CN113767101A - 具有抗乙型肝炎病毒(hbv)活性的新的吲哚-2-甲酰胺类化合物 - Google Patents

具有抗乙型肝炎病毒(hbv)活性的新的吲哚-2-甲酰胺类化合物 Download PDF

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Abstract

总的来说，本发明涉及新的抗病毒剂。具体来说，本发明涉及可以抑制由乙型肝炎病毒(HBV)编码的蛋白质或干扰HBV复制周期的功能的化合物，包含这类化合物的组合物，抑制HBV病毒复制的方法，治疗或预防HBV感染的方法，以及制造所述化合物的方法和中间体。

Description

具有抗乙型肝炎病毒(HBV)活性的新的吲哚-2-甲酰胺类化 合物
技术领域
总的来说，本发明涉及新的抗病毒剂。具体来说，本发明涉及可以抑制由乙型肝炎病毒(HBV)编码的蛋白质或干扰HBV复制周期的功能的化合物，包含这类化合物的组合物，抑制HBV病毒复制的方法，治疗或预防HBV感染的方法，以及制造所述化合物的方法。
背景技术
慢性HBV感染是重大的全球性健康问题，影响了超过5％的世界人口(在全世界超过3.5亿人，在美国125万人)。尽管已有预防性HBV疫苗可用，但由于在大多数发展中国家治疗选择欠佳且新发感染率维持，慢性HBV感染的负担仍然是世界范围内尚未解决的重大医学问题。目前的治疗方法不能提供治愈，并且仅限于两类药剂(干扰素α和核苷类似物/病毒聚合酶的抑制剂)；耐药性、低功效和耐受性问题限制了它们的作用。
HBV的低治愈率至少部分归因于使用单一抗病毒剂难以实现病毒生产的完全抑制这一事实，以及在被感染的肝细胞的核中共价闭合环状DNA(cccDNA)的存在和持续存留。然而，HBV DNA的持续抑制会减缓肝脏疾病的进展，并有助于预防肝细胞癌(HCC)。
当前针对HBV感染患者的治疗目标涉及将血清HBV DNA降低到低或无法检测的水平，并最终减少或阻止肝硬化和HCC的发生。
HBV是嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)的一种有包膜的部分双链DNA(dsDNA)病毒。HBV衣壳蛋白(HBV-CP)在HBV复制中发挥必不可少的作用。HBV-CP的主要生物学功能是充当结构蛋白以包裹前基因组RNA并形成未成熟的衣壳粒子，所述衣壳粒子从细胞质中的衣壳蛋白二聚体的许多拷贝自发地自组装。
HBV-CP还通过其C-端磷酸化位点的不同磷酸化状态来调控病毒DNA的合成。此外，HBV-CP可能利用位于HBV-CP的C-端区域的富含精氨酸的结构域中的核定位信号来促进病毒的松弛环状基因组的核易位。
在核中，作为病毒cccDNA小型染色体的组分，HBV-CP可以在cccDNA小型染色体的功能中发挥结构和调控作用。HBV-CP也在内质网(ER)中与病毒的大包膜蛋白相互作用，并触发完整病毒粒子从肝细胞的释放。
与HBV-CP相关的抗HBV化合物已有报道。例如，包括名为AT-61和AT-130的化合物在内的苯基丙烯酰胺衍生物(Feld J.等，Antiviral Res.2007,76,168)和来自于Valeant的一类噻唑烷-4-酮(WO2006/033995)，已被显示抑制前基因组RNA(pgRNA)包装。
F.Hoffmann-La Roche AG公开了一系列3-取代的四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪，用于HBV的治疗(WO2016/113273、WO2017/198744、WO2018/011162、WO2018/011160、WO2018/011163)。
Shanghai Hengrui Pharma公开了一系列杂芳基哌嗪类化合物，用于HBV治疗(WO2019/020070)。Shanghai Longwood Biopharmaceuticals公开了一系列具有抗HBV活性的双环杂环化合物(WO2018/202155)。
Zhimeng Biopharma公开了具有抗HBV活性的吡唑-
Figure BDA0003327916790000021
唑烷酮化合物(WO2017/173999)。
在基于组织培养的筛选中发现了杂芳基二氢嘧啶类化合物(HAP)(Weber等，Antiviral Res.2002,54,69)。这些HAP类似物充当合成的别构激活剂，并且能够诱导异常衣壳形成，导致HBV-CP的降解(WO 99/54326、WO 00/58302、WO 01/45712、WO 01/6840)。其他HAP类似物也已被描述(J.Med.Chem.2016,59(16),7651-7666)。
来自于F.Hoffman-La Roche的HAP的一个亚类也显示出对抗HBV的活性(WO2014/184328、WO2015/132276和WO2016/146598)。来自于Sunshine Lake Pharma的相似亚类也显示出对抗HBV的活性(WO2015/144093)。其他HAP也已被显示出具有对抗HBV的活性(WO2013/102655，Bioorg.Med.Chem.2017,25(3)pp.1042-1056)，并且来自于Enanta Therapeutics的相似亚类显示出类似活性(WO2017/011552)。来自于Medshine Discovery的另一个亚类显示出类似活性(WO2017/076286)。另一个亚类(Janssen Pharma)显示出类似活性(WO2013/102655)。
哒嗪酮和三嗪酮亚类(F.Hoffman-La Roche)也显示出对抗HBV的活性(WO2016/023877)，四氢吡啶并吡啶亚类也是如此(WO2016/177655)。来自于Roche的三环4-吡啶酮-3-甲酸衍生物亚类也显示出类似的抗HBV活性(WO2017/013046)。
来自于Novira Therapeutics(现在为Johnson&Johnson Inc.的一部分)的氨磺酰基-芳基酰胺亚类也显示出对抗HBV的活性(WO2013/006394、WO2013/096744、WO2014/165128、WO2014/184365、WO2015/109130、WO2016/089990、WO2016/109663、WO2016/109684、WO2016/109689、WO2017/059059)。硫醚-芳基酰胺的相似亚类(也来自于NoviraTherapeutics)显示出对抗HBV的活性(WO2016/089990)。此外，芳基-氮杂环庚烷亚类(也来自于Novira Therapeutics)显示出对抗HBV的活性(WO2015/073774)。来自于EnantaTherapeutics的芳基酰胺的相似亚类显示出对抗HBV的活性(WO2017/015451)。
来自于Janssen Pharma的氨磺酰基衍生物也已被显示出具有对抗HBV的活性(WO2014/033167，WO2014/033170，WO2017001655，J.Med.Chem,2018,61(14)6247-6260)。
也来自于Janssen Pharma的乙醛酰胺取代的吡咯酰胺衍生物的亚类也已被显示出具有对抗HBV的活性(WO2015/011281)。乙醛酰胺取代的吡咯酰胺的相似亚类(GileadSciences)也已被描述(WO2018039531)。
来自于Enanta Therapeutics的氨磺酰基-和草酰基-杂联芳基亚类也显示出对抗HBV的活性(WO2016/161268、WO2016/183266、WO2017/015451、WO2017/136403和US20170253609)。
来自于Assembly Biosciences的苯胺-嘧啶亚类也显示出对抗HBV的活性(WO2015/057945、WO2015/172128)。来自于Assembly Biosciences的稠合三环化合物亚类(二苯并-硫氮杂
Figure BDA0003327916790000041
酮、二苯并-二氮杂
Figure BDA0003327916790000042
酮、二苯并-氧氮杂
Figure BDA0003327916790000043
酮)显示出对抗HBV的活性(WO2015/138895、WO2017/048950)。来自于Assembly Biosciences的另一系列化合物(WO2016/168619)也显示出抗HBV活性。
一系列环状磺酰胺类化合物已被Assembly Biosciences描述为HBV-CP功能的调节剂(WO2018/160878)。
Arbutus Biopharma已公开了一系列苯甲酰胺类化合物用于HBV的治疗(WO2018/052967、WO2018/172852)。还公开了类似化合物与CYP3A抑制剂相组合的组合物和用途(WO2019/046287)。
来自于密苏里大学(University of Missouri)的一系列噻吩-2-甲酰胺类化合物已被描述为HBV抑制剂(US2019/0092742)。
还已显示，小分子双ANS充当分子“楔”，并干扰正常的衣壳蛋白几何结构和衣壳形成(Zlotnick A等，J.Virol.2002,4848)。
HBV直接作用性抗病毒剂可能遇到的问题是毒性、致突变性、缺乏选择性、功效差、生物利用度差、溶解度低和合成困难。因此，对可以克服这些缺点中的至少一者或具有额外的优点例如效力提高或安全窗口增加的用于治疗、改善或预防HBV的另外的抑制剂，存在着需求。
此类治疗剂作为单一疗法或与其他HBV治疗或辅助治疗相组合向HBV感染患者的给药，将导致病毒载量显著降低、预后改善、疾病进展减少和/或血清转化率提高。
发明内容
本文提供了可用于在需要的对象中治疗或预防HBV感染的化合物，以及在它们的制备中有用的中间体。本发明的主题内容是一种式I的化合物
Figure BDA0003327916790000051
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000061
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基、CH2CH2-O-CH2-C6-芳基、CH2CH2-O-C1-C3-烷基、CH2CH2-N-(C1-C3-烷基)2、CH2CH2OCF3、CH2-C(O)-O-C1-C3-烷基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(吗啉-4-基)乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000062
唑基、异
Figure BDA0003327916790000063
唑基、咪唑基、吡唑基、1,3-二氧杂环己烷基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基、氨基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、CH2-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000072
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000073
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-R14是H或F
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
-其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式I的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000071
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000081
唑基、异
Figure BDA0003327916790000082
唑基、咪唑基、吡唑基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000083
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000084
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
-其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式I的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000091
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000092
唑基、异
Figure BDA0003327916790000093
唑基、咪唑基、吡唑基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000094
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000102
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式I的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000101
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是式I的化合物的立体异构体，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000111
-R7是C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基、CH2CH2-O-CH2-C6-芳基、CH2CH2-O-C1-C3-烷基、CH2CH2-N-(C1-C3-烷基)2、CH2CH2OCF3、CH2-C(O)-O-C1-C3-烷基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(吗啉-4-基)乙基和环丙基
R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000112
唑基、异
Figure BDA0003327916790000113
唑基、咪唑基、吡唑基、1,3-二氧杂环己烷基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基、氨基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、CH2-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000122
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000123
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-R14是H或F
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是式I的化合物的立体异构体，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000121
-R7是C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000132
唑基、异
Figure BDA0003327916790000133
唑基、咪唑基、吡唑基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000134
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000135
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是式I的化合物的立体异构体，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure BDA0003327916790000131
-R7是C1-C6-烷基
-R14是H或F
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式I的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式I的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式I的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式I的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000141
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IIa的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IIa的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IIa的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IIa的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000161
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X1和Y1对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IIb的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X1和Y1对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IIb的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IIb的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IIb的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000171
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X2和Y2对于每个位置来说独立地选自CH和N。
位置1
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IIIc的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X2和Y2对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IIc的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IIc的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IIc的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIIa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000191
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IIIa的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IIIa的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IIIa的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IIIa的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIIa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIIb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000201
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X3和Y3对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IIIb的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X3和Y3对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IIIb的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IIIb的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IIIb的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIIb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIIc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000211
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X4和Y4对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IIIc的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X4和Y4对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IIIc的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IIIc的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IIIc的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IIIc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IVa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000231
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IVa的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IVa的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IVa的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IVa的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IVa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IVb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000241
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X5和Y5对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IVb的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X5和Y5对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IVb的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IVb的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IVb的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IVb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IVc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000251
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X6和Y6对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IVc的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X6和Y6对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IVc的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IVc的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IVc的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IVc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式Va的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000271
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式Va的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式Va的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式Va的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式Va的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式Va的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式Vb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000281
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X7和Y7对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式Vb的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X7和Y7对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式Vb的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式Vb的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式Vb的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式Vb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式Vc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000291
Figure BDA0003327916790000301
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X8和Y8对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式Vc的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X8和Y8对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式Vc的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式Vc的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式Vc的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式Vc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VIa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000311
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式VIa的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式VIa的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式VIa的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式VIa的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VIa的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VIb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000321
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X9和Y9对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式VIb的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X9和Y9对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式VIb的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式VIb的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式VIb的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VIb的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VIc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000341
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X10和Y10对于每个位置来说独立地选自CH和N。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式VIc的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X10和Y10对于每个位置来说独立地选自CH和N。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式VIc的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式VIc的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式VIc的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VIc的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VII的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000351
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-q是0或1
-n是0、1或2。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式VII的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-m是0、1或2
-n是0、1或2。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式VII的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式VII的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式VII的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式VII的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IX的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000361
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式IX的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式IX的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式IX的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式IX的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式IX的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式X的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
Figure BDA0003327916790000381
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F。
在本发明的一个实施方式中，本发明的主题内容是一种式X的化合物，其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F。
本发明的一个实施方式是根据本发明所述的式X的化合物或其可药用盐，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的一个实施方式是一种药物组合物，其包含根据本发明所述的式X的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
本发明的一个实施方式是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据本发明所述的式X的化合物或其可药用盐。
本发明的另一个实施方式是根据本发明所述的式X的化合物或其可药用盐，其用于在需要的对象中预防或治疗HBV感染。
在某些实施方式中，本发明的化合物的剂量为约1mg至约2,500mg。在某些实施方式中，在本文中描述的组合物中使用的本发明的化合物的剂量低于约10,000mg或低于约8,000mg或低于约6,000mg或低于约5,000mg或低于约3,000mg或低于约2,000mg或低于约1,000mg或低于约500mg或低于约200mg或低于约50mg。同样地，在某些实施方式中，本文中描述的第二化合物(即用于HBV治疗的另一种药物)的剂量低于约1,000mg或低于约800mg或低于约600mg或低于约500mg或低于约400mg或低于约300mg或低于约200mg或低于约100mg或低于约50mg或低于约40mg或低于约30mg或低于约25mg或低于约20mg或低于约15mg或低于约10mg或低于约5mg或低于约2mg或低于约1mg或低于约0.5mg及其任何和所有的完整或部分增量。所有上述剂量是指每位患者的每日剂量。
通常，设想了抗病毒有效的每日量为约0.01至约50mg/kg或约0.01至约30mg/kg体重。将所需剂量在一天内以适合的间隔作为2、3、4个或更多个分剂量给药，可能是适合的。所述分剂量可以被配制成单位剂型，例如每个单位剂型含有约1至约500mg或约1至约300mg或约1至约100mg或约2至约50mg活性成分。
本发明的化合物取决于它们的结构，可以作为盐、溶剂化物或水合物存在。因此，本发明还涵盖所述盐、溶剂化物或水合物及其相应的混合物。
本发明的化合物取决于它们的结构，可以以互变异构或立体异构形式(对映异构体、非对映异构体)存在。因此，本发明还涵盖了所述互变异构体、对映异构体或非对映异构体及其相应的混合物。立体异构均一的组成成分可以通过已知方式从这类对映异构体和/或非对映异构体的混合物分离。
本发明的主题内容是式I、IIa、IIb、IIc、IIIa、IIIb、IIIc、IVa、IVb、IVc、Va、Vb、Vc、VIa、VIb、VIc、VII、IX、X的化合物或其可药用盐，或所述化合物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物或水合物的可药用盐，或所述化合物的前体药物或所述前体药物的可药用盐或所述前体药物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物的可药用盐或所述前体药物的水合物。
本发明的主题内容是式I、IIa、IIb、IIc、IIIa、IIIb、IIIc、IVa、IVb、IVc、Va、Vb、Vc、VIa、VIb、VIc、VII、IX、X的化合物或其可药用盐，或所述化合物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物或水合物的可药用盐，或所述化合物的前体药物或所述前体药物的可药用盐或所述前体药物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物的可药用盐或所述前体药物的水合物，其用于在对象中预防或治疗HBV感染。
本发明的主题内容还是一种药物组合物，其包含式I、IIa、IIb、IIc、IIIa、IIIb、IIIc、IVa、IVb、IVc、Va、Vb、Vc、VIa、VIb、VIc、VII、IX、X的化合物或其可药用盐，或所述化合物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物或水合物的可药用盐，或所述化合物的前体药物或所述前体药物的可药用盐或所述前体药物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物的可药用盐或所述前体药物的水合物，以及可药用载体。
本发明的主题内容还是一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的式I、IIa、IIb、IIc、IIIa、IIIb、IIIc、IVa、IVb、IVc、Va、Vb、Vc、VIa、VIb、VIc、VII、IX、X的化合物或其可药用盐，或所述化合物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物或水合物的可药用盐，或所述化合物的前体药物或所述前体药物的可药用盐或所述前体药物的溶剂化物或水合物或所述溶剂化物的可药用盐或所述前体药物的水合物。
本发明的主题内容还是一种制备本发明的化合物的方法。因此，本发明的主题内容是一种制备根据本发明所述的式I的化合物的方法，所述方法包括将式VIII的化合物
Figure BDA0003327916790000411
其中R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基，
与选自下述的化合物反应
Figure BDA0003327916790000412
其中
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基、CH2CH2-O-CH2-C6-芳基、CH2CH2-O-C1-C3-烷基、CH2CH2-N-(C1-C3-烷基)2、CH2CH2OCF3、CH2-C(O)-O-C1-C3-烷基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(吗啉-4-基)乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000421
唑基、异
Figure BDA0003327916790000422
唑基、咪唑基、吡唑基、1,3-二氧杂环己烷基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基、氨基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、CH2-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000423
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000424
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-R14是H或F
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1。
在一个实施方式中，本发明的主题内容是一种制备根据本发明所述的式I的化合物的方法，所述方法包括将式VIII的化合物
Figure BDA0003327916790000431
其中R3、R4、R5 and R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基，
与选自下述的化合物反应
Figure BDA0003327916790000432
其中
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure BDA0003327916790000433
唑基、异
Figure BDA0003327916790000434
唑基、咪唑基、吡唑基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure BDA0003327916790000441
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure BDA0003327916790000442
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1。
定义
下文列出了用于描述本发明的各种不同术语的定义。这些定义适用于在整个本说明书和权利要求书中使用的所述术语，除非在特定情况下单独地或作为较大基团的一部分另有限制。
除非另有定义，否则在本文中使用的所有技术和科学术语通常具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。通常，在本文中使用的命名法和细胞培养、分子遗传学、有机化学和肽化学中的实验室程序是在本领域中公知且常用的。
当在本文中使用时，没有具体数目的指称是指一个或超过一个(即至少一个)指称物。例如，“要素”是指一个要素或超过一个要素。此外，术语“包括”以及其他形式的使用不是限制性的。
当在本文中使用时，术语“衣壳组装调节物”是指破坏或加速或抑制或阻碍或延缓或减少或改变正常衣壳组装(例如在成熟期间)或正常衣壳拆解(例如在感染期间)或扰乱衣壳稳定性，从而引起异常衣壳形态或异常衣壳功能的化合物。在一个实施方式中，衣壳组装调节物加速衣壳组装或拆解，从而引起异常衣壳形态。在另一个实施方式中，衣壳组装调节物与主要衣壳组装蛋白(HBV-CP)相互作用(例如在活性位点处结合、在变构位点处结合或改变和/或阻碍折叠等)，从而破坏衣壳组装或拆解。在又一个实施方式中，衣壳组装调节物引起HBV-CP的结构或功能的扰乱(例如HBV-CP组装、拆解、结合到底物、折叠成合适构象等的能力，其减弱病毒的感染性和/或对病毒具有致命性)。
当在本文中使用时，术语“治疗”被定义为向患者施用或给药治疗剂即本发明的化合物(单独地或与另一种药剂相组合)，或向来自于具有HBV感染、HBV感染的症状或发生HBV感染的潜力的患者的分离的组织或细胞系(例如用于诊断或离体施用)施用或给药治疗剂，目的是治愈、痊愈、减轻、缓解、改变、补救、改善、改进或影响所述HBV感染、HBV感染的症状或发生HBV感染的潜力。这类治疗可以在从药物基因组学领域获得的知识的基础上具体地定制或修改。
当在本文中使用时，术语“预防”意味着没有障碍或疾病的发展(如果没有发生)或没有进一步的障碍或疾病的发展(如果已经有障碍或疾病的发展)。还考虑了人们阻止与所述障碍和疾病相关的某些或所有症状的能力。
当在本文中使用时，术语“患者”、“个体”或“对象”是指人类或非人类哺乳动物。非人类哺乳动物包括例如牲畜和宠物，例如绵羊、牛、猪、猫科和鼠类哺乳动物。优选地，患者、对象或个体是人类。
当在本文中使用时，术语“有效量”、“药物有效量”和“治疗有效量”是指提供所需生物学结果的无毒但足够的药剂量。该结果可能是疾病的征兆、症状或原因的减少和/或减轻，或任何其他所需的生物系统改变。本领域普通技术人员可以使用常规实验确定在任何个体情况下适合的治疗量。
当在本文中使用时，术语“可药用”是指不消除所述化合物的生物学活性或特性并且相对无毒的物质例如载体或稀释剂，即所述物质可以给药到个体而不引起不想要的生物学效应或不以有害的方式与其中包含它的组合物的任何组分相互作用。
当在本文中使用时，术语“可药用盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中所述母体化合物通过将已有的酸或碱组成部分转变成其盐形式而被修饰。可药用盐的实例包括但不限于碱性残基例如胺的无机或有机酸盐、酸性残基例如羧酸的碱金属或有机盐等。本发明的可药用盐包括母体化合物的从例如无毒性无机或有机酸形成的常规无毒性盐。本发明的可药用盐可以从含有碱性或酸性组成部分的母体化合物通过常规的化学方法来合成。通常，此类盐可以通过将这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的适合的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常优选的是非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。适合的盐的名单可以在《Remington制药学》(Remington'sPharmaceutical Sciences)第17版,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985p.1418和Journal of Pharmaceutical Science,66,2(1977)中找到，其各自整体通过引用并入本文。根据本发明所述的化合物的可药用盐包括酸加成盐，例如但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。根据本发明所述的化合物的可药用盐还包括常用碱的盐，例如但不限于碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)和源自于氨或具有1至16个碳原子的有机胺例如乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙基胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苯甲胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶的铵盐。
当在本文中使用时，术语“溶剂化物”是指通过与溶剂分子配位在固体或液体状态下形成络合物的化合物。适合的溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、乙酸和水。水合物是一种特殊形式的溶剂化物，其中配位与水发生。
当在本文中使用时，术语“组合物”或“药物组合物”是指在本发明中有用的至少一种化合物与可药用载体的混合物。药物组合物便于所述化合物向患者或对象的给药。本领域中存在给药化合物的多种技术，包括但不限于静脉内、口服、气溶胶、直肠、肠胃外、眼部、肺部和局部给药。
当在本文中使用时，术语“可药用载体”意味着可药用材料、组合物或载体例如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或包封材料，它们参与在本发明中有用的化合物在所述患者中或向所述患者的搬运或运输，使其可以执行其目标功能。通常，此类构建物从身体的一个器官或部分搬运或运输到身体的另一个器官或部分。每种载体在与包括本发明中使用的化合物的制剂的其他成分相容并且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。可以充当可药用载体的材料的一些实例包括：糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄芪胶；麦芽、明胶、滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂用蜡；油类，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二元醇例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯类，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲液，以及在药物制剂中使用的其他无毒性相容物质。
当在本文中使用时，“可药用载体”还包括与在本发明中有用的化合物的活性相容并且对于患者来说在生理上可接受的任何和所有包衣、抗细菌和抗真菌剂和吸收延迟剂等。增补活性化合物也可以并入到所述组合物中。“可药用载体”还可以包括在本发明中有用的化合物的可药用盐。可以被包括在本发明的实践中使用的药物组合物中的其他另外的成分在本领域中是已知的，并描述在例如《Remington制药学》(Remington'sPharmaceutical Sciences)(Genaro主编，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985)中，其通过引用并入本文。
当在本文中使用时，术语“取代的”意味着原子或原子团代替氢作为附连到另一个基团的取代基。
当在本文中使用时，术语“包含”也涵盖选项“由……构成”。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则术语“烷基”本身或作为另一个取代基的一部分意味着具有指定的碳原子数目的直链或支链烃(即C1-C6-烷基意味着1至6个碳原子)，并包括直链和支链。实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基和己基。此外，术语“烷基”本身或作为另一个取代基的一部分也可以意味着被C3-C5-碳环取代的C1-C3直链烃。实例包括(环丙基)甲基、(环丁基)甲基和(环戊基)甲基。为了避免疑问，在基团中存在两个烷基组成部分的情况下，所述烷基组成部分可以相同或不同。
当在本文中使用时，术语“烯基”表示源自于含有至少两个碳原子和至少一个E或Z立体化学的碳-碳双键的烃组成部分的单价基团。所述双键可能是或可能不是通往另一个基团的附连点。烯基(例如C2-C8-烯基)包括但不限于例如乙烯基、丙烯基、丙-1-烯-2-基、丁烯基、甲基-2-丁烯-1-基、庚烯基和辛烯基。为避免疑问，在基团中存在两个烯基组成部分的情况下，所述烯基组成部分可以相同或不同。
当在本文中使用时，C2-C6-炔基或组成部分是含有2至6个碳原子的直链或支链炔基或组成部分，例如含有2至4个碳原子的C2-C4炔基或组成部分。示例性的炔基包括–C≡CH或-CH2-C≡C，以及1-和2-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基。为避免疑问，在基团中存在两个炔基组成部分的情况下，它们可以相同或不同。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则单独或作为另一个取代基的一部分的术语“卤”或“卤素”意味着氟、氯、溴或碘原子，优选为氟、氯或溴，更优选为氟或氯。为避免疑问，在基团中存在两个卤素组成部分的情况下，它们可以相同或不同。
当在本文中使用时，C1-C6-烷氧基或C2-C6-烯氧基通常分别是附连到氧原子的所述C1-C6-烷基(例如C1-C4烷基)或所述C2-C6-烯基(例如C2-C4烯基)。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则单独或与其他术语相组合使用的术语“芳基”意味着含有一个或多个环(通常为1、2或3个环)的碳环芳香族系统，其中这些环可以以侧链方式附连在一起例如联苯，或者可以稠合例如萘。芳基的实例包括苯基、蒽基和萘基。优选的实例是苯基(例如C6-芳基)和联苯基(例如C12-芳基)。在某些实施方式中，芳基具有6至16个碳原子。在某些实施方式中，芳基具有6至12个碳原子(例如C6-C12-芳基)。在某些实施方式中，芳基具有6个碳原子(例如C6-芳基)。
当在本文中使用时，术语“杂芳基”和“杂芳族”是指含有一个或多个环(通常为1、2或3个环)的具有芳香族特点的杂环。杂芳基取代基可以通过碳原子的数目来定义，例如Cl-C9-杂芳基指示了所述杂芳基中含有的碳原子的数目，不包括杂原子的数目。例如，C1-C9-杂芳基包括额外的1至4个杂原子。多环杂芳基可以包括一个或多个部分饱和的环。杂芳基的非限制性实例包括：
Figure BDA0003327916790000501
杂芳基的其他非限制性实例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基(包括例如2和4-嘧啶基)、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基(包括例如2-吡咯基)、咪唑基、噻唑基、
Figure BDA0003327916790000502
唑基、吡唑基(包括例如3-和5-吡唑基)、异噻唑基、1,2,3-三唑基、l,2,4-三唑基、1,3,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-
Figure BDA0003327916790000503
二唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-
Figure BDA0003327916790000504
二唑基。多环杂环和杂芳基的非限制性实例包括吲哚基(包括3-、4-、5-、6-和7-吲哚基)、吲哚啉基、喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基(包括例如1-和5-异喹啉基)、1,2,3,4-四氢异喹啉基、噌啉基、喹喔啉基(包括例如2-和5-喹喔啉基)、喹唑啉基、酞嗪基、1,8-萘啶基、1,4-苯并二氧杂环己烷基、香豆素、二氢香豆素、1,5-萘啶基、苯并呋喃基(包括例如3-、4-、5-、6-和7-苯并呋喃基)、2,3-二氢苯并呋喃基、1,2-苯并异
Figure BDA0003327916790000505
唑基、苯并噻吩基(包括例如3-、4-、5-、6-和7-苯并噻吩基)、苯并
Figure BDA0003327916790000506
唑基、苯并噻唑基(包括例如2-苯并噻唑基和5-苯并噻唑基)、嘌呤基、苯并咪唑基(包括例如2-苯并咪唑基)、苯并三唑基、硫代黄嘌呤基、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡咯啉嗪基和喹嗪基。
当在本文中使用时，术语“卤代烷基”通常分别是其中任一个或多个碳原子被一个或多个上文所定义的卤原子取代的所述烷基、烯基、烷氧基或烯氧基。卤代烷基包含单卤代烷基、二卤代烷基和多卤代烷基游离基。术语“卤代烷基”包括但不限于氟甲基、1-氟乙基、二氟甲基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、二氟甲氧基和三氟甲氧基。
当在本文中使用时，C1-C6-羟基烷基是被一个或多个羟基取代的所述C1-C6烷基。通常，它被1、2或3个羟基取代。优选地，它被单个羟基取代。
当在本文中使用时，C1-C6-氨基烷基是被一个或多个氨基取代的所述C1-C6烷基。通常，它被1、2或3个氨基取代。优选地，它被单个氨基取代。
当在本文中使用时，C1-C4-羧基烷基是被羧基取代的所述C1-C4烷基。
当在本文中使用时，C1-C4-甲酰胺基烷基是被取代或未取代的甲酰胺基团取代的所述C1-C4烷基。
当在本文中使用时，C1-C4-酰基磺酰胺-烷基是被通式C(＝O)NHSO2CH3或C(＝O)NHSO2-c-Pr的酰基磺酰胺基团取代的所述C1-C4烷基。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则术语“羧基”本身或作为另一个取代基的一部分意味着式C(＝O)OH的基团。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则术语“氰基”本身或作为另一个取代基的一部分意味着式C≡N的基团。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则术语“硝基”本身或作为另一个取代基的一部分意味着式NO2的基团。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则术语“羧基酯”本身或作为另一个取代基的一部分意味着式C(＝O)OX的基团，其中X选自C1-C6-烷基、C3-C7-环烷基和芳基。
当在本文中使用时，羧基苯基是被所述羧基取代的苯基。
当在本文中使用时，羧基吡啶基是被所述羧基取代的吡啶基。
当在本文中使用时，羧基嘧啶基是被所述羧基取代的嘧啶基。
当在本文中使用时，羧基吡嗪基是被所述羧基取代的吡嗪基。
当在本文中使用时，羧基哒嗪基是被所述羧基取代的哒嗪基。
当在本文中使用时，羧基三嗪基是被所述羧基取代的三嗪基。
当在本文中使用时，羧基
Figure BDA0003327916790000521
唑基是被所述羧基取代的
Figure BDA0003327916790000522
唑基。
当在本文中使用时，羧基异
Figure BDA0003327916790000523
唑基是被所述羧基取代的异
Figure BDA0003327916790000524
唑基。
当在本文中使用时，羧基咪唑基是被所述羧基取代的咪唑基。
当在本文中使用时，羧基吡唑基是被所述羧基取代的吡唑基。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则术语“吡啶基”、“嘧啶基”、“吡嗪基”、“哒嗪基”、“三嗪基”、“
Figure BDA0003327916790000525
唑基”、“异
Figure BDA0003327916790000526
唑基”、“咪唑基”和“吡唑基”在单独或与一个或多个其他术语组合使用时涵盖了其位置异构体。
当在本文中使用时，未取代的所述吡啶基包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。取代的吡啶基的实例包括所述2-吡啶基，其中进一步的取代可以在3-、4-、5-或6-位处。取代的吡啶基的其他实例还包括所述3-吡啶基，其中进一步的取代可以在2-、4-、5-或6-位处，以及所述4-吡啶基，其中进一步的取代可以在2-、3-、5-或6-位处。
当在本文中使用时，未取代的所述嘧啶基包括2-嘧啶基、4-嘧啶基和5-嘧啶基。取代的嘧啶基的实例包括所述2-嘧啶基，其中进一步的取代在4-、5-或6-位上。取代的嘧啶基的实例还包括所述4-嘧啶基，其中进一步的取代在2-、5-或6-位上。取代的嘧啶基的实例还包括所述5-嘧啶基，其中进一步的取代在2-、4-或6-位上。
当在本文中使用时，未取代的所述吡嗪基是2-吡嗪基。取代的吡嗪基的实例包括所述2-嘧啶基，其中进一步的取代在3-、5-或6-位上。
当在本文中使用时，未取代的所述哒嗪基是3-哒嗪基。取代的吡嗪基的实例包括所述3-嘧啶基，其中进一步的取代在4-、5-或6-位上。
当在本文中使用时，未取代的所述三嗪基是2-三嗪基。取代的三嗪基是在4-或6-位上具有进一步取代的所述2-三嗪基。
当在本文中使用时，未取代的所述
Figure BDA0003327916790000531
唑基包括2-
Figure BDA0003327916790000532
唑基和4-
Figure BDA0003327916790000533
唑基，取代的
Figure BDA0003327916790000534
唑基是在4-或5-位上具有进一步取代的所述2-
Figure BDA0003327916790000535
唑基或在2-或5-位上具有进一步取代的所述4-
Figure BDA0003327916790000536
唑基。
当在本文中使用时，未取代的所述异
Figure BDA0003327916790000537
唑基包括3-异
Figure BDA0003327916790000538
唑基和4-异
Figure BDA0003327916790000539
唑基。取代的异
Figure BDA00033279167900005310
唑基是在4-或5-位上具有进一步取代的所述3-
Figure BDA00033279167900005311
唑基或在3-或5-位上具有进一步取代的所述4-
Figure BDA00033279167900005312
唑基。
当在本文中使用时，未取代的所述咪唑基包括2-咪唑基和4-咪唑基。取代的咪唑基是在N1-、N3-、4-或5-位上具有进一步取代的所述2-咪唑基(前提是N1-和N3-中仅有一者可以被取代)，或在N1-、2-、N3-或5-位上具有进一步取代的所述4-咪唑基(前提是N1-和N3-中仅有一者可以被取代)。
当在本文中使用时，未取代的所述吡唑基包括3-吡唑基和4-吡唑基。取代的吡唑基是在N1-、N2-、4-或5-位上具有进一步取代的所述3-吡唑基(前提是N1-和N2-中仅有一者可以被取代)，或在N1-、N2-、3-或5-位上具有进一步取代的所述4-吡唑基(前提是N1-和N2-中仅有一者可以被取代)。
当在本文中使用时，术语“环烷基”是指其中形成环的每个原子(即骨架原子)是碳原子的单环或多环非芳香族基团。在一个实施方式中，所述环烷基是饱和的或部分不饱和的。在另一个实施方式中，所述环烷基与芳香环稠合。环烷基包括具有3至10个环原子的基团(C3-C10-环烷基)、具有3至8个环原子的基团(C3-C8-环烷基)、具有3至7个环原子的基团(C3-C7-环烷基)和具有3至6个环原子的基团(C3-C6-环烷基)。环烷基的说明性实例包括但不限于下述组成部分：
Figure BDA0003327916790000541
单环环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。二环环烷基包括但不限于四氢萘基、茚满基和四氢并环戊二烯。多环环烷基包括金刚烷和降冰片烷。术语环烷基包括“不饱和非芳香族碳环基”或“非芳香族不饱和碳环基”，两者都是指含有至少一个碳-碳双键或一个碳-碳叁键的本文所定义的非芳香族碳环。
当在本文中使用时，术语“卤代环烷基”通常是其中任一个或多个碳原子被一个或多个上文所定义的卤原子取代的所述环烷基。卤代环烷基包括单卤代烷基、二卤代烷基和多卤代烷基游离基。卤代环烷基包括3,3-二氟-环丁基、3-氟环丁基、2-氟环丁基、2,2-二氟环丁基和2,2-二氟环丙基。
当在本文中使用时，术语“杂环烷基”和“杂环基”是指含有一个或多个环(通常为1、2或3个环)的杂脂环族基团，其含有1至4个各自选自氧、硫和氮的环杂原子。在一个实施方式中，每个杂环基在其环系统中具有3至10个原子，附带条件是所述基团的环不含两个相邻的氧或硫原子。在一个实施方式中，每个杂环基具有稠合的双环环系统，在所述环系统中具有3至10个原子，同样地附带条件是所述基团的环不含两个相邻的氧或硫原子。在一个实施方式中，每个杂环基具有桥接的双环环系统，在所述环系统中具有3至10个原子，同样地附带条件是所述基团的环不含两个相邻的氧或硫原子。在一个实施方式中，每个杂环基具有螺双环环系统，在所述环系统中具有3至10个原子，同样地附带条件是所述基团的环不含两个相邻的氧或硫原子。杂环基取代基可选地可以由碳原子的数目来定义，例如C2-C8-杂环基指示所述杂环基中含有的碳原子数目，不包括杂原子的数目。例如，C2-C8-杂环基包括额外的1至4个杂原子。在另一个实施方式中，杂环烷基与芳香环稠合。在另一个实施方式中，杂环烷基与杂芳基环稠合。在一个实施方式中，氮和硫杂原子可以任选地被氧化，并且氮原子可以任选地被季铵化。除非另有陈述，否则所述杂环系统可以在提供稳定结构的任何杂原子或碳原子处附连。3-元杂环基的实例包括并且不限于氮杂环丙烷。4-元杂环烷基的实例包括并且不限于氮杂环丁烷和β-内酰胺。5-元杂环基的实例包括并且不限于吡咯烷、
Figure BDA0003327916790000551
唑烷和噻唑烷二酮。6-元杂环烷基的实例包括并且不限于哌啶、吗啉、哌嗪、N-乙酰基哌嗪和N-乙酰基吗啉。杂环基的其他非限制性实例是：
Figure BDA0003327916790000561
杂环的实例包括单环基团例如氮杂环丙烷、氧杂环丙烷，硫杂环丙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷，硫杂环丁烷、吡咯烷、吡咯啉、吡唑烷、咪唑啉、二氧杂环戊烷、环丁砜、2,3-二氢呋喃、2,5-二氢呋喃、四氢呋喃、噻吩烷、哌啶、1,2,3,6-四氢吡啶、1,4-二氢吡啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡喃、2,3-二氢吡喃、四氢吡喃、1,4-二
Figure BDA0003327916790000562
烷、1,3-二
Figure BDA0003327916790000563
烷、1,3-二氧杂环戊烷、高哌嗪、高哌啶、1,3-二氧杂环庚烷、4,7-二氢-1,3-二氧杂环庚烷、和六亚甲基氧化物。术语“C3-C7-杂环烷基”包括但不限于四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、3-氧杂双环[3.1.0]己-6-基、3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基、四氢吡喃-4-基、四氢吡喃-3-基、四氢吡喃-2-基、1,3-二氧杂环己烷-2-基、1,4-二氧杂环己烷-2-基和氮杂环丁烷-3-基。
当在本文中使用时，术语“芳香族”是指具有一个或多个多不饱和环并具有芳香族特点即具有(4n+2)个离域π(pi)电子的碳环或杂环，其中n是整数。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则单独或与其他术语相组合使用的术语“酰基”意味着通过羰基连接的烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基。
当在本文中使用时，除非另有陈述，否则单独或与其他术语相组合使用的术语“氨甲酰基”和“取代的氨甲酰基”意味着连接到氨基的羰基，其任选地被氢、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基单取代或双取代。在某些实施方式中，所述氮取代基被连接以形成如上所定义的杂环基环。
术语“前体药物”是指药物的前体，其是在给药到患者后，在变成有活性的药理试剂之前必须经历代谢过程的化学转化的化合物。根据式I所述的化合物的说明性前体药物是酯和酰胺，优选为脂肪酸的烷基酯。这里的前体药物制剂包含以酶、代谢或任何其他方式通过简单的转化(包括水解、氧化或还原)而形成的所有物质。适合的前体药物含有例如通过可酶切割的连接物(例如氨基甲酸酯、磷酸酯、N-糖苷或二硫化物基团)连接到增强溶解的物质(例如四乙二醇、糖类、甲酸或葡萄糖醛酸等)的通式I的物质。根据本发明所述的化合物的这种前体药物可以应用到患者，并且这种前体药物可以被转变成通式I的物质，以便获得所需药理效果。
实施例
现在参考下面的实施例描述本发明。提供这些实施例仅仅是出于说明的目的，并且本发明不限于这些实施例，而是涵盖了明显作为本文提供的教导的结果的所有变化。
所需的取代的吲哚-2-甲酸可以以多种方式制备；使用的主要途径概述在方案1-4中。对于本领域的化学家来说，显然还存在其他方法也可以实现这些中间体的制备。
取代的吲哚-2-甲酸可以通过Hemetsberger-Knittel反应(Organic Letters,2011,13(8)pp.2012-2014；Journal of the American Chemical Society,2007,pp.7500-7501；和Monatshefte für Chemie,103(1),pp.194-204)来制备(方案1)。
Figure BDA0003327916790000581
取代的吲哚也可以使用Fischer方法(Berichte der Deutschen ChemischenGesellschaft.17(1):559–568)来制备(方案2)。
Figure BDA0003327916790000582
用于制备取代的吲哚的另一种方法是钯催化的炔烃环化反应(Journal of theAmerican Chemical Society,1991,pp.6690-6692)(方案3)。
