CN110613113A - 一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：(1)蜂花粉粉碎；(2)乳酸溶液蒸汽对(1)处理后的蜂花粉熏蒸；(3)制备复合菌液；(4)制备发复合酶液；(5)配制基础物料；(6)制备发酵液并将其加至(5)基础物料中混合制得发酵底物；发酵底物进行发酵处理；(7)对(6)中发酵处理得到的物料进行干燥。本发明能制备得到破壁率高，消除蜂花粉杂菌污染和蜂花粉不良气味和苦涩味道，产生香味和酸甜味，适口性好，保质期长，功能性营养丰富，消除蜂花粉蛋白过敏症状发生，利于人们更好的吸收的功能性生物发酵蜂花粉。
Description
技术领域
本发明涉及蜂花粉加工技术领域，具体涉及一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法。
背景技术
蜂花粉来源于大自然，是蜜蜂从显花植物(蜜源植物和花粉源植物)花蕊内采集的花粉粒，并加入了特殊的腺体分泌物(花蜜和唾液)混合而成了一种不规则扁圆形状物团状物。鲜花粉呈西米大小，其实是由成千上万的花粉粒组成的花粉球。
蜜蜂在采蜜时，携粉足会收集花粉，形成花粉团，在进入蜂巢后，花粉团会被储藏起来，花粉团在蜂巢内经过储藏和发酵后形成蜂花粉。
蜂花粉具有天然保健作用与医疗及美容价值，被誉为“全能的营养食品”“浓缩的天然药库”“内服的化妆品”等，是人类天然食品中的瑰宝。
蜂花粉原料大多露天采收，易受周围环境和采收用具的影响，花粉含杂菌较多，且具有苦涩味，不利于蜂花粉产品的商业化的转化。
蜂花粉由细胞壁及其内容物两大部分构成，其细胞壁包括内壁和外壁，因蜂花粉的细胞壁的作用，影响了人体对花粉中的营养物质的吸收和利用。因此，花粉的破壁处理对于提高蜂花粉的应用价值是至关重要的。花粉破壁是指通过外界的作用对花粉粒的细胞壁进行整体破坏或萌发孔闭锁点的破坏，以便释放其内部营养成分，从而利于人体消化吸收。
为了提高蜂花粉的利用价值，有必要对蜂花粉进行深度处理，开发一种具有适口性好、无杂菌污染、破壁率高的功能性生物发酵蜂花粉的制备方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题，制备得到破壁率高，消除蜂花粉杂菌污染和蜂花粉不良气味和苦涩味道，产生香味和酸甜味，适口性好，保质期长，功能性营养丰富，消除蜂花粉蛋白过敏症状发生，利于人们更好的吸收的功能性生物发酵蜂花粉。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌17～32份、酿酒酵母12～22份，将上述复合菌的各组分均加入30～42℃的温水中活化0.5～1.5小时制成菌数0.3×108～1.2×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶40～60份，果胶酶30～50份，蛋白酶10～20份，将上述复合酶的各组分均加入25℃～40℃的温水中活化0.5～1.5小时制成酶活1000～3000U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉50～80份，称取罗汉果粉8～18份，称取磷酸二氢钾0.1～0.5份，将上述称取得到的蜂花粉、罗汉果粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为0.8～2.0∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为30℃～50℃厌氧发酵处理24～72h(小时)；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为(5～10)∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.0×108～1.5×108个/毫升；控制发酵底物的料温为20℃～30℃好氧发酵处理24～72h(小时)；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
优选的，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到40～80目。
优选的，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在40～50℃，熏蒸时间20～60min(分钟)。
优选的，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由40～100份纯乳酸和100份水配置成。
优选的，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌5～10份。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选的，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
优选的，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤9％时停止干燥。
优选的，所述蜂花粉为茶花粉、松花粉、玉米花粉、荷花粉中的任意一种或多种以任意比例配制而成的混合物。
通过本发明制备的蜂花粉可以作为原料添加入其他食品中，根据需要，本发明制备的蜂花粉还可以进一步的进行更为彻底的灭菌和灭酶处理，如臭氧灭菌灭酶处理，升温灭酶处理等。
通过机械粉碎处理，破坏蜂花粉的不规则扁圆形物团状结构，将蜂花粉的粉碎处理成均匀的粉状颗粒，增大物料比表面积，有利于蜂花粉被微生物和酶分解，提高破壁的效率和破壁均匀度。
乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸，第一方面，乳酸溶液蒸汽可以使物料的料温升温，因乳酸能溶解蛋白质和角质，所以，乳酸溶液蒸汽能快速彻底的软化物料，实现对蜂花粉的细胞壁进行预处理，使得细胞壁充分展露，利于后面的发酵处理，菌和酶的作用面积增大，软化、浸润、温热的物料能够使微生物和生物酶快速其作用，节省发酵时间，提高了发酵效率，强化了物料的发酵深度；第二方面，呈粉状的蜂花粉物料在熏蒸过程中，乳酸溶液蒸汽在粉状蜂花粉中穿透力强，对物料的杀菌与杀病毒的作用更彻底高效。蜂花粉物料经乳酸溶液蒸汽熏蒸处理后，物料中的有害菌、杂菌被杀灭处理，有利于后面发酵步骤不受杂菌干扰，物料更安全、发酵更彻底高效；第三方面，乳酸能使物料具有微酸性，并具有防腐作用；第四方面，乳酸能防止杂菌繁殖的同时，加入的乳酸也可以促进底物中酵母菌的生长发育，有利于提高生物处理的效率，提高蜂花粉破壁率；第五方面，乳酸价格便宜，乳酸独特的酸味可增加食物的美味。
植物乳杆菌是乳酸菌的一种，厌氧或兼性厌氧。在繁殖过程中能产出特有的乳酸杆菌素，乳酸杆菌素是一种生物型的防腐剂。植物乳杆菌属于化能异养型微生物，需从外界获取生长代谢所需的营养物质。如糖类、氨基酸、生长因子和矿物质等。植物乳杆菌在生长过程中发酵碳水化合物产乳酸。
酿酒酵母是单细胞微生物，耐酸性强，是兼性微生物，在有氧呼吸或无氧发酵条件下都能生长，厌氧发酵可以获得代谢产物(如酒精、各种酒类、甘油、酶等)，耗氧发酵可以获得酵母细胞或细胞组成成分；酵母菌生长繁殖所需的能量主要来自糖类的分解代谢，可以利用多种不同的单糖和低聚糖、非碳水化合物、工业生产的碳源等。酿酒酵母将葡萄糖、果糖、甘露糖等单糖吸入细胞内，在无氧的条件下，经过内酶的作用，把单糖分解为二氧化碳和酒精。
纤维素酶是一种多组分酶系，通过各酶之间的协同作用，分解纤维素得到寡糖和二糖，并最终水解生成葡萄糖。
罗汉果果实营养价值很高，含丰富的维生素C以及糖甙、果糖、蛋白质、脂类等。罗汉果具有润肺止咳的功效，还有润肠通便的功效，罗汉果对乳酸菌的生长及活力具有较明显的促进作用。
磷酸二氢钾一方面可以给纤维素酶提供金属离子激活剂，提高纤维素酶活性，K+离子对纤维素酶有激活作用，K+离子可以提高纤维素酶活性。磷盐对各种酵母的生长及代谢均极为重要，磷酸二氢钾能促进产酯酵母的活力，提高酵母细胞数、产酸量及产酯量。
随着酶解反应的进行，纤维素被降解，葡萄糖逐渐积累，当达到一定程度时，就会对纤维素酶产生反馈抑制，影响纤维素的高效酶解。通过碳酸钙、葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的转化，将葡萄糖进行了产物转移，降低了体系中的葡萄糖浓度，消除了体系中葡萄糖浓度升高对纤维素酶的反馈以致，间接的提高了纤维素酶的活性。
双歧杆菌能消耗转化纤维素酶的分解产物低聚糖，降低酶解反应体系中的低聚糖浓度，降低纤维素酶的反馈抑制，提高纤维素酶的活力。
产酯酵母对培养环境的要求并不苛刻，产酯酵母在酸性环境中，能够生成大量的酯类，并且保证生成的酯不被降解。球拟酵母具有较强产酯能力。培养基中含有一定量的酒精及有机酸类成分，对产酯酵母的产酯具有明显的作用。
本发明的有益效果为：
(1)使用本发明的方法，蜂花粉破壁率较高，破壁率不低于95％。
蜂花粉被粉碎处理后，物料的比表面积增大且均匀度高，有利于发酵酶解处理，能提高破壁率。
乳酸溶液蒸汽熏蒸蜂花粉，实现对蜂花粉的细胞壁进行预处理，使得细胞壁充分展露，利于后面的发酵处理，菌和酶的作用面积增大，软化、浸润、温热的物料能够使微生物和生物酶快速其作用，节省发酵时间，提高了发酵效率，强化了物料的发酵深度。
磷酸二氢钾还给纤维素酶提供金属离子激活剂，能直接提高纤维素酶的活性，直接提高了蜂花粉的破壁率。
纤维素酶分解蜂花粉细胞壁中的纤维素得到寡糖和二糖，并最终水解生成葡萄糖。随着纤维素酶的酶解反应的进行，蜂花粉细胞壁中的纤维素被降解，物料中的葡萄糖逐渐积累，当达到一定程度时，就会对纤维素酶产生反馈抑制，影响纤维素的高效酶解。通过复合菌对物料中葡萄糖和寡糖的利用的转化(植物乳杆菌和酿酒酵母均能利用转化葡萄糖，双歧杆菌能利用转化寡糖)，将葡萄糖和寡糖进行了产物转移，降低了体系中的葡萄糖浓度和寡糖浓度，消除了体系中葡萄糖浓度升高和寡糖浓度升高对纤维素酶的反馈抑制，间接的提高了纤维素酶的活性。
(2)混合酶液能够将发酵底物中的蛋白质降解成氨基酸，有利于人们更好的吸收，减少蛋白过敏等症状的发生。
(3)发酵酶解处理前，采用便宜且安全的方法对其进行消毒灭菌，蜂花粉粉碎后采用乳酸熏蒸，物料中的有害菌、杂菌被杀灭处理，有利于后面发酵步骤不受杂菌干扰，物料更安全，不破坏营养成分，发酵更彻底高效，且物料有乳酸味，提高了适口性。
生物发酵处理后的物料中含有含有乳酸及有益菌代谢的抑菌物质，能防止有害菌在蜂花粉物料中滋生，生物发酵处理中和生物发酵处理后，蜂花粉物料中均消除了杂菌污染的风险。
(4)罗汉果粉营养价值很高，罗汉果粉能提供微生物生长繁殖的营养物质，且罗汉果对乳酸菌的生长及活力具有较明显的促进作用。同时，物料的酸性环境还给罗汉果粉中丰富的维生素C提供了优良的保存条件，维生素C在酸性环境中比较稳定。罗汉果粉还具有润肺止咳的功效，还有润肠通便的功效，增加了蜂花粉产品的营养功能价值。
(5)发酵酶解处理后，消除了蜂花粉本身所具有的不良气味和苦涩味道，产生了香味和酸甜味，适口性好。发酵底物第一阶段发酵处理过程中，酿酒酵母能产生酒精，发酵底物第二阶段发酵处理过程中，产酯酵母在酸性环境中，能够生成大量的酯类，发酵底物中含有一定量的酒精及有机酸类成分，对产酯酵母的产酯具有明显的作用。
(6)对蜂花粉产品具有保护作用，避免了有害菌的侵入，保质期长。物料中含有乳酸及有益菌代谢的抑菌物质，能防止有害菌在蜂花粉物料中滋生，抗氧化效果好，保质期长。
(7)本发明制备的功能性生物发酵蜂花粉含有有益菌的代谢产物，稳定的维生素C，营养丰富，酸甜香，口感及感官均得到显著改善。
具体实施方式
以下是本发明一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
本发明所述的蜂花粉(茶花粉、松花粉、玉米花粉、荷花粉)、乳酸、植物乳杆菌、酿酒酵母、纤维素酶、果胶酶、蛋白酶、罗汉果粉、磷酸二氢钾、产酯酵母等均可通过市售途径得到。
