CN114395488A - 一种促进香菇单核菌丝生长的培养基及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进香菇单核菌丝生长的培养基及其制备方法，每升培养基由以下原料制成：带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20‑50g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉17‑20g、多维元素片0.1‑0.2g，余量为水。与现有技术相比，本发明首次以带有羊肚菌菌丝的营养袋为部分原料进行熬制培养基，以糙米和红枣代替马铃薯熬制培养基，利用多维元素片添加到培养基中，能够促进组织块萌发、加快生长速度的同时，增强了菌丝长势，降低了菌块被细菌等杂菌污染的机会，降低污染率；从而为香菇利用单核杂交技术进行新种质创制提供了技术支持，具有一定的经济效益和社会效益。
Description
技术领域
本发明涉及香菇育种技术领域，特别是一种促进香菇单核菌丝生长的培养基及其制备方法。
背景技术
香菇Lentinula edodes隶属于担子菌门、伞菌纲、伞菌目、类脐菇科、香菇属。香菇在中国已经有千年的栽培历史，目前是我国产量最高的食用菌类，被广泛栽培。优良的香菇菌株是保证香菇产业稳步、健康发展的基础。菌株性状的好坏，直接影响香菇产业的产值和经济效益，其作用越来越为广大生产者和育种者重视，种质资源创新也显得尤为重要。目前香菇较常见的育种方法为杂交育种法，用其中杂交育种包括孢子杂交和原生质体杂交等。杂交过程需要将孢子或原生质体进行稀释分离成单孢或单核菌丝，分离获得的单孢菌丝生长速度较慢，污染率高，也延长了杂交育种周期。基于此，亟待通过研发一种能促进单核菌丝生长的培养基配方及其制备方法，从而提高制种成活率，提高工作效率。
发明内容
本发明的目的是要现有技术中单核菌丝生长速度慢、污染率高等问题，提供一种促进香菇单核菌丝生长的培养基及其制备方法。
为达到上述目的，本发明是按照以下技术方案实施的：
一种促进香菇单核菌丝生长的培养基，每升培养基由以下原料制成：
带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20-50g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉17-20g、多维元素片0.1-0.2g，余量为水。
优选地，所述促进香菇单核菌丝生长的培养基，每升培养基由以下原料制成：
带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣50g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉20g、多维元素片0.1g，余量为水。
进一步地，所述带菌丝的羊肚菌营养袋培养基由以下方法制得：按以下重量百分比称取木屑49％、麦粒20％、稻壳15％、腐殖质土15％、石灰1％，小麦提前浸泡12h，之后和其它料拌匀，加水搅拌控制含水量为60％，121℃高压灭菌40min，冷却接入羊肚菌菌种，25℃培养至满袋。
优选地，所述多维元素片中包含L赖氨酸12.5mg、维生素A 2500IU，维生素D2200IU、维生素E 5mg、维生素B1 2.5mg、维生素B2 2.5mg、维生素B6 0.25mg、维生素C 25mg、烟酰胺7.5mg、泛酸钙2.5mg、重酒石酸胆碱25mg、肌醇25mg、铁5mg、铜0.5mg、锰0.5mg、锌0.25mg、磷酸氢钙279mg、镁0.5mg、钾5mg。
另外，本发明还提供了一种促进香菇单核菌丝生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、称取带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20-50g，加水煮30min，过滤取其汁液，加水定容至1000ml，获得原液A；
步骤3、称取琼脂粉17-20g，倒入原液A中，边倒边搅拌，至熔化，获得原液B；
步骤4、称取麦芽糖20g、黄豆粉3g，倒入原液B中，搅拌熔化，获得原液C；
步骤5、取多维元素片0.1-0.2g，捣碎后加入原液C中，将原液C于121℃高压灭菌20min，即得宾王菇、香菇组织分离培养基。
与现有技术相比，本发明首次以带有羊肚菌菌丝的营养袋为部分原料进行熬制培养基，有效的促进了香菇单核菌丝的生长速度和长势，解决了香菇单核菌丝在普通PDA培养基生长慢、污染率高的问题；其次以糙米和红枣代替马铃薯熬制培养基，糙米中丰富的蛋白质、矿物质及红枣中糖类、氨基酸及有机酸等促进香菇单核菌丝的生长，提高成活率；首次利用多维元素片添加到培养基中，多项微量元素在促进香菇单核菌丝生长的同时，增强了菌丝长势，降低了菌丝被细菌等杂菌污染的机会，降低污染率；从而为香菇利用单核菌丝进行新种质创制提供了技术支持，具有一定的经济效益和社会效益。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步的详细说明。此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定发明。
实施例1
本实施例的一种促进香菇单核菌丝生长的培养基，每升培养基由以下原料制成：带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉17g、多维元素片0.2g，余量为水；
制备时，称取带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20g，加水煮30min，过滤取其汁液，加水定容至1000ml，获得原液A；
称取琼脂粉17g，倒入原液A中，边倒边搅拌，至熔化，获得原液B；
称取麦芽糖20g、黄豆粉3g，倒入原液B中，搅拌熔化，获得原液C；
