CN113906030A - 稠合杂环衍生物 - Google Patents

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CN113906030A
CN113906030A CN202080039627.1A CN202080039627A CN113906030A CN 113906030 A CN113906030 A CN 113906030A CN 202080039627 A CN202080039627 A CN 202080039627A CN 113906030 A CN113906030 A CN 113906030A
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M·奥布林格
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Abstract

本申请描述了稠合杂环衍生化合物、包含这些化合物的药物组合物、用于制备这些化合物的化学方法、及其在治疗与HBV感染相关的疾病中的用途。

Description

稠合杂环衍生物
技术领域
本申请涉及稠合杂环衍生化合物、包含这些化合物的药物组合物、用于制备这些化合物的化学方法、及其在治疗HBV或与HBV感染相关的疾病中的用途。
相关申请的交叉引用
本申请要求于2019年5月28日提交的欧洲申请号19177009.8和于2019年5月28日提交的美国临时申请号62/853,528的优先权，其内容以其整体并入本文。
背景技术
慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是重大的全球健康问题，影响超过5％的世界人口(全球超过3.5亿人，美国有125万人)。
尽管有预防性HBV疫苗可供使用，但慢性HBV感染的负担仍然是重大的未得到满足的全球医学问题，原因是发展中国家大多数地区的治疗选择并不理想，而且新感染率持续不变。目前的治疗不能治愈，并仅限于两类药剂(干扰素α和核苷类似物/病毒聚合酶抑制剂)；抗药性、疗效低和耐受性问题限制了其影响。HBV的治愈率低至少部分归因于用单一抗病毒剂难以完全抑制病毒产生的事实。然而，持续抑制HBV DNA减缓了肝脏疾病的进展并有助于预防肝细胞癌。目前HBV感染患者的治疗目标是将血清HBV DNA降至低水平或不可检测水平，并最终减少或预防肝硬化和肝细胞癌的发展。
HBV衣壳蛋白在病毒的生命周期中起着重要的作用。HBV衣壳/核心蛋白形成亚稳病毒颗粒或蛋白质壳，其在细胞间传代期间保护病毒基因组，并还在病毒复制过程中发挥核心作用，包括基因组衣壳化、基因组复制和病毒体形态发生和外出。衣壳结构还对环境提示作出反应，以便在病毒进入后允许不包被。一致地，已经发现衣壳组装和拆卸的适当时机、适当的衣壳稳定性和核心蛋白的功能对于病毒感染性是至关重要的。
HBV衣壳蛋白的关键功能对病毒衣壳蛋白序列施加了严格的进化约束，导致观察到低序列可变性和高保守性。一致地，HBV衣壳中破坏其组装的突变是致命的，并且扰动衣壳稳定性的突变会严重减弱病毒的复制。对多功能HBV核心/衣壳蛋白的高功能约束与高序列保守性一致，因为许多突变对功能有害。实际上，核心/衣壳蛋白序列在HBV基因型中的一致性>90％，并且仅显示少量的多态性残基。因此，很难选择对HBV核心/衣壳蛋白结合化合物的抗药性，而不会对病毒复制适应性产生重大影响。
报道描述了结合病毒衣壳和抑制HIV、鼻病毒和HBV复制的化合物，为病毒衣壳蛋白作为抗病毒药物靶点的概念提供了强有力的药理学证据。
WO 2018/005881和WO 2018/005883披露了用于治疗HBV的稠合三环衍生物。
本领域需要可增加对病毒产生的遏制并可治疗、改善和/或预防HBV感染的治疗剂。将此类治疗剂作为单一疗法或与其他HBV治疗或辅助治疗组合施用至HBV感染患者将导致显著降低的病毒载量、改善的预后、减少的疾病进展和增强的血清转化率。
鉴于HBV的临床重要性，能够增加遏制病毒产生的化合物以及可以治疗、改善和/或预防HBV感染的化合物的鉴定代表了开发新的治疗剂的有吸引力的途径。本文提供了此类化合物。
发明内容
本披露涉及本文所附独立权利要求和从属权利要求分别限定的一般和优选的实施例，将其通过援引并入本文。本发明涉及能够调节衣壳组装的化合物。本发明的化合物可以提供相对于现有技术的化合物的特性的有利平衡。特别地，本披露涉及具有式(I)的化合物：
Figure BDA0003377545370000031
或其立体异构体或互变异构体，其中
Figure BDA0003377545370000032
是包含一个、两个或三个杂原子的5元杂芳基，这些杂原子独立地选自由N、O和S组成的组，其中该5元杂芳基被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由以下组成的组：H、C1-4烷基、CF3、CF2H、NH2、NH(CH3)、N(CH3)2和苯基；
R1是5元至10元单环或双环，更特别地是5元至9元单环或双环，其中该5元至10元单环或双环，更特别地该5元至9元单环或双环：
-任选地含有1个至3个杂原子，这些杂原子各自独立地选自N、O和S；和/或
-任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由以下组成的组：氢、卤素、CN、CF3、CF2H、CFH2、CF2CH3、C1-6烷基、OC1-6烷基、OCF3、OCF2H和C3-4环烷基；
更特别地R1是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基各自独立地选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
R2选自由以下组成的组：H、C1-4烷基和被一个或多个F取代的C1-4烷基；
J是CHR3；
R3选自由H、CH2OH、和C(＝O)N(R4)(R5)组成的组；
R4和R5各自独立地选自由H、C1-4烷基、和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组；
K选自由C(R6)(R7)、C＝CH2和C(＝O)组成的组；
R6和R7各自独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、OCH3、CH2OH、C(＝O)R8和C(＝O)N(R9)(R10)；
R8是OH或吗啉；
R9和R10各自独立地选自由以下组成的组：H、苯基、C1-4烷基和C3-4环烷基，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组；
n是整数0或1；
L是C(R11)(R12)、NH、O；
R11和R12各自独立地选自由H和C(＝O)N(R13)(R14)组成的组；并且
R13和R14各自独立地选自由H、C1-4烷基和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组，
或其药学上可接受的盐。
另外的实施例包括具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐、具有式(I)的化合物的药学上可接受的前药、具有式(I)的化合物的药学活性代谢物、以及具有式(I)的化合物的对映异构体和非对映异构体，以及其药学上可接受的盐。
在实施例中，具有式(I)的化合物是选自以下具体实施方式中所述或者例证说明的那些种类的化合物。
本披露还涉及包含一种或多种具有式(I)的化合物、具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐、具有式(I)的化合物的药学上可接受的前药以及具有式(I)的药学活性代谢物的药物组合物。药物组合物可以进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂或一种或多种其他的药剂或疗法。
本披露还涉及具有式(I)的化合物的使用方法或用途。在实施例中，具有式(I)的化合物用于预防、治疗或改善乙型肝炎病毒(HBV)感染、增加对HBV产生的遏制、干扰HBV衣壳组装或其他HBV病毒复制步骤或HBV产物。这些方法包括向需要这样的方法的受试者施用有效量的至少一种具有式(I)的化合物、具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐、具有式(I)的化合物的药学上可接受的前药以及具有式(I)的化合物的药学活性代谢物。治疗方法的另外的实施例在具体实施方式中进行了阐述。本文提供的任何方法可进一步包括向该个体施用至少一种另外的治疗剂，更特别地至少一种其他的HBV抑制剂。
本披露还涉及具有式(Ia)的化合物：
Figure BDA0003377545370000051
以及具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、同位素变体、N-氧化物或溶剂化物；
其中
R1b独立地选自由以下组成的组：氢、C1-4烷基、羟基、羟基甲基、(2,2-二氟乙氧基)甲基、OC1-4烷基、和氟；
R1a独立地是氢或与R1b一起形成甲基烯基；
na是整数0、1、或2；
R2a独立地选自由氢和C1-6烷基组成的组；
R3a选自由以下组成的组：Cl、CN、和C1-4卤代烷基；
R4a是H或F；
HET是5元或6元杂芳基，该5元或6元杂芳基任选独立地被一个至两个取代基取代，该一个至两个取代基选自由以下组成的组：C1-4烷基、溴、氯、氟、和羟基(C1-4)烷基；
X和Y各自独立地选自：N或C，使得在任何情况中X和Y中只有一个是N；
Z1是N或C；并且
Z2是N或CF。
另外的实施例包括具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐、具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的前药、具有式(Ia)的化合物的药学活性代谢物、以及具有式(Ia)的化合物的对映异构体和非对映异构体，以及其药学上可接受的盐。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是选自以下具体实施方式中所述或者例证说明的那些种类的化合物。
本披露还涉及包含一种或多种具有式(Ia)的化合物、具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐、具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的前药以及具有式(Ia)的药学活性代谢物的药物组合物。药物组合物可以进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂或一种或多种其他的药剂或疗法。
本披露还涉及具有式(Ia)的化合物的使用方法或用途。在实施例中，具有式(Ia)的化合物用于治疗或改善乙型肝炎病毒(HBV)感染、增加对HBV产生的遏制、干扰HBV衣壳组装或其他HBV病毒复制步骤或HBV产物。这些方法包括向需要这样的方法的受试者施用有效量的至少一种具有式(Ia)的化合物、具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐、具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的前药以及具有式(Ia)的化合物的药学活性代谢物。治疗方法的另外的实施例在具体实施方式中进行了阐述。
本披露的目的是克服或改善常规方法和/或先前技术的缺点中的至少一种或者提供其有用的可替代方法。根据以下具体实施方式和通过所披露的主题的实践，本披露的另外实施例、特征和优点将是显而易见的。
具体实施方式
根据这样的披露的以下具体实施方式和通过其实践，本披露的主题的另外的实施例、特征和优点将是显而易见的。为了简短起见，在本说明书中引用的出版物(包括专利)通过援引并入本文。
本文提供了具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐、药学上可接受的前药以及所披露化合物的药学活性代谢物。这些化合物相比于现有技术的化合物可以提供特性的有利平衡。
在一方面，本文提供了具有式(I)的化合物、
Figure BDA0003377545370000071
或其立体异构体或互变异构体、或其药学上可接受的盐，其中
Figure BDA0003377545370000072
是包含一个、两个或三个杂原子的5元杂芳基，这些杂原子独立地选自由N、O和S组成的组，其中该5元杂芳基被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：H、C1-4烷基、CF3、CF2H、NH2、NH(CH3)、N(CH3)2和苯基；
R1是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
R2选自由以下组成的组：H、C1-4烷基和被一个或多个F取代的C1-4烷基；
J是CHR3；
R3选自由H、CH2OH、和C(＝O)N(R4)(R5)组成的组；
R4和R5独立地选自由H、C1-4烷基、和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组；
K选自由C(R6)(R7)、C＝CH2和C(＝O)组成的组；
R6和R7独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、OCH3、CH2OH、C(＝O)R8和C(＝O)N(R9)(R10)；
R8是OH或吗啉；
R9和R10独立地选自由以下组成的组：H、苯基、C1-4烷基、和C3-4环烷基，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组；
n是整数0或1；
L是C(R11)(R12)、NH、O；
R11和R12独立地选自由H和C(＝O)N(R13)(R14)组成的组；并且
R13和R14独立地选自由H、C1-4烷基、和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组。
在实施例中，具有式(I)的化合物是如下化合物，其中R1是被一个或多个Cl取代基取代的苯基，更特别地其中R1是二氯苯基。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中R2是H或甲基的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中R3是H的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中K是C(R6)(R7)或C＝CH2的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中K是C(R6)(R7)或C＝CH2的化合物，其中
R6和R7各自独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、OCH3、CH2OH、C(＝O)R8和C(＝O)N(R9)(R10)；
R8是OH或吗啉；并且
R9和R10各自独立地选自由以下组成的组：H、苯基、C1-4烷基和C3-4环烷基，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组。
在实施例中，具有式(I)的化合物是如下化合物，其中R6和R7独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、CH2OH和C(＝O)N(R9)(R10)。
在实施例中，具有式(I)的化合物是如下化合物，其中R6和R7独立地选自由H、OH和C(＝O)N(R9)(R10)组成的组。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中K是C(R6)(R7)的化合物，并且其中R6和R7各自独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、CH2OH和C(＝O)N(R9)(R10)，更特别地，其中R6是H或OH，并且R7选自由以下组成的组：H、F、OH、CH2OH和C(＝O)N(R9)(R10)；并且其中R9和R10各自独立地选自由以下组成的组：H、苯基、C1-4烷基、和C3-4环烷基，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组。
在实施例中，具有式(I)的化合物是R9和R10独立地选自由C1-4烷基和C3-4环烷基组成的组的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中R11和R12中的每一个是氢的化合物。在实施例中，具有式(I)的化合物是如下化合物，其中
Figure BDA0003377545370000091
选自由以下组成的组：异噁唑、吡唑、咪唑、噁唑和噻唑，并且其中
Figure BDA0003377545370000092
任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：H、C1-4烷基、CF3、CF2H、NH2、NH(CH3)、N(CH3)2和苯基。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中
Figure BDA0003377545370000093
是异噁唑的化合物，该异噁唑任选地被选自C1-4烷基和NH2的取代基取代。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中
Figure BDA0003377545370000101
是吡唑的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中n是0的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是其中n是1的化合物。
在实施例中，具有式(I)的化合物是显示对于hepG2.117细胞系中的HBV DNA的抑制具有小于0.10μM的EC50的化合物。
本披露的另一个实施例是选自由以下组成的组的化合物：以下所述的化合物(参见表1)、其立体异构体或互变异构体、或其药学上可接受的盐。
表1.
Figure BDA0003377545370000102
Figure BDA0003377545370000111
Figure BDA0003377545370000121
Figure BDA0003377545370000131
在一方面，本文提供了具有式(Ia)的化合物：
Figure BDA0003377545370000132
以及具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、同位素变体、N-氧化物或溶剂化物；
其中
R1b选自由以下组成的组：氢、C1-4烷基、羟基、羟基甲基、(2,2-二氟乙氧基)甲基、OC1-4烷基、和氟；
R1a是氢或与R1b一起形成甲基烯基；
na是整数0、1、或2；
R2a选自由氢和C1-6烷基组成的组；
R3a选自由以下组成的组：Cl、CN、和C1-4卤代烷基；
R4a是H或F；
HET是5元或6元杂芳基，该5元或6元杂芳基任选独立地被一个至两个取代基取代，该一个至两个取代基选自C1-4烷基、溴、氯、氟、和羟基(C1-4)烷基；
X和Y各自独立地选自：N或C，使得在任何情况中X和Y中只有一个是N；
Z1是N或C；并且
Z2是N或CF。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是如下化合物，其中R1b是氢、C1-4烷基、羟基、羟基甲基、(2,2-二氟乙氧基)甲基、OC1-4烷基、或氟。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是如下化合物，其中R1b和R1a与R1b一起形成甲基烯基。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中na是1的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中na是0的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中na是2的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中R2a是H或CH3的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中R2a是H的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中R2a是CH3的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中R3a是Cl、CN、或CF3的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中R4a是H的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中R4a是F的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中Y是N并且X是C的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中Y是C并且X是N的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中Z1是N的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中Z1是C的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中Z2是N的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中Z2是CF的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中
Figure BDA0003377545370000151
是3-氰基-4-氟苯基、4-氟-3-(三氟甲基)苯基、或3-氯-4-氟苯基的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是其中
Figure BDA0003377545370000152
是3-氰基-4-氟苯基的化合物。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是如下化合物，其中HET是杂芳基，该杂芳基独立地选自由以下组成的组：异噁唑基、吡啶基、三唑基、3-甲基-三唑基、哒嗪基、吡唑基、或1-甲基吡唑基。
在实施例中，具有式(Ia)的化合物是如下化合物，其中HET是杂芳基，该杂芳基独立地选自由异噁唑基和吡唑基组成的组。
本披露的另一个实施例是选自由以下组成的组的化合物：
表2.
Figure BDA0003377545370000161
Figure BDA0003377545370000171
Figure BDA0003377545370000181
Figure BDA0003377545370000191
Figure BDA0003377545370000201
Figure BDA0003377545370000211
Figure BDA0003377545370000221
及其药学上可接受的盐、N-氧化物或溶剂化物。
药物组合物
本文还披露了药物组合物，这些药物组合物包含根据本发明的化合物、或其药学上可接受的盐、以及至少一种药学上可接受的载体。
本披露的实施例是药物组合物，该药物组合物包含至少一种药学上可接受的赋形剂和至少一种选自由以下组成的组的化合物：以下所述的化合物(参见表3)、或其立体异构体或互变异构体、或其药学上可接受的盐。
因此，本文还披露了药物组合物，这些药物组合物包含
(A)至少一种具有式(I)的化合物：
Figure BDA0003377545370000231
或其立体异构体或互变异构体、或其药学上可接受的盐，其中
Figure BDA0003377545370000232
是包含一个、两个或三个杂原子的5元杂芳基，这些杂原子独立地选自由N、O和S组成的组，其中该5元杂芳基被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：H、C1-4烷基、CF3、CF2H、NH2、NH(CH3)、N(CH3)2和苯基；
R1是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
R2选自由以下组成的组：H、C1-4烷基和被一个或多个F取代的C1-4烷基；
J是CHR3；
R3选自由H、CH2OH、和C(＝O)N(R4)(R5)组成的组；
R4和R5独立地选自由H、C1-4烷基、和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组；
K选自由C(R6)(R7)、C＝CH2和C(＝O)组成的组；
R6和R7独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、OCH3、CH2OH、C(＝O)R8和C(＝O)N(R9)(R10)；
R8是OH或吗啉；
R9和R10独立地选自由以下组成的组：H、苯基、C1-4烷基、和C3-4环烷基，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组；
n是整数0或1；
L是C(R11)(R12)、NH、O；
R11和R12独立地选自由H和C(＝O)N(R13)(R14)组成的组；并且
R13和R14独立地选自由H、C1-4烷基、和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基选自由OH和F组成的组；以及
(B)至少一种药学上可接受的赋形剂。
本披露的实施例是药物组合物，该药物组合物包含至少一种药学上可接受的赋形剂和至少一种选自由以下组成的组的化合物：以下所述的化合物(参见表3)、或其立体异构体或互变异构体、或其药学上可接受的盐。
表3：
Figure BDA0003377545370000241
Figure BDA0003377545370000251
Figure BDA0003377545370000261
Figure BDA0003377545370000271
本文还披露了药物组合物，这些药物组合物包含
(A)至少一种具有式(Ia)的化合物：
Figure BDA0003377545370000281
其中
R1b选自由以下组成的组：氢、C1-4烷基、羟基、羟基甲基、(2,2-二氟乙氧基)甲基、OC1-4烷基、和氟；
R1a是氢或与R1b一起形成甲基烯基；
na是整数0、1、或2；
R2a选自由氢和C1-6烷基组成的组；
R3a选自由以下组成的组：Cl、CN、和C1-4卤代烷基；
R4a是H或F；
HET是5元或6元杂芳基，该5元或6元杂芳基任选独立地被一个至两个取代基取代，该一个至两个取代基选自C1-4烷基、溴、氯、氟、和羟基(C1-4)烷基；
X和Y各自独立地选自：N或C，使得在任何情况中X和Y中只有一个是N；
Z1是N或C；并且
Z2是N或CF；
以及具有式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、同位素变体、N-氧化物或溶剂化物；以及
(B)至少一种药学上可接受的赋形剂。
本披露的实施例是药物组合物，该药物组合物包含至少一种药学上可接受的赋形剂和至少一种具有式Ia的化合物，该具有式Ia的化合物选自由以下组成的组：
Figure BDA0003377545370000291
Figure BDA0003377545370000301
Figure BDA0003377545370000311
以及这样的化合物的任何药学上可接受的盐、N-氧化物或溶剂化物、或这样的化合物的任何药学上可接受的前药、或这样的化合物的任何药学活性代谢物。
在实施例中，药物组合物还可以包含至少一种另外的活性剂或治疗剂。另外的活性治疗剂可以包括例如抗HBV剂(如HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、免疫调节剂(如TLR-激动剂)、或影响HBV生命周期和/或HBV感染的后果的任何其他药剂)。本披露的活性剂单独或者与一种或者多种另外的活性剂组合用于配制本披露的药物组合物。
如本文所用，术语“组合物”或“药物组合物”是指可用于本披露的至少一种化合物与药学上可接受的载体的混合物。药物组合物有助于将化合物施用至患者或受试者。本领域存在多种施用化合物的技术，这些技术包括但不限于静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、眼部、肺部和局部施用。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的材料、组合物或载体，如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或囊封材料，这些材料涉及将可用于本披露的化合物在患者体内载运或输送或载运或输送到患者体内，使得它可以发挥预期功能。典型地，此类构建体从身体的一个器官或部分载运或输送到身体的另一个器官或部分。每种载体在与配制品的其他成分(包括可用于本披露的化合物)相容且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。可充当药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及药物配制品中使用的其他无毒相容物质。
如本文所用，“药学上可接受的载体”还包括与可用于本披露的化合物的活性相容并对于患者来说在生理上是可接受的任何和所有的涂层剂、抗细菌剂和抗真菌剂以及吸收延迟剂等。补充活性化合物也可以掺入组合物中。“药学上可接受的载体”可以进一步包括可用于本披露的化合物的药学上可接受的盐。可以包括在用于实践本披露的药物组合物中的其他另外成分在本领域是已知的，并例如描述于Remington's PharmaceuticalSciences[雷明顿药物科学](Genaro编辑,Mack Publishing Co.[马克出版公司],1985,伊斯顿,宾夕法尼亚州)，将其通过援引并入本文。
“药学上可接受的赋形剂”是指无毒的、生物学耐受的以及生物学上适于施用至受试者的物质(如惰性物质)，将其添加到药理学组合物中，或者用作媒介物、载体或者稀释剂以促进药剂的施用并且与之相容。赋形剂的实例包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。
含有一个或者多个活性剂剂量单位的药物组合物的递送形式可以使用适合的药物赋形剂和本领域技术人员已知或者可以获得的混合技术制备。在本发明方法中，组合物可以通过适合的递送途径施用，例如口服、肠胃外、直肠、局部或者经眼途径或者通过吸入施用。
制剂可以为片剂、胶囊、小袋、糖锭、粉剂、粒剂、锭剂、重构粉剂、液体制剂或者栓剂的形式。优选地，组合物配制用于静脉内输注、局部施用或者口服施用。
对于口服施用，可以将本披露化合物提供为片剂或者胶囊的形式，或者为溶液、乳液或者混悬液的形式。为制备口服组合物，可对化合物进行配制，以产生例如从约0.05至约100mg/kg/天或从约0.05至约35mg/kg/天或从约0.1至约10mg/kg/天的剂量。例如，通过每天一次、两次、三次或四次给药可实现每天约5mg至5g的每日总剂量。
口服片剂可以包括与药学上可接受的赋形剂混合的根据本披露的化合物，该药学上可接受的赋形剂如惰性稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂。合适的惰性填充剂包括碳酸钠和碳酸钙、磷酸钠和磷酸钙、乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、甘露醇、山梨醇等。示例性液体口服赋形剂包括乙醇、甘油、水等。淀粉、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羟基乙酸淀粉钠、微晶纤维素和藻酸是合适的崩解剂。粘合剂可以包括淀粉和明胶。润滑剂(如果存在的话)可以是硬脂酸镁、硬脂酸或者滑石。如果需要，片剂可用如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料进行包衣，以延缓在胃肠道中的吸收，或可用肠溶包衣进行包衣。
用于口服施用的胶囊包括硬明胶胶囊和软明胶胶囊。为了制备硬明胶胶囊，可以将本披露的化合物与固体、半固体或者液体稀释剂混合。可通过将本披露的化合物与水、油(如花生油、橄榄油)、液体石蜡、短链脂肪酸单甘油酯和短链脂肪酸双甘油酯的混合物、聚乙二醇400、或丙二醇混合来制备软胶囊。
口服施用的液体可以呈悬浮液、溶液、乳液或糖浆的形式，或可以被冻干或在使用前以用水或其他合适的媒介物重构的干燥产品的形式呈现。此类液体组合物可以任选含有：药学上可接受的赋形剂，如悬浮剂(例如，山梨醇、甲基纤维素、海藻酸钠、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝明胶等)；非水性媒介物，例如油(例如，杏仁油或分馏椰子油)、丙二醇、乙醇、或水；防腐剂(例如，对羟基苯甲酸甲酯或者对羟基苯甲酸丙酯、或山梨酸)；湿润剂，如卵磷脂；以及调味剂和着色剂(如果需要)。
本披露的活性剂还可以通过非口服途径施用。例如，可将组合物配制成栓剂用于直肠施用。对于肠胃外使用，包括静脉内、肌内、腹膜内或者皮下途径，可以将本披露的化合物提供在缓冲至适当pH和等渗性的无菌水性溶液或者悬浮液中或者提供在肠胃外可接受的油中。适合的水性媒介物包括林格氏溶液和等渗氯化钠。此类形式将以单位剂量形式(如安瓿或一次性注射装置)、以多剂量形式(如从中可取出合适的剂量的小瓶)、或以可用于制备可注射配制品的固体形式或预浓缩物存在。与药用载体经从几分钟至几天范围内的时间段混合的示例性输注剂量可以在从约1至1000μg/kg/分钟范围内的化合物。
对于局部施用，化合物可以在约0.1％至约10％(药物比媒介物)的浓度与药用载体混合。本披露化合物的另一种施用模式可利用贴片配制品来影响透皮递送。
本发明还涉及用于制备根据本发明的药物组合物的方法，该方法包括将有效量的如本文披露的具有式(I)的化合物与药学上可接受的载体组合成紧密混合物。
可替代地，在本披露的方法中，本披露的化合物可以经鼻或口服途径(例如以还含有适合载体的喷雾配制品形式)吸入施用。
使用方法
本文提供了化合物，例如具有式(I)、式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐，这些化合物可显著用于治疗或预防有需要的受试者的HBV感染或HBV相关的(或HBV诱发的)病症或疾病。
不受限于任何特定的作用机制，认为这些化合物调节或破坏HBV复制或感染性颗粒产生所必需的HBV衣壳组装和其他HBV核心蛋白(HBc)功能和/或可以破坏HBV衣壳组装，产生具有大大降低的感染性或复制能力的空衣壳。换言之，本文提供的化合物可以充当衣壳组装调节剂或核心蛋白变构调节剂(CpAM)。
本文提供的化合物具有有效的抗病毒活性，并且被认为表现出有利的代谢特性、组织分布、安全性和药物谱，并适用于人类。披露的化合物可以调节(例如，加速、延迟、抑制、破坏或减少)正常病毒衣壳组装或拆卸，结合衣壳或改变细胞多蛋白和前体的代谢。当衣壳蛋白成熟时或在病毒感染期间可以进行调节。披露的化合物可以用于调节HBV cccDNA的活性或特性、或HBV RNA颗粒从感染细胞内产生或释放的方法中。
本申请的化合物可以加速HBV衣壳组装的动力学，从而防止Pol-pgRNA复合物的衣壳化或与Pol-pgRNA复合物的衣壳化相竞争，并因此阻断pgRNA的逆转录。
可以例如通过评价该化合物诱导或不诱导乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)斑点的能力来评估本申请的化合物。HBc是约21kDa的小蛋白，该蛋白形成了二十面体衣壳。已经例如在Diab等人,2018(Antiviral Research[抗病毒研究]149(2018)211-220)中描述了HBc。
衣壳组装调节剂可以诱导形态学上完整的衣壳的形成或多形非衣壳结构的形成。通过对HBV核心蛋白进行免疫荧光染色可以在稳定的HBV复制细胞系中观察到多形非衣壳结构，并且该多形非衣壳结构在细胞核和细胞质中表现为“核心斑点”。
因此，术语“HBc斑点”是指诱导此类多形非衣壳结构的形成的能力。
在一方面，本申请更特别地涉及化合物(如本文所述)，该化合物不诱导HBc斑点。
在另一个方面，本申请更特别地涉及化合物(如本文所述)，该化合物诱导HBc斑点。
诱导或不诱导HBc斑点的能力可以通过本领域普通技术人员找到的适当的任何方法来评估，例如通过：
-使本申请的化合物与HBV感染的细胞(例如，来自(稳定的)HBV感染的细胞系的细胞或之前已从HBV患者收集到的HBV感染的细胞)接触；
-任选地固定并透化这些细胞，或任选地裂解这些细胞；并且
-确定这些细胞与本申请的化合物的接触诱导或不诱导这些细胞中的HBc斑点。
确定这些细胞与本申请的化合物的接触诱导或不诱导HBc斑点可以例如涉及针对HBc的免疫荧光染色，更特别地，涉及使用抗HBc抗体针对HBc的免疫荧光染色。确定本申请的化合物具有或不具有诱导HBc斑点的能力的方法的实例包含在以下实例中描述的方法和在Corcuera等人,2018中描述的免疫荧光测定(Antiviral Research[抗病毒研究](2018),doi/10.1016/j.antiviral.2018.07.011,“Novel non-heteroarylpyrimidine(HAP)capsid assembly modifiers have a different mode of action from HAPs in vitro[新型非杂芳基嘧啶(HAP)衣壳组装改性剂在体外的作用方式与HAP不同]”；参见Corcuera等人,2018的§2.8)。Corcuera等人,2018的图5说明了当测试化合物诱导HBc斑点(参见图5中经HAP处理的细胞)和当测试化合物不诱导HBc斑点(参见图5中那些用CAM(而非HAP)处理的细胞)时的HBV核心形态。
互补地，可以通过使用重组HBV核心二聚体(即不使用HBV感染的细胞，而使用重组HBV核心二聚体)并使用分析型尺寸排阻色谱法和电子显微镜分析实施无细胞生化测定，来确认化合物是否诱导多形非衣壳结构的形成：参见例如Corcuera等人,2018的§2.4-2.5和图2-3；参见例如Berke等人,2017的材料和方法以及图2(Antimicrobial Agents andChemotherapy[抗菌剂与化疗]2017年8月,第61卷第8期e00560-17“Capsid AssemblyModulators have a dual mechanism of action in primary human hepatocytesinfected with Hepatitis B virus[衣壳组装调节剂在感染乙型肝炎病毒的原代人肝细胞中具有双重作用机制]”)；参见例如Huber等人,2018的实验部分和图4(ACS Infect Dis[ACS传染病]2018年12月24日.doi:10.1021/acsinfecdis.8b00235；“Novel Hepatitis BVirus Capsid-Targeting Antiviral that Aggregates Core Particles and InhibitsNuclear Entry of Viral Cores[新型靶向乙型肝炎病毒衣壳的抗病毒物质，其聚集核心颗粒并抑制病毒核心的核进入]”)。
披露的化合物可用于预防或治疗有需要的哺乳动物，更特别地有需要的人的HBV感染或HBV诱发的疾病。
在非限制性方面，这些化合物可以(i)调节或破坏HBV组装和HBV复制或感染颗粒产生所必需的其他HBV核心蛋白功能，(ii)抑制感染性病毒颗粒的产生或感染，或(iii)与HBV衣壳相互作用，以影响作为衣壳组装调节剂的感染性或复制能力降低的缺陷病毒颗粒。特别地，并且在不受任何特定作用机制束缚的情况下，据信所披露的化合物通过破坏、加速、减少、延迟和/或抑制正常病毒衣壳的组装和/或不成熟或成熟颗粒的拆卸从而诱导异常的衣壳形态导致抗病毒作用(如破坏病毒体的组装和/或拆卸、病毒体成熟、病毒的外出和/或靶细胞的感染)而在HBV治疗中是有用的。所披露的化合物可以作为衣壳组装的干扰剂与成熟或不成熟病毒衣壳相互作用以扰动衣壳的稳定性，从而影响其组装和/或拆卸。所披露的化合物可以扰动病毒衣壳的稳定性、功能和/或正常形态所需的蛋白质折叠和/或盐桥，从而破坏和/或加速衣壳的组装和/或拆卸。所披露的化合物可结合衣壳并改变细胞多蛋白和前体的代谢，导致蛋白质单体和/或低聚物和/或异常颗粒的异常积聚，这引起经感染的细胞的细胞毒性和死亡。所披露的化合物可以引起最佳稳定性衣壳形成的失败，影响病毒的有效脱壳和/或拆卸(例如，在感染期间)。当衣壳蛋白未成熟时，所披露的化合物可以破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸。当衣壳蛋白成熟时，所披露的化合物可以破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸。所披露的化合物可以在病毒感染期间破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸，这可进一步减弱HBV病毒感染性和/或降低病毒载量。所披露的化合物对衣壳组装和/或拆卸的破坏、加速、抑制、延迟和/或减少可以将病毒从宿主生物体中根除。通过所披露的化合物从受试者中根除HBV有利地消除慢性长期治疗的需要和/或减少长期治疗的持续时间。
本披露的另一个实施例是治疗患有HBV感染的受试者的方法，该方法包括向需要这样的治疗的受试者施用有效量的至少一种具有式(I)的化合物。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中与HBV感染相关的病毒载量的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染复发的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了抑制或减少有需要的个体中含HBV DNA颗粒或含HBVRNA颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染不良生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了诱导有需要的个体中HBV感染肝损伤缓解的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染的长期抗病毒疗法的生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了预防性地治疗有需要的个体中HBV感染的方法，其中该个体患有潜伏性HBV感染，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本披露的另一个实施例是治疗患有HBV感染的受试者的方法，该方法包括向需要这样的治疗的受试者施用有效量的至少一种具有式(Ia)的化合物。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中与HBV感染相关的病毒载量的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染复发的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了抑制或减少有需要的个体中含HBV DNA颗粒或含HBVRNA颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染不良生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了诱导有需要的个体中HBV感染肝损伤缓解的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染的长期抗病毒疗法的生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了预防性地治疗有需要的个体中HBV感染的方法，其中该个体患有潜伏性HBV感染，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在实施例中，所披露的化合物适用于单一疗法。在实施例中，所披露的化合物有效的抵抗天然的或自然的HBV菌株。在实施例中，所披露的化合物有效地针对对目前已知药物有抗性的HBV菌株。
在另一个实施例中，本文提供的化合物可以用于调节(例如抑制或破坏)HBVcccDNA的活性、稳定性、功能和病毒复制特性的方法中。
在又另一个实施例中，本披露的化合物可以用于削弱或预防HBV cccDNA的形成的方法中。
在另一个实施例中，本文提供的化合物可以用于调节(例如抑制或破坏)HBVcccDNA活性的方法中。
在又另一个实施例中，本披露的化合物可以用于削弱HBV cccDNA的形成的方法中。
在另一个实施例中，所披露的化合物可以用于调节、抑制或破坏HBV RNA颗粒从感染细胞内产生或释放的方法中。
在另外的实施例中，对HBV RNA颗粒的总负担(或浓度)进行了调节。在优选实施例中，削弱了HBV RNA的总负担。
在另一个实施例中，与施用选自下组的化合物相比，本文提供的方法以更大的程度或以更快的速度减少个体中的病毒载量，该组由以下组成：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同的衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物、及其任何组合。
在另一个实施例中，与施用选自下组的化合物相比，本文提供的方法使得病毒突变和/或病毒抗性的发生率更低，该组由以下组成：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同的衣壳组装调节剂、不同或未知机制的抗病毒化合物、及其组合。
在另一个实施例中，本文提供的方法进一步包括向个体施用至少一种HBV疫苗、核苷HBV抑制剂、干扰素或其任何组合。
在一方面，本文提供了治疗有需要的个体中HBV感染的方法，该方法包括通过以下方式减少HBV病毒载量：向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，单独地或与逆转录酶抑制剂组合；并且向该个体进一步施用治疗有效量的HBV疫苗。
本披露的另一个实施例是治疗患有HBV感染的受试者的方法，该方法包括向需要这样的治疗的受试者施用有效量的至少一种具有式(I)的化合物。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中与HBV感染相关的病毒载量的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染复发的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了抑制或减少有需要的个体中含HBV DNA颗粒或含HBVRNA颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染不良生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了诱导有需要的个体中HBV感染肝损伤缓解的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染的长期抗病毒疗法的生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了预防性地治疗有需要的个体中HBV感染的方法，其中该个体患有潜伏性HBV感染，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在实施例中，本文提供的方法进一步包括监测受试者的HBV病毒载量，其中将该方法进行一段时间，使得HBV病毒不可检测。
本申请还涉及如本文披露的具有式(I)的化合物或含有所述具有式(I)的化合物的药物组合物，用作药物。
在一方面，本文提供了治疗有需要的个体中HBV感染的方法，该方法包括通过以下方式减少HBV病毒载量：向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物，或其药学上可接受的盐，单独地或与逆转录酶抑制剂组合；并且向该个体进一步施用治疗有效量的HBV疫苗。
本披露的另一个实施例是治疗患有HBV感染的受试者的方法，该方法包括向需要这样的治疗的受试者施用有效量的至少一种具有式(Ia)的化合物。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中与HBV感染相关的病毒载量的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染复发的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了抑制或减少有需要的个体中含HBV DNA颗粒或含HBVRNA颗粒的形成或存在的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染不良生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了诱导有需要的个体中HBV感染肝损伤缓解的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了减少有需要的个体中HBV感染的长期抗病毒疗法的生理影响的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个方面，本文提供了预防性地治疗有需要的个体中HBV感染的方法，其中该个体患有潜伏性HBV感染，该方法包括向该个体施用治疗有效量的具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐。
在实施例中，本文提供的方法进一步包括监测受试者的HBV病毒载量，其中将该方法进行一段时间，使得HBV病毒不可检测。
本申请还涉及这种化合物或药学上可接受的盐或涉及这种药物组合物，用于预防或治疗有需要的哺乳动物的HBV感染或HBV诱发的疾病。
本申请还涉及这种化合物或药学上可接受的盐或涉及这种药物组合物，用于慢性乙型肝炎的预防、预防恶化、改善或治疗。
本申请涉及这种化合物或药学上可接受的盐或涉及这种药物组合物，用于HBV诱发的疾病或病症的预防、预防恶化、改善或治疗。
HBV诱发或相关的疾病或病症包括进展性肝纤维化、导致肝硬化的炎症和坏死、末期肝病、以及肝细胞癌。此外，HBV是丁型肝炎病毒(HDV)的辅助病毒，并且据估计，全世界超过1500万人可能是HBV/HDV共同感染的，与仅患有HBV的患者相比，具有增加的快速发展为肝硬化的风险和增加的肝代偿失调(Hughes,S.A.等人Lancet[柳叶刀]2011,378,73-85)。因此，HDV感染患有HBV感染的受试者。在特别的实施例中，本发明的化合物可以用于治疗和/或预防HBV/HDV共感染，或与HBV/HDV共感染相关的疾病。因此，在特别的实施例中，HBV感染特别地是HBV/HDV共感染，并且哺乳动物(特别是人)可以是HBV/HDV共感染的，或处于HBV/HDV共感染风险下的。
因此，本申请还涉及这种化合物或药学上可接受的盐或涉及这种药物组合物，用于上述用途的任一者，更特别地用于以下项的一种或多种的预防、预防恶化、改善或治疗：
-预防慢性肝炎感染，更特别地慢性乙型肝炎感染(即，预防(乙型)肝炎感染变为慢性)；
-改善或治疗肝炎相关的或肝炎诱发的(慢性)疾病或病症，更特别地乙型肝炎相关的或乙型肝炎诱发的(慢性)疾病或病症；
-预防肝炎相关的或肝炎诱发的(慢性)疾病或病症的恶化，更特别地乙型肝炎相关的或乙型肝炎诱发的(慢性)疾病或病症的恶化；
-由(慢性)肝炎感染，更特别地由(慢性)乙型肝炎感染诱发的肝纤维化阶段或肝损害程度的改善(消退或无进展)；
-改善(减少)(慢性)肝炎感染的纤维化进展率，更特别地在患有(慢性)肝炎感染(更特别地(慢性)乙型肝炎感染)的受试者中预防肝硬化(例如，预防受试者达到纤维化的肝硬化阶段)。
组合
本文提供了一种或多种所披露的化合物与至少一种另外的治疗剂的组合。在实施例中，本文提供的方法可以进一步包括向个体施用至少一种另外的治疗剂。在实施例中，所披露的化合物适用于在组合疗法中使用。本披露的化合物可以与用于治疗HBV感染的一种或多种另外的化合物组合使用。这些另外的化合物可以包含本披露的化合物或已知用于治疗、预防或减少HBV感染的症状或影响的化合物。
在示例性实施例中，另外的活性成分是已知的或被发现在治疗涉及HBV感染的病症或障碍中有效的那些成分，如另一种HBV衣壳组装调节剂或针对与涉及HBV感染的特定病症或障碍、或HBV感染本身相关的另一靶标的活性化合物。该组合可以用于增强疗效(例如，通过将化合物包括在组合中增强根据本披露的活性剂的效力或者有效性)、减少一种或者多种副作用或者减少根据本披露的活性剂的所需剂量。在另外的实施例中，与在预防性地治疗有需要的个体的HBV感染中获得相似结果所需的至少一种另外的治疗剂的单独施用相比，本文提供的方法允许以更低的剂量或频率施用至少一种另外的治疗剂。
此类化合物包括但不限于HBV复方药物、HBV疫苗、HBV DNA聚合酶抑制剂、免疫调节剂、toll样受体(TLR)调节剂、干扰素α受体配体、透明质酸酶抑制剂、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抑制剂、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(ipi4)抑制剂、亲环蛋白抑制剂、HBV病毒进入抑制剂、反义寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干扰RNA(siRNA)和ddRNAi内切核酸酶调节剂、核糖核苷酸还原酶抑制剂、HBV E抗原抑制剂、共价闭合环状DNA(cccDNA)抑制剂、类法尼醇X受体激动剂、HBV抗体、CCR2趋化因子拮抗剂、胸腺肽激动剂、细胞因子、核蛋白调节剂、维甲酸诱导基因1刺激因子、NOD2刺激因子、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂、吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)途径抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、重组胸腺肽α-1、布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂、KDM抑制剂、HBV复制抑制剂、精氨酸酶抑制剂以及影响HBV生命周期和/或影响HBV感染后果的任何其他药剂或其组合。
在实施例中，本披露的化合物可以与以下组合使用：HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂、干扰素(如聚乙二醇化干扰素)、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、亲环蛋白/TNF抑制剂、免疫调节剂(如TLR-激动剂)、HBV疫苗以及影响HBV生命周期和/或影响HBV感染后果的任何其他药剂或其组合。
特别地，本披露的化合物可以与选自下组的一种或多种药剂(或其盐)组合使用，该组由以下组成：
HBV逆转录酶抑制剂、以及DNA和RNA聚合酶抑制剂，包括但不限于：拉米夫定(lamivudine)(3TC、Zeffix、Heptovir、Epivir、和Epivir-HBV)、恩替卡韦(entecavir)(Baraclude、Entavir)、阿德福韦酯(adefovir dipivoxil)(Hepsara、Preveon、双-POMPMEA)、富马酸泰诺福韦双索酯(tenofovir disoproxil fumarate)(Viread、TDF或PMPA)；
干扰素，包括但不限于干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)、和干扰素γ(IFN-γ)；
病毒进入抑制剂；
病毒成熟抑制剂；
文献描述的衣壳组装调节剂，如但不限于BAY 41-4109；
逆转录酶抑制剂；
免疫调节剂，如TLR激动剂；以及
不同或未知机制的药剂，如但不限于AT-61((E)-N-(1-氯-3-氧代-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲酰胺)、AT-130((E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲酰胺)和类似的类似物。
在实施例中，另外的治疗剂是干扰素。术语“干扰素”或“IFN”是指抑制病毒复制和细胞增殖并调节免疫应答的高度同源物种特异性蛋白的家族中的任何成员。人干扰素分为三类：I型，其包括干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β(IFN-β)和干扰素-ω(IFN-ω)；II型，其包括干扰素-γ(IFN-γ)；和III型，其包括干扰素-λ(IFN-λ)。如本文所用的术语“干扰素”涵盖已经开发并且可商购的干扰素的重组形式。如本文所用的术语“干扰素”也涵盖干扰素的亚型，如化学修饰或突变的干扰素。化学修饰的干扰素包括聚乙二醇化干扰素和糖基化干扰素。干扰素的实例还包括但不限于干扰素-α-2a、干扰素-α-2b、干扰素-α-n1、干扰素-β-1a、干扰素-β-1b、干扰素-λ-1、干扰素-λ-2和干扰素-λ-3。聚乙二醇化干扰素的实例包括聚乙二醇化干扰素-α-2a和聚乙二醇化干扰素α-2b。
因此，在一个实施例中，具有式I的化合物可以与选自下组的干扰素组合施用，该组由以下组成：干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)和干扰素γ(IFN-γ)。在一个特定实施例中，干扰素是干扰素-α-2a、干扰素-α-2b或干扰素-α-n1。在另一个特定实施例中，干扰素-α-2a或干扰素-α-2b是聚乙二醇化的。在优选实施例中，干扰素-α-2a是聚乙二醇化干扰素-α-2a(PEGASYS)。
在另一个实施例中，另外的治疗剂选自免疫调节剂或免疫刺激剂疗法，其包括属于干扰素类别的生物制剂。
此外，另外的治疗剂可以是破坏HBV复制或持久性所需的其他一种或多种必需病毒蛋白或宿主蛋白的功能的药剂。
在另一个实施例中，另外的治疗剂是阻断病毒进入或成熟或靶向HBV聚合酶的抗病毒剂，如核苷或核苷酸或非核苷(核苷酸)聚合酶抑制剂。在组合疗法的另外的实施例中，逆转录酶抑制剂和/或DNA和/或RNA聚合酶抑制剂是齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平(Atevirapine)、病毒唑、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、PMPA、西多福韦、依法韦仑、奈韦拉平、地拉夫定或埃曲韦林。
在实施例中，另外的治疗剂是免疫调节剂，其诱导天然的有限的免疫应答，导致诱导针对不相关病毒的免疫应答。换句话说，免疫调节剂可以影响抗原呈递细胞的成熟、T细胞的增殖和细胞因子释放(例如，IL-12、IL-18、IFN-α、IFN-β和IFN-γ及TNF-α等)。
在另外的实施例中，另外的治疗剂是TLR调节剂或TLR激动剂，如TLR-7激动剂或TLR-9激动剂。在组合疗法的另外的实施例中，TLR-7激动剂选自由以下组成的组：SM360320(9-苄基-8-羟基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤)和AZD 8848([3-({[3-(6-氨基-2-丁氧基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-吗啉基)丙基]氨基}甲基)苯基]乙酸甲酯)。
在本文提供的任何方法中，该方法可进一步包括向该个体施用至少一种HBV疫苗、核苷HBV抑制剂、干扰素或其任何组合。在实施例中，HBV疫苗是RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B或SHANVAC B中的至少一种。
在另一个方面，本文提供了治疗有需要的个体中HBV感染的方法，该方法包括通过以下方式减少HBV病毒载量：向该个体施用治疗有效量的本披露的化合物，单独地或与逆转录酶抑制剂组合；并且向该个体进一步施用治疗有效量的HBV疫苗。逆转录酶抑制剂可以是齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平、病毒唑、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、PMPA、西多福韦、依法韦仑、奈韦拉平、地拉夫定或埃曲韦林中的一种。