Figure BDA0003327916790000583
另外，吲哚可以从其他适当官能化(卤代)的吲哚制备(例如通过钯催化的交叉偶联或亲核取代反应)，如方案4中所示。
Figure BDA0003327916790000591
本领域的化学家将会认识到，其他方法可用于合成适当官能化的吲哚-2-甲酸及其活化酯。
在优选实施方式中，式1的化合物可以如方案5中所示来制备。
Figure BDA0003327916790000592
在步骤1中，使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将方案5中描述的化合物1酰胺化，产生式I的化合物。
在另一个实施方式中，式IIa的化合物可以如下面的方案6中所示来制备。
Figure BDA0003327916790000593
在步骤1中，使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将方案6中描述的化合物2酰胺化，产生式IIa的化合物。
在另一个实施方式中，式IIa的化合物可以如下面的方案7中所示来制备。
Figure BDA0003327916790000601
在步骤1中，使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将方案7中描述的化合物3酰胺化，产生通用结构4的化合物。然后在步骤2中使用例如氢氧化钠水溶液将所述酯(被画为但不限于甲基酯)水解，给出式IIa的化合物。
在另一个实施方式中，式IIb的化合物可以如下面的方案8中所示来制备。
Figure BDA0003327916790000611
在步骤1中，使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将方案7中描述的化合物5酰胺化，产生通用结构6的化合物。然后在步骤2中使用例如氢氧化钠水溶液将所述酯(被画为但不限于甲基酯)水解，给出式IIb的化合物。
在另一个实施方式中，式IIc的化合物可以如下面的方案9中所示来制备。
Figure BDA0003327916790000621
在步骤1中，使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将方案9中描述的化合物7酰胺化，产生通用结构8的化合物。然后在步骤2中使用例如氢氧化钠水溶液将所述酯(被画为但不限于甲基酯)水解，给出式IIc的化合物。
本领域的专业化学家将会认识到，与方案6-9中所示相似的方法适用于合成式IIIa、IIIb、IIIc、IVa、IVb、IVc、Va、Vb、Vc、VIa、VIb和VIc的化合物。
在另一个实施方式中，式VII的化合物可以如下面的方案10中所示来制备。
Figure BDA0003327916790000631
在步骤1中，使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将方案10中描述的化合物9酰胺化，产生通用结构10的化合物。然后在步骤2中，使用例如HCl除去三个保护基团中的两个(被画为但不限于Boc和SEM)，给出通用结构11的化合物。然后在步骤3中，将所述胺基团用与醇保护基团(被画为但不限于苯甲酰基)正交的保护基团例如Boc基团重新保护，给出通用结构12的化合物。使用例如氢氧化钠水溶液除去所述被画为但不限于苯甲酰基的醇保护基团，给出通用结构13的化合物。在步骤5中，所述醇与吡唑NH的Mitsunobu反应(WO2005/120516)给出通用结构14的化合物，其然后可以使用例如HCl去保护(被画为但不限于Boc)，给出通用结构15的化合物。然后可以使用文献中已知的方法(A.El-Faham,F.Albericio,Chem.Rev.2011,111,6557-6602)，例如使用HATU将15的胺基团酰化，产生式VII的化合物。
下面的实施例说明了本发明的某些特定化合物的制备和性质。
使用了下述缩略语：
A-DNA核苷碱基腺嘌呤
ACN-乙腈
Ar-氩气
BODIPY-FL-4,4-二氟-5,7-二甲基-4-硼-3a,4a-二氮杂-s-引达省-3-丙酸(荧光染料)
Boc-叔丁氧基羰基
BnOH-苯甲醇
n-BuLi–正丁基锂
t-BuLi–叔丁基锂
Bz-苯甲酰基
C-DNA核苷碱基胞嘧啶
Cbz-苯甲氧基羰基
CC50-半最高细胞毒性浓度
CO2-二氧化碳
CuCN-氰化亚铜(I)
DABCO-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷
DCE-二氯乙烷
DCM-二氯甲烷
Dess-Martin高碘烷-1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氢-1,2-苯并碘氧杂环戊烷-3(1H)-酮
DIAD–偶氮二甲酸二异丙基酯
DIPEA-二异丙基乙基胺
DIPE-二异丙基醚
DMAP-4-二甲基氨基吡啶
DMF–N,N-二甲基甲酰胺
DMP-Dess-Martin高碘烷
DMSO-二甲基亚砜
DNA-脱氧核糖核酸
DPPA–二苯基磷酰基叠氮化物
DTT-二硫苏糖醇
EC50-半最高有效浓度
EDCI-N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐
Et2O-二乙醚
EtOAc-乙酸乙酯
EtOH-乙醇
FL--用荧光素标记的5'末端
NEt3-三乙胺
ELS-蒸发光散射
g-克
G-DNA核苷碱基鸟嘌呤
HBV-乙型肝炎病毒
HATU-2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸脲
HCl-盐酸
HEPES-4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸
HOAt-1-羟基-7-氮杂苯并三唑
HOBt-1-羟基苯并三唑
HPLC–高效液相色谱
IC50-半最高抑制浓度
LC640--使用荧光染料
Figure BDA0003327916790000651
Red 640的3'末端修饰
LC/MS-液相色谱/质谱
LiAlH4-氢化锂铝
LiOH-氢氧化锂
Me-甲基
MeOH–甲醇
MeCN-乙腈
MgSO4-硫酸镁
mg-毫克
min-分钟
mol-摩尔
mmol-毫摩尔
mL-毫升
MTBE–甲基叔丁基醚
N2-氮气
Na2CO3-碳酸钠
NaHCO3-碳酸氢钠
Na2SO4-硫酸钠
NdeI-识别CA^TATG位点的限制性酶
NEt3-三乙胺
NaH-氢化钠
NaOH-氢氧化钠
NH3-氨
NH4Cl-氯化铵
NMR-核磁共振
PAGE-聚丙烯酰胺凝胶电泳
PCR-聚合酶链反应
qPCR–定量PCR
Pd/C-碳载钯
-PH-3'末端磷酸修饰
pTSA-4-甲苯磺酸
Rt-保留时间
r.t.-室温
sat.-饱和水性溶液
SDS-十二烷基硫酸钠
SI-选择性指数(＝CC50/EC50)
STAB-三乙酰氧基硼氢化钠
T-DNA核苷碱基胸腺嘧啶
TBAF-四丁基氟化铵
TEA-三乙胺
TFA-三氟乙酸
THF-四氢呋喃
TLC-薄层层析
TPPO–三苯基膦氧化物
Tris-三(羟基甲基)-氨基甲烷
XhoI-识别C^TCGAG位点的限制性酶
化合物鉴定-NMR
对于许多化合物来说，使用配备有5mm反向三共振探头的Bruker DPX400谱仪记录NMR波谱，对质子来说在400MHz下运行，对于碳来说在100MHz下运行；或使用配备有5mm反向三共振探头的Bruker DRX500谱仪记录NMR波谱，对质子来说在500MHz下运行，对于碳来说在125MHz下运行。氘代溶剂为氯仿-d(氘代氯仿，CDCl3)或d6-DMSO(氘代DMSO，d6二甲基亚砜)。化学位移相对于用作内标的四甲基硅烷(TMS)以百万分数(ppm)为单位报告。
化合物鉴定–HPLC/MS
对于许多化合物来说，使用下述分析方法记录LC-MS波谱。
方法A
柱-反相Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，3.5微米)
流速-0.8mL/min，25℃
洗脱剂A–95％乙腈+5％10mM碳酸铵水溶液(pH 9)
洗脱剂B–10mM碳酸铵水溶液(pH 9)
线性梯度t＝0min 5％A，t＝3.5min 98％A，t＝6min 98％A
方法A2
柱-反相Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，3.5微米)
流速-0.8mL/min，25℃
洗脱剂A–95％乙腈+5％10mM碳酸铵水溶液(pH 9)
洗脱剂B–10mM碳酸铵水溶液(pH 9)
线性梯度t＝0min 5％A，t＝4.5min 98％A，t＝6min 98％A
方法B
柱-反相Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，3.5微米)
流速-0.8mL/min，35℃
洗脱剂A–0.1％甲酸的乙腈溶液
洗脱剂B–0.1％甲酸水溶液
线性梯度t＝0min 5％A，t＝3.5min 98％A，t＝6min 98％A
方法B2
柱-反相Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，3.5微米)
流速-0.8mL/min，40℃
洗脱剂A–0.1％甲酸的乙腈溶液
洗脱剂B–0.1％甲酸水溶液
线性梯度t＝0min 5％A，t＝4.5min 98％A，t＝6min 98％A
方法C
柱-反相Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，3.5微米)
流速-1mL/min，35℃
洗脱剂A–0.1％甲酸的乙腈溶液
洗脱剂B–0.1％甲酸的水溶液
线性梯度t＝0min 5％A，t＝1.6min 98％A，t＝3min 98％A
方法D
柱-Phenomenex Gemini NX C18(50x2.0mm，3.0微米)
流速-0.8mL/min，35℃
洗脱剂A–95％乙腈+5％10mM碳酸氢铵水溶液
洗脱剂B–10mM碳酸氢铵水溶液pH＝9.0
线性梯度t＝0min 5％A，t＝3.5min 98％A，t＝6min 98％A
方法E
柱-Phenomenex Gemini NX C18(50x2.0mm，3.0微米)
流速–0.8mL/min，25℃
洗脱剂A–95％乙腈+5％10mM碳酸氢铵水溶液
洗脱剂B–10mM碳酸氢铵水溶液(pH 9)
线性梯度t＝0min 5％A，t＝3.5min 30％A，t＝7min 98％A，t＝10min 98％A
方法F
柱-Waters XSelect HSS C18(150x4.6mm，3.5微米)
流速–1.0mL/min，25℃
洗脱剂A–0.1％TFA的乙腈溶液
洗脱剂B–0.1％TFA水溶液
线性梯度t＝0min 2％A，t＝1min 2％A，t＝15min 60％A，t＝20min60％A
方法G
柱-Zorbax SB-C18 1.8μm 4.6x15mm快速分离柱(PN 821975-932)
流速-3mL/min
洗脱剂A–0.1％甲酸的乙腈溶液
洗脱剂B–0.1％甲酸水溶液
线性梯度t＝0min 0％A，t＝1.8min 100％A
方法H
柱-Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，2.5微米)
流速–0.6mL/min
洗脱剂A–0.1％甲酸的乙腈溶液
洗脱剂B–0.1％甲酸水溶液
线性梯度t＝0min 5％A，t＝2.0min 98％A，t＝2.7min 98％A
方法J
柱-反相Waters Xselect CSH C18(50x2.1mm，2.5微米)
流速–0.6mL/min
洗脱剂A–100％乙腈
洗脱剂B–10mM碳酸氢铵水溶液(pH 7.9)
线性梯度t＝0min 5％A，t＝2.0min 98％A，t＝2.7min 98％A
吲哚-2-甲酸的合成
4-氯-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000701
步骤A：将化合物1·HCl(17.0g，86.2mmol)、乙酸钠(7.10g，86.6mmol)和丙酮酸乙酯(10.0g，86.1mmol)在乙醇(100mL)中的混合物回流1h，冷却至r.t.，并用水(100mL)稀释。通过过滤收集沉淀的固体并干燥，得到作为顺-和反-异构体的混合物的20.0g(77.3mmol，90％)化合物2。
步骤B：将在前一步骤中获得的化合物2(20.0g，77.3mmol)和BF3·Et2O(50.0g，352mmol)在乙酸(125mL)中的混合物回流18h，并在减压下蒸发。将残留物与水(100mL)混合并用MTBE(2×50mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥，并在减压下蒸发。将残留物通过硅胶柱层析进行纯化，给出3.00g(12.4mmol，16％)化合物3。
步骤C：将化合物3(3.00g，12.4mmol)和NaOH(0.500g，12.5mmol)在乙醇(30mL)中的混合物回流30min，并在减压下蒸发。将残留物与水(30mL)混合并过滤掉不可溶物质。将滤液用浓盐酸(5mL)酸化。通过过滤收集沉淀的固体，用水(3mL)洗涤并干燥，得到2.41g(11.3mmol，91％)4-氯-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.24min，m/z 212[M-H]-
7-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000711
步骤D：在-10℃下向甲醇钠(21.6g，400mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加化合物4(26.4g，183mmol)和化合物5(59.0g，457mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将反应物料搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min，过滤并用水洗涤，得到作为白色固体的35.0g(156mmol，72％)化合物6。
步骤E：将在前一步骤中获得的化合物6(35.0g，156mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下蒸发。将残留物从己烷-乙酸乙酯混合物(60:40)重结晶，给出21.0g(103mmol，60％)化合物7。
步骤F：向化合物7(21.0g，101mmol)在乙醇(200mL)中的溶液添加2N氢氧化钠水溶液(47mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。蒸发掉溶剂并将残留物用盐酸水溶液酸化至pH 5-6。过滤出得到的沉淀物，用水洗涤并干燥，得到18.0g(93.2mmol，92％)7-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.12min，m/z 192[M-H]-
6,7-二氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000721
步骤G：将化合物8(5.00g，34.7mmol)、乙酸(1mL)和丙酮酸乙酯(5.00g，43.1mmol)在乙醇(20mL)中的混合物回流1h，冷却至r.t.并用水(20mL)稀释。通过过滤收集沉淀的固体并干燥，得到作为顺-和反-异构体的混合物的5.50g(22.7mmol，66％)化合物9。
步骤H：将在前一步骤中获得的化合物9(5.50g，22.7mmol)和BF3·Et2O(10.0g，70.5mmol)在乙酸(25mL)中的混合物回流18h，并在减压下蒸发。将残留物与水(30mL)混合并用MTBE(2×30mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发。将残留物通过硅胶柱层析进行纯化，给出0.460g(2.04mmol，9％)化合物10。
步骤I：将化合物10(0.450g，2.00mmol)和NaOH(0.100g，2.50mmol)在乙醇(10mL)中的混合物回流30min，并在减压下蒸发。将残留物与水(10mL)混合并过滤掉不溶性物质。将滤液用浓盐酸(1mL)酸化。通过过滤收集沉淀的固体，用水(3mL)洗涤并干燥，得到0.38g(1.93mmol，95％)6,7-二氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.10min，m/z 196[M-H]-
4-氰基-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000731
步骤J：向化合物11(5.00g，19.7mmol)在DMF(50mL)中的搅拌的溶液添加CuCN(3.00g，33.5mmol)。将混合物在150℃下搅拌4h。然后将所述混合物冷却至r.t.并添加水(100mL)。将得到的混合物用乙酸乙酯(4×100mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，给出2.50g(12.5mmol，63％)化合物12，其纯度足以用于下一步。
步骤K：向化合物12(2.50g，12.5mmol)在乙醇(30mL)中的溶液添加LiOH·H2O(0.600g，13.0mmol)。将所述混合物回流10h。在减压下蒸发掉溶剂，并将残留物用水(50mL)稀释。将水性层用10％盐酸水溶液酸化至pH 6，并通过过滤收集沉淀的固体。将残留物用水洗涤并在真空下干燥，得到作为白色固体的1.20g(6.45mmol，52％)4-氰基-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.00min，m/z 197[M+H]+
4-氰基-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000741
步骤L：向化合物13(5.00g，18.4mmol)在DMF(50mL)中的搅拌的溶液添加CuCN(2.80g，31.2mmol)。将所述混合物在150℃下搅拌4h。然后将混合物冷却至r.t.并添加水(100mL)。将得到的混合物用乙酸乙酯(4x100mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，给出1.50g(6.87mmol，37％)化合物14，其纯度足以用于下一步。
步骤M：向化合物14(1.50g，6.87mmol)在乙醇(20mL)中的溶液添加LiOH·H2O(0.400g，9.53mmol)。将所述混合物回流10h。在减压下蒸发掉溶剂，并将残留物用水(40mL)稀释。将水性层用10％盐酸水溶液酸化至pH 6.0，并通过过滤收集沉淀物。将残留物用水洗涤并在真空下干燥，得到作为白色固体的0.400g(1.95mmol，28％)4-氰基-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.02min，m/z 203[M-H]-
4-氰基-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000742
步骤N：向化合物15(5.00g，19.4mmol)在DMF(50mL)中的溶液添加NaHCO3(1.59g，18.9mmol)和碘代甲烷(3mL)。将得到的混合物在r.t.搅拌过夜，然后用水(50mL)稀释并用二乙醚(3x50mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，得到4.90g(18.0mmol，90％)作为白色固体的化合物16。
步骤O：向化合物16(4.80g，17.6mmol)在DMF(50mL)中的搅拌的溶液添加CuCN(2.70g，30.1mmol)。将所述混合物在150℃搅拌4h。然后将混合物冷却至r.t.，添加水(100mL)。将得到的混合物用乙酸乙酯(4x100mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，给出1.40g(6.42mmol，36％)化合物17，其纯度足以用于下一步骤。
步骤P：向化合物17(1.40g，6.42mmol)在乙醇(20mL)中的溶液添加LiOH·H2O(0.350g，8.34mmol)。将所述混合物回流10h。在减压下蒸发掉溶剂并将残留物用水(30mL)稀释。将水性层用10％盐酸水溶液酸化至pH 6.0，并通过过滤收集沉淀物。将残留物用水洗涤并在真空下干燥，得到0.500g(2.45mmol，38％)作为白色固体的4-氰基-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.10min，m/z 203[M-H]-
4,5,6-三氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000751
步骤Q：在-10℃下向甲醇钠(23.0g，426mmol)在甲醇(200mL)中的溶液逐滴添加化合物18(15.0g，93.7mmol)和化合物5(26.0g，201mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将所述得到的混合物搅拌10min，并通过过滤收集沉淀物。将固体用水洗涤并干燥，得到12.0g(46.7mmol，72％)作为白色固体的化合物19。
步骤R：将在前一步骤中获得的化合物19(12.0g，46.7mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下蒸发。将所述残留物从己烷-乙酸乙酯混合物(60:40)重结晶，给出7.00g(30.5mmol，65％)化合物20。
步骤S：向化合物20(7.00g，30.5mmol)在乙醇(50mL)中的溶液添加2N氢氧化钠水溶液(18mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。蒸发掉溶剂并将残留物用盐酸水溶液酸化至pH5-6。通过过滤收集得到的沉淀物，用水洗涤并干燥，得到5.00g(23.2mmol，76％)4,5,6-三氟-1H-吲哚-2-甲酸。
1H NMR(400MHz,d6-dmso)7.17(1H,s),7.22(1H,dd),12.3(1H,br s),13.3(1H,brs)
4,6,7-三氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000761
步骤T：在-10℃下向甲醇钠(23.0g，426mmol)在甲醇(200mL)中的溶液逐滴添加化合物21(15.0g，90.3mmol)和化合物5(26.0g，201mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到10.0g(38.0mmol，42％)作为白色固体的化合物22。
步骤U：将在前一步骤中获得的化合物22(10.0g，38.0mmol)在二甲苯(200mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯混合物(60:40)重结晶，给出6.00g(26.2mmol，69％)化合物23。
步骤V：向化合物23(7.00g，30.5mmol)在乙醇(40mL)中的溶液添加2N氢氧化钠水溶液(16mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。蒸发掉溶剂，并将残留物用盐酸水溶液酸化至pH5-6。通过过滤收集得到的沉淀物，用水洗涤并干燥，得到4.10g(19.1mmol，62％)4,6,7-三氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.16min，m/z 214[M-H]-
4-氰基-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000771
步骤W：在-10℃下向甲醇钠(65.0g，1203mmol)在甲醇(500mL)中的溶液逐滴添加化合物24(60.0g，296mmol)和化合物5(85.0g，658mmol)在甲醇(200mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到45.0g(143mmol，48％)化合物25。
步骤X：将在前一步骤中获得的化合物25(35.0g，111mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下蒸发。将残留物从己烷-乙酸乙酯混合物(60:40)重结晶，给出11.0g(38.4mmol，35％)化合物26。
步骤Y：向化合物26(11.0g，38.4mmol)在DMF(20mL)中的搅拌的溶液添加CuCN(6.60g，73.7mmol)。将所述混合物在150℃搅拌4h。然后将混合物冷却至r.t.并添加水(70mL)。将混合物用乙酸乙酯(4x50mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，给出2.40g(10.3mmol，27％)化合物27，其纯度足以用于下一步骤。
步骤Z：向化合物27(2.40g，6.42mmol)在乙醇(30mL)中的溶液添加LiOH·H2O(0.600g，14.3mmol)。将所述混合物回流10h。将混合物在减压下浓缩并将残留物用水(50mL)稀释。将水性层用10％盐酸水溶液酸化至pH 6，并通过过滤收集沉淀物。将固体用水洗涤并在真空下干燥，得到1.20g(5.88mmol，57％)作为白色固体的4-氰基-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.06min，m/z 203[M-H]-
4-乙基-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000791
步骤AA：在0℃下将化合物28(70.0g，466mmol)在无水THF(500mL)中的溶液用BH3在THF中的10M溶液(53mL，53.0mmol的BH3)处理。将反应物料在r.t.搅拌24h，然后向其缓慢添加甲醇(150mL)。将得到的混合物搅拌45min并在减压下蒸发，得到55.0g(404mmol，87％)化合物29，其纯度足以用于下一步骤。
步骤AB：向化合物29(55.0g，404mmol)在CH2Cl2(400mL)中的冷却的(0℃)溶液分部添加Dess-Martin高碘烷(177g，417mmol)。在r.t.下搅拌1h后，将所述反应混合物用Na2S2O3饱和水溶液(300mL)和NaHCO3饱和水溶液(500mL)淬灭。将所述混合物用CH2Cl2(3x300mL)萃取。将合并的有机萃取液用水和盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并浓缩，得到51.0g作为黄色固体的粗品化合物30。
步骤AC：在-10℃下向甲醇钠(107g，1981mmol)在甲醇(600mL)中的溶液逐滴添加在前一步骤中获得的化合物30(51.0g)和化合物5(126g，976mmol)在甲醇(300mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌4h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min，并通过过滤收集沉淀物。将所述固体用水洗涤并干燥，得到35.0g(151mmol，2个步骤总共37％)化合物31。
步骤AD：将在前一步骤中获得的化合物31(35.0g，151mmol)在二甲苯(500mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯混合物(60:40)重结晶，给出21.0g(103mmol，68％)化合物32。
步骤AE：向化合物32(21.0g，103mmol)在乙醇(200mL)中的溶液添加2N氢氧化钠水溶液(47mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并将残留物用盐酸水溶液酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到19g(100mmol，97％)4-乙基-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.20min，m/z 188[M-H]-
1H NMR(400MHz,d6-dmso)δ1.25(t,3H),2.88(q,2H),6.86(1H,d),7.08-7.20(2H,m),7.26(1H,d),11.7(1H,br s),12.9(1H,br s)
4-环丙基-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000801
步骤AF：向化合物33(2.00g，7.80mmol)、环丙基硼酸(0.754g，8.78mmol)、K3PO4(5.02g，23.6mmol)、三环己基膦(0.189g，0.675mmol)和水(2.0mL)在甲苯(60.0mL)中的脱气的悬液添加乙酸钯(II)(0.076g，0.340mmol)。将所述反应混合物在100℃搅拌4h。反应进展如下进行监测：将所述反应混合物的等分试样用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层点样在分析硅胶TLC板上并使用254nm UV光可视化。反应进展到完成伴有极性斑点的形成。起始原料和产物的Rf值分别为0.3和0.2。允许所述反应混合物冷却至r.t.，并通过硅藻土垫过滤。将滤液在减压下浓缩，并将粗产物通过使用230-400目硅胶的快速柱进行纯化，用石油醚中的10％乙酸乙酯洗脱，得到1.10g(5.11mmol，63％)作为棕色液体的化合物34。TLC系统：石油醚中的5％乙酸乙酯。
步骤AG：将化合物34(1.10g，5.11mmol)在乙醇(40mL)和2N氢氧化钠水溶液(15mL)中的混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并将残留物用盐酸水溶液酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到1.01g(5.02mmol，92％)4-环丙基-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.17min，m/z 200[M-H]-
4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000811
步骤AH：在-10℃下向甲醇钠(39.9g，738mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加化合物36(28.8g，182mmol)和叠氮基乙酸甲酯(52.1g，404mmol)在甲醇(150mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到20.0g(78.2mmol，43％)化合物37。
步骤AI：将化合物37(19.4g，76.0mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯(50:50)重结晶，给出9.00g(39.5mmol，52％)化合物38。
步骤AJ：向化合物38(8.98g，39.4mmol)在乙醇(100mL)中的溶液添加2N氢氧化钠水溶液(18mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将所述混合物在减压下浓缩，并将残留物用盐酸水溶液酸化至pH5-6。通过过滤收集得到的沉淀物，用水洗涤并干燥，得到7.75g(36.3mmol，92％)4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.15min，m/z 212[M-H]-
1H NMR(400MHz,d6-dmso)7.08(1H,s),7.28(1H,dd)7.42(1H,dd),12.2(1H,brs),13.2(1H,br s)
5-氟-4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000821
步骤AK：在-10℃下向甲醇钠(50.0g，926mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加化合物39(45.0g，222mmol)和叠氮基乙酸甲酯(59.0g，457mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到35.0g(133mmol，60％)作为白色固体的化合物40。
步骤AL：将在前一步骤中获得的化合物40(35.0g，133mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下蒸发。将残留物从己烷-乙酸乙酯(60:40)重结晶，给出21.0g(77.2mmol，58％)化合物41。
步骤AM：在氮气下向化合物41(4.00g，14.7mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(5.50g，15.2mmol)在甲苯(50mL)中的脱气的溶液添加双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1.16g，1.65mmol)。将反应混合物在60℃搅拌20h。将所述反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液在减压下浓缩并将残留物通过硅胶层析进行纯化，得到2.50g(9.50mmol，65％)作为浅黄色固体的化合物42。
步骤AN：向化合物42(2.40g，9.12mmol)在1,4-二
Figure BDA0003327916790000831
烷(30mL)中的溶液添加2M盐酸(15mL)。将得到的混合物在室温搅拌30min。将所述混合物在真空下浓缩，并将残留物在乙酸乙酯与水之间分配。将有机萃取液用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并蒸发。将残留物用异己烷中的5％乙醚研磨并干燥，得到1.80g(7.65mmol，84％)作为白色固体的化合物43。
步骤AO：将化合物43(1.70g，7.23mmol)和NaBH4(2.50g，66.1mmol)在乙醇(13mL)中的悬液回流2h，然后冷却至室温并过滤。将滤液在减压下浓缩并将残留物溶解在乙酸乙酯中。将所述溶液用1N盐酸和盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，给出1.60g(6.74mmol，93％)作为无色油状物的化合物44。
步骤AP：向化合物44(1.50g，6.32mmol)在甲醇(40mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(10mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并将残留物用10％盐酸酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×15mL)洗涤并干燥，得到1.30g(5.82mmol，92％)5-氟-4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.00min，m/z 222[M-H]-
4-乙基-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000841
步骤AQ：在氮气下向化合物41(4.00g，14.7mmol)在无水DMF(10mL)中的加热的(90℃)溶液添加三正丁基(乙烯基)锡(3.60g，11.4mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.301g，0.757mmol)。将得到的混合物在90℃搅拌1h。然后将混合物冷却至室温并通过硅胶柱层析进行纯化(己烷中的60-80％乙酸乙酯)，给出2.20g(10.0mmol，68％)作为黄色固体的化合物45。
步骤AR：将化合物45(1.50g，6.84mmol)和Pd/C(0.300g，10％wt.)在甲醇(20mL)中的混合物在室温和氢气气氛下搅拌16h。将混合物过滤，然后在减压下浓缩，给出1.45g(6.55mmol，96％)化合物46。
步骤AS：向化合物46(1.40g，6.33mmol)在甲醇(40mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(10mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在真空下浓缩，然后将残留物用10％盐酸酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×15mL)洗涤并干燥，得到1.20g(5.79mmol，91％)目标化合物4-乙基-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.33min，m/z 206[M-H]-
4-乙基-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000851
步骤AT：在-10℃下向甲醇钠(50.0g，926mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加化合物47(45.0g，202mmol)和叠氮基乙酸甲酯(59.0g，457mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到38.5g(128mmol，63％)作为白色固体的化合物48。
步骤AU：将在前一步骤中获得的化合物48(38.5g，128mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯(60:40)重结晶，给出18.0g(67.3mmol，53％)化合物49。
步骤AV：在氮气下向化合物49(4.00g，14.7mmol)在无水DMF(10mL)中的加热的(90℃)溶液添加三正丁基(乙烯基)锡(3.60g，11.4mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.301g，0.757mmol)。将得到的混合物在90℃搅拌1h。然后将混合物冷却至室温，并通过硅胶柱层析进行纯化(己烷中的60-80％乙酸乙酯)，给出2.00g(9.12mmol，62％)作为黄色固体的化合物50。
步骤AW：将化合物50(1.50g，6.84mmol)和Pd/C(0.300g，10％wt.)在甲醇(20mL)中的混合物在室温和氢气气氛下搅拌16h。将所述混合物过滤并浓缩，给出1.40g(6.33mmol，93％)化合物51。
步骤AX：向化合物51(1.10g，4.97mmol)在甲醇(40mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(10mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，然后用10％盐酸酸化至pH5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×15mL)洗涤并干燥，得到0.900g(4.34mmol，87％)目标化合物4-乙基-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.29min，m/z 206[M-H]-
6-氟-4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000861
步骤AY：在氮气下向化合物49(4.00g，14.7mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(5.50g，15.2mmol)在甲苯(50mL)中的脱气的溶液添加双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1.16g，1.65mmol)。将所述反应混合物在60℃搅拌20h。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液在减压下浓缩，并将残留物通过硅胶层析进行纯化，给出2.10g(7.98mmol，54％)作为浅黄色固体的化合物52。
步骤AZ：向化合物52(2.10g，7.98mmol)在1,4-二
Figure BDA0003327916790000862
烷(30mL)中的溶液添加2M盐酸(15mL)。将得到的混合物在室温搅拌30min。将混合物在减压下浓缩，并将残留物在乙酸乙酯与水之间分配。将有机萃取液用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物用异己烷中的5％乙醚研磨并干燥，得到1.70g(7.23mmol，91％)作为白色固体的化合物53。
步骤BA：将化合物53(1.70g，7.23mmol)和NaBH4(2.50g，66.1mmol)在乙醇(13mL)中的悬液回流2h，冷却至室温并过滤。将滤液在减压下浓缩，并将残留物溶解在乙酸乙酯。将溶液用1N盐酸和盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出1.60g(6.74mmol，93％)作为无色油状物的化合物54。
步骤BB：向化合物54(1.40g，5.90mmol)在甲醇(40mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(10mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物浓缩，并将残留物用10％盐酸酸化至pH5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×15mL)洗涤并干燥，得到1.10g(4.93mmol，48％)目标化合物6-氟-4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.00min，m/z 222[M-H]-
4-乙基-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000871
步骤BC:在-10℃下向甲醇钠(50.0g，926mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加化合物55(45.0g，222mmol)和叠氮基乙酸甲酯(59.0g，457mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到33.0g(110mmol，50％)作为白色固体的化合物56。
步骤BD：将在前一步骤中获得的化合物56(33.0g，110mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯(60:40)重结晶，给出21.5g(79.0mmol，72％)化合物57。
步骤BE：在氮气下向化合物57(4.00g，14.7mmol)在无水DMF(10mL)中的加热的(90℃)溶液添加三正丁基(乙烯基)锡(3.60g，11.4mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.301g，0.757mmol)。将所述得到的混合物在90℃搅拌1h。将混合物冷却至室温，并通过硅胶柱层析进行纯化(己烷中的60-80％EtOAc)。将合并的产物级分浓缩，用水(3×100mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并浓缩，给出1.80g(8.21mmol，56％)作为黄色固体的化合物58。
步骤BF：将化合物58(1.50g，6.84mmol)和Pd/C(0.300g，10％wt.)在甲醇(20mL)中的混合物在氢气气氛和室温下搅拌16h。将混合物过滤并浓缩，给出1.25g(5.65mmol，83％)化合物59。
步骤BG：向化合物59(1.40g，6.33mmol)在甲醇(40mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(10mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并将残留物用10％盐酸酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×15mL)洗涤并干燥，得到1.25g(6.03mmol，95％)目标化合物4-乙基-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.27min，m/z 206[M-H]-
7-氟-4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000891
步骤BH：在氮气下向化合物57(4.00g，14.7mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(5.50g，15.2mmol)在甲苯(50mL)中的脱气的溶液添加双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1.16g，1.65mmol)。将所述反应混合物在60℃搅拌20h。将混合物冷却至室温并过滤。将滤液在减压下浓缩，并将残留物通过硅胶层析进行纯化，得到2.70g(10.3mmol，70％)作为浅黄色固体的化合物60。
步骤BI：向化合物60(2.40g，9.12mmol)在1,4-二
Figure BDA0003327916790000892
烷(30mL)中的溶液添加2M盐酸(15mL)。将所述混合物在室温搅拌30min。蒸发掉大部分溶剂，并将残留物在乙酸乙酯与水之间分配。将合并的有机萃取液用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并蒸发。将残留物用异己烷中的5％乙醚研磨并干燥，得到1.90g(8.08mmol，86％)作为白色固体的化合物61。
步骤BJ：将化合物61(1.70g，7.23mmol)和NaBH4(2.50g，66.1mmol)在乙醇(13mL)中的悬液回流2h，冷却至室温并过滤。将滤液在减压下蒸发，并将残留物溶解在乙酸乙酯中。将所述溶液用1N盐酸和盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，给出1.50g(6.32mmol，87％)作为无色油状物的化合物62。
步骤BK：向化合物62(1.50g，6.32mmol)在甲醇(40mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(10mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并将残留物用10％盐酸酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×15mL)洗涤并干燥，得到1.35g(6.05mmol，96％)目标化合物7-氟-4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)0.90min，m/z 222[M-H]-
4-(羟基甲基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000901
步骤BL：向化合物33(10.0g，39.4mmol)在二
Figure BDA0003327916790000902
烷(200mL)和水(50mL)的混合物中的溶液添加乙烯基三氟硼酸钾(11.0g，82.1mmol)、三乙胺(30mL，248mmol)和Pd(dppf)Cl2(1.00g，1.37mmol)。将所述混合物在80℃搅拌48h。将混合物在真空下浓缩，并将残留物溶解在乙酸乙酯中。将溶液用水洗涤并在减压下浓缩。将得到的材料通过硅胶柱层析进行纯化，给出2.50g(12.4mmol，38％)化合物63。
步骤BM：向化合物63(2.50g，12.4mmol)、丙酮(200mL)和水(40mL)的混合物添加OsO4(0.100g，0.393mmol)和NaIO4(13.4g，62.6mmol)。将所述反应在室温搅拌10h。蒸馏掉丙酮，并将剩余的水性溶液用二氯甲烷萃取。将有机层用饱和NaHCO3溶液(2×50mL)和盐水(2×50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，得到1.50g(7.40mmol，60％)化合物64。
步骤BN：向化合物64(1.50g，7.38mmol)在THF/甲醇混合物(100mL)中的冷却的(0℃)溶液添加NaBH4(0.491g，13.0mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌12h。然后将混合物冷却至0℃，用2N盐酸(40mL)处理并浓缩。将残留物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液用水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，得到1.00g(4.87mmol，65％)化合物65，其纯度足以用于下一步骤。
步骤BO：向在前一步骤中获得的化合物65(1.00g，4.87mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(9mL)。将得到的混合物在室温搅拌48h，然后浓缩，并用1N NaHSO4水溶液稀释(9mL)。将所述混合物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到0.250g(1.30mmol，27％)目标化合物4-(羟基甲基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)0.98min，m/z 190[M-H]-
4-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000911
步骤BP和BQ：在氩气下向化合物33(1.00g，3.94mmol)和三丁基-(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.58g，4.37mmol)在DMF(25mL)中的脱气的溶液添加双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.100g，0.142mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌，直至TLC揭示出反应完成(大约7天)。将混合物在减压下浓缩，并将残留物在乙酸乙酯与水之间分配。将有机层通过硅胶塞过滤，在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将得到的黑色油状物溶解在甲醇(100mL)中，用5N盐酸(100mL)处理，并在室温搅拌过夜。将所述混合物浓缩，并将残留物溶解在乙酸乙酯中。将所述溶液用水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶柱层析进行纯化，给出0.500g(2.30mmol，58％)化合物67。
步骤BR：向化合物67(1.00g，4.60mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(7mL)。将得到的混合物在室温搅拌48，然后在减压下浓缩并用1N NaHSO4水溶液(7mL)稀释。将所述混合物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到0.900g(4.43mmol，96％)化合物68。
步骤BS：在氩气下向化合物68(0.900g，4.43mmol)在THF(50mL)中的冷却的(0℃)溶液添加己烷中的1N MeMgCl溶液(16mL)。将所述得到的混合物在室温搅拌48h。将混合物小心地用1N NaHSO4淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到0.250g(1.14mmol，26％)目标化合物4-(2-羟基丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)0.99min，m/z 202[M-H]-
4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000921
步骤BS-2：向化合物67(1.00g，4.60mmol)在THF/甲醇混合物(50mL)中的冷却的(0℃)溶液添加NaBH4(0.385g，10.2mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌12h。将混合物冷却至0℃，用2N盐酸(20mL)处理并浓缩。将残留物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液用水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发，得到0.800g(3.65mmol，79％)化合物69，其纯度足以用于下一步骤。
步骤BT：向在前一步骤中获得的化合物69(0.800g，3.65mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(6mL)。将所述得到的混合物在室温搅拌48h，然后浓缩并用1NNaHSO4水溶液(6mL)稀释。将所述混合物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到0.300g(1.46mmol，40％)目标化合物4-(1-羟基乙基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)0.82min，m/z 204[M-H]-
4-(丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000931
步骤BU：在-10℃下向甲醇钠(10.0g，185mmol)在甲醇(150mL)中的溶液逐滴添加化合物70(15.0g，101mmol)和叠氮基乙酸甲酯(12.0g，104mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。然后通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到7.00g(23.3mmol，23％)作为白色固体的化合物71。
步骤BV：将在前一步骤中获得的化合物71(7.00g，23.3mmol)在二甲苯(200mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯(60:40)重结晶，给出3.50g(16.1mmol，69％)化合物72。
步骤BW：向化合物72(3.50g，16.1mmol)在甲醇(100mL)中的溶液添加2N NaOH水溶液(40mL)。将所述混合物在60℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，然后将残留物用10％盐酸酸化至pH 5-6。通过过滤收集沉淀物，用水(3×50mL)洗涤并干燥，得到2.70g(13.3mmol，83％)目标化合物4-(丙-2-基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.32min，m/z 202[M-H]-
4-乙烯基-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000941
步骤BX：向化合物63(0.900g，4.47mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(8mL)。将所述得到的混合物在室温搅拌48h，然后在减压下浓缩，并用1N NaHSO4水溶液(8mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到0.500g(2.67mmol，59％)目标化合物4-乙烯基-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.14min，m/z 186[M-H]-
4-乙炔基-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000942
步骤BY：在氩气下向化合物33(1.00g，3.94mmol)在THF(50mL)中的溶液添加TMS-乙炔(0.68mL，4.80mmol)、CuI(0.076g，0.399mmol)、三乙胺(2.80mL，20.0mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.100g，0.137mmol)。将混合物在60℃下搅拌，直至TLC揭示出反应完成(约5天)。将混合物在减压下浓缩，将残留物溶解在乙酸乙酯中。将溶液用水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱层析进行纯化，给出0.600g(2.14mmol，56％)化合物73。
步骤BZ：向化合物73(0.840g，3.10mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(7mL)。将得到的混合物在室温搅拌48h，然后在减压下浓缩并用1N NaHSO4水溶液稀释(7mL)。将混合物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到0.400g(2.17mmol，70％)目标化合物4-乙炔基-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.12min，m/z 184[M-H]-
4-(1,1-二氟乙基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000951
步骤CA：向2-溴苯乙酮(63.0g，317mmol)、水(0.5mL)和二氯甲烷(100mL)的混合物添加Morph-DAST(121mL，992mmol)。将得到的混合物在室温搅拌28天。然后将所述反应混合物倾倒在饱和NaHCO3水溶液(1000mL)中，并用乙酸乙酯(2x500mL)萃取。将有机层在Na2SO4上干燥，并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱层析进行纯化，给出16.8g(76.0mmol，12％)化合物74。
步骤CB：在Ar下，在30min内，向化合物74(16.8g，76.0mmol)在THF(300mL)中的冷却的(-85℃)溶液添加n-BuLi在己烷中的2.5M溶液(36.5mL，91.5mmol)。将得到的混合物在-85℃搅拌1h。然后添加DMF(8.80mL，114mmol)(维持温度低于-80℃)，并将所述反应继续搅拌45min。将反应用饱和NH4Cl水溶液(100mL)淬灭，并用水(600mL)稀释。将得到的混合物用乙酸乙酯(2x500mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，得到12.5g(73.6mmol，97％)化合物75(其纯度足以用于下一步骤)。
步骤CC：在Ar下(维持温度低于-25℃)，向化合物75(12.5g，73.5mmol)、乙醇(500mL)和叠氮基乙酸乙酯(28.5g，221mmol)的冷却的(-30℃)混合物分部添加新鲜制备的甲醇钠溶液(通过将Na(5.00g，217mmol)与甲醇(100mL)混合来制备)。将所述反应混合物升温至15℃并搅拌12h。将得到的混合物倾倒在饱和NH4Cl水溶液(2500mL)中并搅拌20min。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到10.0g(35.6mmol，51％)化合物76。
步骤CD：将化合物76(10.0g，35.6mmol)在二甲苯(500mL)中的溶液回流，直至气体生成停止(大约2h)，然后在减压下浓缩。将得到的橙色油状物用己烷/乙酸乙酯(5:1)研磨，通过过滤收集并干燥，得到1.53g(6.04mmol，17％)化合物77。
步骤CE：向化合物77(1.53g，6.04mmol)在THF/水的9:1混合物(100mL)中的溶液添加LiOH·H2O(0.590g，14.1mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。蒸发掉挥发物，并将残留物与水(50mL)和1N盐酸(10mL)混合。将所述混合物用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶柱层析进行纯化，给出0.340g(1.33mmol，24％)4-(1,1-二氟乙基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.16min，m/z 224[M-H]-
4-(三甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000971
步骤CF：在Ar下向4-溴-1H-吲哚(5.00g，25.5mmol)在THF(100mL)中的冷却的(-78℃)溶液添加n-BuLi在己烷中的2.5M溶液(23mL，57.5mmol)。将得到的混合物搅拌30min。添加TMSCl(16mL，126mmol)，并将所述反应混合物升温至室温。在1h后，将混合物用MTBE(250mL)稀释，用水(2x200mL)和盐水(200mL)洗涤，然后在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物在甲醇(100mL)中回流1h。然后蒸馏掉溶剂，得到3.60g(19.0mmol，74％)化合物78。
步骤CG：在Ar下向化合物78(1.50g，7.92mmol)在THF(50mL)中的冷却的(-78℃)溶液添加n-BuLi在己烷中的2.5M溶液(3.8mL，9.5mmol)。将得到的混合物搅拌20min。然后将CO2(2L)鼓泡通过所述混合物10min，并将反应混合物升温至室温。蒸发掉挥发物，并将残留物溶解在THF(50mL)中。将所述溶液冷却至-78℃，并添加t-BuLi的1.7M溶液(5.6mL，9.50mmol)。将所述混合物升温至-30℃，然后再次冷却至-78℃。将CO2(2L)鼓泡通过所述溶液10min。允许得到的溶液缓慢升温至r.t.，然后在减压下浓缩。将残留物溶解在水(50mL)中，用MTBE(2x50mL)洗涤，然后酸化至pH 4，并用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。将有机萃取液用水(2x50mL)和盐水(50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下蒸发。将粗产物用己烷洗涤并干燥，得到1.24g(5.31mmol，67％)目标化合物4-(三甲基甲硅烷基)-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.47min，m/z 232[M-H]-
6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000981
步骤CH：向(3-氯-4-氟苯基)肼(80.0g，498mmol)在乙醇(200mL)中的溶液添加丙酮酸乙酯(58.0g，499mmol)。将所述混合物回流1h，然后在减压下浓缩并用水(300mL)稀释。通过过滤收集固体然后干燥，得到122g(472mmol，95％)化合物79。
步骤CI：将化合物79(122g，472mmol)和pTSA(81.5g，473mmol)在甲苯(500mL)中的悬液回流48h，然后冷却至室温。通过过滤收集沉淀物，并通过从甲苯分步结晶进行纯化，得到4.00g(16.6mmol，4％)化合物80。
步骤CJ：向化合物80(4.00g，16.6mmol)在乙醇(30mL)中的回流的溶液添加NaOH(0.660g，16.5mmol)。将所述混合物回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物用温水(80℃，50mL)研磨，并将所述溶液用浓盐酸酸化(pH 2)。通过过滤收集沉淀物，用水(2x10mL)洗涤并干燥，得到3.18g(14.9mmol，90％)目标化合物6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸。
Rt(方法G)1.23min，m/z 212[M-H]-
4-(二氟甲基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790000991
步骤CK：在-10℃下向甲醇钠(50.0g，926mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加2-溴-4-氟苯甲醛(222mmol)和叠氮基乙酸甲酯(59.0g，457mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将所述反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min并通过过滤收集固体。将所述固体用水洗涤，得到作为白色固体的化合物81(62％得率)。
步骤CL：将化合物81(133mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯混合物(60:40)重结晶，给出化合物82(58％得率)。
步骤CM：在氮气下向化合物82(14.7mmol)在无水DMF(10mL)中的加热的(90℃)溶液添加三正丁基(乙烯基)锡(3.60g，11.4mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.301g，0.757mmol)，并将得到的混合物在90℃搅拌1h。将混合物冷却至室温，并通过硅胶柱层析进行纯化(己烷中的60-80％乙酸乙酯)。将合并的产物级分浓缩，用水(3x100mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，得到作为黄色固体的化合物83(60％得率)。
步骤CN：向化合物83(12.4mmol)、丙酮(200mL)和水(40mL)的混合物添加OsO4(0.100g，0.393mmol)和NaIO4(13.4g，62.6mmol)，并将反应在室温搅拌10h。蒸馏掉丙酮，并将水性溶液用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(2x50mL)和盐水(2x50mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，得到化合物84(33％得率)。
步骤CO：向化合物84(11.0mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液添加Morph-DAST(4.10mL，33.6mmol)。将得到的混合物搅拌，直至等分试样的NMR揭示出反应完成(2-5天)。将反应混合物逐滴添加到冷的饱和NaHCO3溶液(1000mL)。将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层在MgSO4上干燥并浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为黄色固体的化合物85(48％得率)。
步骤CP：向化合物85(4.50mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(8mL)。将得到的混合物在室温搅拌48h，然后在减压下浓缩，并用1N NaHSO4水溶液(8mL)稀释。将得到的混合物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到4-(二氟甲基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸(87％)。
Rt(方法G)1.22min，m/z 228[M-H]-
4-(二氟甲基)-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790001001
如对4-(二氟甲基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸所述，从2-溴-5-氟苯甲醛开始来制备(总得率2.5％)。
Rt(方法G)1.13min，m/z 228[M-H]-
4-(二氟甲基)-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790001011
如对4-(二氟甲基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸所述，从4-溴-1H-吲哚-2-甲酸开始来制备(总得率11％)。
Rt(方法G)1.17min，m/z 210[M-H]-
4-(1,1-二氟乙基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790001012
步骤CQ：在氮气下向2-溴-5-氟苯甲腈(10.0g，48.5mmol)在无水四氢呋喃(100mL)中的溶液添加甲基溴化镁(3.2M，在乙醚中，19mL，60.0mmol)。将得到的混合物加热至回流4h。然后将所述反应混合物冷却，倾倒在2N盐酸(100mL)中，用甲醇(100mL)稀释。除去有机溶剂，并且粗产物沉淀出来。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，在MgSO4上干燥并浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(庚烷/二氯甲烷)，给出4.88g(21.9mmol，45％)作为粉色油状物的化合物86。
