CN115607595B - 诺丽果发酵物于制备改善体态及肌肤状况的组合物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种诺丽果发酵物的用途，其是用于制备具有下列至少一作用的组合物：改善体态及改善肌肤状况。其中，诺丽果发酵物是由(a)将葡萄糖、诺丽果实与水混合并进行萃取以得到诺丽果培养液，以及(b)将此诺丽果培养液及多个菌种进行发酵而制得。在步骤(b)中，此些菌种包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌，并且在发酵过程中，对此诺丽果培养液及此些菌种照射波长介于620‑750nm的红色光源。此外，诺丽果发酵物进一步还能具有去除自由基、改善排便及肠胃蠕动情况其中至少一种作用。
Description
技术领域
本案关于一种诺丽果发酵物的用途，特别是关于一用于制备改善体态及改善肌肤状况的组合物的用途。
背景技术
檄树(Morinda citrifolia)，又名海滨木巴戟、海巴戟，是茜草科巴戟天属的一种植物，灌木至小乔木，高1-5公尺，属于咖啡经济作物。檄树的果实即为诺丽果(nonifruit)。诺丽果盛产于南太平洋群岛，其为复合果，卵形，约4-7公分大，表面分布众多不均匀的麻状点。诺丽果实初为绿色，后转变为黄色，成熟时几乎变为白色，果实内有很多种子。诺丽果实的果肉汁水较为充足，但其气味重、苦涩感强。
发明内容
有鉴于此，研究或开发一种天然植物成分─诺丽果，并将其制备为对人体有所帮助的天然植物产品，有其必要。
缘此，在一些实施例中，提供一种诺丽果发酵物用于制备改善体态的组合物的用途。上述诺丽果发酵物是借由(a)将葡萄糖、诺丽果实与水混合并进行萃取以得到培养液，以及(b)将此培养液及多个菌种进行发酵而制得。上述菌种包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌。在进行上述发酵的过程中，对培养液及此些菌种照射波长介于620-750nm的红色光源。
在一些实施例中，上述改善体态为增加全身肌肉重、减少全身体脂率、减少腹部脂肪重及/或腿部脂肪重、减少皮下脂肪重及/或内脏脂肪重，及减少腰围其中至少一者。
在一些实施例中，上述诺丽果发酵物是透过促进瘦体素生成及/或促进脂肪代谢，以达到改善体态。
在一些实施例中，上述诺丽果发酵物是透过促进减脂基因的表现量，以达到促进脂肪代谢。
在一些实施例中，上述减脂基因为三酸甘油酯脂解酶(adipose triglyceridelipase,ATGL)基因、脂肪酶E(lipase E,LIPE)基因及体解偶联蛋白1(uncoupling protein1,UCP1)基因其中至少一者。
此外，在一些实施例中，还提供一种诺丽果发酵物用于制备改善肌肤状况的组合物的用途。上述诺丽果发酵物是借由(a)将葡萄糖、诺丽果实与水混合并进行萃取以得到培养液，以及(b)将此培养液及多个菌种进行发酵而制得。上述菌种包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌。在进行上述发酵的过程中，对培养液及此些菌种照射波长介于620-750nm的红色光源。上述改善肌肤状况为改善肌肤泛红、改善肌肤弹力及改善肌肤UV斑其中至少一者。
在一些实施例中，上述诺丽果发酵物是透过促进弹力蛋白增生，以达到改善肌肤弹力。
在一些实施例中，上述诺丽果发酵物还具有去除表面自由基、改善排便情况及改善肠胃蠕动情况其中至少一者之作用。
在一些实施例中，上述葡萄糖的添加量为诺丽果实与水之总重量的2-8wt％。
在一些实施例中，上述水之重量为诺丽果实总重的3-5倍。
在一些实施例中，上述酵母菌的添加量为相对于培养液的0.01-0.5wt％，乳酸菌的添加量为相对于培养液的0.01-0.25wt％，醋酸菌的添加量为相对于培养液为1-20wt％。
在一些实施例中，上述酵母菌的发酵时间为24-72小时，乳酸菌的发酵时间为24-72小时，醋酸菌的发酵时间为72-240小时。
在一些实施例中，上述诺丽果发酵物的pH值为2.7-3.7，且其白利糖度(Brixdegree)为23-27。
综上所述，在任一实施例中，诺丽果发酵物至少可提供下列至少一种作用：改善体态及改善肌肤状况，进而借以用于制备具有对应作用的组合物。在一些实施例中，上述改善体态可为增加全身肌肉重、减少全身体脂率、减少腹部脂肪重及/或腿部脂肪重、减少皮下脂肪重及/或内脏脂肪重，及减少腰围其中至少一者。此外，在一些实施例中，上述改善体态可透过促进瘦体素生成及/或促进脂肪代谢而达成。在一些实施例中，上述促进脂肪代谢可透过促进减脂基因的表现量而达成。在一些实施例中，上述促进脂肪代谢亦可透过促进三酸甘油酯脂解酶(ATGL)基因、脂肪酶E(LIPE)基因及体解偶联蛋白1(UCP1)基因其中至少一者的表现量而达成。在一些实施例中，上述改善肌肤状况可为改善肌肤泛红、改善肌肤弹力及改善肌肤UV斑其中至少一者。此外，在一些实施例中，上述改善肌肤弹力可透过促进弹力蛋白增生而达成。此外，在一些实施例中，诺丽果发酵物至少还具有下列至少一种作用：去除自由基、改善排便情况及改善肠胃蠕动情况，进而借以用于制备具有对应作用的组合物。
附图说明
图1是例1的制备方法所得的诺丽果发酵物的总多酚含量的检测结果图。
图2及图3是例1的制备方法所得的诺丽果发酵物及其他对照组的瘦体素生成的检测结果图。
图4是例1的制备方法所得的诺丽果发酵物及其他对照组的减脂基因之表现量的检测结果图。
图5是例1的制备方法所得的诺丽果发酵物及其他对照组的弹力蛋白分泌量的检测结果图。
图6是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的体内脂肪质量(腹部)的检测结果图。
图7是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的体内脂肪质量(腿部)的检测结果图。
图8是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的腰围的检测结果图。
图9是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的肌肉质量的检测结果图。
图10是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的体脂率的检测结果图。
图11是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的皮下脂肪质量的检测结果图。
图12是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的内脏脂肪质量的检测结果图。
图13及图14是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第2周)的排便状况的问卷结果图。
图15是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第4周)的肌肤弹性的检测结果图。
图16是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第4周)的肌肤泛红程度的检测结果图。
