KR20230035595A

KR20230035595A - 항-ctla-4 항체를 함유하는 안정화된 제형

Info

Publication number: KR20230035595A
Application number: KR1020237003824A
Authority: KR
Inventors: 위안 청; 데이비드 비. 루드비히; 샤오린 탕
Original assignee: 리제너론 파아마슈티컬스, 인크.
Priority date: 2020-07-08
Filing date: 2021-07-07
Publication date: 2023-03-14
Also published as: IL299152A; EP4178983A1; MX2022016218A; CA3185091A1; WO2022010988A1; AU2021305093A1; US20220031843A1; CN115812080A; JP2023533963A

Abstract

본 발명은 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 액체 및 동결건조된 약제학적 제형을 제공한다. 제형은 항-CTLA-4 항체에 더하여, 완충제, 적어도 하나의 당, 또는 적어도 하나의 비-이온성 계면활성제를 함유할 수 있다. 본 발명의 약제학적 제형은 수 개월 동안의 저장 후 및 열 및 다른 물리적 스트레스를 받은 후에 상당한 정도의 항체 안정성을 나타낸다.

Description

항-CTLA-4 항체를 함유하는 안정화된 제형

서열목록의 참조

본원은 2021년 ７월 ７일에 생성되고 9,333 바이트를 함유하는 파일 10813WO01-Sequence.txt로서 컴퓨터로 읽을 수 있는 형태로 제출된 서열 목록을 참조로 포함한다.

기술분야

본 발명은 치료 항체 제형의 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 인간 CTLA-4에 특이적으로 결합하는 인간 항체를 포함하는 약제학적 제형의 분야에 관한 것이다.

세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(CTLA-4; CD152로도 알려짐)는 통상적인 조절 T 세포 상에서 발현되는 유형 I 막관통 T 세포 억제 체크포인트 수용체이다. CTLA-4는, 자극 수용체 CD28이 이의 천연 리간드인 B7-1(CD80) 및 B7-2(CD86)에 결합하는 것을 능가함으로써 T 세포 활성화를 부정적으로 조절한다. 초기 T-세포 활성화는 항원-제시 세포(APC) 상의 주요 조직적합성 복합체 클래스 I 또는 II(MHCI 또는 MHCII) 단백질에 의해 제시되는 특정 펩티드를 인식하는 T-세포 수용체(TCR)를 자극함으로써 달성된다(문헌[Goldrath et al. 1999, Nature 402: 255-262]). 활성화된 TCR은 이어서 일련의 신호전달 사건의 캐스케이드를 개시하고, 이는, 다양한 전사 인자, 예를 들어 활성화제-단백질 1(AP-1), 활성화된 T 세포의 핵 인자(NFAT) 또는 활성화된 B 세포의 핵 인자 카파-경쇄-인핸서(NFκB)의 발현을 조절하는 프로모터에 의해 구동되는 형질전환된 리포터 유전자의 발현에 의해 모니터링 될 수 있다. 이어서 T-세포 반응은 T-세포 상에서 본질적으로 또는 유도적으로 발현되는 공동-자극 또는 공동-억제 수용체, 예를 들어 CD28, CTLA-4(세포독성 T-림프구-관련 단백질 4), PD-1(프로그램된 세포 사멸 단백질 1), LAG-3(림프구-활성화 유전자 3) 또는 다른 분자의 참여를 통해 추가로 개선된다(문헌[Sharpe et al. 2002, Nat. Rev. Immunol. 2: 116-126]).

치료 거대분자(예를 들어, 항체)는 분자를 환자에게 투여하기 적합하게 하면서도 저장 중에 안정성이 유지되는 방식으로 제형화되어야 한다. 예를 들어, 치료 항체는 용액이 적절하게 제형화되지 않는 경우 분해, 응집　및/또는　원치 않는 화학적 변형을 일으키는 경향이 있다. 제형 중 항체의 안정성은 제형에서 사용되는 부형제의 종류뿐만 아니라, 부형제의 양 및 부형제 서로간의 비율에 따라 달라진다. 따라서, 치료 항체를 제형화할 때, 안정성을 유지하고, 적절한 농도의 항체를 함유하며, 환자에게 편리하게 투여될 수 있게 하는 다른 특성들을 갖는 제형을 얻기 위해 많은 주의를 기울여야 한다.

인간 CTLA-4에 대한 항체는 적절한 제형화가 필요한 치료 관련 거대분자의 한 예이다.

비록 항-CTLA-4 항체가 당업계에 알려져 있기는 하지만(예를 들어, 국제공개 WO 2019/023482호 참고), 충분히 안정되고 환자에게 투여하기에 적합한, 항-CTLA-4 항체를 포함하는 약제학적 제형의 필요성이 여전히　존재한다．

항-CTLA-4 항체 및 하나 이상의 부형제를 포함하는 안정적인 약제학적 제형　및 이러한 제형을 포함하는 키트 및 이의 용도가 제공된다. 일부 경우에, 약제학적 제형은 액체 제형이다. 일부 경우에, 약제학적 제형은 동결건조된 제형이다. 일부 경우에, 약제학적 제형은 동결건조된 의약 완제품으로부터 재구성된 제형이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 안정적인 액체 약제학적 제형을 제공하며, 이는 수용액에 (i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체; (ii) 완충제; (iii) 열 안정화제; 및 (iv) 유기 공용매를 포함한다. 일부 실시형태에서, 제형은 재구성된 제형이다(즉, 동결건조된 의약 완제품로부터 재구성된다). 또 다른 양태에서, 본 개시내용은 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체의 안정적인 동결건조된 약제학적 제형을 제공하며, 이는 완충제; 열 안정화제; 및 유기 공용매를 포함하는 수용액을 동결건조함으로써 제조된다.

일부 실시형태에서, 완충제는 1 mM 내지 30 mM 농도의 히스티딘이다. 일부 실시형태에서, 열 안정화제는 1% w/v 내지 15% w/V의 농도의 수크로스이다. 일부 실시형태에서, 유기 공용매는 0.01% w/v 내지 0.3% w/v 농도의 계면활성제이다. 일부 경우에, 계면활성제는 폴리소르베이트 20이다.

일부 실시형태에서, 항체는 수용액 중에 1 mg/ml 내지 200 mg/mL의 농도로 존재한다. 일부 실시형태에서, 항체는 25 mg/ml ± 2.5 mg/ml 내지 100 mg/ml ± 10 mg/ml의 농도로 존재한다.

일부 실시형태에서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR)의 상보성 결정 영역(HCDR1-HCDR2-HCDR3), 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)의 상보성 결정 영역(LCDR1-LCDR2-LCDR3)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 각각 서열번호 3-4-5의 아미노산 서열들을 포함하는 HCDR1-HCDR2-HCDR3 도메인 및 각각 서열번호 6-7-8의 아미노산 서열들을 포함하는 LCDR1-LCDR2-LCDR3 도메인을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항체는 인간 IgG 중쇄 불변 영역을 갖는다. 일부 경우에, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역이다. 일부 경우에, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역이다.

일부 실시형태에서, 항체는 서열번호 9의 잔기 1 내지 445의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

임의의 다양한 실시형태에서, 수용액은 (i) 약 5 mg/ml 내지 약 150 mg/ml의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 항체; (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM의 히스티딘; (iii) 약 3% w/v 내지 약 12% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다. 일부 실시형태에서, 수용액은 약 5.5 내지 약 6.5의 pH를 갖는다.

임의의 다양한 실시형태에서, 수용액은 (i) 약 50 mg/ml ±5 mg/ml의 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다. 임의의 다양한 실시형태에서, 수용액은 (i) 약 100 mg/ml ±10 mg/ml의 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다. 일부 경우에, 수용액의 pH는 5.8 내지 6.2이다. 일부 경우에, 수용액의 pH는 약 6.0이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 안정적인 액체 약제학적 제형을 제공하며, 이는 수용액에 (i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 각각 서열번호 3, 4 및 5의 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 도메인 및 각각 서열번호 6, 7 및 8의 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 도메인을 포함하는 HCVR을 포함함); (ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘; (iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및 (iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 제형은 재구성된 제형이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체의 안정적인 동결건조된 약제학적 제형을 제공하며, 이는 (i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 각각 서열번호 3, 4 및 5의 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 도메인 및 각각 서열번호 6, 7 및 8의 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 도메인을 포함하는 HCVR을 포함함); (ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘; (iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및 (iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는 수용액을 동결건조함으로써 제조되고, 수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는다.

일부 실시형태(예를 들어, 선행하는 2개의 단락에서 논의된 제형)에서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 인간 IgG 중쇄 불변 영역을 갖는다. 일부 경우에, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역이다. 일부 경우에, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 안정적인 액체 약제학적 제형을 제공하며, 이는 수용액에 (i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함함); (ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘; (iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및 (iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는다. 일부 실시형태에서, 제형은 재구성된 제형이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체의 안정적인 동결건조된 약제학적 제형을 제공하며, 이는 (i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함함); (ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘; (iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및 (iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는 수용액을 동결건조함으로써 제조되고, 수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는다.

일부 실시형태(예를 들어, 선행하는 2개의 단락에서 논의된 제형)에서, 수용액은 (i) 약 50 mg/ml ± 5 mg/ml의 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다. 일부 실시형태(예를 들어, 선행하는 2개의 단락에서 논의된 제형)에서, 수용액은 (i) 약 100 mg/ml ± 10 mg/ml의 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다. 일부 경우에, 수용액의 pH는 약 6.0이다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, 크기 배제-초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 5℃에서 24개월의 저장 후에 회수된다. 일부 경우에, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 95%는 5℃에서 24개월의 저장 후에 회수된다. 일부 경우에, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 97%는 5℃에서 24개월의 저장 후에 회수된다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후에 회수된다. 일부 경우에, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 96%는 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후에 회수된다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 45℃ 또는 50℃에서 1개월의 저장 후에 회수된다. 일부 경우에, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 95%는 45℃ 또는 50℃에서 1개월의 저장 후에 회수된다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 주위 온도에서 60분의 교반 후에 회수된다. 일부 경우에, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 96%는 주위 온도에서 60분의 교반 후에 회수된다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 제형은 5℃에서 24개월의 저장 후 2% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함한다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 제형은 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후 2.5% 이하의 HMW 종을 포함한다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 제형은 45℃에서 1개월의 저장 후 2% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함한다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 제형은 50℃에서 1개월의 저장 후 3% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함한다.

위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형의 임의의 다양한 실시형태에서, SE-UPLC 의해 결정 시 제형은 주위 온도에서 60분의 교반 후에 2% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함한다.

일부 실시형태에서, 위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형은 유리 바이알에 함유된다. 일부 실시형태에서, 위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형은 시린지에 함유된다. 일부 경우에, 시린지는 플루오로카본-코팅된 플런저를 포함하거나, 시린지는 저 텅스텐 시린지이다. 일부 경우에, 시린지는 사전충전된 시린지이다. 일부 경우에, 시린지는 사전충전된 스테이크형(staked) 바늘 시린지이다. 일부 실시형태에서, 위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형은 대용량 장치 또는 볼루스 주사기에 함유된다.

일 양태에서, 본 개시내용은 위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형을 함유하는 펜 또는 자기주사기 전달 장치를 제공한다. 일부 경우에, 전달 장치는 일회용 펜 전달 장치이다. 일부 경우에, 전달 장치는 재사용 가능한 펜 전달 장치이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 위에서 또는 본원에서 논의된 바와 같은 안정적인 약제학적 제형을 함유하는 용기를 제공한다.

일 양태에서, 본 개시내용은 (i) 위에서 또는 본원에서 논의된 약제학적 제형을 함유하는 용기 및 (ii) 약제학적 제형의 사용을 위한 라벨링을 포함하는 키트를 제공한다. 일부 실시형태에서, 라벨링은 약제학적 제형의 피하 투여를 기재한다. 일부 실시형태에서, 라벨링은 약제학적 제형의 정맥 내 투여를 기재한다.