步骤CR：在室温下向化合物86(110mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液添加Morph-DAST(41mL，336mmol)和几滴水。将得到的混合物在室温搅拌48天；每7天添加另一部分Morph-DAST(41mL，336mmol)。在反应完成后，将所述混合物小心地逐滴添加到冷的饱和NaHCO3水溶液。将产物用乙酸乙酯萃取，并将有机萃取液在MgSO4上干燥并浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为无色液体的87(37％得率)。
步骤CS：向化合物87(21.0mmol)在THF(150mL)中的冷却的(-80℃)溶液缓慢添加n-BuLi在己烷中的2.5M溶液(10.0mL，25.0mmol的n-BuLi)。将混合物搅拌1h然后添加DMF(2.62mL，33.8mmol)，并将所述混合物继续搅拌1h。将反应用饱和NH4Cl水溶液(250mL)淬灭，并用Et2O(3x150mL)萃取。将有机层在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶层析进行纯化(乙酸乙酯/己烷1:9)，给出化合物88(52％得率)。
步骤CT：在-10℃下向甲醇钠(50.0g，926mmol)在甲醇(300mL)中的溶液逐滴添加化合物88(222mmol)和叠氮基乙酸甲酯(59.0g，457mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将反应混合物搅拌3h，维持温度低于5℃，然后用冰水淬灭。将得到的混合物搅拌10min。通过过滤收集得到的固体并用水洗涤，得到作为白色固体的化合物89(66％得率)。
步骤CU：将化合物89(120mmol)在二甲苯(250mL)中的溶液在氩气气氛下回流1h，然后在减压下浓缩。将残留物从己烷-乙酸乙酯重结晶，给出化合物90(70％得率)。
步骤CV：向化合物90(4.40mmol)在THF(50mL)中的溶液添加1N LiOH水溶液(8mL)。将得到的混合物在室温搅拌48h，然后在减压下浓缩并用1N NaHSO4水溶液(8mL)稀释。将得到的残留物用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液在MgSO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物从MTBE重结晶，得到目标化合物4-(1,1-二氟乙基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸(95％得率)。
Rt(方法G)1.26min，m/z 242[M-H]-
4-(1,1-二氟乙基)-7-氟-1H-吲哚-2-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790001031
如对4-(1,1-二氟乙基)-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸所述，从2-溴-4-氟苯乙酮开始来制备(总得率3.6％)。
Rt(方法G)1.23min，m/z 242[M-H]-
5-[(叔丁氧基)羰基]-6-甲基-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790001041
步骤A：将6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-3-甲酸(50.0g，326.51mmol)悬浮在三氯氧磷(500.0g，3.26mol)中，并在95℃搅拌16h。在冷却后，在真空中蒸馏掉过量三氯氧磷，并将得到的残留物用甲苯(2x250 mL)蒸发，给出5-(羧基)-4-氯-2-甲基氯化吡啶-1-鎓(73.3g，95.0％纯度，307.46mmol，94.2％得率)。
步骤B：将5-(羧基)-4-氯-2-甲基氯化吡啶-1-鎓(73.3g，323.64mmol)溶解在THF(500mL)中，并在100℃下逐滴添加MeOH(500mL)。将混合物在r.t.搅拌2h。将所述混合物浓缩以给出残留物，将其溶解在CH2Cl2(700mL)中并用饱和NaHCO3溶液洗涤。将合并的有机萃取液真空浓缩以给出橙色油状物，将其通过柱层析(MTBE-己烷2:1)进行纯化(Rf＝0.8)，得到作为黄色油状物的4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(57.7g，98.0％纯度，304.65mmol，94.1％得率)，将其静置结晶，给出黄色固体。
步骤C：向氢化铝锂(6g)在THF(500mL)中的冷却的(-25℃)悬液逐滴添加4-氯-6-甲基烟酸甲酯(33.0g，177.79mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液。将所述混合物在0℃搅拌1.5小时。向所述反应混合物相继滴加水(6mL，在50mL THF中)、15％氢氧化钠水溶液(6mL)和水(18mL)。将混合物在r.t.搅拌30分钟，过滤，并将滤饼用THF(2x200 mL)洗涤。将滤液浓缩，给出作为黄色固体的标题化合物(4-氯-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(26.3g，95.0％纯度，158.54mmol，89.2％得率)，其不需进一步纯化直接使用。
步骤D：向(4-氯-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(26.3g，166.88mmol)在DCM(777mL)中的溶液分几次添加1,1,1-三(乙酰氧基)-1,1-二氢-1,2-苯并碘氧杂环戊烷-3(1H)-酮(81.4g，191.92mmol)，使用水/冰冷却浴维持温度低于5℃。在反应完成后(通过1H NMR监测)，将所述混合物倾倒在碳酸氢钠(16.12g，191.91mmol)和Na2S2O3的搅拌的水溶液中，并搅拌直至有机相变得透明(约2h)。进行层分离，并将水性层用DCM(3x300 mL)萃取，将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出4-氯-6-甲基吡啶-3-甲醛(21.0g，90.0％纯度，121.48mmol，72.8％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤E：向4-氯-6-甲基吡啶-3-甲醛(17.0g，109.27mmol)(1equiv.)在乙二醇二甲醚(300mL)和1,4-二氧杂环己烷(300ml)中的悬液添加水合肼(191.45g，3.82mol)(98％)(35.00equiv.)。将所述混合物回流96h(1H NMR分析)。进行层分离，并将有机层在减压下浓缩。向残留物添加水(200mL)，并将混合物在室温搅拌1小时。通过过滤收集产物，用水(100mL)洗涤，然后干燥，给出作为黄色固体的6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(3.42g，98.0％纯度，25.17mmol，23％得率)。
步骤F：将6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(1.91g，14.34mmol)(1.00equiv)、碘(7.28g，28.69mmol)(2.00equiv)和氢氧化钾(2.9g，51.63mmol)(3.60equiv)在DMF(40mL)中的悬液在r.t.搅拌12h。通过添加饱和Na2S2O3水溶液将反应淬灭，用乙酸乙酯(3x200 mL)萃取，在无水硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为黄色固体的3-碘-6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(3.1g，98.0％纯度，11.73mmol，81.8％得率)。
步骤G：将3-碘-6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(5.05g，19.49mmol)、三乙胺(2.37g，23.39mmol，3.26mL)和Pd(dppf)Cl2(3mol％)溶解在乙醇(96％，200ml)中。将所述反应混合物在高压容器中在120℃和40atm CO压力下加热18h。然后将混合物浓缩并向得到的残留物添加水(100ml)。将混合物在室温搅拌1小时并通过过滤收集产物。将固体用水(100mL)洗涤，然后干燥，给出作为橙色固体的6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸乙酯(2.7g，95.0％纯度，12.5mmol，64.1％得率)。
步骤H：向6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸乙酯(620.23mg，3.02mmol)和二碳酸二叔丁酯(692.6mg，3.17mmol)在甲醇(133mL)中的悬液(加入5滴Et3N)添加20％碳载Pd(OH)2。将所述混合物在压热釜中在40bar下加氢，然后在r.t搅拌18h。将反应混合物通过薄二氧化硅垫过滤，并将垫用CH3OH(30mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，给出作为油状物的6-甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(888.89mg，98.0％纯度，2.82mmol，93.2％得率)。
步骤I：向6-甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(1.1g，3.56mmol)(1eq.)在THF(75ml)中的冷却的(0℃)溶液分部添加氢化钠(60％，1.33eq)。将所述混合物在室温搅拌0.5h。逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基甲硅烷(788.36mg，4.73mmol)，并将混合物在室温搅拌另外16h。将所述混合物用水淬灭并用EtOAc(3x30 mL)萃取。将合并的有机萃取液在无水Na2SO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，给出作为黄色油状物的6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(1.56g，64.0％纯度，2.26mmol，63.7％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤J：将6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(808.0mg，1.84mmol)和单水氢氧化锂(231.25mg，5.51mmol)在THF:H2O:CH3OH(v/v 3:1:1,50mL)的混合物中在25℃搅拌18h。然后将所述反应混合物在减压下浓缩，并用饱和柠檬酸水溶液酸化至pH4。将所述混合物用EtOAc(3x30 mL)萃取。将合并的有机萃取液在无水Na2SO4上干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的5-[(叔丁氧基)羰基]-6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(505.0mg，99.0％纯度，1.21mmol，66.1％得率)。
Rt(方法G)1.57min，m/z 412[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ-0.07(s,9H),0.80(t,J＝7.9Hz,2H),1.02(d,J＝6.9Hz,3H),1.41(s,9H),2.69(d,J＝16.4Hz,1H),2.83(dd,J＝16.3,6.1Hz,1H),3.48(m,2H),3.98(d,J＝17.5Hz,1H),4.71(br.s,1H),4.88(d,J＝17.1Hz,1H),5.39(AB-系统,2H),12.77(br.s,1H).
5-[(叔丁氧基)羰基]-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸的制备
Figure BDA0003327916790001081
步骤A：将双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(8.4g，50.21mmol，50.21mL)溶解在无水Et2O(50mL)中并冷却至-78℃(干冰/丙酮)。向所述冷却的混合物添加4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.0g，50.21mmol)在无水Et2O/THF(3:1)中的溶液(60mL)。在添加完成后，将混合物搅拌30min。在10min内添加草酸二乙酯(7.34g，50.21mmol，6.82mL)在无水Et2O(20mL)中的溶液。将所述化合物在-78℃搅拌15min，然后撤除冷却。将反应混合物在20℃搅拌过夜。将所述混合物倾倒在1M KHSO4(200mL)中并进行层分离。将水性相用EtOAc(2x100 mL)萃取。分离合并的有机层，用水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，给出作为橙色油状物的3-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(14.1g，47.11mmol，93.8％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤B：向3-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(14.11g，47.14mmol)在abs.EtOH(150mL)中的搅拌的溶液添加乙酸(4.53g，75.43mmol，4.32mL)，然后分部添加水合肼(2.36g，47.14mmol，3.93mL)。将所述混合物搅拌5h，然后浓缩，并将得到的残留物用sat.NaHCO3稀释。将产物用EtOAc(2x100 mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色泡沫的1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(11.2g，37.92mmol，80.4％得率)，静置结晶。
步骤C：在氩气下向氢化钠(1.82g，0.045mol，在矿物油中的60％分散系)在无水THF(250mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(11.2g，37.92mmol)在无水THF(50mL)中的溶液。将所述混合物在0℃搅拌30min，然后逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基甲硅烷(7.59g，45.51mmol)。将得到的混合物在0℃搅拌30min，然后升温至室温。将混合物倾倒在水(250mL)中，并将产物用EtOAc(2x200 mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并浓缩，得到作为黄色油状物的粗品1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(15.3g，35.95mmol，94.8％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤D：向1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(15.3g，35.95mmol)在THF(100mL)/水(50mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(5.28g，125.82mmol)。将所述反应混合物在50℃搅拌3h，然后浓缩。将残留物小心地用饱和KHSO4水溶液酸化至pH 4-5，并将产物用EtOAc(2x200 mL)萃取。将合并的有机萃取液用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。将固体残留物用己烷研磨。通过过滤收集产物并干燥，得到作为黄色固体的5-[(叔丁氧基)羰基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(7.5g，18.87mmol，52.5％得率)。
Rt(方法G)1.52min，m/z 398[M+H]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ-0.05(s,9H),0.87(t,J＝8.2Hz,2H),1.47(s,9H),2.78(m,2H),3.55(m,2H),3.71(m,2H),4.62(br.s,2H),5.43(s,2H)，未观察到COOH。
6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷的制备
Figure BDA0003327916790001101
步骤A：向琥珀酸苷(100g，1000mmol)在甲苯(3000mL)中的溶液添加苯甲胺(107g，1000mmol)。将所述溶液在室温搅拌24h，然后使用Dean–Stark装置加热回流16小时。然后将混合物在减压下浓缩，给出1-苯甲基吡咯烷-2,5-二酮(170g，900mmol，90％得率)。
步骤B：在氩气气氛下向1-苯甲基吡咯烷-2,5-二酮(114g，600mmol)和Ti(Oi-Pr)4(170.5g，600mmol)在无水THF(2000mL)中的冷却的(0℃)混合物逐滴添加乙基溴化镁在THF(1200mmol)中的3.4M溶液。将所述混合物升温至室温并搅拌4h。然后逐滴添加BF3.Et2O(170g，1200mmol)并将溶液搅拌6h。将所述混合物冷却(0℃)并添加3N盐酸(500mL)。将所述混合物用Et2O萃取两次，并将合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥并在减压下浓缩，给出4-苯甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(30.2g，150mmol，25％得率)。
步骤C：在氩气下向4-苯甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(34.2g，170mmol)在无水THF(1000mL)中的冷却的(-78℃)溶液添加THF中的LiHMDS(1.1M溶液，240mmol)。将混合物搅拌1h，然后逐滴添加N-氟苯磺酰亚胺(75.7g，240mmol)在THF(200mL)中的溶液。将所述混合物升温至室温并搅拌6h。然后将混合物再次冷却(-78℃)并添加LiHMDS(在THF中的1.1M溶液，240mmol)。
将所述溶液搅拌1h，然后逐滴添加THF(200mL)中的N-氟苯磺酰亚胺(75.7g，240mmol)。将所述混合物升温至室温并搅拌6h。将混合物倾倒在饱和NH4Cl溶液(300mL)中，并用Et2O萃取两次。将合并的有机萃取液用盐水洗涤并在减压下浓缩。将产物通过柱层析进行纯化，提供4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(18g，75.9mmol，45％得率)。
步骤D：向BH3.Me2S(3.42g，45mmol)在THF(200mL)中的加温的(40℃)溶液逐滴添加4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(11.9g，50mmol)。将混合物在40℃搅拌24，然后冷却至室温。逐滴添加水(50mL)，并将所述混合物用Et2O(2×200mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，用HCl在二氧杂环己烷中的10％溶液(50mL)稀释并在减压下蒸发，给出4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(3g，13.4mmol，27％得率)。
步骤E：将4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(2.68g，12mmol)和氢氧化钯(0.5g)在甲醇(500mL)中，在室温和H2气氛下搅拌24h。将所述混合物过滤，然后将滤液在减压下浓缩，得到6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(0.8g，6.01mmol，50％得率)。
1-[(二氟甲氧基)甲基]-N-甲基环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001121
步骤1：向1-((叔丁氧基羰基)氨基)环丙烷-1-甲酸(1g，4.97mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的冷却的(0℃)溶液添加氢化钠(0.596g，14.91mmol)。当气体逸出停止时，添加碘代甲烷(0.932mL，14.91mmol)。撤除冷却浴，并将所述混合物搅拌2h。然后将混合物冷却至0℃并通过添加水淬灭。将所述混合物在水与乙酸乙酯之间分配，将有机层用盐水洗涤，浓缩，并通过快速层析进行纯化(24g硅胶，流速30ml/min，在15min内庚烷中的15至50％乙酸乙酯)，给出作为无色油状物的所需产物(1.056g，93％得率)。
步骤2：在N2下向1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环丙烷-1-甲酸甲酯(1.05g，4.58mmol)在无水THF(5mL)中的溶液添加硼氢化锂(1.259mL，4M，在THF中，5.04mmol)。将混合物在r.t.搅拌4天。添加硫酸钠和水，将所述混合物在硫酸钠垫上过滤，将所述垫用二氯甲烷漂洗。将滤液浓缩，给出作为白色固体的(1-(羟基甲基)环丙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.904g，95％得率)。
步骤3：向(1-(羟基甲基)环丙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.100g，0.497mmol)和(溴二氟甲基)三甲基甲硅烷(0.155mL，0.994mmol)在二氯甲烷(0.5mL)中的溶液添加一滴乙酸钾(0.195g，1.987mmol)在水(0.5mL)中的溶液。将所述混合物搅拌40h。将混合物用二氯甲烷和水稀释，分离有机层并浓缩。通过快速层析进行纯化(庚烷中的20％乙酸乙酯)，给出作为无色油状物的N-{1[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.058g，46％得率)。
步骤4：向(1-((二氟甲氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.058g，0.231mmol)添加二氧杂环己烷中的HCl(4M溶液，2mL，8.00mmol)。将所述混合物在rt搅拌30min，然后浓缩，得到所需产物，其不需进一步纯化直接使用。
LC-MS：m/z 152.2(M+H)+
6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷的制备
Figure BDA0003327916790001131
步骤A：向琥珀酸苷(100g，1000mmol)在甲苯(3000mL)中的溶液添加苯甲胺(107g，1000mmol)。将所述溶液在室温搅拌24h，然后使用Dean–Stark装置加热回流16小时。然后将混合物在减压下浓缩，给出1-苯甲基吡咯烷-2,5-二酮(170g，900mmol，90％得率)。
步骤B：在氩气气氛下向1-苯甲基吡咯烷-2,5-二酮(114g，600mmol)和Ti(Oi-Pr)4(170.5g，600mmol)在无水THF(2000mL)中的冷却的(0℃)混合物逐滴添加乙基溴化镁在THF中的3.4M溶液(1200mmol)。将所述混合物升温至室温并搅拌4h。然后逐滴添加BF3.Et2O(170g，1200mmol)，并将溶液搅拌6h。将所述混合物冷却(0℃)并添加3N盐酸(500mL)。将所述混合物用Et2O萃取两次，并将合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥并在减压下浓缩，给出4-苯甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(30.2g，150mmol，25％得率)。
步骤C：在氩气下向4-苯甲基-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(34.2g，170mmol)在无水THF(1000mL)中的冷却的(-78℃)溶液添加THF中的LiHMDS(1.1M溶液，240mmol)。将所述混合物搅拌1h，然后逐滴添加N-氟苯磺酰亚胺(75.7g，240mmol)在THF(200mL)中的溶液。将混合物升温至室温并搅拌6h。然后将所述混合物重新冷却(-78℃)并添加LiHMDS(在THF中的1.1M溶液，240mmol)。
将所述溶液搅拌1h，然后逐滴添加THF(200mL)中的N-氟苯磺酰亚胺(75.7g，240mmol)。将所述混合物升温至室温并搅拌6h。将混合物倾倒在饱和NH4Cl溶液(300mL)中，并用Et2O萃取两次。将合并的有机萃取液用盐水洗涤并且在减压下浓缩。将产物通过柱层析进行纯化，提供4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(18g，75.9mmol，45％得率)。
步骤D：向BH3.Me2S(3.42g，45mmol)在THF(200mL)中的加温的(40℃)溶液逐滴添加4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-5-酮(11.9g，50mmol)。将所述混合物在40℃搅拌24h，然后冷却至室温。逐滴添加水(50mL)，并将所述混合物用Et2O(2×200mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，用HCl在二氧杂环己烷中的10％溶液(50mL)稀释并在减压下蒸发，给出4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(3g，13.4mmol，27％得率)。
步骤E：将4-苯甲基-6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(2.68g，12mmol)和氢氧化钯(0.5g)在甲醇(500mL)中，在室温和H2气氛下搅拌24h。将所述混合物过滤，然后将滤液在减压下浓缩，得到6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(0.8g，6.01mmol，50％得率)。
7,7-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷的制备
Figure BDA0003327916790001151
步骤A：在30分钟内向1-苯甲基吡咯烷-2,3-二酮(8g，42.3mmol)在DCM(100mL)中的冷却的(0℃)溶液逐滴添加DAST(20.4g，127mmol)。将所述混合物在室温搅拌过夜，然后通过逐滴添加饱和NaHCO3进行淬灭。分离有机层，并将水性级分用DCM萃取两次(2×50mL)。将合并的有机层在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，得到1-苯甲基-3,3-二氟吡咯烷-2-酮(26.0mmol，61％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤B：在氩气气氛下向粗品1-苯甲基-3,3-二氟吡咯烷-2-酮(5.5g，26mmol)和Ti(Oi-Pr)4(23.4mL，78mmol)在THF(300mL)中的溶液逐滴添加EtMgBr在2-MeTHF中的3.4M溶液(45.8mL，156mmol)。在搅拌12h后，添加水(10mL)，得到白色沉淀物。将所述沉淀物用MTBE洗涤(3×50mL)。将合并的有机级分在Na2SO4上干燥，浓缩，并通过快速层析进行纯化(己烷-EtOAc 9:1)，得到作为浅黄色油状物的4-苯甲基-7,7-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(1.3g，5.82mmol，22％得率)。
步骤C：将4-苯甲基-7,7-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(0.55g，2.46mmol)溶解在CHCl3(1mL)和MeOH(20mL)的溶液中，并添加Pd/C(0.2g，10％)。将该混合物在H2气氛下搅拌5h，然后过滤。将滤液浓缩，给出7,7-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(0.164g，1.23mmol，50％得率)。
N-甲基-1-(5-甲基-1,3,4-
Figure BDA0003327916790001162
二唑-2-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001161
步骤1：将1-氨基环丙烷-1-甲酸(6.0g，59.34mmol)和碳酸氢钠(19.94g，237.38mmol)溶解在蒸馏水(50ml)中，并将得到的混合物用THF(50mL)稀释。将所述混合物用冰/水浴冷却至0℃，并逐滴添加氯甲酸苯甲酯(11.14g，65.28mmol，9.28mL)在THF(10ml)中的溶液。将得到的混合物搅拌过夜，然后用EtOAc洗涤。分离水性层，用conc.HCl酸化至pH＝1，用EtOAc萃取(2x20ml)。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并在减压下浓缩，给出1-[(苯甲氧基)羰基]氨基环丙烷-1-甲酸(6.0g，25.51mmol，43％得率)，其不需纯化用于下一步骤中。
步骤2：在r.t.下向1-[(苯甲氧基)羰基]氨基环丙烷-1-甲酸(6.0g，25.5mmol)在DCM(100mL)中的溶液一次性添加1-(1H-咪唑-1-羰基)-1H-咪唑(6.2g，38.3mmol)。在气体逸出完成后(～20min)，添加乙酰肼(3.78g，51.01mmol)，并将反应混合物搅拌过夜。通过过滤收集形成的沉淀物，用DCM洗涤并干燥，给出N-[1-(N'-乙酰基肼羰基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(4.0g)。
将滤液在减压下浓缩。将残留物在EtOAc(100mL)与硫酸氢钠水溶液(100ml)之间分配。将有机相用水、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，得到第二部分产物(2.5g)。将部分合并，得到作为白色固体的N-[1-(N'-乙酰基肼羰基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(6.5g，22.31mmol，87.5％得率)。
步骤3：将N-[1-(N'-乙酰基肼羰基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(6.5g，22.3mmol)悬浮在DCM(100mL)中。一次性添加三乙胺(4.97g，49.09mmol，6.84mL)，并将得到的混合物用冰/水浴冷却至0℃。添加4-甲基苯-1-磺酰氯(4.47g，23.4mmol)在DCM(50mL)中的溶液。然后将得到的混合物加温，然后加热回流。将得到的混合物用水(2x10mL)、sat.aq.碳酸氢钠、盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(第一次运行：Interchim，220gSiO2，MTBE/甲醇，其中甲醇从0～10％，流速＝100mL/min，Rv＝6CV；第二次运行：Interchim，80g SiO2，氯仿/乙腈，其中乙腈从0～50％，流速＝60mL/min，Rv＝10CV)，得到作为黄色固体的N-[1-(5-甲基-1,3,4-
Figure BDA0003327916790001171
二唑-2-基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(2.69g，9.82mmol，44％得率)。
步骤4：将氢化钠(126.49mg，5.27mmol)悬浮在无水THF(30mL)中。在15℃下(水浴)逐滴添加N-[1-(5-甲基-1,3,4-
Figure BDA0003327916790001172
二唑-2-基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(1.2g，4.39mmol)在无水THF(10mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体释放完成，然后冷却至0℃。逐滴添加碘代甲烷(748mg，5.27mmol，330μl)，并将得到的混合物加温至r.t.并搅拌过夜。然后将所述混合物用EtOAc萃取(2×20mL)，并将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥，然后在减压下浓缩，得到粗品N-甲基-N-[1-(5-甲基-1,3,4-
Figure BDA0003327916790001173
二唑-2-基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(1.33g，4.62mmol，105.2％得率)，其不需纯化用于下一步骤中。
步骤5：向N-甲基-N-[1-(5-甲基-1,3,4-
Figure BDA0003327916790001174
二唑-2-基)环丙基]氨基甲酸苯甲酯(1.33g，4.62mmol)在无水甲醇(20mL)中的溶液添加10％Pd/C(100mg)。将得到的混合物在H2气氛下搅拌。当反应完成时(根据反应混合物的1H NMR)，将所述混合物过滤，并将滤液浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到N-甲基-1-(5-甲基-1,3,4-
Figure BDA0003327916790001175
二唑-2-基)环丙-1-胺(140mg，913μmol，19.7％得率)。
N-甲基-1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001176
唑-2-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001181
步骤1：将1-氨基环丙烷-1-甲酸(4.85g，48.0mmol)悬浮在冰乙酸(50mL)中。添加邻苯二甲酸酐(7.11g，48.0mmol)，并将得到的混合物在110℃搅拌过夜。将所述混合物冷却至r.t.，并用水(200mL)研磨。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤并干燥，得到作为白色固体的1-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)环丙烷-1-甲酸(8.8g，38.1mmol，79.3％得率)。
步骤2：在r.t.下向1-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)环丙烷-1-甲酸(8.8g，38.1mmol)在DCM(100mL)和THF(10mL)中的溶液添加1-(1H-咪唑-1-羰基)-1H-咪唑(6.79g，41.9mmol)。在反应完成后(通过NMR监测)，在r.t.下添加2,2-二甲氧基乙-1-胺(4.4g，41.9mmol，4.56mL)，并将所述混合物搅拌过夜。然后将所述混合物在减压下浓缩，并将残留物用蒸馏水(15mL)研磨。通过过滤收集得到的沉淀物，用水洗涤(2×15mL)并溶解在DCM中。收集有机层，干燥(Na2SO4)并在减压下浓缩，得到N-(2,2-二甲氧基乙基)-1-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(6.0g，18.9mmol，49.5％得率)。
步骤3：将N-(2,2-二甲氧基乙基)-1-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(10.5g，33.0mmol)添加到甲磺酸(≈100g)，然后添加五氧化二磷(7.7g)，并将混合物在140℃搅拌过夜。将得到的深色溶液冷却至r.t.，倾倒在冰中，并用饱和NaHCO3溶液将得到的混合物的pH调整到8。将产物用乙酸乙酯萃取(2×200mL)。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并蒸发。
将得到的残留物用Et2O研磨，并通过过滤收集产物。将得到的白色固体干燥，得到2-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001191
唑-2-基)环丙基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(2.3g，9.05mmol，27.4％得率)。
步骤4：向2-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001192
唑-2-基)环丙基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(2.3g，9.05mmol)在乙醇(50mL)中的溶液添加水合肼(2.26g，45.23mmol，2.26mL)。将得到的混合物在50℃搅拌过夜。将所述得到的混合物冷却至r.t.并真空浓缩。将得到的残留物用DCM研磨。过滤掉产生的沉淀物，并将滤液在减压下浓缩，得到作为无色油状物的粗品1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001193
唑-2-基)环丙-1-胺(1.24g，10.0mmol)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤5：向1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001194
唑-2-基)环丙-1-胺(1.24g，10.0mmol)在无水DCM(10mL)中的溶液逐滴添加二碳酸二叔丁酯(2.18g，10.0mmol，2.3mL)。将得到的混合物搅拌至反应完成(1H NMR)，并在减压下浓缩。将残留物通过快速柱层析进行纯化(80g SiO2，石油醚/MTBE，其中MTBE从0～40％，流速＝60mL/min，Rv＝8CV)，得到作为黄色油状物的N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001195
唑-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.78mmol，17.8％得率)。
步骤6：将氢化钠(51.36mg，2.14mmol)悬浮在10mL无水THF中。逐滴添加N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001196
唑-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.78mmol)在无水THF(2mL)中的溶液(水浴冷却)。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止，然后冷却(0℃)。逐滴添加碘代甲烷(304mg，2.14mmol，130μL)，并将得到的混合物加温至r.t.并搅拌过夜。将反应混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中。将得到的混合物用EtOAc萃取(2×10mL)，并将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥，然后在减压下浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化(柱：Waters SunFireC18，5mkm，19mm x 100mm；流动相：水-乙腈，30mL/min)，得到N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001202
唑-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(29mg，122μmol，6.8％得率)。
步骤7：将N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001203
唑-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(29.0mg，121.7μmol)在r.t.下溶解在4M HCl/二氧杂环己烷(2mL)中，并将得到的混合物搅拌过夜。将得到的混合物在减压下浓缩，得到N-甲基-1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001204
唑-2-基)环丙-1-胺盐酸盐(14mg，80.17μmol，83.3％得率)。
N-甲基-1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001205
唑-5-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001201
步骤1：向(1-(甲基氨基)环丙基)甲醇盐酸盐(1.0g，7.27mmol)和三乙胺(957mg，9.46mmol)在DCM(20mL)中的混合物分部添加二碳酸二叔丁酯(1.75g，8.0mmol)，并留在r.t.搅拌过夜。在反应完成后(通过1H NMR监测)，将所述混合物用水(10mL)洗涤，在Na2SO4上干燥并真空浓缩，给出N-[1-(羟基甲基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(1.2g，5.97mmol，82％得率)。
步骤2：向N-[1-(羟基甲基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(500.01mg，2.48mmol)在DCM(50mL)中的冷却的(0℃)溶液添加1,1,1-三(乙酰氧基)-1,1-二氢-1,2-苯并碘氧杂环戊烷-3(1H)-酮(1.16g，2.73mmol)。当反应完成时(通过1H NMR监测)，将所述混合物倾倒在NaHCO3和Na2S2O3的水溶液中，然后搅拌直至有机相变得透明(～1h)。进行层分离，并将水性层用DCM(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出粗品N-(1-甲酰基环丙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(620mg，3.11mmol)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将N-(1-甲酰基环丙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(477mg，2.39mmol)与1-异氰基甲磺酰基-4-甲基苯(514mg，2.63mmol)在无水甲醇(50mL)中混合，然后添加碳酸钾(695mg，5.03mmol)。将得到的混合物回流2小时。然后向热反应混合物添加蒸馏水(20mL)，并将得到的溶液用EtOAc(2×15mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(硫酸钠)并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(40g SiO2，氯仿/乙腈，其中乙腈从0至20％，流速＝40mL/min)，得到N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001212
唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(400.0mg，1.68mmol，70.1％得率)。
步骤4：将N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001213
唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(370mg，1.55mmol)溶解在TFA(5mL)中，并将所述混合物留在r.t.搅拌过夜。当反应完成时(通过反应混合物的LCMS监测)，蒸发掉过量的TFA，得到N-甲基-1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001214
唑-5-基)环丙-1-胺三氟乙酸盐(360mg，2.1mmol，100％得率)。
N-甲基-1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001215
唑-4-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001211
步骤1：向1,3-
Figure BDA0003327916790001216
唑-4-甲腈(4.0g，42.52mmol)和四异丙醇钛(13.29g，46.77mmol)在Et2O(220mL)中的冷却的(-70℃)溶液添加乙基溴化镁(11.9g，89.29mmol)。将得到的黄色溶液搅拌10min。将溶液加温至r.t.并搅拌1h。添加三氟化硼-二乙醚合物(12.07g，85.04mmol，10.73mL)，并将所述混合物继续搅拌1h。添加1N HCl(100mL)和乙醚(200mL)。向得到的两个透明相添加NaOH(10％aq，200mL)，然后添加二碳酸二叔丁酯(46.4g，212.59mmol，48.84mL)。将得到的两相混合物剧烈搅拌过夜。进行层分离，并将水性相用300mL二乙醚萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，给出粘稠黄色油状物，其主要由所需产物和Boc2O组成(通过1H NMR显示)。将该油状物溶解在100mL二氧杂环己烷中，并在r.t.下将得到的溶液逐滴添加到2-氨基乙酸(15.96g，212.59mmol)和碳酸钠(22.53g，212.59mmol)在200mL水中的溶液。将得到的混合物搅拌过夜，然后在真空下除去所有挥发物。将残留物在300mL水与150mL MTBE之间分配。将有机相用50mL水、盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出作为浅黄色结晶固体的N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001221
唑-4-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(7.2g，32.11mmol，75.5％得率)。
步骤2：向N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001222
唑-4-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(2.0g，8.92mmol)在50mL DMF中的溶液分部添加氢化钠(60％，321.02mg，13.38mmol)，维持温度低于25℃(水冷却浴)。在气体逸出完成后，逐滴添加碘代甲烷(3.16g，22.29mmol，1.39mL)，并将得到的混合物留在r.t.搅拌过夜。将所述反应混合物倾倒在500mL水中，并用150mL乙酸乙酯萃取。将有机相用水(2x100mL)、盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并真空浓缩，给出作为黄色结晶固体的N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001223
唑-4-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(2.15g，90.0％纯度，8.12mmol，91.1％得率)。
步骤3：在r.t.下将N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001224
唑-4-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(2.15g，9.02mmol)溶解在50mL 4M HCl/二氧杂环己烷中，并将得到的混合物搅拌过夜。将得到的混合物用50mL二乙醚稀释，并通过过滤收集产物。将固体用20mL乙醚洗涤，并在真空中干燥，得到作为浅黄色粉末的N-甲基-1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001225
唑-4-基)环丙-1-胺盐酸盐(1.32g，7.56mmol，83.8％得率)。
N-甲基-1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001226
唑-5-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001231
步骤1：在r.t.下向1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙烷-1-甲酸(6.0g，27.88mmol)在无水DCM(300mL)中的溶液添加1-(1H-咪唑-1-羰基)-1H-咪唑(6.78g，41.82mmol)。当气体逸出完成时(～20min)，添加甲氧基(甲基)胺盐酸盐(6.8g，69.7mmol)，并将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物用石油醚(300mL)稀释并用水(3x300mL)洗涤。分离有机相，用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，得到作为无色油状物的N-1-[甲氧基(甲基)氨甲酰基]环丙基-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(3.95g，96.0％纯度，14.7mmol，52.7％得率)。
步骤2：在r.t.和氩气气氛下向N-1-[甲氧基(甲基)氨甲酰基]环丙基-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(3.77g，14.6mmol)在100mL THF中的溶液添加甲基溴化镁(5.22g，43.8mmol，13.7mL)。将所述混合物在r.t.搅拌过夜，通过添加饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭，并在减压下浓缩。将残留物在200mL水与200mL MTBE之间分配。将有机层用100mL水、盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出作为浅黄色液体的N-(1-乙酰基环丙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(2.71g，96.0％纯度，12.2mmol，83.6％得率)。
步骤3：将N-(1-乙酰基环丙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(2.71g，12.71mmol)溶解在叔丁氧基双(二甲基氨基)甲烷(50mL)中，并在75℃加热过夜。将所述反应混合物在减压下浓缩，得到6.65g橙色油状物。将2g该油状物通过快速层析进行纯化(40g SiO2，石油醚/MTBE，其中MTBE从15～100％，以及MTBE/甲醇，其中甲醇从0～15％，流速＝40mL/min，Rv＝21.5CV)，得到作为无色液体的N-1-[(2E)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酰基]环丙基-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(580mg，2.16mmol)。
步骤4：将N-1-[(2E)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酰基]环丙基-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(580.0mg，2.16mmol)和羟胺盐酸盐(165mg，2.38mmol)在无水甲醇(20mL)中的混合物在50℃和氩气气氛下加热20h。然后将反应混合物在减压下浓缩。将残留物在乙酸乙酯(20mL)与水(50mL)之间分配。将有机层用水、盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出作为浅黄色油状物的N-甲基-N-[1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001242
唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(455mg，1.91mmol，88.3％得率)。
步骤5：在r.t.下将N-甲基-N-[1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001243
唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(455mg，1.91mmol)溶解在10mL 4M HCl/二氧杂环己烷中，并将得到的混合物搅拌过夜。将得到的混合物在减压下浓缩，并将残留物用乙酸乙酯(10mL)研磨。通过过滤收集得到的浅棕色固体并在真空下干燥，给出作为结晶固体的N-甲基-1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001244
唑-5-基)环丙-1-胺盐酸盐(210.0mg，1.2mmol，63.1％得率)。
N-甲基-1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001245
唑-3-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001241
步骤1：向1,2-
Figure BDA0003327916790001246
唑-3-甲腈(4.0g，42.5mmol)和四异丙醇钛(13.3g，46.8mmol)在Et2O(200mL)中的冷却的(-70℃)溶液添加乙基溴化镁(11.9g，89.3mmol，26.3mL)。将得到的黄色溶液在-70℃搅拌10min，然后缓慢升温至r.t.。然后添加三氟化硼-二乙醚合物(12.1g，85.1mmol，10.7mL)。在搅拌1h后，添加1N HCl(100mL)和二乙醚(200mL)。向得到的混合物添加NaOH(10％aq，200mL)，然后添加二碳酸二叔丁酯(46.4g，212mmol，48.9mL)。将得到的两相混合物剧烈搅拌过夜。进行相分离，并将水性相用二乙醚(3×100mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥，过滤并在减压下浓缩，给出粘稠黄色油状物，其主要由所需产物和Boc2O组成。将该油状物溶解在50mL二氧杂环己烷中。向该溶液逐滴添加2-氨基乙酸(15.96g，212.66mmol)和碳酸钠(22.54g，212.66mmol)在100mL水中的溶液。将所述混合物搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残留物在300mL水与150mL MTBE之间分配。将有机相用5mL水、盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并在减压下浓缩，给出作为浅黄色油状物的N-[1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001251
唑-3-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(6.0g，26.8mmol，62.9％得率)。
步骤2：将氢化钠(67mg，2.81mmol)悬浮在10mL无水THF中。然后逐滴添加(水浴冷却)N-[1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001252
唑-3-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(524mg，2.34mmol)在2mL无水THF中的溶液。将得到的混合物搅拌，直至气体逸出停止，然后冷却至0℃。逐滴添加碘代甲烷(498mg，3.51mmol，220μL)，并将得到的混合物加温至r.t.，然后搅拌过夜。将反应混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中。将得到的混合物用EtOAc(2×10mL)萃取。将有机萃取液合并，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出粗品N-甲基-N-[1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001253
唑-3-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(537mg，2.25mmol，96.4％得率)，其不需纯化用于下一步骤中。
步骤3：将N-甲基-N-[1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001254
唑-3-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(536mg，2.25mmol)溶解在50ml无水DCM中。一次性添加2,2,2-三氟乙酸(770mg，6.75mmol，520μl)，并将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩，得到N-甲基-1-(1,2-
Figure BDA0003327916790001255
唑-3-基)环丙-1-胺(64mg，463μmol，20.6％得率)。
N-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001256
二唑-5-基)环丙-1-胺的合成
Figure BDA0003327916790001261
步骤1：将1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001262
二唑-5-基)环丙-1-胺盐酸盐(1.5g，8.54mmol)和二碳酸二叔丁酯(2.05g，9.39mmol，2.16mL)在二氯甲烷(50mL)中混合，并在0℃下逐滴添加三乙胺(949.0mg，9.38mmol，1.31mL)。将反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水(2×10mL)洗涤，在硫酸钠上干燥并在真空中蒸发，给出N-[1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001263
二唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.61g，6.72mmol，78.9％得率)。
步骤2：将氢化钠(209.7mg，8.74mmol)悬浮在无水THF(10mL)中。逐滴添加(水浴冷却)N-[1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001264
二唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.61g，6.72mmol)在无水THF(10mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌，直至气体逸出完成，然后冷却至0℃。逐滴添加碘代甲烷(1.05g，7.4mmol，460.0μL)。将得到的混合物加温至r.t.，然后搅拌过夜。将反应混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中，并用20mL CH2Cl2萃取两次。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留(1.56g)通过在硅胶上柱层析进行纯化，使用己烷/MTBE(梯度100/0至50/50)作为洗脱剂，得到作为无色油状物的N-甲基-N-[1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001265
二唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(914.0mg，3.61mmol，53.7％得率)。
步骤3：将N-甲基-N-[1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001266
二唑-5-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(914.0mg，3.61mmol)溶解在50mL无水DCM中。一次性添加2,2,2-三氟乙酸(2.06g，18.04mmol，1.39mL)，并将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。将反应混合物浓缩，给出N-甲基-1-(3-甲基-1,2,4-
Figure BDA0003327916790001267
二唑-5-基)环丙-1-胺三氟乙酸盐(522.0mg，1.95mmol，54.1％得率)。
1-氨基-N-甲基环丙烷-1-甲酰胺的合成
Figure BDA0003327916790001271
步骤1：在r.t.下将1-(1H-咪唑-1-羰基)-1H-咪唑(2.42g，14.9mmol)添加到1-((叔丁氧基羰基)氨基)环丙烷甲酸(2.0g，9.94mmol)在10mL无水THF中的溶液。当气体释放停止时(～20min)，逐滴添加甲胺溶液(50mL，在甲醇中的20％溶液)。将得到的溶液搅拌过夜。在真空中蒸发掉溶剂，并将残留物在DCM(30mL)与水(10mL)之间分配。分离有机相，用水、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，得到作为白色固体的N-[1-(甲基氨甲酰基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.9g，8.89mmol，89.4％得率)。
步骤2：将N-[1-(甲基氨甲酰基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.9g，8.89mmol)溶解在25mL二氧杂环己烷中的4M HCl中，并将得到的混合物搅拌过夜。将所述混合物在减压下浓缩，得到作为白色固体的1-氨基-N-甲基环丙烷-1-甲酰胺盐酸盐(1.29g，8.58mmol，96.4％得率)。
3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001281
步骤1：向1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(1.01g，4.05mmol)在无水DCM(10mL)中的冷却的(0℃)悬液添加二碳酸二叔丁酯(882.91mg，4.05mmol)和三乙胺(450.12mg，4.45mmol，620.0μl)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜，然后用水(5mL)稀释。分离有机相，用10％aq.H3PO4和水洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到作为棕色油状物的N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.52mmol，87.1％得率)。
步骤2：在Ar下向氢化钠(212.04mg，8.84mmol)在无水THF(5ml)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.53mmol)在THF(2ml)中的溶液。将反应混合物在r.t.搅拌1h，然后冷却至0℃。逐滴添加碘代甲烷(752.4mg，5.3mmol，330.0μl)，并将反应混合物在r.t.搅拌过夜。将所述混合物用盐水(10mL)稀释并用EtOAc(2*10mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色油状物的N-[1-(3-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(700.0mg，2.15mmol，60.7％得率)。
步骤3：向N-[1-(3-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(701.88mg，2.15mmol)在MeOH(30mL)中的溶液添加与二氯甲烷络合的[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)(175.7mg，215.15μmol)和三乙胺(261.36mg，2.58mmol，360.0μl)。将所述反应混合物在135℃和40atm压力下羰基化(CO气氛)过夜。将混合物冷却并浓缩至干。将残留物在硅胶上使用柱层析进行纯化(己烷-EtOAc 3:1作为洗脱剂)，得到作为无色油状物的3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(380.0mg，1.24mmol，57.8％得率)。
步骤4：向3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(380.0mg，1.24mmol)在无水DCM(5mL)中的搅拌的溶液添加二氧杂环己烷/HCl(2mL，4M)。将所述反应混合物在r.t.搅拌5h。将所述混合物浓缩，将残留物用己烷研磨，并通过过滤收集产物，得到作为白色固体的3-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(290.0mg，1.2mmol，96.4％得率)。
步骤5：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(210.94mg，789.21μmol)和[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]二甲基六氟-λ5-磷酸铵(300.08mg，789.21μmol)在DMF(0.8mL)中的冷却的(0℃)溶液相继添加3-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(190.76mg，789.21μmol)和三乙胺(319.44mg，3.16mmol，440.0μl)。将所述反应混合物在r.t.搅拌过夜并用盐水稀释。将混合物用EtOAc(2*20mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到作为棕色油状物的3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(270.0mg，594.03μmol，75.3％得率)。
步骤6：向3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(270.34mg，594.79μmol)在THF/水/MeOH(2mL/2mL/1mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(74.88mg，1.78mmol)，并将所述反应混合物在r.t搅拌过夜。将所述混合物浓缩，将残留物溶解在水(5mL)中，并将所述混合物用MTBE(3mL)萃取。分离水性相，并用5％aq.HCl酸化至pH 4。将产物用EtOAc(2*5mL)萃取。将合并的有机相在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色固体的3-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯甲酸(220.0mg，499.44μmol，84％得率)。
Rt(方法G)1.23min，m/z 441[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.99(br.s,1H),δ7.81(d,J＝7.0Hz,1H),7.63(s,1H),7.50(m,1H),7.30(d,J＝7.9Hz,1H),6.94(s,1H),4.75(m,2H),4.05(s,2H),3.78(m,2H),3.06(s,3H),1.58(m,2H),1.44(m,11H).
