CN111603515B - 一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用 - Google Patents

一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用，其特征在于所述中药组合物包括：鱼腥草5‑30份、金银花5‑30份、赤芍5‑20份、艾叶3‑15份、薄荷3‑15份。本发明在Vero细胞上考察中药组合物在不同浓度下对新型冠状病毒SARS‑CoV‑2抑制效果，实验结果表明在3000μg/ml、1000μg/ml、200μg/ml浓度下，中药组合物在SARS‑CoV‑2病毒感染的Vero细胞上表现出良好的保护作用，可抑制SARS‑CoV‑2在细胞内复制，使感染后的细胞不发生病变，说明本发明的中药组合物具有良好的治疗或预防冠状病毒相关疾病的效果。

Description

一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的 应用
技术领域
本发明涉及疾病治疗药物领域，更具体地说，涉及一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用。
背景技术
2020年3月11日，世界卫生组织(WHO)正式将COVID-19定性为全球大流行病。目前，尚无有效疫苗和药物来防治，因此寻找针对该病毒的有效药物显得尤为迫切。中医药在治疗瘟疫方面历史悠久，在各种疫情防控中发挥了重大作用。本发明涉及的双鱼颗粒，是以现代工艺提取鱼腥草、金银花、赤芍、艾叶、薄荷中的有效成分精制而成，能够显著改善外感风热、肺胃热盛所致的咽干、咽痛、喉核肿大、口渴、发热，以及急慢性扁桃体炎、急慢性咽炎、上呼吸道感染等。其能否成为有效预防及治疗冠状病毒相关疾病特别是COVID-19亟待开展科学研究。
发明内容
有鉴于此，本发明旨在提出一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物，其中，以重量计所述的中药组合物包括：鱼腥草5-30 份、金银花5-30份、赤芍5-20份、艾叶3-15份、薄荷3-15份。
进一步地，所述冠状病毒感染的疾病包括COVID-19(新型冠状病毒肺炎)。
进一步地，所述中药组合物包括：鱼腥草5-25份、金银花5-25份、赤芍5-15份、艾叶3-10份、薄荷3-10份。
进一步地，所述中药组合物包括：鱼腥草15-25份、金银花15-25份、赤芍10-15份、艾叶5-10份、薄荷3-5份。
可选地，所述中药组合物包括：鱼腥草20份、金银花20份、赤芍12 份、艾叶8份、薄荷4份。
可选地，所述中药组合物包括：鱼腥草15份、金银花15份、赤芍12 份、艾叶7份、薄荷7份。
可选地，所述中药组合物包括：鱼腥草10份、金银花10份、赤芍8 份、艾叶4份、薄荷4份。
本发明的组合物可以直接研磨成粉，也可以是经过本领域常规手段制得的提取物等。所述的组合物，可以按传统方法直接将几味组合物直接研磨成粉，也可以是经过常规手段制得提取物，以便制成不同剂型，得到疗效更好并且更利于制备成现代药物剂型
具体地，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
具体地，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
进一步地，本发明所述中药组合物制备方法可以包括以下步骤：
步骤A:按照原料药的重量比例称取中药材；
步骤B:金银花用6-12倍量50％～80％乙醇提取，提取液滤过，回收乙醇，干燥粉碎，得干膏粉；
步骤C:鱼腥草、艾叶、薄荷投入提取罐中，加水3～12倍，提取挥发油，药渣加赤芍粗粉，加水6-12倍量煎煮，提取液滤过，得清膏，加入浓度为90％以上的乙醇，至含醇量60％～80％，醇沉，静置，上清液回收乙醇，得稠膏，干燥粉碎，得干膏粉；
步骤D：将上述挥发油和上述干膏粉混合。
进一步地，本发明所述中药组合物制备方法可以包括以下步骤：
步骤A:金银花加12倍量50％乙醇，回流提取二次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，减压(-0.07MPa～-0.09MPa，65℃～75℃)回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20～1.25(65℃)的稠膏，减压干燥(-0.07MPa～-0.09MPa， 60℃～65℃)，粉碎，得到醇提部分干浸膏粉；
步骤B:鱼腥草、艾叶、薄荷，加8倍量水，水蒸气蒸馏提取挥发油，提取5小时，提取液滤过，另器存放，备用；
步骤C:所得挥发油以10倍量β-环糊精，20倍量水研磨包合20分钟，包合物(55℃)干燥，粉碎，得到挥发油包合物；
步骤D：提取挥发油后药渣与赤芍合并，加10倍量水，提取二次，每次1小时，提取液与提油药液(提取挥发油后的剩余药液)合并，滤过，滤液减压(-0.07MPa～-0.09MPa，75℃～85℃)浓缩至相对密度为1.02～1.05 (70℃)的清膏，冷却至室温，加入95％乙醇使含醇量达70％，静置12小时以上，醇沉上清液减压(-0.07MPa～-0.09MPa，65℃～75℃)回收乙醇并浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)的稠膏，可选加入适量的糊精减压 (-0.07MPa～-0.09MPa，75℃)干燥，粉碎，得到水提部分干浸膏粉；将以上三种中间体混合。
本发明在Vero细胞上考察中药组合物在不同浓度下对新型冠状病毒SARS-CoV-2抑制效果，实验结果表明在3000μg/ml、1000μg/ml、 200μg/ml浓度下，中药组合物在SARS-CoV-2病毒感染的Vero细胞上表现出良好的保护作用，可抑制SARS-CoV-2在细胞内复制，使感染后的细胞不发生病变，说明本发明的中药组合物具有良好的治疗或预防冠状病毒相关疾病的效果。
具体实施方式
本发明提供了一种中药组合物的用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
本发明如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1中药组合物颗粒剂的制备
原料药配比：鱼腥草：750g、金银花750g，赤芍450g，艾叶300g，薄荷150g。
步骤A:金银花加12倍量50％乙醇，回流提取二次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，减压(-0.07MPa～-0.09MPa，65℃～75℃)回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20～1.25(65℃)的稠膏，减压干燥 (-0.07MPa～-0.09MPa，60℃～65℃)，粉碎，得到醇提部分干浸膏粉；
步骤B:鱼腥草、艾叶、薄荷，加8倍量水，水蒸气蒸馏提取挥发油，提取5小时，提取液滤过，另器存放，备用；
步骤C:所得挥发油以10倍量β-环糊精，20倍量水研磨包合20 分钟，包合物(55℃)干燥，粉碎，得到挥发油包合物；
步骤D：提取挥发油后药渣与赤芍合并，加10倍量水，提取二次，每次1小时，提取液与提油药液合并，滤过，滤液减压 (-0.07MPa～-0.09MPa，75℃～85℃)浓缩至相对密度为1.02～1.05(70℃) 的清膏，冷却至室温，加入95％乙醇使含醇量达70％，静置12小时以上，醇沉上清液减压(-0.07MPa～-0.09MPa，65℃～75℃)回收乙醇并浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)的稠膏，加入适量的糊精减压 (-0.07MPa～-0.09MPa，75℃)干燥，粉碎，得到水提部分干浸膏粉。将以上三种中间体与适量糊精、甜菊素，混匀，干法制粒，制成1000g 颗粒，即得。
实施例2中药组合物口含片的制备
原料药配比：鱼腥草：560g、金银花560g，赤芍450g，艾叶275g，薄荷275g。
步骤A:按照原料药的重量比例称取中药材，金银花净选、赤芍粗粉碎、薄荷全草粉碎，鱼腥草和艾叶直接备用即可；
步骤B:金银花用12倍量50％乙醇回流提取2次，每次0.5h，提取液合并滤过，回收乙醇得浸膏1，比重为1.20～1.30(60～80℃)，干燥，得干膏粉1，备用；
步骤C:加8倍量的水，加热至80℃，依次投入鱼腥草、艾叶、薄荷，提取挥发油持续5h，得到挥发油，药渣加赤芍粗粉，加10倍量水，煎煮2次，每次1h，提取液合并滤过，浓缩至相对密度为1.02～ 1.05(60℃)，得清膏，加入95％乙醇，至含醇量70％，醇沉，静置12-32小时，上清液回收乙醇，得相对密度为1.20～1.30(60℃)的稠膏2，干燥，粉碎得干膏粉2，备用；
步骤D：将所得的挥发油，采用胶体磨研磨方式进行包合，得到挥发油包合物3，粉碎后，备用。将干膏粉1、干膏粉2、包合物3与口含片常用辅料混合均匀，制粒，整粒、压片、内包装即得。
实施例3中药组合物喷雾剂的制备
原药材配比：鱼腥草350g、金银花350g，赤芍280g、艾叶150g、薄荷150g。
步骤A：按照原料药的重量比例称取中药材，金银花净选、赤芍粗粉碎、薄荷全草粉碎、鱼腥草和艾叶直接备用；
步骤B:金银花用12倍量50％乙醇回流提取2次，每次0.5h，提取液合并滤过，回收乙醇得浸膏1，比重为1.20～1.30(60～80℃)，得稠膏1，备用；
步骤C:加8倍量的水，加热至80℃，依次投入鱼腥草、艾叶、薄荷，提取挥发油持续5h，药渣加赤芍粗粉，加10倍量水，煎煮2次，每次1h，提取液合并滤过，浓缩至相对密度为1.02～1.05(60℃)，得清膏，加入95％乙醇，至含醇量70％，醇沉，静置12-32小时，上清液回收乙醇，得相对密度为1.20～1.30(60℃)的稠膏2，备用；
步骤D：将以上稠膏1和稠膏2混合均匀，采用喷雾剂制备常用的辅料，加入挥发油混合均匀，封装于具有特制阀门系统的耐压容器中即得。
实施例4中药组合物对SARS-CoV-2的抑制作用
1.实验材料
受试药物：本发明实施例1制得的药物。
细胞：Vero细胞，由微生物流行病研究所细胞库保存。
病毒：SARS-CoV-2，滴度为107CCID50/ml，由微生物流行病研究所病毒库及P3毒种冰箱-80℃保存。使用病毒滴度为100CCID50/孔。
2.实验方法
无菌96孔培养板，每孔加入100μl浓度为1×105cell/ml Vero细胞， 37℃5％CO2培养24小时；受试药物稀释成3000μg(制剂)/ml、1000 μg(制剂)/ml、200μg(制剂)/ml三个浓度，每个浓度3个复孔，每孔100μl作用1h，然后每孔再加入等体积100CCID50病毒，作用1h；1h后，弃去96孔培养板中所有液体，加入稀释的药液；同时设立细胞对照、空白对照(溶剂对照)和病毒对照(阴性对照)；细胞37℃，5％ CO2孵箱孵育5天；光学显微镜下观察细胞病变(CPE)，细胞出现病变程度按以下5级标准记录：细胞完全病变记录为“++++”，75％病变记录为“+++”，50％病变记录为“++”，25％病变记录为“+”，未病变记录为“－”。
3.实验条件：以上实验操作均在BSL-3实验室内完成。
4.结果判断：细胞不出现CPE为有效抑制病毒的浓度，出现CPE 为无效。
5.实验结果：
本发明药物组设置的3个浓度，细胞均未出现病变，结果见表1。
表1.药物抗SARS-CoV-2效果(CPE)
Figure RE-GDA0002595671900000071
备注：“－”为未病变；“++++”为细胞完全病变。
6.结论：
根据细胞水平的筛选结果，根据本发明实施例1制得的样品在3000 μg/ml、1000μg/ml、200μg/ml三个浓度下，均可抑制SARS-CoV-2在细胞内复制，提示本发明药物具有良好的体外抗SARS-CoV-2活性。
需要指出的是，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。

Claims (7)

1.一种中药组合物在制备体外抗冠状病毒SARS-CoV-2的药物中的应用；其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的组分组成：鱼腥草5-30份、金银花5-30份、赤芍5-20份、艾叶3-15份、薄荷3-15份。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的组分组成：鱼腥草5-25份、金银花5-25份、赤芍5-15份、艾叶3-10份、薄荷3-10份。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的组分组成：鱼腥草15-25份、金银花15-25份、赤芍10-15份、艾叶5-10份、薄荷3-5份。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的组分组成：鱼腥草15份、金银花15份、赤芍12份、艾叶7份、薄荷7份。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的组分组成：鱼腥草20份、金银花20份、赤芍12份、艾叶8份、薄荷4份。
6.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述中药组合物制备方法包括以下步骤：
步骤A：按照原料药的重量比例称取中药材；
步骤B：金银花用6-12倍量50％～80％乙醇提取，提取液滤过，回收乙醇，干燥粉碎，得干膏粉；
步骤C：鱼腥草、艾叶、薄荷加水3～12倍，提取挥发油，药渣加赤芍粗粉，加水6-12倍量煎煮，提取液滤过，得清膏，加入浓度为90％以上的乙醇，至含醇量60％～80％，醇沉，静置，上清液回收乙醇，得稠膏，干燥粉碎，得干膏粉；
步骤D：将上述挥发油和上述两种干膏粉混合。
7.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述中药组合物制备方法包括以下步骤：
步骤A: 金银花加12倍量50%乙醇，回流提取二次，每次0.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20～1.25的稠膏，减压干燥，粉碎，得到醇提部分干浸膏粉；
步骤B: 鱼腥草、艾叶、薄荷，加8倍量水，水蒸气蒸馏提取挥发油，提取5小时，提取液滤过，备用；
步骤C: 所得挥发油以10倍量β-环糊精，20倍量水研磨包合20分钟，包合物干燥，粉碎，得到挥发油包合物；
步骤D：提取挥发油后药渣与赤芍合并，加10倍量水，提取二次，每次1小时，提取液与提油药液合并，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.02~1.05的清膏，冷却至室温，加入95%乙醇使含醇量达70%，静置12小时以上，醇沉上清液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.25～1.30的稠膏，减压干燥，粉碎，得到水提部分干浸膏粉；混合所述醇提部分干浸膏粉、所述挥发油包合物和所述水提部分干浸膏粉。
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