对于本文描述的任何组合疗法，可以例如使用合适的方法计算协同效应，例如，Sigmoid-Emax方程(Holford和Scheiner,1981,Clin.Pharmacokinet.[临床药物动力学]6:429-453)、Loewe可加性方程(Loewe和Muischnek,1926,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.[实验病理学与药理学档案]114:313-326)和median-effect方程(Chou和Talalay,1984,Adv.Enzyme Regul.[酶调控研究进展]22:27-55)。上面提到的每个方程都可以应用于实验数据，以生成相应的图表以帮助评估药物组合的效果。与上述方程相关的对应图表分别是浓度-效应曲线、等效线图曲线和联合指数曲线。
因此，本申请还涉及包含第一化合物和第二化合物的产品，该第一化合物和第二化合物作为组合制剂用于在有需要的哺乳动物的HBV感染或HBV诱发的疾病的预防或治疗中同时、分开或顺序使用，其中所述第一化合物不同于所述第二化合物，其中所述第一化合物是如本文所述的化合物或药学上可接受的盐或本申请的药物组合物，并且其中所述第二化合物是另一种HBV抑制剂。
例如，第二化合物是选自下组的另一种HBV抑制剂，该组由以下组成：HBV复方药物、HBV DNA聚合酶抑制剂、免疫调节剂、toll样(TLR)受体调节剂、干扰素α受体配体、透明质酸酶抑制剂、乙型肝炎表面抗原(HbsAg)抑制剂、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(ipi4)抑制剂、亲环蛋白抑制剂、HBV病毒进入抑制剂、反义寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干扰RNA(siRNA)和ddRNAi内切核酸酶调节剂、核糖核苷酸还原酶抑制剂、HBV E抗原抑制剂、共价闭合环状DNA(cccDNA)抑制剂、类法尼醇X受体激动剂、HBV抗体、CCR2趋化因子拮抗剂、胸腺肽激动剂、细胞因子、核蛋白调节剂、维甲酸诱导基因1刺激因子、NOD2刺激因子、磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)抑制剂、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)途径抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、重组胸腺肽α-1、布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂、KDM抑制剂、HBV复制抑制剂、精氨酸酶抑制剂以及其他HBV药物。
方法
本申请涉及用于制备如本文所描述的具有式(I)的化合物的方法。
在实施例中，该方法包括来自步骤a)、b)、c)、d)、e)、f)、g)、h)、i)、j)、k)、l)、m)、n)、o)、p)、q)、r)和s)中的至少一个步骤：
a)使具有式(II)的化合物，
Figure BDA0003377545370000491
与NaOCl反应以形成具有式(III)的化合物，
Figure BDA0003377545370000492
其中
m是整数0或1；
G1是H或CH3；
G2是H、C1-4烷基、CF3或苯基；
条件是当m是1时，G1和G2不都是H；
b)使具有式(III)的化合物，
Figure BDA0003377545370000501
与强酸，如盐酸(HCl)或TFA反应以形成具有式(IV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000502
其中
m是整数0或1；
G1是H或CH3；
G2是H、C1-4烷基、CF3或苯基；
c)使具有式(IV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000503
与具有式(V)的化合物，
Figure BDA0003377545370000504
在非亲核碱，如三乙胺(Et3N)或碳酸钠(Na2CO3)的存在下反应，以形成具有式(VI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000505
其中
m是整数0或1；
G1是H或CH3；
G2是H、C1-4烷基、CF3或苯基；
G3是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G3是3,4-二氯苯基；
d)使具有式(VII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000511
与具有式(VIII)的化合物反应，
Figure BDA0003377545370000512
以形成具有式(IX)的化合物，
Figure BDA0003377545370000513
其中
Figure BDA0003377545370000514
表示单键或双键；
Figure BDA0003377545370000515
是芳香族环；
G3是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G3是3,4-二氯苯基；
G4是H或CH3；
e)使具有式(X)的化合物，
Figure BDA0003377545370000521
与肼反应以形成具有式(XI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000522
其中G5是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G3是3,4-二氯苯基；
f)使具有式(XXV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000523
与硫代乙酰胺反应以形成具有式(XXVI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000524
其中G6是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
g)使具有式(XII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000525
与具有式(XIII)的化合物反应，
H2N-G7
(Xiii)，
以形成具有式(XIV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000531
其中
Figure BDA0003377545370000532
表示单键或双键；
Figure BDA0003377545370000533
是芳香族环；
X是CH2或C＝CH2；
G7是OH、NH2或NH(CH3)；
G8是H或NH2；
条件是当G7是NH2或NH(CH3)时，G8是H；或当G7是OH时，则G8是H或NH2；
Y是O、NH、N或N(CH3)；
Z是N或O；
h)使具有式(XV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000534
与强酸，如盐酸(HCl)或TFA(三氟乙酸)反应以形成具有式(XVI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000535
其中
Figure BDA0003377545370000541
表示单键或双键；
Figure BDA0003377545370000542
是芳香族环；
Q是C＝CH2或CG10G11；
G9是H或NH2；
G10和G11独立地选自H、OH、CONHMe、CH2OH和CONH2；
Y是O、N、NH或N(CH3)；
Z是N或O；
在实施例中，当G6是NH2时，Q是C＝CH2，Y是O，并且Z是N；
i)使具有式(XVI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000543
与具有式(XVII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000544
在非亲核碱，如三乙胺(Et3N)或碳酸钠(Na2CO3)的存在下反应，以形成具有式(XVIII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000545
其中
Figure BDA0003377545370000546
表示单键或双键；
Figure BDA0003377545370000551
是芳香族环；
Q是C＝CH2或CG10G11；
G9是H或NH2；
G10和G11独立地选自H、OH、CONHMe、CH2OH和CONH2；
G12是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G12是3,4-二氯苯基；
Y是O、N、NH或N(CH3)；
Z是N或O；
在实施例中，当G6是NH2时，Q是C＝CH2，Y是O，并且Z是N；
j)使具有式(XIX)的化合物，
Figure BDA0003377545370000552
与具有式(XX)的化合物反应，
Figure BDA0003377545370000553
以形成具有式(XXI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000554
其中
G13是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G12是3,4-二氯苯基；
G14和G15独立地选自H、C1-4烷基、环丙基、CH2CH2OH、CH2CF3和苯基；更特别地，G14和G15中的一个是H；更特别地，当G14和G15都不为H时，G14是CH3并且G15是CH3；
或者G14和G15连接在一起以形成吗啉环；
k)使具有式(XXVII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000561
与锇酸钾(K2OsO4)，在4-甲基吗啉N-氧化物(NMO)的存在下反应，以形成具有式(XXVIII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000562
其中
G17是H或NH2；
G16是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G16是OtBu或3,4-二氯苯基；
l)使具有式(XXIX)的化合物，
Figure BDA0003377545370000563
与氧化剂，如过钌酸四丙基铵(TPAP)在4-甲基吗啉N-氧化物(NMO)的存在下反应，以形成具有式(XXX)的化合物；
Figure BDA0003377545370000571
其中G18是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G18是OtBu或3,4-二氯苯基；
m)使具有式(XXXI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000572
与氟化试剂，如(二乙胺)三氟化硫(DAST)反应以形成具有式(XXXII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000573
其中G19是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G19是3,4-二氯苯基；
n)使具有式(XXXIII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000574
与过氧化氢，在9-BBN和氢氧化钠的存在下反应以形成具有式(XXXIV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000581
其中
G20是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G20是OtBu或3,4-二氯苯基；
X是NH或O；
o)使具有式(XXXV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000582
与甲基化剂，在非亲核碱的存在下反应以形成具有式(XXXVI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000583
其中
G21是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G21是3,4-二氯苯基；
G22和G23独立地选自H和CH3，条件是G22和G23中的至少一个是CH3；
在实施例中，甲基化剂是MeI，并且碱是NaH；在实施例中，甲基化剂是多聚甲醛，并且碱是NaOMe、然后是NaBH4；
p)使具有式(XXXVII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000591
与甲基化剂，如碘甲烷在非亲核碱，如氢化钠的存在下反应，以形成具有式(XXXVIII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000592
其中G24是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G24是3,4-二氯苯基；
q)使具有式(XXXIX)的化合物，
Figure BDA0003377545370000593
与甲基化剂，如碘甲烷在非亲核碱，如氢化钠的存在下反应，以形成具有式(XL)的化合物，
Figure BDA0003377545370000594
其中G25是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G25是3,4-二氯苯基；
r)使具有式(XXII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000601
与具有式(XXIII)的化合物反应，
Figure BDA0003377545370000602
以形成具有式(XXIV)的化合物，
Figure BDA0003377545370000603
其中
G26是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；更特别地，G26是3,4-二氯苯基；
W是O或S；
W’是O、NH、S；
s)使具有式(XLI)的化合物，
Figure BDA0003377545370000604
与乙醇镁和氯乙醛反应以形成具有式(XLII)的化合物，
Figure BDA0003377545370000605
在实施例中，该方法可以包括步骤a)、b)、和c)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、和i)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)，并且可以进一步包括步骤k)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)和k)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)、k)，并且进一步包括步骤q)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)、k)，并且进一步包括步骤m)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)，并且进一步包括步骤o)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)，并且进一步包括步骤n)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)，并且进一步包括步骤l)和n)。
在实施例中，该方法可以包括步骤g)、h)、i)、l)、n)，并且进一步包括步骤j)。
在实施例中，该方法可以包括步骤r)和p)。
定义
下文列出了用于描述本披露的各个术语的定义。这些定义适用于如它们在整个说明书和权利要求书中使用的术语，除非在特定情况下另行限制，单独地或作为更大基团的一部分。
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与可应用领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。一般而言，本文使用的命名法和细胞培养、分子遗传学、有机化学和肽化学中的实验室程序是本领域众所周知且常用的那些。
如本文所用，冠词“一个/种(a和an)”是指一个/种或多于一个/种(即，至少一个/种)该冠词的语法宾语。举例来说，“一个元素”意指一个元素或多于一个元素。此外，术语“包括(including)”以及其他形式如“包括(“include”、“includes”)”和“包括的”的使用不是限制性的。
如本说明书和权利要求书中所用，术语“包含(comprising)”可以包括实施例“由……组成”和“基本上由……组成”。如本文所用，术语“包含(comprise(s))”、“包括(include(s))”、“具有(having和has)”、“可以(can)”、“含有(contain(s))”及其变体意指要求命名的成分/步骤的存在并且允许其他成分/步骤的存在的开放性的过渡短语、术语、或词语。然而，此类描述应被理解为，也将组合物或方法描述为“由以下组成”和“基本上由以下组成”：列举的化合物，这允许仅存在命名的化合物、伴随任何药学上可接受的载体、以及排除其他化合物。
本文披露的所有范围都是包括列举的端点，并且独立地可组合(例如，“从50mg至300mg”的范围包括端点50mg和300mg，以及所有中间值)。本文披露的范围的端点和任何值都不限于精确范围或值；它们不是足够精确的，从而包括接近这些范围和/或值的值。
如本文所用，可以将近似的语言应用于修饰可以变化而不导致其相关基本功能的改变的任何定量表示。因此，在一些情况下，由一个或多个术语，例如“基本上”修饰的值不能限制为指定的精确值。在至少一些实例中，近似的语言可以对应于用于测量该值的仪器的精确度。
术语“烷基”是指在链中具有1至12个碳原子的直链或支链烷基。烷基的实例包括甲基(Me，其还可以由符号“/”在结构上表示)、乙基(Et)、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基(tBu)、戊基、异戊基、叔戊基、己基、异己基、和根据本领域的普通技术人员和本文提供的观点被认为等同于任何上述实例中的任一项的基团。如本文所用的术语C1-4烷基是指在链中具有1至4个碳原子的直链或者支链烷基基团。如本文所用的术语C1-6烷基是指在链中具有1至6个碳原子的直链或者支链烷基基团。
术语“环烷基”是指每个碳环具有3至12个环原子的饱和或者部分饱和的单环、稠合多环或者螺多环碳环。环烷基基团的示例性实例包括以下为适当键合部分形式的实体：
Figure BDA0003377545370000631
单环、双环或三环芳香族碳环表示由1个、2个或3个环组成的芳香族环系统，所述环系统仅由碳原子构成；术语芳香族是本领域技术人员熟知的，并且表示4n+2个电子的环状共轭系统，即具有6个、10个、14个等π-电子(休克尔规则)。
单环、双环或三环芳香族碳环的特定的实例是苯基、萘基、蒽基。
术语“苯基”表示以下部分：
Figure BDA0003377545370000632
术语“杂芳基”是指具有5至10个环成员并含有碳原子和从1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的芳香族单环或双环芳香族环系统。术语杂芳基中包括具有5或6个成员的芳香族环，其中该环由碳原子组成并且具有至少一个杂原子成员。合适的杂原子包括氮、氧和硫。在5元环的情况下，杂芳基环优选含有氮、氧或硫中的一个，以及另外最多3个氮。在6元环的情况下，杂芳基环优选含有从1至3个氮原子。对于6元环具有3个氮的情况，至多2个氮原子是相邻的。杂芳基的实例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、喹啉基、异喹啉基和喹唑啉基。除非另有说明，否则杂芳基在产生稳定结构的任何杂原子或碳原子处附接至其侧基。
本领域技术人员将认识到，以上列举或者阐述的杂芳基基团种类并非详尽的，还可以在这些定义的术语范围内选择另外种类。
术语“氰基”是指基团-CN。
术语“卤代”或“卤素”表示氯、氟、溴或者碘。
术语“经取代的”意指指定基团或部分中带有一个或者多个取代基。术语“未取代的”意指指定基团不带有取代基。术语“任选地取代的”意指指定基团是未取代的或被一个或多个取代基取代。在术语“取代的”用于描述结构体系时，意指取代发生在体系上任何化合价允许的位置上。在未明确注明指定部分或基团被指定取代基任选地取代或取代的情况下，应当理解这样的部分或基团意指未被取代的。
术语“对(para)”、“间(meta)”和“邻(ortho)”具有本领域所理解的含义。因此，例如，完全取代的苯基基团在与苯环附接点相邻的两个“邻”(o)位、两个“间”(m)位和横跨附接点的一个“对”(p)位处具有取代基。为了进一步阐明取代基在苯环上的位置，将两个不同的邻位指定为邻和邻'，并将两个不同的间位指定为间和间'，如下阐述。
Figure BDA0003377545370000641
当提及吡啶基基团上的取代基时，术语“对”、“间”和“邻”是指取代基相对于吡啶环的附接点的位置。例如，下面的结构被描述为3-吡啶基，其中X1取代基位于邻位，X2取代基位于间位，并且X3取代基位于对位：
Figure BDA0003377545370000642
为了提供更简洁的描述，本文给定的一些定量表达未用术语“约”限定。应当理解，无论是否明确地使用术语“约”，本文给出的每个量意指实际给出的值，并且还意指基于本领域普通技术人员合理推断的此类给定值的近似值，包括由于针对这样的给定值的实验和/或测量条件导致的等价值和近似值。任何时候当产率以百分比给出时，这样的产率是指相对于根据特定的化学计量条件可以获得相同实体的最大量给出产率的实体质量。以百分比给出的浓度，除非另外指明，是指质量比。
术语“缓冲的(buffered)”溶液或“缓冲(buffer)”溶液在本文中根据其标准含义可互换地使用。缓冲溶液用于控制介质的pH，并且其选择、用途和功能是本领域普通技术人员已知的。参见，例如，描述了(尤其是)缓冲溶液以及缓冲液成分的浓度与缓冲液的pH如何关联的G.D.Considine编辑,Van Nostrand’s Encyclopedia of Chemistry[范诺斯特兰化学百科全书],第261页,第5版(2005)。例如，通过将MgSO4和NaHCO3以10:1w/w的比率添加到溶液中，以将溶液的pH保持在约7.5，来获得缓冲溶液。
本文所给出的任何式旨在表示具有该结构式描绘的结构及其某些变化或某些形式的化合物。特别地，本文所给出的任何式的化合物可具有不对称中心，并且因此以不同的对映异构体形式存在。通式化合物的所有旋光异构体及其混合物都认为在该式的范围之内。因此，本文所给出的任何式旨在表示外消旋物、一种或多种对映异构体形式、一种或多种非对映异构体形式、一种或多种阻转异构体形式，及其混合物。此外，某些结构可以以几何异构体(即顺式和反式异构体)、互变异构体或阻转异构体存在。
也应该理解，具有相同分子式但其原子键合的性质或顺序或者其原子在空间中的排列不同的化合物称为“异构体”。
彼此不成镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，并且彼此是不能重叠的镜像的立体异构体称为“对映异构体”。当化合物具有不对称中心，例如，该不对称中心键合到四个不同的基团时，并且可能有一对对映异构体。对映异构体可以由其不对称中心的绝对构型来表征，并由Cahn和Prelog的R-和S-顺序规则来描述，或由分子旋转偏振光平面的方式来描述，并指定为右旋或左旋(即，分别被指定为(+)-或(-)-异构体)。手性化合物可以作为单独的对映异构体或作为其混合物存在。含有相同比例的对映异构体的混合物被称为“外消旋混合物”。
“互变异构体”是指是特定化合物结构的可互换形式并且在氢原子和电子位移方面不同的化合物。因此，两种结构可以通过π电子和原子(通常是H)的运动处于平衡。例如，烯醇和酮是互变异构体，因为它们通过用酸或碱的处理而快速地相互转化。另一互变异构的实例是苯基硝基甲烷的酸-和硝基-形式，该实例同样地通过用酸或碱处理形成。
互变异构形式可以与获得目标化合物的最优化学反应性和生物活性相关。
本披露的化合物可以具有一个或多个不对称中心；因此，此类化合物可以作为单独的(R)-或(S)-立体异构体或作为其混合物产生。
除非另有说明，说明书和权利要求书中特定化合物的描述或命名旨在包括两种单独的对映异构体及其外消旋混合物或其他混合物。立体化学的测定方法和立体异构体的分离方法在本领域中是众所周知的。
某些实例含有描绘为绝对对映异构体的化学结构，但旨在指示未知构型的对映异构体纯的物质。在这些情况下，在名称中用(R*)或(S*)或(*R)或(*S)指示对应立体中心的绝对立体化学是未知的。因此，指定为(R*)或(*R)的化合物是指绝对构型为(R)或(S)的对映异构体纯的化合物。在绝对立体化学已被证实的情况下，使用(R)和(S)命名结构，其中绝对构型是根据卡恩-英戈尔德-普雷洛格(Cahn-Ingold-Prelog)系统指定的。
符号
Figure BDA0003377545370000661
和
Figure BDA0003377545370000662
用于意指本文所示化学结构中相同的空间排列。类似地，符号
Figure BDA0003377545370000671
和
Figure BDA0003377545370000672
用于意指本文所示化学结构中相同的空间排列。
另外，本文中给出的任何式也旨在提及此类化合物的水合物、溶剂化物和多晶型物及其混合物，即使此类形式未明确列出。某些具有式(I)的化合物或具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐，可以作为溶剂化物获得。溶剂化物包括由本披露化合物与一种或多种溶剂在溶液中或以固体或晶体形式相互作用或络合而形成的溶剂化物。在一些实施例中，该溶剂是水并且溶剂化物是水合物。此外，某些具有式(I)的化合物的结晶形式或具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐可以作为共晶体获得。在本披露的某些实施例中，具有式(I)的化合物以结晶形式获得。在其他实施例中，具有式(I)的化合物的结晶形式本质上为立方体的。在其他实施例中，具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐以结晶形式获得。在仍其他实施例中，具有式(I)的化合物以几种多晶型中的一种、作为结晶形式的混合物、作为多晶型、或作为无定型形式获得。在其他实施例中，具有式(I)的化合物在溶液中在一种或多种结晶形式和/或多晶型之间转化。
在本文中涉及的化合物代表涉及以下任一种：(a)这样的化合物的实际列举形式，和(b)这样的化合物在介质中的任何形式，在命名时即已考虑该化合物处于该介质中。例如，本文中对如R-COOH的化合物的提及涵盖对例如以下任一项的提及：R-COOH(s)、R-COOH(sol)和R-COO- (sol)。在此实例中，R-COOH(s)是指固体化合物，因为其可例如存在于片剂或一些其它固体药物组合物或制剂中；R-COOH(sol)指化合物在溶剂中的非解离形式；而R-COO- (sol)是指化合物在溶剂中的解离形式，如化合物在水性环境中的解离形式，无论这样的解离形式是衍生自R-COOH、衍生自其盐、或衍生自在所考虑的介质中解离后产生的R-COO-的任何其他实体。在另一实例中，如“将实体暴露于具有式R-COOH的化合物”的表达是指将该实体暴露于在进行这样的暴露的介质中存在的化合物R-COOH的一种或多种形式。在又另一个实例中，如“使实体与具有式R-COOH化合物反应”的表达是指，使(a)处于发生这样的反应的介质中存在的一种或多种化学相关形式的这样的实体与(b)处于发生这样的反应的介质中所存在的一种或多种化学相关形式的化合物R-COOH反应。在这方面，如果这样的实体例如处于水性环境中，应当理解，化合物R-COOH处于这样的相同介质中，并且因此使该实体暴露于如R-COOH(aq)和/或R-COO- (aq)种类的介质中，其中下标“(aq)”根据其在化学和生物化学中的常规含义代表“水性”。在这些命名实例中选择了羧酸官能团；然而，这一选择并不旨在作为限制，而其仅是说明。应当理解，可以根据其它官能团提供类似的实例，包括但不限于羟基、碱性氮成员(如在胺中的那些)、和在含有化合物的介质中根据已知的方式相互作用或者转化的任何其它基团。此类相互作用和转化包括但不限于离解、缔合、互变异构、溶剂分解(包括水解)、溶剂化(包括水合)、质子化和去质子化。就此方面在本文中未进一步提供实例，这是因为这些在给定介质中的相互作用和转化对于任何本领域普通技术人员是已知的。
在另一实例中，通过参考已知形成两性离子的化合物，在本文中涵盖两性离子化合物，即使没有以其两性离子形式进行明确命名。如一种或多种两性离子及其同义词一种或多种两性离子化合物的术语是IUPAC认可的标准名称，这种名称是众所周知的，并且是定义的科学名称的标准集的一部分。就此方面，两性离子这个名称被生物学关联化学实体数据库(Chemical Entities of Biological Interest(ChEBI))的分子实体词典指定为名称标识CHEBI：27369。如通常所熟知，两性离子或者两性离子化合物是具有相反符号的形式单位电荷的中性化合物。有时，这些化合物参考术语“内盐”。其他来源将这些化合物称为“偶极离子”，虽然后面的术语被另一些其他来源认为是误称。作为特定的实例，氨基乙酸(即氨基甘氨酸)式为H2NCH2COOH，并且在一些介质中(在这个情况下是在中性介质中)以两性离子+H3NCH2COO-的形式存在。两性离子、两性离子化合物、内盐和偶极离子以这些术语的已知和充分确定含义落入本披露的范围内，在任何情形中本领域普通技术人员都应当如此理解。因为不必命名本领域普通技术人员会认识到的每一个实施例，因此本文中没有明确给出与本披露化合物相关的两性离子化合物的结构。但是其是本披露实施例的一部分。在此方面，本文中没有提供进一步的实例，因为在给定介质中导致给定化合物的各种形式的相互作用和转化是本领域任何普通技术人员已知的。
在本文中给出的任何式还旨在表示这些化合物的未标记形式以及同位素标记形式。除了一个或多个原子被具有选择的原子质量或原子数的原子替换外，同位素标记的化合物具有本文所给出的式描述的结构。可以掺入本披露的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯以及碘的同位素，如分别是2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F、36Cl、125I。此类同位素标记的化合物可以用于代谢研究(优选14C)、反应动力学研究(具有，例如氘(即D或2H)；或氚(即T或3H))、包括药物或者底物组织分布测定的检测或者成像工艺(如正电子发射断层成象(PET)或者单-光子发射计算断层成象(SPECT))、或者患者的放射性治疗中。特别地，18F或11C标记的化合物可以特别优选地用于PET或SPECT的研究。此外，用较重的同位素如氘(即，2H)进行取代可以赋予由更好的代谢稳定性引起的某些治疗优势(例如，增加的体内半衰期或降低的剂量需求)。本披露的同位素标记化合物及其前药通常可以通过进行以下方案或者实例中披露的程序、以及以下所述通过容易获得的同位素标记试剂取代非同位素标记的试剂来制备。
当涉及本文给出的任何式时，从指定变量的可能种类列表中进行的特定的部分的选择并不旨在将在其它地方出现的变量的种类限定为相同选择。换言之，当变量出现不止一次时，除非另有说明，从指定列表中进行的种类选择独立于式中其它地方的相同变量的种类选择。
根据上述对赋值和命名进行的解释性说明，应当理解，在本文中对设定的明确涉及(其中在化学性质上有意义和除非另有说明)，暗示了独立地涉及这样的设定的实施例，和涉及所明确涉及的设定的子集的每种可能实施例。
通过关于取代基术语的第一实例，如果取代基S1 实例是S1和S2中的一个，并且取代基S2 实例是S3和S4中的一个，则这些分配是指根据以下选择给出的本披露的实施例：S1 实例是S1并且S2 实例是S3；S1 实例是S1并且S2 实例是S4；S1 实例是S2并且S2 实例是S3；S1 实例是S2并且S2 实例是S4；以及此类选择中每一个的等效物。为了简洁起见，本文相应地使用较短的术语“S1 实例是S1和S2中的一个，并且S2 实例是S3和S4中的一个”，但并非以限制的方式。在通用术语中所述的以上关于取代基术语的笫一实例旨在阐述各种在本文中所述的取代基赋值。本文中给出的用于取代基的上述规则在适用时延伸至如R1、R2、R3、R4、R5、G1、G2、G3、G4、G5、G6、G7、G8、G9、G10、G11、n、L、R、T、Q、W、X、Y和Z以及本文中使用的任何其他通用取代基符号的成员。
此外，当将多于一种赋值给予任何成员或者取代基时，本披露的实施例包含可以由所列举的独立采用的赋值及其等价赋值构成的各种组合。通过关于取代基术语的第二实例，如果本文描述取代基S实例是S1、S2和S3中的一个，则此列表是指本披露的实施例，其中S实例是S1；S实例是S2；S实例是S3；S实例是S1和S2中的一个；S实例是S1和S3中的一个；S实例是S2和S3中的一个；S实例是S1、S2和S3中的一个；并且S实例是这些选择中每一个的任何等效物。为了简洁起见，本文相应地使用较短的术语“S实例是S1、S2和S3中的一个”，但并非以限制的方式。在通用术语中所述的以上关于取代基术语的笫二实例旨在阐述各种在本文中所述的取代基赋值。本文中给出的用于取代基的上述规则在适用时延伸至如R1、R2、R3、R4、R5、G1、G2、G3、G4、G5、G6、G7、G8、G9、G10、G11、n、L、R、T、Q、W、X、Y和Z以及本文中使用的任何其他通用取代基符号的成员。
命名“Ci-j”，其中j>i，当本文中将其应用于一类取代基时，意指本披露实施例，其中从i至j(包括i和j)的每一种数目的碳原子成员的独立地实现。举例来说，术语C1-4独立地是指具有一个碳原子成员(C1)的实施例、具有两个碳原子成员(C2)的实施例、具有三个碳原子成员(C3)的实施例和具有四个碳原子成员(C4)的实施例。
术语Cn-m烷基是指在链中具有总数N个碳原子成员的直链或者支链脂肪链，其满足n≤N≤m，同时m>n。当允许存在多于一种此类附接可能性时，任何在本文中提及的二取代基意指涵盖各种附接可能性。例如，提及二取代基-A-B-(其中A≠B)在本文中是指A附接到第一取代成员上以及B附接到第二取代成员上的这样的二取代基，并且其也指A附接到第二取代成员上以及B附接到第一取代成员上的这样的二取代基。
本披露还包括具有式(I)的化合物的药学上可接受的盐，优选上述那些和本文示例的特定化合物的盐，以及使用此类盐的治疗方法。
术语“药学上可接受的”意指由联邦或州政府的监管机构或美国以外的国家的相应机构批准的或可批准的，或者美国药典中或其他公认药典中列出的用于在动物(更特别地，在人中)中使用。
“药学上可接受的盐”旨在意指无毒的、生物学耐受的或者以生物学适于施用至受试者的其它形式的由式(I)和式(Ia)表示的化合物的游离酸或者碱的盐。其应该具有亲本化合物所需的药理学活性。通常参见，G.S.Paulekuhn等人,“Trends in ActivePharmaceutical Ingredient Salt Selection based on Analysis of the Orange BookDatabase”[基于橙皮书数据库分析的活性药物成分盐筛选趋势],J.Med.Chem.[药物化学杂志],2007,50:6665-72,S.M.Berge等人,“Pharmaceutical Salts”[药物盐],J PharmSci.[药物科学杂志],1977,66:1-19,和Handbook of Pharmaceutical Salts,Properties,Selection,and Use,[药用盐手册：性质，选择和使用]Stahl和Wermuth编辑,Wiley-VCH和VHCA,苏黎世,2002。药学上可接受的盐的实例是那些不具有过度毒性、刺激或者变态反应的药理学有效且适于与患者组织接触的盐。具有式(I)的化合物可以具有足够酸性的基团、足够碱性的基团或者两种的官能团，并且因此与多种无机或者有机碱、和无机和有机酸反应，以形成药学上可接受的盐。
本披露还涉及具有式(I)和式(Ia)的化合物的药学上可接受的前药、以及采用此类药学上可接受的前药的治疗方法。术语“前药”意指指定化合物的前体，其在施用至受试者之后，经由化学或者生理过程(如溶剂分解或者酶促裂解)或者在生理条件下在体内产生该化合物(例如，达到生理pH时前药被转化为具有式(I)或式(Ia)的化合物)。“药学上可接受的前药”是无毒的、生物学耐受的和处于在生物学上适于施用至受试者的其它形式的前药。选择和制备适合的前药衍生物的示例性程序描述于例如“Design of Prodrugs[前药的设计]”H.Bundgaard编辑,爱思唯尔(Elesevier),1985中。
本披露还涉及具有式(I)和式(Ia)的化合物的药学活性代谢物，其还可以用于本披露的方法中。“药学活性代谢物”意指具有式(I)的化合物或其盐或具有式(Ia)的化合物或其盐的体内代谢的药理学活性产物。化合物的前药和活性代谢物可使用本领域已知或可获得的常规技术测定。参见，例如，Bertolini等人,J Med Chem.[药物化学杂志]1997,40,2011-2016；Shan等人,J Pharm Sci.[药物科学杂志]1997,86(7),765-767；Bagshawe,DrugDev Res.[药物开发研究]1995,34,220-230；Bodor,Adv Drug Res.[药物研究进展]1984,13,224-331；Bundgaard,Design of Prodrugs[前药的设计](Elsevier Press[爱思唯尔出版社],1985)；以及Larsen,Design and Application of Prodrugs,Drug Design andDevelopment[前药的设计和应用，药物设计和开发](Krogsgaard-Larsen等人编辑,Harwood Academic Publishers[哈伍德学术出版社],1991)。
如本文所用，术语“组合物”或“药物组合物”是指本文提供的至少一种化合物与药学上可接受的载体的混合物。药物组合物有助于将化合物施用至患者或受试者。本领域存在多种施用化合物的技术，这些技术包括但不限于静脉内、口服、气雾剂、肠胃外、眼部、肺部和局部施用。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的材料、组合物或载体，如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或囊封材料，这些材料涉及将本文提供的化合物在患者体内载运或输送或载运或输送到患者体内，使得它可以发挥预期功能。典型地，此类构建体从身体的一个器官或部分载运或输送到身体的另一个器官或部分。每种载体在与配制品的其他成分(包括本文提供的化合物)相容且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。可充当药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及药物配制品中使用的其他无毒相容物质。如本文所用，“药学上可接受的载体”还包括与本文提供的化合物的活性相容并对于患者来说在生理上是可接受的任何和所有的涂层剂、抗细菌剂和抗真菌剂以及吸收延迟剂等。补充活性化合物也可以掺入组合物中。“药学上可接受的载体”可以进一步包括本文提供的化合物的药学上可接受的盐。可以包括在本文提供的药物组合物中的其他另外成分在本领域是已知的，并例如描述于Remington's Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学](Genaro编辑,MackPublishing Co.[马克出版公司],1985,伊斯顿,宾夕法尼亚州)，将其通过援引并入本文。
如本文所用，术语“稳定剂”是指能够化学抑制或防止具有式I的化合物的降解的聚合物。添加稳定剂到化合物的配制品中以改善化合物的化学和物理稳定性。
如本文所用，术语“片剂”表示可口服施用的、单剂量的固体剂型，该剂型可通过常规压片方法将药物或其药学上可接受的盐与适当的赋形剂(例如，填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、和/或表面活性剂)压制而成。可以使用常规制粒方法(例如，湿法或干法制粒)生产片剂，任选地粉碎颗粒，随后进行压缩并且任选地进行包衣。还可以通过喷雾干燥法生产片剂。
如本文所用，术语“胶囊”是指药物被包封在硬或软可溶性容器或“壳”内的固体剂型。容器或壳可以由明胶、淀粉和/或其他合适的物质形成。
如本文所用，术语“有效量”、“药学有效量”和“治疗有效量”是指无毒但足够提供期望的生物学结果的药剂量。该结果可以是疾病征象、症状或原因的减少或减轻，或任何其他期望的生物学系统变化。本领域普通技术人员使用常规实验可以确定任何个体情况下的适当治疗量。
如本文所用，术语“组合”、“治疗组合”、“药物组合”、或“组合产物”是指组合施用的非固定的组合或成套试剂盒，其中在时间间隔内，可以同时或分开地独立施用两种或更多种治疗剂，尤其是其中这些时间间隔允许组合伙伴物显示协作的，例如协同的效应。
术语“调节剂”包括抑制剂和激活剂两者，其中“抑制剂”是指降低、预防、灭活、脱敏或下调HBV组装以及其他HBV核心蛋白功能的化合物，这些功能是HBV复制或感染颗粒生成所必需的。
如本文所用，术语“衣壳组装调节剂”是指破坏或加速或抑制或阻碍或延迟或减少或修饰正常衣壳组装(例如，在成熟期间)或正常衣壳拆卸(例如，在感染期间)或扰动衣壳稳定性从而诱导异常的衣壳形态和功能的化合物。在一个实施例中，衣壳组装调节剂加速衣壳组装或拆卸，从而诱导异常的衣壳形态。在另一个实施例中，衣壳组装调节剂与主要的衣壳组装蛋白(CA)相互作用(例如在活性位点与其结合，在变构位点与其结合，修改和/或阻碍折叠等)，从而破坏衣壳组装或拆卸。在又另一个实施例中，衣壳组装调节剂引起CA的结构或功能(例如，CA组装、拆卸、与底物结合、折叠成合适构象等的能力)的扰动，这减弱了病毒感染性和/或对病毒是致命的。
如本文所用，术语“治疗(treatment或treating)”被定义为向患者应用或施用治疗剂，即本披露的化合物(单独地或与另一种药剂组合)，或向来自患者的分离的组织或细胞系应用或施用治疗剂(例如，用于诊断或离体应用)，该患者患有HBV感染、有HBV感染的症状或具有患上HBV感染的可能性，目的是治愈、痊愈、减轻、缓解、改变、补救、改善、改进或影响HBV感染、HBV感染的症状或患上HBV感染的可能性。基于从药物基因组学领域获得的知识，此类治疗可以具体定制或修改。
如本文所用，术语“预防(prevent或prevention)”意指没有障碍或疾病发展(如果没有发生障碍或疾病)、或没有进一步的障碍或疾病发展(如果已经患上了该障碍或疾病)。还考虑到了预防与障碍或疾病相关的一些或全部症状的能力。
如本文所用，术语“患者”、“个体”或“受试者”是指人或非人类哺乳动物。非人类哺乳动物包括例如家畜以及宠物，如绵羊、牛、猪、犬科动物、猫科动物和鼠科哺乳动物。优选地，该患者、受试者或个体是人。
在根椐本披露的治疗方法中，根据本披露的有效量的药剂被施用至患有或诊断为具有这样的疾病、障碍或者病症的受试者。“有效量”意指在需要这样的治疗的患者中对于指定的疾病、障碍或者病症通常足以引起所需的治疗或者预防益处的量或者剂量。本披露化合物的有效量或者剂量可以通过常规方法确定，如建模、剂量升级研究或者临床试验，并且考虑常规因素，例如施用或者药物递送的模式或者途径，化合物的药代动力学，疾病、障碍或者病症的严重程度和过程，受试者的先前或者正在进行的治疗，受试者的健康状况和对药物的响应，和治疗医师的判断。剂量实例在从约0.001至约200mg化合物/kg受试者体重/天的范围内，优选约0.05至100mg/kg/天，或者约1至35mg/kg/天，以单个的或者分开的剂量单位(例如，BID、TID、QID)施用。对于70-kg的人，适合剂量的示例性范围从约0.05至约7g/天、或者约0.2至约2.5g/天。
化合物的剂量的实例为约1mg至约2,500mg。在一些实施例中，本文所述的组合物中使用的本披露的化合物的剂量小于约10,000mg、或小于约8,000mg、或小于约6,000mg、或小于约5,000mg、或小于约3,000mg、或小于约2,000mg、或小于约1,000mg、或小于约500mg、或小于约200mg、或小于约50mg。类似地，在一些实施例中，如本文所述的第二化合物(即，用于HBV治疗的另一种药物)的剂量小于约1,000mg、或小于约800mg、或小于约600mg、或小于约500mg、或小于约400mg、或小于约300mg、或小于约200mg、或小于约100mg、或小于约50mg、或小于约40mg、或小于约30mg、或小于约25mg、或小于约20mg、或小于约15mg、或小于约10mg、或小于约5mg、或小于约2mg、或小于约1mg、或小于约0.5mg及其任何和所有全部或部分增量。
一旦患者的疾病、障碍或者病症出现改善，可调整剂量，用于预防性或维持性治疗。例如，随着症状变化，施用的剂量或频率或两者可以减少至维持所需的治疗或预防作用的水平。当然，如果症状已经被减轻到适当的水平，治疗可以停止。然而，在有任何症状复发时，患者可能需要长期的间歇治疗。
可以根据披露的方法进行治疗的HBV感染包括HBV基因型A、B、C、和/或D感染。然而，在实施例中，披露的方法可以治疗任何HBV基因型(“泛基因型(pan-genotypic)治疗”)。可以使用本领域已知的方法进行HBV基因分型，例如INNO-
Figure BDA0003377545370000761
HBV基因分型(Innogenetics N.V.公司，根特，比利时)。
为了帮助本申请书的读者，将说明书分隔为不同的段落或部分。这些分隔不应被视为一段或一部分的实质内容与另一段或另一部分的实质内容脱节。相反，本说明书涵盖了可以考虑的各个部分、段落和句子的所有组合。
本文引用的所有参考文献的每一相关披露内容均通过援引具体并入。以下实例是通过说明的方式而不是通过限制的方式提供的。
实例
现在将参考以下用于其一般制备的说明性合成方案和随后的具体实例来描述可用于本披露方法的示例性化合物。技术人员将认识到，为了获得本文中的各种化合物，可以适当地选择起始材料，使得最终所需的取代基将在有或没有合适的保护下通过反应方案而被携带以产生所需产物。可替代地，可能有必要或希望使用合适的基团代替最终所需的取代基，该合适的基团可通过反应方案被携带并适当地被所需的取代基代替。除非另有说明，否则变量如上文参考式(I)所定义。反应可以在溶剂的熔点和回流温度之间进行，优选在0℃和溶剂的回流温度之间进行。可以采用常规加热或微波加热来加热反应。反应也可以在高于溶剂的正常回流温度的密封压力容器中进行。
可使用本领域普通技术人员已知的方法将具有式(I)和式(Ia)的化合物转化为其相应盐。例如，在如Et2O、CH2Cl2、THF、MeOH、氯仿或异丙醇的溶剂中用三氟乙酸、HCl或柠檬酸处理具有式(I)的胺以提供相应的盐形式。可替代地，通过反相HPLC纯化条件，因此获得三氟乙酸或甲酸盐。可以从极性溶剂(包括极性溶剂的混合物和极性溶剂的水性混合物)或从非极性溶剂(包括非极性溶剂的混合物)中通过重结晶以结晶形式获得具有式(I)和式(Ia)的化合物的药学上可接受的盐的结晶形式。
当根据本披露的化合物具有至少一个手性中心时，它们可相应地作为对映异构体存在。当化合物具有两个或更多个手性中心时，它们可以另外以非对映体存在。应当理解，所有此类异构体及其混合物都涵盖在本披露的范围内。
表示为“立体异构体混合物”(意指两种或更多种立体异构体的混合物，并且包括对映异构体、非对映异构体及其组合)的化合物通过SFC拆分分离。
化合物可通过特定形式的合成或通过拆分以单一形式(如单一对映异构体)获得。化合物可以作为各种形式的混合物可替代地获得，如外消旋(1:1)或非外消旋(非1:1)混合物。当获得对映异构体的外消旋和非外消旋混合物时，可使用本领域普通技术人员已知的常规分离方法分离单一对映异构体，如手性色谱、重结晶、非对映异构体的盐形成、衍生为非对映异构体的加合物、生物转化、或酶转化。当获得区域异构体或者非对映异构体的混合物时，适用情况下，可以使用常规方法(如色谱法或者结晶法)对单个的异构体进行分离。
1.一般信息
化学名称
使用化学软件：ACD/ChemSketch生成化学名称。
LCMS方法
使用LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器以及如在对应的方法中所指定的柱进行高效液相色谱法(HPLC)测量。如果必要的话，包括其他检测器(参见下文的方法表格)。
将来自柱的流带至配置有大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。利用适当的软件进行数据采集。
通过实验保留时间(Rt)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么报道的分子离子对应于[M+H]+(质子化的分子)和/或[M-H]-(去质子的分子)。在化合物不是直接可电离的情况下，指定加合物的类型(即[M+NH4]+、[M+HCOO]-等)。获得的所有结果具有通常与所使用的方法相关的实验不确定性。
下文中，“SQD”意指单四极检测器，“MSD”质量选择检测器，“RT”室温，“BEH”桥接的乙基硅氧烷/二氧化硅杂合物，“DAD”二极管阵列检测器，“HSS”高强度二氧化硅，“Q-Tof”四极飞行时间质谱仪，“CLND”化学发光氮检测器，“ELSD”蒸发光扫描检测器。
LCMS方法
(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间)。
Figure BDA0003377545370000791
Figure BDA0003377545370000801
Figure BDA0003377545370000811
SFC方法
使用分析型超临界流体色谱法(SFC)系统来进行SFC测量，该系统由以下构成：用于递送二氧化碳(CO2)和改性剂的二元泵、自动进样器、柱温箱、配备有经得起400巴的高压流动池的二极管阵列检测器。如果配置有质谱仪(MS)，来自该柱的流被引至该(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。利用适当的软件进行数据采集。
分析性SFC-MS方法(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间，以巴表示背压(BPR)。
SFC方法：
Figure BDA0003377545370000812
NMR分析
1H NMR谱记录在a)Bruker DRX 500MHz光谱仪上、或b)Bruker Avance 400MHz光谱仪上、或c)Bruker Avance III 400MHz光谱仪上、或d)Bruker Avance 600MHz光谱仪上、或e)Bruker DRX 400MHz光谱仪上、或f)Bruker Avance NEO 400MHz光谱仪上。
除非另有说明，否则在环境温度下记录NMR谱。数据报告如下：在规模、积分、多重性(s＝单峰、d＝双重峰、t＝三重峰、q＝四重峰、quin＝五重峰、sext＝六重峰、sept＝七重峰、m＝多重峰、b＝宽峰或它们的组合)方面，化学位移相对于TMS(δ＝0ppm)以百万分率(ppm)为单位，偶联常数J以赫兹(Hz)为单位。
质谱
除非另外指明，质谱在Shimadzu LCMS-2020-MSD或Agilent 1200/G6110A MSD上通过在正模式下的电喷雾电离(ESI)获得。
2.缩写
Figure BDA0003377545370000821
Figure BDA0003377545370000831
Figure BDA0003377545370000841
3.化合物的合成
3.1.6元环化合物的合成
3.1.1.关键中间体的合成
3.1.1.1.中间体I1-I4、I6的合成
中间体I1
5-叔丁基3-乙基2-(丁-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000842
将反应在无水条件下、在Ar气氛下进行。
向5-叔丁基3-乙基4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二甲酸酯(1.50g，5.08mmol)在DMF(30mL)中的溶液中添加Cs2CO3(1.65g，5.08mmol)和4-溴丁炔(477μL，5.08mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌1h。添加另外的量的Cs2CO3(1.65g，5.08mmol)和4-溴丁炔(477μL，5.08mmol)，并将反应混合物在50℃下再搅拌一小时。将该程序重复直到反应完成(添加6当量的Cs2CO3和4-溴丁炔)。将反应混合物用H2O(60mL)稀释，并用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x60mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：MeCN/H2O，梯度从：1:9至1:1)纯化以得到呈黄色油状物的中间体I1(897mg，51％)。
中间体I2
5-叔丁基3-乙基2-(戊-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3，5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000851
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向5-叔丁基3-乙基4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二甲酸酯(2.00g，6.78mmol)在DMF(40mL)中的溶液中添加Cs2CO3(4.41g，13.5mmol)和甲磺酸戊-3-炔基酯(2.20g，13.5mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌1h，用H2O(100mL)稀释并用EtOAc(3x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：MeCN/H2O，梯度从：1:9至1:1)纯化以得到呈浅黄色油状物的中间体I2(1.30g，53％)。
中间体I3
5-叔丁基3-乙基2-(己-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000861
以与针对中间体I2所述类似的方式制备中间体I3(1.18g，46％)。
中间体I4
5-叔丁基3-乙基2-(4-苯基丁-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000862
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I1(500mg，1.44mmol)在THF(6mL)中的溶液中添加碘苯(242μL，2.16mmol)和Et3N(602μL，4.32mmol)。将混合物用Ar脱气。添加Pd(PPh3)2Cl2(50.5mg，0.072mmol)和CuI(27.4mg，0.14mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物与另一级分(0.14mmol)合并，用EtOAc(80mL)稀释，用HCl(1N，水溶液)和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至80:20)纯化，以得到呈黄色油状物的中间体I4(475mg，70％)。
中间体I6
5-叔丁基3-乙基(6R)-2-(丁-3-炔-1-基)-6-甲基-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000863
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向5-叔丁基3-乙基(6R)-6-甲基-4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-3,5-二甲酸酯I5(1.50g，4.85mmol)和甲磺酸丁-3-炔基酯(1.93g，9.70mmol)在DMF(30mL)中的溶液中添加Cs2CO3(3.16g，9.70mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌2h，然后在室温搅拌3天。添加另外量的甲磺酸丁-3-炔基酯(0.96g，4.85mmol)和Cs2CO3(1.58g，4.85mmol)，并将反应混合物在50℃下再搅拌一小时。将反应混合物用H2O(70mL)稀释，并用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：MeCN/H2O，梯度从35:65至56:44)纯化以得到呈黄色油状物的中间体I6(930mg，89％)。
3.1.1.2.中间体I11的合成
Figure BDA0003377545370000871
中间体I7
5-叔丁基3-乙基2-(4-乙氧基-4-氧代丁基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000881
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向Cs2CO3(12.9g，39.7mmol)在DMF(100mL)中的悬浮液中依次添加5-(叔丁基)3-乙基2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯(10.2g，33.1mmol)和乙基4-溴丁酸酯(5.21mL，36.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌48h并倒入水(150mL)中，并且用EtOAc(2x150mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(3x150mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩以给出呈黄色油状物的中间体I7(15g，90％纯度，区域异构体的66/33混合物)，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I8
2-叔丁基9-乙基10-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-2,9(1H)-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370000882
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向t-BuOK(7.42g，66.2mmol)在THF(150mL)中的溶液中逐滴添加中间体I7在THF(150mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1h。将反应用水(200mL)淬灭并用HCl(1N，150mL)酸化。将各层分离并将水相用EtOAc(2x150mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从70:30至30:70)纯化，以给出呈无色胶状物的中间体I8(8.62g，93％纯度，67％，经过2个步骤)。
中间体I9
乙基10-氧代-1,2,3,4,7,8,9,10-八氢吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-9-甲酸酯盐酸盐
Figure BDA0003377545370000891
