CN113543772A - 抗il-36r抗体制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明关于用于向受试者投与的抗IL‑36R制剂。

Description

抗IL-36R抗体制剂
序列表
本申请含有序列表，该序列表已以ASCII格式经由EFS-Web提交且以全文引用的方式并入本申请中。该ASCII复本创建于2020年3月2日且命名为09-0694-TW-SL.txt，并且大小为146,026个字节。
技术领域
本发明关于一种用于治疗性抗体的医药制剂。更特定而言的，本发明关于一种用于本申请所公开的抗IL-36R抗体的医药制剂。
背景技术
本申请所描述的抗IL-36R抗体减少或阻断IL36配体介导型信号传导且适用于治疗与此类信号传导相关的疾病或病况。需要一种用于抗IL-36R抗体的稳定液体或冻干抗体制剂，其适合于向人类非经肠投与，包括静脉内、肌肉内或皮下注射。
治疗性抗体为大型复合分子，且因而经历降解过程，尤其是在液态下。虽然抗体产生及纯化为控制良好的过程，但研发稳定且适合于递送至患者的制剂具有挑战性。抗体的不稳定性为商业上研发抗体药物的主要障碍。举例而言，抗体制剂的存放期可能较短，且抗体可能因储存期间的化学及物理降解而导致生物活性丧失。化学降解过程包括去酰胺化、外消旋化、水解、氧化、β消除及二硫键交换。物理降解过程包括变性、聚集、沉淀及吸附(Cleland等,Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems,1993,10(4):307-377)。尽管抗体共有某些结构类似性，但由于其独特且略微不可预测的溶液特性，研发商业上可行的抗体药物并不简单。由于不同抗体之间一级序列的差异显著，降解路径(例如变性、聚集、表面吸附、去酰胺化、氧化、异构化、片段化等)的强度可显著不同。(Wang等,JPharm Sci.,Antibody Structure,Instability,and Formulation,2007,96(1):1-26)。
下文列出多种制剂参考物。
美国专利第10,166,993号描述一种黏度降低的浓缩蛋白质制剂，其包括：量为至少约80mg/mL的蛋白质、量为至少约50mM的缓冲剂，以便具有约4.2至约4.9或约7.1至约12.0的pH且在25℃下具有约50cs或更小的运动黏度，由此使得制剂适合于皮下投与。
WO 2011/109365描述一种制剂，其包含量大于100mg/mL或低于约200mg/mL的浓缩蛋白质、及以约110mM至约120mM的组合量存在的盐的张力剂和缓冲剂、以及表面活性剂，其中该制剂为低渗透压的(具有小于290毫渗(mOsm)的渗透压值)。
美国专利第9,517,226号描述一种用于抗c-Met抗体的制剂。其公开一种抗c-Met抗体的液体制剂，其含有表面活性剂、缓冲剂及液体介质，且缓冲剂包括丁二酸、柠檬酸或其组合。
WO 2016/128564描述医药组合物，其包括抗体、至少一种选自由乙酸盐及组氨酸组成的组的缓冲剂、至少一种选自由甘氨酸、天冬酰胺及谷氨酰胺组成的组的氨基酸及/或至少一种选自由海藻糖及甘露糖醇组成的组的赋形剂、以及表面活性剂，其中组合物的pH为5.0至6.5。
尽管提供了这些或类似参考的信息，但常规地理解具有不同序列的抗体在包括振荡、长期储存、暴露于光、冷冻-解冻过程、冻干过程等的各种条件下的表现不可预测。不可预测一种抗体在制剂中会如何表现，该制剂特定地用另一种抗体或蛋白质制备，或经制备用于另一种抗体或蛋白质。举例而言，制剂的轻微变化可使蛋白质不稳定且导致聚集。蛋白质聚集体一般具有降低的活性，且更重要的是，由于抗原决定基的多重性及/或构形变化而更具免疫原性潜力。已显示免疫球蛋白聚集体导致严重肾衰竭及类过敏反应，例如头痛、发热及发冷(Wang等,见上文)。
因此，存在对本申请所描述的抗IL-36R抗体的稳定制剂的需求，即使在长储存周期期间，该稳定制剂也展现例如增加的稳定性、低至不可检测的物理或化学降解水平及极少甚至无丧失的抗体生物活性。
发明内容
本发明通过提供如下文进一步描述的抗IL-36R抗体的稳定液体或冻干医药制剂来解决以上需求。特别是，本发明提供本申请所公开的这些抗IL-36R抗体的稳定液体或粉末医药制剂。本发明的这些抗IL-36R抗体制剂适用于向哺乳动物，尤其人类或患有自体免疫疾病或其他恶性疾病的患者投与。根据本发明的该制剂具有相较于本领域中现有的其他制剂改良的特性，如下文将描述。
在第一方面中，本发明提供一种抗IL-36R抗体的医药制剂，其中该制剂包含：治疗量的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段(本申请所公开)；及i)医药学上可接受的缓冲剂；或ii)医药学上可接受的张力调节剂；或iii)医药学上可接受的稳定剂；或iv)医药学上可接受的盐；或v)医药学上可接受的表面活性剂；或vi)医药学上可接受的缓冲剂及医药学上可接受的张力调节剂；或vii)医药学上可接受的缓冲剂、医药学上可接受的张力调节剂及医药学上可接受的稳定剂；或viii)医药学上可接受的缓冲剂、医药学上可接受的张力调节剂、医药学上可接受的稳定剂及医药学上可接受的盐；或ix)医药学上可接受的缓冲剂、医药学上可接受的张力调节剂、医药学上可接受的稳定剂、医药学上可接受的盐及医药学上可接受的表面活性剂；其各自呈医药学上可接受的量且处于医药学上可接受的pH。
在第二方面中，本发明关于一种治疗性抗IL-36R抗体或抗体片段(本申请所公开)的医药制剂，其中该制剂包含：(a)该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；及(b)医药学上可接受的缓冲剂；其中该制剂的特征在于pH在约5至约8范围内。在与此方面相关的实施方案中，该缓冲剂以约20mM至约80mM范围内的浓度存在。在与此方面相关的另一实施方案中，该制剂进一步包含医药学上可接受的张力调节剂。在相关实施方案中，该张力调节剂以在约100mM至约250mM的浓度存在。
在第三方面中，本发明提供一种医药产品，其包含小瓶或注射器及用于投与的装置(例如自动注射器、针头安全装置)，该医药产品包含根据本发明的第一或第二方面中的任一个的该医药制剂。
在第四方面中，本发明关于一种制备本发明的医药制剂的方法，该方法包含：a)培养编码抗IL-36R抗体(如本申请所公开)的轻链及重链的一或多种核酸已稳定并入其基因组中的哺乳动物细胞，使得这些细胞将该抗体分泌至细胞培养基中，并自该细胞培养基纯化该抗体；及b)根据该第一或第二方面中的任一个制备该制剂。
在第五方面中，本发明关于一种减少本申请所公开的抗IL-36R抗体的聚集及/或片段化的方法，其包含将该抗体调配于缓冲系统及表面活性剂中，及在调配该抗体之前及之后评估数据(例如任何抗体聚集)。在与该第五方面相关的实施方案中，该抗体根据该第一或第二方面的这些实施方案中的任一个而调配。
在第六方面中，本发明关于一种分装部分的试剂盒，其包括：至少一个容器，该至少一个容器包括根据第一或第二方面中的任一个的医药制剂；及根据第三方面的注射装置。在与该第六方面相关的实施方案中，该注射装置为预组装注射装置，其包括自动注射器或针头安全装置。在相关实施方案中，该自动注射器或针头安全装置各自包括：(a)约2mL的总体积中的约300mg的该抗体；(b)约1.5mL的总体积中的约225mg的该抗体；(c)约1mL的总体积中的约150mg的该抗体；(d)约0.5mL的总体积中的约75mg的该抗体；或(e)约0.4mL的总体积中的约60mg的该抗体。
根据本发明的另一方面，提供根据本发明的制剂、根据本发明的预组装注射装置或根据本发明的分装部分的试剂盒的用途，其用于输注、静脉内及/或皮下投与。
根据本发明的另一方面，提供根据本发明的制剂、根据本发明的预组装注射装置或根据本发明的分装部分的试剂盒的用途，其用于治疗至少一种选自由自体免疫病症及/或恶性疾病组成的组的疾病。该定义覆盖的自体免疫病症的非限制性实例包括牛皮癣、类风湿性关节炎、发炎性肠病或牛皮癣性关节炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、硬皮病、掌跖脓疱病(palmoplantar pustulosis)、全身型脓疱性牛皮癣(generalized pustularpsoriasis)、异位性皮炎、糖尿病性肾病变、狼疮性肾炎、硬皮病、僵直性脊椎炎、IL-36受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(deficiency in the IL-36 receptor antagonist autoimmunedisease；DITRA)、IL-1受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(deficiency in the IL-1 receptorantagonist autoimmune disease；DIRA)或冷吡啉(cryopyrin)相关周期性综合征(CAPS)、类风湿性关节炎(RA)、全身性红斑性狼疮症(SLE)、硬皮病、薛格连氏症候群(Sjogren'ssyndrome)、多发性硬化症、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、发炎性肠病(例如溃疡性结肠炎及克罗恩氏病(Crohn's disease))、肺部发炎、哮喘、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、上皮发炎性病症、纤维化及僵直性脊椎炎。在另一优选实施方案中，该试剂盒包含用于向受试者皮下或肌肉内投与该制剂的说明书。
本发明技术的额外特征及优势将阐述于下文说明书中，且在某种程度上将自说明书显而易见，或可通过本发明技术的实践而获悉。将通过在此处书面描述及申请专利范围以及附图中特别指出的结构实现及获得本发明技术的优势。
应理解，前文一般描述及以下详细描述两者皆仅为例示性及解释性的，且意欲提供对所主张的本发明技术的进一步解释。
【附图说明】
图1 通过用DLS测量的扩散系数来展示胶体稳定性。各个缓冲剂中的蛋白质浓度在5至20mg/mL之间变化，如X轴所示。扩散系数展示于所测试缓冲剂的Y轴上。
图2 展示通过HP-SEC测量的高分子量(HMW)结果(Y轴)。提供使用量为0、0.02、0.04及0.06％(w/v)的聚山梨醇酯20(PS20)的一个(黑色柱形)及三个(加阴影柱形)冷冻-解冻循环(FT)之后的结果。
图3 展示通过HP-SEC测量的高分子量(HMW)结果(Y轴)。将含有浓度为0、0.02、0.04及0.06％(w/v)的聚山梨醇酯20(PS20)的溶液进行振荡。展示在室温(RT)下振荡3、6、24及48小时之后的结果。
图4 展示通过HP-SEC测量的高分子量(HMW)结果(Y轴)。将目标蛋白浓度为150mg/mL的含抗IL-36R抗体的六种制剂(F1至F6)储存于40℃下。在X轴上描画储存0、2、4、6及8周(8w)之后的数据。
图5 展示蛋白质浓度为145至189mg/mL的不同蛋白质(抗IL-36R抗体、蛋白质C、蛋白质D)及不同制剂(制剂I、制剂V、制剂VIII、制剂IX、制剂VI、制剂VII)在20℃下的黏度数据。另外，给出蛋白质浓度为60mg/mL的抗IL-36R抗体的黏度数据。在Y轴上展示黏度值。在X轴上给出蛋白浓度增加的蛋白质制剂。
图6 展示通过HP-SEC测量的高分子量(HMW)结果(Y轴)。将两种制剂(F1及F2)储存于2至8℃下。描绘F1的储存长达36个月之后的数据及F2的储存长达30个月之后的数据。
图7 展示通过在400至600nm下的90°光散射分析的浊度结果(Y轴)。在X轴上展示F1及F2(参考制剂)在应力条件下在40℃下储存长达3个月之后的数据。
图8 展示通过HP-SEC测量的高分子量(HMW)结果。描绘F1及F2(参考制剂)在应力条件下在40℃下储存长达3个月之后的数据。
图9 展示通过在400至600nm下的90°光散射分析的浊度结果(Y轴)。在X轴上给出在冻干之前、冻干之后以及将冻干粉末制剂在应力条件下在40℃下储存长达6个月之后的数据。
图10 展示通过HP-SEC测量的高分子量(HMW)结果(Y轴)。描绘冻干之前、冻干之后以及将冻干粉末制剂在应力条件下在40℃下储存长达6个月之后的数据。
【实施方式】
在不希望受任何理论或机制束缚的情况下，本发明为部分基于显示以下的出人意料的发现，具有最低溶解温度值(Tm)的本发明的抗IL-36R制剂与最有前景的特性(即最小化的蛋白质间相互作用、最高扩散程度及增加的长期稳定性)相关。参见实例。这与如下常规观点相反：增加的Tm与所研究蛋白质的增加的长期稳定性相关(参见例如He等,J PharmSci 2011；100:1330-40)。
如先前所论述，抗体的物理及化学不稳定性为溶解条件、温度及其一级结构的复合作用。抗体例如易于受去酰胺化、异构化、氧化、蛋白分解、聚集及其他修饰影响。怀疑这些现象会导致功效降低或甚至导致潜在临床副作用或毒性，因为聚集体可降低功效且增强蛋白质药物的免疫原性。抗体聚集亦为抗体生产链中的批次间变化性的来源，且其控制导致具有极高成本后果的监管及质量控制负担。此外，一旦自最佳储存条件移出，抗体的聚集影响其储存稳定性，包括存放期及其可用投与时间。
含水抗体制剂通常需要至少一种用以维持给定pH范围的缓冲剂及用以确保制剂具有与生理液体类似的渗透压值的张力调节剂。
需要提供呈可由患者自己投与(“家用”或“自投与”或“自注射”)形式的用于治疗慢性疾病的治疗性抗体，因为在许多情况下，药物将必须长期频繁投与。用于自投与的制剂的适合性将因此增加患者顺应性且降低成本，因为患者不必在每次需要注射药物时去见医务人员。
在未储存于最佳条件下，例如在高于2至8℃的推荐范围的升高温度下的溶液中，发生不合需要的降解，其包括不可溶及/或可溶聚集体的形成。那些不可溶及可溶聚集体很可能通过抗体分子的缔合而以液态形成。在将液体制剂储存长时间段的情况下，抗体分子的生物活性可归因于例如聚集或氧化而降低。冷冻及解冻的循环亦可引起经降解及聚集抗体分子的形成。
因此，溶液可展现降低的活性、增加的毒性及/或增加的免疫原性。实际上，多肽沉淀会引起栓塞、剂型的非均质性及免疫反应。因此，多肽的任何医药制剂的安全性及功效与其稳定性直接相关。
然而，关于自投与的适合性对于存放期方面产生了新的挑战。患者将必须在家储存大量药物，其中储存条件通常不如医学实践中适合。适合于自投与的包含治疗性抗体的制剂因此即使在次佳条件(例如冷链断裂或将保持制剂或药品的条件)下也将必须在储存稳定性方面超过现有制剂。
对于家用及/或自投与，患者需要皮下或肌肉内投与药物。为了递送所需量，供家用的药物剂量通常归因于注射体积限制而需要比静脉内使用所需的蛋白质浓度更高的蛋白质浓度。然而，较高蛋白质浓度增加溶液的黏度。由于黏度增加，通过注射器针头进行药物递送变得具有挑战性。另外，已知一些缓冲溶液在存在于皮下或肌肉内投与的产品中时会引起疼痛。
因此，需要稳定的抗体制剂，其提供给药优势及投与优势，尤其是关于改良的储存稳定性，包括存放期及其可用投与的优势。
上文所提及的问题通过在申请专利范围中表征且在下文进一步描述的实施方案解决。
定义
例如“方面”的词组并非暗示此方面对于本发明必不可少或此方面适用于本发明技术的所有组态。与方面相关的公开内容可适用于所有组态或一或多个组态。一方面可提供本发明的一或多个实例。例如“方面”的词组可指代一或多个方面且反之亦然。例如“实施方案”的词组并非暗示此实施方案对于本发明技术必不可少或此实施方案适用于本发明技术的所有组态。与实施方案相关的公开内容可适用于所有实施方案或一或多个实施方案。一实施方案可提供本发明的一或多个实例。
术语“约”一般应意谓鉴于测量的性质或精确度，所测量的量的可接受误差或偏差程度。通常，例示性误差或偏差程度在给定值或范围的5％内或3％内或1％内。例如，表述“约100”包括105及95、或103及97、或101及99，以及其间的所有值(例如，对于95至105的范围，95.1、95.2等；或对于97至103的范围，97.1、97.2等；对于99至101的范围，99.1、99.2等)。除非另有说明，否则本申请中给定的数值量为近似值，意谓当未明确陈述时可推断术语“约”。
如本申请所用的一般实施方案“包含(comprising或comprise)”涵盖更特定实施方案“由...组成”。此外，单数及复数形式不以限制性方式使用。如本申请所用，除非明确陈述仅表示单数，否则单数形式“一(a/an)”及“该(the)”表示单数及复数两者。
“医药制剂”或“制剂”指其中活性药物或药剂与化学物质组合产生最终医药产品或药品的过程以及过程产物，最终制剂因此指例如液体、粉剂或组合物的医药产品。因此，在一个实施方案中，医药制剂为医药组合物。
在此上下文中，“医药组合物”指液体或粉末制剂，其呈该形式以便允许活性成分的生物活性明确有效，且其不含对组合物将投与的受试者有显著毒性的额外组分。此类组合物为无菌的。“粉剂”指供非经肠使用的冷冻干燥或冻干或喷雾干燥的医药组合物。粉剂通常在水中进行复原或溶解。冻干为一种低温脱水过程，其涉及冷冻产物，降低压力，随后通过升华移除冰。冷冻干燥会产生高质量产物，这是因为加工时使用低温。对于良好研发的冻干制剂，产品的形状及外观随时间推移保持不变且复水产物的质量极佳。喷雾干燥为一种由液体或浆液通过用热气迅速干燥来产生干燥粉末且目标为达成恒定粒度分布的方法。
如本申请所用，术语“水”指注射用水。
“医药学上可接受的”赋形剂(媒剂、添加剂)为适合于向受试者非经肠投与的那些试剂。
在一个实施方案中，本发明的医药制剂为稳定的。
“稳定性”指化学稳定性及物理稳定性且可定性及/或定量地使用本领域中所描述及例如以下文献中所综述的各种分析技术加以评估：Peptide and Protein DrugDelivery,247-301,Vincent Lee编,Marcel Dekker,Inc.,New York,N.Y.,Pubs.(1991)及Jones,A.Adv.Drug Delivery Rev.10:29-90(1993)。那些方法包括评估聚集体及粒子形成(例如，使用尺寸排阻层析、通过测量浊度、显微镜可见粒子通过光遮蔽或微流成像及/或通过视觉检查)；使用阳离子交换层析或毛细管等电聚焦评定电荷异质性；质谱分析；用以比较还原性及完整抗体的毛细管凝胶电泳(CGE)分析；肽图谱(例如，胰蛋白酶或Lys-C消化物)分析；评估抗体的生物活性或抗原结合功能；等等。不稳定性可涉及以下中的任一个或多个：聚集、去酰胺化(例如Asn去酰胺化)、氧化(例如Met氧化)、异构化(例如Asp异构化)、修剪/水解/片段化(例如铰链区片段化)、丁二酰亚胺形成、未配对半胱氨酸等。本申请中的“去酰胺”单克隆抗体为其一或多个天冬酰胺残基已通过转译后修饰经修饰为例如天冬氨酸或异天冬氨酸的单克隆抗体。为了测量稳定性，可在稳定性研究中测试本发明的制剂样本，其中使样本在应力条件下暴露所选的时间段，随后使用适当分析技术定量及定性分析化学及物理稳定性。
因此，可例如通过将样本储存在例如-40℃、5℃、25℃及40℃的不同温度下长达2个月及通过使用例如HP-SEC、CEX、光遮蔽、CGE或结合活性进行定性及定量分析来在所选温度下对稳定性进行测量达所选时间段。
根据上文，“稳定制剂”为抗体在储存后在物理上及化学上稳定及/或保持其生物活性的制剂。
可通过检测且定量抗体的化学上改变的形式来评定“化学稳定性”。化学改变可涉及尺寸修改(例如修剪)，其可使用例如尺寸排阻层析、CGE及/或基质辅助雷射解吸附离子化/飞行时间质谱法(MALDI/TOF MS)评估。其他类型的化学改变包括电荷改变(例如由于去酰胺化而出现)，其可例如通过离子交换层析评估。在本发明的上下文中，化学稳定性例如通过阳离子交换层析(CEX)测量，其中例如5％的变化可视为显著。
在本发明的上下文中，“物理稳定性”实质上指具有极少或不具有聚集、沉淀及/或变性迹象的抗体。评估物理稳定性的方法为例如尺寸排阻层析(SEC)、光遮蔽(lightobscuration；LO)及色彩与清晰度。对于尺寸排阻层析(SEC)，在本发明的上下文中，在视所用管柱、操作压力、缓冲液的流速而定的所测试条件下，例如含量的≥0.1％的差异可视为显著不同。
若医药制剂中的抗体具有用于其预期用途的生物活性，则该抗体在医药制剂中“保留其生物活性”。举例而言，若抗体在医药组合物中的生物活性在参考标准的约30％、约20％或约10％内(分析误差内)(例如如在抗原结合分析中所测定)，则保留生物活性。如本领域技术人员已知，维持于溶液中的单体抗体的百分比对于适合的医药活性组合物而言最为重要。由于聚集体可导致数种以及严重副作用，故单体的含量显示实际医药学活性量的药物或抗体或其抗体片段。
在本发明的上下文中，术语“应力”或“应力条件”指例如机械应力、热应力、光应力或由冷冻及解冻引起的应力。用以模拟机械应力、热应力、光应力或由冷冻及解冻引起的应力的方法及条件多种多样且本领域技术人员已知。机械应力可为例如在室温下以300rpm振荡至多48小时。举例而言，热应力指在降低或升高的温度下储存一定时间量，在一个实例中，样本可储存在5℃、25℃及40℃，其中例如25℃及40℃指应力条件。光应力可为例如将样本在约1100lux的光强度下在室温下储存5天。可通过将样本暴露至若干冷冻循环，例如在-40℃下24小时且在室温下解冻2小时来将样本暴露于来自冷冻及解冻的应力，其中将循环重复3次。
如本申请所用，“缓冲剂”指通过其酸碱偶联物组分的作用来抵抗pH变化的缓冲溶液。“pH”在本申请中指组合物在室温下的酸度或碱度。测量组合物pH的标准方法为本领域技术人员所知。通常，测量pH由以下组成：校准仪器、将电极置放于充分混合的样本中，且随后直接自pH计读取pH。本发明的例示性缓冲剂包括乙酸盐、柠檬酸盐、组氨酸、丁二酸盐、磷酸盐及Tris。
如本申请所用，术语“张力调节剂”或“张力试剂”或“张力剂”指提供与体内血清的渗透压等效的渗透压的物质，包括盐(例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫酸镁(MgSO4))或糖/多元醇(例如，蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖)。另外，溶液中所存在的糖/多元醇充当蛋白质的低温保护剂，其允许原料药在不受损的情况下冷冻。此允许以冷冻形式进行装运且在填充药品之前长期储存原料药。
本发明的例示性张力调节剂包括氯化钠、氯化钾、氯化镁、硫酸镁(MgSO4)(盐)及/或蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖(糖/多元醇)。在某些实施方案中，张力调节剂为选自由以下组成的组的糖或多元醇：蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇及右旋糖。
如本申请所用，术语“稳定剂”或“稳定试剂”指促成医药制剂中的活性成分的稳定性的物质。本发明的例示性稳定剂包括精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸或其医药学上可接受的盐。
如本申请所用，术语“表面活性剂”指往往会降低溶解其的液体的表面张力的物质。本发明的例示性表面活性剂包括泊洛沙姆188(poloxamer 188)、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。
本发明关于一种用于向哺乳动物，尤其人类投与的抗IL-36R抗体制剂。本发明的制剂包括结合于IL-36受体(IL-36R)的本申请所公开的人源化抗体。在本申请中的特定实施方案中，这些人源化抗体的序列经鉴别。
本发明的制剂使抗体聚集体的形成及浊度降至最低，且确保抗体随时间推移保持其生物活性。特别是，本发明的发明人具有如实例中所证实的惊人发现：经调配抗体的单体的含量更稳定，且在40℃下，当已储存长达3个月时，聚集体的形成在本发明的一些制剂中远不及在所测试的其他制剂中明显。参见实例7。
因此，在第一方面中，本发明提供一种抗IL-36R抗体的医药制剂，其中该制剂包含：治疗量的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段(本申请所公开)；及i)医药学上可接受的缓冲剂；或ii)医药学上可接受的张力调节剂；或iii)医药学上可接受的稳定剂；或iv)医药学上可接受的盐；或v)医药学上可接受的表面活性剂；或vi)医药学上可接受的缓冲剂及医药学上可接受的张力调节剂；或vii)医药学上可接受的缓冲剂、医药学上可接受的张力调节剂及医药学上可接受的稳定剂；或viii)医药学上可接受的缓冲剂、医药学上可接受的张力调节剂、医药学上可接受的稳定剂及医药学上可接受的盐；或ix)医药学上可接受的缓冲剂、医药学上可接受的张力调节剂、医药学上可接受的稳定剂、医药学上可接受的盐及医药学上可接受的表面活性剂；其各者呈医药学上可接受的量且处于医药学上可接受的pH。根据本发明的制剂具有如下文将描述的改良特性。
在下表中，提供本发明的制剂的组分的典型浓度范围：
表I：制剂的组分的典型浓度范围
Figure BDA0003248185000000111
Figure BDA0003248185000000121
下表提供本发明的例示性制剂以及参考制剂XI及XIb：
表Ia：例示性制剂
Figure BDA0003248185000000122
Figure BDA0003248185000000131
表Ib：例示性制剂
Figure BDA0003248185000000132
Figure BDA0003248185000000141
根据上文，在一个实施方案中，本发明的医药组合物具有至少一个选自由以下组成的组的特征：
(a)如通过高效能尺寸排阻层析(HP-SEC)所测量，显著降低的聚集体百分比，
(b)如通过HP-SEC所测量，在约40℃下储存之后，显著较高的单体百分比，
(c)通过CEX所测量，与较少化学降解相关的较高主峰百分比，
(d)通过视觉评定的较低浊度及/或以福尔马肼浊度测量单位(FormazineNephelometry Unit；FNU)计的较低浊度值，及
(e)显微镜可见粒子(≥10μm及≥25μm)的较低值，
如与参考制剂比较。
根据本发明，例如表示两个状态之间的定量差异的术语“减小”、“较高”、“较少”、“较小”、“增加”、“较低”或“较不”等包括该两个状态之间的显著差异。
根据本发明，术语“参考制剂”指表Ia中的制剂XI及/或表Ib中的制剂XIb。在一个实施方案中，参考制剂包含如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其例如以与所比较的制剂相同的浓度存在，但具有不同量及/或类型的缓冲系统，及/或不同量及/或类型的张力调节剂(及/或不同量及/或类型的表面活性剂)，例如在表Ia的制剂XI及/或表Ib中的制剂XIb中；其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约7范围内。
在一个实施方案中，本发明的制剂在约40℃下储存之后的聚集体量相较于参考制剂的聚集体量减少至少约10％、25％或50％，如通过高效能尺寸排阻层析(HP-SEC)所测量。举例而言，若实验值自1.0％降低至0.9％，则根据上一句，相对减少为10％。
在一个实施方案中，如通过HP-SEC所测量，本发明的制剂在约40℃下储存后的单体量相较于参考制剂在约40℃下储存之后提高至少约10％、25％或50％。
在一个实施方案中，如通过CEX所测量，本发明的制剂在约40℃下储存之后的主峰量相较于参考制剂增加至少约10％、25％或50％(化学降解减小)。
在一个实施方案中，本发明的制剂的浊度值相较于参考制剂低至少约10％、25％或50％，以浊度测量单位(FNU)计。
在一实施方案中，本发明的制剂的显微镜可见粒子(例如≥10μm及≥25μm)的增加相较于参考制剂少至少约10％、25％、50％、75％或100％。
在与第一方面相关的一个实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段以如下浓度存在于制剂中：在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内，或在约10至约175mg/mL范围内，或在约10至约30mg/mL范围内，或在约45至约75mg/mL范围内，或在约125至约175mg/mL范围内，或以约15mg/mL、约20mg/mL、约25mg/mL、约30mg/mL、约60mg/mL、约75mg/mL、约80mg/mL、约100mg/ml或约150mg/mL的浓度存在。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段以约20mg/mL的浓度存在于制剂中。在另一实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段以约60mg/mL的浓度存在于制剂中。在又一实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段以约150mg/mL的浓度存在于制剂中。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的缓冲剂以如下浓度存在于制剂中：在约20mM至约80mM范围内，或在约20至约70mM范围内，或在约20至约60mM范围内，或在约20mM至约50mM范围内，或以约20mM、约25mM、约35mM、约40mM、约45mM、约50mM、约60mM的浓度存在。缓冲剂可包含组氨酸、磷酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐或TRIS。在某些实施方案中，缓冲剂选自由以下组成的组：组氨酸、磷酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐及TRIS，特别是乙酸盐及柠檬酸盐。在一个实施方案中，缓冲剂为柠檬酸盐。在另一实施方案中，缓冲剂为组氨酸。在又一实施方案中，缓冲剂为乙酸盐。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的张力调节剂以如下浓度存在于制剂中：在约100mM至约250mM范围内，或在约120至约220mM范围内，或在约130至约190mM范围内，或在约140至约190mM范围内，或以约100mM、约120mM、约150mM、约180mM、约200mM、约220mM的浓度存在。张力调节剂可为盐、糖或多元醇。在一个实施方案中，张力调节剂为一或多种糖及/或多元醇。张力调节剂可为一或多种糖及/或多元醇，包含蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖，特别是蔗糖或海藻糖。在一个实施方案中，张力调节剂为一或多种选自由以下组成的组的糖及/或多元醇：蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖，特别是蔗糖及海藻糖，特别是，张力调节剂为蔗糖或张力调节剂为海藻糖。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的稳定剂以如下浓度存在于制剂中：在约0mM至约80mM范围内，或在约0至约70mM范围内，或在约0至约60mM范围内，或在约0至约50mM范围内。在存在稳定剂的情况下，其可以在约5mM至约80mM、或约10mM至70mM、或约20mM至50mM范围内的浓度，或以约25mM、或约50mM的浓度存在。在一实施方案中，稳定剂以约20mM、或约25mM、或约30mM、或约35mM、或约40mM、或约45mM的浓度存在于制剂中。稳定剂可包含氨基酸，例如精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或其医药学上可接受的盐，更特别是精氨酸。在一个实施方案中，稳定剂选自由以下组成的组：精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸及其医药学上可接受的盐。在又一实施方案中，稳定剂为L-精氨酸或其医药学上可接受的盐。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的盐以如下浓度存在于制剂中：在约0至约150mM范围内，或在约0至约120mM范围内，或在约0至约90mM范围内，或在约0至约10mM范围内，或以约3mM、5mM、10mM、25mM或50mM的浓度存在。在另一相关实施方案中，医药学上的制剂包含作为张力调节剂的一或多种糖及/或多元醇及另一医药学上可接受的盐，该盐的浓度在约3至约150mM范围内，或在约3至约120mM范围内，或约3至约90mM范围内，或在约3至约10mM范围内，或浓度为约3mM、5mM、10mM、25mM或50mM。盐可包含氯化钠(NaCl)、氯化镁(MgCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、氯化锂(LiCl)、氯化钙(CaCl2)、硼酸盐或氯化锌(ZnCl2)。在一个实施方案中，盐选自由以下组成的组：氯化钠(NaCl)、氯化镁(MgCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、氯化锂(LiCl)、氯化钙(CaCl2)、硼酸盐及氯化锌(ZnCl2)。在一特定实施方案中，盐为氯化钠。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的表面活性剂以如下浓度存在于制剂中：在约0g/L至约1.5g/L范围内，或在约0.1g/L至约1.5g/L范围内，或在约0.1至约1.0g/L范围内，或在约0.1至约0.6g/L范围内，或在约0.15至约0.5g/L范围内，或以约0.1g/L、0.2g/L、0.4g/L、0.5g/L或1g/L的浓度存在。表面活性剂可包含聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，表面活性剂选自由以下组成的组：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60及聚山梨醇酯80，特别是选自由聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80组成的组。