일 양태에서, 본 개시내용은 위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형을 포함하는 단위 투여 형태를 제공하며, 항-CTLA-4 항체는 1 mg 내지 500 mg의 양으로 존재한다. 일부 경우에, 제형은 유리 바이알에 함유된다. 일부 경우에, 제형은 시린지에 함유된다. 일부 실시형태에서, 시린지는 사전충전된 시린지이다.

일 양태에서, 본 개시내용은 위에서 또는 본원에서 논의된 안정적인 약제학적 제형을 함유하는 안전성 시스템 전달 장치를 제공한다. 일부 실시형태에서, 안전성 시스템 전달 장치는 수동 작동에 의해 연장하도록 구성된 안전성 슬리브를 포함한다. 일부 실시형태에서, 안전성 시스템 전달 장치는 안정적인 액체 약제학적 제형의 주사 후 자동으로 연장하도록 구성된 안전성 슬리브를 포함한다.

다양한 실시형태에서, 위에서 또는 본원에서 논의된 실시형태의 임의의 특징 또는 구성요소는 조합될 수 있고, 이러한 조합은 본 개시내용의 범위 내에 포함된다. 위에서 또는 본원에서 논의된 임의의 특정한 값은 위에서 또는 본원에서 논의된 다른 관련 값과 조합되어 범위의 상단 및 하단을 나타내는 값을 갖는 범위를 나열할 수 있고, 이러한 범위는 본 개시내용의 범위 내에 포함된다. 위에서 또는 본원에서 논의된 각각의 값은 1%, 5%, 10% 또는 20%의 편차로 표현될 수 있다. 예를 들어, 10 mM의 농도는 10 mM ± 0.1 mM(1% 편차), 10 mM ± 0.5 mM(5% 편차), 10 mM ± 1 mM(10% 편차) 또는 10 mM ± 2 mM(20% 편차)로서 표현될 수 있다.

다른 실시형태는 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용의 검토로부터 명백해질 것이다.

도 1은 본 개시내용의 일 실시형태에 따른 항-CTLA-4 항체(mAb1)의 동결건조된 제형의 생성을 위한 예시적인 의약 완제품 동결건조 사이클의 저장 온도, 생성물 온도 및 챔버 압력을 포함한, 동결건조 파라미터를 예시한다.

본 발명에 대해 설명하기 전에, 본 발명은 본 명세서에 기재된 특정 방법과 실험 조건에 국한되지 않으며, 이러한 방법과 조건은 바뀔 수 있다고 이해될 것이다. 또한, 본 발명의 범위는 오직 첨부된 청구범위에 의해서만 제한될 것이기 때문에, 본 명세서에 사용된 용어는 오직 특정 실시형태를 설명하려는 목적을 위한 것이며 이를 제한하려는 의도가 아님을 이해해야 한다.

달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술 용어와 과학 용어는 본 발명이 속하는 당업계의 통상의 숙련자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에서 나열된 특정 수치 값 또는 값들의 범위를 언급할 때 사용되는 "약"이라는 단어는, 그 값이 제시된 값이 1% 이하만큼 변동될 수 있다는 것을 의미한다. 예를 들어, 본 명세서에 사용된 "약 100"이라는 표현은 99 내지 101, 및 그 사이의 모든 값들(예를 들어, 99.1, 99.2, 99.3, 99.4 등)을 포함한다.

본 명세서에서 언급된 모든 특허, 출원 및 비-특허 간행물은 전체 내용이 본 명세서에 참고로 포함된다.

약제학적 제형

본원에서 사용된"약제학적 제형"이라는 표현은, 적어도 하나의 활성 성분(예를 들어, 인간 또는 비-인간 동물에 생물학적 효과를 나타낼 수 있는 항-CTLA-4 항체)과, 활성 성분 및/또는 하나 이상의 추가적인 불활성 성분과 조합될 경우 인간 또는 비-인간 동물에 치료적으로 투여되기 적합한 적어도 하나의 불활성 성분의 조합을 의미한다. 본원에서 사용된 "제형"이라는 용어는, 달리 구체적으로 지시된 바 없는 경우 "약제학적 제형"을 의미한다. 본 발명은 적어도 하나의 치료 폴리펩티드를 포함한 약제학적 제형을 제공한다. 본 발명의 특정 실시형태에 의하면, 치료 폴리펩티드는 인간 세포독성 T-림프구 관련 단백질 4(CTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원-결합 단편이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 약제학적 제형을 포함하며, 이는 (i) CTLA-4에 특이적으로 결합하는 인간 항체; (ii) 완충제; (iii) 열 안정화제; 및 (iv) 계면활성제(또한 유기 공용매 또는 계면 안정화제)를 포함한다. 부가적인 구성요소는 이러한 구성요소가 제형의 안정성을 유의하게 방해하지 않는 경우에 본 발명의 제형에 포함될 수 있다. 본 발명에 포함된 특정 예시적인 구성요소 및 제형은 아래에 상세히 기재되어 있다.

본 발명의 약제학적 제형은 특정 실시형태에서 유체 제형일 수 있다. 본원에서 사용된 "유체 제형"이라는 표현은 약 2℃ 내지 약 45℃에서 대체로 유체 상태로 존재하는 적어도 2개 구성요소의 혼합물을 의미한다. 유체 제형은 특히 액체 제형 및 재구성된 동결건조된 제형을 포함한다. 유체 제형은 특정 구성 성분에 따라서 저점도, 중간 점도 또는 고점도를 가질 수 있다. 본 발명의 약제학적 제형은 특정 실시형태에서 동결건조된 제형일 수 있다. 용어 "동결건조", "동결건조된" 및 "냉동 건조된"은 건조될 물질이 먼저 냉동되고, 이어서 얼음 또는 냉동 용매가 진공 환경에서 승화에 의해 제거되는 공정을 지칭한다. 부형제는 저장 시 동결건조된 생성물의 안정성을 향상시키거나 재구성된 생성물의 안정성을 향상시키기 위해 사전 동결건조된 제형에 포함될 수 있다. "재구성된" 제형 또는 생성물은 동결건조된 제형에 존재하는 단백질(예를 들어, 항체)이 재구성된 제형에 분산되어 재구성된 제형이 비경구 투여(예를 들어, 정맥 내 또는 피하 투여)에 적합하도록 동결건조된 제형을 희석제에 용해시킴으로써 제조된 것이다. "재구성 시간"은 용액을 이용하여 동결건조된 제형을 실질적으로 입자가 없는 정화된 용액으로 재수화시키는 데 필요한 시간이다. 재구성은 일반적으로 완전한 수화를 보장하기 위해 약 25℃의 온도에서 일어나지만, 다른 온도가 원하는 대로 사용될 수 있다. 재구성에 필요한 시간은 예를 들어, 희석제의 유형, 부형제(들) 및 단백질의 양에 따라 달라질 것이다. 예시적인 희석제는 멸균수, 주사용 정균수(BWFI), pH 완충용액(예를 들어, 인산염 완충 식염수), 멸균 식염수 용액, 링거 용액 또는 덱스트로스 용액을 포함한다.

인간 CTLA-4에 특이적으로 결합하는 항체

본 발명의 약제학적 제형은 hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 항체(예를 들어, 인간 항체) 또는 이의 항원-결합 단편을 포함할 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "hCTLA-4"는 인간 CTLA-4 단백질을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "항체"는 일반적으로 이황화 결합에 의해 상호-연결된 4개의 폴리펩티드 사슬인 2개의 중쇄(H) 및 2개의 경쇄(L)를 포함하는 면역글로불린 분자 및 이의 다량체(예를 들어, IgM)를 지칭하고자 한 것이다; 그러나 중쇄만으로 구성된 면역글로불린 분자(즉, 경쇄가 결여된 분자) 또한 용어 "항체"의 정의 내에 포함된다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서, HCVR 또는 VH라고도 약칭됨)과 중쇄 불변 영역을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3을 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(LCVR 또는 VL이라고도 약칭됨)과 경쇄 불변 영역을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인(CL1)을 포함한다. VH 및 VL 영역은 프레임워크 영역(FR)으로 지칭된 더욱 보존된 영역이 개재된 상보성 결정 영역(CDR)으로 지칭되는 고변이성 영역들로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH와 VL은 3개의 CDR과 4개의 FR로 구성되며, 아미노-말단에서부터 카르복시-말단까지 이하의 순서로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

본 발명의 특정 실시형태에서, 본 발명의 항-CTLA-4 항체는 인간 항체이다. 본원에서 사용된 "인간 항체"라는 용어는, 인간 생식세포 면역글로불린 서열에서 유래한 가변 영역과 불변 영역을 갖는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 본 발명의 인간 항체는 예를 들어 CDR, 특히 CDR3에, 인간 생식세포 면역글로불린 서열에 의해 암호화하지 않는 아미노산 잔기(예를 들어, 시험관 내의 무작위 또는 부위-특이적인 돌연변이 유발, 또는 생체 내의 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, 본원에서 사용된 "인간 항체"라는 용어는, 다른 포유류 종, 예컨대 마우스의 생식세포에서 유래한 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열로 이식된 항체를 포함하지 않는 것으로 의도된다. 다양한 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 인간 IgG 항체이다. 다양한 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 이소형 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4, 또는 혼합된 이소형의 인간 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 인간 IgG1 항체이다. 일부 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 인간 IgG4 항체이다. 위에서 또는 본원에서 논의된 임의의 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 인간 카파 경쇄를 포함할 수 있다. 위에서 또는 본원에서 논의된 임의의 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 인간 람다 경쇄를 포함할 수 있다.

본 발명의 항체는 일부 실시형태에서 재조합 인간 항체일 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 "재조합 인간 항체"는 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 모든 인간 항체, 예컨대, 숙주 세포 내로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 이용하여 발현된 항체, 재조합, 조합적 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체, 인간 면역글로불린 유전자에 대해 유전자 이식된 동물(예를 들어, 마우스)로부터 단리된 항체(예를 들어, 문헌[Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295 참조) 또는 다른 DNA 서열에 대한 인간 면역글로불린 유전자 서열의 스플라이싱을 수반하는 임의의 다른 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 이러한 재조합 인간 항체는 인간 생식세포 면역글로불린 서열 유래의 가변 영역과 불변 영역을 갖는다. 특정 실시형태에서, 그러나, 이러한 재조합 인간 항체는 시험관 내 돌연변이 유발(또는 인간 Ig 서열로 형질전환된 동물을 사용할 때에는, 생체 내 체세포 돌연변이 유발)을 거치기 때문에, 재조합 항체의 V_H 및 V_L 영역의 아미노산 서열은 인간 생식세포 V_H 및 V_L 서열로부터 유래되고 이와 관련되지만, 생체 내에서 인간 항체 생식세포의 레퍼토리 내에 자연적으로 존재할 수 없는 서열이다.

본원에서 사용된 용어 항체의 "항원-결합 부분" 또는 "항원-결합 단편"(또는 단순히" 항체 부분" 또는 "항체 단편")은 hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다.

본원에서 사용된 "단리된 항체"는 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 지칭하는 것으로 의도된다(예를 들어, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 hCTLA-4 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 없다).

"특이적으로 결합한다" 등의 용어는, 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 생리적 조건 하에서 비교적 안정적인 항원과 복합체를 형성한다는 것을 의미한다. 특이적 결합은 적어도 약 1 x 10^-6 M 이상의 해리 상수를 갖는 것을 특징으로 할 수 있다. 두 분자가 특이적으로 결합하는지를 결정하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있으며, 예를 들어, 평형 투석(equilibrium dialysis), 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다. 그러나, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 단리된 항체는 다른 항원, 예컨대 다른 종으로부터의 CTLA-4 분자(오르토로그)에 대해 교차-반응성을 가질 수 있다. 본 발명의 맥락에서, hCTLA-4뿐만 아니라 하나 이상의 추가의 항원에 결합하는 다중특이적(예를 들어, 이중특이적) 항체는 hCTLA-4에 "특이적으로 결합하는" 것으로 간주된다. 게다가, 단리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학 물질을 실질적으로 포함하지 않을 수 있다.

