CN109865033A - 一种外敷药膏及其在修复糖尿病足创伤中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药膏技术领域，尤其是一种外敷药膏及其在修复糖尿病足创伤中的应用。该外敷药膏包括间充质干细胞外泌体和软膏组合物；其中所述软膏组合物包括芦荟汁、儿茶、牛白藤和薄荷。这种修复糖尿病足创伤的外敷药膏中所含的间充质干细胞外泌体具有抑制细胞凋亡、减轻炎症反应、促进血管生成、抑制纤维化、提高组织修复潜力等重要生物学功能，能够直接用于修复皮肤表面的伤口。此外该外敷药膏中所含有的中药成分如芦荟汁、儿茶、牛白藤和薄荷，这些成分具有杀菌、抗炎、消肿和止痛等功效，能够有效的降低患者的病痛感，经过临床试验，能够有效的修复足创伤，并且治疗周期短。

Description

一种外敷药膏及其在修复糖尿病足创伤中的应用

技术领域

本发明涉及药膏技术领域，尤其是一种外敷药膏及其在修复糖尿病足创伤中的应用。

背景技术

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。

糖尿病足是糖尿病的严重并发症之一，其发病机理是由于糖尿病患者由于长期受到高血糖的影响，下肢血管病变造成血管闭塞和供血障碍导致足部组织得不到足够的营养物质从而出现水肿、发黑、溃烂和坏死。此外，下肢供血不足造成足部神经细胞缺血进而引起神经损伤，这使得患者在行走时由于失去知觉而使足部受力不均，足部受力过多的地方会形成老茧且容易开裂并被细菌感染，进而导致溃烂，严重时患者会面临截肢的危险。由于糖尿病患者体内血糖高，容易在伤口局部形成高糖环境，容易引发细菌感染，伤口难以愈合，目前用于外科治疗糖尿病足的药物一般为抗感染的抗生素药物，其仅能对患者进行长期的消毒治疗，然而长时间施用抗生素会使细菌产生一定的耐药性，不但不能产生足够的疗效，而且还会导致足部创面面积的增加，延长治疗的周期，使患者长时间饱受疼痛的困扰，身心俱损。

发明内容

为了克服现有的糖尿病足创伤难以愈合的技术问题，本发明提供了一种外敷药膏及其在修复糖尿病足创伤中的应用。本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种外敷药膏，其特征在于，包括间充质干细胞外泌体和软膏组合物；其中所述软膏组合物包括芦荟汁、儿茶、牛白藤和薄荷；优选地，以所述外敷药膏的重量份计，所述间充质干细胞外泌体为2-5份，所述软膏组合物为20-40份。

进一步地，以所述软膏组合物的重量份数计：15-25份芦荟汁、2-6份儿茶、2-7份牛白藤、1-3份薄荷。软膏组合物中的芦荟汁含有多种对皮肤有益的功效成分，如芦荟素、创伤激素和聚糖肽甘露(Ke-2)等，其具有抗菌消炎、止血消肿和促进伤口愈合复原的作用，儿茶具有活血止痛，止血生肌的功效，牛白藤用于治疗皮肤瘙痒，薄荷所含有的功效成分为薄荷醇，当应用于皮肤伤口处时，其会作刺激人体神经末梢以产生清凉和止痛止痒的作用，以上四味中药的组合施用可以有效地加快糖尿病足部伤口的愈合，并防止细菌病毒的感染，从而明显地降低创面加大的可能性。

进一步地，所述软膏组合物还包括胶原蛋白和/或维生素；优选地，所述维生素为B族维生素。胶原蛋白是一种高分子蛋白质，皮肤成分中就有70％是由胶原蛋白组成，因此它是维持皮肤形态和结构的主要成分，也是修复受损皮肤组织的重要原料物质。此外，B族维生素可加快人体细胞的新陈代谢，促进新生皮肤的生成，有利于伤口愈合。

进一步地，所述软膏组合物还包括软膏剂、保湿剂和柔润剂中的一种或几种。

进一步地，所述软膏组合物还包括软膏剂、保湿剂和柔润剂；优选地，所述软膏剂为甘油，所述保湿剂选自甘油、丙二醇和山梨醇中的一种或多种，所述柔润剂选自油醇、胆甾醇、氢化棕榈油一种或多种。

进一步地，所述软膏组合物还包括胶原蛋白、维生素、软膏剂、保湿剂和柔润剂。

进一步地，以所述软膏组合物的重量份数计：15-25份芦荟汁、2-6份儿茶、2-7份牛白藤、1-3份薄荷、2-5份胶原蛋白、1-3份维生素、10-20份软膏剂、10-12份保湿剂、4-6份柔润剂。

