KR20190069301A - 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20190069301A KR20190069301A KR1020180149564A KR20180149564A KR20190069301A KR 20190069301 A KR20190069301 A KR 20190069301A KR 1020180149564 A KR1020180149564 A KR 1020180149564A KR 20180149564 A KR20180149564 A KR 20180149564A KR 20190069301 A KR20190069301 A KR 20190069301A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- skin
- composition
- preventing
- alleviating
- sensitive skin
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 108
- 230000037307 sensitive skin Effects 0.000 title claims abstract description 106
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 title claims abstract description 51
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 title claims description 195
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims description 66
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 69
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 35
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 24
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 23
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 18
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 18
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 16
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims description 16
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 14
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 14
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 14
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 14
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 14
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 13
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical group O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 10
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 claims description 10
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 9
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 7
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 7
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 6
- -1 packs Substances 0.000 claims description 6
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 6
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 5
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 5
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 claims description 5
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011607 retinol Substances 0.000 claims description 5
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N Lithium ion Chemical compound [Li+] HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OJIJEKBXJYRIBZ-UHFFFAOYSA-N cadmium nickel Chemical compound [Ni].[Cd] OJIJEKBXJYRIBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910001416 lithium ion Inorganic materials 0.000 claims description 4
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 4
- WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-3-[(2s,3r,5s,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N 0.000 claims description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229940014041 hyaluronate Drugs 0.000 claims description 3
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 3
- 235000015961 tonic Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 claims description 3
- 229960000716 tonics Drugs 0.000 claims description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 claims description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 2
- 238000010030 laminating Methods 0.000 claims description 2
- 239000003595 mist Substances 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 239000006072 paste Substances 0.000 claims description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 claims 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 17
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 17
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 abstract description 14
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 14
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 8
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 118
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 59
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 23
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 20
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 20
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 19
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 19
- 229940074410 trehalose Drugs 0.000 description 17
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 14
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 14
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 13
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 13
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 12
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 12
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 12
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 11
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 11
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 11
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 9
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 7
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 7
- 101000934368 Homo sapiens CD63 antigen Proteins 0.000 description 7
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 7
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 7
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 7
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 102100025222 CD63 antigen Human genes 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 6
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 6
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 6
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 6
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 6
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 6
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 6
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 6
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 6
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 6
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 6
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 6
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 6
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 6
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 5
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 5
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 5
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 5
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100027221 CD81 antigen Human genes 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000914479 Homo sapiens CD81 antigen Proteins 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 229940015975 1,2-hexanediol Drugs 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 3
- CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 6-[(5S)-5-[[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]methyl]-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C[C@H]1CN(C(O1)=O)C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 3
- SNPLKNRPJHDVJA-ZETCQYMHSA-N D-panthenol Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCCO SNPLKNRPJHDVJA-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 3
- FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2-diol Chemical compound CCCCC(O)CO FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 3
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 3
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 3
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940101267 panthenol Drugs 0.000 description 3
- 235000020957 pantothenol Nutrition 0.000 description 3
- 239000011619 pantothenol Substances 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 230000001012 protector Effects 0.000 description 3
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 3
- 230000036560 skin regeneration Effects 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 3
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 3
- LADGBHLMCUINGV-UHFFFAOYSA-N tricaprin Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCC LADGBHLMCUINGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 3
- IHRKJQSLKLYWBQ-QKDODKLFSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-5-amino-2-[[2-(hexadecanoylamino)acetyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O IHRKJQSLKLYWBQ-QKDODKLFSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 2
- BYUQATUKPXLFLZ-UIOOFZCWSA-N CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CN=CN1 Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CN=CN1 BYUQATUKPXLFLZ-UIOOFZCWSA-N 0.000 description 2
- AERBNCYCJBRYDG-UHFFFAOYSA-N D-ribo-phytosphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(N)CO AERBNCYCJBRYDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 2
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 2
- ATGQXSBKTQANOH-UWVGARPKSA-N N-oleoylphytosphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)NC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC ATGQXSBKTQANOH-UWVGARPKSA-N 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- BQMNFPBUAQPINY-UHFFFAOYSA-N azane;2-methyl-2-(prop-2-enoylamino)propane-1-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[O-]S(=O)(=O)CC(C)(C)NC(=O)C=C BQMNFPBUAQPINY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 2
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000001926 citrus aurantium l. subsp. bergamia wright et arn. oil Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- SZXQTJUDPRGNJN-UHFFFAOYSA-N dipropylene glycol Chemical compound OCCCOCCCO SZXQTJUDPRGNJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOPFSRXAKWQILS-UHFFFAOYSA-N docosan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO NOPFSRXAKWQILS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 2
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 2
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 2
- 229940075529 glyceryl stearate Drugs 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTFJIXJJCSYFAL-UHFFFAOYSA-N icosan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO BTFJIXJJCSYFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035990 intercellular signaling Effects 0.000 description 2
- 239000000171 lavandula angustifolia l. flower oil Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 2
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940093441 palmitoyl oligopeptide Drugs 0.000 description 2
- 229940094946 palmitoyl tetrapeptide-7 Drugs 0.000 description 2
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 2
- 229940057874 phenyl trimethicone Drugs 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- AERBNCYCJBRYDG-KSZLIROESA-N phytosphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](N)CO AERBNCYCJBRYDG-KSZLIROESA-N 0.000 description 2
- 229940033329 phytosphingosine Drugs 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000013469 resistive pulse sensing Methods 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- 210000002955 secretory cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 230000036620 skin dryness Effects 0.000 description 2
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 2
- LINXHFKHZLOLEI-UHFFFAOYSA-N trimethyl-[phenyl-bis(trimethylsilyloxy)silyl]oxysilane Chemical compound C[Si](C)(C)O[Si](O[Si](C)(C)C)(O[Si](C)(C)C)C1=CC=CC=C1 LINXHFKHZLOLEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 2
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 2
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N (2r,3r,4r,5s)-hexane-1,2,3,4,5,6-hexol;(z)-octadec-9-enoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N 0.000 description 1
- KZVAAIRBJJYZOW-VPENINKCSA-N (2r,3r,4s)-2-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O KZVAAIRBJJYZOW-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- OMDQUFIYNPYJFM-XKDAHURESA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-2-(hydroxymethyl)-6-[[(2r,3s,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-3-[(2s,3s,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]methoxy]oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O1 OMDQUFIYNPYJFM-XKDAHURESA-N 0.000 description 1
- LTBAFRQKFIMYQK-DLWPFLMGSA-N (2s,3r,4r)-5-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypentane-1,2,3,4-tetrol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LTBAFRQKFIMYQK-DLWPFLMGSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N (2s,3s,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](OC3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N 0.000 description 1
- 229940058015 1,3-butylene glycol Drugs 0.000 description 1
- JQMFQLVAJGZSQS-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-N-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)acetamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)NC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 JQMFQLVAJGZSQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTVWZWFKMIUSGS-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropane-1,2-diol Chemical compound CC(C)(O)CO BTVWZWFKMIUSGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWGRWMMWNDWRQN-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropane-1,3-diol Chemical compound OCC(C)CO QWGRWMMWNDWRQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- DHFUFHYLYSCIJY-WSGIOKLISA-N CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DHFUFHYLYSCIJY-WSGIOKLISA-N 0.000 description 1
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 description 1
- 229940124638 COX inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241001107116 Castanospermum australe Species 0.000 description 1
- 244000241235 Citrullus lanatus Species 0.000 description 1
- 235000012828 Citrullus lanatus var citroides Nutrition 0.000 description 1
- PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N Cocarcinogen A1 Natural products CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1C(C)C2(O)C3C=C(C)C(=O)C3(O)CC(CO)=CC2C2C1(OC(C)=O)C2(C)C PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000247747 Coptis groenlandica Species 0.000 description 1
- 235000002991 Coptis groenlandica Nutrition 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 229920002670 Fructan Polymers 0.000 description 1
- 229920000926 Galactomannan Polymers 0.000 description 1
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 description 1
- 229920002581 Glucomannan Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000303040 Glycyrrhiza glabra Species 0.000 description 1
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 description 1
- BIVBRWYINDPWKA-VLQRKCJKSA-L Glycyrrhizinate dipotassium Chemical compound [K+].[K+].O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C=C4[C@@H]5C[C@](C)(CC[C@@]5(CC[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2C1(C)C)C)C(O)=O)C([O-])=O)[C@@H]1O[C@H](C([O-])=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BIVBRWYINDPWKA-VLQRKCJKSA-L 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 101000738354 Homo sapiens CD9 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000613251 Homo sapiens Tumor susceptibility gene 101 protein Proteins 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- 229920000161 Locust bean gum Polymers 0.000 description 1
- 210000004322 M2 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 244000044822 Simmondsia californica Species 0.000 description 1
- 235000004433 Simmondsia californica Nutrition 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102100040879 Tumor susceptibility gene 101 protein Human genes 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000012996 alamarblue reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 229940083987 anhydroxylitol Drugs 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N arachidonyl-2'-chloroethylamide Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)NCCCl SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 229940069765 bean extract Drugs 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- HGKOWIQVWAQWDS-UHFFFAOYSA-N bis(16-methylheptadecyl) 2-hydroxybutanedioate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CC(O)C(=O)OCCCCCCCCCCCCCCCC(C)C HGKOWIQVWAQWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021279 black bean Nutrition 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229940105847 calamine Drugs 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000002390 cell membrane structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000002583 cell-derived microparticle Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940081733 cetearyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 210000003690 classically activated macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 1
- 229940071160 cocoate Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000011035 continuous diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- QMIFIFIYYPUVNU-ACMTZBLWSA-L copper (2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-imidazol-1-id-4-ylpropanoyl]amino]hexanoate Chemical compound [Cu+2].NCCCC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=C[N-]C=N1 QMIFIFIYYPUVNU-ACMTZBLWSA-L 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N d-alpha-Tocopheryl acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000011036 discontinuous diafiltration Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- LVQSCKUKDKAQGO-UHFFFAOYSA-L disodium;diiodide Chemical compound [Na+].[Na+].[I-].[I-] LVQSCKUKDKAQGO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960000735 docosanol Drugs 0.000 description 1
- 230000037336 dry skin Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028023 exocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- FOYKKGHVWRFIBD-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1 FOYKKGHVWRFIBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 description 1
- 229940002508 ginger extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020708 ginger extract Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940046240 glucomannan Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001649 glycyrrhiza glabra l. absolute Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229940094952 green tea extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020688 green tea extract Nutrition 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 229920000591 gum Polymers 0.000 description 1
- 229910052864 hemimorphite Inorganic materials 0.000 description 1
- XJNUECKWDBNFJV-UHFFFAOYSA-N hexadecyl 2-ethylhexanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)C(CC)CCCC XJNUECKWDBNFJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 102000057640 human CD63 Human genes 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 239000008172 hydrogenated vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 229940083980 lavender extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020723 lavender extract Nutrition 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229940051810 licorice root extract Drugs 0.000 description 1
- 235000010420 locust bean gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000711 locust bean gum Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 229940100573 methylpropanediol Drugs 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940105132 myristate Drugs 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N n-heptadecyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCO GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 230000007903 penetration ability Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- ULWHHBHJGPPBCO-UHFFFAOYSA-N propane-1,1-diol Chemical compound CCC(O)O ULWHHBHJGPPBCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012342 propidium iodide staining Methods 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000245 skin permeability Toxicity 0.000 description 1
- 231100000051 skin sensitiser Toxicity 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1[N+](C=2C=CC(I)=CC=2)=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=N1 JUJBNYBVVQSIOU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229960005078 sorbitan sesquioleate Drugs 0.000 description 1
- 229950011392 sorbitan stearate Drugs 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 230000007103 stamina Effects 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 239000006097 ultraviolet radiation absorber Substances 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 235000014692 zinc oxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
- CPYIZQLXMGRKSW-UHFFFAOYSA-N zinc;iron(3+);oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[Fe+3].[Fe+3].[Zn+2] CPYIZQLXMGRKSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/51—Umbilical cord; Umbilical cord blood; Umbilical stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
- A61K8/14—Liposomes; Vesicles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
- A61K8/981—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Birds (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
본 발명의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은 민감성 피부 관련 사이토카인의 발현 또는 생성을 감소시키고 산화스트레스를 예방 또는 억제하여, 민감성 피부를 효과적으로 예방, 억제, 완화 또는 개선할 수 있다. 또한, 본 발명의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 사람의 피부에 직접 적용한 경우 민감성 피부와 관련된 피부 트러블, 홍조 증상 및 홍반 등을 현저히 완화 내지는 개선시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 피부외용제 및 기능성 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 새로운 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 기능성 화장료 조성물 및 피부외용제에 관한 것이다.
외부 성분이나 환경 변화 등에 과민한 반응을 나타내는 피부를 민감성 피부라고 한다. 일반적으로, 민감성 피부란 대부분의 사람들에게는 문제가 되지 않는 물질에 특이적으로 반응하여 피부 트러블을 일으키기 쉬운 피부, 피부장벽기능이 저하되어 있어 알레르기성 물질이나 자극성 물질에 체질적으로 민감한 피부, 수면부족, 과로, 생리, 환절기, 정신적인 스트레스 등에 의해 피부 본래의 저항력 또는 피부의 생리기능이 약해질 때 자극 물질에 대해 일시적으로 피부 트러블이 일어나기 쉬워지는 피부 등을 의미한다. 경우에 따라서는 민감성 피부를 평균적 집단에 비해 접촉성 자극이나 알러지 반응을 더 잘 나타내는 피부라고 정의하기도 한다.
