CN112285219B - 一种洋槐蜂蜜真实性评价方法及在掺假鉴别中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于涉及食品检测领域，具体涉及一种洋槐蜂蜜真实性评价方法及在掺假鉴别中的应用。在所述的真实性评价方法中，以刺槐苷为指示性物质，当其在蜂蜜中的含量介于0.8‑2.0mg/kg时，可将其判定为洋槐蜂蜜；当其在蜂蜜中的含量低于0.8mg/kg时，则判定为其它蜂蜜或者掺假洋槐蜂蜜。本发明中提供的方法具有简单、高效等优点，便于操作和推广，对优质洋槐蜜的相关行业或国家标准的制定具有一定的指导意义，同时对保护蜂蜜消费者的合法权益和维护蜂蜜消费行业的健康发展具有重要的现实意义。

Description

一种洋槐蜂蜜真实性评价方法及在掺假鉴别中的应用
技术领域
本发明涉及食品检测领域，具体涉及一种洋槐蜂蜜真实性评价方法及在掺假鉴别中的应用。
背景技术
洋槐为豆科蝶形花亚科刺槐属多年生落叶乔木，亦称之为刺槐。原产于美洲，因其具有较好的耐旱、绿化等优点，现已广泛分布于世界各地。19世纪末引入我国，现在我国的东部和中部地区广泛栽培，如辽东半岛、华北平原、黄土高原、内蒙、以及西南地区。洋槐花期泌蜜丰富，分布广泛，是我国主要蜜源植物之一，尤其是华北和西北地区春季的关键蜜源植物。洋槐蜜作为我国大宗商品蜂蜜中的一种，由于洋槐蜜色泽水白、口感柔和、甜而不腻、且具有槐花清香等优点，深受人们喜爱。洋槐花期恰好位于春季，此时天气变化多样，而气候多变会严重影响洋槐花的流蜜及蜂蜜的采蜜行为，从而导致不同年份洋槐蜜的产量差异较大，存在典型的大小年现象。丰收年份，全国洋槐蜜的产量高达数万吨，但是歉收年份仅数千吨。由于洋槐蜜色香味俱佳，但总产量有限且不稳定，从而导致市场上洋槐蜜的价格较高，通常是其它品种蜂蜜的2-5倍。当前，我国尚未制定有关洋槐蜜真实性与纯度的评价方法，部分不良商家为了牟取高额利润，往往制售掺假洋槐蜜，其掺假的方式主要有：一是在洋槐蜜中勾兑果葡糖浆进行以假乱真；二是勾兑其它品种蜂蜜，如油菜蜜进行以次充好。目前，市场上流通的洋槐蜜商品主要是通过企业的自律行为进行标识，缺乏有效的评价方法和依据，难以进行监管。建立并制定洋槐蜜真实性与纯度的评价方法已经成为广大蜂农和蜂产品从业者的共识。
蜂蜜是蜜蜂采集蜜源植物的花蜜或蜜露与自身分泌物相混合，经充分酿造储存在蜂巢中的天然甜味食品。花蜜中除了糖类和水分之外，通常还含有其它化合物，其中部分化合物是某种单花蜂蜜所特有，如枣花蜜中的4-羟基喹啉、麦卢卡蜂蜜中的甲基乙二醛、板栗蜂蜜中犬尿酸等。这些特有化合物已经作为特征性物质广泛应用于某种单花蜜的真实性和纯度评价。洋槐蜜作为我国主要商品蜂蜜，当前，尚未报道有关洋槐蜜真实性与纯度的评价方法。本发明专利基于液相串联高分辨质谱等技术对洋槐蜜进行系统研究，从中识别和鉴定出了洋槐蜜的指示性物质：刺槐苷。该物质存在于所有洋槐蜜中，且含量较为稳定，而其它品种蜂蜜中难以检测到该物质的存在。基于此，本发明专利提供了一种洋槐蜂蜜的真实性与纯度评价方法，并将刺槐苷作为指示性物质。本发明提供的方法为保护广大蜂农、蜂产品从业者和消费者具有重大的现实意义，同时为制定洋槐蜜真实性与纯度评价的行业标准提供数据和方法参考。
发明内容
本发明首先通过液相色谱串联高分辨质谱的正负模式对大量的洋槐蜂蜜以及其它常见的蜂蜜进样分析。实验结果表明洋槐蜂蜜在正模式下的总离子流色谱图中存在一个区别于其他常见蜂蜜的化合物刺槐苷，其色谱保留时间为6.80min，精确质量数为m/z741.22366。
基于获得的对照品，采用LC-MS初步建立了蜂蜜中刺槐苷的准确定量分析方法。另外，本发明从洋槐蜂蜜的产地共采集了18份蜂蜜样本，样本经前处理之后，由开发的LC-MS方法进样分析，结果发现洋槐蜂蜜中刺槐苷的含量较为稳定为0.8-2.0mg/kg。而其它品种的蜂蜜中，该物质的含量很低，甚至检测不到。因此，可以将刺槐苷作为洋槐蜂蜜的特征性物质，用于洋槐蜂蜜的真实性鉴别及纯度评价。