在与第一方面相关的一实施方案中，制剂的特征在于pH在约5至约8范围内，或在约5至约7范围内，或在约5至约6.5范围内。在另一相关实施方案中，pH为约5、约5.5、约6、约6.5、约7、约7.5或约8。本领域技术人员将理解制剂的pH指制剂在呈水溶液形式时的pH。
在与第一方面相关的一实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在另一特定实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
在与第一方面相关的一实施方案中，抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ IDNO:88的重链可变区组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ IDNO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ IDNO:125所列的氨基酸序列的重链组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
在第二方面中，本发明关于一种治疗性抗IL-36R抗体或抗体片段(本申请所公开)的医药制剂，其中该制剂包含：(a)抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；及(b)医药学上可接受的缓冲剂；其中该制剂的特征在于pH在约5至约8范围内。在与此方面相关的一实施方案中，该缓冲剂以约20mM至约80mM范围内的浓度存在。在与此方面相关的另一实施方案中，该制剂进一步包含医药学上可接受的张力调节剂。在一相关实施方案中，该张力调节剂以在约100mM至约250mM范围内的浓度存在。因此，在一个实施方案中，医药制剂包含：(a)抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；(b)缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；(c)张力调节剂，其以在约100mM至约250mM范围内的浓度存在；其中制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约8范围内。
在与第二方面相关的一实施方案中，本发明的医药制剂包含：a)如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段以约20mg/mL、60mg/mL或150mg/mL的浓度存在；b)乙酸盐缓冲剂，其以约25至50mM的浓度存在；c)蔗糖或海藻糖，其以约150mM至200mM的浓度存在；及视情况存在的d)L-精氨酸或其医药学上可接受的盐，其以约25mM的浓度存在；及/或e)聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，其以约0.4g/L的浓度存在；其中制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约7范围内。
在与第二方面相关的另一实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段以如下浓度存在于制剂中：在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内，或在约10至约175mg/mL范围内，或在约10至约30mg/mL范围内，或在约45至约75mg/mL范围内，或在约125至约175mg/mL范围内，或以约15mg/mL、约20mg/mL、约25mg/mL、约30mg/mL、约60mg/mL、约75mg/mL、约80mg/mL、约100mg/ml或约150mg/mL的浓度存在。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段以约20mg/mL的浓度存在于制剂中。在另一实施方案中，浓度为约60mg/mL。在又一实施方案中，浓度为约150mg/mL。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的缓冲剂以如下浓度存在于制剂中：在约20mM至约80mM范围内，或在约20至约70mM范围内，或在约20至约60mM范围内，或在约20mM至约50mM范围内，或以约20mM、约25mM、约35mM、约40mM、约45mM、约50mM、约60mM的浓度存在。缓冲剂可包含组氨酸、磷酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐或TRIS。在某些实施方案中，缓冲剂选自由以下组成的组：组氨酸、磷酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐及TRIS，特别是乙酸盐及柠檬酸盐。在一个实施方案中，缓冲剂为柠檬酸盐。在另一实施方案中，缓冲剂为组氨酸。在又一实施方案中，缓冲剂为乙酸盐。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的张力调节剂以如下浓度存在于制剂中：在约100mM至约250mM范围内，或在约120至约220mM范围内，或在约130至约190mM范围内，或在约140至约190mM范围内，或以约100mM、约120mM、约150mM、约180mM、约200mM、约220mM的浓度存在。张力调节剂可为盐、糖或多元醇。在一个实施方案中，张力调节剂为一或多种糖及/或多元醇。张力调节剂可为一或多种糖及/或多元醇，包含蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖，特别是蔗糖或海藻糖。在一个实施方案中，张力调节剂为一或多种选自由以下组成的组的糖及/或多元醇：蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖，特别是蔗糖及海藻糖，特别是，张力调节剂为蔗糖或张力调节剂为海藻糖。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的稳定剂以如下浓度存在于制剂中：在约0mM至约80mM范围内，或在约0至约70mM范围内，或在约0至约60mM范围内，或在约0至约50mM范围内。在存在稳定剂的情况下，其可以在约5mM至约80mM、或约10mM至70mM、或约20mM至50mM范围内的浓度，或以约25mM、或约50mM的浓度存在。稳定剂可包含氨基酸，例如精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或其医药学上可接受的盐，更特别是精氨酸。在一个实施方案中，稳定剂选自由以下组成的组：精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸及其医药学上可接受的盐。在一特定实施方案中，稳定剂为L-精氨酸或其医药学上可接受的盐。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的盐以如下浓度存在于制剂中：在约0至约150mM范围内，或在约0至约120mM范围内，或在约0至约90mM范围内，或在约0至约10mM范围内，或以约3mM、5mM、10mM、25mM或50mM的浓度存在。在另一相关实施方案中，医药学上可接受的制剂包含作为张力调节剂的一或多种糖及/或多元醇及另一医药学上可接受的盐，该盐的浓度在约3至约150mM范围内，或在约3至约120mM范围内，或约3至约90mM范围内，或在约3至约10mM范围内，或浓度为约3mM、5mM、10mM、25mM或50mM。盐可包含氯化钠(NaCl)、氯化镁(MgCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、氯化锂(LiCl)、氯化钙(CaCl2)、硼酸盐或氯化锌(ZnCl2)。在一个实施方案中，盐选自由以下组成的组：氯化钠(NaCl)、氯化镁(MgCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、氯化锂(LiCl)、氯化钙(CaCl2)、硼酸盐及氯化锌(ZnCl2)。在一特定实施方案中，盐为氯化钠。
在另一相关实施方案中，医药学上可接受的表面活性剂以如下浓度存在于制剂中：在约0g/L至约1.5g/L范围内，在约0.1g/L至约1.5g/L范围内，或在约0.1至约1.0g/L范围内，或在约0.1至约0.6g/L范围内，或在约0.15至约0.5g/L范围内，或以约0.1g/L、0.2g/L、0.4g/L、0.5g/L或1g/L的浓度存在。表面活性剂可包含聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，表面活性剂选自由以下组成的组：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60及聚山梨醇酯80，特别是选自由聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80组成的组。
在与第一方面相关的一实施方案中，制剂的特征在于pH在约5至约8范围内，或在约5至约7范围内，或在约5至约6.5范围内。在另一相关实施方案中，pH为约5、约5.5、约6、约6.5、约7、约7.5或约8。
在与第二方面相关的一实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在另一特定实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
在与第二方面相关的一实施方案中，抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ IDNO:88的重链可变区组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ IDNO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ IDNO:125所列的氨基酸序列的重链组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链组成。在另一相关实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
为方便起见，与本发明的第一及第二方面相关的各种其他实例或实施方案经描述为下文的经编号的项(1、2、3等)。这些项提供为实例且并不限制本发明技术。应注意，从属项中的任一个可呈任何组合形式进行组合，且可置于各独立项(例如项1)中。其他项可以类似方式呈现。
1.一种医药制剂，其包括：
a.一种如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；及
b.医药学上可接受的缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约8范围内。
2.如项1的制剂，其中该制剂呈液体或粉末形式。
3.如项1或2的制剂，其中该抗IL-36R抗体以约10mg/mL至约200mg/mL范围内的浓度存在。
4.如项1的制剂，其中该抗IL-36R抗体以约20mg/mL的浓度存在。
5.如项1的制剂，其中该抗IL-36R抗体以约60mg/mL的浓度存在。
6.如项1的制剂，其中该抗IL-36R抗体以约150mg/mL的浓度存在。
7.如项1至6中任一项的制剂，其中该缓冲剂包括组氨酸、磷酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐或TRIS。
8.如项7的制剂，其中该缓冲剂包含柠檬酸盐或乙酸盐。
9.如项7的制剂，其中该缓冲剂包含组氨酸。
10.如项8的制剂，其中该缓冲剂包含乙酸盐。
11.如项1至10中任一项的制剂，其中该制剂进一步包含医药学上可接受的张力调节剂，其以在约100mM至约250mM范围内的浓度存在。
12.如项11的制剂，其中该张力调节剂为一或多种糖及/或多元醇。
13.如项12的制剂，其中该张力调节剂为一或多种选自由以下组成的组的糖及/或多元醇：蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖。
14.如项13的制剂，其中该张力调节剂为蔗糖或海藻糖。
15.如项14的制剂，其中该张力调节剂为蔗糖。
16.如项14的制剂，其中该张力调节剂为海藻糖。
17.如项1至16中任一项的制剂，其中该制剂进一步包含医药学上可接受的稳定剂，其以在约0mM至约80mM或约5mM至约80mM范围内的浓度存在。
18.如项17的制剂，其中该稳定剂包含选自由以下组成的组的氨基酸：精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或其医药学上可接受的盐。
19.如项17的制剂，其中该稳定剂为L-精氨酸或其医药学上可接受的盐。
20.如项11至16中任一项的制剂，其中该制剂进一步包含医药学上可接受的盐，其以约0至约150mM范围内的浓度存在。
21.如项20的制剂，其中该盐包含氯化钠(NaCl)、氯化镁(MgCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、氯化锂(LiCl)、氯化钙(CaCl2)、硼酸盐或氯化锌(ZnCl2)。
22.如项20的制剂，其中该盐为氯化钠(NaCl)。
23.如项1至22中任一项的制剂，其中该制剂进一步包含医药学上可接受的表面活性剂，其以在约0.1g/L至约1.5g/L范围内的浓度存在。
24.如项23的制剂，其中该表面活性剂包含泊洛沙姆188、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。
25.如项23的制剂，其中该表面活性剂选自由以下组成的组：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。
26.如项23的制剂，其中该表面活性剂为聚山梨醇酯20。
27.如项23的制剂，其中该表面活性剂为聚山梨醇酯80。
28.一种医药制剂，其包括：
a.如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约10mg/mL至约200mg/mL范围内的浓度存在；
b.乙酸盐及/或组氨酸缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
c.蔗糖及/或海藻糖，其以在约100mM至约250mM范围内的浓度存在；
d.L-精氨酸及/或其医药学上可接受的盐，其以在约0mM至约80mM范围内的浓度存在；
e.氯化钠(NaCl)，其以在约0至约150mM范围内的浓度存在；及
f.聚山梨醇酯20及/或聚山梨醇酯80，其以在约0g/L至约1.5g/L或约0.1g/L至约1.5g/L范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约7范围内。
29.一种医药制剂，其包括：
a.如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以约20mg/mL的浓度存在；
b.柠檬酸盐缓冲剂，其以约25mM的浓度存在；
c.蔗糖及/或海藻糖，其以约200mM的浓度存在；
d.聚山梨醇酯80，其以约0.4g/L的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约6至约7范围内。
30.一种医药制剂，其包括：
a.如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以约60mg/mL的浓度存在；
b.乙酸盐缓冲剂，其以约45mM的浓度存在；
c.蔗糖及/或海藻糖，其以约150mM的浓度存在；
d.L-精氨酸或其医药学上可接受的盐，其以约25mM的浓度存在；及
e.聚山梨醇酯20，其以约0.4g/L的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约6范围内。
31.一种医药制剂，其包括：
a.如本申请所公开的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以约150mg/mL的浓度存在；
b.乙酸盐缓冲剂，其以约45mM的浓度存在；
c.蔗糖或海藻糖，其以约150mM的浓度存在；
d.L-精氨酸或其医药学上可接受的盐，其以约25mM的浓度存在；及
e.聚山梨醇酯20，其以约0.4g/L的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约6范围内。
32.如项1至31中任一项的医药制剂，其中该制剂的特征在于渗透压值在约210mOsmol/kg至约390mOsm/kg范围内。
33.如项1至32中任一项的医药制剂，其中低于约5％的抗体以聚集体形式存在于制剂中。
34.如项1至33中任一项的医药制剂，其中该制剂为无菌的。
35.如项1至34中任一项的医药制剂，其中该制剂在冷冻及解冻后稳定。
36.如项1至35中任一项的医药制剂，其中该制剂包含水或用水复原。
37.如项1至36中任一项的医药制剂，其中该制剂呈液体形式或在用水复原时具有约5至约6之间的pH。
38.如项1至37中任一项的医药制剂，其中该制剂呈液体形式或在用水复原时具有约6的pH。
39.如项1至37中任一项的医药制剂，其中该制剂具有至少一个选自由以下组成的组的特征：
(i)增加的存放期，
(ii)优选温度稳定性，
(iii)减少的聚集体形成，
(iv)优选化学稳定性，
(v)降低的黏度，及
如与参考制剂比较。
40.如项1至37中任一项的医药制剂，其中该制剂具有至少一个选自由以下组成的组的特征：
(a)如通过高效能尺寸排阻层析(HP-SEC)所测量，降低的聚集体百分比，
(b)如通过HP-SEC所测量，较高的单体百分比，
(c)通过CEX所测量，较高的主峰百分比(电荷变体降解较少)，
(d)例如≥10μm及≥25μm的显微镜可见粒子的较低百分比，及
(e)以福尔马肼浊度测量单位(FNU)计的较低浊度值，在储存于约40℃之后，如与该参考制剂比较。
41.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
42.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约20mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mML-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0。
43.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
44.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5。
45.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0。
46.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0。
47.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5。
48.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
49.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mML-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
50.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
51.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
52.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂包括：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
53.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mML-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0。
54.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
55.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5。
56.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0。
57.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0。
58.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5。
59.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
60.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
61.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
62.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
63.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂包括：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5。
64.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
65.一种医药制剂，其包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；
其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
在与第一或第二方面中的任一个相关的实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；其中抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。在另一实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；其中抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。
在与第一或第二方面中的任一个相关的实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；其中抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。在另一实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；其中抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。
在与第一或第二方面中的任一个相关的实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；其中抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。在另一实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；其中抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。
在与第一或第二方面中的任一个相关的实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；其中抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。在另一实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mML-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；其中抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。在一相关实施方案中，制剂包含20mg/mL抗体。在一相关实施方案中，制剂包含150mg/mL抗体。
在与第一或第二方面中的任一个相关的实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐及约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.5；其中抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。在另一实施方案中，制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐及约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.5；其中抗IL-36R抗体由包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区组成。
在第三方面中，本发明提供一种医药产品，其包含小瓶或注射器或装置(例如自动注射器或针头安全装置)，该小瓶或注射器或装置包含根据本发明的第一或第二方面的医药制剂。在与此方面相关的实施方案中，医药产品包含预组装注射装置，该预组装注射装置包含根据本发明的第一或第二方面的注射器(包含医药制剂的注射器)。在一相关实施方案中，预组装注射装置为自动注射器或针头安全装置。
在与第三方面相关的实施方案中，该“预组装注射装置”为具有柱塞杆及手指凸缘的注射器、针头安全装置或自动注射器。针头安全装置提供针头保护机构，该针头保护机构在启动或注射时使针头自注射部位回缩。举例而言，针头安全装置可由弹簧驱动。自动注射器为经设计以递送一个剂量的药物，特别是可注射药物的医疗装置。注射器、针头安全装置及自动注射器避免将药物自小瓶转移至注射装置中的需求，该步骤费力、通常较困难且具有特定风险(例如污染或误给药)。自动注射器及针头安全装置易于使用且旨在用于供患者自投与或由未经训练人员投与。自动注射器具有可回缩针头或由特定护罩保护的针头。相较于注射器，其提供易化处置且因此降低损伤或污染风险，从而促成其供家用的适合性。
自动注射器进一步帮助克服通常与基于针头的药物递送装置的自投与相关的犹豫，因此提供增强的患者顺应性，此又确保根据处方剂量方案定期摄入药物，从而增加治疗成功的可能性。此在需要重复治疗的治疗方案中尤其重要，如在许多慢性疾病，如自体免疫疾病中或在许多归因于靶向疗法而变成慢性或接近慢性的癌症类型中的情况。
此外，在此类适应症中，若患者可自己在家治疗，如使用自动注射器及针头安全性装置的情况，则尤其有益。家庭治疗进一步降低疗法成本且增加患者顺应性，因为患者不必在每次给药方案要求递送药物时去见医务人员。在本发明的实施方案中，该自动注射器为弹簧装载注射器类型。此类型含有连接至注射器的弹簧装载针头。在另一实施方案中，该自动注射器为气体喷流自动注射器类型。后者含有加压气缸，且推动精细液体喷流透过皮肤而无需使用针头。此具有如下优势：可重新装载自动注射器，且可使用各种不同剂量或不同药物。在本发明的另一实施方案中，该预组装注射装置选自由以下组成的组：常规自动注射器及/或湿/干自动注射器。
常规自动注射器包含如上文所概述的注射器(填充有医药制剂的注射器)且可用于直接投与。湿/干自动注射器(亦称为“液体干燥自动注射器”或“双腔自动注射器”)为两个腔室的自动注射器，其使医药制剂或其活性组分以干燥稳定形式(例如冻干)置于干燥腔室中直至使用。投与之前，通过转移至含有溶剂的第二腔室(“湿润”腔室)中来复原医药制剂或其活性组分，或将来自第二腔室的溶剂转移至第一腔室。针对该用途，含有固体药物粉末的干燥腔室可例如亦含有大量空气或其他气体，其在复原医药制剂或其活性组分时经溶剂置换。
优选地，自动注射器为一次性自动注射器且供单次使用。可用于本发明的情形的适合自动注射器包括由Ypsomed制造的自动注射器。这些自动注射器包括单次剂量装置，如以商标“LyoTwist”、“YpsoMate”、“YpsoJect”及“VarioJect”销售的产品。在一实施方案中，自动注射器的外壳经自定义而为使用者提高易用性及安全性。
可用于本发明的情形的其他适合自动注射器包括由SHL制造的自动共注射器(autocoinjector)。这些注射器包括以商标“MollyTM”、“DAITM”、“DAITM-RNS”、“DAITM-R”、“SDI MIX+NITTM”、“VSDITM”、“PSDITM”、“NaisaTM”及“DCPTM(OEM)”销售的产品。
自动注射器的另一优选类型为由Becton Dickinson制造的PhysiojectTM一次性自动注射器。常规类型的此自动注射器固持具有皮下针头的1至2mL预填充注射器，容易组装(2个总成组件)，稳固，具有大视觉检查窗口且为防开启透明包装的。
另一优选类型的自动注射器为由Becton DickinsonTM制造的BDTMLiquidDryInjectorTM。此湿/干型自动注射器允许患者复原及注射根据本发明的冻干医药制剂，消除对处置小瓶及注射器的需求。
又一其他适合自动注射器为由BespakInjectablesTM提供的ASITMautoTM注射器及OTSTMTM一次性自动注射器、由Aqueo Future InjectiontechnologiesTM提供的SafeClickTMautoinjectorTM以及由Future InjectionTechnologyTM提供的SafeClickTM-Lyo及SafeClickTM-Visco。然而，此清单为非限制性的。
优选地，针头安全装置为一次性针头安全装置且供单次使用。可用于本发明的情形的适合针头安全装置包括由Nemera制造的针头安全装置。这些针头安全装置包括单次剂量装置，如被动安全装置
Figure BDA0003248185000000431