피부상태가 민감하게 되는 요인으로는 피부장벽기능의 저하, 피부자극 임계값의 저하, 피부의 건조, 물리화학적 자극, 스트레스, 몸상태, 계절변화, 자외선, 생리 등을 들 수 있다. 또한, 잘못된 피부 관리에 의해 피부를 민감하게 하거나, 심리적 불안으로 피부를 민감하게 만드는 경우도 있다.
일반적으로 민감성 피부 보유자들은 홍반, 피부 건조, 피부 거칠음, 따가움, 가려움 등을 호소한다. 민감성 피부의 개선을 위한 피부용 화장품들은 자극을 일으킬 여지가 있는 물질을 사전에 제거하여 부작용을 최소화하고 있다. 보다 적극적인 방법으로서 최근에 개발된 기능성 화장품이나 의약 외품은 사이토카인 및 염증 매개물질의 발현 억제, 피부 장벽 강화 기능 등을 통해 민감성 피부를 개선하고 있다.
그러나 사이토카인의 조절 및 염증 매개분자의 발현 억제를 위해 효과적인 비스테로이드계 항염제, 스테로이드계 항염제, 신경 펩타이드 길항제, COX 억제제등은 부작용이 심각하고, 화장료에 배합할 때 안정성 측면에서 문제가 있다. 이러한 문제점을 감안하여 천연물을 원료로 하는 민감성 피부 개선용 피부외용제나 화장료 조성물에 대한 연구가 활발하다. 예를 들어, 수박 내피 추출물, 인도 유향 레진추출물, 라벤더 추출물, 검정콩 추출물, 톳 추출물 등을 사용하여 민감성 피부를 개선하고자 하는 노력이 있다.
하지만, 이러한 천연물을 원료로 하는 민감성 피부 개선용 화장품의 경우, 천연 추출물 내의 유효성분 함량이 적은 관계로 민감성 피부의 실질적인 개선을 위해서는 많은 양의 사용이 필요하고, 이들 중 대부분은 천연물 소재라는 점을 마케팅에 활용하고 있을 뿐 민감성 피부 개선의 실질적 효능에 대해서는 과학적 연구가 좀더 필요한 상황이다.
한편, 최근 세포 분비물(secretome)에 세포의 행동(behavior)을 조절하는 다양한 생체활성인자가 포함되어 있다는 연구가 보고되고 있으며, 특히 세포 분비물 내에는 세포 간 신호전달 기능을 갖는 '엑소좀(exosome)'이 포함되어 있어 그 성분과 기능에 대한 연구가 활발히 진행 중에 있다.
세포는 세포외 환경에 다양한 막(membrane) 유형의 소포체를 방출하는데, 통상 이러한 방출 소포체들을 세포외 소포체(Extracellular vesicles, EV)라고 부르고 있다. 세포외 소포체는 세포막 유래 소포체, 엑토좀(ectosomes), 쉐딩 소포체(shedding vesicles), 마이크로파티클(microparticles), 엑소좀 등으로 불려지기도 하며, 경우에 따라서는 엑소좀과는 구별되어 사용되기도 한다.
엑소좀은 세포막의 구조와 동일한 이중인지질막으로 이루어진 수십 내지 수백 나노미터 크기의 소포체로서 내부에는 엑소좀 카고(cargo)라고 불리는 단백질, 핵산(mRNA, miRNA 등) 등이 포함되어 있다. 엑소좀 카고에는 광범위한 신호전달 요소들(signaling factors)이 포함되며, 이들 신호전달 요소들은 세포 타입에 특이적이고 분비세포의 환경에 따라 상이하게 조절되는 것으로 알려져 있다. 엑소좀은 세포가 분비하는 세포 간 신호전달 매개체로서 이를 통해 전달된 다양한 세포 신호는 표적 세포의 활성화, 성장, 이동, 분화, 탈분화, 사멸(apoptosis), 괴사(necrosis)를 포함한 세포 행동을 조절한다고 알려져 있다. 엑소좀은 유래된 세포의 성질 및 상태에 따라 특이적인 유전물질과 생체활성 인자들이 포함되어 있다. 증식하는 줄기세포 유래 엑소좀의 경우 세포의 이동, 증식 및 분화와 같은 세포 행동을 조절하고, 조직 재생과 관련된 줄기세포의 특성이 반영되어 있다(Nature Review Immunology 2002 (2) 569-579).
그러나 엑소좀을 이용한 특정 질환의 치료에 대한 가능성 제시 등 다양한 연구가 이루어지고 있음에도 불구하고, 엑소좀을 안정적으로 유지·보관할 수 있는 새로운 제형 개발과 엑소좀의 사용 편의성 및 효능 증대 등을 위한 다양한 의료 내지는 미용기술과의 접목은 상대적으로 주목받고 있지 못하고 있다.
본 발명자들은 인체에 부작용이 없으며 화장료 배합 시 안정성 문제를 해결할 수 있는 새로운 민감성 피부 개선 물질을 개발하고자 노력하였다. 이에 본 발명자들은 줄기세포로부터 유래된 엑소좀이 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 효과적임을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
한편, 상기한 배경기술로서 설명된 사항들은 본 발명의 배경에 대한 이해 증진을 위한 것일 뿐, 본 발명의 "선행 기술"로서 이용될 수 있다는 승인으로서 인용한 것은 아님을 이해하여야 한다.
본 발명의 목적은 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 새로운 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 목적은 상기 조성물을 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 기능성 화장료 조성물 및 피부외용제를 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 이용하여, 치료용을 제외한 민감성 피부 개선을 통해 포유동물 피부의 상태를 조절하는 미용방법을 제공하는데 있다.
그러나, 전술한 바와 같은 본 발명의 과제는 예시적인 것으로, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 용어, "엑소좀(exosomes)"은 세포막의 구조와 동일한 이중인지질막으로 이루어진 수십 내지 수백 나노미터(바람직하게는 대략 30~200 nm) 크기의 소포체를 의미한다(단, 분리 대상이 되는 세포 종류, 분리방법 및 측정방법에 따라 엑소좀의 입자 크기는 가변될 수 있음)(Vasiliy S. Chernyshev et al., "Size and shape characterization of hydrated and desiccated exosomes", Anal Bioanal Chem, (2015) DOI 10.1007/s00216-015-8535-3). 엑소좀에는 엑소좀 카고(cargo)라고 불리는 단백질, 핵산(mRNA, miRNA 등) 등이 포함되어 있다. 엑소좀 카고에는 광범위한 신호전달 요소들(signaling factors)이 포함되며, 이들 신호전달 요소들은 세포 타입에 특이적이고 분비세포의 환경에 따라 상이하게 조절되는 것으로 알려져 있다. 엑소좀은 세포가 분비하는 세포 간 신호전달 매개체로서 이를 통해 전달된 다양한 세포 신호는 표적 세포의 활성화, 성장, 이동, 분화, 탈분화, 사멸(apoptosis), 괴사(necrosis)를 포함한 세포 행동을 조절한다고 알려져 있다.
한편, 본 명세서에서 사용된 "엑소좀"이란 용어는 줄기세포에서 분비되어 세포외 공간으로 방출된 나노 크기의 베지클 구조를 갖고 있고 엑소좀과 유사한 조성을 갖는 베지클(예를 들어, 엑소좀-유사 베지클)을 모두 포함하는 것을 의미한다. 상기 줄기세포의 종류는 제한되지 않으나, 본 발명을 한정하지 않는 하나의 예시로서, 바람직하게는 중간엽 줄기세포, 예를 들어 지방, 골수, 제대 또는 제대혈 유래 줄기세포일 수 있으며, 보다 바람직하게는 지방 유래 줄기세포일 수 있다. 상기 지방 유래 줄기세포의 종류는 병원체에 의한 감염의 위험이 없고 면역 거부 반응을 일으키지 않는 것이라면 제한되지 않으나, 바람직하게는 인간지방 유래 줄기세포일 수 있다.
그러나 본 발명에서 사용되는 줄기세포 유래의 엑소좀은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 효과가 있고 인체에 불리한 작용을 일으키지 않는 것이라면 당업계에서 사용되고 있거나 향후 사용될 수 있는 다양한 줄기세포 유래의 엑소좀을 사용할 수 있음은 물론이다. 따라서, 후술하는 실시예들의 분리방법에 따라 분리된 줄기세포 유래의 엑소좀은 본 발명에서 사용될 수 있는 엑소좀의 일례로서 이해되어야 하며, 본 발명은 이에 제한되는 것이 아님을 명백히 밝혀 둔다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선"이란 알레르기성 물질이나 자극성 물질에 체질적으로 민감함 피부, 수면부족, 과로, 생리, 환절기, 정신적인 스트레스 등에 의해 피부 트러블이 일어나기 쉬워지는 피부 등에서 나타나는 홍반, 피부 거칠음, 홍조 증상, 따가움 등의 증세를 미연에 예방 또는 억제하거나, 이미 나타난 상기 증세는 완화시키거나 정상적인 피부상태로 회복시키는 것을 의미한다. "피부 트러블"이란 외부 자극이나 신체적 변화에 의해 피부가 붉게 변하고 가려움증이 나타나며, 심한 경우 작은 돌기나 뾰루지 등이 생기는 현상을 의미한다.
본 명세서에서 용어, "이온토포레시스(iontophoresis)"는 유효물질이 적용된 피부에 미세전류를 흐르게 하여 전위차를 주어 피부의 전기적 환경을 변화시킴으로써 이온화된 유효성분을 전기적 반발력으로 피부를 투과하게 하는 방법을 의미한다. 본 발명의 일 구체예에 사용되는 이온토포레시스(iontophoresis)는 피부 위의 전극 패치에 외부전원으로부터의 전류가 흘러들어가 피부에 미세전류가 도입되는 방식, 전극 패치 자체에 배터리가 장착되어 피부에 미세전류가 도입되는 방식, 고농도 전해질 용액 및 저농도 전해질 용액 간의 이온 농도 차이를 통해 전류를 발생시키는 역전기투석(Reversed Electrodialysis) 수단이 장착된 패치를 통해 피부에 미세전류가 도입되는 방식 등을 포함할 수 있다. 그러나, 본 발명은 이에 제한되는 것이 아니며, 다양한 방식의 이온토포레시스가 사용될 수 있음은 물론이다.
한편, 줄기세포 유래의 엑소좀을 이용한, 제한적인 주름개선 및 피부재생 효과가 보고된 바가 있다. 그러나 상기 종래기술에 있어서의 엑조좀을 이용한 피부재생은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 관한 것이 아니고, 피부조직의 재생을 통해 주름을 개선하거나 피부 탄력을 회복시키는 것에 관한 것이었다. 그리고 줄기세포, 줄기세포 배양액 등을 이용하여 피부 중 진피층을 재생하여 창상을 치료하고, 피부조직을 재생하여 피부 탄력을 개선하고자 한 시도는 있으나, 줄기세포 배양액으로부터 분리 정제된 엑소좀을 사용할 때 전술한 바와 같이 정의된 "민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선" 효과가 있다는 것에 대해서는 공지된 바가 없었다.
본 발명의 조성물은 피부외용제 또는 화장료 조성물로 적용될 때, 유효성분으로 함유된 줄기세포 유래의 엑소좀이 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 유의적인 효과를 나타내며, 줄기세포 자체나 줄기세포 배양액의 안전성 문제를 해결할 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물에 포함된 줄기세포 유래의 엑소좀은 종래에 알려진 제한적인 주름개선 및 피부재생과는 전혀 다른 메카니즘으로 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선 효능을 나타내며 이러한 효능은 종래기술로부터 전혀 예측할 수 없는 것임을 명백히 밝혀 둔다.
또한, 본 발명의 조성물은 민감성 피부질환의 예방, 완화, 개선 또는 치료용 약학 조성물로 사용될 수 있다. 여기서, "민감성 피부질환"은 상기 정의된 바와 같은 민감성 피부에서 나타나기 쉬운 홍반, 피부 건조, 피부 거칠음, 홍조 증상, 따가움, 가려움 등의 증세 자체와 이러한 증세로 인해 발생되는 2차적인 피부질환을 포괄하는 광의적 의미로 사용된다.
본 발명의 일 구체예의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은, 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함한다.
본 발명의 일 구체예의 조성물에 있어서, 상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 피부에서 산화스트레스를 감소시킬 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 조성물은, 상기 줄기세포 유래의 엑소좀과, 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스를 유효성분으로 포함하는 동결건조제제를 포함할 수 있다. 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스의 중량비는 1:1:1이다.
본 발명의 일 구체예의 조성물에 있어서, 상기 동결건조제제는 아스코르브산 및 레티놀을 추가로 함유할 수 있다. 예를 들어, 메티오닌, 만니톨, 트레할로오스, 아스코르브산 및 레티놀의 중량비는 9:9:9:0.5:0.5이다.
본 발명의 일 구체예의 조성물은, 상기 동결건조제제와, 희석제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 희석제는 주사용수, 생리적 식염수, 인산염 완충용액, 정제수, 또는 탈이온수일 수 있다. 또한, 상기 희석제는 히알루론산 또는 히알루론산염(예를 들어, 히알루론산 나트륨)을 추가로 포함할 수 있다. 일례로서, 상기 조성물은 현탁액일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 조성물은 화장료 조성물 또는 피부 외용제일 수 있다. 예를 들어, 화장료 조성물은 크림 또는 로션일 수 있다.
