CN115851520B - 一种副干酪乳杆菌及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种副干酪乳杆菌及其应用。所述副干酪乳杆菌命名为：副干酪乳杆菌YYS‑69，保藏编号：CGMCC No.25837。本发明提供的副干酪乳杆菌YYS‑69为天然菌种，其能够较为高效的将亚油酸转化为具有生物活性且对人体健康有益的共轭亚油酸，可应用于生产富含共轭亚油酸的发酵产品。同时，该菌具有良好的耐胃酸、耐胆盐及肠道定植能力，也可应用于益生菌产品，改善肠道菌群结构。本发明的副干酪乳杆菌与植物乳杆菌BXM2联合发酵能有效改善饮料的风味口感，能同时生成共轭亚油酸和γ‑氨基丁酸，可开发为功能食品。

Description

一种副干酪乳杆菌及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种副干酪乳杆菌及其应用。

背景技术

随着科学家对乳酸菌健康益处了解的逐渐深入，乳酸菌在食品中的应用范围也在逐渐扩延。乳酸菌是发酵工业中的重要微生物，代谢物可赋予优良的发酵风味，同时提高产品的营养价值。目前副干酪乳杆菌和植物乳杆菌是研究较多的益生菌，广泛应用于奶制品、饮料等食品生产中。

共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid，CLA)是含有共轭双键的十八碳二烯酸的总称，是人体无法合成，必须从外界食物中获取但又必不可少的脂肪酸之一，被称为“二十一世纪的新型营养素”。研究表明，CLA具有增强人体抗氧化能力和免疫能力的作用，并且在调节血液胆固醇和甘油三酸脂水平、防止动脉粥样硬化、促进脂肪氧化分解等方面具有积极作用。CLA最重要的天然来源是反刍动物相关食品，但含量却非常低。另外，在亚麻籽油、红花油、花生油、葵花籽油、棉籽油和玉米油等植物油脂中存在着大量CLA的前体物亚油酸(Linoleic acid，LA)，但其中CLA的含量却很低，通常低于0.1％，很难实现对它的提取利用。

目前，国内外产CLA微生物的研究尚处在菌株筛选、产CLA微生物培养条件优化阶段。市场上销售的CLA产品多以游离的LA或具有高含量LA的植物油为前体物，在一定条件下，通过碱催化的异构化来生产CLA。然而化学法得到的CLA往往是由多种异构体组成，对底物的实际利用效率也十分有限，这就造成极大的浪费。

申请号：CN202011348882.2的中国发明专利公开了：K56副干酪乳杆菌在发酵乳清的上清中有总抗氧化能力(T-AOC)达到1.0-3.0u/mL；血管紧张素转化酶(ACE)活力可达到10-70％，超氧化物歧化酶(T-SOD)活力可达到20-30u/mL；γ-氨基丁酸含量(GABA)可达到14-21μg/mL；共轭亚油酸(CLA)可达0.01-0.06mg/kg。上述产CLA的菌株产量较低。

文献“产共轭亚油酸干酪乳杆菌的诱变选育[J].食品研究与开发，2010，31(06):28-31”公开了经紫外诱变处理，筛选出一株高产共轭亚油酸的菌株，在亚油酸添加量0.05％，乳糖添加量2％，接种量4％，初始pH6.5，37℃发酵36h时，共轭亚油酸生物合成量可达394.1μg/mL。该方法所产共轭亚油酸量大，但所用菌株为诱变菌，不可应用于食品。

因此，现有技术中尝试将产CLA的菌种应用到食品中，但是大部分学者筛选到的产CLA的菌株产量过低(诱变菌株产量高，但不安全)，且不耐胃液、肠液，不适合应用到食品中。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种副干酪乳杆菌及其应用，本发明的副干酪乳杆菌，在高产CLA的同时耐胃液消化，其在食品或保健品等领域具有重要的应用价值。

本发明的技术方案为：提供了一种副干酪乳杆菌YYS-69，该菌株的分类命名为：副干酪乳杆菌YYS-69，拉丁文学名：Lactobacillus Paracasei，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2022年9月28日，保藏编号：CGMCC No.25837。

