CN102836188A - 布渣叶总黄酮提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了布渣叶总黄酮提取物及其制备方法和应用，所述提取物含有以芦丁计总黄酮的量为50-95wt%，总黄酮提取物中的水仙苷的量为3.5-7.5wt%，牡荆苷的量为0.5-3.0wt%，异牡荆苷的量为0.5-3.0wt%；制备方法步骤如下：粗提：采用水、甲醇、乙醇的其中一种或几种为提取溶媒，进行粗提；精制：以大孔树脂或聚酰胺或硅胶为吸附剂，乙醇或其它有机溶剂为洗脱液，进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物。本发明所制得的布渣叶总黄酮提取物含有以芦丁计总黄酮的量达50-95wt%，具有明显的调节血脂作用；制备方法简单，有效，适合于工业化大批量生产，可用于调节血脂药物的制备。

Description

布渣叶总黄酮提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种布渣叶总黄酮提取物及其制备方法和应用。

背景技术

高血脂症为临床常见疾病,具有病程进展较慢、并发症多的特点。随着人民生活水平的提高，饮食结构和生活方式的改变，我国高脂血症患病率有逐年升高的趋势。高血脂症是导致动脉粥样硬化的主要危险因素，心、脑部的动脉硬化，可导致冠心病、心绞痛、心肌梗死和脑血管意外等疾病；肾脏的毛细血管硬化，可引起肾功能衰竭，从而导致顽固性高血压和尿毒症；血脂过高还会引起脂肪肝，严重者可导致肝硬化等。据统计，我国30岁以上的成年人中间，血脂偏高的比例大约在10-20%左右，估计中国的高脂血症患者高达9000万。高血脂的高发病率，已成为我国面临的重要公共卫生问题之一。

近年来，我国中医药工作者针对高血脂症的临床特点以及化学合成药的不良反应等问题，结合中医药理论，在辨证施治的基础上，结合西医等现代科技手段，使得中医理论对高脂血症有了新的认识。在中医辨证的基础研究和应用中医药防治高脂血症方面，涉及到单味中药、复方、针灸、气功等多层面的研究，经过不懈的努力，在高血脂的病因病机、中医药治法、药物实验研究等方面都取得了令人瞩目的成就。同时，中药复方的调脂机制正在向多机制、全方位地深入研究方向发展。

传统中药布渣叶为椴树科植物破布叶（Microcos paniculata L.）的干燥叶。本品味酸，性凉，归脾、胃经。具有消食化积、清热利湿的功效。用于饮食积滞、感冒发热、湿热黄疸等。布渣叶主要含有黄酮类、生物碱、三萜类、挥发油类等化合物。其中黄酮类化学成分主要有牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷等。经检索，尚未发现关于布渣叶总黄酮治疗高脂血症、冠心病、心脑动脉粥样硬化、心绞痛、脑梗死、脂肪肝以及有关的高血压、糖尿病等的文献报道。

发明内容

基于此，本发明提供一种具有降血脂作用的布渣叶总黄酮提取物及其制备方法和应用。

实现上述目的的技术方案如下：

布渣叶总黄酮提取物，所述提取物含有以芦丁计总黄酮的量为50-95wt%。

在其中一些实施例中，所述提取物含有以芦丁计总黄酮的量为80-90wt%。

在其中一些实施例中，所述总黄酮提取物中的水仙苷的量为3.5-7.5wt%，牡荆苷的量为0.5-3.0wt%，异牡荆苷的量为0.5-3.0wt%。

在其中一些实施例中，所述总黄酮提取物中的水仙苷的量为5.5-7.5wt%，牡荆苷的量为1.8-3.0wt%，异牡荆苷的量为1.8-3.0wt%。

布渣叶总黄酮提取物的制备方法，包括以下步骤：

（1）粗提：将布渣叶以水、甲醇、乙醇的其中一种或几种以任意比例混合的溶液为提取溶媒，进行提取，过滤，将滤液浓缩至布渣生药浓度为0.5-5g/ml，得粗提物；

（2）精制：将步骤（1）所得的粗提物，以大孔树脂为吸附剂，先以水或体积分数为1-20%的乙醇溶液或体积分数为1-20%的甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，直至洗脱液无色；再以体积分数为60-90%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行分离，收集体积分数为60-90%的乙醇溶液或甲醇溶液洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物；