한편, 본 발명의 일 구체예의 조성물이 피부외용제 및/또는 화장료 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 효과를 손상하지 않는 범위내에서 통상 화장품이나 피부외용제에 이용되는 성분, 예를 들면 보습제, 산화방지제, 유성성분, 자외선 흡수제, 유화제, 계면활성제, 증점제, 알콜류, 분말성분, 색재, 수성성분, 물, 각종 피부영양제 등을 필요에 따라 적절히 배합할 수 있다.
또한, 본 발명의 일 구체예의 피부외용제 및/또는 화장료 조성물은 줄기세포 유래의 엑소좀 이외에, 그 작용(민감성 피부 개선 등)을 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용된 민감성 피부 개선제 및/또는 보습제를 함께 혼합하여 사용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 줄기세포 유래의 엑소좀은 하이드로겔, 히알루론산, 히알루론산 염(예를 들어 히알루론산 나트륨 등), 또는 히알루론산 겔 중 적어도 1종에 담지되거나 혼합될 수 있다. 본 발명의 일 구체예의 피부외용제 및/또는 화장료 조성물에서, 상기 하이드로겔의 종류는 제한되지 않으나, 바람직하게는 겔화 고분자를 다가 알코올에 분산시켜 얻은 하이드로겔일 수 있다. 상기 겔화 고분자는 플루로닉, 정제한천, 아가로오스, 젤란검, 알긴산, 카라기난, 카시아검, 잔탄검, 갈락토만난, 글루코만난, 펙틴, 셀룰로오스, 구아검 및 로커스트빈검으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종일 수 있고, 상기 다가 알코올은 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 이소부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 소르비톨, 자일리톨 및 글리세린으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 피부외용제 및/또는 화장료 조성물은 예를 들면, 패취, 마스크팩, 마스크시트, 크림, 토닉, 연고, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 로션, 젤, 오일, 팩, 스프레이, 에어졸, 미스트, 파운데이션, 파우더, 기름 종이 등의 다양한 형태에 적용할 수 있다. 예를 들어, 상기 피부외용제 및/또는 화장료 조성물은 패취, 마스크팩 또는 마스크시트의 적어도 일면(一面)에 도포되거나 침적될 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 화장료 조성물은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선시킬 목적으로 사용되며, 화장품 제형은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어 패취, 마스크팩, 마스크시트, 유연화장수, 영양화장수, 수렴화장수, 영양크림, 마사지크림, 아이크림, 클렌징크림, 에센스, 아이에센스, 클렌징로션, 클렌징폼, 클렌징워터, 선스크린, 립스틱, 비누, 샴푸, 계면활성제-함유 클렌징, 입욕제, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 바디세정제, 염모제, 헤어토닉 등으로 제형화할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구체예의 피부외용제 및/또는 화장료 조성물은 피부외용제 및/또는 화장품에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 그리고 담체를 포함할 수 있다. 또한, 피부외용제 및/또는 화장료 조성물에 대한 각각의 제형에 있어서, 다른 성분들은 피부외용제 및/또는 화장료 조성물의 종류 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.
또한, 본 발명은 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취와, 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 이온토포레시스 디바이스를 포함하는 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트를 제공한다. 상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 피부에서 산화스트레스를 감소시킨다.
예를 들어, 본 발명의 일 구체예의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트는, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취를 포유동물의 피부 위에 접촉 또는 부착시키고, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 상기 이온토포레시스 디바이스를 위치시킴으로써, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 접촉 또는 부착되어 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 방식으로 사용될 수 있다.
상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은 줄기세포 유래의 엑소좀 이외에, 그 작용(민감성 피부 개선, 민김성 피부로 인한 피부트러블 예방, 피부 상태의 개선, 피부 미용 등)을 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용된 민감성 피부 개선제 및/또는 보습제를 함께 혼합하여 사용할 수 있다. 예를 들어, 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은 하이드로겔, 히알루론산, 히알루론산 염(예를 들어 히알루론산 나트륨 등), 또는 히알루론산 겔 중 적어도 1종에 담지되거나 혼합될 수 있다. 상기 하이드로겔의 종류는 제한되지 않으나, 바람직하게는 겔화 고분자를 다가 알코올에 분산시켜 얻은 하이드로겔일 수 있다. 상기 겔화 고분자 및 다가 알코올은 앞선 설명들에서 예시된 것일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트에 있어서, 상기 이온토포레시스 디바이스는 가요성 배터리, 리튬이온 이차 전지, 알칼리 전지, 건전지, 수은 전지, 리튬 전지, 니켈-카드뮴 전지, 및 역전기 투석 전지로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 1종의 전지를 포함하거나, 상기 적어도 1종의 전지가 장착된 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트에 있어서, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 상기 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 적층되어 사용될 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트에 있어서, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취의 적어도 일면(一面)에는 하이드로겔, 히알루론산, 히알루론산 염(예를 들어 히알루론산 나트륨), 또는 히알루론산 겔 중 적어도 1종이 도포될 수 있다. 상기 하이드로겔의 종류는 제한되지 않으나, 바람직하게는 겔화 고분자를 다가 알코올에 분산시켜 얻은 하이드로겔일 수 있다. 상기 겔화 고분자 및 다가 알코올은 앞선 설명들에서 예시된 것일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트에 따르면, 상기 이온토포레시스 디바이스로부터 미세전류가 흐름으로써 줄기세포 유래의 엑소좀이 표피를 효과적으로 통과하고 피부 내부 깊숙이 침투할 수 있게 된다. 이에 따라 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 보다 효과적으로 기여할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 이용하여, 치료용을 제외한 민감성 피부 개선을 통해 포유동물 피부의 상태를 조절하는 미용방법을 제공한다. 본 발명의 미용방법에 있어서, 피부의 상태 조절이란 피부의 상태를 개선시키고/시키거나 피부의 상태를 예방적으로 조절하는 것을 의미하고, 피부의 상태 개선이란 피부 조직의 외관 및 느낌의 시각적 및/또는 촉각적으로 지각할 수 있는 긍정적인 변화를 의미한다. 예를 들어, 피부의 상태 개선이란 피부의 홍반이나 붉은기 감소, 따가움 감소, 피부 트러블 예방, 또는 촉촉하고 윤기가 있는 피부 상태일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법은, (a) 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 포유동물의 피부에 직접 도포하는 것, (b) 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 패취, 마스크팩 또는 마스크시트를 포유동물의 피부에 접촉 또는 부착하는 것, 또는 상기 (a) 및 (b)를 순차적으로 진행하는 것을 포함한다. 상기 (a) 단계에서는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물로서 로션이나 크림이 사용될 수 있다.
대안으로, 본 발명의 일 구체예의 미용방법은, (c) 상기 (b) 단계 이후에 상기 패취, 마스크팩 또는 마스크시트를 상기 포유동물의 피부로부터 제거하고, 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 포유동물의 피부에 도포하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 (c) 단계에서는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물로서 로션이나 크림이 사용될 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법은, 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흐르게 하여 이온토포레시스(iontophoresis)를 수행하는 것을 더 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 구체예의 미용방법은, 이온토포레시스 장치를 상기 포유동물의 피부에 접촉 또는 부착시키는 것을 더 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 일 구체예의 미용방법은, 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취와, 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 이온토포레시스 디바이스를 포함하는 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트를 이용하여 수행될 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 일 구체예의 미용방법은, (a) 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취를 포유동물의 피부 위에 접촉 또는 부착하는 단계와, (b) 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 이온토포레시스 디바이스를 위치시키는 단계와, (c) 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 접촉 또는 부착되어 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 이온토포레시스를 수행하는 단계와, (d) 상기 미세전류를 통하여 상기 줄기세포 유래의 엑소좀을 포유동물 피부 내부로 전달하는 단계를 포함한다. 상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 피부에서 산화스트레스를 감소시킨다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법에 있어서, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취의 적어도 일면(一面)에는 하이드로겔, 히알루론산, 히알루론산 염(예를 들어 히알루론산 나트륨 등), 또는 히알루론산 겔 중 적어도 1종이 도포될 수 있다. 상기 하이드로겔의 종류는 제한되지 않으나, 바람직하게는 겔화 고분자를 다가 알코올에 분산시켜 얻은 하이드로겔일 수 있다. 상기 겔화 고분자 및 다가 알코올은 앞선 설명들에서 예시된 것일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법에 있어서, 상기 이온토포레시스 디바이스는 가요성 배터리, 리튬이온 이차 전지, 알칼리 전지, 건전지, 수은 전지, 리튬 전지, 니켈-카드뮴 전지, 및 역전기 투석 전지로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 1종의 전지를 포함하거나, 상기 적어도 1종의 전지가 장착된 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취일 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법에 있어서, 상기 (b) 단계는 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 상기 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취를 적층하여 수행될 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법에 있어서, 상기 이온토포레시스 디바이스로부터 미세전류가 흐름으로써 줄기세포 유래의 엑소좀이 표피를 효과적으로 통과하고 피부 내부 깊숙이 침투할 수 있게 된다. 이에 따라 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 보다 효과적으로 기여할 수 있다.
본 발명의 일 구체예의 미용방법에 있어서, 상기 포유동물은 인간, 개, 고양이, 설치류, 말, 소, 원숭이, 또는 돼지일 수 있다.
본 발명의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은 민감성 피부 관련 사이토카인의 발현 또는 생성을 감소시키고 산화스트레스를 예방 또는 억제하여, 민감성 피부를 효과적으로 예방, 억제, 완화 또는 개선할 수 있다. 또한, 본 발명의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 사람의 피부에 직접 적용한 경우 민감성 피부와 관련된 피부 트러블, 홍조 증상 및 홍반 등을 현저히 완화 내지는 개선시킬 수 있다.
따라서, 본 발명의 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 피부외용제 및 기능성 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.
한편, 전술한 바와 같은 효과들에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
도 1은 본 발명의 일 구체예에 따라 얻어진 엑소좀의 물리적 특성 분석 결과를 도시한 것이다. "도 1A"는 TRPS(tunable resistive pulse sensing) 분석에 의한 입자 크기 분포와 입자수를 나타낸다. "도 1B"는 NTA(nanoparticle tracking analysis) 분석에 의한 입자 크기 분포와 입자수를 나타낸다. "도 1C"는 TEM(transmitted electron microscopy) 분석에 의한 입자 이미지를 배율에 따라 도시하였다. "도 1D"는 본 발명의 일 구체예에 따라 얻어진 엑소좀의 웨스턴 블랏 결과를 나타낸다. "도 1E"는 본 발명의 일 구체예에 따라 얻어진 엑소좀에 대한 마커 분석에 있어서 CD63 및 CD81에 대한 유세포분석 결과를 나타낸다.
도 2는 인체 피부섬유아세포인 HS68 세포에 본 발명의 일 구체예에 따른 엑소좀을 처리한 후 세포 독성이 없음을 확인한 결과를 도시한다.
도 3은 RAW 264.7 세포에 대해 LPS와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 경우 LPS에 의해 유도되는 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 iNOS mRNA의 발현량이 감소한 것을 확인한 리얼타임 PCR 결과를 도시한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 구체예에 따른 엑소좀에 의한, 염증 반응의 일종인 NO 형성의 감소 효과를 확인한 실험 결과를 도시한다. 도 4에서 PBS는 인산염 완충용액(phosphate-buffered saline), DEX는 덱사메타손(dexamethasone), EXO는 엑소좀, CM은 지방줄기세포 배양액(conditioned media), CM-EXO는 엑소좀이 제거된 지방줄기세포 배양액(exosome-depeleted conditioned media)을 나타낸다.
도 5는 본 발명의 일 구체예에 따른 엑소좀에 의한, 염증성 사이토카인인 TNF-α 형성의 감소 효과를 확인한 실험 결과를 도시한다. 도 5에서, PBS는 인산염 완충용액(phosphate-buffered saline), DEX는 덱사메타손(dexamethasone), 각 숫자는 엑소좀 처리량(μg/mL)을 나타낸다.
도 6은 본 발명의 일 구체예에 따라 분리된 엑소좀에 의한 NO 형성 감소 효과와, 종래의 침전법(PPT)에 의해 분리된 엑소좀에 의한 NO 형성 감소 효과를 비교한 실험 결과를 도시한다. 도 6A는 종래의 침전법에 의해 분리된 엑소좀의 NTA 분석 결과이고, 도 6B는 본 발명의 일 구체예에 따른 방법에 의해 분리 정제된 엑소좀의 NTA 분석 결과이며, 도 6C는 NO 형성 감소 효과를 비교 도시한 그래프이다. NO 형성의 감소 정도는 양성대조군인 덱사메타손(Dex)에 의한 NO 형성 감소 정도에 대한 상대 비율(%)로 표시하였다.
도 7은 PKH67로 염색된 엑소좀을 확인한 형광강도 측정 결과를 도시한다.
도 8은 돼지 피부조직 내부로, 형광염색된 엑소좀이 전달된 정도를 확인한 형광현미경 이미지이다.
도 9는 생쥐 피부조직 내부로, 형광염색된 엑소좀이 전달된 정도를 확인한 공초점형광현미경 이미지이다.
도 10은 도 9의 각 이미지 상의 형광강도를 측정하여 얻은 총 형광강도를 비교하여 도시한 그래프이다.
도 11은 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)의 구성을 나타내는 사시도이다.
도 12는 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트를 사람 피부에 처리하고 처리 전후의 피부 상태를 비교하는 사진이다.