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在室温下，将HCl(4N在1,4-二噁烷中，55.4mL，222mmol)添加至中间体I8(8.05g，22.2mmol)在DCM(50mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌18h并用Et2O(200mL)稀释。将混合物过滤并用Et2O(100mL)冲洗。将固体在真空下干燥以给出呈白色固体的中间体I9，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I10
乙基2-(3,4-二氯苯甲酰基)-10-氧代-1,2,3,4,7,8,9,10-八氢吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-9-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000892
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I9在DCM(100mL)中的溶液中添加吡啶(5.38mL，66.5mmol)，随后逐滴添加3,4-二氯苯甲酰氯(5.10g，24.4mmol)在DCM(50mL)中的溶液。将反应物混合物温热至室温并搅拌18h。将反应混合物用DCM(150mL)稀释，并用HCl(1M，水溶液，2x150mL)和盐水(150mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤并且在减压下进行浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/EtOAc，梯度从100:0至70:30)纯化，以给出呈灰白色泡沫的中间体I10(8.72g，90％，经过2个步骤)。
中间体I11
2-(3,4-二氯苯甲酰基)-1,2,3,4,8,9-六氢吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(7H)-酮
Figure BDA0003377545370000901
向中间体I10(1.00g，2.3mmol)在DMSO(18mL)中的溶液中添加H2O(2mL)和LiCl(126mg，2.98mmol)。将反应混合物在150℃下搅拌5h，冷却至室温并用H2O(100mL)稀释。将溶液再搅拌30min。通过过滤收集沉淀物，并将其在50℃下在真空下干燥过夜，以得到呈白色固体的中间体I11(776mg，93％)。
3.1.2.异噁唑衍生化合物的合成
3.1.2.1.化合物1的合成
Figure BDA0003377545370000902
中间体I12
叔丁基2-(丁-3-炔-1-基)-3-(羟基甲基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000911
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I1(880mg，2.53mmol)在THF(17mL)中的溶液中添加LiAlH4(192mg，5.07mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h。将反应用EtOAc(50mL)和H2O(5mL)淬灭，并添加罗谢尔盐(Rochelle's salt)的溶液(1M，水溶液，50mL)。将混合物在室温下搅拌30min，并且将各层分离。将水相用EtOAc(50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩，以得到呈浅黄色油状物的中间体I12(708mg，92％)。
中间体I13
叔丁基2-(丁-3-炔-1-基)-3-甲酰基-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000912
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I12(705mg，2.31mmol)在DME(30mL)中的悬浮液中添加MnO2(803mg，9.24mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌18h。添加另外量的MnO2(401mg，4.62mmol)，并且将反应混合物在80℃下再搅拌2h。将混合物经
Figure BDA0003377545370000913
垫过滤并将滤液在减压下浓缩。将残余物溶解在DCM(30mL)中，并添加PCC(746mg，3.46mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h并在减压下浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至60:40)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I13(282mg，40％)。
中间体I14
叔丁基2-(丁-3-炔-1-基)-3-[(羟基亚氨基)甲基]-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000921
向中间体I13(200mg，0.66mmol)和NaOAc(162mg，1.98mmol)在THF(6.5mL)、MeOH(6.5mL)和H2O(13mL)中的溶液中添加N-羟胺盐酸盐(91.6mg，1.32mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并用H2O(10mL)稀释。将各层分离并将水相用DCM(3x30mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩以得到中间体I14(203mg)，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I15
叔丁基4,5,8,9-四氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(11H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000922
在0℃下，向中间体I14(200mg，0.63mmol)在THF(13mL)和H2O(0.8mL)中的溶液中添加次氯酸钠(15％在H2O中，779μL，1.57mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h。将混合物与另一级分(0.24mmol)合并，并用H2O(30mL)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至20:80)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I15(116mg，42％)。
中间体I16
4,5,8,9,10,11-六氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶盐酸盐
Figure BDA0003377545370000931
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I15(110mg，0.35mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加HCl(4M在1,4-二噁烷中，1.74mL，6.95mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并在减压下浓缩至干燥以得到中间体I16(88mg)，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物1
(3,4-二氯苯基)(4,5,8,9-四氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(11H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370000932
将反应在Ar气氛下进行。
在0℃下，向粗中间体I16在DCM(8mL)中的溶液中添加Et3N(144μL，1.03mmol)，随后添加3,4-二氯苯甲酰氯(79.3mg，0.38mmol)在DCM(2mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌2h。将反应混合物用DCM(30mL)稀释，用HCl(1N，水溶液，20mL)、NaHCO3(饱和水溶液，20mL)和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从：100:0至95:5)纯化，以得到呈白色固体的化合物1(115mg，84％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 8.74(s,1H),7.73-7.64(m,2H),7.46(dd,J＝8.2,1.8Hz,1H),4.76-4.66(m,2H),4.30(t,J＝6.7Hz,2H),3.81-3.71(m,2H),3.12(td,J＝6.9,0.9Hz,2H),2.80(t,J＝5.9Hz,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝9.6min，C18H14Cl2N4O2的m/z计算值388，m/z实测值389[M+H]+。
3.1.2.2.化合物2的合成
Figure BDA0003377545370000941
中间体I17
叔丁基3-(羟基甲基)-2-(戊-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000942
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I2(1.25g，3.46mmol)在THF(30mL)中的溶液中添加LiAlH4(263mg，6.92mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h。将反应用EtOAc(100mL)和H2O(10mL)淬灭，并添加罗谢尔盐(Rochelle's salt)的溶液(1M，水溶液，100mL)。将混合物在室温下搅拌30min，并且将各层分离。将水相用EtOAc(100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至20:80)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I17(991mg，90％)。
中间体I18
叔丁基3-甲酰基-2-(戊-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000951
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I17(985mg，3.08mmol)在DCM(30mL)中的悬浮液中添加PCC(997mg，4.62mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h并浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至50:50)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I18(814mg，83％)。
中间体I19
叔丁基3-[(羟基亚氨基)甲基]-2-(戊-3-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000952
向中间体I18(400mg，1.26mmol)和NaOAc(310mg，3.78mmol)在THF(13mL)、MeOH(13mL)和H2O(26mL)中的溶液中添加N-羟胺盐酸盐(175mg，2.52mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并用H2O(20mL)稀释。将各层分离并将水相用DCM(3x60mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩以得到中间体I19(378mg，90％)，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I20
叔丁基3-甲基-4,5,8,9-四氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(11H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370000961
在0℃下，向中间体I19(370mg，1.11mmol)在THF(20mL)和H2O(1.3mL)中的溶液中添加次氯酸钠(15％在H2O中，1.38mL，2.78mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2h，并用H2O(60mL)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至30:70)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I20(108mg，29％)。
中间体I21
3-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶盐酸盐
Figure BDA0003377545370000962
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I20(100mg，0.303mmol)在DCM(4mL)中的溶液中添加HCl(4N在1,4-二噁烷中，1.51mL，6.04mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18h，然后浓缩至干燥以得到中间体I21，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物2
3-甲基-4,5,8,9,10,11-六氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶
Figure BDA0003377545370000963
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I21在DCM(5mL)中的溶液中添加Et3N(125μL，0.9mmol)，随后添加3,4-二氯苯甲酰氯(69.1mg，0.330mmol)在DCM(5mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌2h。将反应混合物用DCM(30mL)稀释，用HCl(1N，水溶液，20mL)、NaHCO3(饱和水溶液，20mL)和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至97:3)纯化，以得到呈白色固体的化合物2(80mg，65％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.73-7.64(m,2H),7.45(dd,J＝8.3,1.8Hz,1H),4.73-4.68(m,2H),4.28(t,J＝6.8Hz,2H),3.78(t,J＝4.8Hz,2H),3.00(t,J＝6.8Hz,2H),2.79(t,J＝6.0Hz,2H),2.42(s,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝9.9min，C19H16Cl2N4O2的m/z计算值402，m/z实测值403[M+H]+。
3.1.2.3.化合物3的合成
Figure BDA0003377545370000981
以与针对化合物2所述类似的方式制备化合物3。
获得呈白色固体的化合物3，(3,4-二氯苯基)(3-乙基-4,5,8,9-四氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(11H)-基)甲酮。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.70(d,J＝2.0Hz,1H),7.45(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.74-4.66(m,2H),4.28(t,J＝6.9Hz,2H),3.82-3.73(m,2H),3.04(t,J＝6.5Hz,2H),2.87-2.77(m,4H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)；LCMS(方法F)：Rt＝4.90min，C20H18Cl2N4O2的m/z计算值416，m/z实测值417[M+H]+。
3.1.2.4.化合物4的合成
Figure BDA0003377545370000991
以与针对化合物2所述类似的方式制备化合物4。
获得呈浅黄色固体的化合物4，(3,4-二氯苯基)(3-苯基-4,5,8,9-四氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(11H)-基)甲酮。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.85-7.78(m,2H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.72(d,J＝2.0Hz,1H),7.63-7.52(m,3H),7.47(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.78-4.73(m,2H),4.38(t,J＝6.8Hz,2H),3.84-3.75(m,2H),3.36(t,J＝6.8Hz,2H),2.82(t,J＝5.8Hz,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝11.4min，C24H18Cl2N4O2的m/z计算值464，m/z实测值465[M+H]+。
3.1.2.5.化合物5的合成
Figure BDA0003377545370001001
以与针对化合物2所述类似的方式制备化合物5。
获得呈白色固体的化合物5，(3,4-二氯苯基)[(9R)-9-甲基-4,5,8,9-四氢[1,2]噁唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(11H)-基]甲酮。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 8.74(s,1H),7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.69(d,J＝2.0Hz,1H),7.43(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),5.15-5.02(m,1H),4.72-4.57(m,1H),4.35(m,1H),4.31(t,J＝6.4Hz,2H),3.14-3.10(m,2H),3.00(dd,J＝16.0,5.6Hz,1H),2.51(d,J＝16.0Hz,1H),1.21(d,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝9.9min，C19H16Cl2N4O2的m/z计算值402，m/z实测值403[M+H]+。
3.1.3.吡唑衍生化合物的合成
3.1.3.1.化合物6的合成
(3,4-二氯苯基)(2,4,5,8,9,11-六氢-10H-吡唑并[3,4-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001011
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I11(210mg，0.58mmol)在EtOH(5mL)中的溶液中添加N,N-二甲基甲酰胺乙酸二甲酯(536μL，4.04mmol)。将反应混合物在150℃下搅拌2h，浓缩至干燥并与DCM(2x10mL)共蒸发。将残余物悬浮EtOH(5mL)中，并添加一水合肼(559μL，11.5mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2h并浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至90:10)纯化。通过快速柱色谱法(C-18，流动相：MeCN/H2O，梯度从10:90至60:40)进行第二次纯化，以得到呈白色固体的化合物6(119mg，53％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 12.59(br.s,1H),7.71-7.67(m,2H),7.57(s,1H),7.45(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),4.76-4.66(m,2H),4.20(t,J＝7.2Hz,2H),3.83-3.71(m,2H),3.02(t,J＝6.7Hz,2H),2.76(t,J＝5.5Hz,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝8.6min，C18H15Cl2N5O的m/z计算值387，m/z实测值388[M+H]+。
3.1.3.2.化合物7的合成
Figure BDA0003377545370001012
中间体I37
9-乙酰基-2-(3,4-二氯苯甲酰基)-1,2,3,4,8,9-六氢吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(7H)-酮
Figure BDA0003377545370001021
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I11(400mg，1.10mmol)在甲苯(4.8mL)和DMSO(1.1mL)中的溶液中添加t-BuOK(370mg，3.30mmol)。逐滴添加EtOAc(1.40mL，14.3mmol)，并且将所得反应混合物在回流下搅拌1h。将反应混合物用EtOAc(100mL)稀释，并添加NH4Cl(饱和水溶液，100mL)。将各层分离并将水相用EtOAc(2x150mL)萃取。将合并的有机层用水(150mL)和盐水(150mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从80:20至60:40)纯化。通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至97.5:2.5)进行第二次纯化以得到呈白色固体的中间体I37(170mg，38％)。
化合物7
(3,4-二氯苯基)(3-甲基-2,4,5,8,9,11-六氢-10H-吡唑并[3,4-c]吡唑并-
[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001022
将反应在Ar气氛下进行。
在室温下，将一水合肼(401μL，8.27mmol)逐滴添加至中间体I37(168mg，0.41mmol)在EtOH(4mL)中的溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌2h，浓缩至干燥并与DCM(2x5mL)共蒸发。将残余物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从90:10至72:28)纯化，以给出呈淡黄色固体的化合物7(70mg，42％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 12.31(br.s,1H),7.72-7.67(m,2H),7.44(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H),4.72-4.65(m,2H),4.18(t,J＝6.8Hz,2H),3.81-3.72(m,2H),2.89(t,J＝6.8Hz,2H),2.74(t,J＝5.6Hz,2H),2.22(s,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝8.8min，C19H17Cl2N5O的m/z计算值401，m/z实测值402[M+H]+。
3.1.3.3.化合物8的合成
(3,4-二氯苯基)(2-甲基-2,4,5,8,9,11-六氢-10H-吡唑并[3,4-c]吡唑并-
[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001031
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向化合物6(230mg，0.41mmol，70％纯度)在THF(4mL)中的溶液中添加NaH(在矿物油中60％，33.3mg，0.83mmol)。将反应混合物在此温度下搅拌30min，然后添加碘甲烷(51.9μL，0.83mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2h，温热至室温并用水(10mL)稀释。将各层分离并将水层用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在真空下浓缩。将粗混合物与另一级分(0.33mmol)合并，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至90:10)纯化。通过制备型HPLC(流动相：H2O/MeCN，梯度从50:50至0:100)进行第二次纯化。将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从99:1至95:5)经受另一次纯化以给出化合物8(86.2mg，29％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.69(d,J＝2.0Hz,1H),7.54(s,1H),7.44(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.70(s,2H),4.19(t,J＝7.2Hz,2H),3.86(s,3H),3.77-3.69(m,2H),3.00(m,2H),2.74(t,J＝6.0Hz,2H)；LCMS(方法G)：Rt＝13.1min，C19H17Cl2N5O的m/z计算值401，m/z实测值402[M+H]+。
3.1.3.4.化合物9的合成
(3,4-二氯苯基)(1-甲基-1,4,5,8,9,11-六氢-10H-吡唑并[3,4-c]吡唑并-[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001041
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I11(400mg，1.10mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加N,N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(1.02mL，7.69mmol)。将反应混合物在150℃下搅拌2h，浓缩至干燥并与DCM(2x4mL)共蒸发。将残余物吸收在EtOH(10mL)中，并添加甲基肼(1.16mL，22.0mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌过夜，在减压下浓缩至干燥并与DCM(2x4mL)共蒸发。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至90:10)纯化。通过制备型HPLC(流动相：H2O/MeCN，梯度从50:50至0:100)进行第二次纯化。将残余物在EtAOc中研磨，通过过滤收集并干燥，以得到呈白色固体的化合物9(72mg，16％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.70(d,J＝8.0Hz,1H),7.69(d,J＝2.0Hz,1H),7.45(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.35(s,1H),4.92(s,2H),4.19(t,J＝6.8Hz,2H),3.93(s,3H),3.78-3.71(m,2H),2.91(t,J＝7.2Hz,2H),2.76(t,J＝6.0Hz,2H)；LCMS(方法G)：Rt＝16.9min，C19H17Cl2N5O的m/z计算值401，m/z实测值402[M+H]+。
3.1.4.噻唑衍生化合物的合成
3.1.4.1.化合物10的合成
Figure BDA0003377545370001051
中间体I38
9-溴-2-(3,4-二氯苯甲酰基)-1,2,3,4,8,9-六氢吡唑并[1,5-a:4,3-c']联吡啶-10(7H)-酮
Figure BDA0003377545370001052
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在室温下，向CuBr2(429mg，1.92mmol)在EtOAc(6mL)中的悬浮液中添加中间体I11(500mg，1.37mmol)在CHCl3(4mL)中的溶液。将反应混合物在60℃下搅拌18h，冷却至室温并添加另外的量的CuBr2(61mg；0.28mmol)。将反应混合物在65℃下再搅拌2h。重复添加CuBr2(61mg，0.28mmol)，并且将反应混合物在65℃下搅拌2h。将反应混合物缓慢添加至EDTA溶液中并用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，在减压下浓缩以得到中间体I38，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物10
(3,4-二氯苯基)(2-甲基-4,8,9,11-四氢[1,3]噻唑并[4,5-c]吡唑并[1,5-a:4,3-c']-联吡啶-10(5H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001061
向中间体I38在DMF(12mL)中的溶液中添加硫代乙酰胺(81.4mg，1.08mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌18h，并用EtOAc和水稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从85:15至0:100)纯化。通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从99/1至95/5)进行第二次纯化。将残余物与EtOH共蒸发(3次)，然后与混合物EtOAc/EtOH/DCM(1:1:1)共蒸发，并且在50℃下在真空下干燥以给出呈白色固体的化合物10(111mg，19％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.72-7.64(m,2H),7.47-7.42(m,1H),4.78(s,2H),4.30(t,J＝7.2Hz,2H),3.78-3.68(m,2H),3.30(t,J＝7.2Hz,2H),2.76(t,J＝6.1Hz,2H),2.68(s,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝10.1min，C19H16Cl2N4OS的m/z计算值418，m/z实测值419[M+H]+。
3.2.7元环的合成
3.2.1.中间体的合成
3.2.1.1.中间体I39的合成
5-叔丁基3-乙基2-(戊-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001062
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在室温下，向Cs2CO3(6.62g，20.3mmol)在DMF(60mL)中的悬浮液中依次添加5-叔丁基3-乙基2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯(3.00g，10.2mmol)和5-氯-1-戊炔(2.15mL，20.3mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌5h，然后在室温搅拌18h。将反应混合物倒入水(100mL)中并且用EtOAc(3x70mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(3x100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从75:25至5:95)纯化，以给出呈淡黄色油状物的中间体I39(2.25g，57％，93％纯度)。
3.2.1.2.中间体I40的合成
5-叔丁基3-乙基2-(己-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001071
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向5-叔丁基3-乙基2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯(4.00g，13.5mmol)在DMF(80mL)中的溶液中添加Cs2CO3(13.2g，40.6mmol)和6-氯-2-己炔(7.52g，40.6mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌1h，并用H2O(100mL)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(3x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从：90:10至50:50)纯化，以得到呈黄色油状物的中间体I40(1.79g，35％)。
3.2.1.3.中间体I41的合成
5-叔丁基3-乙基2-(庚-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001081
以与针对中间体I40所述类似的方式制备中间体I41(850mg，32％)。
3.2.1.4.中间体I42的合成
5-叔丁基3-乙基(6R)-6-甲基-2-(戊-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001082
以与针对中间体I39所述类似的方式制备中间体I42(1.17g，45％，94％纯度)。
3.2.1.5.中间体I43的合成
5-叔丁基3-乙基(6R)-2-(己-4-炔-1-基)-6-甲基-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001083
以与针对中间体I39所述类似的方式制备中间体I43(632mg，43％，86％纯度)。
3.2.1.6.中间体I51的合成
Figure BDA0003377545370001091
中间体I44
5-叔丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001092
在N2气氛下，向5-叔丁基3-乙基6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(5.00g，16.9mmol)和3-溴丙-1-烯(3.07g，25.4mmol)在DMF(50mL)中的混合物中一次性添加Cs2CO3(13.8g，42.3mmol)。将混合物在50℃下搅拌12h并倒入水(50mL)中。将混合物搅拌1min，并且将水相用EtOAc(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从15:1至5:1)纯化以给出呈黄色固体的中间体I44(2.70g，47％)。
中间体I45
叔丁基2-烯丙基-3-(羟基甲基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370001101
在-40℃下在N2气氛下，向中间体I44(1.70g，5.07mmol)在THF(30.00mL)中的混合物中一次性添加LiAlH4(288mg，7.60mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌1h并倒入水(10mL)中。将混合物搅拌1min，并且将水相用EtOAc(2x30mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2x10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，DCM/MeOH，梯度从50:1至20:1)纯化以得到呈黄色固体的中间体I45(1.10g，72％)。
中间体I46
叔丁基2-烯丙基-3-甲酰基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001102
在N2气氛下，向中间体I45(1.10g，3.75mmol)在DCM(10.00mL)中的混合物中一次性添加MnO2(3.26g，37.5mmol)。将反应混合物在45℃下搅拌12h。添加另外量的MnO2(3.26g，37.5mmol)，并且将反应混合物在45℃下再搅拌24h。将混合物过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从10:1至5:1)纯化以得到呈黄色固体的中间体I46(620mg，57％)。
中间体I47
叔丁基2-烯丙基-3-(1-羟基丁-3-烯-1-基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001111
在-40℃下在N2气氛下，向中间体I46(800mg，2.75mmol)在THF(5.00mL)中的混合物中一次性添加烯丙基溴化镁(1M在THF中，8.24mL，8.24mmol)。将反应混合物在-40℃下搅拌2h并倒入水(20mL)中。将混合物搅拌1min，并且将水相用EtAOc(2x20mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2x10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从3:1至1:1)纯化以得到呈黄色油状物的中间体I47(750mg，79％)。
中间体I48
叔丁基11-羟基-3,4,10,11-四氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001112
-2(7H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001121
在N2气氛下，向中间体I47(750mg，2.25mmol)在DCM(1.20L)中的混合物中一次性添加第2代Grubbs(382mg，445μmol)。将反应混合物在30℃下搅拌12h并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从4:1至1:1)纯化以得到呈黄色固体的中间体I48(650mg，90％)。
中间体I49
叔丁基11-羟基-1,3,4,7,8,9,10,11-八氢-2H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001124
-2-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001122
将中间体I48(2.31g，7.56mmol)溶解于MeOH(100mL)中。添加Pd/C(10％，697mg，0.65mmol)，并且将反应混合物在H2气氛下搅拌2h。将反应混合物过滤并且在减压下除去挥发物。将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化，以得到呈白色泡沫的中间体I49(1.94，83％)。
中间体I50
叔丁基11-氧代-1,3,4,7,8,9,10,11-八氢-2H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001125
-2-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001123
将中间体I49(1.89g，6.15mmol)、TPAP(432mg，1.23mmol)和NMO(3.32g，24.6mmol)在MeCN(75mL)中的混合物在50℃下搅拌2h。将挥发物在减压下除去，并将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化以得到中间体I50(1.79g，95％)。
中间体I51
叔丁基(10E)-10-[(二甲基氨基)亚甲基]-11-氧代-1,3,4,7,8,9,10,11-八氢-2H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001132
-2-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001131
将N,N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(15mL)中的中间体I50(1.79g，5.86mmol)在75℃下搅拌72h。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将混合物剧烈搅拌1h。将各层分离并将水相用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机相干燥(MgSO4)，过滤并蒸发至干燥，以得到呈黄色油状物的中间体I51(2.07g，98％)。
3.2.1.7.中间体I62和I63的合成
Figure BDA0003377545370001141
中间体I52
叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001142
在-65℃下在N2气氛下，向乙酸乙酯(20.9g，237mmol)在THF(120mL)中的溶液中添加NaHMDS(1M在THF中，474mL，474mmol)。在-65℃下，将5-叔丁基3-乙基6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(28.0g，94.8mmol)在THF(200mL)中的溶液经1h逐滴添加至混合物中。将反应混合物在45℃下搅拌10h并用HCl(1N，1.5L)淬灭。将水相用EtOAc(1.5L)萃取。将有机相干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从10:1至1:1)纯化以给出呈黄色固体的中间体I52(28.4g，89％)。
中间体I53和I54
二-叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-2,5(4H)-二甲酸酯和二-叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001151
向中间体I52(18.0g，53.4mmol)、Et3N(16.2g，160mmol)和DMAP(652mg，5.34mmol)在DCM(200mL)中的混合物中添加Boc2O(11.6g，53.4mmol)。将反应混合物在15℃下搅拌2h并倒入HCl(1N，250mL)中。将混合物用EtOAc(2x200mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从100:0至80:20)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I53和I54的混合物(20g，43％)。
中间体I55和I56
二-叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(乙氧基羰基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-2,5(4H)-二甲酸酯和二-叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(乙氧基羰基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001161
向中间体I53和I54(14.0g，32.0mmol)在丙酮(150mL)中的混合物中添加K2CO3(6.64g，48.1mmol)、NaI(960mg，6.41mmol)和2-(溴甲基)烯丙基氧基-叔丁基-二苯基硅烷(15.0g，38.4mmol)。将反应混合物在55℃下搅拌4h并在0℃下倒入HCl(1N，400mL)中。将混合物用EtOAc(3x300mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(500mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从30:1至20:1)纯化，以得到呈黄色油状物的中间体I55和I56的混合物(13.5g，53％)。
中间体I57
叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001162
向中间体I55和I56(13.5g，16.8mmol)在MeOH(50mL)中的混合物中添加KOH(1.89g，33.7mmol)在H2O(10mL)中的溶液。将反应混合物在65℃下搅拌3h并倒入HCl(1N，300mL)中。将混合物用EtOAc(3x200mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，3/1)纯化以给出呈黄色油状物的中间体I57(8.9g，92％)。
中间体I58
叔丁基3-(4-(羟基甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370001171
向中间体I57(14.0g，22.0mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加TBAF(1M在THF中，32.9mL，32.9mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌12h，并倒入H2O(100mL)中。将水相用EtOAc(3x80mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从2:1至1:1)纯化以给出呈白色固体的中间体I58(6.3g，84％)。
中间体I59
叔丁基3-(4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001172
在0℃下在N2气氛下，向中间体I58(6.30g，18.4mmol)和Et3N(5.59g，55.2mmol)在DCM(30mL)中的混合物中添加MsCl(4.73g，41.3mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h并倒入水(60mL)中。将水相用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(60mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩以得到中间体I59，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I60
叔丁基8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001182
-2(7H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001181
在30℃下在N2气氛下，向中间体I59在THF(60mL)中的溶液中添加DBU(7.06g，46.4mmol)。将反应混合物在30℃下搅拌1h并倒入水(50mL)中。将水相用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从10:1至8:1)纯化以得到呈无色油状物的中间体I60(4.2g，61％，经过2个步骤，85％纯度)。
中间体I61
(Z)-叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001183
-2(7H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370001191
在80℃下，将中间体I60(4.20g，11.3mmol)在DMF-DMA(15mL)中的溶液搅拌12h，并在减压下浓缩。将残余物倒入水(30mL)中并且用EtOAc(2x20mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2x20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩以得到中间体I61(4.5g)，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I62和I63
叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001193
-11(12H)-甲酸酯和叔丁基3-氨基-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001194
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001192
向中间体I61(2.4g，粗品)在吡啶(25mL)中的溶液中添加羟胺盐酸盐(2.24g，32.2mmol)。将反应混合物在115℃下搅拌10h并在减压下浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释，并用EtOAc(3x20mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从10:1至1:1)纯化以得到呈白色固体的中间体I62(1.4g，93％纯度)和呈黄色固体的中间体I63(0.9g)。
3.2.1.9.中间体I64的合成
叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001203
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001201
在-10℃下，向中间体I62(480mg，1.40mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加9-BBN(0.5M在THF中，56.1mL，23mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌2h，并且在-30℃下添加NaOH(561mg，14.0mmol)在H2O(5mL)中的溶液，随后添加H2O2(30％纯度，3.18g，28.0mmol)。将反应混合物在15℃下搅拌16h。将反应用NaHSO3(饱和水溶液，50mL)淬灭，并用EtOAc(3x80mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从100:0至50:50)纯化以得到呈白色固体的中间体I64(460mg，88％)。
3.2.1.10.中间体I67的合成
Figure BDA0003377545370001202
中间体I65
叔丁基5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001204
-11-(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001211
在0℃下，向中间体I62(300mg，0.88mmol)在THF(20mL)和H2O(10mL)中的溶液中添加NMO(154mg，1.31mmol)和K2OsO4·2H2O(32.3mg，87.6μmol)。将反应混合物在室温下搅拌16h。添加另外量的NMO(154mg)和K2OsO4·2H2O(50mg)，并且将反应混合物在室温再搅拌16h。将混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(3x20mL)萃取。将合并的有机萃取物用NaHSO3(饱和水溶液，3x20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩以得到中间体I65(334mg)，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I66
叔丁基5-氧代-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001213
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001212
向中间体I65在THF(3.3mL)和H2O(3.3mL)中的溶液中添加NaIO4(563mg，2.63mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h并用水(50mL)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(2x40mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩以得到中间体I66(320mg)，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I67
叔丁基5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001223
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001221
在0℃下，向中间体I66在EtOH(3mL)中的溶液中添加NaBH4(65.9mg，1.74mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并用NH4Cl(饱和水溶液，20mL)淬灭。将各层分离并将水相用EtOAc(3x40mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩以得到中间体I67(230mg)，将其照原样用于下一个步骤中。
3.2.1.11.中间体I68的合成
叔丁基5-亚甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001224
-11(2H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001222
向中间体I61(1.4g)在EtOH(20mL)中的溶液中添加肼(376mg，7.37mmol)。将反应混合物在10℃下搅拌12h并倒入HCl(1N，40mL)中。将混合物搅拌1min，并且将水相用EtAOc(2x40mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(2x30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，石油醚/EtOAc，梯度从5:1至1:1)纯化以给出呈白色固体的中间体I68(1.02g)。
3.2.1.11.中间体I74的合成
Figure BDA0003377545370001231
中间体I69
5-叔丁基3-乙基2-(5-乙氧基-5-氧代戊基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001232
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向Cs2CO3(16.2g，49.6mmol)在DMF(120mL)中的悬浮液中依次添加5-叔丁基3-乙基2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5-二甲酸酯(12.2g，41.3mmol)和乙基5-溴戊酸酯(7.19mL，45.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5天，倒入水(150mL)中，并且用EtOAc(2x150mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(3x150mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且浓缩至干燥以给出呈黄色油状物的中间体I69，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I70
2-叔丁基10-乙基11-氧代-1,3,4,7,8,9,10,11-八氢-2H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001233
-2,10-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001241
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向t-BuOK(9.26g，82.6mmol)在THF(190mL)中的溶液中逐滴添加中间体I69在THF(190mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1h。将反应用水(200mL)淬灭并用HCl(1N，水溶液，200mL)酸化。将水相用EtOAc(2x200mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从70:30至30:70)纯化，以给出呈无色胶状物的中间体I70(9.07g，55％，经过2个步骤)。
中间体I71
乙基11-氧代-1,3,4,7,8,9,10,11-八氢-2H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001243
-10-甲酸酯盐酸盐
Figure BDA0003377545370001242
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
将HCl(4N在1,4-二噁烷中，57.1mL，228mmol)添加至中间体I70(9.07g，22.8mmol)在DCM(50mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3天，并用Et2O(200mL)稀释。通过过滤收集固体，将其用Et2O(100mL)洗涤并在真空下干燥以给出呈白色固体的中间体I71，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I72
乙基2-(3,4-二氯苯甲酰基)-11-氧代-1,3,4,7,8,9,10,11-八氢-2H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001244
-10-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001251