或将步骤（1）所得的粗提物，以聚酰胺为吸附剂，以体积分数为10-95%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行分离，收集洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物；

或将步骤（1）所得的粗提物，以硅胶为吸附剂，先以氯仿-甲醇为洗脱液进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱液依次为：氯仿-甲醇的体积比为4∶1、3∶1、2∶1、1∶1；后以甲醇-水溶液进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱液依次为：体积分数为100%甲醇、80%甲醇溶液、60%甲醇溶液、30%甲醇溶液，收集氯仿-甲醇的体积比从3∶1梯度变化至体积分数为100%的甲醇，再梯度变化到体积分数为30%甲醇溶液的洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物。

在其中一些实施例中，步骤（1）所述的提取剂为体积分数60-95%的乙醇溶液或甲醇溶液；所述步骤（2）中，以大孔树脂为吸附剂，先以水或体积分数为10-15%的乙醇溶液或体积分数为10-15%的甲醇溶液为洗脱液；再以体积分数为80-90%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，收集体积分数为80-90%的乙醇溶液或甲醇溶液洗脱液，减压蒸馏，即得；或所述步骤（2）中，以聚酰胺为吸附剂，先以体积分数为10%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液；再以体积分数为95%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，收集2次洗脱液，减压蒸馏，即得。

在其中一些实施例中，对步骤（2）所得的提取物，采用乙酸乙酯进一步萃取，得到以芦丁计总黄酮的量为80-95wt%的布渣叶总黄酮提取物。

在其中一些实施例中，步骤（2）所述的大孔树脂为HPD100、HPD200、HPD300、HPD450、D101、D201、D301、AB-8、ZTC-5的其中一种。

一种布渣叶总黄酮提取物在制备降血脂的药物中的应用。

在其中一些实施例中，所述的布渣叶总黄酮提取物在制备防治冠心病、心脑动脉粥样硬化、脑梗死、脂肪肝、高血压或糖尿病药物中的应用。

在其中一些实施例中，所述药物制得的剂型可以为片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、合剂、口服液、糖浆剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、凝胶剂、粉剂、滴丸、缓释片、粉针、固体分散体、微囊、微丸、微乳中的任何一种。

本发明有如下优点和有益效果：

1、本发明制得的布渣叶总黄酮提取物中含有以芦丁计总黄酮的量达50-95wt%；所得总黄酮提取物可应用于制备降血脂，防治冠心病、心脑动脉粥样硬化、脑梗死、脂肪肝、高血压或糖尿病等与高血脂有关的并发症的药物中。

2、本发明所述的布渣叶总黄酮提取物的制备方法简单，有效，适合于工业化大批量生产。

具体实施方式

本发明下述实施例所制得的布渣叶总黄酮提取物中总黄酮的测定方法参照《中国药典》2010年版一部附录紫外分光光度法测定，以芦丁为对照品，在500nm处测定吸收度，并计算总黄酮的含量。

布渣叶总黄酮提取物中水仙苷、牡荆苷、异牡荆苷的测定方法参照《中国药典》2010年版一部附录高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适应性试验：采用十八烷基硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，0.1%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱（0-10min，25-30%A；10-25min，30%A；25-50min，30-35%A；50-60min，35%A），检测波长320nm；柱温25℃；流速0.8mL·min^-1；理论塔板数以牡荆苷计不低于2000。

通过以下实施例对本发明作进一步阐述。

实施例1

一种布渣叶总黄酮提取物制备方法，步骤如下：

（1）粗提：将布渣叶粉碎，采用醇提水沉提取法，加体积分数为60%的乙醇溶液回流提取3次，过滤，合并各次滤液，回收乙醇至无乙醇味，再浓缩至适宜浓度，加适量水搅拌均匀，静置，待沉淀完全后，倾出上清液，药液浓缩至布渣生药浓度为0.5g/ml，得粗提物，备用；