本发明进一步提出一种洋槐蜂蜜的真实性评价方法，以刺槐苷为特征性标志物对蜂蜜样本进行检测；若所述蜂蜜样本中所述刺槐苷的含量介于0.8-2.0mg/kg，判断所述蜂蜜样本为洋槐蜂蜜；若所述蜂蜜样本中刺槐苷的含量低于0.8mg/kg，判定所述蜂蜜样本为其它蜂蜜或者掺假洋槐蜂蜜。
作为优选，通过加入刺槐苷的空白蜂蜜(不含有刺槐苷)确认刺槐苷的含量与峰面积间的线性关系，根据蜂蜜样本中刺槐苷的峰面积推算其含量。
作为优选，采用UHPLC-Q-Orbitrap(超高液相色谱-高分辨质谱)和/或LC-MS/MS检测蜂蜜样本。
作为优选，刺槐苷在UHPLC-Q-Orbitrap的精确提取离子流色谱图中含有m/z741.22366([M+H]+)准分子离子峰，其精确质量数的误差应当小于5ppm；优选刺槐苷色谱峰的保留时间为6.80min，保留时间允许的偏差应小于0.2min。
此外，为了提高洋槐蜂蜜的鉴别能力，刺槐苷的精确质量数和保留时间除了满足上述条件之外，该物质的MS/MS图谱(子离子图谱)中应该含有其主要的碎片离子，本发明进一步发现了其特征碎片离子：m/z 595.16608、m/z 433.11294、m/z 287.05491，其精确质量数的误差应当小于10ppm。基于上述MS/MS图谱中提供的主要碎片离子，即便是在无刺槐苷对照品的情况，依然可以通过判定蜂蜜样本中含有洋槐蜂蜜，并可积分母离子峰面积用于洋槐蜂蜜含量的计算。
作为优选，采用UHPLC-Q-Orbitrap对蜂蜜样本进行检测时，液相条件如下：
采用C18色谱柱，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为流动相B，采用梯度洗脱程序分离：0-2.0min，5％的流动相B；2.0-7.0min，5-30％的流动相B；7.0-14.0min，30-95％的流动相B；14.0-18.0min，95％的流动相B；18.0-18.1min，95-5％的流动相B；18.1-20.0min，5％的流动相B。
优选液相的流速为0.30mL/min。
优选进样量为5.0μL。
在进行上述优化后，目标物色谱峰与其它色谱峰分离明显。
作为优选，采用UHPLC-Q-Orbitrap对蜂蜜样本进行检测时，质谱条件如下：
离子源参数：鞘气的流速45arb；辅助气的流速10arb；挡锥气的流速0arb；电喷雾电压3.5kV；离子导管的温度320℃；S-lens RF level设为60V；离子源的温度350℃；
优选采集的模式为正离子模式下的Full MS-ddMS2，其中Full MS的具体参数设置如下：分辨率：70000；AGC Target：3e6；Maximum IT：100ms；Scan range：80-1200Da；Spectrum data：Centroid；其中dd-MS2的具体参数设置如下：分辨率：17500；AGC Target：1.0e5；Maximum IT：50ms；Loop count：2；Isolation window：2.0Da；Scan range：200-2000Da；NCE：35eV；Spectrum data：Centroid；dd settings中，Minimum AGC：8.0e3；Apextrigger：2-6s；Exclude isotope：on；Dynamic exclusion：8.0s。
在进行上述优化后，离子响应值更高。
采用LC-MS/MS对蜂蜜样本进行检测时，由于检测仪器的不同，液相和质谱设置条件与UHPLC-Q-Orbitrap差异较大。
优选液相条件如下：采用C18色谱柱(优选采用较短的C18色谱柱)，柱温为25℃，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为流动相B；采用梯度洗脱程序分离：0-0.8min，5％的流动相B；0.8-1.2min，5-40％的流动相B；1.2-2.5min，40-90％的流动相B；2.5-3.5min，90％的流动相B；3.5-3.6min，90-5％的流动相B；3.6-6.0min，5％的流动相B。