取多维元素片0.2g，捣碎后加入原液C中，将原液C于121℃高压灭菌20min，即得促进香菇单核菌丝生长的培养基。
实施例2
本实施例的一种促进香菇单核菌丝生长的培养基，每升培养基由以下原料制成：带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣40g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉18g、多维元素片0.15g，余量为水；
制备时，称取带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣40g，加水煮30min，过滤取其汁液，加水定容至1000ml，获得原液A；
称取琼脂粉20g，倒入原液A中，边倒边搅拌，至熔化，获得原液B；
称取麦芽糖20g、黄豆粉3g，倒入原液B中，搅拌熔化，获得原液C；
取多维元素片0.15g，捣碎后加入原液C中，将原液C于121℃高压灭菌20min，即得促进香菇单核菌丝生长的培养基。
实施例3
本实施例的一种促进香菇单核菌丝生长的培养基，每升培养基由以下原料制成：带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣50g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉20g、多维元素片0.1g，余量为水；
制备时，称取带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣50g，加水煮30min，过滤取其汁液，加水定容至1000ml，获得原液A；
称取琼脂粉20g，倒入原液A中，边倒边搅拌，至熔化，获得原液B；
称取麦芽糖20g、黄豆粉3g，倒入原液B中，搅拌熔化，获得原液C；
取多维元素片0.1g，捣碎后加入原液C中，将原液C于121℃高压灭菌20min，即得促进香菇单核菌丝生长的培养基
进一步，为了验证本发明促进香菇单核菌丝生长的培养基对香菇单孢(单核)菌丝生长的影响首先设置以下对比例。
对比例1
提供一种培养基，每升培养基由以下原料制成：土豆200g、葡萄糖20g、琼脂粉20g，余量为水。
在烧杯或广口罐头瓶底放置一层滤纸，用细铁丝做一个三角座，然后将新鲜的香菇子实体剪去根部，插在铁丝上，菌褶朝下，顶部用面巾纸封口，置于25℃放置24h，收集孢子置于离心管中，进行稀释分离单孢，利用显微镜对单孢(核)菌丝进行鉴定。
对获得的单孢(核)菌丝进行纯培养，取0.3～0.5mm的小块分别接种于实施例3和对比例1(记为CK)的培养基中，置于25℃的培养箱内进行黑暗培养。每个处理组合接种10块，3次重复，3d和7d时统计接种块萌发率和菌丝生长速度，统计结果如表1所示。
表1
由表1可知，用带有羊肚菌菌丝的营养袋及用糙米和红枣的培养基，单孢子萌发率显著不同，实施例3的萌发率明显优于对照CK；菌丝生长速度及长势与对照差异明显，在香菇单核菌丝生长方面具有绝对优势，添加羊肚菌菌丝的营养袋对菌丝生长促作用明显。因此，可以得出如下结论：本发明的培养基能够加快香菇单核菌丝生长速度的同时，增强了菌丝长势。
本发明的技术方案不限于上述具体实施例的限制，凡是根据本发明的技术方案做出的技术变形，均落入本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种促进香菇单核菌丝生长的培养基，其特征在于，每升培养基由以下原料制成：
带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20-50g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉17-20g、多维元素片0.1-0.2g，余量为水。
2.根据权利要求1所述的促进香菇单核菌丝生长的培养基，其特征在于，每升培养基由以下原料制成：
带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣50g、麦芽糖20g、黄豆粉3g、琼脂粉20g、多维元素片0.1g，余量为水。
3.根据权利要求1所述的促进香菇单核菌丝生长的培养基，其特征在于，所述带菌丝的羊肚菌营养袋培养基由以下方法制得：按以下重量百分比称取木屑49％、麦粒20％、稻壳15％、腐殖质土15％、石灰1％，小麦提前浸泡12h，之后和其它料拌匀，加水搅拌控制含水量为60％，121℃高压灭菌40min，冷却接入羊肚菌菌种，25℃培养至满袋。
4.根据权利要求2所述的促进香菇单核菌丝生长的培养基，其特征在于：所述多维元素片中包含L赖氨酸12.5mg、维生素A 2500IU，维生素D2 200IU、维生素E 5mg、维生素B12.5mg、维生素B2 2.5mg、维生素B6 0.25mg、维生素C 25mg、烟酰胺7.5mg、泛酸钙2.5mg、重酒石酸胆碱25mg、肌醇25mg、铁5mg、铜0.5mg、锰0.5mg、锌0.25mg、磷酸氢钙279mg、镁0.5mg、钾5mg。
5.一种如权利要求1所述的促进香菇单核菌丝生长的培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、称取带菌丝的羊肚菌营养袋培养基100g、糙米50g、红枣20-50g，加水煮30min，过滤取其汁液，加水定容至1000ml，获得原液A；
步骤3、称取琼脂粉17-20g，倒入原液A中，边倒边搅拌，至熔化，获得原液B；
步骤4、称取麦芽糖20g、黄豆粉3g，倒入原液B中，搅拌熔化，获得原液C；
步骤5、取多维元素片0.1-0.2g，捣碎后加入原液C中，将原液C于121℃高压灭菌20min，即得促进香菇单核菌丝生长的培养基。
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