CN101444599B

CN101444599B - 玉米须提取物及其制备方法和在制备治疗痛风药物中的应用

Info

Publication number: CN101444599B
Application number: CN200810051485A
Authority: CN
Inventors: 邱智东; 曲晓波; 隋殿军; 胡东华; 陈雪松; 董金香
Original assignee: Changchun University of Chinese Medicine
Current assignee: Changchun University of Chinese Medicine
Priority date: 2008-11-28
Filing date: 2008-11-28
Publication date: 2012-09-19
Anticipated expiration: 2028-11-28
Also published as: CN101444599A

Abstract

本发明一种玉米须提取物，取玉米须，除去杂质，剪成段约3-4cm，10～50倍量50-95％乙醇70-80℃回流提取3～4次，每次提取1～2小时，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，浓缩成稠膏，40℃-80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分；去干粉加水溶解，经大孔树脂柱分离，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次洗脱，得到分离物。回收个部分洗脱液，浓缩，40℃-80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分，即得。本发明还公开了玉米须子提取物在制备治疗痛风药物中的应用。

Description

玉米须提取物及其制备方法和在制备治疗痛风药物中的应用

技术领域

本发明提供一种玉米须提取物，同时还提供了其制备方法和在制备治疗痛风药物中的应用，属于中医药物制备技术领域。

背景技术

痛风病是体内嘌呤代谢紊乱引起的一类疾病，随着我国人民生活水平的提高、寿命的延长、饮食结构的改变(富含核蛋白的食物增多)、肥胖者的增加，以及对本病的重视程度加强等，痛风已不再是国人的罕见病，其患病率较15年前增长约15～30倍。痛风是一种由于血尿酸过高沉积在关节或其邻近组织所引起的特殊疾病，好发于中老年男性中，但是目前中老年女性和青年男性的发病率也有所上升。发病年龄多在50岁以上(63％)；在老年患者中，女性发病率高于男性，且发病率由60岁前的7％提高至60岁后的29％。

发明内容

本发明提供一种玉米须提取物，具有医药活性。

本发明其制备方法，简单易行、成本较低廉，适用于工业化生产。

本发明进一步公开了上述提取物在制备治疗痛风药物中的用途，具有显著疗效，无毒副作用等特点。

本发明提供的玉米须提取物，可以通过以下方法得到的：

取玉米须2～10g，除去杂质，剪成段约3-4cm，10～50倍量50-95％乙醇70-80℃回流提取3～4次，每次提取1～2小时，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，浓缩成稠膏，40℃-80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分；取干粉加水溶解，经大孔树脂柱分离，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次(梯度？)洗脱，得到分离物；回收个部分洗脱液，浓缩，40℃-80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细粉，即得。

本发明提取方法得到玉米须总黄酮，经过工艺验证试验表明提取率可达到3.0％，提取物中总黄酮含量以芦丁计不少于60％。

以下实验表明本发明药物对小鼠耳肿胀、镇痛等作用的影响

实验材料

1.动物昆明种小鼠，体质量(20±2)g；雄性大鼠，体重150～200g

2.仪器HF一300电子分析天平、TGL一16A台式高速冷冻离心机、SK-1快速混匀器、721紫外分光光度仪

3.药物玉米须总黄酮(YMXZHT)长春中医药大学中医药与生物工程研究中心；消炎痛，山西三晋药业有限公司；别嘌呤醇：广东彼迪药业有限公司生产；苯溴马隆，氢氯噻嗪：江苏昆山龙灯瑞迪制药有限公司。

4.试剂二甲苯，北京化工；酵母膏，北京奥博星生物技术有限责任公司；尿酸试剂盒，黄嘌呤氧化酶测试盒，尿素氮试剂盒，均为南京建成生物工程研究所产品。

实验方法

1、玉米须总黄酮对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响取雄性昆明种小鼠50只，称质量后随机分为空白组、阳性对照组(消炎痛)、YMXZHT高、中、低剂量组共5组。分别于每日早8时、晚8时灌胃给药，给药容量均为0.2ml/10g体量，连续给药3d。末次给药45min后，在右耳的前后两面均匀涂布二甲苯0.02ml/只，以左耳作对照，45min后将其脱颈处死，剪下左、右耳，然后用直径为7mm的打孔器分别在同一部位取下耳圆片，立即天平称质量，计算耳壳的肿胀度，公式：肿胀度(g)＝右耳的质量(g)一左耳的质量(g)。