优选液相的流速为0.30mL/min。
优选进样量为3.0μL。
作为优选，为了准确定量蜂蜜中的刺槐苷，采用LC-MS/MS对蜂蜜样本进行检测时，采集的模式为正离子模式下的多反应监测(MRM)，MRM关键参数的设置如下：741.2>595.2(定量离子),16eV；741.2>433.1(定性离子)，21eV。
质谱条件如下：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：正离子扫描；离子喷雾电压：3500V；雾化气压力：45psi；干燥气温度：300℃；干燥气流速：5L/min；鞘气温度：250℃；鞘气流速：11L/min。
其中，刺槐苷的详细MRM参数设置参见表1。
表1 LC-MS/MS在定量分析检测蜂蜜中刺槐苷的MRM关键参数设置
Figure BDA0002667228070000051
为验证建立的LC-MS/MS方法科学合理性，本发明考察了该方法的准确度和精密度，变异系数均小于10％，完全符合残留检测分析的要求。
作为优选，在检测前，还包括利用甲醇水对所述蜂蜜样本进行提取的步骤；
在所述甲醇水中，优选甲醇与水的体积比为2：(7～9)，优选为2：8。
作为优选，对蜂蜜样本进行检测前，将蜂蜜按1：(9～11)的质量体积比充分溶于甲醇水中，进行提取；更优选为1：10。
作为优选，所述提取具体包括如下步骤：称取0.8g蜂蜜加入7.2mL提取溶液，在室温下涡旋至完全溶解，并在20194g，4℃下离心20min。收集上清液过0.22μm滤膜，再取100μL提取液：900μL甲醇水的比例稀释一次。稀释液转移至进样瓶中等待上机分析。
本发明涉及到的试剂和标准品在市场上均可获得，涉及到的操作如无特殊说明均为本领域常规操作。
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以相互组合，得到具体实施方式。
本发明的有益效果在于：
本发明首次公布了洋槐蜂蜜中一种高含量物质为刺槐苷，并提出了刺槐苷可作为洋槐蜂蜜真实性和纯度评价的指标，采用液相串联质谱(UHPLC-Q-Orbitrap或LC-MS/MS)检测蜂蜜中刺槐苷的方法。
此外，为了准确定量洋槐蜂蜜中刺槐苷含量，本发明还对该物质的检测方法和关键的检测参数进行了优化。基于高分辨质谱提供的精确质量数，该方法具有较高的特异性和灵敏度，检出限可以达到2μg/kg。
同时，本发明中的方法还具有简单、高效等优点，便于操作和推广，对保护蜂蜜消费者的合法权益和维护蜂蜜消费行业的健康发展具有重要的现实意义。
附图说明
图1为本发明实施例1提供洋槐蜂蜜中特征性标志物刺槐苷的化学结构。
图2为本发明实施例1提供的洋槐花中的刺槐苷在UHPLC-Q-Orbitrap中的精确提取离子流色谱图(A)和洋槐蜂蜜中中的刺槐苷在UHPLC-Q-Orbitrap中的精确提取离子流色谱图(B)，其中提取的质量窗口偏差小于5ppm。
图3为本发明实施例1提供的刺槐苷在UHPLC-Q-Orbitrap正离子模式下全扫描质谱图(A)、精确质量数的子离子(MS/MS)质谱图(B)，负离子模式下全扫描质谱图(C)、精确质量数的子离子(MS/MS)质谱图(D)。
图4为本发明实施例2提供的LC-MS/MS的MRM模式检测21种主要的不同品种蜂蜜中刺槐苷的含量。
图5为本发明实施例3提供的18种商品化洋槐蜂蜜中的刺槐苷含量情况。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明均为常规方法。所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
仪器与试剂：
1.质谱仪(Q-Exactive Plus)，美国Thermo Fisher Scientific公司；
2.1200series液相色谱-6460三重四级杆质谱，美国Agilent Technologies公司；
3.台式低温离心机(1-15Pk)，德国Sigma公司；