（2）精制：采用非极性的大孔吸附树脂HPD-100进行分离，首先将上述粗提物以1.5BV/h的速度通过已预处理的径:高比为1:8的HPD-100大孔树脂吸附，待全部通过树脂柱后，用水洗脱至无色，再用2.5BV体积分数为80%的乙醇溶液以1BV/h的流速进行洗脱，收集体积分数为80%的乙醇溶液洗脱液，减压回收溶剂后，即得到布渣叶总黄酮提取物。

（3）干燥：将上述布渣叶总黄酮提取物，于60℃继续浓缩至相对密度1.30g/cm³，置于加热温度为60℃，真空度为-0.06mp的真空干燥箱内，干燥后，取出，碎粉，过筛，即可。

干燥后的布渣叶总黄酮提取物中总黄酮的测定方法参照《中国药典》2010年版一部附录紫外分光光度法测定，以芦丁为对照品，在500nm处测定吸收度，并计算总黄酮的含量；总黄酮提取物中水仙苷、牡荆苷、异牡荆苷的测定方法参照《中国药典》2010年版一部附录高效液相色谱法测定。结果：以芦丁计总黄酮的量为89wt%，在所述总黄酮提取物中，水仙苷的量为7.3wt%、牡荆苷的量为2.7wt%、异牡荆苷的量为2.7wt%。

所制的布渣叶总黄酮提取物可应用于制备降血脂药物中。

所述的降血脂药物的剂型为片剂，片剂的制备方法如下：

称取布渣叶总黄酮提取物300g，加入适量的辅料，混合，过100目筛，干压制粒或湿法制粒，60℃以下干燥，过16目筛整粒，混匀，加入适量润滑剂硬脂酸镁，混匀，压片，共制成1000片，即得。

实施例2

一种布渣叶总黄酮提取物的制备方法，步骤如下：

（1）粗提：采用水提醇沉提取法，首先加水煎煮布渣叶，提取3次，过滤，合并各次滤液，浓缩至适宜浓度，加乙醇调节乙醇溶液浓度达到70%，静置，待沉淀完全后，倾出上清液，回收乙醇至无乙醇味，再浓缩至布渣生药浓度为3.5g/ml，得粗提物，备用；

（2）精制：采用聚酰胺吸附分离：取粗提液，以1BV/h的速度通过径:高比为1:5的聚酰胺吸附柱，用体积分数为10%的乙醇溶液洗脱至无色，再用1.5BV体积分数为95%的乙醇溶液以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂后，即得到布渣叶总黄酮提取物；

所制得的布渣叶总黄酮提取物中，参照实施例1的测定方法，测得总黄酮、水仙苷、牡荆苷、异牡荆苷的含量：以芦丁计总黄酮的量为50wt%，在所述总黄酮提取物中，水仙苷的量为3.5wt%、牡荆苷的量为0.5wt%、异牡荆苷的量为0.5wt%。

所制得的布渣叶总黄酮提取物可应用于制备降血脂药物中。

所述的降血脂药物的剂型为口服液，该口服液的制备方法如下：

取精制后的布渣叶活性提取物500g，加入少量热水溶解，加入适量单糖浆，加水至1000ml，调节pH值至6-7，滤过，灌封，灭菌，即得。

实施例3

一种布渣叶总黄酮提取物的制备方法，步骤如下：

（1）粗提：将布渣叶粉碎，采用醇渗漉提取法，加40%的乙醇浸泡后，进行渗滤，收集渗漉液，回收乙醇，浓缩至布渣生药浓度为5g/ml，得粗提物，备用。

（2）精制：采用硅胶吸附分离：将上述药液以0.5BV/h的速度通过径:高比为1:3的硅胶吸附柱，先以氯仿-甲醇进行梯度洗脱，后以甲醇-水梯度进行梯度洗脱，具体洗脱过程为：氯仿-甲醇的体积比为4∶1洗脱1.5BV、体积比为3∶1洗脱1BV、体积比为2∶1洗脱1BV、体积比为1∶1洗脱1BV、体积分数为100%甲醇洗脱1BV、体积分数为80%甲醇溶液洗脱0.5BV、体积分数为60%甲醇溶液洗脱0.5BV、体积分数为30%甲醇溶液洗脱1BV，流速为0.5BV/h，收集氯仿-甲醇的体积比3∶1梯度变化至100%的甲醇，再梯度变化到体积分数为30%甲醇溶液的洗脱液，减压回收溶剂后，即得到布渣叶总黄酮提取物；

（3）干燥：采用喷雾干燥法：将上述布渣叶总黄酮提取物于60℃浓缩至相对密度1.10g/cm³，进行喷雾干燥，取出，过筛，即得。

干燥后的布渣叶总黄酮提取物，参照实施例1的测定方法，测得总黄酮、水仙苷、牡荆苷、异牡荆苷的的含量：以芦丁计总黄酮的量为80wt%，在所述总黄酮提取物中，水仙苷的量为5.5wt%、牡荆苷的量为1.8wt%、异牡荆苷的量为1.8wt%。

所制的布渣叶总黄酮提取物可应用于制备降血脂药物中。

所述的降血脂药物的剂型为颗粒剂，颗粒剂的制备方法如下：

称取布渣叶总黄酮提取物900g，加入适量乳糖与糊精混合均匀，过100目筛，干压制粒或湿法制粒，60℃以下干燥，整粒，分装成1000袋，即得。

实施例4

一种布渣叶总黄酮提取物的制备方法，步骤如下：

（1）粗提：将布渣叶粉碎，加甲醇-乙醇-水的体积比为55:35:10回流提取3次，过滤，合并各次滤液，回收甲醇，再浓缩至适宜浓度，加适量水搅拌均匀，静置，待沉淀完全后，倾出上清液，药液浓缩至布渣生药浓度为2g/ml，得粗提物，备用。

（2）精制：采用弱极性的大孔树脂AB-8进行分离，首先将上述粗提物以2BV/h的速度通过径:高比为1:6的大孔树脂吸附柱，用体积分数为15%的甲醇溶液冲洗至洗脱液近无色；再用0.8BV体积分数为90%的甲醇溶液以3BV/h的流速洗脱，收集体积分数为90%的甲醇溶液洗脱液，减压回收溶剂后，采用乙酸乙酯进一步萃取，分离乙酸乙酯层溶液，回收溶剂，得布渣叶总黄酮提取物。

（3）干燥：将上述布渣叶总黄酮提取物于60℃浓缩至相对密度为1.25g/cm³，后置于鼓风干燥箱内干燥，取出并碎粉，过筛，即得。

干燥后的布渣叶总黄酮提取物，参照实施例1的测定方法，测得总黄酮、水仙苷、牡荆苷、异牡荆苷的含量：以芦丁计总黄酮的量为95wt%，在所述总黄酮提取物中，水仙苷的量为7.5wt%、牡荆苷的量为3.0wt%、异牡荆苷的量为3.0wt%。

所制得的布渣叶总黄酮提取物可应用于制备降血脂药物中。

所述的降血脂药物的剂型为胶囊剂，其制备方法如下：

称取布渣叶总黄酮提取物300g，加入适量的辅料，混合，过100目筛，干压制粒或湿法制粒，60℃以下干燥，灌入1号胶囊，制成1000粒，即得。

上述实施例1-实施例4所制的布渣叶总黄酮提取物可应用于：制备降血脂，防治冠心病、心脑动脉粥样硬化、脑梗死、脂肪肝、高血压或糖尿病的药物中。

所述的药物剂型可以还可以为合剂、糖浆剂、缓释片、微囊、微丸、微乳等任何一种现有药物剂型。

实施例5

下面是布渣叶总黄酮提取物进行药效学试验用以说明本发明提取物的活性和应用。

一、布渣叶总黄酮提取物对尾静脉注射化学表面活化剂Triton WR-1339所致小鼠实验性高脂血症的影响

1实验动物

SPF级NIH小鼠，雌雄各半，体重18-22g，由广东省医学实验动物中心提供。

2供试药物

布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D分别由本实施例1-4制得，广东省中医研究所中药制剂研究室提供。使用时按剂量以蒸馏水配制成所需浓度，4℃冰箱保存。

阳性对照药：非诺贝特胶囊，法国利博福尼制药公司，批号16965；血脂康胶囊，北京北大维信生物科技有限公司，批号20110505。使用时按剂量以蒸馏水配制成所需浓度，4℃冰箱保存。

3实验方法

3.1给药方法

供试品药物各剂量组及阳性对照药按剂量灌胃给药，给药体积20ml·kg^-1，每天1次，连续7d，正常对照组、模型对照组同法灌胃给予蒸馏水20ml·kg^-1。

3.2测定方法

取SPF级NIH小鼠120只，雌雄各半，按体重随机分为12组，分别为正常对照组、模型对照组、非诺贝特组、血脂康组、布渣叶总黄酮A高剂量组和低剂量组、布渣叶总黄酮B高剂量组和低剂量组、布渣叶总黄酮C高剂量组和低剂量组、布渣叶总黄酮D高剂量组和低剂量组（2倍剂量间距），每组10只。非诺贝特剂量0.143g药粉·kg^-1，血脂康剂量0.312g药粉·kg^-1，布渣叶总黄酮高、低剂量分别为7.80、3.90g生药·kg^-1。各给药组均按剂量灌胃给药，正常对照组、模型对照组同法灌胃给予等体积蒸馏水，给药体积为20ml·kg^-1，每天1次，连续7d。给药第5d下午5时开始各组小鼠禁食不禁水16h，第6d上午9时除正常对照组外，其余各组小鼠均尾静脉注射Triton WR-1339 300mg·kg^-1造模，正常对照组同法尾静脉注射等体积生理盐水，造模后各组小鼠均正常进食，下午5时开始各组小鼠禁食不禁水16h，第7d上午9时末次给药后1h，各组小鼠均眼眶静脉丛取血，2000rpm离心10min，按甘油三酯试剂盒、胆固醇试剂盒说明书测定各组小鼠血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）含量。计量资料以均值加减标准差

表示，多组间均数的比较采用One-Way ANOVA S-N-K法，采用SPSS15.0软件统计分析各组数据差异。

4实验结果

结果见表1，结果显示，与正常对照组相比，模型对照组小鼠血清TC、TG含量均显著升高（P<0.01）；与模型对照组相比，布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D均能使高脂血症小鼠血清TC、TG的含量明显降低（P<0.01）。实验结果提示布渣叶总黄酮提取物能够明显抑制内源性脂质的产生。

表1布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D对小鼠实验性高脂血症的影响(

n=10)

注：①非诺贝特组、血脂康组剂量单位为g药粉·kg^-1，布渣叶总黄酮剂量单位为g生药·kg^-1。

②^*表示与正常对照组比较P<0.05，^**表示与正常对照组比较P<0.01；^#表示与模型对照组比较P<0.05，^##表示与模型对照组比较P<0.01。

5实验结论

布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D均能明显降低实验性高脂血症小鼠血清TC、TG含量，作用程度D≈A>C>B。

实验结果表明：布渣叶总黄酮提取物对小鼠实验性高脂血症的有显著的调节作用，且效果与血脂康相当，提示布渣叶总黄酮提取物能够明显抑制内源性脂质的产生。

二、布渣叶总黄酮提取物对大鼠进食高脂饲料所致实验性高脂血症的影响

1实验动物

SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重180-220g，由广东省医学实验动物中心提供。

2供试药物

布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D分别由本实施例1-4制得，广东省中医研究所中药制剂研究室提供。使用时按剂量以蒸馏水配制成所需浓度，4℃冰箱保存。

阳性对照药：非诺贝特胶囊，法国利博福尼制药公司，批号16965；血脂康胶囊，北京北大维信生物科技有限公司，批号20110505。使用时按剂量以蒸馏水配制成所需浓度，4℃冰箱保存。