实施例1：
一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌17份、酿酒酵母22份，将上述复合菌的各组分均加入30℃的温水中活化1.5小时制成菌数1.2×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶50份，果胶酶40份，蛋白酶10份，将上述复合酶的各组分均加入25℃的温水中活化1.5小时制成酶活3000U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉65份，称取罗汉果粉8份，称取磷酸二氢钾0.3份，将上述称取得到的蜂花粉、罗汉果粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为0.8∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为50℃厌氧发酵处理24h；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为10∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.5×108个/毫升；控制发酵底物的料温为20℃好氧发酵处理48h；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
优选的，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到40目。
优选的，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在50℃，熏蒸时间20min。
优选的，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由40份纯乳酸和100份水配置成。
优选的，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌10份。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选的，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
优选的，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤9％时停止干燥。
优选的，所述蜂花粉为茶花粉。
上述方法制备得到的蜂花粉破壁率98.6％。
实施例2：
一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌24份、酿酒酵母17份，将上述复合菌的各组分均加入42℃的温水中活化0.5小时制成菌数0.7×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶40份，果胶酶50份，蛋白酶15份，将上述复合酶的各组分均加入40℃的温水中活化0.5小时制成酶活2000U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉50份，称取罗汉果粉13份，称取磷酸二氢钾0.1份，将上述称取得到的蜂花粉、罗汉果粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为1.4∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为30℃厌氧发酵处理72h；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为7∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.2×108个/毫升；控制发酵底物的料温为25℃好氧发酵处理24h；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
优选的，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到60目。
优选的，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在45℃，熏蒸时间40min。
优选的，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由70份纯乳酸和100份水配置成。
优选的，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌7份。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选的，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
优选的，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤9％时停止干燥。
优选的，所述蜂花粉为松花粉。
上述方法制备得到的蜂花粉破壁率96.7％。
实施例3；
一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌32份、酿酒酵母12份，将上述复合菌的各组分均加入36℃的温水中活化1.0小时制成菌数0.3×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶60份，果胶酶30份，蛋白酶20份，将上述复合酶的各组分均加入30℃的温水中活化1.0小时制成酶活1000U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉80份，称取罗汉果粉18份，称取磷酸二氢钾0.5份，将上述称取得到的蜂花粉、罗汉果粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为2.0∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为40℃厌氧发酵处理48h；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为5∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.0×108个/毫升；控制发酵底物的料温为30℃好氧发酵处理72h；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