本发明的另一技术方案为：提供一种上述副干酪乳杆菌YYS-69在生产益生菌产品中的应用。

本发明的又一技术方案为：提供上述副干酪乳杆菌YYS-69在生产富含共轭亚油酸的食品中的应用。

本发明的又一技术方案为：提供上述副干酪乳杆菌YYS-69在生产耐酸，耐胆盐的食品中的应用。

本发明的又一技术方案为：提供一种菌剂，所述菌剂包含上述副干酪乳杆菌YYS-69。

本发明的又一技术方案为：提供一种共轭亚油酸的生产方法，将上述副干酪乳杆菌YYS-69进行发酵，所述发酵所用底物包括亚油酸，得到发酵产物，即得到共轭亚油酸。

优选的，上述共轭亚油酸的生产方法中，所述底物中亚油酸浓度为0.5mg/mL。

本发明的又一技术方案为：提供一种富含γ-氨基丁酸的发酵果汁的生产方法，将上述的副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌BXM2联合发酵果汁，得到发酵产物，即得到富含γ-氨基丁酸的发酵果汁。

植物乳杆菌BXM2，拉丁文学名：lactobacillus plantarum，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2018年9月6日，保藏编号：CGMCC No.16436。

优选的，上述富含γ-氨基丁酸的发酵果汁的生产方法中，所述果汁为菠萝果汁。

本发明的又一技术方案为：提供一种富含共轭亚油酸的发酵产品的生产方法，其特征在于，将上述的副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌BXM2联合发酵，得到发酵产物，即得到富含共轭亚油酸的发酵产品。

本发明的有益效果：本发明提供的副干酪乳杆菌YYS-69分离于重庆农家自制泡菜汁，其为天然菌种，具有较高食品安全性，在MRS培养基中添加0.5％的亚油酸，转化生成共轭亚油酸的含量为159.2μg/mL。因此其能够较为高效的将亚油酸转化为具有生物活性且对人体健康有益的共轭亚油酸，可应用于生产富含共轭亚油酸的发酵产品。

进一步的，本发明的副干酪乳杆菌具有良好的耐胃酸、耐胆盐及肠道定植能力，也可应用于益生菌产品，改善肠道菌群结构。本发明的副干酪乳杆菌与植物乳杆菌BXM2联合发酵能有效改善饮料的风味口感，能同时生成共轭亚油酸和γ-氨基丁酸，可开发为功能食品。

附图说明

图1为本发明具体实施方式实施例1的副干酪乳杆菌YYS-69溶钙圈；

图2为本发明具体实施方式实施例1的副干酪乳杆菌YYS-69的菌落形态；

图3为本发明具体实施方式实施例2的共轭亚油酸(CLA)测定标准曲线；

图4为本发明具体实施方式实施例3的副干酪乳杆菌YYS-69的革兰氏染色；

图5为本发明具体实施方式实施例3的副干酪乳杆菌YYS-69的16S r RNA扩增产物琼脂糖凝胶电泳；

图6为本发明具体实施方式实施例3的基于16S rRNA序列的副干酪乳杆菌YYS-69系统发育树；

图7为本发明具体实施方式实施例5的γ-氨基丁酸测定标准曲线；

图8为本发明具体实施方式实施例5的γ-氨基丁酸标准品谱图；

图9为本发明具体实施方式实施例5的YYS-69+BXM2联合发酵菠萝汁谱图；

图10为本发明具体实施方式实施例5的YYS-69+BXM2联合发酵植物饮料谱图。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。

实施例1乳酸菌的分离

从重庆农家自制泡菜汁中无菌采样，采用涂布平板法，取5g泡菜汁样品放入无菌均质袋中，做好标记，加入45mL 0.85％的生理盐水后完全拍打混匀。然后吸取100μL样品进行10倍系列的梯度稀释，分别吸取稀释倍数为10^-4、10^-5、10^-6的样品100μL，涂布于含2.5％CaCO₃的MRS平板上，37℃倒置培养24h。挑取长势良好，溶钙圈大的菌落(如图1)，通过平板划线分离法反复分离纯化，直至得到单菌落(如图2)，将该分离菌株命名为YYS-69，-80℃甘油菌库保藏。

实施例2产共轭亚油酸条件的筛选

1、CLA标准曲线绘制

称取100mg CLA标准品和200mg吐温80，混匀，再溶于水并定容至10mL，充分搅拌乳化后，经0.45μm无菌滤膜过滤除菌后获得10mg/mL的CLA标准储备液，于-20℃避光保存。分别取以下表1标准储备液，充分振荡30s，再静置2-10min；测定233nm下的吸光值。以CLA质量浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线(如图3)。