3实验方法

（1）大鼠高脂饲料配制：

大鼠高脂饲料组成：2％胆固醇，10％猪油，0.2％丙基硫氧嘧啶，87.8％基础饲料，由广东省医学实验动物中心加工配制。

（2）动物分组与模型建立：

取SPF级SD大鼠120只，雌雄各半，随机留取10只大鼠（雌雄各半）作为正常对照组，其余110只大鼠（雌雄各半）作为高脂饮食组。正常对照组大鼠给予正常饲料，高脂饮食组大鼠每天上午9时左右每笼给予高脂饲料200g，下午5时左右换成正常饲料100g，自由饮水，连续8周。第4周末下午5时各组大鼠均禁食不禁水15h，第2天8时各组大鼠均从眼眶静脉丛采血1mL，离心分离血清，按胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒说明书测定大鼠血清中TC、TG含量作为大鼠给药前血脂水平。根据TC水平把高脂饮食组大鼠分为11组，分别为高脂模型组、非诺贝特组、血脂康组、布渣叶总黄酮A高和低剂量组、布渣叶总黄酮B高和低剂量组、布渣叶总黄酮C高和低剂量组、布渣叶总黄酮D高和低剂量组（2倍剂量间距），每组10只，雌雄各半，雌雄分笼饲养，每笼5只。非诺贝特剂量0.099g药粉·kg^-1，血脂康剂量0.216g药粉·kg^-1，布渣叶总黄酮高、低剂量分别为5.40、2.70g生药·kg^-1。各给药组大鼠每天上午按剂量灌胃给予相应药物10mL/kg，正常对照组、高脂模型组给予等量蒸馏水，每天1次，连续给药4周。末次给药前各组大鼠均禁食不禁水15h，末次给药1h后取血，离心分离血清，分别按各试剂盒说明书测定各组大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C。计量资料以均值加减标准差

表示，多组间均数的比较采用One-WayANOVA S-N-K法，采用SPSS15.0软件统计分析各组数据差异。

4实验结果

4.1布渣叶总黄酮提取物对食饵性高脂血症大鼠血清TC、TG含量的影响

表2显示，在造模4周后（给药前）各组造模大鼠与正常对照组大鼠相比，血清TC、TG含量均显著升高（P<0.01）。

给药4周后，与正常对照组相比，模型对照组大鼠血清TC、TG含量仍明显升高（P<0.01）；与模型对照组相比，布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D高、低剂量组大鼠血清TC、TG含量均明显降低（P<0.01或P<0.05）。实验结果提示布渣叶总黄酮提取物能够明显抑制外源性脂质所致高脂血症的产生。

表2布渣叶总黄酮提取物对食饵性高脂血症大鼠血清TC、TG含量的影响(n=10)

注：①非诺贝特组、血脂康组剂量单位为g药粉·kg^-1，布渣叶总黄酮剂量单位为g生药·kg^-1。

②^*表示与正常对照组比较P<0.05，^**表示与正常对照组比较P<0.01；^#表示与模型对照组比较P<0.05，^##表示与模型对照组比较P<0.01。

4.2布渣叶总黄酮提取物对食饵性高脂血症大鼠血清HDL-c、LDL-c含量的影响

表3显示，给药4周后，与正常对照组相比，模型对照组大鼠血清HDL-c含量明显降低（P<0.01）、LDL-c含量明显升高（P<0.01）；与模型对照组相比，布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D高、低剂量组大鼠血清HDL-c含量明显升高（P<0.01或P<0.05）、LDL-c含量明显下降（P<0.01或P<0.05）。

表3布渣叶总黄酮提取物对食饵性高脂血症大鼠血清HDL-c、LDL-c含量的影响(

n=10)