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I71在DCM(100mL)中的悬浮液中添加吡啶(5.47mL，67.6mmol)，随后添加3,4-二氯苯甲酰氯(5.19g，24.8mmol)在DCM(50mL)中的溶液。将反应混合物温热至室温并搅拌18h。添加另外的量的吡啶(1.82mL，22.5mmol)和3,4-二氯苯甲酰氯(2.36g，11.3mmol)。将反应混合物在室温下再搅拌24h。再次添加吡啶(1.82mL，22.5mmol)和3,4-二氯苯甲酰氯(2.36g，11.3mmol)，并且将反应混合物进一步搅拌5h。将混合物用DCM(150mL)稀释，并用HCl(1M，水溶液，2x150mL)和盐水(150mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤并且在减压下进行浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从99:1至95:5)纯化。将残余物吸收在DCM和MeOH(9/1；150mL)的混合物中，并用NaHCO3(饱和水溶液，150mL)洗涤。将各层分离并将水相用DCM和MeOH(9:1；100mL)的混合物萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩，以给出呈白色泡沫的中间体I72(9.00g，89％，经过2个步骤)。
中间体I73
2-(3,4-二氯苯甲酰基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氢-11H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001253
-11-酮
Figure BDA0003377545370001252
向中间体I72(1.00g，2.22mmol)在DMSO(18mL)中的溶液中添加H2O(2mL)和LiCl(122mg，2.89mmol)。将反应混合物在150℃下搅拌5h。将混合物冷却至室温并倒入水(500mL)中。将混合物搅拌1h。通过过滤收集沉淀物，并将其在50℃下在真空下干燥过夜，以得到呈白色固体的中间体I73(709mg，84％)。
中间体I74
10-溴-2-(3,4-二氯苯甲酰基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氢-11H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001262
-11-酮
Figure BDA0003377545370001261
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在室温下，向CuBr2(4.03g，18.0mmol)在CHCl3(15mL)的悬浮液中添加中间体I73(3.79g，10.0mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌18h。添加另外量的CuBr2(1.34g，6.01mmol)，并且将反应混合物再搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩，并且将粗混合物通过快速柱色谱法(硅胶，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至97:3)纯化，以给出中间体I74两个级分：级分A(225mg，4％，75％纯度)和含有杂质的级分B。将级分B通过快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从75:25至0:100)纯化，以给出呈绿色泡沫的中间体I74(2.07g，40％，90％纯度)。
3.2.2.化合物的合成
3.2.2.1.异噁唑衍生化合物的合成
3.2.2.1.1.化合物11的合成
Figure BDA0003377545370001271
中间体I75
叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001274
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001272
在100℃下，将中间体I51(100mg，0.28mmol)和N-羟胺盐酸盐(116mg，1.66mmol)在吡啶(5mL)中的混合物搅拌过夜。将挥发物在减压下除去，并将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化以得到中间体I75(40mg，44％)。
中间体I76
5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001275
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001273
将HCl(6M在i-PrOH中，0.75mL，4.5mmol)添加至中间体I75(40mg，0.12mmol)在i-PrOH(5mL)中的溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌过夜，并且在80℃下再搅拌2h。将挥发物在减压下除去以得到中间体I76，将其按照原样用于下一步骤中。
化合物11
(3,4-二氯苯基)(5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001282
-11(12H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001281
在室温下，将中间体I76、3,4-二氯苯甲酰氯(27.5mg，0.13mmol)和Na2CO3(25.7mg，0.24mmol)在DCM(5mL)和水(5mL)中的混合物剧烈搅拌1h。将有机层加载在二氧化硅筒上并通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷/EtOAc)纯化，以得到化合物11(33.8mg，69％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 8.72(br s,1H),7.65-7.69(m,2H),7.42(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),4.71(s,2H),4.43-4.49(m,2H),3.68-3.79(m,2H),2.88-2.92(m,2H),2.73(t,J＝5.9Hz,2H),2.07-2.14(m,2H)；LCMS(方法A)：Rt＝1.02min，C19H16Cl2N4O2的m/z计算值402，m/z实测值403[M+H]+。
3.2.2.1.2.化合物12的合成
Figure BDA0003377545370001291
中间体I77
叔丁基2-(己-4-炔-1-基)-3-(羟基甲基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001292
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I40(885mg，2.36mmol)在THF(20mL)中的溶液中添加LiAlH4(179mg，4.71mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1h。将反应用EtOAc(100mL)和H2O(10mL)淬灭。添加罗谢尔盐的溶液(1M，水溶液，100mL)，并且将混合物搅拌30min。将各层分离并将水层用EtOAc(100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至80:20)纯化，以给出呈浅黄色油状物的中间体I77(614mg，78％)。
中间体I78
叔丁基3-甲酰基-2-(己-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001301
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I77(614mg，1.84mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加PCC(595mg，2.76mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并且将混合物浓缩至干燥。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至60:40)纯化，以得到呈无色油状物的中间体I78(512mg，84％)。
中间体I79
叔丁基2-(己-4-炔-1-基)-3-[(羟基亚氨基)甲基]-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001302
向中间体I78(512mg，1.55mmol)和NaOAc(380mg，4.64mmol)在THF(15mL)、MeOH(15mL)和H2O(30mL)中的溶液中添加N-羟胺盐酸盐(215mg，3.09mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物用H2O(20mL)稀释，并且将水相用DCM(3x60mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x60mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且浓缩至干燥，以得到中间体I79，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I80
叔丁基3-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001313
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001311
在0℃下，向中间体I79在DCM(31.6mL)中的溶液中添加次氯酸钠(14％在H2O中，1.63mL，3.75mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h并用MeOH(16mL)、水(50mL)和DCM(130mL)稀释。将混合物用K2CO3(饱和水溶液，50mL)洗涤。将各层分离并将水相用DCM(2x50mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从80:20至20:80)纯化，以给出中间体I80(199mg，36％，经过2个步骤，93％纯度)。
中间体I81
3-甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001314
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001312
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
向中间体I80(158mg，0.46mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加HCl(4N在1,4-二噁烷中，2.29mL，9.18mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并浓缩至干燥以得到中间体I81，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物12
(3,4-二氯苯基)(3-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001315
-11(12H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001321
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向中间体I81在DCM(5mL)中的溶液中添加Et3N(192μL，1.38mmol)和3,4-二氯苯甲酰氯(125mg，0.60mmol)在DCM(5mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌2h。将反应混合物用DCM(30mL)稀释，用HCl(1N，水溶液，2x20mL)、NaHCO3(饱和水溶液，2x20mL)和盐水(20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至97:3)纯化。通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100/0至97/3)进行第二次纯化。将残余物用DCM(20mL)稀释。将溶液用NaHCO3(饱和水溶液，2x10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩至干燥。将残余物再次通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至97:3)纯化。经由反相柱色谱法进行另一次纯化。将产物与EtOH共蒸发，并在50℃下干燥3天以得到呈白色固体的化合物12(95mg，50％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.70(d,J＝8.0Hz,1H),7.68(d,J＝2.0Hz,1H),7.43(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.70(s,2H),4.48-4.41(m,2H),3.79-3.62(m,2H),2.80-2.70(m,4H),2.37(s,3H),2.16-2.05(m,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝10.5min，C20H18Cl2N4O2的m/z计算值416，m/z实测值417[M+H]+。
3.2.2.1.3.化合物13的合成
Figure BDA0003377545370001331
以与针对化合物12所述类似的方式制备化合物13(98mg)。
获得呈白色固体的化合物13，(3,4-二氯苯基)(3-乙基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001332
-11(12H)-基)甲酮。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.72-7.65(m,2H),7.46-7.39(m,1H),4.71(s,2H),4.48-4.41(m,2H),3.81-3.66(m,2H),2.82-2.70(m,6H),2.16-2.05(m,2H),1.25(t,J＝7.5Hz,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝11.0min，C21H20Cl2N4O2的m/z计算值430，m/z实测值431[M+H]+。
3.2.2.1.4.化合物14的合成
Figure BDA0003377545370001341
以与针对化合物12所述类似的方式制备化合物14(22mg)。
获得呈白色固体的化合物14，(3,4-二氯苯基)[(10R)-10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001342
-11(12H)-基]甲酮。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 8.75(s,1H),7.71(d,J＝8.2Hz,1H),7.68(d,J＝1.9Hz,1H),7.43(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H),5.20-5.05(m,1H),4.72-4.55(m,1H),4.52-4.46(m,2H),4.28(d,J＝17.1Hz,1H),2.95-2.90(m,2H),2.60-2.54(m,2H),2.20-2.06(m,2H),1.20(d,J＝6.9Hz,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝10.4min，C20H18Cl2N4O2的m/z计算值416，m/z实测值417[M+H]+。
3.2.2.1.5.化合物15的合成
Figure BDA0003377545370001351
以与针对化合物12所述类似的方式制备化合物15(60mg)。
获得呈白色固体的化合物15，(3,4-二氯苯基)[(10R)-3,10-二甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001352
-11(12H)-基]甲酮。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.70(d,J＝8.0Hz,1H),7.67(d,J＝1.8Hz,1H),7.42(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),5.19-5.01(m,1H),4.72-4.56(m,1H),4.47(t,J＝5.3Hz,2H),4.26(d,J＝17.0Hz,1H),2.95-2.92(m,1H),2.79(t,J＝6.1Hz,2H),2.56(d,J＝17.0Hz,1H),2.38(s,3H),2.22-2.05(m,2H),1.20(d,J＝6.9Hz,3H)；LCMS(方法E)：Rt＝10.8min，C21H20Cl2N4O2的m/z计算值430，m/z实测值431[M+H]+。
3.2.2.1.6.化合物16的合成
Figure BDA0003377545370001361
中间体I97
叔丁基3-(羟基甲基)-2-(戊-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001362
以与针对中间体I77所述类似的方式制备中间体I97(1.07g，82％，89％纯度)。
中间体I98
叔丁基3-甲酰基-2-(戊-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001363
以与针对中间体I78所述类似的方式制备中间体I98(757mg，72％，90％纯度)。
中间体I99
叔丁基3-甲酰基-2-(6,6,6-三氟己-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001371
将反应在无水条件下进行。
在室温下，将CuI(567mg，2.98mmol)、K2CO3(823mg，5.96mmol)和TMEDA(446μL，2.98mmol)在DMF(12mL)中的混合物剧烈搅拌20min。添加三甲基(三氟甲基)硅烷(587μL，3.97mmol)，并且将混合物在室温下搅拌15min。将混合物冷却至0℃，并且在0℃下添加中间体I98(630mg，1.99mmol)和三甲基(三氟甲基)硅烷(587μL，3.97mmol)在DMF(12mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌30min，并且在室温下搅拌18h。将混合物用水(50mL)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(3x40mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(3x30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：环己烷/EtOAc，梯度从100:0至60:40)纯化，以给出呈无色油状物的中间体I99(188mg，24％)。
中间体I100
叔丁基3-[(羟基亚氨基)甲基]-2-(6,6,6-三氟己-4-炔-1-基)-2,4,6,7-四氢-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001381
以与针对中间体I79所述类似的方式制备中间体I100(202mg)。
中间体I101
叔丁基3-(三氟甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001384
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001382
以与针对中间体I80所述类似的方式制备中间体I101(78mg，39％，经过2个步骤，95％纯度)。
中间体I102
3-(三氟甲基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001385
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001383
以与针对中间体I81所述类似的方式制备中间体I102。
化合物16
(3,4-二氯苯基)[3-(三氟甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001386
-11(12H)-基]甲酮
Figure BDA0003377545370001391
以与针对化合物12所述类似的方式制备化合物16(76mg，87％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.69(d,J＝2.0Hz,1H),7.45(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.77-4.73(m,2H),4.55-4.50(m,2H),3.80-3.72(m,2H),3.07-3.02(m,2H),2.77(t,J＝6.0Hz,2H),2.23-2.17(m,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝11.5min，C20H15Cl2F3N4O2的m/z计算值470，m/z实测值471[M+H]+。
3.2.2.1.8.化合物17的合成
Figure BDA0003377545370001392
中间体I103
5-亚甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001394
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001393
在室温下，将中间体I62(1.02g，2.98mmol)在HCl(4N在1,4-二噁烷中，8.0mL，32.0mmol)中的混合物搅拌3h，并且在减压下浓缩以得到中间体I103，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物17
(3,4-二氯苯基)(5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001403
-11(12H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001401
向中间体I103在DCM(6mL)和水(6mL)中的溶液中添加3,4-二氯苯甲酰氯(749mg，3.58mmol)和Na2CO3(631mg，5.96mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将各层分离并将水相用DCM萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并吸附到二氧化硅上。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：50％-80％庚烷/EtOAc)纯化，以得到呈白色泡沫状固体的化合物17(916mg，74％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.40-8.21(m,1H),7.58(d,J＝2.0Hz,1H),7.56-7.44(m,1H),7.30(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),5.36(s,1H),5.28(s,1H),5.00-4.89(m,2H),4.68(s,1H),4.04(s,1H),3.76-3.53(m,3H),3.00-2.74(m,3H)；LCMS(方法C)：Rt＝3.03min，C20H16Cl2N4O2的m/z计算值414，m/z实测值415[M+H]+。
3.2.2.1.9.化合物18的合成
(3,4-二氯苯基)[5-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001404
-11(12H)-基]甲酮
Figure BDA0003377545370001402
在室温下，将化合物17(250mg，0.60mmol)、K2OsO4·2H2O(22.2mg，60.2μmol)和NMO(106mg，0.90mmol)在THF(1.4mL)和水(0.7mL)中的混合物搅拌16h。将混合物用H2O(15mL)稀释，并用EtOAc(3x15mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。
将粗混合物(50mg)的级分通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：0-10％MeOH/EtOAc)纯化以给出呈白色固体的化合物18(21mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(d,J＝33.7Hz,1H),7.87-7.67(m,2H),7.48(dd,J＝8.2,1.9Hz,1H),5.10(s,1H),5.00-4.89(m,1H),4.78(s,1H),4.67-4.22(m,3H),3.93(s,1H),3.58(s,1H),3.40(overlaps with solvent),3.00-2.62(m,4H)；LCMS(方法C)：Rt＝2.27min，C20H18Cl2N4O4的m/z计算值448，m/z实测值449[M+H]+。
3.2.2.1.10.化合物19的合成
Figure BDA0003377545370001411
中间体I104
5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001413
-5-醇·TFA
Figure BDA0003377545370001412
向中间体I67(120mg)在DCM(5mL)中的混合物中添加TFA(1.54g，13.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌30min，并在减压下浓缩以得到中间体I104，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物19
(3,4-二氯苯基)(5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001414
-11(12H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001421
以与针对化合物23所述类似的方式制备化合物19。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.00-8.75(m,1H),7.77-7.70(m,2H),7.47(br d,J＝8.3Hz,1H),5.50-5.30(m,1H),4.78(br s,1H),4.66-4.39(m,3H),4.25(br s,1H),4.03-3.83(m,1H),3.57(br s,1H),3.05-2.89(m,2H),2.83-2.62(m,2H)。
3.2.2.1.11.化合物20的合成
(3,4-二氯苯基)(5-甲氧基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001423
-11(12H)-基)甲酮。
Figure BDA0003377545370001422
在0℃下在N2气氛下，向化合物19(12.0mg，28.6μmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加NaH(60％分散体在矿物油中，2.29mg，57.2μmol)。将反应混合物在此温度下搅拌30min，并且添加MeI(8.13mg，57.2μmol)。在N2气氛下，将反应混合物在10℃下搅拌16h并倒入水(10mL)中。将水相用EtOAc(2x5mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩。将粗混合物与另一级分(10mg规模)合并，并且通过反相HPLC(Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的Synergi C18(10μm，150x25mm)，或Boston Green ODS C18(5μm，150x30mm)，并在流动相为在水中的经10min 5％-99％MeCN(含0.225％FA)，并且然后在100％MeCN中保持2min，流速为25mL/min)纯化，以给出呈白色固体的化合物20(9mg，69％，95％纯度)。
MS(ESI)：C20H18Cl2N4O3的m/z计算值432.1；m/z实测值433.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.37-8.27(m,1H),7.60(s,1H),7.51(d,J＝9.6Hz,1H),7.34-7.32(m,1H),4.79-4.70(m,2H),4.51-4.47(m,1H),3.96-3.92(m,2H),3.78-3.57(m,1H),3.41(s,3H),3.22-3.16(m,1H),3.12-2.65(m,4H)。
3.2.2.1.12.化合物21的合成
(3,4-二氯苯基)(5-氟-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001432
-11(12H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001431
在-78℃下，向化合物19(42.8mg，0.10mmol)在DCM(2.1mL)中的溶液中添加DAST(18.8μL，0.15mmol)。将反应混合物温热至0℃并搅拌1h。将反应用NaHCO3(饱和水溶液)淬灭。将各层分离并将水相用DCM萃取(3次)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过制备型TLC(80％EtOAc/庚烷)纯化，以得到呈白色固体的化合物21(7.5mg，17％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 8.65(d,J＝34.4Hz,1H),7.78-7.59(m,2H),7.43(s,1H),5.47-5.20(m,1H),4.90(与水峰重叠),4.80-4.49(m,2H),4.23-3.90(m,1H),3.71(s,1H),3.30(与溶剂峰重叠),2.94-2.77(m,2H)；LCMS(方法D)：Rt＝3.07min，C19H15Cl2FN4O2的m/z计算值420，m/z实测值421[M+H]+。
3.2.2.1.13.化合物22的合成
Figure BDA0003377545370001441
中间体I105
11-叔丁基5-甲基5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001443
-5,11(12H)-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001442
向中间体I65(375mg，1.00mmol)在MeCN(3.5mL)中的溶液中添加TPAP(35.0mg，0.10mmol)和NMO(1.17g，9.96mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加另外0.1当量的TPAP(35.0mg，0.10mmol)，并且继续搅拌2h。将碘甲烷(620μL，9.96mmol)和K2CO3(275mg，1.99mmol)添加至混合物中。将反应混合物在70℃下搅拌5h，并用EtOAc和HCl稀释。将各层分离并将水相用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：60％-100％EtOAc/庚烷)纯化，以得到呈固体的中间体I105(89mg，22％)。
中间体I106
叔丁基5-羟基-5-(甲基氨基甲酰基)-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001454
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001451
将中间体I105(89.0mg，0.22mmol)溶解于甲胺(2M在THF中，2.20mL，4.40mmol)的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌24h。将混合物在减压下浓缩以得到中间体I106，将其按照原样用于下一步骤中。
中间体I107
5-羟基-N-甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001455
-5-甲酰胺盐酸盐
Figure BDA0003377545370001452
向中间体I106在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加HCl(4N在1,4-二噁烷中，1mL，4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并在减压下浓缩以得到中间体I107，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物22
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-5-羟基-N-甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001456
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001453
向中间体I107在DCM(1mL)和水(1mL)中的溶液中添加3,4-二氯苯甲酰氯(69.1mg，0.33mmol)和Na2CO3(46.6mg，0.44mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将挥发物在减压下除去并将水相用EtOAc萃取(两次)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：0-10％MeOH/EtOAc)纯化。将残余物用EtOAc和MeOH洗涤以给出化合物22(44mg，42％，经过3个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.99-8.76(m,1H),8.09(s,1H),7.85-7.67(m,2H),7.48(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),6.10(d,J＝17.4Hz,1H),4.89-4.36(m,4H),3.93(s,1H),3.59(s,1H),3.33-3.18(m,1H),3.13-2.89(m,1H),2.85-2.69(m,2H),2.65(s,3H)；LCMS(方法C)：Rt＝2.70min，C21H19Cl2N5O4的m/z计算值475，m/z实测值476[M+H]+。
3.2.2.1.14.化合物23的合成
Figure BDA0003377545370001461
中间体I108
5-亚甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001463
-3-胺盐酸盐
Figure BDA0003377545370001462
向中间体I63(300mg，0.84mmol)的溶液中添加HCl(4M在1,4-二噁烷中，6mL，24.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并在减压下浓缩以得到中间体I108，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物23
(3-氨基-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001473
-11(12H)-基)(3,4-二氯苯基)甲酮
Figure BDA0003377545370001471
向中间体I108和3,4-二氯苯甲酰氯(158mg，0.76mmol)在DCM(6.17mL)中的混合物中添加Et3N(1.00mL，7.19mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h并在减压下浓缩。将粗混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：70％-100％EtOAc/庚烷)纯化，以得到化合物23(157mg，51％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,丙酮-d6)δppm 7.61-7.78(m,2H),7.39-7.56(m,1H),6.22(m,2H),5.18-5.34(m,2H),4.77-5.00(m,3H),4.56-4.70(m,1H),3.92-4.07(m,1H),3.63-3.78(m,1H),3.36-3.52(m,2H),2.78(m,2H)；LCMS(方法C)：Rt＝2.85min，C20H17Cl2N5O4的m/z计算值429，m/z实测值430[M+H]+。
3.2.2.1.15.化合物24的合成
[3-氨基-5-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001474
-11(12H)-基](3,4-二氯苯基)甲酮
Figure BDA0003377545370001472
在室温下，将化合物23(56.0mg，0.13mmol)、K2OsO4·2H2O(4.80mg，13.0μmol)和NMO(22.9mg，0.20mmol)在THF(0.3mL)和水(0.15mL)中的混合物搅拌3h。将混合物用H2O(15mL)稀释，并用EtOAc(3x15mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：0-10％MeOH/EtOAc)纯化。将残余物溶解在MeCN和水中并冻干，以获得呈白色固体的化合物24(24.8mg，41％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.82-7.69(m,2H),7.53-7.42(m,1H),6.67(d,J＝26.7Hz,2H),5.04-4.94(m,1H),4.85-4.19(m,5H),3.91(s,1H),3.55(s,1H),2.86-2.54(m,5H,与溶剂重叠)；LCMS(方法C)：Rt＝2.31min，C20H19Cl2N5O4的m/z计算值463，m/z实测值464[M+H]+。
3.2.2.1.16.化合物25的合成
(3,4-二氯苯基)[3-(甲基氨基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001482
-11(12H)-基]甲酮
Figure BDA0003377545370001481
向化合物23(30.0mg，69.7μmol)和多聚甲醛(30.0mg)在MeOH(1mL)中的混合物中添加NaOMe(15.1mg，0.28mmol)。将反应混合物在回流下搅拌3h，然后冷却至0℃。添加NaBH4(10.5mg，0.28mmol)，并且将反应混合物在回流下搅拌过夜。将溶剂蒸发，添加EtOH并且在60℃下继续搅拌3h。将混合物在冷却至室温，并且将反应用NH4Cl(饱和水溶液)淬灭。将混合物用水和EtOAc稀释。将水相用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将残余物溶解于DMSO中，加载在反相柱上，并通过HPLC(流动相梯度：10％-100％MeCN/水与0.1％TFA)纯化以得到化合物25(7mg)。
LCMS(方法C)：Rt＝2.91min，C21H19Cl2N5O2的m/z计算值444.3，m/z实测值444.1[M+H]+。
3.2.2.1.17.化合物26的合成
(3,4-二氯苯基)[3-(二甲基氨基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001493
-11(12H)-基]甲酮
Figure BDA0003377545370001491
在0℃下，向化合物23(25.0mg，58.1μmol)在THF(1.05mL)中的溶液中添加NaH(95％纯度，2.20mg，87.2μmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30min，并且添加碘甲烷(4.00μL，63.9μmol)。将反应混合物加热至室温并且搅拌过夜。添加另外的量的NaH(232μmol)和碘甲烷(0.58mmol)，并且将反应混合物在室温下再搅拌5h。将反应用NH4Cl(饱和水溶液)淬灭，并用水稀释。将各层分离并将水相用EtOAc萃取(两次)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过制备型TLC(流动相：80％EtOAc/庚烷)纯化，以得到呈白色固体的化合物26(13mg，49％)。
1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 7.57-7.74(m,2H),7.33-7.46(m,1H),5.19-5.33(m,2H),4.79-4.86(m,2H),4.52-4.70(m,2H),3.96-4.12(m,1H),3.53-3.76(m,3H),2.99-3.17(m,6H),2.73-2.92(m,2H)；LCMS(方法C)：Rt＝3.49min，C22H21Cl2N5O2的m/z计算值457，m/z实测值458[M+H]+。
3.2.2.1.18.化合物27的合成
Figure BDA0003377545370001492
中间体I109
(5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001503
-5-基)甲醇盐酸盐
Figure BDA0003377545370001501
将中间体I64(2.00g，5.55mmol)和HCl(4M在1,4-二噁烷中，20mL，80.0mmol)的混合物在室温下搅拌4h。将混合物在减压下浓缩以得到中间体I109，将其按照原样用于下一步骤中。
化合物27
(3,4-二氯苯基)[5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001504
-11(12H)-基]甲酮
Figure BDA0003377545370001502
向中间体I109在DCM(20mL)中的悬浮液中添加3,4-二氯苯甲酰氯(1.28g，6.10mmol)和Et3N(7.71mL，55.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5h并在减压下浓缩。将粗混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：40％-100％EtOAc/庚烷)纯化，以得到化合物27(1.57g，65％，经过2个步骤)。
LCMS(方法C)：Rt＝2.39min，C20H18Cl2N4O3的m/z计算值432，m/z实测值433[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.90-8.82(m,1H),7.76-7.73(m,2H),7.48(dd,J＝1.51,8.16Hz,1H),4.95(br s,1H),4.79(s,1H),4.65-4.40(m,2H),4.35-4.10(m,1H),3.93(brs,1H),3.59(br s,1H),3.45-3.30(m,2H),3.05-2.90(m,1H),2.74-2.54(m,3H),2.14(brs,1H)。
3.2.2.1.19.化合物28的合成
Figure BDA0003377545370001511
中间体I110
11-(叔丁氧基羰基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001513
-5-甲酸
Figure BDA0003377545370001512
将中间体I64(750mg，2.08mmol)、TPAP(73.1mg，0.21mmol)和NMO(2.44g，20.8mmol)在MeCN(15mL)中的混合物在室温下搅拌72h。将反应混合物用EtOAc、水和HCl(1N，水溶液)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并且在减压下浓缩以得到中间体I110，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I111
11-叔丁基5-甲基5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001514
-5,11(12H)-二甲酸酯
Figure BDA0003377545370001521
向粗中间体I110和K2CO3(406mg，2.94mmol)在丙酮(11mL)中的混合物中添加MeI(457μL，7.35mmol)。将反应混合物在回流下搅拌5h。将混合物过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将粗混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：40％-80％EtOAc/庚烷)纯化，以得到中间体I111(320mg，40％，经过2个步骤)。
中间体I112
叔丁基5-氨基甲酰基-5,6,9,10-四氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001523
-11(12H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001522
向中间体I111(130mg，0.34mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中添加NH3(20％在H2O中，1.00mL，14.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在80℃下搅拌4h。将混合物在减压下浓缩。将混合物与另一级分(0.21mmol)合并。将残余物溶解于EtOAc中，并且将溶液用NaHCO3(水溶液)洗涤(3次)。将有机相干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩，以得到中间体I112。
中间体I113
5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001524
-5-甲酰胺盐酸盐
Figure BDA0003377545370001531
在室温下，将中间体I112和HCl(4N在1,4-二噁烷中，1.5mL，6.00mmol)的混合物搅拌1.5h，并且将混合物在减压下浓缩以得到中间体I113，将其照原样用于下一个步骤中。
化合物28
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001533
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001532
向中间体I113和3,4-二氯苯甲酰氯(35.3mg，0.17mmol)在DCM(2.0mL)中的悬浮液中添加Et3N(0.11mL，0.77mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h，过滤，并在减压下浓缩。将粗混合物从EtOH中通过重结晶纯化，以得到化合物28(30.7mg，45％，经过3个步骤)。
LCMS(方法C)：Rt＝2.15min，C20H17Cl2N5O3的m/z计算值445，m/z实测值446[M+H]+；1H NMR(DMSO-d6,75℃)δppm 8.81(s,1H),7.66-7.75(m,2H),7.39-7.50(m,1H),4.58-4.79(m,3H),4.44-4.55(m,1H),3.63-3.85(m,2H),2.92-3.23(m,与溶剂峰重叠),2.70-2.79(m,2H)。
3.2.2.1.20.化合物29的合成
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001534
-5-甲酸
Figure BDA0003377545370001541
向化合物27(200mg)在MeCN(10mL)中的溶液中添加TPAP(40.6mg，115μmol)和NMO(270mg，2.31μmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h并用HCl(1N，25mL)淬灭。将混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过反相HPLC(Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的SynergiC18(10μm，150x25mm)或Boston Green ODS C18(5μm，150x30mm)，并在流动相为在水中的经10min 5％-99％MeCN(含0.225％FA)，并且然后在100％MeCN中保持2min，流速为25mL/min)纯化，以给出呈白色固体的化合物29(12.5mg)。
MS(ESI)：C20H16Cl2N4O4的m/z计算值446.1；m/z实测值447.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.10-8.74(m,1H),7.96-7.66(m,2H),7.47(br d,J＝8.0Hz,1H),5.06-4.41(m,4H),3.91(br s,1H),3.57(br s,1H),3.25-2.94(m,3H),2.73(br s,2H)。
3.2.2.1.21.化合物30和31的合成
(5*R)-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N-甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001542
-5-甲酰胺和(5*S)-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N-甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001543
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001551
向化合物29(268mg，0.60mmol)在DCM(7.66mL)中的悬浮液中添加DMF(76.6μL)和乙二酰氯(2M在DCM中，899μL，1.80mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。向该橙色溶液中添加甲胺(2M在THF中，1.50mL，3.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并在减压下浓缩。将残余物溶解于EtOAc中，并且将有机层用NaHCO3(水溶液)、NaOH(1M，水溶液)和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物与另一级分(0.15mmol)合并，并通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：0-10％MeOH/EtOAc)纯化。将对映异构体经由Prep SFC(固定相：Chiralcel Diacel OJ 20x250mm，流动相：CO2，EtOH+0.4％i-PrNH2)分离，以得到化合物30(52mg，15％)和化合物31(56mg，16％)。
化合物30：1H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 8.77(s,1H),7.64-7.77(m,3H),7.42(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),4.65-4.76(m,2H),4.57-4.64(m,1H),4.41-4.51(m,1H),3.82(s,1H),3.67-3.78(m,2H),3.02-3.14(m,2H),2.70-2.77(m,2H),2.61(d,J＝4.6Hz,3H)；LCMS(方法B)：Rt＝1.67min，C21H19Cl2N5O3的m/z计算值459，m/z实测值460[M+H]+。
化合物31：1H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 8.77(s,1H),7.69-7.75(m,2H),7.64-7.70(m,1H),7.42(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.65-4.76(m,2H),4.58-4.64(m,1H),4.42-4.50(m,1H),3.82(s,1H),3.68-3.79(m,2H),3.07-3.14(m,1H),2.98-3.06(m,1H),2.71-2.77(m,2H),2.61(d,J＝4.6Hz,3H)；LCMS(方法B)：Rt＝1.68min，C21H19Cl2N5O3的m/z计算值459，m/z实测值460[M+H]+。
3.2.2.1.22.化合物32的合成
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N-乙基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001563
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001561
向化合物29(35.0mg，78.3μmol)在DCM(1mL)中的悬浮液中添加DMF(10μL，0.13mmol)和乙二酰氯(2M在DCM中，78.3μL，157μmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。向该橙色溶液中添加乙胺(2M在THF中，0.20mL，0.40mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h并在减压下浓缩。将残余物用MeOH洗涤以得到呈白色固体的化合物32(23.1mg，62％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(d,J＝33.9Hz,1H),8.13(s,1H),7.81-7.66(m,2H),7.47(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),4.78(s,1H),4.67-4.38(m,3H),3.92(s,1H),3.58(s,1H),3.18-2.57(m,7H),1.00(t,J＝6.8Hz,3H)；LCMS(方法C)：Rt＝2.62min，C22H21Cl2N5O3的m/z计算值473，m/z实测值474[M+H]+。
3.2.2.1.23.化合物33的合成
N-环丙基-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001564
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001562
以与针对化合物32所述类似的方式制备化合物33。然而，在搅拌过程中，产物从溶液中沉淀出。通过过滤收集固体，并且将其用MeOH洗涤以得到呈白色固体的化合物33(31mg，81％)。
LCMS(方法C)：Rt＝2.62min，C23H21Cl2N5O3的m/z计算值485，m/z实测值486[M+H]+。
3.2.2.1.24.化合物34的合成
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N-(2-羟基乙基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001573
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001571
向化合物29(60.0mg，0.13mmol)在DCM(1.00mL)中的悬浮液中添加DMF(1.04μL，13.4μmol)和乙二酰氯(2M在DCM中，0.29mL，0.54mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。添加乙醇胺(40.5μL，0.67mmol)，并且将反应混合物再搅拌2h。将混合物用DCM和水稀释。将各层分离并将水相用DCM萃取(3次)。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在减压下部分浓缩。将混合物通过制备型TLC(100％EtOAc)纯化，以得到呈淡黄色固体的化合物34(13.2mg，20％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(d,J＝33.9Hz,1H),8.19(s,1H),7.80-7.70(m,2H),7.52-7.42(m,1H),4.83-4.41(m,5H),3.92(s,1H),3.58(s,1H),3.20-2.64(m,8H)；LCMS(方法D)：Rt＝2.38min，C22H21Cl2N5O4的m/z计算值489，m/z实测值490[M+H]+。
3.2.2.1.25.化合物35的合成
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N-(2,2,2-三氟乙基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001574
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001572
根据针对化合物32的合成报道的程序制备化合物35。
将混合物在减压下浓缩并添加MeOH。将混合物吸附到二氧化硅上，并且通过快速柱色谱法(硅胶，流动相梯度：0-10％MeOH/EtOAc)纯化，以得到呈白色固体的化合物35(18.4mg，52％)。
LCMS(方法C)：Rt＝2.88min，C22H18Cl2F3N5O3的m/z计算值527，m/z实测值528[M+H]+；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.77-9.04(m,2H),7.69-7.81(m,2H),7.47(br d,J＝7.3Hz,1H),4.78(br s,1H),4.52-4.66(m,3H),3.84-4.04(m,3H),3.52-3.64(m,1H),2.99-3.15(m,3H),2.68-2.82(m,2H)。
3.2.2.1.26.化合物36的合成
Figure BDA0003377545370001581
中间体I115
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001583
-5-碳酰氯
Figure BDA0003377545370001582
在N2气氛下，向化合物29(58.0mg，0.13mmol)在DCM(0.6mL)和DMF(54μL)中的溶液中添加乙二酰氯(2M在DCM中，0.13mL，0.26mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1.5h以得到中间体I115，并且将混合物分为3批，将其用于随后的反应中。
化合物36
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N,N-二甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001593