在与Nemeras
Figure BDA0003248185000000432
相关的本发明的实施方案中，柱塞杆及手指凸缘的自定义为使用者增加处置简易性。
可用于本发明的情形的其他适合的被动针头安全装置包括由BD制造的BDPreventisTM或BD UltrasafeTM。
其他被动针头安全装置为例如Biocorp NewguardTM或Owen Mumford UnisafeTM。
优选地，针头安全装置为一次性针头安全装置且供单次使用。可用于本发明的情形的适合针头安全装置包括由Nemera制造的针头安全装置。这些针头安全装置包括单次剂量装置，如被动安全装置
Figure BDA0003248185000000433
在一实施方案中，Nemeras
Figure BDA0003248185000000434
针头安全装置具有经修改柱塞杆及/或手指凸缘以便为使用者增加使用及处置简易性。
可用于本发明的情形的其他适合的被动针头安全装置包括由BD制造的BDPreventisTM或BD UltrasafeTM。
其他被动针头安全装置为例如Biocorp NewguardTM或Owen Mumford UnisafeTM。
在与第三方面相关的本发明的另一实施方案中，注射装置为预填充注射器或呈西雷特皮下注射器(syrette)形式。西雷特皮下注射器为用于经由针头注射液体的装置。其类似于注射器，不同的处在于其具有封闭的可挠性管而非刚性管及柱塞。术语“预填充注射器”不解自明。预填充注射器与自动注射器共有许多优势。如同自动注射器，预填充注射器可用作常规注射器及湿/干注射器(亦成为双腔注射器)。注射器例如由BectonDickinsonTM、Nuova OmpiTM、SchottAG及其他公司提供。柱塞挡止件例如由BectonDickinsonTM、West PharmaceuticalsTM及其他公司提供。预填充注射器的制造可例如由Boehringer IngelheimTM、Vetter Pharma International及其他公司提供。
在与第三方面相关的实施方案中，本发明关于一直如本申请所公开的抗IL-36R抗体的制剂，其以各种剂型及强度提供，这些剂型及强度包含：
(i)自动注射器(AI)，例如由
Figure BDA0003248185000000441
提供的定制模型，包含：
a.在单次剂量AI中呈约2mL制剂体积的约300mg的抗体；
b.在单次剂量AI中呈约1.5mL制剂体积的约225mg的抗体；
c.在单次剂量AI中呈约1mL制剂体积的约150mg的抗体；
d.在单次剂量AI中呈约0.5mL制剂体积的约75mg的抗体；
或
e.在单次剂量AI中呈约0.4mL制剂体积的约60mg的抗体；
(ii)配备有针头安全装置以及例如自定义EFF及PR的预填充注射器，其包含：
a.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约2mL制剂体积的约300mg的抗体；
b.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约1.5mL制剂体积的约225mg的抗体；
c.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约1mL制剂体积的约150mg的抗体；
d.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约0.5mL制剂体积的约75mg的抗体；或
e.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约0.4mL制剂体积的约60mg的抗体；或
(iii)无针头安全件的预填充注射器，其包含：
a.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约2mL制剂体积的约300mg的抗体；
b.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约1.5mL制剂体积的约225mg的抗体；
c.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约1mL制剂体积的约150mg的抗体；
d.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约0.5mL制剂体积的约75mg的抗体；或
e.在单次剂量预填充玻璃注射器中呈约0.4mL制剂体积的约60mg的抗体；或
(iv)小瓶，其包含：
a.在单次剂量玻璃小瓶中呈约20mL制剂体积的约1200mg的抗体；
b.在单次剂量玻璃小瓶中呈约15mL制剂体积的约900mg的抗体；
c.在单次剂量玻璃小瓶中呈约10mL制剂体积的约600mg的抗体；
d.在单次剂量玻璃小瓶中呈约7.5mL制剂体积的约450mg的抗体；
e.在单次剂量玻璃小瓶中呈约5mL制剂体积的约300mg的抗体；
f.在单次剂量玻璃小瓶中呈约2.5mL制剂体积的约150mg的抗体；或
g.在单次剂量玻璃小瓶中呈约1.25mL制剂体积的约75mg的抗体；或
h.在单次剂量玻璃小瓶中呈约1mL制剂体积的约60mg的抗体；
i.在单次剂量玻璃小瓶中呈约0.5mL制剂体积的约30mg的抗体；或
(v)输液袋，其包含：
a.在约100mL至500mL 0.9％NaCl溶液中的30mg至1200mg的抗体。
为方便起见，与本发明的第三方面相关的各种其他实例或实施方案经描述为下文的经编号的项(66至77)。这些项提供为实例且并不限制本发明技术。应注意，从属项中的任一个可呈任何组合形式进行组合，且可置于各独立项(例如项64)中。其他项可以类似方式呈现。
66.一种医药产品，其包含小瓶或注射器，该小瓶或注射器包含如第一或第二方面的项中任一项的医药制剂。
67.如项66的医药产品，其进一步包含预组装注射装置。
68.如项67的医药产品，其中该预组装注射装置为自动注射器或具有或不具有针头安全装置的注射器。
69.一种预组装注射装置，其包含根据第一或第二方面的项中任一项的医药制剂。
70.如项69的预组装注射装置，其中该装置为自动注射器或具有或不具有针头安全装置的注射器。
71.如项69的预组装注射装置，其中该制剂适合于静脉内、皮下或肌肉内投与。
72.如项70的预组装注射装置，其中该自动注射器或具有或不具有针头安全装置的该注射器包含医药制剂，该医药制剂包含：
抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/ml抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
73.如项70的预组装注射装置，其中该自动注射器或具有针头安全装置的该注射器包括：
a.呈约2mL制剂体积的约300mg的抗体；或
b.呈约1.5mL制剂体积的约225mg的抗体；或
c.呈约1mL制剂体积的约150mg的抗体；或
d.呈约0.5mL制剂体积的约75mg的抗体；或
e.呈约0.4mL制剂体积的约60mg的抗体。
74.如项66的小瓶，其中该小瓶包括：
a.呈约20mL制剂体积的约1200mg的抗体；或
b.呈约15mL制剂体积的约900mg的抗体；或
c.呈约10mL制剂体积的约600mg的抗体；或
d.呈约150mL制剂体积的约300mg的抗体；或
e.呈约2.5mL制剂体积的约1500mg的抗体。
75.一种医药产品，其包含：包含呈粉末形式的约100mg至1500mg抗IL-36R抗体的小瓶；用于复原抗IL-36R抗体的说明书；及用于制备供输注的复原抗体的说明书，其中抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125、126或127中的任一个所列的氨基酸序列的重链；且复原说明书要求用注射用水复原至1至50mL的可抽取体积。
76.如项66至68中任一项的医药产品或如项69至73中任一项的预组装注射装置，其中该医药制剂包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；
b.缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
c.张力调节剂，其以在约100mM至约400mM范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约8范围内。
77.如项1至10中任一项的医药制剂，其中该医药制剂包含：
d.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；
e.缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
f.张力调节剂，其以在约100mM至约400mM范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约8范围内。
在与第三方面及/或项66至77相关的实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ IDNO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在另一特定实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
在第四方面中，本发明关于一种制备本发明的医药制剂的方法，该方法包含：a)培养具有编码如本申请所公开的抗IL-36R抗体的轻链及重链的一或多种核酸已稳定并入其基因组中的哺乳动物细胞，使得这些细胞将该抗体分泌至细胞培养基中，并自该细胞培养基纯化该抗体；及b)根据该第一或第二方面制备该制剂。在一相关实施方案中，编码抗IL-36R抗体的轻链的核酸包含编码SEQ ID NO:118的核苷酸序列，且其中编码抗IL-36R抗体的重链的核酸包含编码SEQ ID NO:125的核苷酸序列。在另一相关实施方案中，编码抗IL-36R抗体的轻链的核酸包含编码SEQ ID NO:118的核苷酸序列，且其中编码抗IL-36R抗体的重链的核酸包含编码SEQ ID NO:126的核苷酸序列。在另一相关实施方案中，编码抗IL-36R抗体的轻链的核酸包含编码SEQ ID NO:118的核苷酸序列，且其中编码抗IL-36R抗体的重链的核酸包含编码SEQ ID NO:127的核苷酸序列。
在与第四方面相关的另一实施方案中，该制剂包含：抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
在与第四方面相关的实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ IDNO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在另一特定实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
在第五方面中，本发明关于一种减少本申请所公开的抗IL-36R抗体的聚集及/或片段化的方法，其包含将该抗体调配于缓冲系统及表面活性剂中，及在调配该抗体之前及之后评估数据(例如任何抗体聚集)。在与该第五方面相关的实施方案中，该抗体根据该第一或第二方面的这些实施方案中的任一个而调配。
在与第五方面相关的一实施方案中，制剂包括：抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/ml抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
在与第五方面相关的实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ IDNO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在另一特定实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
在第六方面中，本发明关于一种分装部分的试剂盒，其包含：至少一个容器，该至少一个容器包含根据第一或第二方面中的任一个的医药制剂；及根据第三方面的注射装置。在一实施方案中，分装部分的试剂盒包含至少一个容器，该至少一个容器包含根据第一或第二方面的医药制剂。在一相关实施方案中，分装部分的试剂盒包含一或多个含有根据第一或第二方面的制剂的小瓶及用于向受试者皮下或肌肉内投与制剂的说明书。根据本发明的分装部分的试剂盒或注射装置例如适用于皮下投与。在此情况下，注射针头优选地具有≥10mm至≤100mm的长度及0.2mm与1mm之间的规格(规格33至19)。
在与第六方面相关的实施方案中，制剂包括抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该制剂选自由以下组成的组：
I.包含以下的制剂：约20mg/ml抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0。
在与该第六方面相关的实施方案中，该注射装置为预组装注射装置，其包含自动注射器或针头安全装置。在一相关实施方案中，该自动注射器或针头安全装置各自包括：(a)约2mL的总体积中的约300mg的该抗体；(b)约1.5mL的总体积中的约225mg的该抗体；(c)约1mL的总体积中的约150mg的该抗体；(d)约0.5mL的总体积中的约75mg的该抗体；或(e)约0.4mL的总体积中的约60mg的该抗体。
根据本发明的另一方面，提供根据本发明的制剂、根据本发明的预组装注射装置或根据本发明的分装部分的试剂盒的用途，其用于静脉内及/或皮下投与。
在与第六方面相关的实施方案中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或包含如SEQ IDNO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。在另一特定实施方案中，抗IL-36R抗体由包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链组成。
根据本发明的另一方面，提供根据本发明的制剂、根据本发明的预组装注射装置或根据本发明的分装部分的试剂盒的用途，其用于治疗至少一种选自由自体免疫病症及/或恶性疾病组成的组的疾病。该定义覆盖的自体免疫病症的非限制性实例包括牛皮癣、类风湿性关节炎、发炎性肠病或牛皮癣性关节炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、硬皮病、掌跖脓疱病、全身型脓疱性牛皮癣、异位性皮炎、糖尿病性肾病变、狼疮性肾炎、硬皮病、僵直性脊椎炎、IL-36受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(DITRA)、IL-1受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(DIRA)或冷吡啉相关周期性综合征(CAPS)、类风湿性关节炎(RA)、全身性红斑性狼疮症(SLE)、硬皮病、薛格连氏症候群、多发性硬化症、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、发炎性肠病(例如溃疡性结肠炎及克罗恩氏病)、肺部发炎、哮喘、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、上皮发炎性病症、纤维化及僵直性脊椎炎。在另一优选实施方案中，该试剂盒包含用于向受试者皮下或肌肉内投与该制剂的说明书。
抗体
本发明的抗IL-36R抗体公开于美国专利第9,023,995号或WO2013/074569中，其中的每一个的全部内容以引用的方式并入本申请中。
IL-36α、IL-36β及IL-36γ的信使RNA高度表达于若干组织中，特别是，暴露于病原体的内部上皮组织中及皮肤中。有趣的是，IL-36Ra及IL-36α的表达在IL-1β/TNF-α刺激的人类角质细胞中显著上调，且IL-36Ra及IL-36γmRNA在病变牛皮癣皮肤中高度增加。此外，在TNF-α及IFN-γ刺激之后，人类角质细胞中的IL-36γ蛋白产生增强。也在慢性肾病中报导升高的IL-36αmRNA及蛋白表达。综合而言，这些数据指示，包括IL-36α、IL-36β和IL-36γ的L-36R配体在活体外及活体内发挥促炎性作用，且IL-36Ra充当天然拮抗剂，由此模拟IL-1/IL-1Ra统。证据表明，IL-36R配体参与包括发炎性疾病的多种疾病病况。本申请所描述的抗IL-36R抗体减少或阻断IL36配体介导型信号传导且适用于治疗此类病况或疾病。本发明的代表性抗体的可变区及CDR公开如下：
抗IL-36R小鼠抗体序列
本发明的代表性小鼠前导抗体(小鼠前导)的可变区及CDR展示如下：
轻链可变区(VK)氨基酸序列
>33D10B12vK蛋白(抗体33D10)
QIVLTQSPAIMSASLGERVTMTCTASSSVSSSYLHWYQKKPGSSPKLWVYSTSNLASGVPVRFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCHQHHRSPVTFGSGTKLEMK(SEQ ID NO:1)
>172C8B12 vK蛋白(抗体172C8)
DIQMTQSPASQSASLGESVTFTCLASQTIGTWLAWYQQRPGKSPQLLIYAATSLADGVPSRFSGSGSGTQFSFNIRSLQAEDFASYYCQQVYTTPLTFGGGTKLEIK(SEQ ID NO:2)
>67E7E8 vK蛋白(抗体67E7)
DIQMTQSPASQSASLGESVTFTCLASQTIGTWLGWYQQKPGKSPQLLIYRSTTLADGVPSRFSGSGSGTKFSFKISSLQAADFASYYCQQLYSAPYTFGGGTKLEIR(SEQ ID NO:3)
>78C8D1 vK蛋白(抗体78C8)
DVLLTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQNIVHSNGNTYLQWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQGSHVPFTFGAGTKLELK(SEQ ID NO:4)
>81A1D1 vK蛋白(抗体81A1)
DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDIYKYLNWYQQKPDGTLKLLIYYTSGLHSGVPSRFSGSGSGTDFSLTISNLEPEDIATYFCQQDSKFPWTFGGDTKLEIK(SEQ ID NO:5)
>81B4E11 vK蛋白(抗体81B4)
QIVLTQSPAIMSASLGERVTMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGSSPKLWIYRTSNLASGVPGRFSGSGSGTSYSLTISSMEAEDAATYYCHQFHRSPLTFGAGTKLELK(SEQ ID NO:6)
>73C5C10 vK蛋白(抗体73C5)
DIVMTQSQKFLSTSVGVRVSVTCKASQDVGTNVLWYQQKIGQSPKPLIYSASYRHSGVPDRFTGSGSGTDFTLIISNVQSEDLAEYFCQQYSRYPLTFGPGTKLELK(SEQ ID NO:7)
>73F6F8 vK蛋白(抗体73F6)
DIVMTQSQKFLSTSVGVRVSVTCKASQDVGTNVLWYQQKIGQSPKALIYSASYRHSGVPDRFTGSGSGTDFTLIITNVQSEDLAEYFCQQYSRYPLTFGPGTKLELK(SEQ ID NO:8)
>76E10E8 vK蛋白(抗体76E10)
DIVMTQSQKFMSATVGGRVNITCKASQNVGRAVAWYQQKPGQSPKLLTHSASNRYTGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNMQSEDLADYFCQQYSSYPLTFGAGTKLDLK(SEQ ID NO:9)
>89A12B8 vK蛋白(抗体89A12)
DIQMTQSPASQSASLGESVTFSCLASQTIGTWLGWYQQKPGKSPQLLIYRATSLADGVPSRFSGSGSGTNFSFKISSLQAEDLASYYCQQLYSGPYTFGGGTKLEIR(SEQ ID NO:10)
重链可变区(VH)氨基酸序列
>33D10B12vH蛋白(抗体33D10)
QVQLQQSGTELLKPGASVKLSCKASGNTVTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEILPSTGRTNYNENFKGKAMLTVDKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCTIVYFGNPWFAYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:11)
>172C8B12 vH蛋白(抗体172C8)
EVQLQQSGPELVKPGASVKLSCKASGYTFTDNYMNWVRQSHGKSLEWIGRVNPSNGDTKYNQNFKGKATLTVDKSLSTAYMQLNGLTSEDSAVYYCGRTKNFYSSYSYDDAMDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO:12)
>67E7E8 vH蛋白(抗体67E7)
EVQLQQSGAEFVRPGASVKFSCTASGFNIKDDYIHWVRQRPEQGLEWVGRIDPANGNTKYAPKFQDKATITADTSSNTAYLQLSSLTSEDTAVYYCAKSFPNNYYSYDDAFAYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:13)
>78C8D1 vH蛋白(抗体78C8)
QVQLKESGPVLVAPSQSLSITCTVSGFSLTKFGVHWIRQTPGKGLEWLGVIWAGGPTNYNSALMSRLTISKDISQSQVFLRIDSLQTDDTAMYYCAKQIYYSTLVDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO:14)
>81A1D1 vH蛋白(抗体81A1)
QVQLKESGPGLVAPSQSLFITCTVSGFSLSSYEINWVRQVPGKGLEWLGVIWTGITTNYNSALISRLSISKDNSKSLVFLKMNSLQTDDTAIYYCARGTGTGFYYAMDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO:15)
>81B4E11 vH蛋白(抗体81B4)
QVQLQQPGADFVRPGASMRLSCKASGYSFTSSWIHWVKQRPGQGLEWIGEINPGNVRTNYNENFRNKATLTVDKSSTTAYMQLRSLTSADSAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:16)
>73C5C10 vH蛋白(抗体73C5)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTNYAVHWVRQFPGKGLEWLGVIWSDGSTDFNAPFKSRLSINKDNSKSQVFFKMNSLQIDDTAIYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:17)
>73F6F8 vH蛋白(抗体73F6)
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTNYAVHWVRQFPGKGLEWLGVIWSDGSTDYNAPFKSRLSINKDNSKSQVFFKMNSLQTDDTAIYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:18)
>76E10E8 vH蛋白(抗体76E10)
QVQLKESGPVLVAPSQSLSITCTVSGFSLTNYGVHWVRQPPGKGLEWLGVIWPVGSTNYNSALMSRLSIHKDNSKSQVFLRMNSLQTDDTAIYYCAKMDWDDFFDYWGQGTTLTVSS(SEQ ID NO:19)
>89A12B8 vH蛋白(抗体89A12)
EVQLQQSGAELVRPGASVRLSCTASGFNIKDDYIHWVRQRPKQGLEWLGRIDPANGNTKYDPRFQDKATITADTSSNTAYLHLSSLTSEDTAVYYCAKSFPDNYYSYDDAFAYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:20)
轻链CDR-1(L-CDR1)氨基酸序列
>33D10G1 L-CDR1
TASSSVSSSYLH(SEQ ID NO:21)
>172C8B12 L-CDR1
LASQTIGTWLA(SEQ ID NO:22)
>67E7E8 L-CDR1
LASQTIGTWLG(SEQ ID NO:23)
>78C8D1 L-CDR1
RSSQNIVHSNGNTYLQ(SEQ ID NO:24)
>81A1D1 L-CDR1
RASQDIYKYLN(SEQ ID NO:25)
>81B4E11 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>73C5C10 L-CDR1
KASQDVGTNVL(SEQ ID NO:27)
>73F6F8 L-CDR1
KASQDVGTNVL(SEQ ID NO:27)
>76E10E8 L-CDR1
KASQNVGRAVA(SEQ ID NO:28)
>89A12B8 L-CDR1
LASQTIGTWLG(SEQ ID NO:29)
轻链CDR-2(L-CDR2)氨基酸序列
>33D10B12 L-CDR2
STSNLAS(SEQ ID NO:30)
>172C8B12 L-CDR2
AATSLAD(SEQ ID NO:31)
>67E7E8 L-CDR2
RSTTLAD(SEQ ID NO:32)
>78C8D1 L-CDR2
KVSNRFS(SEQ ID NO:33)
>81A1D1 L-CDR2
YTSGLHS(SEQ ID NO:34)
>81B4E11 L-CDR2
RTSNLAS(SEQ ID NO:35)
>73C5C10 L-CDR2
SASYRHS(SEQ ID NO:36)
>73F6F8 L-CDR2
SASYRHS(SEQ ID NO:36)
>76E10E8 L-CDR2
SASNRYT(SEQ ID NO:37)
>89A12B8 L-CDR2
RATSLAD(SEQ ID NO:38)
轻链CDR-3(L-CDR3)氨基酸序列
>33D10B12 L-CDR3
HQHHRSPVT(SEQ ID NO:39)
>172C8B12 L-CDR3
QQVYTTPLT(SEQ ID NO:40)
>67E7E8 L-CDR3
QQLYSAPYT(SEQ ID NO:41)
>78C8D1 L-CDR3
FQGSHVPFT(SEQ ID NO:42)
>81A1D1 L-CDR3
QQDSKFPWT(SEQ ID NO:43)
>81B4E11 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>73C5C10 L-CDR3
QQYSRYPLT(SEQ ID NO:45)
>73F6F8 L-CDR3
QQYSRYPLT(SEQ ID NO:45)
>76E10E8 L-CDR3
QQYSSYPLT(SEQ ID NO:46)
>89A12B8 L-CDR3
QQLYSGPYT(SEQ ID NO:47)
重链CDR-1(H-CDR1)氨基酸序列
>33D10B12 H-CDR1
GNTVTSYWMH(SEQ ID NO:48)
>172C8B12 H-CDR1
GYTFTDNYMN(SEQ ID NO:49)
>67E7E8 H-CDR1
GFNIKDDYIH(SEQ ID NO:50)
>78C8D1 H-CDR1
GFSLTKFGVH(SEQ ID NO:51)
>81A1D1 H-CDR1
GFSLSSYEIN(SEQ ID NO:52)
>81B4E11 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>73C5C10 H-CDR1
GFSLTNYAVH(SEQ ID NO:54)
>73F6F8 H-CDR1
GFSLTNYAVH(SEQ ID NO:54)
>76E10E8 H-CDR1
GFSLTNYGVH(SEQ ID NO:55)
>89A12B8 H-CDR1
GFNIKDDYIH(SEQ ID NO:56)
重链CDR-2(H-CDR2)氨基酸序列
>33D10B12 H-CDR2
EILPSTGRTNYNENFKG(SEQ ID NO:57)
>172C8B12 H-CDR2
RVNPSNGDTKYNQNFKG(SEQ ID NO:58)
>67E7E8 H-CDR2
RIDPANGNTKYAPKFQD(SEQ ID NO:59)
>78C8D1 H-CDR2
VIWAGGPTNYNSALMS(SEQ ID NO:60)
>81A1D1 H-CDR2
VIWTGITTNYNSALIS(SEQ ID NO:61)
>81B4E11 H-CDR2
EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO:62)
>73C5C10 H-CDR2
VIWSDGSTDFNAPFKS(SEQ ID NO:63)
>73F6F8 H-CDR2
VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO:64)
>76E10E8 H-CDR2
VIWPVGSTNYNSALMS(SEQ ID NO:65)
>89A12B8 H-CDR2
RIDPANGNTKYDPRFQD(SEQ ID NO:66)
重链CDR-3(H-CDR3)氨基酸序列
>33D10B12 H-CDR3
VYFGNPWFAY(SEQ ID NO:67)
>172C8B12 H-CDR3
TKNFYSSYSYDDAMDY(SEQ ID NO:68)
>67E7E8 H-CDR3
SFPNNYYSYDDAFAY(SEQ ID NO:69)
>78C8D1 H-CDR3
QIYYSTLVDY(SEQ ID NO:70)
>81A1D1 H-CDR3
GTGTGFYYAMDY(SEQ ID NO:71)
>81B4E11 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>73C5C10 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>73F6F8 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>76E10E8 H-CDR3
MDWDDFFDY(SEQ ID NO:74)
>89A12B8 H-CDR3
SFPDNYYSYDDAFAY(SEQ ID NO:75)
抗IL-36R小鼠CDR序列
小鼠前导抗体的CDR序列的汇总展示如下：
Figure BDA0003248185000000631
Figure BDA0003248185000000641
Figure BDA0003248185000000651
抗IL-36R人源化抗体序列
基于构架同源性、CDR结构、保守典型残基、保守表面填充残基及其他参数针对小鼠前导选择人类构架序列以产生人源化可变区。
源自抗体81B4及73C5的代表性人源化可变区展示如下。
轻链可变区(VK)氨基酸序列
>81B4vK32_3 vK蛋白
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSTLASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:76)
>81B4vK32_105 vK蛋白