注：①非诺贝特组、血脂康组剂量单位为g药粉·kg^-1，布渣叶总黄酮剂量单位为g生药·kg^-1。

②^*表示与正常对照组比较P<0.05，^**表示与正常对照组比较P<0.01；^#表示与模型对照组比较P<0.05，^##表示与模型对照组比较P<0.01。

5实验结论

布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D均能明显降低实验性高脂血症大鼠血清TC、TG含量，布渣叶总黄酮提取物A、B、C、D均能明显升高实验性高脂血症大鼠血清HDL-c含量，降低LDL-c含量。

实验结果表明：布渣叶总黄酮提取物对大鼠实验性高脂血症的有显著的调节作用，提示布渣叶总黄酮提取物能够明显抑制外源性脂质所致高脂血症的产生。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.布渣叶总黄酮提取物，其特征在于，所述提取物含有以芦丁计总黄酮的量为50-95wt%。

2.根据权利要求1所述的布渣叶总黄酮提取物，其特征在于，所述提取物含有以芦丁计总黄酮的量为80-90wt%。

3.根据权利要求1所述的布渣叶总黄酮提取物，其特征在于，所述总黄酮提取物中的水仙苷的量为3.5-7.5wt%，牡荆苷的量为0.5-3.0wt%，异牡荆苷的量为0.5-3.0wt%。

4.根据权利要求3所述的布渣叶总黄酮提取物，其特征在于，所述总黄酮提取物中的水仙苷的量为5.5-7.5wt%，牡荆苷的量为1.8-3.0wt%，异牡荆苷的量为1.8-3.0wt%。

5.布渣叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）粗提：将布渣叶以水、甲醇、乙醇的其中一种或几种以任意比例混合的溶液为提取溶媒，进行提取，过滤，将滤液浓缩至布渣生药浓度为0.5-5g/ml，得粗提物；

（2）精制：将步骤（1）所得的粗提物，以大孔树脂为吸附剂，先以水或体积分数为1-20%的乙醇溶液或体积分数为1-20%的甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，直至洗脱液无色；再以体积分数为60-90%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，收集体积分数为60-90%的乙醇溶液或甲醇溶液洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物；

或将步骤（1）所得的粗提物，以聚酰胺为吸附剂，以体积分数为10-95%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行分离，收集洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物；

或将步骤（1）所得的粗提物，以硅胶为吸附剂，先以氯仿-甲醇溶液为洗脱液进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱液依次为：氯仿-甲醇的体积比为4∶1、3∶1、2∶1、1∶1；后以甲醇-水溶液进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱液依次为：体积分数为100%甲醇、80%甲醇溶液、60%甲醇溶液、30%甲醇溶液，收集氯仿-甲醇的体积比从3∶1梯度变化至体积分数为100%甲醇，再梯度变化至体积分数为30%甲醇溶液的洗脱液，减压浓缩，得布渣叶总黄酮提取物。

6.根据权利要求5所述的布渣叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述的提取剂为体积分数60-95%的乙醇溶液或甲醇溶液；所述步骤（2）中，以大孔树脂为吸附剂，先以水或体积分数为10-15%的乙醇溶液或体积分数为10-15%的甲醇溶液为洗脱液；再以体积分数为80-90%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，收集体积分数为80-90%的乙醇溶液或甲醇溶液洗脱液，减压蒸馏，即得；或所述步骤（2）中，以聚酰胺为吸附剂，先以体积分数为10-25%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液；再以体积分数为90-95%的乙醇溶液或甲醇溶液为洗脱液，进行洗脱，收集2次的洗脱液，减压蒸馏，即得。

7.根据权利要求5所述的布渣叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，对步骤（2）所制得的提取物，采用乙酸乙酯进一步萃取，得到以芦丁计总黄酮的量为80-95wt%的布渣叶总黄酮提取物。

8.根据权利要求5所述的布渣叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述的大孔树脂为HPD100、HPD200、HPD300、HPD450、D101、D201、D301、AB-8、ZTC-5的其中一种。

9.权利要求1-8任一项所述的布渣叶总黄酮提取物在制备降血脂药物中的应用。

10.权利要求1-8任一项所述的布渣叶总黄酮提取物在制备防治冠心病、心脑动脉粥样硬化、脑梗死、脂肪肝、高血压或糖尿病药物中的应用。