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001591
向中间体I115的溶液中添加二甲胺(2M在THF中，0.11mL，0.22mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌30min。将混合物在减压下浓缩，并通过制备型TLC(流动相：2％MeOH/EtOAc)纯化以得到化合物36(18.7mg，91％)。
LCMS(方法D)：Rt＝2.91min，C22H21Cl2N5O3的m/z计算值473，m/z实测值474[M+H]+；1H NMR(400MHz,MeOD)δppm8.52-8.70(m,1H),7.54-7.75(m,2H),7.41(br d,J＝7.8Hz,1H),4.58-4.78(m,2H),4.34-4.52(m,1H),3.93-4.17(m,1H),3.64-3.74(m,1H),3.41-3.57(m,1H),3.00-3.25(m,5H),2.91-2.98(m,3H),2.76-2.88(m,3H)。
3.2.2.1.27.化合物37的合成
11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N-苯基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001594
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001592
向中间体I115(30.0mg，64.4μmol)在DCM(1mL)中的溶液中添加苯胺(29.3μL，0.32mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并在减压下浓缩。将粗混合物通过反相HPLC(吉尔森公司(Gilson)，100mm x 30mm，10％-100％ACN/水，均含有0.1％TFA)纯化。将残余物用DCM和MeOH洗涤以得到呈灰白色固体的化合物37(7.6mg，23％)。
LCMS(方法C)：Rt＝3.30min，C26H21Cl2N5O3的m/z计算值521，m/z实测值522[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm10.13-10.30(m,1H),8.82-9.11(m,1H),7.70-7.82(m,2H),7.41-7.63(m,3H),7.31(t,J＝8.1Hz,2H),7.02-7.09(m,1H),4.51-4.87(m,4H),3.85-3.98(m,1H),3.52-3.66(m,1H),3.05-3.29(m,3H),2.68-2.83(m,2H)。
3.2.2.1.28.化合物38的合成
[11-(3,4-二氯苯甲酰基)-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001603
-5-基](吗啉-4-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001601
向中间体I115的溶液中添加吗啉(7.49mg，86μmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并通过制备型TLC(流动相：2％MeOH/EtOAc)纯化，以得到呈白色固体的化合物38(11.3mg，50％)。
LCMS(方法C)：Rt＝2.72min，C24H23Cl2N5O4的m/z计算值515，m/z实测值516[M+H]+。
3.2.2.1.29.化合物39的合成
Figure BDA0003377545370001602
中间体I116
叔丁基4,5,6,9,10,12-六氢-11H-[1,2]噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001614
-11-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001611
将羟胺盐酸盐(68μL，1.11mmol)添加至中间体I51(100mg，0.28mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中。将反应混合物在50℃下搅拌2h。将挥发物在减压下除去，并将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化以得到中间体I116(58mg，63％)。
中间体I117
5,6,9,10,11,12-六氢-4H-[1,2]噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001615
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001612
将HCl(6M在i-PrOH中，0.75mL，4.50mmol)添加至中间体I116(58mg，0.18mmol)在i-PrOH(5mL)中的溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌1h，并在室温下搅拌过夜。将挥发物在减压下除去以得到中间体I117，将其按照原样用于下一步骤中。
化合物39
(3,4-二氯苯基)(4,5,6,9,10,12-六氢-11H-[1,2]噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001616
-11-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001613
在室温下，将中间体I117、3,4-二氯苯甲酰氯(39.8mg，0.18mmol)和Na2CO3(37.2mg，0.35mmol)在DCM(5mL)和水(5mL)中的混合物剧烈搅拌1h。将有机层加载在二氧化硅筒上并通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化，以得到化合物39(26.9mg，38％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 8.46(s,1H),7.69(d,J＝4.8Hz,1H),7.68(d,J＝1.1Hz,1H),7.44(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),4.80(br s,2H),4.38-4.45(m,2H),3.69-3.79(m,2H),2.81(t,J＝6.1Hz,2H),2.73(t,J＝5.8Hz,2H),2.08-2.17(m,2H)；LCMS(方法A)：Rt＝0.99min，C19H16Cl2N4O2的m/z计算值402，m/z实测值403[M+H]+。
3.2.2.2.噁唑衍生化合物的合成
化合物40的合成
(3,4-二氯苯基)(4,5,6,9,10,12-六氢-11H-[1,3]噁唑并[4,5-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001622
-11-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001621
将反应在无水条件下进行。
向中间体I74(200mg，0.44mmol)在甲酰胺(2mL)中的溶液中添加AgSbF6(150mg，0.44mmol)。将反应混合物在微波辐射下在90℃下搅拌2h。将反应混合物用DCM(20mL)稀释，通过
Figure BDA0003377545370001623
垫过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(硅胶，流动相：DCM/MeOH，梯度从：100:0至98:2)纯化。将产物在50℃下干燥过夜，以得到呈白色固体的化合物40(64mg，36％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 8.27(s,1H),7.70(d,J＝8.5Hz,1H),7.67(d,J＝1.9Hz,1H),7.43(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),4.80(s,2H),4.38-4.30(m,2H),3.78-3.65(m,2H),3.07(t,J＝5.6Hz,2H),2.72(t,J＝5.7Hz,2H),2.25-2.12(m,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝9.8min，C19H16Cl2N4O2的m/z计算值402，m/z实测值403[M+H]+。
3.2.2.3.吡唑衍生化合物的合成
3.2.2.3.1.化合物41的合成
Figure BDA0003377545370001631
中间体I118
叔丁基2,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001634
-11(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001632
将一水合肼(50％在H2O中，34.56μL，0.55mmol)添加至中间体I51(100mg，0.28mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中。将反应混合物在40℃下搅拌2h。将挥发物在减压下除去，并将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化，以得到呈白色粉末的中间体I118(57mg，62％)。
中间体I119
2,4,5,6,9,10,11,12-八氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001635
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001633
将HCl(6M在i-PrOH中，288μL，1.73mmol)添加至中间体I118(57.0mg，0.17mmol)在i-PrOH(5mL)中的溶液中。将反应混合物在50℃下搅拌过夜。将挥发物在减压下除去以得到中间体I119，将其按照原样用于下一步骤中。
化合物41
(3,4-二氯苯基)(2,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001642
-11(4H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001641
在室温下，将中间体I119、3,4-二氯苯甲酰氯(39.2mg，0.18mmol)和Na2CO3(36.7mg，0.35mmol)在DCM(5mL)和水(5mL)中的混合物剧烈搅拌1h。将混合物加载在二氧化硅筒上，并且将混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化。将残余物经由制备型HPLC(固定相：RP XBridge制备型C18 OBD-10μm，30x150mm，流动相：NH4HCO3(0.25％在水中)/MeCN)纯化，以得到化合物41(31.7mg，46％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 12.39-12.93(m,1H),7.62-7.68(m,2H),7.52(s,1H),7.40(dd,J＝8.3,1.8Hz,1H),4.73(s,2H),4.33-4.39(m,2H),3.64-3.80(m,2H),2.92(br s,1H),2.84-2.89(m,2H),2.69(t,J＝5.9Hz,2H)；LCMS(方法A)：Rt＝0.88min，C19H17Cl2N5O的m/z计算值401，m/z实测值402[M+H]+。
3.2.2.3.2.化合物42的合成
Figure BDA0003377545370001651
中间体I120
叔丁基2-甲基-2,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001654
-11(4H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370001652
将甲基肼(29.8μL，0.56mmol)添加至中间体I51(100mg，0.28mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中。将反应混合物在50℃下搅拌2h。将挥发物在减压下除去，并将残余物通过快速柱色谱法(硅胶，流动相梯度：庚烷至EtOAc)纯化，以得到呈白色粉末的中间体I120(50mg，52％)。
中间体I121
2-甲基-2,4,5,6,9,10,11,12-八氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001655
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001653
将HCl(6M在i-PrOH中，500μL，3.00mmol)添加至中间体I120(50mg，0.15mmol)在i-PrOH(10mL)中的溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌1h，并在室温下搅拌过夜。将挥发物在减压下除去以得到中间体I121，将其按照原样用于下一步骤中。
化合物42
(3,4-二氯苯基)(2-甲基-2,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001663
-11(4H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001661
在室温下，将中间体I121、3,4-二氯苯甲酰氯(33.0mg，0.15mmol)和Na2CO3(30.9mg，0.29mmol)在DCM(5mL)和水(5mL)中的混合物剧烈搅拌1h。将混合物加载在二氧化硅筒上，并且将混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相梯度：庚烷/EtOAc)纯化。将残余物经由制备型HPLC(固定相：RP XBridge制备型C18 OBD-10μm，30x150 mm，流动相：NH4HCO3(0.25％在水中)/MeCN)纯化，以得到化合物42(32.1mg，53％，经过2个步骤)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,100℃)δppm 7.64-7.69(m,2H),7.49(s,1H),7.41(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),4.72(br s,2H),4.31-4.37(m,2H),3.78(s,3H),3.65-3.75(m,2H),2.79-2.85(m,2H),2.68(t,J＝5.9Hz,2H),2.02-2.09(m,2H)；LCMS(方法A)：Rt＝1.00min，C20H19Cl2N5O的m/z计算值415，m/z实测值416[M+H]+。
3.2.2.3.3.化合物43的合成
Figure BDA0003377545370001662
中间体I122
5-亚甲基-2,4,5,6,9,10,11,12-八氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001673
盐酸盐
Figure BDA0003377545370001671
在室温下，将中间体I68(812mg，2.38mmol)在HCl(4M在1,4-二噁烷中，6.0mL，24.0mmol)中的溶液搅拌3h，并且将混合物在减压下浓缩以得到中间体I122，将其照原样用于下一个步骤中。
中间体I123
(3,4-二氯苯基)(5-亚甲基-2,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001674
-11(4H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001672
向中间体I122、3,4-二氯苯甲酰氯(257mg，1.23mmol)的混合物中添加DCM(34mL)和H2O(34mL)。添加Na2CO3(247mg，2.33mmol)，并且将反应混合物在室温下剧烈搅拌2h。将各层分离并将水相用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并在减压下浓缩。将MeOH添加至残余物中。将溶液过滤，并在减压下浓缩以得到中间体I123，将其按照原样用于下一步骤中。
化合物43
(3,4-二氯苯基)[5-(羟基甲基)-2,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001675
-11(4H)-基]甲酮
Figure BDA0003377545370001681
将中间体I123溶解于THF(0.7mL)中。添加9-BBN(0.5M在THF中，0.60mL，0.30mmol)，并且将混合物在室温下搅拌1h。添加NaOH(1M，水溶液，0.1mL，0.1mmol)和H2O2(0.1mL)，并且将反应混合物再搅拌1h。将混合物用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物在减压下浓缩。将粗混合物通过制备型TLC(100％EtOAc)纯化，以得到化合物43(4.0mg，15％，经过3个步骤)。
LCMS(方法D)：Rt＝2.38min，C20H19Cl2N5O2的m/z计算值431，m/z实测值432[M+H]+；1H NMR(400Hz,MeOD)δppm 7.54-7.70(m,1H),7.34-7.50(m,1H),7.32-7.73(m,2H),4.91-4.98(m,1H),4.50-4.81(m,2H),4.12-4.27(m,1H),3.93-4.10(m,1H),3.41-3.77(m,3H),2.61-3.08(m,4H),2.15-2.34(m,1H)。
3.2.2.4.咪唑衍生化合物的合成
3.2.2.4.1.化合物44的合成
(3,4-二氯苯基)(4,5,6,9,10,12-六氢咪唑并[4,5-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001683
-11(3H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001682
将反应在Ar气氛下进行。
向中间体I74(800mg，1.75mmol)在甲酰胺(8.37mL，210mmol)中的溶液中添加H2O(0.88mL，49.0mmol)。在微波辐射下，将反应混合物在160℃下搅拌1h，并用DCM(10mL)和水(3mL)稀释。将各层分离并将水相用DCM萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过反相快速柱色谱法(C-18，流动相：H2O/MeCN，梯度从95:5至50:50)纯化，以给出化合物44的两个级分：级分A(200mg，90％纯度，26％)和级分B(158mg，92％纯度，21％)。将级分A通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至98:2)纯化以得到化合物44(130mg，18％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 11.65(s,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,1H),7.67(d,J＝1.6Hz,1H),7.58(s,1H),7.43(d,J＝2.0Hz,1H),4.81(s,2H),4.33-4.19(m,2H),3.79-3.64(m,2H),2.95(t,J＝6.0Hz,2H),2.69(t,J＝5.6Hz,2H),2.15-2.08(m,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝7.6min，C19H17Cl2N5O的m/z计算值401，m/z实测值402[M+H]+。
3.2.2.4.2.化合物45的合成
(3,4-二氯苯基)(3-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢咪唑并[4,5-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001692
-11(3H)-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001691
将反应在无水条件下且在Ar气氛下进行。
在0℃下，向化合物44(138mg，0.31mmol，91％纯度)在THF(4mL)中的溶液中添加NaH(在矿物油中60％，25.1mg，0.63mmol)。将混合物在此温度下搅拌30min。添加碘甲烷(39.0μL，0.63mmol)，并且将反应混合物在0℃下搅拌2h，并在室温下搅拌过夜。将混合物与另一级分(0.13mmol)合并。将混合物用水(10mL)稀释。将各层分离并将水相用EtOAc(2x30mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从100:0至97:3)纯化，以得到呈白色固体的化合物45(110mg，69％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 7.68(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(d,J＝2.0Hz,1H),7.59(s,1H),7.42(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),4.79(s,2H),4.32-4.25(m,2H),3.78-3.65(m,2H),3.56(s,3H),2.89(t,J＝6.4Hz,2H),2.68(t,J＝6.0Hz,2H),2.19-2.11(m,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝8.1min，C20H19Cl2N5O的m/z计算值415，m/z实测值416[M+H]+。
3.2.2.4.噻唑衍生化合物的合成
化合物46的合成
(3,4-二氯苯基)(4,5,6,9,10,12-六氢-11H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,3]噻唑并[4,5-c]氮杂
Figure BDA0003377545370001703
-11-基)甲酮
Figure BDA0003377545370001701
在室温下，在五硫化二磷(340mg，0.77mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加甲酰胺(349μL，8.75mmol)。将反应混合物在回流下搅拌2h并冷却至室温。将固体滤出，并且将滤液添加至中间体I74(200mg，0.437mmol)在1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中。将反应混合物在回流下搅拌3h。将混合物用DCM(15mL)稀释并通过
Figure BDA0003377545370001702
垫过滤。将滤液在真空下浓缩。将粗混合物通过快速柱色谱法(二氧化硅，流动相：DCM/MeOH，梯度从：100:0至97:3)纯化。将产物在50℃下在真空下干燥过夜，以给出呈白色固体的化合物46(140mg，76％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δppm 8.97(s,1H),7.69(d,J＝8.2Hz,1H),7.67(d,J＝1.7Hz,1H),7.43(dd,J＝8.2,1.7Hz,1H),4.83(s,2H),4.45-4.33(m,2H),3.78-3.66(m,2H),3.24(t,J＝5.7Hz,2H),2.73(t,J＝5.7Hz,2H),2.25-2.18(m,2H)；LCMS(方法E)：Rt＝10.3min，C19H16Cl2N4OS的m/z计算值418，m/z实测值419[M+H]+。
3.2.2.5.化合物47-50的合成
中间体I126的合成
Figure BDA0003377545370001711
在0℃下，向乙基异噁唑-3-甲酸酯[3209-70-9](14.7g，104mmol)和NBS[128-08-5](55.7g，313mmol)的混合物中逐滴添加三氟甲磺酸[1493-13-6](175mL，1.98mol)。将混合物在0℃下搅拌30min，温热至室温并搅拌21h。在0℃下，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(500mL)淬灭并用固体Na2CO3中和。将混合物用EtOAc(250mL)和Et2O(250mL)稀释。将各层分离并将水层用Et2O(4x250mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干燥。将残余物通过柱色谱法(环己烷/EtOAc，从100:0至80:20)纯化以得到呈白色固体的I124(10.3g，45％)。
在0℃下，将K2CO3[584-08-7](9.42g，68.2mmol)在H2O(82ml)中的溶液中添加至I124(10g，45.5mmol)在MeOH(165ml)中的溶液中。将反应温热至室温，并且搅拌直到起始材料被消耗。将反应粗品浓缩，添加H2O和EtOAc。将各层分离，将水层用EtOAc(2x40ml)萃取，用HCl 3M(pH约2)酸化并用EtOAc(3x90ml)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，并浓缩以得到呈白色固体的I125(8.6g，99％)。
将反应在无水条件中、在氩气气氛下进行。
向I125(5.00g，26.0mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液中添加乙二酰氯[79-37-8](6.6mL，78.1mmol)和DMF(0.202mL，2.61mmol)。将混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩至干燥，并且与DCM(3x20mL)共蒸发以得到呈黄色油状物的I126。将粗品按原样未经任何进一步纯化而用于下一个步骤。
化合物47-50的合成
Figure BDA0003377545370001721
中间体I127和I127’
Figure BDA0003377545370001731
将反应在无水条件中、在氩气气氛下进行。
在-78℃下，向(2R)-2-甲基-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯[790667-43-5](5.6g，26.0mmol)在THF(50mL)中的溶液中逐滴添加LiHMDS[4039-32-1](39mL，39mmol，1M在THF中)，并在-78℃下搅拌30min。然后在-78℃下将混合物经由套管添加至I126(6g，28.7mmol)在THF(50mL)中的溶液中，并且缓慢温热至环境温度并搅拌15h。将反应混合物用NH4Cl的饱和水溶液(120mL)淬灭，并且将水层用EtOAc(3x120mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗品通过柱色谱法(环己烷/EtOAc，从100:0至0:100)纯化以产生呈橙色油状物的I127和I127’的混合物。
中间体I128和I128’
Figure BDA0003377545370001732
在-40℃下，向I127和I127’(6.19g，16.0mmol)在EtOH(74mL)中的溶液中添加一水合肼[7803-57-8](4.00g，79.9mmol)，并在室温下搅拌17h。将反应混合物浓缩，然后添加饱和NaHCO3水溶液(100mL)，并用EtOAc(3x80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(环己烷/EtOAc，从100:0至50:50)纯化以得到呈白色固体的I128和I128’的混合物。
中间体I129和I129’
Figure BDA0003377545370001741
将TFA[76-05-1](1.0mL，13.07mmol)添加至I128和I128’(100mg，0.261mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液碱化，用H2O(5mL)稀释并用EtOAc(3x5mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并浓缩以产生呈白色固体的I129和I129’的混合物(照原样用于下一个步骤中)。
中间体I130和I130’
Figure BDA0003377545370001742
在0℃下，向I129和I129’的混合物(2.9g，10.24mmol)在THF(80mL)中的溶液中添加Et3N[121-44-8](4.3mL，30.7mmol)和3,4-二氯苯甲酰氯[3024-72-4](2.6g，12.3mmol)。将混合物在室温下搅拌4h。添加NH4Cl饱和水溶液(5mL)，并且将水层用EtOAc(3x5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH，从100/0至99/1)纯化以得到呈白色固体的I130和I130’的混合物(4.17g，83％)。
中间体I131、I131’、I131a和I131a’
Figure BDA0003377545370001751
将反应在氩气气氛下进行。
在0℃下，向I130和I130’(1.03g，2.26mmol)在THF(20mL)中的溶液中添加NaH[7646-69-7](135mg，3.39mmol，60％)。搅拌15min后，添加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物[76513-69-4](0.480mL，2.71mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2h，然后添加饱和NH4Cl水溶液(20mL)。将水层用EtOAc(3x15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(环己烷/EtOAc，从100/0至80/20)纯化以产生呈白色固体的异构体I131、I131’、I131a和I131a’的混合物(961mg，72％)。
中间体I132、I132a、I132’和I132a’
Figure BDA0003377545370001752
将反应在氩气气氛下进行。
将I131、I131’、I131a和I131a’(823mg，1.40mmol)、硼酸酯[153989-28-7](635mg，2.81mmol)和Na2CO3[497-19-8](446mg，4.21mmol)在THF(11mL)和H2O(2.5mL)中的混合物通过鼓泡氩气脱气10min。然后，添加Pd(PPh3)4[14221-01-3](162mg，0.140mmol)，并用氩气吹扫，然后在95℃下在密封管中搅拌2h。添加硼酸酯[153989-28-7](635mg，2.81mmol)、Na2CO3[497-19-8](446mg，4.21mmol)和Pd(PPh3)4[14221-01-3](162mg，0.140mmol)，并在95℃下搅拌2h。添加硼酸酯[153989-28-7](317mg，1.40mmol)、Na2CO3[497-19-8](223mg，2.11mmol)和Pd(PPh3)4[14221-01-3](0.0811g，0.0702mmol)，并在95℃下再搅拌2h。将粗品用水(50mL)稀释，并且将水层用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗品通过快速色谱法(环己烷/EtOAc从100:0至70:30)纯化，以得到呈浅黄色油状物的I132、I132a、I132’和I132a’的混合物(照原样用于下一个步骤中)。
中间体I133和I133’
Figure BDA0003377545370001761
向I132、I132a、I132’和I132a’的混合物(490mg，0.81mmol)在CH2Cl2(1.6mL)中的溶液中添加TFA[76-05-1](1.6mL，20.2mmol)。将混合物在室温下搅拌2h。添加TFA[76-05-1](1.6mL，20.2mmol)并搅拌16h。将反应混合物浓缩至干燥，并与EtOH(3x8mL)共蒸发以产生呈橙色油状物的I133和I133’的混合物。将产物按原样未经任何进一步纯化而用于下一个步骤。
中间体I134和I134’
Figure BDA0003377545370001771
向I133和I133’的混合物(826mg，0.806mmol)在MeOH(18mL)中的溶液中添加KOH[1310-58-3](266mg，4.03mmol)。将混合物在室温下搅拌16h。添加KOH[1310-58-3](133mg，2.02mmol)并在室温下搅拌3天。将反应混合物用HCl(1M)水溶液酸化(直至pH约2，6mL)，用水(20mL)稀释，然后用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法(水/MeCN从80:20至0:100)纯化，以得到呈白色固体的I134和I134’的混合物(照原样用于下一个步骤中)。
化合物47-50
Figure BDA0003377545370001772
将反应在无水条件中、在氩气气氛下进行。
在0℃下，向I134和I134’的混合物(840mg，0.80mmol)和DIPEA[7087-68-5](0.419mL，2.40mmol)在CH2Cl2(13mL)中的溶液中添加甲胺盐酸盐[593-51-1](81mg，1.20mmol)和HATU[148893-10-1](457mg，1.20mmol)。将混合物温热至室温并搅拌18h。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(40mL)淬灭并用DCM(3x30mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH从100:0至95:5)和反相快速色谱法(水/MeCN从80:20至0:100)纯化，随后与EtOH(3x10mL)共蒸发。然后将白色固体通过制备型SFC(固定相：Chiralpak Daicel ID20x250mm，流动相：CO2，iPrOH+0.4iPrNH2)纯化，以产生呈白色固体的化合物47(22mg)、化合物48(28mg)、化合物49(22mg)和化合物50(33mg)。
最终化合物47
(5R,10R)-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N,10-二甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001783
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001781
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.15(d,J＝6.82Hz,3H)2.54(d,J＝15.85Hz,1H)2.61(d,J＝4.62Hz,3H)2.91-2.97(m,3H)3.00-3.14(m,2H)4.23(br d,J＝17.39Hz,1H)4.40-4.52(m,1H)4.60-4.66(m,1H)5.02-5.22(m,1H)7.41(dd,J＝8.14,1.98Hz,1H)7.65-7.78(m,3H)8.77(s,1H)
SFC(方法：SFC_A)：Rt：8.52min，100.00％，C22H21Cl2N5O3的m/z 473.10，实测值533[M+iPrNH2]+。
LCMS(方法：B)：Rt＝1.75min，C22H21Cl2N5O3的m/z计算值473，m/z实测值474[M+H]+
最终化合物48
(5S,10R)-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N,10-二甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001784
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001782
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.18(d,J＝6.82Hz,3H)2.56(d,J＝15.85Hz,1H)2.60-2.63(m,3H)2.89-2.97(m,3H)2.98-3.15(m,2H)4.26(br d,J＝17.39Hz,1H)4.43-4.52(m,1H)4.63(dt,J＝14.64,1.71Hz,1H)4.95-5.21(m,1H)7.40(dd,J＝8.14,1.98Hz,1H)7.62-7.76(m,3H)8.78(br s,1H)
SFC(方法：SFC_A)：Rt：7.24min，100.00％，C22H21Cl2N5O3的m/z 473.10，实测值533[M+iPrNH2]+。
LCMS(方法：B)：Rt＝1.76min，C22H21Cl2N5O3的m/z计算值473，m/z实测值474[M+H]+
最终化合物49
(5R,12R)-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N,12-二甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001793
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001791
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.51(d,J＝6.60Hz,3H)2.62(d,J＝4.62Hz,3H)2.68-2.74(m,2H)2.87-2.98(m,4H)2.99-3.13(m,2H)4.39-4.48(m,1H)4.57-4.65(m,1H)7.36(dd,J＝8.25,1.87Hz,1H)7.59-7.76(m,3H)8.79(s,1H)
SFC(方法：SFC_A)：Rt：7.05min，100.00％，C22H21Cl2N5O3的m/z 473.10，实测值533[M+iPrNH2]+。
LCMS(方法：B)：Rt＝1.77min，C22H21Cl2N5O3的m/z计算值473，m/z实测值474[M+H]+
最终化合物50
(5S,12R)-11-(3,4-二氯苯甲酰基)-N,12-二甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001794
-5-甲酰胺
Figure BDA0003377545370001792
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.40-1.46(m,3H)2.61(d,J＝4.62Hz,3H)2.66-2.83(m,2H)2.91-3.13(m,6H)4.34-4.49(m,1H)4.54-4.62(m,1H)7.38(dd,J＝8.14,1.98Hz,1H)7.62-7.75(m,3H)8.79(s,1H)
SFC(方法：SFC_A)：Rt：7.75min，100.00％，C22H21Cl2N5O3的m/z 473.10，实测值533[M+iPrNH2]+。
LCMS(方法：B)：Rt＝1.76min，C22H21Cl2N5O3的m/z计算值473，m/z实测值474[M+H]+
3.2.2.6.化合物51的合成
(2-氨基-4,5,6,9,10,12-六氢-11H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]噻唑并[4,5-c]氮杂
Figure BDA0003377545370001802
-11-基)(3,4-二氯苯基)甲酮
Figure BDA0003377545370001801
将反应在无水条件中、在氩气气氛下进行。
向I74(510mg，1.12mmol)在ACN(6mL)中的溶液中添加硫脲[62-56-6](84.9mg，1.12mmol)。将反应在80℃下搅拌18h。添加H2O(10mL)和EtOAc(3x30mL)。将有机层分离，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过柱色谱法(DCM/MeOH从100/0至95/5)纯化，以产生呈黄色固体的化合物51(102mg，21％)。
LCMS(方法E)：Rt：9.5min，C19H17Cl2N5OS的m/z计算值433，m/z实测值434[M+H]+
3.2.2.7.化合物52的合成
Figure BDA0003377545370001811
向NaOH[1310-73-2](103mg，2.56mmol)在EtOH(9.4mL)中的溶液中添加I73(650mg，1.72mmol)和苯甲醛[100-52-7](174μL，1.72mmol)。将反应在室温下搅拌18小时，然后用DCM(40mL)和水(20mL)稀释。将各层分离并将水层用DCM(2x150mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，以得到呈白色固体的I135(770mg，74％)。
将反应在无水条件中、在氩气气氛下进行。向I135(220mg，0.472mmol)在吡啶(8mL)中的溶液中添加N-羟胺盐酸盐[7803-57-8](164mg，2.36mmol)。将反应在60℃下搅拌5天。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，用HCl 1N水溶液(2x50mL)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并浓缩。将残余物通过快速色谱法(DCM/MeOH，从10/0至95/5)纯化。将获得的固体与EtOAc和EtOH共蒸发，在50℃下在真空下干燥，以得到呈白色固体的化合物52(28mg，12％)。
LCMS(方法E)：Rt：11.6min，C25H20Cl2N4O2的m/z计算值478，m/z实测值479[M+H]+
3.2.2.8.化合物53的合成
Figure BDA0003377545370001821
向I104(20mg，0.071mmol)和5,6-二氯-吡啶碳酰氯[54127-29-6]在DCM(0.8mL)中的悬浮液中添加Et3N[121-44-8](56μL，0.406mmol，0.728g/mL)。将反应在室温下搅拌2h。将粗混合物通过制备型TLC(100％EtOAc-运行板2x)纯化，以产生呈白色固体的化合物53(19mg，65％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-δ6):δ8.69-8.89(m,1H),8.40-8.54(m,1H),8.15-8.28(m,1H),5.19(br s,1H),4.60-4.86(m,2H),4.40-4.56(m,2H),4.24(br s,1H),3.57-3.96(m,2H),2.89-3.04(m,2H),2.67-2.82(m,2H)。
LCMS(方法E)：Rt：2.38min，C18H15Cl2N5O3的m/z计算值419，m/z实测值420[M+H]+
中间体和具有式(Ia)的化合物可以通过以下方法制备。
方案1
Figure BDA0003377545370001822
根据方案1，在合适的碱(如氢化钠、氢化钾、二异丙基氨基锂(LDA)、六甲基二甲硅烷基氨基锂(LHMDS)、双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(NaHMDS)、丁醇钾等)、优选地双(三甲基甲硅烷基)氨基钠(NaHMDS)的存在下，在合适的溶剂(如四氢呋喃(THF)、二噁烷、二甲氧基乙烷、甲苯、二甲苯、乙腈(ACN)、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA)、N-甲基吡咯烷酮等)、优选地THF中，在-70℃至100℃、优选地-65℃至40℃的温度范围下，具有式(Va)的化合物(其中R2a是H或C1-6烷基，并且PG是BOC)与乙酸乙酯经历克莱森(Claisen)型反应或酰化持续2h至24h的时间段。采用已建立的方法，例如在T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基团],”第3版,约翰威利父子出版公司(John Wiley&Sons),1999中描述的那些保护具有式(VIa)的化合物，以提供具有式(VIIa)和式(VIIb)的化合物的混合物(其中R2a是H或C1-6烷基，并且PG为BOC)。
方案2
Figure BDA0003377545370001831
根据方案2，在合适的溶剂如丙酮等中，采用烷基卤化物如((2-(溴甲基)烯丙基)氧基)(叔丁基)二苯基硅烷、碱(如K2CO3)、NaI，实现具有式(VIIa)和(VIIb)的β-酮酯化合物(其中R2a是H或C1-6烷基，并且PG是BOC)的烷基化，以提供具有式(VIIIa)和(VIIIb)的化合物的混合物。在合适的溶剂(如MeOH、H2O、或其混合物)中，使用碱(如氢氧化钾等)，实现具有式(VIIIa)和(VIIIb)的化合物的混合物的水解/脱羧，以提供具有式(IXa)的化合物。
方案3
Figure BDA0003377545370001841
根据方案3，用四正丁基氟化铵(TBAF)，在合适的溶剂(如THF等)中，将具有式(IXa)的化合物(其中R2a是H或C1-6烷基，PG是BOC，PG1是TBDSP)脱甲硅烷基化。随后的羟基的甲磺酰化采用甲烷磺酰氯(甲磺酰氯)，合适的碱(如三乙胺(TEA))，在合适的溶剂(如DCM等)中进行，提供具有式(XIIa)的化合物。采用碱(如DBU)，在合适的溶剂(如THF等)中进行分子内环化，提供具有式(XIIIa)的化合物(其中na是1)。可以以类似于具有式(XIIIa)的化合物(其中na是1)的方式制备具有式(XIIIa)的化合物(其中na是0或2)。
方案4
Figure BDA0003377545370001842
根据方案4，将具有式(XIIIa)的化合物用DMA处理，以得到具有式(XIVa)的二甲基烯胺化合物；在叔碱(如吡啶等)存在下，在约70℃-115℃的温度下，将该二甲基烯胺化合物用羟胺盐酸盐处理后，得到具有式(XVa)的化合物。以类似的方式，在甲醇的存在下，将具有式(XIVa)的化合物用羟胺盐酸盐处理，以得到具有式(XVIa)的化合物。
方案5
Figure BDA0003377545370001851
根据方案5，通过9-硼双环[3.3.1]壬烷(9-BBN)的作用，随后用过氧化氢和氢氧化物处理，将具有式(XVa)的化合物的烯基部分区域选择性地转化为其相应的具有式(XVIIa)的末端醇化合物，以得到具有式(XVIIa)的化合物。使用本领域技术人员熟知的方法进一步衍生所述末端醇。例如，通过合适的氧化剂(如氧化锰)的作用，将醇氧化成相应的醛。可替代地，还可以在合适的溶剂(如THF等)中，将醇官能团用合适的亲电子试剂(如三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯)、合适的碱(如NaH等)进行烷基化，以提供具有式(XVIIIa)的化合物。
可替代地，具有式(XVa)的化合物(其中R4a是H或C1-4烷基)通过采用本领域技术人员已知的条件经历锇催化二羟基化，以提供具有式(XIXa)的化合物。例如，在合适的溶剂(如THF、丙酮、H2O、或其混合物)中，将具有式(XVa)的化合物(其中R4a是H或C1-4烷基)与氧化剂(如含有锇的化合物像OsO4(或OsO4也可以通过K2OsO2(OH)4与NMO的氧化原位制备))、胺氧化物共氧化剂(如NMO等)反应，以提供具有式(XIXa)的化合物。将具有式(XIXa)的化合物用氧化剂(如高碘酸钠等)处理后，得到具有式(XXa)的化合物。具有式(XXa)的酮还原为具有式(XXIa)的醇通过氢化物源(如硼氢化钠等)、合适的溶剂(如醇类溶剂)的反应实现。
方案6
Figure BDA0003377545370001861
根据方案6，在合适的溶剂(如DMF、THF、吡啶等)中，将可商购的或可合成的烷基卤化物(如3-溴丙-1-烯)与具有式(Va)的化合物(其中R2a是H或C1-6烷基)、无机碱(如Cs2CO3、碳酸钾等)反应，以提供具有式(XXIIa)的化合物。在合适的溶剂(如THF等)中，在-40℃至40℃的温度范围内，将具有式(XXIIa)的化合物的酯官能团通过氢化物源(氢化铝锂、硼氢化钠等)还原，以得到具有式(XXIIIa)的醇。分两个步骤制备具有式(XXIVa)的化合物。在第一步中，使用本领域技术人员已知的条件，例如斯文(Swern)氧化条件((COCl)2/DMSO)或TPAP-NMO条件，实现至相应的醛的氧化。在第二步中，在非质子溶剂(如THF等)中，在-40℃至40℃的温度范围内，将醛中间体与格氏(Grignard)试剂(如烯丙基溴化镁)反应，提供具有式(XXIVa)的化合物，其中PG是Boc并且R2a是H或C1-6烷基。
方案7
Figure BDA0003377545370001862
根据方案7，在合适的溶剂(如DMF等)中，将可商购的或可合成的二乙基1H-吡唑-3,5-二甲酸酯用叔丁基N-(2-溴乙基)甲酸酯、碱(如Cs2CO3等)烷基化，以提供二乙基1-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-吡唑-3,5-二甲酸酯。采用已建立的方法，例如在T.W.Greene和P.G.M.Wuts,“Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基团],”第3版,约翰威利父子出版公司(John Wiley&Sons),1999中描述的那些，将二乙基1-(2-((叔丁氧基-羰基)氨基)乙基)-1H-吡唑-3,5-二甲酸酯脱保护；随后将其在碱性条件下处理，以形成乙基4-氧代-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸酯和甲基4-氧代-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸酯的混合物。乙基4-氧代-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸酯和甲基4-氧代-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸酯的混合物具有氢化物源，如LAH等；随后使用常规方法(如通过用Boc-酸酐处理)保护氨基官能团，以得到叔丁基2-(羟基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。
方案8
Figure BDA0003377545370001871
根据方案8，在合适的溶剂(如ACN等)中，在约15℃的温度下，采用卤化剂(如N-碘代琥珀酰亚胺等)实现叔丁基2-(羟基甲基)-6,7-二氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯的碘化，提供叔丁基2-(羟基甲基)-3-碘-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]-吡嗪-5(4H)-甲酸酯。随后，在合适的溶剂(如二氯甲烷等)中，在约0℃至约25℃的温度范围内，用合适的氧化剂(如戴斯-马丁高碘烷(DMP))，持续大约0.5至4小时的时间段，实现叔丁基2-(羟基甲基)-3-碘-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯的氧化，以提供叔丁基2-甲酰基-3-碘-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。
在有机溶剂(如THF、甲苯等)中，将叔丁基2-甲酰基-3-碘-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯与维蒂希(Wittig)型试剂(如甲基三苯基溴化磷)、碱(如NaHMDS等)进行反应，以提供叔丁基3-碘-2-乙烯基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。在有机镁卤化物(如i-PrMgCl等)的存在下，在合适的溶剂(如THF等)中，将叔丁基3-碘-2-乙烯基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯在常规格氏反应条件下与戊-4-烯醛反应，以提供具有式(XXVa)的化合物，其中R2a是H。
方案9
Figure BDA0003377545370001881
根据方案9，在溶剂(如DCM等)中，采用二氯[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基](2-异丙氧基苯基亚甲基)-钌(II)(Hoveyda-Grubbs II催化剂)，使具有式(XXVIa)的化合物(其包括具有式(XXIVa)和(XXVa)的化合物)经历闭环复分解反应持续16-24h的时间段，以提供具有式(XXVIIa)的化合物。
在合适的溶剂或溶剂系统(如DMF、甲醇、二噁烷/水等)中，在钯催化剂(包括但不限于，Pd碳、Pd(dppf)Cl2或Pd(PPh3)4)的存在下，采用氢化条件，将具有式(XXVII)的化合物(其中PG是Boc，Y是C并且X是N，并且R2a是H或C1-6烷基)还原，以提供具有式(XXVIIIa)的化合物，其中PG是Boc，Y是C并且X是N，na是1，并且R2a是H或C1-6烷基。
采用本领域技术人员已知的条件将具有式(XXVIII)的化合物氧化成具有式(XXIXa)的化合物。例如，用N-甲基吗啡啉N-氧化物(NMO)作为共氧化剂，在适合的溶剂(例如，ACN、DCM、DMF等)中，使具有式(XXVIIIa)的醇化合物与氧化催化剂(过钌酸四丙基铵(TPAP))的反应，提供具有式(XXIXa)的化合物，其中X是N并且Y是C。
以类似的方式，将具有式(XXVIIa)的化合物(其中X是C并且Y是N)首先在先前描述的TPAP条件下氧化，随后采用先前描述的氢化条件还原双键，以提供具有式(XXIX)的化合物，其中PG是Boc，Y是N并且X是C，na是1，并且R2a是H或C1-6烷基。
可以以类似于具有式(XXIXa)的化合物(其中na是1)的方式制备具有式(XXIXa)的化合物(其中na是0或2)。
方案10
Figure BDA0003377545370001891
根据方案10，将具有式(XXXa)的酮化合物(其中X是N，Y是C，R1b和R1a是H，或R1b和R1a一起形成亚甲基，R2a是H或C1-6烷基，并且PG是Boc)与二甲基甲酰胺-二甲基乙缩醛(DMF-DMA)缩合，以得到具有式(XXXIa)的化合物，其中Ra是OH或N(CH3)2，并且na是1。
在强有机金属碱(如LDA)的存在下，在HMPA的存在下，在非质子有机溶剂(如THF等)中，用烯丙基溴将具有式(XXXa)的化合物(其中X是N，Y是C，R1b和R1a是H，R2a是H或C1-6烷基，na是1，并且PG是BOC)进行烷基化，以得到具有式(XXXIIa)的化合物。在本领域技术人员已知的条件(例如，四氧化锇、高碘酸钠、斯文氧化条件等)下将具有式(XXXIIa)的化合物氧化成具有式(XXXIIIa)的醛化合物。
在合适的溶剂(如EtOH等)中，将具有式(XXXa)的化合物(其中X是N，Y是C，R1b和R1a是H，R2a是H或C1-6烷基，na是1，并且PG是BOC)，在胺化/环化条件下与炔丙基胺、金催化剂(如NaAuCl4·2H2O等)反应，以提供具有式(XXXIVa)的化合物。
将具有式(XXXa)的酮化合物(其中X是C，Y是N，R1b和R1a是H，R2a是H或C1-6烷基，并且PG是Boc)与二甲基甲酰胺-二甲基乙缩醛(DMF-DMA)缩合，以得到具有式(XXXVa)的烯胺酮(enaminone)化合物。在替代方法中，在溶剂(如甲苯等)中，在约115℃的温度下，将三(二甲基-氨基)甲烷(TDAM)与具有式(XXXa)的化合物反应持续12-20h的时间段，以提供具有式(XXXVa)的化合物，其中Ra是N(CH3)2，并且na是1。
可以以类似于具有式(XXXIa)、(XXXIIIa)、(XXXIVa)、和(XXXVa)的化合物(其中na是1)的方式制备具有式(XXXIa)、(XXXIIIa)、(XXXIVa)、和(XXXVa)的化合物(其中na是0或2)。
方案11
Figure BDA0003377545370001911
根据方案11，在合适的溶剂(如MeOH等)中，通过使具有式(XXXVIa)的化合物(其中X是N，Y是C，na是1，并且Ra是OH)与肼(如甲基肼或水合肼)反应来制备具有式(XXXVIIa、XXXVIIb、XXXVIIc)的化合物。
在叔碱(如吡啶等)的存在下，在70℃至115℃的温度范围下，用羟胺盐酸盐处理具有式(XXXVIa)的化合物(其中Ra是OH或N(CH3)2)，以得到具有式(XXXVIIIa)的异噁唑化合物。以类似的方式，在合适的溶剂(如MeOH等)中，在约70℃的温度下，用羟胺盐酸盐处理具有式(XXXVIa)的化合物，以提供具有式(XXXIXa)的异噁唑化合物(其中na是1)。
可以以类似于具有式(XXXVIIa)、(XXXVIIb)、(XXXVIIc)、(XXXVIIIa)、和(XXXIXa)的化合物(其中na是1)的方式制备具有式(XXXVIIa)、(XXXVIIb)、(XXXVIIc)、(XXXVIIIa)、和(XXXIXa)的化合物(其中na是0或2)。
方案12
Figure BDA0003377545370001921
根据方案12，将叔丁基11-氧代-10-(2-氧代乙基)-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001923
-2(7H)-甲酸酯用水合肼处理，以得到叔丁基4a,5,6,7,10,11-六氢-4H-哒嗪并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]-氮杂
Figure BDA0003377545370001924
-12(13H)-甲酸酯。在合适的溶剂(如THF)中，在约0℃的温度下，将叔丁基4a,5,6,7,10,11-六氢-4H-哒嗪并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001925
-12(13H)-甲酸酯用试剂(如DDQ等)氧化，得到具有式(XLa)的芳香化的化合物，其中na是1，R2a是H，并且PG是Boc。
可以以类似于具有式(XLa)的化合物(其中na是1)的方式制备具有式(XLa)的化合物(其中na是0或2，并且R2a是H或C1-6烷基)。
方案13
Figure BDA0003377545370001922
根据方案13，采用劳森试剂(Lawesson’s reagent)，将具有式(XLIa)的化合物转化为具有式(XLIIa)的硫代酰胺化合物。例如，在合适的溶剂(如甲苯等)中，在约110℃的温度下，将叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370001932
-2(7H)-甲酸酯(如在PCT国际申请WO 2018005883,2018年1月4日中所述)用劳森试剂处理，以提供叔丁基11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370001933
-2(7H)-甲酸酯。将具有式(XLIIa)的化合物环化以形成具有式(XLIIIa)的化合物。例如，在合适的溶剂(如ACN等)中，将叔丁基11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370001934
-2(7H)-甲酸酯用Rb取代的酰肼(其中Rb是氢或CH3)、Hg(OAc)2环化，以得到具有式(XLIIIa)的化合物，其中R2a是H或C1-6烷基，PG是Boc，na是1，并且Rb是H或CH3。