4-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001301
步骤1：将氢化钠(123.54mg，5.15mmol)悬浮在无水DMF(10mL)中。逐滴添加(水浴冷却)4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(999.86mg，3.43mmol)在无水DMF(1mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止，然后冷却至0℃。在该温度下逐滴添加碘代甲烷(2.44g，17.16mmol)；将得到的混合物加温至r.t.，然后搅拌过夜。将反应混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中。将得到的混合物用EtOAc(2x10 mL)萃取。将合并的有机萃取液在Na2SO4上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(900.0mg，2.95mmol，85.9％得率)。
步骤2：将4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(800.0mg，2.62mmol)溶解在二氧杂环己烷/HCl(10mL，4M溶液)中，并将得到的混合物在r.t.搅拌。在起始原料耗尽后，将得到的溶液蒸发至干，得到粗品4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(600.0mg，2.48mmol，94.8％得率)，其不需纯化用于下一步骤中。
步骤3：将4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(650.0mg，2.69mmol)、[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]二甲基六氟-λ5-磷酸铵(1.12g，2.96mmol)和三乙胺(680.14mg，6.72mmol，940.0μl)溶解在无水DMF(5mL)中，并将得到的混合物搅拌10分钟。向其添加5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(718.6mg，2.69mmol)，并将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。将得到的混合物用水(50mL)稀释。通过过滤收集得到的沉淀物。将滤饼重新溶解在EtOAc(20mL)中，在Na2SO4上干燥并浓缩，给出3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.0g，2.2mmol，81.8％得率)，其不需纯化用于下一步骤中。
步骤4：将3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(899.77mg，1.98mmol)与氢氧化钠(237.54mg，5.94mmol)在甲醇(10mL)中混合，并将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。在起始原料耗尽后(1H NMR控制)，将得到的混合物蒸发至干。将残留物在水(5mL)与EtOAc(5mL)之间分配。收集水性层，并用硫酸氢钠(713.02mg，5.94mmol)在5mL水中的溶液酸化。通过过滤收集沉淀物，然后重新溶解在EtOAc(10mL)中，在Na2SO4上干燥并蒸发至干。将残留物通过HPLC进行纯化，得到4-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯甲酸(366.0mg，830.89μmol，42％得率)。
Rt(方法G)1.23min，m/z 441[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(br.s,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,2H),7.17(d,J＝8.1Hz,2H),6.93(s,1H),4.76(m,2H),4.05(s,2H),3.77(m,2H),3.04(s,3H),1.64(m,2H),1.43(m,11H).
2-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)嘧啶-5-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001321
步骤1：向氢化钠(278.12mg，11.59mmol)在无水DMF(20mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(1.7g，5.8mmol)。将混合物搅拌直至气体逸出停止。然后逐滴添加碘代甲烷(1.07g，7.53mmol)。将得到的混合物加温至r.t.，搅拌过夜，然后倾倒在水中。将得到的混合物用EtOAc(2x50mL)萃取。将有机相合并，用水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出2-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(700.0mg，99.0％纯度，2.25mmol，38.9％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：将2-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(700.0mg，2.28mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(30mL)中。将得到的混合物搅拌过夜，然后蒸发至干，给出作为固体的1-[5-(甲氧基羰基)嘧啶-2-基]-N-甲基环丙-1-氯化铵(440.0mg，95.0％纯度，1.72mmol，75.3％得率)，其不需纯化用于下一步骤中。
步骤3：向2-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(439.34mg，1.8mmol)和5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(481.87mg，1.8mmol)在无水DMF(7mL)中的搅拌的溶液添加[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]二甲基六氟-λ5-磷酸铵(891.16mg，2.34mmol)和三乙胺(638.88mg，6.31mmol，880.0μL，3.5equiv.)。将所述混合物搅拌过夜，然后倾倒在水(50mL)中并用EtOAc(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(3x20mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为白色半固体的2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(111.0mg，98.0％纯度，238.29μmol，13.2％得率)。
6-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)吡啶-3-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001331
步骤1：向1-(5-溴吡啶-2-基)环丙-1-胺二盐酸盐(600.65mg，2.1mmol)在DMF(5mL)中的溶液添加5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(561.34mg，2.1mmol)、HATU(798.55mg，2.1mmol)和DIPEA(1.36g，10.51mmol，1.83mL，5.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物用水(10mL)稀释并用EtOAc(3x20mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到作为白色固体的3-[1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(400.0mg，865.16μmol，41.2％得率)。
步骤2：向3-[1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(400.0mg，865.16μmol)在MeOH(20mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(35.33mg，43.26μmol)和三乙胺(105.07mg，1.04mmol，140.0μL，1.2equiv.)。将所述混合物在125℃和40atm下羰基化过夜。将混合物冷却至室温并浓缩至干。将残留物溶解在EtOAc(10mL)中，用水(5mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为棕色固体的6-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(390.0mg，70.0％纯度，618.37μmol，71.5％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向6-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(390.0mg，883.39μmol)在THF/水/MeOH(2mL/2mL/1mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(148.43mg，3.54mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出6-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)吡啶-3-甲酸。
2-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)嘧啶-5-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001341
步骤1：将N-[1-(5-溴嘧啶-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(3.0g，9.55mmol)、三乙胺(1.16g，11.46mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(3mol％)溶解在甲醇(100mL)中。将反应混合物在高压容器中在120℃和40atm CO压力下加热18h，然后冷却至室温。在真空中除去溶剂并添加水(100mL)。将所述混合物在室温搅拌1小时，并通过过滤收集产物。将固体用水(100mL)洗涤并空气干燥，给出作为橙色固体的2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(2.5g，98.0％纯度，8.35mmol，87.5％得率)。
步骤2：向2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(800.0mg，2.73mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(40mL，160mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。通过过滤收集产物，用MTBE(20mL)洗涤并空气干燥，得到作为白色固体的1-[5-(甲氧基羰基)嘧啶-2-基]环丙-1-氯化铵(400.0mg，98.0％纯度，1.71mmol，62.6％得率)。
步骤3：向2-(1-氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(400.19mg，1.74mmol)和5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(465.74mg，1.74mmol)在DMF(7mL)中的搅拌的溶液添加[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]二甲基六氟-λ5-磷酸铵(861.31mg，2.27mmol)和三乙胺(617.1mg，6.1mmol，850.0μL，3.5equiv.)。将所述混合物在室温搅拌过夜，然后倾倒在水(50mL)中并用MTBE(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(3x20mL)洗涤，并在无水硫酸钠上干燥。在真空下除去溶剂，得到2-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(700.0mg，91.0％纯度，1.44mmol，82.6％得率)。
步骤4：向2-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(700.2mg，1.58mmol)在MeOH/THF/H2O(4:4:1)(27mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(265.63mg，6.33mmol)。将所述混合物搅拌18h，然后浓缩。添加水(200mL)，并将得到的溶液冷却至0-5℃，并使用1M NaHSO4调整到pH 3～4。将所述悬液搅拌30分钟并通过过滤收集产物。将滤饼用水洗涤，然后干燥，得到作为浅黄色固体的2-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)嘧啶-5-甲酸(310.0mg，98.0％纯度，709.08μmol，44.8％得率)。
3-((1-(5-羟基吡啶-2-基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001361
步骤1：向1-(5-溴吡啶-2-基)环丙-1-胺二盐酸盐(4.0g，13.98mmol)在DCM(50mL)中的溶液添加二碳酸二叔丁酯(3.2g，14.67mmol，3.37mL，1.05equiv.)。将得到的混合物搅拌5min，然后逐滴添加三乙胺(3.54g，34.94mmol，4.87mL，2.5equiv.)。将得到的混合物在r.t.搅拌12小时，然后转移到分液漏斗。将有机相用水(20mL)和盐水洗涤，然后在硫酸钠上干燥，得到N-[1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(4.2g，13.41mmol，96％得率)。
步骤2：将(1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯(4.2g，13.41mmol)在MeOH(100mL)中在130℃和50atm.CO压力下，使用Pd(dppf)Cl2.DCM络合物作为催化剂进行羰基化。在反应完成后，将所述混合物浓缩，并将残留物在水(100mL)与EtOAc(100mL)之间分配。收集有机层，在硫酸钠上干燥并浓缩，得到6-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(4.6g，15.74mmol，117.3％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向氢化钠(106.92mg，4.46mmol)在无水DMF(15mL)中的冷却的(水浴)悬液逐滴添加6-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(1.0g，3.43mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止。将混合物冷却至0℃，然后逐滴添加碘代甲烷(729.6mg，5.14mmol，320.0μL，1.5equiv.)。将得到的混合物加温至r.t.，然后搅拌过夜。将混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中，并将产物用EtOAc(2x40mL)萃取。将有机相合并，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出6-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(800.0mg，2.61mmol，76.2％得率)。
步骤4：向6-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(800.0mg，2.61mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(50mL，200mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌12小时，然后蒸发至干，得到6-[1-(甲基氨基)环丙基]吡啶-3-甲酸甲酯二盐酸盐(700.0mg，2.51mmol，96％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤5：将5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(670.1mg，2.51mmol)、[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]二甲基六氟-λ5-磷酸铵(1.05g，2.76mmol)和三乙胺(887.93mg，8.77mmol)在无水DMF(10mL)中混合。将得到的混合物在r.t.搅拌10分钟，然后添加6-[1-(甲基氨基)环丙基]吡啶-3-甲酸甲酯二盐酸盐(700.0mg，2.51mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌过夜。然后将反应混合物倾倒在H2O(60mL)中。通过过滤收集产物，用H2O(2x10mL)洗涤并空气干燥，得到6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(350.0mg，768.37μmol，30.6％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤6：向6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(349.77mg，767.87μmol)在MeOH(20mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(322.23mg，7.68mmol)。将所述反应混合物在50℃搅拌过夜，然后浓缩，并在水(10mL)与EtOAc(10mL)之间分配。收集水性层并用NaHSO4(15％aq.sol.)酸化。将得到的混合物用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩，给出3-((1-(5-羟基吡啶-2-基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯。
6-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基}环丙基)吡啶-3-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001381
步骤1：向6-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(2.0g，6.84mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(50mL，200mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌12小时，然后浓缩至干，给出6-(1-氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯二盐酸盐(2.0g，7.54mmol，110.3％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：将5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(1.01g，3.77mmol)、[(二甲基氨基)(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]二甲基六氟-λ-5-磷酸铵(1.58g，4.15mmol)和三乙胺(1.34g，13.2mmol，1.84mL，3.5equiv.)在无水DMF(10mL)中混合。将得到的混合物在r.t.搅拌10分钟，然后添加6-(1-氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯二盐酸盐(999.94mg，3.77mmol)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜。然后将所述混合物倾倒在水(60mL)中。通过过滤收集沉淀物，用水(2x10mL)洗涤并干燥，得到粗品6-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(1.1g，2.49mmol，66.1％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向6-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(500.0mg，1.13mmol)在MeOH(20mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(475.15mg，11.32mmol)。将所述反应混合物在50℃加热过夜。将得到的混合物冷却并在减压下浓缩。将残留物在水(10mL)与EtOAc(10mL)之间分配。收集水性层并用NaHSO4(15％aq.sol.)酸化。将得到的混合物用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机层在硫酸钠上干燥并浓缩，给出6-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基}环丙基)吡啶-3-甲酸。
2-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基}环丙基)嘧啶-5-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001391
步骤1：将N-[1-(5-溴嘧啶-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(3.0g，9.55mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(139.75mg，190.99μmol)和三乙胺(2.9g，28.65mmol)在MeOH(100mL)中的溶液在钢制反应釜中，在120℃和25bar的CO压力下加热过夜。在冷却至r.t.后，将所述溶液浓缩，并将残留物通过HPLC进行纯化，给出2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(2.6g，8.86mmol，92.8％得率)。
步骤2：向2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(725.0mg，2.47mmol)在DMF(50mL)中的冷却的(水浴)溶液分部添加氢化钠(118.68mg，4.95mmol)，维持温度低于25℃。在气体逸出停止后，逐滴添加碘代甲烷(526.48mg，3.71mmol，230.0μL，1.5equiv.)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倾倒在水(400mL)中并用EtOAc(200mL)萃取。将有机相用水(2x100mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出2-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(550.0mg，1.79mmol，72.4％得率)。
步骤3：向2-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(550.0mg，1.79mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(15mL，60mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌过夜。通过过滤收集产物，用MTBE洗涤，然后干燥，得到2-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(200.0mg，820.71μmol，45.9％得率)。
步骤4：向5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(76.7mg，286.97μmol)和三乙胺(87.12mg，860.91μmol，120.0μL，3.0equiv.)在无水DMF(20mL)中的溶液添加(1H-1,2,3-苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(139.61mg，315.67μmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加2-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(70.0mg，287.25μmol)。将所述反应混合物在室温搅拌过夜。然后将所述混合物在EtOAc(100mL)与水(200mL)之间分配。将有机相用水(50mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)-嘧啶-5-甲酸甲酯(100.0mg，219.06μmol，76.3％得率)。
步骤5：向2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(100.0mg，219.06μmol)在MeOH(3mL)中的溶液添加氢氧化钠(19.27mg，481.8μmol)在水(0.5mL)中的溶液。将得到的混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物转移到水(10mL)中。将得到的溶液用NaHSO4酸化并用MTBE(2x10mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩，给出2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸(60.0mg，135.6μmol，61.9％得率)。
2-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基}环丙基)嘧啶-5-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001411
步骤1：向2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(710.0mg，2.42mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL，80mmol)。将所述混合物在室温搅拌过夜。通过过滤收集沉淀物并用MTBE洗涤，然后干燥，给出作为浅粉色粉末的2-(1-氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(540.0mg，2.35mmol，97.1％得率)。
步骤2：向5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(628.21mg，2.35mmol)和三乙胺(832.42mg，8.23mmol，1.15mL，3.5equiv.)在无水DMF(20mL)中的溶液添加(1H-1,2,3-苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(1.14g，2.59mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加2-(1-氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(540.0mg，2.35mmol)，并将搅拌继续过夜。将反应混合物在EtOAc(50mL)与水(50mL)之间分配。将有机相用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，在减压下浓缩，然后通过HPLC进行纯化，给出2-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(70.0mg，158.2μmol，7％得率)。
步骤3：向2-(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯(70.0mg，158.2μmol)在MeOH(3mL)中的溶液添加氢氧化钠(22.15mg，553.87μmol)在水(0.2mL)中的溶液。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残留物转移到水(15mL)中，用EtOAc(10mL)洗涤，然后用aq.HCl(1N)酸化至pH～3，并用EtOAc(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩，给出作为白色粉末的2-(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰氨基}环丙基)嘧啶-5-甲酸(36.0mg，84.03μmol，53.1％得率)。
3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001421
步骤1：向4-(1-氨基环丙基)苯甲酸盐酸盐(490.78mg，2.3mmol)在无水甲醇(30mL)中的溶液添加亚硫酰氯(410.0mg，3.45mmol，250.0μL，1.5equiv.)。将所述混合物加热回流过夜，然后冷却至室温并蒸发至干，给出4-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(500.0mg，2.2mmol，95.6％得率)。
步骤2：将5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(254.85mg，953.48μmol)、HATU(398.8mg，1.05mmol)和三乙胺(241.21mg，2.38mmol，330.0μL，2.5equiv.)在室温下在无水DMF(5mL)中混合。将得到的混合物搅拌10min，然后添加4-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯(182.33mg，953.48μmol)。将所述反应混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物浓缩，然后通过HPLC直接纯化，得到3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(527.0mg，1.2mmol，125.5％得率)。
3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001431
步骤1：向1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(2.0g，8.05mmol)在无水DCM(15mL)中的冷却的(0℃)悬液添加二碳酸二叔丁酯(1.76g，8.05mmol)和三乙胺(977.02mg，9.66mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌4h。添加水(5mL)，分离有机相并用5％aq.HCl、水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出作为白色固体的N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(2.2g，7.05mmol，87.6％得率)。
步骤2：向N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(2.2g，7.05mmol)在MeOH(80mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(575.46mg，704.67μmol)和三乙胺(855.67mg，8.46mmol)。将所述混合物在125℃和40atm下羰基化20h。将得到的混合物冷却并浓缩至干。将残留物溶解在EtOAc(20mL)中，并将所述溶液用水(5mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过硅胶上的快速柱层析进行纯化(己烷-EtOAc 3:1作为洗脱剂)，得到作为棕色油状物的3-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.3g，4.46mmol，63.3％得率)。
步骤3：向3-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.3g，4.46mmol)在DCM(10mL)中的溶液添加二氧杂环己烷中的4M HCl(7.8mL，31.2mmol)。将所述反应混合物在室温搅拌8h。通过过滤收集沉淀物并用无水EtOAc洗涤，然后空气干燥，得到作为白色固体的3-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(900.0mg，3.95mmol，88.6％得率)。
步骤4：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(586.75mg，2.2mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液添加HATU(834.71mg，2.2mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加3-(1-氨基环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(500.0mg，2.2mmol)和三乙胺(888.56mg，8.78mmol)。将反应混合物搅拌过夜，然后在EtOAc(20mL)与水(30mL)之间分配。将有机相用水(3x10mL)、sat.aq.NaHCO3和盐水洗涤，然后在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为无色固体的3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(710.0mg，1.61mmol，73.4％得率)。
3-[(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]甲基环丙基)(甲基)氨甲酰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001441
步骤1：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(1.12g，4.19mmol)和三乙胺(963.2mg，9.52mmol，1.33mL，2.5equiv.)在无水DMF(40mL)中的溶液添加(1H-1,2,3-苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(1.85g，4.19mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加1-[(4-溴苯基)甲基]环丙-1-胺盐酸盐(1.0g，3.81mmol)并继续搅拌过夜。将所述反应混合物在EtOAc(50mL)与水(150mL)之间分配。将有机相用水(50mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出3-(1-[(4-溴苯基)甲基]环丙基氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(2.0g，90.0％纯度，3.79mmol，99.4％得率)。
步骤2：向3-(1-[(4-溴苯基)甲基]环丙基氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(2.0g，4.21mmol)在DMF(50mL)中的冷却的(水浴)溶液分部添加氢化钠(201.92mg，8.41mmol)，维持温度低于25℃。在气体逸出停止后，逐滴添加碘代甲烷(895.74mg，6.31mmol，390.0μL，1.5equiv.)，并将得到的混合物留在室温搅拌过夜。将反应混合物倾倒在水(400mL)中并用EtOAc(200mL)萃取。将有机相用水(2x100mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，得到3-(1-[(4-溴苯基)甲基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.8g，3.68mmol，87.4％得率)。
步骤3：将3-(1-[(4-溴苯基)甲基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.5g，3.06mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(44.85mg，61.3μmol)和三乙胺(930.38mg，9.19mmol)在MeOH(100mL)中的溶液在钢制反应釜中，在120℃和25bar的CO压力下加热过夜。在冷却至室温后，将所述溶液浓缩，并将残留物通过HPLC进行纯化，得到3-[(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]甲基环丙基)(甲基)氨甲酰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(245.0mg，522.9μmol，17.1％得率)。
4-[(1-{5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-基}-N-甲基甲酰胺基)甲基]苯甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001451
步骤1：将5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(142.52mg，533.23μmol)、HATU(202.75mg，533.23μmol)和三乙胺(188.76mg，1.87mmol，260.0μL，3.5equiv.)在室温下在无水DMF(5mL)中混合。将所述混合物搅拌10min，然后添加4-[(甲基氨基)甲基]苯甲酸盐酸盐(107.53mg，533.23μmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后浓缩。将残留物通过HPLC直接纯化，给出4-[(1-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-基-N-甲基甲酰胺基)甲基]苯甲酸(70.0mg，168.9μmol，31.7％得率)。
6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸甲酯的合成
Figure BDA0003327916790001461
步骤1：向丙-2-炔酸乙酯(2.43g，24.75mmol)在无水THF(50mL)中的冷却的(–78℃)溶液添加正丁基锂(1.57g，24.54mmol，10.05mL，1.19equiv.)。将得到的溶液搅拌1h，然后在20min内逐滴添加N-(1-甲酰基环丙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(4.11g，20.62mmol)在无水THF(20mL)中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌3h，然后通过添加NH4Cl溶液(sat.aq.，150mL)淬灭。将得到的悬液升温至室温并进行层分离。将水性层用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤(100mL)，干燥(硫酸钠)并浓缩，得到作为黄色油状物的粗品4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)-4-羟基丁-2-炔酸乙酯(5.5g，18.5mmol，89.7％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)-4-羟基丁-2-炔酸乙酯(5.5g，18.5mmol)在无水DCM(80mL)中的溶液添加1,1-双(乙酰基氧基)-3-氧代-3H-1λ5,2-苯并碘氧杂环戊-1-基乙酸盐(7.85g，18.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。将所述混合物冷却至0℃，并逐滴添加饱和碳酸氢钠水溶液。将混合物搅拌1h并分离有机层，用饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色油状物的粗品4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)-4-氧代丁-2-炔酸乙酯(4.67g，15.81mmol，85.5％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)-4-氧代丁-2-炔酸乙酯(4.67g，15.81mmol)在乙腈(50mL)和水(cat.)中的溶液添加甲脒乙酸盐(2.47g，23.72mmol)和碳酸钠(5.03g，47.44mmol)。将反应混合物加热回流8h。将混合物在减压下浓缩，并将得到的残留物溶解在EtOAc(100mL)中。将所述溶液用水(2x30mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过硅胶上的柱层析进行纯化(EtOAc-己烷1:5作为洗脱剂)，得到作为黄色固体的6-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(1.3g，4.05mmol，25.6％得率)。
步骤4：向6-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(1.3g，4.05mmol)在无水DCM(10mL)中的溶液添加二氧杂环己烷中的4M HCl(7.15mL)。将所述反应混合物在室温搅拌8h。将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物在真空下干燥，得到作为棕色固体的粗品6-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(1.0g,3.88mmol，95.9％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤5：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(517.5mg，1.94mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液添加HATU(736.18mg，1.94mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加6-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(498.98mg，1.94mmol)和三乙胺(784.08mg，7.75mmol，1.08mL，4.0equiv.)。将所述混合物搅拌过夜，然后在EtOAc(50mL)与水(50mL)之间分配。将有机相用水(3x10mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到作为棕色油状物的粗品6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(190.0mg，92.0％纯度，371.5μmol，19.2％得率)。
步骤6：向6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(190.35mg，404.55μmol)在THF/水(1mL/1mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(50.93mg，1.21mmol)。将反应混合物在室温搅拌5h。将所述混合物浓缩，将残留物溶解在水(5mL)中，并将所述溶液用MTBE(2x2mL)萃取。将水性相浓缩至干；将残留物真空干燥并溶解在无水DMF(1mL)中。将所述溶液冷却至0℃并添加碘代甲烷(229.69mg，1.62mmol)。将混合物在r.t.搅拌10h并浓缩至干。将残留物通过HPLC直接纯化，得到作为浅黄色固体的6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸甲酯(55.9mg，122.45μmol，31.2％得率)。
2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯的合成
Figure BDA0003327916790001481
步骤1：向氢化钠(170.42mg，7.1mmol)在无水DMF(20mL中的悬液一次性添加2-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(1.0g，3.25mmol)。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止(大约2h，在室温下)。将所述混合物冷却(10℃)，然后逐滴添加碘代甲烷(831.57mg，5.86mmol，360.0μL，1.8equiv.)。将得到的混合物升温至室温并搅拌过夜(18h)。将反应混合物倾倒在水(100mL)中，并将产物用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(20mL)洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出2-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(800.0mg，90.0％纯度，2.24mmol，68.8％得率)(Me和Et酯的混合物)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：向2-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(800.0mg，2.49mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(30mL)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后蒸发至干，给出作为固体的2-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(600.0mg，90.0％纯度，2.1mmol，84.1％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(622.02mg，2.33mmol)和HATU(1.06g，2.79mmol)在DMF(25mL)中的溶液添加DIPEA(1.05g，8.15mmol，3.5equiv.)。将所述反应混合物在室温搅拌15min，然后添加2-[1-(甲基氨基)环丙基]嘧啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(600.0mg，2.33mmol)。将混合物搅拌过夜，然后将所述混合物倾倒在水(100mL)中并用EtOAc(3x100mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(3x30mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥并浓缩，得到粗产物(800mg)，将其通过HPLC进行纯化，给出作为半固体的2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)嘧啶-4-甲酸乙酯(297.0mg，97.0％纯度，612.28μmol，26.3％得率)。
3-[1-(甲基氨基)环丙基]-1,2-
Figure BDA0003327916790001492
唑-5-甲酸甲酯盐酸盐的合成
Figure BDA0003327916790001491
步骤1：向N-(1-甲酰基环丙基)氨基甲酸叔丁酯(1.03g，5.56mmol)和羟胺盐酸盐(773.22mg，11.13mmol)在EtOH(10mL)中的搅拌的溶液添加吡啶(880.0mg，11.13mmol，900.0μL，2.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌18h，然后真空浓缩。将残留物在水(20mL)与MTBE(70mL)之间分配。将有机层用0.1N HCl(10mL)、水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥并过滤。将滤液浓缩，给出N-1-[(E)-(羟基亚氨基)甲基]环丙基氨基甲酸叔丁酯(800.0mg，95.0％纯度，3.8mmol，68.2％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：向N-1-[(1E)-(羟基亚氨基)甲基]环丙基氨基甲酸叔丁酯(800.33mg，4.0mmol)在DMF(8mL)中的冷却的(0℃)搅拌的溶液添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(560.41mg，4.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌18h。然后将得到的溶液不需其他精制直接用于下一步骤中。
步骤3：将在步骤2中得到的溶液冷却(0℃)，然后添加单水合乙酸铜(II)(79.14mg，396.4μmol)。将反应混合物搅拌5min，然后添加丙-2-炔酸甲酯(399.92mg，4.76mmol)和碳酸氢钠(499.5mg，5.95mmol)。将所述混合物在室温搅拌24h，然后真空浓缩。将得到的残留物倾倒在水(50mL)中并用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机级分用水(30mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥并浓缩，给出3-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)-1,2-
Figure BDA0003327916790001501
唑-5-甲酸甲酯(1.0g，98.0％纯度，3.47mmol，87.6％得率)。
步骤4：向氢化钠(185.53mg，7.73mmol)在DMF(8mL)中的悬液添加3-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)-1,2-
Figure BDA0003327916790001502
唑-5-甲酸甲酯(1.0g，3.54mmol)在DMF(2mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止(～2h)，将所述溶液冷却(10℃)，然后添加碘代甲烷(855.03mg，6.02mmol)。将反应混合物升温至室温并搅拌过夜。将得到的混合物倾倒在水(50mL)中，并将产物用MTBE(2x50mL)萃取。合并有机相，用水(2x30mL)洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩。将产物通过柱层析进行纯化(硅胶，己烷:MTBE 2:1)，给出3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)-1,2-
Figure BDA0003327916790001503
唑-5-甲酸甲酯(420.0mg，96.0％纯度，1.36mmol，38.4％得率)。
步骤5：向3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)-1,2-
Figure BDA0003327916790001504
唑-5-甲酸甲酯(400.0mg，1.35mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL，80mmol)。将得到的混合物搅拌过夜，然后蒸发至干，给出作为固体的3-[1-(甲基氨基)环丙基]-1,2-
Figure BDA0003327916790001512
唑-5-甲酸甲酯盐酸盐(270.0mg，95.0％纯度，1.1mmol，81.7％得率)。
3-((1-(4-(甲氧基羰基)苯基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001511
步骤1：向氢化钠(321.2mg，13.38mmol)在无水DMF(15mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸酯(3.0g，10.3mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止，然后逐滴添加碘代甲烷(2.19g，15.44mmol)。将得到的混合物升温至室温然后搅拌过夜。将反应混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中并用EtOAc(2x40mL)萃取。将有机相合并，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(3.0g，9.82mmol，95.4％得率)。
步骤2：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(3.0g，9.82mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(50mL)。将反应混合物在r.t.搅拌12小时，然后蒸发至干，给出4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(1.5g，6.21mmol，63.2％得率)。
步骤3：将4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(531.8mg，2.2mmol)、HATU(920.21mg，2.42mmol)和三乙胺(556.58mg，5.5mmol)在无水DMF(5mL)中混合。将所述混合物搅拌10min，然后添加5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(588.05mg，2.2mmol)。将得到的混合物搅拌过夜，然后在水(50mL)与EtOAc(50mL)之间分配。分离有机相，在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(158.5mg，348.72μmol，15.9％得率)。
3-({1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001521
步骤1：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(1.61g，6.03mmol)在无水DMF(15mL)中的溶液添加HATU(2.29g，6.03mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(1.5g，6.03mmol)和三乙胺(2.44g，24.11mmol，3.36mL，4.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在EtOAc(100mL)与水(50mL)之间分配。将有机级分用水(3x50mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，得到作为米黄色固体的3-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(2.3g，4.99mmol，82.7％得率)。
步骤2：向3-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(2.3g，4.98mmol)在无水DMF(20mL)中的冷却的(0℃)溶液添加氢化钠(298.72mg，12.45mmol)。将混合物搅拌30min，然后逐滴添加碘代甲烷(1.41g，9.96mmol，620.0μL，2.0equiv.)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜。将所述混合物用盐水(50mL)稀释并用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出作为米黄色泡沫的3-[1-(3-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(2.3g，4.84mmol，97.2％得率)。
步骤3：向3-[1-(3-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(2.3g，4.84mmol)在MeOH(100mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(395.1mg，483.81μmol)和三乙胺(587.48mg，5.81mmol)。将混合物在125℃和40atm下羰基化20h。将得到的混合物冷却并浓缩至干。将残留物溶解在EtOAc(100mL)中，并将所述溶液用水(20mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物重新溶解在氯仿(50mL)中，并添加二碳酸二叔丁酯(316.77mg，1.45mmol)。将反应混合物在r.t.搅拌5h并浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(硅胶，EtOAc-己烷1:1至EtOAc)，得到作为黄色固体的3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.0g，2.2mmol，45.5％得率)。
1-({1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001531
步骤1：向1-(4-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(10.0g，40.24mmol)和二碳酸二叔丁酯(9.66g，44.27mmol，10.18mL，1.1equiv.)在DCM(100mL)中的混合物分部添加三乙胺(4.48g，44.27mmol，6.17mL，1.1equiv.)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后用水(70mL)洗涤，在硫酸钠上干燥并真空浓缩，给出N-[1-(4-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(10.5g，33.63mmol，83.6％得率)。
步骤2：将1-(N-boc-氨基)-1-(4-溴苯基)环丙烷(10.5g，33.63mmol)在MeOH(100mL)中，在130℃和50atm CO压力下羰基化，使用Pd(dppf)Cl2.DCM络合物作为催化剂。在起始原料耗尽后，将得到的混合物浓缩，并将残留物在水(100mL)与EtOAc(200mL)之间分配。收集有机层，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(9.5g，32.61mmol，97％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向氢化钠(616.74mg，25.7mmol)在无水DMF(20mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(4.99g，17.13mmol)在无水DMF(20mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止，然后逐滴添加碘代甲烷(3.65g，25.7mmol，1.6mL，1.5equiv.)。将得到的混合物加温至r.t.并搅拌过夜。将反应混合物倾倒在饱和NH4Cl水溶液中。将得到的混合物用EtOAc(2x50mL)萃取。将有机相合并，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(3.0g，9.82mmol，57.3％得率)。
步骤4：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(3.0g，9.82mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL)。将得到的混合物搅拌过夜，然后蒸发至干。将残留物用MTBE研磨，过滤并干燥，给出作为固体残留物的4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(1.1g，4.55mmol，46.3％得率)。
步骤5：将4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(200.0mg，827.42μmol)、HATU(346.0mg，909.97μmol)和三乙胺(209.27mg，2.07mmol，290.0μL，2.5equiv.)在室温下在无水DMF(5mL)中混合。将得到的混合物搅拌10分钟，然后添加7-[(叔丁氧基)羰基]-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酸(221.11mg，827.25μmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在水(50mL)与EtOAc(50mL)之间分配。分离有机相，在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的1-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(45.5mg，100.11μmol，12.1％得率)。
1-({1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001551
步骤1：向7-[(叔丁氧基)羰基]-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酸(630.0mg，2.36mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液添加HATU(895.87mg，2.36mmol)。将得到的混合物搅拌30min，然后添加1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(585.61mg，2.36mmol)和三乙胺(953.66mg，9.42mmol，1.31mL，4.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在EtOAc(50mL)与水(30mL)之间分配。将有机相用水(2x20mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为黄色固体的粗品1-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨甲酰基-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(1.0g，85.0％纯度，1.84mmol，78.2％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：向1-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨甲酰基-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(1.0g，2.17mmol)在无水DMF(10mL)中的冷却的(0℃)溶液添加氢化钠(130.12mg，5.42mmol)。将所述混合物搅拌30min，然后逐滴添加碘代甲烷(615.6mg，4.34mmol，270.0μL，2.0equiv.)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜，然后用盐水(50mL)稀释并用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出1-[1-(3-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(1.0g，2.1mmol，97％得率)。
步骤3：向1-[1-(3-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(999.87mg，2.1mmol)在MeOH(50mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(171.77mg，210.33μmol)和三乙胺(255.4mg，2.52mmol)。将所述混合物在120℃和40atm下羰基化40h。将混合物冷却至室温并浓缩至干。将残留物重新溶解在EtOAc(50mL)中并用水(25mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为棕色固体的1-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-7-甲酸叔丁酯(115.3mg，253.67μmol，12.1％得率)。
3-({1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001561
步骤1：将4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(200.0mg，827.42μmol)、HATU(346.35mg，910.91μmol)和三乙胺(209.49mg，2.07mmol，290.0μL，2.5equiv.)在室温下在无水DMF(5mL)中混合。将得到的混合物搅拌10min，然后添加5-[(叔丁氧基)羰基]-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(232.95mg，828.1μmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后在水(50mL)与EtOAc(50mL)之间分配。分离有机相，在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(206.5mg，440.73μmol，53.2％得率)。
3-({1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001571
步骤1：向5-[(叔丁氧基)羰基]-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(690.0mg，2.45mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液添加HATU(932.62mg，2.45mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(609.63mg，2.45mmol)和三乙胺(992.79mg，9.81mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后在EtOAc(50mL)与水(30mL)之间分配。将有机相用水(2x20mL)、盐水洗涤，然后在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为棕色固体的3-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨甲酰基-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.15g，2.42mmol，98.6％得率)。
步骤2：向3-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨甲酰基-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.15g，2.42mmol)在无水DMF(10mL)中的冷却的(0℃)溶液添加氢化钠(145.14mg，6.05mmol)。将所述混合物搅拌30min，然后逐滴添加碘代甲烷(686.78mg，4.84mmol)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜。将所述混合物用盐水(50mL)稀释并用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为棕色固体的3-[1-(3-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.0g，2.04mmol，84.5％得率)。
