CN1698691A - 一种治疗肺热（毒）咳嗽的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管－支气管炎的药物，其主要是由马芷苋、金银花、车前草按一定重量配比制备而成。它可以被制备成任何一种常用内服剂型。本发明药物具有清热解毒，止咳祛痰的功能，治疗肺热(毒)咳嗽见效快，治愈率高。

Description

一种治疗肺热(毒)咳嗽的药物及其制备方法

本发明涉及一种治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎的药物(银马解毒颗粒)及其制备方法，属于中药领域。

肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎是一种常见的呼吸系统疾病，多由感染、物理化学刺激或过敏引起，是气管-支气管粘膜的急性炎症。常见于寒冷季节或气候突变之时，且常为某些传染病如麻疹、百日咳、白喉、伤寒等的早期表现。临床主要症状有咳嗽和咳痰。可发展为细支气管炎或支气管肺炎、或加重原有的呼吸系统疾病。如迁延不愈，日久可演变为慢性支气管炎。西医治疗止咳以内服咳必清、可待因为主。化痰以氯化铵；高热、痰成浓状，可适当使用抗菌药物，如：红霉素、麦迪霉素、青霉素、链霉素或庆大霉素。目前治疗这种疾病的中药以内服为主：风寒型治疗用疏风散寒、宣肺化痰法，方用杏苏散(杏仁、紫苏叶、前胡、桔梗、法半夏、陈皮、枳壳、茯苓、生姜、灸甘草)加减。恶寒重，咳喘痰多，加麻黄、细辛；风热型治疗用疏风清热，宣肺化痰法，方用桑菊饮(桑叶、菊花、杏仁、连翘、薄荷、桔梗、芦根、甘草)加减。痰稠难咳出，加冬瓜仁、瓜蒌、桑白皮；热甚加银花、连翘。尽管如此该中药制剂疗效仍不能令人满意。

肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎是我国乃至世界的性、多发性疾病，在城市尤为多见，虽然此病不是人类的头号疾病，但研究开发出低毒、高效、多功能的治疗药物，仍然十分必要。因此，人们对疗效更好的治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎的中药制剂仍存在需求。至今为止，还没有发现任何有关本发明药物组合物的报道。本发明人经反复研究，并通过动物和临床试验的反复验证，终于找到了有更好疗效的治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎的中药内服药物，从而完成了本发明。

本发明目的就是提供一种更为有效治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎的一种中药组合物。

本发明的另外一个目的是提供了该中药组合物的制备方法。

本发明药物选择生甘草、马芷苋、金银花、车前草、生大黄进行组合，将这些药物组合使得各药物功效产生协同作用，从而能够有效治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎。其中选用金银花是因为金银花性味甘寒，归肺心胃经，清热解毒，疏风散热。因能轻清宣散、善清肺(噍)之风热邪毒为主药，马齿苋：祛瘀消肿，凉血解毒，不但清血分热毒，而且能化热毒所致的瘀血痰结故为臣药。另因肺与大肠相表里，肺易移热于大肠而引起便结，用大黄泻热通便而解肺闭。另心属火，肺属金，且心与小肠相表里，用车前草利小便，导小肠热以防心火过盛，乘克肺金。故大黄，车前草为佐药。甘草缓和药性，以防上药攻伐太过，且有补脾益气作用，从而断了生痰之源，使咳喘自愈，以上诸药合用，起清热解毒，止咳祛痰的作用。

本发明药物组分的用量也是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量为在下述重量份范围都具有较好疗效：

生甘草0.5～5份、马芷苋3～5、金银花2～5、车前草3～10、生大黄1～10份。

优选为：生甘草5份、马芷苋5份、金银花5份、车前草5份、生大黄1份。

本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂。例如可以将这些原药材经水提醇沉制成颗粒剂冲服；可以将这些原药材水煎，然后浓缩水煎液按汤剂服用；也可探索制成其他制剂，但是为了使该药物的各原料更好地发挥药效，优选对上述五种原药材用正交试验法进行水提醇沉工艺的摸索，优选地，本发明药物活性组分的制备方法如下：

a.将所述重量配比的生甘草、马芷苋、金银花、车前草、生大黄5味药加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤得滤液。

b.滤液浓缩至相对密度为1.14~1.16(80℃)，冷却后加乙醇，使含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.38~1.40(80℃)的清膏，低温干燥，粉碎。

本发明的药物活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型，如丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液等。

本发明药物具有清热解毒，止咳祛痰等功能，用于治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎。

以下通过试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些试验例包括了本发明药物(银马解毒颗粒)的药效学试验和临床疗效观察试验。

[试验例1]本发明药物对肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎具有抗菌、抗病毒、镇咳、祛痰、抗炎、镇痛和免疫增强的治疗作用。

摘要：体外实验结果表明，银马解毒颗粒对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的最小抑制浓度(MIC)为8.0mg生药/ml；对志贺氏痢疾杆菌和不动杆菌的MIC为16.0mg生药/ml；对肠球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌和阴沟杆菌的MIC为32.0mg生药/ml；对流感病毒甲₃型(A₃)、乙型(B)、科萨奇B₅型(COXB₅)、B₆型肠道病毒(COXB₆)和呼吸道合胞病毒(RS)的MIC分别为0.279、0.558、0.558、0.586、0.558mg生药/ml，治疗指数(TI)分别为32，19，16，11，16。体内实验结果表明，银马解毒颗粒对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌感染小鼠和流感病毒性肺炎小鼠有明显的保护作用；并延长小白鼠咳嗽潜伏期、增加大白鼠排痰量、抑制小鼠耳廓炎症、抑制酵母诱发的大鼠关节肿胀、抑制小鼠肉芽组织的增生；提高小鼠热板痛阈和抑制小鼠的扭体反应、促进小鼠血清IgG抗体生成、提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。提示，银马解毒颗粒具有抗菌、抗病毒、镇咳、祛痰、抗炎、镇痛和免疫增强作用。

试验目的：考察本品对呼吸道感染常见的细菌、病毒的抑制作用和对动物模型的镇咳、祛痰、抗炎、解热、镇痛以及免疫功能调节作用，为临床合理用药提供参考。

受试药物：银马解毒颗粒，其功能主治为清热解毒，消肿散结，化痰止咳，用于肺热咳嗽之急性支气管炎和气管炎。本试验采用其无赋形剂的浸膏粉，每克干膏粉相当生药8.33克，批号：20030519，由广西强寿药业集团有限公司提供。临用时用水配制成所需浓度供试验用。

实验菌株：金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、表皮葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、肠球菌、肺炎克雷氏杆菌、绿脓杆菌、阴沟杆菌、大肠杆菌、不动杆菌，由广西医科大学第一附属医院检查科细菌室分离鉴定提供。

细胞和病毒：Hep-2细胞及流感病毒甲₃型(A₃)和乙型(B)、流感病毒肺应株FM₁、副流感病毒(HVJ)、腺病毒(ADA₃，ADA₇)、疱疹病毒(HSV-1、HSV-2)、科萨奇病毒(CoxsackieB₅，B₆)、呼吸道合胞病毒(RS)，均由中国预防医学科学院病毒学研究所提供。各种病毒经常规传代测定感染滴度后用于实验。

实验动物：wistar大鼠，体重180-220g，6-7周龄，普通级，合格证号：桂医动字11005；昆明小白鼠，体重18-22g，6-7周龄，普通级，桂医动字11004；豚鼠体重200-220g，广西中医学院实验动物室提供。

试验方法选择：本品功能主治为清热解毒，消肿散结，化痰止咳，用于肺热咳嗽之急性支气管炎和气管炎。根据本品功能主治选择呼吸道感染常见的细菌(金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、表皮葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、肠球菌、肺炎克雷氏杆菌、绿脓杆菌、阴沟杆菌、大肠杆菌、不动杆菌)和病毒(流感病毒甲₃型(A₃)和乙型(B)、流感病毒肺应株FM₁、副流感病毒(HVJ)、腺病毒(ADA₃，ADA₇)、疱疹病毒(HSV-1、HSV-2)、科萨奇病毒(CoxsackieB₅，B₆)、呼吸道合胞病毒(RS)分别作体内、体外抗菌和抗病毒试验观察其抗菌抗病毒作用；选用小鼠氨水引咳法观察其镇咳作用；用大鼠毛细管法观察其祛痰作用；用小鼠耳壳肿胀法和大鼠酵母性关节肿胀法观察其抗炎作用；用大鼠角叉菜胶法观察其解热作用；用小鼠扭体法和热板法观察其镇痛作用；用小鼠血清IgG和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定观察其对免疫功能调节作用。

动物给药后反应：在本试验剂量范围内，未见动物的毒副反应发生。

剂量设置和给药方法：银马解毒颗粒设三个剂量：10、20、40g药材/kg体重；给药途径与临床用药途径一致，即灌胃给药。

试验对照：设模型对照和阳性药对照(一个剂量)

试验方法与结果：

1抗菌试验

1.1体外抗菌试验  用试管二倍稀释法，菌液终浓度为10⁵cfu/ml。37℃培养18小时。观察银马解毒颗粒抑制细菌生长的最低浓度，即MIC。

结果，银马解毒颗粒对临床分离的10种致病菌均有一定的抑制作用，其中对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的MIC均为8.0mg生药/ml；对志贺氏痢疾杆菌和不动杆菌MIC均为16.0mg生药/ml；对肠球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌和阴沟杆菌MIC均为32.0mg生药/ml(表1)。

           表1  银马解毒颗粒对临床分离菌株的抗菌作用

实验菌种	MIC	MIC50	MIC90	MIC范围(mg/ml)
					金黄色葡萄球菌	8	8	32	8~32
表皮葡萄球菌	8	8	32	8~63
					肠球菌	32	32	63	32~250
绿脓杆菌	32	125	250	32~250
					大肠杆菌	32	63	125	32~125
福氏痢疾杆菌	32	63	125	32~125
					志贺氏痢疾杆菌	16	32	63	16~125
肺炎克雷伯氏杆菌	32	63	63	32~63
					阴沟杆菌	32	32	63	32~63
不动杆菌	16	16	32	16~63

1.2体内抗菌试验  采用金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，绿脓杆菌，大肠杆菌的临床菌株。将上述菌种少许菌苔，分别接种于2ml肉汤培养基中，37℃恒温箱中增菌6小时，分别取0.1ml菌液，转种至10ml培养基中培养18小时作为原菌液。用5％干酵母稀释原菌液后，测定100％最小致死量(MLD)，以此致死量作为感染菌量。每个菌种试验50只小鼠，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。设模型对照组、阳性药(庆大霉素)对照组和银马解毒颗粒三个剂量40、20、10g生药/kg组。腹腔注射菌液0.5ml/只感染后立即灌胃给药，每日两次，庆大霉素皮下注射36mg/kg/日，模型对照组给等体积生理盐水，连续给药观察7天内小鼠死亡数，并统计各组动物的死亡百分率。与模型对照组比较，用卡方法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒40、20、10g生药/kg对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌感染的小鼠保护率均分别为60％、50％、30％；但对绿脓杆菌和大肝杆菌感染的小鼠在本实验所用剂量下未见明显保护作用(表2)。

                  表2  银马解毒颗粒对细菌感染小鼠的保护作用

感染菌株及接种量	药物	剂量(g/kg)	动物数(只)	死亡动物数(只)	保护率(％)
						金黄色葡萄球菌6401	银马解毒颗粒	40	10	4	60*
20	10	5	50*
				10	10			7	30
庆大霉素	36mg	10	0							100**
				模型对照	0.5ml ns		10	10	0
		40	10							4	60*

表皮葡萄球菌62801		40	10	4	60*
						20	10	5	50*
		庆大霉素	36mg	10	0					100**
	模型对照					0.5ml ns	10	10	0
		绿脓杆菌62803	银马解毒颗粒	40	10					9	10
20	10					9	10
				10	10			10	0
庆大霉素	36mg					10	0			100**
			模型对照	0.5ml ns	10			10	0
						40	10			7	30
		20	10	7	30
						10	10	8	20
		庆大霉素	36mg	10	0					100**
	模型对照					0.5ml ns	10	10	0

注：与模型对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，下同。

2、抗病毒试验

2.1药物对实验用细胞毒性界限的测定将Hep-2细胞接种于96孔细胞培养板中，37℃，5％CO₂培养48h长成细胞单层，再将各药用Eagle’s液作倍比稀释，加入已换过液的细胞板中(每稀释3孔)，设正常细胞对照孔，置相同条件下继续培养，于第3天观察结果，以出现50％以上细胞病变作为毒性标准，找出亚毒性浓度(SC)，计算药物对细胞的50％毒性浓度(CC₅₀)。结果测得银马解毒颗粒的SC为4.463mg生药/ml，CC₅₀＝6.376mg生药/ml，阳性对照药感冒清热颗粒的SC为4.167mg/ml，CC₅₀＝5.953mg/ml。

2.2药物对病毒感染细胞的保护作用，以同样方法接种Hep-2细胞于细胞板中，48h后将SC以下不同稀释度的药物加到板孔细胞单层上，每稀释度加3孔，同时分别感染适当感染量(TCID₅₀)的各种病毒，同样置于37℃，5％CO₂中培养。第3天观察细胞病变(CPE)，按病变程度从重到轻分5级：“4”(75~100％)，“3”(50~75％)，“2”(25~50％)，“1”(＜25％)，“-”(无病变，细胞正常)。以“1”和“-”作为药物有效的界限，以“2”，“3”，“4”表示药物无抑制作用，即无效。以出现CPE在25％以下的试验孔为药物具有抑制细胞病变作用，找出最低抑制浓度(MIC)，求出50％有效浓度(EC₅₀)和治疗指数(TI＝CC₅₀/EC₅₀)。

结果，银马解毒颗粒对A₃、B、RS、COXB₅和COXB₆病毒感染细胞的EC₅₀分别为0.200、0.336、0.440、0.400和0.564；TI分别为32、19、16、16和11(表3)。提示，本品对流感病毒甲3型和乙型、科萨奇病毒和呼吸道合胞病毒均有抑制作用。

               表3  银马解毒颗粒对常见呼吸病毒的影响

病毒	感染量TCID50	银马解毒颗粒			感冒清热颗粒
								MIC	EC50	TI	MIC	EC50	TI
		A3	100	0.279	0.200	32	0.521							0.373	16
B	100							0.558	0.336	19	2.083	1.773	3.4
		HVJ	100	-	-	-	-							-	-
RS	100							0.558	0.440	16	1.042	0.620	10
		COXB5	100	0.558	0.400	16	4.167							2.488	2.4
COXB6	100							0.586	0.564	11	4.167	2.488	2.4
		ADA3	-	-	-	-	-							-	-
ADA7	-							-	-	-	-	-	-
		HSV-1	-	-	-	-	-							-	-
HSV-2	-							-	-	-	-	-	-

2.3对小鼠流感病毒性肺炎的保护作用  取昆明种小鼠50只，体重13~16g，随机分为5组，每组10只。设模型对照组、阳性药感冒清热颗粒对照组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。将各组小鼠以乙醚轻度麻醉，用15LD₅₀的流感病毒鼠肺适应株FM₁进行滴鼻感染。感染前一天开始给药，连续5天，感染后第4天将小鼠处死，称体重后，取肺称重，计算肺指数(100×肺重/体重)。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组的肺指数比模型对照组小，差异具有统计学意义。提示，本品对小鼠流感病毒性肺炎有保护作用(表4)。

        表4  银马解毒颗粒对小鼠流感病毒性肺炎的保护作用

组别	鼠数	剂量(g/kg)	肺指数
				模型对照	10		1.380±0.165
感冒清热颗粒	10	5.28	1.196±0.178*
				银马解毒颗粒	10	40	1.221±0.165*
银马解毒颗粒	10	20	1.218±0.228
				银马解毒颗粒	10	10	1.263±0.151

3、银马解毒颗粒镇咳作用采用小白鼠氨水引咳法。取5立升真空玻璃干燥器，打开盖上的活塞，通空气，容器底部放一培养皿，存放浓氨水。选取小鼠50只，体重18~22g，雌雄各半，随机分为5组。设模型对照组、阳性药复方甘草片组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。灌胃给药后1小时，将小鼠放入已存有0.5ml氨水容器中，观察记录15分钟内各组小鼠咳嗽潜伏期。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组小白鼠咳嗽潜伏期比模型对照组长，差异具有统计学意义，提示银马解毒颗粒有镇咳作用(表5)。

              表5  银马解毒颗粒组小鼠咳嗽潜伏期的影响

组别	动物数(只)	剂量(g/kg)	咳嗽潜伏期(秒)
				模型对照	10	-	143.2±20.0
复方甘草片	10	4	182.4±29.9*
				银马解毒颗粒	10	40	172.1±36.3*
银马解毒颗粒	10	20	160.8±34.5
				银马解毒颗粒	10	10	157.2±29.7

4、银马解毒颗粒祛痰作用采用毛细管法。取wistar大鼠50只，体重250~270g，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。设模型对照组、阳性药复方甘草片组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。用乌拉坦1g/kg腹腔麻醉，仰位固定，剪开颈中部皮肤，分离出气管，与甲状腺软骨下缘正中两软骨环之间，用尖锐针头扎一小孔，插入毛细管，使毛细管接触气管底部表面，借以吸取痰液。当毛细管痰液充满时，立即另换一根，以毛细管吸取痰液长度为评价药物的化痰指标。记录给药前两小时的正常分泌量，灌胃给药后继续收集两小时的分泌量。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组大鼠给药后排痰量比模型对照组多，差异具有统计学意义。提示，银马解毒颗粒有祛痰作用(表6)。

                          表6  银马解毒颗粒的祛痰作用

组别	动物数(只)	剂量g/kg	排痰量(cm)
					给药前	给药后
			对照	10			-	2.13±0.26	2.11±0.33
复方甘草片	10	4			2.19±0.24	2.55±0.28**
			银马解毒颗粒	10			40	2.11±0.23	2.45±0.37*
银马解毒颗粒	10	20			2.08±0.22	2.32±0.31
			银马解毒颗粒	10			10	2.08±0.23	2.17±0.24

5、银马解毒颗粒的抗炎作用

5.1对小鼠耳廓肿胀的影  响采用二甲苯诱发小鼠耳廓水肿法。取健康小鼠50只，随机分5组，每组10只。设模型对照组、阳性药阿斯匹林组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。每天给药一次，连续3天。末次给药1小时后，将二甲苯0.01ml涂于小鼠右耳，左耳作对照。涂二甲苯20分钟后，用直径0.8cm的圆形不锈钢冲子将左、右耳廓冲下，分别称重。以右、左耳重量差为肿胀程度。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组耳肿胀程度比模型对照组轻，差异具有统计学意义。提示，银马解毒颗粒有抗炎作用(表7)。

       表7  银马解毒颗粒对二甲苯诱发小白鼠耳廓炎症的影响

组别	动物数(只)	剂量(g/kg)	耳片重差(mg)
				模型对照	10		9.2±4.1
阿斯匹林	10	0.2	3.6±2.5**
				银马解毒颗粒	10	40	5.9±2.6*
银马解毒颗粒	10	20	6.5±3.9
				银马解毒颗粒	10	10	8.5±4.1

5.2对大鼠酵母性关节肿的影响  采用酵母致炎大鼠足趾浮肿法。取健康雄性wistar大鼠50只，体重180-200g，随机分5组，每组10只。设模型对照组、阳性药阿斯匹林组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。每天灌胃给药一次，连续5天。末次给药后1小时，将10％酵母上清液0.1ml皮下注射于大鼠右踝关节处，于不同时间用卡尺测量足趾厚度(mm)。以注射酵母前、后同侧足跖厚度之差作为关节肿胀程度的指标，于致炎后1、2、3小时各测一次。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组关节肿胀程度比模型对照组轻，差异具有统计学意义。提示，银马解毒颗粒有抗炎作用(表8)。

                  表8  银马解毒颗粒对大鼠酵母性关节肿的影响

组别	剂量(g/kg)	药前足趾厚度(mm)	药后足肿胀度(mm)
						1h	2h	3h
			模型对照		5.51±0.41				1.31±0.58	1.66±0.50	1.85±0.49
阿斯匹林	0.2	5.55±0.48				0.13±0.13**	0.21±0.24*8	0.37±0.25**
			银马解毒颗粒	40	5.59±0.38				0.83±0.42*	1.20±0.47*	1.47±0.43
银马解毒颗粒	20	5.45±0.35				1.24±0.48	1.68±0.34	1.72±0.36
			银马解毒颗粒	10	5.69±0.38				1.18±0.27	1.55±0.24	1.73±0.35

5.3对小鼠棉球肉芽肿的影响  取健康雄性小鼠50只，体重18-21g，随机分5组，每组10只。设模型对照组、阳性药地塞米松组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。灌胃给药3天后，于腋下植入一10mg无菌棉球，每天给药一次，连续10天。末次给药24小时后处死动物，剥取棉球肉芽组织，置80℃烤箱中，烘干1.5小时后取出，称重。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组肉芽重比模型对照组轻，差异具有统计学意义。提示，银马解毒颗粒有抗炎作用(表9)。

  表9  银马解毒颗粒对棉球肉芽肿的抑制作用

组别          动物数  剂量       肉芽重(mg)
	模型对照      10                 65.88±6.84地塞米松      10      2mg/kg     55.67±6.56**银马解毒颗粒  10      40g/kg     57.81±9.87*银马解毒颗粒  10      20g/kg     59.63±8.78银马解毒颗粒  10      10g/kg     63.67±6.92

6、银马解毒颗粒对免疫功能的影响

6.1对小鼠血清IgG含量的影响取小鼠50只，体重18-21g，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。设对照组、阳性药桂附地黄丸5g/kg组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。每天灌胃给药一次，连续7天。末次药后24小时，眼眶取血，用环状免疫单向扩散法测定血清IgG含量(mg/ml)。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组血清IgG水平比对照组高，差异具有统计学意义。提示，银马解毒颗粒有增强免疫功能作用(表10)。

        表10  银马解毒颗粒对小鼠血清IgG含量的影响

组别	动物数(只)	剂量(g/kg)	IgG含量
				对照	10		23.2±2.9
桂附地黄丸	10	5	26.9±3.8*
				银马解毒颗粒	10	40	26.3±3.6*
银马解毒颗粒	10	20	24.2±2.6
				银马解毒颗粒	10	10	24.9±1.3

6.2对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响  取小鼠50只，体重18-21g，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。设模型对照组、阳性药桂附地黄丸5g/kg组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。每天灌胃给药一次，连续7天。于给药后第3天，每只动物腹腔注射1％糖元1ml。药后第8天腹腔注射2％绵羊红细胞1ml，2小时后，将腹腔细胞洗出，用氯化铵溶液将巨噬细胞外的绵羊红细胞溶解，并洗出其释放的血红蛋白。计数巨噬细胞数后，调节其浓度为1×10⁶。取该细胞悬液1ml，加至24孔培养板中，37℃孵育1.5小时，然后洗去未贴壁的细胞，吸干洗后加入1ml无色孔雀绿溶液，置室温30分钟显色。无色孔雀绿与巨噬细胞内绵羊红细胞中的血红蛋白反应，生成兰色孔雀绿，其颜色深浅与血红蛋白浓度成正比。显色后每孔取200μl液体加至96孔板中，以620nm波长比色测定光密度。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组光密度值比模型对照组高，差异具有统计学意义。提示，银马解毒颗粒有增强巨噬细胞吞噬功能作用(表11)。

           表11  银马解毒颗粒对巨噬细胞吞噬功能的影响

组别	剂量(g/kg)	动物数(只)	光密度值
				模型对照		10	0.089±0.027
桂附地黄丸	5	10	0.120±0.026*
				银马解毒颗粒	40	10	0.115±0.028*
银马解毒颗粒	20	10	0.100±0.020
				银马解毒颗粒	10	10	0.099±0.031

7、对2，4-二硝基苯酚致热诱发大鼠体温升高的影响  选用正常大鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。设模型对照组、阳性药阿司匹林对照组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。每天灌胃给药一次，连续5天。末次给药后，用数字体温计测量肛温。然后，于每只大鼠皮下注射15mg/kg的2，4-二硝基苯酚致热，注射后1、2、3小时同法分别测定肛温一次。以致热后肛温减去致热前肛温的差值作为体温变化值(温差)。以温差作指标，与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组的温差比对照组的温差大，但组间差异无统计学意义。提示，本品对体温的影响不大(表12)。

                  表12  银马解毒颗粒对致热大鼠体温的影响

组别          剂量g/kg     药前体温       药后1h        药后2h       药后3h
	对照                       39.9±0.9      -0.1±0.4     -0.2±0.3    -0.6±1.1阿司匹林      0.2          39.6±0.8      -1.1±0.8**   -1.1±0.9*   -1.5±0.7*银马解毒颗粒  40           39.6±0.7      -0.5±0.5     -0.5±0.3    -0.5±0.4银马解毒颗粒  20           39.6±0.6      -0.1±0.2     -0.5±0.6    -0.5±0.6银马解毒颗粒  10           39.5±0.7      -0.2±0.6     -0.2±0.5    -0.3±0.6

8、镇痛实验

8.1对小鼠热板痛阈的影响：以小鼠自放在55℃热板上到出现舔后足的动作所经历的时间作为小鼠热板痛阈。从正常健康体重为18-20克的♀小鼠中，选取痛阈在10-30秒的小鼠50只。均匀随机分为5组，每组10只。设对照组、阿司匹林0.2g/kg组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。给药后60、90、120分钟分别测痛一次。以给药后痛阈减去给药前痛阈的差作为痛阈提高值。将各组痛阈提高值与对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。结果，银马解毒颗粒大剂量组的痛阈提高值明显高于对照组。组间差异具有统计学意义(表13)。提示本品有镇痛作用。

                  表13  银马解毒颗粒对小鼠热板痛阈的影响

组别            剂量     药前痛阈               药后痛阈提高值(秒)(秒)           60分          90分           120分
	对照                     17.87±3.59    0.24±1.19    0.80±2.22     2.73±1.89
阿司匹林        0.2g/kg  16.62±3.85    6.62±3.30**  5.53±4.85*    5.33±2.83*
	银马解毒颗粒    40g/kg   18.16±4.49    4.82±6.17*   4.62±4.46*    2.61±3.07
银马解毒颗粒    20g/kg   18.19±3.46    1.78±4.43    2.02±2.72     1.88±2.57
	银马解毒颗粒    10g/kg   17.14±2.87     2.57±4.62   2.36±2.44     1.13±1.78

8.2对小鼠扭体反应的影响  取小白鼠50只，体重18-21g，雌雄各半，随机分5组，每组10只。设对照组、阿司匹林0.2g/kg组、银马解毒颗粒40、20、10g/kg组。每天灌胃给药1次，连续4次。末次给药后1小时，腹腔注射0.9％醋酸生理盐水0.1ml/10g体重，观察注射醋酸后20分钟内小白鼠扭体次数。与模型对照组比较，用t值法检验组间差异的显著性。

结果，银马解毒颗粒组小白鼠扭体次数比模型对照组少，差异具有统计学意义(见表12)。提示，银马解毒颗粒有镇痛作用。

          表12  银马解毒颗粒对小白鼠扭体反应的影响

组别	剂量g/kg	动物数(只)	扭体次数
				对照组		10	28.9±4.0
阿斯匹林	0.2	10	8.5±2.1**
				银马解毒颗粒	40	10	24.7±4.8*
银马解毒颗粒	20	10	25.4±5.1
				银马解毒颗粒	10	10	25.0±5.0

结论：

体外实验结果表明，银马解毒颗粒对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的最小抑制浓度(MIC)为8.0mg生药/ml；对志贺氏痢疾杆菌和不动杆菌的MIC为16.0mg生药/ml；对肠球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌和阴沟杆菌的MIC为32.0mg生药/ml；对流感病毒甲₃型(A₃)、乙型(B)、科萨奇B₅型(COXB₅)、B₆型肠道病毒(COXB₆)和呼吸道合胞病毒(RS)的MIC分别为0.279、0.558、0.558、0.586、0.558mg生药/ml，治疗指数(TI)分别为32，19，16，11，16。体内实验结果表明，银马解毒颗粒对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌感染小鼠和流感病毒性肺炎小鼠有明显的保护作用；并延长小白鼠咳嗽潜伏期、增加大白鼠排痰量、抑制小鼠耳廓炎症、抑制酵母诱发的大鼠关节肿胀、抑制小鼠肉芽组织的增生；提高小鼠热板痛阈和抑制小鼠的扭体反应、促进小鼠血清IgG抗体生成、提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。提示，银马解毒颗粒具有抗菌、抗病毒、镇咳、祛痰、抗炎、镇痛和免疫增强作用，可用于肺热咳嗽之急性支气管炎和气管炎。

〔试验例2〕

                    银马解毒颗粒治疗咳嗽临床疗效总结

                     中国中医研究院西苑医院呼吸内科

1998年4月~1998年6月，我科应用银马解毒颗粒对咳嗽患者进行了临床疗效观察，总有效率为90.0％，总控显率为60％，经统计学处理治疗前后有非常显著性差异(P＜0.001)，现将其结果总结如下：

一、一般资料

1、病例来源，全部病例皆在病房观察

2、性别    男性16例      女性14例

3、年龄    最大者65岁    最小者16岁

4、病情    重者7例       轻者7例      中度者16例

二、病例选择

(一)西医病例诊断标准

1、急性气管炎，支气管炎

2、慢性气管炎，急性发作期

3、感冒以咳嗽为主者

(二)中医病例选择标准

中医病名根据“全国高等院校统一教材”咳嗽中的风热型列为观察范围。

证见：咳嗽频剧、气粗、咳声嘶哑、喉燥咽痛、咯痰不爽、痰粘稠或稠黄、咳时汗出、常伴口渴、头痛、恶风身热、舌见薄黄、脉浮数或滑。

三、治疗方法

银马解毒颗粒，开发冲服，一次1袋，一日3次，首日倍量。7天为一疗程，疗程结束后统计疗效。

四、疗效评定标准

(一)单项症状疗效判断标准

咳嗽  轻度(+)白天间断咳嗽，不影响正常生活工作          记1分

      中度(++)症状介于轻度及重度之间                   记3分

      重度(+++)昼夜咳嗽频繁或阵咳，影响工作或睡眠      记5分

咯痰  少(+)昼夜咯痰10-50ml或夜间及清晨咯痰5-25ml       记1分

      中度(++)昼夜咯痰51-100ml或夜间及清晨咯痰25-50m   记3分

      多(+++)昼夜咯痰100ml，或夜间及清晨咯痰50ml以上   记5分

(二)综合疗效判断

临床控制：咳嗽症状消失，或不足轻度者，症状治疗后改善在90％以上者。

显效：咳嗽症状明显好转，症状积分改善在70-90％之间。

有效：咳嗽症状有好转，症状积分改善在30-70％之间。

无效：咳嗽症状无好转或加重，症状积分改善＜30％者。

五、治疗结果

(一)总疗效

见表1

                          表1  治疗前后疗效比较表

例数   临    显    有    无    总有效率   总控显率   疗前积分   疗后积分   差值控    效    效    效    例(％)     例(％)     X±SD     X±SD     X±SD
	n＝30  4     14    9     3     27         18         9.767      3          6.8％     13.3  46.7  30.0  10.0  90.0       60.0       ±3.530    ±2.334    ±2.953

治疗前后积分比较t＝12.61 P＜0.001有非常显著性差异。

(二)两组主要症状治疗前后疗效分析  见表2

                   表2  两组主要症状疗效比较

症候  例数    临控  显效 有效 无效 有效率例  控显率例   差值 X±SD(n)     (例)  (例) (例) (例) (％)      (％)
	咳嗽  n＝30   4     9    13   4    26(86.67) 13(43.33)  2.067±1.187咳嗽  n＝28   5     5    14   4    24(85.71) 10(35.71)  1.589±1.123

咳嗽治疗前后比较  t＝9.539  P＜0.001

咳嗽治疗前后比较  t＝7.488  P＜0.001

(三)舌象比较  见表3

                             表3  治疗前后舌象分析表

舌质淡红 红  X2   P       复常率(例)	舌苔黄    白   X2     P        复常率(例)
		治疗前  1    29治疗    19   11  24.3 ＜0.001  62.1％(18)	29    110    20   26.45    ＜0.001  65.5％(19)

(四)脉象分析  表见表4

              表4  脉象分析表

滑数 浮滑 弦  细   X2    P         复常率(例)
	疗前  25   5疗后  11        9   10   27.8   P＜0.001  63.33％(19)

(五)治疗前后白细胞变化表比较  见表5

          表5  治疗前后白细胞比较表

正常   异常  X2   P         复常率(例)
	疗前   12     18疗后   24     6     10    ＜0.001   66.67％(12例)

(六)对肝肾功能及心电图的影响

在治疗前后皆进行了肝功能(GPT、GOT)肾功能(Bun)尿常规、心电图测定均未发现异常，说明银马解毒颗粒对肝肾功能及心血管系统无毒副作用。

六、总结

综上所述，通过临床观察，银马解毒颗粒治疗咳嗽的临床总疗效经统计学处理治疗前后积分比较t＝12.61、P＜0.001，有非常显著差异，其总有效率为90％，总控显率为60％，主要单项症状疗效，咳嗽症状治疗前后积分比较t＝9.539、P＜0.001，有非常显著性差异，其中总有效率为86.67％，控显率为43.33％，咯痰症状治疗前后积分比较t＝7.488、P＜0.001有非常显著差异，其中总有效率为85.71％，总控显率为35.71％。

随着病情的好转，治疗后舌质、舌苔、脉象及白细胞均有明显改善，其中舌质的复常率为62.1％，舌苔的复常率为66.62％，经统计学处理，治疗后均有显著性差异。

临床观察表明：银马解毒颗粒对肝肾功能、心脏等系统均无损害，少数病人服药后稍有恶心不适，不影响继续用药治疗，停药后自动消失。

〔实施例1〕本发明药物的颗粒剂制备

将生甘草5份、马芷苋5份、金银花5份、车前草5份、生大黄1份5味药材加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤得滤液。滤液浓缩至相对密度为1.14~1.16(80℃)，冷却后加乙醇，使含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.38~1.40(80℃)的清膏，低温干燥，得干膏，粉碎，加适量糊精，加入乙醇为黏合剂制粒，干燥，分装即得。

〔实施例2〕本发明药物的胶囊剂制备

将生甘草5份、马芷苋5份、金银花5份、车前草5份、生大黄1份5味药材加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤得滤液。滤液浓缩至相对密度为1.14~1.16(80℃)，冷却后加乙醇，使含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.38~1.40(80℃)的清膏，低温干燥，得干膏，粉碎，加适量赋形剂，装明胶硬胶囊即得。

Claims (5)

1、一种治疗肺热(毒)咳嗽即西医的急性气管-支气管炎的药物(银马解毒颗粒)，其特征在于它主要是由下列重量份的原药材制成：生甘草0.5～5份、马芷苋3～5份、金银花2～5份、车前草3～10份、生大黄1～10份。

2、根据权利要求1的药物，其中原药材优选的用量为：生甘草5份、马芷苋5份、金银花5份、车前草5份、生大黄1份。

3、权利要求1或2所述药物的制备方法，它包括下列步骤：

a)称取生甘草、马芷苋、金银花、车前草、生大黄原药材，备用。

b)将所述重量配比的生甘草、马芷苋、金银花、车前草、生大黄5味药材加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤得滤液。滤液浓缩至相对密度为1.14~1.16(80℃)，冷却后加乙醇，使含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，减压浓缩至相对密度1.38~1.40(80℃)的清膏，低温干燥，得干膏。

4、权利要求3所述药物的制备方法，制得的活性组分与颗粒剂常用辅料混合，制粒。

5、根据权利要求3所述的制备方法，其中在步骤b)中将药物加水煎煮提取时，第一次加水倍量，煎煮1.5小时，第一次加水倍量，煎煮1.5小时。