본 발명의 약제학적 제형에 포함될 수 있는 예시적인 항-hCTLA-4 항체는 WO 2019/023482에 기재되어 있고, 이의 개시내용은 전체가 참조로 포함된다.

본 발명의 특정 실시형태에 의하면, 항-hCTLA-4 항체, 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 3-4-5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 HCDR1-HCDR2-HCDR3을 각각 포함한다. 본 발명의 특정 실시형태에 의하면, 항-hCTLA-4 항체, 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 6-7-8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 LCDR1-LCDR2-LCDR3을 각각 포함한다.

특정 실시형태에서, 항-hCTLA-4 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR)을 포함한다. 특정 실시형태에서, 항-hCTLA-4 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함한다. 특정 실시형태에서, 항-hCTLA-4 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 서열번호 1/2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함한다. 특정 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 각각 서열번호 1/2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR/LCVR, 및 인간 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함한다. 특정 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 각각 서열번호 1/2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR/LCVR, 및 인간 IgG4 중쇄 불변 영역을 포함한다. 특정 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 각각 서열번호 1/2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR/LCVR, 및 인간 IgG 중쇄 불변 영역을 포함한다. 특정 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 각각 서열번호 1/2의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR/LCVR, 및 인간IgG1 또는 IgG4 중쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-CTLA-4 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 갖는 항-CTLA-4 항체는 본원에서 mAb1로 지칭된다. 이 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는다.

본 발명의 약제학적 제형 내에 함유되는 항체, 또는 이의 항원-결합 단편의 양은 제형에서 원하는 특정한 특성뿐만 아니라 제형이 사용되도록 의도된 특정 상황과 목적에 따라 달라질 수 있다. 특정 실시형태에서, 약제학적 제형은 약 1 mg/mL 내지 약 500 mg/mL의 항체; 약 5 mg/mL 내지 약 400 mg/mL의 항체; 약 5 mg/mL 내지 약 200 mg/mL의 항체; 약 15 mg/mL 내지 약 150 mg/mL; 약 25 mg/mL 내지 약 180 mg/mL의 항체; 약 25 mg/mL 내지 약 150 mg/mL의 항체; 약 50 mg/mL 내지 약 100 mg/mL; 약 25 mg/mL 내지 약 75 mg/mL; 또는 약 75 mg/mL 내지 약 125 mg/mL의 항체를 함유할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 제형은 약 1 mg/mL; 약 2 mg/mL; 약 5 mg/mL; 약 10 mg/mL; 약 15 mg/mL; 약 20 mg/mL; 약 25 mg/mL; 약 30 mg/mL; 약 35 mg/mL; 약 40 mg/mL; 약 45 mg/mL; 약 50 mg/mL; 약 55 mg/mL; 약 60 mg/mL; 약 65 mg/mL; 약 70 mg/mL; 약 75 mg/mL; 약 80 mg/mL; 약 85 mg/mL; 약 90 mg/mL; 약 95 mg/mL; 약 100 mg/mL; 약 105 mg/mL; 약 110 mg/mL; 약 115 mg/mL; 약 120 mg/mL; 약 125 mg/mL; 약 130 mg/mL; 약 131 mg/mL; 약 132 mg/mL; 약 133 mg/mL; 약 134 mg/mL; 약 135 mg/mL; 약 140 mg/mL; 약 145 mg/mL; 약 150 mg/mL; 약 155 mg/mL; 약 160 mg/mL; 약 165 mg/mL; 약 170 mg/mL; 약 175 mg/mL; 약 180 mg/mL; 약 185 mg/mL; 약 190 mg/mL; 약 195 mg/mL; 또는 약 200 mg/mL의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 제형일 수 있다. 특정 실시형태에서, 약제학적 제형은 5 ± 0.75 mg/mL 내지 150 ± 22.5 mg/mL의 항체; 7.5 ± 1.125 mg/mL 내지 140 ± 21 mg/mL의 항체; 10 ± 1.5 mg/mL 내지 130 ± 19.5 mg/mL의 항체; 12.5 ± 1.875 mg/mL 내지 120 ± 18 mg/mL의 항체; 15 ± 2.25 mg/mL 내지 110 ± 16.5 mg/mL의 항체; 17.5 ± 2.625 mg/mL 내지 100 ± 15 mg/mL의 항체; 20 ± 3 mg/mL 내지 90 ± 13.5 mg/mL의 항체; 22.5 ± 3.375 mg/mL 내지 80 ± 12 mg/mL의 항체; 25 ± 3.75 mg/mL 내지 70 ± 10.5 mg/mL의 항체; 27.5 ± 4.125 mg/mL 내지 60 ± 9 mg/mL의 항체; 30 ± 4.5 mg/mL 내지 50 ± 7.5 mg/mL의 항체; 25 ± 3.75 mg/mL의 항체, 50 ± 7.5 mg/ml의 항체, 또는 100 ± 15 mg/ml을 함유할 수 있는 제형이다. 일부 실시형태에서, 약제학적 제형은 15 ± 0.15 mg/ml 내지 150 ± 1.5 mg/mL의 항-CTLA-4 항체를 함유한다. 일부 경우에, 약제학적 제형은 50 mg/mL ± 2.5 mg/mL의 항-CTLA-4 항체를 함유한다. 일부 경우에, 약제학적 제형은 100 mg/mL ± 5 mg/mL의 항-CTLA-4 항체를 함유한다.

생체등가물

본 발명은 본원에 개시된 예시적인 분자의 것과는 다르지만 hCTLA-4에 결합하는 능력을 보유하는 아미노산 서열을 갖는 항체를 포함한다. 이러한 변이체 분자는 모 서열에 비해 아미노산에 하나 이상의 첨가, 결실, 또는 치환을 포함할 수 있으나, 본원에서 논의된 항체와 본질적으로 동등한 생물학적 활성을 나타낼 수 있다.

본 발명은 본원에 제시된 예시적인 항체 중 어느 것과 생체등가인 항원-결합 분자를 포함한다. 2개의 항체는 예를 들어, 동일한 몰 용량과 유사한 실험 조건 하에서 단일 용량 또는 다수의 용량으로 투여될 때 흡수 속도나 정도에 유의한 차이가 나타나지 않는 약제학적 균등물 또는 약제학적 대체물인 경우, 생체등가인 것으로 간주된다. 일부 항체들은 흡수 정도는 동등하지만 흡수 속도가 동등하지 않기 때문에 서로 동등물 또는 약제학적 대체물로 간주될 것이나, 흡수 속도에서의 이러한 흡수 속도의 차이는 의도적이며 라벨링에 반영되어 있고, 예를 들어, 만성적으로 사용할 때 유효 체내 약물 농도에 도달하는 데 필수적인 것도 아니고, 연구된 특정 의약 완제품에 대해서는 의학적으로 유의하지도 않으므로 여전히 생체등가인 것으로 간주될 수 있다.

일 실시형태에서, 2개의 항체는 안전성, 순도 및 효능에서 임상적으로 유의한 차이가 없는 경우 생체등가이다.

일 실시형태에서, 2개의 항체는 환자에 대해 참고 산물과 생물학적 산물을 1회 이상 교체할 수 있고, 이러한 교체가 없는 연속 치료제에 비해 면역원성의 임상적으로 유의한 변화 또는 효능 약화를 포함한 부작용 위험의 예측되는 증가가 없는 경우, 생체등가이다.

생체등가는 생체 내 및 시험관 내 방법에 의해 입증될 수 있다. 생체등가 척도는 예를 들어, 다음을 포함한다: (a) 항체 또는 그 대사산물의 농도가 혈액, 혈장, 혈청 또는 기타 생물학적 유체에서 시간의 함수로 측정되는 인간 또는 기타 포유동물의 생체 내 시험; (b) 인간의 생체 내 생체이용률 데이터와 상관관계가 있고 이를 합리적으로 예측하는 시험관 내 시험; (c) 항체(또는 이의 표적)의 적절한 급성 약리학적 효과가 시간의 함수로 측정되는 인간 또는 기타 포유동물의 생체 내 시험; 및 (d) 항원-결합 단백질의 안전성, 효능, 또는 생체이용률 또는 생체등가를 확립하는 잘 통제된 임상 시험에서.

제형화 부형제 및 pH

본 발명의 약제학적 제형은 하나 이상의 부형제를 포함한다. 본원에서 사용된 "부형제"라는 용어는, 원하는 지속성, 점도 또는 안정화 효과를 제공하기 위해 제형에 첨가된 임의의 비-치료제를 의미한다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 약제학적 제형은 하나 이상의 탄수화물, 예를 들어, 하나 이상의 당을 포함할 수 있다. 당은 환원 당 또는 비-환원 당일 수 있다. "환원 당"은 예를 들어, 케톤 또는 알데히드 기가 있는 당을 포함하며, 반응성 헤미아세탈기를 함유하여 환원제의 역할을 하게 된다. 환원 당의 특정한 예는, 프럭토스, 글루코스, 글리세르알데히드, 락토스, 아라비노스, 만노스, 자일로스, 리보스, 람노스, 갈락토스 및 말토스를 포함한다. 비-환원 당은 아세탈인 아노머 탄소를 포함할 수 있고, 마이야르(Maillard) 반응을 개시하기 위해 아미노산 또는 폴리펩티드와 실질적으로 반응하지 않는다. 비-환원 당의 특정한 예는 수크로스, 트레할로스, 소르보스, 수크랄로스, 멜레지토스 및 라피노스를 포함한다. 당 산(Sugar acid)은 예를 들어, 당산(saccharic acid), 글루코네이트 및 다른 폴리하이드록시 당과 이의 염을 포함한다. 일부 실시형태에서, 당은 수크로스이다. 일부 경우에, 당(예를 들어, 수크로스)은 항-CTLA-4 항체에 대한 열 안정화제로서 작용한다.

본 발명의 약제학적 제형 내에 함유된 당(예를 들어, 수크로스)의 양은 제형이 사용되는 특정 상황과 의도된 목적에 따라 달라질 것이다. 특정 실시형태에서, 제형은 약 0.1% 내지 약 20%의 당; 약 0.5% 내지 약 20%의 당; 약 1% 내지 약 20%의 당; 약 2% 내지 약 15%의 당; 약 3% 내지 약 10%의 당; 약 3% 내지 약 7%의 당; 약 4% 내지 약 6%의 당, 약 3% 내지 약 12%의 당, 또는 약 4% 내지 약 11%의 당을 함유할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약제학적 제형은 약 0.5%; 약 1.0%; 약 1.5%; 약 2.0%; 약 2.5%; 약 3.0%; 약 3.5%; 약 4.0%; 약 4.5%; 약 5.0%; 약 5.5%; 약 6.0%; 약 6.5%; 약 7.0%; 약 7.5%; 약 8.0%; 약 8.5%; 약 9.0%; 약 9.5%; 약 10.0%; 약 15%; 또는 약 20%의 당(예를 들어, 수크로스)을 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제형은 약 5%의 당(예를 들어, 수크로스)을 함유한다. 일부 실시형태에서, 제형은 약 10%의 당(예를 들어, 수크로스)을 함유한다.

