CN102726211A - 野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法 - Google Patents

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肖燕
钱赟
李本春
李先
赵榆新
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Abstract

本发明公开一种野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法,是一种人工驯化生物技术的具体应用。解决野生菌人工栽培的技术难题。技术方法为:⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡枞菌子实体获得孢子;⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡枞菌出菇菌株;⑶再通过子实体组织分离进行系统选育,经过2~6年的系统培育,人工驯化,得到稳定性强,可用于繁殖生产的红土鸡枞菌母种。本发明的红土鸡枞菌母种可用于人工种植生产红土鸡枞菌。

Description

野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法
技术领域
本发明公开一种野生菌通过人工驯化获得母种的方法,具体地是野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法。 
背景技术
红土鸡枞菌(Oudemansiella radicata var.alba  )是我国云南省红土高原特有的野生菌种,子实体中等至大型,只生长在我国云南省海拔1800米以上的高原地区。夏秋季常常生长在呈弱酸性的红色土壤潮湿林地上,故名红土鸡枞,属中低温型菌类,野生产量极低,十分珍贵。其外观怡人,味道鲜美,营养价值极高。红土鸡枞菌菇体大、菌柄粗长、菌盖表面浅褐色、菌柄白色、菇盖厚实、品质优良目前,国内外没有任何驯化栽培野生红土鸡枞菌子实体的先例。 
载止本专利申请前,在我国专利申请中涉及鸡枞菌种植的不上10项,并且均没有获得授权,主要问题是菌种证明力度弱,没有获得保藏认可,其提出的鸡枞菌难以确认。 
因红土鸡枞菌特殊的营养、味道和保健作用,野生菌产品价格一直很高,单纯采摘野生红土鸡枞菌已经难以满足市场的巨大需求。为此,非常有必要进行人工驯化栽培技术开发。 
本发明使野生红土鸡枞菌人工驯化栽培迈出了第一步,进行了野生红土鸡枞菌人工驯化母种的技术开发,并得以实现,为云南省珍贵野生菌资源的可持续利用奠定了产业技术基础。 
发明内容
本发明的目的就是提供一种对野生红土鸡枞菌进行人工驯化,首先获得原始母种的制备方法。 
实现本发明的技术方案及过程是这样的:采用的技术包含单孢子杂交技术,子实体组织分离技术。 
制备方法过程为: 
    ⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡枞菌子实体获得孢子;
⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡枞菌出菇菌株;
⑶再通过子实体组织分离进行系统选育,经过2~6年的系统培育,人工驯化,得到稳定性强,可用于繁殖生产的红土鸡枞菌母种。
这一方法人工驯化的红土鸡枞菌母种繁育方法具体过程细化为: 
⑴制备红土鸡枞菌母种培养基原料,该原料所使用的各种物质和重量组份为、香蕉30~100克、马铃薯50~150克、玉米粉20~50克、胡萝卜20~50克、水1000~2000克、琼脂10~30克;
⑵先将香蕉、马铃薯、玉米粉、胡罗卜等粉碎混合成泥状物备用;再将水烧开加入所需的琼脂,待琼脂溶化后,加入备用的泥状物,充分搅拌均匀后用柠檬酸调pH值5.0~6.5,乘热分装在试管或其他玻璃容器中;在110~126℃下灭菌20~45分钟,冷却后制成培养基;
⑶接入人工驯化的红土鸡枞母种进行培养,培养温度为15~26℃,培养7~15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种,红土鸡枞母种即制作完成;
⑷在1~4℃条件下保存备用,或者即可用于繁殖原种。
其中,制备红土鸡枞菌母种培养基原料,该原料所使用的各种物质和重量组份还可为、葡萄糖2~30克、麦芽糖2~30克、磷酸二氢钾1~10克、硫酸镁0.5~3克、硫酸锌0.5~5克、硫酸亚铁0.5~5克、磷酸二氢铵0.5~3克、蛋白胨1~10克、酵母浸膏1~5克、烟酸50~150毫克、核黄素10~50毫克、水1000~2000克、琼脂10~30克,用柠檬酸调pH值; 
或者:蔗糖2~30克、麦芽糖2~30克、磷酸氢二钾0.5~5克、硫酸镁0.5~3克、硫酸锌0.5~5克、硫酸铵0.5~5克、牛肉浸膏2~10克、氯化铁30~300毫克、硫胺素20~100毫克、烟酸50~150毫克、水1000~2000克、琼脂10~30克,用柠檬酸调pH值;
或者:小麦粒10~30克、玉米粉5~15克、马铃薯30~100克、香菇50~150克、葡萄糖10~20克、磷酸二氢钾1~5克、硫酸镁0.5~3克、蛋白胨1~5克、酵母浸膏1~3克、水1000~2000克、琼脂10~30克,用柠檬酸调pH值。
本发明的有益效果在于:首次将野生红土鸡枞菌人工驯化成可繁殖的原始母种,为人工栽培红土鸡枞菌迈出了第一步;所获得的母种菌丝健壮、扭结力强、颜色洁白、生长迅速和易出菇、品质好、效率高。其开创性的研发工作,为云南省珍贵野生菌资源的可持续利用奠定了产业技术基础。 
附图说明
本发明主要内容是制备方法,故无具体的附图提供。 
本发明涉及的红土鸡枞菌(Oudemansiella radicata var.alba )已申报生物活性材料保存,自定义编名为FBM-001,以于2012年4月13日,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,简称CGMCC进行了保藏,保藏编号为CGMCC5970,并证明存活。 
具体实施方式
下面对本发明的制备方法,给出一些更加具体的实施方式说明。 
实施例1:野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法 
采用的技术包含单孢子杂交技术,子实体组织分离技术。
制备方法过程为: 
    ⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡枞菌子实体获得孢子;
⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡枞菌出菇菌株;
⑶再通过子实体组织分离进行系统选育,经过2~6年的系统培育,人工驯化,得到稳定性强,可用于繁殖生产的红土鸡枞菌母种。
这一方法人工驯化的红土鸡枞菌母种繁育方法具体过程细化为: 
⑴制备红土鸡枞菌母种培养基原料,该原料所使用的各种物质和重量组份为、香蕉30~100克、马铃薯50~150克、玉米粉20~50克、胡萝卜20~50克、水1000~2000克、琼脂10~30克;
⑵先将香蕉、马铃薯、玉米粉、胡罗卜等粉碎混合成泥状物备用;再将水烧开加入所需的琼脂,待琼脂溶化后,加入备用的泥状物,充分搅拌均匀后用柠檬酸调pH值5.0~6.5,乘热分装在试管或其他玻璃容器中;在110~126℃下灭菌20~45分钟,冷却后制成培养基;
⑶接入人工驯化的红土鸡枞母种进行培养,培养温度为15~26℃,培养7~15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种,红土鸡枞母种即制作完成;
⑷在1~4℃条件下保存备用,或者即可用于繁殖原种。
上述所使用的物质均是现存天然的物质,可在市场中采购使用。 
实施例2:野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法 
采用的技术包含单孢子杂交技术,子实体组织分离技术。
制备方法过程为: 
    ⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡枞菌子实体获得孢子;
⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡枞菌出菇菌株;
⑶再通过子实体组织分离进行系统选育,经过2~6年的系统培育,人工驯化,得到稳定性强,可用于繁殖生产的红土鸡枞菌母种。
这一方法人工驯化的红土鸡枞菌母种繁育方法具体过程细化为: 
制备红土鸡枞菌母种培养基原料,该原料所使用的各种物质和重量组份为:葡萄糖2~30克、麦芽糖2~30克、磷酸二氢钾1~10克、硫酸镁0.5~3克、硫酸锌0.5~5克、硫酸亚铁0.5~5克、磷酸二氢铵0.5~3克、蛋白胨1~10克、酵母浸膏1~5克、烟酸50~150毫克、核黄素10~50毫克,将它们粉碎混合均匀成泥状物,煮开水1000~2000克、溶入琼脂10~30克,再放入上述泥状物调均,用柠檬酸调pH值5.0~6.5;乘热分装在试管或其他玻璃容器中;在110~126℃下灭菌20~45分钟,冷却后制成培养基。
接入人工驯化的红土鸡枞母种进行培养,培养温度为15~26℃,培养7~15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种,红土鸡枞母种即制作完成; 
在1~4℃条件下保存备用,或者即可用于繁殖原种。
上述所使用的物质,均是市场中所能够获得的正规商品,其规格、含量、成份均是国家标准或行业标准产品。 
  

Claims (3)

1.野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法,采用的技术包含单孢子杂交技术,子实体组织分离技术,其特征是:制备方法过程为、
    ⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡枞菌子实体获得孢子;
⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡枞菌出菇菌株;
⑶再通过子实体组织分离进行系统选育,经过2~6年的系统培育,人工驯化,得到稳定性强,可用于繁殖生产的红土鸡枞菌母种。
2.根据权利要求1所述的野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法,其特征是:人工驯化的红土鸡枞菌母种繁育方法过程为、
⑴制备红土鸡枞菌母种培养基原料,该原料所使用的各种物质和重量组份为、香蕉30~100克、马铃薯50~150克、玉米粉20~50克、胡萝卜20~50克、水1000~2000克、琼脂10~30克;
⑵先将香蕉、马铃薯、玉米粉、胡罗卜等粉碎混合成泥状物备用;再将水烧开加入所需的琼脂,待琼脂溶化后,加入备用的泥状物,充分搅拌均匀后用柠檬酸调pH值5.0~6.5,乘热分装在试管或其他玻璃容器中;在110~126℃下灭菌20~45分钟,冷却后制成培养基;
⑶接入人工驯化的红土鸡枞母种进行培养,培养温度为15~26℃,培养7~15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种,红土鸡枞母种即制作完成;
⑷在1~4℃条件下保存备用,或者即可用于繁殖原种。
3.根据权利要求1或2所述的野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法,其特征是:制备红土鸡枞菌母种培养基原料,该原料所使用的各种物质和重量组份还可为、葡萄糖2~30克、麦芽糖2~30克、磷酸二氢钾1~10克、硫酸镁0.5~3克、硫酸锌0.5~5克、硫酸亚铁0.5~5克、磷酸二氢铵0.5~3克、蛋白胨1~10克、酵母浸膏1~5克、烟酸50~150毫克、核黄素10~50毫克、水1000~2000克、琼脂10~30克,用柠檬酸调pH值;
或者:蔗糖2~30克、麦芽糖2~30克、磷酸氢二钾0.5~5克、硫酸镁0.5~3克、硫酸锌0.5~5克、硫酸铵0.5~5克、牛肉浸膏2~10克、氯化铁30~300毫克、硫胺素20~100毫克、烟酸50~150毫克、水1000~2000克、琼脂10~30克,用柠檬酸调pH值;
或者:小麦粒10~30克、玉米粉5~15克、马铃薯30~100克、香菇50~150克、葡萄糖10~20克、磷酸二氢钾1~5克、硫酸镁0.5~3克、蛋白胨1~5克、酵母浸膏1~3克、水1000~2000克、琼脂10~30克,用柠檬酸调pH值。
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