优选地，所述间充质干细胞外泌体为人脐带间充质干细胞外泌体。

本发明软膏组合物的所有组分，除了芦荟汁外，其它组分为粉末形式，粉末越细越好。

本发明还提供一种所述外敷药膏的制备方法，该方法将所述外敷药膏的各成分混合均匀即可。

优选地，所述外敷药膏通过以下步骤制成：

a.将以所述外敷药膏的重量份计20-40份软膏组合物放置在搅拌机中，加入适量水(例如60-80份水)进行搅拌，搅拌时间为2-4小时，搅拌完成之后得到膏状物体；优选地，每4-6分钟改变一次搅拌方向；

b.将以所述外敷药膏的重量份计2-5份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在40-50℃的温度下搅拌，搅拌时间为1-2小时；优选地，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

本发明的有益效果是，该外敷药膏中的主要成分间充质干细胞外泌体，例如人脐带间充质干细胞外泌体由一种由细胞分泌的直径为30～100nm的小囊泡，内含来源于细胞相关的蛋白质与核苷酸等生物活性分子，其可直接进入靶细胞，通过向靶细胞转运特异性蛋白、脂质及RNA等生物活性物质，来诱导靶细胞的增殖、迁移、血管化等生物学变化，因此其具有抑制细胞凋亡、减轻炎症反应、促进血管生成、抑制纤维化、提高组织修复潜力等重要生物学功能，能够直接用于修复皮肤表面的伤口。此外该外敷药膏中所含有的中药成分如芦荟汁、儿茶、牛白藤和薄荷，这些成分具有杀菌、抗炎、消肿和止痛等功效，能够有效的降低患者的病痛感，经过临床试验，能够有效的修复足创伤，并且治疗周期短。

具体实施方式

下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解,本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明的保护范围。

在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。若无特别指明，实施例采用的方法为本领域常用技术手段。

实施例1

1.人脐带间充质干细胞外泌体的制备

无菌取脐带剪成3cm左右小段，抽弃血管，取血管周物质剪碎后，先使用1‰的IV型胶原酶在消化2h，然后2000r/min离心10min，取下层沉淀再用0.25％胰蛋白酶-PBS在37℃继续消化25min，然后2000r/min离心10min，取细胞沉淀用0.25％胰蛋白酶液消化后，再800r/min离心10min，取细胞沉淀以1×10⁶个/ml的密度悬浮于培养基中，培养基成分为商品化的市购间充质干细胞无血清培养基。置37℃、100％湿度、5％CO₂和黑暗环境下培养，每3天换液1次，经2天可见成纤维状细胞在瓶底生长，约10天后能达到80％汇合时用0.25％胰蛋白酶-PBS消化后，再以细胞密度5×10⁴个/cm²传代培养。F4代的细胞用于收获外泌体。

2.外敷药膏的制备：

a.将按重量份数计20份软膏组合物放置在搅拌机中进行搅拌，其中软膏组合物的成分配比按照重量份数计分别为15份芦荟汁、2份儿茶粉末、2份牛白藤粉末、1份薄荷粉末、2份胶原蛋白、1份维生素B、10份软膏剂、10份保湿剂、4份柔润剂，60份水；保湿剂为甘油，柔润剂为油醇，软膏剂为甘油。该软膏组合物搅拌时间为2小时，每4分钟改变一次搅拌方向，搅拌完成之后得到膏状物体；

b.将按重量份数计2份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在40℃的温度下搅拌，搅拌时间为1小时，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

实施例2：

1.人脐带间充质干细胞外泌体的制备

人脐带间充质干细胞外泌体由与实施例1相同的方法制备。

2.外敷药膏的制备

a.将按重量份数计40份软膏组合物放置在搅拌机中进行搅拌，其中软膏组合物的配比按重量份数计分别为25份芦荟汁、6份儿茶粉末、7份牛白藤粉末、3份薄荷粉末、5份胶原蛋白、3份维生素B、20份软膏剂、12份保湿剂、6份柔润剂，65份水；保湿剂为甘油和丙二醇的混合物，且甘油和丙二醇的重量比为5:1，柔润剂为油醇和胆甾醇的混合物，且油醇和胆甾醇的重量比为3:5；软膏剂为甘油。该软膏组合物搅拌时间为4小时，每6分钟改变一次搅拌方向，搅拌完成之后得到膏状物体；

b.将按重量份数计5份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在50℃的温度下搅拌，搅拌时间为2小时，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

实施例3：

1.人脐带间充质干细胞外泌体的制备

人脐带间充质干细胞外泌体由与实施例1相同的方法制备。

2.外敷药膏的制备

a.将按重量份数计30份软膏组合物放置在搅拌机中进行搅拌，其中软膏组合物的配比按重量份数计分别为20份芦荟汁、4份儿茶粉末、6份牛白藤粉末、2份薄荷粉末、4份胶原蛋白、2份维生素B、15份软膏剂、11份保湿剂、5份柔润剂，70份水；保湿剂为甘油、丙二醇和山梨醇的混合物，且甘油、丙二醇和山梨醇的重量比为5:1:2；柔润剂为油醇、胆甾醇、氢化棕榈油的混合物，且油醇、胆甾醇、氢化棕榈油的重量比为3:5:8；软膏剂为甘油。该软膏组合物搅拌时间为3小时，每5分钟改变一次搅拌方向，搅拌完成之后得到膏状物体；

b.将按重量份数计3份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在45℃的温度下搅拌，搅拌时间为1.5小时，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