图17是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第4周)的肌肤泛红程度的实际检测照片。
图18是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第4周)的肌肤UV斑的检测结果图。
图19是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第4周)的肌肤UV斑的实际检测照片。
图20是使用例1的制备方法所得的诺丽果发酵物于服用前(第0周)及服用后(第4周)的体内抗氧化能力的检测结果图。
具体实施方式
本文中所使用的数值为近似值，所有实验数据皆表示在正负10％的范围内，最佳为在正负5％的范围内。
本文中所使用的用语「wt％」是指重量百分比，而用语「vol％」是指体积百分比。
本文中所使用的用语「糖度」所指为白利糖度(Brix degrees，符号°Bx)，是测量糖度的单位，其代表在20℃情况下，每100公克水溶液中溶解的蔗糖公克数。
本文中所使用的用语「培养液」是指借由萃取作用所制备之产物。培养液可以溶于溶剂中之溶液形式呈现，或培养液可为不含或大体上不含溶剂之浓缩物呈现。
本文中所使用的用语「发酵物」是指将借由溶剂对原料进行浸提所得到的培养液经过特定的发酵照光程序所形成之效性成份。于此，发酵物可以溶于溶剂中之溶液形式呈现，或发酵物可为不含或大体上不含溶剂之浓缩物呈现。需说明的是，若未特别强调或标注为「未照光」或「未照射红光」，本文中所使用的用语「发酵物」均是指发酵程序提供红光照射所得的发酵物。例如，「发酵物」及「发酵物(照射红光)」是指经过发酵且发酵过程中全程提供红光照射所得之发酵物；而「发酵物(未照射红光)」则是指经过发酵但发酵过程中不提供红光照射所得的发酵物。
本文中所使用的用语「诺丽果」或「诺丽果实」通常是指植物果实，其中果实可为含皮或不含皮之果实、经干燥或以其他物理方式加工以利于处理之果实。其中，以其他物理方式加工可例如为完整、剁碎、切丁、碾磨、研磨、或以其他改变原物料之大小及实体完整性的加工方式，或其任意组合。
本文中所使用的用语「酵母菌」、「乳酸菌」及「醋酸菌」分别是指能以任何商业手段获得(例如可购自于国内或国外保藏机构者)的酵母菌菌株、乳酸菌菌株及醋酸菌菌株，或者利用所属技术领域中所惯用的微生物分离方法而从天然来源中所分离纯化出的酵母菌菌株、乳酸菌菌株及醋酸菌菌株。
在一些实施例中，诺丽果发酵物是借由(a)将葡萄糖、诺丽果实与水混合并进行萃取以得到一培养液；以及(b)利用多个菌种将得到的培养液进行发酵而制得。
在步骤(b)中，所使用的菌种包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌，且在发酵过程中，对殖入菌种的培养液照射一红色光源。在一些实施例中，红色光源的波长介于620-750nm。
在一些实施例中，将诺丽果实依序经过包含加热程序及降温程序的步骤(a)及包含发酵照光程序的步骤(b)后得到诺丽果发酵物(照射红光)。
在一些实施例中，将诺丽果实依序经过包含粉碎程序、加热程序及降温程序的步骤(a)及包含发酵照光程序的步骤(b)后得到诺丽果发酵物(照射红光)。
在一些实施例中，将诺丽果实依序经过包含加热程序及降温程序的步骤(a)及包含发酵照光程序及过滤程序的步骤(b)后得到诺丽果发酵物(照射红光)。
在一些实施例中，将诺丽果实依序经过包含加热程序及降温程序的步骤(a)及包含发酵照光程序、过滤程序及浓缩程序的步骤(b)后得到诺丽果发酵物(照射红光)。
在一些实施例中，将诺丽果实依序经过包含粉碎程序、加热程序及降温程序的步骤(a)及包含发酵照光程序及过滤程序的步骤(b)后得到诺丽果发酵物(照射红光)。
在一些实施例中，将诺丽果实依序经过包含粉碎程序、加热程序及降温程序的步骤(a)及包含发酵照光程序、过滤程序及浓缩程序的步骤(b)后得到诺丽果发酵物(照射红光)。
在一些实施例中，诺丽果实可以是含皮或不含皮的诺丽果实。在一些实施例中，诺丽果实可以是新鲜或干燥的诺丽果实。
在一些实施例中，上述粉碎程序是指将诺丽果实搅打至分裂为碎状的诺丽果实。举例而言，碎状的诺丽果实可以采用果汁机、调理机或均质机搅打而成。
在一些实施例中，上述加热程序是先将诺丽果实与水混合而得到初培养液。接着，再将初培养液于95±5℃下浸泡1±0.5小时以进行萃取(浸提)而得到诺丽果水萃液。接着，再将葡萄糖加至诺丽果水萃液中而得到诺丽果培养液。需说明的是，于加热程序中，若所使用的溶剂(例如水)过少或萃取(浸提)的时间过短，则萃取(浸提)效率将会明显下降；而若萃取(浸提)时间过长，则诺丽果培养液中的效性成份可能会产生因此降解。
在一些实施例中，上述加热程序是先将葡萄糖、诺丽果实与水一起混合而形成初培养液；再将初培养液于95±5℃下萃取(浸提)1±0.5小时而得到诺丽果培养液。由于将葡萄糖与诺丽果实同时混合来进行萃取(浸提)程序，而可不需再开启萃取(浸提)设备来添加葡萄糖加入的葡萄糖可再经过高温环境处理，而有助于葡萄糖的溶解且可降低原料受污染风险。
在一些实施例中，上述加热程序中所使用的水：诺丽果实的重量比例(液固比)为3：1至5：1(即水的重量为诺丽果实总重的3-5倍)。
在一些实施例中，上述加热程序中所使用的葡萄糖的添加量为水与诺丽果实的总重的5±3wt％。借由添加葡萄糖，可使诺丽果培养液中具有足够的糖度，以确保发酵时所使用的菌种可以有足够的养份，让后续的发酵照光程序可顺利进行。
在一些实施例中，上述降温程序是指将加热后的初培养液降至特定温度范围。举例而言，特定温度范围为低于38±3℃。
在一些实施例中，在进行上述发酵照光程序之前，不另滤除诺丽果培养液中的固形物(例如萃取/浸提后的诺丽果实)，借以利用发酵照光程序中所使用的菌种来进一步提取固形物中的效性成份。在一些实施例中，在进行上述发酵照光程序之前，先滤除诺丽果培养液中的固形物，由此可避免后续发酵照光程序中产生其他较为复杂且非所欲的成份，而可较佳地控制诺丽果发酵物的质量。
在一些实施例中，上述发酵照光程序是指将诺丽果培养液同时或分多个阶段殖入多个菌种(包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌)以进行发酵。在发酵的过程中，全程对殖入菌种的诺丽果培养液照射红色光源，以发酵得到诺丽果发酵物(照射红光)。在一些实施例中，上述红色光源的波长介于620-720nm。举例而言，红色光源是使用波长约为635nm的红色LED光源。借由对殖入菌种的诺丽果培养液照射红色光源，可提升菌种的生长速度，进而增加诺丽果发酵物中效性成份的含量。
在一些实施例中，上述发酵照光程序所使用的酵母菌为市售的啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。举例而言，酵母菌可为向中国台湾地区的食品工作发展研究所采购之保藏编号BCRC20271(国际保藏编号ATCC26602)菌株的啤酒酵母。
在一些实施例中，上述发酵照光程序所使用的乳酸菌为市售的瑞士乳酸菌(Lactobacillus helveticus)、胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophiles)或植物乳杆菌。举例而言，乳酸菌可采用保藏编号BCRT910760(国际保藏编号DSM32451)菌株的胚芽乳酸杆菌TCI378。