본 발명의 약제학적 제형은 또한 거친 취급 또는 교반, 예컨대 오비탈 진탕의 조건 하에서 항-CTLA-4 항체를 안정화시키는 유형과 양으로 하나 이상의 유기 공용매(또는 계면 안정화제)를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 유기 공용매는 계면활성제이다. 본원에서 사용된 "계면활성제"라는 용어는, 자신이 용해된 유체의 표면 장력을 감소시키고/거나 오일과 물 사이의 계면 장력을 감소시키는 물질을 의미한다. 계면활성제는 이온성 또는 비-이온성일 수 있다. 본 발명의 제형 내에 포함될 수 있는 예시적인 비-이온성 계면활성제는 예를 들어, 알킬 폴리(에틸렌 옥사이드), 알킬 폴리글루코시드(예를 들어, 옥틸 글루코시드 및 데실 말토사이드), 지방 알코올, 예컨대 세틸 알코올 및 올레일 알코올, 코카미드 MEA, 코카미드 DEA, 및 코카미드 TEA를 포함한다. 본 발명의 제형에 포함될 수 있는 특이적인 비-이온성 계면활성제는, 예를 들어, 폴리소르베이트, 예컨대 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 28, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 65, 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 81, 및 폴리소르베이트 85; 폴록사머, 예컨대 폴록사머 188(Pluronic F68로도 알려짐), 폴록사머 407; 폴리에틸렌-폴리프로필렌 글리콜; 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다. 폴리소르베이트 20은 또한 TWEEN 20, 소르비탄 모노라우레이트 및 폴리옥시에틸렌소르비탄 모노라우레이트로도 알려져 있다. 일부 실시형태에서, 계면활성제는 폴리소르베이트 20이다.

본 발명의 약제학적 제형 내에 함유된 계면활성제의 양은 제형에서 원하는 특정한 특성뿐만 아니라 제형이 사용되도록 의도된 특정 상황과 목적에 따라 달라질 수 있다. 특정 실시형태에서, 제형은 약 0.01% 내지 약 0.5%의 계면활성제; 약 0.05% 내지 약 0.3%의 계면활성제; 약 0.04% 내지 약 0.25%; 약 0.05% 내지 약 0.24%의 계면활성제; 약 0.06% 내지 약 0.23%의 계면활성제; 또는 약 0.07% 내지 약 0.22%의 계면활성제를 함유할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 제형은 약 0.05%; 약 0.06%; 약 0.07%; 약 0.08%; 약 0.09%; 약 0.10%; 약 0.11%; 약 0.12%; 약 0.13%; 약 0.14%; 약 0.15%; 약 0.16%; 약 0.17%; 약 0.18%; 약 0.19%; 약 0.20%; 약 0.21%; 약 0.22%; 약 0.23%; 약 0.24%; 약 0.25%; 약 0.26%; 약 0.27%; 약 0.28%; 약 0.29%; 또는 약 0.30%의 계면활성제(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 제형은 약 0.1%의 계면활성제(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 함유한다. 일부 실시형태에서, 제형은 약 0.2%의 계면활성제(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 함유한다. 상기 기재된 각각의 백분율은 중량/부피(w/v) 퍼센트에 해당한다.

본 발명의 약제학적 제형은 또한 안정적인 pH를 유지하고 항-CTLA-4 항체의 안정화를 돕는 역할을 하는 완충제 또는 완충제 시스템을 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 완충제 또는 완충제 시스템은 전체적으로 또는 부분적으로 pH 5.6 내지 6.4 범위와 중첩되는 완충 범위를 갖는 적어도 하나의 완충제를 포함한다. 특정 실시형태에서, 완충제는 히스티딘 완충제를 포함한다. 특정 실시형태에서, 완충제(예를 들어, 히스티딘)는 약 1 mM 내지 약 40 mM, 약 1 mM 내지 약 30 mM, 약 1 mM 내지 약 20 mM; 약 3 mM 내지 약 18 mM; 약 5 mM 내지 약 15 mM; 또는 약 8 mM 내지 약 12 mM, 약 10 mM 내지 약 20 mM, 약 15 mM 내지 약 25 mM, 또는 약 18 mM 내지 약 22 mM의 농도로 존재한다. 일부 실시형태에서, 완충제(예를 들어, 히스티딘)는 10 mM ± 1 mM, 10 mM ± 0.5 mM, 10 mM ± 0.1 mM, 20 mM ± 2 mM, 20 mM ± 1 mM, 또는 20 mM ± 0.5 mM의 농도로 존재한다. 일부 실시형태에서, 완충제는 약 5 mM; 약 6 mM; 약 7 mM; 약 8 mM; 약 9 mM; 약 10 mM; 약 11 mM; 약 12 mM; 약 13 mM; 약 14 mM; 약 15 mM; 약 16 mM; 약 17 mM; 약 18 mM; 약 19 mM; 약 20 mM; 약 21 mM; 약 22 mM; 약 23 mM; 약 24 mM; 또는 약 25 mM의 농도로 존재한다.

예시적인 제형

본 발명의 일 양태에 의하면, 약제학적 제형은 수용액에 (i) hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 인간 항체(예를 들어, mAb1); (ii) 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 1 mg/ml 내지 약 200 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 인간 항체(예를 들어, mAb1); (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 약 5% w/v 내지 약 15% w/v 농도의 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v 농도의 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 인간 항체(예를 들어, mAb1); (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 약 5% w/v 내지 약 15% w/v 농도의 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v 농도의 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 약 5% w/v 내지 약 15% w/v 농도의 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v 농도의 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 약 5% w/v 내지 약 15% w/v 농도의 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v 농도의 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 약 5% w/v 내지 약 15% w/v 농도의 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v 농도의 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM 농도의 완충제(예를 들어, 히스티딘); (iii) 약 5% w/v 내지 약 15% w/v 농도의 열 안정화제(예를 들어, 수크로스); 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v 농도의 유기 공용매(예를 들어, 폴리소르베이트 20)를 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 8 mM 내지 약 12 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 3% w/v 내지 약 7% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.08% w/v 내지 약 0.12% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 8 mM 내지 약 12 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 3% w/v 내지 약 7% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.08% w/v 내지 약 0.12% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 8 mM 내지 약 12 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 3% w/v 내지 약 7% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.08% w/v 내지 약 0.12% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 8 mM 내지 약 12 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 3% w/v 내지 약 7% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.08% w/v 내지 약 0.12% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 18 mM 내지 약 22 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 8% w/v 내지 약 12% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.18% w/v 내지 약 0.22% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 18 mM 내지 약 22 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 8% w/v 내지 약 12% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.18% w/v 내지 약 0.22% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 18 mM 내지 약 22 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 8% w/v 내지 약 12% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.18% w/v 내지 약 0.22% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 18 mM 내지 약 22 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 8% w/v 내지 약 12% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.18% w/v 내지 약 0.22% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% w/v ± 0.02% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG1의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 20 mM ± 2 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% w/v ± 0.02% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체(여기서 항체는 이소형 IgG4의 중쇄 불변 영역을 가짐); (ii) 약 20 mM ± 2 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% w/v ± 0.02% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM 농도의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v 농도의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% w/v ± 0.02% w/v 농도의 폴리소르베이트 20을 포함한다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 25 mg/ml 내지 약 100 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 50 50 mg/ml ± 5 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 100 mg/ml ± 10 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 50 mg/ml ± 5 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR 및 인간 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 100 mg/ml ± 10 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 HCVR, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 LCVR 및 인간 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는 인간 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.02% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 50 50 mg/ml ± 5 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

일부 경우에, 안정적인 약제학적 제형은 수용액에 (i) 약 100 mg/ml ± 10 mg/ml 농도의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하고 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 인간 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.02% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고, 제형은 6.0 ± 0.1의 pH를 갖는다.

본 발명에 포함된 약제학적 제형의 추가적인 비-제한적인 예는, 이하에 제시된 작용 실시예를 비롯하여 본원의 다른 곳에 기재되어 있다.

약제학적 제형의 안정성

본 발명의 약제학적 제형은 높은 수준의 안정성을 나타낸다. 본원에서 약제학적 제형에 대해 사용된 "안정적인"이라는 용어는, 약제학적 제형 내의 항체가 지정된 기간 동안 저장된 후 허용 가능한 정도의 구조 및/또는 기능 및/또는 생물학적 활성을 보유한다는 것을 의미한다. 제형은 이에 함유된 항체가 지정된 기간 동안 저장된 후 구조 및/또는 기능 및/또는 생물학적 활성이 100% 유지되지 않는 경우에도 안정적일 수 있다. 특정 환경 하에서, 한정된 양의 시간 동안 저장 후 항체의 구조 및/또는 기능 및/또는 생물학적 활성의 약 90%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99%의 유지는 "안정적인" 것으로 간주될 수 있다.

안정성은 특히 지정된 기간 동안 소정의 온도에서 저장된 후 제형에 남아있는 천연 항체의 백분율을 결정하여 측정할 수 있다. 천연 항체의 백분율은 특히 크기 배제 크로마토그래피(예를 들어, 크기 배제 고성능 액체 크로마토그래피[SE-HPLC])에 의해 결정할 수 있다. 본원에서 사용된 "허용 가능한 정도의 안정성"이라는 어구는, 지정된 기간 동안 소정의 온도에서 저장된 후 제형에서 적어도 90%의 천연 형태의 항체가 검출될 수 있다는 것을 의미한다. 특정 실시형태에서, 지정된 기간 동안 소정의 온도에서 저장된 후 제형에서 적어도 약 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 천연 형태의 항체가 검출될 수 있다. 안정성을 평가할 때의 지정된 기간은, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 30개월, 적어도 36개월, 또는 그 이상일 수 있다. 안정성을 평가할 때 약제학적 제형이 저장될 수 있는 온도는 약 -80℃ 내지 약 50℃의 임의의 온도일 수 있고, 예를 들어, 약 -80℃, 약 -30℃, 약 -20℃, 약 0℃, 약 4℃~8℃, 약 5℃, 약 25℃, 약 35℃, 약 37℃, 약 45℃, 또는 약 50℃에서의 저장일 수 있다. 예를 들어, 약제학적 제형은 5℃에서 3개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과 또는 97% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 5℃에서 6개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과 또는 97% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 5℃에서 9개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과, 96.5% 초과, 97% 초과, 97.5% 초과, 98% 초과, 98.5% 초과, 99% 초과 또는 99.5% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 5℃에서 24개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과, 96.5% 초과 또는 97% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 25℃에서 3개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과, 96.5% 초과, 97% 초과, 97.5% 초과, 98% 초과, 98.5% 초과, 99% 초과 또는 99.5% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 25℃에서 6개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과, 96.5% 초과, 97% 초과, 97.5% 초과, 98% 초과, 98.5% 초과, 99% 초과 또는 99.5% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 25℃에서 9개월의 저장 후, SE-HPLC에 의해 약 90% 초과, 95% 초과, 96% 초과, 96.5% 초과, 97% 초과, 97.5% 초과, 98% 초과, 98.5% 초과, 99% 초과 또는 99.5% 초과의 천연 항체가 검출된 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 "안정적인" 약제학적 조성물 또는 약제학적 제형은 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후 크기 배제 초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)에 의해 측정 시, 적어도 95%, 적어도 96%,또는 적어도 97%의 천연 형태의 항체를 포함한다.

다른 방법을 사용하여 본 발명의 제형의 안정성을 평가할 수도 있는데, 예를 들어, 열 안정성을 평가하는 데 차등 주사 열량측정법(DSC)을 사용하고, 기계적인 안정성을 결정하는 데 제어된 교반을 사용하고, 용액 탁도를 결정하는 데 약 350 nm 또는 약 405 nm에서의 흡광도를 사용한다. 예를 들어, 본 발명의 제형은 약 5℃ 내지 약 25℃에서 6개월 이상의 저장 후, 제형의 OD₄₀₅ 변화가 t=0에서의 제형의 OD₄₀₅보다 약 0.05(예를 들어, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01, 또는 그 이하) 더 적은 경우 안정적인 것으로 간주될 수 있다.