步骤3：向3-[1-(3-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(994.38mg，2.03mmol)在MeOH(60mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(165.93mg，203.18μmol)和三乙胺(246.84mg，2.44mmol，340.0μL，1.2equiv.)。将得到的混合物在125℃和40atm下羰基化36h。将所述混合物冷却至室温并浓缩至干。将残留物溶解在EtOAc(50mL)中。将所述溶液用水(20mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到作为棕色固体的3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(413.7mg，882.95μmol，43.5％得率)。
4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐的合成
Figure BDA0003327916790001581
步骤1：向氢化钠(98.83mg，4.12mmol)在无水DMF(10mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.0g，3.43mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止(大约20min)。逐滴添加碘代甲烷(730.68mg，5.15mmol)，并将得到的混合物升温至r.t.并搅拌过夜。将混合物倾倒在饱和NH4Cl水溶液中，并用EtOAc(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(900.0mg，2.95mmol，85.9％得率)。
步骤2：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(900.0mg，2.95mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL，80mmol)。将反应混合物搅拌过夜，然后蒸发至干。将残留物用MTBE研磨，过滤并空气干燥，给出作为固体的4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(500.0mg，2.07mmol，70.2％得率)。
3-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐的合成
Figure BDA0003327916790001591
步骤1：向1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(4.4g，17.7mmol)在DCM(50mL)中的冷却的(0℃)溶液添加二碳酸二叔丁酯(3.86g，17.7mmol)。逐滴添加三乙胺(2.15g，21.24mmol)，将反应混合物升温至室温，然后搅拌5h。将所述混合物用水(25mL)稀释。分离有机相，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为白色固体的N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(4.8g，15.37mmol，86.8％得率)。
步骤2：在氩气气氛下向N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(4.8g，15.38mmol)在无水DMF(30mL)中的冷却的(0℃)溶液分部添加氢化钠(922.45mg，38.44mmol)。将混合物搅拌30min，然后逐滴添加碘代甲烷(4.36g，30.75mmol)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜。将所述混合物用盐水(50mL)稀释并用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到N-[1-(3-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(4.3g，13.18mmol，85.7％得率)。
步骤3：向N-[1-(3-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(4.3g，13.18mmol)在MeOH(150mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(1.08g，1.32mmol)和三乙胺(1.6g，15.82mmol)。将混合物在135℃和40atm下羰基化28h。将得到的混合物冷却并蒸发至干。将残留物溶解在EtOAc(50mL)中。将所述溶液用水(25mL)洗涤，在在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过硅胶上的快速柱层析进行纯化(己烷-EtOAc 4:1)，给出作为黄色油状物的3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(3.24g，90.0％纯度，9.55mmol，72.4％得率)。
步骤4：向3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(3.24g，10.61mmol)在无水DCM(20mL)中的溶液添加二氧杂环己烷中的4M HCl(18.7mL)。将所述混合物在室温搅拌10h，然后在减压下浓缩。将残留物用无水EtOAc研磨。通过过滤收集固体并空气干燥，得到作为粉色固体的3-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(2.1g，8.69mmol，81.9％得率)。
3-({1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001601
步骤1：将双(三甲基甲硅烷基)氰酸锂(27.72g，165.66mmol，165.66mL，1.1equiv.)溶解在无水二乙醚(150mL)中并冷却至-78℃(干冰/丙酮)。在氩气气氛下向所述冷却的混合物添加4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(30.01g，150.6mmol)在无水二乙醚/无水THF(3:1)中的溶液(200mL)(在15min内)。将混合物搅拌30min，然后添加草酸二乙酯(24.21g，165.66mmol，22.5mL，1.1equiv.)在无水二乙醚(50mL)中的溶液。将得到的混合物在-78℃搅拌30min，然后撤除冷却。当所述混合物达到0℃时，形成黄色悬液。将所述混合物倾倒在1M KHSO4(200mL)中并进行层分离。将水性相用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机萃取液用水洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并浓缩，给出作为橙色油状物的粗品5-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-4-羟基-1,2,3,6-四氢吡啶-1-甲酸叔丁酯(49.0g，90.0％纯度，147.33mmol，97.8％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：向3-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(49.02g，163.76mmol)在无水EtOH(250mL)中的搅拌的溶液添加乙酸(14.16g，235.81mmol，13.62mL，1.6equiv.)和水合肼(7.38g，147.38mmol，12.3mL，1.0equiv.)。将所述混合物搅拌5h，然后将混合物浓缩。将残留物用饱和NaHCO3水溶液稀释，并将产物用EtOAc(3x100mL)萃取。将合并的有机相干燥(硫酸钠)，过滤并浓缩。将残留物用己烷研磨，并通过过滤收集得到的固体，得到作为浅黄色固体的1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(41.6g，140.86mmol，95.6％得率)。
步骤3：在氩气气氛下向氢化钠(1.02g，42.38mmol)在无水THF(50mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(5.01g，16.95mmol)在无水THF(20mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌30min，然后逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基甲硅烷(3.67g，22.04mmol，3.9mL，1.3equiv.)。将反应混合物搅拌30min，然后升温至室温。将得到的混合物倾倒在水(100mL)中，将产物用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，得到作为无色固体的1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(6.7g，15.74mmol，92.9％得率)。
步骤4：向1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(6.7g，15.74mmol)在THF(50mL)和水(25mL)中的搅拌的溶液添加单水氢氧化锂(2.31g，55.1mmol)。将反应混合物在50℃搅拌3h，然后在减压下浓缩；将残留物小心地用饱和KHSO4水溶液酸化至pH 4-5。将产物用EtOAc(2x50mL)萃取。分离有机相，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物用己烷研磨，通过过滤收集产物并干燥，得到作为浅黄色固体的5-[(叔丁氧基)羰基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(4.6g，11.57mmol，73.5％得率)。
步骤5：向5-[(叔丁氧基)羰基]-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(600.0mg，1.51mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液添加HATU(574.14mg，1.51mmol)。将得到的混合物搅拌30min，然后添加4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(364.98mg，1.51mmol)和三乙胺(611.18mg，6.04mmol，840.0μL，4.0equiv.)。将得到的混合物搅拌过夜，然后在EtOAc(50mL)与水(30mL)之间分配。将有机相用水(2x20mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到作为棕色固体的3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(470.0mg，803.72μmol，53.2％得率)。
3-({1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基}(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001631
步骤1：在-25℃下向氢化锂铝(5.7g)在THF(500mL)中的悬液逐滴添加4-氯-6-甲基烟酸甲酯(30.0g，161.63mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液。将得到的混合物在0℃搅拌1.5小时。然后，向反应混合物相继滴加(0-5℃)水(6mL，在50ml THF中)、NaOH(6mL，15％水溶液)和水(18mL)。将得到的混合物在室温搅拌30分钟，然后过滤。将滤饼用THF(2x200mL)洗涤。将滤液浓缩，给出作为黄色固体的(4-氯-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(20.0g，93.0％纯度，118.02mmol，73％得率)。所述粗产物(93％纯度)不需纯化直接使用。
步骤2：向(4-氯-6-甲基吡啶-3-基)甲醇(42.5g，269.67mmol)在CH2Cl2(1300mL)中的溶液分几次(在～10min内)添加1,1-双(乙酰基氧基)-3-氧代-3H-1λ5,2-苯并碘氧杂环戊-1-基乙酸酯(131.54g，310.12mmol)，用水/冰浴冷却维持温度低于5℃。在反应完成后，将混合物倾倒在碳酸氢钠(113.27g，1.35mol)、Na2S2O3.5H2O(100.39g，0.404mol)的饱和水溶液中，并搅拌直至有机相变得透明(约18h，在10-20℃下)。进行层分离，并将水性层用DCM(300mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤(200mL)，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为黄色固体的4-氯-6-甲基吡啶-3-甲醛(37.0g，98.0％纯度，233.06mmol，86.4％得率)。
步骤3：在氮气下向4-氯-6-甲基吡啶-3-甲醛(31.0g，199.26mmol)(1equiv.)在1,4-二氧杂环己烷(1100mL)中的悬液添加水合肼(279.3g，5.58mol,279.3mL，28.0equiv.)。将所述混合物回流48h，然后冷却。进行层分离，并将有机层在减压下浓缩。然后向得到的残留物添加水(200mL)。将所述悬液在室温搅拌1小时，过滤，将固体用水(100mL)洗涤并空气干燥，给出作为黄色固体的6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(3.7g，95.0％纯度，26.4mmol，13.2％得率)。
步骤4：向6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(5.0g，37.55mmol)(1.00equiv.)和氢氧化钾(7.58g，135.19mmol)(3.60equiv.)在DMF(80mL)中的冷却的(水浴)悬液添加碘(19.06g，75.11mmol)(2.00equiv.)。将反应混合物搅拌1h，然后通过添加Na2S2O3饱和水溶液将所述混合物淬灭，用乙酸乙酯(3x200mL)萃取，在无水硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为黄色固体的3-碘-6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(5.2g，98.0％纯度，19.67mmol，52.4％得率)。
步骤5：将3-碘-6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(5.2g，20.07mmol)、三乙胺(2.44g，24.09mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(50mg，3mol％)溶解在MeOH(200mL)中。将所述反应混合物在高压容器中，在120℃和CO气氛中的40atm压力下加热24h。然后，在真空中蒸发掉溶剂。将残留物重新溶解在水(100mL)中。将所述混合物在室温搅拌1小时并过滤。将得到的固体用水(100mL)洗涤并空气干燥，给出作为橙色固体的粗产物。将得到的固体通过快速层析进行纯化(MeOH:DCM 1:30)，给出6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸甲酯(1.2g，98.0％纯度，6.15mmol，30.6％得率)。
步骤6：向6-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸甲酯(1.2g，6.28mmol)和二碳酸二叔丁酯(2.81g，12.87mmol)在甲醇(50mL)中的悬液添加Pd(OH)2(20％，在活性炭上，0.1mmol)。将所述混合物在压热釜中，在45atm H2和室温下加氢48h。然后，将反应混合物通过二氧化硅垫过滤，并将所述垫用甲醇(50mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，给出作为油状物的6-甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1,3,5-三甲酸1,5-二叔丁基3-甲基酯(2.2g，90.0％纯度，5.01mmol，79.8％得率)(单和二Boc产物的混合物)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤7：向6-甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1,3,5-三甲酸1,5-二叔丁基3-甲基酯(2.2g，5.56mmol)添加MeOH(70mL)和NaHCO3饱和水溶液(15mL)。将所述混合物在室温搅拌18h，然后在真空中蒸发掉溶剂。将残留物与水(25mL)混合。将得到的悬液用MTBE(2x50mL)萃取，在无水硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出作为黄色半固体的粗品6-甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-甲基酯(1.7g，90.0％纯度，5.18mmol，93.1％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤8：向6-甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-甲基酯(1.7g，5.76mmol)(1eq.)在THF(75mL)中的冷却的(0℃)溶液分部添加氢化钠(334.06mg，13.92mmol)。将混合物在室温搅拌30min，然后逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基甲硅烷(1.28g，7.66mmol)。将得到的混合物在室温搅拌另外16h，然后用水淬灭并用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机萃取液在无水硫酸钠上干燥，过滤，浓缩，并通过快速柱层析进行纯化(己烷:MTBE2:1)，得到作为黄色油状物的6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-甲基酯(1.6g，97.0％纯度，3.65mmol，63.3％得率)。
步骤9：将6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-甲基酯(1.6g，3.76mmol)和单水氢氧化锂(473.2mg，11.28mmol)在THF:H2O:甲醇的混合物(v/v 3:1:1，50mL)中，在25℃搅拌18h。然后将所述反应混合物在减压下浓缩。将残留物用饱和柠檬酸溶液酸化至pH 4。将混合物用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机萃取液在无水硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩。将得到的残留物通过HPLC进行纯化，给出作为白色半固体的5-[(叔丁氧基)羰基]-6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(1.1g，97.0％纯度，2.59mmol，69％得率)。
步骤10：将5-(叔丁氧基羰基)-6-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(402.77mg，978.61μmol)和HATU(427.91mg，1.13mmol)在DMF(5mL)中混合。将得到的混合物在室温搅拌15min，然后添加4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(236.54mg，978.61μmol)和三乙胺(326.7mg，3.23mmol，450.0μL，3.3equiv.)。将反应混合物在室温搅拌过夜(18h)。然后将所述混合物倾倒在水(50mL)中并用MTBE(3x50mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(3x30mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥，并在真空中除去溶剂。将得到的残留物通过快速柱层析进行纯化(己烷:MTBE)，得到作为半固体的3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基-1H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(265.0mg，98.0％纯度，433.7μmol，44.3％得率)。
4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001662
唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯的合成
Figure BDA0003327916790001661
步骤1：向羟胺盐酸盐(10.7g，153.95mmol)在乙醇(100mL)和水(25mL)中的溶液添加4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.45g，102.64mmol)和乙酸钾(16.12g，164.22mmol)。将白色悬液在回流下搅拌3h，然后冷却并过滤。将滤液在减压下浓缩。将残留物在水(200mL)与DCM(250mL)之间分配。进行层分离，并将有机层用DCM(50mL)萃取。将合并的有机萃取液干燥(硫酸钠)并浓缩，得到作为米黄色固体的4-(羟基亚氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.2g，94.28mmol，91.9％得率)。
步骤2：在氩气下向4-(羟基亚氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(35.2g，164.28mmol)在THF(300mL)中的冷却的(-78℃)溶液逐滴添加仲丁基锂溶液(31.57g，492.85mmol，352.04mL，3.0equiv.)。将混合物搅拌1h，然后逐滴添加草酸二乙酯(33.61g，230.0mmol)。将混合物搅拌15min，然后升温至室温并继续搅拌1h。通过添加sat.aq.NH4Cl(1000mL)将反应淬灭，并用EtOAc(3x300mL)萃取，将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩，得到作为棕色油状物的粗品3-羟基-3H,3aH,4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001671
唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(43.2g，137.43mmol，83.7％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：向3-羟基-3H,3aH,4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001672
唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(6.0g，19.09mmol)和三乙胺(5.79g，57.26mmol，7.98mL，3.0equiv.)在THF(40mL)中的冷却的(0℃)溶液添加甲磺酰氯(2.84g，24.81mmol，1.92mL，1.3equiv.)。撤除冷却浴，并将混合物搅拌1h。将所述溶液在减压下浓缩，然后用EtOAc(100mL)稀释，并用饱和NH4Cl水溶液(50mL)洗涤。将水层用EtOAc(10mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(硅胶，己烷-EtOAc梯度)，得到作为黄色油状物的4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001673
唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸5-叔丁基3-乙基酯(1.0g，3.37mmol，17.7％得率)。
4,6-二氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001681
步骤1：向亚硝酸钠(2.49g，36.11mmol)在EtOH/H2O(25mL/25mL)中的冷却的(0℃)溶液逐滴添加3,5-二氯-4-氟苯胺(5.0g，27.78mmol)在HCl(conc.，11mL)、H2O(10mL)和EtOH(25mL)中的溶液。在0℃下5min后，一次性添加2-甲基-3-氧代丁酸乙酯(4.41g，30.55mmol)。然后将得到的混合物在3分钟内添加到EtOH(100mL)和KOH水溶液(50％，21mL)的冷却的(-10℃)搅拌的混合物，维持内部温度在-10℃至-5℃之间。在添加完成后，将所述混合物加温至5℃(在～15min内)，然后倾倒在搅拌的饱和NH4Cl水溶液(400mL)中。通过过滤收集沉淀物，用水(100mL)洗涤，并重新溶解在DCM(200mL)中。将得到的溶液在无水硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过快速柱层析进行纯化(硅胶，石油醚/MTBE梯度，MTBE从10-25％)，提供(2Z)-2-[2-(3,5-二氯-4-氟苯基)肼-1-亚基]丙酸乙酯(1.2g，4.09mmol，14.7％得率)。
步骤2：向(2Z)-2-[2-(3,5-二氯-4-氟苯基)肼-1-亚基]丙酸乙酯(1.2g，4.09mmol)在苯(70mL)中的溶液添加4-甲基苯-1-磺酸(1.76g，10.23mmol)。将混合物回流过夜。在冷却至r.t.后，将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，用水和aq Na2CO3洗涤。将混合物在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过快速柱层析进行纯化，得到作为浅黄色粉末的4,6-二氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(140.0mg，507.08μmol，12.4％得率)。
步骤3：向4,6-二氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(140.0mg，507.08μmol)在EtOH(3mL)中的溶液添加氢氧化钠(60.95mg，1.52mmol)在H2O(1mL)中的溶液。将得到的溶液搅拌过夜，然后浓缩。将残留物在水(20mL)与EtOAc(10mL)之间分配。分离水性相，用NaHSO4酸化并用EtOAc(20mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并真空浓缩，给出4,6-二氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸(45.0mg，181.42μmol，35.7％得率)。
2-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)苯甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001691
步骤1：向1-(2-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(3.75g，15.1mmol)在DCM(50mL)中的冷却的(0℃)搅拌的悬液添加二碳酸二叔丁酯(3.3g，15.1mmol)和三乙胺(1.76g，17.36mmol，2.42mL，1.15equiv.)。将反应混合物搅拌过夜并用水(10mL)稀释。分离有机相，用水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色油状物的N-[1-(2-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(3.8g，12.17mmol，80.6％得率)。
步骤2：向氢化钠(730.28mg，30.43mmol)在无水DMF(20mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加N-[1-(2-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(3.8g，12.17mmol)在无水DMF(10mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌30min。将得到的混合物冷却(0℃)，并添加碘代甲烷(3.46g，24.34mmol，1.52mL，2.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将得到的悬液倾倒在冰水中，并将产物用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。将合并的有机萃取液用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并真空浓缩，得到作为黄色油状物的N-[1-(2-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(3.03g，9.29mmol，76.3％得率)。
步骤3：向N-[1-(2-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(1.3g，3.98mmol)在无水DCM(10mL)中的搅拌的溶液添加二氧杂环己烷中的4M HCl(726.24mg，19.92mmol，6.05mL，5.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌10h，然后在减压下浓缩。将残留物用己烷研磨，过滤并干燥，得到作为白色固体的1-(2-溴苯基)-N-甲基环丙-1-胺盐酸盐(970.0mg，3.69mmol，92.7％得率)。
步骤4：向HATU(1.4g，3.69mmol)和5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(987.31mg，3.69mmol)在DMF(10mL)中的冷却的(0℃)搅拌的溶液添加1-(2-溴苯基)-N-甲基环丙-1-胺盐酸盐(969.92mg，3.69mmol)和三乙胺(1.5g，14.78mmol)。将反应混合物搅拌1h，升温至室温并搅拌过夜。将所述混合物倾倒在水(20mL)中，并将产物用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机萃取液用水、碳酸氢钠水溶液洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩，得到作为棕色固体的3-[1-(2-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.8g，89.0％纯度，3.37mmol，91.2％得率)。
步骤5：向3-[1-(2-溴苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.8g，3.79mmol)在EtOH(20mL)中的脱气的溶液添加乙烯基三氟硼酸钾(1.02g，7.58mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(309.44mg，378.92μmol)和三乙胺(3.83g，37.88mmol，5.28mL，10.0equiv.)。将反应混合物在85℃搅拌30h。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将残留物溶解在EtOAc(10mL)中，通过硅胶垫过滤并浓缩。将残留物通过硅胶上的柱层析进行纯化(从MTBE-己烷1:3至MTBE-己烷9:1作为洗脱剂)，得到作为黄色泡沫的3-[1-(2-乙烯基苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(900.0mg，2.13mmol，56.2％得率)。
步骤6：向3-[1-(2-乙烯基苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(900.0mg，2.13mmol)在EtOAc(10mL)和水(5mL)中的溶液添加氧化钌(IV)(14.17mg，106.48μmol)。将反应混合物搅拌30min，然后添加高碘酸钠(1.82g，8.52mmol)。将反应混合物搅拌20h。分离有机相，在硫酸钠上干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到作为黄色固体的3-[1-(2-甲酰基苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(170.0mg，400.48μmol，18.8％得率)。
步骤7：向3-[1-(2-甲酰基苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(170.0mg，400.48μmol)在叔丁醇(2mL)和2-甲基-2-丁烯(1mL)中的冷却的(0℃)溶液缓慢添加亚氯酸钠(46.98mg，519.42μmol)和磷酸二氢钠(95.87mg，799.11μmol)在水(2mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后浓缩。将残留物溶解在水(5mL)中，并用5％aq.HCl酸化至pH 3。将所述混合物用EtOAc(2x5mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(5mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩，得到作为白色泡沫的2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯甲酸(157.0mg，356.42μmol，89.2％得率)。
2-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)吡啶-3-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001721
步骤1：向3-溴-2-氟吡啶(10.0g，56.82mmol)、环丙烷甲腈(11.44g，170.46mmol，12.55mL，3.0equiv.)、4埃分子筛和甲苯(100mL)的冷却的(-5℃)混合物逐滴添加双(三甲基甲硅烷基)氰酸锂(29.47g，176.14mmol，176.14mL，3.1equiv.)。允许反应混合物升温至室温，搅拌1h，然后倾倒在水中并过滤。将所述混合物用EtOAc(2x15mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物在硅胶上通过柱层析进行纯化(己烷-MTBE 4:1作为洗脱剂)，得到作为浅黄色固体的1-(3-溴吡啶-2-基)环丙烷-1-甲腈(6.5g，29.14mmol，51.3％得率)。
步骤2：将1-(3-溴吡啶-2-基)环丙烷-1-甲腈(5.7g，25.55mmol)和硫酸(90％，12mL)的混合物在室温搅拌过夜。将所述混合物倾倒在冷NH3(25％)水溶液中，并混合物浓缩至干。将残留物用无水MeOH(100mL)研磨并过滤。将滤液浓缩，将残留物在真空中干燥，得到作为黄色固体的1-(3-溴吡啶-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(6.0g，24.89mmol，97.4％得率)。
步骤3：将1-(3-溴吡啶-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(1.5g，6.22mmol)溶解在无水t-BuOH(每mmol 20mL)中，添加几滴吡啶并用氩气冲刷。添加四乙酸铅(6.07g，13.69mmol)，并将反应混合物加热回流2h。将混合物冷却至室温，在减压下浓缩，并将残留物用sat.aq.NaHCO3(至pH 8)和EtOAc(30mL)稀释。将两相混合物过滤。将滤液转移到分液漏斗。分离有机相，并将水相用EtOAc(2x15mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(硅胶，EtOAc-己烷5:1)，得到作为黄色固体的N-[1-(3-溴吡啶-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(330.0mg，1.05mmol，16.9％得率)。
步骤4：在氩气下向N-[1-(3-溴吡啶-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(330.21mg，1.05mmol)在无水DMF(3mL)中的冷却的(0℃)搅拌的溶液添加氢化钠(63.25mg，2.64mmol)。将混合物搅拌1h，然后添加碘代甲烷(224.48mg，1.58mmol)。将所述混合物在0℃搅拌1h，升温至室温并搅拌过夜。将所述混合物倾倒在水(10mL)中并用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机萃取液用水、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色油状物的粗品N-[1-(3-溴吡啶-2-基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(240.0mg，733.46μmol，69.6％得率)。所述得到的产物不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤5：向N-[1-(3-溴吡啶-2-基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(239.94mg，733.28μmol)在MeOH(1mL)中的溶液添加conc.HCl(0.2mL)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将所述混合物在减压下浓缩。将残留物在真空下干燥，得到作为棕色固体的1-(3-溴吡啶-2-基)-N-甲基环丙-1-胺二盐酸盐(210.0mg，699.95μmol，95.5％得率)。
步骤6：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(186.84mg，699.04μmol)在DMF(1mL)中的溶液添加HATU(265.8mg，699.04μmol)。将反应混合物搅拌10min，然后添加1-(3-溴吡啶-2-基)-N-甲基环丙-1-胺二盐酸盐(209.73mg，699.04μmol)和三乙胺(353.68mg，3.5mmol)。将得到的混合物搅拌5h，然后倾倒在水(3mL)中并用EtOAc(2x5mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到作为棕色固体的粗品3-[1-(3-溴吡啶-2-基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(300.0mg，629.77μmol，90.1％得率)。所述得到的产物不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤7：在氩气下向3-[1-(3-溴吡啶-2-基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(300.0mg，629.77μmol)在EtOH(5mL)中的溶液添加乙烯基三氟硼酸钾(168.9mg，1.26mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(51.48mg，63.04μmol)和三乙胺(637.95mg，6.3mmol，880.0μL，10.0equiv.)。将反应混合物在85℃搅拌30h，然后冷却至室温并在减压下浓缩。将残留物溶解在EtOAc(10mL)中，通过硅胶垫过滤并浓缩。将残留物通过硅胶上的柱层析进行纯化(从MTBE-己烷1:3至MTBE-己烷9:1作为洗脱剂)，得到作为黄色固体的3-[1-(3-乙烯基吡啶-2-基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(160.0mg，377.8μmol，59.9％得率)。
步骤8：向3-[1-(3-乙烯基吡啶-2-基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(160.0mg，377.8μmol)在EtOAc(1mL)和水(1mL)中的溶液添加氧化钌(IV)(2.52mg，18.92μmol)和高碘酸钠(323.74mg，1.51mmol)。将所述混合物在室温搅拌24h。分离有机相，并将水性相用EtOAc(1mL)萃取。将合并的有机相在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为无色泡沫的3-[1-(3-甲酰基吡啶-2-基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(43.0mg，86.0％纯度，86.91μmol，23％得率)。
步骤9：将3-[1-(3-甲酰基吡啶-2-基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(42.98mg，101.02μmol)溶解在叔丁醇(1mL)和2-甲基-2-丁烯(0.5mL)中。将得到的混合物冷却至0℃，并缓慢添加亚氯酸钠(11.88mg，131.33μmol)和磷酸二氢钠(24.24mg，202.05μmol)在水(1mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌过夜。将所述混合物浓缩，将残留物溶解在水(5mL)中，并用5％aq.HCl酸化至pH 3。将所述混合物用EtOAc(2x5mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(5mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到作为白色泡沫的2-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸(11.0mg，24.92μmol，24.7％得率)。2-[4-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)苯基]乙酸的合成
Figure BDA0003327916790001751
步骤1：向4-(2-羟基乙基)苯甲腈(7.5g，50.96mmol)、叔丁基(氯)二甲基甲硅烷(9.99g，66.25mmol)和三乙胺(10.31g，101.92mmol，14.21mL，2.0equiv.)在DCM(100mL)中的搅拌的溶液添加DMAP(124.52mg，1.02mmol)。将混合物搅拌过夜。将反应混合物用水(2x100mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，并在减压下浓缩，给出作为浅棕色油状物的4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯甲腈(12.8g，48.96mmol，96.1％得率)。
步骤2：向4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯甲腈(999.99mg，3.82mmol)和四(丙-2-基氧基)钛(1.2g，4.21mmol，1.25mL，1.1equiv.)在无水Et2O(30mL)中的冷却的(-70℃)溶液添加乙基溴化镁(1.07g，8.03mmol，2.36mL，2.1equiv.)。将所述溶液搅拌10min，升温至室温，然后添加BF3.OEt2(1.09g，7.65mmol，970.0μL，2.0equiv.)。将混合物搅拌1h，然后添加1N HCl(10mL)和乙醚(20mL)。向得到的两个透明相添加Na2CO3(10％aq，20mL)，然后添加MTBE(100mL)。剧烈搅拌10min后，分离有机相，用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过快速柱层析进行纯化(40g硅胶，MTBE/甲醇，其中甲醇从0～15％)，给出作为浅黄色油状物的1-(4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯基)环丙-1-胺(370.0mg，1.27mmol，33.2％得率)。
步骤3：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(366.74mg，1.37mmol)和三乙胺(277.69mg，2.74mmol，380.0μL，2.0equiv.)在无水DMF(20mL)中的溶液添加HATU(573.89mg，1.51mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加1-(4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯基)环丙-1-胺(200.0mg，686.1μmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将所述混合物在EtOAc(50mL)与水(150mL)之间分配。将合并的有机萃取液用水(2x30mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，得到3-[1-(4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯基)环丙基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(150.0mg，277.38μmol，20.2％得率)。
步骤4：向3-[1-(4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯基)环丙基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(150.11mg，277.58μmol)在无水DMF(5mL)中的溶液添加氢化钠(16.65mg，693.95μmol)。在气体逸出停止后，逐滴添加碘代甲烷(98.5mg，693.95μmol，40.0μL，2.5equiv.)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倾倒在水(50mL)中并用EtOAc(30mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(2x10mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并真空浓缩，给出3-[1-(4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(160.0mg，90.0％纯度，259.55μmol，93.5％得率)。
步骤5：向3-[1-(4-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]乙基苯基)环丙基](甲基)氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(150.0mg，270.37μmol)在THF(10mL)中的溶液添加四丁基氟化铵(141.26mg，540.25μmol，540.0μL，2.0equiv.)。将所述混合物在室温搅拌过夜，然后在EtOAc(20mL)与水(50mL)之间分配。将有机相用水(2x10mL)洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，得到3-(1-[4-(2-羟基乙基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(100.0mg，227.0μmol，84％得率)。
步骤6：将3-(1-[4-(2-羟基乙基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(69.98mg，158.85μmol)、(2,2,6,6-四甲基哌啶-1-基)氧自由基(1.74mg，11.12μmol)、MeCN(20mL)、磷酸二氢钠(76.23mg，635.4μmol)、水(15mL)和氢氧化钠(25.4mg，635.05μmol，250.0μL，4.0equiv.)的混合物加热至35℃。然后在2min内同时添加亚氯酸钠(28.73mg，317.7μmol)水溶液(2mL)和稀释的漂白液(NaClO，1mL，0.5％)。将所述混合物在35℃搅拌过夜。允许混合物冷却至室温并添加水(30mL)。用2NNaOH溶液将pH调整到8.0。通过倾倒在冷(0℃)Na2SO3溶液中将反应淬灭。在室温搅拌30min后，添加MTBE(20mL)。分离有机层并舍弃。添加更多MTBE(30mL)，并将水性层用NaHSO4酸化。分离有机层，用水(10mL)和盐水(150mL)洗涤，然后浓缩，给出粗产物，将其通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的2-[4-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯基]乙酸(15.0mg，33.0μmol，20.8％得率)。
3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001782
唑并[4,5-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001781
步骤1：向1-(4-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(2.0g，8.05mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.93g，8.85mmol)在DCM(50mL)中的溶液逐滴添加三乙胺(895.6mg，8.85mmol)。将得到的混合物在室温搅拌12h，然后将所述混合物转移到分液漏斗。将有机相用水(20mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出N-[1-(4-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(2.0g，6.41mmol，79.6％得率)。
步骤2：将1-(N-boc-氨基)-1-(4-溴苯基)环丙烷(2.0g，6.41mmol)在MeOH(100mL)中，在130℃和50atm CO压力下，使用Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(100mg)作为催化剂羰基化18小时。将得到的混合物冷却并浓缩，并将残留物在水(100mL)与EtOAc(100mL)之间分配。收集有机层，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.5g，5.15mmol，80.4％得率)，其不需另外的纯化用于下一步骤中。
步骤3：向氢化钠(148.24mg，6.18mmol)在无水DMF(15mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.5g，5.15mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止，然后逐滴添加碘代甲烷(1.1g，7.72mmol)。将得到的混合物升温至室温，搅拌过夜，然后倾倒在饱和氯化铵水溶液中。将产物用EtOAc(2x40mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥并浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.2g，3.93mmol，76.3％得率)。
步骤4：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(1.2g，3.93mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL，80mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，然后蒸发至干，给出4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(850.0mg，3.52mmol，89.5％得率)。
步骤5：将5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001792
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(500.6mg，1.87mmol)、HATU(780.49mg，2.05mmol)和三乙胺(471.9mg，4.66mmol，650.0μL，2.5equiv.)在室温下在无水DMF(5mL)中混合。将得到的混合物搅拌10min，然后添加4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(451.05mg，1.87mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后在水(50mL)与EtOAc(50mL)之间分配。分离有机相，在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001793
唑并[4,5-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(486.0mg，1.07mmol，57.2％得率)。
3-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)苯甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001791
步骤1：向1-(3-溴苯基)环丙-1-胺盐酸盐(1.01g，4.05mmol)在无水DCM(10mL)中的冷却的(0℃)悬液添加二碳酸二叔丁酯(882.91mg，4.05mmol)和三乙胺(450.12mg，4.45mmol，620.0μL，1.1equiv.)。将反应混合物搅拌过夜，然后用水(5mL)稀释。分离有机相，用10％H3PO4水溶液和水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩，得到作为棕色油状物的N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.52mmol，87.1％得率)。
步骤2：在氩气下向氢化钠(212.04mg，8.84mmol，1.5equiv.)在无水THF(5mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加N-[1-(3-溴苯基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.53mmol)在THF(2mL)中的溶液。将反应混合物升温至室温并搅拌1h，然后重新冷却至0℃。逐滴添加碘代甲烷(752.4mg，5.3mmol，330.0μL，1.5equiv.)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。将所述混合物用盐水(10mL)稀释并用EtOAc(2x10mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出作为黄色油状物的N-[1-(3-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(700.0mg，2.15mmol，60.7％得率)。
步骤3：向N-[1-(3-溴苯基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(701.88mg，2.15mmol)在MeOH(30mL)中的溶液添加Pd(dppf)Cl2.DCM络合物(175.7mg，215.15μmol)和三乙胺(261.36mg，2.58mmol，360.0μL，1.2equiv.)。将反应混合物在135℃和40atm下羰基化过夜。将得到的混合物冷却并浓缩至干。将残留物通过硅胶上的柱层析进行纯化(己烷:EtOAc 3:1作为洗脱剂)，得到作为无色油状物的3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(380.0mg，1.24mmol，57.8％得率)。
步骤4：向3-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(380.0mg，1.24mmol)在无水DCM(5mL)中的搅拌的溶液添加二氧杂环己烷中的4M HCl(2mL，8mmol)。将反应混合物在室温搅拌5h，然后在减压下浓缩。将残留物用己烷研磨，通过过滤收集产物并空气干燥，得到作为白色固体的3-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(290.0mg，1.2mmol，96.4％得率)。
步骤5：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(210.94mg，789.21μmol)在DMF(0.8mL)中的冷却的(0℃)溶液添加HATU(300.08mg，789.21μmol)。将得到的混合物在室温搅拌5min，然后添加3-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(190.76mg，789.21μmol)和三乙胺(319.44mg，3.16mmol，440.0μL，4.0equiv.)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用盐水稀释。将所述混合物用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出作为棕色油状物的3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(270.0mg，594.03μmol，75.3％得率)。
步骤6：向3-(1-[3-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(270.34mg，594.79μmol)在THF/水/MeOH(2mL/2mL/1mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(74.88mg，1.78mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后浓缩。将残留物溶解在水(5mL)中，并将所述混合物用MTBE(3mL)萃取。分离水性相并用5％aq.HCl酸化至pH 4。将产物用EtOAc(2x5mL)萃取。将合并的有机萃取液在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为黄色固体的3-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯甲酸(220.0mg，499.44μmol，84％得率)。
4-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)苯甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001811
步骤1：向氢化钠(123.54mg，5.15mmol)在无水DMF(10mL)中的冷却的(0℃)悬液逐滴添加4-(1-[(叔丁氧基)羰基]氨基环丙基)苯甲酸甲酯(999.86mg，3.43mmol)在无水DMF(1mL)中的溶液。将得到的混合物搅拌直至气体逸出停止。逐滴添加碘代甲烷(2.44g，17.16mmol)。将得到的混合物加温至r.t.并搅拌过夜。然后将反应混合物倾倒在饱和氯化铵水溶液中。将产物用EtOAc(10mL)萃取两次。将有机相合并，在硫酸钠上干燥并真空浓缩，给出4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(900.0mg，2.95mmol，85.9％得率)。
步骤2：向4-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)苯甲酸甲酯(800.0mg，2.62mmol)添加二氧杂环己烷中的4M HCl(10mL，40mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌过夜，然后浓缩，给出4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(600.0mg，2.48mmol，94.8％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将4-[1-(甲基氨基)环丙基]苯甲酸甲酯盐酸盐(650.0mg，2.69mmol)、HATU(1.12g，2.96mmol)和三乙胺(680.14mg，6.72mmol，940.0μL，2.5equiv.)在室温下在无水DMF(5mL)中混合。将得到的混合物搅拌10分钟，然后添加5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(718.6mg，2.69mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物用水(50mL)稀释。通过过滤收集沉淀物。将滤饼重新溶解在EtOAc(20mL)中，在硫酸钠上干燥并浓缩，给出3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(1.0g，2.2mmol，81.8％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤4：向3-(1-[4-(甲氧基羰基)苯基]环丙基(甲基)氨甲酰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(899.77mg，1.98mmol)在甲醇(10mL)中的溶液添加氢氧化钠(237.54mg，5.94mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌过夜，然后蒸发至干。将残留物在水(5mL)与EtOAc(5mL)之间分配。将水性层用硫酸氢钠(713.02mg，5.94mmol)水溶液(5mL)酸化。通过过滤收集沉淀物，溶解在EtOAc(10mL)中，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干。将残留物通过HPLC进行纯化，给出4-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)苯甲酸(366.0mg，830.89μmol，42％得率)。
6-(1-{N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基}环丙基)吡啶-3-甲酸的合成
Figure BDA0003327916790001831
步骤1：向1-(5-溴吡啶-2-基)环丙-1-胺二盐酸盐(1.0g，3.5mmol)在DCM(10mL)中的冷却的(0℃)溶液添加二碳酸二叔丁酯(763.05mg，3.5mmol)。逐滴添加三乙胺(778.33mg，7.69mmol，1.07mL，2.2equiv.)，并将所述混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物用水稀释并分离有机相。将有机层用水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并在减压下浓缩，给出N-[1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯(930.0mg，2.97mmol，84.9％得率)。
步骤2：向(1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯(930.0mg，2.97mmol)在无水DMF(5mL)中的冷却的(0℃)溶液添加氢化钠(154.45mg，6.44mmol)。将混合物搅拌30min，然后逐滴添加碘代甲烷(632.45mg，4.46mmol)。将反应混合物在r.t.搅拌过夜。将得到的混合物用盐水(10mL)稀释并用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出作为黄色固体的N-[1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(1.0g，90.0％纯度，2.75mmol，92.6％得率)。
步骤3：向N-[1-(5-溴吡啶-2-基)环丙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(997.6mg，3.05mmol)在MeOH(50mL)中的溶液添加与二氯甲烷络合的[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)(248.97mg，304.87μmol)和三乙胺(370.26mg，3.66mmol，510.0μL，1.2equiv.)。将所述混合物在135℃和40atm下羰基化20h。将得到的混合物冷却并浓缩至干。将残留物溶解在EtOAc(20mL)中，并将所述溶液用水(5mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，给出作为棕色固体的6-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(800.0mg，90.0％纯度，2.35mmol，77.1％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤4：向6-(1-[(叔丁氧基)羰基](甲基)氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(800.28mg，2.61mmol)在无水DCM(5mL)中的溶液添加二氧杂环己烷中的4M HCl(4.5mL，10mmol)。将反应混合物搅拌过夜。将得到的混合物在减压下浓缩。得到的固体不需另外纯化用于下一步骤中。
步骤5：向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(606.14mg，2.27mmol)在无水DMF(3mL)中的溶液添加HATU(948.52mg，2.49mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加6-[1-(甲基氨基)环丙基]吡啶-3-甲酸甲酯盐酸盐(550.4mg，2.27mmol)和三乙胺(252.43mg，2.49mmol，350.0μL，1.1equiv.)。将反应混合物搅拌过夜。将得到的混合物在EtOAc(30mL)与水(10mL)之间分配。将有机相用水(2x10mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩。将残留物通过HPLC进行纯化，给出作为棕色泡沫的6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(320.0mg，702.51μmol，31％得率)。
步骤6：向6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸甲酯(320.0mg，702.51μmol)在THF-水(5mL/1mL)中的溶液添加单水氢氧化锂(117.86mg，2.81mmol)。将混合物在r.t.搅拌过夜，然后在减压下浓缩。将残留物溶解在水(5mL)中，并用5％aq.HCl酸化至pH 3。通过过滤收集得到的沉淀物并空气干燥，得到作为浅棕色固体的6-(1-N-甲基-5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰氨基环丙基)吡啶-3-甲酸(195.0mg，441.7μmol，62.9％得率)。
然后将滤液在减压下浓缩，得到6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷(0.8g，6.01mmol，50％得率)。
3-{[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]氨甲酰基}-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003327916790001851
向5-[(叔丁氧基)羰基]-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(804.39mg，3.01mmol)和三乙胺(609.07mg，6.02mmol，840.0μL)在无水DMF(30mL)中的溶液添加HATU(1.22g，3.21mmol)。将得到的混合物搅拌10min，然后添加(2R)-1,1,1-三氟丙-2-胺盐酸盐(300.0mg，2.01mmol)，并继续搅拌过夜。将反应混合物在EtOAc(50mL)与H2O(300mL)之间分配。将有机相用H2O(2x50mL)、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩，给出粘稠的棕色残留物，将其通过HPLC进行纯化，给出3-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]氨甲酰基-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸叔丁酯(353.2mg，974.76μmol，48.6％得率)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.40(d,3H),1.50(s,9H),3.86(m,1H),3.94(m,1H),4.19(m,2H),4.92(m,3H),5.85(m,1H),7.70(s,1H).