在一些实施例中，上述发酵照光程序所使用的醋酸菌可为向美国菌种中心(American Type Culture Collection)所采购、保藏编号BCRC11688(国际保藏编号ATCC15973)菌株的醋酸菌。
在一些实施例中，上述发酵照光程序所使用的菌种包括相对于诺丽果培养液为0.01-0.5wt％的酵母菌、相对于诺丽果培养液为0.01-0.25wt％的乳酸菌以及相对于诺丽果培养液为1-20wt％的醋酸菌。
在一些实施例中，上述发酵照光程序是同时或多阶段地殖入多个菌种(包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌)以发酵约3-16日(即72-384小时)。在一些实施例中，酵母菌进行发酵的时间可为1-3日(即24-72小时)，乳酸菌进行发酵的时间可为1-3日(即24-72小时)，醋酸菌进行发酵的时间可为3-10日(即72-240小时)。
在一些实施例中，上述发酵照光程序是三阶段地殖入多个菌种(包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌)以进行发酵。举例而言，上述发酵照光程序是借由先于诺丽果培养液中添加酵母菌，以先将诺丽果培养液中的糖份(例如葡萄糖)经发酵而转化为乙醇。乙醇有助于萃出诺丽果培养液中的效性成份，并形成第一初发酵物。而后，于第一初发酵物中加入乳酸菌，以形成第二初发酵物。透过于第一初发酵物中加入乳酸菌，可使第一初发酵物内尚未反应的糖份经发酵而转化为乳酸，以进一步消耗其中的糖份，进而降低第二初发酵物所含的糖度。由于在第二初发酵物中产生了乳酸，其将会进一步改变整体反应环境(例如使第二初发酵物的pH值下降)，对于萃取诺丽果培养液内的效性成份亦有影响与帮助(使溶于酸性溶液的效性成份更易萃取出)。接着，再于第二初发酵物中加入醋酸菌，以形成诺丽果发酵物。由此，可使第二初发酵物内的乙醇转化为乙酸。而由于乙醇被进一步消耗，酵母菌可进一步地继续将糖份转化为乙醇，使酵母菌进行的反应更为完全，糖度进一步降低。在一些实施例中，诺丽果发酵物的白利糖度为2.7-3.7°Bx，以确保发酵反应完全。在一些实施例中，诺丽果发酵物的pH值约为2.3-4.3。
在一些实施例中，上述发酵照光程序是三阶段地殖入多个菌种(包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌)以进行发酵。举例而言，上述发酵照光程序所使用的酵母菌与乳酸菌二者的添加顺序不限，以形成第一初发酵物；最后再加入醋酸菌到第一初发酵物中，以发酵形成第二初发酵物。由此，可确保第一初发酵物中已经产生乙醇，而可使醋酸菌更佳地生长及进行乙醇的转化反应，进而降低第二初发酵物中的乙醇含量。在一些实施例中，醋酸菌进行发酵的时间长于酵母菌的发酵时间，亦长于乳酸菌的发酵时间，由此可使醋酸菌更完全地消耗第二初发酵物中的乙醇。
在一些实施例中，上述发酵照光程序是二阶段地殖入多个菌种(包括酵母菌、乳酸菌及醋酸菌)以进行发酵。举例而言，可先于诺丽果培养液中同时添加酵母菌与乳酸菌进行发酵，以形成第一初发酵物。接着，再加入醋酸菌到第一初发酵物中，以发酵形成诺丽果发酵物。因酵母菌与乳酸菌两者的发酵反应皆较为快速，且二者所需的发酵时间相近，而借由于酵母菌及乳酸菌之后再加入醋酸菌，可让诺丽果培养液在酵母菌及乳酸菌的发酵阶段先以较短时间(例如共同发酵1日)同时完成第一初发酵物的发酵反应，而能减少整体诺丽果发酵物的发酵所需时间。
在一些实施例中，上述发酵照光程序所使用的酵母菌、乳酸菌及醋酸菌可于25-40℃下进行发酵反应，较佳为28-32℃。若温度超过40℃，将会使菌种失去活性；而若温度低于25℃，则发酵反应的速率将过低、甚至无法进行发酵反应，不利于第一初发酵物、第二初发酵物及/或诺丽果发酵物的取得。
在一些实施例中，上述过滤程序是指将经过上述发酵照光程序的诺丽果发酵物通过筛网，以将诺丽果发酵物内的固形物滤除，并形成诺丽果发酵物(过滤液)。举例而言，上述筛网可以是200网目(mesh)的筛网。
在一些实施例中，上述浓缩程序是指将经过上述发酵照光程序的诺丽果发酵物进行减压浓缩(厂牌/型号：BUCHI-Rotavapor R-100)，或将经过上述过滤程序的诺丽果发酵物(过滤液)进行减压浓缩(厂牌/型号：BUCHI-Rotavapor R-100)，借以调整诺丽果发酵物的成份浓度，进而得到诺丽果发酵物(浓缩物)。
在一些实施例中，可于诺丽果发酵物(过滤液)/诺丽果发酵物(浓缩物)/诺丽果发酵物中添加寡醣，以使最后得到的诺丽果发酵物具有所欲的糖度。在一些实施例中，寡糖是指由3-10个单醣分子聚合而成的低聚糖。在一些实施例中，寡糖例如可为果寡糖、半乳寡糖、木寡糖或异麦芽寡糖。举例而言，可于诺丽果发酵物(过滤液)/诺丽果发酵物(浓缩物)/诺丽果发酵物中添加相对诺丽果发酵物(过滤液)/诺丽果发酵物(浓缩物)/诺丽果发酵物之重量为40-70wt％(较佳为60wt％)的异麦芽寡糖，使最后得到的诺丽果发酵物的白利糖度为23-27°Bx，而pH值为2.7-3.7。
在一些实施例中，诺丽果发酵物可用于制备改善体态的组合物的用途，其中诺丽果发酵物是透过促进瘦体素生成及/或促进脂肪代谢以达到上述改善体态(例如为增加全身肌肉重、减少全身体脂率、减少腹部脂肪重及/或腿部脂肪重、减少皮下脂肪重及/或内脏脂肪重，及减少腰围其中至少一者)。
在一些实施例中，诺丽果发酵物是透过促进减脂基因的表现量而达成促进脂肪代谢。在一些实施例中，上述减脂基因可为三酸甘油酯脂解酶(adipose triglyceridelipase，简称为ATGL)基因、脂肪酶E(lipase E，简称为LIPE)基因及体解偶联蛋白1(uncoupling protein 1，简称为UCP1)基因其中至少一者。
在一些实施例中，诺丽果发酵物可用于制备改善肌肤状况的组合物的用途。上述改善肌肤状况例如可为改善肌肤泛红、改善肌肤弹力及改善肌肤UV斑其中至少一者。
在一些实施例中，诺丽果发酵物是透过促进弹力蛋白增生而达成改善肌肤弹力。
在一些实施例中，诺丽果发酵物还具有抗氧化及去除表面自由基其中至少一者的作用。
在一些实施例中，诺丽果发酵物还具有改善排便状况及改善肠胃蠕动状况其中至少一者的作用。
在以下范例中，使用Excel软件进行统计分析。数据以平均值±标准偏差(SD)表示，各组之间的差异以学生t检验(student’s t-test)进行分析。并且，在对应图式中，「*」代表p值小于0.05，「**」代表p值小于0.01，以及「***」代表p值小于0.001。当「*」越多时，代表统计上的差异越显著。
例1：诺丽果发酵物之制备方法
制备步骤依序如下：
1.首先，将诺丽果实进行粗碎(Osterizer品牌的10speed blender)并以孔径为12mm的筛网将其过筛，去除过大颗粒后取得诺丽果实。
2.接着，先将液固重量比为3：1的水与诺丽果实一起混合，并根据水与诺丽果实之总重而添加5wt％的葡萄糖，以形成混合液。再将混合液于95℃下萃取(浸提)1小时以得到诺丽果培养液。
3.接着，冷却诺丽果培养液至低于38℃。
