CN110869033B - 包含干细胞来源外排体作为有效成分的组合物用于抑制或减轻瘙痒的用途 - Google Patents
包含干细胞来源外排体作为有效成分的组合物用于抑制或减轻瘙痒的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110869033B CN110869033B CN201880042992.0A CN201880042992A CN110869033B CN 110869033 B CN110869033 B CN 110869033B CN 201880042992 A CN201880042992 A CN 201880042992A CN 110869033 B CN110869033 B CN 110869033B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- exosomes
- skin
- itch
- stem cells
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 title claims abstract description 199
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 title claims abstract description 153
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 64
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 230000007803 itching Effects 0.000 title claims description 44
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title abstract description 15
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 48
- 102100031294 Thymic stromal lymphopoietin Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 22
- 102100021596 Interleukin-31 Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 101710181613 Interleukin-31 Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 claims abstract description 7
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 105
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 claims description 40
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 35
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 34
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 34
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 31
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 claims description 29
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 16
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 12
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 9
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 7
- 108010029307 thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 claims description 7
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 6
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 5
- 230000005808 skin problem Effects 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 5
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 4
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 claims description 4
- NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N isobutane Chemical compound CC(C)C NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 4
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 4
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 4
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 3
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 claims description 3
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 claims description 3
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 3
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 claims description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 claims description 3
- OMDQUFIYNPYJFM-XKDAHURESA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-2-(hydroxymethyl)-6-[[(2r,3s,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-3-[(2s,3s,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]methoxy]oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O1 OMDQUFIYNPYJFM-XKDAHURESA-N 0.000 claims description 2
- LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N (2s,3s,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](OC3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 2
- 239000001884 Cassia gum Substances 0.000 claims description 2
- 229920000926 Galactomannan Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002581 Glucomannan Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 claims description 2
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N Lithium ion Chemical compound [Li+] HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920000161 Locust bean gum Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 2
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 claims description 2
- OJIJEKBXJYRIBZ-UHFFFAOYSA-N cadmium nickel Chemical compound [Ni].[Cd] OJIJEKBXJYRIBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 claims description 2
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 claims description 2
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019318 cassia gum Nutrition 0.000 claims description 2
- SZXQTJUDPRGNJN-UHFFFAOYSA-N dipropylene glycol Chemical compound OCCCOCCCO SZXQTJUDPRGNJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 claims description 2
- 229940046240 glucomannan Drugs 0.000 claims description 2
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 claims description 2
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 claims description 2
- 239000001282 iso-butane Substances 0.000 claims description 2
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910001416 lithium ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000010420 locust bean gum Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000711 locust bean gum Substances 0.000 claims description 2
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 2
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000001814 pectin Substances 0.000 claims description 2
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 claims description 2
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 claims description 2
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 claims description 2
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 claims description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims 4
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 claims 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract description 17
- 101000845170 Homo sapiens Thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 abstract description 16