표적에 대한 항체의 결합 친화성의 측정은 또한 안정성의 평가에도 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 제형은 예를 들어 -80℃, -30℃, -20℃, 5℃, 25℃, 37℃ 및 45℃ 등에서 지정된 기간(예를 들어, 14일 내지 9개월) 동안 저장 후, 제형 내에 함유된 항-CTLA-4 항체가 상기 저장 전 항체의 결합 친화도의 적어도 80%, 85%, 90%, 95% 또는 그 초과인 친화도로 hCTLA-4에 결합하는 경우에 안정적인 것으로 간주될 수 있다. 결합 친화성은 임의의 방법, 예컨대 예를 들어, ELISA 또는 플라스몬 공명에 의해 결정될 수 있다. 생물학적 활성은 CTLA-4 활성 검정에 의해, 예컨대 CTLA-4를 발현하는 세포를 항-CTLA-4 항체를 포함하는 제형과 접촉시킴으로써 결정될 수 있다. 이러한 세포에 대한 항체의 결합은 예컨대 FACS 분석을 통해 직접 측정될 수 있다. 대안적으로, CTLA-4 시스템의 하류 활성은 항체의 존재하에 측정될 수 있고, 항체의 부재 하에 CTLA-4 시스템의 활성과 비교될 수 있다.

안정성은 특히 지정된 기간 동안 지정된 온도에서 저장 후 제형 내에서 응집체를 형성하는 항체의 백분율을 결정하여 측정될 수 있는데, 여기서 안정성은 형성된 응집체의 퍼센트에 반비례한다. 응집된 항체의 백분율은 그 중에서도 크기 배제 크로마토그래피(예를 들어, 크기 배제 고성능 액체 크로마토그래피 [SE-HPLC] 또는 크기 배제 초고성능 액체 크로마토그래피 [SE-UPLC])에 의해 결정될 수 있다. 본원에서 사용된 "허용 가능한 정도의 안정성"이라는 어구는, 제형에서 항체의 최대 6%가 지정된 기간 동안 소정의 온도에서 저장 후 응집된 형태로 검출된다는 것을 의미한다. 특정 실시형태에서, 허용 가능한 정도의 안정성이란, 제형에서 항체의 최대 약 6%, 5.5%, 5%, 4.5%, 4%, 3.5%, 3%, 2.5%, 2%, 1.5%, 1%, 0.5%, 또는 0.1%가 지정된 기간 동안 소정의 온도에서 저장 후 응집체로 검출될 수 있다는 것을 의미한다. 안정성을 측정하는 지정된 기간은 적어도 2주, 적어도 28일, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 30개월, 적어도 36개월, 또는 그 이상일 수 있다. 안정성을 평가할 때 약제학적 제형이 저장될 수 있는 온도는 약 -80℃ 내지 약 50℃의 임의의 온도일 수 있고, 예를 들어, 약 -80℃, 약 -30℃, 약 -20℃, 약 0℃, 약 4℃~8℃, 약 5℃, 약 25℃, 약 35℃, 약 37℃, 약 45℃, 또는 약 50℃에서의 저장일 수 있다. 예를 들어, 약제학적 제형은 5℃에서 9개월의 저장 후, 약 2% 미만, 1.75% 미만, 1.5% 미만, 1.25% 미만, 1% 미만, 0.75% 미만, 0.5% 미만, 0.25% 미만, 또는 0.1% 미만의 항체가 응집된 형태로 검출되는 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 25℃에서 6개월의 저장 후, 약 2.5% 미만, 2% 미만, 1.75% 미만, 1.5% 미만, 1.25% 미만, 1% 미만, 0.75% 미만, 0.5% 미만, 0.25% 미만, 또는 0.1% 미만의 항체가 응집된 형태로 검출되는 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 45℃에서 28일의 저장 후, 약 4% 미만, 3.5% 미만, 3% 미만, 2.5% 미만, 2% 미만, 1.5% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만, 또는 0.1% 미만의 항체가 응집된 형태로 검출되는 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 -20℃, -30℃, 또는 -80℃에서 3개월의 저장 후, 2% 미만, 1.9% 미만, 1.8% 미만, 1.7% 미만, 1.6% 미만, 1.5% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만, 또는 0.1% 미만의 항체가 응집된 형태로 검출되는 경우 안정적이라고 간주될 수 있다.

안정성은 특히 이온 교환 동안 항체의 주요 분획("주요 전하 형태")보다 더욱 산성인 분획("산성 형태")에서 이동하는 항체의 백분율을 결정하여 측정될 수 있는데, 여기에서 안정성은 산성 형태의 항체의 분획에 반비례한다. 이론에 얽매이지 않기를 바라며, 항체는 탈아미드화에 의해 더욱 음전하를 갖게 되어, 비-탈아미드화 항체에 비해 더욱 산성도가 높아진다(예를 들어, 문헌[Robinson, N., Protein Deamidation, PNAS, April 16, 2002, 99(8):5283-5288] 참고). "산성화" 항체의 백분율은 이온 교환 크로마토그래피(예를 들어, 양이온 교환 고성능 액체 크로마토그래피[CEX-HPLC] 또는 양이온 교환 초고성능 액체 크로마토그래피[CEX-UPLC])에 의해 결정할 수 있다. 본원에서 사용된 "허용 가능한 정도의 안정성"이라는 어구는, 제형에서 항체의 최대 60%가 지정된 기간 동안 지정된 온도에서 저장 후 더욱 산성인 형태로 검출된다는 것을 의미한다. 특정 실시형태에서, 허용 가능한 정도의 안정성이란, 제형에서 항체의 최대 약 55%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 또는 0.1%가 지정된 기간 동안 소정의 온도에서 저장 후 산성인 형태로 검출될 수 있다는 것을 의미한다. 안정성을 측정하는 지정된 기간은 적어도 2주, 적어도 28일, 적어도 1개월, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월, 적어도 18개월, 적어도 24개월, 적어도 30개월, 적어도 36개월, 또는 그 이상일 수 있다. 안정성을 평가할 때 약제학적 제형이 저장될 수 있는 온도는 약 -80℃ 내지 약 50℃의 임의의 온도일 수 있고, 예를 들어, 약 -80℃, 약 -30℃, 약 -20℃, 약 0℃, 약 4℃~8℃, 약 5℃, 약 25℃, 약 45℃, 또는 약 50℃에서의 저장일 수 있다. 예를 들어, 약제학적 제형은 -80℃, -30℃, 또는 -20℃에서 3개월의 저장 후, 약 29% 미만, 28% 미만, 27% 미만, 26% 미만, 25% 미만, 24% 미만, 23% 미만, 22% 미만, 21% 미만, 20% 미만, 19% 미만, 18% 미만, 17% 미만, 16% 미만, 15% 미만, 14% 미만, 13% 미만, 12% 미만, 10% 미만, 9% 미만, 8% 미만, 7% 미만, 6% 미만, 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만 또는 0.1% 미만의 항체가 더욱 산성인 형태인 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 5℃에서 9개월의 저장 후, 약 50% 미만, 45% 미만, 40% 미만, 35% 미만, 30% 미만, 25% 미만, 24% 미만, 23% 미만, 22% 미만, 21% 미만, 20% 미만, 19% 미만, 18% 미만, 17% 미만, 16% 미만, 15% 미만, 14% 미만, 13% 미만, 12% 미만, 10% 미만, 9% 미만, 8% 미만, 7% 미만, 6% 미만, 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만 또는 0.1% 미만의 항체가 더욱 산성인 형태인 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 25℃에서 28일의 저장 후, 약 30% 미만, 29% 미만, 28% 미만, 27% 미만, 26% 미만, 25% 미만, 24% 미만, 23% 미만, 22% 미만, 21% 미만, 20% 미만, 19% 미만, 18% 미만, 17% 미만, 16% 미만, 15% 미만, 14% 미만, 13% 미만, 12% 미만, 10% 미만, 9% 미만, 8% 미만, 7% 미만, 6% 미만, 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만 또는 0.1% 미만의 항체가 더욱 산성인 형태인 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 37℃에서 28일의 저장 후, 약 37% 미만, 36% 미만, 35% 미만, 34% 미만, 33% 미만, 32% 미만, 31% 미만, 30% 미만, 29% 미만, 28% 미만, 27% 미만, 26% 미만, 25% 미만, 24% 미만, 23% 미만, 22% 미만, 21% 미만, 20% 미만, 19% 미만, 18% 미만, 17% 미만, 16% 미만, 15% 미만, 14% 미만, 13% 미만, 12% 미만, 10% 미만, 9% 미만, 8% 미만, 7% 미만, 6% 미만, 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만 또는 0.1% 미만의 항체가 더욱 산성인 형태인 경우 안정적이라고 간주될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 50℃에서 1개월의 저장 후, 약 50% 미만, 49% 미만, 48% 미만, 47% 미만, 46% 미만, 45% 미만, 44% 미만, 43% 미만, 42% 미만, 41% 미만, 40% 미만, 39% 미만, 38% 미만, 37% 미만, 36% 미만, 35% 미만, 34% 미만, 33% 미만, 32% 미만, 31% 미만, 30% 미만, 29% 미만, 28% 미만, 27% 미만, 26% 미만, 25% 미만, 24% 미만, 23% 미만, 22% 미만, 21% 미만, 20% 미만, 19% 미만, 18% 미만, 17% 미만, 16% 미만, 15% 미만, 14% 미만, 13% 미만, 12% 미만, 10% 미만, 9% 미만, 8% 미만, 7% 미만, 6% 미만, 5% 미만, 4% 미만, 3% 미만, 2% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만 또는 0.1% 미만의 항체가 더욱 산성인 형태로 검출될 수 있는 경우 안정적이라고 간주될 수 있다.

"안정적인" 제형(액체 제형, 동결건조된 제형, 또는 재구성된 제형을 포함함)은 그 안의 단백질이 일정 기간 동안 저장 시 본질적으로 그의 물리적 안정성 및/또는 화학적 안정성 및/또는 생물학적 활성을 보유하는 것이다. "안정적인" 동결건조된 제형은 냉장 온도(예를 들어, 2~8℃)에서 유의한 변화가 관찰되지 않은 동결건조된 제형이다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 "안정적인" 약제학적 조성물 또는 약제학적 제형은 5℃에서 1, 3, 6, 9, 12, 18 또는 24개월의 저장 후 크기 배제 초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)에 의해 측정 시, 2% 이하, 1.9% 이하, 1.8% 이하, 1.7% 이하, 1.6% 이하 또는 1.5% 이하의 HMW 종을 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 "안정적인" 약제학적 조성물 또는 약제학적 제형은 45℃에서 1개월의 저장 후 SE-UPLC에 의해 측정 시, 2% 이하, 1.9% 이하, 1.8% 이하의 HMW 종을 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 "안정적인" 약제학적 조성물 또는 약제학적 제형은 50℃에서 1개월의 저장 후 SE-UPLC에 의해 측정 시, 3% 이하의 HMW 종을 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 "안정적인" 약제학적 조성물 또는 약제학적 제형은 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 1, 3 또는 6개월의 저장 후 SE-UPLC에 의해 측정 시, 2.5% 이하, 2.4% 이하, 2.3% 이하, 2.2% 이하, 2.1% 이하, 2% 이하, 1.9% 이하, 1.8% 이하, 1.7% 이하, 1.6% 이하, 1.5% 이하 또는 1.4% 이하의 HMW 종을 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 "안정적인" 약제학적 조성물 또는 약제학적 제형은 주위 온도(예를 들어, 25℃)에서 30 또는 60분의 교반 후 SE-UPLC에 의해 측정 시, 2% 이하, 1.9% 이하, 1.8% 이하, 1.7% 이하, 1.6% 이하 또는 1.5% 이하의 HMW 종을 포함한다.