도 13은 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트에 사용되는 엑소좀을 포함하는 조성물을 사람의 피부(환부)에 도포한 후 상기 조성물이 도포된 피부(환부)에 미세전류를 흘려주는 이온토포레시스를 수행한 결과, 피부(환부)의 홍반 등이 현저히 개선된 것을 보여주는 사진이다.
도 14는 인간 피부섬유아세포인 HDF 세포에 대해 과산화수소에 의한 산화 스트레스를 유발한 후, 아넥신 V(Annexin V)/PI 염색을 이용하여 HDF 세포의 괴사(necrosis) 및 세포사멸(apoptosis) 정도를 보여주는 유세포분석 결과이다.
도 15는 도 14의 유세포분석 결과 중 초기 세포사멸(early apoptosis) 및 후기 세포사멸(late apoptosis)를 나타내는 구획을 합산하여 얻은 HDF 세포의 사멸 비율을 나타낸 그래프이다.
도 16은 THP-1 단핵구를 대식세포로 분화시킨 후 얻은 THP-1 유래 대식세포에 대해, LPS 및 IFN-γ와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리(co-treatment)한 경우, 친염증성 사이토카인인 IL-6의 mRNA 발현량이 감소한 것을 확인한 리얼타임 PCR 결과를 도시한 그래프이다.
도 17 내지 도 19는 THP-1 단핵구를 대식세포로 분화시킨 후 얻은 THP-1 유래 대식세포에 대해, 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 전처리(pre-treatment)하고 일정 시간 배양한 다음 LPS 및 IFN-γ를 처리한 경우, 친염증성 사이토카인인 IL-6, IL-1β 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 감소한 것을 확인한 리얼타임 PCR 결과를 도시한 그래프이다.
도 20 내지 도 22는 멀티플렉스 패널을 이용한 유세포분석 결과를 도시한 그래프로서, RAW 264.7 세포에 대해 LPS와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 경우 LPS에 의해 유도되는 IL-6, IL-27 및 IFN-β의 생성량이 감소한 것을 나타낸다.
도 23은 본 발명의 일 구체예의 방법에 따라 동결건조된 엑소좀의 양호한 성상을 나타내는 사진이다.
도 24a 내지 도 24g는 동결건조 보호제 성분의 조합을 다르게 하고 동결건조를 수행한 후, 동결건조 보호제 성분 조합별로 동결건조 엑소좀의 성상을 촬영한 사진이다.
도 2는 인체 피부섬유아세포인 HS68 세포에 본 발명의 일 구체예에 따른 엑소좀을 처리한 후 세포 독성이 없음을 확인한 결과를 도시한다.
도 3은 RAW 264.7 세포에 대해 LPS와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 경우 LPS에 의해 유도되는 TNF-α, IL-6, IL-1β 및 iNOS mRNA의 발현량이 감소한 것을 확인한 리얼타임 PCR 결과를 도시한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 구체예에 따른 엑소좀에 의한, 염증 반응의 일종인 NO 형성의 감소 효과를 확인한 실험 결과를 도시한다. 도 4에서 PBS는 인산염 완충용액(phosphate-buffered saline), DEX는 덱사메타손(dexamethasone), EXO는 엑소좀, CM은 지방줄기세포 배양액(conditioned media), CM-EXO는 엑소좀이 제거된 지방줄기세포 배양액(exosome-depeleted conditioned media)을 나타낸다.
도 5는 본 발명의 일 구체예에 따른 엑소좀에 의한, 염증성 사이토카인인 TNF-α 형성의 감소 효과를 확인한 실험 결과를 도시한다. 도 5에서, PBS는 인산염 완충용액(phosphate-buffered saline), DEX는 덱사메타손(dexamethasone), 각 숫자는 엑소좀 처리량(μg/mL)을 나타낸다.
도 6은 본 발명의 일 구체예에 따라 분리된 엑소좀에 의한 NO 형성 감소 효과와, 종래의 침전법(PPT)에 의해 분리된 엑소좀에 의한 NO 형성 감소 효과를 비교한 실험 결과를 도시한다. 도 6A는 종래의 침전법에 의해 분리된 엑소좀의 NTA 분석 결과이고, 도 6B는 본 발명의 일 구체예에 따른 방법에 의해 분리 정제된 엑소좀의 NTA 분석 결과이며, 도 6C는 NO 형성 감소 효과를 비교 도시한 그래프이다. NO 형성의 감소 정도는 양성대조군인 덱사메타손(Dex)에 의한 NO 형성 감소 정도에 대한 상대 비율(%)로 표시하였다.
도 7은 PKH67로 염색된 엑소좀을 확인한 형광강도 측정 결과를 도시한다.
도 8은 돼지 피부조직 내부로, 형광염색된 엑소좀이 전달된 정도를 확인한 형광현미경 이미지이다.
도 9는 생쥐 피부조직 내부로, 형광염색된 엑소좀이 전달된 정도를 확인한 공초점형광현미경 이미지이다.
도 10은 도 9의 각 이미지 상의 형광강도를 측정하여 얻은 총 형광강도를 비교하여 도시한 그래프이다.
도 11은 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)의 구성을 나타내는 사시도이다.
도 12는 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트를 사람 피부에 처리하고 처리 전후의 피부 상태를 비교하는 사진이다.
도 13은 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트에 사용되는 엑소좀을 포함하는 조성물을 사람의 피부(환부)에 도포한 후 상기 조성물이 도포된 피부(환부)에 미세전류를 흘려주는 이온토포레시스를 수행한 결과, 피부(환부)의 홍반 등이 현저히 개선된 것을 보여주는 사진이다.
도 14는 인간 피부섬유아세포인 HDF 세포에 대해 과산화수소에 의한 산화 스트레스를 유발한 후, 아넥신 V(Annexin V)/PI 염색을 이용하여 HDF 세포의 괴사(necrosis) 및 세포사멸(apoptosis) 정도를 보여주는 유세포분석 결과이다.
도 15는 도 14의 유세포분석 결과 중 초기 세포사멸(early apoptosis) 및 후기 세포사멸(late apoptosis)를 나타내는 구획을 합산하여 얻은 HDF 세포의 사멸 비율을 나타낸 그래프이다.
도 16은 THP-1 단핵구를 대식세포로 분화시킨 후 얻은 THP-1 유래 대식세포에 대해, LPS 및 IFN-γ와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리(co-treatment)한 경우, 친염증성 사이토카인인 IL-6의 mRNA 발현량이 감소한 것을 확인한 리얼타임 PCR 결과를 도시한 그래프이다.
도 17 내지 도 19는 THP-1 단핵구를 대식세포로 분화시킨 후 얻은 THP-1 유래 대식세포에 대해, 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 전처리(pre-treatment)하고 일정 시간 배양한 다음 LPS 및 IFN-γ를 처리한 경우, 친염증성 사이토카인인 IL-6, IL-1β 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 감소한 것을 확인한 리얼타임 PCR 결과를 도시한 그래프이다.
도 20 내지 도 22는 멀티플렉스 패널을 이용한 유세포분석 결과를 도시한 그래프로서, RAW 264.7 세포에 대해 LPS와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 경우 LPS에 의해 유도되는 IL-6, IL-27 및 IFN-β의 생성량이 감소한 것을 나타낸다.
도 23은 본 발명의 일 구체예의 방법에 따라 동결건조된 엑소좀의 양호한 성상을 나타내는 사진이다.
도 24a 내지 도 24g는 동결건조 보호제 성분의 조합을 다르게 하고 동결건조를 수행한 후, 동결건조 보호제 성분 조합별로 동결건조 엑소좀의 성상을 촬영한 사진이다.
이하 본 발명을 하기 실시예에서 보다 상세하게 기술한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 권리범위를 제한하거나 한정하는 것이 아니다. 본 발명의 상세한 설명 및 실시예로부터 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 기술자가 용이하게 유추할 수 있는 것은 본 발명의 권리범위에 속하는 것으로 해석된다. 본 발명에 인용된 참고문헌들은 본 발명에 참고로서 통합된다.
명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
실시예
실시예 1: 세포의 배양
마우스 대식세포주인 RAW 264.7은 한국세포주은행 또는 ATCC에서 구입하여 배양하였다. 세포 배양을 위해 10% 우태아 혈청 (fetal bovine serum: ThermoFisher Scientific에서 구입) 및 1% 항생제-항진균제 (antibiotics-antimycotics: ThermoFisher Scientific에서 구입)가 함유된 DMEM (ThermoFisher Scientific에서 구입) 배지에 5% CO2, 37℃ 조건에서 계대 배양하였다.
인체 피부 섬유아세포(human dermal fibroblast)인 HS68 세포는 ATCC에서 구입하여, 10% 우태아 혈청 (fetal bovine serum: ThermoFisher Scientific에서 구입) 및 1% 항생제-항진균제 (antibiotics-antimycotics: ThermoFisher Scientific에서 구입)가 함유된 DMEM (ThermoFisher Scientific에서 구입) 배지에 5% CO2, 37℃ 조건에서 계대 배양하였다.
당해 발명이 속하는 기술분야에 알려진 세포배양 방법에 따라 5% CO2, 37℃ 조건에서 지방 유래 줄기세포를 배양하였다. 그 다음, 인산염 완충용액(phosphate-buffered saline)(ThermoFisher Scientific에서 구입)으로 세척 후, 무혈청, 무페놀레드 배지로 교체하여 1일 내지 10일간 배양하고 그 상층액(이하, 배양액)을 회수하였다.
엑소좀의 분리 과정에서 입자크기 분포가 균일하고 순도가 높은 엑소좀을 수득하기 위하여 배양액에 트레할로오스를 2 중량% 첨가하였다. 트레할로오스를 첨가한 후 배양액을 0.22 μm 필터로 여과하여 세포 잔해물, 노폐물 및 거대 입자 등의 불순물을 제거해 주었다. 여과된 배양액은 즉시 분리 과정을 통해 엑소좀을 분리하였다. 또한, 여과된 배양액은 냉장고(영상 10℃ 이하)에서 보관한 후 엑소좀 분리에 사용하였다. 또한, 여과된 배양액은 -60℃ 이하의 초저온 냉동고에서 동결 보관하였다가 해동시킨 후 엑소좀 분리를 수행하였다. 이후, 배양액으로부터 접선흐름여과장치(Tangential Flow Filtration; TFF)를 이용하여 엑소좀을 분리하였다.
실시예 2: TFF 방법에 의한 엑소좀의 분리 및 정제
실시예 1에서 0.22 μm 필터로 여과된 배양액으로부터 엑소좀을 분리, 농축, 탈염과 버퍼교환(diafiltration)을 위해 TFF(Tangential Flow Filtration) 방법을 사용하였다. TFF 방법을 위한 필터로는 카트리지 필터(cartridge filter, 일명 hollow fiber filter; GE Healthcare에서 구입) 또는 카세트 필터(cassette filter; Pall 또는 Sartorius 또는 Merck Millipore에서 구입)를 사용하였다. TFF 필터는 다양한 분자량 차단(molecular weight cutoff; MWCO)에 의해 선택될 수 있다. 선택된 MWCO에 의해 선별적으로 엑소좀을 분리, 농축하였고, MWCO보다 작은 입자나 단백질, 지질, 핵산, 저분자 화합물 등은 제거하였다.
엑소좀을 분리, 농축하기 위하여 MWCO 100,000 Da(Dalton), 300,000 Da, 또는 500,000 Da의 TFF 필터를 사용하였다. 배양액을 TFF 방법을 이용하여 1/100 내지 1/25 정도의 부피가 될 때까지 농축하면서, MWCO보다 작은 물질들은 제거하여 엑소좀을 분리하였다.
분리, 농축된 엑소좀 용액은 TFF 방법을 이용하여 추가로 탈염과 버퍼교환(diafiltration)을 수행하였다. 이때, 탈염과 버퍼교환은 연속적으로 수행(continuous diafiltration)하거나 단속적으로 수행(discontinuous diafiltration)하였으며, 시작 부피(starting volume)에 대하여 적어도 4배, 바람직하게는 6배 내지는 10배 이상, 보다 바람직하게는 12배 이상의 부피를 갖는 완충용액을 이용하여 수행하였다. 완충용액에는 입자크기 분포가 균일하고 순도가 높은 엑소좀을 수득하기 위하여 PBS에 녹인 2 중량%의 트레할로오스를 첨가하였다.
실시예 3: 분리된 엑소좀의 특성 분석
분리된 엑소좀은 나노입자 트랙킹 분석(nanoparticle tracking analysis: NTA; Malvern에서 구입) 또는 가변 저항펄스 감지(tunable resistive pulse sensing: TRPS; Izon Science에서 구입)에 의해 입자의 크기와 농도를 측정하였다. 분리된 엑소좀의 균일도와 크기는 투과전자현미경(transmitted electron microscopy: TEM)을 이용하여 분석하였다. 본 발명의 일 구체예에 따라 분리된 엑소좀의 TRPS, NTA, TEM 분석 결과는 도 1A 내지 도 1C에 도시하였다.
도 1D는 본 발명의 일 구체예의 방법에 따라 분리된 엑소좀에 대해 웨스턴 블랏을 수행한 결과로서, CD9, CD63, CD81 및 TSG101 마커의 존재를 확인하였다. 각 마커에 대한 항체로는 각각 항-CD9 (Abcam에서 구입), 항-CD63 (System Biosciences에서 구입), 항-CD81 (System Biosciences에서 구입), 및 항-TSG101 (Abcam에서 구입)을 사용하였다.