优选的，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到80目。
优选的，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在40℃，熏蒸时间60min。
优选的，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由100份纯乳酸和100份水配置成。
优选的，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌5份。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选的，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
优选的，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤9％时停止干燥。
优选的，所述蜂花粉为玉米花粉。
上述方法制备得到的蜂花粉破壁率95.8％。
实施例4：
一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌20份、酿酒酵母14份，将上述复合菌的各组分均加入33℃的温水中活化0.7小时制成菌数0.9×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶55份，果胶酶35份，蛋白酶12份，将上述复合酶的各组分均加入28℃的温水中活化0.7小时制成酶活2500U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉57份，称取罗汉果粉16份，称取磷酸二氢钾0.4份，将上述称取得到的蜂花粉、罗汉果粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为1.1∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为45℃厌氧发酵处理36h；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为6∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.4×108个/毫升；控制发酵底物的料温为22℃好氧发酵处理60h；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
优选的，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到70目。
优选的，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在43℃，熏蒸时间30min。
优选的，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由55份纯乳酸和100份水配置成。
优选的，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌9份。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选的，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
优选的，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤7％时停止干燥。
优选的，所述蜂花粉为荷花粉。
上述方法制备得到的蜂花粉破壁率93.2％。
实施例5：
一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌27份、酿酒酵母19份，将上述复合菌的各组分均加入39℃的温水中活化1.3小时制成菌数0.5×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、果胶酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶45份，果胶酶45份，蛋白酶18份，将上述复合酶的各组分均加入34℃的温水中活化1.2小时制成酶活1500U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉73份，称取罗汉果粉11份，称取磷酸二氢钾0.2份，将上述称取得到的蜂花粉、罗汉果粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为1.7∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为35℃厌氧发酵处理60h；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为8∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.3×108个/毫升；控制发酵底物的料温为28℃好氧发酵处理36h；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