특정 기간 "후"의 약제학적 제형의 안정성에 대한 언급은, 안정성 파라미터(예를 들어, 천연 형태(%), HMW 종(%), 또는 산성 형태(%))의 측정이 특정 기간의 종결 시 또는 대략적인 종결 시에 실시된다는 것을 의미하는 것으로 의도되며, 약제학적 제형이 그 후에 측정된 파라미터에 대해 반드시 동일한 정도로 안정성을 유지한다는 것을 의미하고자 하는 것은 아니다. 예를 들어, 9개월 후의 특별한 안정성에 대한 언급은 안정성의 측정이 연구 시작 이후 9개월 또는 약 9개월 시점에서 실시되었다는 것을 의미한다. 제형 내의 항체의 안정성을 평가하는 추가적인 방법은 이하에 제시된 실시예에 설명되어 있다.

하기 실시예에 예시된 바와 같이, 본 발명은, 부분적으로, 청구된 부형제와 항-CTLA-4 항체의 조합이 안정하고/하거나 허용 가능한 재구성 시간(예를 들어 10분 미만, 5분 미만, 4분 미만, 3분 미만 등)을 갖는 제형을 생성한다는 발견에 기초한다.

용기 및 투여 방법

본 발명의 약제학적 제형은 약과 다른 치료 조성물의 저장에 적합한 임의의 용기 내에 함유될 수 있다. 예를 들어, 약제학적 제형은 지정된 부피를 갖는 밀봉 및 멸균된 플라스틱 또는 유리 용기, 예컨대 바이알, 앰플, 시린지, 카트리지, 보틀 또는 IV 주머니 내에 함유될 수 있다. 예를 들어, 투명 및 불투명(예를 들어, 갈색) 유리 또는 플라스틱 바이알을 포함한 상이한 유형의 바이알을 사용하여, 본 발명의 제형을 함유할 수 있다. 마찬가지로, 임의의 유형의 시린지를 사용하여, 본 발명의 약제학적 제형을 함유하고/거나 투여할 수 있다. 일부 실시형태에서, 약제학적 제형은 유리 바이알에 함유된다. 일부 실시형태에서, 약제학적 제형은 사전충전된 시린지에 함유된다. 일부 실시형태에서, 약제학적 제형은 스테이크형(staked) 바늘 시린지에 함유된다.

본 발명의 약제학적 제형은 "정상적인 텅스텐"의 시린지 또는 "저 텅스텐"의 시린지에 함유될 수 있다. 당업계의 통상의 숙련자가 알고 있듯이, 유리 시린지의 제조 공정은 일반적으로 뜨거운 텅스텐 막대의 사용과 관련되는데, 이는 유리를 관통하여 시린지로부터 액체를 끌어당기고 빼낼 수 있는 구멍을 형성하는 기능을 한다. 이 공정은 시린지의 내부 표면에 미량의 텅스텐을 침착시킨다. 이후 세척 및 다른 공정 단계를 사용하여 시린지 내의 텅스텐의 양을 감소시킬 수 있다. 본원에서 사용된 "정상적인 텅스텐"이라는 용어는 시린지가 500 ppb(십억분율) 초과의 텅스텐을 함유한다는 것을 의미한다. "저 텅스텐"이라는 용어는, 시린지가 500 ppb 미만의 텅스텐을 함유한다는 것을 의미한다. 예를 들어, 본 발명에 의한 저 텅스텐 시린지는, 약 490 ppb 미만, 480 ppb 미만, 470 ppb 미만, 460 ppb 미만, 450 ppb 미만, 440 ppb 미만, 430 ppb 미만, 420 ppb 미만, 410 ppb 미만, 390 ppb 미만, 350 ppb 미만, 300 ppb 미만, 250 ppb 미만, 200 ppb 미만, 150 ppb 미만, 100 ppb 미만, 90 ppb 미만, 80 ppb 미만, 70 ppb 미만, 60 ppb 미만, 50 ppb 미만, 40 ppb 미만, 30 ppb 미만, 20 ppb 미만, 10 ppb 또는 그 이하의 텅스텐을 함유할 수 있다.

시린지에 사용된 고무 플런저와 바이알의 입구를 닫는 데 사용된 고무 스토퍼는 코팅되어, 시린지 또는 바이알의 약제 내용물의 오염을 방지하고/거나 이의 안정성을 보존할 수 있다. 따라서, 특정 실시형태에 의하면 본 발명의 약제학적 제형은 코팅된 플런저를 포함하는 시린지, 또는 코팅된 고무 마개로 밀봉된 바이알 내에 함유될 수 있다. 예를 들어, 플런저 또는 마개는 플루오로카본 필름으로 코팅될 수 있다. 본 발명의 약제학적 제형을 함유한 바이알과 시린지에 사용하기 적합한 코팅된 스토퍼 및/또는 플런저의 예는 예를 들어, 미국 특허 제4,997,423호; 미국 특허 제5,908,686호; 미국 특허 제6,286,699호; 미국 특허 제6,645,635호; 및 미국 특허 제7,226,554호에 언급되어 있으며, 이의 전체 내용이 본원에 참조로 포함된다. 본 발명의 맥락에서 사용될 수 있는 특정 예시적인 코팅된 고무 스토퍼 및 플런저는, West Pharmaceutical Services, Inc.(미국 펜실베이니아주 리온빌 소재)에서 "FluroTec®"이라는 상표명 하에 시판되고 있다. 본 발명의 특정 실시형태에 의하면, 약제학적 제형은 플루오로카본-코팅된 플런저를 포함하는 저 텅스텐 시린지 내에 함유될 수 있다. 일부 실시형태에서, 용기는 시린지, 예컨대 Ompi EZ-Fill^TM 시린지 또는 BD Neopak^TM 시린지이다. 일부 경우에, 시린지는 1 mL iWest 피스톤, 27G 얇은 벽 바늘 및 FM30 바늘 쉴드 또는 BD260 바들 쉴드를 갖는 1 mL의 긴 유리 시린지이다. 일부 경우에, 시린지는 West NovaPure^TM 1~3 mL 피스톤, 27G 얇은 벽 바늘 및 FM30 바늘 쉴드 또는 BD260 바늘 쉴드를 갖는 2.25 mL의 유리 시린지이다. 다양한 실시형태에서, 시린지는 0.5 mL, 0.6 mL, 0.7 mL, 0.8 mL, 0.9 mL, 1.0 mL, 1.1 mL, 1.2 mL, 1.3 mL, 1.4 mL, 1.5 mL, 1.6 mL, 1.7 mL, 1.8 mL, 1.9 mL, 2.0 mL, 2.1 mL, 2.2 mL, 2.3 mL, 2.4 mL, 2.5 mL, 2.6 mL, 2.7 mL, 2.8 mL, 2.9 mL, 3.0 mL, 3.5 mL, 4.0 mL, 4.5 mL, 5.0 mL, 5.5 mL, 6.0 mL, 6.5 mL, 7.0 mL, 7.5 mL, 8.0 mL, 8.5 mL, 9.0 mL, 9.5 mL, 또는 10 mL의 시린지(예를 들어, 유리 시린지)이다.

약제학적 제형은 예컨대 주사(예를 들어, 피하, 정맥 내, 근육 내, 복강 내 등)를 포함한 비경구 경로, 또는 경피, 점막, 비강, 폐 및/또는 경구 투여에 의해 환자에게 투여될 수 있다. 다수의 재사용 펜 및/또는 자기주사기 전달 장치를 사용하여, 본 발명의 약제학적 제형을 피하 전달할 수 있다. 몇 가지 예로서, AUTOPEN™(Owen Mumford, Inc., 영국 우드스톡 소재), DISETRONIC™ 펜(Disetronic Medical Systems, 스위스 버그도프 소재), HUMALOG MIX 75/25™ 펜, HUMALOG™ 펜, HUMALIN 70/30™ 펜(Eli Lilly and Co., 미국 인디애나주 인디애나폴리스 소재), NOVOPEN™ I, II 및 III(Novo Nordisk, 덴마크 코펜하겐 소재), NOVOPEN JUNIOR™(Novo Nordisk, 덴마크 코펜하겐 소재), BD™ 펜(Becton Dickinson, 미국 뉴저지주 프랭클린 레이크스 소재), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™, 및 OPTICLIK™(sanofi-aventis, 독일 프랑크푸르트 소재)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 약제학적 조성물의 피하 전달에 응용하기 위한 1회용 펜 및/또는 자기주사기 전달 장치의 몇 가지 예로서, SOLOSTAR™ 펜(sanofi-aventis), FLEXPEN™(Novo Nordisk), 및 KWIKPEN™(Eli Lilly), SURECLICK^TM 자기주사기(Amgen, 캐나다 사우전드 오크스 소재), PENLET^TM(Haselmeier, 독일 슈투트가르트 소재), EPIPEN(Dey, L.P.), 및 HUMIRA^TM 펜(Abbott Labs, 미국 일리노이주 애봇 파크 소재)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 일부 경우에, 약제학적 제형은 특히 자기주사기에 사용하도록 구성된 시린지에 함유된다. 피하 주사는 20~30 게이지 바늘 또는 25~30 게이지 바늘을 사용하여 투여될 수 있다. 일부 경우에, 피하 주사는 25 게이지 바늘을 사용하여 투여될 수 있다. 일부 경우에, 피하 주사는 27 게이지 바늘을 사용하여 투여될 수 있다. 일부 경우에, 피하 주사는 29 게이지 바늘을 사용하여 투여될 수 있다.

다른 유형의 전달 장치는 안전성 시스템을 포함할 수 있다. 이러한 장치는 비교적 저렴할 수 있고, 일단 주입이 완료되면 바늘 위로 안전성 슬리브를 수동으로 또는 자동으로 연장하도록 작동할 수 있다. 안전성 시스템의 예는 West Pharmaceutical에 의한 ERIS 장치, 또는 Becton Dickinson에 의한 UltraSafe 장치를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 약제학적 제형을 전달하기 위한 대용량 장치("LVD") 또는 볼루스 주사기의 사용이 또한 본원에서 고려된다. 일부 경우에, LVD 또는 볼루스 주사기는 환자에게 의약을 주사하도록 구성될 수 있다. 예를 들어, LVD 또는 볼루스 주사기는 "큰" 부피의 의약(전형적으로 약 2 ml 내지 약 10 ml)을 전달하도록 구성될 수 있다.

본 발명의 약제학적 제형은 또한 단위 투여 형태에 함유될 수 있다. 본원에서 사용된 "단위 투여 형태"라는 용어는 치료될 환자에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적 개별 단위를 말하며, 각 단위는 원하는 치료 효과를 내도록 계산된 사전 결정된 양의 활성 화합물, 및 필요한 약제학적 담체, 희석제, 또는 부형제를 함께 함유한다. 다양한 실시형태에서, 단위 투여 형태는 본원에서 논의된 용기에 함유된다. 본 발명의 제형 중 활성 성분(예를 들어, 항-CTLA-4 항체)의 실제 투여량 수준은 환자에 대한 역효과 없이 특정 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 원하는 치료 반응을 달성하기에 효과적인 활성 성분의 양을 얻도록 변화될 수 있다. 선택된 투여량의 정도는 이용된 본 발명의 특정 조성물의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 이용 중인 특정 화합물의 배출 속도, 치료 지속 기간, 이용된 특정 조성물과 함께 사용된 다른 약물, 화합물 및/또는 물질, 치료 중인 환자의 연령, 성별, 체중, 컨디션, 전반적인 건강 상태 및 이전의 의료 이력을 포함한 다양한 약동학적 요인들과 의학 분야에서 잘 알려진 유사 요인들에 따라 달라질 것이다. 본원에서 사용된 "희석제"라는 용어는, 예시적이거나 적절한 농도 또는 본원에 기재된 농도를 변화시키거나 얻어내는 데 적합한 용액을 말한다.