4.接着，于步骤4中，全程对诺丽果培养液照射波长635nm的红色LED光源。将诺丽果培养液依序殖入0.1％的啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae，保藏编号BCRC20271)发酵1日、0.05％的胚芽乳酸菌(Lactobacillus plantarum)TCI378(国际保藏编号DSM32451，保藏编号BCRT910760)发酵1日；接着，再殖入5％醋酸菌(Acetobacter aceti，保藏编号BCRC11688)发酵5日，以得到诺丽果发酵物。
5.接着，使用200网目的网筛过滤诺丽果发酵物，以得到诺丽果发酵物(过滤液)。
6.接着，将诺丽果发酵物(过滤液)于55-65℃下进行减压浓缩，并添加60wt％的异麦芽寡糖，以使所得到的诺丽果发酵物(浓缩物)的白利糖度为25±2°Bx、pH值为3.2±0.5时，停止浓缩。
7.接着，将诺丽果发酵物(浓缩物)于100℃下灭菌2小时，进而得到最终的诺丽果发酵物。
需说明的是，以下实验检测中所使用的诺丽果发酵物(未照射红光)可使用例1的制备方法而得。不同的是，在例1的制备方法之步骤4中，诺丽果发酵物(未照射红光)是以自然光取代红色LED光源，其余的照射时间及条件则均与诺丽果发酵物(照射红光)相同。
此外，以下实验检测中所使用的诺丽果培养液可使用例1的制备方法而得。不同的是，诺丽果培养液并未经过例1的制备方法之步骤4，其余的条件则均与诺丽果发酵物(照射红光)相同。
例2：诺丽果发酵物之多酚定量
标准曲线绘制：
首先，将10mg的没食子酸(gallic acid，简称为GA)(购自Sigma，料号：G7384)溶于水中，并添加10mL的体积至量瓶中，得到1000μg/mL的没食子酸溶液(即1,000ppm GA)后，将溶液储存于-20℃作为储备溶液。之后，将储备溶液稀释10倍至100μg/mL的浓度，而未使用完之液体则储存于-20℃之环境。接着，于玻璃试管中分别配制0、20、40、60、80及100μg/mL的没食子酸标准溶液，配制方式显示如下表1：
表1：没食子酸标准溶液配置方法
之后，添加500μL的佛萧酚试剂(Folin-Ciocalteu’s phenol reagent)(购自Merck，料号：1.09001.0100)、混合均匀并静置3分钟，接着添加400μL的7.5％碳酸钠(sodium carbonate)(Sigma 31432，溶于水中)、混合均匀并反应30分钟。接着，经由涡旋(vortex)确保无气泡后取200μL的标准溶液于750nm下测量吸光值，并绘制标准曲线。
样品总多酚定量实验：
将使用例1的制备方法所得的对照一组(诺丽果培养液)、对照二组(诺丽果发酵物(未照射红光))及实验组(即诺丽果发酵物(照射红光))作为样本。将各组分别以水稀释20倍至1200μL并取100μL的体积至玻璃试管中，每组样品需三重复。之后，添加500μL的佛萧酚试剂、混合均匀并静置3分钟。
接而添加400μL的7.5％碳酸钠、混合均匀并反应30分钟至1小时。再经由涡旋确保无气泡后取200μL的各组反应溶液于750nm下测量吸光值，并以内差法算出浓度后，再回乘稀释倍数以取得原浓度。
请参照图1，相较于对照一组及对照二组，实验组的总多酚含量有显著提升。相较于对照一组，实验组的总多酚含量提升约2.49倍；而相较于对照二组，实验组的总多酚含量则提升约1.26倍。因此，由图1之实验结果显示，经照射红光的诺丽果发酵物会大量释出多酚，而可有效改变诺丽果发酵物中的所含成分，有效提升活性成份。而由于多酚具有清除自由基、抗氧化之能力，因此诺丽果发酵物(照射红光)亦因此被证实具有清除自由基及抗氧化的能力，甚至诺丽果发酵物(照射红光)可具有较诺丽果发酵物(未照射红光)更优异的清除自由基及抗氧化的能力。
例3：细胞试验-提升瘦体素
于此，所使用的细胞分化培养基为添加有10vol％FBS(品牌：Gibco，编号10437-028)、1vol％抗生素-抗霉菌素(Antibiotic-Antimycotic)(Gibco公司，产品编号：15240-062)(以下称为AA)、1.0μM/mL地塞米松(dexamethasone，简称为DEXA；品牌：Sigma，编号50-02-2)、0.5mM/mL IBMX(Methylisobutylxanthine；品牌：Sigma，编号28822-58-4)及1.0μg/mL胰岛素(Insulin，品牌：Sigma，编号I9278)的DMEM培养基。所使用的脂肪维持培养基为添加10vol％FBS、1vol％AA及1.0μg/mL胰岛素的DMEM培养基(品牌：Gibco)。
检测流程：
首先，以每孔1×104个细胞密度，将3T3-L1细胞(购自BCRC，编号60159)接种含有100μL细胞分化培养基的96孔培养盘的各孔中，并置于37℃下培养6天。于6天的培养期间，每2天更换一次新鲜的细胞分化培养基。接着，于培养6天后，更换细胞分化培养基为脂肪维持培养基，并置于37℃下培养7天。于7天的培养期间，每2天更换一次新鲜的脂肪维持培养基。于培养7天后，使用显微镜(厂牌：ZEISS)观察各孔中的细胞内的油滴(lipid droplet)是否形成以确认细胞完全分化成脂肪细胞，供后续实验使用。
将脂肪细胞分成4个组别：实验组、对照一组、对照二组及空白组。移除各组别的分化培养基，并更换成每孔100μL实验培养基，然后置于37℃下接续培养12天。于12天的培养期间，每2天更换一次新鲜的100μL实验培养基。其中，于第一组实验(对应的实验结果示于图2)中，实验组的实验培养基中含有0.125vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光)；对照一组的实验培养基中含有0.125vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果培养液；而对照二组的实验培养基中含有0.125vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(未照射红光)；而空白组的实验培养基则不含上述诺丽果培养液、诺丽果发酵物(未照射红光)及诺丽果发酵物(照射红光)。而于第二组实验(对应的实验结果示于图3)中，实验组的实验培养基中含有0.25vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光)；对照一组的实验培养基中含有0.25vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果培养液；而对照二组的实验培养基中含有0.25vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(未照射红光)；而空白组的实验培养基则不含上述诺丽果培养液、诺丽果发酵物(未照射红光)及诺丽果发酵物(照射红光)。
接着，以Mouse LEP(Leptin)ELISA套组(品牌：Elabscience，编号E-EL-M3008)收集各组3T3-L1细胞的培养基并检测各组瘦体素含量。
于此，将空白组检测到的瘦体素相对产率视为100％来计算对照一组、对照二组及实验组的瘦体素相对产率。并且，各组之间的统计学显著差异是借由学生t-试验来统计分析，分别如图2及图3所示。