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSILASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:77)
>81B4vK32_116 vK蛋白
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLWIYRTSRLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:78)
>81B4vK32_127 vK蛋白
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSRLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:79)
>81B4vK32_138 vK蛋白
QIVLTQSPGTLSLSPGERATMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLWIYRTSRLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGAGTKLEIK(SEQ ID NO:80)
>81B4vK32_140 vK蛋白
QIVLTQSPGTLSLSPGERVTMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSQLASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:81)
>81B4vK32_141 vK蛋白
QIVLTQSPGTLSLSPGERATMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSKLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:82)
>81B4vK32_147 vK蛋白
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSHLASGIPGRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAAVYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:83)
>73C5vK39_2 vK蛋白
EIVMTQSPATLSVSPGVRATLSCKASQDVGTNVLWYQQKPGQAPRPLIYSASYRHSGIPDRFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAEYFCQQYSRYPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:84)
>73C5vK39_7 vK蛋白
EIVMTQSPATLSVSPGVRATLSCKASQDVGTNVLWYQQKPGQAPRPLIYSASYRHSGIPDRFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYSRYPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:85)
>73C5vK39_15 vK蛋白
EIVMTQSPATLSVSPGVRATLSCKASQDVGTNVLWYQQKPGQAPRPLIYSASYRHSGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAEYYCQQYSRYPLTFGQGTKLEIK(SEQ ID NO:86)
重链可变区(VH)氨基酸序列
>81B4vH33_49 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGNVRTNYNENFRNKATMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:87)
>81B4vH33_85T vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWIGEINPGNVRTNYNENFRNRVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:88)
>81B4vH33_90 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVKQAPGQGLEWMGEINPGNVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:89)
>81B4vH33_93 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWMGEINPGNVRTNYNENFRNRATLTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:90)
>81B4vH50_22 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWMGEILPGVVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:91)
>81B4vH50_30 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWIGEINPGAVRTNYNENFRNRVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:92)
>81B4vH51_13 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGLVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:93)
>81B4vH51_15 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGAVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:94)
>81B4vH52_83 vH蛋白
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGSVRTNYNENFRNKATMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:95)
>73C5vH46_4 vH蛋白
QVQLQESGPGLVKPSETLSITCTVSGFSLTDYAVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAPFKSRVTINKDTSKSQVSFKMSSVQAADTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:96)
>73C5vH46_19 vH蛋白
QVQLQESGPGLVKPSETLSITCTVSGFSLTDYAVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAPFKSRVTISKDTSKNQVSLKMNSLTTDDTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:97)
>73C5vH46_40 vH蛋白
QVQLQESGPGLVKPSETLSITCTVSGFSLTDYAVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAPFKSRVTISKDNSKSQVSLKMNSVTVADTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:98)
>73C5vH47_65 vH蛋白
QVQLQESGPGLVKPSETLSITCTVSGFSLTDYAVHWVRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAPFKSRVTISKDTSKNQVSFKLSSVTVDDTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:99)
>73C5vH47_77 vH蛋白
QVQLQESGPGLVAPSETLSLTCTVSGFSLTDYAVHWIRQFPGKGLEWIGVIWSDGSTDFNAPFKSRVTISKDTSKNQVSFKLSSVTTDDTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:100)
>73C5vH58_91 vH蛋白
QVQLQESGPGLVKPSETLSITCTVSGFSLTDYAVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAPFKSRVTISKDNSKSQVSFKMSSVTADDTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:101)
来自上文所示的源自抗体81B4及73C5的人源化可变区的CDR序列描绘如下。
L-CDR1氨基酸序列
>81B4vK32_3 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_105 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_116 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_127 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_138 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_140 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_141 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>81B4vK32_147 L-CDR1
TASSSVSSSYFH(SEQ ID NO:26)
>73C5vK39_2 L-CDR1
KASQDVGTNVL(SEQ ID NO:27)
>73C5vK39_7 L-CDR1
KASQDVGTNVL(SEQ ID NO:27)
>73C5vK39_15 L-CDR1
KASQDVGTNVL(SEQ ID NO:27)
L-CDR2氨基酸序列
>81B4vK32_3 L-CDR2(SEQ ID NO:102)
RTSTLAS
>81B4vK32_105 L-CDR2(SEQ ID NO:103)
RTSILAS
>81B4vK32_116 L-CDR2(SEQ ID NO:104)
RTSRLAS
>81B4vK32_127 L-CDR2(SEQ ID NO:104)
RTSRLAS
>81B4vK32_138 L-CDR2(SEQ ID NO:104)
RTSRLAS
>81B4vK32_140 L-CDR2(SEQ ID NO:105)
RTSQLAS
>81B4vK32_141 L-CDR2(SEQ ID NO:106)
RTSKLAS
>81B4vK32_147 L-CDR2(SEQ ID NO:140)
RTSHLAS
>73C5vK39_2 L-CDR2
SASYRHS(SEQ ID NO:36)
>73C5vK39_7 L-CDR2
SASYRHS(SEQ ID NO:36)
>73C5vK39_15 L-CDR2
SASYRHS(SEQ ID NO:36)
L-CDR3氨基酸序列
>81B4vK32_3 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_105 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_116 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_127 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_138 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_140 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_141 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>81B4vK32_147 L-CDR3
HQFHRSPLT(SEQ ID NO:44)
>73C5vK39_2 L-CDR3
QQYSRYPLT(SEQ ID NO:45)
>73C5vK39_7 L-CDR3
QQYSRYPLT(SEQ ID NO:45)
>73C5vK39_15 L-CDR3
QQYSRYPLT(SEQ ID NO:45)
H-CDR1氨基酸序列
>81B4vH33_49 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH33_85T H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH33_90 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH33_93 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH50_22 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH50_30 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH51_13 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH51_15 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>81B4vH52_83 H-CDR1
GYSFTSSWIH(SEQ ID NO:53)
>73C5vH46_4 H-CDR1
GFSLTDYAVH(SEQ ID NO:107)
>73C5vH46_19 H-CDR1
GFSLTDYAVH(SEQ ID NO:107)
>73C5vH46_40 H-CDR1
GFSLTDYAVH(SEQ ID NO:107)
>73C5vH47_65 H-CDR1
GFSLTDYAVH(SEQ ID NO:107)
>73C5vH47_77 H-CDR1
GFSLTDYAVH(SEQ ID NO:107)
>73C5vH58_91 H-CDR1
GFSLTDYAVH(SEQ ID NO:107)
H-CDR2氨基酸序列
>81B4vH33_49 H-CDR2
EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO:62)
>81B4vH33_85T H-CDR2
EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO:62)
>81B4vH33_90 H-CDR2
EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO:62)
>81B4vH33_93 H-CDR2
EINPGNVRTNYNENF(SEQ ID NO:62)
>81B4vH50_22 H-CDR2
EILPGVVRTNYNENF(SEQ ID NO:108)
>81B4vH50_30 H-CDR2
EINPGAVRTNYNENF(SEQ ID NO:109)
>81B4vH51_13 H-CDR2
EINPGLVRTNYNENF(SEQ ID NO:110)
>81B4vH51_15 H-CDR2
EINPGAVRTNYNENF(SEQ ID NO:109)
>81B4vH52_83 H-CDR2
EINPGSVRTNYNENF(SEQ ID NO:111)
>73C5vH46_4 H-CDR2
VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO:64)
>73C5vH46_19 H-CDR2
VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO:64)
>73C5vH46_40 H-CDR2
VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO:64)
>73C5vH47_65 H-CDR2
VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO:64)
>73C5vH47_77 H-CDR2
VIWSDGSTDFNAPFKS(SEQ ID NO:63)
>73C5vH58_91 H-CDR2
VIWSDGSTDYNAPFKS(SEQ ID NO:64)
H-CDR3氨基酸序列
>81B4vH33_49 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH33_85T H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH33_90 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH33_93 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH50_22 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH50_30 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH51_13 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH51_15 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>81B4vH52_83 H-CDR3
VFYGEPYFPY(SEQ ID NO:72)
>73C5vH46_4 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>73C5vH46_19 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>73C5vH46_40 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>73C5vH47_65 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>73C5vH47_77 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
>73C5vH58_91 H-CDR3
KGGYSGSWFAY(SEQ ID NO:73)
在一个方面中，本发明的可变区连接于恒定区。举例而言，本发明的可变区连接于如下所示的恒定区以形成抗体的重链或轻链。
连接在人源化可变重链区的下游的重链恒定区：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:112)
连接在人源化可变轻链区的下游的轻链恒定区：
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:113)
本发明的代表性轻链及重链序列展示如下(源自抗体81B4及73C5的人源化可变区连接于恒定区)。
轻链氨基酸序列
>81B4vK32_3轻链
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSTLASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:114)
>81B4vK32_105轻链
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSILASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:115)
>81B4vK32_116轻链
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLWIYRTSRLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:116)
>81B4vK32_127轻链
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSRLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:117)
>81B4vK32_138轻链
QIVLTQSPGTLSLSPGERATMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLWIYRTSRLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGAGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:118)
>81B4vK32_140轻链
QIVLTQSPGTLSLSPGERVTMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSQLASGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:119)
>81B4vK32_141轻链
QIVLTQSPGTLSLSPGERATMTCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSKLASGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFATYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:120)
>81B4vK32_147轻链
EIVLTQSPGTLSLSPGERATMSCTASSSVSSSYFHWYQQKPGQAPRLLIYRTSHLASGIPGRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDAAVYYCHQFHRSPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:121)
>73C5vK39_2轻链
EIVMTQSPATLSVSPGVRATLSCKASQDVGTNVLWYQQKPGQAPRPLIYSASYRHSGIPDRFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAEYFCQQYSRYPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:122)
>73C5vK39_7轻链
EIVMTQSPATLSVSPGVRATLSCKASQDVGTNVLWYQQKPGQAPRPLIYSASYRHSGIPDRFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYSRYPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:123)
>73C5vK39_15轻链
EIVMTQSPATLSVSPGVRATLSCKASQDVGTNVLWYQQKPGQAPRPLIYSASYRHSGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAEYYCQQYSRYPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:124)
重链氨基酸序列
>81B4vH33_49重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGNVRTNYNENFRNKATMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:125)
>81B4vH33_85T重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWIGEINPGNVRTNYNENFRNRVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:126)
>81B4vH33_90重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVKQAPGQGLEWMGEINPGNVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:127)
>81B4vH33_93重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWMGEINPGNVRTNYNENFRNRATLTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:128)
>81B4vH50_22重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWMGEILPGVVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:129)
>81B4vH50_30重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQRPGQGLEWIGEINPGAVRTNYNENFRNRVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCTVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:130)
>81B4vH51_13重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGLVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:131)
>81B4vH51_15重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGAVRTNYNENFRNKVTMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:132)
>81B4vH52_83重链
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTSSWIHWVRQAPGQGLEWIGEINPGSVRTNYNENFRNKATMTVDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVVFYGEPYFPYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:133)
>73C5vH46_4重链
QVQLQESGPGLVKPSETLSITCTVSGFSLTDYAVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAPFKSRVTINKDTSKSQVSFKMSSVQAADTAVYYCARKGGYSGSWFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:134)
>73C5vH46_19重链
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>73C5vH46_40重链
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>73C5vH47_65重链
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>73C5vH47_77重链
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>73C5vH58_91重链
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上文所列的CDR使用Chothia编号系统(Al-Lazikani等(1997)JMB 273,927-948)定义。
在一个方面中，本发明的抗体包含3个轻链CDR及3个重链CDR，例如如上文所阐述。
在一个方面中，本发明的抗体包含如上文所阐述的轻链及重链可变区。在一个方面中，本发明的轻链可变区与轻链恒定区，例如κ或λ恒定区融合。在一个方面中，本发明的重链可变区与重链恒定区，例如IgA、IgD、IgE、IgG或IgM，尤其IgG1、IgG2、IgG3或IgG4融合。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:115的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:125的重链(抗体B1)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:115的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:126的重链(抗体B2)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:115的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:127的重链(抗体B3)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:118的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:125的重链(抗体B4)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:118的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:126的重链(抗体B5)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:118的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:127的重链(抗体B6)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:123的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:138的重链(抗体C3)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:123的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:139的重链(抗体C2)。
本发明提供一种抗IL-36R抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:124的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:138的重链(抗体C1)。
本发明的代表性抗体展示如下。
表A.