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 10
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 35
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 20
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 14
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 12
- 229940062713 mite extract Drugs 0.000 description 12
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 11
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 11
- -1 shedding vesicles Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 8
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 8
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 7
- 206010016825 Flushing Diseases 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 7
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 102100025222 CD63 antigen Human genes 0.000 description 5
- 101000934368 Homo sapiens CD63 antigen Proteins 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 5
- 102100027221 CD81 antigen Human genes 0.000 description 4
- 101000914479 Homo sapiens CD81 antigen Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 208000017733 acquired polycythemia vera Diseases 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 4
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 4
- 208000037244 polycythemia vera Diseases 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 4
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 3
- 238000011194 good manufacturing practice Methods 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 230000035990 intercellular signaling Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 3
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 3
- 230000001314 paroxysmal effect Effects 0.000 description 3
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 3
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 3
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 3
- 230000036560 skin regeneration Effects 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 3
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 2
- 206010014190 Eczema asteatotic Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 2
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 2
- 208000015710 Iron-Deficiency Anemia Diseases 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037083 Prurigo Diseases 0.000 description 2
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 201000010618 Tinea cruris Diseases 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 2
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 2
- 239000003012 bilayer membrane Substances 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000001587 cholestatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000032459 dedifferentiation Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 2
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 2
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 235000021251 pulses Nutrition 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 2
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 1
- UYIFTLBWAOGQBI-BZDYCCQFSA-N Benzhormovarine Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](C2=CC=3)CC[C@]4([C@H]1CC[C@@H]4O)C)CC2=CC=3OC(=O)C1=CC=CC=C1 UYIFTLBWAOGQBI-BZDYCCQFSA-N 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 description 1
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101000738354 Homo sapiens CD9 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000586302 Homo sapiens Oncostatin-M-specific receptor subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 101000613251 Homo sapiens Tumor susceptibility gene 101 protein Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000006877 Insect Bites and Stings Diseases 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010022971 Iron Deficiencies Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- 102000001490 Opioid Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010093625 Opioid Peptides Proteins 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 1
- 108091036414 Polyinosinic:polycytidylic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102000003141 Tachykinin Human genes 0.000 description 1
- 208000024799 Thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 101150072278 Tslp gene Proteins 0.000 description 1
- 102100040879 Tumor susceptibility gene 101 protein Human genes 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000003470 adrenal cortex hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 239000012996 alamarblue reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N arachidonyl-2'-chloroethylamide Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)NCCCl SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003788 bath preparation Substances 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 210000003445 biliary tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 1
- ZREIPSZUJIFJNP-UHFFFAOYSA-K bismuth subsalicylate Chemical compound C1=CC=C2O[Bi](O)OC(=O)C2=C1 ZREIPSZUJIFJNP-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960000782 bismuth subsalicylate Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010495 camellia oil Substances 0.000 description 1
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 description 1
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000007870 cholestasis Effects 0.000 description 1
- 231100000359 cholestasis Toxicity 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000011035 continuous diafiltration Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000002951 depilatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 238000011036 discontinuous diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 229950002007 estradiol benzoate Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003090 exacerbative effect Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000005558 fluorometry Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000118 hair dye Substances 0.000 description 1