在图2中，除了空白组之外，各组的实验培养基中分别含有如前所述0.125vol％的待测样品。如图2所示，实验组的瘦体素相对生成量为122.1％，而对照一组的瘦体素相对生成量为77.5％、对照二组的瘦体素相对生成量则为87.9％。换言之，实验组的瘦体素相对生成量明显高于对照一组及对照二组。由此可知，诺丽果发酵物(照射红光)能有效地促进受体的瘦体素生成，进而具有能抑制受体食欲及增加受体能量消耗的能力。
另外，在图3中，除了空白组之外，各组的实验培养基中分别含有如前所述0.25vol％的待测样品。如图3所示，实验组的瘦体素相对生成量为123.8％，而对照一组的瘦体素相对生成量为83.6％、对照二组的瘦体素相对生成量则为107.5％。换言之，实验组的瘦体素相对生成量明显高于对照一组及对照二组。由此可知，诺丽果发酵物(照射红光)能有效地促进受体的瘦体素生成，进而具有能抑制受体食欲及增加受体能量消耗的能力。
综合图2及图3之实验结果可知，诺丽果发酵物(照射红光)能有效地促进受体的瘦体素生成，进而具有能抑制受体食欲、增加受体能量消耗及改善体态的能力。
例4：细胞试验-促进脂肪代谢及促进脂肪代谢基因之表现量
材料与仪器：
细胞株：小鼠骨髓基质细胞OP9(购自BCRC，编号6566)。
培养基：含有20％胎牛血清(fetal bovine serum，简称为FBS)(GIBCO公司，编号10438-026，美国)、1％抗生素-抗霉菌素(Antibiotic-Antimycotic)(Gibco公司，编号15240-062)的α-最低限度必需培养基(α-Minimum essential medium，简称为α-MEM)(Gibco公司，编号12000-022)。
RNA萃取试剂套组(购自Geneaid公司，中国台湾，Lot No.FC24015-G)。
反转录酶(III Reverse Transcriptase)(Invitrogen公司，美国，编号18080-051)。
测量标的基因引子，其中包含ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因，另包括内部控制组(m-ACTB基因)。
KAPAFAST qPCR试剂组(购自Sigma公司，美国，编号38220000000)。
ABI StepOnePlusTM实时PCR系统(ABI StepOnePlusTM Real-Time PCR system(Thermo Fisher Scientific公司，美国))。
试验样品：分别使用例1之制备方法所得的诺丽果培养液、诺丽果发酵物(未照射红光)及诺丽果发酵物(照射红光)。
实验步骤：
首先，取1.5×105个小鼠骨髓基质细胞至每孔含有2mL上述培养基的细胞培养盘中，于37℃下培养24小时，并且将培养后的小鼠骨髓基质细胞依据下列表2所示分为4组：空白组、对照一组(诺丽果培养液)、对照二组(诺丽果发酵物(未照射红光))及实验组(诺丽果发酵物(照射红光))。各组更换2mL实验培养基后接续培养24小时。每组进行三重复。
表2：测试条件
将处理后的小鼠骨髓基质细胞(B组至D组)及空白组(A组)以细胞裂解液分别破细胞膜，以形成四组的细胞溶液。接着，以RNA萃取试剂套组(购自Geneaid公司，中国台湾，LotNo.FC24015-G)分别萃取四组细胞溶液内的RNA。接着，每组取1000纳克(ng)的萃取出的RNA作为模板，透过III反转录酶(购自Invitrogene公司，美国，编号18080-051)将萃取出的RNA反转录为相应之cDNA。再借由ABI StepOnePlusTM实时PCR系统(ABIStepOnePlusTM Real-Time PCR system(Thermo Fisher Scientific公司，美国))、KAPASYBR FAST(购自Sigma公司，美国，编号38220000000)及表3的引子(SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:8)对四组的cDNA进行定量实时反转录聚合酶连锁反应(quantitative real-timereverse transcription polymerase chain reaction)以观察四组的小鼠骨髓基质细胞内的ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因的表现量。定量实时反转录聚合酶连锁反应的仪器设定条件为95℃反应20秒，接着95℃反应3秒，60℃反应30秒，并重复40个循环，并使用2-ΔCt方法进行基因定量。于此，借由cDNA进行定量实时反转录聚合酶连锁反应可间接定量ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因的mRNA表现量，进而推断ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因编码的蛋白质的表现量。
表3
*R为REVERSE反向，F为FORWARD顺向。
需要特别说明的是，在图4中所显示的ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因的相对基因表现系以相对倍率呈现，其中使用Excel软件之STDEV公式计算标准偏差，并在Excel软件中以单尾学生t检验(Student’st-test)分析是否具有统计上的显著差异。
如图4所示，将空白组(A组)的ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因的表现量视为1(即100％)，实验组(D组)相对于A组的ATGL基因的表现量约为135.8％、相对于A组的LIPE(HSL)基因的表现量约为122.0％，且相对于A组的UCP1基因的表现量约为107.7％，代表实验组(D组)的ATGL基因的表现量上升为A组的1.358倍、LIPE(HSL)基因的表现量上升为A组的1.22倍，且UCP1基因的表现量上升为A组的1.077倍。由此可知，当小鼠骨髓基质细胞以含有0.025mg/mL的诺丽果发酵物(照射红光)处理后，小鼠骨髓基质细胞的ATGL基因、LIPE(HSL)基因和UCP1基因的表现量皆有上升的现象。
接着，再分别将实验组(D组)与对照一组(B组)及对照二组(C组)进行比较。就ATGL基因的表现量而言，实验组之ATGL基因的表现量均高于B组及C组，且分别为B组及C组的2.10倍及3.01倍。就LIPE(HSL)基因的表现量而言，实验组之LIPE(HSL)基因的表现量均高于B组及C组，且分别为B组及C组的1.60倍及1.18倍。而就UCP1基因的表现量而言，实验组之UCP1基因的表现量均高于B组及C组，且分别为B组及C组的2.18倍及2.65倍。
ATGL(adipose triglyceride lipase)基因所编码的蛋白质为三酸甘油脂水解酶(ATGL)。三酸甘油酯为脂肪细胞之脂滴或脂肪体中的主要构造成分，亦为脂肪细胞中储存能量的主要来源，而三酸甘油脂水解酶主要作用即为分解三酸甘油酯，三酸甘油酯水解酶存在于脂滴表面，被激活后三酸甘油脂水解酶会分解甘油三酯，为个体提供能量。因此，ATGL基因表现量上升，会促进脂肪细胞中脂肪的分解，并使其中脂肪累积量降低。因此，如图4之实验结果所示，诺丽果发酵物(照射红光)能显著提升ATGL基因(即与脂肪代谢(减脂)相关基因)的表现量，而使诺丽果发酵物(照射红光)具有促进代谢脂肪的活性的能力，而对脂肪分解具有促进的效果，更能有效地预防及改善肥胖症状。