Figure BDA0003248185000000851
Figure BDA0003248185000000861
Figure BDA0003248185000000871
Figure BDA0003248185000000881
Figure BDA0003248185000000891
表B
Figure BDA0003248185000000892
Figure BDA0003248185000000901
Figure BDA0003248185000000911
本发明的抗体适用于用于治疗人类的各种疾病或病症，例如免疫疾病、发炎性疾病、自体免疫疾病及呼吸道疾病的方法中。举例而言，本发明的抗体适用于用于治疗牛皮癣、类风湿性关节炎、发炎性肠病或牛皮癣性关节炎的方法中。举例而言，本发明的抗体适用于用于治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)或哮喘的方法中。举例而言，本发明的抗体适用于用于治疗硬皮病、掌跖脓疱病、全身型脓疱性牛皮癣、糖尿病性肾病变、狼疮性肾炎、硬皮病、僵直性脊椎炎、IL-36受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(DITRA)、IL-1受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(DIRA)或冷吡啉相关周期性综合征(CAPS)。
在一些方面中，人源化抗体显示阻断活性，由此其使IL-36配体与IL-36受体的结合降低至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。抗体阻断IL-36配体与IL-36受体的结合的能力可使用本领域中已知的竞争性结合分析来测量。或者，抗体的阻断活性可通过评定IL-36的生物效应，例如IL-8、IL-6及GM-CSF的产生来测量，以测定由IL-36受体介导的信号传导是否得到抑制。
在另一方面中，本发明提供一种具有有利生理特性的人源化抗IL-36R抗体。在一个方面中，本发明的人源化抗IL-36R抗体在缓冲剂中以至少90％单体形式，或以至少92％单体形式，或以至少95％单体形式存在。在另一方面中，本发明的人源化抗IL-36R抗体在缓冲剂中保持呈至少90％单体形式，或至少92％单体形式，或至少95％单体形式持续一个月或四个月。
在一个方面中，本发明的人源化抗体为抗体B1、抗体B2、抗体B3、抗体B4、抗体B5、抗体B6、抗体C1、抗体C2或抗体C3。因此，在一个实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQID NO:115的轻链序列及SEQ ID NO:125的重链序列(抗体B1)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQ ID NO:115的轻链序列及SEQ ID NO:126的重链序列(抗体B2)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQ ID NO:115的轻链序列及SEQ ID NO:127的重链序列(抗体B3)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQ ID NO:118的轻链序列及SEQ ID NO:125的重链序列(抗体B4)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQID NO:118的轻链序列及SEQ ID NO:126的重链序列(抗体B5)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQ ID NO:118的轻链序列及SEQ ID NO:127的重链序列(抗体B6)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQ ID NO:124的轻链序列及SEQ ID NO:138的重链序列(抗体C1)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQ ID NO:123的轻链序列及SEQ ID NO:139的重链序列(抗体C2)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体包含SEQID NO:123的轻链序列及SEQ ID NO:138的重链序列(抗体C3)。
在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:115的轻链序列及SEQ IDNO:125的重链序列组成(抗体B1)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:115的轻链序列及SEQ ID NO:126的重链序列组成(抗体B2)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:115的轻链序列及SEQ ID NO:127的重链序列组成(抗体B3)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:118的轻链序列及SEQ ID NO:125的重链序列组成(抗体B4)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:118的轻链序列及SEQ ID NO:126的重链序列组成(抗体B5)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:118的轻链序列及SEQ ID NO:127的重链序列组成(抗体B6)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:124的轻链序列及SEQ ID NO:138的重链序列组成(抗体C1)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:123的轻链序列及SEQ IDNO:139的重链序列组成(抗体C2)。在另一实施方案中，本发明的人源化抗体由SEQ ID NO:123的轻链序列及SEQ ID NO:138的重链序列组成(抗体C3)。
在一些实施方案中，人源化抗IL-36R抗体，包括其抗原结合片段，例如重链及轻链可变区，包含源自抗体B1、抗体B2、抗体B3、抗体B4、抗体B5、抗体B6、抗体C1、抗体C2或抗体C3的残基的氨基酸序列。
在另一实施方案中，本发明提供一种与本发明的抗体竞争性地结合于人类IL-36R的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，本发明的抗体例如本申请所描述的抗体B1、抗体B2、抗体B3、抗体B4、抗体B5、抗体B6、抗体C1、抗体C2或抗体C3。抗体或抗原结合片段竞争性地结合于IL-36R的能力可使用本领域中已知的竞争性结合分析来测量。
人源化抗IL-36R抗体视情况包括共同或生殖系构架区中的特异性氨基酸取代。相对于通过将CDR或HVL“直接交换”至人类生殖系构架区中所形成的人源化抗体中所展现的效能，这些构架位置处的氨基酸残基的特异性取代可改良抗体效能的各个方面，包括结合亲和力及/或稳定性。
在一些实施方案中，本发明描述其他单克隆抗体，其含有具有SEQ ID NO:1至10中的任一个中所列的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，本发明描述其他单克隆抗体，其含有具有SEQ ID NO:11至20中的任一个中所列的氨基酸序列的重链可变区。将这些CDR置于人类共同重链及轻链可变域的FR区中将产生适用的本发明的人源化抗体。
特别是，本发明提供具有以下的轻链可变及重链可变区的组合的单克隆抗体：SEQID NO:1/11、2/12、3/13、4/14、5/15、6/16、7/17、8/18、9/19、10/20。此类可变区可与人类恒定区组合。
在一些实施方案中，本发明描述其他人源化抗体，其含有具有SEQ ID NO:76至86中的任一个中所列的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，本发明描述其他人源化抗体，其含有具有SEQ ID NO:87至101中的任一个中所列的氨基酸序列的重链可变区。详言的，本发明提供具有以下的轻链可变及重链可变区的组合的单克隆抗体：SEQ ID NO:77/89、80/88、80/89、77/87、77/88、80/87、86/100、85/101、85/100。此类可变区可与人类恒定区组合。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:77的CDR及具有与SEQ ID NO:77的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:89的CDR及具有与SEQ ID NO:89的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:80的CDR及具有与SEQ ID NO:80的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:88的CDR及具有与SEQ ID NO:88的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:80的CDR及具有与SEQ ID NO:80的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:89的CDR及具有与SEQ ID NO:89的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:77的CDR及具有与SEQ ID NO:77的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:87的CDR及具有与SEQ ID NO:87的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:77的CDR及具有与SEQ ID NO:77的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:88的CDR及具有与SEQ ID NO:88的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:80的CDR及具有与SEQ ID NO:80的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:87的CDR及具有与SEQ ID NO:87的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:86的CDR及具有与SEQ ID NO:86的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:100的CDR及具有与SEQ ID NO:100的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:85的CDR及具有与SEQ ID NO:85的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:101的CDR及具有与SEQ ID NO:101的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在另一实施方案中，本发明关于一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：人源化轻链可变域，该轻链可变域包含SEQ ID NO:85的CDR及具有与SEQ ID NO:85的可变域轻链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区；及人源化重链可变域，该重链可变域包含SEQ ID NO:100的CDR及具有与SEQ ID NO:100的可变域重链氨基酸序列的构架区的氨基酸序列具有至少90％一致性、至少93％一致性或至少95％一致性的氨基酸序列的构架区。在一个实施方案中，抗IL-36R抗体为人源化单克隆抗体。
在一些特定实施方案中，本申请所公开的人源化抗IL-36R抗体包含至少一个重或轻链可变域，其包含如本申请所公开的鼠类单克隆抗体或人源化抗体的CDR或HVL及人类生殖系重链及轻链可变域的FR。
在另一方面中，本发明提供一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：SEQ IDNO:21至29中的任一个的轻链CDR1(L-CDR1)序列；SEQ ID NO:30至38中的任一个的轻链CDR2(L-CDR2)序列；SEQ ID NO:39至47中的任一个的轻链CDR3(L-CDR3)序列；SEQ ID NO:48至56中的任一个的重链CDR1(H-CDR1)序列；SEQ ID NO:57至66中的任一个的重链CDR2(H-CDR2)序列；及SEQ ID NO:67至75中的任一个的重链CDR3(H-CDR3)序列。在一个方面中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含上文所列的L-CDR1、上文所列的L-CDR2及上文所列的L-CDR3；及重链可变区，其包含上文所列的H-CDR1、上文所列的H-CDR2及上文所列的H-CDR3。
在另一方面中，本发明提供一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
a)分别为SEQ ID NO:21、30、39、48、57及67的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
b)分别为SEQ ID NO:22、31、40、49、58及68的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
c)分别为SEQ ID NO:23、32、41、50、59及69的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
d)分别为SEQ ID NO:24、33、42、51、60及70的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
e)分别为SEQ ID NO:25、34、43、52、61及71的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
f)分别为SEQ ID NO:26、35、44、53、62及72的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
g)分别为SEQ ID NO:27、36、45、54、63及73的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
h)分别为SEQ ID NO:27、36、45、54、64及74的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
i)分别为SEQ ID NO:27、36、45、54、64及73的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
j)分别为SEQ ID NO:28、37、46、55、65及74的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
k)分别为SEQ ID NO:29、38、47、56、66及75的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列。
在另一方面中，本发明提供一种抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
a)分别为SEQ ID NO:26、103、44、53、62及72的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
b)分别为SEQ ID NO:26、104、44、53、62及72的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
c)分别为SEQ ID NO:27、36、45、107、63及73的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列；或
d)分别为SEQ ID NO:27、36、45、107、64或73的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3序列。
在一个方面中，抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含上文所列的L-CDR1、L-CDR2及L-CDR3组合；及重链可变区，其包含上文所列的H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3组合。
在特定实施方案中，预期在这些例示性免疫球蛋白之间具有经交换的CDR区(即，例如用来自另一小鼠抗体或由其衍生的人源化抗体的类似CDR交换小鼠抗体之一或由其衍生的人源化抗体的一或两个CDR)的嵌合抗体可产生适用抗体。
在某些实施方案中，人源化抗IL-36R抗体为抗体片段。各种抗体片段已在上文进行一般论述且存在已研发用于产生抗体片段的技术。片段可经由完整抗体的蛋白水解消化得到(参见例如Morimoto等,1992,Journal of Biochemical and Biophysical Methods24:107-117；及Brennan等,1985,Science229:81)。或者，片段可在重组宿主细胞中直接产生。举例而言，Fab'-SH片段可自大肠杆菌中直接回收且以化学方式偶合以形成F(ab')2片段(参见例如Carter等,1992,Bio/Technology 10:163-167)。通过另一方法，F(ab')2片段可自重组宿主细胞培养物直接分离。用于产生抗体片段的其他技术将为本领域技术人员显而易见。因此，在一个方面中，本发明提供包含本申请所描述的CDR，特别是本申请所描述的L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3、H-CDR1、H-CDR2及H-CDR3的组合中之一的抗体片段。在另一方面中，本发明提供包含本申请所描述的可变区，例如本申请所描述的轻链可变区及重链可变区的组合中之一的抗体片段。
某些实施方案包括人源化抗IL-36R抗体的F(ab')2片段，其包含SEQ ID NO:115或118中的任一个的轻链序列与SEQ ID NO:125、126或127的重链序列的组合。此类实施方案可包括包含此F(ab')2的完整抗体。
某些实施方案包括人源化抗IL-36R抗体的F(ab')2片段，其包含SEQ ID NO:123或124中的任一个的轻链序列与SEQ ID NO:138或139的重链序列的组合。此类实施方案可包括包含此F(ab')2的完整抗体。
在一些实施方案中，抗体或抗体片段包括介导效应功能的恒定区。恒定区可针对表达IL-36R的目标细胞提供抗体依赖性细胞毒性(ADCC)、抗体依赖性细胞吞噬(ADCP)及/或补体依赖性细胞毒性(CDC)反应。效应子域可为例如Ig分子的Fc区。
抗体的效应子域可来自任何适合的脊椎动物物种及同型。来自不同动物物种的同型的不同之处在于介导效应功能的能力。举例而言，人类免疫球蛋白介导CDC及ADCC/ADCP的能力一般分别按IgM≈IgG1≈IgG3>IgG2>IgG4及IgG1≈IgG3>IgG2/IgM/IgG4次序。鼠类免疫球蛋白一般分别按鼠类IgM≈IgG3>>IgG2b>IgG2a>>IgG1及IgG2b>IgG2a>IgG1>>IgG3次序介导CDC及ADCC/ADCP。在另一实例中，鼠类IgG2a介导ADCC，而鼠类IgG2a及IgM介导CDC。
人源化及氨基酸序列变体
抗IL-36R抗体的氨基酸序列变体可通过将适当核苷酸变化引入至抗IL-36R抗体DNA中或通过肽合成来制备。此类变体包括例如自本申请中实例的抗IL-36R抗体的氨基酸序列内的残基缺失及/或插入其中及/或对其的取代。进行缺失、插入及取代的任何组合以获得最终构建体，其限制条件为该最终构建体具有所需特征。氨基酸变化也可改变人源化或变体抗IL-36R抗体的翻译后过程，例如改变糖基化位点的数目或位置。
一种适用于鉴别抗IL-36R抗体的作为突变诱发的优选位置的某些残基或区的方法被称作“丙氨酸扫描突变诱发”，如Cunningham及Wells(Science,244:1081-1085(1989))所描述。在此，残基或目标残基的组经鉴别(例如带电残基，例如arg、asp、his、lys及glu)且经中性或带负电氨基酸(通常丙氨酸)置换以影响氨基酸与IL-36R抗原的相互作用。随后，通过在取代位点处或为取代位点引入另外的或其他变体来优化对取代展现功能敏感性的氨基酸位置。因此，虽然用于引入氨基酸序列变异的位点为预定的，但突变本身的性质无需预定。举例而言，为分析给定位点的突变的效能，可在目标密码子或目标区进行丙氨酸扫描或随机突变诱发，且针对所需活性筛选所表达的抗IL-36R抗体变体。
氨基酸序列插入包括长度在一个残基至含有一百个或更多个残基的多肽范围内的氨基端及/或羧基端融合，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的实例包括与抗原决定基标签融合的抗IL-36R抗体。抗IL-36R抗体分子的其他插入变体包括抗IL-36R抗体的N端或C端与酶或延长抗体的血清半衰期的多肽的融合体。
另一类型的变体为氨基酸取代变体。这些变体移除抗IL-36R抗体分子中的至少一个氨基酸残基且在其位置插入不同残基。受到最大关注的取代型突变诱发位点包括高变区，但也涵盖FR变化。保守性取代以标题“优选取代”展示于表C中。若此类取代导致生物活性变化，则可引入命名为“例示性取代”或如下文关于氨基酸类别所进一步描述的更多实质性变化，及筛选产物。
表C：
Figure BDA0003248185000000991
Figure BDA0003248185000001001
在蛋白质化学中，一般公认抗体的生物特性可通过选择对于维持以下的效应显著不同的取代来实现：(a)取代的区域中的多肽主链的结构，例如，呈薄片或螺旋构形；(b)在目标位点处的分子的电荷或疏水性；或(c)侧链的体积。基于共同侧链特性将天然存在的残基划分成以下群组：
(1)疏水性：正亮氨酸、met、ala、val、leu、ile；
(2)中性亲水性：cys、ser、thr；
(3)酸性：asp、glu；
(4)碱性：asn、gin、his、lys、arg；
(5)影响链取向的残基：gly、pro；及
(6)芳族：trp、tyr、phe。
非保守性取代将必然伴有将这些类别中之一的成员换成另一类别。
不参与维持人源化或变体抗IL-36R抗体的适当构形的任何半胱氨酸残基一般也可经丝氨酸取代，以改良分子的氧化稳定性，防止异常交联，或提供与细胞毒性或细胞生长抑制化合物的已确立结合点。反之，可将半胱氨酸键添加至抗体以改良其稳定性(尤其在抗体为例如Fv片段的抗体片段的情况下)。
一种类型的取代型变体涉及取代亲本抗体(例如人源化或人类抗体)的一或多个高变区残基。一般而言，经选择用于进一步研发的所得变体应相对于产生其的亲本抗体具有经改良的生物特性。产生此类取代型变体的适宜方式为用噬菌体展示的亲和力成熟。简言之，使若干高变区位点(例如6至7个位点)突变以在各位点处产生所有可能的氨基酸取代。因此产生的抗体变体以单价方式自丝状噬菌体粒子以与包装在各粒子内的M13的基因III产物的融合体形式呈现。随后，针对噬菌体展示变体的生物活性(例如结合亲和力)对其进行筛选。为了鉴别用于修饰的候选高变区位点，可进行丙氨酸扫描突变诱发以鉴别显著有助于抗原结合的高变区残基。或者或另外，其可有益于分析抗原-抗体复合物的晶体结构以鉴别抗体与人类IL-36R之间的接触点。此类接触残基及相邻残基为根据本申请中详述的技术用于取代的候选物。在产生这些变体后，如本申请所描述对变体组进行筛选，且可在一或多个相关分析中选择具有优良特性的抗体用于进一步研发。
抗体的另一类型的氨基酸变体改变抗体的原始糖基化型态。“改变”意谓使抗体中发现的一或多个碳水化合物部分缺失，及/或添加不存在于抗体中的一或多个糖基化位点。
在一些实施方案中，可能需要修饰本发明的抗体以添加糖基化位点。抗体的糖基化通常为N连接型或O连接型。N连接型指碳水化合物部分与天冬酰胺残基的侧链连接。三肽序列天冬酰胺-X-丝氨酸及天冬酰胺-X-苏氨酸(其中X为除脯氨酸以外的任何氨基酸)为用于碳水化合物部分与天冬酰胺侧链的酶促连接的识别序列。因此，多肽中这些三肽序列中的任一个的存在产生潜在糖基化位点。O连接型糖基化指糖N-乙酰半乳胺糖、半乳糖或木糖中的一个与羟氨基，最通常丝氨酸或苏氨酸连接，尽管也可使用5-羟脯氨酸或5-羟基赖氨酸。因此，为了使给定蛋白质(例如抗体)糖基化，蛋白质的氨基酸序列经工程改造以含有上文所描述的三肽序列中的一或多个(针对N连接糖基化位点)。也可通过向原始抗体的序列添加一或多个丝氨酸或苏氨酸残基或用这些残基取代原始抗体的序列来进行改变(针对O连接糖基化位点)。
编码抗IL-36R抗体的氨基酸序列变体的核酸分子通过本领域中已知的多种方法制备。这些方法包括(但不限于)自天然来源分离(在天然存在的氨基酸序列变体的情况下)或通过对抗IL-36R抗体的早期制备变体或非变体形式进行寡核苷酸介导(或定点)突变诱发、PCR突变诱发及盒式突变诱发来制备。
聚核苷酸、载体、宿主细胞及重组方法
其他实施方案涵盖包含编码人源化抗IL-36R抗体的序列的分离的聚核苷酸、包含聚核苷酸的载体及宿主细胞以及用于产生该人源化抗体的重组技术。分离的聚核苷酸可编码抗IL-36R抗体的任何所需形式，包括例如全长单克隆抗体、Fab、Fab'、F(ab')2及Fv片段、双功能抗体、线性抗体、单链抗体分子以及由抗体片段形成的多特异性抗体。
一些实施方案包括包含如下序列的分离的聚核苷酸，该序列编码抗体或抗体片段的具有SEQ ID NO:1至10中的任一氨基酸序列的轻链可变区。一些实施方案包括包含如下序列的分离的聚核苷酸，该序列编码抗体或抗体片段的具有氨基酸序列SEQ ID NO:11至20的重链可变区。
一些实施方案包括包含如下序列的分离的聚核苷酸，该序列编码抗体或抗体片段的具有SEQ ID NO:76至86中的任一氨基酸序列的轻链可变区。一些实施方案包括包含如下序列的分离的聚核苷酸，该序列编码抗体或抗体片段的具有氨基酸序列SEQ ID NO:87至101的重链可变区。
一些实施方案包括包含如下序列的分离的聚核苷酸，该序列编码抗体的具有SEQID NO:114至124中的任一氨基酸序列的轻链。一些实施方案包括包含如下序列的分离的聚核苷酸，该序列编码抗体的具有氨基酸序列SEQ ID NO:125至139的重链。
在一个方面中，分离的聚核苷酸序列编码具有轻链及重链可变区的抗体或抗体片段，该轻链及重链可变区分别包含氨基酸序列SEQ ID NO:115及SEQ ID NO:127；分别包含SEQ ID NO:118及SEQ ID NO:126；分别包含SEQ ID NO:118及SEQ ID NO:127；分别包含SEQID NO:115及SEQ ID NO:125；分别包含SEQ ID NO:115及SEQ ID NO:126；分别包含SEQ IDNO:118及SEQ ID NO:125；分别包含SEQ ID NO:124及SEQ ID NO:138；分别包含SEQ ID NO:123及SEQ ID NO:139；分别包含SEQ ID NO:123及SEQ ID NO:138。
包含编码人源化抗IL-36R抗体或其片段或链的序列的聚核苷酸可与一或多个本领域中已知的调控或控制序列融合，且可包含于本领域中已知的适合的表达载体或宿主细胞中。每个编码重链或轻链可变域的聚核苷酸分子中的可独立地与编码例如人类恒定域的恒定域的聚核苷酸序列融合，从而使得能够产生完整抗体。或者，聚核苷酸或其部分可融合在一起，从而提供用于产生单链抗体的模板。
对于重组产生，将编码抗体的聚核苷酸插入至用于克隆(DNA扩增)或表达的可复制载体中。可获得许多适用于表达重组抗体的载体。载体组分一般包括(但不限于)以下中的一或多个：信号序列、复制起点、一或多个标记基因、增强子组件、启动子及转录终止序列。
人源化抗IL-36R抗体也可以融合多肽形式产生，其中抗体与例如信号序列或在成熟蛋白或多肽的氨基端具有特异性裂解位点的其他多肽的异源多肽融合。所选异源信号序列通常为经宿主细胞识别且处理(即，通过信号肽酶裂解)的信号序列。对于不识别且处理人源化抗IL-36R抗体信号序列的原核宿主细胞，信号序列可经原核信号序列取代。信号序列可为例如碱性磷酸酶、青霉素酶、脂蛋白、热稳定肠毒素II前导序列及其类似信号序列。对于酵母分泌，原生信号序列可经例如获自酵母转化酶α因子(包括酵母(Saccharomyces)及克鲁维酵母(Kluyveromyces)α-因子前导子)、酸磷酸酶、白色念珠菌(C.albicans)葡糖淀粉酶的前导序列或WO90/13646中所描述的信号取代。在哺乳动物细胞中，可使用哺乳动物信号序列以及病毒分泌性前导子，例如单纯疱疹gD信号。此类前驱体区的DNA在阅读框架中接合至编码人源化抗IL-36R抗体的DNA。
表达载体及克隆载体含有使得载体能够在一或多个所选宿主细胞中复制的核酸序列。一般而言，在克隆载体中，此序列为使得载体能够独立于宿主染色体DNA而复制的序列，且包括复制起点或自主复制序列。用于各种细菌、酵母及病毒的此类序列为熟知的。来自质粒pBR322的复制起点适合于大部分革兰氏阴性细菌2-υ。质粒起点适合于酵母，且各种病毒起点(SV40、多瘤病毒、腺病毒、VSV及BPV)适用于哺乳动物细胞中的克隆载体。一般而言，哺乳动物表达载体不需要复制起点组分(通常可仅使用SV40起点，因为其含有早期启动子)。
表达载体及克隆载体可含有编码选择性标记的基因以有助于鉴别表达。典型选择性标记基因编码如下蛋白质，这些蛋白质赋予对抗生素或其他毒素，例如氨苄西林(ampicillin)、新霉素(neomycin)、甲氨喋呤(methotrexate)或四环素(tetracycline)的抗性，或者任选地补充营养缺陷型缺乏，或在其他替代方案中，提供不存在于复合培养基中的特定营养素，例如编码用于杆菌的D-丙氨酸消旋酶的基因。
选择方案的一个实例利用药物来阻滞宿主细胞生长。这些经异源基因成功转化的细胞产生赋予耐药性的蛋白质且因此在选择疗法中存活下来。此类显性选择的实例使用药物新霉素、霉酚酸及潮霉素。哺乳动物细胞的常见选择性标记使得能够鉴别可摄取编码人源化抗IL-36R抗体的核酸的细胞的标记，例如DHFR(二氢叶酸还原酶)、胸苷激酶、金属硫蛋白-I及金属硫蛋白-II(例如灵长类动物金属硫蛋白基因)、腺苷脱氨酶、鸟氨酸脱羧酶及其类似物。首先通过在含有甲氨喋呤(Mtx)(DHFR的竞争性拮抗剂)的培养基中培养所有转化体来鉴别经DHFR选择基因转化的细胞。当采用野生型DHFR时合适的宿主细胞为缺乏DHFR活性的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株(例如DG44)。
或者，经编码抗IL-36R抗体、野生型DHFR蛋白质及另一种选择性标记(例如氨基糖苷3'-磷酸转移酶(APH))的DNA序列转染或共染型的宿主细胞(特别是含有内源性DHFR的野生型宿主)可通过使细胞在含有针对选择性标记(例如氨基糖苷抗生素，例如卡那霉素、新霉素或G418)的选择剂的培养基中生长来进行选择。参见例如美国专利第4,965,199号。
在酵母细胞作为宿主细胞进行重组生产的情况下，存在于酵母质粒YRp7中的TRP1基因(Stinchcomb等,1979,Nature 282:39)可用作选择性标记。TRP1基因为在色氨酸中缺乏生长能力的酵母突变菌株(例如ATCC编号44076或PEP4-1)提供选择标记(Jones,1977,Genetics 85:12)。酵母宿主细胞基因组中存在trp1损伤则提供通过在不存在色氨酸下生长检测转化的有效环境。类似地，例如ATCC 20,622及38,626的Leu2p缺乏酵母菌株由带有LEU2基因的已知质粒来补充。
另外，源自1.6μm环形质粒pKD1的载体可用于克鲁维酵母的转化。或者，针对乳酸克鲁维酵母(K.lactis)报导了用于大规模产生重组小牛凝乳酶的表达系统(Van denBerg,1990,Bio/Technology 8:135)。也已公开用于通过工业克鲁维酵母菌株分泌成熟重组人类血清白蛋白的稳定多拷贝表达载体(Fleer等,1991,Bio/Technology 9:968-975)。
表达载体及克隆载体通常含有通过宿主生物体识别且可操作地连接于编码抗IL-36R抗体或其多肽链的核酸分子的启动子。适合于与原核宿主一起使用的启动子包括phoA启动子、β-内酰胺酶及乳糖启动子系统、碱性磷酸酶、色氨酸(trp)启动子系统及杂合启动子，例如tac启动子。其他已知细菌启动子也是适合的。用于细菌系统中的启动子也将含有可操作地连接于编码人源化抗IL-36R抗体的DNA的夏因-达尔加诺(Shine-Dalgarno，S.D.)序列。
已知许多真核启动子序列。几乎所有的真核基因均具有富AT区，其位于转录起始位点上游约25至30个碱基处。在许多基因转录起点上游70至80个碱基处发现的另一个序列为CNCAAT区，其中N可为任何核苷酸。在大多数真核基因的3'端处为AATAAA序列，其可为聚A尾添加至编码序列的3'端的信号。所有这些序列宜插入真核表达载体中。
适合与酵母宿主一起使用的启动序列的实例包括3-磷酸甘油酸激酶或其他糖分解酶的启动子，这些糖分解酶例如烯醇酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、己糖激酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸果糖激酶、葡萄糖-6-磷酸异构酶、3-磷酸甘油酸变位酶、丙酮酸激酶、磷酸丙糖异构酶、磷酸葡萄糖异构酶以及葡糖激酶。
诱导性启动子具有通过生长条件控制的额外转录优势。这些启动子包括用于醇脱氢酶2、异细胞色素C、酸性磷酸酶、与氮代谢相关的衍生酶、金属硫蛋白、甘油醛-3-磷酸去氢酶及负责麦芽糖及半乳糖利用的酶的酵母启动子区。适合用于酵母表达的载体及启动子进一步描述于EP 73,657中。酵母增强子也宜与酵母启动子一起使用。
自哺乳动物宿主细胞中的载体的人源化抗IL-36R抗体转录例如通过获自例如多瘤病毒、禽痘病毒、腺病毒(例如腺病毒2)、牛类乳头状瘤病毒、禽类肉瘤病毒、巨细胞病毒、反转录病毒、乙型肝炎病毒及猿猴病毒40(SV40)的病毒的基因组，获自例如肌动蛋白启动子或免疫球蛋白启动子的异源哺乳动物启动子，或获自热休克启动子(只要此类启动子与宿主细胞系统兼容)的启动子来控制。
SV40病毒的早期及晚期启动子适宜以亦含有SV40病毒复制起点的SV40限制性片段形式获得。人类巨细胞病毒的即刻早期启动子适宜以HindIII E限制性片段形式获得。在哺乳动物宿主中使用牛类乳头状瘤病毒作为载体表达DNA的系统公开于美国专利第4,419,446号中。此系统的修改描述于美国专利案第4,601,978号中。亦参见Reyes等,1982,Nature297:598-601，其公开人类p-干扰素cDNA在来自单纯性疱疹病毒的胸苷激酶启动子的控制下于小鼠细胞中的表达。任选地，可使用劳斯肉瘤病毒(Rous sarcoma virus)长末端重复序列作为启动子。
可用于重组表达载体中的另一适用组件为增强子序列，其用于增加编码人源化抗IL-36R抗体的DNA通过高级真核生物的转录。现已知来自哺乳动物基因(例如血球蛋白、弹性蛋白酶、白蛋白、甲胎蛋白及胰岛素)的许多增强子序列。然而，通常使用来自真核细胞病毒的增强子。实例包括复制起点(bp 100-270)后侧的SV40增强子、巨细胞病毒早期启动子增强子、复制起点后侧的多瘤病毒增强子及腺病毒增强子。关于增强真核启动子活化的组件的描述也可参见Yaniv,1982,Nature 297:17-18。增强子可在人源化抗IL-36R抗体编码序列的位置5'或3'处剪接至载体中，但优选地位于启动子的位点5'处。
真核宿主细胞(酵母细胞、真菌细胞、昆虫细胞、植物细胞、动物细胞、人类细胞或来自其他多细胞生物体的有核细胞)中使用的表达载体也可含有终止转录及稳定mRNA所需的序列。此类序列通常可获自真核或病毒DNA或cDNA的5'及偶尔3'未翻译区。这些区域在编码抗IL-36R抗体的mRNA的未翻译部分中含有以聚腺苷酸化片段形式转录的核苷酸区段。一种适用的转录终止组分为牛生长激素聚腺苷酸化区域。参见WO94/11026及其中所公开的表达载体。在一些实施方案中，人源化抗IL-36R抗体可使用CHEF系统表达。(参见例如美国专利第5,888,809号；其公开内容以引用的方式并入本申请中。)
本申请中适用于在载体中克隆或表达DNA的宿主细胞为上文所描述的原核生物、酵母或高级真核生物细胞。适用于此目的的原核生物包括真细菌，例如革兰氏阴性或革兰氏阳性生物体，例如肠杆菌科(Enterobacteriaceae)，例如埃希氏杆菌属(Escherichia)(例如大肠杆菌)、肠杆菌属(Enterobacter)、欧文氏菌属(Erwinia)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、变形杆菌属(Proteus)、沙门氏菌属(Salmonella)(例如鼠伤寒沙门杆菌(Salmonella typhimurium))、沙雷氏菌属(Serratia)(例如粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescans))及志贺杆菌属(Shigella)；以及杆菌属(Bacilli)(例如枯草杆菌(B.subtilis)及地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)(例如1989年4月12日公开的DD 266,710中所公开的地衣芽孢杆菌41P))、假单胞菌属(Pseudomonas)(例如绿脓杆菌(P.aeruginosa))及链霉菌属(Streptomyces)。一种优选大肠杆菌克隆宿主为大肠杆菌294(ATCC 31,446)，但例如大肠杆菌B、大肠杆菌X1776(ATCC 31,537)及大肠杆菌W3110(ATCC27,325)的其他菌株也是适合的。这些实例为说明性而非限制性的。
除原核生物以外，例如丝状真菌或酵母的真核微生物为人源化抗IL-36R抗体编码载体的适合克隆或表达宿主。在低级真核宿主微生物中最常使用酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)或普通面包酵母。然而，多种其他属、种及菌株通常可用且适用于本申请，例如粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)；克鲁维酵母属(Kluyveromyce)宿主，例如乳酸克鲁维酵母、脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)(ATCC 12,424)、保加利亚克鲁维酵母(K.bulgaricus)(ATCC 16,045)、威克克鲁维酵母(K.wickeramii)(ATCC24,178)、沃尔第克鲁维酵母(K.waltii)(ATCC 56,500)、果妮克鲁维酵母(K.drosophilarum)(ATCC 36,906)、耐热克鲁维酵母(K.thermotolerans)及马克斯克鲁维酵母(K.marxianus)；耶氏酵母属(yarrowia)(EP 402,226)；毕赤酵母(Pichia pastors)(EP 183,070)；念珠菌(Candida)；里氏木霉(Trichoderma reesia)(EP 244,234)；粗厚神经胞子菌(Neurospora crassa)；施氏酵母属(Schwanniomyce)，例如西方施氏酵母(Schwanniomyces occidentalis)；及丝状真菌，例如红霉菌属(Neurospora)、青霉菌属(Penicillium)、弯颈霉属(Tolypocladium)及曲菌属(Aspergillus)宿主，例如构巢曲霉(A.nidulans)及黑曲霉(A.niger)。
适用于表达经糖基化人源化抗IL-36R抗体的宿主细胞系来源于多细胞生物体。无脊椎细胞的实例包括植物及昆虫细胞，包括例如许多杆状病毒株及变体以及来自例如以下宿主的对应容许昆虫宿主细胞：草地黏虫(Spodoptera frugiperda)(毛虫)、埃及伊蚊(Aedes aegypti)(蚊虫)、白纹伊蚊(Aedes albopictus)(蚊虫)、黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)(果蝇)及家蚕(Bombyx mori)(桑蚕(silk worm))。用于转染的各种病毒株可公开获得，例如苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)NPV的L-1变体及家蚕NPV的Bm-5菌株，且此类病毒可尤其用于转染草地黏虫细胞。
棉花、玉米、马铃薯、大豆、矮牵牛、西红柿及烟草的植物细胞培养物也可用作宿主。
在另一方面中，人源化抗IL-36R的表达在脊椎动物细胞中进行。脊椎动物细胞在培养物(组织培养物)中的繁殖已成为常规程序及广泛可用的技术。适用哺乳动物宿主细胞株的实例为经SV40转化的猴肾脏CV1细胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)、人类胚胎肾细胞株(经亚克隆以便在悬浮培养物中生长的293或293细胞，Graham等,1977,J.Gen Virol.36:59)、幼仓鼠肾细胞(BHK，ATCC CCL 10)、中国仓鼠卵巢细胞/-DHFR1(CHO，Urlaub等,1980,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:4216；例如DG44)、小鼠塞特利氏细胞(mouse sertoli cell)(TM4，Mather,1980,Biol.Reprod.23:243-251)、猴肾细胞(CV1ATCC CCL 70)、非洲绿猴肾细胞(VERO-76，ATCC CRL-1587)、人类子宫颈癌细胞(HELA，ATCC CCL 2)、犬肾细胞(MDCK，ATCC CCL 34)、水牛鼠肝细胞(buffalo rat liver cell)(BRL 3A，ATCC CRL 1442)、人类肺细胞(W138，ATCC CCL 75)、人类肝细胞(Hep G2，HB 8065)、小鼠乳腺肿瘤(MMT 060562，ATCC CCL51)、TR1细胞(Mather等,1982,Annals N.Y.Acad.Sci.383:44-68)、MRC 5细胞、FS4细胞及人类肝肿瘤细胞株(Hep G2)。