可以以类似于具有式(XLIII)的化合物(其中n是1)的方式制备具有式(XLIII)的化合物(其中n是0或2，并且R2是H或C1-6烷基)。
方案14
Figure BDA0003377545370001931
根据方案14，采用本领域技术人员已知的条件，将具有式(XLIVa)的化合物(其涵盖具有式(XVa)、(XVIa)、(XVIIIa)、(XXIa)、(XXXIVa)、(XXXVIIa)、(XXXVIIb)、XXXVIIc)、(XXXVIIIa)、(XXXIXa)、(XLa)、和(XLIIIa)的化合物)脱保护。随后在合适的溶剂(如DCM等)中，与可商购的或可合成的具有式(XLVa)的化合物(其中Z2、R3a、和R4a如上所定义的)、合适的碱(如TEA等)反应，提供具有式(Ia)的化合物。
通用程序
提供以下具体实例以进一步说明本披露和多种优选实施例。
在获得以下实例中所述的化合物和相应的分析数据中，除非另有说明，否则遵循以下实验和分析方案。
除非另行说明，否则将反应混合物在室温(rt)下在氮气气氛下进行磁力搅拌。当溶液被“干燥”时，它们通常经干燥剂(如Na2SO4或MgSO4)进行干燥。当混合物、溶液和提取物被“浓缩”时，它们典型地在旋转蒸发器中在减压下进行浓缩。
用预填充柱在硅胶(SiO2)上进行正相硅胶色谱法(FCC)。
制备型反相高效液相色谱法(RP HPLC)在以下任一方法下进行：
方法A.Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的Synergi C18(10μm，150x25mm)或Boston Green ODS C18(5μm，150x30mm)，并在流动相为在水中的经10min5％-99％ACN(含0.225％FA)，并且然后在100％ACN中保持2min，流速为25mL/min。
或者
方法B.Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的Synergi C18(10μm，150x25mm)或Boston Green ODS C18(5μm，150x30mm)，并在流动相为在水中的经10min5％-99％ACN(0.1％TFA)，并且然后在100％ACN中保持2min，流速为25mL/min。
或者
方法C.Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的Synergi C18(10μm，150x25mm)或Boston Green ODS C18(5μm，150x30mm)，并在流动相为在水中的经10min5％-99％ACN(0.05％HCl)，然后在100％ACN中保持2min，流速为25mL/min。
或者
方法D.Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的Gemini C18(10μm，150x25mm)，AD(10μm，250mm x 30mm)，或沃特斯XBridge C18柱(5μm，150x30mm)，流动相为在水中的经10min 0-99％ACN(0.05％氢氧化铵v/v)，并且然后100％ACN中保持2min，流速为25mL/min。
或者
方法E.Gilson GX-281半制备型HPLC，采用菲罗门公司的Gemini C18(10μm，150x25mm)或沃特斯XBridge C18柱(5μm，150x30mm)，流动相为在水中的经10min 5％-99％ACN(10mM NH4HCO3)，并且然后在100％ACN中保持2min，流速为25mL/min。
制备型超临界流体高效液相色谱(SFC)是在Thar 80Prep-SFC系统或来自沃特斯的沃特斯80Q Prep-SFC系统上进行的。将ABPR设置为100巴，以使CO2保持在SF条件下，并且流速可根据化合物特征验证，流速范围为50g/min至70g/min。柱温为环境温度
除非另外指明，质谱(MS)在SHIMADZU LCMS-2020MSD或Agilent 1200\G6110A MSD上通过在正模式下的电喷雾电离(ESI)获得。计算的质量对应于准确质量。
在Bruker model AVIII 400光谱仪上获得核磁共振(NMR)光谱。多重性的定义如下：s＝单峰、d＝双峰、t＝三重峰、q＝四重峰、m＝多重峰、br＝宽峰。应当理解，对于包含可交换质子的化合物，所述质子可以在NMR谱上可见或者在NMR谱上不可见，这取决于用于运行NMR谱的溶剂的选择和化合物在溶液中的浓度。
使用ChemDraw Ultra 12.0,ChemDraw Ultra 14.0(美国麻州哈佛大学剑桥软件公司(CambridgeSoft Corp.))或ACD/Name Version 10.01(先进化学发展股份有限公司(Advanced Chemistry))生成化学名称。
指定为R*或S*的化合物是未确定绝对构型的对映异构体纯的化合物。
中间体1：叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3': 3,4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001951
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370001961
步骤A.叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5 (4H)-甲酸酯。在-65℃下在N2下，向乙酸乙酯(20.88g，237.02mmol，23.20mL)在THF(120mL)中的溶液中添加NaHMDS(1M，474.04mL)。在-65℃下，将5-叔丁基3-乙基6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(如在WO 2018005881，公开日期2018年1月4日中所述制备)(28g，94.81mmol)在THF(200mL)中的溶液经1h逐滴添加至混合物中。将混合物在45℃下搅拌10h。将混合物用HCl(1M水溶液，1500mL)淬灭并用乙酸乙酯(1500mL)稀释。将有机相分离，并且经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，以给出呈黄色固体的标题化合物(28.4g，84.18mmol，88.79％产率，100％纯度)。MS(ESI)：C16H23N3O5的质量计算值337.16；m/z实测值360.1[M+Na]+。
步骤B.二-叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡 啶-2,5(4H)-二甲酸酯和二-叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4, 3-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯的混合物。
向叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(18g，53.35mmol)、TEA(16.20g，160.06mmol，22.28mL)和DMAP(651.82mg，5.34mmol)在DCM(200mL)中的溶液中添加Boc2O(11.64g，53.35mmol，12.26mL)，将混合物在15℃下搅拌2h。将混合物倒入1M HCl水溶液(250mL)中并用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过二氧化硅快速柱色谱法(0至20％乙酸乙酯/石油醚的洗脱液)纯化，以给出呈无色油状物的标题化合物(20g，22.86mmol，42.84％产率，100％纯度)。MS(ESI)：C21H31N3O7的质量计算值437.22；m/z实测值460.1[M+Na]+/897.2[2M+23]+。
步骤C.二-叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(乙氧基羰 基)-戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-2,5(4H)-二甲酸酯和二-叔丁基3- (4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(乙氧基羰基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-1H- 吡唑并[4,3-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯的混合物。向二-叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-2,5(4H)-二甲酸酯和二-叔丁基3-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯(14.00g，32.04mmol)在丙酮(150mL)中的混合物中添加K2CO3(6.64g，48.05mmol)、NaI(960.39mg，6.41mmol)和2-(溴甲基)烯丙基氧基-叔丁基-二苯基-硅烷(14.97g，38.44mmol)。将混合物在55℃下搅拌4h。在0℃下，将混合物倒入HCl(400mL，1M水溶液)中，并用乙酸乙酯(300mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(500mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至20/1)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(13.5g，16.83mmol，52.53％产率，93％纯度)(TLC，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)。MS(ESI)：C41H55N3O3Si的质量计算值745.38；m/z实测值768.5[M+Na]+。
步骤D.叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)戊-4-烯酰基)-6,7- 二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯。向二-叔丁基3-(4-(((叔丁基-二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(乙氧基羰基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-2,5(4H)-二甲酸酯和二-叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(乙氧基羰基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯(13.5g，16.83mmol)在MeOH(50mL)中的混合物中添加KOH(1.89g，33.66mmol)在水(10mL)中的溶液。将混合物在65℃下搅拌3h。将混合物倒入HCl(1M，水溶液，300mL)中并用乙酸乙酯(200mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2：石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(8.9g，15.51mmol，92.15％产率)。MS(ESI)：C33H43N3O4Si的质量计算值573.3；m/z实测值，574.4[M+H]+。
步骤E.叔丁基3-(4-(羟基甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡 啶-5(4H)-甲酸酯。向叔丁基3-(4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(14g，21.96mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加TBAF(1M，32.94mL)。将混合物在30℃下搅拌12h。将混合物倒入水(100mL)中，并用乙酸乙酯(80mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1至1/1)纯化，以得到呈白色固体的标题化合物(6.3g，18.41mmol，83.83％产率，98％纯度)。C17H25N3O4的MS(ESI)/质量计算值335.2；m/z实测值，358.1[M+Na]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝5.05(s,1H),4.91(s,1H),4.67(s,2H),4.16(s,2H),3.72(t,J＝5.4Hz,2H),3.15(s,2H),2.79(t,J＝5.6Hz,2H),2.53(t,J＝7.2Hz,2H),1.49(s,9H)。
步骤F.叔丁基3-(4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡 唑并-[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯。在0℃下在N2下，向叔丁基3-(4-(羟基甲基)戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(6.3g，18.41mmol)和TEA(5.59g，55.23mmol，7.69mL)在DCM(30mL)中的溶液中添加MsCl(4.73g，41.29mmol，3.20mL)。将混合物在0℃下搅拌1h。将混合物倒入水(60mL)中，并用乙酸乙酯(60mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的标题化合物(8.2g，粗品)。MS(ESI)：C18H27N3O6S的质量计算值413.2；m/z实测值，414.1[M+H]+。
步骤G.叔丁基8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4] 吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001991
-2(7H)-甲酸酯。在30℃下在N2下，向叔丁基3-(4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)-戊-4-烯酰基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(8.2g，粗品)在THF(60mL)中的溶液中添加DBU(7.06g，46.37mmol，6.99mL)。将混合物在30℃下搅拌1h。将混合物倒入水(50mL)中，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1-8/1)纯化，以得到呈无色油状物的标题化合物(4.2g，11.25mmol，85％纯度)。MS(ESI)：C17H23N3O3的质量计算值317.2；m/z实测值，318.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝5.22(s,1H),5.09(s,1H),5.03(s,2H),4.62(s,2H),3.68(s,2H),2.93-2.87(m,2H),2.74(s,4H),1.47(s,9H)。
步骤H.叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11- 六-氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001992
-2(7H)-甲酸酯。在80℃下，将叔丁基8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001993
-2(7H)-甲酸酯(4.2g，11.25mmol)在DMF-DMA(15mL)中的溶液搅拌12h。将混合物在减压下浓缩。将残余物倒入水(30mL)中，并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的标题化合物(4.5g，粗品)。MS(ESI)：C20H28N4O3的质量计算值372.2；m/z实测值395.1[M+Na]+。
步骤I.叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001994
-11(12H)-甲酸酯。向叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370001995
-2(7H)-甲酸酯(4.5g，粗品)在Py(50mL)中的溶液中添加NH2OH·HCl(5.04g，72.53mmol)。将混合物在115℃下搅拌12h。将混合物在减压下浓缩。将残余物倒入HCl(1N，水溶液，40mL)中，并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(40mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，以得到呈白色固体的标题化合物(2.1g，5.95mmol，97％纯度)。MS(ESI)：C18H22N4O3的质量计算值342.2；m/z实测值，343.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.32(s,1H),5.34(s,1H),5.26(s,1H),4.93(s,2H),4.68(s,2H),3.75(s,2H),3.64(s,2H),2.79(s,2H),1.50-1.47(m,9H)。
中间体2：叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002002
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002001
在-10℃下，向叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002003
-11(12H)-甲酸酯(中间体1，步骤I的产物，480mg，1.40mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加1,9-BBN(0.5M，56.08mL)。将混合物在-10℃下搅拌2h，然后在-30℃下添加NaOH(560.72mg，14.02mmol)在水(5mL)中的溶液，随后添加H2O2(3.18g，28.04mmol，2.69mL，30％纯度)。将混合物在15℃下搅拌16h。将混合物用NaHSO3饱和水溶液(50mL)淬灭，并用EtOAc(80mL×3)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50％至100％)纯化，以得到呈白色固体的标题化合物(460mg，1.24mmol，88.31％产率，97％纯度)。MS(ESI)：C18H24N4O4的质量计算值360.18；m/z实测值，361.0[M+H]+。
中间体3：(5S*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑 并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002012
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002011
步骤A.(5S*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶 并-[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002013
-11(12H)-甲酸酯和(5R*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5, 6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002014
-11(12H)-甲 酸酯。将叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并-[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002015
-11(12H)-甲酸酯(中间体2)通过SFC(条件：柱：IC(250mm×30mm，10um)；流动相：[0.1％NH3 H2O IPA]；B％：45％-45％，6.1min；100min)分离，以给出呈白色固体的(5S*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002016
-11(12H)-甲酸酯(峰1于SFC(IC-3S_4_40_3ML柱：ChiralpakIC-3 100×4.6mm I.D.，3um，流动相：在CO2中的40％异丙醇(0.05％DEA)，流速：3mL/min，波长：220nm)上，保留时间＝1.369min，136mg，97％纯度)，和呈白色固体的(5R*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002017
-11(12H)-甲酸酯(峰2于SFC(IC-3S_4_40_3ML柱：Chiralpak IC-3 100×4.6mm I.D.，3um，流动相：在CO2中的40％异丙醇(0.05％DEA)，流速：3mL/min，波长：220nm)上，保留时间＝1.627min，82mg，97％纯度)。
步骤B.(5S*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并 [3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002022
-11(12H)-甲酸酯。向(5S*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]-氮杂
Figure BDA0003377545370002023
-11(12H)-甲酸酯(135.00mg，363.34umol)在THF(2mL)中的溶液中添加NaH(30mg，750.07umol，60％纯度)。将混合物在0℃下搅拌0.5h，然后将三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(234mg，1.09mmol)添加至混合物中。将混合物在0℃下搅拌4h，然后倒入冰水(20mL)中，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈无色油状物的标题化合物(140mg，粗品)。MS(ESI)：C20H26F2N4O4的质量计算值424.2；m/z实测值，425.1[M+H]+。
中间体4.(5R*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑 并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002024
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002021
以类似于中间体3的方式，但在步骤B中，用(5R*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002025
-11(12H)-甲酸酯取代(5S*)-叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002026
-11(12H)-甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C20H26F2N4O4的质量计算值424.2；m/z实测值，425.1[M+H]+。
中间体5：叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3': 3,4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002027
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002031
向叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-8-亚甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002033
-2(7H)-甲酸酯(中间体1，步骤H的产物，0.32g，859.15umol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加NH2OH·HCl(358.21mg，5.15mmol)。将混合物在30℃下搅拌12h。将混合物倒入水(20mL)中，并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至2/1)纯化，以得到呈无色油状物的标题化合物(200mg，519.87umol，89％纯度)。MS(ESI)：C18H22N4O3的质量计算值342.2；m/z实测值，343.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.17(s,1H),5.39(s,1H),5.33(s,1H),4.87(s,2H),4.75(s,2H),3.74(s,2H),3.57(s,2H),2.78(t,J＝5.4Hz,2H),1.49(s,9H)。
中间体6：叔丁基5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3, 4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002034
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002032
步骤A.叔丁基5-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002035
-11(12H)-甲酸酯。在0℃下，向叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002036
-11(12H)-甲酸酯(中间体1，步骤I的产物，300mg，876.19umol)在THF(20mL)和H2O(10mL)中的溶液中添加NMO(153.97mg，1.31mmol，138.71uL)和K2OsO4.2H2O(32.28mg，87.62umol)。将混合物在25℃下搅拌16h。添加另外的NMO(153.97mg)和K2OsO4.2H2O(50mg)，并且将混合物在25℃下搅拌16h。将混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，将合并的有机层用NaHSO3饱和水溶液(20mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈白色固体的标题化合物(334mg，粗品)。MS(ESI)：C18H24N4O5的质量计算值376.2；m/z实测值，377.1[M+H]+。
步骤B.叔丁基5-氧代-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4] 吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002041
-11(12H)-甲酸酯。向叔丁基5-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002042
-11(12H)-甲酸酯(330mg)在THF(3.3mL)和水(3.3mL)中的溶液中添加NaIO4(562.56mg，2.63mmol，145.74uL)。将混合物在25℃下搅拌2h。将混合物用水(50mL)稀释，用EtOAc(40mL×2)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈棕色固体的标题化合物(320mg，粗品)。LCMS显示60％的水合物质量和24％的所希望的质量。MS(ESI)：C17H20N4O4的质量计算值344.4；m/z实测值，345.2[M+H]+
步骤C.叔丁基5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]- 吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002043
-11(12H)-甲酸酯。在0℃下，向叔丁基5-氧代-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002044
-11(12H)-甲酸酯(300mg)在EtOH(3mL)中的溶液中添加NaBH4(65.92mg，1.74mmol)。将混合物在25℃下搅拌5h。将反应用NH4Cl饱和水溶液(20mL)淬灭并用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的标题化合物(230mg，粗品)。MS(ESI)：C17H22N4O4的质量计算值346.4；m/z实测值，347.3[M+H]+。
中间体7：(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002052
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002051
步骤A.(R)-5-叔丁基3-乙基2-烯丙基-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡 啶-3,5(4H)-二甲酸酯。将(R)-5-叔丁基3-乙基6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(如在PCT国际申请WO 2018005883中所述制备)(15g，48.49mmol)、3-溴丙-1-烯(8.80g，72.73mmol)、Cs2CO3(39.50g，121.22mmol)在无水DMF(200mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后将混合物在15℃下在N2气氛下搅拌16h。将混合物倒入水(30mL)中并搅拌5min。将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/1)纯化，以得到呈无色油状物的标题化合物(9.7g，26.26mmol，54.16％产率，94.6％纯度)。MS(ESI)：C18H27N3O4的质量计算值349.2；m/z实测值，350.1[M+H]+。
步骤B.(R)-叔丁基2-烯丙基-3-(羟基甲基)-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3- c]吡啶-5(4H)-甲酸酯。在-40℃下在N2下，向(R)-5-叔丁基3-乙基2-烯丙基-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(8g，22.89mmol)在THF(80mL)中的溶液中添加LiAlH4(1.30g，34.34mmol)，然后将混合物在-40℃下在N2气氛下搅拌2h。在-40℃下，将冰NaOH(3mL，15％水溶液)逐滴添加至混合物中并搅拌5min。然后将混合物温热至15℃并过滤。将滤液倒入水(40mL)中，并用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0:1)纯化，以得到呈无色油状物的标题化合物(6.3g，20.29mmol，88.62％产率，99％纯度)。MS(ESI)：C16H25N3O3的质量计算值307.2；m/z实测值，308.1[M+H]+。
步骤C.(R)-叔丁基2-烯丙基-3-甲酰基-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡 啶-5(4H)-甲酸酯。在N2下在-78℃下，向(COCl)2(4.74g，37.33mmol，3.27mL)在DCM(150mL)中的溶液中一次性添加DMSO(3.89g，49.77mmol，3.89mL)。将混合物在-78℃下搅拌15min。然后添加(R)-叔丁基2-烯丙基-3-(羟基甲基)-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(7.3g，24.88mmol)，随后添加TEA(8.81g，87.09mmol，12.12mL)。将混合物在-78℃下在N2气氛下搅拌2h，然后在-40℃下将混合物倒入水(200mL)中，搅拌1min，然后温热至15℃。将水相用DCM(100mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(300mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至50/1)纯化，以得到呈无色油状物的标题化合物(6.4g，21.31mmol，85.63％产率，97％纯度)。MS(ESI)：C16H23N3O3的质量计算值305.2；m/z实测值，306.1[M+H]+。
步骤D.(6R)-叔丁基2-烯丙基-3-(1-羟基丁-3-烯-1-基)-6-甲基-6,7-二氢-2H- 吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯。在-40℃下在N2下，向(R)-叔丁基2-烯丙基-3-甲酰基-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(5.8g，18.99mmol)在THF(60mL)中的溶液中逐滴添加烯丙基(溴)镁(1M，56.98mL)。将混合物在-40℃下搅拌30min，然后加热至0℃并搅拌2h。将混合物用冰HCl(水溶液，1N，50mL)淬灭并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(60mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:1)纯化，以得到呈无色油状物的标题化合物(5.7g，15.70mmol，82.66％产率，95.7％纯度)。MS(ESI)：C19H29N3O3的质量计算值347.2；m/z实测值，348.1[M+H]+。
步骤E.(3R)-叔丁基11-羟基-3-甲基-3,4,10,11-四氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡 唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002071
-2(7H)-甲酸酯。将(6R)-叔丁基2-烯丙基-3-(1-羟基丁-3-烯-1-基)-6-甲基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(2.2g，6.33mmol)、[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-亚基]-二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌(396.77mg，633.18umol)在DCM(1.6L)中的混合物脱气并用N2吹扫(3x)，然后将混合物在40℃下在N2气氛下搅拌16h。在15℃下在氮气气氛下，将[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-亚基]-二氯-[(2-异丙氧基苯基)-亚甲基]钌(198.38mg，316.59umol)添加至混合物中。将混合物在34℃下在N2下再搅拌32h，然后将混合物在40℃下再搅拌32h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至3/1)纯化，以得到呈黑棕色固体的标题化合物(1.8g，5.58mmol，88.11％产率，99％纯度)。MS(ESI)：C17H25N3O3的质量计算值319.2；m/z实测值，320.1[M+H]+。
步骤F.(3R)-叔丁基11-羟基-3-甲基-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3, 4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002072
-2(7H)-甲酸酯。在N2下，向(3R)-叔丁基11-羟基-3-甲基-3,4,10,11-四氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002075
-2(7H)-甲酸酯(750mg，2.35mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中添加Pd/C(75mg，10％)。将悬浮液在减压下脱气并用H2吹扫几次。将混合物在15℃下在H2(15psi)下搅拌16h。将混合物过滤并在减压下浓缩，以得到呈黑棕色油状物的标题化合物(680mg，2.12mmol，90.10％产率)。MS(ESI)：C17H27N3O3的质量计算值321.2；m/z实测值，322.1[M+H]+。
步骤G.(R)-叔丁基3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002073
-2(7H)-甲酸酯。
将(3R)-叔丁基11-羟基-3-甲基-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并-[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002074
-2(7H)-甲酸酯(680mg，2.12mmol)、TPAP(148.70mg，423.13umol)和NMO(991.36mg，8.46mmol，893.11uL)在乙腈(ACN)(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫(3x)，然后将混合物在15℃下在N2气氛下搅拌16h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(600mg，1.84mmol，87.02％产率，98％纯度)。MS(ESI)：C17H25N3O3的质量计算值319.2；m/z实测值，320.1[M+H]+。
步骤H.(R)-叔丁基10-(羟基亚甲基)-3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H- 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002081
-2(7H)-甲酸酯。
将(R)-叔丁基3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002082
-2(7H)-甲酸酯(400mg，1.25mmol)在DMF-DMA(13.46g，112.91mmol，15mL)中的溶液中在75℃下搅拌16h。将混合物在75℃下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物倒入水(20mL)中并搅拌2min。将水相用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的标题化合物(440mg，粗品)。MS(ESI)：C18H25N3O4的质量计算值347.2；m/z实测值，348.1[M+H]+。
步骤I.(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4', 3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002083
-11(12H)-甲酸酯。
在30℃下在N2下，向(R)-叔丁基10-(羟基亚甲基)-3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002084
-2(7H)-甲酸酯(200mg，575.69umol)在MeOH(30mL)中的溶液中一次性添加NH2OH·HCl(240.03mg，3.45mmol)。将混合物在30℃下搅拌16h。将混合物倒入水(100mL)中并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化以得到呈浅黄色油状物的标题化合物(120mg，348.42umol，60.52％产率)。MS(ESI)：C18H24N4O3的质量计算值344.2；m/z实测值，345.1[M+H]+。
中间体8：(11R)-叔丁基11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002093
-12(13H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002091
向(R)-叔丁基3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并-[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002094
-2(7H)-甲酸酯(160mg，500.94umol，中间体7中步骤G的产物)和丙-2-炔-1-胺(137.96mg，2.50mmol，160.41uL)在EtOH(2mL)中的溶液中添加NaAuCl4·2H2O(49.82mg，125.24umol)。将混合物在80℃下搅拌72h。将残余物用水(10mL)稀释，并且将混合物用EtOAc(10mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至2/1)纯化，以给出呈黄色油状物的标题化合物(90mg，190.44umol，38.02％产率，75％纯度)。MS(ESI)：C20H26N4O2的质量计算值354.2；m/z实测值，355.1[M+H]+。
中间体9：(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002095
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002092
在N2下，向(R)-叔丁基10-(羟基亚甲基)-3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002096
-2(7H)-甲酸酯(200mg，575.69umol)在Py(30mL)中的溶液中一次性添加NH2OH·HCl(240.03mg，3.45mmol)。将混合物在115℃下搅拌16h。将混合物在减压下浓缩。将残余物倒入HCl(1N水溶液，100mL)中，并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，以得到呈浅黄色油状物的标题化合物(90mg，261.32umol，45.39％产率)。MS(ESI)：C18H24N4O3的质量计算值344.2；m/z实测值，345.1[M+H]+。
中间体10：叔丁基6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2, 4]-三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002102
-12(13H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002101
步骤A.叔丁基11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1, 5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002103
-2(7H)-甲酸酯。向叔丁基11-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002104
-2-甲酸酯(如在PCT国际申请WO 2018005883，2018年1月4日中所述制备)(250.00mg，816.03umol)在甲苯(5mL)中的溶液中添加劳森试剂(165.03mg，408.02umol)。将混合物加热至110℃持续3h，然后在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(EtOAc)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(258.00mg，800.20umol，98.06％产率)。
步骤B.叔丁基6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三 唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002105
-12(13H)-甲酸酯。向叔丁基11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002106
-2(7H)-甲酸酯(80.00mg，248.12umol)和甲酰肼(74.51mg，1.24mmol)在MeCN(3.00mL)中的溶液中添加Hg(OAc)2(118.61mg，372.18umol)，然后将混合物在20℃下搅拌16h。将混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈无色油状物的标题化合物(100.00mg，粗品)。
中间体11：叔丁基3-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5- a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002112
-12(13H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002111
步骤A.叔丁基11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1, 5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002113
-2(7H)-甲酸酯。以类似于中间体12的方式，在步骤A中使用叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002114
-2(7H)-甲酸酯(如在PCT国际申请WO 2018005883中所述制备)替代(R)-叔丁基3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002115
-2(7H)-甲酸酯制备标题化合物。将标题化合物不经进一步纯化而直接用于下一步骤。
步骤B：叔丁基3-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a] [1,2,4]-三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002116
-12(13H)-甲酸酯。向叔丁基11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002117
-2(7H)-甲酸酯(80.00mg，248.12umol)和乙酰肼(91.90mg，1.24mmol)在MeCN(3.00mL)中的溶液中添加Hg(OAc)2(118.61mg，372.18umol)，然后将混合物在20℃下搅拌16h。将混合物用EtOAc(20mL×3)和水(30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈无色油状物的标题化合物(100.00mg，粗品)。
中间体12：(11R)-叔丁基11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并-[4',3':3,4]吡唑 并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002118
-12(13H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370002121
步骤A.(R)-叔丁基3-甲基-11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3, 4]-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002122
-2(7H)-甲酸酯。向(R)-叔丁基3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002123
-2(7H)-甲酸酯(如在PCT国际申请WO 2018005883中所述制备)(300.00mg，936.36umol)在甲苯(3.00mL)中的溶液中添加劳森试剂(189.36mg，468.18umol)。将混合物加热至110℃持续3h，然后在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝30％至50％)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(270.00mg，650.02umol，69.42％产率，81％纯度)。
步骤B.(11R)-叔丁基11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002124
-12(13H)-甲酸酯。向(R)-叔丁基3-甲基-11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002125
-2(7H)-甲酸酯(100.00mg，297.22umol)和甲酰肼(89.26mg，1.49mmol)在MeCN(2.00mL)中的悬浮液中添加Hg(OAc)2(142.08mg，445.83umol)。将混合物在25℃下搅拌16h，然后用水(50mL)稀释并用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈白色固体的标题化合物(90.00mg，粗品)。MS(ESI)：C17H24N6O2的质量计算值344.2；m/z实测值，345.0[M+H]+。
中间体13：(11R)-叔丁基3,11-二甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]- 吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002126
-12(13H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002131
向(R)-叔丁基3-甲基-11-硫代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002133
-2(7H)-甲酸酯(中间体12，步骤A的产物，80.00mg，237.78umol)和乙酰肼(88.07mg，1.19mmol)在MeCN(3.00mL)中的悬浮液中添加Hg(OAc)2(113.66mg，356.67umol)。将混合物在25℃下搅拌16h，然后用水(50mL)稀释并用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈白色固体的标题化合物(90.00mg，粗品)。
中间体14：叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002134
-2(7H)-甲酸酯
Figure BDA0003377545370002132
步骤A.5-叔丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二 甲酸酯。在N2下，向5-叔丁基3-乙基6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(如在WO 2018005881，公开日期2018年1月4日中所述制备)(5.00g，16.93mmol)和3-溴丙-1-烯(3.07g，25.40mmol)在DMF(50.00mL)中的混合物中一次性添加Cs2CO3(13.79g，42.33mmol)。将混合物在50℃下搅拌12h。将混合物倒入水(50mL)中并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝15/1至5/1)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(2.70g，7.89mmol，46.60％产率，98％纯度)。MS(ESI)：C17H25N3O4的质量计算值335.1；m/z实测值，336.0[M+H]+。
步骤B.叔丁基2-烯丙基-3-(羟基甲基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5 (4H)-甲酸酯。在-40℃下在N2下，向5-叔丁基3-乙基2-烯丙基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯(1.00g，2.98mmol)在THF(30.00mL)中的混合物中一次性添加LiAlH4(169.72mg，4.47mmol)。将混合物在20℃下搅拌1h。将混合物用HCl(1N水溶液，10mL)淬灭。将水相用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇＝100/1至20/1)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(780.00mg，2.66mmol，89.22％产率)。MS(ESI)：C15H23N3O3的质量计算值293.1；m/z实测值，294[M+H]+。
步骤C.叔丁基2-烯丙基-3-甲酰基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲 酸酯。在N2下，向叔丁基2-烯丙基-3-(羟基甲基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(780.00mg，2.66mmol)在DCM(30.00mL)中的混合物中一次性添加MnO2(2.31g，26.60mmol)。将混合物在45℃下搅拌12h。添加另外的MnO2(2.31g，26.60mmol)，并且将混合物在45℃下再搅拌24h。此时，将混合物过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至3/1)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(450.00mg，1.54mmol，58.07％产率，100％纯度)。MS(ESI)：C15H21N3O3的质量计算值291.1；m/z实测值，292[M+H]+。
步骤D.叔丁基2-烯丙基-3-(1-羟基丁-3-烯-1-基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c] 吡啶-5(4H)-甲酸酯。在-40℃下在N2下，向叔丁基2-烯丙基-3-甲酰基-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(800.00mg，2.75mmol)在THF(5.00mL)中的混合物中一次性添加烯丙基(溴)镁(1M，8.24mL)。将混合物在-40℃下搅拌2h。将混合物倒入水(20mL)中并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(750.00mg，2.16mmol，78.53％产率，96％纯度)。MS(ESI)：C18H27N3O3的质量计算值333.2；m/z实测值，334[M+H]+。
步骤E.叔丁基11-羟基-3,4,10,11-四氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a] 氮杂
Figure BDA0003377545370002151
-2(7H)-甲酸酯。在N2下，向叔丁基2-烯丙基-3-(1-羟基丁-3-烯-1-基)-6,7-二氢-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯(750.00mg，2.25mmol)在DCM(1.20L)中的混合物中一次性添加苯亚甲基-[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-亚基]-二氯-钌；三环己基磷烷(381.94mg，449.88umol)。将混合物在30℃下搅拌12h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4/1至1/1)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(650.00mg，2.02mmol，89.87％产率，95％纯度)。MS(ESI)：C16H23N3O3的质量计算值305.1；m/z实测值，306[M+H]+。
步骤F.叔丁基11-羟基-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1, 5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002152
-2(7H)-甲酸酯。在N2下，向叔丁基11-羟基-3,4,10,11-四氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002153
-2(7H)-甲酸酯(150.00mg，491.21umol)在MeOH(5.00mL)中的溶液中添加Pd/C(20.00mg，10％)。将悬浮液在减压下脱气并用H2吹扫几次。将混合物在30℃下在H2(15psi)下搅拌12h。将反应混合物过滤，并且将滤液浓缩以得到呈黄色固体的标题化合物(140.00mg，455.45umol，92.72％产率)。MS(ESI)：C16H25N3O3的质量计算值307.1；m/z实测值，308[M+H]+。
步骤G.叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1, 5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002154
-2(7H)-甲酸酯。在N2下，向叔丁基11-羟基-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002155
-2(7H)-甲酸酯(2.00g，6.51mmol)在MeCN(80.00mL)中的混合物中一次性添加NMO(3.05g，26.04mmol，2.75mL)和TPAP(457.31mg，1.30mmol)。将混合物在30℃下搅拌12h。将混合物过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4/1至1/1)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(1.60g，5.24mmol，80.48％产率)。MS(ESI)：C16H23N3O3的质量计算值305.1；m/z实测值，306[M+H]+。
中间体15：叔丁基6,7,10,11-四氢-5H-哒嗪并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]-吡唑 并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002162
-12(13H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002161
步骤A.叔丁基10-烯丙基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4] 吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002163