LIPE(lipase E)基因所编码的蛋白质为脂肪酶，其具有长形(long form)与短形(short form)。长形主要表达在类固醇生成组织(例如睪丸中)，其主要功能为将胆固醇酯(cholesteryl esters)转化为游离的胆固醇，以利后续产生类固醇类激素。短形则主要表达在脂肪组织中，其主要功能为将存储的三酸甘油酯水解成游离的脂肪酸。因此，LIPE基因表达量上升，会促进脂肪细胞中脂肪的分解，并使其中脂肪累积量降低。此外，ATGL基因与LIPE基因分别转录脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)与荷尔蒙敏感性脂解酶(hormone-sensitive lipase，简称为HSL)。具体而言，ATGL可将细胞储存的三酸甘油脂水解成游离之脂肪酸及双酸甘油脂，而HSL则将双酸甘油脂进一步水解成单酸甘油脂，二者均于脂肪上扮演举足轻重的角色。因此，如图4之实验结果所示，诺丽果发酵物(照射红光)能显著提升LIPE(HSL)基因(即与脂肪代谢(减脂)相关基因)的表现量，而使诺丽果发酵物(照射红光)具有促进代谢脂肪的活性的能力，而对脂肪分解具有促进的效果，更能有效地预防及改善肥胖症状。
UCP1(uncoupling protein 1)基因所编码的蛋白质为体解偶联蛋白(UCP)，其为线粒体阴离子载体蛋白(mitochondrial anion carrier proteins，简称为MACP)家族的成员之一，主要功能为将三磷酸腺核苷(Adenosine triphosphate，简称为ATP)还原，并促进阴离子从线粒体的内膜向外转移，及促进质子从外部到线粒体内膜的返回转移，并将过程中产生的能量以热能释放出来；其中，UCP1基因仅在棕色脂肪细胞中表达，该棕色脂肪细胞含有大量的粒线体，能够燃烧脂肪油滴以产生热能。因此，UCP1基因的表现量上升，被认为能够促进脂肪的分解，并使脂肪的累积量降低。基此，如图4之实验结果所示，诺丽果发酵物(照射红光)能显著提升UCP1基因(即与脂肪代谢(减脂)相关基因)的表现量，而使诺丽果发酵物(照射红光)具有促进代谢脂肪的活性的能力，以对脂肪分解具有促进之效果，更能有效地预防及改善肥胖症状。
由上可知，如图4之实验结果所示，诺丽果发酵物(照射红光)能借由显著提升ATGL基因、LIPE(HSL)基因及UCP1基因三种与脂肪代谢(亦即减脂)相关基因中至少一种的表现量，而使诺丽果发酵物(照射红光)具有促进代谢脂肪的活性的能力，以对脂肪分解具有促进之效果，更有效于预防及改善肥胖症状。此外，如图4之实验结果所示，诺丽果发酵物(照射红光)对于促进代谢脂肪的活性、促进脂肪分解与预防及改善肥胖症状，均具有较诺丽果培养液及诺丽果发酵物(未照射红光)更为优异的表现。
例5：细胞试验-促进弹力蛋白增生
于此，所使用的培养基为含有90vol％最低限度基本培养基(minimum essentialmedium；品牌Gibco)、10vol％胎牛血清蛋白(fetal bovine serum，FBS；品牌：Gibco)及1mM丙酮酸钠(sodium pyruvate，品牌：Gibco)的细胞培养基(以下称为MEM培养基)。所使用的细胞株为人类肌肤成纤维细胞(CCD-966Sk cell，品牌：CRL-1881)，以下称CCD-966Sk细胞。
将CCD-966Sk细胞以每孔1×105个的数量接种于每孔含2毫升MEM培养基之培养盘中，并于37℃下培养24小时，并分为4组：实验组、对照一组、对照二组及空白组。接着，更换MEM培养基为实验培养基，并将实验组、对照一组、对照二组及空白组均于37℃下培养24小时。其中，实验组的实验培养基中含有0.25vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光)；对照一组的实验培养基中含有0.25vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果培养液。对照二组的实验培养基之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(未照射红光)。空白组的实验培养基中则不含上述诺丽果培养液、诺丽果发酵物(未照射红光)及诺丽果发酵物(未照射红光)。
接着，以弹性蛋白检测套组(FastinTMElastin Assay kit，品牌：Biocolor)处理各组CCD-966Sk细胞后，以全光谱光学分析仪(品牌：BioTek，Epoch)检测四组CCD-966Sk细胞的弹力蛋白生成量。其中，将未以实验培养基培养24小时的空白组量测到的弹力蛋白含量视为1(即弹力蛋白生成量为100％)。需要特别说明的是，各组之间的统计学显著差异是藉由学生t-试验(Student’st-test)来统计分析，如图5所示。
在图5中，相较于空白组，实验组的弹力蛋白生成量为588.6％，而对照一组的弹力蛋白生成量为82.8％、对照二组的弹力蛋白生成量则为84.4％。换言之，空白组、对照一组及对照二组的弹力蛋白生成量之间并无明显差异，且相较于对照一组及对照二组，实验组的弹力蛋白生成量显著地提高(分别为对照一组及对照二组的7.10倍及6.97倍)，代表以含有诺丽果发酵物(照射红光)培养的CCD-966Sk细胞可生成更多的弹力蛋白。由此可知，诺丽果发酵物(照射红光)具有促进细胞合成弹力蛋白的能力。基此，当受体服用诺丽果发酵物(照射红光)后，定殖于受体体内的诺丽果发酵物(照射红光)具有可促进受体的肌肤细胞生成弹力蛋白，进而提高受体肌肤弹性的能力。
例6：人体试验-改善体态
令8位肥胖受试者(即其体脂率大于25％或BMI值大于24)每日饮用一瓶6mL诺丽果发酵饮(其含有12vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光))，连续饮用2周。并且，于服用前(即第0周)及服用后(即第2周)，以体重机测量此些受试者体重，以体脂计(厂牌：TANITA BC-601FS)测量此些受试者腹部及腿部之体内脂肪质量、全身体脂率、肌肉质量、皮下及内脏脂肪质量，以及以布尺量测此些受试者的腰围。并且，第0周的量测结果与第2周的量测结果之间的统计学显著差异是借由学生t-试验来统计分析，如图6至图12所示。
由图6之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使体内脂肪质量(腹部)减少约316.25公克。
由图7之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使体内脂肪质量(腿部)减少约120.62公克。
由图8之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使腰围减少约1.2公分。
由图9之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使肌肉质量增加约712.5公克。