表1CLA标准曲线配置表

2.2待测样品的检测分析

(1)底物亚油酸(LA)的配制

底物LA母液的配制(30mg/mL)：按照300mg LA，200mg吐温80的比例蜗旋震荡混合均匀，用去离子水定容至10mL，常温磁力搅拌20min至混合物充分乳化，然后混合物经过0.22μm无菌水系滤膜过滤除菌后避光保存于-20℃环境中。为了保证母液不会因反复冻融而出现破乳现象，母液使用前需要重新涡旋震荡10min。

底物小麦胚芽粉母液的配制：微粉碎的小麦胚芽粉1g，200mg吐温80的比例，用去离子水定容至10mL，搅拌均匀，超声波细胞粉碎机乳化5min。

(2)培养基配置

按照表2配置各培养基，高温高压灭菌锅121℃灭菌15min。

表2培养基配置表

(3)样品检测

将活化好的副干酪乳杆菌YYS-69按照2％的接种量接种至各类MRS培养基中，37℃培养箱中培养72h，以未发酵的空白液为对照，发酵液经过8000g离心10min，收集上清液于干净离心管中，按照发酵液：异丙醇：正己烷为3:3:6(v/v/v)的比例进行混合，漩涡震荡充分混合后，静止分层，转移上层的正己烷层于干净的储液瓶中，每个样品做3个平行，233nm测定吸光值。

由测得的标准曲线获得CLA浓度与OD_233nm吸光值之间的线性关系，样品检测得出YYS-69在底物亚油酸浓度为0.5mg/mL时(LA+MRS培养基)，其转化生成共轭亚油酸(CLA)的量可达到159.2μg/mL。

实施例3乳酸菌的鉴定

(1)生理生化试验

将筛选纯化的菌株YYS-69进行革兰氏染色(如图4)及过氧化氢酶试验，并对其生理生化指标进行测定，试验结果对照《伯杰氏系统细菌学手册第八版》进行菌种的初步判定。试验得出该筛选菌株YYS-69革兰氏染色为紫色，呈阳性。其细胞形状为杆状，接触酶和氧化酶为阴性，无芽孢形成。

(2)16S r RNA鉴定

根据细菌基因DNA提取试剂盒说明提取YYS-69该未知菌株基因DNA，以基因DNA为模板进行16S r RNA基因的PCR扩增。

扩增引物使用通用引物27F(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3')和1492R(5'-TACGGCTACCTTGTTACGACTT-3')。

其中PCR反应体系：DNA 2μL，27F 2μL，1492R 2μL，Premix Ex Taq 25μL，ddH2O 19μL。PCR反应条件：94℃预变性3min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，30次循环；最后72℃延伸5min。YYS-69提取DNA基因组后16S r RNA扩增片段如图5所示。然后将PCR扩增产物送去DNA测序(广州擎科生物工程有限公司)。测序序列结果在NCBI数据库中用Blast软件搜索近似序列，将所测得的序列和从基因库中获得的相关种属的16S r RNA基因序列进行比对，运用Mega7.0软件构建系统发育树，结果如图6所示。

27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'(SEQ ID NO.1)。

1492R：5'-TACGGCTACCTTGTTACGACTT-3'(SEQ ID NO.2)。

16S r RNA基因序列测定结果如下：

CGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAATGGTCGGCAGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAAGCGCATCGGAAACTGGGAAACTGTCGAACGAGTTCTCGTTGATGATCGGTGCTTGCACCGAGATTCAACATGGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAGATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGTAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCTTTTAGGGAGCGAGCCGT(SEQID NO.3)。

根据该菌株的细胞形态、生理生化特征、16S r RNA基因序列等数据综合分析，参考《伯杰氏系统细菌学手册第八版》，鉴定该菌株为副干酪乳杆菌(LactobacillusParacasei)YYS-69。

实施例4菌株模拟胃液耐酸性和肠液耐胆盐试验

1、菌株模拟胃液耐酸性试验

称取0.2g NaCl与0.35g胃蛋白酶溶解于适量蒸馏水中，用1mol/L盐酸调节pH值为1.5、2.5、3.5，用100ml容量瓶定容至刻度。将副干酪乳杆菌YYS-69活化后培养24h的发酵液按2％接种量分别接入不同pH值的模拟人工胃酸溶液中，37℃水浴恒温处理0、2、4h后，分别十倍梯度稀释，振荡均匀后取100μL菌液倒板，37℃下培养24h，计算YYS-69活菌数和存活率。