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000005722 itchiness Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000007443 liposuction Methods 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940057948 magnesium stearate Drugs 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940042472 mineral oil Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000003399 opiate peptide Substances 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 230000037368 penetrate the skin Effects 0.000 description 1
- 230000007903 penetration ability Effects 0.000 description 1
- 231100000435 percutaneous penetration Toxicity 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 238000001126 phototherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 229960004063 propylene glycol Drugs 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000013469 resistive pulse sensing Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 1
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 1
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 1
- JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1[N+](C=2C=CC(I)=CC=2)=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=N1 JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 108060008037 tachykinin Proteins 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229940033134 talc Drugs 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 210000001103 thalamus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 208000021510 thyroid gland disease Diseases 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0002—Galenical forms characterised by the drug release technique; Application systems commanded by energy
- A61K9/0009—Galenical forms characterised by the drug release technique; Application systems commanded by energy involving or responsive to electricity, magnetism or acoustic waves; Galenical aspects of sonophoresis, iontophoresis, electroporation or electroosmosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N1/00—Electrotherapy; Circuits therefor
- A61N1/02—Details
- A61N1/04—Electrodes
- A61N1/0404—Electrodes for external use
- A61N1/0408—Use-related aspects
- A61N1/0428—Specially adapted for iontophoresis, e.g. AC, DC or including drug reservoirs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N1/00—Electrotherapy; Circuits therefor
- A61N1/18—Applying electric currents by contact electrodes
- A61N1/32—Applying electric currents by contact electrodes alternating or intermittent currents
- A61N1/325—Applying electric currents by contact electrodes alternating or intermittent currents for iontophoresis, i.e. transfer of media in ionic state by an electromotoric force into the body
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/04—Antipruritics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Birds (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的包含干细胞来源外排体作为有效成分的组合物。由于作用于引起瘙痒的多种细胞因子靶标(例如IL‑4、IL‑31和TSLP),本发明组合物可应用于多种原因导致的广谱的瘙痒,并且可有效地抑制和减轻瘙痒。另外,当直接施加至人皮肤时,本发明的组合物可显著地改善瘙痒相关的临床指标和红斑。因此,本发明的组合物可用作用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的药物组合物、皮肤外用剂和化妆品组合物。
Description
技术领域
本发明涉及包含干细胞来源外排体作为活性成分的组合物用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒(pruritus)的用途。
此外,本发明涉及用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的包含干细胞来源外排体的药物组合物、皮肤外用制剂和化妆品组合物。
另外,本发明涉及能够获得大量干细胞来源外排体的临床上和商业上相关的技术,所述外排体在临床上可用于预防、抑制、减轻、改善和治疗瘙痒并且具有高纯度和均一的颗粒尺寸分布,其中所述技术可以以低成本大量提供包含所获得的具有优异功能活性的干细胞来源外排体作为活性成分的组合物。
背景技术
发痒或瘙痒是症状,其特征在于发痒本身被认为是疾病。瘙痒是出现在多种病症和障碍中的令人不愉快的症状。特别地,其是可常见于皮肤疾病和全身性疾病的症状。瘙痒是在伴有疼痛的大多数皮肤疾病中经常发生的感觉,并且在临床上被定义为引发抓挠或摩擦皮肤之欲望的不愉快感觉。
由于瘙痒而抓挠皮肤引起伤口并导致细菌感染和炎症。由于这样的细菌感染和炎症,免疫细胞(例如T细胞和巨噬细胞)被激活并分泌多种细胞因子,因而使瘙痒进一步恶化。患有瘙痒的患者有意识或无意识地抓挠受影响区域。当受影响区域被严重抓挠或摩擦时,抓痕可能仍然严重,或者可出现多种副作用,例如红斑、裂纹、溃疡、荨麻疹或色素沉着。
瘙痒的已知原因包括皮肤病学原因、全身性原因、神经性原因和精神性原因。另外,瘙痒可由多种刺激(包括物理、机械、化学或生物学因素)引起或恶化。例如,瘙痒可由以下引起:环境触发,包括气候、颗粒物、洗涤剂、真菌或细菌性皮肤感染、昆虫叮咬和身体侵入物;疾病,包括糖尿病、尿毒症、胆道闭锁、恶性肿瘤、肝病、肾衰竭、肾透析、痛风、甲状腺病、血液病、铁缺乏、妄想性寄生虫病、真性红细胞增多症(polycythemia rubra vera)、胆汁淤积和霍奇金病(Hodgkin′s disease);妊娠、药物或精神性因素。认为出现发痒感觉是因为发痒刺激物作用于表皮-真皮界面处存在的多刺激响应神经末梢(发痒受体),并且产生的冲动按顺序到达脊髓丘脑、丘脑和大脑皮层(Miyachi Yoshiki,Approach to theTreatment of Skin Pruritus,p.22,1996,Sendan Igakusha)。
瘙痒按原因分类为:1)阵发性发生的阵发性瘙痒;2)皮肤瘙痒,包括冬季瘙痒、谷道痒(肛门瘙痒)、阴痒(外阴发痒)、股痒(股癣)、水源性瘙痒和头皮瘙痒;3)与内科疾病相关的瘙痒,包括胆汁淤积性瘙痒、慢性肾衰竭、恶性肿瘤、缺铁性贫血、真性红细胞增多症、甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退、糖尿病和获得性免疫缺陷综合征;4)与精神性皮肤病症相关的瘙痒,包括慢性单纯性苔癣、痒疹、拔毛症、神经性抓痕、影响皮肤的行为障碍和妄想性寄生虫病;以及5)与流感等相关的鼻瘙痒和喉咙痒、与眼病(例如结膜炎)相关的眼部瘙痒、与牙病相关的口腔瘙痒等。
根据迄今为止报道的研究结果,已知瘙痒介质在多种皮肤疾病中引起瘙痒。特别地,已知从免疫细胞(T细胞、巨噬细胞等)分泌的多种细胞因子(IL-4、IL-13、IL-31等)和组胺引起瘙痒。另外,近年来,已知TSLP(胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromallymphopoietin))与皮炎的严重程度相关并引起发痒症状(Wilson SR et al.,Theepithelial cell-derived atopic dermatitis cytokine TSLP activates neurons toinduce itch.Cell.2013;155(2):285-95)。
根据国家医疗信息卫生信息门户(http://health.mw.go.kr),已知诱导瘙痒的介质包括组胺、血清素、前列腺素E、速激肽、细胞因子、蛋白酶、阿片样肽、血小板活化因子等。
在诱导瘙痒的物质中,细胞因子是由所有类型的真核细胞产生的低分子量蛋白质,其与细胞表面受体相互作用,并且包括白介素、趋化因子、干扰素等。其中,IL-4、IL-13、IL-31、TSLP等已知为诱导瘙痒的代表性细胞因子。
作为迄今为止已报道的针对瘙痒的治疗,有多种治疗,包括抗组胺剂、类固醇、抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂、麻醉剂、益生菌、免疫抑制剂、光疗等。然而,这些治疗存在的问题在于它们具有暂时或有限的治疗作用,并且显示出取决于瘙痒种类的特异性。另外,肾上腺皮质激素和皮质类固醇存在的问题在于由于其副作用它们应仅在急性或严重的情况下短时间内使用。
鉴于这些问题,已积极进行了使用天然物质来抑制或减轻瘙痒的研究。在基于这些天然物质的用于抑制或减轻瘙痒的组合物的情况下,天然提取物中活性成分的含量低,并因此需要使用大量的天然提取物来获得抑制或减轻瘙痒的作用。在大多数情况下,在营销中已强调了这些组合物是基于天然物质的事实,但是需要对天然物质在抑制或减轻瘙痒中的实际作用进行更多的科学研究。
同时,已提出了用于使用干细胞改善或治疗皮肤状况或疾病的方法。胚胎干细胞或胎儿组织来源干细胞具有优异的分化能力和优异的再生和治疗能力,并且引起较少的排斥,但是由于伦理问题和潜在的肿瘤形成风险,这些干细胞在临床上不适用。作为对其的替代,已提出了用于使用成体干细胞改善或治疗皮肤状况或疾病的方法。然而,使用同种异体成体干细胞(不是患者的自体成体干细胞)可造成引起移植物抗宿主病的风险。当自体成体干细胞用于治疗时,产生了问题:必需进行培养从患者分离的成体干细胞的过程,这是复杂且昂贵的。
近年来,鉴于干细胞的上述问题,已作出尝试使用通过培养成体干细胞而获得的条件培养基来改善或治疗皮肤状况或疾病。然而,成体干细胞的条件培养基不仅包含由成体干细胞分泌的多种蛋白质、细胞因子和生长因子,还包含例如在细胞生长期间分泌的废物、为防止污染而添加的抗生素、动物来源的血清等组分。因此,当将条件培养基用于皮肤上时,皮肤极有可能暴露于多种风险。