由图10之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使体脂率减少约1.0％。
由图11之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使皮下脂肪质量减少约475.0公克。
由图12之实验结果可知，与服用前(第0周)相比，持续服用诺丽果发酵饮2周可使内脏脂肪质量减少约137.5公克。
由此可知，长期服用含有诺丽果发酵物(照射红光)的诺丽果发酵饮可改善肥胖者的体内脂肪(腹部及腿部)累积、腰围、肌肉质量、体脂率、皮下及内脏脂肪累积，亦即诺丽果发酵物(照射红光)具有瘦身减脂及改善体态的能力。
例7：人体试验-改善排便状况及改善肠胃蠕动情况
令8位肥胖受试者(即其体脂率大于25％或BMI值大于24)每日饮用一瓶6mL诺丽果发酵饮(其含有12vol％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光))，连续服用2周。并且，于服用前(即第0周)及服用后(即第2周)，以问卷方式分析受试者肠胃及排便情况。
首先，对上述受试者于第0周(服用上述诺丽果发酵饮前)、第2周(服用上述诺丽果发酵饮后)进行肠胃状态的问卷调查。详细来说，在每周测试时填写问卷，其调查的症状项目及计分方式如下表4。各分数代表各种症状项目的严重程度，并区分为：1分为无异状(正常)；2分为轻微；3分为普通；4分为有些严重；5分为非常严重。
表4
将问卷的分数数据换算为百分制的问卷结果，并将其平均而列于下表5与图13及图14所示。
表5
针对项目1(有便秘之困扰)及项目2(平时容易胀气、消化不良)，由上表5及对应的图13之问卷结果可知，8位受试者在服用前(即第0周)均有便秘之困扰且平时容易胀气、消化不良的情况。而在服用诺丽果发酵饮(即第2周)后，对于便秘之困扰的平均分数下降至83.3分(较轻微)，代表持续服用诺丽果发酵饮2周后即可改善便秘的情况。此外，在服用诺丽果发酵饮(即第2周)后，对于平时容易胀气、消化不良的平均分数下降至76.9分(较轻微)，代表持续服用诺丽果发酵饮2周后即可改善容易胀气、消化不良的情况。再由图14的问卷结果可看出，在服用诺丽果发酵饮(即第2周)后，约有88％的受试者对于排便顺畅及胃肠蠕动频率明显有感，更代表含有诺丽果发酵物(照射红光)的诺丽果发酵饮确实具有可改善排便情况及改善胃肠蠕动情况的能力。
例8：人体试验-改善肌肤状况
令8位25-40岁之受试者每日饮用一瓶50g诺丽果发酵饮(其含有12wt％之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光))，连续服用4周(即28日)。
受试者于开始服用前(脸部已清洁，第0周)及服用28日后，依据不同检测项目，使用对应的仪器及测量方式，纪录脸部肌肤之数值、并拍摄服用前及服用后的照片。(于服用前及服用后进行检测时，受试者所在的测试区域的温度与湿度为一致，以减少外界的温湿度等因素会对肌肤所造成的影响)。
将分别对肌肤进行以下检测项目的检测：
1.肌肤弹性(elasticity)及紧实度(firmness)
使用购自德国Courage+Khazaka electronic公司之肌肤弹力检测探头MPA580(C+K Multi Probe Adapter System；Germany)对同一受试者在服用前与服用前的面部肌肤进行检测。测试原理是基于吸力和拉伸原理，在被测试的肌肤表面产生一个负压将肌肤吸进一个测试探头内，透过光学测试系统检测肌肤被吸进探头内的深度，并以软件分析计算肌肤弹性与紧实度。其中，由仪器根据肌肤弹性与紧实度初始所测得之数值作为100％，并记录受试者持续摄取诺丽果发酵物(照射红光)4周后的根据肌肤弹性与紧实度所测得之数值，并将其与初始所测得之数值进行换算及比较。
2.肌肤红色斑点数量以及面积
使用全脸肤质检测仪(7th Generation VISIA Complexion Analysis System；Canfield，USA)测定该些受试者的红色斑点数量及面积。由仪器根据红色斑点数量及面积初始所测得之数值作为100％，并记录受试者持续摄取诺丽果发酵物(照射红光)4周后的根据红色斑点数量及面积所测得之数值，并将其与初始所测得之数值进行换算及比较。
3.肌肤斑点
使用美国Canfield所贩卖之VISIA高阶数字肤质检测仪对同一受试者在饮用前与饮用后的面部肌肤进行检测。该仪器系以UV光进行脸部肌肤拍摄及RBX偏振光技术进行脸部肌肤拍摄。紫外线可被黑色素吸收，提高色素斑的显现度，检测肉眼不可见的表皮层黑色素斑。测量数值越高，说明紫外线色斑(UV斑)越多。而RBX偏振光可检测肉眼不可见的真皮层黑色素斑。测量数值越高，说明棕色斑越多。其中，由仪器根据肌肤UV斑初始所测得之数值作为100％，并记录受试者持续摄取诺丽果发酵物(照射红光)4周后的根据肌肤UV斑所测得之数值，并将其与初始所测得之数值进行换算及比较。
关于受试者之「肌肤弹性及紧实度」的检测结果，其显示于图15。如图15之实验结果所示，相较于使用前的100％，在使用含有诺丽果发酵物(照射红光)之诺丽果发酵饮4周后，受试者的肌肤弹性紧实度为104.2％而改善约4.2％。由此可见，诺丽果发酵物(照射红光)确实具有可促进并改善肌肤弹性及紧实度的能力，进而具有能透过改善肌肤弹性而达到改善肌肤外观及状况的能力。
关于受试者之「肌肤红色斑点数量及面积」的检测结果及实际的外观变化，分别显示于图16及图17。如图16之实验结果所示，相较于使用前的100％，在使用含有诺丽果发酵物(照射红光)之诺丽果发酵饮4周后，受试者的脸部肌肤泛红程度为91.8％而下降约8.2％。图17之实拍图像为其中一位受试者脸部肌肤在第0周及使用第4周后，以检测仪所拍摄的图像。由图17之图像可知，在使用含有诺丽果发酵物(照射红光)之诺丽果发酵饮4周后，受试者的肌肤红色斑点数量/面积明显减少或淡化。换言之，诺丽果发酵物(照射红光)具有可透过改善或淡化肌肤泛红而达到改善肌肤外观及状况的能力。
关于受试者之「肌肤斑点」的检测结果及实际的外观变化，分别显示于图18及图19。在图18中，相较于使用前的100％，在使用含有诺丽果发酵物(照射红光)之诺丽果发酵饮4周后，受试者的肌肤UV斑为93.9％而下降约6.1％。图19之实拍图像为其中一位受试者脸部肌肤在第0周及使用第4周后，以检测仪所拍摄的图像。由图19之图像可知，在使用含有诺丽果发酵物(照射红光)之诺丽果发酵饮4周后，受试者的肌肤UV斑点数量/面积明显减少或淡化。换言之，诺丽果发酵物(照射红光)具有可透过改善或淡化肌肤UV斑点而达到改善肌肤外观及状况的能力。
例9：人体试验-提升体内抗氧化能力
令8位25-40岁之受试者每日服用6mL之使用例1的制备方法所得到的诺丽果发酵物(照射红光)，并分别于服用前(即第0周)及服用28日(即第4周)后，分别将受试者血液中的红血球细胞以红血球分离液进行分离，并将经分离的受试者血液以PBS调整至106cells/mL后，使用生化比色法测定人体血球细胞中谷胱甘肽S转移酶(glutathione s-transferase，简称为GST)的活性，以测量各受试者血液中GST的活性。其中，以使用前之GST的活性为100％，并将实验结果显示于图20。