-2(7H)-甲酸酯。在-78℃下，向叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002164
-2(7H)-甲酸酯(中间体14，300.00mg，982.41umol)和HMPA(440.12mg，2.46mmol，431.49uL)在THF(8.00mL)中的溶液中添加LDA(6mL，1.25M，在-65℃下，通过添加n-BuLi(2.5M，5.00mL)，由THF(3.00mL)中的N-异丙基丙-2-胺(1.22g，12.05mmol，1.69mL)新鲜制备)，然后温热至-30℃，持续0.5h。在-78℃下添加3-溴丙-1-烯(594.26mg，4.91mmol)。将混合物温热至30℃并再搅拌1h。将反应用HCl(1N水溶液，10mL)淬灭并用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，并且进一步通过RP HPLC(条件A)纯化，以得到呈无色油状物的叔丁基10-烯丙基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002165
-2(7H)-甲酸酯(31.00mg，89.74umol，9.14％产率)。MS(ESI)：C19H27N3O3的质量计算值345.2；m/z实测值，346.1[M+H]+。
步骤B.叔丁基11-氧代-10-(2-氧代乙基)-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4', 3':3,4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002171
-2(7H)-甲酸酯。在0℃下在N2下，向叔丁基10-烯丙基-11-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]氮杂
Figure BDA0003377545370002172
-2-甲酸酯(60.00mg，173.70umol)在THF(4.00mL)和H2O(4.00mL)中的混合物中一次性添加OsO4(13.25mg，52.11umol，2.70uL)和NaIO4(148.61mg，694.80umol，38.50uL)。将混合物在20℃下搅拌10h。将混合物倒入水(10mL)中并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(5mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的标题化合物(60.35mg，粗品)。MS(ESI)：C18H25N3O4的质量计算值347.1；m/z实测值，348.1[M+H]+。
步骤C.叔丁基4a,5,6,7,10,11-六氢-4H-哒嗪并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002173
-12(13H)-甲酸酯。在0℃下在N2下，向叔丁基11-氧代-10-(2-氧代乙基)-3,4,7,8,9,10-六氢-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b]氮杂
Figure BDA0003377545370002174
-2-甲酸酯(60.35mg，173.71umol)在EtOH(10.00mL)中的混合物中一次性添加N2H4·H2O(15.35mg，260.57umol，14.90uL，85％纯度)。将混合物在20℃下搅拌2h。将反应混合物直接用于下一步骤。MS(ESI)：C18H25N5O2的质量计算值343.2；m/z实测值，344.1[M+H]+。
步骤D.叔丁基6,7,10,11-四氢-5H-哒嗪并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1, 5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002175
-12(13H)-甲酸酯。在N2下，向来自步骤C的反应混合物中添加DDQ(47.32mg，208.46umol)。将混合物在0℃下搅拌2h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝10/1)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(17.00mg，48.95umol，28.18％产率，98.3％纯度)。MS(ESI)：C18H23N5O2的质量计算值341.1；m/z实测值，342[M+H]+。
中间体16：叔丁基4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002176
-11(2H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002181
步骤A.叔丁基10-(羟基亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4', 3':3,4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002182
-2(7H)-甲酸酯。在75℃下，将叔丁基11-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢-1H-吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002183
-2-甲酸酯(200.00mg，654.94umol，中间体14)在DMF-DMA(18.00g，151.07mmol，20.00mL)中的混合物搅拌12h。将混合物在75℃下再搅拌24h，然后在减压下浓缩。将残余物倒入水(20mL)中并搅拌2min。将水相用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的标题化合物(210.00mg，629.91umol，96.18％产率)。MS(ESI)：C17H23N3O4的质量计算值333.1；m/z实测值，334.1[M+H]+。
步骤B.叔丁基4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1, 5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002184
-11(2H)-甲酸酯。在30℃下在N2下，向叔丁基10-(羟基亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002185
-2(7H)-甲酸酯(80.00mg，239.97umol)在MeOH(5.00mL)中的混合物中一次性添加N2H4·H2O(28.27mg，479.93umol，27.44uL，85％纯度)。将混合物在30℃下搅拌10h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(54.00mg，163.93umol，68.31％产率)。MS(ESI)：C17H23N5O2的质量计算值329.1；m/z实测值，330.1[M+H]+。
中间体17：叔丁基6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并 [1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002186
-12(13H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002191
以类似于中间体8的方式，用叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002193
-2(7H)-甲酸酯取代(R)-叔丁基3-甲基-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002194
-2(7H)-甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C19H24N4O2的质量计算值340.2；m/z实测值，341.0[M+H]+。
中间体18：叔丁基2-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3, 4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002195
-11(2H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002192
在30℃下在N2下，向叔丁基10-(羟基亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002196
-2(7H)-甲酸酯(130.00mg，389.95umol，步骤A的中间体15产物)在MeOH(5.00mL)中的混合物中一次性添加甲基肼(89.82mg，779.90umol，102.07uL)。将混合物在30℃下搅拌10h。将混合物在减压下浓缩，然后通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化以得到100mg的粗产物，将该粗产物通过RP HPLC(条件A)进一步纯化以得到呈黄色固体的标题化合物叔丁基2-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002197
-11(2H)-甲酸酯(70.00mg，203.83umol，52.27％产率)，和呈黄色固体的另一个区域异构体叔丁基1-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002198
-11(1H)-甲酸酯(20.00mg，58.24umol，14.93％产率)。MS(ESI)：C18H25N5O2的质量计算值343.2；m/z实测值，344.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.19(s,1H),4.63-4.77(m,2H),4.38-4.53(m,2H),4.06-4.20(m,1H),3.84-3.94(m,3H),3.84-3.94(m,3H),3.64-3.67(m,1H),3.72(br s,1H),2.83-2.96(m,2H),2.76(br t,J＝5.58Hz,2H),2.13-2.30(m,2H),1.50(s,9H)。
中间体19：叔丁基1-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3, 4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002203
-11(1H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002201
将标题化合物通过RP HPLC(条件A)从中间体16中分离。MS(ESI)：C18H25N5O2的质量计算值343.2；m/z实测值，344.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43(s,1H),4.43-4.65(m,2H),4.11-4.25(m,2H),3.91(s,3H),3.76(br s,2H),2.82(br t,J＝5.58Hz,2H),2.71(t,J＝7.47Hz,2H),2.22(br dd,J＝4.96,6.71Hz,2H),1.48(s,8H)。
中间体20：叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002204
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002202
在N2下，向叔丁基10-(羟基亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002205
-2(7H)-甲酸酯(80.00mg，239.97umol，步骤A的中间体15产物)在Py(5.00mL)中的混合物中一次性添加NH2OH·HCl(100.05mg，1.44mmol)。将混合物在115℃下搅拌12h，然后在减压下浓缩。将残余物倒入HCl(1N水溶液，10mL)中，并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，以得到呈黄色固体的标题化合物(48.00mg，116.23umol，48.44％产率，80％纯度)。MS(ESI)：C17H22N4O3的质量计算值330.1；m/z实测值，331.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17-8.37(m,1H),4.70(br s,2H),4.38-4.57(m,2H),3.74(br s,2H),3.50(s,3H),2.87-3.03(m,2H),2.65-2.82(m,2H),2.16-2.39(m,2H),1.50(s,9H)。
中间体21：叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑 并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002212
-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002211
在30℃下在N2下，向叔丁基10-(羟基亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002213
-2(7H)-甲酸酯(70.00mg，209.97umol，步骤A的中间体15产物)在MeOH(5.00mL)中的混合物中一次性添加NH2OH·HCl(87.55mg，1.26mmol)。将混合物在30℃下搅拌12h。将混合物倒入水(10mL)中并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，以得到呈黄色油状物的标题化合物(40.00mg，106.54umol，50.74％产率，88％纯度)。MS(ESI)：C17H22N4O3的质量计算值330.1；m/z实测值，331.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),4.78(br s,2H),4.40-4.57(m,2H),3.74(br s,2H),2.86(t,J＝5.96Hz,2H),2.77(br s,2H),2.19-2.31(m,2H),1.50(s,9H)。
中间体22：叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-环庚[3,4]吡唑并-[1,5-a] 吡嗪-2(7H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002221
步骤A.二乙基1-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-1H-吡唑-3,5-二甲酸酯。
向二乙基1H-吡唑-3,5-二甲酸酯(45g，212.06mmol)和Cs2CO3(82.91g，254.47mmol)在DMF(1000mL)中的溶液中添加叔丁基N-(2-溴乙基)甲酸酯(50.85g，226.91mmol)。将混合物在15℃下在N2气氛下搅拌16h。将反应混合物用水(500mL)稀释并用EtOAc(700mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(1000mL×3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以给出呈白色固体的标题化合物(67g，粗品)，将其直接用于下一个步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35(s,1H),4.82-4.74(m,3H),4.42-4.33(m,4H),3.63-3.62(m,2H),1.46-1.38(m,15H)。
步骤B.乙基4-氧代-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸酯。向二乙基1-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]吡唑-3,5-二甲酸酯(67g，188.53mmol)在MeOH(100mL)中的溶液中添加HCl/MeOH(4M，100mL)。将混合物在15℃下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，以给出呈白色固体的粗产物(54.9g粗品，HCl盐)。向所得固体中添加二噁烷(560mL)，随后添加Na2CO3(39.89g，376.36mmol)在水(560mL)中的溶液。将混合物在15℃下搅拌16h。将反应混合物用EtOAc(500mL×2)萃取，随后用DCM/MeOH＝20/1(500mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物在石油醚/EtOAc(v/v＝10/1，150mL)的混合物中研磨，然后过滤。将收集的固体干燥以给出呈白色固体的标题化合物(34g，含有约60％mol甲酯)。
步骤C.叔丁基2-(羟基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。在-30℃下在N2气氛下，向叔丁基2-(羟基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯(32.00g，含有约60％mol甲酯)在THF(640mL)中的溶液中添加LAH(6.6g，173.91mmol)，然后将混合物加热至75℃持续16h。在-30℃下，将LAH(6.6g，173.89mmol)添加至混合物中。将反应混合物加热至75℃持续16h。将反应混合物通过添加酒石酸钠钾四水合物饱和水溶液(30mL)淬灭，并搅拌1h并且过滤。向滤液中添加Boc2O(50.12g，229.67mmol，52.76mL)，并在15℃下搅拌16h。将反应混合物用水(600mL)稀释并用EtOAc(300mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化，以给出呈白色固体的标题产物(33g，130.28mmol，85.09％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.04(s,1H),4.62-4.61(m,4H),4.13-4.10(m,2H),3.86-3.84(m,2H),1.47(s,9H)。
步骤D.叔丁基2-(羟基甲基)-3-碘-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。向叔丁基2-(羟基甲基)-6,7-二氢-4H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸酯(23g，90.80mmol)在MeCN(300mL)中的溶液中缓慢添加NIS(30.64g，136.20mmol)，并且将混合物在15℃下在N2气氛下搅拌16h。将混合物用水(400mL)稀释，并用EtOAc(400mL)萃取。将有机相用饱和Na2S2O3(400mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物用石油醚/EtOAc＝20/1(300mL)冲洗，并搅拌0.5h。将混合物过滤。将收集的固体在减压下干燥，以给出呈黄色固体的标题化合物(29.5g，77.80mmol，85.68％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.61(s,2H),4.48(s,2H),4.14(m,2H),3.86(m,2H)。
步骤E.叔丁基2-甲酰基-3-碘-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。向叔丁基2-(羟基甲基)-3-碘-6,7-二氢-4H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸酯(9g，23.73mmol)在DCM(180mL)中的溶液中添加戴斯-马丁(15.10g，35.60mmol，11.02mL)，并且将混合物在15℃下搅拌2h。将混合物过滤，并且将滤液用DCM(300mL)稀释，并用盐水(300mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，以给出呈黄色固体的标题化合物(7.5g，19.88mmol，83.78％产率)。
步骤F.叔丁基3-碘-2-乙烯基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-5(4H)-甲酸酯。
在-10℃下在N2气氛下，向甲基(三苯基)溴化磷(9.23g，25.85mmol)在THF(50mL)中的溶液中添加NaHMDS(1M，25.85mL)，随后0.5h后，添加叔丁基2-甲酰基-3-碘-6,7-二氢-4H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸酯(7.5g，19.88mmol)在THF(30mL)中的溶液，并且将混合物在15℃下搅拌2h。将混合物用盐水(120mL)淬灭，并用EtOAc(120mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，以给出呈无色油状物的标题化合物(2.8g，7.46mmol)。
步骤G.叔丁基3-(1-羟基戊-4-烯-1-基)-2-乙烯基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡 嗪-5(4H)-甲酸酯。在-10℃下在N2气氛下，向叔丁基3-碘-2-乙烯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸酯(1.8g，4.80mmol)在THF(30mL)中的溶液中添加i-PrMgCl(2M，3.60mL)。将混合物在10℃下搅拌1h，然后添加戊-4-烯醛(605.31mg，7.20mmol)在THF(3mL)中的溶液。将反应混合物在15℃下搅拌1.5h。将混合物用饱和NH4Cl(100mL)淬灭并用EtOAc(100mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，以给出呈无色油状物的标题化合物(1.0g，3.00mmol，62.52％产率)。
步骤H.叔丁基11-羟基-3,4,10,11-四氢-1H-环庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-2 (9H)-甲酸酯。在N2气氛下，向叔丁基3-(1-羟基戊-4-烯基)-2-乙烯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-5-甲酸酯(1.3g，3.90mmol)在DCM(800mL)中的溶液中添加[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)咪唑烷-2-亚基]-二氯-[(2-异丙氧基苯基)亚甲基]钌(244.32mg，389.89umol)，并且将混合物在40℃下搅拌16h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，以给出呈棕色固体的标题化合物(0.79g，2.59mmol，66.35％产率)。MS(ESI)：C16H23N3O3的质量计算值305.2；m/z实测值，306.1[M+H]+。
步骤I.叔丁基11-氧代-3,4,10,11-四氢-1H-环庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-2 (9H)-甲酸酯。将叔丁基11-羟基-1,3,4,9,10,11-六氢环庚-[2,3]吡唑并[2,4-a]吡嗪-2-甲酸酯(570mg，1.87mmol)、NMO(874.65mg，7.47mmol，787.97uL)和TPAP(131.19mg，373.32umol)在MeCN(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫(3x)，然后将混合物在15℃下在N2气氛下搅拌1.5h。将混合物倒入冰水(50mL)中并搅拌1min。将水相用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(60mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化，以给出呈黑棕色固体的标题化合物(405mg，1.34mmol，71.52％产率)。MS(ESI)：C16H21N3O3的质量计算值303.2；m/z实测值，304.1[M+H]+。
步骤J.叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-环庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪- 2(7H)-甲酸酯。向叔丁基11-氧代-3,4,9,10-四氢-1H-环庚[2,3]-吡唑并[2,4-a]吡嗪-2-甲酸酯(0.405g，1.34mmol)在EtOH(30mL)/MeOH(3mL)中的溶液中添加Pd/C(0.08g，1.34mmol，10％纯度)，并且将混合物在15℃下在H2(15Psi)气氛下搅拌1h。将混合物过滤，将滤液在减压下浓缩以给出呈棕色固体的标题化合物(0.39g，1.28mmol，95.66％产率)，将其直接用于下一个步骤。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.77(s,2H),4.05-4.03(m,2H),3.81-3.79(m,2H),2.89-2.86(m,2H),2.62-2.59(m,2H),1.89-1.82(m,4H),1.44(s,9H)。
中间体23：叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]- 吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002261
步骤A.叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-环 庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-2(7H)-甲酸酯。将叔丁基11-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢-1H-环庚[2,3]吡唑并[2,4-a]吡嗪-2-甲酸酯(0.08g，261.98umol)在DMF-DMA(3.59g，30.11mmol，4mL)中的溶液加热至115℃，持续56h。将混合物在减压下浓缩。将残余物用EtOAc(30mL)稀释并用盐水(30mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以给出呈黄色固体的标题化合物(0.09g，粗品)，将其直接用于下一个步骤。
步骤B.叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑 并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯。
将叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-环庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-2(7H)-甲酸酯(0.09g，249.69umol)和羟胺盐酸盐(104.11mg，1.50mmol)在MeOH(3mL)中的混合物在20℃下搅拌16h。将混合物用EtOAc(40mL)稀释并用盐水(40mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/EtOAc)纯化，以给出呈无色油状物的标题化合物(0.051g，140.47umol，56.26％产率，91％纯度)。MS(ESI)：C17H22N4O3的质量计算值330.2；m/z实测值，331.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(s,1H),4.97(s,2H),4.16-4.13(m,2H),3.93-3.90(m,2H),3.02-2.99(m,2H),2.79-2.76(m,2H),2.05-2.00(m,2H),1.51(s,9H)。
中间体24：叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4] 吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯。
Figure BDA0003377545370002271
步骤A.叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-环 庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-2(7H)-甲酸酯。将叔丁基11-氧代-3,4,7,8,9,10-六氢-1H-环庚[2,3]吡唑并[2,4-a]吡嗪-2-甲酸酯(0.34g，1.11mmol)和TDAM(1.29g，8.91mmol，1.54mL)在甲苯(15mL)中的溶液加热至115℃，持续16h。添加TDAM(646.87mg，4.45mmol)，并且将混合物加热至115℃，再持续16h。添加另外的TDAM(323.43mg，2.23mmol)，并且将混合物加热至115℃，再持续16h。此时，将混合物用EtOAc(60mL)稀释并用盐水(50mL×3)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩，以给出呈黄色固体的标题化合物(0.385g，粗品)，将其直接用于下一个步骤。
步骤B.叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑 并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯。
将叔丁基10-((二甲基氨基)亚甲基)-11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-环庚[3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-2(7H)-甲酸酯(0.235g，651.96umol)和羟胺盐酸盐(271.83mg，3.91mmol)在吡啶(12mL)中的混合物在115℃下搅拌24h。将混合物浓缩以给出黄色残余物，将该残余物用EtOAc(50mL)稀释并用HCl(1M水溶液，50mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(条件A)纯化，以给出呈无色油状物的区域异构体化合物叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯(中间体2，0.07g，211.88umol，32.50％产率)，和呈无色油状物的标题化合物(0.037g，111.99umol，17.18％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,1H),4.90(s,2H),4.18-4.15(m,2H),3.93-3.90(m,2H),3.07-3.04(m,2H),2.85-2.83(m,2H),2.01-1.98(m,2H),1.51(s,9H)。
实例1a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c] 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002282
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002281
步骤A.5-亚甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3, 4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002283
。
向叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并-[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002284
-11(12H)-甲酸酯(中间体1，0.06g，175.24umol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(770.00mg，6.75mmol，0.5mL)。将混合物在20℃下搅拌1h。将反应混合物在减压下浓缩，以给出呈黄色油状物的标题化合物(63mg，粗品，TFA盐)。MS(ESI)：C13H14N4O的质量计算值242.17；m/z实测值，243.1[M+H]+。
步骤B.N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]- 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002285
-11(12H)-甲酰胺。
向5-亚甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并-[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002286
(63mg，182.43umol，TFA盐)和苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯(44mg，154.55umol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TEA(184.60mg，1.82mmol，253.92uL)。将混合物在25℃下搅拌12h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过RP HPLC(条件A)纯化，以给出呈白色固体的标题化合物(40.58mg，99.34umol，54.46％产率，99％纯度)。MS(ESI)：C21H17FN6O2的质量计算值404.1；m/z实测值，405.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.36(s,1H),7.77(dd,J＝2.8,5.6Hz,1H),7.65-7.61(m,1H),7.13(t,J＝8.8Hz,1H),6.82(s,1H),5.39(s,1H),5.31(s,1H),4.97(s,2H),4.73(s,2H),3.90(t,J＝5.6Hz,2H),3.66(s,2H),2.89(t,J＝5.6Hz,2H)。
实例2a：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并 [3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002293
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002291
以类似于实例1的方式，在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C21H17F4N5O2的质量计算值447.13；m/z实测值，448.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.36(s,1H),7.68(dd,J＝2.4,6.0Hz,1H),7.64-7.59(m,1H),7.13(t,J＝9.2Hz,1H),6.72(s,1H),5.39(s,1H),5.31(s,1H),4.98(s,2H),4.73(s,2H),3.91(t,J＝5.6Hz,2H),3.66(s,2H),2.89(t,J＝5.6Hz,2H)。
实例3a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并-[3, 4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002294
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002292
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]-氮杂
Figure BDA0003377545370002295
-11(12H)-甲酸酯(中间体2)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002296
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19FN6O3的质量计算值422.15；m/z实测值，423.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.35(s,1H),7.78(dd,J＝2.8,5.6Hz,1H),7.67-7.63(m,1H),7.14(t,J＝8.8Hz,1H),6.90(s,1H),4.75-4.68(m,3H),4.46-4.37(m,1H),3.93-3.87(m,2H),3.74-3.66(m,2H),3.14-3.08(m,1H),2.90-2.80(m,3H),2.45(d,J＝6.4Hz,1H)。
实例4a：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑 并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002302
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002301
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基5-(羟基甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]-氮杂
Figure BDA0003377545370002303
-11(12H)-甲酸酯(中间体2)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002304
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19F4N5O3的质量计算值465.1；m/z实测值，466.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.34(s,1H),7.69(dd,J＝2.4,6.0Hz,1H),7.65-7.60(m,1H),7.13(t,J＝9.6Hz,1H),6.77(s,1H),4.76-4.67(m,3H),4.46-4.37(m,1H),3.93-3.87(m,2H),3.75-3.65(m,2H),3.15-3.07(m,1H),2.90-2.78(m,3H),2.50-2.40(m,1H)。
实例5a：(5S*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四 氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002305
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002311
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(5S*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002313
-11(12H)-甲酸酯(中间体3)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002314
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C23H21F3N6O3的质量计算值486.2；m/z实测值，487.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.35(s,1H),7.78(dd,J＝2.8,5.6Hz,1H),7.66-7.62(m,1H),7.14(t,J＝8.8Hz,1H),6.80(s,1H),6.03-5.70(m,1H),4.79-4.72(m,2H),4.70-4.66(m,1H),4.40-4.34(m,1H),3.93-3.88(m,2H),3.73-3.63(m,2H),3.60(d,J＝6.4Hz,2H),3.10-3.05(m,1H),2.91-2.84(m,3H),2.59-2.48(m,1H)。
实例6a：(5S*)-5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5,6, 9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002315
-11(12H)-甲酰 胺。
Figure BDA0003377545370002312
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(5S*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002316
-11(12H)-甲酸酯(中间体3)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002322
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C23H21F6N5O3的质量计算值529.2；m/z实测值，530.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.35(s,1H),7.69(dd,J＝2.8,6.0Hz,1H),7.66-7.59(m,1H),7.14(t,J＝9.2Hz,1H),6.73(s,1H),6.03-5.71(m,1H),4.80-4.73(m,2H),4.70-4.66(m,1H),4.40-4.34(m,1H),3.96-3.87(m,2H),3.71-3.63(m,2H),3.60(d,J＝6.4Hz,2H),3.10-3.05(m,1H),2.91-2.84(m,3H),2.60-2.48(m,1H)。
实例7a：(5R*)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四 氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002323
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002321
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(5R*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002324
-11(12H)-甲酸酯(中间体4)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002325
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C23H21F3N6O3的质量计算值486.2；m/z实测值，487.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.36(s,1H),7.79(dd,J＝2.8,5.6Hz,1H),7.68-7.64(m,1H),7.14(t,J＝8.8Hz,1H),6.95(s,1H),6.02-5.71(m,1H),4.76-4.66(m,3H),4.40-4.34(m,1H),3.91(q,J＝5.6Hz,2H),3.71-3.63(m,2H),3.60(d,J＝6.4Hz,2H),3.10-3.06(m,1H),2.92-2.84(m,3H),2.59-2.49(m,1H)。
实例8a：(5R*)-5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5,6, 9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002333
-11(12H)-甲酰 胺。
Figure BDA0003377545370002331
以类似于实例1的方式制备标题化合物，除了在步骤A中使用(5R*)-叔丁基5-((2,2-二氟乙氧基)甲基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]-吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002334
-11(12H)-甲酸酯(中间体4)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002335
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)外，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)-苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯。MS(ESI)：C23H21F6N5O3的质量计算值529.2；m/z实测值，530.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.35(s,1H),7.70(dd,J＝2.8,6.0Hz,1H),7.66-7.60(m,1H),7.13(t,J＝9.2Hz,1H),6.85(s,1H),6.03-5.70(m,1H),4.77-4.64(m,3H),4.40-4.34(m,1H),3.94-3.88(m,2H),3.73-3.63(m,2H),3.60(d,J＝6.4Hz,2H),3.13-3.05(m,1H),2.92-2.83(m,3H),2.54(s,1H)。
实例9a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]- 吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002336
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002332
以类似于实例1的方式制备标题化合物，除了在步骤A中使用叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002342
-11(12H)-甲酸酯(中间体5)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002343
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)。MS(ESI)：C21H17FN6O2的质量计算值404.1；m/z实测值，405.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.22(s,1H),7.78(dd,J＝2.8,5.4Hz,1H),7.64-7.60(m,1H),7.15(t,J＝8.8Hz,1H),6.68(s,1H),5.42(s,1H),5.36(s,1H),4.90(s,2H),4.81(s,2H),3.88(t,J＝5.6Hz,2H),3.60(s,2H),2.88(t,J＝5.6Hz,2H)。
实例10a：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并 [5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002344
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002341
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002345
-11(12H)-甲酸酯(中间体5)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002346
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C21H17F4N5O2的质量计算值447.13；m/z实测值，448.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.22(s,1H),7.69(dd,J＝2.8,6.0Hz,1H),7.64-7.59(m,1H),7.14(t,J＝9.6Hz,1H),6.63(s,1H),5.42(s,1H),5.36(s,1H),4.90(s,2H),4.82(s,2H),3.89(t,J＝5.6Hz,2H),3.60(s,2H),2.88(t,J＝5.6Hz,2H)。
实例11a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡 啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002347
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002351
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基5-羟基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002353
-11(12H)-甲酸酯(中间体6)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002354
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C20H17FN6O3的质量计算值408.1；m/z实测值，409[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ＝8.63(s,1H),7.83(dd,J＝2.8,5.6Hz,1H),7.72(ddd,J＝2.8,4.8,9.2Hz,1H),7.28(t,J＝9.2Hz,1H),4.81(s,2H),4.66-4.56(m,2H),4.40(q,J＝5.2Hz,1H),3.88(t,J＝5.6Hz,2H),3.14(d,J＝5.2Hz,2H),2.86(t,J＝5.7Hz,2H)。
实例12a：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3, 4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002355
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002352
在N2下，向N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002356
-11(12H)-甲酰胺(45mg，98.57umol)在MeOH(2mL)中的溶液中添加Pd-C(10％，4mg)。将悬浮液在减压下脱气并用H2吹扫几次。将混合物在H2(15psi)下在25℃下搅拌10min。将反应混合物过滤并在真空在浓缩。将残余物通过RP HPLC(条件A)纯化，以给出呈白色固体的N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002362
-11(12H)-甲酰胺(24.11mg，53.11umol，53.88％产率，99％纯度)。MS(ESI)：C21H19F4N5O2的质量计算值449.2；m/z实测值，450.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.31(s,1H),7.70(dd,J＝2.8,6.0Hz,1H),7.65-7.60(m,1H),7.14(t,J＝9.6Hz,1H),6.75(s,1H),4.75(d,J＝3.2Hz,2H),4.55-4.52(m,1H),4.32-4.27(m,1H),3.94-3.88(m,2H),3.04-3.00(m,1H),2.88(t,J＝5.6Hz,2H),2.76-2.69(m,1H),2.44(d,J＝6.8Hz,1H),1.16(d,J＝7.2Hz,3H)。
实例13a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡 啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002363
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002361
以类似于实例12的方式，使用N-(3-氰基-4-氟苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002364
-11(12H)-甲酰胺(实例1)替代N-(4-氟-3-(三氟-甲基)苯基)-5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并-[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002365
-11(12H)-甲酰胺制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19FN6O2的质量计算值406.2；m/z实测值，407.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.32(s,1H),7.79(dd,J＝2.8,5.6Hz,1H),7.68-7.61(m,1H),7.14(t,J＝8.8Hz,1H),6.78(s,1H),4.74(d,J＝3.2Hz,2H),4.55-4.52(m,1H),4.33-4.27(m,1H),3.94-3.88(m,2H),3.04-3.00(m,1H),2.88(t,J＝5.6Hz,2H),2.76-2.69(m,1H),2.44(d,J＝5.6Hz,1H),1.16(d,J＝7.2Hz,3H)。
实例14a：(10R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并 [5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002366
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002371
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002373
-11(12H)-甲酸酯(中间体7)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002374
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19FN6O2的质量计算值406.2；m/z实测值，407.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.20-8.19(m,1H),7.84-7.79(m,1H),7.67-7.59(m,1H),7.17(d,J＝8.7Hz,1H),6.62-6.58(m,1H),5.17-5.11(m,1H),4.94(s,1H),4.60(d,J＝15.0Hz,1H),4.51(s,2H),3.09-3.00(m,1H),2.91-2.86(m,2H),2.72-2.65(m,1H),2.32-2.24(m,2H),1.22-1.19(m,3H)。
实例15a：(10R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁 唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002375
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002372
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002376
-11(12H)-甲酸酯(中间体7)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002377
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19F4N5O2的质量计算值449.2；m/z实测值，450.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.20(s,1H),7.75-7.70(m,1H),7.68-7.60(m,1H),7.20-7.12(m,1H),6.63-6.57(m,1H),5.22-5.11(m,1H),4.96(s,1H),4.62(d,J＝15.2Hz,1H),4.52(t,J＝5.0Hz,2H),3.11-3.01(m,1H),2.90(s,2H),2.74-2.65(m,1H),2.35-2.23(m,2H),1.21(d,J＝6.9Hz,3H)。
实例16a：(11R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并- [2,3-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002382
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002381
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(11R)-叔丁基11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002383
-12(13H)-甲酸酯(中间体8)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002384
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C23H21FN6O的质量计算值416.2；m/z实测值，417.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.60(dd,J＝1.6,4.8Hz,1H),7.73(dd,J＝2.8,5.4Hz,1H),7.70-7.63(m,2H),7.25(dd,J＝4.8,7.6Hz,1H),7.13(t,J＝8.7Hz,1H),6.83(s,1H),5.19-5.05(m,1H),4.97(d,J＝15.3Hz,1H),4.54(d,J＝15.3Hz,1H),4.32-4.22(m,2H),3.10(dd,J＝5.9,15.8Hz,1H),2.81(t,J＝6.9Hz,2H),2.73(d,J＝16.3Hz,1H),2.49-2.38(m,2H),1.27(d,J＝6.8Hz,3H)。