表2菌株模拟胃液耐酸性试验统计表

由表2可得副干酪乳杆菌YYS-69在不同模拟人工胃液pH下都有很高的存活率，表明副干酪乳杆菌YYS-69胃酸耐受良好。

2、菌株模拟肠液耐胆盐试验

将副干酪乳杆菌YYS-69活化后培养24h的发酵液按2％接种量分别接入0.3％、0.5％与0.7％质量浓度的猪胆盐溶液中，37℃水浴恒温处理0、2、4h后，分别十倍梯度稀释，振荡均匀后取100μL菌液倒板，37℃下培养24h后，计算YYS-69活菌数和存活率。

表3菌株模拟肠液耐胆盐试验统计表

由表3可得副干酪乳杆菌YYS-69随着胆盐质量浓度的增加，存活率在不断下降，当0.7％胆盐浓度4小时时，存活率为33.3％。

实施例5利用本发明副干酪乳杆菌YYS-69制备发酵食品

实验一、发酵菠萝汁

(1)将菠萝去皮，榨汁，得到菠萝汁，向菠萝汁中加入10wt％白砂糖，混匀，于121℃下灭菌15min。接种副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌BXM2的复合均，接种比例为1：2，接种量5％，发酵时间22h。在该条件下得到的发酵菠萝汁味道酸甜适中，口感柔和浓郁。取发酵后的菠萝汁测定γ-氨基丁酸含量(标准曲线如图7，标准品谱图如图8)。

以不灭菌果汁作为对照，发现副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌BXM2均能对灭菌和不灭菌的果汁进行发酵。发酵后的菠萝汁与未发酵相比味道酸甜适中，口感柔和浓郁。经HPLC测定发酵菠萝汁γ-氨基丁酸含量为27.615mg/kg(如图9)。发酵所得的活菌数达5.7×10⁷cfu/mL，可溶性固形物为21.75±0.25，滴定酸为0.828g/kg，产品pH值为3.56。发酵果汁酸甜适中，口感柔和，该复合菌能作为发酵菌种应用于菠萝果汁的发酵生产中。

实验二、发酵复合植物

(2)取花生20份，火麻仁5份，红参5份，绿豆10份，黄豆10份，添加100份纯水，100摄氏度微沸煮60min，放凉后300目过滤。加入益生元(低聚果)10份和0.2wt％的亚油酸为底物，加入5wt％比例为1：2的副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌BXM2，在37℃下发酵20h。取发酵后的发酵液测定共轭亚油酸(CLA)和γ-氨基丁酸含量。

经发酵后的植物饮料，与未发酵前相比较味道更加丰郁浓厚，酸甜适中。其中共轭亚油酸含量为100.8μg/mL，γ-氨基丁酸含量为44.028mg/kg(如图10)。试验结果表明经副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌BXM2发酵后能有效改善风味口感，同时转化生成共轭亚油酸和γ-氨基丁酸，对饮料的营养价值起到增效作用。

实施例6利用本发明副干酪乳杆菌YYS-69制备菌剂

将副干酪乳杆菌YYS-69按照以培养基质量的3％的接种量接种于121℃灭菌15min的培养基中，以培养基总质量添加10％酶水解脱脂乳、0.5％葡萄糖、1.5％胰蛋白胨、0.3％酵母浸膏和余量水组成，调节pH6.8。然后，在温度37℃下培养18h后，于4℃下6000r/min离心20min，弃上清，加入pH 7.2磷酸盐缓冲液清洗2-4次，得到菌泥，再用保护剂重悬菌液浓度为10¹⁰CFU/mL。所述的保护剂含有100g/L脱脂奶粉、30mL/L甘油、100g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖与10g/L L-谷氨酸钠。

然后，将该悬浮液在温度37℃下预培养60min，再进行冷冻干燥，得到所述的副干酪乳杆菌YYS-69菌剂。利用上述方法制备的菌剂中含有大于1×10¹⁰CFU/g的活性副干酪乳杆菌YYS-69。

