取物可以任意用在诸如食物制品、抗易感染疾病试剂和化妆品的组合物中。
具有大于4,000A310nm/A660nm吸收度比和令人满意颜色、风味和味道的本蜂胶组合物,将对食物制品、化妆品和药物领域作出深不可测的影响。
这里所描述的都是本发明认为的优选的实施方案,有一点清楚的是可以作出各种改进,且旨在覆盖本权利要求书的所有这种改进都将不超出本发明的真实精髓和范围。
Claims (7)
1.蜂胶提取液,其中所说的提取液具有pH5.5-7.0,含有3-[4-羟基-3,5-双(3-甲基-2-丁烯基)苯基]-2-丙烯酸作为活性成分,其中所述活性成分在25℃下以至少0.45ppm溶解在0.5v/v%的乙醇水溶液中,其通过包含下述的工序制备,
(a)将蜂胶块和没有作pH调整的易溶于水的有机溶剂的水溶液接触,溶解并提取蜂胶块的有效成分,
(b)通过添加pH控制剂将所得蜂胶提取液的pH调整至5.5-7.0,
(c)收集蜂胶提取液。
2.蜂胶提取液,其中所说的提取液具有pH5.5-7.0,含有3-[4-羟基-3,5-双(3-甲基-2-丁烯基)苯基]-2-丙烯酸作为活性成分,其中所述活性成分在25℃下以至少0.45ppm溶解在0.5v/v%的乙醇水溶液中,其通过包含下述的工序制备,
(a)将蜂胶块和通过添加pH控制剂调整pH为5.5或更高的易溶于水的有机溶剂的水溶液接触,溶解并提取蜂胶的有效成分,
(b)选择性地调整所得蜂胶提取液的pH值,
(c)收集蜂胶提取液。
3.用于生产具有pH5.5-7.0、以改进蜂胶有效成分的水溶性的蜂胶提取液的方法,包括:
(a)将蜂胶块和没有作pH调整的易溶于水的有机溶剂的水溶液接触,溶解并提取蜂胶的有效成分,
(b)通过添加pH控制剂将所得蜂胶提取液的pH调整至5.5-7.0,
(c)收集蜂胶提取液,
其中收集的蜂胶提取液,其pH为5.5-7.0,含有3-[4-羟基-3,5-双(3-甲基-2-丁烯基)苯基]-2-丙烯酸作为活性成分,所述活性成分在25℃下至少以0.45ppm溶解在0.5v/v%的乙醇水溶液中。
4.用于生产具有pH5.5-7.0、以改进蜂胶有效成分的水溶性的蜂胶提取液的方法,包括:
(a)将蜂胶块和通过添加pH控制剂调整pH为5.5或更高的易溶于水的水溶液接触,溶解并提取蜂胶的有效成分,(b)选择性地调整所得蜂胶提取液的pH值,(c)并收集蜂胶提取液,其中收集的蜂胶提取液,其pH为5.5-7.0,含有3-[4-羟基-3,5-双(3-甲基-2-丁烯基)苯基]-2-丙烯酸作为活性成分,所述活性成分在25℃下至少以0.45ppm溶解在0.5v/v%的乙醇水溶液中。
5.含有权利要求1的蜂胶提取液作为有效成分的组合物。
6.含有权利要求2的蜂胶提取液作为有效成分的组合物。
7.权利要求5或6的组合物,组合物是以食品、化妆品或药品的形式。
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