2、玉米须总黄酮对小鼠的镇痛作用(扭体法)观察取健康昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分为空白组、阳性对照组(消炎痛)和和YMXZHT高、中、低剂量组共5组，每组12只。每日早晚8时各灌胃1次，连续给药3天，末次给药后1h每只小鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml。观察并记录注射醋酸后小鼠扭体潜伏期及20min内扭体(腹部内凹，躯干与后肢伸张、臀部高起)次数。

3、玉米须总黄酮对酵母膏致小鼠高尿酸血症模型血清尿酸(UA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、尿素氮(BUN)的影响取昆明种雄性小鼠70只，称重后随机分为空白组、模型组、阳性对照A组(别嘌呤醇)、阳性对照B组(苯溴马隆)、YMXZHT高、中、低剂量组共7组。除空白组外，其余各组以酵母30g·kg-1·d灌胃，连续1周，第6天、第7天阳性对照A组和B组分别给予别嘌醇(40mg/kg)和苯溴马隆(20mg/kg)灌胃，中药各剂量组从第5天开始予以中药灌胃，连续3天，第8天眼眶后静脉丛取血，测定小鼠血清UA、XOD和BUN值。4、玉米须总黄酮对大鼠利尿作用150～200g雄性大鼠预先使之适应代谢笼的生活环境1～2日后，用25ml·kg-1的38℃温水灌胃，2小时内收集的尿量达到所灌入量的40％以上的动物可用于利尿实验。将筛选出的50只大鼠依体重随机分为5组，每组10只。分组以及给药方法见表4。各组按1.0mg/kg灌服相应的药物，连续5天，每天一次，实验前8小时动物禁食不禁水。实验当天用38℃温水灌胃25ml·kg-1，每小时一次共两次。第二次给完水后30分钟给末次药物。与给药后收集0.5、1.0、2.0、4.0、8.0小时的尿量。

5、统计学方法实验结果以±表示，应用SPSS11.5统计分析软件对实验数据进行处理，各组间比较采用单因素方差分析。

实验结果

1、玉米须总黄酮抑制二甲苯致小鼠耳肿胀的结果见表1。玉米须总黄酮高剂量组明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，与空白组比较，有极显著性差异<0.01)，而中、低剂量组作用不明显。低、中、高剂量组药肿胀抑制率分别为12.01％、20.09％、40.17％，有随剂量增加而增强的趋势。

表1 YMXZHT对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(n＝10)

注：与空白组比较*P<0.05**P<0.01

2.玉米须总黄酮镇痛(扭体法)作用研究结果见表2。玉米须总黄酮高、中剂量组能明显减少醋酸致小鼠的扭体次数，与空白组比较，有显著性差异(P<0.05)，而低剂量组作用不显著。低、中、高剂量组均有延长扭体潜伏期的作用趋势，且有随剂量增加而作用增强的趋势。

表2 玉米须总黄酮对醋酸致痛小鼠潜伏期及扭体次数的影响(n＝12)

注：与空白组比较*P<0.05**P<0.01

3.玉米须总黄酮对酵母膏致小鼠高尿酸血症模型血清UA、XOD、BUN的影响结果见表3。模型组与空白组比较，UA、XOD、BUN明显升高，有显著性差异(P<0.01)，说明造模成功。阳性对照A组、阳性对照B组及玉米须总黄酮各剂量组血清UA值较模型组均降低，有显著差异(P<0.05或P<0.01)；但阳性对照A组(别嘌呤醇)和玉米须总黄酮高剂量组降低UA更明显，有极显著差异(P<0.01)。与模型组相比，阳性对照A组及玉米须总黄酮各剂量组均能降低XOD值，有显著差异(P<0.01)；而阳性对照B组作用不明显。与模型组相比，阳性对照B组及玉米须总黄酮各剂量组均能明显降低BUN值，有显著差(P<0.01)。