LCMS:m/z 363.4
实施例1
2-(3-{4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羰基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001852
唑并[4,5-c]吡啶-5-羰基)-1H-吲哚
Figure BDA0003327916790001861
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001862
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(25mg，0.093mmol)和HATU(42.5mg，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。将其添加到4-氮杂螺[2.4]庚烷盐酸盐(12.45mg，0.093mmol)和三乙胺(0.065mL，0.466mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液。将所述混合物在室温搅拌4小时。通过添加水(0.2mL)将反应淬灭。将混合物用水(35mL)和EtOAc(35mL)稀释。将水层用EtOAc(1x35mL)萃取。将合并的有机层用水(2x20ml)和盐水(20mL)洗涤。将有机层在Na2SO4上干燥并真空浓缩，给出3-(4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001863
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.033g，0.095mmol，102％得率)。
步骤2：将3-(4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001864
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.033g，0.095mmol)在盐酸(4M，在二氧杂环己烷中，5mL，20.00mmol)中搅拌。将混合物在室温搅拌2小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，给出(4-氮杂螺[2.4]庚-4-基)(4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001865
唑并[4,5-c]吡啶-3-基)甲酮盐酸盐。
步骤3：将1H-吲哚-2-甲酸(0.015g，0.095mmol)和HATU(0.043g，0.114mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中将(4-氮杂螺[2.4]庚-4-基)(4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001866
唑并[4,5-c]吡啶-3-基)甲酮盐酸盐(0.027g，0.095mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.066mL，0.476mmol)。5分钟后添加酸溶液。所述混合物变得透明。将混合物在室温搅拌16小时。将反应用水(0.25mL)淬灭，在尼龙滤膜上过滤并直接纯化，给出作为白色固体的(5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001867
唑并[4,5-c]吡啶-3-基)(4-氮杂螺[2.4]庚-4-基)甲酮(0.022g，0.056mmol，59.2％得率)。
Rt(方法A)3.51min，m/z 391[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.25-7.17(m,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.92(s,1H),4.98-4.46(m,2H),4.18-3.94(m,2H),3.90-3.84(m,2H),3.20-2.86(m,2H),1.97-1.83(m,6H),0.61-0.51(m,2H).
实施例2
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-N-[1-(1,3-
Figure BDA0003327916790001872
唑-4-基)环丙基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001873
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001871
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001874
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(25mg，0.093mmol)和HATU(42.5mg，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。将其添加到N-甲基-1-(
Figure BDA0003327916790001875
唑-4-基)环丙-1-胺盐酸盐(17.90mg，0.103mmol)和三乙胺(0.065mL，0.466mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时。通过添加水(0.2mL)将反应淬灭，并用水(35mL)和EtOAc(35mL)稀释。将水层用EtOAc(35mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(2x20ml)和盐水(20mL)洗涤。将有机层在Na2SO4上干燥并真空浓缩，得到3-(甲基(1-(
Figure BDA0003327916790001876
唑-4-基)环丙基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001877
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.035g，0.090mmol，97％得率)。
步骤2：将3-(甲基(1-(
Figure BDA0003327916790001878
唑-4-基)环丙基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001879
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.036g，0.093mmol)在盐酸(4M，在二氧杂环己烷中，5mL，20.00mmol)中搅拌。将所述混合物在室温搅拌2小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，给出N-甲基-N-(1-(
Figure BDA00033279167900018710
唑-4-基)环丙基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA00033279167900018711
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐，其不需进一步纯化直接使用。
步骤3：在小管中将1H-吲哚-2-甲酸(0.015g，0.092mmol)和HATU(0.042g，0.111mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中将N-甲基-N-(1-(
Figure BDA0003327916790001882
唑-4-基)环丙基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001883
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.030g，0.092mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.064mL，0.462mmol)。5分钟后添加酸溶液。所述混合物变得透明。将混合物在室温搅拌16小时。将反应用水(0.25mL)淬灭，在尼龙滤膜上过滤，并通过HPLC进行纯化，给出作为白色固体的5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-N-(1-(
Figure BDA0003327916790001884
唑-4-基)环丙基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001885
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.035g，0.081mmol，88％得率)。
Rt(方法A)3.17min，m/z 432[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71-11.52(m,1H),8.35-8.11(m,1H),8.09-7.92(m,1H),7.69-7.59(m,1H),7.47-7.39(m,1H),7.25-7.16(m,1H),7.11-7.01(m,1H),6.95-6.86(m,1H),5.15-4.33(m,2H),4.22-3.86(m,2H),3.32-3.28(m,1H),3.20-2.90(m,4H),1.41-1.12(m,4H).
实施例3
2-(3-{6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羰基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001886
唑并[4,5-c]吡啶-5-羰基)-1H-吲哚
Figure BDA0003327916790001881
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001887
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(25mg，0.093mmol)和HATU(42.5mg，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将其添加到6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷盐酸盐(17.39mg，0.103mmol)和三乙胺(0.065mL，0.466mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时，然后通过添加水(0.2mL)进行淬灭。将混合物用水(35mL)和EtOAc(35mL)稀释。将水层用EtOAc(35mL)萃取。将合并的有机萃取液用水(2x20ml)和盐水(20mL)洗涤。将有机层在Na2SO4上干燥并真空浓缩，给出3-(6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001891
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.034g，0.089mmol，95％得率)。
步骤2：将3-(6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚烷-4-羰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001892
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.034g，0.089mmol)在盐酸(4M，在二氧杂环己烷中，5mL，20.00mmol)搅拌。将所述混合物在室温搅拌2小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，给出(6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-4-基)(4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001893
唑并[4,5-c]吡啶-3-基)甲酮盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将1H-吲哚-2-甲酸(0.014g，0.088mmol)和HATU(0.040g，0.105mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将(6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-4-基)(4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001894
唑并[4,5-c]吡啶-3-基)甲酮盐酸盐(0.028g，0.088mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.061mL，0.438mmol)。5分钟后添加酸溶液。将所述混合物在室温搅拌4小时，然后用水(0.25mL)淬灭，在尼龙滤膜上过滤。将产物通过HPLC直接纯化，给出作为白色固体的(5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001895
唑并[4,5-c]吡啶-3-基)(6,6-二氟-4-氮杂螺[2.4]庚-4-基)甲酮(0.017g，0.040mmol，45.5％得率)。
Rt(方法A)3.6min，m/z 427[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),7.65(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.20(ddd,J＝8.1,6.9,1.2Hz,1H),7.06(dd,J＝8.0,6.7Hz,1H),6.92(s,1H),4.93-4.56(m,2H),4.36(t,J＝12.9Hz,2H),4.13-3.93(m,2H),3.15-2.93(m,2H),2.61-2.53(m,2H),2.05-1.82(m,2H),0.77-0.67(m,2H).
实施例4
5-(4-乙基-6-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[1-(甲氧基甲基)环丙基]-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001902
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001901
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001903
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(0.2g，0.746mmol)和HATU(0.340g，0.895mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将该混合物添加到1-(甲氧基甲基)-N-甲基环丙-1-胺盐酸盐(0.124g，0.820mmol)和三乙胺(0.520mL，3.73mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时，然后通过添加水(0.2mL)进行淬灭。将产物通过HPLC直接纯化，给出3-((1-(甲氧基甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001904
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.211g，0.577mmol，77％得率)。
步骤2：将3-((1-(甲氧基甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001905
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.211g，0.577mmol)在二氧杂环己烷中的4N盐酸(5mL，20.00mmol)中搅拌。将所述混合物在室温搅拌2小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，得到N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001906
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将4-乙基-6-氟-1H-吲哚-2-甲酸(0.024g，0.116mmol)和HATU(0.053g，0.139mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001907
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.035g，0.116mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.081mL，0.580mmol)。5分钟后添加酸溶液。将所述混合物在室温搅拌2小时。将反应用水(0.25mL)淬灭。将产物通过HPLC直接纯化，给出5-(4-乙基-6-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001908
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.029g，0.064mmol，55.0％得率)。
Rt(方法A)3.61min，m/z 455[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),7.02-6.93(m,2H),6.78(dd,J＝10.8,2.3Hz,1H),4.97-4.35(m,2H),4.17-3.79(m,2H),3.28-3.15(m,4H),3.12-2.99(m,4H),2.89(q,J＝7.5Hz,2H),1.31-1.24(m,3H),0.95-0.64(m,4H).
实施例5
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-[1-(甲氧基甲基)环丙基]-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001912
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001911
Rt(方法A)3.49min，m/z 443/445[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),7.41(dd,J＝8.0,2.7Hz,1H),7.24-7.12(m,2H),6.89(s,1H),4.99-4.48(m,2H),4.19-3.92(m,2H),3.28-3.16(m,4H),3.05(s,4H),0.94-0.71(m,4H).
将4-氯-1H-吲哚-2-甲酸(0.023g，0.116mmol)和HATU(0.053g，0.139mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001913
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.035g，0.116mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.081mL，0.580mmol)。5分钟后添加酸溶液。将混合物在室温搅拌2小时。将反应用水(0.25mL)淬灭，并通过HPLC直接纯化，得到5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001914
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.031g，0.070mmol，60.3％得率)。
实施例6
5-(4,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[1-(甲氧基甲基)环丙基]-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001923
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001921
将4,6-二氟-1H-吲哚-2-甲酸(0.023g，0.116mmol)和HATU(0.053g，0.139mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001924
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.035g，0.116mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.081mL，0.580mmol)。5分钟后添加酸溶液。将混合物在室温搅拌2小时。将反应用水(0.25mL)淬灭，并通过HPLC直接纯化，给出5-(4,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001925
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.036g，0.081mmol，69.8％得率)。
Rt(方法A)3.44min，m/z 445[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),7.07-6.97(m,2H),6.92(td,J＝10.4,2.1Hz,1H),5.06-4.32(m,2H),4.27-3.81(m,2H),3.28-3.17(m,4H),3.12-2.96(m,4H),1.02-0.64(m,4H).
实施例7
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-[1-(甲氧基甲基)环丙基]-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001926
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001922
将1H-吲哚-2-甲酸(0.019g，0.116mmol)和HATU(0.053g，0.139mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001927
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.035g，0.116mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.081mL，0.580mmol)。5分钟后添加酸溶液。将混合物在室温搅拌2小时。将反应用水(0.25mL)淬灭并通过HPLC直接纯化，给出5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-(1-(甲氧基甲基)环丙基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001932
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.037g，0.091mmol，78％得率)。
Rt(方法A)3.28min，m/z 409[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.92(s,1H),5.03-4.37(m,2H),4.16-3.95(m,2H),3.29-3.15(m,4H),3.13-2.92(m,4H),0.94-0.69(m,4H).
实施例8
N-[1-(羟基甲基)环丙基]-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001933
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001931
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001934
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(40mg，0.149mmol)溶解在二甲基亚砜(无水)(0.5mL)中并添加HATU(62.4mg，0.164mmol)。将混合物搅拌10min。在单独的小管中，将苯甲酸(1-(甲基氨基)环丙基)甲基酯盐酸盐(36.0mg，0.149mmol)溶解在二甲基亚砜(无水)(0.500mL)中，并添加三乙胺(0.104mL，0.746mmol)。将所述混合物合并并搅拌1h。将反应混合物在10mL EtOAc与10mL水之间分配。添加NaCl和一些盐水以分离所述层。进行层分离，并将水性层用EtOAc(10mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(4x10 mL)，用Na2SO4干燥并浓缩，给出3-((1-((苯甲酰氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001935
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(64mg，0.124mmol，83％得率)。
步骤2：将3-((1-((苯甲酰氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001941
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(64mg，0.124mmol)溶解在HCl(4M，在二氧杂环己烷中)(1mL，4.00mmol)中，并将混合物搅拌1h。将反应混合物浓缩，并用DCM汽提，给出苯甲酸(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001942
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将吲哚-2-甲酸(19.74mg，0.122mmol)溶解在二甲基亚砜(无水)(0.5mL)中，并添加HATU(51.2mg，0.135mmol)。在单独的小管中，将苯甲酸(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001943
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯盐酸盐(48mg，0.122mmol)溶解在二甲基亚砜(无水)(0.500mL)中，并添加三乙胺(0.085mL，0.612mmol)。添加一滴水，并将所述混合物通过HPLC进行纯化，给出苯甲酸(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001944
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯(30mg，0.060mmol，49.1％得率)。
步骤4：将苯甲酸(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001945
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯(20.5mg，0.041mmol)溶解在四氢呋喃(0.5mL)中，并添加单水氢氧化锂(6.90mg，0.164mmol)在水(0.500mL)中的溶液。将所述混合物在60℃搅拌2.5h。将反应混合物用1M HCl(0.15mL)中和，并通过HPLC进行纯化，给出N-(1-(羟基甲基)环丙基)-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001946
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(4.1mg，10.39μmol，25.3％得率)
Rt(方法A)2.94min，m/z 395[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),7.70-7.59(m,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.98-6.89(m,1H),5.06-3.51(m,7H),3.24-3.18(m,1H),3.16-2.94(m,4H),0.92-0.62(m,4H).
实施例9
苯甲酸{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001953
唑并[4,5-c]吡啶-3-amido]环丙基}甲基酯
Figure BDA0003327916790001951
将吲哚-2-甲酸(19.74mg，0.122mmol)溶解在二甲基亚砜(无水)(0.5mL)中，并添加HATU(51.2mg，0.135mmol。在单独的小管中，将苯甲酸(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001954
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯盐酸盐(48mg，0.122mmol)溶解在二甲基亚砜(无水)(0.500mL)中，并添加三乙胺(0.085mL，0.612mmol)。添加一滴水，并将混合物通过HPLC进行纯化，给出苯甲酸(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001955
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯(30mg，0.060mmol，49.1％得率)。
Rt(方法A)3.72min，m/z 399[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),8.02-7.95(m,2H),7.72-7.59(m,2H),7.58-7.48(m,2H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.17(m,1H),7.10-7.03(m,1H),6.96-6.85(m,1H),5.28-3.85(m,6H),3.27-3.24(m,1H),3.17-2.95(m,4H),1.16-0.85(m,4H).
实施例10
N-环丙基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001956
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001952
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001957
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(0.025g，0.093mmol)和HATU(0.043g，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将该混合物添加到环丙胺(6.46μL，0.093mmol)和三乙胺(0.065mL，0.466mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时。添加另外的环丙胺(5.32mg，0.093mmol)。将混合物继续搅拌1小时。通过添加水(0.2mL)将反应淬灭，并通过HPLC直接纯化，给出3-(环丙基氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001961
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.028g，0.091mmol，98％得率)。
步骤2：将3-(环丙基氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001962
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.028g，0.091mmol)在盐酸(4M，在二氧杂环己烷中，5mL，20.00mmol)中搅拌。将所述混合物在室温搅拌2小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，给出N-环丙基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001963
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将1H-吲哚-2-甲酸(0.015g，0.090mmol)和HATU(0.041g，0.108mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将N-环丙基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001964
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.022g，0.090mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.063mL，0.451mmol)。5分钟后添加酸溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时。将反应用水(0.25mL)淬灭。将产物通过HPLC直接纯化，给出N-环丙基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001965
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.013g，0.037mmol，41.1％得率)。
Rt(方法A)3.1min，m/z 351[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),8.89(d,J＝4.0Hz,1H),7.65(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.93(s,1H),5.04-4.67(m,2H),4.20-3.89(m,2H),3.18-2.76(m,3H),0.88-0.44(m,4H).
实施例11
N-环丙基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790001966
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790001971
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001972
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(0.025g，0.093mmol)和HATU(0.043g，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将该溶液添加到N-环丙基-甲胺盐酸盐(10.03mg，0.093mmol)和三乙胺(0.065mL，0.466mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(无水)(1mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌16小时，然后通过添加水(0.2mL)淬灭。将产物通过HPLC直接纯化，给出3-(环丙基(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001973
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.033g，0.103mmol，110％得率)。
步骤2：将3-(环丙基(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790001974
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.033g，0.103mmol)在盐酸(4M，在二氧杂环己烷中，5mL，20.00mmol)中搅拌。将所述混合物在室温搅拌2小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，给出N-环丙基-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001975
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将1H-吲哚-2-甲酸(0.016g，0.101mmol)和HATU(0.046g，0.121mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。在单独的小管中，将N-环丙基-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001976
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.026g，0.101mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.070mL，0.504mmol)。5分钟后添加酸溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时，然后用水(0.25mL)淬灭。将产物通过HPLC直接纯化，给出N-环丙基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790001977
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(0.029g，0.080mmol，79％得率)。
Rt(方法A)3.16min，m/z 365[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),7.64(d,J＝8.1Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.5Hz,1H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.93(s,1H),4.92-4.53(m,2H),4.17-3.95(m,2H),3.15-2.80(m,6H),0.85-0.48(m,4H).
实施例12
4-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790001981
步骤1：将4-(1-(5-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(100mg，0.227mmol)溶解在HCl(4M，在二氧杂环己烷中)(1.419mL，5.68mmol)中，并将得到的浅棕色溶液在rt搅拌。1h后进行LCMS。添加另外的二氧杂环己烷(0.3mL)，并将混合物继续搅拌1h。将反应混合物用二氧杂环己烷(6mL)稀释并浓缩。与甲苯(2x6mL)共蒸发，给出作为灰白色固体的4-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：向1H-吲哚-2-甲酸(20.53mg，0.127mmol)在二甲基亚砜(0.6mL)中的溶液添加HATU(53.3mg，0.140mmol)。将得到的溶液在r.t.搅拌45min。然后添加4-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸盐酸盐(48mg，0.127mmol)和三乙胺(0.089mL，0.637mmol)在二甲基亚砜(0.6mL)中的混合物，并将所述混合物在r.t.搅拌5天。然后将反应混合物过滤并通过HPLC直接纯化，给出作为白色固体的4-(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(0.015g，24％得率)。
Rt(方法A)2.45min，m/z 484[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(d,J＝2.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.0Hz,2H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.26-7.19(m,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,2H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.95(s,2H),5.22(s,2H),4.27(m,3H),4.09(s,1H),3.57(s,1H),3.04(s,2H),1.62(m,2H),1.42(m,2H).
实施例13
3-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790001991
步骤1：将3-(1-(5-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(112mg，0.254mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(1.6mL，6.40mmol)中，并得到的溶液在r.t.搅拌4h。将反应混合物用二氧杂环己烷(4mL)稀释并浓缩。将残留物与甲苯(2x10mL)共蒸发，给出作为灰白色固体的3-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸盐酸盐(0.085g，89％得率)。
步骤2：向1H-吲哚-2-甲酸(18.18mg，0.113mmol)在二甲基亚砜(0.6mL)中的溶液添加HATU(47.2mg，0.124mmol)。将得到的溶液在r.t.搅拌45min。逐滴添加3-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸盐酸盐(42.5mg，0.113mmol)在二甲基亚砜(0.7mL)中的溶液，然后添加三乙胺(0.079mL，0.564mmol)。将得到的混合物在r.t.搅拌20h。将反应混合物过滤并通过HPLC直接纯化，给出3-(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(0.0105g，19％得率)。
Rt(方法A)2.5min，m/z 484[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),7.79(d,J＝7.6Hz,1H),7.73-7.54(m,2H),7.54-7.35(m,2H),7.33-7.14(m,2H),7.14-6.85(m,3H),5.44-4.93(m,2H),4.47-3.94(m,4H),3.16-2.94(m,3H),1.70-1.22(m,4H).
实施例14
12'-(1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮的合成
Figure BDA0003327916790002001
步骤1：将(1-(羟基甲基)环丙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.739g，3.67mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)中。向其添加三乙胺(0.768mL，5.51mmol)和DMAP(0.045g，0.367mmol)。将所述混合物冷却至0℃，并添加苯甲酰氯(0.511mL，4.41mmol)。将所述混合物在0℃搅拌30分钟，并在室温搅拌1小时。将所述混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭。将水性层用CH2Cl2萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤。将有机层在Na2SO4上干燥，在真空中浓缩，然后通过柱层析进行纯化，给出苯甲酸(1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环丙基)甲基酯(0.982g，3.22mmol，88％得率)。
步骤2：将苯甲酸(1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环丙基)甲基酯(0.982g，3.22mmol)溶解在无水1,4-二氧杂环己烷(25mL)中。向其添加HCl(4M，在二氧杂环己烷中，25mL，100mmol)。将所述混合物在室温搅拌3小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2、甲苯和CH2Cl2汽提，给出作为白色固体的苯甲酸(1-(甲基氨基)环丙基)甲基酯盐酸盐(0.761g，3.15mmol，98％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤3：将5-(叔丁氧基羰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4,5,6,7-四氢-1H吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(1.252g，3.15mmol)和苯甲酸(1-(甲基氨基)环丙基)甲基酯盐酸盐(0.761g，3.15mmol)溶解在吡啶(20mL)中。将所述混合物用盐/冰浴冷却至-12℃。向其添加POCl3(0.587mL，6.30mmol)。将混合物搅拌3小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用庚烷汽提(两次)。将固体溶解在CH2Cl2中，并用1M KHSO4(两次)和盐水洗涤。将有机层在Na2SO4上干燥并真空浓缩。将产物通过柱层析进行纯化，给出作为无色油状物的3-((1-((苯甲酰氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(1.335g，2.283mmol，72.5％得率)。
步骤4：将3-((1-((苯甲酰氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(1.335g，2.283mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL，80mmol)中并搅拌16小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，得到苯甲酸(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯二盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤5：将苯甲酸(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)甲基酯二盐酸盐(0.976g，2.284mmol)悬浮在二氯甲烷(30mL)中。向其添加三乙胺(0.700mL，5.02mmol)。向其添加Boc-酸酐(0.583mL，2.51mmol)。将所述混合物在室温搅拌1.5小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液淬灭，将产物用CH2Cl2萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥并真空浓缩。将产物通过柱层析进行纯化，给出作为白色泡沫的3-((1-((苯甲酰氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.846g，1.861mmol，81％得率)。
步骤6：将3-((1-((苯甲酰氧基)甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.846g，1.861mmol)溶解在四氢呋喃(15mL)中。向其添加水(15mL)，然后添加单水氢氧化锂(0.234g，5.58mmol)。将所述混合物在室温搅拌16小时。将混合物用1M HCl(5.58mL，5.58mmol)酸化，然后在真空下浓缩。将残留物用甲苯汽提，然后通过HPLC进行纯化，给出3-((1-(羟基甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.523g，1.492mmol，80％得率)。
步骤7：将3-((1-(羟基甲基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.523g，1.492mmol)溶解在无水四氢呋喃(60mL)中。向其添加三苯基膦(0.509g，1.940mmol)。逐滴添加DIAD(0.377mL，1.940mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的溶液。然后将所述混合物在80℃搅拌2小时。将混合物倾倒在水(20mL)中并用EtOAc(2x20mL)萃取，将合并的有机萃取液用盐水洗涤(30mL)。将有机层在Na2SO4上干燥并真空浓缩，给出9'-甲基-10'-氧代-3',4',9',10'-四氢-7'H螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤8：将9'-甲基-10'-氧代-3',4',9',10'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(0.496g，1.492mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(20mL，80mmol)中。将所述混合物在室温搅拌16小时。在真空中蒸发掉溶剂。将残留物悬浮在CH2Cl2中。过滤出固体，用CH2Cl2(两次)和EtOAc洗涤(除去残留的TPPO)。将所述固体在真空中干燥，给出作为白色固体的9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐(0.366g，1.362mmol，91％得率)。
步骤9：将9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐(0.030g，0.112mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.078mL，0.558mmol)。在单独的小管中，将HATU(0.051g，0.134mmol)和1H-吲哚-2-甲酸(0.018g，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。将该溶液添加到前一种溶液。将所述混合物在室温搅拌16小时。将混合物用水(0.250mL)淬灭。将溶液过滤，并将滤膜用DMSO(0.2mL)漂洗。将产物通过HPLC进行纯化，给出2'-(1H-吲哚-2-羰基)-9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮(0.040g，0.107mmol，95％得率)。
Rt(方法A)2.9min，m/z 376[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.60(d,J＝2.2Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.19(ddd,J＝8.1,6.9,1.2Hz,1H),7.09-7.01(m,1H),6.88(s,1H),5.10-4.72(m,2H),4.27-4.12(m,2H),4.10-3.87(m,2H),2.95-2.68(m,5H),1.24-1.11(m,2H),0.95-0.82(m,2H).
实施例15
12'-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002031
步骤1：将9'-甲基-10'-氧代-3',4',9',10'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(0.020g，0.060mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(5mL，20.00mmol)中。将混合物在室温搅拌2小时。然后在真空中除去溶剂。将残留物用CH2Cl2汽提(两次)，给出9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2：将9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐(0.016g，0.060mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.041mL，0.298mmol)。在单独的小管中，将HATU(0.027g，0.071mmol)和6-氯-5-氟-1H吲哚-2-甲酸(0.013g，0.060mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(无水)(1mL)中搅拌10分钟。然后将该溶液前驾到前一种溶液，将混合物在室温搅拌3小时。将混合物用水(0.250mL)淬灭。将溶液过滤，并将滤膜用DMSO(1mL)漂洗。将产物通过HPLC进行纯化，给出2'-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮(0.005g，0.012mmol，19.63％得率)。
Rt(方法A)3.19min，m/z 428/430[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.90(s,1H),7.66(d,J＝10.0Hz,1H),7.55(d,J＝6.5Hz,1H),6.92(s,1H),5.19-4.67(m,2H),4.28-4.15(m,2H),4.10-3.87(m,2H),2.96-2.71(m,5H),1.27-1.10(m,2H),0.98-0.82(m,2H).
实施例16
4'-甲基-12'-(4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002041
将9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐(0.030g，0.112mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(无水)(1mL)中。向其添加三乙胺(0.078mL，0.558mmol)。在单独的小管中，将HATU(0.051g，0.134mmol)和4-甲基-1H-吲哚-2-甲酸(0.020g，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将该溶液添加到前一种溶液。将混合物在室温搅拌16小时，然后用水(0.250mL)淬灭。添加DMSO(1mL)并将产物通过HPLC进行纯化，给出9'-甲基-2'-(4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮(0.037g，0.095mmol，85％得率)。
Rt(方法A)3.02min，m/z 390[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.57(d,J＝2.3Hz,1H),7.24(d,J＝8.3Hz,1H),7.08(dd,J＝8.3,7.0Hz,1H),6.91-6.81(m,2H),5.05-4.81(m,2H),4.24-4.16(m,2H),4.07-3.93(m,2H),2.94-2.69(m,5H),1.23-1.12(m,2H),0.94-0.85(m,2H)。一个信号(3H)与DMSO相一致。
实施例17
12'-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002051
将9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐(0.030g，0.112mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.078mL，0.558mmol)。在单独的小管中，将HATU(0.051g，0.134mmol)和4-氯-1H-吲哚-2-甲酸(0.022g，0.112mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将该溶液添加到前一种溶液。将混合物在室温搅拌16小时，然后用水(0.250mL淬灭。将溶液过滤并用DMSO(1mL)冲洗。将产物通过HPLC直接纯化，给出2'-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮(0.040g，0.098mmol，87％得率)。
Rt(方法A)3.12min，m/z 410/412[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),7.41(d,J＝8.1Hz,1H),7.24-7.12(m,2H),6.85(s,1H),5.14-4.76(m,2H),4.26-4.13(m,2H),4.07-3.90(m,2H),2.93-2.68(m,5H),1.24-1.11(m,2H),0.94-0.83(m,2H).
实施例18
12'-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002061
将9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮盐酸盐(0.030g，0.112mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加三乙胺(0.078mL，0.558mmol)。在单独的小管中，将HATU(0.051g，0.134mmol)和5-氟-4-甲基-1H吲哚-2-甲酸(0.010g，0.052mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10分钟。然后将该溶液添加到前一种溶液。将混合物在室温搅拌16小时。然后将混合物用水(0.250mL)淬灭，并将溶液过滤，用DMSO(1mL)冲洗。将产物通过HPLC直接纯化，给出2'-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-9'-甲基-1',2',3',4'-四氢-7'H-螺[环丙烷-1,8'吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪]-10'(9'H)-酮(0.015g，0.037mmol，33.0％得率)。
Rt(方法A)3.08min，m/z 408[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(d,J＝2.0Hz,1H),7.24(dd,J＝8.8,4.2Hz,1H),7.01(dd,J＝10.2,8.9Hz,1H),6.92(d,J＝2.1Hz,1H),5.01-4.82(m,2H),4.24-4.15(m,2H),4.05-3.94(m,2H),2.92-2.69(m,5H),2.43-2.37(m,3H),1.23-1.14(m,2H),0.93-0.84(m,2H).
实施例19
6-{1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}吡啶-3-甲酸
Figure BDA0003327916790002071
将1H-吲哚-2-甲酸(18.86mg，0.117mmol)和HATU(44.5mg，0.117mmol)在二甲基亚砜(0.6mL)中的溶液在rt搅拌1h，然后添加三乙胺(0.082mL，0.585mmol)，然后添加6-(1-(4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)烟酸盐酸盐(42.6mg，0.117mmol)在二甲基亚砜(0.6mL)中的溶液。将反应混合物搅拌过夜，然后过滤，并通过基本制备HPLC直接纯化，给出作为灰白色蓬松固体的所需产物(36mg，65％得率)。
Rt(方法A2)2.47min，m/z 471[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.98(s,1H),8.89(d,J＝2.1Hz,1H),8.26-7.91(m,2H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.54-7.32(m,2H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.05(t,J＝7.5Hz,1H),6.94(s,1H),5.39-4.96(m,2H),4.43-4.08(m,4H),1.67-1.49(m,2H),1.37-1.18(m,2H).
实施例20
2-{1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002072
步骤1：将3-((1-(5-(甲氧基羰基)嘧啶-2-基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸叔丁酯(73mg，0.160mmol)悬浮在四氢呋喃(1mL)中，并添加单水氢氧化锂(42.0mg，1mmol)在水(1mL)中的溶液，将混合物在60℃搅拌1h。在冷却至r.t.后，添加1M HCl(2mL)，然后添加水(10mL)，并将所述混合物用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，得到作为白色固体的2-(1-(5-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸(60mg，85％得率)。
步骤2：将2-(1-(5-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸(60mg，0.136mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(1mL，4.00mmol)中，并将混合物搅拌过夜。将悬液浓缩并用二氯甲烷汽提，得到作为灰白色固体的2-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸盐酸盐(43mg，85％得率)。
步骤3：将吲哚-2-甲酸(11.93mg，0.074mmol)溶解在DMSO(400μL)中并添加Et3N(25.8μL，0.185mmol)，然后添加HATU(28.1mg，0.074mmol)。将所述混合物搅拌1h。在单独的小管中，将2-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸盐酸盐(28.0mg，0.074mmol)溶解在DMSO(400μL)中，并添加Et3N(25.8μL，0.185mmol)。将反应混合物搅拌过夜，然后过滤，用MeOH冲洗，使用制备HPLC进行纯化，得到作为白色固体的2-(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸(6.7mg，18％得率)。
Rt(方法A2)2.45min，m/z 472[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.96(d,J＝32.6Hz,3H),8.12(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.28-7.00(m,3H),6.93(s,1H),5.38-4.95(m,2H),4.27(d,J＝28.2Hz,4H),1.73-1.55(m,2H),1.41-1.27(m,2H).
实施例21
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-(2-羟基乙基)-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002093
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002091
Rt 3.00min(方法A)[M+H]＝403.1/405.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),7.41(d,J＝7.9Hz,1H),7.24-7.13(m,2H),6.89(s,1H),4.90-4.60(m,3H),4.15-3.96(m,2H),3.65-3.45(m,4H),3.23(s,1H),3.13-2.91(m,4H).
实施例22
N-(2-羟基乙基)-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002094
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002092
Rt 2.80min(方法A)[M+H]＝369.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),7.64(d,J＝8.1Hz,1H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.21(t,J＝7.5Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.92(s,1H),4.87-4.59(m,3H),4.16-3.97(m,2H),3.68-3.42(m,4H),3.23(s,1H),3.13-2.91(m,4H).
实施例23
5-(4,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-(2-羟基乙基)-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002095
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002101
Rt 2.96min(方法A)[M+H]＝405.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.10(s,1H),7.08-6.85(m,3H),4.91-4.55(m,3H),4.17-3.92(m,2H),3.69-3.42(m,4H),3.23(s,1H),3.15-2.87(m,4H).
实施例24
2-({1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-基]-N-甲基甲酰胺基}甲基)苯甲酸
Figure BDA0003327916790002102
Rt 3.01min(方法B)[M+H]＝458.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.06(m,2H),11.64(s,1H),7.89(d,J＝7.4Hz,1H),7.63(d,J＝8.9Hz,1H),7.31(m,5H),7.07(m,1H),6.89(s,1H),5.50(m,1H),5.00(m,3H),4.01(m,3H),3.39(m,1H),2.92(m,4H).
实施例25
2-[3-(3,3-二氟吡咯烷-1-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002103
唑并[4,5-c]吡啶-5-羰基]-1H-吲哚
Figure BDA0003327916790002111
Rt 3.36min(方法A)[M+H]＝401.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.21(ddd,J＝8.0,6.9,1.2Hz,1H),7.07(ddd,J＝8.1,7.0,1.0Hz,1H),6.92(s,1H),5.13-4.51(m,2H),4.32-3.65(m,6H),3.19-2.94(m,2H),2.49-2.36(m,2H).
实施例26
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-N-[(吡啶-2-基)甲基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002113
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002112
实施例27–故意留空
实施例28–故意留空
实施例29
2-{1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002121
Rt 2.45min(方法A2)[M+H]+472.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.96(d,J＝32.6Hz,3H),8.12(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.28-7.00(m,3H),6.93(s,1H),5.38-4.95(m,2H),4.27(d,J＝28.2Hz,4H),1.73-1.55(m,2H),1.41-1.27(m,2H).
实施例30
2-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002122
Rt 2.54min(方法A2)[M+H]+484.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.07-7.15(m,7H),7.08(t,J＝7.5Hz,1H),6.95(s,1H),5.37-4.76(m,2H),4.43-4.05(m,4H),3.19(s,3H),1.64-0.99(m,4H).
实施例31
6-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}吡啶-3-甲酸
Figure BDA0003327916790002131
步骤1：将6-(1-(5-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)烟酸(100mg，0.227mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(2mL，8.00mmol)中，并将得到的棕色悬液在r.t.搅拌1h。将反应混合物蒸发，并将残留物与甲苯(2x10mL)共蒸发，给出作为浅棕色固体的6-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)烟酸盐酸盐(86mg，定量得率)。
步骤2：向1H-吲哚-2-甲酸(18mg，0.114mmol)在DMSO(0.5mL)中的溶液添加HATU(43.3mg，0.114mmol)，并将得到的浅棕色溶液在r.t.搅拌。1h后，添加Et3N(0.079mL，0.569mmol)，然后添加6-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)烟酸盐酸盐(43mg，0.114mmol)在DMSO(0.6mL)中的溶液。将反应混合物搅拌1h，然后通过微滤膜过滤并使用制备HPLC直接纯化，给出作为固体的产物(22mg，40％得率)。
Rt 2.57min(方法A2)[M+H]+485.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),9.06-8.89(m,1H),8.27-8.03(m,1H),7.74-7.57(m,1H),7.53-7.14(m,3H),7.08(t,J＝7.5Hz,1H),6.95(s,1H),6.85(s,1H),5.41-4.93(m,2H),4.44-3.96(m,4H),3.07(s,3H),1.99-1.77(m,1H),1.77-1.20(m,3H).
实施例32
3-{1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002141
Rt 3.35min(方法B2)[M+H]＝470.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.69(s,1H),8.91(s,1H),8.12(s,1H),7.77(s,1H),7.74-7.67(m,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.39-7.26(m,2H),7.24-7.16(m,1H),7.05(t,J＝7.5Hz,1H),6.93(s,1H),5.41-4.92(m,2H),4.41-4.09(m,4H),1.24(s,4H).一个信号(1H)与水信号相一致。
实施例33
3-{1-[N-甲基-5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002142
步骤1：将3-(1-(5-(叔丁氧基羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(0.050g，0.114mmol)悬浮在二氧杂环己烷中的4M HCl(1mL，4.00mmol)中，并将得到的白色悬液在r.t搅拌过夜。将反应混合物浓缩，并与MeOH(2x5mL)和二氯甲烷(2x5mL)共蒸发，得到作为黄色固体的3-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸盐酸盐(45mg，定量得率)。
步骤2：将6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸(0.024g，0.114mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(0.75mL)中，并添加HATU(0.046g，0.120mmol)。将混合物搅拌30min。将得到的溶液添加到3-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸盐酸盐(0.043g，0.114mmol)和Et3N(0.079mL，0.570mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.75mL)中的悬液，并将所述混合物在r.t.搅拌过夜。将反应混合物通过微滤膜过滤并通过制备HPLC进行纯化，得到白色蓬松固体(5mg，7％得率)。
Rt 2.91min(方法A2)[M+H]+536.0/538.0
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.94(s,1H),7.83–7.75(m,1H),7.74–7.64(m,1H),7.62(s,1H),7.57(d,J＝6.4Hz,1H),7.53–7.41(m,1H),7.32–7.15(m,1H),7.06–6.85(m,2H),5.51–4.88(m,2H),4.42–3.92(m,4H),3.04(s,3H),1.71–1.29(m,4H)-未观察到来自于羧酸的质子。
实施例34
4-({1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}甲基)苯甲酸
Figure BDA0003327916790002151
Rt 2.66min(方法A2)[M+H]+498.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.74(s,1H),7.94-7.59(m,4H),7.45(d,J＝8.2Hz,1H),7.39-7.14(m,3H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.96(s,1H),5.39-4.85(m,2H),4.42-4.05(m,4H),2.98-2.54(m,5H),1.30-0.64(m,4H).
实施例35
3-{1-[N-甲基-5-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002161
Rt 2.84min(方法A2)[M+H]+516.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.69-12.22(m,1H),11.95-11.53(m,1H),7.86-7.75(m,1H),7.63(s,1H),7.56-7.39(m,1H),7.26(dd,J＝8.9,4.3Hz,2H),7.13-6.85(m,3H),5.41-4.93(m,2H),4.45-3.98(m,4H),3.04(s,3H),2.42(s,3H),1.67-1.30(m,4H)-几乎没有观察到羧酸的质子。
实施例36
2-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-4-甲酸
Figure BDA0003327916790002162
Rt 2.49min(方法A2)[M+H]+486.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.48(s,1H),8.73(s,1H),7.72-7.36(m,3H),7.28-6.78(m,4H),5.24-5.06(m,2H),4.35-3.93(m,4H),1.92-1.39(m,4H)-观察到构象异构体的混合物。
实施例37
12'-(4-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002171
Rt 3.34min(方法B2)[M+H]+394.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.01(s,1H),7.27(d,J＝8.2Hz,1H),7.18(td,J＝8.0,5.2Hz,1H),6.92(s,1H),6.85(dd,J＝10.8,7.6Hz,1H),5.31-4.62(m,2H),4.29-4.15(m,2H),4.11-3.88(m,2H),3.00-2.71(m,5H),1.25-1.15(m,2H),0.94-0.86(m,2H).
实施例38
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-[1-(甲氧基甲基)环丙基]-N-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002173
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002172
Rt 3.54min(方法B2)[M+H]+409.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.16(m,1H),7.10-7.02(m,1H),6.96-6.88(m,1H),5.25-4.64(m,2H),4.26-3.79(m,3H),3.57-3.39(m,1H),3.30-3.20(m,4H),3.09-2.95(m,4H),1.02-0.73(m,4H).
实施例39
N-环丙基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002174
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002181
步骤1：将5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002182
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸乙酯(58mg，0.171mmol)悬浮在四氢呋喃(1mL)中，并添加单水氢氧化锂(42mg，1.001mmol)在水(1.000mL)中的溶液。在将所述混合物搅拌1h后，添加1M HCl(2mL)和水(5mL)，并将得到的悬液搅拌30min。将悬液过滤，并将固体用水和Et2O洗涤，得到作为灰白色固体的5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002183
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(41.6mg，78％得率)。
步骤2：将5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002184
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(21mg，0.067mmol)溶解在DMSO(400μL)中，并添加HATU(28.2mg，0.074mmol)。10min后，添加Et3N(47.0μL，0.337mmol)，然后立即添加N-甲基环丙胺盐酸盐(7.98mg，0.074mmol)在DMSO(400μL)中的溶液，并将混合物搅拌1h。添加一滴水，并将反应混合物过滤，用乙腈和水冲洗，并使用制备HPLC进行纯化，得到作为白色固体的N-环丙基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002185
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺(15.9mg，64％得率)。
Rt 3.46min(方法B2)[M+H]+365.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.17(m,1H),7.10-7.03(m,1H),6.92(s,1H),5.22-4.63(m,2H),4.15-3.88(m,2H),3.17-2.86(m,6H),0.79-0.54(m,4H).