다양한 실시형태에서, 단위 투여 형태는 1회용으로 의도된 활성 성분(예를 들어, 항-CTLA-4 항체)의 양을 함유한다. 다양한 실시형태에서, 단위 투여 형태 중 활성 성분의 양은 약 0.1 mg 내지 약 5000 mg, 약 10 mg 내지 약 1000 mg, 및 약 10 mg 내지 약 500 mg, 약 10 mg 내지 약 400 mg, 약 10 mg 내지 약 200 mg, 약 50 mg 내지 약 150 mg, 약 250 mg 내지 약 350 mg, 약 125 mg 내지 약 175 mg, 또는 약 275 mg 내지 약 325 mg, 또는 이들의 범위 또는 간격이다. 나열된 양들 사이의 범위, 예를 들어, 약 135 mg 내지 약 165 mg 또는 285 mg 내지 315 mg도 본 발명의 일부인 것으로 의도된다. 예를 들어, 상한 및/또는 하한으로서 상기 나열된 임의의 값들(또는 상기 나열된 범위 내에 포함된 값들)의 조합을 사용하는 값들의 범위가 포함되는 것으로 의도된다. 특정 실시형태에서, 제형은 종종 단위 투여 형태 내 액체로서 공급된다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 단위 투여 형태는 환자에게 피하 투여에 적합하다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 단위 투여 형태는 환자에게 정맥 내 투여에 적합하다.

본 발명은 또한 단위 투여 형태의 제조 방법을 포함한다. 예시적인 실시형태에서, 약제학적 단위 투여 형태의 제조 방법은 적합한 용기(예를 들어, 본원에서 논의된 용기) 내에서 임의의 전술한 실시형태의 제형을 조합하는 단계를 포함한다.

약제학적 제형의 치료 용도

본 발명의 약제학적 제형들은 특히 CTLA-4 활성과 연관된 임의의 질환 또는 장애의 치료, 예방 및/또는 개선에 유용하다. 특히, 본 발명의 약제학적 제형은 특히 CTLA-4 발현, 신호전달, 또는 활성과 관련되거나 이에 의해 매개되는 임의의 질환 또는 장애의 치료, 예방 및/또는 개선에 유용하거나, 또는 CTLA-4와 CTLA-4 리간드(예를 들어, ST2) 사이의 상호작용을 차단하거나 또는 다른 방식으로 CTLA-4 활성 및/ 또는 신호전달을 억제함으로써 치료 가능하다.

본 발명의 치료 방법은 본원에 개시된 항-hCTLA-4 항체를 포함하는 임의의 제형을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 약제학적 제형이 투여되는 대상체는, 예를 들어, 이러한 치료, 예방 및/또는 개선을 필요로 하거나, 또는 달리 CTLA-4 또는 CTLA-4-매개 활성의 억제 또는 약화로부터 이익을 얻을 임의의 인간 또는 비-인간 동물일 수 있다. 예를 들어, 대상체는 상기 언급된 임의의 질환 또는 장애가 있다고 진단받거나, 이에 걸릴 위험이 있다고 간주된 개체일 수 있다. 본 발명은 상기 언급된 예시적인 질환, 장애 및 병태 중 임의의 것을 포함하는, CTLA-4 활성과 연관된 임의의 질환 또는 장애의 치료, 예방 및/또는 개선을 위한 약제의 제조에서 본원에 개시된 임의의 약제학적 제형의 용도를 추가로 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명은 본원에서 논의된 약제학적 제형(예를 들어, 제형 또는 단위 투여 형태를 갖는 용기)와, 위에서 논의된 질환 또는 장애의 치료를 위한 약제학적 제형 사용의 설명이 포함된 포장 또는 라벨링(예를 들어, 패키지 삽입물)을 포함하는 키트를 제공한다. 일부 경우에, 설명은 본원에서 논의된 바와 같은, 질환 또는 장애의 치료를 위한 단위 투여 형태의 사용에 대해 제공된다.

예시적인 서열

본원에서 논의되고 첨부된 서열 목록에 제시된 서열은 mAb1, IgG1 중쇄 불변 영역을 갖는 완전 인간 항체에 상응하고, 이는 하기 실시예 전반에 걸쳐 사용된다. 서열의 정체는 이하에 제시되어 있다. 이 항체는 REGN4659로도 공지되어 있다.

서열 표(서열번호)

실시예

이하의 실시예는 당업계의 통상의 숙련자에게 본 발명의 방법과 조성물을 어떻게 제조하고 사용하는지에 대한 전체 개시내용과 상세 사항을 제공하기 위한 것으로, 본 발명자들이 본 발명으로서 간주한 범주를 제한하기 위한 것은 아니다. 사용된 수치(예를 들어, 양, 온도 등)에 대해 정확성을 보장하기 위해 노력했지만, 일부 실험 오류와 편차도 있다고 해야 할 것이다. 달리 지시되지 않은 경우, 부는 중량부이고, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기압 또는 그 유사 압력이다.

실시예 1: 항-CTLA-4 항체의 안정성에 대한 완충제 및 pH의 효과

mAb1 액체 제형의 열 안정성에 대한 완충제 및 pH의 효과는 25 mg/mL의 mAb1을 45℃에서 28일 동안 pH 범위가 변하는 일련의 완충제 시스템에서 인큐베이션함으로써 조사하였다. 하기 pH 및 완충제 시스템을 연구하였다: 10 mM 아세트산염(pH 4.5 내지 5.5), 10 mM 히스티딘(pH 5.5 내지 6.5) 및 10 mM 인산염(pH 6.0 내지 7.0). SE-UPLC 및 CEX-UPLC 분석으로부터의 결과에 기초하여, 최대 단백질 안정성은 mAb1이 히스티딘 완충제 중에서 pH 5.5 내지 pH 6.5로 제형화되었을 때 관찰되었다. 이러한 분석에서는 또한 저분자량 종(LMW), 고분자량(HMW) 종 및 전하 변이체의 형성이 주요 분해 경로인 것으로 나타났다. pH 6.0의 10 mM 히스티딘 완충제는 최선의 전체 수준의 안정화를 제공하기 때문에 의약 완제품(DP)에 대한 제형 완충제로서 선택되었다. 결과를 표 1에 나타낸다.

[표 1]

실시예 2: 항-CTLA-4 항체의 안정성에 대한 열 안정화제의 효과

냉동 및 해동 스트레스에 대해 단백질을 안정화하고 액체 및 동결건조된 제형에서 단백질의 열 안정성을 증가시키기 위해 수크로스와 같은 안정화제가 항체 제형에 첨가될 수 있다. mAb1 액체 제형의 냉동/해동 안정성에 대한 수크로스의 효과를 10% 수크로스와 함께 및 10% 수크로스 없이 25 mg/mL mAb1을 8회의 냉동/해동 주기에 노출시켜 조사하였다. 표 2에 제시된 바와 같이, HMW 종의 1.0%의 증가가 수크로스가 없는 제형에 대해 SE-UPLC에 의해 관찰되었지만, 수크로스를 함유하는 제형에 대해 SE-UPLC에 의해 HMW의 상당한 증가는 관찰되지 않았다. mAb1 액체 제형의 열 안정성에 대한 수크로스의 효과를 10% 수크로스와 함께 및 10% 수크로스 없이 제형화된 25 mg/mL mAb1을 45℃에서 28일 동안 인큐베이션함으로써 조사하였다. 표 3에 제시된 바와 같이, 수크로스의 존재와 관계없이 SE-UPLC에 의해 HMW의 상당한 증가가 관찰되지 않았다.

[표 2]

[표 3]

5% 수크로스를 제형화된 약물 물질(FDS)에서 동결보호제로서 선택하였는데, 이는 동결건조된 DP에서 충분한 mAb1 안정성을 제공하는 것으로 밝혀졌기 때문이다(하기 표 4 참조). 리드 제형에서, FDS(동결건조 전)와 재구성된 DP(동결건조 후) 사이에는 차이가 관찰되지 않았다. 나아가, 100 mg/mL mAb1(10% 수크로스를 함유함)로 재구성된 DP는 거의 등장성의 제형을 산출하였다.

[표 4]

실시예 3: 항-CTLA-4 항체의 안정성에 대한 계면활성제의 효과

안정화제, 예컨대 계면활성제는 단백질을 표면 유도성 분해로부터 보호하기 위해 항체 제형에 첨가될 수 있다. 25 mg/mL mAb1의 열 안정성에 대한 계면활성제의 효과를 액체 제형에서 조사하였다. 이하의 계면활성제: 0.1%의 폴리소르베이트 20 및 0.1%의 폴리소르베이트 80을 평가하였다. 열 안정성 연구의 결과는 표 5에 요약되어 있다. 45℃에서 인큐베이션하는 경우, 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80의 첨가는 임의의 계면활성제가 없는 대조군 제형에 비해 mAb1의 열 안정성에 부정적인 영향을 미쳤다. 탁도, LMW 종, HMW 종 및 전하 변이체의 증가가 관찰되었다. 0.1% 폴리소르베이트 20을 함유하는 제형은 계면활성제를 함유하는 다른 제형과 비교하여 최소량의 응집체 및 전하 변이체 종을 형성하였다.

폴리소르베이트 20을 포함하고 및 포함하지 않고, 120분 동안, 50 mg/mL mAb1을 와동시켜 mAb1의 교반 안정성에 대한 폴리소르베이트 20의 효과를 조사하였다. 표 6에 제시된 바와 같이, HMW 종의 2.5%의 증가가 폴리소르베이트 20이 없는 제형에 대해 SE-UPLC에 의해 관찰되었지만, 폴리소르베이트 20을 함유하는 제형에 대해 SE-UPLC에 의해 HMW의 상당한 증가는 관찰되지 않았다.

[표 5]

[표 6]

실시예 4: 항-CTLA-4 항체 의약 완제품의 액체, 동결건조 및 재구성된 제형의 안정성

mAb1 의약 완제품의 액체, 동결건조 및 재구성된 제형의 저장, 가속 안정성 및 스트레스 안정성(교반)을 평가하기 위한 연구를 수행하였다. 저장 및 안정성 연구에 사용된 동결건조된 DP는 실시예 5에서 논의된 동결건조 주기에 따라 20 mL 타입 1 유리 바이알에서 5.3 mL의 FDS를 동결건조시킴으로써 제조되었다. 재구성된 제형은 (정맥 내 또는 피하 투여를 위해) 동결건조된 DP(20 mL 타입 1 유리 바이알에서 5.3 mL FDS)를 4.9 mL의 주사용수(WFI)를 사용하여 50 mg/mL mAb1로, 그리고 2.3 mL의 WFI를 사용하여 100 mg/mL mAb1로 재구성함으로써 제조하였다.

mAb1 DP 제형의 안정성을 다음의 분석을 사용하여 평가하였다:

동결건조된 DP 샘플의 경우

o 동결건조된 DP의 육안 검사에 의한 케이크 외관

o Vapor Pro^® 수분 분석기에 의한 동결건조된 DP의 수분 함량

o 동결건조된 DP의 재구성 시간

재구성된 DP 샘플을 포함하는 액체 샘플의 경우

o 육안 검사에 의한 색상 및 외관

o pH

o 405 nm에서의 광학 밀도(OD)의 증가에 의해 측정된 탁도

o 마이크로-유동 이미징(MFI)에 의한 불용성 미립자 분석

o 역상 초고성능 액체 크로마토그래피(RP-UPLC)로 회수된 단백질

o 다음의 분석에 의한 순도:

환원 및 비-환원 마이크로칩 모세관 전기영동(MCE);

크기 배제 초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)

o 다음의 분석에 의한 전하 변이체 분석:

양이온 교환(CEX) UPLC

이미지화된 모세관 등전점 전기영동(iCIEF)

o 상대 효능(%):

각각의 샘플의 상대 효능은 생물분석을 사용하여 결정되고 (IC₅₀ 기준 샘플/IC₅₀ 샘플) × 100%로 정의된다. 저장 안정성 샘플의 측정된 효능은 기준 표준의 측정된 효능의 50 내지 150% 이내여야 한다.

