CN113288967A - 一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用，其特征在于所述中药组合物由下述重量份比例的原料药制成：羚羊角5‑15份或山羊角50‑150份、平贝母10‑60份、大黄15‑60份、黄芩7‑30份、青礞石7‑30份、石膏10‑50份、人工牛黄5‑20份、甘草15‑60份。发明的中药组合物在1:10000，1:20000，1:50000倍稀释浓度下，能够在2019‑nCoV病毒感染的VeroE6细胞上表现出良好的保护作用，可抑制2019‑nCoV在细胞内复制，三个浓度均可使感染后的细胞不发生病变，说明本发明的中药组合物具有良好的治疗或预防冠状病毒感染所致相关疾病的效果。

Description

一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的 应用
技术领域
本发明涉及疾病治疗药物领域，更具体地说，涉及一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用。
背景技术
2019-nCoV属于β属的新型冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm。其基因特征与SARSr-CoV和 MERSr-CoV有明显区别。目前研究显示与蝙蝠SARS样冠状病毒 (bat-SL-CoVZC45)同源性达85％以上。飞沫和密切接触传播是主要的传播途径，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度病毒气溶胶的情况下存在气溶胶传播的可能。患者以发热、乏力、干咳为主要表现，少数伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状。重型病例多在一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。
本发明涉及的金振口服液原药材组成为：羚羊角/山羊角、平贝母、大黄、黄芩、青礞石、生石膏、人工牛黄和甘草。功能主治为：清热解毒、祛咳止痰。用于小儿急性支气管炎符合痰热咳嗽者，表现为发热、咳嗽、咳吐黄痰、咳吐不爽、舌质红、苔黄腻等。由于其在临床应用中，对多种病毒和细菌引起的呼吸道疾病有良好的改善效果，其能否成为有效预防及治疗冠状病毒相关疾病特别是COVID-19亟待开展科学研究。
发明内容
有鉴于此，本发明旨提出一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用，其中，所述中药组合物包括：羚羊角5-15份或山羊角50-150份、平贝母10-60份、大黄15-60份、黄芩7-30份、青礞石7-30份、石膏10-50份、人工牛黄5-20份、甘草15-60份。
进一步地，所述冠状病毒感染的疾病包括COVID-19(新型冠状病毒肺炎)。
进一步地，所述中药组合物包括：羚羊角8-12份或山羊角80-120 份、平贝母15-55份、大黄20-35份、黄芩10-18份、青礞石10-18份、石膏15-25份、人工牛黄8-12份、甘草20-35份。
进一步地，所述中药组合物包括：羚羊角8-10份或山羊角80-100 份、平贝母40-50份、大黄25-35份、黄芩12-18份、青礞石12-18份、石膏20-25份、人工牛黄8-10份、甘草30-35份。
优选地，所述中药组合物包括：羚羊角9.45份、平贝母17.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份。
优选地，所述中药组合物包括：山羊角94.5份、平贝母47.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份
具体地，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
具体地，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
其中，以上本发明所使用的原料药可以直接研磨成粉，也可以是经过本领域常规手段制得的提取物；所述的组合物，可以按传统方法直接将几味组合物直接研磨成粉，也可以是经过常规手段制得提取物，以便制成不同剂型，得到疗效更好并且更利于制备成现代药物剂型。
优选地，如前所述中药组合物制备方法包括以下步骤：取羚羊角或山羊角镑成丝，用含碱水溶液水解，滤过，取滤液浓缩；取青礞石、石膏粉碎成粗粉，水加热煎煮，滤过，取滤液浓缩；取人工牛黄用70％乙醇提取，滤过，滤液浓缩；其余药材，加水煎煮，滤液浓缩并离心后，上清液加乙醇沉淀，静置，取上清液，滤过，滤液浓缩；将上述浓缩液混合，即得。
更具体地，如前所述组合物采用以下方法提取：
羚羊角或山羊角镑成丝，用含碱水溶液水解回流两次，合并两次滤液，浓缩；青礞石、石膏粉碎成粗粉，水加热煎煮两次，滤过，合并两次滤液，浓缩至相对密度为1.01～1.04(75℃～85℃)；人工牛黄用70％乙醇回流提取两次，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.02～1.05(75℃～85℃)；其余平贝母等四味药，加水煎煮两次，滤过，合并两次滤液，浓缩至相对密度为1.10(85℃)，离心，上清液加乙醇使沉淀，静置，取上清液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08(85℃)；上述浓缩液混合，即得。
本发明还提出一种前述口服液的制备方法，即：将上述任一组合物制备方法所制得得混合后的浓缩液与0.2％甜菊素混匀，加水至1000ml，搅匀，煮沸40分钟，冷藏不低于48h，滤过，滤液加水至1000ml，调节pH值为8.0～9.0，灌封，灭菌，即得。
通过上述制备方法可以得到液体制剂，如果要制备成固体制剂，则可在液体药物中加入药用辅料，再制备成该药物选自汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
本发明的中药组合物的口服液在1:10000，1:20000，1:50000倍稀释浓度下，能够在2019-nCoV病毒感染的VeroE6细胞上表现出良好的保护作用，可抑制2019-nCoV在细胞内复制，使感染后的细胞不发生病变，说明本发明的中药组合物具有良好的治疗或预防冠状病毒相关疾病的效果。
具体实施方式
本发明提供了一种中药组合物的用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
除有特别说明，本发明采用的药品、生物材料或仪器皆为普通市售品，皆可于市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1中药复方口服液的制备
山羊角94.5g镑成丝，用含碱水溶液水解回流两次，合并两次滤液，浓缩；青礞石15.75g、石膏23.62g碎成粗粉，水加热煎煮两次，滤过，合并两次滤液，浓缩至相对密度为1.01～1.04(75℃～85℃)；人工牛黄9.45g 用70％乙醇回流提取两次，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.02～1.05(75℃～85℃)；其余四味药平贝母47.25g、大黄 31.5g、黄芩15.75g、甘草31.5g，加水煎煮两次，滤过，合并两次滤液，浓缩至相对密度1.10(85℃)，离心，上清液加乙醇使沉淀，静置，取上清液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08(85℃)；上述浓缩液混合，即得。
将上述浓缩液与0.2％甜菊素混匀，加水至1000ml，搅匀，煮沸40分钟，冷藏不低于48h，滤过，滤液加水至1000ml，调节pH值为8.0～9.0，灌封，灭菌，即得。
药效试验例
1.实验材料
受试药物：本发明实施例1制得的药物。
VeroE6细胞：由中国医学科学院医学实验动物研究所病原中心保存。
2019-nCoV病毒：滴度为105TCID50/ml，由中国医学科学院医学实验动物研究所病原中心-80℃保存。使用病毒滴度为100TCID50。
2.实验方法
无菌96孔培养板，每孔加入200μl浓度为5×104cell/ml Vero E6细胞，37℃5％CO2培养24小时；受试药物稀释成3个浓度(1:10000， 1:20000，1:50000)，每个浓度5个复孔，每孔100μl，然后每孔再加入等体积100TCID50病毒，作用1h；1h后，弃去96孔培养板中细胞培养液，加入上述混合液；同时设立细胞对照、空白对照(溶剂对照)和病毒对照(阴性对照)；细胞37℃，5％CO2孵箱孵育4-5天；光学显微镜下观察细胞病变(CPE)，细胞完全病变记录为“++++”，75％病变记录为“+++”，50％病变记录为“++”，25％病变记录为“+”，未病变记录为“－”。
3.实验条件：以上实验操作均在BSL-3实验室内完成。
4.结果判断：细胞不出现CPE为有效抑制病毒的浓度，出现CPE为无效。
5.实验结果：
本发明药物组设置3个浓度，在细胞上均能有效抑制2019-nCoV 复制。结果见表1。
表1.药物抗2019-nCoV效果
Figure DEST_PATH_IMAGE001
/细胞毒性
备注：“－”为未病变；“++++”为细胞完全病变。
6.结论：
根据细胞水平的筛选结果，根据本发明实施例1制得的样品在 1:10000、1:20000、1:50000倍稀释浓度下，均可抑制2019-nCoV在细胞内复制，提示本发明药物具有良好的体外抗2019-nCoV活性。
需要指出的是，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。

Claims (9)

1.一种中药组合物在制备治疗或预防冠状病毒感染的药物中的应用，其特征在于所述中药组合物包括：羚羊角5-15份或山羊角50-150份、平贝母10-60份、大黄15-60份、黄芩7-30份、青礞石7-30份、石膏10-50份、人工牛黄5-20份、甘草15-60份。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述冠状病毒感染包括COVID-19。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物包括：羚羊角8-12份或山羊角80-120份、平贝母15-55份、大黄20-35份、黄芩10-18份、青礞石10-18份、石膏15-25份、人工牛黄8-12份、甘草20-35份。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物包括：羚羊角9.45份、平贝母17.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物包括：山羊角94.5份、平贝母47.25份、大黄31.5份、黄芩15.75份、青礞石15.75份、石膏23.62份、人工牛黄9.45份、甘草31.5份。
6.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗或预防冠状病毒感染的药物包括汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、煎膏剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、气雾剂、贴剂、口服液。
8.根据权利要求1-5任一所述的应用，其特征在于，所述中药组合物制备方法包括以下步骤：取羚羊角或山羊角镑成丝，用含碱水溶液水解，滤过，取滤液浓缩；取青礞石、石膏粉碎，水加热煎煮，滤过，取滤液浓缩；取人工牛黄用70％乙醇提取，滤过，滤液浓缩；其余药材，加水煎煮，滤液浓缩并离心后，上清液加乙醇沉淀，静置，取上清液，滤过，滤液浓缩；将上述浓缩液混合，即得。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，羚羊角或山羊角镑成丝，用含碱水溶液水解回流两次，合并两次滤液，浓缩；青礞石、石膏粉碎成粗粉，水加热煎煮两次，滤过，合并两次滤液，浓缩至75℃～85℃下相对密度为1.01～1.04；人工牛黄用70％乙醇回流提取两次，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇，浓缩至75℃～85℃下相对密度为1.02～1.05；其余药材，加水煎煮两次，滤过，合并两次滤液，浓缩至85℃下相对密度为1.10，离心，上清液加乙醇使沉淀，静置，取上清液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至85℃下相对密度为1.08；上述浓缩液混合，即得。
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