实施例7利用本发明副干酪乳杆菌YYS-69制备益生菌产品

所述益生菌产品为副干酪乳杆菌YYS-69与其他配料的组合物；所述产品中，副干酪乳杆菌YYS-69的活菌数不低于1×10⁶CFU/mL或1×10⁶CFU/g。所述配料包含益生元、填充剂、酸味剂、溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂以及助滤剂中的一种或几种。

所述益生菌产品的剂型可以为固体饮料、饮料、压片糖果、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。

更为具体的是，一种副干酪乳杆菌YYS-69固体饮料的制造方法，将所述副干酪乳杆菌YYS-69菌种用液体培养基培养，收集和洗涤菌体，添加辅料，干燥制备成活性菌粉；取菌粉10份，木糖醇24份，全脂奶粉24份，发酵猕猴桃粉13.705份，麦芽糊精21.6份，低聚半乳糖6.1份，低聚果糖0.1份，无水柠檬酸0.495份，混合均匀，得到副干酪乳杆菌YYS-69固体饮料。所述固体饮料中副干酪乳杆菌YYS-69活菌数不低于1×10⁸CFU/g。

综上所述，本发明提供的副干酪乳杆菌YYS-69分离于重庆农家自制泡菜汁，其为天然菌种，具有较高食品安全性，在MRS培养基中添加0.5％的亚油酸，转化生成共轭亚油酸的含量为159.2μg/mL。因此其能够较为高效的将亚油酸转化为具有生物活性且对人体健康有益的共轭亚油酸，可应用于生产富含共轭亚油酸的发酵产品。

进一步的，本发明的副干酪乳杆菌YYS-69具有一定的耐胃酸，耐胆盐作用，可在人体肠道中定植，起到改善肠道菌群结构的作用，具有较高的商业应用价值。本发明的副干酪乳杆菌与植物乳杆菌BXM2联合发酵可生产富含γ-氨基丁酸的菠萝发酵汁和联产共轭亚油酸和γ-氨基丁酸的植物发酵饮料，能有效改善风味口感，同时转化生成共轭亚油酸和γ-氨基丁酸，对饮料的营养价值起到增效作用。

如未明确指出，以下实施例中涉及的实验操作方法为本领域常规的实验操作方法，涉及的试剂或仪器均可从正规渠道商购获得。

试验用到的菌种及其培养基如表4所示。

表4试验菌种及培养基

本发明实施例中所涉及的培养基：MRS液体培养基：葡萄糖20.0g，胰蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸粉5.0g，吐温80 1.0m L，磷酸氢二钾2.0g，柠檬酸铵2.0g，无水乙酸钠5.0g，硫酸镁0.5g，一水硫酸锰0.25g，去离子水1L，pH 6.5(加1.5％琼脂为固体培养基)。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (10)

1.一种副干酪乳杆菌(Lactobacillus Paracasei)YYS-69，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25837。

2.权利要求1所述的副干酪乳杆菌YYS-69在生产益生菌产品中的应用。

3.权利要求1所述的副干酪乳杆菌YYS-69在生产富含共轭亚油酸的食品中的应用。

4.权利要求1所述的副干酪乳杆菌YYS-69在生产耐胃酸且耐胆盐的食品中的应用。

5.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂包含权利要求1所述的副干酪乳杆菌YYS-69。

6.一种共轭亚油酸的生产方法，其特征在于，将权利要求1所述副干酪乳杆菌YYS-69进行发酵，所述发酵所用底物包括亚油酸，得到发酵产物，所述发酵产物中含有共轭亚油酸。

7.根据权利要求6所述共轭亚油酸的生产方法，其特征在于，所述底物中亚油酸浓度为0.5mg/mL。

8.一种富含γ-氨基丁酸的发酵果汁的生产方法，其特征在于，将权利要求1所述的副干酪乳杆菌YYS-69和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BXM2联合发酵果汁，得到发酵产物，即得到富含γ-氨基丁酸的发酵果汁，所述植物乳杆菌BXM2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.16436。

9.根据权利要求8所述富含γ-氨基丁酸的发酵果汁的生产方法，其特征在于，所述果汁为菠萝果汁。

10.一种富含共轭亚油酸的发酵产品的生产方法，其特征在于，将权利要求1所述的副干酪乳杆菌YYS-69和保藏编号为CGMCC No.16436的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)BXM2联合发酵，得到发酵产物，即得到富含共轭亚油酸的发酵产品。