저장 및 안정성 연구로부터의 결과는 하기 표 7 내지 13에 제시되어 있다.

[표 7]

[표 8]

[표 9]

[표 10]

[표 11]

[표 12]

[표 13]

DP 저장 및 안정성 연구로부터의 결과는 mAb1이 25 mg/ml 내지 100 mg/ml의 농도로 10 mM 내지 20 mM 히스티딘(pH 6), 5% w/v 내지 10% w/v 수크로스, 및 0.1% w/v 내지 0.2% w/v 폴리소르베이트 20으로 제형화될 때 안정적임을 나타낸다. mAb1 제형은 물리적 또는 화학적 안정성을 손상시키지 않으면서 실온에 대한 노출을 견딜 수 있다. mAb1 단백질은 또한 예시된 제형에서 50 내지 100 mg/mL의 농도로 재구성될 때 안정적이다. 재구성된 mAb1 DP를 25℃까지 최대 24시간 동안 노출시키는 것은 단백질의 무결성을 손상시키지 않을 것이고, 재구성된 DP의 교반을 손상시키지 않을 것이다. mAb1 제형은 가속 조건 하에서 인큐베이션한 후에도, 생물분석에 의해 결정 시 효능을 유지하였다.

실시예 5: 동결건조 주기 개발

임상 생산을 위해 개발된 동결건조 공정은 냉동, 1차 건조 및 2차 건조로 이루어진다. 냉동 건조 현미경을 사용하여 냉동 제형화된 약물 물질(FDS)에 대해 결정된, -15.7℃의 부분 케이크 붕괴 온도(T_c)에 기초하여 FTS LyoStar^™ III 동결건조기를 시용하여 동결건조 공정을 개발하였다. 1차 건조 중에, 생성물 온도는 부분 케이크 T_c를 초과하지 않아서 동결건조 주기 동안 케이크 무결성을 유지해야 한다. DP가 낮은 잔류 수분 함량을 갖는 것을 보장하기 위해 2차 건조 공정이 개발되었다.

동결건조 주기는 5.3 mL의 50 mg/mL mAb1 FDS로 충전된 20 mL 타입 1 유리 바이알에서 냉동 건조된 mAb1 DP를 생성하는 데 약 43시간이 걸린다. 동결건조 주기(도 1)는 하기 표 14에 제시된 단계를 포함한다.

[표 14]

본 발명은 본원에 기재된 특정 실시형태에 의해 범위가 제한되지 않는다. 사실상, 당업자에게 본원에 기재된 것들 외에도 본 발명의 다양한 변형들이 있음은 자명할 것이다. 이러한 변형들도 첨부된 청구범위의 범위 내에 속하는 것으로 의도된다.

SEQUENCE LISTING <110> REGENERON PHARMACEUTICALS INC <120> STABILIZED FORMULATIONS CONTAINING ANTI-CTLA-4 ANTIBODIES <130> 10813WO01 <150> 63/049,540 <151> 2020-07-08 <160> 10 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain Variable Region <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Glu Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ser Ile Arg Thr Ser Gly Thr Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Met 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Gly Gly Thr Phe Leu His Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 2 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light Chain Variable Region <400> 2 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val 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Claims

안정적인 액체 약제학적 제형으로서, 수용액에 (i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체; (ii) 완충제; (iii) 열 안정화제; 및 (iv) 유기 공용매를 포함하는, 안정적인 액체 약제학적 제형.
제1항에 있어서, 재구성된 제형인, 안정적인 약제학적 제형.
인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체의 안정적인 동결건조된 약제학적 제형으로서, 완충제; 열 안정화제; 및 유기 공용매를 포함하는 수용액을 동결건조함으로써 제조되는, 안정적인 동결건조된 약제학적 제형.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 완충제는 1 mM 내지 30 mM 농도의 히스티딘인, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 열 안정화제는 1% w/v 내지 15% w/v의 농도의 수크로스인, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 유기 공용매는 0.01% w/v 내지 0.3% w/v 농도의 계면활성제인, 안정적인 약제학적 제형.
제6항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 20인, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 수용액 중에 1 mg/ml 내지 200 mg/mL의 농도로 존재하는, 안정적인 약제학적 제형.
제8항에 있어서, 항체는 25 mg/ml ± 2.5 mg/ml 내지 100 mg/ml ± 10 mg/ml의 농도로 존재하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR)의 상보성 결정 영역(HCDR1-HCDR2-HCDR3), 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)의 상보성 결정 영역(LCDR1-LCDR2-LCDR3)을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제10항에 있어서, 항체는 각각 서열번호 3-4-5의 아미노산 서열들을 포함하는 HCDR1-HCDR2-HCDR3 도메인 및 각각 서열번호 6-7-8의 아미노산 서열들을 포함하는 LCDR1-LCDR2-LCDR3 도메인을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제12항에 있어서, 항체는 인간 IgG 중쇄 불변 영역을 갖는, 안정적인 약제학적 제형.
제13항에 있어서, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG1인, 안정적인 약제학적 제형.
제13항에 있어서, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG4인, 안정적인 약제학적 제형.
제12항에 있어서, 항체는 서열번호 9의 잔기 1 내지 445의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제12항에 있어서, 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액은 (i) 약 5 mg/ml 내지 약 150 mg/ml의, hCTLA-4에 특이적으로 결합하는 항체; (ii) 약 5 mM 내지 약 25 mM의 히스티딘; (iii) 약 3% w/v 내지 약 12% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.05% w/v 내지 약 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액은 약 5.5 내지 약 6.5의 pH를 갖는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액은 (i) 약 50 mg/ml ± 5 mg/ml의 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액은 (i) 약 100 mg/ml ± 10 mg/ml의 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액의 pH는 5.8 내지 6.2인, 안정적인 약제학적 제형.
제22항에 있어서, 수용액의 pH는 약 6.0인, 안정적인 약제학적 제형.
안정적인 액체 약제학적 제형으로서, 수용액에
(i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 각각 서열번호 3, 4 및 5의 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 도메인 및 각각 서열번호 6, 7 및 8의 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 도메인을 포함하는 HCVR을 포함함);
(ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘;
(iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및
(iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고,
수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는, 안정적인 액체 약제학적 제형.
제24항에 있어서, 재구성된 제형인, 안정적인 약제학적 제형.
인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체의 안정적인 동결건조된 약제학적 제형으로서,
(i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 각각 서열번호 3, 4 및 5의 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 도메인 및 각각 서열번호 6, 7 및 8의 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 도메인을 포함하는 HCVR을 포함함);
(ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘;
(iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및
(iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는 수용액을 동결건조함으로써 제조되고,
수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는, 안정적인 동결건조된 약제학적 제형.
제24항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(HCVR) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(LCVR)을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제27항에 있어서, 항체는 인간 IgG 중쇄 불변 영역을 갖는, 안정적인 약제학적 제형.
제28항에 있어서, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG1인, 안정적인 약제학적 제형.
제28항에 있어서, 중쇄 불변 영역은 이소형 IgG4인, 안정적인 약제학적 제형.
안정적인 액체 약제학적 제형으로서, 수용액에
(i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함함);
(ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘;
(iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및
(iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하고,
수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는, 안정적인 액체 약제학적 제형.
제31항에 있어서, 재구성된 제형인, 안정적인 약제학적 제형.
인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 특이적으로 결합하는 항체의 안정적인 동결건조된 약제학적 제형으로서,
(i) 인간 세포독성 T-림프구-관련 단백질 4(hCTLA-4)에 5 ± 0.5 mg/ml 내지 150 ± 15 mg/ml의 농도로 특이적으로 결합하는 인간 항체(항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함함);
(ii) 5 mM 내지 25 mM의 히스티딘;
(iii) 3% w/v 내지 12% w/v의 수크로스; 및
(iv) 0.05% w/v 내지 0.25% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는 수용액을 동결건조함으로써 제조되고,
수용액은 5.8 내지 6.2의 pH를 갖는, 안정적인 동결건조된 약제학적 제형.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액은 (i) 약 50 mg/ml ± 5 mg/ml의 항체; (ii) 약 10 mM ± 1 mM의 히스티딘; (iii) 약 5% w/v ± 0.5% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.1% ± 0.01% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제24항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 수용액은 (i) 약 100 mg/ml ± 10 mg/ml의 항체; (ii) 약 20 mM ± 2 mM의 히스티딘; (iii) 약 10% w/v ± 1% w/v의 수크로스; 및 (iv) 약 0.2% ± 0.02% w/v의 폴리소르베이트 20을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제34항 또는 제35항에 있어서, 수용액의 pH는 약 6.0인, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 크기 배제-초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 5℃에서 24개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제37항에 있어서, 크기 배제-초고성능 액체 크로마토그래피(SE-UPLC)에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 95%는 5℃에서 24개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제38항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 97%는 5℃에서 24개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제40항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 96%는 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 45℃ 또는 50℃에서 1개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제42항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 95%는 45℃ 또는 50℃에서 1개월의 저장 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 90%는 주위 온도에서 60분의 교반 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제44항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 항체의 천연 형태의 적어도 96%는 주위 온도에서 60분의 교반 후에 회수되는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 5℃에서 24개월의 저장 후 2% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 25℃ 및 60%의 상대 습도에서 6개월의 저장 후 2.5% 이하의 HMW 종을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 45℃에서 1개월의 저장 후 2% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 50℃에서 1개월의 저장 후 3% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, SE-UPLC에 의해 결정 시 주위 온도에서 60분의 교반 후 2% 이하의 고분자량(HMW) 종을 포함하는, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 유리 바이알에 함유된, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 시린지에 함유된, 안정적인 약제학적 제형.
제52항에 있어서, 시린지는 플루오로카본-코팅된 플런저를 포함하거나, 시린지는 저 텅스텐 시린지인, 안정적인 약제학적 제형.
제52항에 있어서, 사전충전된 시린지인, 안정적인 약제학적 제형.
제52항에 있어서, 사전충전된 스테이크형(staked) 바늘 시린지인, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 대용량 장치 또는 볼루스(bolus) 주사기에 함유된, 안정적인 약제학적 제형.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항의 안정적인 액체 약제학적 제형을 함유하는, 펜 또는 자기주사기 전달 장치.
제57항에 있어서, 일회용 펜 전달 장치인, 전달 장치.
제57항에 있어서, 재사용 가능한 펜 전달 장치인, 전달 장치.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항의 안정적인 약제학적 제형을 함유하는, 용기.
(i) 제1항 내지 제50항 중 어느 한 항의 안정적인 약제학적 제형을 함유하는 용기 및 (ii) 약제학적 제형의 사용을 위한 라벨링을 포함하는, 키트.
제61항에 있어서, 라벨링은 약제학적 제형의 피하 투여를 기재하는 것인, 키트.
제61항에 있어서, 라벨링은 약제학적 제형의 정맥 내 투여를 기재하는 것인, 키트.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항의 안정적인 약제학적 제형을 포함하는 단위 투여 형태로서, 항-CTLA-4 항체는 1 mg 내지 500 mg의 양으로 존재하는, 단위 투여 형태.
제62항에 있어서, 제형은 유리 바이알에 함유되는, 단위 투여 형태.
제62항에 있어서, 제형은 시린지에 함유되는, 단위 투여 형태.
제66항에 있어서, 시린지는 사전충전된 시린지인, 단위 투여 형태.
제1항 내지 제50항 중 어느 한 항의 안정적인 액체 약제학적 제형을 함유하는, 안전성 시스템 전달 장치.
제68항에 있어서, 수동 작동에 의해 연장하도록 구성된 안전성 슬리브를 포함하는, 안전성 시스템 전달 장치.
제68항에 있어서, 안정적인 약제학적 제형의 주사 후 자동으로 연장하도록 구성된 안전성 슬리브를 포함하는, 안전성 시스템 전달 장치.