实施例4

1.人脐带间充质干细胞外泌体的制备

人脐带间充质干细胞外泌体由与实施例1相同的方法制备。

2.外敷药膏的制备

a.将按重量份数计20份软膏组合物放置在搅拌机中进行搅拌，其中软膏组合物的配比按重量份数计分别为25份芦荟汁、2份儿茶粉末、2份牛白藤粉末、1份薄荷粉末、75份水。该软膏组合物搅拌时间为3小时，每5分钟改变一次搅拌方向，搅拌完成之后得到膏状物体；

b.将按重量份数计5份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在45℃的温度下搅拌，搅拌时间为1.5小时，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

实施例5

1.人脐带间充质干细胞外泌体的制备

人脐带间充质干细胞外泌体由与实施例1相同的方法制备。

2.外敷药膏的制备

a.将按重量份数计40份软膏组合物放置在搅拌机中进行搅拌，其中软膏组合物的配比按重量份数计分别为15份芦荟汁、6份儿茶粉末、7份牛白藤粉末、3份薄荷粉末、80份水。该软膏组合物搅拌时间为3小时，每5分钟改变一次搅拌方向，搅拌完成之后得到膏状物体；

b.将按重量份数计2份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在45℃的温度下搅拌，搅拌时间为1.5小时，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

验证外敷药膏的治疗效果

治疗过程：随机选取60位糖尿病足患者作为实验对象，并随机将这60位实验对象每10人一组，共分为6组，前5组作为实验组分别单独涂抹实施例1-5中制得的外敷药膏，最后1组作为对照组单独涂抹生理盐水，每天观察各实验对象糖尿病足创口情况，持续30天，记录痊愈的时间(平均值)，患者痊愈后继续保持观察，记录每组出现复发的人数，结果见表1。可见，与对照例相比，本发明实施例1-5制得的外敷药膏能够加速糖尿病足伤口痊愈的速度，并有效的防止复发。

表1治疗后糖尿病足伤口痊愈速度统计表(n＝10/组)

以上说明对本发明而言只是说明性的，而非限制性的，本领域普通技术人员理解，在不脱离所附权利要求所限定的精神和范围的情况下，可做出许多修改、变化或等效，但都将落入本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种外敷药膏，其特征在于，包括间充质干细胞外泌体和软膏组合物；其中所述软膏组合物包括芦荟汁、儿茶、牛白藤和薄荷；优选地，以所述外敷药膏的重量份计，所述间充质干细胞外泌体为2-5份，所述软膏组合物为20-40份。

2.根据权利要求1所述的外敷药膏，其中，以所述软膏组合物的重量份数计：15-25份芦荟汁、2-6份儿茶、2-7份牛白藤、1-3份薄荷。

3.根据权利要求1所述的外敷药膏，其中，所述软膏组合物还包括胶原蛋白和/或维生素；优选地，所述维生素为B族维生素。

4.根据权利要求3所述的外敷药膏，其中，所述软膏组合物还包括软膏剂、保湿剂和柔润剂中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的外敷药膏，其中，所述软膏组合物还包括软膏剂、保湿剂和柔润剂；优选地，所述软膏剂为甘油，所述保湿剂选自甘油、丙二醇和山梨醇中的一种或多种，所述柔润剂选自油醇、胆甾醇、氢化棕榈油一种或多种。

6.根据权利要求1所述的外敷药膏，其中，所述软膏组合物还包括胶原蛋白、维生素、软膏剂、保湿剂和柔润剂。

7.根据权利要求6所述的外敷药膏，其中，以所述软膏组合物的重量份数计：15-25份芦荟汁、2-6份儿茶、2-7份牛白藤、1-3份薄荷、2-5份胶原蛋白、1-3份维生素、10-20份软膏剂、10-12份保湿剂、4-6份柔润剂。

8.根据权利要求1所述的外敷药膏，其中，所述间充质干细胞外泌体为人脐带间充质干细胞外泌体。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的外敷药膏，其中，所述外敷药膏通过以下步骤制成：

a.将以所述外敷药膏的重量份计20-40份软膏组合物放置在搅拌机中，加入适量水进行搅拌，搅拌时间为2-4小时，搅拌完成之后得到膏状物体；优选地，每4-6分钟改变一次搅拌方向；

b.将以所述外敷药膏的重量份计2-5份人脐带间充质干细胞外泌体注入到步骤a中制成的所述膏状物体中，并且在40-50℃的温度下搅拌，搅拌时间为1-2小时；优选地，搅拌完成之后，放置在无菌室内自然冷却。

10.权利要求1-9任一项所述的外敷药膏在修复糖尿病足创伤中的应用。