CN104206169A - 利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,其特征在于:包括菌种收集保藏与复壮、菌种制作、生产原料配制、原基的制备、子实体形成步骤。本发明是将蛹虫草栽培结束后的培养基用设备碾压烘干后制成营养麦片。利用培养基制作的营养麦片,口味纯正,营养丰富,与市售普通麦片相比,具有浓郁的虫草香味,以及较高含量的虫草酸、虫草素及可溶性膳食纤维,营养均衡。另外,生产及操作过程相对简单,所以本发明具有实用性和可操作性。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体的讲是一种利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法。
背景技术
现代科学研究表明,蛹虫草具有很高的营养价值,是冬虫夏草理想的替代品,且随着人们生活水平的日益提高,对虫草产品的需求也不断扩大。由于天然虫草资源稀少,价格昂贵,人工栽培蛹虫草子实体已成为热门,并随着生产规模的日渐扩大,其所产生的培养残基也日益增加,因此有必要对这些培养基进行再利用开发应用与研究,以提高其利用率。蛹虫草产业化栽培多以大米、小麦或莜麦为基质,添加植物蛋白等营养素作为培养基,多数是一次性采收。采收后的培养基仍含有很多淀粉等大分子物质未被利用,且充满了蛹虫草的菌丝及代谢产物,具有很高的再利用价值。目前已有许多有关对蛹虫草培养基再利用的报道,如把收获过蛹虫草的栽培料酿造功能型酱油、保健黄酒、虫草醋或用于提取虫草素和虫草多糖、或进行白酒酿造。有的则直接将其膨化制成食品,或不经过任何加工直接用作饲料。但至今为止,利用蛹虫草培养基生产营养麦片的产品尚未见报道,也没有相关的技术专利。
发明内容
本发明的目的是提供一种生产工艺简单、生产成本低、设备投资少,生产效率高,易于实现工业化生产具有良好营养成分的利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法。
其技术方案是:利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,包括如下步骤:
(1)菌种收集、保藏与复壮:将收集到的蛹虫草子实体通过常规方法进行组织分离,于培养基上培养,获得原始纯菌株,为防止菌株退化,按照常规方法对菌种进行复壮;
(2)菌种制作:将原始纯菌株接入无菌的蛹虫草斜面培养基中,在温度18-25℃下,暗培养7-10天后,光照1-2天,选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种,作为母种,将母种接至无菌的蛹虫草液体培养基中,振荡培养3-8天,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2-3mm的作为一级菌种,将一级液体菌种按3%~10%的V/V比例接入蛹虫草液体培养基中,按一级液体菌种的培养方式进行培养,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2-3mm的作为二级生产种,用于虫草的固体培养;
(3)生产原料配制:固体发酵培养基是莜麦果实颗粒和营养液按1:1.6~1:1.8的m/V比例配制而成,经高压灭菌,冷却后为用于接种的生产原料;
(4)原基的制备:在无菌室或超净工作台内,将经无菌水稀释的二级生产种接入无菌的生产原料中,每瓶接入17-22ml,再进行避光培养7-10天,待菌丝长满培养基后,进行光照培养,光强为200-300Lux,空气相对湿度60-65%,温度16-18℃,经5-6天后即可形成原基,光照控制在15-18h/d、光照强度为200-300lux,促进原基分化;