实施例40
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002186
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002191
Rt 3.68min(方法B2)[M-H]405.0
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.68(s,1H),9.59(d,J＝8.4Hz,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.17(m,1H),7.10-7.03(m,1H),6.93(s,1H),5.14-4.89(m,2H),4.83-4.72(m,1H),4.19-3.84(m,2H),3.17-2.91(m,2H),1.36(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例41
3-{1-[N-甲基-7-(1H-吲哚-2-羰基)-6-甲基-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002192
步骤1：将1-((1-(3-(甲氧基羰基)苯基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6-甲基-5,6-二氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(8H)-甲酸叔丁酯(100mg，0.213mmol)悬浮在二氧杂环己烷中的4M HCl(2.03mL，8.11mmol)中。在搅拌2h后，将反应混合物真空浓缩，并用二氯甲烷汽提，得到作为米黄色固体的3-(1-(N,6-二甲基-5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酰胺基)环丙基)苯甲甲酸酯盐酸盐(85.1mg，98％得率)。
步骤2：向1H-吲哚-2-甲酸(16.72mg，0.104mmol)和HATU(41.4mg，0.109mmol)在二氯甲烷(0.5mL)中的混合物添加Et3N(0.101mL，0.726mmol)。在t.t.搅拌30min后，添加3-(1-(N,6-二甲基-5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(42mg，0.104mmol)在二氯甲烷(0.500mL)中的溶液。将得到的反应混合物搅拌3天。向所述反应混合物添加1H-吲哚-2-甲酸(8.36mg，0.052mmol)和HATU(19.72mg，0.052mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的溶液。在搅拌过夜后，将反应混合物真空浓缩。将得到的固体溶解在DMSO中，并通过制备HPLC进行纯化，得到作为米黄色固体的3-(1-(7-(1H-吲哚-2-羰基)-N,6-二甲基-5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯(25.4mg，48％得率)。
步骤3：将3-(1-(7-(1H-吲哚-2-羰基)-N,6-二甲基-5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯(24.6mg，0.048mmol)溶解在四氢呋喃(5.8mL)中。向其添加水(0.58mL)，然后添加单水氢氧化锂(12.11mg，0.289mmol)。将混合物在r.t.搅拌三天。将反应混合物用水(3mL)稀释，并用1M HCl溶液酸化至pH 3。将产物用EtOAc(3x4mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(4mL)，在硫酸钠上干燥并真空浓缩。将得到的固体溶解在DMSO中并通过制备HPLC进行纯化，得到作为白色固体的产物(23.4mg，98％得率)。
Rt 3.02min(方法B2)[M+H]+498.4
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.10(s,1H),11.70(s,1H),7.81(d,J＝7.4Hz,1H),7.71-7.61(m,2H),7.56-7.42(m,2H),7.35-7.17(m,2H),7.08(t,J＝7.5Hz,1H),7.04-6.90(m,2H),5.84-5.47(m,1H),5.40-5.21(m,1H),5.08-4.59(m,1H),4.49-4.02(m,2H),3.05(s,3H),1.70-1.18(m,7H).
实施例42
3-{1-[N-甲基-5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002201
Rt 2.80min(方法A2)[M+H]+520.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.13(bs,1H),7.80(d,J＝7.6Hz,1H),7.62(s,1H),7.54-7.38(m,1H),7.33-7.19(m,3H),7.07(s,1H),6.97(s,1H),5.50-4.84(m,2H),4.43-3.96(m,4H),3.16-2.99(m,3H),1.68-1.28(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例43
12'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002211
Rt 3.05min(方法A2)[M+H]+362.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),8.40(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.25-7.17(m,1H),7.10-7.03(m,1H),6.89(s,1H),5.33-4.55(m,2H),4.20(s,2H),4.13-3.83(m,2H),2.99-2.77(m,2H),0.90-0.76(m,4H).
实施例44
4-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002212
步骤1：向3-((1-(4-(甲氧基羰基)苯基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.050g，0.086mmol)添加二氧杂环己烷中的4MHCl(1mL，4.00mmol)，并将得到的透明溶液在r.t.搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，并与二氯甲烷(3x5mL)共蒸发，得到作为白色固体的4-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯二盐酸盐(37mg，定量得率)。
步骤2：将1H-吲哚-2-甲酸(0.014g，0.087mmol)和Et3N(0.060mL，0.433mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中，并添加HATU(0.035g，0.091mmol)。在搅拌15min后，将所述反应混合物添加到4-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯二盐酸盐(0.037g，0.087mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的悬液，并将得到的反应混合物搅拌1h。将反应混合物倾倒在水(30mL)中，并用EtOAc(3x30mL)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤(5x20mL)，在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到作为棕色油状物的4-(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯(43mg，定量得率)。
步骤3：将4-(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸甲酯(0.043g，0.086mmol)溶解在四氢呋喃(2mL)中。添加单水氢氧化锂(0.084g，2mmol)在水(2mL)中的溶液，并将得到的透明溶液搅拌2h。将反应混合物用6M HCl水溶液(0.35mL)酸化，并通过制备HPLC进行纯化，得到作为白色蓬松固体的4-(1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)苯甲酸(42mg，27％得率)。
Rt 2.61min(方法A2)[M+H]+484.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.52–12.71(m,1H),11.71(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(d,J＝7.9Hz,1H),7.49(d,J＝8.3Hz,1H),7.25(t,J＝7.7Hz,1H),7.22–7.06(m,3H),6.93(s,1H),5.31–4.60(m,2H),4.21–3.86(m,2H),3.24–3.03(m,3H),3.03–2.77(m,2H),1.65–1.27(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例45
2-{1-[N-甲基-5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002231
Rt 3.44min(方法B2)[M+H]+520.1/522.0
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.11(s,1H),9.14-8.99(m,2H),7.46-7.39(m,1H),7.33-7.01(m,3H),6.93(s,1H),6.80(s,1H),5.70-4.70(m,2H),4.46-3.98(m,4H),3.16-3.01(m,3H),2.01-1.85(m,1H),1.72-1.38(m,3H).
实施例46
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002233
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002232
Rt 3.65min(方法A2)[M+H]+407.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.68(s,1H),9.60(d,J＝7.9Hz,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.25-7.18(m,1H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.93(s,1H),5.42-4.61(m,3H),4.21-3.78(m,2H),3.15-2.89(m,2H),1.36(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例47
4-({1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}甲氧基)苯甲酸
Figure BDA0003327916790002241
步骤1：将(1-(羟基甲基)环丙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.248mmol)在四氢呋喃(2mL)中的冷却的(0℃)溶液带到氮气气氛下，并添加4-羟基苯甲酸甲酯(45.4mg，0.298mmol)和三苯基膦(78mg，0.298mmol)。将混合物搅拌5min，然后逐滴添加偶氮二甲酸二异丙酯(0.058mL，0.298mmol)在四氢呋喃(1mL)中的溶液。允许反应在氮气气氛下升温至r.t.。在搅拌过夜后，将所述反应混合物真空浓缩，并将残留物转移到EtOAc(5mL)中。将有机层用1M NaOH水溶液(5mL)、盐水(5mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物溶解在极少量EtOAc和二氯甲烷(～1:1)中，并使用柱层析进行纯化(庚烷中的EtOAc，20％至50％)，给出作为粘稠油状物的4-((1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(83mg，定量得率)。
步骤2：将4-((1-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(83mg，0.247mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(2mL，8.00mmol)中，并将得到的透明溶液在r.t.搅拌过夜。将反应混合物蒸发，并将残留物用甲苯(2x10mL)汽提，给出作为白色固体的4-((1-(甲基氨基)环丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(44mg，76％得率)。
步骤3：向5-(1H-吲哚-2-羰基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸(58.0mg，0.187mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的溶液添加HATU(71.1mg，0.187mmol)，并将得到的悬液在r.t.搅拌30min。然后添加Et3N(0.130mL，0.935mmol)，然后添加4-((1-(甲基氨基)环丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(44mg，0.187mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.6mL)中的溶液。将反应混合物通过微滤膜过滤，并使用制备HPLC进行纯化，给出作为浅黄色固体的4-((1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(58mg，58％得率)。
步骤4：向4-((1-(5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)甲氧基)苯甲酸甲酯(58mg，0.110mmol)在四氢呋喃(2mL)中的黄色溶液添加0.5M氢氧化锂水溶液(2.199mL，1.099mmol)，并将得到的溶液在r.t.搅拌过夜。通过添加1M HCl水溶液(1mL)将反应混合物带到中性pH，真空浓缩，并将残留物与MeCN(5mL)共蒸发，给出作为黄色固体的4-((1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)甲氧基)苯甲酸(40.7mg，定量得率)。
步骤5：将HATU(41.8mg，0.110mmol)添加到1H-吲哚-2-甲酸(17.73mg，0.110mmol)在DMSO(0.5mL)中的溶液，并将得到的棕色溶液在r.t.搅拌45min。然后添加Et3N(0.077mL，0.550mmol)，然后添加4-((1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酰胺基)环丙基)甲氧基)苯甲酸(40.7mg，0.110mmol)在DMSO(1mL)中的溶液，并将混合物搅拌过夜。将反应混合物通过微滤膜过滤，并使用制备HPLC进行纯化，给出作为固体的产物(17mg，30％得率)。
Rt 2.68min(方法A2)[M+H]+514.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.28-7.75(m,3H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.16-6.70(m,4H),5.78-4.85(m,2H),4.56-3.86(m,6H),3.20-2.90(m,3H),1.52-0.71(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例48
4'-甲基-12'-[4-(三氟甲基)-1H-吲哚-2-羰基]-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002261
Rt 3.59min(方法A2)[M+H]+444.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.26(s,1H),7.73(d,J＝8.3Hz,1H),7.47(d,J＝7.5Hz,1H),7.37(t,J＝7.8Hz,1H),6.87(s,1H),5.17-4.66(m,2H),4.22(s,2H),4.07-3.91(m,2H),2.91-2.70(m,5H),1.21-1.12(m,2H),0.94-0.85(m,2H).
实施例49
4-{1-[N-甲基-5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002262
Rt 2.79min(方法A2)[M+H]+518.1/520.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.59–12.62(m,1H),12.06(s,1H),7.85(d,J＝8.1Hz,2H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.26–7.06(m,4H),6.85(s,1H),5.28–4.60(m,2H),4.12–3.80(m,2H),3.18–2.99(m,3H),2.97–2.71(m,2H),1.57–1.21(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例50
4-{1-[N-甲基-5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002271
Rt 3.62min(方法B2)[M+H]+536.1/538.0
实施例51
4-{1-[N-甲基-5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002272
Rt 3.57min(方法B2)[M+H]+518.1/520.1
实施例52
4-{1-[N-甲基-5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002273
Rt 3.51min(方法B2)[M+H]+520.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.76–12.31(m,1H),12.15(s,1H),8.00–7.77(m,2H),7.32–7.23(m,2H),7.20–7.11(m,2H),7.07(s,1H),6.96(s,1H),5.62–4.76(m,2H),4.51–3.95(m,4H),3.04(s,3H),1.75–1.27(m,4H).
实施例53
4-{1-[N-甲基-5-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002281
Rt 3.54min(方法B2)[M+H]+516.1
实施例54
4-{1-[N-甲基-5-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002282
Rt 3.55min(方法B2)[M+H]+516.1
实施例55
4-{1-[N-甲基-5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002283
Rt 3.59min(方法B2)[M+H]+536.1/538.0
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.32-12.77(m,1H),11.89(s,1H),7.83(d,J＝7.8Hz,2H),7.63(d,J＝10.0Hz,1H),7.54(d,J＝6.4Hz,1H),7.11(s,2H),6.90(s,1H),5.14-4.60(m,2H),4.10-3.73(m,2H),3.41(s,2H),3.08-2.71(m,3H),1.51-1.20(m,4H)-未观察到羧酸的质子
实施例56
2-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002291
Rt 2.52min(方法A2)[M+H]+486.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.93(d,J＝154.7Hz,1H),11.63(s,1H),9.07(s,2H),7.71-7.54(m,1H),7.48-7.35(m,1H),7.24-7.13(m,1H),7.11-6.98(m,1H),6.91-6.80(m,1H),5.27-4.46(m,2H),4.19-3.66(m,2H),3.52-3.04(m,3H),3.00-2.69(m,2H),1.97-1.82(m,1H),1.68-1.27(m,3H)-未观察到羧酸的质子。
实施例57
2-{1-[N-甲基-5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002292
Rt 2.78min(方法A2)[M+H]+538.1/540.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.95(s,1H),9.19–8.96(m,2H),7.80–7.46(m,2H),7.32–6.71(m,2H),5.50–4.75(m,2H),4.50–3.90(m,4H),3.08(s,3H),2.01–1.33(m,4H).
实施例58
2-{1-[N-甲基-5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002301
Rt 2.68min(方法A2)[M+H]+522.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.14(s,1H),9.20–8.74(m,2H),7.34–6.93(m,3H),6.80(s,1H),5.43–4.77(m,2H),4.52–3.89(m,4H),3.08(s,3H),2.03–1.29(m,4H).
实施例59
2-{1-[N-甲基-5-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002302
Rt 2.71min(方法A2)[M+H]+518.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(d,J＝2.3Hz,1H),9.07(d,J＝28.3Hz,2H),7.35–6.69(m,4H),5.14(s,2H),4.18(d,J＝53.3Hz,4H),3.08(s,3H),2.45–2.29(m,3H),2.02–1.37(m,4H).
实施例60
2-{1-[N-甲基-5-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002311
Rt 2.71min(方法A2)[M+H]+518.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.76(d,J＝2.4Hz,1H),9.20–8.95(m,2H),7.30–6.67(m,4H),5.40–4.80(m,2H),4.46–3.97(m,4H),3.08(s,3H),2.52(s,3H),2.02–1.84(m,1H),1.78–1.39(m,3H).
实施例61
2-({1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}甲氧基)苯甲酸
Figure BDA0003327916790002312
Rt 2.56min(方法A2)[M+H]+514.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.05-7.71(m,1H),7.69-7.49(m,2H),7.49-7.30(m,2H),7.29-6.76(m,5H),5.42-4.88(m,2H),4.67-3.81(m,6H),3.25-2.95(m,3H),1.48-0.79(m,4H).
实施例62
3-({1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}甲氧基)苯甲酸
Figure BDA0003327916790002321
Rt 2.70min(方法A2)[M+H]+514.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),8.31-7.73(m,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.57-7.27(m,4H),7.21(t,J＝7.5Hz,1H),7.17-7.00(m,2H),6.94(s,1H),5.45-4.89(m,2H),4.53-3.97(m,6H),3.10(s,3H),1.56-0.63(m,4H).
实施例63
4'-(1H-吲哚-2-羰基)-13'-甲基-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002322
Rt 3.16min(方法A2)[M+H]+390.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.87(s,1H),5.25-4.50(m,2H),4.33(t,J＝6.8Hz,2H),4.15-3.83(m,2H),3.09-2.72(m,5H),2.12(t,J＝7.1Hz,2H),0.88-0.64(m,2H),0.60-0.40(m,2H).
实施例64
4'-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-13'-甲基-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002331
Rt 3.48min(方法A2)[M+H]+442.1/444.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.90(s,1H),7.64(d,J＝10.1Hz,1H),7.54(d,J＝6.4Hz,1H),6.90(s,1H),5.14-4.52(m,2H),4.38-4.27(m,2H),4.10-3.86(m,2H),2.99-2.71(m,5H),2.18-2.07(m,2H),0.89-0.64(m,2H),0.58-0.41(m,2H).
实施例65
4-{1-[N-甲基-5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002332
Rt 3.46min(方法B2)[M+H]+520.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.35-12.72(m,1H),12.07(s,1H),7.83(d,J＝7.8Hz,2H),7.23(d,J＝5.8Hz,2H),7.11(s,2H),6.97(s,1H),5.21-4.59(m,2H),4.13-3.75(m,2H),3.41(s,2H),3.08-2.73(m,3H),1.54-1.22(m,4H)."
实施例66
4-{1-[N-甲基-5-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002341
Rt 3.48min(方法B2)[M+H]+516.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.35-12.73(m,1H),11.70(s,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,2H),7.27-7.20(m,1H),7.18-7.07(m,2H),7.05-6.97(m,1H),6.92(s,1H),4.81(s,2H),4.20-3.75(m,2H),3.40(s,2H),3.07-2.73(m,3H),2.41(s,3H),1.50-1.21(m,4H).
实施例67
4-{1-[N-甲基-5-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002342
Rt 3.50min(方法B2)[M+H]+516.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.38-12.71(m,1H),11.70(s,1H),7.83(d,J＝8.1Hz,2H),7.19-7.04(m,2H),7.00-6.86(m,2H),6.81-6.70(m,1H),4.83(s,2H),4.10-3.79(m,2H),3.50-3.39(m,4H),3.11-2.98(m,2H),2.96-2.72(m,2H),1.55-1.20(m,4H).
实施例68
4'-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-13'-甲基-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002351
Rt 3.41min(方法A2)[M+H]+424.1/426.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.05(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),7.23-7.12(m,2H),6.83(s,1H),5.14-4.58(m,2H),4.37-4.27(m,2H),4.11-3.86(m,2H),2.99-2.71(m,5H),2.17-2.08(m,2H),0.83-0.70(m,2H),0.57-0.46(m,2H).
实施例69
4-{1-[N-甲基-5-(4,6-二氯-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002352
Rt 3.87min(方法B2)[M+H]+552.0/554.0
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.24(s,1H),8.00-7.75(m,2H),7.46(s,1H),7.28(s,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,2H),7.02-6.89(m,2H),5.51-4.88(m,2H),4.45-3.93(m,4H),3.04(s,3H),1.74-1.29(m,4H)-未观察到羧酸的信号。
实施例70
2-{1-[N-甲基-5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002361
Rt 3.40min(方法B2)[M+H]+520.0/522.0
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.32–12.51(m,1H),12.04(s,1H),9.03(s,2H),7.43–7.37(m,1H),7.23–7.10(m,2H),6.83(s,1H),5.20–4.48(m,2H),4.21–3.59(m,2H),3.53–3.47(m,1H),3.21–3.05(m,2H),3.00–2.59(m,2H),2.01–1.19(m,4H)-未观察到羧酸的信号。
实施例71
2-{1-[N-甲基-5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002362
Rt 3.35min(方法B2)[M+H]+522.1
实施例72
2-{1-[N-甲基-5-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002363
Rt 3.38min(方法B2)[M+H]+518.1
实施例73
2-{1-[N-甲基-5-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002371
Rt 3.39min(方法B2)[M+H]+518.1
实施例74
4-{1-[N-甲基-5-(4-乙基-6-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002372
Rt 3.73min(方法B2)[M+H]+530.1
实施例75
4-{1-[N-甲基-5-(4,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002381
Rt 3.55min(方法B2)[M+H]+520.1
实施例76
4-{1-[N-甲基-5-(4,7-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002382
Rt 3.48min(方法B2)[M+H]+520.1
实施例77
4-{1-[N-甲基-5-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002383
Rt 3.49min(方法B2)[M+H]+520.2
实施例78
4-{1-[N-甲基-5-(4,5,6-三氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002391
Rt 3.62min(方法B2)[M+H]+538.1
实施例79
12'-(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002392
Rt 3.28min(方法A2)[M+H]+394.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),7.41(dt,J＝8.4,4.0Hz,2H),7.06(td,J＝9.3,2.6Hz,1H),6.87(s,1H),5.26-4.57(m,2H),4.28-4.17(m,2H),4.11-3.86(m,2H),2.97-2.70(m,5H),1.25-1.14(m,2H),0.95-0.86(m,2H).
实施例80
4-{1-[N-甲基-5-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002401
Rt 3.64min(方法B2)[M+H]+536.1/538.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49–11.91(m,1H),8.02–7.74(m,2H),7.44(dd,J＝8.9,4.0Hz,1H),7.27(t,J＝9.4Hz,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,2H),7.00–6.93(m,2H),5.71–4.73(m,2H),4.48–3.94(m,4H),3.04(s,3H),1.73–1.29(m,4H)-未观察到羧酸的信号。
实施例81
4-{1-[N-甲基-5-(4-氯-6-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002402
Rt 3.68min(方法B2)[M+H]+536.1/538.2
实施例82
4-{1-[N-甲基-5-(4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002411
Rt 3.49min(方法B2)[M+H]+498.1
实施例83
4-{1-[N-甲基-5-(4-乙基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002412
Rt 3.65min(方法B2)[M+H]+512.2
实施例84
3-{1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}-1,2-
Figure BDA0003327916790002414
唑-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002413
Rt 2.53min(方法A2)[M+H]+475.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.37-6.81(m,4H),6.39(s,1H),5.42-4.91(m,2H),4.45-3.95(m,4H),3.04(s,3H),1.74-1.19(m,4H).
实施例85
12'-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002421
Rt 3.40min(方法A2)[M+H]+412.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),7.29-7.21(m,2H),6.98(s,1H),5.21-4.67(m,2H),4.23(s,2H),4.11-3.88(m,2H),3.01-2.70(m,5H),1.25-1.10(m,2H),0.96-0.82(m,2H).
实施例86
13'-乙基-4'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002422
Rt 3.32min(方法A2)[M+H]+404.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.19(ddd,J＝8.2,7.0,1.2Hz,1H),7.06(ddd,J＝8.1,7.1,1.0Hz,1H),6.87(s,1H),5.17-4.46(m,2H),4.34(t,J＝6.8Hz,2H),4.10-3.89(m,2H),3.53-3.36(m,2H),3.01-2.72(m,2H),2.16-2.03(m,2H),1.21(t,J＝7.3Hz,3H),0.84-0.68(m,2H),0.62-0.47(m,2H).
实施例87
12'-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002431
Rt 3.52min(方法A2)[M+H]+428.1/430.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.15(s,1H),7.41(dd,J＝8.9,3.9Hz,1H),7.28-7.20(m,1H),6.89(s,1H),5.21-4.69(m,2H),4.23(s,2H),4.10-3.88(m,2H),2.96-2.69(m,5H),1.25-1.14(m,2H),0.96-0.82(m,2H).
实施例88
12'-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4'-甲基-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002432
Rt 3.44min(方法A2)[M+H]+408.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),6.99-6.90(m,2H),6.76(dd,J＝10.7,2.3Hz,1H),5.14-4.66(m,2H),4.22(s,2H),4.11-3.91(m,2H),2.95-2.81(m,2H),2.76(s,3H),2.51(s,3H),1.23-1.14(m,2H),0.94-0.87(m,2H).
实施例89
13'-(2-羟基乙基)-4'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002441
步骤1：将5-(叔丁氧基羰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸(0.272g，0.684mmol)和苯甲酸2-(1-((2-(苯甲氧基)乙基)氨基)环丙基)乙基酯盐酸盐(0.257g，0.684mmol)溶解在吡啶(5mL)中。将所述混合物冷却至-12℃，添加磷酰氯(0.127mL，1.367mmol)，并将反应混合物搅拌3h。将反应混合物真空浓缩，并将残留物用庚烷汽提，并溶解在二氯甲烷中。将有机层用1M KHSO4、盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并真空浓缩。将得到的棕色油状物溶解在二氯甲烷中并通过柱层析进行纯化(庚烷中的EtOAc，0％至100％)，得到作为无色油状物的3-((1-(2-(苯甲酰氧基)乙基)环丙基)(2-(苯甲氧基)乙基)氨甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.388g，79％得率)。
步骤2：将3-((1-(2-(苯甲酰氧基)乙基)环丙基)(2-(苯甲氧基)乙基)氨甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.388g，0.540mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(10mL，40.0mmol)中并搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩。将残留物用二氯甲烷汽提，得到苯甲酸2-(1-(N-(2-(苯甲氧基)乙基)-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)乙基酯二盐酸盐(303mg，定量得率)。
步骤3：将苯甲酸2-(1-(N-(2-(苯甲氧基)乙基)-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)乙基酯二盐酸盐(0.303g，0.540mmol)悬浮在二氯甲烷(10mL)中，并添加Et3N(0.165mL，1.187mmol)。随后添加boc-酸酐(0.138mL，0.594mmol)，并将混合物在r.t.搅拌1.5h。将反应混合物用饱和NH4Cl淬灭，并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥并真空浓缩。将得到的油状物溶解在二氯甲烷中，并通过柱层析进行纯化(庚烷中的EtOAc，0％至100％)，得到作为白色泡沫的3-((1-(2-(苯甲酰氧基)乙基)环丙基)(2-(苯甲氧基)乙基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.165g，51％得率)。
步骤4：将3-((1-(2-(苯甲酰氧基)乙基)环丙基)(2-(苯甲氧基)乙基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.165g，0.280mmol)溶解在四氢呋喃(5mL)中。向其添加水(5mL)，然后添加单水氢氧化锂(0.035g，0.841mmol)。将混合物在r.t.搅拌过夜。添加另外的单水氢氧化锂(0.035g，0.841mmol)，并将混合物继续搅拌3h。将所述反应混合物用1M HCl(1.682mL，1.682mmol)酸化并真空浓缩。将残留物用甲苯汽提，并通过制备HPLC可形成，得到3-((2-(苯甲氧基)乙基)(1-(2-羟基乙基)环丙基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.100g，73％得率)。
步骤5：将3-((2-(苯甲氧基)乙基)(1-(2-羟基乙基)环丙基)氨甲酰基)-1,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(0.100g，0.206mmol)溶解在四氢呋喃(15mL)中。向其添加三苯基膦(0.070g，0.268mmol)。逐滴添加偶氮二甲酸二异丙酯(0.052mL，0.268mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液，并将混合物在80℃搅拌。2h后，添加另外的偶氮二甲酸二异丙酯(0.020mL，0.103mmol)和三苯基膦(0.054g，0.206mmol)。将混合物在80℃搅拌2h。将反应混合物倾倒在水(100mL)中并用EtOAc(2x200mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(300mL)。将有机层在硫酸钠上干燥并真空浓缩。将残留物转移到二氯甲烷中，并通过柱层析进行纯化(庚烷中的EtOAc，10％至100％)，得到10'-(2-(苯甲氧基)乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002451
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(0.098g，62％得率)。
步骤6：将10'-(2-(苯甲氧基)乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002452
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(0.098g，0.210mmol)溶解在EtOH(5mL)中。向其添加碳载钯(0.050g，0.047mmol)，并将混合物带到氢气气氛下，在r.t.搅拌过夜。将反应混合物在在硅藻土上过滤，用MeOH冲洗并真空浓缩。将残留物通过制备HPLC进行纯化，得到10'-(2-羟基乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002461
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(0.030g,37％得率)。
步骤7：将10'-(2-羟基乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002462
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(0.030g，0.080mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(5mL，20.00mmol)中。在将所述反应搅拌2h后，将它真空浓缩，并将残留物用二氯甲烷汽提，得到10'-(2-羟基乙基)-1',2',3',4',7',8'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002463
]-11'(10'H)-酮盐酸盐(25mg，定量得率)。
步骤8：将10'-(2-羟基乙基)-1',2',3',4',7',8'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002464
]-11'(10'H)-酮盐酸盐(0.025g，0.080mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中。向其添加Et3N(0.056mL，0.400mmol)。在单独的小管中，将HATU(0.036g，0.096mmol)和1H-吲哚-2-甲酸(0.013g，0.080mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌10min。将该溶液添加到前一种溶液，并将混合物在r.t搅拌过夜。将混合物用水(0.250mL)淬灭，将溶液过滤并用DMSO(0.2mL)冲洗，通过制备HPLC进行纯化，得到作为白色固体的10'-(2-羟基乙基)-2'-(1H-吲哚-2-羰基)-1',2',3',4',7',8'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002465
]-11'(10'H)-酮(0.020g，59.7％得率)。
Rt2.98min(方法A2)[M+H]+420.2
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(ddd,J＝8.1,6.9,1.2Hz,1H),7.06(ddd,J＝7.9,6.8,1.0Hz,1H),6.87(s,1H),5.12-4.55(m,3H),4.36(t,J＝6.6Hz,2H),4.11-3.88(m,2H),3.68-3.56(m,2H),3.55-3.38(m,2H),2.98-2.72(m,2H),2.20-1.99(m,2H),0.88-0.67(m,2H),0.58-0.42(m,2H).
实施例90
13'-[2-(苯甲氧基)乙基]-4'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002471
Rt 1.72min(方法J)[M+H]+510.4
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.65(d,J＝2.2Hz,1H),7.63(d,J＝7.8Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.38-7.25(m,5H),7.19(ddd,J＝8.2,6.9,1.2Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.87(s,1H),5.14-4.58(m,2H),4.51(s,2H),4.33-4.17(m,2H),4.14-3.89(m,2H),3.80-3.54(m,4H),2.98-2.71(m,2H),2.14-1.94(m,2H),0.88-0.72(m,2H),0.59-0.47(m,2H).
实施例91
4-[7-(1H-吲哚-2-羰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-羰基]-8-氧杂-4-氮杂螺[2.6]壬烷
Figure BDA0003327916790002472
Rt 1.20min(方法H)[M+H]+420.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),7.73(s,1H),7.66(d,J＝7.9Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.94(s,1H),5.58-4.75(m,2H),4.71-3.94(m,6H),3.92-3.37(m,4H),2.03-1.76(m,2H),0.94-0.68(m,4H).
实施例92
4-[7-(1H-吲哚-2-羰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-羰基]-4-氮杂螺[2.5]辛-7-醇
Figure BDA0003327916790002481
Rt 1.04min(方法H)[M+H]+420.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),7.71(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.93(s,1H),5.42-4.71(m,3H),4.67-4.59(m,1H),4.34-3.99(m,4H),3.82-3.70(m,1H),3.28-3.07(m,1H),2.01-1.68(m,2H),1.45-1.03(m,2H),0.88-0.76(m,2H),0.55-0.39(m,2H).
实施例93
4-{1-[N-甲基-7-(1H-吲哚-2-羰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002482
Rt 1.30min(方法H)[M+H]+484.4
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),7.90-7.74(m,3H),7.70-7.60(m,1H),7.52-7.38(m,1H),7.25-7.17(m,1H),7.16-7.00(m,3H),6.97-6.89(m,1H),5.51-4.82(m,2H),4.43-3.86(m,4H),3.55-3.47(m,2H),3.03-2.90(m,1H),1.54-1.17(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例94
2-{1-[N-甲基-7-(1H-吲哚-2-羰基)-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002491
Rt 1.22min(方法H)[M+H]+486.4
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),9.05(s,2H),7.82-7.34(m,3H),7.25-7.16(m,1H),7.11-7.01(m,1H),6.95-6.87(m,1H),5.44-4.84(m,2H),4.37-3.86(m,4H),3.64-3.59(m,1H),3.15-3.02(m,2H),2.01-1.87(m,1H),1.63-1.30(m,3H)-未观察到羧酸质子。
实施例95
4-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002493
唑并[4,5-c]吡啶-3-羰基]-4-氮杂螺[2.5]辛-7-醇
Figure BDA0003327916790002492
Rt 3.15min(方法A2)[M+H]+421.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.25–7.17(m,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.92(s,1H),5.31–4.63(m,3H),4.49–3.62(m,4H),3.16–2.76(m,3H),2.06–1.77(m,2H),1.57–1.18(m,2H),1.09–0.43(m,4H).
实施例96
4-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002503
唑并[4,5-c]吡啶-3-羰基]-8-氧杂-4-氮杂螺[2.6]壬烷
Figure BDA0003327916790002501
Rt 3.39min(方法A2)[M+H]+421.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.68(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.97–6.85(m,1H),5.39–4.49(m,2H),4.13–3.94(m,2H),3.91–3.71(m,2H),3.70–3.61(m,1H),3.60–3.48(m,1H),3.08–2.89(m,2H),2.05–1.85(m,2H),1.03–0.73(m,4H)-一个信号(2H)与水信号相一致。
实施例97
4-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002504
唑并[4,5-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002502
Rt 2.76min(方法A2)[M+H]+485.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.68(s,1H),7.94–7.80(m,2H),7.69–7.61(m,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.32–7.11(m,3H),7.10–7.02(m,1H),6.96–6.86(m,1H),5.44–4.56(m,2H),4.12–3.78(m,2H),3.11–2.76(m,5H),1.65–1.26(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例98
2-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002512
唑并[4,5-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002511
步骤1：将3-((1-(5-(甲氧基羰基)嘧啶-2-基)环丙基)(甲基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790002513
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.030g，0.066mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(3mL，12.00mmol)中，并将混合物搅拌过夜。将反应混合物浓缩，并与二氯甲烷(2x5mL)共蒸发，得到作为米黄色固体的2-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002514
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(0.026g，定量得率)。
步骤2：向1H-吲哚-2-甲酸(10.64mg，0.066mmol)、2-(1-(N-甲基-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002515
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺基)环丙基)嘧啶-5-甲酸甲酯盐酸盐(0.026g，0.066mmol)和Et3N(0.046mL，0.330mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的混合物添加HATU(0.026g，0.069mmol)。在将所述反应混合物搅拌2h后，添加单水氢氧化锂(0.042g，1mmol)在水(0.5mL)中的溶液并搅拌1h。将反应混合物用6M HCl水溶液(0.2mL)淬灭并在r.t.搅拌过夜。将反应混合物过滤，并通过制备HPLC-MS进行纯化，得到作为白色蓬松固体的产物(0.023g，68％得率)。
Rt 2.67min(方法A2)[M+H]+487.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),9.22–8.92(m,2H),7.72–7.58(m,1H),7.48–7.39(m,1H),7.26–7.15(m,1H),7.11–7.01(m,1H),6.95–6.85(m,1H),5.24–4.66(m,2H),4.14–3.82(m,2H),3.14–2.89(m,5H),1.97–1.81(m,1H),1.72–1.48(m,3H)-未观察到羧酸的质子。
实施例99
5-(4,6-二氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002523
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002521
如为实施例100所述来制备。
Rt 4.10min(方法A2)[M+H]+498.9/501.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.21(s,1H),9.11(s,1H),7.44(s,1H),7.26(s,1H),6.93(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),5.18-4.51(m,2H),4.22-3.84(m,4H),3.20-2.85(m,2H),0.98-0.71(m,4H).
实施例100
5-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002524
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002522
步骤1：向5-(叔丁氧基羰基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002525
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酸(120mg，0.447mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.6mL)中的溶液添加HATU(170mg，0.447mmol)。将得到的黄色溶液在r.t.搅拌20min，然后添加1-((二氟甲氧基)甲基)环丙-1-胺盐酸盐(78mg，0.447mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.7mL)中的溶液，然后添加Et3N(0.312mL，2.237mmol)。在搅拌30min后，将反应混合物过滤，并通过制备HPLC进行纯化，得到作为灰白色固体的3-((1-((二氟甲氧基)甲基)环丙基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790002531
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(173mg，69％得率)。
步骤2：将3-((1-((二氟甲氧基)甲基)环丙基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790002532
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(78mg，0.201mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(1107μL，4.43mmol)中，并将得到的溶液在r.t.搅拌。2h后，将反应混合物用二氧杂环己烷(5mL)稀释并真空浓缩。将残留物与甲苯(2x5mL)共蒸发，给出作为灰白色固体的N-(1-((二氟甲氧基)甲基)环丙基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002533
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(65mg，定量得率)。
步骤3：向N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-甲酸(14.2mg，0.067mmol)添加HATU(0.025g，0.067mmol)，并将反应混合物在r.t.搅拌15min。然后添加N-(1-((二氟甲氧基)甲基)环丙基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002534
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.022g，0.067mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.8mL)中的溶液，然后添加Et3N(0.047mL，0.335mmol)。45min后，将反应混合物通过微滤膜过滤，并通过制备HPLC进行纯化，得到作为蓬松白色固体的产物(19mg，59％得率)。
Rt 3.94min(方法A2)[M+H]+483.1/485.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.16(s,1H),9.12(s,1H),7.42(dd,J＝9.0,3.9Hz,1H),7.33-7.19(m,1H),6.93(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),4.82(s,2H),3.99(d,J＝39.9Hz,4H),3.06(s,2H),0.86(d,J＝13.5Hz,4H).
实施例101
3-氯-4-({1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}甲氧基)苯甲酸
Figure BDA0003327916790002541
Rt 2.76min(方法A2)[M+H]+548.2/550.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.70(s,1H),8.21-7.72(m,3H),7.64(d,J＝8.1Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.21(t,J＝7.5Hz,2H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.94(s,1H),5.37-4.91(m,2H),4.64-4.03(m,6H),1.45-0.78(m,4H).
实施例102
4-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002543
唑并[4,3-c]吡啶-3-羰基]-4-氮杂螺[2.5]辛-7-醇
Figure BDA0003327916790002542
Rt 1.33min(方法J)[M+H]+421.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.67(s,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.92(s,1H),5.13-4.71(m,3H),4.48-3.74(m,4H),3.57-3.42(m,1H),3.12-2.80(m,2H),2.12-1.60(m,2H),1.54-1.21(m,2H),0.99-0.66(m,2H),0.63-0.50(m,2H).
实施例103
5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002544
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002551
Rt 1.71min(方法H)[M+H]+459.2/461.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.92(s,1H),9.61(s,1H),7.66(d,J＝9.9Hz,1H),7.56(d,J＝6.5Hz,1H),6.96(s,1H),5.25–4.85(m,2H),4.84–4.68(m,1H),4.12–3.84(m,2H),3.13–2.92(m,2H),1.36(d,J＝7.1Hz,3H)."
实施例104
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002554
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002552
Rt 1.70min(方法H)[M+H]+441.2/443.2
实施例105
5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002555
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002553
Rt 1.65min(方法H)[M+H]+443.2
实施例106
5-(5-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002564
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002561
Rt 1.67min(方法H)[M+H]+439.2
实施例107
5-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002565
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002562
Rt 1.68min(方法H)[M+H]+439.2
实施例108
5-(1H-吲哚-2-羰基)-N-甲基-N-{1-[(2r,5r)-5-氨基-1,3-二氧杂环己烷-2-基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002566
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002563
Rt 1.36min(方法J)[M+H]+466.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.68(s,1H),7.69-7.60(m,1H),7.46-7.39(m,1H),7.24-7.17(m,1H),7.11-7.03(m,1H),6.93(s,1H),5.02-4.51(m,3H),4.25-3.74(m,5H),3.29-2.94(m,8H),2.92-2.72(m,1H),0.95-0.70(m,4H).
实施例109
4-{1-[N-甲基-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002573
唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002571
Rt 3.58min(方法B2)[M+H]+485.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.68(s,1H),7.94-7.82(m,2H),7.69-7.61(m,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.25-7.12(m,3H),7.11-7.03(m,1H),6.96-6.88(m,1H),4.99(s,2H),4.17-3.81(m,2H),3.09(s,3H),3.00-2.84(m,2H),1.58-1.22(m,4H)-未观察到羧酸的质子。
实施例110
4-{1-[N-甲基-5-(4,6-二氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002572
Rt 3.85min(方法B2)[M+H]+570.1/572.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.27(br s,1H),8.02-7.80(m,2H),7.67-7.50(m,1H),7.15(d,J＝8.0Hz,2H),7.01(s,1H),6.96(s,1H),5.79-4.70(m,2H),4.54-3.83(m,4H),3.04(s,3H),1.78-1.21(m,4H).-未观察到羧酸的质子。
实施例111
5-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002582
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002581
步骤1：将(R)-3-((1,1,1-三氟丙-2-基)氨甲酰基)-6,7-二氢异
Figure BDA0003327916790002583
唑并[4,5-c]吡啶-5(4H)-甲酸叔丁酯(0.120g，0.330mmol)溶解在二氧杂环己烷中的4M HCl(4mL，16.00mmol)中，并将混合物搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，并与二氯甲烷(2x5mL)共蒸发，得到作为浅米黄色固体的(R)-N-(1,1,1-三氟丙-2-基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002584
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.099g，94％得率)。
步骤2：向N,N-二甲基甲酰胺(0.4mL)中的5,6-二氟-1H-吲哚-2-甲酸(0.018,0.083mmol)添加HATU(0.033g，0.087mmol)，并将所述混合物在封闭小管中搅拌30min。向其添加(R)-N-(1,1,1-三氟丙-2-基)-4,5,6,7-四氢异
Figure BDA0003327916790002585
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(0.025g，0.083mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.4mL)中的溶液，并添加Et3N(0.1mL)，将混合物搅拌3天。将反应混合物过滤，通过制备HPLC-MS进行纯化，得到作为蓬松白色固体的产物(0.016g，44％得率)。
Rt 1.65min(方法J)[M+H]+443.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.17-11.59(m,1H),9.83-9.38(m,1H),7.67(dd,J＝11.0,8.0Hz,1H),7.36(dd,J＝11.0,7.0Hz,1H),6.95(s,1H),5.35-4.81(m,2H),4.81-4.63(m,1H),4.17-4.03(m,1H),4.03-3.73(m,1H),3.17-2.90(m,2H),1.36(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例112
5-(4,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002593
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002591
如为实施例111所述来制备。
Rt 1.68min(方法J)[M+H]+443.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.38-11.81(m,1H),9.92-9.30(m,1H),7.05(dd,J＝9.4,2.1Hz,1H),7.00(s,1H),6.93(td,J＝10.4,2.1Hz,1H),5.45-4.83(m,2H),4.83-4.66(m,1H),4.18-4.04(m,1H),4.04-3.81(m,1H),3.18-2.80(m,2H),1.36(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例113
5-(4,6-二氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002594
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002592
如为实施例111所述来制备。
Rt 1.87min(方法J)[M+H]+475.2/477.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.22(s,1H),9.61(s,1H),7.44(s,1H),7.29-7.22(m,1H),6.93(s,1H),5.46-4.83(m,2H),4.83-4.67(m,1H),4.20-4.03(m,1H),4.03-3.72(m,1H),3.19-2.79(m,2H),1.36(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例114
5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002603
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002601
Rt 4.14min(方法B2)[M+H]+459.1/461.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.93(s,1H),9.61(s,1H),7.66(d,J＝9.9Hz,1H),7.56(d,J＝6.4Hz,1H),6.96(s,1H),5.20-4.85(m,2H),4.84-4.67(m,1H),4.13-3.85(m,2H),3.13-2.92(m,2H),1.36(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例115
5-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002604
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002602
Rt 3.98min(方法B2)[M+H]+443.1
实施例116
5-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002613
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002611
Rt 4.13min(方法B2)[M+H]+459.1/461.1
实施例117
5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002614
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002612
Rt 4.01min(方法B2)[M+H]+443.1
实施例118
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002615
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002621
Rt 4.10min(方法B2)[M+H]+441.1/443.1
实施例119
5-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002623
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002622
Rt 1.74min(方法J)[M+H]+459.2/461.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.56-11.63(m,1H),10.33-9.10(m,1H),7.43(dd,J＝8.9,4.0Hz,1H),7.30-7.21(m,1H),6.94(s,1H),5.36-4.83(m,2H),4.83-4.69(m,1H),4.16-4.04(m,1H),4.04-3.86(m,1H),3.17-2.89(m,2H),1.36(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例120
4'-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-13'-(2-羟基乙基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002631
Rt 1.33min(方法J)[M+H]+456.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.09(s,1H),7.29-7.21(m,2H),7.03-6.92(m,1H),5.15-4.56(m,3H),4.45-4.28(m,2H),4.10-3.86(m,2H),3.70-3.56(m,2H),3.53-3.40(m,2H),3.02-2.70(m,2H),2.16-2.05(m,2H),0.90-0.66(m,2H),0.57-0.45(m,2H).