表3玉米须总黄酮对酵母膏致高尿酸血症

小鼠血清UA、XOD、BUN的影响

注：与空白组比较△△P<0.01；与模型组比较，*P<0.05**P<0.01。

4、玉米须总黄酮对大鼠利尿作用结果发现玉米须总黄酮大、中、小剂量组在给药1～4小时有明显的利尿作用。见表4。

与空白组比较*P<0.05**P<0.01***P<0.001

5、小结本实验证实玉米须总黄酮能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，有显著的抗炎作用，高剂量组效果好于对照组消炎痛组；能减少醋酸致小鼠扭体次数、延长潜伏期，有良好的镇痛效果；能够通过抑制黄嘌呤氧化酶而减少尿酸生成，且玉米须总黄酮高、中、低各剂量组效果均好于对照组苯溴马隆；能够降低尿素氮，改善肾功能，且玉米须总黄酮高、中、低各剂量组效果均好于对照组别嘌呤醇，且玉米须总黄酮高、中剂量组均有明显的利尿作用，且在试验过程中未见动物死亡。因此，本试验研究为玉米须总黄酮治疗痛风的有效性及安全性提供了有力的实验依据，但对于其抗炎、镇痛、降尿酸的机制，仍待进一步作深层次探讨。

具体实例

下列实施例旨在进一步举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明，再不背离本发明的精神和原则的前提下，对本发明所做的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。

实施例1

取玉米须3Kg，除去杂质，剪成段约3cm，10～50倍量50％乙醇70℃回流提取3次，每次提取1小时，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，浓缩成稠膏，55℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分；去干粉加水溶解，经大孔树脂柱分离，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次洗脱，得到分离物。回收个部分洗脱液，浓缩，70℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分，即得本发明产品。

实施例2

取玉米须6Kg，除去杂质，剪成段约4cm，50倍量95％乙醇80℃回流提取4次，每次提取2小时，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，浓缩成稠膏，80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分；去干粉加水溶解，经大孔树脂柱分离，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次洗脱，得到分离物。回收个部分洗脱液，浓缩，60℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分，即得本发明产品。

实施例3

滴丸的制备

取玉米须抗痛风活性提取物100g与3倍量聚乙二醇6000经混匀、溶化、滴制、冷却、吸干而制成滴丸。其他项目应符合中华人们共和国药典2005版滴丸项目的有关要求。

实施例4

片剂的制备

取玉米须抗痛风活性提取物1000g，要用淀粉500g，混合均匀，用适量乙醇制粒，经整粒机整粒，压片，每片0.25g，口服每次1-2片，每日两次。其他项目应符合中华人们共和国药典2005版片剂项目的有关要求。

实施例5

胶囊剂的制备

取玉米须抗痛风活性提取物500g，要用淀粉500g，混合均匀，装入0#胶囊，每粒0.30g，口服每次1-2粒，每日两次。其他项目应符合中华人们共和国药典2005版胶囊项目的有关要求。

实施例6

颗粒剂的制备

取玉米须抗痛风活性提取物100g，要用淀粉1000g，糖粉400g，混合均匀，用适量乙醇制粒、干燥、整粒、分装即得。口服，一次5g，每日两次。其他项目应符合中华人们共和国药典2005版颗粒剂项目的有关要求。

Claims

1.一种玉米须提取物在制备治疗痛风药物中的应用，所述玉米须提取物由以下方法制得：取玉米须，除去杂质，剪成段约3-4cm，10～50倍量50-95％乙醇70-80℃回流提取3～4次，每次提取1～2小时，过滤，合并滤液，减压回收溶剂，浓缩成稠膏，40℃-80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细分；取干粉加水溶解，经大孔树脂柱分离，以水、10％、30％、50％、70％、90％的乙醇依次洗脱，得到分离物；回收各部分洗脱液，浓缩，40℃-80℃，0.05Mpa条件下减压干燥，粉碎成细粉，即得。