도 1E는 본 발명의 일 구체예의 방법에 따라 분리된 엑소좀에 대해 유세포분석기를 이용하여 분석한 결과로서 CD63 및 CD81 마커의 존재를 확인하였다. CD63에 대해 양성(positive)인 엑소좀을 분리하기 위하여 엑소좀-휴먼 CD63 분리/검출 키트(ThermoFisher Scientific에서 구입)를 제조사의 방법에 따라 사용하였고, PE-마우스 항-인간 CD63 (PE-Mouse anti-human CD63)(BD에서 구입) 및 PE-마우스 항-인간 CD81 (PE-mouse anti-human CD81)(BD에서 구입)을 사용하여 마커를 염색한 후, 유세포분석기 (ACEA Biosciences)를 이용하여 분석하였다.
한편, 본 발명에서 사용되는 줄기세포 유래의 엑소좀은 전술한 바와 같은 실시예들의 엑소좀에 제한되는 것이 아니며, 당업계에서 사용되고 있거나 향후 사용될 수 있는 다양한 줄기세포 유래의 엑소좀을 사용할 수 있음은 물론이다. 상기 실시예들에 따라 분리된 줄기세포 유래의 엑소좀은 본 발명에서 사용될 수 있는 줄기세포 유래의 엑소좀의 일례로서 이해되어야 하며, 본 발명은 이에 제한되는 것이 아님을 명백히 밝혀 둔다.
실시예 4: 엑소좀 처리에 따른 세포 독성 측정
인체 피부 섬유아세포인 HS68 세포에서 본 발명의 일 구체예의 분리 방법에 따라 수득된 엑소좀의 독성을 평가하기 위해 세포에 농도별로 엑소좀을 처리하고 세포의 증식률을 확인하였다. HS68 세포를 10% FBS를 포함한 DMEM에 현탁시킨 후 80 내지 90%의 밀집도(confluency)를 갖도록 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 24시간 후, 배양액을 제거하고 실시예 2에서 준비된 엑소좀을 농도 별로 처리하여 24 내지 72시간 동안 배양하면서 세포 생존율을 평가하였다. 세포 생존율을 WST-1 시약(WST-1 reagent)(Takara에서 구입), MTT 시약(Sigma에서 구입), 셀타이터-글로 시약(CellTiter-Glo reagent)(Promega에서 구입), 또는 아라마르 블루 시약(alamarBlue reagent)(ThermoFisher Scientific에서 구입)과 마이크로플레이트 리더(microplate reader)(Molecular Devices에서 구입)를 이용하여 측정하였다.
비교군은 엑소좀이 처리되지 않은 일반 세포배양배지에서 배양된 세포수를 기준으로 하였고, 시험된 농도 범위 내에서 본 발명의 엑소좀에 의한 세포 독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도 2).
실시예 5: 엑소좀의 동결건조
실시예 5-1: 동결건조 조건
엑소좀의 동결건조를 위해 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스를 포함하는 동결건조 보호제를 준비하였다. 아스코르브산 및 레티놀을 각각 0.5 mg/mL로 함유하고 있는 1mL의 수용액[(주)바이오에프디엔씨(대한민국 전남 화순군 소재)에서 외주 제작]에 상기 동결건조 보호제를 첨가한 수용액을 준비하였다. 본 실시예에서는 동결건조 보호제를 아스코르브산 및 레티놀을 함유하고 있는 용액에 첨가하였으나, 주사용수, 정제수, 생리적 식염수, 또는 탈이온수에 동결건조 보호제를 첨가하여 수용액을 준비할 수도 있다. 상기 수용액 내의 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스의 농도는 각각 9 mg/mL가 되도록 하였다.
동결건조 보호제가 함유된 수용액에 실시예 2에서 준비된 엑소좀(5×108 입자)을 혼합한 후 동결건조 장비(제조사: VIRTIS, ITME No.: 34424)를 이용하여 하기 표 1의 조건으로 동결건조를 수행하였다. 동결건조는 하기 표 1의 조건 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 및 8의 순서로 진행하였다.
| 총 시간 (min) | 4320 | ||
| 조건 | 시간 (min) | 온도 (℃) | 압력 (mmHg) |
| 1 | 700 | -50 | 760 |
| 2 | 60 | -50 | 760 |
| 3 | 999 | -50 | 0 |
| 4 | 999 | -50 | 0 |
| 5 | 999 | -50 | 0 |
| 6 | 370 | -50 | 0 |
| 7 | 120 | -20 | 0 |
| 8 | 73 | 10 | 0 |
메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스를 포함하는 동결건조 보호제를 처리하여 엑소좀을 동결건조 후 성상을 확인한 결과, 색은 유백색이며 다공성의 스폰지 형상을 유지하는 양호한 성상을 나타내는 것을 확인할 수 있었다(도 23). 즉, 본 발명의 엑소좀의 동결건조 방법에서는 감압 하에서의 건조 시간을 길게 하고 동결건조 보호제를 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스의 조합으로 구성함으로써 우수한 성상을 나타내는 동결건조 제품을 수득할 수 있었다.
실시예 5-2: 동결건조 보호제 성분에 따른 엑소좀 제품의 성상 비교
한편, 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스 (이하, 동결건조 보호제 성분이라 함) 중 적어도 1종을 포함하는 다양한 동결건조 보호제를 사용하여 엑소좀을 동결건조한 경우의 엑소좀의 성상을 비교하였다. 상기 실시예 5-1에 기재된 방법에 따라 동결건조 보호제 성분 단독, 2가지 성분의 조합, 또는 3가지 성분 조합을 첨가한 7가지 종류의 수용액을 준비하였다. 상기 수용액 내에서 각 동결건조 보호제 성분의 농도는 9 mg/mL가 되도록 하였다. 상기 실시예 5-1의 동결건조 조건 및 방법에 따라, 동결건조 보호제 성분의 각 조합이 함유된 수용액에 실시예 2에서 준비된 엑소좀(5×108 입자)을 혼합한 후 동결건조를 수행하였다.
동결건조된 엑소좀 제품들에 대한 외형 성상을 촬영하고 평가하였다(도 24a 내지 도 24g). 동결건조된 엑소좀 제품의 케익 모양의 좋고 나쁨에 따라 가장 좋은 것은 5점으로 하고 가장 나쁜 것은 1점으로 하여 외형 성상을 상대 평가하였다. 동결건조 보호제 성분 조합별로 엑소좀 제품의 성상을 평가한 결과는 하기 표 2와 같다.
| 동결건조 보호제 성분 조성 | 만니톨 | 트레할로오스 | 메티오닌 | 메티오닌+ 트레할로오스 |
메티오닌+ 만니톨 |
트레할로오스+ 만니톨 |
메티오닌+만니톨+트레할로오스(본 발명) |
| 평가점수 | 1 | 1 | 4 | 3 | 4 | 2 | 5 |
| 도면 | 도 24a | 도 24b | 도 24c | 도 24d | 도 24e | 도 24f | 도 24g |
도 24a 내지 도 24g 및 상기 표 2에서 확인되는 바와 같이 본 발명의 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스의 조합으로 구성된 동결건조 보호제를 사용하여 엑소좀을 동결건조한 경우가 제품 외형 성상이 가장 양호하였고, 상기 3가지 성분 중 1가지 또는 2가지 성분이 빠진 조합으로 동결건조한 엑소좀은 제품 외형 성상이 본 발명의 경우 보다 불량함을 알 수 있었다.
실시예 6: 마크로파지 세포주를 이용한 염증 반응 측정
RAW 264.7 세포를 10% FBS를 포함한 DMEM 배지에 현탁시키고 이를 멀티웰 플레이트(multiwell plate)의 각 웰에 80 내지 90%의 밀집도(confluency)를 갖도록 분주하였다. 다음 날 LPS가 포함된 새로운 무혈청 배지에 희석한 본 발명의 엑소좀 (실시예 2에서 준비된 엑소좀)을 적정 농도로 1~24시간 동안 처리하여 배양하였다. 배양이 끝난 배양상층액을 취하고 배양액 내에 존재하는 NO 및 염증성 사이토카인을 측정하여 염증 반응을 확인하였다. 배양액 내의 염증 반응은 NO 검출키트(detection kit)(인트론바이오 혹은 프로메가에서 구입)를 이용하여 측정하였다. ELISA 키트 (R&D system에서 구입) 제조사의 매뉴얼대로 수행하여 LPS만을 처리한 군과 본 발명의 엑소좀이 함께 처리된 군의 염증성 사이토카인 TNF-α 양을 확인하였다. 양성대조군으로 덱사메타손(dexamethasone) (Sigma에서 구입)을 처리하였다. 또한, 위와 같이 처리된 RAW 264.7 세포로부터 얻은 총 RNA로부터 cDNA를 제조하였고 리얼타임 PCR 방법을 이용하여 iNOS, TNF-α, IL-6 및 IL-1β의 mRNA 변화량을 측정하였다. 상기 유전자들을 정량하기 위한 표준 유전자로서 GAPDH 유전자를 사용하였다. 리얼타임 PCR에 사용한 프라이머의 종류와 서열은 하기의 표 3과 같다.
| 유전자 | 서열 | |
| 정방향 프라이머 (5' → 3') | 역방향 프라이머 (5' → 3') | |
| TNF-α | TCT CAT CAG TTC TAT GGC CCA GAC (서열번호 1) | GGC ACC ACT AGT TGG TTG TCT TTG (서열번호 2) |
| iNOS | GCT ACC ACA TTG AAG AAG CTG GTG (서열번호 3) | CCA TAG GAA AAG ACT GCA CCG AAG (서열번호 4) |
| GAPDH | GAC ATC AAG AAG GTG GTG AAG CAG (서열번호 5) | CCC TGT TGC TGT AGC CGT ATT CAT (서열번호 6) |
| IL-6 | GCC AGA GTC CTT CAG AGA GAT ACA (서열번호 7) | ATT GGA TGG TCT TGG TCC TTA GCC (서열번호 8) |
| IL-1β | GCA ACG ACA AAA TAC CTG TGG CCT (서열번호 9) | AGT TGG GGA ACT CTG CAG ACT CAA (서열번호 10) |
우선, 도 3에 도시된 바와 같이, 생쥐의 대식세포인 RAW 264.7 세포에 대해 LPS와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 경우 LPS에 의해 유도되는 염증성 사이토카인인 TNF-α, IL-6 및 IL-1β의 mRNA의 발현량이 감소하였고, NO 생성효소인 iNOS의 mRNA의 발현량이 감소하였다. 다음으로, 도 4에 도시된 바와 같이, 생쥐의 대식세포인 RAW 264.7 세포에 LPS 존재 하에서 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 결과 LPS에 의해 유도되는 염증 반응인 NO 생성을 농도의존적으로 감소시킴을 확인하였다. 또한, 도 5에 도시된 바와 같이, 생쥐의 대식세포인 RAW 264.7 세포에 LPS 존재 하에서 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 결과 LPS에 의해 유도되는 염증성 사이토카인인 TNF-α 생성을 감소시킴을 확인하였다. 이러한 결과들은 본 발명의 일 구체예의 엑소좀이 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선을 위해 유용한 기능적 활성, 즉 민감성 피부와 관련된 사이토카인 및 NO 생성을 감소시키는 활성을 가지며, 이를 통해 본 발명의 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 조성물은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 유용할 것으로 기대된다.
실시예 7: 분리 방법에 따른 NO 형성 감소 효과의 비교
분리 방법에 따른 엑소좀의 NO 형성 감소 효과를 비교하기 위하여 본 발명의 일 구체예의 TFF 분리 정제에 의해 얻어진 엑소좀 이외에 종래의 침전법에 의해 분리된 엑소좀을 준비하였다. 침전법은 제조사(System Biosciences)의 프로토콜에 따라 시행하였다. 종래의 침전법에 의해 분리된 엑소좀(도 6A 참조)은 본 발명의 일 구체예의 TFF 방법에 의해 분리 정제된 엑소좀(도 6B 참조)과 비교하여 입자크기 분포의 균일도가 낮고 다양한 크기를 갖는 것을 확인하였다. 또한, 도 6C에 도시한 바와 같이 본 발명의 일 구체예의 TFF 방법에 의해 분리 정제된 엑소좀은 종래의 침전법에 의해 얻어진 엑소좀에 비해 훨씬 높은 수준으로 NO 형성을 억제함을 확인하였다. 이러한 결과들은 본 발명의 일 구체예에 따라 분리 정제된 엑소좀이 종래 방법에 따라 분리된 엑소좀에 비해 입자크기 분포의 균일도와 NO 형성 억제 측면에서 우수하다는 것을 보여주고 있다.
따라서, 본 발명의 일 구체예의 분리 방법에 따라 수득된 엑소좀은 종래의 분리 방법에 따라 수득된 엑소좀과 비교하여 성능 또는 기능적 활성(예를 들어, 입자크기 분포의 균일성, NO 생성 억제 등)이 훨씬 우수하고, 이와 같이 기능적 활성이 우수한 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 본 발명의 조성물은 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선 효과 면에서 종래기술 보다 훨씬 우수하다고 할 수 있다.
실시예 8: 과산화수소에 의한 산화 스트레스의 예방 효과
인간 피부섬유아세포인 HDF 세포를 12웰 플레이트 (12-well plate)의 각 웰에 6.5×104 세포의 밀도로 분주하였다. 무혈청 배지에 희석한 본 발명의 일 구체예의 엑소좀(실시예 2에서 준비된 엑소좀)을 농도별로 처리하여 22시간 동안 배양하였다. 이후 1 mM의 과산화수소(Sigma에서 구입)를 추가 처리하여 2시간 동안 배양하였다.