谷胱甘肽S转移酶(GST)广泛存在于哺乳动物各组织中，用以催化谷胱甘肽(glutathione，简称为GSH)与化学物质的亲电子基团进行结合，最终形成硫醚氨酸排出体外，在体内解毒的功能上起重要作用。GSH-ST具有消除体内过氧化物及解毒的双重功能。其中，谷胱甘肽S转移酶在谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxide，简称为GSH-PX)活力低下的条件下，只有清除体内脂质过氧化物(lipid peroxide，简称为LPO)的功能。如图20之实验结果所示，相较于使用前的100％，在使用诺丽果发酵物(照射红光)4周后，受试者的血液中GST的活性为107.2％而提升约7.2％，且改善率高达75％(亦即在此8位受测者中，有6位受测者达到改善效果；结果未显示)。由此可见，诺丽果发酵物(照射红光)能有效提升抗氧化的指标酵素(即GST)，而确实具有能提升人体中整体抗氧化的能力。
当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。
【序列表】
<110>百岳特生物技术（上海）有限公司
<120>诺丽果发酵物于制备改善体态及肌肤状况的组合物的用途
<150> US 63/221,010
<151> 2021-07-13
<160> 8
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ATGL-Forward Primer
<400> 1
ggatggcggcatttcagaca 20
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ATGL-Reverse Primer
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caaagggttgggttggttcag 21
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LIPE-Forward Primer
<400> 3
tggcacaccattttgacctg 20
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LIPE-Reverse Primer
<400> 4
ttgcggttagaagccacatag 21
<210> 5
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> UCP1-Forward Primer
<400> 5
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<210> 6
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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<223> UCP1-Reverse Primer
<400> 6
ctgagtgaggcaaagctgattt 22
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ACTB-Forward Primer
<400> 7
ggctgtattcccctccatcg 20
<210> 8
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ACTB-Reverse Primer
<400> 8
ccagttggtaacaatgccatgt 22
Claims (9)
1.一种诺丽果发酵物用于制备改善体态的组合物的用途，其中该诺丽果发酵物是借由(a)将葡萄糖、诺丽果实与水混合并进行萃取以得到一诺丽果培养液以及(b)将该诺丽果培养液依序通过保藏编号为ATCC26602的啤酒酵母菌、保藏编号为DSM32451的胚芽乳酸杆菌TCI378及保藏编号为ATCC15973的醋酸菌发酵而制得，以及在进行该发酵的过程中，对该诺丽果培养液、该啤酒酵母菌、该胚芽乳酸杆菌TCI378及该醋酸菌照射一波长介于620-750nm的红色光源；
其中，
该啤酒酵母菌的添加量为相对于该诺丽果培养液的0.01-0.5wt％，该胚芽乳酸杆菌TCI378的添加量为相对于该诺丽果培养液的0.01-0.25wt％，及该醋酸菌的添加量为相对于该诺丽果培养液为1-20wt％；
该啤酒酵母菌的发酵时间为24-72小时，该胚芽乳酸杆菌TCI378的发酵时间为24-72小时，及该醋酸菌的发酵时间为72-240小时；
该改善体态为增加全身肌肉重、减少全身体脂率、减少腹部脂肪重及/或腿部脂肪重、减少皮下脂肪重及/或内脏脂肪重，及减少腰围其中至少一者。
2.如权利要求1所述的用途，其中该诺丽果发酵物是透过促进瘦体素生成及/或促进脂肪代谢以达到该改善体态。
3.如权利要求2所述的用途，其中该诺丽果发酵物是透过促进减脂基因的表现量以达到该促进脂肪代谢，该减脂基因为三酸甘油酯脂解酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)基因、脂肪酶E(lipase E,LIPE)基因及体解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)基因其中至少一者。
4.一种诺丽果发酵物用于制备改善肌肤状况的组合物的用途，其中该诺丽果发酵物是借由(a)将葡萄糖、诺丽果实与水混合并进行萃取以得到一诺丽果培养液以及(b)将该诺丽果培养液依序通过保藏编号为ATCC26602的啤酒酵母菌、保藏编号为DSM32451的胚芽乳酸杆菌TCI378及保藏编号为ATCC15973的醋酸菌发酵而制得，该发酵包含对该诺丽果培养液、该啤酒酵母菌、该胚芽乳酸杆菌TCI378及该醋酸菌照射一波长介于620-750nm的红色光源，
其中，
该啤酒酵母菌的添加量为相对于该诺丽果培养液的0.01-0.5wt％，该胚芽乳酸杆菌TCI378的添加量为相对于该诺丽果培养液的0.01-0.25wt％，及该醋酸菌的添加量为相对于该诺丽果培养液为1-20wt％；
该啤酒酵母菌的发酵时间为24-72小时，该胚芽乳酸杆菌TCI378的发酵时间为24-72小时，及该醋酸菌的发酵时间为72-240小时；
该改善肌肤状况为改善肌肤泛红、改善肌肤弹力及改善肌肤UV斑其中至少一者。
5.如权利要求4所述的用途，其中该诺丽果发酵物是透过促进弹力蛋白增生以达到该改善肌肤弹力。
6.如权利要求1或4所述的用途，该诺丽果发酵物还具有去除自由基、改善排便情况及改善肠胃蠕动情况其中至少一者之作用。
7.如权利要求1或4所述的用途，其中该葡萄糖的添加量为该诺丽果实与该水的总重量的2-8wt％。
8.如权利要求1或4所述的用途，其中该水的重量为该诺丽果实总重的3-5倍。
9.如权利要求1或4所述的用途，其中该诺丽果发酵物的pH值为2.7-3.7，且其白利糖度(Brix degree)为23-27。
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