实施例121
4'-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-13'-(2-羟基乙基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002632
Rt 1.32min(方法J)[M+H]+456.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.86(s,1H),7.65(dd,J＝11.0,8.1Hz,1H),7.35(dd,J＝11.0,7.0Hz,1H),6.97-6.81(m,1H),5.16-4.51(m,3H),4.36(t,J＝6.9Hz,2H),4.05-3.94(m,2H),3.67-3.57(m,2H),3.53-3.41(m,2H),2.99-2.72(m,2H),2.16-2.05(m,2H),0.89-0.66(m,2H),0.58-0.44(m,2H).
实施例122
4'-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-13'-(2-羟基乙基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002641
Rt 1.39min(方法J)[M+H]+472.2/474.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.91(s,1H),7.65(d,J＝10.0Hz,1H),7.54(d,J＝6.5Hz,1H),7.03-6.81(m,1H),5.08-4.57(m,3H),4.36(t,J＝6.9Hz,2H),4.11-3.90(m,2H),3.67-3.56(m,2H),3.54-3.39(m,2H),3.02-2.73(m,2H),2.21-1.96(m,2H),0.89-0.65(m,2H),0.58-0.41(m,2H).
实施例123
4'-(1H-吲哚-2-羰基)-13'-(2-甲氧基乙基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002642
Rt 1.40min(方法H)[M+H]+434.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.3Hz,1H),7.24-7.16(m,1H),7.09-7.02(m,1H),6.93-6.82(m,1H),5.15-4.50(m,2H),4.32(t,J＝6.6Hz,2H),4.12-3.89(m,2H),3.66-3.45(m,4H),3.28(s,3H),2.99-2.70(m,2H),2.17-1.96(m,2H),0.88-0.68(m,2H),0.62-0.44(m,2H).
实施例124
13'-[2-(二甲基氨基)乙基]-4'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002651
Rt 2.50min(方法B2)[M+H]+447.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.23-7.15(m,1H),7.10-7.02(m,1H),6.93-6.80(m,1H),5.26-4.52(m,2H),4.42-4.33(m,2H),4.07-3.94(m,2H),3.65-3.40(m,2H),3.02-2.72(m,2H),2.48-2.41(m,2H),2.30-1.95(m,8H),0.91-0.66(m,2H),0.63-0.41(m,2H).
实施例125
4'-(1H-吲哚-2-羰基)-13'-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002652
步骤1：将10'-(2-羟基乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002653
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(60mg，0.159mmol)(参见实施例89)溶解在二氯甲烷(3mL)中并添加Dess-Martin高碘烷(101mg，0.239mmol)。在搅拌1h后，将反应混合物用EtOAc(10mL)稀释。将得到的白色悬液用饱和Na2S2O3水溶液(10mL)洗涤。进行层分离，并将水层用EtOAc(10mL)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液洗涤，在硫酸钠上干燥，真空浓缩，并用二氯甲烷汽提。将得到的固化油状物溶解在二氯甲烷(1mL)中，并通过柱层析进行纯化(二氯甲烷中的MeOH，0％至10％)，得到作为固化油状物的11'-氧代-10'-(2-氧代乙基)-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002661
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(43mg，72％得率)。
步骤2：将11'-氧代-10'-(2-氧代乙基)-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002662
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(21mg，0.056mmol)溶解在二氯甲烷(0.5mL)中，并添加1-甲基哌嗪(9.33μL，0.084mmol)然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(17.83mg，0.084mmol)，并将混合物搅拌过夜。将反应混合物在EtOAc(10mL)与饱和NaHCO3水溶液(10mL)之间分配。进行层分离，并将水性层用EtOAc(10mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤(10mL)，在硫酸钠上干燥，真空浓缩，并用二氯甲烷汽提。将残留物溶解在二氯甲烷(2mL)中，并通过柱层析进行纯化(二氯甲烷中的7M NH3 MeOH溶液，0％至10％)，得到作为无色油状物的10'-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002663
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(15mg，58％得率)。
步骤3：将10'-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-11'-氧代-3',4',7',8',10',11'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002664
]-2'(1'H)-甲酸叔丁酯(15mg，0.033mmol)溶解在二氯甲烷(0.1mL)中，并添加二氧杂环己烷中的4M HCl(1mL，4.00mmol)。3h后，将反应混合物浓缩，并用二氯甲烷汽提，得到作为白色固体的10'-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1',2',3',4',7',8'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002665
]-11'(10'H)-酮二盐酸盐(14mg，定量得率)。
步骤4：将吲哚-2-甲酸(6.32mg，0.039mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(400μL)中，然后添加Et3N(10μL，0.072mmol)和HATU(13.67mg，0.036mmol)，并将混合物搅拌10min。在单独的小管中，将10'-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1',2',3',4',7',8'-六氢螺[环丙烷-1,9'-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003327916790002666
]-11'(10'H)-酮二盐酸盐(14.1mg，0.033mmol)悬浮在N,N-二甲基甲酰胺(400μL)中，并添加Et3N(20μL，0.143mmol)，然后添加一滴水。将所述混合物合并并搅拌过夜。将反应混合物过滤，并通过制备HPLC进行纯化，得到作为白色固体的产物(12.5mg，76％得率)。
Rt 0.92min(方法H)[M+H]+502.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.94-6.79(m,1H),5.20-4.55(m,2H),4.53-4.33(m,2H),4.16-3.89(m,2H),3.77-3.38(m,2H),2.97-2.71(m,2H),2.61-2.52(m,2H),2.49-1.85(m,13H),0.91-0.63(m,2H),0.61-0.41(m,2H).
实施例126
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002673
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002671
Rt 3.88min(方法A2)[M+H]+465.0/467.0
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.08(s,1H),9.12(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),7.32-7.10(m,2H),6.98-6.40(m,2H),5.18-4.49(m,2H),4.24-3.82(m,4H),3.22-2.84(m,2H),1.00-0.70(m,4H).
实施例127
5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002674
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002672
Rt 3.79min(方法A2)[M+H]+467.0
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.11(s,1H),9.12(s,1H),7.33-7.17(m,2H),7.04(s,1H),6.67(t,J＝76.0Hz,1H),5.13-4.53(m,2H),4.15-3.82(m,4H),3.21-2.86(m,2H),1.01-0.73(m,4H).
实施例128
N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-5-(6-氟-4-甲基-1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002683
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002681
Rt 3.89min(方法A2)[M+H]+463.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.73(s,1H),9.11(s,1H),7.00-6.93(m,2H),6.90-6.43(m,2H),4.98-4.63(m,2H),4.15-3.86(m,4H),3.14-2.96(m,2H),2.52(s,3H),0.94-0.80(m,4H).
实施例129
5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002684
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002682
Rt 3.91min(方法A2)[M+H]+483.0/485.0
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.92(s,1H),9.11(s,1H),7.66(d,J＝10.0Hz,1H),7.55(d,J＝6.4Hz,1H),6.95(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),5.15-4.49(m,2H),4.18-3.80(m,4H),3.20-2.78(m,2H),1.01-0.70(m,4H).
实施例130
N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002693
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002691
Rt 3.68min(方法A2)[M+H]+431.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.67(s,1H),9.11(s,1H),7.65(d,J＝8.1Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.5Hz,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.93(s,1H),6.67(t,J＝76.2Hz,1H),5.04-4.64(m,2H),4.14-3.86(m,4H),3.15-2.94(m,2H),0.92-0.80(m,4H).
实施例131
5-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002694
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002692
Rt 3.81min(方法A2)[M+H]+467.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.88(s,1H),9.12(s,1H),7.75-7.56(m,1H),7.36(dd,J＝11.0,7.0Hz,1H),6.95(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),5.18-4.55(m,2H),4.16-3.84(m,4H),3.17-2.89(m,2H),0.93-0.79(m,4H).
实施例132
N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002703
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002701
Rt 1.53min(方法H)[M-H]429.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.68(s,1H),9.32(s,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.18(m,1H),7.10-7.04(m,1H),6.93(s,1H),6.67(t,J＝76.2Hz,1H),5.25-4.77(m,2H),4.11-3.87(m,4H),3.12-2.92(m,2H),0.93-0.74(m,4H).
实施例133
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002704
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002702
Rt 1.65min(方法H)[M-H]463.2/465.2
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.08(s,1H),9.32(s,1H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.12(m,2H),6.90(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),5.20-4.75(m,2H),4.08-3.87(m,4H),3.08-2.91(m,2H),0.93-0.77(m,4H).
实施例134
4'-(1H-吲哚-2-羰基)-13'-[2-(吗啉-4-基)乙基]-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002711
Rt 0.91min(方法H)[M+H]+489.4
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.63(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),6.86(s,1H),5.25-4.56(m,2H),4.44(t,J＝6.8Hz,2H),4.16-3.86(m,2H),3.64-3.45(m,6H),2.95-2.72(m,2H),2.60-2.52(m,2H),2.47-2.34(m,4H),2.18-1.94(m,2H),0.95-0.63(m,2H),0.63-0.38(m,2H).
实施例135
5-(4,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-n[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002713
唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002712
如为实施例100所述来制备。
Rt 3.87min(方法A2)[M+H]+467.1
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.12(s,1H),9.12(s,1H),7.12-6.43(m,4H),5.15-4.49(m,2H),4.20-3.81(m,4H),3.23-2.85(m,2H),0.98-0.72(m,4H).
实施例136
2-{1-[N-甲基-5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-2H,4H,5H,6H,7H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-酰胺基]环丙基}嘧啶-5-甲酸
Figure BDA0003327916790002721
Rt 3.49min(方法B2)[M+H]+538.0/540.0
实施例137
4-{1-[5-(1H-吲哚-2-羰基)-4H,5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-酰胺基]环丙基}苯甲酸
Figure BDA0003327916790002722
Rt 3.30min(方法B2)[M+H]+470.1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.90(s,1H),8.12(s,1H),7.82(d,J＝8.3Hz,2H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.25-7.16(m,3H),7.05(t,J＝7.5Hz,1H),6.93(s,1H),5.38-4.98(m,2H),4.39-4.08(m,4H),1.30(d,J＝8.2Hz,4H).一个信号(1H)与水信号相一致。
实施例138
7-(1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-5H,6H,7H,8H-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002731
Rt 1.45min(方法H)[M+H]+406.2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.33(d,J＝9.3Hz,1H),7.81(s,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.45(d,J＝8.2Hz,1H),7.22(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.5Hz,1H),6.95(s,1H),5.54-4.86(m,2H),4.82-4.69(m,1H),4.38-3.97(m,4H),1.33(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例139
4-(1H-吲哚-2-羰基)-13-甲基-4,8,9,13-四氮杂三环[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮
Figure BDA0003327916790002732
Rt 2.97min(方法A2)m/z 364[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.63(s,1H),7.64(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.19(t,J＝7.5Hz,1H),7.06(t,J＝7.4Hz,1H),6.87(s,1H),5.16-4.60(m,2H),4.39-4.17(m,2H),4.13-3.83(m,2H),3.43-3.34(m,2H),3.14-2.70(m,5H),2.24-2.09(m,2H).
实施例140
4'-(2-羟基乙基)-12'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',7',8',12'-四氮杂螺[环丙烷-1,5'-三环[7.4.0.02,7]十三烷]-1',8'-二烯-3'-酮
Figure BDA0003327916790002741
Rt 1.22min(方法H)m/z 406[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,1H),7.43(d,J＝8.2Hz,1H),7.20(t,J＝7.5Hz,1H),7.06(t,J＝7.4Hz,1H),6.89(s,1H),5.21-4.79(m,2H),4.79-4.66(m,1H),4.17(s,2H),4.09-3.91(m,2H),3.50-3.35(m,4H),2.97-2.74(m,2H),1.18-0.89(m,4H).
实施例141
5-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002743
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002742
Rt 1.6min(方法H)m/z 465[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.88(s,1H),9.32(s,1H),7.76-7.61(m,1H),7.40-7.32(m,1H),6.95(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),5.20-4.77(m,2H),4.12-3.83(m,4H),3.12-2.89(m,2H),0.96-0.78(m,4H).
实施例142
5-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002744
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002751
Rt 1.67min(方法H)m/z 481/483[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.16(s,1H),9.32(s,1H),7.50-7.36(m,1H),7.31-7.23(m,1H),6.93(s,1H),6.67(t,J＝76.1Hz,1H),5.33-4.73(m,2H),3.97(d,J＝23.4Hz,4H),3.16-2.91(m,2H),1.07-0.72(m,4H).
实施例143
5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002753
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002752
Rt 1.61min(方法H)m/z 465[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.10(s,1H),9.32(s,1H),7.31-7.15(m,2H),7.03(s,1H),6.67(t,J＝76.2Hz,1H),5.18-4.73(m,2H),4.12-3.79(m,4H),3.10-2.81(m,2H),0.95-0.74(m,4H).
实施例144
5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-{1-[(二氟甲氧基)甲基]环丙基}-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002754
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002761
Rt 1.67min(方法H)m/z 481/483[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.92(s,1H),9.32(s,1H),7.69-7.62(m,1H),7.59-7.50(m,1H),6.95(s,1H),6.58(d,J＝76.1Hz,1H),5.25-4.62(m,2H),4.08-3.81(m,4H),3.12-2.82(m,2H),0.97-0.70(m,4H).
实施例145
4-(1H-吲哚-2-羰基)-12,13-二甲基-4,8,9,13-四氮杂三环[7.5.0.02,7]十四碳-1,7-二烯-14-酮
Figure BDA0003327916790002762
Rt 1.31min(方法H)m/z 378[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.64(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.23-7.15(m,1H),7.10-7.02(m,1H),6.86(s,1H),5.26-4.52(m,2H),4.40-4.31(m,1H),4.31-4.18(m,1H),4.13-3.82(m,2H),3.78-3.66(m,1H),3.04-2.91(m,3H),2.89-2.72(m,2H),2.31-2.18(m,1H),2.18-2.04(m,1H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例146
4'-(1H-吲哚-2-羰基)-13'-[2-(三氟甲氧基)乙基]-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002771
Rt 1.62min(方法H)m/z 488[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,1H),7.23-7.15(m,1H),7.09-7.02(m,1H),6.96-6.77(m,1H),5.15-4.48(m,2H),4.42-4.21(m,4H),4.16-3.88(m,2H),3.85-3.61(m,2H),3.06-2.69(m,2H),2.17-2.02(m,2H),0.93-0.70(m,2H),0.69-0.46(m,2H).
实施例147
13'-(2,2-二氟乙基)-4'-(1H-吲哚-2-羰基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002772
Rt 1.52min(方法J)m/z 440[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),7.24-7.15(m,1H),7.06(t,J＝7.4Hz,1H),6.98-6.78(m,1H),6.32(t,J＝55.6Hz,1H),5.16-4.50(m,2H),4.43-4.27(m,2H),4.12-3.93(m,2H),3.93-3.72(m,2H),3.04-2.74(m,2H),2.20-2.01(m,2H),0.96-0.74(m,2H),0.66-0.46(m,2H).
实施例148
4'-(1H-吲哚-2-羰基)-13'-(2,2,2-三氟乙基)-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-14'-酮
Figure BDA0003327916790002781
Rt 3.61min(方法A2)m/z 458.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),7.20(t,J＝7.5Hz,1H),7.06(t,J＝7.4Hz,1H),6.87(s,1H),5.24-4.54(m,2H),4.48-4.14(m,4H),4.02(s,2H),3.03-2.73(m,2H),2.23-1.94(m,2H),0.92(s,2H),0.61(s,2H).
实施例149
2-[4'-(1H-吲哚-2-羰基)-14'-氧代-4',8',9',13'-四氮杂螺[环丙烷-1,12'-三环[7.5.0.02,7]十四烷]-1',7'-二烯-13'-基]乙酸甲酯
Figure BDA0003327916790002782
Rt 3.25min(方法A2)m/z 448.2[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.65(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.3Hz,1H),7.19(t,J＝7.5Hz,1H),7.06(t,J＝7.4Hz,1H),6.87(s,1H),5.11-4.55(m,2H),4.55-4.33(m,2H),4.33-3.81(m,4H),3.67(s,3H),3.03-2.73(m,2H),2.24-2.01(m,2H),0.94-0.66(m,2H),0.66-0.41(m,2H).
实施例150
5-(4-氯-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1-二氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002783
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002791
Rt 1.63min(方法H)m/z 421/423[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.23-11.86(m,1H),9.48-8.93(m,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),7.20(t,J＝7.8Hz,1H),7.15(d,J＝7.5Hz,1H),6.89(s,1H),6.20-5.80(m,1H),5.28-4.70(m,2H),4.46-4.22(m,1H),4.17-3.87(m,2H),3.17-2.88(m,2H),1.22(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例151
5-(4,5-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1-二氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002793
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002792
Rt 1.58min(方法H)m/z 423[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.31-11.91(m,1H),9.50-9.03(m,1H),7.26-7.17(m,2H),7.02(s,1H),6.20-5.77(m,1H),5.38-4.63(m,2H),4.45-4.21(m,1H),4.21-3.90(m,2H),3.21-2.84(m,2H),1.22(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例152
5-(4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1-二氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002794
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002801
Rt 1.64min(方法H)m/z 439/441[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.23-12.09(m,1H),9.33-9.14(m,1H),7.42(dd,J＝8.9,4.0Hz,1H),7.25(t,J＝9.4Hz,1H),6.93(s,1H),6.17-5.81(m,1H),5.40-4.65(m,2H),4.44-4.24(m,1H),4.13-3.86(m,2H),3.20-2.86(m,2H),1.22(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例153
N-[(2R)-1,1-二氟丙-2-基]-5-(1H-吲哚-2-羰基)-6-甲基-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002803
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002802
Rt 1.57min(方法H)m/z 401[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.09-11.12(m,1H),9.64-8.92(m,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.4Hz,1H),6.91(s,1H),6.19-5.83(m,1H),5.45(dd,J＝18.0,4.5Hz,1H),5.30-5.19(m,1H),4.76-4.16(m,2H),3.25-3.01(m,1H),2.92(d,J＝16.4Hz,1H),1.27-1.16(m,6H).
实施例154
5-(1H-吲哚-2-羰基)-6-甲基-N-[(2R)-1,1,1-三氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002804
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002811
Rt 1.65min(方法H)m/z 419[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.66(s,1H),9.59(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.17(m,1H),7.11-7.03(m,1H),6.91(s,1H),5.45(dd,J＝18.1,5.0Hz,1H),5.31-5.21(m,1H),4.89-4.71(m,1H),4.71-4.23(m,1H),3.24-3.00(m,1H),2.93(d,J＝16.4Hz,1H),1.41-1.31(m,3H),1.24-1.16(m,3H).
实施例155
5-(5,6-二氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1-二氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002813
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002812
Rt 1.57min(方法H)m/z 423[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.45-11.25(m,1H),9.86-8.72(m,1H),7.72-7.59(m,1H),7.35(dd,J＝11.0,7.0Hz,1H),6.94(s,1H),6.18-5.82(m,1H),5.26-4.71(m,2H),4.44-4.24(m,1H),4.14-3.89(m,2H),3.15-2.85(m,2H),1.22(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例156
5-(6-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羰基)-N-[(2R)-1,1-二氟丙-2-基]-4H,5H,6H,7H-[1,2]
Figure BDA0003327916790002814
唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0003327916790002821
Rt 1.65min(方法H)m/z 439/441[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.93(s,1H),9.25(s,1H),7.66(d,J＝9.9Hz,1H),7.56(d,J＝6.4Hz,1H),6.95(s,1H),6.20-5.80(m,1H),5.34-4.56(m,2H),4.45-4.19(m,1H),4.11-3.86(m,2H),3.23-2.80(m,2H),1.22(d,J＝7.0Hz,3H).
如下所述，在衣壳组装和HBV复制测定法中测定了本发明的所选化合物，并且代表性的一组这些活性化合物示出在表1(衣壳组装测定法)和表2(HBV复制测定法)中。
生物化学衣壳组装测定法
组装效应物活性的筛选在Zlotnick等，(2007)发表的荧光淬灭测定法的基础上进行。将含有N-端组装结构域的149个氨基酸的C-端截短的核心蛋白融合到第150位置处的唯一半胱氨酸残基，并使用pET表达系统(Merck Chemicals,Darmstadt)在大肠杆菌中表达。核心二聚体蛋白的纯化使用一系列孔径排阻层析步骤来进行。简单来说，将来自于表达通过NdeI/XhoI克隆到表达质粒pET21b中的核心蛋白编码序列的1L BL21(DE3)Rosetta2培养物的细胞沉积物，用本源裂解缓冲液(Qproteome细菌蛋白质制备试剂盒；Qiagen,Hilden)在冰上处理1h。在离心步骤后，将上清液在冰上搅拌2h期间用0.23g/ml固体硫酸铵沉淀。在进一步离心后，将得到的沉积物溶解在缓冲液A(100mM Tris,pH 7.5；100mM NaCl；2mMDTT)中，然后装载到缓冲液A平衡的CaptoCore 700柱(GE HealthCare,Frankfurt)上。将含有组装的HBV衣壳的柱穿流液针对缓冲液N(50mM NaHCO3 pH 9.6；5mM DTT)进行透析，然后添加尿素至终浓度为3M，在冰上1.5h，以将衣壳解离成核心二聚体。然后将所述蛋白质溶液装载到1L Sephacryl S300柱上。在用缓冲液N洗脱后，通过SDS-PAGE鉴定含有核心二聚体的级分，然后合并并针对50mM HEPES pH 7.5，5mM DTT进行透析。为了提高所述纯化的核心二聚体的组装能力，进行了第二轮组装和拆解，其始于添加5M NaCl并包括上述的孔径排阻层析步骤。将来自于最后一个层析步骤的含有核心二聚体的级分合并，以1.5至2.0mg/ml之间的浓度分成等分试样，储存在-80℃。
在即将标记之前，通过添加终浓度为20mM的新鲜制备的DTT将所述核心蛋白还原。在冰上温育40min后，使用Sephadex G-25柱(GE HealthCare,Frankfurt)和50mM HEPES，pH7.5除去储存缓冲液和DTT。对于标记来说，将1.6mg/ml核心蛋白与终浓度为1mM的BODIPY-FL马来酰亚胺(Invitrogen,Karlsruhe)在4℃下在暗处温育过夜。在标记后，使用SephadexG-25柱，通过额外的脱盐步骤除去游离染料。将标记的核心二聚体分成等分试样储存在4℃。在二聚体状态下，所述标记的核心蛋白的荧光信号高，并在所述核心二聚体组装成高分子衣壳结构期间淬灭。所述筛选测定法在黑色384孔微量滴定板中，在10μl总测定体积中，使用50mM HEPES pH 7.5和1.0至2.0μM标记的核心蛋白来进行。每种筛选化合物以8种不同浓度添加，使用始于100μM、31.6μM或10μM的终浓度的0.5对数单位的连续稀释。在任何情况下，在整个微量滴定板上的DMSO浓度为0.5％。所述组装反应通过注入NaCl至终浓度为300μM来启动，这将组装过程诱导到最大淬灭信号的大约25％。在开始反应后6min，使用Clariostar读板器(BMG Labtech,Ortenberg)，使用477nm的激发和525nm的发射测量荧光信号。作为100％和0％组装对照，使用含有2.5M和0M NaCl的HEPES缓冲液。实验进行三次，每次三份平行样。使用Graph Pad Prism 6软件(GraphPad Software,La Jolla,USA)通过非线性回归分析来计算EC50值。
从HepAD38细胞的上清液确定HBV DNA
在稳定转染的细胞系HepAD38中分析抗HBV活性，所述细胞系已被描述分泌高水平的HBV病毒粒子(Ladner等，1997)。简单来说，将HepAD38细胞在37℃和5％CO2和95％湿度下在200μl维持培养基中培养，所述维持培养基是Dulbecco's改良的Eagle's培养基/营养物混合物F-12(Gibco,Karlsruhe)，10％胎牛血清(PAN Biotech Aidenbach)，并增补有50μg/ml青霉素/链霉素(Gibco,Karlsruhe)、2mM L-谷氨酰胺(PAN Biotech,Aidenbach)、400μg/ml G418(AppliChem,Darmstadt)和0.3μg/ml四环素。将细胞每周一次以1:5的比例传代培养，但通常不传代超过10次。对于测定法来说，将60,000个细胞接种在96孔板的每个孔中的不含任何四环素的维持培养基中，并用测试化合物的连续半对数稀释液处理。为了使边缘效应最小化，所述板的外侧36个孔不使用，而是装填有测定介质。在每个测定板上，分别分派6个孔用于病毒对照(未处理的HepAD38细胞)和6个孔用于细胞对照(用0.3μg/ml四环素处理的HepAD38细胞)。此外，在每个实验中制备一块使用参比抑制剂如BAY 41-4109、恩替卡韦和拉夫米定代替筛选化合物设置的板。通常，实验进行三次，每次使用三份平行样。在第6天，在MagNa Pure LC仪器上，使用MagNA Pure 96DNA和病毒NA小体积试剂盒(RocheDiagnostics,Mannheim)，按照制造商的说明书从100μl过滤的细胞培养上清液(AcroPrepAdvance 96过滤板，0.45μM Supor膜，PALL GmbH,Dreieich)自动纯化HBV DNA。EC50值从HBV DNA的相对拷贝数计算。简单来说，使用LC480 Probes Master试剂盒(Roche)，将100μl含有HBV DNA的洗脱液中的5μl与1μM反义引物tgcagaggtgaagcgaagtgcaca、0.5μM正义引物gacgtcctttgtttacgtcccgtc、0.3μM杂交探针acggggcgcacctctctttacgcgg-FL和LC640-ctccccgtctgtgccttctcatctgc-PH(TIBMolBiol,Berlin)一起，在12.5μl的终体积中进行PCR。PCR在Light Cycler 480实时系统(Roche Diagnostics,Mannheim)上，使用下述方案进行：在95℃预温育1min，扩增：40个循环x(95℃10sec，60℃50sec，70℃1sec)，在40℃冷却10sec。病毒载量针对已知标准品，使用pCH-9/3091的HBV质粒DNA(Nassal等，1990,Cell63:1357–1363)和LightCycler 480SW1.5软件(Roche Diagnostics,Mannheim)来定量，并使用GraphPad Prism6(GraphPad Software Inc.,La Jolla,USA)，使用非线性回归来计算EC50值。
细胞存活测定法
使用AlamarBlue存活测定法，在HepAD38细胞中，在0.3μg/ml的阻断HBV基因组表达的四环素存在下评估细胞毒性。测定条件和板布置与抗HBV测定法类似，然而使用其他对照。在每个测定板上，使用含有未处理的HepAD38细胞的6个孔作为100％存活对照，并使用只装填有测定介质的6个孔作为0％存活对照。此外，在每个实验中将始于60μM最终测定浓度的环己酰亚胺的几何浓度系列用作阳性对照。在6天的温育期后，向测定板的每个孔添加1/11稀释的Alamar Blue Presto细胞存活试剂(ThermoFisher,Dreieich)。在37℃温育30至45min后，使用带有550nm激发滤光片和595nm发射滤光片的Tecan Spectrafluor Plus读板器读取与活细胞数目成正比的荧光信号。将数据归一化成未处理的对照(100％存活率)和测定介质(0％存活率)的百分率，然后使用非线性回归和GraphPad Prism 6.0(GraphPadSoftware,La Jolla,USA)计算CC50值。使用平均EC50和CC50值计算每种测试化合物的选择性指数(SI＝CC50/EC50)。
体内功效模型
抗病毒剂的HBV研究和临床前测试受限于所述病毒的狭窄物种和组织趋向性、可用感染模型的匮乏以及唯一对HBV感染完全易感的动物黑猩猩的使用所施加的限制。可选的动物模型是基于使用与HBV亲缘的嗜肝DNA病毒，并且已在土拨鼠肝炎病毒(WHV)感染的土拨鼠或鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染的鸭或毛猴HBV(WM-HBV)感染的树鼩中测试了各种不同的抗病毒化合物(在Dandri等，2017,Best Pract Res Clin Gastroenterol 31,273-279中概述)。然而，替代病毒的使用具有几个限制。例如，最远缘的DHBV与HBV之间的序列同源性仅为约40％，并且这就是HAP家族的核心蛋白组装修饰剂似乎对DHBV和WHV无活性但高效抑制HBV的原因(Campagna等，2013,J.Virol.87,6931-6942)。小鼠不容许HBV复制，但主要的工作聚焦于HBV复制和感染的小鼠模型的开发，例如人类HBV转基因小鼠(HBV tg小鼠)的产生、HBV基因组在小鼠中的流体力学注射(HDI)或具有人源化肝脏和/或人源化免疫系统的小鼠的产生，以及基于含有HBV基因组的腺病毒(Ad-HBV)或腺相关病毒(AAV-HBV)的病毒载体在免疫活性小鼠中的静脉内注射(在Dandri等，2017,Best Pract Res ClinGastroenterol 31,273-279中概述)。使用完整HBV基因组的转基因小鼠，可以证实鼠类肝细胞产生感染性HBV病毒粒子的能力(Guidotti等，1995,J.Virol.,69:6158-6169)。由于转基因小鼠对病毒蛋白免疫耐受并且在产生HBV的小鼠中没有观察到肝损伤，因此这些研究证实了HBV本身不引起细胞病变。HBV转基因小鼠已被用于测试几种抗HBV药剂如聚合酶抑制剂和核心蛋白组装修饰剂的功效(Weber等，2002,Antiviral Research 54 69–78；Julander等，2003,Antivir.Res.,59:155-161)，由此证明了HBV转基因小鼠良好地适合于许多类型的临床前体内抗病毒测试。
正如在Paulsen等，2015,PLOSone,10:e0144383中所述，在第2916/2917位处带有移码突变(GC)的HBV转基因小鼠(Tg[HBV1.3fsX-3’5’])可用于证实核心蛋白组装修饰剂的体内抗病毒活性。简单来说，在实验前通过qPCR检查所述HBV转基因小鼠的血清中的HBV特异性DNA(参见“从HepAD38细胞的上清液确定HBV DNA”一节)。每个处理组由大约10周龄的5只雄性和5只雌性动物构成，并且滴度高于每mL血清107–108个病毒粒子。将化合物在适合的介质例如2％DMSO/98％侵填体(0.5％甲基纤维素/99.5％PBS)或50％PEG400中配制成悬液，并在10天期间每天1至3次经口给药到所述动物。介质充当阴性对照，而将适合的介质中的1μg/kg恩替卡韦作为阳性对照。使用异氟烷喷雾器通过眼球后采血获取血液。为了收集最后一次处理后6小时的终末心脏穿刺血液或器官，将小鼠用异氟烷麻醉并随后通过CO2暴露处死。将眼球后(100–150μl)和心脏穿刺(400–500μl)血样分别收集在Microvette 300LH或Microvette 500LH中，然后通过离心(10min，2000g，4℃)分离血浆。获取肝组织并在液体N2中速冻。将所有样品储存在-80℃下直至进一步使用。从50μl血浆或25mg肝组织提取病毒DNA，并按照制造商的说明书使用DNeasy 96血液和组织试剂盒(Qiagen,Hilden)洗脱在50μl AE缓冲液(血浆)中或使用DNeasy组织试剂盒(Qiagen,Hilden)洗脱在320μl AE缓冲液(肝组织)中。使用LightCycler 480Probes Master PCR试剂盒(Roche,Mannheim)，按照制造商的说明书对洗脱的病毒DNA进行qPCR，以确定HBV拷贝数。使用的HBV特异性引物包括正向引物5’-CTG TAC CAA ACC TTC GGA CGG-3’，反向引物5’-AGG AGA AAC GGG CTG AGG C-3’和FAM标记的探针FAM-CCA TCA TCC TGG GCT TTC GGA AAA TT-BBQ。具有20μl总体积的一个PCR反应样品含有5μl DNA洗脱液和15μl主混合物(包含0.3μM正向引物，0.3μM反向引物，0.15μMFAM标记的探针)。qPCR在Roche Light Cycler 1480上使用下述方案进行：在95℃预温育1min，扩增：(95℃10sec，60℃50sec，70℃1sec)x 45个循环，在40℃冷却10sec。如上所述产生标准曲线。所有样品进行一式两份试验。所述测定法的检测限是～50HBV DNA拷贝(使用在250–2.5x107拷贝数范围内的标准品)。结果被表示为HBV DNA拷贝/10μl血浆或HBV DNA拷贝/100ng总肝DNA(归一化至阴性对照)。
在多项研究中已显示，不仅转基因小鼠是证明新的化学实体在体内的抗病毒活性的适合模型，而且HBV基因组的流体力学注射在小鼠中的使用以及用HBV阳性患者血清感染的免疫缺陷的人类肝嵌合小鼠的使用已被频繁用于描述靶向HBV的药物(Li等，2016,Hepat.Mon.16:e34420；Qiu等，2016,J.Med.Chem.59:7651-7666；Lutgehetmann等，2011,Gastroenterology,140:2074-2083)。此外，通过接种低剂量的含有HBV基因组的腺病毒(Huang等，2012,Gastroenterology 142:1447-1450)或腺相关病毒(AAV)载体(Dion等，2013,J Virol.87:5554-5563)，也已在免疫感受态小鼠中成功地建立慢性HBV感染。这个模型也可用于证实新的抗HBV药剂的体内抗病毒活性。
表1：衣壳组装测定法
在表1中，“A”表示IC50<5μM；“B”表示5μM<IC50<10μM；“C”表示IC50<100μM
Figure BDA0003327916790002881
Figure BDA0003327916790002891
Figure BDA0003327916790002901
Figure BDA0003327916790002911
Figure BDA0003327916790002921
表2:HBV复制测定法
在表2中，“+++”表示EC50<1μM；“++”表示1μM<EC50<10μM；“+”表示EC50<100μM
Figure BDA0003327916790002922
Figure BDA0003327916790002931
Figure BDA0003327916790002941
Figure BDA0003327916790002951
序列表
<110> 艾库里斯有限及两合公司（AiCuris GmbH & Co. KG）
<120> 具有抗乙型肝炎病毒（HBV）活性的新的吲哚-2-甲酰胺类化合物
<130> A75284WO
<160> 7
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反义引物HBV
<400> 1
tgcagaggtg aagcgaagtg caca 24
<210> 2
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正义引物HBV
<400> 2
gacgtccttt gtttacgtcc cgtc 24
<210> 3
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 杂交探针FL HBV
<400> 3
acggggcgca cctctcttta cgcgg 25
<210> 4
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 杂交探针PH HBV
<400> 4
ctccccgtct gtgccttctc atctgc 26
<210> 5
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> HBV正向引物
<400> 5
ctgtaccaaa ccttcggacg g 21
<210> 6
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> HBV反向引物
<400> 6
aggagaaacg ggctgaggc 19
<210> 7
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 用于HBV的FAM标记的探针
<400> 7
ccatcatcct gggctttcgg aaaatt 26

Claims (27)

1.式I的化合物
Figure FDA0003327916780000011
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure FDA0003327916780000012
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基、CH2CH2-O-CH2-C6-芳基、CH2CH2-O-C1-C3-烷基、CH2CH2-N-(C1-C3-烷基)2、CH2CH2OCF3、CH2-C(O)-O-C1-C3-烷基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(吗啉-4-基)乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure FDA0003327916780000021
唑基、异
Figure FDA0003327916780000022
唑基、咪唑基、吡唑基、1,3-二氧杂环己烷基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基、氨基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、CH2-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure FDA0003327916780000023
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure FDA0003327916780000024
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-R14是H或F
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键，
或其可药用盐，或式I的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式I的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
2.根据权利要求1所述的式I的化合物
Figure FDA0003327916780000031
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure FDA0003327916780000032
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-羟基乙基和环丙基
-R9选自H、C1-C6-烷基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、
Figure FDA0003327916780000033
唑基、异
Figure FDA0003327916780000034
唑基、咪唑基、吡唑基、CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2OCHF2、CH2-O-C3-C5-环烷基、CH2-O-C(O)-C6-芳基和CH2-O-C1-C3-烷基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基、OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R8和R9任选地被连接以形成由2或3个C3-C7环构成的螺环环系统，其任选地被选自OH、OCHF2、OCF3、羧基和卤素的1、2或3个基团取代
-R13选自CH2-O-CH2CH2CH2OH、CH2-O-CH2CH2OH、CH2-O-C6-芳基、CH2-O-羧基苯基、羧基苯基、羧基吡啶基、羧基嘧啶基、羧基吡嗪基、羧基哒嗪基、羧基三嗪基、羧基
Figure FDA0003327916780000042
唑基、羧基咪唑基、羧基吡唑基或羧基异
Figure FDA0003327916780000043
唑基，其任选地被各自独立地选自C1-C4-烷基和卤素的1、2或3个基团取代
-m是0或1
-n是0、1或2
-q是0或1，
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键，
或其可药用盐，或式I的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式I的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
3.根据权利要求1所述的式I的化合物
Figure FDA0003327916780000041
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-Y选自
Figure FDA0003327916780000051
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F
其中虚线是C(O)与Y之间的共价键，
或其可药用盐，或式I的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式I的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
4.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式IIb的化合物
Figure FDA0003327916780000052
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X1和Y1对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式IIb的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IIb的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
5.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式IIc的化合物
Figure FDA0003327916780000061
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X2和Y2对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式IIc的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IIc的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
6.根据权利要求1、2、4或5中的任一项所述的式I的化合物，其是式IIa的化合物
Figure FDA0003327916780000062
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基，
或其可药用盐，或式IIa的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IIa的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
7.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式IIIb的化合物
Figure FDA0003327916780000071
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X3和Y3对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式IIIb的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IIIb的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
8.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式IIIc的化合物
Figure FDA0003327916780000081
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X4和Y4对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式IIIc的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IIIc的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
9.根据权利要求1、2、7或8中的任一项所述的式I的化合物，其是式IIIa的化合物
Figure FDA0003327916780000082
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基，
或其可药用盐，或式IIIa的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IIIa的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
10.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式IVb的化合物
Figure FDA0003327916780000091
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X5和Y5对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式IVb的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IVb的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
11.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式IVc的化合物
Figure FDA0003327916780000101
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X6和Y6对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式IVc的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IVc的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
12.根据权利要求1、2、10或11中的任一项所述的式I的化合物，其是式IVa的化合物
Figure FDA0003327916780000102
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基，
或其可药用盐，或式IVa的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IVa的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
13.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式Vb的化合物
Figure FDA0003327916780000111
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X7和Y7对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式Vb的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式Vb的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
14.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式Vc的化合物
Figure FDA0003327916780000121
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X8和Y8对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式Vc的化合物或其可药用盐的溶剂化物，式Vc的化合物或的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
15.根据权利要求1、2、13或14中的任一项所述的式I的化合物，其是式Va的化合物
Figure FDA0003327916780000122
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基，
或其可药用盐，或式Va的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式Va的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
16.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式VIb的化合物
Figure FDA0003327916780000131
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X9和Y9对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式VIb的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式VIb的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
17.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式VIc的化合物
Figure FDA0003327916780000141
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-X10和Y10对于每个位置来说独立地选自CH和N，
或其可药用盐，或式VIc的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式VIc的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
18.根据权利要求1、2、16或17中的任一项所述的式I的化合物，其是式VIa的化合物
Figure FDA0003327916780000151
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基，
或其可药用盐，或式VIa的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式VIa的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
19.根据权利要求1或2所述的式I的化合物，其是式VII的化合物
Figure FDA0003327916780000152
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R8选自H、甲基、CD3、乙基、2,2-二氟乙基、2-羟基乙基、环丙基和2,2,2-三氟乙基
-q是0或1
-n是0、1或2，
或其可药用盐，或式VII的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式VII的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
20.根据权利要求1或3所述的式I的化合物，其是式IX的化合物
Figure FDA0003327916780000161
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F
或其可药用盐，或式IX的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式IX的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
21.根据权利要求1或3所述的式I的化合物，其是式X的化合物
Figure FDA0003327916780000171
其中
-R3、R4、R5和R6对于每个位置来说独立地选自H、F、Cl、Br、I、CF3、CF2H、C1-C4-烷基、CF2CH3、环丙基、氰基和硝基
-R7选自H、D和C1-C6-烷基
-R14是H或F
或其可药用盐，或式X的化合物或其可药用盐的溶剂化物，或式X的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物。
22.根据权利要求1至21中的任一项所述的式I的化合物或其可药用盐或式I的化合物或其可药用盐的溶剂化物或式I的化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物，
其中所述前体药物选自酯和酰胺，优选为脂肪酸的烷基酯。
23.根据权利要求1至21中的任一项所述的化合物或其可药用盐或所述化合物或其可药用盐的溶剂化物或水合物或所述化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物或水合物，用于在对象中预防或治疗HBV感染。
24.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至21中的任一项所述的化合物或其可药用盐或所述化合物或其可药用盐的溶剂化物或水合物或所述化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物或水合物，以及可药用载体。
25.一种在需要的个体中治疗HBV感染的方法，所述方法包括向所述个体给药治疗有效量的根据权利要求1至21中的任一项所述的化合物或其可药用盐或所述化合物或其可药用盐的溶剂化物或水合物或所述化合物的前体药物或其可药用盐或溶剂化物或水合物。
26.一种制备权利要求1中所定义的式I的化合物的方法，所述方法包括将式VIII的化合物
Figure FDA0003327916780000181
其中R3、R4、R5和R6如权利要求1中所定义，与选自下述的化合物反应
Figure FDA0003327916780000182
其中R7、R8、R9、R13、R14、m、n和q如权利要求1中所定义。
27.根据权利要求26所述的制备式I的化合物的方法，其中将式VIII的化合物
Figure FDA0003327916780000191
其中R3、R4、R5和R6如权利要求2中所定义，与选自下述的化合物反应
Figure FDA0003327916780000192
其中R7、R8、R9、R13、m、n和q如权利要求2中所定义。
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