4.电子分析天平(PL203)，德国METTLERTOLEDO公司；
5.超纯水机(Milli-Q Gradient)，美国Millipore公司；
6.涡动仪(G560E)，美国Scientific Industries公司；
甲酸(FA)从上海安谱实验科技股份有限(CNW)公司购买；乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)购买于Fisher公司。
实施例1
本实施例首先通过液相色谱串联高分辨质谱的正负模式对大量的洋槐蜂蜜以及其它常见的蜂蜜进样分析。实验结果表明，在保留时间为6.80min的总离子流色谱图中，洋槐蜂蜜存在一个含量较高的化合物，而其它常见蜂蜜未出现该化合物，并且在洋槐花中也发现了该物质(见图2中A图)，因此可判定该物质来源于洋槐。图2中B图为发现的含量较高的化合物的精确提取离子流色谱(提取窗口为5mDa)，其色谱保留时间为6.80min，在正模式下精确质量数为m/z741.22366如图3中的A图所示,此外，在负模式下在该物质的精确质量数为m/z 739.20970(如图3中的C图所示)。图3中的A图和B图分别展示了该化合物的正模式下全扫描质谱图(MS)与子离子质谱图(MS/MS)；C图和D图分别为负模式下全扫描质谱图(MS)和子离子质谱图(MS/MS)。
在正离子模式下，基于高分辨质谱提供的精确质量数m/z741.22366，本实施例获得该物质的元素组成为C33H41O19 +，该物质峰的主要碎片含有m/z 595.16608、m/z433.11294、m/z 287.05491等。随后，本实施例采用Compound Discoverer 2.0软件对该物质进行多重化学物质数据库进行检索，如m/z Cloud、Chem Bank等。实验结果表明该物质属于刺槐苷(如图1)。
此外，为保证刺槐苷鉴定结果的有效性，通过与购买的刺槐苷标准品进行了对比，发现两者具有相同的保留时间、母离子(MS)和碎片离子(MS/MS)。该结果再次验证了该物质为刺槐苷的准确性。
实施例2
1.样品来源
从蜂场直接购买常见的不同单花蜂蜜样本用于检测各种蜂蜜中刺槐苷的含量，具体的包括：枣花、洋槐、油菜、荔枝、龙眼、荆条、桉树、雪脂莲、向日葵、鸭脚木、乌桕、石榴、野桂花、野坝子、柠条、麦卢卡、老瓜头、枸杞、党参、五倍子、柑橘蜂蜜。每个品种蜂蜜样本的数量不少于20个；而洋槐蜂蜜样本的数量为154个，分别采自不同年份(2017年-2020年)我国洋槐蜜蜂蜜的主产区，如陕西、山西、甘肃、山东、河北、北京、辽宁和河南等省市。
2.溶液配制
提取溶液：移取甲醇20mL，超纯水定容到100mL，4℃保存。
刺槐苷标准溶液：称取10mg的刺槐苷标准品，甲醇定容至10mL。4℃保存，有效期2个月。
3.Q Exactive plus测试条件如下：
(1)样品处理：
称取0.8g蜂蜜加入7.2mL提取溶液，在室温下涡旋至完全溶解，并在20194g，4℃下离心20min。收集上清液过0.22μm滤膜，再取100μL提取液：900μL甲醇水的比例稀释一次。稀释液转移至进样瓶中等待上机分析。
(2)质控样本
称取0.8g空白蜂蜜(不含刺槐苷)加入7.2mL提取溶液，在室温下涡旋至完全溶解，并在20194g，4℃下离心20min。收集上清液过0.22μm滤膜转移至进样品中，再吸取100μL提取液，800μL甲醇水和100μL浓度为100μg/kg的刺槐苷标准溶液。涡旋混匀，等待上机分析。涡旋混匀，等待上机分析。
(3)UHPLC-Q Exactive plus仪器设置
色谱条件为：分析柱为C18色谱柱。以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为B，采用梯度洗脱程序分离：0-2.0min，5％的B；2.0-7.0min，5-30％的B；7.0-14.0min，30-95％的B；14.0-18.0min，95％的B；18.0-18.1min，95-5％的B；18.1-20.0min，5％的B；流速：0.30mL/min；进样量：5.0μL。
离子源参数：鞘气的流速45arb；辅助气的流速10arb；挡锥气的流速0arb；电喷雾电压3.5kV；离子导管的温度320℃；S-lens RF level设为60V；离子源的温度350℃。
优选采集的模式为正离子模式下的Full MS-ddMS2，其中Full MS的具体参数设置如下：分辨率：70000；AGC Target：3e6；Maximum IT：100ms；Scan range：80-1200Da；Spectrum data：Centroid；其中dd-MS2的具体参数设置如下：分辨率：17500；AGC Target：1.0e5；Maximum IT：50ms；Loop count：2；Isolation window：2.0Da；Scan range：200-2000Da；NCE：35eV；Spectrum data：Centroid；dd settings中，Minimum AGC：8.0e3；Apextrigger：2-6s；Exclude isotope：on；Dynamic exclusion：8.0s。
质谱生成的数据通过Xcalibur软件收集并存储，将质谱采集的raw数据通过Xcalibur的Qualitative browser分析，比较样品与空白加标样品中刺槐苷的Full MS及MS/MS图谱，确定样品中含有刺槐苷。
(4)标准曲线的绘制
在空白蜂蜜样品提取后过滤膜的稀释溶液中制备一系列刺槐苷溶液(1.0，2.0，5.0，10，20，50μg/kg)。并指定10μg/kg的空白添加为质控样本。数据通过Trace Finder软件处理，定量蜂蜜样品中刺槐苷的含量。得到标准曲线公式为Y＝1.4346e4X-0.53e4，R2＝0.997(X为浓度Y定量离子响应积分值)。
通过Trace Finder软件即可分析蜂蜜样品中的刺槐苷含量。通过浓度稀释计算，得到蜂蜜中刺槐苷的含量，见图4。当样品中刺槐苷的含量介于0.8-2.0mg/kg时，可以被认为样品蜂蜜的蜜源为洋槐，该样品为洋槐蜂蜜。
实施例3
1.样品来源
从市场购买标签为洋槐蜂蜜的多种品级或品牌的蜂蜜样本共18份。
2.实验步骤
(1)溶液配制
提取溶液：移取甲醇20mL，超纯水定容到100mL，4℃保存。
刺槐苷标准溶液：称取10mg的刺槐苷标准品，甲醇定容至10mL。4℃保存，有效期2个月。
(2)样品处理
称取0.8g蜂蜜加入7.2mL提取溶液，在室温下涡旋至完全溶解，并在20194g，4℃下离心20min。收集上清液过0.22μm滤膜，再取100μL提取液：900μL甲醇水的比例稀释一次。稀释液转移至进样瓶中等待上机分析。
(3)质控样品
称取0.8g空白蜂蜜(不含刺槐苷)加入7.2mL提取溶液，在室温下涡旋至完全溶解，并在20194g，4℃下离心20min。收集上清液过0.22μm滤膜转移至进样品中，再吸取100μL提取液，800μL甲醇水和100μL浓度为100μg/kg的刺槐苷标准溶液。涡旋混匀，等待上机分析。
3.Agilent1200液相色谱-6460三重四级杆质谱分析条件如下
液相条件中采用较短的C18色谱柱分离，是以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为B，采用较短的梯度洗脱程序分离：0-0.8min，5％的流动相B；0.8-1.2min，5-40％的流动相B；1.2-2.5min，40-90％的流动相B；2.5-3.5min，90％的流动相B；3.5-3.6min，90-5％的流动相B；3.6-6.0min，5％的流动相B。液相的流速为0.30mL/min。进样量为3.0μL。
LC-MS/MS的质谱条件如下：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测(MRM)；离子喷雾电压：3500V；雾化气压力：45psi；干燥气温度：300℃；干燥气流速：5L/min；鞘气温度：250℃；鞘气流速：11L/min。
采集的模式为正离子模式下的MRM模式。MRM参数：741.2>595.2(定量离子)，16eV；741.2>433.1(定性离子)，21eV。
4.标准曲线的绘制：在空白蜂蜜样品提取后过滤膜的稀释溶液中制备一系列刺槐苷溶液(1.0，2.0，5.0，10，20，50μg/kg)。并指定10μg/kg的空白添加为质控样本。
通过Agilent的Mass Hunter定量软件分析样品及空白加标样品。外标法定量，得到标准曲线公式为Y＝1.4623e4X-0.57e4，R2＝0.998(X为浓度Y定量离子响应积分值)
通过定量软件即可分析蜂蜜样品中的刺槐苷含量。结果如图5所示，其中33.3％的样品中刺槐苷的含量小于0.8mg/kg。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (1)

1.一种洋槐蜂蜜的真实性评价方法，其特征在于，以刺槐苷为指示性物质，当蜂蜜样本中刺槐苷的含量介于0.8-2.0mg/kg，则判断所述蜂蜜样本为洋槐蜜；当刺槐苷的含量低于0.8mg/kg，则判定所述蜂蜜样本为其它蜂蜜；
采用UHPLC-Q-Orbitrap和/或LC-MS/MS检测蜂蜜样本；在检测前，还包括利用甲醇水对所述蜂蜜样本进行提取的步骤；所述蜂蜜样本与甲醇水的质量体积比1：(9～11)，在所述甲醇水中，甲醇与水的体积比为2：(7～9)；
刺槐苷在UHPLC-Q-Orbitrap的精确提取离子流色谱图中含有m/z 741.22366([M+H]+)准分子离子峰，其精确质量数的误差应当小于5ppm；刺槐苷色谱峰的保留时间为6.80min，保留时间偏差小于0.2min；
刺槐苷的MS/MS图谱中应含有m/z 595.16608、m/z 433.11294、m/z 287.05491中的一个或多个碎片离子峰，其精确质量数的误差应当小于10ppm；
采用UHPLC-Q-Orbitrap对蜂蜜样本进行检测时，液相色谱条件如下：采用C18色谱柱，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为流动相B，采用梯度洗脱程序分离：0-2.0min，5％的流动相B；2.0-7.0min，5-30％的流动相B；7.0-14.0min，30-95％的流动相B；14.0-18.0min，95％的流动相B；18.0-18.1min，95-5％的流动相B；18.1-20.0min，5％的流动相B；
采用UHPLC-Q-Orbitrap对蜂蜜样本进行检测时，质谱条件如下：离子源参数：鞘气的流速45arb；辅助气的流速10arb；挡锥气的流速0arb；电喷雾电压3.5kV；离子导管的温度320℃；S-lens RF level设为60V；离子源的温度350℃；采集的模式为正离子模式下的FullMS-ddMS2；
采用LC-MS/MS对蜂蜜样本进行检测时，液相条件如下：采用C18色谱柱，柱温为25℃，以0.1％的甲酸水为流动相A，0.1％的甲酸乙腈为流动相B；采用梯度洗脱程序分离：0-0.8min，5％的流动相B；0.8-1.2min，5-40％的流动相B；1.2-2.5min，40-90％的流动相B；2.5-3.5min，90％的流动相B；3.5-3.6min，90-5％的流动相B；3.6-6.0min，5％的流动相B；
采用LC-MS/MS对蜂蜜样本进行检测时，质谱条件如下：质谱条件如下：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；监测方式：多反应监测；离子喷雾电压：3500V；雾化气压力：45psi；干燥气温度：300℃；干燥气流速：5L/min；鞘气温度：250℃；鞘气流速：11L/min；采集的模式为正离子模式下的MRM模式，MRM参数如下741.2>595.2，16eV；741.2>433.1，21eV。
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