宿主细胞经用于人源化抗IL-36R抗体产生的上文所描述的表达或克隆载体转化且在适当时经调节的常规营养素培养基中培养以便诱导启动子、选择转化体或扩增编码所需序列的基因。
用于产生本申请所描述的人源化抗IL-36R抗体的宿主细胞可于多种培养基中培养。例如Ham's F10(Sigma-Aldrich Co.,St.Louis,Mo.)、最低必需培养基((MEM)，(Sigma-Aldrich Co.)、RPMI-1640(Sigma-Aldrich Co.)及达尔伯克氏改良伊格尔氏培养基((Dulbecco's Modified Eagle's Medium；DMEM)，Sigma-Aldrich Co.)的可商购获得的培养基适合于培养宿主细胞。另外，Ham等,1979,Meth.Enz.58:44；Barnes等,1980,Anal.Biochem.102:255；美国专利第4,767,704号、美国专利第4,657,866号、美国专利第4,927,762号、美国专利第4,560,655号、美国专利第5,122,469号、WO 90/103430及WO 87/00195中的一或多个中所描述的培养基中的任一个可用作用于宿主细胞的培养基。这些培养基中的任一个可视需要补充激素及/或其他生长因子(例如胰岛素、转铁蛋白或表皮生长因子)、盐(例如氯化钠、钙盐、镁盐及磷酸盐)、缓冲剂(例如HEPES)、核苷酸(例如腺苷及胸苷)、抗生素(例如庆大霉素)、示踪元素(定义为通常以微摩尔浓度范围内的最终浓度存在的无机化合物)及葡萄糖或等效能量来源。也可以本领域技术人员已知的适当浓度包括其他补充剂。培养条件(例如温度、pH及类似条件)为先前用于经选择用于表达的宿主细胞的培养条件，且对于本领域技术人员而言将显而易见。
当使用重组技术时，抗体可于细胞内、周质间隙中产生或直接分泌于培养基中。若抗体于细胞内产生，则第一步可将细胞破坏以释放蛋白质。可例如通过离心或超过滤移除微粒碎片，即宿主细胞或溶解片段。Carter等,1992,Bio/Technology 10:163-167描述分离分泌至大肠杆菌的周质间隙的抗体的程序。简言之，在乙酸钠(pH 3.5)、EDTA及苯基甲基磺酰基氟(PMSF)存在下经约30分钟解冻细胞浆料。可通过离心移除细胞碎片。在抗体分泌至培养基中的情形下，通常首先使用市售蛋白质浓缩过滤器(例如Amicon或MilliporePellicon超过滤单元)浓缩此类表达系统的上清液。在任何在先步骤中可包括例如PMSF的蛋白酶抑制剂以抑制蛋白分解，且可包括抗生素以防止外来污染物生长。可使用各种方法自宿主细胞分离抗体。
自细胞制备的抗体组合物可使用例如羟磷灰石层析、凝胶电泳、透析及亲和力层析加以纯化，其中亲和力层析为典型纯化技术。蛋白质A作为亲和力配体的适合性视抗体中存在的任何免疫球蛋白Fc域的种类及同型而定。可使用蛋白质A纯化基于人类γ1、γ2或γ4重链的抗体(参见例如Lindmark等,1983J.Immunol.Meth.62:1-13)。针对所有小鼠同型及人类γ3，推荐蛋白质G(参见例如Guss等,1986EMBO J.5:1567-1575)。连接亲和力配体的基质最常为琼脂糖，但其他基质是可用的。与琼脂糖可实现的相比，机械稳定基质(例如受控微孔玻璃或聚(苯乙烯二乙烯基)苯)实现更快的流动速率及更短的处理时间。在抗体包含CH3域的情况下，Bakerbond ABXTM树脂(J.T.Baker,Phillipsburg,N.J.)适用于纯化。视欲回收的抗体而定，也可利用其他蛋白质纯化技术，例如离子交换管柱上的分级分离、乙醇沉淀、逆相HPLC、二氧化硅层析、肝素SEPHAROSETM层析、阴离子或阳离子交换树脂(例如聚天冬氨酸管柱)层析、层析聚焦、SDS-PAGE及硫酸铵沉淀。
在任何初步纯化步骤之后，包含所关注的抗体及污染物的混合物可经历通常在低盐浓度(例如约0-0.25M盐)下执行的使用洗脱缓冲液的约2.5至4.5之间的pH下的低pH疏水性相互作用层析。
还包括在如本申请所定义的低、中及高严格度条件下与由编码本发明的抗体或抗体片段的分离的聚核苷酸序列表示的全部或部分(例如编码可变区的部分)核苷酸序列杂交的核酸。杂交核酸的杂交部分的长度通常为至少15(例如20、25、30或50)个核苷酸。杂交核酸的杂交部分与编码抗IL-36R多肽(例如重链或轻链可变区)的一部分或所有核酸的序列或其互补序列至少80％，例如至少90％、至少95％或至少98％一致。可使用本申请所描述的类型的杂交核酸例如作为克隆探针、引物，例如PCR引物或诊断探针。
治疗性用途
在另一实施方案中，本申请公开的人源化抗IL-36R抗体适用于治疗与如本申请所描述的IL-36R的表达相关的各种病症。用于治疗IL-36R相关病症的方法包含向有需要的受试者投与治疗有效量的人源化抗IL-36R抗体。
人源化抗IL-36R抗体或药剂通过任何合适方式投与，包括非经肠、皮下、肺内及鼻内，且针对局部免疫抑制治疗视需要包括病灶内投与(包括灌注或在移植之前以其他方式使移植物与抗体接触)。人源化抗IL-36R抗体或药剂可例如以输注形式或以推注形式投与。非经肠输注包括肌肉内、静脉内、动脉内或皮下投与。另外，人源化抗IL-36R抗体宜通过脉冲输注投与，特别是，在抗体剂量递减的情况下投与。在一个方面中，部分视投与的短期或长期性而定，可通过注射、最优选静脉内或皮下注射给药。
对于疾病的预防或治疗，抗体的适当剂量将视各种因素而定，这些因素例如如上文所定义的待治疗的疾病的类型、疾病的严重度及病程、是否为预防或治疗目的而投与抗体、先前疗法、患者的临床病史及对抗体的反应以及主治医师的判断。适宜一次性或历经一系列治疗向患者投与抗体。
视疾病的类型及严重度而定，约1μg/kg至20mg/kg(例如0.1至15mg/kg)抗体为向患者投与的初始候选剂量，不论例如通过一或多次分开投与抑或通过连续输注。典型的每日剂量可在约1μg/kg至100mg/kg或更多范围内，视上文所提及的因素而定。对于历经数天或更长时间的重复投与，视病况而定，治疗持续至出现疾病症状的所需抑制为止。然而，其他给药方案可为适用的。此疗法的进展易于通过常规技术及分析来监测。例示性给药方案为WO 94/04188中所公开的给药方案。
术语“抑制”在本申请中在与“改善”及“缓解”相同的情形下使用，意谓减轻疾病的一或多个特征。
抗体组合物将以与良好医学实践一致的方式调配、给药及投与。在此情形下考虑的因素包括所治疗的特定病症、所治疗的特定哺乳动物、个别患者的临床病况、病症起因、药剂递送位点、投与方法、投与时程及医学从业者已知的其他因素。待投与抗体的“治疗有效量”将通过此类考虑因素控管，且为预防、改善或治疗与IL-36R表达相关的病症所需的最少量。
抗体并非必须，而是视情况与一或多种当前用于预防或治疗所讨论病症的药剂一起调配。此类其他药剂的有效量视制剂中存在的人源化抗IL-36R23p19抗体的量、病症或治疗的类型及上文所论述的其他因素而定。这些药剂一般以如上文所用的相同剂量及投与途径或迄今使用的剂量的约1％至99％使用。
使用抗体制剂的治疗
在一个实施方案中，本发明提供一种治疗受试者的疾病或病症的方法，其包含以有效治疗疾病或病症的量向受试者投与本申请所描述的制剂。
本发明的抗体制剂适用于治疗人类的各种疾病或病症，例如免疫疾病、发炎性疾病、自体免疫疾病及呼吸道疾病的方法中。举例而言，本发明的抗体制剂适用于治疗牛皮癣、类风湿性关节炎、发炎性肠病或牛皮癣性关节炎的方法中。举例而言，本发明的抗体制剂适用于治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)或哮喘的方法中。举例而言，本发明的抗体制剂适用于用于治疗硬皮病、掌跖脓疱病、全身型脓疱性牛皮癣、糖尿病性肾病变、狼疮性肾炎、硬皮病、僵直性脊椎炎、IL-36受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(DITRA)、IL-1受体拮抗剂缺乏自体免疫疾病(DIRA)或冷吡啉相关周期性综合征(CAPS)。
可向患有免疫病症、呼吸道病症或癌症或处于患病风险下的受试者投与包含IL-36R结合剂(例如抗IL-36R抗体)的制剂。本发明进一步提供IL-36R结合剂(例如抗IL-36R抗体)的用途，其用于制造用于预防或治疗癌症、呼吸道病症或免疫病症的药物。如本申请所用的术语“受试者”意谓可投与IL-36R结合剂的任何哺乳动物患者，包括例如人类及非人类哺乳动物，例如灵长类动物、啮齿动物及狗。特别意欲使用本申请所描述方法治疗的受试者包括人类。抗体或药剂可单独或与其他组合物组合投与以预防或治疗免疫病症、呼吸道病症或癌症。可与抗体或药剂组合投与的此类组合物包括甲氨喋呤(MTX)及免疫调节剂，例如抗体或小分子。
在一个方面中，本发明关于一种治疗受试者的疾病或病况(例如上文所列的那些)的方法，该方法包括向受试者投与治疗量的稳定医药制剂，该制剂包含约20mg/mL至约150mg/mL的抗IL-36R抗体、约20mM至约80mM的医药学上可接受的缓冲剂(例如乙酸盐缓冲剂)、约100mM至约250mM的医药学上可接受的张力调节剂(例如蔗糖)、约0mM至约80mM的医药学上可接受的稳定剂(例如精氨酸)或其医药学上可接受的盐、约0至约150mM的医药学上可接受的盐(例如氯化钠)及量为约0.1g/L至约1.5g/L的医药学上可接受的表面活性剂(例如聚山梨醇酯20)，其中疾病或病况被治疗。在一相关实施方案中，稳定医药制剂为医药制剂水溶液。在一相关实施方案中，医药制剂水溶液的pH为约5至约7。在一相关实施方案中，医药制剂用于向受试者静脉内投与。在一相关实施方案中，医药制剂用于向受试者皮下投与。在一相关实施方案中，用于静脉内投与的医药制剂包含量为约60mg/mL的抗IL-36R抗体。在一相关实施方案中，用于皮下投与的医药制剂包含量为约150mg/mL的抗IL-36R抗体。在一相关实施方案中，抗IL-36R抗体包含：(i)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或(ii)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或(iii)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链。在一相关实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。
在一个实施方案中，根据前述方面中的任一个的治疗方法包含向受试者投与治疗量的选自由以下组成的组的稳定医药制剂：
I.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约20mg/mL至约150mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0，
其中疾病或病况被治疗。在一相关实施方案中，稳定医药制剂为医药制剂水溶液。在一相关实施方案中，医药制剂用于向受试者静脉内投与。在一相关实施方案中，医药制剂用于向受试者皮下投与。在一相关实施方案中，用于静脉内投与的医药制剂包含量为约60mg/mL的抗IL-36R抗体。在一相关实施方案中，用于皮下投与的医药制剂包含量为约150mg/mL的抗IL-36R抗体。在一相关实施方案中，抗IL-36R抗体包含：(i)包含如SEQ IDNO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或(ii)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或(iii)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ IDNO:127所列的氨基酸序列的重链。在一相关实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQID NO:89的重链可变区。
在一个实施方案中，根据前述方面中的任一个的治疗方法包含向受试者投与治疗量的选自由以下组成的组的稳定医药制剂：
I.包含以下的制剂：约20mg/ml抗IL-36R抗体、约40mM组氨酸、约120mM蔗糖、约50mM L-精氨酸、约5mM NaCl及约1.0g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
II.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
III.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约180mM蔗糖、约25mM甘氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约5.5；
IV.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约150mM海藻糖、约25mM甲硫氨酸、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
V.包含以下的制剂：约60mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM组氨酸、约160mM蔗糖、约20mM甘露糖醇、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约6.0；
VI.包含以下的制剂：约20mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM柠檬酸盐、约200mM蔗糖、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.5；
VII.包含以下的制剂：约150mg/mL抗IL-36R抗体、约45mM乙酸盐、约150mM蔗糖、约25mM L-精氨酸、约0.4g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；
VIII.包含以下的制剂：约15mg/mL抗IL-36R抗体、约35mM组氨酸、约180mM海藻糖、约25mM L-精氨酸、约3mM NaCl、约0.4g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0；
IX.包含以下的制剂：约80mg/mL抗IL-36R抗体、约25mM乙酸盐、约100mM甘露糖醇、约50mM NaCl、约0.2g/L聚山梨醇酯20，pH为约5.5；及
X.包含以下的制剂：约100mg/mL抗IL-36R抗体、约20mM丁二酸盐、约220mM蔗糖、约0.1g/L聚山梨醇酯80，pH为约6.0，
其中疾病或病况被治疗。在一相关实施方案中，稳定医药制剂为医药制剂水溶液。在一相关实施方案中，医药制剂用于向受试者静脉内投与。在一相关实施方案中，医药制剂用于向受试者皮下投与。在一相关实施方案中，用于静脉内投与的医药制剂包含量为约60mg/mL的抗IL-36R抗体。在一相关实施方案中，用于皮下投与的医药制剂包含量为约150mg/mL的抗IL-36R抗体。在一相关实施方案中，抗IL-36R抗体包含：(i)包含如SEQ IDNO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或(ii)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或(iii)包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ IDNO:127所列的氨基酸序列的重链。在一相关实施方案中，抗IL-36R抗体包含：包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQID NO:89的重链可变区。
用于此类医药制剂中的抗体的实例为包含具有SEQ ID NO:1至10中的任一个的轻链可变区氨基酸序列的抗体或抗体片段的那些抗体。用于此类医药组合物中的抗体的实例亦为包含具有SEQ ID NO:11至20中的任一个的重链可变区氨基酸序列的人源化抗体或抗体片段的那些抗体。
用于此类医药制剂中的抗体的其他实例进一步为包含具有SEQ ID NO:76至86中的任一个的轻链可变区氨基酸序列的人源化抗体或抗体片段的那些抗体。用于此类医药组合物中的优选抗体亦为包含具有SEQ ID NO:87至101中的任一个的重链可变区氨基酸序列的人源化抗体或抗体片段的那些抗体。
用于此类医药制剂中的抗体的其他实例进一步为包含具有如下中的任一个的轻链可变区及重链可变区的人源化抗体或抗体片段的那些抗体：SEQ ID NO:77及89、SEQ IDNO:80及88、SEQ ID NO:80及89、SEQ ID NO:77及87、SEQ ID NO:77及88、SEQ ID NO:80及87、SEQ ID NO:86及100、SEQ ID NO:85及101或SEQ ID NO:85及10。
用于此类医药制剂中的抗体的其他实例还为包含具有SEQ ID NO:115、118、123或124中的任一个的轻链区氨基酸序列的人源化抗体的那些抗体。用于此类医药组合物中的优选抗体亦为包含具有SEQ ID NO:125、126、127、138或139中的任一个的重链可变区氨基酸序列的人源化抗体的那些抗体。
用于此类医药制剂中的抗体的其他实例还为包含抗体B1、抗体B2、抗体B3、抗体B4、抗体B5、抗体B6、抗体C1、抗体C2或抗体C3的那些抗体。
各种递送系统为已知的且可用于投与IL-36R结合剂。引入方法包括(但不限于)皮内、肌肉内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外及经口途径。IL-36R结合剂可例如通过输注、推注或注射投与，且可与例如化学治疗剂的其他生物活性剂一起投与。投与可为全身性或局部的。在优选实施方案中，投与通过皮下注射进行。用于此类注射的制剂可在例如可每隔一周投与一次的预填充注射器中制备。
在特定实施方案中，IL-36R结合剂制剂通过注射、借助于导管、借助于栓剂或借助于植入物投与，该植入物为多孔、无孔或胶状材料，包含膜，例如硅橡胶膜或纤维。通常，当投与制剂时，使用抗IL-36R抗体或药剂不会吸收的材料。
在其他实施方案中，抗IL-36R抗体或药剂以控制释放系统递送的。在一个实施方案中，可使用泵(参见例如Langer,1990,Science 249:1527-1533；Sefton,1989,CRCCrit.Ref.Biomed.Eng.14:201；Buchwald等,1980,Surgery 88:507；Saudek等,1989,N.Engl.J.Med.321:574)。在另一实施方案中，可使用聚合材料。(参见例如MedicalApplications of Controlled Release(Langer及Wise编,CRC Press,Boca Raton,Fla.,1974)；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design and Performance(Smolen及Ball编,Wiley,New York,1984)；Ranger及Peppas,1983,Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.23:61。也可参见Levy等,1985,Science 228:190；During等,1989,Ann.Neurol.25:351；Howard等,1989,J.Neurosurg.71:105。)其他控制释放系统论述于例如Langer，见上文。
IL-36R结合剂(例如抗IL-36R抗体)可以包含治疗有效量的结合剂及一或多种医药学上相容的成分的医药制剂形式投与。
当通过输注投与医药物时，其可用含有无菌医药级水或生理食盐水的输注瓶来配药。当通过注射投与医药物时，可提供注射用无菌水或生理食盐水的安瓿，以使得这些成分可于投与前混合。
此外，医药制剂可以医药试剂盒形式提供，该医药试剂盒包含(a)含有呈冻干形式的IL-36R结合剂(例如抗IL-36R抗体)的容器及(b)含有医药学上可接受的稀释剂(例如无菌水)的第二容器。医药学上可接受的稀释剂可用于对冻干抗IL-36R抗体或药剂进行复原或稀释。视情况与此类容器相关联的可为呈由管理医药或生物产品的制造、使用或销售的政府机构所规定的形式的注意事项，该注意事项反映由人类投与的制造、使用或销售机构的批准。
有效治疗或预防免疫病症或癌症的IL-36R结合剂(例如抗IL-36R抗体)的量可通过标准临床技术确定。另外，活体外分析可视情况用于帮助鉴别最佳剂量范围。待用于制剂中的精确剂量也将视投与途径及免疫病症或癌症的阶段而定，且应根据医师的判断及各患者的情况来决定。
在一些实施方案中，包含IL-36R结合剂的医药制剂可进一步包含结合或未结合至结合剂的治疗剂。抗IL-36R抗体或IL-36R结合剂可与一或多种用于治疗或预防免疫病症或癌症的治疗剂组合而共投与。
此类组合疗法投与对疾病参数(例如症状的严重度、症状数目或复发频率)可具有累加或协同作用。
关于组合投与的治疗方案，在一特定实施方案中，抗IL-36R抗体或IL-36R结合剂与治疗剂并行投与。在另一特定实施方案中，在投与抗IL-36R抗体或IL-36R结合剂之前或之后至少一小时至数月，例如在投与抗IL-36R抗体或IL-36R结合剂之前或之后至少一小时、五小时、12小时、一天、一周、一个月或三个月投与治疗剂。
制品
在另一方面中，包括含有适用于治疗上文所描述病症的材料的制品。制品包含容器及标签。适合的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器及试管。容器可由各种材料(例如玻璃或塑料)形成。容器保存有效治疗病况的制剂且可具有无菌接取口。举例而言，容器可为具有可由皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶。制剂中的活性剂为人源化抗IL-36R抗体。容器上或与容器相关联的标签指示该制剂用于治疗选定病况。制品可进一步包含第二容器，该第二容器包含医药学上可接受的缓冲剂，例如磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液(Ringer's solution)及右旋糖溶液。其可以进一步包括自商业及使用者的观点来看合乎需要的其他材料，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器及带有使用说明的药品说明书。
本发明在以下实例中进一步加以描述，其不意欲限制本发明的范畴。
实施例
实施例1
构形及胶态稳定性(pH及缓冲剂筛选)
使用DSF(差示扫描荧光测定法)通过监测展开温度(T(h))来评估在5.5至6.5的pH范围内的热稳定性。T(h)为疏水性暴露的温度，其类似于Tm且在此以Tm形式报导，因此表示蛋白质展开的温度。将样本用各别缓冲剂稀释至0.5mg/mL的目标浓度以用于通过DSF进行热稳定性筛选。
通过DLS(动态光散射)评定制剂的胶态稳定性。在不同缓冲剂中于若干不同蛋白质浓度下测量本发明抗体的扩散系数。
针对pH/缓冲剂筛选的DSF分析的结果显示pH明显影响热展开温度Tm。热稳定性数据指示构形稳定性随着pH增加而略微增加。表1展示所评估的缓冲剂及在各别缓冲剂中的对应Tm。
表1：pH/缓冲剂筛选：通过DSF研究测定Tm值
缓冲剂 T<sub>m</sub>(℃)
组氨酸pH 6.5 71
磷酸盐pH 6.5 71
丁二酸盐pH 6.4 71
柠檬酸盐pH 6.5 70
丁二酸盐pH 6.0 70
柠檬酸盐pH 6.0 70
组氨酸pH 6.0 69
乙酸盐pH 5.5 69
胶态稳定性筛选研究(图1)显示以下出人意料的结果：抗IL-36R抗体(如本申请所公开)在pH 5.5(25mM乙酸盐)及pH 6.0(25mM组氨酸)中的制剂展现最具前景的特性(蛋白质间相互作用最小且扩散程度最高)。胶态筛选分析预测乙酸盐(pH 5.5)及组氨酸(pH6.0)应具有最小量的蛋白质间相互作用。在5至20mg/mL的浓度下对抗IL-36R抗体进行胶态稳定性筛选研究。
实施例2：
化学稳定性研究(在40℃下2周)
以pH/缓冲剂的函数的形式评估本发明的抗IL-36R抗体的化学稳定性。在5.5至6.5的pH范围内以80mg/mL制备样本。样本以1mL填充于2mL玻璃小瓶中。在40℃下培育样本14天。尤其通过视觉评定、蛋白质浓度(A280)、用于测定单体含量及聚集体形成的HP-SEC(高效能尺寸排阻层析)及用于测量呈APG(酸性峰群组)、BPG(碱性峰群组)及主峰形式的电荷变体的CEX(阳离子交换层析)来评估样本。
样本的视觉评定显示大部分样本在14天结束时变得混浊。出人意料地，在40℃下14天之后，仅25mM乙酸盐pH 5.5中的样本保持澄清。
HP-SEC指示就在14天之后剩余的主峰％而言最有利的缓冲剂为25mM乙酸盐pH5.5(98.5％)，接着为25mM柠檬酸盐pH 6.5(97.5％)及25mM柠檬酸盐pH 6.0(97.1％)。如组氨酸pH 6.0、磷酸盐6.5及丁二酸盐pH 6.4的其他缓冲剂在40℃下14天之后的主峰数据介于88.9与91.9％之间。
在40℃下14天之后的CEX数据指示相较于其他所测试缓冲剂(33.3％至44.5％)，25mM乙酸盐pH 5.5中的主峰％最高(54.0％)。
在40℃下14天之后的CEX数据指示相较于其他所测试缓冲剂(高达58.1％)，25mM乙酸盐pH 5.5中的酸性峰％最低(38.1％)。就将碱性物物种的出现降至最低而言，此缓冲剂也具有与其他缓冲剂相当的效能。
基于通过视觉评定以及HP-SEC及CEX获得的结果，在14天加速稳定性研究之后，25mM乙酸盐pH 5.5呈现为最有利的制剂缓冲剂。
尽管在热筛选研究中pH 5.5的Tm最低，但得出结论，构形稳定性将通过添加排除的溶质稳定剂(例如蔗糖)来改良。因此，选择25mM乙酸盐pH 5.5作为用于本发明的抗IL-36R抗体的选定缓冲剂。
实施例3：
表面活性剂研究
进行此实施例以优化含有pH 5.5的25mM乙酸盐的四种不同制剂中的聚山梨醇酯20的浓度(表2)。将样本填充至2mL玻璃瓶小瓶中(1mL/小瓶)。
表2：在表面活性剂优化研究中评估的制剂
Figure BDA0003248185000001201
进行用于表面活性剂研究的以下实验：冷冻-解冻稳定性、搅拌稳定性。以下分析用于分析不同实验所产生的样本：尤其HP-SEC及显微镜可见粒子。
冷冻-解冻稳定性研究
将本发明的抗IL-36R抗体的溶液冷冻于-40℃下的玻璃小瓶中24小时，接着在室温下解冻2小时。将此程序重复至多3次。随后尤其通过HP-SEC分析样本。
出人意料地，HP-SEC结果显示相对于具有较低浓度的聚山梨醇酯20的其他制剂，具有0.06％聚山梨醇酯20的制剂在三个冷冻-解冻循环(图2)之后具有较高含量的高分子量物种。具有浓度介于0与0.04％之间的聚山梨醇酯20的那些制剂与具有0.06％聚山梨醇酯20的制剂相比表现同样良好且略微优于后者。
搅拌稳定性
在室温下用振荡器进行搅拌研究48小时。尤其通过HP-SEC及流动成像显微法进行分析以测量显微镜可见粒子(SVP)含量。
HP-SEC结果指示当不存在聚山梨醇酯20时聚集稍微增加(图3)。所有其他制剂在各取样点具有类似聚集水平。
出人意料地，SVP结果显示具有0.04％PS20的制剂在搅拌48小时之后具有最低数目的显微镜可见粒子(表3)。
表3：搅拌稳定性(表面活性剂优化)的SVP结果
Figure BDA0003248185000001211
使聚山梨醇酯20的浓度升高至高于0.04％(w/v)出乎意料地导致冷冻-解冻样本的样本聚集轻微增加。另一方面，搅拌研究显示移除聚山梨醇酯20使得聚集略微升高。另外，在搅拌之后，SVP在高于及低于0.04％(w/v)的聚山梨醇酯20浓度下较高，此为未预期到的。基于这些结果，聚山梨醇酯20的最终浓度经选择为0.04％(w/v)。另外，研究显示0.04％(w/v)聚山梨醇酯20对于含有60mg/mL蛋白质的溶液而言亦为可行的。
实施例4
最终制剂筛选研究
基于初始筛选数据，选择六种候选制剂(表4)以用150mg/mL本发明的抗IL-36R抗体在最终制剂筛选中进行测试。添加精氨酸HCl及NaCl以评估其降低蛋白质间相互作用的潜能。降低蛋白质间相互作用可减少聚集且减小黏度。
表4：用于最终制剂筛选的制剂组成
Figure BDA0003248185000001212
Figure BDA0003248185000001221
针对六种候选制剂的最终制剂筛选进行以下实验：八周加速稳定性研究、冷冻-解冻稳定性、搅拌稳定性及光稳定性。
八周加速稳定性研究
所有制剂的蛋白质浓度为150mg/mL，浓度的测量值落于155至166mg/mL内。将样本填充至2mL玻璃瓶小瓶中(1mL/小瓶)。乙酸盐浓度为45mM。将样本储存于三个不同温度(5℃、25℃、40℃)下。通过以下分析来分析样本：尤其显微镜可见粒子、HP-SEC、IL-36R结合(效力)、非还原性CGE(用以检测片段的毛细管凝胶电泳)及icIEF(用以测量电荷变体的成像毛细管等电聚焦)。
显微镜可见粒子(SVP)
对候选制剂中的显微镜可见粒子的监测通过流动成像显微法进行的。出人意料地，对于储存于5℃、25℃及40℃下的样本，在直径为10至25μm或25μm及更大的粒子的计数中未观测到明显趋势。在两种类别中，所有六种制剂显示类似结果，在八周研究结束时具有低显微镜可见粒子计数。
icIEF
本发明的抗IL-36R抗体的一般电荷特征曲线呈现酸性、碱性及主峰群组。在40℃下之后8周，本发明的抗IL-36R抗体的电荷变体呈现在制剂之间极其类似的趋势。
非还原性CGE
为了评定本发明制剂的抗IL-36R抗体在储存时的片段化及二硫键还原，评估非还原性毛细管凝胶电泳的结果。在三个储存温度下，所有制剂观测到类似程度的片段化及二硫键还原(LMW％)。
HP-SEC
通过HP-SEC评定候选制剂中制剂相对于聚集的稳定性(HMW％)。在25℃及40℃下8周之后，F2及F5展现较低HMW％(图4)。
效力
使用结合分析评定本发明候选制剂的抗IL-36R抗体的效力。值得注意的是，即使在40℃下储存八周之后，所有六种制剂的效力仍呈现为稳定。
候选制剂的冷冻-解冻稳定性
将本发明的抗IL-36R抗体溶液(1mL)填充至2mL玻璃小瓶(1mL/小瓶)中且在-40℃下冷冻，接着在室温下解冻。将此程序重复总共3个循环。利用以下分析来进行分析：视觉评定、pH、蛋白质浓度、HP-SEC、非还原性CGE及显微镜可见粒子。
值得注意的是，分析方法的所有结果揭示，六种制剂表现同样良好。
候选制剂的搅拌稳定性
将本发明的抗IL-36R抗体的溶液填充至2mL玻璃小瓶(1mL/小瓶)中。在室温下振荡样本48h。通过以下分析样本：尤其pH、蛋白质浓度、视觉评定、HP-SEC、非还原性CGE及icIEF。
出人意料地，搅拌对六种制剂在所评定分析结果中的表现无任何影响。
候选制剂的光稳定性
将六种制剂填充至2mL玻璃小瓶(1mL/小瓶)中，塞住且加盖。将小瓶置放于室温下，光强度为大约1100lux，保持5天。使用以下分析来分析样本：视觉评定、蛋白质浓度、pH、HP-SEC、icIEF及非还原性CGE。
视觉评定、pH、蛋白质浓度、icIEF及非还原性CGE的结果显示，曝光对于所测试制剂中的任一个均无影响。
观测到HP-SEC中对主峰含量的轻微影响，但在处于室温及曝光下5天之后，F5的降低最少(表5)。原则上，所有制剂对于曝光出乎意料地稳定。
表5：通过HP-SEC的光稳定性研究的主峰％
制剂 F1 F2 F3 F4 F5 F6
5天，有光 99.0 99.0 98.8 99.0 99.4 98.9
最终制剂筛选研究的概述
出人意料地，来自八周加速稳定性研究的数据的评估显示所有制剂在通过各种分析进行评定时表现同样良好。此唯一例外为在尤其25℃及40℃下储存八周之后，关于高分子量物种，制剂F2及F5呈现得比其它制剂略微更稳定。此指示精氨酸通过减少本发明的抗IL-36R抗体的蛋白质间相互作用而赋予积极影响，从而减少聚集倾向。此外，F5在曝光研究中显示略小的主峰损失。
实施例5
不同蛋白质及制剂的黏度
蛋白质制剂的较低黏度尤其有益于家用及通过患者自身自投与。具有较低黏度的蛋白质溶液可舒适地进行注射。另外，基于低黏度，可使用细注射器针头，且注射力仍可接受。由于针头细，注射疼痛减少。
然而，高浓度蛋白质溶液通常显示高黏度。
不同蛋白质及制剂在20℃下的黏度数据展示于图5中。使用Thermo ScientificHaake流变仪(Mars III)及板锥测量几何结构产生数据。添加蛋白质浓度为145至189mg/mL的不同蛋白质的实例。在蛋白质浓度渐增的X轴上示出数据。另外，例示性地添加60mg/mL下的抗IL-36R抗体的黏度数据，以便显示蛋白质浓度对黏度的影响(较低蛋白质浓度导致较低黏度)。相较于典型的高浓度蛋白质溶液，抗IL-36R抗体溶液具有出人意料的低黏度值。
实施例6
最终制剂长期稳定性研究
选择两种制剂(表6)以在长期稳定性研究中进行测试。将具有本发明的抗IL-36R抗体的两种制剂于5℃下保存至少30个月。
表6：用于长期稳定性研究的制剂组成
Figure BDA0003248185000001241
30个月稳定性研究
在0、1、3、6、9、12、18、24及30或36个月时监测各制剂的稳定性。通过以下分析来分析样本：尤其显微镜可见粒子、HP-SEC、IL-36R结合(效力)、非还原性CGE(用以检测片段的毛细管凝胶电泳)及icIEF(用以测量电荷变体的成像毛细管等电聚焦)。
显微镜可见粒子(SVP)
对候选制剂中的显微镜可见粒子的监测通过流动光遮蔽进行的。出人意料地，对于在5℃下储存30个月的样本，对于在5℃下储存至少30个月之后的F1及F2两者，皆观测到低数目的直径10至25μm或25μm及更大的粒子(数据未显示)。
icIEF
本发明的抗IL-36R抗体的一般电荷特征曲线呈现酸性、碱性及主峰群组。F1及F2两者在5℃下储存至少30个月之后，电荷特征曲线的变化极少(数据未显示)。
非还原性CGE
为了评定本发明制剂的抗IL-36R抗体在储存时的片段化及二硫键还原，评估非还原性毛细管凝胶电泳的结果。对于F1及F2两者，在5℃下储存至少30个月之后，观测到极低程度的片段化及二硫键还原(LMW％)(数据未显示)。
HP-SEC
通过HP-SEC评定制剂相对于聚集的稳定性(HMW％)。出人意料地，F1及F2在5℃下储存至少30个月之后展现极低HMW％(图6)。
效力
使用结合分析评定本发明候选的抗IL-36R抗体制剂的效力。值得注意的是，即使在5℃下储存至少30个月之后，F1及F2的效力仍呈现为稳定(数据未显示)。
长期稳定性研究的概述
来自30个月稳定性研究的数据的评估显示F1及F2两者在通过各种分析进行评定时表现同样良好。值得注意的是，制剂在储存至少30个月之后显示极低HMW含量％。
实施例7
加速稳定性研究
选择两种制剂(表7)以在应力条件下在稳定性研究中进行测试。将具有本发明的抗IL-36R抗体的两种制剂在40℃下保持于10mL玻璃小瓶(8mL/小瓶)中至多三个月。制剂F2表示可用于非经肠投与的参考制剂。
表7：用于加速稳定性研究的制剂组成
制剂基质 制剂F1 制剂F2
抗L-36R抗体浓度 60mg/mL 60mg/mL
乙酸盐 45 mM 0mM
柠檬酸盐 0mM 25mM
蔗糖 150 mM 0mM
L-精氨酸HCl 25mM 0mM
PS20 0.04％(w/v) 0.04％(w/v)
pH 5.5 6.5
浊度
在0、1及3个月时监测两种制剂的稳定性。通过测量浊度来分析样本。通过90°光散射用Hach Lange TL2350浊度仪在400至600nm下分析浊度。数据展示于图7中。制剂F2显示为制剂F1的至少两倍的高浊度结果。自初始取样时间点，历经至多三个月的研究时程，制剂F1出人意料地展现极低的浊度。
HP-SEC
通过HP-SEC评定制剂相对于聚集的稳定性(HMW％)。数据描绘在图8中。出乎意料地，相较于参考制剂F2，自初始取样时间点，历经至多三个月的研究时程，制剂F1展现极低的HMW％。相较于制剂F1，参考制剂F2的HMW％高至少45％。
加速稳定性研究的概述
在40℃下于应力条件下的三个月稳定性研究的数据评估显示参考制剂F2的浊度结果相对于制剂F1高至少两倍。此外，相较于参考制剂F2，自初始取样时间点，历经至多三个月的研究时程，制剂F1展现极低的HMW％。
实施例8
冻干制剂的稳定性
使用标准冻干制程，在具有2.5mL抗IL-36R抗体制剂的6mL玻璃小瓶中评估冻干制剂的稳定性(表8)。将样本储存于40℃下至多6个月。
表8：制剂组成
Figure BDA0003248185000001271
在冻干之前、紧接在冻干及复原之后以及在40℃下储存1、3及6个月之后监测制剂的稳定性。通过以下分析来分析样本：尤其浊度、显微镜可见粒子及通过HP-SEC测得的聚集体含量。
浊度
通过90°光散射(
Figure BDA0003248185000001272
至600nm)用Hach Lange TL2350浊度仪测量浊度。所测试制剂展现不受冻干步骤影响的低浊度。出人意料地，浊度值在于40℃下储存6个月之后并未增加(图9)。
HP-SEC
此外，通过HP-SEC进行粉末制剂相对于聚集的稳定性(HMW％)。在冻干期间产生的冰水表面处的冷冻浓度及应力出乎意料地并未引起蛋白质聚集体的形成。此外，粉末制剂在于40℃下储存至少6个月之后显示极低HMW％(图10)。
冻干制剂的稳定性的概述
来自此研究的数据的评估出人意料地显示冻干抗IL36R抗体制剂而对蛋白质质量无任何影响的可行性。此外，在40℃下在应力条件下之后续稳定性研究证实抗IL-36R抗体在前述粉末制剂中的非凡稳定性。
提供前述描述以使本领域技术人员能够实践本申请所描述的各种组态。尽管已参看各种附图及组态特定地描述了本发明技术，但应理解，这些技术仅出于说明目的且不应被视为限制本发明技术的范畴。
在整个本申请中，参考各种公开案(专利或非专利文献)。这些公开案的公开内容全部特此以引用的方式并入本申请案中，以便更充分地描述本发明所关于的现有技术。所公开的参考文献也单独且具体地以引用的方式并入本申请中，其中所含的材料在参考文献所依据的句子中论述。
序列表
<110> 勃林格殷格翰国际有限公司
<120> 抗IL-36-R抗体制剂
<130> 09-0694-CN-1
<150> 62/815405
<151> 2019-03-08
<160> 140
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 108
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 1
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu His Trp Tyr Gln Lys Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Leu Trp
35 40 45
Val Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Val Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln His His Arg Ser Pro
85 90 95
Val Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys
100 105
<210> 2
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 2
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Gln Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Thr Phe Thr Cys Leu Ala Ser Gln Thr Ile Gly Thr Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Thr Ser Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Phe Asn Ile Arg Ser Leu Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Tyr Thr Thr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 3
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 3
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Gln Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Thr Phe Thr Cys Leu Ala Ser Gln Thr Ile Gly Thr Trp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ser Thr Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Lys Phe Ser Phe Lys Ile Ser Ser Leu Gln Ala
65 70 75 80
Ala Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Tyr Ser Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Arg
100 105
<210> 4
<211> 112
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 4
Asp Val Leu Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Asn Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gln Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105 110
<210> 5
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 5
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Tyr Lys Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Leu Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Gly Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Lys Phe Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Asp Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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<210> 6
<211> 108
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 6
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Leu Trp
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Ile Tyr Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Gly Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu
65 70 75 80
Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Phe His Arg Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 7
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 7
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Leu Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Val Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Asn
20 25 30
Val Leu Trp Tyr Gln Gln Lys Ile Gly Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg His Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Arg Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 8
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 8
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Leu Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Val Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Asn
20 25 30
Val Leu Trp Tyr Gln Gln Lys Ile Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg His Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Thr Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Arg Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 9
<211> 107
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 9
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Ala Thr Val Gly
1 5 10 15
Gly Arg Val Asn Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Arg Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Thr
35 40 45
His Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Met Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Asp Leu Lys
100 105
<210> 10
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<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 10
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Gln Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Ser Val Thr Phe Ser Cys Leu Ala Ser Gln Thr Ile Gly Thr Trp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Thr Ser Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Arg
100 105
<210> 11
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<213> 小鼠
<400> 11
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Thr Glu Leu Leu Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asn Thr Val Thr Ser Tyr
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50 55 60
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Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn
20 25 30
Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Val Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Lys Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Leu Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Asn Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Thr Lys Asn Phe Tyr Ser Ser Tyr Ser Tyr Asp Asp Ala Met
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 13
<211> 124
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 13
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Phe Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Phe Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ala Pro Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Lys Ala Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Phe Pro Asn Asn Tyr Tyr Ser Tyr Asp Asp Ala Phe Ala
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 14
<211> 118
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 14
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Lys Phe
20 25 30
Gly Val His Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Pro Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met
50 55 60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ile Ser Gln Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Arg Ile Asp Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Gln Ile Tyr Tyr Ser Thr Leu Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Ser Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 15
<211> 120
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 15
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Phe Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr
20 25 30
Glu Ile Asn Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Thr Gly Ile Thr Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Ile
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Leu Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Thr Gly Thr Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 16
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Asp Phe Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Met Arg Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn Pro Gly Asn Val Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Asn Phe
50 55 60
Arg Asn Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Arg Ser Leu Thr Ser Ala Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Val Val Phe Tyr Gly Glu Pro Tyr Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 17
<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 17
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Val Arg Gln Phe Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Phe Asn Ala Pro Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe
65 70 75 80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Ile Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Lys Gly Gly Tyr Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 18
<211> 119
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 18
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Val Arg Gln Phe Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Pro Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe
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Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
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Arg Lys Gly Gly Tyr Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 19
<211> 117
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 19
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Ala Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Val Ile Trp Pro Val Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile His Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Arg Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Met Asp Trp Asp Asp Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 20
<211> 124
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 20
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Arg Pro Lys Gln Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Asp Pro Arg Phe
50 55 60
Gln Asp Lys Ala Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Lys Ser Phe Pro Asp Asn Tyr Tyr Ser Tyr Asp Asp Ala Phe Ala
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 21
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 21
Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His
1 5 10
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<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 22
Leu Ala Ser Gln Thr Ile Gly Thr Trp Leu Ala
1 5 10
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<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 23
Leu Ala Ser Gln Thr Ile Gly Thr Trp Leu Gly
1 5 10
<210> 24
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 24
Arg Ser Ser Gln Asn Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gln
1 5 10 15
<210> 25
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 25
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Tyr Lys Tyr Leu Asn
1 5 10
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<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 26
Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Phe His
1 5 10
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<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 27
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Asn Val Leu
1 5 10
<210> 28
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 28
Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Arg Ala Val Ala
1 5 10
<210> 29
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 29
Leu Ala Ser Gln Thr Ile Gly Thr Trp Leu Gly
1 5 10
<210> 30
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 30
Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 31
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 31
Ala Ala Thr Ser Leu Ala Asp
1 5
<210> 32
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 32
Arg Ser Thr Thr Leu Ala Asp
1 5
<210> 33
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 33
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 34
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 34
Tyr Thr Ser Gly Leu His Ser
1 5
<210> 35
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 35
Arg Thr Ser Asn Leu Ala Ser
1 5
<210> 36
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 36
Ser Ala Ser Tyr Arg His Ser
1 5
<210> 37
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 37
Ser Ala Ser Asn Arg Tyr Thr
1 5
<210> 38
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 38
Arg Ala Thr Ser Leu Ala Asp
1 5
<210> 39
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 39
His Gln His His Arg Ser Pro Val Thr
1 5
<210> 40
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成肽
<400> 40
Gln Gln Val Tyr Thr Thr Pro Leu Thr
1 5
<210> 41
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 41
Gln Gln Leu Tyr Ser Ala Pro Tyr Thr
1 5
<210> 42
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 42
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Phe Thr
1 5
<210> 43
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 43
Gln Gln Asp Ser Lys Phe Pro Trp Thr
1 5
<210> 44
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 44
His Gln Phe His Arg Ser Pro Leu Thr
1 5
<210> 45
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 45
Gln Gln Tyr Ser Arg Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 46
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 46
Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 47
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 47
Gln Gln Leu Tyr Ser Gly Pro Tyr Thr
1 5
<210> 48
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 48
Gly Asn Thr Val Thr Ser Tyr Trp Met His
1 5 10
<210> 49
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 49
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Asn Tyr Met Asn
1 5 10
<210> 50
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 50
Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp Tyr Ile His
1 5 10
<210> 51
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 51
Gly Phe Ser Leu Thr Lys Phe Gly Val His
1 5 10
<210> 52
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 52
Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Glu Ile Asn
1 5 10
<210> 53
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 53
Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Ser Trp Ile His
1 5 10
<210> 54
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 54
Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr Ala Val His
1 5 10
<210> 55
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 55
Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr Gly Val His
1 5 10
<210> 56
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 56
Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp Tyr Ile His
1 5 10
<210> 57
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 57
Glu Ile Leu Pro Ser Thr Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Asn Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 58
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 58
Arg Val Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Lys Tyr Asn Gln Asn Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 59
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 59
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ala Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 60
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 60
Val Ile Trp Ala Gly Gly Pro Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser
1 5 10 15
<210> 61
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 61
Val Ile Trp Thr Gly Ile Thr Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Ile Ser
1 5 10 15
<210> 62
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 62
Glu Ile Asn Pro Gly Asn Val Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Asn Phe
1 5 10 15
<210> 63
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 63
Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Phe Asn Ala Pro Phe Lys Ser
1 5 10 15
<210> 64
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 64
Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Pro Phe Lys Ser
1 5 10 15
<210> 65
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 65
Val Ile Trp Pro Val Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser
1 5 10 15
<210> 66
<211> 17
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 66
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Asp Pro Arg Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 67
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 67
Val Tyr Phe Gly Asn Pro Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 68
<211> 16
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 68
Thr Lys Asn Phe Tyr Ser Ser Tyr Ser Tyr Asp Asp Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 69
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 69
Ser Phe Pro Asn Asn Tyr Tyr Ser Tyr Asp Asp Ala Phe Ala Tyr
1 5 10 15
<210> 70
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 70
Gln Ile Tyr Tyr Ser Thr Leu Val Asp Tyr
1 5 10
<210> 71
<211> 12
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 71
Gly Thr Gly Thr Gly Phe Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 72
<211> 10
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 72
Val Phe Tyr Gly Glu Pro Tyr Phe Pro Tyr
1 5 10
<210> 73
<211> 11
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 73
Lys Gly Gly Tyr Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 74
<211> 9
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 74
Met Asp Trp Asp Asp Phe Phe Asp Tyr
1 5
<210> 75
<211> 15
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 75
Ser Phe Pro Asp Asn Tyr Tyr Ser Tyr Asp Asp Ala Phe Ala Tyr
1 5 10 15
<210> 76
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 76
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Phe His Arg Ser Pro
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Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 77
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 77
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Ile Leu Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Phe His Arg Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 78
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 78
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Trp
35 40 45
Ile Tyr Arg Thr Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Phe His Arg Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 79
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 79
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
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50 55 60
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85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 80
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 80
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Trp
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50 55 60
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85 90 95
Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 81
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 81
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
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Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 82
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 82
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
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<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 83
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1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
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Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
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Pro Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Phe His Arg Ser Pro
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<210> 84
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 84
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1 5 10 15
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65 70 75 80
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 85
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明: 合成多肽
<400> 86
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 87
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 88
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 89
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 90
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 91
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 93
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 94
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<211> 119
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 95
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<211> 119
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 96
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<211> 119
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 97
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115
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<211> 119
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 98
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 99
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<210> 100
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 100
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<210> 101
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 101
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<212> PRT
<213> 小鼠
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<212> PRT
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<400> 104
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<213> 小鼠
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<210> 112
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 112
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
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35 40 45
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100 105 110
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145 150 155 160
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165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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290 295 300
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305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 113
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 113
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
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100 105
<210> 114
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 114
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
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210 215
<210> 115
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 115
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
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Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 116
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 116
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Trp
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Ile Tyr Arg Thr Ser Arg Leu Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
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Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
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Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
100 105 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
115 120 125
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180 185 190
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195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
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<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 117
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Glu Arg Ala Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
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<211> 215
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 118
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Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
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<210> 119
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 119
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
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Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 120
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 120
Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Met Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser
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Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
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<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 121
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
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210 215
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 122
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 123
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 124
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Val Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Asn
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210
<210> 125
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 125
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
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Lys
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<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 126
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
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Lys
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<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 127
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
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340 345 350
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355 360 365
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Lys
<210> 128
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 128
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
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180 185 190
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
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<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 129
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<400> 130
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<400> 137
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Pro Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Phe
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Val Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Lys Gly Gly Tyr Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 138
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 138
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Phe Asn Ala Pro Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Phe
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Thr Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Lys Gly Gly Tyr Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 139
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列说明：合成多肽
<400> 139
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Pro Phe Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Phe
65 70 75 80
Lys Met Ser Ser Val Thr Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Lys Gly Gly Tyr Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 140
<211> 7
<212> PRT
<213> 小鼠
<400> 140
Arg Thr Ser His Leu Ala Ser
1 5

Claims (69)

1.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；
b.缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
c.张力调节剂，其以在约100mM至约250mM范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约8范围内。
2.如权利要求1的医药制剂，其中该制剂呈液体或粉末形式。
3.如权利要求1或2的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体以在约10mg/mL至约200mg/mL范围内的浓度存在。
4.如权利要求1的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体以约20mg/mL的浓度存在。
5.如权利要求1的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体以约60mg/mL的浓度存在。
6.如权利要求1的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体以约150mg/mL的浓度存在。
7.如权利要求1至6中任一项的医药制剂，其中该缓冲剂包含组氨酸、磷酸盐、丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐或TRIS。
8.如权利要求7的医药制剂，其中该缓冲剂包含柠檬酸盐或乙酸盐。
9.如权利要求7的医药制剂，其中该缓冲剂包含组氨酸。
10.如权利要求8的医药制剂，其中该缓冲剂包含乙酸盐。
11.如权利要求1至10中任一项的医药制剂，其中该张力调节剂为一或多种糖及/或多元醇。
12.如权利要求11的医药制剂，其中该张力调节剂为包含蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、甘油、甘露糖醇或右旋糖的一或多种糖及/或多元醇。
13.如权利要求12的医药制剂，其中该张力调节剂包含蔗糖或海藻糖。
14.如权利要求13的医药制剂，其中该张力调节剂包含蔗糖。
15.如权利要求13的医药制剂，其中该张力调节剂包含海藻糖。
16.如权利要求1至15中任一项的医药制剂，其中该制剂进一步包含稳定剂，其以在约0mM至约80mM范围内的浓度存在。
17.如权利要求16的医药制剂，其中该稳定剂包含氨基酸，其包含精氨酸、组氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或其医药学上可接受的盐。
18.如权利要求16的医药制剂，其中该稳定剂包含L-精氨酸或其医药学上可接受的盐。
19.如权利要求11-15中任一项的医药制剂，其中该制剂进一步包含盐，其以在约0至约150mM范围内的浓度存在。
20.如权利要求19的医药制剂，其中该盐包含氯化钠(NaCl)、氯化镁(MgCl2)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钾(KCl)、氯化锂(LiCl)、氯化钙(CaCl2)、硼酸盐或氯化锌(ZnCl2)。
21.如权利要求19的医药制剂，其中该盐包含氯化钠(NaCl)。
22.如权利要求1的医药制剂，其中该制剂进一步包含表面活性剂，其以在约0.1g/L至约1.5g/L范围内的浓度存在。
23.如权利要求22的医药制剂，其中该表面活性剂包含泊洛沙姆188(poloxamer 188)、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。
24.如权利要求22的医药制剂，其中该表面活性剂包含聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60或聚山梨醇酯80。
25.如权利要求22的医药制剂，其中该表面活性剂包含聚山梨醇酯20。
26.如权利要求22的医药制剂，其中该表面活性剂包含聚山梨醇酯80。
27.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约10mg/mL至约200mg/mL范围内的浓度存在；
b.乙酸盐及/或组氨酸缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
c.蔗糖及/或海藻糖，其以在约100mM至约250mM范围内的浓度存在；
d.L-精氨酸及/或其医药学上可接受的盐，其以在约0mM至约80mM范围内的浓度存在；
e.氯化钠(NaCl)，其以在约0至约150mM范围内的浓度存在；及
f.聚山梨醇酯20及/或聚山梨醇酯80，其以在约0g/L至约1.5g/L范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约7范围内。
28.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约20mg/mL范围内的浓度存在；
b.柠檬酸盐缓冲剂，其以约25mM的浓度存在；
c.蔗糖及/或海藻糖，其以约200mM的浓度存在；
d.聚山梨醇酯80，其以约0.4g/L的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约6至约7范围内。
29.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以约60mg/mL的浓度存在；
b.乙酸盐缓冲剂，其以约45mM的浓度存在；
c.蔗糖及/或海藻糖，其以约150mM的浓度存在；
d.L-精氨酸或其医药学上可接受的盐，其以约25mM的浓度存在；及
e.聚山梨醇酯20，其以约0.4g/L的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约6范围内。
30.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以约150mg/mL的浓度存在；
b.乙酸盐缓冲剂，其以约45mM的浓度存在；
c.蔗糖或海藻糖，其以约150mM的浓度存在；
d.L-精氨酸或其医药学上可接受的盐，其以约25mM的浓度存在；及
e.聚山梨醇酯20，其以约0.4g/L的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约6范围内。
31.如权利要求1至30中任一项的医药制剂，其中该制剂的渗透压值在约210mOsmol/kg至约390mOsm/kg的范围内。
32.如权利要求1至30中任一项的医药制剂，其中少于约5％的该抗体以聚集体形式存在于该制剂中。
33.如权利要求1至32中任一项的医药制剂，其中该制剂为无菌的。
34.如权利要求1至33中任一项的医药制剂，其中该制剂在冷冻及解冻后稳定。
35.如权利要求1至34中任一项的医药制剂，其中该制剂包含水或用水复原。
36.如权利要求1至35中任一项的医药制剂，其中该制剂呈液体形式或在用水复原时具有约5至约6之间的pH。
37.如权利要求1至36中任一项的医药制剂，其中该制剂呈液体或在用水复原时具有约6的pH。
38.如权利要求1至37中任一项的医药制剂，其中该制剂具有至少一个选自由以下组成的组的特征：
(i)增加的存放期，
(ii)较好的温度稳定性，
(iii)减少的聚集体形成，
(iv)较好的化学稳定性，
(v)降低的黏度，及
如与参考制剂比较。
39.如权利要求1至37中任一项的医药制剂，其中该制剂在储存于约40℃之后，如与该参考制剂比较，具有至少一个选自由以下组成的组的特征：
(a)如通过高效能尺寸排阻层析(HP-SEC)所测量，降低的聚集体百分比，
(b)如通过HP-SEC所测量，较高的单体百分比，
(c)通过CEX所测量，较高的主峰百分比(电荷变体降解较少)，
(d)例如≥10μm及≥25μm的显微镜可见粒子的较低百分比，及
(e)以福尔马肼浊度测量单位(Formazine Nephelometry Unit；FNU)计的较低浊度值。
40.一种医药产品，其包含小瓶或注射器，该小瓶或注射器包含如权利要求1至39中任一项的医药制剂。
41.如权利要求40的医药产品，其进一步包含预组装的注射装置。
42.如权利要求41的医药产品，其中该预组装注射装置为自动注射器或针头安全装置。
43.一种预组装注射装置，其包含如权利要求1至39中任一项的医药制剂。
44.如权利要求43的预组装注射装置，其中该装置为自动注射器或针头安全装置，或注射器。
45.如权利要求43的预组装注射装置，其中该制剂适合于皮下投与或肌肉内投与。
46.一种分装部分的试剂盒，其包含至少一个容器，该至少一个容器包含如权利要求1至39中任一项的医药制剂及注射装置。
47.如权利要求46的试剂盒，其包含用于向受试者皮下或肌肉内投与该制剂的说明书或用于皮下或肌肉内自投与的说明书。
48.如权利要求1至39中的任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
a.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:35、102、103、104、105、106或140(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:72(H-CDR3)；或
b.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:102(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQID NO:72(H-CDR3)；或
c.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:103(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQID NO:72(H-CDR3)；或
d.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:104(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQID NO:72(H-CDR3)；或
e.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:105(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQID NO:72(H-CDR3)；或
f.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:106(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；及氨基酸序列SEQID NO:72(H-CDR3)；或
g.轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:140(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQID NO:72(H-CDR3)。
49.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:76、77、78、79、80、81、82或83中的任一个；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:87、88、89、90、91、92、93、94或95中的任一个。
50.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:87的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:88的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:89的重链可变区。
51.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:84、85或86中的任一个；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:96、97、98、99、100或101中的任一个。
52.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:85的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:100的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:85的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:101的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:86的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:100的重链可变区；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:86的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:101的重链可变区。
53.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：轻链，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:114、115、116、117、118、119、120或121中的任一个；及重链，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:125、126、127、128、129、130、131、132或133中的任一个。
54.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:115的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:125的重链；
包含氨基酸序列SEQ ID NO:115的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:126的重链；
包含氨基酸序列SEQ ID NO:115的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:127的重链；
包含氨基酸序列SEQ ID NO:118的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:125的重链；
包含氨基酸序列SEQ ID NO:118的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:126的重链；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:118的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:127的重链。
55.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：轻链，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:122、123或124中的任一个；及重链，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:134、135、136、137、138或139中的任一个。
56.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
包含氨基酸序列SEQ ID NO:123的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:138的重链；
包含氨基酸序列SEQ ID NO:123的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:139的重链；或
包含氨基酸序列SEQ ID NO:124的轻链；及包含氨基酸序列SEQ ID NO:138的重链。
57.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:103(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:72(H-CDR3)；
b)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:104(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:72(H-CDR3)；
c)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:45(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:107(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:63(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:73(H-CDR3)；或
d)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:45(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ IDNO:107(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:64(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:73(H-CDR3)。
58.如权利要求1至39中任一项的医药制剂，其中该抗IL-36R抗体或其抗原结合片段包含：
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:21(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:30(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:39(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:48(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:57(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:67(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:22(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:31(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:40(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:49(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:58(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:68(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:23(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:32(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:41(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:50(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:59(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:69(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:24(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:33(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:42(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:51(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:60(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:70(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:25(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:34(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:43(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:52(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:61(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:71(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:35(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:44(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:72(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:45(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:54(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:63(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:73(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:45(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:54(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:64(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:73(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:28(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:37(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:46(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:55(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:65(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:74(H-CDR3)；或
轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:29(L-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:38(L-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:47(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:56(H-CDR1)；氨基酸序列SEQ ID NO:66(H-CDR2)；氨基酸序列SEQ ID NO:75(H-CDR3)。
59.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；
其中该抗体以约20mg/mL、60mg/mL或150mg/mL的浓度存在；及
b.乙酸盐缓冲剂，其以约45mM的浓度存在；
c.蔗糖，其以约150mM的浓度存在；
d.L-精氨酸HCl，其以约25mM的浓度存在；
e.聚山梨醇酯20，其以约0.4g/L的浓度存在；且
其中该制剂的特征在于pH在约5至约6范围内。
60.一种粉末医药制剂，其中当用水复原时产生包含以下的水溶液：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：
i.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:125所列的氨基酸序列的重链；或
ii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:126所列的氨基酸序列的重链；或
iii.包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链，及包含如SEQ ID NO:127所列的氨基酸序列的重链；及
b.组氨酸缓冲剂，其以约25mM的浓度存在；
c.蔗糖及/或甘露糖醇，其以约180mM的浓度存在；
d.聚山梨醇酯20，其以约0.2g/L的浓度存在；且
其中该制剂的特征在于当用水复原时，pH在约5至约7的范围内。
61.如权利要求60的粉末制剂，其中该抗体以约20mg/mL、60mg/mL或150mg/mL的浓度存在。
62.如权利要求60的粉末制剂，其中该制剂包含约100mg至约1500mg的该抗体且可用注射用水复原。
63.一种制备医药制剂的方法，其包含：
a.培养编码抗IL-36R抗体的轻链及重链的一或多种核酸已稳定并入其基因组中的哺乳动物细胞，使得该细胞将该抗体分泌至细胞培养基中，并自该细胞培养基纯化该抗体；及
b.制备如权利要求1至39中任一项的制剂。
64.如权利要求63的方法，其中编码该抗IL-36R抗体的轻链的核酸包含编码SEQ IDNO:118的核苷酸序列，且其中编码该抗IL-36R抗体的重链的核酸包含编码SEQ ID NO:125的核苷酸序列。
65.如权利要求63的方法，其中编码该抗IL-36R抗体的轻链的核酸包含编码SEQ IDNO:118的核苷酸序列，且其中编码该抗IL-36R抗体的重链的核酸包含编码SEQ ID NO:126的核苷酸序列。
66.如权利要求63的方法，其中编码该抗IL-36R抗体的轻链的核酸包含编码SEQ IDNO:118的核苷酸序列，且其中编码该抗IL-36R抗体的重链的核酸包含编码SEQ ID NO:127的核苷酸序列。
67.一种医药产品，其包含：小瓶，该小瓶包含呈粉末形式的约100mg至1500mg抗IL-36R抗体；用于复原该抗IL-36R抗体的说明书；及用于制备供输注的该复原抗体的说明书，其中该抗IL-36R抗体包含有包含如SEQ ID NO:118所列的氨基酸序列的轻链及包含如SEQ IDNO:125、126或127中的任一个所列的氨基酸序列的重链；且该复原说明书要求用注射用水复原至1至50mL的可抽取体积。
68.如权利要求7的医药制剂，其中该缓冲剂包含柠檬酸盐。
69.一种医药制剂，其包含：
a.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以在约0.5mg/mL至约220mg/mL范围内的浓度存在；
b.缓冲剂，其以在约20mM至约80mM范围内的浓度存在；
c.张力调节剂，其以在约100mM至约400mM范围内的浓度存在；
其中该制剂的特征在于当呈水溶液形式时，pH在约5至约8范围内。
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