优选的，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到50目。
优选的，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在47℃，熏蒸时间50min。
优选的，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由85份纯乳酸和100份水配置成。
优选的，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌6份。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
优选的，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选的，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
优选的，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤7.5％时停止干燥。
优选的，所述蜂花粉为茶花粉、松花粉、玉米花粉、荷花粉以任意比例配制而成的混合物；例如可以是：所述蜂花粉为茶花粉、松花粉、玉米花粉、荷花粉以重量份比例2∶1∶7∶4配制而成的混合物，通过上述方法制备得到的蜂花粉破壁率95.8％。
例如可以是：所述蜂花粉为松花粉、玉米花粉、荷花粉以重量份比例1∶3∶7配制而成的混合物，通过上述方法制备得到的蜂花粉破壁率94.5％。
例如可以是：所述蜂花粉为茶花粉、松花粉、玉米花粉以重量份比例3∶4∶3配制而成的混合物，通过上述方法制备得到的蜂花粉破壁率97.4％。
例如可以是：所述蜂花粉为茶花粉、荷花粉以重量份比例2∶5配制而成的混合物，通过上述方法制备得到的蜂花粉破壁率94.9％。
例如可以是：所述蜂花粉为松花粉、玉米花粉以重量份比例3∶7配制而成的混合物，通过上述方法制备得到的蜂花粉破壁率96.1％。
Claims (10)
1.一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将去杂后的蜂花粉进行粉碎处理；
(2)采用乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸；
(3)制备发酵所需的复合菌液；所述复合菌液中包括有植物乳杆菌、酿酒酵母，且各组分重量份分别为：植物乳杆菌17～32份、酿酒酵母12～22份，将上述复合菌的各组分均加入30～42℃的温水中活化0.5～1.5小时制成菌数0.3×108～1.2×108个/毫升的复合菌液；
(4)制备发酵所需的复合酶液；所述复合酶液中包括纤维素酶、蛋白酶，且各组分的重量份为纤维素酶40～60份，果胶酶30～50份，蛋白酶10～20份，将上述复合酶的各组分均加入25℃～40℃的温水中活化0.5～1.5小时制成酶活1000～3000U/毫升的复合酶液；
(5)配制基础物料；按重量份计，称取步骤(2)处理后的蜂花粉50～80份，称取罗汉果粉8～18份，称取磷酸二氢钾0.1～0.5份，将上述称取得到的蜂花粉、磷酸二氢钾进行均匀混合，配制成基础物料；
(6)分别取步骤(3)中制备得到的复合菌液和步骤(4)中制备得到的复合酶液，按容积比1∶1进行混合均匀制成发酵液，将制得的发酵液加至步骤(5)中制得的基础物料中混合均匀制得发酵底物，基础物料与发酵液的重量比为0.8～2.0∶1；
发酵底物分别依次进行第一阶段发酵和第二阶段发酵，发酵底物在第一阶段发酵完成后，再进行第二阶段发酵；
发酵底物第一阶段发酵的处理方式：控制发酵底物的料温为30℃～50℃厌氧发酵处理24～72h；
发酵底物第二阶段发酵的处理方式：向发酵底物中加入产酯酵母菌液，发酵底物与产酯酵母菌液的重量比为5～10∶100，产酯酵母菌液的菌数为1.0×108～1.5×108个/毫升；控制发酵底物的料温为20℃～30℃好氧发酵处理24～72h；
(7)对步骤(6)中发酵处理得到的物料进行干燥，将干燥后得到的物料密封包装。
2.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述蜂花粉的粉碎粒度达到40～80目。
3.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，在乳酸溶液蒸汽对步骤(1)处理后的蜂花粉进行熏蒸过程中，蜂花粉物料温度控制在40～50℃，熏蒸时间20～60min。
4.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，按重量份计，乳酸溶液由40～100份纯乳酸和100份水配置成。
5.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，按重量份数计，所述复合菌液中还包括有双歧杆菌5～10份。
6.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述蛋白酶为酸性蛋白酶。
7.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述蛋白酶为中性蛋白酶。
8.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(6)中，所述产酯酵母为球拟酵母。
9.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，在步骤(7)中，物料进行干燥时，物料水分≤9％时停止干燥。
10.根据权利要求1所述的一种功能性生物发酵蜂花粉的制备方法，其特征在于，所述蜂花粉为茶花粉、松花粉、玉米花粉、荷花粉中的任意一种或多种以任意比例配制而成的混合物。
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