본 발명의 일 구체예의 엑소좀이 과산화수소에 의해 유도된 산화 스트레스로 인한 세포사멸을 방지할 수 있는지 확인하기 위하여, 유세포 분석기(flow cytometer)를 이용하여 다음과 같이 HDF 세포 생존율을 측정하였다. 먼저 배양 배지를 제거하고 DPBS(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline)(Gibco에서 구입) 1 mL로 세척한 후, 트립신/EDTA (Gibco에서 구입) 150 μL를 넣고 37℃, 5% CO2 배양기에서 4분간 정치하였다. 이후 배양 배지 450 μL를 넣고 세포를 현탁시킨 후 1,500 rpm으로 3분간 원심분리하였다. 상층액을 제거하고 DPBS 500 μL로 2회 세척한 후, 1X 아넥신 V 바인딩 버퍼(annexin V binding buffer)(BD에서 구입) 25 μL를 이용하여 세포를 현탁하였다. 현탁된 세포 샘플 당 25 μL의 1X 아넥신 V 바인딩 버퍼, FITC 아넥신 V (BD에서 구입) 및 PI 염색용액(Propidium Iodide staining solution)(BD에서 구입) 혼합액을 넣고 실온에서 15분간 암(暗) 반응하였다. 샘플 당 1X 아넥신 V 바인딩 버퍼 150 μL를 넣고 유세포분석기(NovoCyte)로 세포사멸 정도를 측정하였다.
그 결과, 본 발명의 일 구체예의 엑소좀 함께 처리된 군에서 과산화수소에 의해 유도된 산화 스트레스로 인한 세포사멸이 현저히 감소됨을 확인하였다(도 14 및 도 15). 이러한 실험결과는 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 포함하는 조성물이 항-산화스트레스 효과가 있으며, 산화스트레스로 인해 발생하는 민감성 피부를 억제, 완화 내지는 개선할 수 있음을 강력히 시사한다.
따라서, 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 조성물은 산화스트레스를 예방 내지는 억제하는 효과가 있음을 알 수 있어, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 있어 우수한 효과를 나타낸다고 할 수 있다.
실시예 9: 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물에 함유되는 줄기세포 유래의 엑소좀의 피부 투과 능력 시험
형광염색된 엑소좀을 제조하기 위하여 PKH67 염료(Sigma에서 구입)를 사용하였다. 1 mM의 PKH67을 Diluent C (Sigma에서 구입)에 희석하여 10 μM의 PKH67 용액을 제조한 후, 적정 농도의 엑소좀 용액과 혼합하여 상온에서 빛을 차단한 상태로 10분간 반응시켰다. 반응이 끝난 후, PKH67로 염색된 엑소좀(이하, "PKH-엑소좀"으로 약칭)으로부터 잔여 PKH67 염료를 제거하기 위하여 MW3000 스핀 컬럼(ThermoFisher Scientific에서 구입)을 사용하였다. 형광측정기(Molecular Devices에서 구입)를 이용하여 확인한 결과 엑소좀과 반응하지 않은 PKH67을 제거한 후, PKH-엑소좀에서 충분한 강도의 형광이 검출됨을 확인하였다(도 7).
PKH-엑소좀을 적정 농도, 예를 들어 1×105 입자/mL 내지 1×109 입자/mL 농도로 인산완충용액(PBS)에 분산시킨 후, 돼지 피부 바깥면에 도포하였다. 도포된 PKH-엑소좀의 건조를 막기 위하여 부직포를 덮어 준 후 적정 시간, 예를 들어 30분 내지 1시간 동안 반응시켜 PKH-엑소좀이 피하 조직에 전달되도록 하였다. 또한, PKH-엑소좀을 돼지 피부 바깥면에 도포하고 부직포를 덮어 준 후, 일정 시간, 예를 들어 30분 내지 1시간 동안 미세 전류를 흘려주었다. 반응이 종료된 후, 돼지 피부조직을 3.7% 포름알데히드 용액에 담궈 하룻밤 동안 반응시키고, 인산완충용액으로 5분씩 3회 세척하였다. 세척된 돼지 피부조직을 30% 수크로오스 용액에 담가 처리한 후, OCT 화합물을 처리하였다. 다시 인산완충용액으로 5분씩 3회 세척한 후, 마이크로톰을 이용하여 종단면으로 절편을 제작하여 슬라이드글라스 위에 조직 절편을 위치시켰다. 한편 조직 절편의 제작은 포름알데히드 용액으로 조직을 고정하기 전에 진행할 수도 있다. 조직 절편에서 PKH-엑소좀으로부터 검출되는 형광은 형광현미경을 이용하여 관찰하였다. 이상의 방법으로 돼지 피부조직의 표피를 투과하여 피하 조직으로 전달된 PKH-엑소좀을 확인하였다. 그 결과, 미세 전류를 흘려주는 경우(active transdermal delivery), 엑소좀이 표피를 보다 효과적으로 통과하여 피부조직 내부로 깊숙이 전달되었고, 피부에 대해 보다 효과적으로 흡수되는 것을 확인할 수 있었다(도 8 참조).
다음으로, 헤어리스 마우스의 피부조직을 적출하여 프란츠 확산셀(Franz Diffusion Cell)의 챔버 위쪽에 위치시켰다. 이때, 확산셀의 내부는 인산완충용액으로 채워주었다. PKH-엑소좀을 적정 농도, 예를 들어 1×105 입자/mL 내지 1×109 입자/mL 농도로 인산완충용액(PBS)에 분산시킨 후, 생쥐의 피부조직 바깥쪽에 도포하였다. 이때, PKH-엑소좀의 건조를 막기 위하여 부직포를 생쥐 피부조직 바깥쪽에 미리 위치시키고, 부직포와 피부조직 사이에 PKH-엑소좀을 주입하였다. 그 후 30분 내지 1시간 동안 반응시켰다. 또한, PKH-엑소좀을 부직포와 피부조직 사이에 주입한 후, 일정 시간, 예를 들어 30분 내지 1시간 동안 미세 전류를 흘려주었다. 반응이 끝난 후, 즉시 공초점형광현미경(Leica, SP8X)을 이용하여 피부조직 내부로 전달된 PKH-엑소좀을 확인하거나, 1시간 내지 6시간 동안 피부조직과 PKH-엑소좀 용액을 추가로 반응시킨 후, 공초점형광현미경으로 PKH-엑소좀을 확인하였다. 그 결과, 미세 전류를 흘려주는 경우(active transdermal delivery), 엑소좀이 표피를 보다 효과적으로 통과하여 피부조직 내부로 깊숙이 전달되었고, 피부에 대해 보다 효과적으로 흡수되는 것을 확인할 수 있었다(도 9 및 도 10 참조).
이상의 실험결과들을 종합하면, 이온토포레시스에 의해 피부에 미세 전류를 흘려주면서 줄기세포 유래의 엑소좀을 피부에 적용할 경우, 줄기세포 유래의 엑소좀이 표피를 효과적으로 통과하여 피부조직 내부로 깊숙이 전달될 수 있고, 피부에 대해 효과적으로 흡수될 수 있다. 이에 따라 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 보다 효과적으로 기여할 수 있다. 따라서, 이온토포레시스 디바이스(피부에 대해 미세전류를 흐르게 하는 장치)를 포함하는 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트를 이용하여 줄기세포 유래의 엑소좀을 피부에 적용할 경우 피부 침투능력이 보다 향상되어 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선 효과를 보다 극대화시킬 수 있다.
실시예 10: 사람 피부에 대한 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트의 처치
도 11에 도시된 바와 같이, 본 발명의 일 구체예에 따른 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)는 액상 침적 시트 마스크(10)(줄기세포 유래의 엑소좀을 함유하는 조성물이 도포되거나 침적된 흰색 시트 마스크)와 이온토포레시스 디바이스인 경피투과 촉진 시트 마스크(은색 시트 마스크)(20)로 구성되어 있다. 액상 침적 시트 마스크(10)의 표면 내지는 내부에는 줄기세포 유래의 엑소좀(12)이 도포되거나 침적되어 있다. 또한, 경피투과 촉진 시트 마스크(20)에는 미세전류를 발생시키는 전지(22)가 장착되어 있고, 이러한 전지(22)와 전기적으로 연결되어 있는 도전성 패턴(24)이 경피투과 촉진 시트 마스크(20) 상에 형성되어 전지(22)로부터 발생된 미세전류를 경피투과 촉진 시트 마스크(20) 전반에 골고루 전달할 수 있다. 도전성 패턴(24)은 금, 은, 또는 구리 등의 도전성 금속이 프린팅되거나 도금(plating)되어 형성된다.
상기와 같은 구성을 갖는 "민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)"를 민감성 피부와 관련이 있는 홍조 증상과 피부 트러블이 심한 사람(이하, "case 1"이라 함)의 얼굴에 1회 적용하여 피부 트러블과 홍조 증상이 완화 내지는 개선되는지를 평가하였다. 또한, 본 발명의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)를 홍조 증상이 있는 사람(이하, "case 2"라 함)의 얼굴에 1회 적용하여 전체적인 피부톤과 홍조 증상이 개선되는지를 평가하였다. 5×105 입자의 줄기세포 유래의 엑소좀(12)이 포함된 액상 침적 시트 마스크(10)를 눈과 입 부분에 맞추어 case 1 및 2의 얼굴 전체에 고르게 밀착시킨 다음, 약 0.3~0.4 mA의 미세 전류가 흐르도록 액티베이션된 경피투과 촉진 시트 마스크(20)를 액상 침적 시트 마스크(10) 위에 적층시켜 25~30분 정도 사용하였다.
그 결과, 줄기세포 유래의 엑소좀(12)을 5×105 입자/마스크의 농도로 함유하는 액상 침적 시트 마스크(10)와 경피투과 촉진 시트 마스크(20)로 구성된 "민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)"의 한번의 사용만으로 "case 1"에서 민감성 피부와 관련이 있는 홍조 및 피부 트러블이 현저히 개선되었고(도 12의 case 1 참조), "case 2"에서도 전체적인 피부톤이 개선되었으며 홍조가 완화되었다(도 12의 case 2 참조). 따라서, 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 조성물이 침적된 액상 침적 시트 마스크(10)와 경피투과 촉진 시트 마스크(이온토포레시스 디바이스)(20)로 구성된 본 발명의 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트(100)는 민감성 피부와 관련이 있는 홍조 증상 및 피부트러블을 예방, 억제, 완화 내지는 개선시키는 효과가 있다고 할 수 있다.
또한, 줄기세포 유래의 엑소좀을 0.29×108 입자/mL의 농도로 함유하는 조성물(엑소좀 현탁액)을, 중증 아토피 환자 3인의 환부(손, 목, 팔 등)에 도포한 후 이온토포레시스 장비(IONZYME DF MACHINE)(Environ에서 구입)를 사용하여 상기 조성물이 도포된 환부에 20분 동안 0.4 mA의 미세전류를 흘려주는 이온토포레시스를 수행하였다. 상기와 같은 처치를 2주 동안 주3회에 걸쳐 시행한 결과, 환자들의 극심한 가려움증이 현저히 완화되었고, 홍반 증상 역시 현저히 개선되었다(도 13). 줄기세포 유래의 엑소좀을 함유하는 조성물을 적용한 환자들 모두 민감성 피부와 관련이 있는 가려움증과 홍반이 완화되어 스테로이드나 항히스타민 제제의 처방을 중단해도 될 정도로 증상이 개선되었다.
따라서, 본 발명의 엑소좀 키트(100)는 상기와 같은 임상시험을 통해 확인되는 바와 같이 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선에 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
실시예 11: 친염증성 사이토카인 발현 감소 효과 확인
THP-1 단핵구(THP-1 human monocyte)를 대식세포로 분화시킨 후 본 발명의 일 구체예의 엑소좀의 친염증성 사이토카인 발현 감소 효과를 다음과 같이 확인하였다.
THP-1 단핵구를, 10% FBS(Fetal Bovine Serum), 1% 페니실린-스트렙토마이신 및 100nM 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(Phorbol 12-myristate 13-acetate)(Sigma에서 구입)가 첨가된 RPMI 1640(Roswell Park Memorial Institute 1640; ThermoFisher Scientific에서 구입) 배지에 현탁시킨 후 12웰 플레이트에 6×105 세포/mL의 밀도로 접종하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 48시간 배양하여 THP-1 유래 대식세포(THP-1 derived macrophage)로 분화를 유도하였다. 이후 분화된 세포를 PBS로 1회 세척하고, 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트가 포함되어 있지 않은 RPMI 1640 배지에서 24시간 동안 배양하여 세포를 안정화하였다.
동시처리(co-treatment) 실험군의 경우, THP-1 유래 대식세포에 대해 FBS(Fetal Bovine Serum)가 포함되어 있지 않은 RPMI 1640 배지와 100 ng/mL LPS(sigma 에서 구입) 및 20 ng/mL IFN-γ(Peprotech에서 구입)를 처리하여 THP-1 유래 대식세포를 활성화시키고, 또한 양성대조군인 덱사메타손(Sigma에서 구입) 또는 본 발명의 일 구체예의 엑소좀(실시예 2에서 준비된 엑소좀)을 처리하여 24시간 배양하였다. 한편, 전처리(pre-treatment) 실험군의 경우, THP-1 유래 대식세포에 대해 FBS(Fetal Bovine Serum)가 포함되어 있지 않은 RPMI 1640 배지와 양성대조군인 덱사메타손(Sigma에서 구입) 또는 본 발명의 일 구체예의 엑소좀(실시예 2에서 준비된 엑소좀)을 처리하여 24시간 배양한 다음, 100 ng/mL LPS(sigma 에서 구입) 및 20 ng/mL IFN-γ(Peprotech에서 구입)를 처리하고 4시간 동안 배양하여 THP-1 유래 대식세포를 활성화하였다.
배양이 끝난 THP-1 유래 대식세포(THP-1 derived macrophage)로부터 분리한 RNA로부터 cDNA를 제조하고 리얼타임 PCR 방법을 이용하여 친염증성 사이토카인(Pro-inflammatory cytokine)인 IL-6, IL-1β 및 TNF-α의 mRNA 발현량을 측정하였다. 상기 유전자들을 정량하기 위한 표준 유전자로서 GAPDH를 사용하였다. PCR에 사용한 프라이머의 종류와 서열은 하기의 표 4와 같다.
| 유전자 | 서열 | |
| 정방향 프라이머 (5'→3') | 역방향 프라이머 (5'→3') | |
| IL-6 | AAGCCAGAGCTGTGCAGATGAGTA (서열번호 11) | TGTCCTGCAGCCACTGGTTC (서열번호 12) |
| IL-1β | ACCTGTCCTGCGTGTTGAAAGATG (서열번호 13) | TGGGCAGACTCAAATTCCAGCTTG (서열번호 14) |
| TNF-α | CTGCCTGCTGCACTTTGGAG (서열번호 15) | ACATGGGCTACAGGCTTGTCACT (서열번호 16) |
| GAPDH | CTTTGGTATCGTGGAAGGACTC (서열번호 17) | GTAGAGGCAGGGATGATGTTCT (서열번호 18) |
도 16에 도시된 바와 같이, THP-1 단핵구를 대식세포로 분화시킨 후 얻은 THP-1 유래 대식세포에 대해, LPS 및 IFN-γ와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리(co-treatment)한 경우, 음성대조군에 비해 친염증성 사이토카인인 IL-6의 mRNA 발현량이 감소하였다. 또한, 도 17 내지 도 19에 도시된 바와 같이, THP-1 단핵구를 대식세포로 분화시킨 후 얻은 THP-1 유래 대식세포에 대해, LPS 및 IFN-γ 처리 전에 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 전처리(pre-treatment)한 경우, 음성대조군에 비해 친염증성 사이토카인인 IL-6, IL-1β 및 TNF-α의 mRNA 발현량이 감소하였다. 민감성 피부와 관련이 있는 친염증성 사이토카인인 IL-6, IL-1β 및 TNF-α는 친염증성 M1 대식세포에서는 발현이 증가하고 항염증성 M2 대식세포에서는 발현이 감소한다. 따라서, 상기 결과들은 본 발명의 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 조성물이 피부에서 친염증성 사이토카인 발현을 감소시키고, 또한 친염증성 사이토카인과 밀접한 관련이 있는 민감성 피부 증상을 억제, 완화 및 감소시킬 수 있는 것을 시사한다. 또한, 본 실시예의 실험결과는 앞서 논의된 실시예들의 실험결과들을 강력히 뒷받침한다.
실시예 12: 친염증성 사이토카인 생성 감소 효과 확인
마우스 대식세포주인 RAW 264.7 세포에서 본 발명의 일 구체예의 엑소좀의 친염증성 사이토카인 생성 감소 효과를 다음과 같이 확인하였다. RAW 264.7 세포를 10% FBS(Fetal Bovine Serum) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신이 첨가된 DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium; ThermoFisher Scientific에서 구입) 배지에 현탁시킨 후 96웰 플레이트에 2.5×104 세포/웰의 밀도로 접종하고 동시에 22 μg/mL 농도의 본 발명의 일 구체예의 엑소좀(실시예 2에서 준비된 엑소좀)을 처리하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 이후 100 ng/mL의 LPS(Sigma에서 구입)를 처리하고 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하여 RAW 264.7 세포의 활성화를 유도하였다.
배양이 끝난 RAW 264.7 세포의 배양 상등액(Culture supernatant)을 수거하고 배양 상등액 내의 IL-6, IL-27, IFN-β의 생성량을 LEGENDplexTM 마우스 염증 패널(mouse inflammation panel)(Biolegend에서 구입)을 이용하여 유세포분석기 (Flow Cytometer)로 측정하였다. 또한, 본 발명의 일 구체예의 엑소좀(실시예 2에서 준비된 엑소좀)에 의한 세포 생존율 변화를 측정하고 이를 통한 사이토카인 생성량 보정을 위하여 MTT 어세이를 수행하였다. 배양이 끝난 RAW 264.7 세포의 배양 배지를 0.5 mg/mL 티아졸릴 블루 테트라졸륨 브로마이드(Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide)(Sigma에서 구입)를 포함한 DMEM 배지로 교환하고 1시간 동안 배양하였다. 이후 세포배양 플레이트 바닥에 형성된 포르마잔(formazan)이 흩어지지 않게 상등액을 제거하고 디메틸 설폭시드(Dimethyl Sulfoxide)(AMRESCO에서 구입)로 용해시킨 후 570 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 생존율을 확인하였다. 그리고 각각의 사이토카인(IL-6, IL-27 및 IFN-β) 생성량을 세포 생존율로 보정하였다.
도 20 내지 도 22에 도시된 바와 같이, 멀티플렉스 패널을 이용한 유세포분석 결과, RAW 264.7 세포에 대해 LPS와 함께 본 발명의 일 구체예의 엑소좀을 처리한 경우 LPS에 의해 유도되는 IL-6, IL-27 및 IFN-β의 생성량이 감소하였다. 상기 결과는 본 발명의 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 조성물이 IL-6, IL-27 및 IFN-β의 생성을 감소시키고, 또한 이들 사이토카인의 생성 증가와 관련이 있는 민감성 피부 증상을 억제, 완화 및 감소시킬 수 있는 것을 시사한다. 또한, 본 실시예의 실험결과는 앞서 논의된 실시예들의 실험결과들을 강력히 뒷받침한다.
실시예 13: 본 발명의 엑소좀을 포함하는 화장료 조성물의 제조
(로션의 제조)
상기 실시예 2에서 준비된 1704 μg/mL 농도의 엑소좀 원액을 희석하고 하기 표 5에 기재된 성분들과 혼합하여 현탁한 후 화장료 조성물(로션)을 제조하였다. 최종 화장료 조성물이 엑소좀을 2×104 입자/mL의 농도로 함유하도록 제조하였다. 각 성분의 함량은 하기 표 5와 같다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 실시예 2에서 준비된 엑소좀 | 1 |
| 글리세린 | 7.375 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 6 |
| 세틸 에틸헥사노에이트 | 5 |
| 프로판디올 | 5 |
| 페닐 트리메티콘 | 3.5 |
| 스테아르산 | 3 |
| 1,2-헥산디올 | 2 |
| 판테놀 | 2 |
| 세테아릴 올리베이트 | 1.8 |
| 소르비탄 올리베이트 | 1.2 |
| 디이소스테아릴 말레이트 | 1 |
| 프룩탄 | 1 |
| 암모늄 아크릴로일디메틸타우레이트/VP 코폴리머 | 0.3 |
| 아라키딜 알코올 | 0.25 |
| 베헤닐 알코올 | 0.15 |
| 아라키딜 글루코사이드 | 0.1 |
| 하이드로제네이티드 레시틴 | 0.1 |
| 시어버터 | 0.09 |
| 잔탄검 | 0.05 |
| 라벤더 오일 | 0.02 |
| 베르가모트 오일 | 0.02 |
| 세라마이드엔피 (Ceramide NP) | 0.02 |
| 오렌지껍질 오일 | 0.02 |
| 피토스핑고신 | 0.015 |
| 팔미토일 테트라펩타이드-7 | 0.01 |
| 팔미토일 트리펩타이드-1 | 0.01 |
| 정제수 | 잔량 |
(크림의 제조)
상기 실시예 2에서 준비된 1704 μg/mL 농도의 엑소좀 원액을 희석하고 하기 표 6에 기재된 성분들과 혼합하여 현탁한 후 화장료 조성물(크림)을 제조하였다. 최종 화장료 조성물이 엑소좀을 2×104 입자/mL의 농도로 함유하도록 제조하였다. 각 성분의 함량은 하기 표 6과 같다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 실시예 2에서 준비된 엑소좀 | 1 |
| 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 12 |
| 글리세린 | 9.75 |
| 부틸렌글리콜 | 7 |
| 세테아릴알코올 | 3.5 |
| 하이드로제네이티드 식물성오일 | 3.5 |
| 1,2-헥산디올 | 2 |
| 스테아르산 | 2 |
| 페닐트리메티콘 | 2 |
| 호호바씨오일 | 2 |
| 비즈왁스 | 1.7 |
| 글리세릴스테아레이트 | 1.5 |
| 스테아릴알코올 | 1.45 |
| 글리세릴스테아레이트에스이 | 1 |
| 세틸알코올 | 1 |
| 판테놀 | 1 |
| 시어버터 | 0.88 |
| 솔비탄세스퀴올리에이트 | 0.5 |
| 폴리글리세릴-2스테아레이트 | 0.45 |
| 암모늄아크릴로일다이메틸타우레이트/브이피코폴리머 | 0.3 |
| 하이드로제네이티드 레시틴 | 0.1 |
| 베르가모트오일 | 0.04 |
| 세라마이드엔피 | 0.04 |
| 피토스핑고신 | 0.03 |
| 아이비고드열매추출물 | 0.0225 |
| 한련초추출물 | 0.0225 |
| 라벤더오일 | 0.02 |
| 오렌지껍질오일 | 0.02 |
| 카퍼트리펩타이드-1 | 0.01 |
| 팔미토일 테트라펩타이드-7 | 0.01 |
| 팔미토일 트리펩타이드-1 | 0.01 |
| 칼라민 | 0.001 |
| 정제수 | 잔량 |
(마스크팩의 제조)
상기 실시예 2에서 준비된 1704 μg/mL 농도의 엑소좀 원액을 희석하고 하기 표 7에 기재된 성분들과 혼합하여 현탁한 후 얻어진 화장료 조성물을 도포 내지는 침적시킨 마스크팩을 제조하였다. 엑소좀은 4×103 입자/mL의 농도로 마스크팩에 도포 내지는 침적되었다. 각 성분의 함량은 하기 표 7과 같다.
| 성분 | 함량 (중량%) |
| 실시예 2에서 준비된 엑소좀 | 0.1 |
| 글리세린 | 3.070045 |
| 디프로필렌글리콜 | 3.03 |
| 메틸프로판디올 | 2 |
| 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 1.500025 |
| 올리브오일 | 0.8 |
| 1,2-헥산디올 | 0.7235 |
| 폴리솔베이트60 | 0.7 |
| 솔비탄스테아레이트 | 0.6475 |
| 알지닌 | 0.13 |
| 카보머 | 0.13 |
| 하이드록시에틸셀룰로오스 | 0.13 |
| 알란토인 | 0.1 |
| 트레할로오스 | 0.1 |
| 녹차추출물 | 0.07 |
| 부틸렌글리콜 | 0.07 |
| 생강추출물 | 0.07 |
| 스페인감초뿌리추출물 | 0.07 |
| 콥티스뿌리추출물 | 0.07 |
| 수크로오스코코에이트 | 0.0525 |
| 에틸헥실글리세린 | 0.05 |
| 디포타슘글리시리제이트 | 0.03 |
| 디소듐이디티에이 | 0.02 |
| 토코페릴아세테이트 | 0.02 |
| 판테놀 | 0.02 |
| 세라마이드엔피 | 0.000001 |
| 소듐히알루로네이트 | 0.01 |
| 자일리틸글루코사이드 | 0.004 |
| 안하이드로자일리톨 | 0.0028 |
| 자일리톨 | 0.0012 |
| 글루코오스 | 0.0004 |
| 하이드로제네이티드 레시틴 | 0.000005 |
| 향료 | 0.012 |
| 콜레스테롤 | 0.000001 |
| 정제수 | 잔량 |
이상, 본 발명을 상기 실시예를 들어 설명하였으나, 본 발명은 이에 제한되는 것이 아니다. 당업자라면 본 발명의 취지 및 범위를 벗어나지 않고 수정, 변경을 할 수 있으며 이러한 수정과 변경 또한 본 발명에 속하는 것임을 알 수 있을 것이다.
100: 엑소좀 키트
10: 액상 침적 시트 마스크 12: 줄기세포 유래의 엑소좀
20: 경피투과 촉진 시트 마스크 22: 전지
24: 도전성 패턴
10: 액상 침적 시트 마스크 12: 줄기세포 유래의 엑소좀
20: 경피투과 촉진 시트 마스크 22: 전지
24: 도전성 패턴
<110> ExoCoBio Inc.
<120> Cosmetic composition for preventing, suppressing, alleviating or
improving sensitive skin comprising an exosome derived from stem
cell as an active ingredient
<130> P17-0028KR
<150> KR 10-2017-0169648
<151> 2017-12-11
<150> KR 10-2018-0072309
<151> 2018-06-22
<160> 18
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TNF-alpha forward primer
<400> 1
tctcatcagt tctatggccc agac 24
<210> 2
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TNF-alpha reverse primer
<400> 2
ggcaccacta gttggttgtc tttg 24
<210> 3
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> iNOS forward primer
<400> 3
gctaccacat tgaagaagct ggtg 24
<210> 4
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> iNOS reverse primer
<400> 4
ccataggaaa agactgcacc gaag 24
<210> 5
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GAPDH forward primer
<400> 5
gacatcaaga aggtggtgaa gcag 24
<210> 6
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GAPDH reverse primer
<400> 6
ccctgttgct gtagccgtat tcat 24
<210> 7
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-6 forward primer
<400> 7
gccagagtcc ttcagagaga taca 24
<210> 8
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-6 reverse primer
<400> 8
attggatggt cttggtcctt agcc 24
<210> 9
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-1beta forward primer
<400> 9
gcaacgacaa aatacctgtg gcct 24
<210> 10
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-1beta reverse primer
<400> 10
agttggggaa ctctgcagac tcaa 24
<210> 11
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-6 (THP-1) forward primer
<400> 11
aagccagagc tgtgcagatg agta 24
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-6 (THP-1) reverse primer
<400> 12
tgtcctgcag ccactggttc 20
<210> 13
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-1beta (THP-1) forward primer
<400> 13
acctgtcctg cgtgttgaaa gatg 24
<210> 14
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IL-1beta (THP-1) reverse primer
<400> 14
tgggcagact caaattccag cttg 24
<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TNF-alpha (THP-1) forward primer
<400> 15
ctgcctgctg cactttggag 20
<210> 16
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TNF-alpha (THP-1) reverse primer
<400> 16
acatgggcta caggcttgtc act 23
<210> 17
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GAPDH (THP-1) forward primer
<400> 17
ctttggtatc gtggaaggac tc 22
<210> 18
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> GAPDH (THP-1) reverse primer
<400> 18
gtagaggcag ggatgatgtt ct 22
Claims (27)
- 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 피부에서 산화스트레스를 감소시키는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 줄기세포 유래의 엑소좀과, 메티오닌, 만니톨 및 트레할로오스를 유효성분으로 포함하는 동결건조제제를 포함하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제3항에 있어서,
상기 동결건조제제는 아스코르브산 및 레티놀을 추가로 함유하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제3항에 있어서,
상기 조성물은 상기 동결건조제제와, 희석제를 포함하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제5항에 있어서,
상기 희석제는 주사용수, 생리적 식염수, 인산염 완충용액, 정제수, 또는 탈이온수인 것을 특징으로 하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제6항에 있어서,
상기 희석제는 히알루론산 또는 히알루론산염을 추가로 포함하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
패취, 마스크팩, 마스크시트, 크림, 토닉, 연고, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 로션, 젤, 오일, 팩, 스프레이, 에어졸, 미스트, 파운데이션, 파우더 및 기름 종이로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 1종의 형태에 적용하는 것을 특징으로 하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제8항에 있어서,
패취, 마스크팩 또는 마스크시트의 적어도 일면(一面)에 도포되거나 침적되는 것을 특징으로 하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
화장료 조성물 또는 피부 외용제인 것을 특징으로 하는, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 제10항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 크림 또는 로션인, 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물. - 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취와,
상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 이온토포레시스 디바이스를 포함하는, 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트. - 제12항에 있어서,
상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 피부에서 산화스트레스를 감소시키는, 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트. - 제13항에 있어서,
상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취를 포유동물의 피부 위에 접촉 또는 부착시키고, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 상기 이온토포레시스 디바이스를 위치시킴으로써, 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 접촉 또는 부착되어 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 것을 특징으로 하는, 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트. - 제12항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 이온토포레시스 디바이스는 가요성 배터리, 리튬이온 이차 전지, 알칼리 전지, 건전지, 수은 전지, 리튬 전지, 니켈-카드뮴 전지, 및 역전기 투석 전지로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 1종의 전지를 포함하거나, 상기 적어도 1종의 전지가 장착된 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취인, 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트. - 제15항에 있어서,
상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 상기 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 적층되어 사용되는 것을 특징으로 하는, 민감성 피부 개선용 엑소좀 키트. - (a) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 포유동물의 피부에 직접 도포하는 것, (b) 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 패취, 마스크팩 또는 마스크시트를 포유동물의 피부에 접촉 또는 부착하는 것, 또는 상기 (a) 및 (b)를 순차적으로 진행하는 것을 포함하는, 치료용을 제외한 민감성 피부 개선을 통해 포유동물 피부의 상태를 조절하는 미용방법.
- 제17항에 있어서,
상기 (a) 단계에서는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물로서 로션이나 크림이 사용되는, 미용방법. - 제17항에 있어서,
(c) 상기 (b) 단계 이후에 상기 패취, 마스크팩 또는 마스크시트를 상기 포유동물의 피부로부터 제거하고, 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물을 포유동물의 피부에 도포하는 단계를 더 포함하는, 미용방법. - 제19항에 있어서,
상기 (c) 단계에서는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물로서 로션이나 크림이 사용되는, 미용방법. - 제17항에 있어서,
상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흐르게 하여 이온토포레시스(iontophoresis)를 수행하는 것을 더 포함하는, 미용방법. - 제21항에 있어서,
이온토포레시스 장치를 상기 포유동물의 피부에 접촉 또는 부착시키는 것을 더 포함하는, 미용방법. - 제17항에 있어서,
상기 포유동물은 인간, 개, 고양이, 설치류, 말, 소, 원숭이, 또는 돼지인, 미용방법. - (a) 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 도포되거나 침적된 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취를 포유동물의 피부 위에 접촉 또는 부착하는 단계와,
(b) 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 이온토포레시스 디바이스를 위치시키는 단계와,
(c) 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취가 접촉 또는 부착되어 상기 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 조성물이 적용된 포유동물의 피부에 미세전류를 흘려 주는 이온토포레시스를 수행하는 단계와,
(d) 상기 미세전류를 통하여 상기 줄기세포 유래의 엑소좀을 포유동물 피부 내부로 전달하는 단계를 포함하는, 치료용을 제외한 민감성 피부 개선을 통해 포유동물 피부의 상태를 조절하는 미용방법. - 제24항에 있어서,
상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 피부에서 산화스트레스를 감소시키는, 미용방법. - 제24항 또는 제25항에 있어서,
상기 이온토포레시스 디바이스는 가요성 배터리, 리튬이온 이차 전지, 알칼리 전지, 건전지, 수은 전지, 리튬 전지, 니켈-카드뮴 전지, 및 역전기 투석 전지로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 1종의 전지를 포함하거나, 상기 적어도 1종의 전지가 장착된 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취인, 미용방법. - 제26항에 있어서,
상기 (b) 단계는 상기 제1 마스크팩, 마스크시트 또는 패취 위에 상기 제2 마스크팩, 마스크시트 또는 패취를 적층하여 수행되는, 미용방법.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170169648 | 2017-12-11 | ||
| KR20170169648 | 2017-12-11 | ||
| KR1020180072309A KR20190069277A (ko) | 2017-12-11 | 2018-06-22 | 줄기세포 유래의 엑소좀 및/또는 세포외 소포체를 유효성분으로 포함하는 조성물의 민감성 피부 예방, 억제, 완화 또는 개선 용도 |
| KR1020180072309 | 2018-06-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20190069301A true KR20190069301A (ko) | 2019-06-19 |
Family
ID=67104692
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020180149564A KR20190069301A (ko) | 2017-12-11 | 2018-11-28 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 화장료 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20190069301A (ko) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019231134A1 (ko) * | 2018-05-31 | 2019-12-05 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 |
| KR20190136908A (ko) * | 2018-05-31 | 2019-12-10 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 |
| JP2021116228A (ja) * | 2020-01-22 | 2021-08-10 | 医薬資源研究所株式会社 | 抗酸化ストレス剤、化粧品、および医薬品 |
| CN113797151A (zh) * | 2021-10-09 | 2021-12-17 | 四川伍衍生物科技有限公司 | 一种含间充质干细胞外泌体的修护凝胶及其制备方法 |
| KR102357466B1 (ko) * | 2021-09-01 | 2022-02-08 | 주식회사 씨지테라피 | 과일 유래의 소포체 및 이를 포함하는 화장료 조성물 |
| EP3811933A4 (en) * | 2018-07-30 | 2022-03-30 | Exocobio Inc. | FREEZE-DRIED PREPARATION OF EXOSOMES DERIVED FROM STEM CELLS AND ANTI-INFLAMMATORY COMPOSITION COMPRISING THEM AS ACTIVE PRINCIPLE |
| US11337419B2 (en) | 2018-07-28 | 2022-05-24 | Exocobio Inc. | Method for lyophilizing exosome |
| US11529306B2 (en) | 2018-07-30 | 2022-12-20 | Exocobio Inc. | Lyophilized formulation of stem cell-derived exosomes and anti-inflammatory composition including the same as active ingredient |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101081178B1 (ko) | 2004-02-09 | 2011-11-07 | (주)아모레퍼시픽 | 수박 내피 추출물을 함유하는 민감성 화장료 조성물 |
| KR101151093B1 (ko) | 2008-11-28 | 2012-07-09 | (주)아모레퍼시픽 | 항염 및 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 |
-
2018
- 2018-11-28 KR KR1020180149564A patent/KR20190069301A/ko not_active Application Discontinuation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101081178B1 (ko) | 2004-02-09 | 2011-11-07 | (주)아모레퍼시픽 | 수박 내피 추출물을 함유하는 민감성 화장료 조성물 |
| KR101151093B1 (ko) | 2008-11-28 | 2012-07-09 | (주)아모레퍼시픽 | 항염 및 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019231134A1 (ko) * | 2018-05-31 | 2019-12-05 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 |
| KR20190136908A (ko) * | 2018-05-31 | 2019-12-10 | 주식회사 엑소코바이오 | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 |
| US11730695B2 (en) | 2018-05-31 | 2023-08-22 | Exocobio Inc. | Composition for alleviating facial redness, comprising stem cell-derived exosomes as active ingredient |
| US11337419B2 (en) | 2018-07-28 | 2022-05-24 | Exocobio Inc. | Method for lyophilizing exosome |
| EP3811933A4 (en) * | 2018-07-30 | 2022-03-30 | Exocobio Inc. | FREEZE-DRIED PREPARATION OF EXOSOMES DERIVED FROM STEM CELLS AND ANTI-INFLAMMATORY COMPOSITION COMPRISING THEM AS ACTIVE PRINCIPLE |
| US11529306B2 (en) | 2018-07-30 | 2022-12-20 | Exocobio Inc. | Lyophilized formulation of stem cell-derived exosomes and anti-inflammatory composition including the same as active ingredient |
| JP2021116228A (ja) * | 2020-01-22 | 2021-08-10 | 医薬資源研究所株式会社 | 抗酸化ストレス剤、化粧品、および医薬品 |
| KR102357466B1 (ko) * | 2021-09-01 | 2022-02-08 | 주식회사 씨지테라피 | 과일 유래의 소포체 및 이를 포함하는 화장료 조성물 |
| WO2023033471A1 (ko) * | 2021-09-01 | 2023-03-09 | (주)씨지테라피 | 과일 유래의 소포체 및 이를 포함하는 화장료 조성물 |
| CN113797151A (zh) * | 2021-10-09 | 2021-12-17 | 四川伍衍生物科技有限公司 | 一种含间充质干细胞外泌体的修护凝胶及其制备方法 |
| CN113797151B (zh) * | 2021-10-09 | 2023-10-31 | 四川伍衍生物科技有限公司 | 一种含间充质干细胞外泌体的修护凝胶及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20190069301A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 민감성 피부의 예방, 억제, 완화 또는 개선용 화장료 조성물 | |
| KR102147169B1 (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 가려움증 억제 또는 개선 용도 | |
| US11612621B2 (en) | Use of composition comprising exosome derived from adipose-derived stem cell as effective ingredient in ameliorating dermatitis | |
| JP7208655B2 (ja) | 幹細胞由来のエキソソームの凍結乾燥製剤及びそれを有効成分として含む抗炎組成物 | |
| KR102045188B1 (ko) | 지방줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 피부염 개선 용도 | |
| KR102646145B1 (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 모공 축소용 조성물 | |
| KR20190069277A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀 및/또는 세포외 소포체를 유효성분으로 포함하는 조성물의 민감성 피부 예방, 억제, 완화 또는 개선 용도 | |
| KR101964992B1 (ko) | 피부 보습 및 소양감 개선을 위한 화장료 조성물 | |
| KR20190003399A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물의 피부 섬유증 개선 용도 | |
| KR20190069291A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물 | |
| KR20240037208A (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 안면 홍조 개선용 조성물 | |
| WO2019112238A2 (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물 | |
| KR102320845B1 (ko) | 엑소좀 키트 및 이를 이용한 엑소좀의 경피 투과 증진 방법 | |
| EP3811933A1 (en) | Lyophilized preparation of stem cell-derived exosomes, and anti-inflammatory composition comprising same as active ingredient | |
| KR102197562B1 (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 포함하는 엑소좀 키트의 새로운 용도 | |
| KR20200016183A (ko) | 피부 필링과 줄기세포 유래의 엑소좀 처리를 병용한 피부 미용방법 | |
| KR101964991B1 (ko) | 줄기세포 유래의 엑소좀을 포함하는 엑소좀 키트의 새로운 용도 | |
| KR20190045829A (ko) | 엑소좀의 경피 투과 증진 방법 및 이의 응용 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal |