CN110559263B - 一种△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及食品营养技术领域，尤其涉及一种△5‑胆甾硫酸基类化合物脂质体及其制备方法。所述△5‑胆甾硫酸基类化合物脂质体指没有包封待包封药物但脂质体膜材料中含有△5‑胆甾硫酸基类化合物，其中所述脂质体的膜材料组分及其重量百分比为：磷脂类物质66.7％‑83.3％，△5‑胆甾硫酸基类化合物16.7％‑33.3％，不含胆固醇；平均粒度为100‑200nm，分布窄、稳定性好、分散性好，包封药物时包封率为90％以上。

Description

一种△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体及其制备方法

技术领域

本发明涉及食品营养技术领域，尤其涉及一种△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体及其制备方法。

背景技术

脂质体是由磷脂等双亲性分子在水相溶液中形成的具有细胞膜类似结构的优良载体，可以包裹亲水、亲脂和两亲性的药物和营养因子，既可保护药物和营养因子，降低其毒副作用，达到缓释目的，又可提高药物的靶向性和生物利用度。脂质体的制备方法主要有薄膜分散法、超声分散法、乙醇注入法、超临界法等。目前广泛使用的方法为薄膜分散法和超声分散法。薄膜分散法是将磷脂和胆固醇等类脂溶于有机溶剂，然后将溶液置于圆底烧瓶中，旋转减压蒸干有机溶剂，从而在烧瓶内壁上挂上一层类脂分子膜；随后加入缓冲溶液，充分震荡烧瓶使脂质膜水化脱落得到脂质体。如此制得的脂质体粒径在0.2-5μm之间，需要在后续步骤中将其在压力下多次通过具有100-200nm孔径的滤膜，从而制备成为平均粒径为100-200nm的均匀的脂质体。如果在旋转减压蒸干有机溶剂获得类脂分子膜后，加入缓冲液，将该溶液经超声波处理也能制备脂质体。但无论哪种方法，脂质体中均需要加入胆固醇提高其稳定性，而血清胆固醇过高是引发冠心病的主要危险因素。有数据表明，人体血清总胆固醇每降低1％，冠心病发生的危险性可降低2％-3％。因此，控制胆固醇的摄入，降低脂质体中胆固醇的含量成为研究热点。

△5-胆甾硫酸基类化合物是广泛存在于海洋生物中的一类天然物质，具有脂质代谢调节活性、糖代谢调节活性等生物功能。

发明内容

本发明要解决的技术问题是现今无论哪种方法，脂质体中均需要加入胆固醇提高其稳定性，而血清胆固醇过高是引发冠心病的主要危险因素。有数据表明，人体血清总胆固醇每降低1％，冠心病发生的危险性可降低2％-3％。因此，控制胆固醇的摄入，降低脂质体中胆固醇的含量成为研究热点。

为解决上述问题，本发明提供了一种安全、功能性质优良的代替胆固醇的△5-胆甾硫酸基类化合物作为壁材的新型空白纳米脂质体。△5-胆甾硫酸基类化合物作为壁材的新型空白纳米脂质体是指没有包封待包封药物但脂质体膜材料中含有△5-胆甾硫酸基类化合物，所制得的脂质体粒径小、分布窄且稳定性好。

为达到上述目的，本发明通过以下技术方案实现：

一种△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体，所述△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体指没有包封待包封药物但脂质体膜材料中含有△5-胆甾硫酸基类化合物，其中所述脂质体的膜材料组分及其重量百分比为：磷脂类物质66.7％-83.3％，△5-胆甾硫酸基类化合物16.7％-33.3％，不含胆固醇；平均粒度为100-200nm，分散性好，包封药物时包封率为90％以上。

胆固醇由一个刚性的环状结构、一个短的烷基链分支和一个羟基构成。环状结构具有亲脂性，极性的羟基具有亲水性，所以胆固醇是一种表面活性剂。如图1所示，△5-胆甾硫酸基类化合物与胆固醇有着类似的结构，它们都是由三个环己烷和一个环戊烷稠合而成的环戊烷多氢菲结构，且C-17上含有一个碳氢侧链，并具有一个或多个双键。两者结构不同的是，胆固醇C-3上为羟基，而△5-胆甾硫酸基类化合物C-3上为硫酸基团，硫酸基团属阴离子表面活性剂，具有很强的亲水性，与卵磷脂的亲水性头基结合得更加紧密，可以抑制磷脂不饱和链的暴露，从而使得磷脂不易氧化，以此获得更好的氧化稳定性。同时，△5-胆甾硫酸基类化合物较长的亲水链能在脂质体表面形成致密的水化层，避免或者减少了脂质体之间的团聚现象，获得更均一的稳定体系。因此以△5-胆甾硫酸基类化合物替代胆固醇制备脂质体获得更好的粒径分布稳定性和氧化稳定性具有可行性。但是过量的△5-胆甾硫酸基类化合物会使双分子层超过可容纳的限度，造成分子层的破坏，使脂质体失去稳定的结构，最终导致破裂，所以如何控制磷脂类物质和△5-胆甾硫酸基类化合物的添加量就至关重要。

进一步的，磷脂类物质为卵磷脂、豆磷脂或药用合成磷脂。

一种上述△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体的制备方法，为薄膜分散-超声法，薄膜分散法制备的脂质体包封率较高，但一般粒径较大；超声法制备的脂质体粒径小，但包封率较低，且结构不稳定。采取两种方法结合可以制备粒径小、包封率高、结构稳定的单室脂质体，从而提高脂质体的靶向性，延缓其在体内的消除速率。具体包括如下步骤：

(1)按重量百分比分别称取磷脂类物质与△5-胆甾硫酸基类化合物，在40℃条件下，用有机溶剂完全溶解各组分；而过量的△5-胆甾硫酸基类化合物会使双分子层超过可容纳的限度，造成分子层的破坏，使脂质体失去稳定的结构，最终导致破裂，所以如何控制磷脂类物质和△5-胆甾硫酸基类化合物的添加量就至关重要。

△5-胆甾硫酸基类化合物的提取过程如下：

取水产品体壁，真空冷冻干燥后磨粉过筛，加入一定体积的氯仿：甲醇溶液(2:1,v/v)，保持总的料液比为1:15(m/v)，持续搅拌浸提24h。浸提液过滤后加入1/4体积水，充分震荡混匀后静置分层。分层后取下层氯仿层，经真空减压浓缩、干燥后得到总脂。取200-300目硅胶于105℃活化10-12h后室温冷却待用，总脂用氯仿溶解后与硅胶混匀后快速均匀地倒进硅胶柱中，用硅胶柱层析的方法进行纯化。分别用氯仿、氯仿：甲醇(9:1,v/v)和丙酮进行洗脱，并减压浓缩收集各洗脱组分。将丙酮洗脱物用氯仿溶解后与硅胶混匀后快速均匀地倒进硅胶柱中，用氯仿：甲醇(5:1,v/v)进行洗脱，并用试管分别收集各个洗脱组分，逐一经过TCL硫酸根显色分析确认，合并收集洗脱液，减压浓缩干燥后即为△5-胆甾硫酸基类化合物。

(2)将步骤1所得溶液于真空旋转蒸发仪上除去有机溶剂，形成均匀薄膜；

(3)按4％脂质浓度(卵磷脂与△5-胆甾硫酸基类化合物总量占缓冲溶液体积的百分比)加入生理盐水，置于超声波细胞破碎仪中间歇超声30min，得乳白色混悬液，形成粗脂质体悬浊液；

(4)将制备好的粗脂质体混悬液10000g离心10min，除去体系中未形成脂质体的杂质，上清液即为替代胆固醇的△5-胆甾硫酸基类化合物纳米脂质体。

进一步的，步骤(1)的有机溶剂为甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙醚中的一种或两种。因卵磷脂易溶于甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙醚等有机溶剂，△5-胆甾硫酸基类化合物更易溶于甲醇、二氯甲烷等混合溶液，因此从中选择一种或两种有机溶剂。此外，因溶解后还需在真空的环境下将其蒸干以获得均匀的脂膜，过高的温度可能造成脂质氧化，品质降低，因此需选择一种沸点较低，易挥发的有机溶剂，在保证脂质品质的条件下尽可能减少有机溶剂的残留。

一种上述△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体的应用，应用在脂质体药物传输体系中。

一种上述制备微小载药脂质体的方法及其由该方法制备的药物传输体系。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明提供了一种新的替代胆固醇的△5-胆甾硫酸基类化合物作为壁材的新型空白纳米脂质体，即克服了传统脂质体中胆固醇的不良作用，又赋予脂质体△5-胆甾硫酸基类化合物的有益生理活性。

(2)利用本发明方法制得的脂质体性质稳定，平均粒度为100-200nm，分散性好，包封率可达90％以上，可用来包埋药物，将其应用于脂质体药物传输体系中。

附图说明

图1为△5-胆甾硫酸基类化合物代表性成分化学结构。其中，上图为24-亚甲基-胆甾-5-烯-3β-醇-3-硫酸基；下图为胆甾-5-烯-3β-硫酸基。

图2为△5-胆甾硫酸基类化合物对肝脏脂肪代谢的影响。

图3为△5-胆甾硫酸基类化合物对肝脏胆固醇及胆汁酸排泄的影响。

图4为△5-胆甾硫酸基类化合物对肝脏胆固醇代谢的影响。

具体实施方式

下面结合具体实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：

△5-胆甾硫酸基类化合物的代表性成分为24-亚甲基-胆甾-5-烯-3β-醇-3-硫酸基和胆甾-5-烯-3β-硫酸基，结构式见图1，制备方法如下：取水产品体壁，真空冷冻干燥后磨粉过筛，加入一定体积的氯仿：甲醇溶液(2:1,v/v)，保持总的料液比为1:15(m/v)，持续搅拌浸提24h。浸提液过滤后加入1/4体积水，充分震荡混匀后静置分层。分层后取下层氯仿层，经真空减压浓缩、干燥后得到总脂。取200-300目硅胶于105℃活化10-12h后室温冷却待用，总脂用氯仿溶解后与硅胶混匀后快速均匀地倒进硅胶柱中，用硅胶柱层析的方法进行纯化。分别用氯仿、氯仿：甲醇(9:1,v/v)和丙酮进行洗脱，并减压浓缩收集各洗脱组分。将丙酮洗脱物用氯仿溶解后与硅胶混匀后快速均匀地倒进硅胶柱中，用氯仿：甲醇(5:1,v/v)进行洗脱，并用试管分别收集各个洗脱组分，逐一经过TCL硫酸根显色分析确认，合并收集洗脱液，减压浓缩干燥后即为△5-胆甾硫酸基类化合物。

准确称量0.6g卵磷脂，和0.2g△5-胆甾硫酸基类化合物，完全溶解于12mL二氯甲烷中，在40℃水浴条件下真空旋转除去二氯甲烷，在瓶壁上形成均匀的脂质薄膜。加入20mL生理盐水溶液，置于超声波细胞破碎仪中超声30min，得到乳白色混悬液，即得△5-胆甾硫酸基类化合物粗脂质体混悬液。将粗脂质体混悬液10000g离心10min，除去体系中未形成脂质体的杂质。上清液即制备得到的△5-胆甾硫酸基类化合物空白脂质体。制得的△5-胆甾硫酸基类化合物空白纳米脂质体为较透明淡黄色溶液，平均粒径为119.5nm，分散系数为0.185，稳定性良好，4℃下保存10天以上，可以达到胆固醇空白脂质体相等的稳定性。

实施例2：

其中膜材料组分为：1.0g卵磷脂和0.2g△5-胆甾硫酸基类化合物。其余均与实施例1相同。

制得的△5-胆甾硫酸基类化合物空白纳米脂质体为较透明淡黄色溶液，平均粒径为107.3nm，分散系数为0.193，稳定性良好，4℃下保存10天以上，可以达到胆固醇空白脂质体相等的稳定性。

实施例3：

一种实施例1脂质体在药物传输体系中的应用：

准确称量0.6g卵磷脂、0.2g△5-胆甾硫酸基类化合物和20mg虾青素，完全溶解于12mL二氯甲烷中，在40℃水浴条件下真空旋转除去二氯甲烷，在瓶壁上形成均匀的脂质薄膜。加入20mL生理盐水溶液，置于超声波细胞破碎仪中超声，得到深红色混悬液，即得包封虾青素的△5-胆甾硫酸基类化合物粗脂质体混悬液。将粗脂质体混悬液10000g离心10min，除去体系中未形成脂质体的杂质。上清液即制备得到的包封虾青素的△5-胆甾硫酸基类化合物纳米脂质体。制得的包封虾青素的△5-胆甾硫酸基类化合物纳米脂质体为深红色溶液，平均粒径为110.3nm，分散系数为0.187，包封率为98.2％，稳定性良好，4℃下保存10天以上，可以达到包封虾青素的胆固醇纳米脂质体相等的稳定性。

对比实施例：

1.实验材料

植物甾醇购于陕西帕尼尔生物科技有限公司，为β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇和菜籽甾醇的混合物。

雄性C57BL/6J小鼠，SPF级，体重18-20g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2009-0007。

2.实验方法

2.1动物分组和建模

对雄性C57BL/6J小鼠首先进行一周的适应性喂养，再按照体重平均分为3组，每组8只，分别为高脂模型组(高脂)，△5-胆甾硫酸基类化合物(胆甾硫酸基类)和植物甾醇组。各组均喂食添加20％猪油和20％果糖的高脂高糖饲料，诱导C57BL/6J小鼠形成肥胖模型。喂食二周后，对高脂高糖饮食小鼠进行受试物干预。其中，△5-胆甾硫酸基类化合物组的饲料中添加0.4％的△5-胆甾硫酸基类化合物，植物甾醇组的饲料中添加0.4％的植物甾醇。各组饲料均在AIN93M基础饲料配方的基础上配制。小鼠自由摄食和饮水，在室温(23±2)℃、12h/12h明暗交替条件下饲养。每天更换饲料，测定并记录摄食量，隔天记录体重变化。小鼠按照眼窝取血后脱颈椎的方法处死，取肝脏、腓肠肌、附睾脂肪、肾周脂肪、皮下脂肪、棕色脂肪和肠系膜脂肪等脏器组织。组织称重记录后放于液氮速冻，之后再放入-80℃冰箱保存。

2.2Real-Time PCR检测肝脏组织脂质代谢和胆固醇代谢相关基因表达

称量0.1g肝脏组织，加入1mLTrizol于冰水浴中快速匀浆后转移至1.5mL灭酶离心管中，于室温静置5min后加入0.2mL氯仿，充分混匀后静置10min。于4℃，12000r/min条件下离心15min，收集500uL左右的上清转移至新的1.5mL灭菌离心管中，并加入等体积的异丙酮再次充分混匀。静置10min后4℃、12000r/min离心15min，收集管底的白色沉淀。加入75％乙醇溶液缓慢吹打混匀后4℃、10000r/min离心15min，弃去上清并将管内控干，加入适量DEPC水充分溶解沉淀，得到肝脏RNA样品。利用琼脂糖凝胶电泳检测所提RNA是否降解，并用Nanodrop 2000读取A260/280比值测定RNA浓度。取2μg RNA加随机引物2μL,并加入一定量的DEPC水补足至12.5μL反转得到25uL cDNA。将cDNA稀释到适宜的浓度，按照Fast StartUniveral SYBR Green Master说明书要求加入2.5μL样品cDNA、0.75μL上游引物、0.75μL下游引物、12.5μL SYBR和8.5μLDEPC水的25μL反应体系，反应条件为：95℃预变性10min，然后以95℃变性10s，60℃低温退火20s，72℃延伸30s为一个循环周期，运行45个循环。PCR扩增反应完成，分析溶解曲线，确定产物的单一性。目的基因表达量测定时以18s mRNA表达量作为内参。所使用引物序列均经过BLAST验证，并由上海生工生物工程有限公司合成，具体引物序列如下:18s(forward,5’-GTAACCCGTTGAACCCCATT-3’；reverse,5’-CCATCCAATCGGTAGTAGCG-3’)；FAS(forward,5’-GTCTGGAAAGCTGAAGGATCTC-3’；reverse,5’-TGCCTCTGAACCACTCACAC-3’)；ACC2(forward,5’-ACGAGCACACACAGTCCATG-3’；reverse,5’-GATGACCTCTGGATGTTCTTG-3’)；CPT1(forward,5’-GCCAGGAGGTCATAGAGACAT-3’；reverse,5’-GAGTCATGGAAGCCTCATACG-3’)；ACOX1(forward,5’-GTATAAACTCTTCCCGCTCCTG-3’；reverse,5’-CCAGGTAGTAAAAGCCTTCAGC-3’)；HMGR(forward,5’-GGCTGGTGAGTTGTCCTTGAT-3’；reverse,5’-TCTAAAGAGCCAGAAACCAAGC-3’)；ABCG5(forward,5’-TCTCCGCGTCCAGAACAAC-3’；reverse,5’-CATTGAGCATGCCGGTGTAT-3’)；CYP7A1(forward,5’-AGCAACTAAACAACCTGCCAGTACTA-3’；reverse,5’-GTCCGGATATTCAAGGATGCA-3’)。

2.3粪便中性固醇的提取和测定

在实验进行的第七周时，连续三天收集各组小鼠的粪便，并记录饲料消耗量。将收集的小鼠粪便冻干后称重，并在研钵里磨碎成粉末。称取0.1g粪便粉末于10mL离心管中，加入4mL无水乙醇在75℃加热抽提1h。抽提后6000rpm离心5min，收集上层抽提液。重复此抽提操作2次，最后合并抽提液。将抽提液吹干后加入4mL 1.25M NaOH于120℃进行4h的皂化反应。皂化反应结束后冷却至室温，之后加入4ml乙醚旋涡抽提，取上层液体，重复此抽提操作2次，最后合并抽提液，抽提液即为中性固醇样品。取少量样品，并加入一定量的5α-胆甾烷作为内标。吹干后用氯仿-甲醇复溶，取1ul上样。气相色谱条件为：载气为高纯氮气，进样口选择分流模式，分流比为5:1，温度为300℃，选择恒压模式，压力设为10.857psi，流速为1.34mL/min，气相分析过程采用梯度升温，步骤如下：起始温度为200℃，保持3min，之后按20℃/min的速度升至280℃，然后在280℃下保持30min，整个过程持续时间为37min；检测器为氢火焰离子化检测器(FID)，参数为：温度300℃，氢气流量25mL/min，空气流量400mL/min。根据检测器对待测物的响应与待测物的量成正比的原理进行定量。对样品谱图中的各个峰进行积分，依据加入内标的量计算得出粪便中性固醇的总含量。

2.4粪便胆汁酸的测定

在抽提完中性固醇的液体中加入适量盐酸调节PH至2左右。之后加入乙醚旋涡抽提，取上层液体，重复此抽提操作2次，最后合并抽提液，抽提液即为胆汁酸样品。得到的粪便胆汁酸样品按照试剂盒说明进行测定。

3结果分析：

从图2的结果可知，△5-胆甾硫酸基类化合物能够显著地降低脂合成相关基因(ACC2和FAS)的mRNA表达，并且增加脂分解相关基因(CPT1和ACOX1)的mRNA水平。从而降低了小鼠肝脏组织中脂肪酸的合成，升高了脂肪酸β氧化水平，最终使得肝脏脂肪蓄积情况得到一定的改善。而植物甾醇在脂质合成方面仅能显著降低ACC2的基因表达，但涉及脂分解相关基因的mRNA水平无显著性变化。粪便中性固醇和胆汁酸含量测定结果表明，机体对于△5-胆甾硫酸基类化合物的吸收要高于植物甾醇，△5-胆甾硫酸基类化合物能够很大程度上加大粪便中胆固醇的排出量，而植物甾醇对于粪便中胆汁酸的排出有促进作用，如图3所示。而图4的结果发现，△5-胆甾硫酸基类化合物的摄入能够降低HMGR的基因表达进而减少胆固醇的内源性合成，同时还能够升高ABCG5的基因表达从而增加胆固醇的外排，最终使得肝脏内胆固醇的含量降低。而植物甾醇的摄入则能够显著升高CYP7A1的基因表达从而增加胆固醇转化为胆汁酸并排出肝脏从而降低肝脏内胆固醇的含量。以上结果表明，植物甾醇的干预对胆固醇异化为胆汁酸及胆汁酸的排泄有较大的上调作用，进而减少了肝脏中胆固醇的含量。与此不同，△5-胆甾硫酸基类化合物在抑制胆固醇的内源性合成以及加大胆固醇的外排方面的作用更显著，所以△5-胆甾硫酸基类化合物是通过抑制胆固醇的合成以及增加胆固醇的排泄来降低肝脏中胆固醇的水平。因此采用△5-胆甾硫酸基类化合物作为脂质体的壁材，不仅可以替代胆固醇作用，还具有减少机体胆固醇含量的活性，作为药物传输体系应用更加优异。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体，其特征在于：所述△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体指没有包封待包封药物但脂质体膜材料中含有△5-胆甾硫酸基类化合物，其中所述脂质体的膜材料组分及其重量百分比为：磷脂类物质66.7％-83.3％，△5-胆甾硫酸基类化合物16.7％-33.3％，不含胆固醇；平均粒度为100-200nm，分布窄、稳定性好、分散性好；

所述△5-胆甾硫酸基类化合物包括24-亚甲基-胆甾-5-烯-3β-醇-3-硫酸基和胆甾-5-烯-3β-硫酸基两种；

所述△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体的制备方法，为薄膜分散-超声法。

2.如权利要求1所述的△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体，其特征在于：所述磷脂类物质为卵磷脂、豆磷脂或药用合成磷脂。

3.如权利要求1所述的△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体，其特征在于包括以下步骤：(1)按重量百分比分别称取磷脂类物质与△5-胆甾硫酸基类化合物，在40℃条件下，用有机溶剂完全溶解各组分；

(2)将步骤(1)所得溶液于真空旋转蒸发仪上除去有机溶剂，形成均匀薄膜；

(3)按4％脂质浓度加入生理盐水，置于超声波细胞破碎仪中间歇超声30min，得乳白色混悬液，形成粗脂质体悬浊液，所述脂质浓度为卵磷脂与△5-胆甾硫酸基类化合物总量占缓冲溶液体积的百分比；

(4)将制备好的粗脂质体混悬液10000g离心10min，除去体系中未形成脂质体的杂质，上清液即为替代胆固醇的△5-胆甾硫酸基类化合物纳米脂质体。

4.如权利要求3所述的△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体，其特征在于：步骤(1)的有机溶剂为甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙醚中的一种或两种。

5.如权利要求2或3所述的△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体，其特征在于△5-胆甾硫酸基类化合物的提取过程如下：取水产品体壁，真空冷冻干燥后磨粉过筛，加入体积比为2:1的氯仿：甲醇溶液，保持总的料液比为1:15，持续搅拌浸提24h；浸提液过滤后加入1/4体积水，充分震荡混匀后静置分层；分层后取下层氯仿层，经真空减压浓缩、干燥后得到总脂；取200-300目硅胶于105℃活化10-12h后室温冷却待用，总脂用氯仿溶解后与硅胶混匀后快速均匀地倒进硅胶柱中，用硅胶柱层析的方法进行纯化；分别用氯仿、氯仿：甲醇和丙酮进行洗脱，并减压浓缩收集各洗脱组分；将丙酮洗脱物用氯仿溶解后与硅胶混匀后快速均匀地倒进硅胶柱中，用氯仿：甲醇进行洗脱，并用试管分别收集各个洗脱组分，逐一经过TCL硫酸根显色分析确认，合并收集洗脱液，减压浓缩干燥后即为△5-胆甾硫酸基类化合物。

6.一种权利要求1中的△5-胆甾硫酸基类化合物脂质体在制备脂质体药物传输体系的制品中的应用。

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