最近,有报道称细胞分泌组(secretome)包含调节细胞行为的多种生物活性分子。特别地,细胞分泌组包含具有细胞间信号传导功能的“外排体(exosome)”,并因此已积极地对其组分和功能进行了研究。
细胞向其细胞外环境脱落多种膜囊泡,并且这些释放的囊泡通常称为细胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)。细胞外囊泡也被称为细胞膜来源囊泡、核外颗粒体、脱落囊泡、微粒、外排体等,并且在一些情况下也与外排体区别使用。
外排体是尺寸为数十至数百纳米的囊泡,其由具有与细胞膜相同结构的磷脂双层膜组成。该外排体包含被称为外排体载物(cargo)的蛋白质、核酸(mRNA、miRNA等)等。已知外排体的载物包括范围广泛的信号传导因子,并且这些信号传导因子对细胞类型具有特异性并且根据分泌细胞的环境而受到不同地调节。已知外排体是由细胞分泌的细胞间信号传导介质,并且通过其传输的多种细胞信号调节细胞行为,包括靶细胞的活化、生长、迁移、分化、去分化、凋亡和坏死。根据外排体来源的细胞的性质和状态,外排体包含特定的遗传物质和生物活性因子。来源于增殖干细胞的外排体调节细胞行为,例如细胞迁移、增殖和分化,并概括参与组织再生的干细胞的特征(Nature Review Immunology 2002(2)569-579)。
然而,尽管已进行了表明使用外排体来治疗一些疾病的可能性的多种研究,但需要更详细的临床和非临床研究,而且特别地,需要开发使用外排体的技术,所述技术可通过科学地确定外排体所作用的多种靶标而应用于多种疾病的治疗。
本发明人已致力于开发用于抑制和减轻瘙痒的组合物,所述组合物优于有关瘙痒已知的常规治疗剂并且比其更安全。因此,本发明人对来源于干细胞的外排体的新用途进行了大量的研究,并且作为结果,已发现从干细胞的条件培养基分离的外排体可解决如上所述的干细胞本身或条件培养基的安全问题,并且对预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒是有效的,从而完成了本发明。
同时,应当理解的是,被描述为背景技术的内容仅旨在帮助理解本发明的背景,并不被认为是针对本发明的现有技术。
发明概述
本发明的一个目的是提供包含干细胞来源外排体作为活性成分的组合物用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的用途。
本发明的另一个目的是提供用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的包含干细胞来源外排体的药物组合物、皮肤外用制剂和化妆品组合物。
本发明的另一个目的是获得大量具有高纯度和均一颗粒尺寸分布的干细胞来源外排体,并提供包含所获得的具有优异功能活性的干细胞来源外排体作为活性成分的组合物。
本发明的另一个目的是提供使用所述组合物来预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的方法。
本发明的又一个目的是提供用于通过使用所述组合物除治疗目的之外调节哺乳动物皮肤状况的美容方法。
然而,如上所述的本发明目的是举例说明性的并且本发明的范围不限于此。另外,通过以下描述、所附权利要求书和附图,本发明的其他目的和优点将更加明显。
发明详述
为了实现以上目的,本发明提供了用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的组合物,其包含干细胞来源外排体作为活性成分。
本发明还提供了能够获得大量干细胞来源外排体的临床上和商业上相关的新技术,所述外排体在临床上可用于预防、抑制、减轻、改善和治疗瘙痒并且具有高纯度和均一颗粒尺寸分布,其中所述技术可以以低成本大量提供包含所获得的具有优异功能活性的干细胞来源外排体作为活性成分的组合物。
本文中使用的术语“外排体”是指尺寸为数十至数百纳米(优选地,约30至200nm)的囊泡,其由具有与细胞膜相同结构的磷脂双层膜组成(然而,根据分离出外排体的细胞的类型、分离方法和测量方法,外排体的颗粒尺寸是可变的)(Vasiliy S.Chernyshev etal.,“Size and shape characterization of hydrated and desiccated exosomes”,Anal Bioanal Chem,(2015)DOI 10.1007/s00216-015-8535-3)。这些外排体包含被称为外排体载物的蛋白质、核酸(mRNA、miRNA等)等。已知外排体的载物包括范围广泛的信号传导因子,并且这些信号传导因子对细胞类型具有特异性并且根据分泌细胞的环境而受到不同地调节。已知外排体是由细胞分泌的细胞间信号传导介质,并且通过其传输的多种细胞信号调节细胞行为,包括靶细胞的活化、生长、迁移、分化、去分化、凋亡和坏死。
本文中使用的术语“发痒”或“瘙痒”没有特别限制。瘙痒的一些实例包括阵发性瘙痒、冬季瘙痒、谷道痒(肛门瘙痒)、阴痒(外阴发痒)、股痒(股癣)、水源性瘙痒、头皮瘙痒、鼻瘙痒、喉咙痒、口腔瘙痒和眼部瘙痒;与内科疾病相关的瘙痒,包括胆汁淤积性瘙痒、慢性肾衰竭、恶性肿瘤、缺铁性贫血、真性红细胞增多症、甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退、糖尿病和获得性免疫缺陷综合征;以及与精神性皮肤病症相关的瘙痒,包括慢性单纯性苔癣、痒疹、拔毛症、神经性抓痕、影响皮肤的行为障碍和妄想性寄生虫病。然而,应当理解的是,本发明并不排除除以上列出的瘙痒之外的多种原因的瘙痒。例如,本发明可包括本领域中所有已知的瘙痒,例如皮肤病学原因、全身性原因、神经性原因和精神性原因的瘙痒。
本文中使用的术语“离子透入”是指使微电流流过已施加活性成分的皮肤,从而产生电位差并改变皮肤的电环境,并因此允许电离的活性成分通过电斥力穿透皮肤的方法。在本发明的一个实施方案中使用的离子透入的一些实例包括:通过允许微电流从外部电源流入到皮肤上的电极贴片而将微电流引入到皮肤中的方法,所述微电流由外部电源产生;将微电流引入到皮肤中的方法,所述微电流由在皮肤上的电极贴片中提供的电池产生;以及通过在皮肤上的具有反向电渗析装置的贴片将微电流引入到皮肤中的方法,所述微电流由反向电渗析装置中高浓度电解质溶液与低浓度电解质溶液之间的浓度差产生。然而,本发明不限于此,并且当然可使用多种类型的离子透入。
同时,报道了干细胞来源外排体对皱纹改善和皮肤再生的有限作用。然而,在该常规技术中使用外排体的皮肤再生并不旨在预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒,而是旨在通过使皮肤组织再生来改善皱纹或恢复皮肤弹性。另外,已尝试使用干细胞、干细胞的条件培养基等来再生皮肤的真皮层用于使伤口愈合,以及使皮肤组织再生用于改善皮肤弹性。然而,从来不知道使用从干细胞的条件培养基分离和纯化的外排体对于如上所述限定的“预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒”是有效的。
到目前为止,尚未开发出使得可在临床上应用外排体用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的治疗剂,其中所述外排体是从在培养可大量培养的干细胞之后获得的干细胞的条件培养基中经济地大量分离和纯化的。例如,可通过简单的操作(例如吸脂)大量获得脂肪来源干细胞。脂肪具有的干细胞是骨髓、脐带或脐带血具有的干细胞的约40倍高。因此,这些脂肪来源干细胞具有最低的商业成本并且以大量获得。然而,由于脂肪包含大量杂质(例如细胞碎片、废物、蛋白质和大颗粒),因此难以从脂肪来源干细胞的条件培养基中经济地分离具有高纯度和均一的颗粒尺寸分布的大量外排体。因此,显示出,在经济性方面,从干细胞的条件培养基中分离具有高纯度和均一的颗粒尺寸分布的大量外排体存在技术障碍。
当本发明的组合物用作药物组合物、皮肤外用制剂或化妆品组合物时,所述组合物中包含的作为活性成分的干细胞来源外排体对预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒表现出显著作用,并且可克服干细胞本身或干细胞的条件培养基的安全问题。因此,根据本发明用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的组合物中所包含的干细胞来源外排体通过与常规技术中已知的有限的皱纹改善和皮肤再生机制完全不同的机制来预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒,并且应当理解的是,这种作用根本不能够从常规技术中预测。
根据本发明一个实施方案的用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的组合物包含干细胞来源外排体作为活性成分。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,外排体可通过进行以下步骤获得:(a)向干细胞的条件培养基添加海藻糖;(b)过滤已向其添加了海藻糖的所述条件培养基;(c)通过切向流过滤(tangential flow filtration,TFF)从经过滤条件培养基分离外排体;以及(d)将海藻糖添加至用于渗滤的缓冲液,并使用已向其添加了海藻糖的缓冲液通过TFF对所分离的外排体进行渗滤。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,当在步骤(d)中将海藻糖添加至用于渗滤的缓冲液时,可有效获得具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的外排体(参见图6A至6E)。
同时,在本发明中,海藻糖用于将外排体与杂质(例如细胞碎片、废物、蛋白质和大颗粒)有效地区别开。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,渗滤可连续或不连续地进行。渗滤可使用具有至少4倍、优选至少6至10倍、更优选至少12倍体积的分离的外排体的缓冲液来进行。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,可使用0.05μm过滤器或者具有100,000Da(道尔顿)、300,000Da、500,000Da或750,000Da的截留分子量(molecular weightcutoff,MWCO)的TFF过滤器来进行TFF。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,步骤(c)还可包括通过TFF将所分离的外排体浓缩至1/100至1/25的体积。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,可在TFF之前对经过滤条件培养基进行声处理。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,外排体可降低皮肤组织或皮肤细胞中IL-4、IL-31和TSLP的表达水平。
在根据本发明一个实施方案的组合物中,干细胞的类型没有特别限制,但是干细胞可优选地为间充质干细胞,例如,来源于脂肪、骨髓、脐带或脐带血的干细胞,更优选脂肪来源干细胞。对脂肪来源干细胞没有特别限制,只要其不造成感染病原体的风险并且不引起免疫排斥即可,但是其优选地为人脂肪来源干细胞。
根据本发明的组合物可有效地用于预防、抑制、减轻、改善或治疗由如上所列出的多种因素引起的瘙痒。
根据本发明一个实施方案的组合物可制备成药物组合物。当根据本发明一个实施方案的组合物制备成药物组合物时,根据本发明一个实施方案的组合物可以是用于经口或肠胃外施用的任何制剂。
根据本发明一个实施方案的药物组合物可包含根据常规方法的可药用载体、赋形剂或稀释剂。所述载体、赋形剂和稀释剂包括但不限于:乳糖、右旋糖、海藻糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、藻酸类、明胶、磷酸钙、碳酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯酸甲酯、羟基苯酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。为了使用,根据本发明一个实施方案的药物组合物可配制成经口剂型(例如散剂、丸剂、片剂、胶囊剂、混悬液、乳液、糖浆剂、颗粒剂、酏剂、气雾剂等)、皮肤外用制剂、栓剂、或无菌注射溶液剂。
根据本发明一个实施方案的药物组合物的施用意指通过任何适当的方法将期望的物质引入到患者中,并且药物组合物可通过任何一般途径来施用,只要物质可到达靶组织即可。例如,根据本发明一个实施方案的药物组合物可经口或肠胃外施用。肠胃外施用的途径可包括经皮施用、腹膜内施用、静脉内施用、动脉内施用、肌内施用、皮下施用、皮内施用、表面(topical)施用、直肠内施用等。然而,本发明的范围不限于此,并且不排除本领域中已知的多种施用方法。此外,根据一个实施方案的药物组合物可通过任何装置来施用,通过该装置可将活性成分递送到靶组织或细胞中。另外,根据本发明一个实施方案的药物组合物的有效量意指为了达到治疗疾病的作用而需要施用的量。