(5)子实体形成:搔菌完成后,低温4-5℃进行温差刺激,6天左右原基长出,当长至5-10mm时降温至18—20℃,后期仍保持此温度长至子实体高度50—70mm时进行采收,采收之后,将含有虫草菌丝的培养基碾压后干燥,获得虫草麦片产品。
其中,所述蛹虫草斜面培养基的组成及原料重量比为:土豆18—22%煮汁、葡萄糖1—3%、蛋白胨0.3—0.5%、酵母浸膏0.1—0.3%、琼脂1.6—2%、磷酸二氢钾0.2—0.4%、硫酸镁0.08—0.12%,余量为水,pH保持自然。所述蛹虫草斜面培养基的组成及原料重量比为:土豆20—25%煮汁、葡萄糖2—4%、蛋白胨0.4—0.6%、酵母浸膏0.2—0.4%、磷酸二氢钾0.3—0.5%、硫酸镁0.1—0.3%,余量为水,pH保持自然。所述营养液为pH 6.2-6.5的水。所述搔菌为手工用搔菌机或纯手工去除老菌种块和菌皮,使子实体从培养基表面整齐发生。
本发明与现有技术相比较,具有的有益效果:生产工艺简单、生产成本低、设备投资少,生产效率高,易于实现工业化生产具有良好营养成分的虫草麦片的制备方法,所制备出来的虫草麦片是一种纯天然的产品,具有良好的营养成分。
具体实施方式
利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,包括如下步骤:
(1)菌种收集、保藏与复壮:将收集到的蛹虫草子实体通过常规方法进行组织分离,于培养基上培养,获得原始纯菌株,为防止菌株退化,按照常规方法对菌种进行复壮;
(2)菌种制作:将原始纯菌株接入无菌的蛹虫草斜面培养基中,在温度18-25℃下,暗培养7-10天后,光照1-2天,选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种,作为母种,将母种接至无菌的蛹虫草液体培养基中,振荡培养3-8天,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2-3mm的作为一级菌种,将一级液体菌种按3%~10%的V/V比例接入蛹虫草液体培养基中,按一级液体菌种的培养方式进行培养,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2-3mm的作为二级生产种,用于虫草的固体培养;
(3)生产原料配制:固体发酵培养基是莜麦果实颗粒和营养液按1:1.6~1:1.8的m/V比例配制而成,经高压灭菌,冷却后为用于接种的生产原料;
(4)原基的制备:在无菌室或超净工作台内,将经无菌水稀释的二级生产种接入无菌的生产原料中,每瓶接入17-22ml,再进行避光培养7-10天,待菌丝长满培养基后,进行光照培养,光强为200-300Lux,空气相对湿度60-65%,温度16-18℃,经5-6天后即可形成原基,光照控制在15-18h/d、光照强度为200-300lux,促进原基分化;
(5)子实体形成:搔菌完成后,低温4-5℃进行温差刺激,6天左右原基长出,当长至5-10mm时降温至18—20℃,后期仍保持此温度长至子实体高度50—70mm时进行采收,采收之后,将含有虫草菌丝的培养基碾压后干燥,获得虫草麦片产品。
其中,所述蛹虫草斜面培养基的组成及原料重量比为:土豆18—22%煮汁、葡萄糖1—3%、蛋白胨0.3—0.5%、酵母浸膏0.1—0.3%、琼脂1.6—2%、磷酸二氢钾0.2—0.4%、硫酸镁0.08—0.12%,余量为水,pH保持自然。所述蛹虫草斜面培养基的组成及原料重量比为:土豆20—25%煮汁、葡萄糖2—4%、蛋白胨0.4—0.6%、酵母浸膏0.2—0.4%、磷酸二氢钾0.3—0.5%、硫酸镁0.1—0.3%,余量为水,pH保持自然。所述营养液为pH 6.2-6.5的水。所述搔菌为手工用搔菌机或纯手工去除老菌种块和菌皮,使子实体从培养基表面整齐发生。
实施方式1.
(1) 将收集到的蛹虫草子实体通过常规方法进行组织分离,于蛹虫草斜面培养基上培养,获得纯菌株;为防止菌株退化,按照常规方法对菌种进行复壮。
(2)将原始菌株接入无菌的蛹虫草斜面培养基中,18℃下,暗培养7天后,光照1天,选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种,作为母种。将经复壮挑选的母种接至无菌蛹虫草液体培养基(土豆20%煮汁、葡萄糖2%、蛋白胨0.4%、酵母浸膏0.2%、琼脂1.8%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.1%,pH 自然)中,振荡培养3天,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2毫米的作为一级菌种。将一级液体菌种按一定比例(3%,V/V)接入蛹虫草液体培养基中,按一级液体菌种的培养方式进行培养,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2毫米的作为二级生产种,用于虫草的固体培养。
(3)固体发酵培养基是莜麦和营养液按1:1.6(m/V)比例配制而成(营养液配方为:水,pH 6.2),经高压灭菌,冷却后即可用于接种。
(4)在无菌室或超净工作台内,将经无菌水稀释的二级生产种接入无菌的固体发酵培养基中,每瓶接入17毫升。再进行避光培养7天,待菌丝长满培养基后,进行光照培养,光强200Lux,空气相对湿度60%,16℃,经5天后即可形成原基。光照控制15h/d,光照强度200lux,促进原基分化。
(5)搔菌完成后低温4℃进行温差刺激,5天原基出现,当长至0.5cm时降温至20℃,后期仍保持此温度长至子实体高度5cm时进行采收。采收之后,将含有虫草菌丝的培养基碾压后干燥,获得虫草麦片。
(6)取干燥粉碎后的虫草麦片,依据国标GB/T 5009.91-2003方法进行钠元素测定,依据国标GB/T 5009.14-2003方法进行锌元素测定,依据国标GB/T 5009.88-2008进行膳食纤维及可溶性膳食纤维测定,依据《食品营养标签管理规范》卫生部2008版进行碳水化合物及能量测定,依据NY/T 1676 2008食用菌中粗多糖含量的测定方法进行粗多糖含量测定,依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版,P300-301进行虫草素含量测定,依据MS(i)C024-C03虫草制品中甘露醇的测定进行虫草酸含量测定。同时以蛹虫草子实体作为对照,结果如表一,
表一:
营养成分 | 虫草麦片 | 蛹虫草子实体 |
虫草素mg/100g | 314 | 37.9 |
虫草酸mg/g | 34.8 | 15.3 |
粗多糖g/100g | 8.25 | 11.71 |
膳食纤维g/100g | 58.4 | 56.6 |
可溶性膳食纤维g/100g | 49.1 | 36.5 |
碳水化合物g/100g | 16.0 | 3.5 |
能量KJ/100g | 1.20×103 | 1.04×103 |
钠mg/100g | 32.1 | 34.6 |
锌mg/100g | 20.6 | 43.2 |
实施方式2.
(1) 将收集到的蛹虫草子实体通过常规方法进行组织分离,于蛹虫草斜面培养基上培养,获得纯菌株;为防止菌株退化,按照常规方法对菌种进行复壮。
(2)将原始菌株接入无菌的蛹虫草斜面培养基中,22℃下,暗培养9天后,光照1天,选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种,作为母种。将经复壮挑选的母种接至无菌蛹虫草液体培养基(土豆20%煮汁、葡萄糖2%、蛋白胨0.4%、酵母浸膏0.2%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.1%,pH 自然)中,振荡培养6天,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2毫米的作为一级菌种。将一级液体菌种按一定比例(3%,V/V)接入蛹虫草液体培养基中,按一级液体菌种的培养方式进行培养,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2.5毫米的作为二级生产种,用于虫草的固体培养。
(3) 固体发酵培养基是莜麦和营养液按1:1.7(m/V)比例配制而成(营养液配方为:水,pH 6.4),经高压灭菌,冷却后即可用于接种。
(4)在无菌室或超净工作台内,将经无菌水稀释的二级生产种接入无菌的固体发酵培养基中,每瓶接入20毫升。再进行避光培养9天,待菌丝长满培养基后,进行光照培养,光强250Lux,空气相对湿度63%,16℃,经5天后即可形成原基。光照控制16h/d,光照强度250lux,促进原基分化。
(5) 搔菌完成后低温4℃进行温差刺激,6天原基出现,当长至0.8cm时降温至20℃,后期仍保持此温度长至子实体高度6cm时进行采收。采收之后,将含有虫草菌丝的培养基碾压后干燥,获得虫草麦片。
(6)取干燥粉碎后的虫草麦片,依据国标GB/T 5009.91-2003方法进行钠元素测定,依据国标GB/T 5009.14-2003方法进行锌元素测定,依据国标GB/T 5009.88-2008进行膳食纤维及可溶性膳食纤维测定,依据《食品营养标签管理规范》卫生部2008版进行碳水化合物及能量测定,依据NY/T 1676 2008食用菌中粗多糖含量的测定方法进行粗多糖含量测定,依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版,P300-301进行虫草素含量测定,依据MS(i)C024-C03虫草制品中甘露醇的测定进行虫草酸含量测定。同时以蛹虫草子实体作为对照,结果如表二,
表二:
营养成分 | 虫草麦片 | 蛹虫草子实体 |
虫草素mg/100g | 314 | 37.9 |
虫草酸mg/g | 34.8 | 15.3 |
粗多糖g/100g | 8.25 | 11.71 |
膳食纤维g/100g | 58.4 | 56.6 |
可溶性膳食纤维g/100g | 49.1 | 36.5 |
碳水化合物g/100g | 16.0 | 3.5 |
能量KJ/100g | 1.20×103 | 1.04×103 |
钠mg/100g | 32.1 | 34.6 |
锌mg/100g | 20.6 | 43.2 |
以上实施例是对本发明的进一步说明,但本发明不限于上述实施例。
本发明生产工艺简单、生产成本低、设备投资少,生产效率高,易于实现工业化生产具有良好营养成分的虫草麦片的制备方法,包括了原料制备=>原料加工=>营养成分检测,所制备出来的虫草麦片是一种纯天然的产品,具有良好的营养成分。
人工蛹虫草培育过程中产生的培养基是干子实体量的3一3.5倍,将其用于营养麦片的加工,从原料来源和成本上讲,是完全可行的。另外,利用培养基制作的营养麦片,口味纯正,营养丰富,与市售普通麦片相比,具有浓郁的虫草香味,以及较高含量的虫草酸、虫草素及可溶性膳食纤维,营养均衡。另外,生产及操作过程相对简单,所以本发明具有实用性和可操作性。
Claims (5)
1.利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)菌种收集、保藏与复壮:将收集到的蛹虫草子实体通过常规方法进行组织分离,于培养基上培养,获得原始纯菌株,为防止菌株退化,按照常规方法对菌种进行复壮;
(2)菌种制作:将原始纯菌株接入无菌的蛹虫草斜面培养基中,在温度18-25℃下,暗培养7-10天后,光照1-2天,选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种,作为母种,将母种接至无菌的蛹虫草液体培养基中,振荡培养3-8天,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2-3mm的作为一级菌种,将一级液体菌种按3%~10%的V/V比例接入蛹虫草液体培养基中,按一级液体菌种的培养方式进行培养,选取菌丝球大小均匀一致、直径为2-3mm的作为二级生产种,用于虫草的固体培养;
(3)生产原料配制:固体发酵培养基是莜麦果实颗粒和营养液按1:1.6~1:1.8的m/V比例配制而成,经高压灭菌,冷却后为用于接种的生产原料;
(4)原基的制备:在无菌室或超净工作台内,将经无菌水稀释的二级生产种接入无菌的生产原料中,每瓶接入17-22ml,再进行避光培养7-10天,待菌丝长满培养基后,进行光照培养,光强为200-300Lux,空气相对湿度60-65%,温度16-18℃,经5-6天后即可形成原基,光照控制在15-18h/d、光照强度为200-300lux,促进原基分化;
(5)子实体形成:搔菌完成后,低温4-5℃进行温差刺激,6天左右原基长出,当长至5-10mm时降温至18—20℃,后期仍保持此温度长至子实体高度50—70mm时进行采收,采收之后,将含有虫草菌丝的培养基碾压后干燥,获得虫草麦片产品。
2.根据权利要求1所述的利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,其特征在于:所述蛹虫草斜面培养基的组成及原料重量比为:土豆18—22%煮汁、葡萄糖1—3%、蛋白胨0.3—0.5%、酵母浸膏0.1—0.3%、琼脂1.6—2%、磷酸二氢钾0.2—0.4%、硫酸镁0.08—0.12%,余量为水,pH保持自然。
3.根据权利要求1所述的利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,其特征在于:所述蛹虫草斜面培养基的组成及原料重量比为:土豆20—25%煮汁、葡萄糖2—4%、蛋白胨0.4—0.6%、酵母浸膏0.2—0.4%、磷酸二氢钾0.3—0.5%、硫酸镁0.1—0.3%,余量为水,pH保持自然。
4.根据权利要求1所述的利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,其特征在于:所述营养液为pH6.2-6.5的水。
5.根据权利要求1所述的利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法,其特征在于:所述搔菌为手工用搔菌机或纯手工去除老菌种块和菌皮,使子实体从培养基表面整齐发生。
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20141217 |