实例17a：(11R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡 啶并[2,3-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002392
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002391
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(11R)-叔丁基11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002393
-12(13H)-甲酸酯(中间体8)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002394
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C23H21F4N5O的质量计算值459.2；m/z实测值，460.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.60(dd,J＝1.7,4.8Hz,1H),7.68-7.59(m,3H),7.24(dd,J＝4.8,7.6Hz,1H),7.12(t,J＝9.4Hz,1H),6.73(s,1H),5.15-5.04(m,1H),4.96(d,J＝15.3Hz,1H),4.56(d,J＝15.4Hz,1H),4.28(t,J＝6.8Hz,2H),3.11(dd,J＝6.1,15.5Hz,1H),2.81(t,J＝6.9Hz,2H),2.73(d,J＝15.7Hz,1H),2.47-2.40(m,2H),1.27(d,J＝7.0Hz,3H)。
实例18a：(10R)-N-(3-氰基-4-氟苯基)-10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并- [3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002395
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002401
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002403
-11(12H)-甲酸酯(中间体9)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002404
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19FN6O2的质量计算值406.2；m/z实测值，407.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.32(s,1H),7.81-7.77(m,1H),7.68-7.61(m,1H),7.18-7.10(m,1H),6.76-6.65(m,1H),5.26-5.12(m,1H),4.92-4.78(m,1H),4.64-4.46(m,3H),3.13-2.92(m,3H),2.77-2.63(m,1H),2.32-2.18(m,2H),1.22-1.17(m,3H)。
实例19a：(10R)-N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁 唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002405
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002402
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(10R)-叔丁基10-甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002406
-11(12H)-甲酸酯(中间体9)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002412
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C21H19F4N5O2的质量计算值449.2；m/z实测值，450.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)8.33(s,1H),7.74-7.69(m,1H),7.66-7.60(m,1H),7.14(t,J＝9.5Hz,1H),6.66(s,1H),5.20(t,J＝7.0Hz,1H),4.87(d,J＝15.3Hz,1H),4.61-4.50(m,3H),3.11-2.96(m,3H),2.70(d,J＝15.6Hz,1H),2.32-2.22(m,2H),1.20(d,J＝6.9Hz,3H)。
实例20a：N-(3-氯-4-氟苯基)-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并- [1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002413
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002411
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002414
-12(13H)-甲酸酯(中间体10)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002415
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C18H17ClFN7O的质量计算值401.1；m/z实测值，402[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.19(s,1H),7.65(dd,J＝2.6,6.7Hz,1H),7.29(dd,J＝2.8,4.1Hz,1H),7.00-7.10(m,2H),4.86(s,2H),4.63-4.70(m,2H),4.39-4.45(m,2H),3.91(t,J＝5.8Hz,2H),2.87(t,J＝5.8Hz,2H),2.49-2.59(m,2H)。
实例21a：N-(3-氯-4-氟苯基)-3-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]- 吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002416
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002421
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基3-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002423
-12(13H)-甲酸酯(中间体11)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002424
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C19H19ClFN7O的质量计算值415.1；m/z实测值，416[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.66(dd,J＝2.7,6.6Hz,1H),7.27-7.31(m,1H),7.12(s,1H),7.05(t,J＝8.8Hz,1H),4.83(s,2H),4.61-4.66(m,2H),4.18-4.23(m,2H),3.91(t,J＝5.8Hz,2H),2.85(t,J＝5.7Hz,2H),2.49-2.56(m,5H)。
实例22a：(R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并-[4', 3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002425
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002422
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(11R)-叔丁基11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]-二氮杂
Figure BDA0003377545370002426
-12(13H)-甲酸酯(中间体12)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002427
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C19H19ClFN7O的质量计算值415.1；m/z实测值，416[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.20(s,1H),7.67(dd,J＝2.6,6.5Hz,1H),7.28-7.31(m,1H),7.06(t,J＝8.8Hz,1H),6.96(br s,1H),5.25(quin,J＝6.5Hz,1H),5.00(d,J＝15.8Hz,1H),4.58-4.74(m,3H),4.40-4.49(m,2H),3.06(dd,J＝5.9,15.9Hz,1H),2.69(d,J＝15.8Hz,1H),2.55(br d,J＝3.3Hz,2H),1.18(d,J＝7.0Hz,3H)。
实例23a：(11R)-N-(3-氯-4-氟苯基)-11-甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并-[4', 3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002432
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002431
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用(11R)-叔丁基3,11-二甲基-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,2,4]三唑并[3,4-c][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002433
-12(13H)-甲酸酯(中间体13)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002434
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C20H21ClFN7O的质量计算值429.1；m/z实测值，430[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.68(dd,J＝2.7,6.6Hz,1H),7.28-7.32(m,1H),7.06(t,J＝8.8Hz,1H),6.98(s,1H),4.97(m,1H),4.57-4.68(m,3H),4.20-4.25(m,2H),3.05(m,1H),2.68(m,1H),2.54(s,5H),1.17(d,J＝6.9Hz,3H)。
实例24a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-6,7,10,11-四氢-5H-哒嗪并[3,4-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002435
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002441
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-吡唑-3-基)-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002443
-2(7H)-甲酸酯(中间体15)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002444
-2-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C21H18FN7O的质量计算值403.1；m/z实测值，404[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.04(d,J＝5.1Hz,1H),7.75-7.82(m,1H),7.64(ddd,J＝2.8,4.6,9.2Hz,1H),7.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.12(t,J＝8.7Hz,1H),6.90(s,1H),4.89(s,2H),4.40(t,J＝6.5Hz,2H),3.94(t,J＝5.8Hz,2H),2.87-3.00(m,4H),2.44(t,J＝6.5Hz,2H)
实例25a：N-(3-氯-4-氟苯基)-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并-[4', 3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002445
-11(2H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002442
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002446
-11(2H)-甲酸酯(中间体16)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002447
-2-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C19H18ClFN6O的质量计算值400.1；m/z实测值，401[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(dd,J＝2.6,6.4Hz,1H),7.45(s,1H),7.21-7.26(m,1H),7.00-7.08(m,1H),6.63-6.70(m,1H),4.76(s,2H),4.44-4.57(m,2H),3.87(t,J＝5.8Hz,2H),2.92-3.03(m,2H),2.86(t,J＝5.8Hz,2H),2.16-2.30(m,2H)。
实例26a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002453
-11(2H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002451
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002454
-11(2H)-甲酸酯(中间体16)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002455
-2-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C20H18FN7O的质量计算值391.1；m/z实测值，392[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.79-7.85(m,1H),7.71(ddd,J＝2.8,4.7,9.2Hz,1H),7.56(s,1H),7.27(t,J＝9.0Hz,1H),4.80(s,2H),4.39-4.46(m,2H),3.80-3.89(m,2H),2.93-3.02(m,2H),2.80(t,J＝5.7Hz,2H),2.12-2.23(m,2H)。
实例27a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]吡啶并- [4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002456
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002452
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002457
-2(7H)-甲酸酯(中间体17)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002458
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)制备标题化合物。MS(ESI)：C22H19FN6O的质量计算值402.16；m/z实测值，403.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.59(dd,J＝1.6,4.8Hz,1H),7.72(dd,J＝2.8,5.4Hz,1H),7.69-7.63(m,2H),7.27-7.23(m,1H),7.13(t,J＝8.8Hz,1H),6.87(s,1H),4.79(s,2H),4.26(t,J＝6.8Hz,2H),3.91(t,J＝5.8Hz,2H),2.92(t,J＝5.8Hz,2H),2.81(t,J＝6.8Hz,2H),2.46-2.39(m,2H)。
实例28a：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-6,7,10,11-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002462
-12(13H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002461
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基11-氧代-3,4,8,9,10,11-六氢-1H-吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002463
-2(7H)-甲酸酯(中间体17)替代叔丁基5-亚甲基-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002464
-11(12H)-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基(3-氰基-4-氟苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C22H19F4N5O的质量计算值445.2；m/z实测值，446.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.59(dd,J＝1.6,4.8Hz,1H),7.67-7.59(m,3H),7.24(dd,J＝4.8,7.6Hz,1H),7.12(t,J＝9.4Hz,1H),6.74(s,1H),4.79(s,2H),4.26(t,J＝6.8Hz,2H),3.91(t,J＝6.0Hz,2H),2.92(t,J＝6.0Hz,2H),2.81(t,J＝6.8Hz,2H),2.46-2.39(m,2H)。
实例29a：N-(3-氯-4-氟苯基)-2-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]-吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002465
-11(2H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002471
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基2-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002473
-11(2H)-甲酸酯(中间体18)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002474
-2-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C20H20ClFN6O的质量计算值414.1；m/z实测值，415.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(dd,J＝2.6,6.5Hz,1H),7.21-7.26(m,2H),7.06(t,J＝8.8Hz,1H),6.62(s,1H),4.74(s,2H),4.39-4.55(m,2H),3.93(s,3H),3.86(s,2H),2.85(s,4H),2.18(br s,2H)。
实例30a：N-(3-氯-4-氟苯基)-1-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶 并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002475
-11(1H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002472
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基1-甲基-4,5,6,9,10,12-六氢吡唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002476
-11(1H)-甲酸酯(中间体19)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002477
-2-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C20H20ClFN6O的质量计算值414.1；m/z实测值，415.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49-7.56(m,1H),7.44(s,1H),7.14-7.22(m,1H),7.02-7.11(m,1H),6.41(s,1H),4.64(s,2H),4.16-4.25(m,2H),3.94(s,3H),3.84(s,2H),2.91-3.00(m,2H),2.73(s,2H),2.16-2.29(m,2H)。
实例31a：N-(3-氯-4-氟苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并-[4', 3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002483
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002481
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002484
-11(12H)-甲酸酯(中间体20)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002485
-2-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C19H17ClFN5O2的质量计算值401.1；m/z实测值，402.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),7.60(dd,J＝2.2,6.5Hz,1H),7.24(br d,J＝3.3Hz,1H),7.06(t,J＝8.7Hz,1H),6.62(s,1H),4.73(s,2H),4.53-4.61(m,2H),3.90(t,J＝5.7Hz,2H),2.93-3.03(m,2H),2.87(t,J＝5.7Hz,2H),2.19-2.31(m,2H)。
实例32a：N-(3-氯-4-氟苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并-[4', 3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002486
-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002482
以类似于实例1的方式，在步骤A中使用叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5,4-c]吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]氮杂
Figure BDA0003377545370002487
-11(12H)-甲酸酯(中间体21)替代叔丁基10-甲基-11-氧代-8-(1H-1,2,4-三唑-3-基)-1,3,4,7,8,9-六氢吡啶并[2,3]吡唑并[2,4-b][1,4]二氮杂
Figure BDA0003377545370002492
-2-甲酸酯(中间体1)，并且在步骤B中使用苯基(3-氯-4-氟苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C19H17ClFN5O2的质量计算值401.1；m/z实测值，402.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,1H),7.60(dd,J＝2.7,6.5Hz,1H),7.21-7.26(m,1H),7.08(t,J＝8.7Hz,1H),6.54(s,1H),4.83(s,2H),4.46-4.53(m,2H),3.88(t,J＝5.8Hz,2H),2.87(td,J＝6.0,8.2Hz,4H),2.27(br dd,J＝3.8,6.1Hz,2H)。
实例33a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']-环 庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002491
步骤A.5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑 并-[1,5-a]吡嗪。向叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']-环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯(0.07g，211.88umol)在DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(1.54g，13.51mmol，1mL)，并且将混合物在20℃下搅拌1h。将混合物在减压下浓缩，以给出呈黄色油状物的标题化合物(0.073g，粗品，TFA盐)，将其直接用于下一个步骤。
步骤B.N-(3-氰基-4-氟苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚- [1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酰胺。
将5,6,9,10,11,12-六氢-4H异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪(0.073g，TFA盐)、苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯(54.33mg，212.03umol)和Et3N(107.28mg，1.06mmol，147.56uL)在DCM(4mL)中的混合物在20℃下搅拌16h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(条件A)纯化，以给出呈白色固体的标题化合物(0.048g，120.86umol，57.00％产率，98.8％纯度)。MS(ESI)：C20H17FN6O2的质量计算值392.1；m/z实测值，393.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.32(s,1H),8.41(s,1H),7.95-7.93(m,1H),7.78-7.78(m,1H),7.48-7.44(m,1H),5.01(s,2H),4.17-4.14(m,2H),3.99-3.97(m,2H),2.93-2.90(m,2H),2.76-2.73(m,2H),1.91-1.89(m,2H)。
实例34a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']-环 庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002501
以类似于实例1步骤2的方式，使用苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯替代苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)-甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C20H17F4N5O2的质量计算值435.1；m/z实测值，436.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.30(s,1H),8.41(s,1H),7.93-7.90(m,1H),7.80-7.77(m,1H),7.45-7.41(m,1H),5.01(s,2H),4.17-4.00(m,2H),3.99-3.98(m,2H),2.93-2.90(m,2H),2.75-2.73(m,2H),1.91-1.89(m,2H)。
实例35a：N-(3-氰基-4-氟苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3”,4”:3',4']-环 庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002502
以类似于实例1的方式，使用叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[3”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯替代叔丁基5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']-环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酸酯制备标题化合物。MS(ESI)：C20H17FN6O2的质量计算值392.1；m/z实测值，393.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,1H),8.65(s,1H),7.94-7.92(m,1H),7.78-7.77(m,1H),7.48-7.43(m,1H),4.90(s,2H),4.18-4.15(m,2H),3.99-3.95(m,2H),2.97-2.95(m,2H),2.82-2.79(m,2H),1.88-1.86(m,2H)。
实例36a：N-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5,6,9,10-四氢-4H-异噁唑并-[3”,4”: 3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪-11(12H)-甲酰胺。
Figure BDA0003377545370002511
以类似于实例1步骤2的方式制备标题化合物，除了使用5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[3”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪与苯基(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)甲酸酯反应替代5,6,9,10,11,12-六氢-4H-异噁唑并[5”,4”:3',4']环庚[1',2':3,4]吡唑并[1,5-a]吡嗪与苯基N-(3-氰基-4-氟-苯基)甲酸酯反应。MS(ESI)：C20H17F4N5O2的质量计算值435.1；m/z实测值，436.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.29(s,1H),8.65(s,1H),7.92-7.90(m,1H),7.79-7.77(m,1H),7.45-7.40(m,1H),4.90(s,2H),4.18-4.16(m,2H),4.00-3.99(m,2H),2.98-2.95(m,2H),2.81-2.80(m,2H),1.89-1.86(m,2H)。
4.具有式(I)的化合物的抗HBV活性
程序
使用HepG2.117细胞系来测定抗HBV活性，该细胞系是一种稳定的、诱导HBV产生的细胞系，其在强力霉素缺乏(四环素关闭(Tet-off)系统)下复制HBV。HepG2细胞系可从
Figure BDA0003377545370002512
获得，编号HB-8065。HepG2细胞系的转染可以是如Sun和Nassal在2006,Journalof Hepatology[肝脏病学杂志]45(2006)636-645“Stable HepG2-and Huh7-based humanhepatoma cell lines for efficient regulated expression of infectioushepatitis B virus[稳定的基于HepG2-和Huh7的人肝癌细胞系用于有效调节传染性乙型肝炎病毒的表达]”中所描述的。
对于抗病毒测定，HBV复制被诱导，随后用一系列稀释的化合物在96孔板中进行处理。处理3天之后，通过使用实时PCR和HBV特异引物集和探针进行胞内HBV DNA的定量来确定抗病毒活性。
这些化合物的细胞毒性是使用HepG2或HepG2.117细胞进行测试的，将这些细胞在化合物存在下孵育3天。使用珀金埃尔默公司(PERKIN ELMER)的ATPlite发光测定系统(Luminescence Assay System)”评估细胞的活力。
结果：
表4
Figure BDA0003377545370002521
Figure BDA0003377545370002531
Figure BDA0003377545370002541
诱导或不诱导HBc斑点。将HepG2.117细胞在DMSO或测试化合物的存在下、在多西环素缺乏下培养。在甲醛固定和Triton-X-100透化后，用抗HBc一抗免疫标记乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)。将ALEXA 488缀合的二抗用于荧光检测原发性HBV核心信号。将CELLMASKDeep Red和HOECHST 33258分别用于细胞质和细胞核的检测，这允许细胞区室的分割。将允许检测不同形态表型的图像分析软件用于确定细胞质或细胞核中HBV核心的水平(高含量成像测定)。
HBV复制抑制测定
在感染或转染了HBV的细胞或具有稳定整合的HBV的细胞(例如HepG2.2.15细胞)中确定了所披露的化合物对HBV复制的抑制作用(Sells等人1987)。在此实例中，HepG2.2.15细胞被维持在含有10％胎牛血清(FBS)、遗传霉素、L-谷氨酰胺、青霉素和链霉素的细胞培养基中。将HepG2.2.15细胞以40,000个细胞/孔的密度接种于96孔板中，并在棋盘格(checker box)格式中用最终DMSO浓度为0.5％的系列稀释的化合物单独处理或通过添加药物组合进行处理。将细胞与化合物孵育3天，然后去除培养基，并将含有化合物的新鲜培养基加入细胞中，并再孵育3天。第6天，去除上清液，并在37℃用DNA酶处理60分钟，随后在75℃酶失活15分钟。通过在含有2.5μg蛋白酶K的裂解缓冲液(Affymetrix QS0010)中在50℃孵育40分钟将衣壳化的HBV DNA从病毒体中释放出来并共价连接至HBV聚合酶。根据制造商((美国昂飞公司)Affymetrix)推荐，通过添加0.2M NaOH使HBV-DNA变性，并使用分支DNA(BDNA)QuantiGene测定试剂盒进行检测。还使用基于衣壳化HBV DNA(用快速提取溶液(Epicentre生物技术公司)提取)的扩增和使用可以与HBV DNA杂交的HBV特异性PCR探针和用于定量的荧光标记探针的HBV DNA的扩增进行qPCR定量HBV DNA的水平。此外，根据制造商的方案(普洛麦格公司(Promega))，使用CellTitre-Glo试剂确定单独或与测试化合物组合孵育的HepG2.2.15细胞的细胞活力。从所有其他样品中减去仅含有培养基的孔的平均背景信号，并使用方程E1将0.5％DMSO处理的HepG2.2.15细胞的信号归一化，计算每种化合物浓度下的抑制百分比。
E1：％抑制＝(DMSOave-Xi)/DMSOave x 100％
其中，DMSOave是从用DMSO对照(0％抑制对照)处理的孔计算的平均信号，Xi是从单独的孔测量的信号。利用Graphpad Prism软件(圣地亚哥，加利福尼亚州)和方程E2，通过非线性拟合确定EC50值，即达到50％抑制效果的有效浓度。
E2：Y＝Ymin+(Ymax-Ymin)/(1+10(LogEC50-X)x希尔斜率)
其中Y表示抑制百分比值，并且X表示化合物浓度的对数。
如上所述，在HBV复制测定(BDNA测定)中对选择的披露的化合物进行测定，并且这些活性化合物的代表性组示于表5中。表5显示了一组选择的化合物通过BDNA测定获得的EC50值。
表5.BDNA测定中的活性(EC50)
Figure BDA0003377545370002551
Figure BDA0003377545370002561
Figure BDA0003377545370002571
Figure BDA0003377545370002581
所披露的主题在范围上不受本文所述的特定实施例和实例的限制。确实，根据以上说明书和附图，除了所描述的内容以外，本披露的不同修改方案对于本领域的普通技术人员而言都将变得很清楚。此类修饰旨在落入所附权利要求书的范围内。
出于所有目的，本文引用的全部参考文献(例如，出版物或专利或专利申请)通过引用以其全文并入本文，达到如同每个单独的参考文献(例如，出版物或专利或专利申请)具体地或单独地指明出于所有目的通过援引以其全文并入的相同程度。其他实施例在以下权利要求的范围内。

Claims (29)

1.一种具有式(I)的化合物：
Figure FDA0003377545360000011
或其立体异构体或互变异构体，其中
Figure FDA0003377545360000012
是包含一个、两个或三个杂原子的5元杂芳基，这些杂原子独立地选自由N、O和S组成的组，其中该5元杂芳基被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由以下组成的组：H、C1-4烷基、CF3、CF2H、NH2、NH(CH3)、N(CH3)2和苯基；
R1是5元至10元单环或双环，更特别地是5元至9元单环或双环，其中该5元至10元单环或双环，更特别地该5元至9元单环或双环：
-任选地含有1个至3个杂原子，这些杂原子各自独立地选自N、O和S；和/或
-任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由以下组成的组：氢、卤素、CN、CF3、CF2H、CFH2、CF2CH3、C1-6烷基、OC1-6烷基、OCF3、OCF2H和C3-4环烷基；
更特别地R1是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基各自独立地选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
R2选自由以下组成的组：H、C1-4烷基和被一个或多个F取代的C1-4烷基；
J是CHR3；
R3选自由H、CH2OH、和C(＝O)N(R4)(R5)组成的组；
R4和R5各自独立地选自由H、C1-4烷基、和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组；
K选自由C(R6)(R7)、C＝CH2和C(＝O)组成的组；
R6和R7各自独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、OCH3、CH2OH、C(＝O)R8和C(＝O)N(R9)(R10)；
R8是OH或吗啉；
R9和R10各自独立地选自由以下组成的组：H、苯基、C1-4烷基和C3-4环烷基，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组；
n是整数0或1；
L是C(R11)(R12)、NH、O；
R11和R12各自独立地选自由H和C(＝O)N(R13)(R14)组成的组；并且
R13和R14各自独立地选自由H、C1-4烷基和C3-4环烷基组成的组，其中C1-4烷基任选地被一个或多个取代基取代，该一个或多个取代基各自独立地选自由OH和F组成的组，
或其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R1是被一个或多个Cl取代基取代的苯基。
3.如权利要求1或2所述的化合物，其中R2是H或甲基。
4.如权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R3是H。
5.如权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中K是C(R6)(R7)或C＝CH2。
6.如权利要求5所述的化合物，其中R6和R7独立地选自由以下组成的组：H、F、OH、CH2OH和C(＝O)N(R9)(R10)。
7.如权利要求6所述的化合物，其中R9和R10独立地选自由C1-4烷基和C3-4环烷基组成的组。
8.如权利要求1至7中任一项所述的化合物，其中R11和R12中的每一个是氢。
9.如权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中
Figure FDA0003377545360000031
选自由以下组成的组：异噁唑、吡唑、咪唑、噁唑和噻唑，并且其中
Figure FDA0003377545360000032
任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代：H、C1-4烷基、CF3、CF2H、NH2、NH(CH3)、N(CH3)2和苯基。
10.如权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中
Figure FDA0003377545360000033
是异噁唑，该异噁唑任选地被选自C1-4烷基和NH2的取代基取代。
11.如权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中
Figure FDA0003377545360000034
是吡唑。
12.一种药物组合物，其包含如权利要求1至11中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐，并且进一步包含至少一种药学上可接受的载体。
13.一种用于制备如权利要求12所述的药物组合物的方法，该方法包括将有效量的如权利要求1至11中任一项所述的化合物与药学上可接受的载体组合成紧密混合物。
14.如权利要求1至11中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐，或如权利要求12所述的药物组合物，用作药物。
15.如权利要求1至11中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐，或如权利要求12所述的药物组合物，用于在预防或治疗有需要的哺乳动物的HBV感染或HBV诱发的疾病中使用。
16.如权利要求1至11中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐，或如权利要求12所述的药物组合物，用于在预防或治疗慢性乙型肝炎中使用。
17.一种治疗有需要的个体的HBV感染或HBV诱发的疾病的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的如权利要求1至11中任一项所述的化合物或如权利要求12所述的药物组合物。
18.一种包含第一化合物和第二化合物的产品，该第一化合物和第二化合物作为组合制剂用于在有需要的哺乳动物的HBV感染或HBV诱发的疾病的预防或治疗中同时、分开或顺序使用，其中所述第一化合物不同于所述第二化合物，其中所述第一化合物是如权利要求1至11中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐或如权利要求12所述的药物组合物，并且其中所述第二化合物是另一种HBV抑制剂。
19.如权利要求18所述的产品，其中所述第二化合物是选自由以下组成的组的另一种HBV抑制剂：选自HBV复方药物的治疗剂、HBV疫苗、HBV DNA聚合酶抑制剂、免疫调节剂、toll样受体(TLR)调节剂、干扰素α受体配体、透明质酸酶抑制剂、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抑制剂、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(ipi4)抑制剂、亲环蛋白抑制剂、HBV病毒进入抑制剂、反义寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干扰RNA(siRNA)和ddRNAi内切核酸酶调节剂、核糖核苷酸还原酶抑制剂、HBV E抗原抑制剂、共价闭合环状DNA(cccDNA)抑制剂、类法尼醇X受体激动剂、HBV抗体、CCR2趋化因子拮抗剂、胸腺肽激动剂、细胞因子、核蛋白调节剂、维甲酸诱导基因1刺激因子、NOD2刺激因子、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂、吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)途径抑制剂、PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、重组胸腺肽α-1、布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂、KDM抑制剂、HBV复制抑制剂、精氨酸酶抑制剂以及其他HBV药物。
20.一种用于制备如权利要求1-11中任一项所述的具有式(I)的化合物的方法，该方法包括来自步骤a)、b)、c)、d)、e)、f)、g)、h)、i)、j)、k)、l)、m)、n)、o)、p)、q)、r)和s)中的至少一个步骤：
a)使具有式(II)的化合物，
Figure FDA0003377545360000051
与NaOCl反应以形成具有式(III)的化合物，
Figure FDA0003377545360000052
其中
m是整数0或1；
G1是H或CH3；
G2是H、C1-4烷基、CF3或苯基；
条件是当m是1时，G1和G2不都是H；
b)使具有式(III)的化合物，
Figure FDA0003377545360000053
与强酸，如盐酸(HCl)或TFA反应以形成具有式(IV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000054
其中
m是整数0或1；
G1是H或CH3；
G2是H、C1-4烷基、CF3或苯基；
c)使具有式(IV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000061
与具有式(V)的化合物，
Figure FDA0003377545360000062
在非亲核碱，如三乙胺(Et3N)或碳酸钠(Na2CO3)的存在下反应，以形成具有式(VI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000063
其中
m是整数0或1；
G1是H或CH3；
G2是H、C1-4烷基、CF3或苯基；
G3是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
d)使具有式(VII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000064
与具有式(VIII)的化合物反应，
Figure FDA0003377545360000065
以形成具有式(IX)的化合物，
Figure FDA0003377545360000071
其中
Figure FDA0003377545360000072
表示单键或双键；
Figure FDA0003377545360000073
是芳香族环；
G3是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
G4是H或CH3；
e)使具有式(X)的化合物，
Figure FDA0003377545360000074
与肼反应以形成具有式(XI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000075
其中G5是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
f)使具有式(XXV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000076
与硫代乙酰胺反应以形成具有式(XXVI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000077
其中G6是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
g)使具有式(XII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000081
与具有式(XIII)的化合物反应，
H2N-G7
(ⅩⅢ），
以形成具有式(XIV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000082
其中
Figure FDA0003377545360000083
表示单键或双键；
Figure FDA0003377545360000084
是芳香族环；
X是CH2或C＝CH2；
G7是OH、NH2或NH(CH3)；
G8是H或NH2；
条件是当G7是NH2或NH(CH3)时，G8是H；或当G7是OH时，则G8是H或NH2；
Y是O、NH、N或N(CH3)；
Z是N或O；
h)使具有式(XV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000085
与强酸，如盐酸(HCl)或TFA(三氟乙酸)反应以形成具有式(XVI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000091
其中
Figure FDA0003377545360000092
表示单键或双键；
Figure FDA0003377545360000093
是芳香族环；
Q是C＝CH2或CG10G11；
G9是H或NH2；
G10和G11独立地选自H、OH、CONHMe、CH2OH和CONH2；
Y是O、N、NH或N(CH3)；
Z是N或O；
i)使具有式(XVI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000094
与具有式(XVII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000095
在非亲核碱，如三乙胺(Et3N)或碳酸钠(Na2CO3)的存在下反应，以形成具有式(XVIII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000096
其中
Figure FDA0003377545360000101
表示单键或双键；
Figure FDA0003377545360000102
是芳香族环；
Q是C＝CH2或CG10G11；
G9是H或NH2；
G10和G11独立地选自H、OH、CONHMe、CH2OH和CONH2；
G12是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
Y是O、N、NH或N(CH3)；
Z是N或O；
j)使具有式(XIX)的化合物，
Figure FDA0003377545360000103
与具有式(XX)的化合物反应，
Figure FDA0003377545360000104
以形成具有式(XXI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000105
其中
G13是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基
G14和G15独立地选自H、C1-4烷基、环丙基、CH2CH2OH、CH2CF3和苯基；
或者G14和G15连接在一起以形成吗啉环；
k)使具有式(XXVII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000111
与锇酸钾(K2OsO4)，在4-甲基吗啉N-氧化物(NMO)的存在下反应，以形成具有式(XXVIII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000112
其中
G17是H或NH2；
G16是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
l)使具有式(XXIX)的化合物，
Figure FDA0003377545360000113
与氧化剂，如过钌酸四丙基铵(TPAP)在4-甲基吗啉N-氧化物(NMO)的存在下反应，以形成具有式(XXX)的化合物；
Figure FDA0003377545360000114
其中G18是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
m)使具有式(XXXI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000121
与氟化试剂，如(二乙胺)三氟化硫(DAST)反应以形成具有式(XXXII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000122
其中G19是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
n)使具有式(XXXIII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000123
与过氧化氢，在9-BBN和氢氧化钠的存在下反应以形成具有式(XXXIV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000124
其中
G20是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
X是NH或O；
o)使具有式(XXXV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000131
与甲基化剂，在非亲核碱的存在下反应以形成具有式(XXXVI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000132
其中
G21是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
G22和G23独立地选自H和CH3，条件是G22和G23中的至少一个是CH3；
p)使具有式(XXXVII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000133
与甲基化剂，如碘甲烷在非亲核碱，如氢化钠的存在下反应，以形成具有式(XXXVIII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000134
其中G24是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
q)使具有式(XXXIX)的化合物，
Figure FDA0003377545360000141
与甲基化剂，如碘甲烷在非亲核碱，如氢化钠的存在下反应，以形成具有式(XL)的化合物，
Figure FDA0003377545360000142
其中G25是被一个或多个取代基取代的O-叔丁基或苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
r)使具有式(XXII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000143
与具有式(XXIII)的化合物反应，
Figure FDA0003377545360000144
以形成具有式(XXIV)的化合物，
Figure FDA0003377545360000145
其中
G26是被一个或多个取代基取代的苯基，该一个或多个取代基选自由以下组成的组：Cl、F、CF3、CF2H、CN、和C1-4烷基；
W是O或S；
W’是O、NH、S；
s)使具有式(XLI)的化合物，
Figure FDA0003377545360000151
与乙醇镁和氯乙醛反应以形成具有式(XLII)的化合物，
Figure FDA0003377545360000152
21.一种具有式(Ia)的化合物：
Figure FDA0003377545360000153
或其药学上可接受的盐；
其中
R1b选自由以下组成的组：氢、C1-4烷基、羟基、羟基甲基、(2,2-二氟乙氧基)甲基、OC1-4烷基、和氟；
R1a是氢或与R1b一起形成甲基烯基；
na是整数0、1、或2；
R2a选自由氢和C1-6烷基组成的组；
R3a选自由以下组成的组：Cl、CN、和C1-4卤代烷基；
R4a是H或F；
HET是5元或6元杂芳基，该5元或6元杂芳基任选独立地被一个至两个取代基取代，该一个至两个取代基选自C1-4烷基、溴、氯、氟、和羟基(C1-4)烷基；
X和Y各自独立地选自：N或C，使得在任何情况中X和Y中只有一个是N；
Z1是N或C；并且
Z2是N或CF。
22.如权利要求21所述的化合物，其中R1b独立地选自由以下组成的组：氢、C1-4烷基、羟基、羟基甲基、(2,2-二氟乙氧基)甲基、OC1-4烷基、和氟。
23.如权利要求21所述的化合物，其中R1b和R1a一起形成甲基烯基。
24.如权利要求21-23中任一项所述的化合物，其中na是1。
25.如权利要求21-24中任一项所述的化合物，其中R2a是H或CH3。
26.如权利要求21-25中任一项所述的化合物，其中
Figure FDA0003377545360000161
是3-氰基-4-氟苯基、4-氟-3-(三氟甲基)苯基、或3-氯-4-氟苯基。
27.如权利要求21-26中任一项所述的化合物，其中HET是杂芳基，该杂芳基独立地选自由以下组成的组：异噁唑基、吡啶基、三唑基、3-甲基-三唑基、哒嗪基、吡唑基、或1-甲基吡唑基。
28.一种药物组合物，其包含如权利要求21-27中任一项所述的化合物和至少一种药学上可接受的载体。
29.一种治疗有需要的个体的HBV感染的方法，该方法包括向该个体施用治疗有效量的如权利要求21-27中任一项所述的化合物或如权利要求28所述的药物组合物。
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