根据本发明药物组合物的用于肠胃外施用的制剂可以是无菌水溶液、非水溶液、混悬液、乳液、冻干制剂或栓剂。根据本发明一个实施方案的药物组合物的用于肠胃外施用的制剂还可制备成可注射制剂。根据本发明一个实施方案的可注射制剂可以是水性可注射制剂、非水性可注射制剂、水性混悬液注射剂、非水性混悬液注射剂、在溶解或混悬之后使用的固体可注射制剂等,但不限于此。根据本发明一个实施方案的可注射制剂根据其类型还可包含以下的至少一种:注射用蒸馏水、植物油(例如,花生油、芝麻油、山茶油等)、甘油单酯、甘油二酯、丙二醇、樟脑、苯甲酸雌二醇、次水杨酸铋、砷酚胺钠、硫酸链霉素,并且还可任选地包含稳定剂或防腐剂。
在制剂中根据一个实施方案的药物组合物的含量可根据如上所述的另外的组分的种类、量、形式等适当地选择。例如,基于可注射制剂的总重量,本发明的药物组合物可以以约0.1至99wt%、优选约10至90wt%的量被包含在内。此外,根据本发明一个实施方案的药物组合物的合适剂量可根据患者的疾病的种类,疾病的严重程度,制剂的类型,配制方法,患者的年龄、性别、体重、健康状况、饮食、排泄率,施用时期和施用方案进行调整。例如,当将根据本发明一个实施方案的药物组合物施用于成人时,可以以每天0.001mg/kg至100mg/kg的剂量施用一次至数次。
同时,当将根据本发明一个实施方案的组合物制备成皮肤外用制剂和/或化妆品组合物时,在不损害本发明效果的范围内,根据需要其可适当地包含化妆品产品或皮肤外用制剂中通常使用的组分,例如,保湿剂、抗氧化剂、油性组分、UV吸收剂、乳化剂、表面活性剂、增稠剂、醇、粉组分、着色剂、水性组分、水、以及多种皮肤营养素等。
此外,在不损害干细胞来源外排体的作用(即预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的作用)的范围内,除干细胞来源外排体之外,根据本发明一个实施方案的皮肤外用制剂还可包含本领域中使用的瘙痒治疗剂和/或保湿剂。例如,本发明的外排体可包含在以下的至少一种中或与以下的至少一种混合:水凝胶、透明质酸、透明质酸的盐(例如,透明质酸钠等)或透明质酸凝胶在根据本发明一个实施方案的皮肤外用制剂中,水凝胶的种类没有特别限制,但是水凝胶可优选地通过将胶凝聚合物分散在多元醇中来获得。胶凝聚合物可以是选自以下的至少一种:普朗尼克、纯化琼脂、琼脂糖、结冷胶、藻酸、卡拉胶、肉桂胶、黄原胶、半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、果胶、纤维素、瓜尔胶和槐豆胶,并且多元醇可以是选自以下的至少一种:乙二醇、丙二醇、1,3-丁二醇、异丁二醇、二丙二醇、山梨糖醇、木糖醇和甘油。
根据本发明一个实施方案的皮肤外用制剂和/或化妆品组合物可以以多种形式使用,例如,贴片片装面膜面膜巾霜活肤水软膏混悬液乳液糊剂化妆水凝胶剂油剂剥撕式面膜喷雾剂气雾剂雾剂粉底粉和油纸例如,皮肤外用制剂和/或化妆品组合物可被施加至贴片、片装面膜或面膜巾的至少一个表面或浸透在所述贴片、片装面膜或面膜巾的至少一个表面中。
当将根据本发明一个实施方案的皮肤外用制剂制备成化妆品组合物时,其用于预防、抑制、减轻或改善瘙痒的目的,并且所述化妆品组合物可制备成本领域中通常制备的任何制剂。例如,其可配制成:贴片、片装面膜、面膜巾、皮肤软化剂、营养品、收敛化妆水、滋养霜、按摩霜、眼霜、清洁霜、精华、眼部精华、清洁化妆水、清洁泡沫、清洁水、防晒霜、唇膏、肥皂、洗发香波、含表面活性剂的清洁剂、浴用配制品、身体洗剂、身体霜、身体油、身体精华、身体清洁剂、染发剂、生发剂等,但不限于此。
根据本发明一个实施方案的皮肤外用制剂和/或化妆品组合物包含通常在皮肤外用制剂和/或化妆品产品中使用的组分。例如,皮肤外用制剂和/或化妆品组合物可包含常规的辅料和载体,例如抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、色素和香料。另外,根据皮肤外用制剂和/或化妆品组合物的类型或预期用途,本领域技术人员可毫无困难地适当选择皮肤外用制剂和/或化妆品组合物的每种制剂中的其他组分。
本发明的另一个实施方案提供了用于通过使用所述化妆品组合物除治疗目的之外调节哺乳动物皮肤状况的美容方法。在本发明的美容方法中,调节皮肤状况意味着改善皮肤状况和/或预防性地调节皮肤状况,并且改善皮肤状况意味着皮肤组织的外观和感觉发生视觉上和/或触觉上可感知的积极变化。
根据本发明一个实施方案的美容方法包括:(a)直接将化妆品组合物施加至哺乳动物皮肤;或者(b)使贴片、片装面膜或面膜巾与所述哺乳动物皮肤接触或附着在所述哺乳动物皮肤上,所述贴片、片装面膜或面膜巾具有向其施加的或浸透在其中的所述化妆品组合物;或者依次进行(a)和(b)。
根据本发明一个实施方案的美容方法还可包括通过允许微电流流过哺乳动物皮肤来进行离子透入,所述哺乳动物皮肤具有向其施加的所述化妆品组合物。另外,根据本发明一个实施方案的美容方法还可包括使离子透入装置与哺乳动物皮肤接触或附着在所述哺乳动物皮肤上。
在根据本发明一个实施方案的美容方法中,离子透入装置可包含选自以下的至少一种电池:柔性电池、锂离子二次电池、碱性电池、干电池、汞电池、锂电池、镍-镉电池和反向电渗析电池,或者可包含具有所述至少一种电池的贴片、片装面膜或面膜巾。
本发明的另一个实施方案提供了用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的方法,所述方法包括向哺乳动物施用治疗有效量的药物组合物。
在根据本发明的用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的方法中,哺乳动物可以是人、狗、猫、啮齿动物、马、牛、猴或猪。
有益效果
如上所述,本发明的组合物可针对诱导瘙痒的多种细胞因子靶标(例如IL-4、IL-31和TSLP)发挥作用,并因此可广泛地应用针对由多种因素引起的瘙痒,并且可有效地抑制和减轻瘙痒。另外,当将本发明的组合物直接施加至人皮肤时,其可显著改善与瘙痒相关的临床评分、红斑等。因此,本发明的组合物可用作用于预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的药物组合物、皮肤外用制剂和化妆品组合物。
另外,根据本发明,可以以低成本大量获得具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的干细胞来源外排体。因此,本发明可以以低成本大量提供包含具有优异功能活性的干细胞来源外排体作为活性成分的组合物。此外,本发明使得按比例扩大(scale-up)过程成为可能,并且还适合于药品生产质量管理规范(good manufacturing practice,GMP)。
应当理解的是,本发明的范围不限于前述效果。
附图简述
图1是举例说明根据本发明一个实施方案在由干细胞培养基制备外排体的方法中分离和纯化外排体的方法的流程图。
图2示出了测量根据本发明的一个实施方案在由干细胞培养基制备外排体的每个步骤中溶液中包含的蛋白质的相对量的结果。每个步骤中蛋白质的相对量表示为每个步骤的溶液中蛋白质的总量与干细胞的条件培养基中蛋白质的总量的相对比例。所示实验结果是分别从两个不同批次获得的结果。
图3示出了测量根据本发明的一个实施方案获得的外排体的生产率和纯度的结果。将外排体的生产率作为每mL干细胞条件培养基(CM)所获得的外排体颗粒数目进行计算,并且将外排体的纯度作为最终级分中包含的每μg蛋白质的外排体颗粒数目进行计算。所示实验结果是分别从五个不同批次获得的结果。
图4A至4E示出了分析根据本发明的一个实施方案获得的外排体的物理特性的结果。“图4A”示出了通过可调电阻脉冲传感(tunable resistive pulse sensing,TRPS)分析获得的颗粒的颗粒尺寸分布和数目。“图4B”示出了通过纳米颗粒追踪分析(nanoparticletracking analysis,NTA)获得的颗粒的颗粒尺寸分布和数目。“图4C”示出了通过透射电子显微术(transmitted electron microscopy,TEM)分析获得的不同放大率的颗粒图像。“图4D”示出了根据本发明的一个实施方案获得的外排体的蛋白质印迹分析的结果。“图4E”示出了在对根据本发明的一个实施方案获得的外排体的标志物的分析中CD63和CD81的流式细胞术的结果。
图5A至5C示出了颗粒尺寸分布的NTA分析的结果,其表明通过添加海藻糖获得了具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的外排体。随着添加的海藻糖的量提高,可获得具有单峰的颗粒尺寸分布。
图6A至6C示出了NTA分析的结果,其示出了取决于在根据本发明一个实施方案的制备外排体的过程中是否添加海藻糖而获得的颗粒尺寸分布。“图6A”示出了在整个制备过程中添加海藻糖时所获得的结果;“图6B”示出了在条件培养基被冷冻储存并解冻,并随后向经解冻培养基添加海藻糖的情况下所获得的结果;并且“图6C”示出了在未添加海藻糖时获得的结果。“图6D”示出了将通过图6A至6C的方法分离的外排体的相对生产率和相对浓度进行比较的结果。“图6E”示出了通过图6A至6C的方法分离的外排体的平均尺寸。
图7描绘了显示实时PCR结果的图,进行该实时PCR以检查在用根据本发明一个实施方案的外排体处理小鼠(其中诱导了特应性瘙痒)之后从动物模型1的皮肤病灶获得的样品中IL-4和IL-31(其引起瘙痒)的mRNA表达水平的变化。
图8描绘了显示实时PCR结果的图,进行该实时PCR以检查在用根据本发明一个实施方案的外排体处理小鼠(其中诱导了特应性瘙痒)之后从动物模型2的皮肤病灶获得的样品中IL-4和IL-31(其引起瘙痒)的mRNA表达水平的变化。
图9A和9B示出了显示当用根据本发明一个实施方案的外排体处理人角质形成细胞HaCaT细胞时TSLP的mRNA表达和蛋白质产量降低的结果。
图10示出了测量荧光强度以鉴定用PKH67染色的外排体的结果。
图11描绘了显示将荧光染色的外排体递送到猪皮肤组织中的程度的荧光显微图像。
图12描绘了显示将荧光染色的外排体递送到小鼠皮肤组织中的程度的共聚焦荧光显微图像。
图13示出了将通过测量图12的每个图像上的荧光强度而获得的总荧光强度进行比较的图。
图14示出了表明在用根据本发明一个实施方案的外排体处理人成纤维细胞HS68细胞之后该外排体没有细胞毒性的结果。
图15描绘了将用包含根据本发明一个实施方案的外排体的受试产品处理人皮肤之前和之后的皮肤状况进行比较的照片。
图16描绘了照片,该照片显示作为向人皮肤(受影响部分)施加了包含根据本发明一个实施方案的外排体的组合物,并随后进行离子透入以允许微电流流过向其施加了该组合物的人皮肤(受影响部分)的结果,人皮肤(受影响部分)上的红斑等明显改善。
实施例
在下文中,将参照以下实施例更详细地描述本发明。然而,以下实施例仅是举例说明本发明并且不旨在限制或约束本发明的范围。本领域技术人员可从本发明的发明详述和实施例中容易地推断出的那些被解释为落入本发明的范围内。本发明中提及的参考文献通过引用并入本文。
应当理解的是,在本说明书通篇当任何部分被称为“包含”任何组分时,除非另有指明,否则其不排除其他组分,而是还可包含其他组分。
实施例1:细胞培养
在37℃,5%CO2下,将购自ATCC的人真皮成纤维细胞HS68细胞在包含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS;购自ThermoFisher Scientific)和1%抗生素-抗真菌剂(购自ThermoFisher Scientific)的DMEM(购自ThermoFisher Scientific)培养基中进行传代培养。此外,在37℃,5%CO2下,将人角质形成细胞HaCaT细胞在补充有10%FBS和1vol%青霉素-链霉素的DMEM培养基中进行传代培养。
根据本发明所属技术领域中已知的细胞培养方法,在37℃,5%CO2下培养脂肪来源干细胞。接下来,用磷酸缓冲盐水(购自ThermoFisher Scientific)洗涤细胞,并随后用不含血清、不含酚红的培养基替代该培养基,并将细胞培养1至10天。回收上清液(在下文中称为“条件培养基”)。
为了在外排体分离过程中获得具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的外排体,向条件培养基添加2wt%的海藻糖。在添加海藻糖之后,通过0.22μm过滤器过滤条件培养基以去除杂质,例如细胞碎片、废物、大颗粒等。立即从经过滤条件培养基分离外排体。另外,将经过滤条件培养基储存在冰箱(10℃或低于10℃)中,并随后用于外排体分离。此外,将经过滤条件培养基冷冻储存在-60℃或低于-60℃的超低温冷冻箱中,解冻,并随后进行外排体分离。此后,通过TFF从条件培养基分离外排体。
实施例2:通过TFF方法分离和纯化外排体
为了从实施例1中通过0.22μm过滤器过滤的条件培养基分离、浓缩和渗滤外排体,使用了TFF方法。在使用TFF分离和浓缩外排体之前,对经过滤条件培养基进行声处理以使潜在的外排体聚集变得松散。作为用于TFF方法的过滤器,使用了筒式过滤器(称为中空纤维过滤器;购自GE Healthcare)或盒式过滤器(购自Pall、Sartorius或Merck Millipore)。可选择具有多种截留分子量(MWCO)的TFF过滤器。使用具有选定MWCO的过滤器,将外排体分离并浓缩,并且去除小于MWCO的颗粒、蛋白质、脂质、核酸、低分子量化合物等。
为了分离和浓缩外排体,使用具有100,000Da(道尔顿)、300,000Da或500,000Da的MWCO的TFF过滤器。通过TFF方法通过去除小于MWCO的物质并将条件培养基浓缩至约1/100至1/25的体积,从条件培养基分离外排体。
将分离和浓缩的外排体溶液另外进行渗滤。使用具有至少4倍、优选至少6至10倍、更优选至少12倍体积的分离的外排体的缓冲液,连续地(连续渗滤)或不连续地(不连续渗滤)进行渗滤。为了获得具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的外排体,向缓冲液添加PBS中的2wt%海藻糖。图6A至6E示出了通过添加海藻糖,可以以高产率获得具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的外排体的结果。
实施例3:分离的外排体的特征分析
使用BCA比色测定(购自ThermoFisher Scientific)或FluoroProfile荧光测定(购自Sigma)测量分离的外排体、条件培养基和TFF分离过程的级分的蛋白质的量。对于通过根据一个实施方案的TFF方法分离和浓缩的外排体,通过蛋白质测定监测蛋白质、脂质、核酸、低分子量化合物等被去除的程度,并且监测结果示于图2中。作为结果,可以看出,通过根据一个实施方案的TFF方法非常有效地去除了条件培养基中存在的蛋白质。
图3示出了当通过根据一个实施方案的TFF方法分离外排体时将五个独立批次中的每一批次中的外排体的生产率和纯度进行比较的结果。分析了从所述五个独立批次获得的结果,并且作为结果,确定通过根据一个实施方案的TFF方法非常稳定地分离了外排体。
分离的外排体的颗粒尺寸和浓度通过纳米颗粒追踪分析(NTA)仪器(购自Malvern)或可调电阻脉冲传感(TRPS)仪器(购自Izon Science)进行测量。通过透射电子显微术(TEM)分析分离的外排体的均一性和尺寸。图4A至图4C示出了通过根据本发明一个实施方案的分离方法分离的外排体的TRPS、NTA和TEM的结果。
在分离外排体之后,根据是否添加海藻糖通过NTA分析外排体的尺寸分布。分析的结果示于图5A至5C中。海藻糖的浓度从0wt%提高至1wt%和2wt%(在图5A至5C中从顶部到底部),并且实验重复进行3次。确定当不使用海藻糖时,观察到尺寸为300nm或更大的颗粒,然而随着添加的海藻糖的量的提高,尺寸为300nm或更大的颗粒的数目降低并且外排体的尺寸分布变得均一。
另外检查了在通过TFF方法分离外排体的过程中由于添加海藻糖引起的作用。如图6A至6C中所示,当在制备外排体的整个过程中添加PBS中的2wt%海藻糖时,可获得具有均一尺寸分布的外排体(图6A)。然而,当使用在不添加海藻糖的情况下冷冻储存的条件培养基,而仅在渗滤过程中添加海藻糖的情况下进行TFF过程,或者在未添加任何海藻糖的情况下进行TFF过程时,获得了包含大量大颗粒的不均一的外排体(图6B和6C)。
对分离的外排体的相对生产率和浓度进行比较,并且作为结果,当在整个外排体生产过程中添加海藻糖时,可获得具有非常高的生产率的外排体。所获得的外排体是对照(其中在整个外排体生产过程中未添加海藻糖)的浓度的至少5倍(图6D)。如NTA分析结果所示,确定当在整个外排体生产过程中添加海藻糖时,分离的外排体的平均尺寸是均一的(200nm)。
图4D示出了通过根据本发明一个实施方案的分离方法分离的外排体的蛋白质印迹分析的结果。如其中所示,确定了CD9、CD63、CD81和TSG101标志物的存在。作为针对每种标志物的抗体,分别使用抗CD9(购自Abcam)、抗CD63(购自System Biosciences)、抗CD81(购自System Biosciences)和抗TSG101(购自Abcam)。
图4E示出了通过根据本发明一个实施方案的分离方法分离的外排体的流式细胞术的结果。如其中所示,确定了CD63和CD81标志物的存在。为了分离CD63阳性外排体,根据制造商的说明书,使用了外排体-人CD63分离/检测试剂盒(购自ThermoFisherScientific)。用PE-小鼠抗人CD63(购自BD)或PE-小鼠抗人CD81(购自BD)对标志物进行染色,并随后使用流式细胞仪(ACEA Biosciences)进行分析。
综合以上结果,可确定根据本发明一个实施方案的分离方法可通过在基于切向流过滤的分离和/或纯化过程中添加海藻糖,以高产率经济并有效地分离和纯化具有均一颗粒尺寸分布和高纯度的外排体。另外,可以看出,根据本发明一个实施方案的分离方法的过程可按比例扩大,并且还适合于GMP。
实施例4:外排体处理之后细胞毒性的测量
为了评价在人皮肤成纤维细胞HS68细胞中通过根据本发明一个实施方案的分离方法分离的外排体的细胞毒性,用多种浓度的外排体处理细胞,并检查细胞的增殖速率。具体地,将HS68细胞悬浮于含10%FBS的DMEM中,并随后接种并培养至80%至90%汇合,并在37℃,5%CO2下在培养箱中培养24小时。在24小时之后,去除培养基,并用实施例2中制备的多种浓度的外排体处理细胞。然后,在细胞培养24至72小时的同时评价细胞的生存力。细胞生存力使用WST-1试剂(购自Takara)、MTT试剂(购自Sigma)、CellTiter-Glo试剂(购自Promega)或alamarBlue试剂(购自ThermoFisher Scientific)和微板阅读仪(购自Molecular Devices)进行测量。
使用在未用外排体处理的常规细胞培养基中培养的细胞作为对照。确定了本发明的外排体在测试中使用的浓度范围内没有表现出细胞毒性(图14)。
实施例5:动物模型1
购买雄性NC/Nga小鼠(16至18g,5周龄;购自Central Laboratory Animal Inc.),适应7天,并随后将其用于该实验。在适应的小鼠中诱导伴有瘙痒的皮炎之后,将小鼠分成如下五组。
(1)正常:正常对照组;
(2)载剂(皮炎诱导组):阴性对照组,其中伴有瘙痒的皮炎由屋尘螨(house dustmite)提取物诱导;
(3)IV:测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以2.8μg/头的剂量静脉内(IV)注射实施例2中制备的外排体,一周三次,持续两周;
(4)SC:测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以2.8μg/头的剂量皮下(SC)注射实施例2中制备的外排体,一周三次,持续两周;以及
(5)Pred:测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,每天经口施用泼尼松龙(prednisolone)。
用剃刀剃每个NC/Nga小鼠(购自Central Laboratory Animal Inc.)的耳廓,并随后通过施加合适量的脱毛剂对其进行脱毛。在擦拭掉脱毛剂之后,通过微量移液管尖端将AD诱导试剂(屋尘螨提取物;购自BioStir Inc.)均匀地施加至耳廓。在用剃刀剃毛之后,如果有必要的话,通过微量移液管尖端将150μL的4%SDS水溶液均匀地施加至耳廓。在用来自烘干机的冷空气使耳廓干燥并进一步自然干燥约2至3小时之后,通过微量移液管尖端将AD诱导试剂均匀地施加至耳廓。所有预处理一周进行两次,持续3周,即总共六次。
在开始施用实施例2中制备的外排体之前,进行临床皮肤评分评估。根据排名评分,将动物随机分组使得每组的平均评分尽可能均匀地分布。
实施例6:动物模型2
为了评价外排体的剂量依赖性作用,如以上实施例5中所述,在诱导伴有瘙痒的皮炎之后,将小鼠分成如下9组。
(1)正常:正常对照组(在图8中由“N”表示);
(2)对照(皮炎诱导组):阴性对照组,其中伴有瘙痒的皮炎由屋尘螨提取物诱导(在图8中由“C”表示);
(3)IV,L(外排体,低):测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以0.14μg/头的剂量静脉内(IV)注射以上实施例2中制备的外排体,一周3次,持续4周;
(4)IV,M(外排体,中等):测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以1.4μg/头的剂量静脉内(IV)注射以上实施例2中制备的外排体,一周3次,持续4周;
(5)IV,H(外排体,高):测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以10μg/头的剂量静脉内(IV)注射以上实施例2中制备的外排体,一周3次,持续4周;
(6)SC,L(外排体,低):测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以0.14μg/头的剂量皮下(SC)注射以上实施例2中制备的外排体,一周3次,持续4周;
(7)SC,M(外排体,中等):测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以1.4μg/头的剂量皮下(SC)注射以上实施例2中制备的外排体,一周3次,持续4周;
(8)SC,H(外排体,高):测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,以10μg/头的剂量皮下(SC)注射以上实施例2中制备的外排体,一周3次,持续4周;以及
(9)Pred:测试组,其中在由屋尘螨提取物诱导伴有瘙痒的皮炎之后,每天经口施用泼尼松龙(在图8中由“P”表示)。
如实施例5中所述进行皮炎诱导,并施加过量的AD诱导试剂使得在施用外排体时平均临床皮肤评分为9。在开始施用实施例2中制备的外排体之前,进行临床皮肤评分评估。根据排名评分,将动物随机分组使得每组的平均评分尽可能均匀地分布。
实施例7:细胞因子的mRNA表达水平的测量
为了检查本发明的外排体是否具有抑制和减轻瘙痒的作用,以及该外排体是否可广泛地应用针对由多种因素引起的瘙痒,分析了IL-4和IL-31的mRNA表达水平。IL-4被广泛地已知为诱导瘙痒的细胞因子,并且据报道在表皮中表达IL-4的转基因小鼠中诱导皮肤瘙痒(Journal of Investigative Dermatology(2001)117,pp.977-983)。另外,据报道,IL-31在表现出瘙痒的特应性皮炎患者中过表达,并且在过表达IL-31的转基因小鼠中诱导瘙痒(J Allergy Clin Immunol(2006)117,pp.411-417)。此外,据报道,IL-31通过与31RA/OSMR受体结合来诱导瘙痒(European Journal of Allergy and Clinical Immunology(2018)73,pp.29-36),并且用针对IL-31受体A的抗体的处理减轻了瘙痒(New EnglandJournal of Medicine(2017)376;9,pp.826-835)。因此,如果在用候选物质处理之后分析皮肤组织或血液中IL-4和IL-31的产生或表达水平,则可评价该候选物质对抑制和减轻瘙痒的作用。
首先,处死来自实施例5的动物模型1和实施例6的动物模型2的动物,并从其中解剖皮肤病变部位的组织。此后,从获自如下组织的总RNA中合成cDNA并对其进行实时PCR,所述组织是从来自动物模型1的动物解剖的。通过实时PCR测量作为瘙痒的主要原因的IL-4和IL-31的mRNA表达水平的变化。另外,从获自如下组织的总RNA中合成cDNA并对其进行实时PCR,所述组织是从来自动物模型2的动物解剖的。通过实时PCR测量作为瘙痒的主要原因的IL-4和IL-31的mRNA表达水平的变化。使用GAPDH基因作为用于对以上基因表达进行归一化的参照基因。实时PCR中使用的引物序列示于下表1中。
表1:实时PCR中使用的引物的核苷酸序列
通过对动物模型1进行的实验,确认了用本发明的外排体处理的所有组(IV和SC)中IL-4和IL-31二者(其引起瘙痒)的表达水平均降低(图7A和7B)。另外,通过对动物模型2进行的实验,确认了用本发明的外排体处理的所有组(IV和SC)中IL-4和IL-31二者(其引起瘙痒)的表达水平均以剂量依赖方式降低(图8A和8B)。因此,本发明的外排体能够针对IL-4和IL-31二者(其是引起瘙痒的主要靶标)发挥作用,并因此能够广泛地应用针对由多种因素引起的瘙痒,并且可有效地抑制和减轻瘙痒。
实施例8:使用HaCaT细胞对TSLP抑制作用的测量
已知TSLP在患有严重瘙痒的患者的人上皮细胞或角质形成细胞中过表达,并且是引起皮肤瘙痒的物质。因此,通过确认特定的候选物质是否抑制皮肤角质形成细胞中诱导的TSLP,可确认该候选物质对瘙痒的抑制或减轻作用。将人角质形成细胞HaCaT细胞悬浮在补充有10%FBS、1%两性霉素B(购自Sigma)和1%青霉素-链霉素的DMEM(购自ThermoFisher Scientific)中,并随后以1×105个细胞的密度接种到12孔板的每个孔中并培养24小时。接下来,将细胞在不含血清的DMEM培养基中另外培养24小时。然后,将贴壁细胞用PBS洗涤两次,并且在不含血清的培养基中,用根据图9A中所示组的不含和含有本发明外排体(在实施例2中制备的外排体)的聚I:C(Poly I:C)(购自Sigma)和组胺(购自Sigma)不进行处理或进行处理,并培养24小时。从分离自每组的HaCaT细胞的RNA中,合成cDNA并对其进行实时PCR,并通过实时PCR测量作为瘙痒的主要原因的TSLP的mRNA表达水平的变化。使用β-肌动蛋白基因作为用于对TSLP基因表达进行归一化的参照基因。实时PCR中使用的引物的序列示于下表2中。
表2:实时PCR中使用的引物的核苷酸序列
另外,将人角质形成细胞HaCaT细胞悬浮在补充有10%FBS(胎牛血清)、1%两性霉素B(购自Sigma)和1%青霉素-链霉素的DMEM(购自ThermoFisher Scientific)中,并随后以5×105个细胞的密度接种到6孔板的每个孔中并培养24小时。接下来,将细胞在不含血清的DMEM培养基中另外培养24小时。然后,将贴壁细胞用PBS洗涤两次,并在不含血清培养基中,用根据图9B中所示组的不含和含有本发明外排体(在实施例2中制备的外排体)的聚I:C(购自Sigma)不进行处理或进行处理,并培养24小时。在每组中,使用TSLP抗体(Abcam,Cambridge,MA)通过蛋白质印迹来测量TSLP蛋白质的量。使用BSA(牛血清白蛋白)作为参照材料通过BCA测定量化蛋白质的量。通过GAPDH蛋白质的量对每组中TSLP蛋白质的量进行归一化。
作为结果,确定了本发明的外排体降低了皮肤角质形成细胞中TSLP(其引起瘙痒)的mRNA表达水平和的蛋白质产生(图9A和9B)。因此,本发明的外排体能够针对TSLP(其是引起瘙痒的主要靶标)发挥作用,并因此有效地抑制和减轻瘙痒。
实施例9:对于外排体的皮肤穿透能力的测试
为了制备荧光染色的外排体,使用了PKH67染料(购自Sigma)。将1mM PKH67在稀释剂C(购自Sigma)中进行稀释以制备10μM的PKH67溶液。将该溶液与合适浓度的外排体溶液混合,并允许在室温下在遮光条件下反应10分钟。反应完成之后,使用MW3000离心柱(购自ThermoFisher Scientific)从用PKH67染色的外排体(在下文中简称为“PKH-外排体”)去除剩余的游离PKH67染料。在去除未与外排体反应的PKH67之后,使用荧光计(购自MolecularDevices)进行分析,并且作为结果,确认了在PKH-外排体中检测到具有足够强度的荧光(图10)。
将PKH-外排体以合适的浓度(例如1×105个颗粒/mL至1×109个颗粒/mL)的浓度分散在磷酸缓冲盐水(PBS)中,并施加至猪皮肤的外表面。用无纺布覆盖猪皮肤以防止PKH-外排体溶液变干,并随后允许PKH-外排体与皮肤组织反应合适的时间,例如30分钟至1小时,使得PKH-外排体到达猪皮肤的皮下组织。或者,在将PKH-外排体施加至猪皮肤的外表面并用无纺布覆盖皮肤之后,允许微电流流过皮肤持续预先确定的时间,例如30分钟至1小时。反应完成之后,将猪皮肤组织在3.7%甲醛溶液中固定过夜,并用PBS洗涤3次,每次持续5分钟。将洗过的猪皮肤组织浸泡在30%蔗糖溶液中,并随后用OCT化合物进行处理。接下来,将组织用PBS洗涤3次,每次持续5分钟,并随后使用切片机进行切片。将组织切片放置在载玻片上。同时,可进行组织切片的制备,然后将组织用甲醛溶液进行固定。使用荧光显微镜观察从组织切片中的PKH-外排体检测到的荧光。作为结果,确认了PKH-外排体通过猪皮肤组织的表皮被递送到皮下组织中(图11)。如图11中所示,本发明的外排体可有效地穿透通过皮肤屏障,使得其可被深入地递送到皮肤组织中并被有效地吸收到皮肤中。
因此,包含外排体作为活性成分的皮肤外用制剂或化妆品组合物将有效地在预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒中发挥作用。
接下来,解剖无毛小鼠的皮肤组织并将其放置在Franz扩散池的上室中。扩散池的内部填充有PBS。将PKH-外排体以合适的浓度(例如1×105个颗粒/mL至1×109个颗粒/mL的浓度)分散在PBS中,并随后施加至小鼠皮肤组织的外表面。此时,为了防止PKH-外排体溶液变干,将无纺布预先放置在小鼠皮肤组织的外表面上,并且将PKH-外排体溶液注射在无纺布与皮肤组织之间。然后,允许PKH-外排体与皮肤组织反应30分钟至1小时。或者,在将PKH-外排体溶液注射在无纺布和皮肤组织之间之后,允许微电流流过皮肤组织持续预先确定的时间,例如30分钟至1小时。反应完成之后,立即用共聚焦荧光显微镜(Leica,SP8X)观察递送到皮肤组织中的PKH-外排体,或者另外允许皮肤组织与PKH-外排体溶液反应1至6小时,并随后用共聚焦荧光显微镜观察PKH-外排体。作为结果,确认了本发明的外排体能够有效地穿透通过皮肤屏障,使得本发明的外排体能够被深入地递送到皮肤组织中并被有效地吸收到皮肤中(图12和13)。
因此,包含外排体作为活性成分的皮肤外用制剂或化妆品组合物将有效地在预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒中发挥作用。
实施例10:用包含外排体作为活性成分的组合物对人皮肤进行处理
将“受试产品”一次施加至患有与瘙痒相关的严重面部潮红和皮肤问题(在下文中称为“情况1”)的人的面部,所述“受试产品”由包含根据本发明的一个实施方案获得的外排体的安瓿(包含半透明乳状液体组合物)、浸透有液体的片状面膜(浸透有上述半透明乳状液体的白色片状面膜)和促进经皮穿透的片状面膜(包含离子透入装置的银色片状面膜)构成。评价是否减轻或改善了皮肤问题和面部潮红。另外,将所述受试产品一次施加至患有面部潮红(在下文中称为“情况2”)的人的面部。评价是否改善整体肤色和面部潮红。
在仅单使用包含本发明的外排体的“受试产品”的情况下,显著改善了“情况1”的面部潮红和皮肤问题(参见图15的情况1),并且改善了“情况2”的整体肤色并减轻了“情况2”的面部潮红(参见图15的情况2)。因此,包含本发明的外排体作为活性成分的皮肤外用制剂或化妆品组合物具有预防、抑制、减轻或改善与瘙痒相关的面部潮红和皮肤问题的作用。
另外,将包含根据本发明的一个实施方案获得的外排体的组合物(即包含本发明的外排体的混悬液)施加至抱怨瘙痒的三名严重特应性患者的受影响部分(手、颈、臂等),一周3次,持续1至2周,并随后使用离子透入装置进行允许微电流流过施加有组合物的受影响部分的离子透入。作为结果,显著减轻了患者中的严重瘙痒,并且也显著改善了患者的红斑(图16)。在施加包含本发明外排体的组合物的患者中,严重瘙痒和红斑得到减轻和改善,使得将停止针对这些患者的类固醇或抗组胺的处方。
因此,如通过上述临床测试所确认的,包含通过根据本发明一个实施方案的分离方法获得的外排体作为活性成分的皮肤外用制剂或化妆品组合物表现出预防、抑制、减轻、改善或治疗瘙痒的作用。
实施例11:包含本发明的外排体的化妆品组合物的制备
将1704μg/mL的以上实施例2中制备的外排体与下表3中所示的组分混合并悬浮在其中,从而制备化妆品组合物(化妆水)。每种组分的含量示于下表3中。
表3:包含本发明的外排体的化妆水的组分及其含量
尽管已参照一些实施方案描述了本发明,但是本发明的范围不限于这些实施方案。本领域的任何技术人员将理解,在不脱离本发明的精神和范围的情况下可进行多种修改和改变,并且这些修改和改变也落入本发明的范围内。
Claims (20)
1.来源于脂肪来源干细胞的外排体作为活性成分在制备用于改善由胸腺基质淋巴细胞生成素介导的瘙痒的药物组合物中的用途,其中所述外排体分离自所述脂肪来源干细胞的条件培养基。
2.权利要求1所述的用途,其中所述外排体通过进行以下步骤获得:(a)向所述脂肪来源干细胞的所述条件培养基添加海藻糖;(b)过滤已向其添加了海藻糖的所述条件培养基;(c)通过切向流过滤从经过滤条件培养基分离外排体;以及(d)将海藻糖添加至用于渗滤的缓冲液,并使用已向其添加了海藻糖的所述缓冲液通过切向流过滤对所分离的外排体进行渗滤。
3.权利要求2所述的用途,其中所述渗滤是连续或不连续进行的。
4.权利要求2所述的用途,其中所述渗滤是使用具有所分离外排体之至少4倍体积的缓冲液进行的。
5.权利要求2所述的用途,其中使用0.05μm过滤器或者具有100,000Da、300,000Da、500,000Da或750,000Da的截留分子量的切向流过滤过滤器进行所述切向流过滤。
6.权利要求2所述的用途,其中步骤(c)还包括通过切向流过滤将所分离的外排体浓缩至1/100至1/25的体积。
7.权利要求1至6中任一项所述的用途,其中所述外排体降低皮肤组织或皮肤细胞中IL-4、IL-31和胸腺基质淋巴细胞生成素的表达水平。
8.来源于脂肪来源干细胞的外排体作为活性成分在制备用于改善由胸腺基质淋巴细胞生成素介导的瘙痒的皮肤外用制剂中的用途,其中所述外排体分离自所述脂肪来源干细胞的条件培养基。
9.权利要求8所述的用途,其中所述外排体包含在以下的至少一种中或与以下的至少一种混合:水凝胶、透明质酸、透明质酸的盐和透明质酸凝胶。
10.权利要求9所述的用途,其中所述水凝胶通过将胶凝聚合物分散在多元醇中获得。
11.权利要求10所述的用途,其中所述胶凝聚合物是选自以下的至少一种:普朗尼克、纯化琼脂、琼脂糖、结冷胶、藻酸、卡拉胶、肉桂胶、黄原胶、半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、果胶、纤维素、瓜尔胶和槐豆胶,并且所述多元醇是选自以下的至少一种:乙二醇、丙二醇、1,3-丁二醇、异丁二醇、二丙二醇、山梨糖醇、木糖醇和甘油。
12.来源于脂肪来源干细胞的外排体作为活性成分在制备用于改善由胸腺基质淋巴细胞生成素介导的瘙痒的化妆品组合物中的用途,其中所述外排体分离自所述脂肪来源干细胞的条件培养基。
13.权利要求12所述的用途,其中所述化妆品组合物以选自以下的至少一种形式使用:贴片、片装面膜、面膜巾、霜、软膏、混悬液、乳液、糊剂、化妆水、凝胶剂、油剂、剥撕式面膜、雾剂、粉和油纸。
14.权利要求12所述的用途,其中所述化妆品组合物以选自以下的至少一种形式使用:活肤水、喷雾剂、气雾剂和粉底。
15.权利要求13所述的用途,其中所述化妆品组合物被施加至所述贴片、所述片装面膜或所述面膜巾的至少一个表面或浸透在所述贴片、所述片装面膜或所述面膜巾的至少一个表面中。
16.用于除治疗目的之外在哺乳动物皮肤中减轻由胸腺基质淋巴细胞生成素介导的瘙痒引起的皮肤潮红、皮肤问题或红斑的美容方法,所述美容方法包括:(a)直接将化妆品组合物施加至哺乳动物皮肤;或者(b)使贴片、片装面膜或面膜巾与哺乳动物皮肤接触或附着至哺乳动物皮肤,所述贴片、片装面膜或面膜巾具有向其施加的或浸透在其中的所述化妆品组合物;或者依次进行(a)和(b),其中所述化妆品组合物包含来源于脂肪来源干细胞的外排体作为活性成分,所述外排体分离自所述脂肪来源干细胞的条件培养基。
17.权利要求16所述的美容方法,其还包括:(c)通过允许微电流流过已向其施加了所述化妆品组合物的哺乳动物皮肤来进行离子透入。
18.权利要求17所述的美容方法,其还包括使离子透入装置与所述哺乳动物皮肤接触或附着至所述哺乳动物皮肤。
19.权利要求18所述的美容方法,其中所述离子透入装置包含选自以下的至少一种电池:柔性电池、碱性电池、干电池、锂电池和反向电渗析电池。
20.权利要求18所述的美容方法,其中所述离子透入装置包含选自以下的至少一种电池:锂离子二次电池、汞电池和镍-镉电池,或者包含具有所述至少一种电池的贴片、片装面膜或面膜巾。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR20170083508 | 2017-06-30 | ||
KR10-2017-0083508 | 2017-06-30 | ||
KR10-2018-0063921 | 2018-06-02 | ||
KR20180063921 | 2018-06-02 | ||
PCT/KR2018/007369 WO2019004757A2 (ko) | 2017-06-30 | 2018-06-28 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 가려움증 억제 또는 개선 용도 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN110869033A CN110869033A (zh) | 2020-03-06 |
CN110869033B true CN110869033B (zh) | 2023-05-09 |
Family
ID=64742470
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201880042992.0A Active CN110869033B (zh) | 2017-06-30 | 2018-06-28 | 包含干细胞来源外排体作为有效成分的组合物用于抑制或减轻瘙痒的用途 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11446333B2 (zh) |
EP (1) | EP3646877B1 (zh) |
JP (1) | JP7037205B2 (zh) |
KR (2) | KR102147169B1 (zh) |
CN (1) | CN110869033B (zh) |
ES (1) | ES2965939T3 (zh) |
WO (1) | WO2019004757A2 (zh) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20190003316A (ko) * | 2017-06-30 | 2019-01-09 | 주식회사 엑소코바이오 | 지방줄기세포 유래의 엑소좀 및/또는 세포외 소포체를 유효성분으로 포함하는 조성물의 피부염 개선 용도 |
WO2019231134A1 (ko) * | 2018-05-31 | 2019-12-05 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 |
KR102646145B1 (ko) | 2018-05-31 | 2024-03-11 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 모공 축소용 조성물 |
JP7079984B2 (ja) | 2018-07-28 | 2022-06-03 | エクソコバイオ インコーポレイテッド | エキソソームの凍結乾燥方法 |
KR102163806B1 (ko) | 2018-07-30 | 2020-10-07 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피지분비 감소용 조성물 |
KR102504868B1 (ko) | 2019-01-10 | 2023-02-28 | 주식회사 엘지에너지솔루션 | 고체 전해질막 및 이를 포함하는 전고체 전지 |
KR102285913B1 (ko) * | 2019-01-24 | 2021-08-06 | 동국대학교 산학협력단 | 담즙산을 이용한 표면 개질 엑소좀, 그 생산 방법 및 세포 증식 유도 방법 |
JP2023130530A (ja) * | 2020-07-27 | 2023-09-21 | 株式会社Exorphia | 細胞外小胞溶液 |
WO2023064390A1 (en) * | 2021-10-17 | 2023-04-20 | ELEVAI Labs, Inc. | Exosome-based skincare product |
US11878036B2 (en) | 2022-05-25 | 2024-01-23 | Neuvian LLC | Vaginal care compositions and methods of improving vaginal health |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100776755B1 (ko) | 2006-05-04 | 2007-11-28 | (주)아모레퍼시픽 | 생약 추출물을 함유하는 가려움증 억제 및 완화용 조성물 |
PL2254586T3 (pl) * | 2008-02-22 | 2015-09-30 | Agency For Science Tech And Research Astarstar | Cząstki mezenchymalnych komórek macierzystych |
KR20090111269A (ko) * | 2009-02-10 | 2009-10-26 | (주)프로스테믹스 | 아토피성 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 |
WO2011053257A2 (en) * | 2009-11-02 | 2011-05-05 | Agency For Science, Technology And Research (A*Star) | Methods of monitoring cellular states |
KR20120032801A (ko) | 2010-09-29 | 2012-04-06 | 목포대학교산학협력단 | 소양증 또는 피부 가려움증 예방 또는 개선용 조성물 |
KR101211828B1 (ko) * | 2010-11-22 | 2012-12-12 | 서울대학교산학협력단 | 지방 줄기세포 유래 단백질 추출물을 안정화시킨 프로리포솜을 유효성분으로 포함하는 아토피성 피부염 치료 또는 예방용 조성물 |
KR20120087625A (ko) * | 2011-01-28 | 2012-08-07 | (주)프로스테믹스 | 케라틴세포의 이주, 증식 또는 케라틴 합성을 촉진시키는 인간 지방유래 줄기세포의 배양 농축액 및 이의 용도 |
EP2850178A4 (en) * | 2012-05-18 | 2015-10-28 | Agency Science Tech & Res | EXOSOMES OF MESHCHYMIC STROKE CELL OF UMBILICAL CORD |
KR20140076198A (ko) * | 2012-12-12 | 2014-06-20 | 서울대학교산학협력단 | 성체줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부염 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
KR20150088374A (ko) * | 2014-01-23 | 2015-08-03 | 주식회사 이에이치엘바이오 | 인체 지방-유래 줄기세포를 이용한 주요 세포성장인자를 포함하는 줄기세포 배양액 및 아토피 개선 화장료 조성물 |
DK3145493T3 (da) * | 2014-05-18 | 2022-10-31 | Childrens Medical Center | Fremgangsmåder og sammensætninger vedrørende exosomer |
KR20160026234A (ko) * | 2014-08-29 | 2016-03-09 | (주)코스메디션 | 다기능 경피 흡수 미용기기 및 피부 미용방법 |
KR101744676B1 (ko) * | 2014-09-18 | 2017-06-09 | (주)인성정보 | 이온토포레시스를 위한 시트형 마스크 및 이를 이용하는 마스크 어셈블리 |
KR101663912B1 (ko) | 2015-01-08 | 2016-10-10 | 한양대학교 에리카산학협력단 | 줄기세포로부터 추출된 엑소좀을 함유하는 피부 미백, 주름개선 또는 재생용 화장료 조성물 |
KR101661353B1 (ko) * | 2014-11-11 | 2016-10-04 | (주)뷰티화장품 | 단일 또는 이종의 피부활성성분의 공급제어 기능을 가지는 하이드로겔 마스크팩의 제조방법 |
KR20160109019A (ko) * | 2015-03-09 | 2016-09-21 | 주식회사 이에이치엘바이오 | 지방-유래 줄기세포를 함유하는 정맥혈관 투여를 통한 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 |
KR101761680B1 (ko) | 2015-03-31 | 2017-08-23 | 포항공과대학교 산학협력단 | 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 분리방법 |
CA2993224A1 (en) * | 2015-07-31 | 2017-02-09 | Zen-Bio, Inc. | Exosome compositions and use thereof for soft tissue repair |
KR101686064B1 (ko) * | 2015-09-21 | 2016-12-13 | (주)프로스테믹스 | 면역 억제 및 항염증성 조성물 |
KR20170044999A (ko) * | 2015-10-16 | 2017-04-26 | (주)프로스테믹스 | 줄기세포 유래 엑소좀을 포함하는 상처 치료, 피부 개선 및 탈모 방지 또는 치료용 조성물 및 그 제조방법 |
JP2017093431A (ja) * | 2015-11-18 | 2017-06-01 | 株式会社Awsホールディングス | 脂肪由来間葉系幹細胞、脂肪由来間葉系幹細胞の培養方法、及び治療薬 |
CN110087658A (zh) * | 2016-10-12 | 2019-08-02 | 新加坡科技研究局 | 一种用于冻干外泌体的方法 |
-
2018
- 2018-06-28 JP JP2019566946A patent/JP7037205B2/ja active Active
- 2018-06-28 KR KR1020180074813A patent/KR102147169B1/ko active IP Right Grant
- 2018-06-28 ES ES18822756T patent/ES2965939T3/es active Active
- 2018-06-28 WO PCT/KR2018/007369 patent/WO2019004757A2/ko active Application Filing
- 2018-06-28 CN CN201880042992.0A patent/CN110869033B/zh active Active
- 2018-06-28 EP EP18822756.5A patent/EP3646877B1/en active Active
-
2019
- 2019-06-11 KR KR1020190068336A patent/KR20190067758A/ko active Application Filing
- 2019-12-26 US US16/727,173 patent/US11446333B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20190003387A (ko) | 2019-01-09 |
CN110869033A (zh) | 2020-03-06 |
JP7037205B2 (ja) | 2022-03-16 |
EP3646877B1 (en) | 2023-12-06 |
US20200121722A1 (en) | 2020-04-23 |
EP3646877C0 (en) | 2023-12-06 |
WO2019004757A2 (ko) | 2019-01-03 |
JP2020532489A (ja) | 2020-11-12 |
WO2019004757A3 (ko) | 2019-06-20 |
WO2019004757A9 (ko) | 2019-05-09 |
EP3646877A4 (en) | 2021-05-26 |
US11446333B2 (en) | 2022-09-20 |
KR20190067758A (ko) | 2019-06-17 |
KR102147169B1 (ko) | 2020-08-24 |
ES2965939T3 (es) | 2024-04-17 |
EP3646877A2 (en) | 2020-05-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110869033B (zh) | 包含干细胞来源外排体作为有效成分的组合物用于抑制或减轻瘙痒的用途 | |
CN111148520B (zh) | 包含来源于脂肪来源干细胞的外排体作为有效成分的组合物在改善皮炎中的用途 | |
KR102045188B1 (ko) | 지방줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 피부염 개선 용도 | |
CN112770729B (zh) | 干细胞来源外排体的冻干制剂和包含其作为活性成分的抗炎组合物 | |
US11730695B2 (en) | Composition for alleviating facial redness, comprising stem cell-derived exosomes as active ingredient | |
KR20190069301A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 화장료 조성물 | |
KR20190003399A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 피부 섬유증 개선 용도 | |
KR102439866B1 (ko) | 생산성 향상 및 생리활성 강화를 위한 엑소좀의 생산방법 및 이의 응용 | |
KR20190069277A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀 및/또는 세포외 소포체를 유효성분으로 포함하는 조성물의 민감성 피부 예방, 억제, 완화 또는 개선 용도 | |
KR101964992B1 (ko) | 피부 보습 및 소양감 개선을 위한 화장료 조성물 | |
CN111432799A (zh) | 包含干细胞来源外排体作为有效成分的组合物在使皮肤屏障增强和使其功能改善中的用途 | |
KR20240037208A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 | |
KR20190069291A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물 | |
KR20220000144A (ko) | 엑소좀 군집 내에서 엑소좀 아집단을 분리하는 방법 및 이의 응용 | |
KR20190049474A (ko) | 엑소좀 키트 및 이를 이용한 엑소좀의 경피 투과 증진 방법 | |
CN116196333A (zh) | 一种负载thc的干细胞源外泌体皮肤稳态剂及其制备方法、应用 | |
KR102368442B1 (ko) | 생리활성이 강화된 엑소좀의 생산방법 및 이의 응용 | |
KR20210152151A (ko) | 항염, 창상 치료 또는 창상 치료 촉진 효능이 강화된 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물 및 이의 생산방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |