CN104740613A - 脂联素在制备治疗骨折的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了脂联素在制备治疗骨折的药物中的应用。经试验证实，脂联素能够显著加快骨痂形成、增强骨痂强度、提高骨折愈合速度、缩短骨愈合的时间，从而能够促进骨愈合，对粉碎性骨折、线性骨折和骨缺损等均有良好的治疗效果，特别是对愈合缓慢的股骨骨折有明显的促进作用，为骨折的临床治疗提供了新的方法。
Description
技术领域
本发明涉及脂联素在制药中的新用途，更具体地，涉及脂联素在制备治疗骨折的药物中的应用。
背景技术
四肢伤在战伤中所占的比例非常高，其中骨折在战伤所致四肢伤中约占60%。在平时的工农业生产、交通运输、体育运动和军事训练中，骨折也是常见的意外事故。在各城市创伤中心，约45.5%的住院患者存在骨折，其中，股骨干骨折是最常见的四肢骨折损伤。
骨折愈合时间视部位不同而有所差异，通常下肢骨折的修复时间相对较长。股骨干骨折一般需要8～12周，而股骨颈骨折恢复时间最长，需要12～24周。枪击伤至股骨骨折的愈合时间与创伤骨折所需时间类似。如果能够缩短骨折修复时间，增加修复骨痂的强度，对于尽快恢复和改善生活质量有着重要作用。
随着生物技术的发展，临床及基础研究中应用细胞因子治疗骨病已取得了可喜的效果。脂联素是一种脂源性细胞因子，主要由脂肪组织分泌，体内含量丰富，血清中的浓度高达5～30μg/L，约占总血清蛋白的0.01%以上。人类脂联素基因位于3g27，长约17kb，包含3个外显子和2个内含子。脂联素由244个氨基酸组成，一级序列分析显示其包含4个功能区：前18个氨基酸的信号肽、23个氨基酸组成的氨基端非螺旋功能区、一段22个胶原重复序列和137个氨基酸组成的羧基端球形结构域。全长型的脂联素和脂联素的水解产物-球形结构(gACRP30)都具有生物活性。2004年Berner等最先在人类的股骨和胫骨成骨细胞中发现了脂联素及其受体AdipoRl/2的表达，在体外重组脂联素可促进小鼠成骨细胞的增殖，初步证实了脂联素参与骨的代谢（参见Berner HS等，Adiponectin and its receptors are expressed in bone-forming cells,Bone,2004Oct;35(4):842-9）。进一步研究表明，重组脂联素分别通过AdipoR/JNK和AdipoR/p38促进成骨细胞的增殖和分化，且具有时间和剂量的依赖性。
但是，虽然现有技术已经确定了脂联素能够影响骨代谢，但关于脂联素对创伤骨折修复、骨痂强度等的影响，其最佳给药剂量、给药方式等尚没有相关研究，这对本领域技术人员来说是未知的。
发明内容
本发明的目的是提供脂联素的医药新用途。
具体地说，本发明涉及脂联素在制备治疗骨折的药物中的应用。
所述骨折包括线性骨折、粉碎性骨折和骨缺损。特别地，所述骨折为四肢骨折，进一步地，所述骨折为股骨骨折。
所述药物是指含有脂联素的骨渣、含有脂联素的附着制剂、粉剂或注射剂等，所述含有脂联素的附着制剂优选为含有脂联素的医用明胶海绵。
本发明中所述药物的给药方式包括在骨间植入含有脂联素的骨渣、用含有脂联素的附着制剂（医用明胶海绵等）填塞、粉剂直接涂敷和注射给药中的至少一种。
所述注射给药包括在骨折断端局部注射给药、腹腔注射给药、皮下注射给药、肌肉注射给药及静脉注射给药中的至少一种。
特别地，在局部注射给药时，以每次0.05～1mg/kg体重脂联素的剂量给药，每月给药1～4次到每日给药1～3次的频次均可。在皮下注射、腹腔注射、肌肉注射或静脉注射等注射给药时，以每次0.2～20mg/kg体重脂联素的剂量给药，每月给药1～4次到每日给药1～3次的频次均可。优选为以每次1～4mg/kg体重脂联素的剂量给药，每日给药1次。
此外，本发明还提供一种用于治疗骨折的药物组合物，其含有100μg～1000mg脂联素和药学上可接受的辅料，优选的含有2.5mg～50mg脂联素和药学上可接受的辅料。
本发明首次将脂联素应用于促进骨愈合以及治疗骨折中。经试验证实，脂联素能够显著加快骨痂形成、增强骨痂强度、提高骨折愈合速度、缩短骨愈合的时间，对粉碎性骨折、线性骨折和骨缺损等均有良好的治疗效果，特别是对愈合缓慢的股骨骨折有明显的促进愈合作用，为骨折的临床治疗提供了新的方法。
附图说明
图1是表示流式细胞仪测定脂联素对成骨细胞增殖影响的图，其中，*表示有显著差异。
图2是表示[3H]游离胸苷摄入法测定脂联素对大鼠原代成骨细胞、人成骨细胞和大鼠破骨细胞影响的图，其中，A为对大鼠原代成骨细胞以不同浓度脂联素干预24h的结果的图；B为对大鼠原代成骨细胞以不同浓度脂联素干预8h、24h和48h的结果的图；C为对人成骨细胞以不同浓度脂联素干预24h和48h的结果的图；D为对大鼠破骨细胞以不同浓度脂联素干预24h的结果的图。
图3是表示脂联素尾静脉注射对小鼠骨结构影响的图，其中，**表示有显著差异。
图4是表示骨断端局部注射脂联素治疗骨折的照片。
图5表示脂联素局部注射给药的骨生物力学-最大载荷的图。
图6表示脂联素腹腔注射给药的骨生物力学-最大载荷的图。
图7表示脂联素皮下注射给药的骨生物力学-最大载荷的图。
图8表示脂联素静脉注射给药的骨生物力学-最大载荷的图。
图9表示含脂联素的骨渣填塞的骨生物力学-最大载荷的图。
图10表示含脂联素的明胶海绵填塞的骨生物力学-最大载荷的图。
具体实施方式
本发明提供了脂联素在制备治疗骨折的药物中的应用。
所述骨折包括线性骨折、粉碎性骨折和骨缺损。特别地，所述骨折为四肢骨折，进一步地，所述骨折为股骨骨折。
所述药物是指含有脂联素的骨渣、含有脂联素的附着制剂、粉剂或注射剂等，其中，含有脂联素的附着制剂优选含有脂联素的医用明胶海绵。
具体地说，所述含有脂联素的骨渣，是将获得的小鼠同种异体骨表面软组织、骨膜和骨端软骨彻底剔除，根据需要制成大于1mm的移植骨材料，使用无菌盐水进行加压冲洗尽量去除骨髓组织；在根据不同给药组配制成的1～5μg/g浓度的脂联素溶液中进行无菌浸泡，然后进行无菌包装，采用逐渐降温法，先将移植骨放人-4℃的冷库中，12h后再逐渐降至-80℃保存。将新制成的深冻骨放入干燥机内，使骨组织内剩余水分降低到5%以下，然后进行无菌包装，置于无菌真空容器中常温保存。所有移植骨渣均采用射线照射消毒处理后无菌封装备用。
所述含有脂联素的医用明胶海绵，是将医用吸收性明胶海绵等附着制剂剪成1.5mm2小块，脂联素溶于生理盐水中后与医用明胶海绵充分混合（复合材料），制成含脂联素的附着制剂，环氧乙烷熏蒸消毒，于4℃保存备用。
所述注射剂，是将购买的脂联素粉末制剂（购自Sino Biological公司，纯度大于97%），以无菌水或其他消毒溶剂（例如生理盐水、葡萄糖等）溶解制备成0.002～0.4mg/L的脂联素注射液。
本发明中，所述药物的给药方式包括在骨间植入含有脂联素的骨渣、用含有脂联素的附着制剂填塞、粉剂直接涂敷和注射给药中的至少一种。
所述注射给药包括在骨折断端局部注射给药、腹腔注射给药、皮下注射给药、肌肉注射给药及静脉注射给药中的至少一种，优选为在骨折断端局部注射给药。
此外，在局部注射给药时，以每次0.05～1mg/kg体重脂联素的剂量给药，每月给药1～4次到每日给药1～3次的频次均可。在皮下注射、腹腔注射、肌肉注射或静脉注射等注射给药时，以每次0.2～200mg/kg体重脂联素的剂量给药，每月给药1～4次到每日给药1～3次的频次均可。优选为以每次1～4mg/kg体重脂联素的剂量给药，每日给药1次。
下面结合实施例进一步说明本发明，本发明中所使用的脂联素购自北京盛世中方公司，另外，除非特别说明，本发明所用到的试剂、培养基均为市售商品。
实施例1细胞干预实验
大鼠成骨细胞的提取：外科手术取大鼠的髂骨松质骨并剪成2mm×1mm×1mm大小的碎片，用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗摇荡3次，加入1g/L IV型胶原酶于37℃下振摇消化，待松质骨变白并呈蜂窝状时，加入含体积分数为0.2胎牛血清的无酚红MEM终止消化，用含体积分数为0.1胎牛血清的MEM洗涤3次，待洗液中不含细胞时，将骨片贴于25cm2培养瓶壁，加入含体积分数为0.15胎牛血清的MEM，其中含50mg/L抗坏血酸、青霉索50U/mL、庆大霉素50mg/L，在37℃、体积分数为0.05的CO2条件下培养。两天后换液，以后每3天换液1次，培养约15天后，可见有细胞游出，约25天后达汇片，用2.5g/L胰酶-EDTA（Sigma公司）消化液消化，再接种到25cm2培养瓶中，细胞数为5×105个/瓶。
大鼠破骨细胞的提取：收集大鼠骨髓，细胞培养6天后，进行体外骨髓破骨细胞样细胞的培养，以抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色鉴定（抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性且细胞核≥3个的细胞认定为破骨细胞样细胞）。
细胞干预试验：将上述提取到的大鼠成骨细胞培养于25cm2培养瓶中，在含体积分数为0.1胎牛血清的MEM培养液（其中含50mg/L抗坏血酸、青霉索50U/mL、庆大霉素50mg/L）中培养2天，然后更换含体积分数为0.01胎牛血清的MEM培养液（其中含50mg/L抗坏血酸、青霉索50U/mL、庆大霉素50mg/L）培养4天，然后用含2.5g/L牛血清白蛋白（Sigma公司）的无血清MEM培养2天，分别用0.003、0.03、0.3、1、3、5、10、30mg/L脂联素干预24h，另用10、30mg/L脂联素干预8、24、48h。
此外，使用上述同样的方法，对人成骨细胞（购自ATCC公司），用5、10、30mg/L脂联素干预24h、48h；对上述提取到的大鼠破骨细胞用0.1、1、5、10、30mg/L脂联素干预24h。
然后用流式细胞仪测定细胞增殖量，用[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数，具体方法如下。
流式细胞仪测定大鼠成骨细胞的增殖量：
1）将未经脂联素干预的对照组细胞和各浓度的脂联素干预组细胞按0.5×105～2×105个/皿的接种量接种于60mm培养板，80%汇合后转染。2）24小时后在新鲜培养液中加入青链霉素（1%浓度，50U/ml的青霉素，50ug/ml的链霉素）进行培养。3）48～72小时后用胰酶消化收集细胞，用PBS洗涤两遍，弃上清，加入1ml70%预冷乙醇中，吹打均匀，在4℃下固定12小时以上。4）用PBS洗涤并除去乙醇，在1000rpm下洗涤两遍，每遍5min。5）用0.5ml PBS重悬细胞，加入PI和RNaseA至终浓度均为50μg/ml，在37℃下温浴30min。6）用流式细胞仪测定周期。
其中，PI：碘化丙啶，以PBS配成浓度为1mg/ml，并于4℃下保存；RNaseA：10mg/ml。
结果如图1所示。
[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数：
1）用不含血清的MEM培养液洗涤两次对数生长期（培养3天）的上述大鼠成骨细胞、人成骨细胞（购自ATCC公司）和大鼠破骨细胞，每次250g，离心10分钟。2）用台盼蓝（Trypan blue，1%）染色法计数细胞并确定细胞的活力，用10%小牛血清的MEM培养液悬浮细胞至1×105/ml，制得细胞悬液。3）在96孔细胞培养板中每孔加0.1ml倍比稀释的标准IL-2，每个稀释度三个复孔，标准IL-2从40IU/ml稀释到0.019IU/ml（8～10个稀释度），阴性对照孔不加IL-2。4）每孔加0.1ml细胞悬液，在37℃、5%CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养18～24小时。每孔加10μl（0.5μCi或1.85×104Bq）[3H]脱氧胸苷（[3H]TdR），继续培养4小时。5）用多头细胞收集器将细胞收集到玻璃纤维滤纸上，用3%醋酸水溶液洗涤3次，洗去游离的[3H]TdR。将滤纸置液体闪烁瓶中，加入5ml闪烁液。在液体闪烁仪上计数细胞摄入的同位素活性（每分钟放射性计数，cpm），根据仪器效率换算成dpm（每分钟衰变数）。6）比较同样dpm处的不同稀释倍数，确定待测样品的相应浓度。
各组细胞的浓度比较结果如图2所示。其中，图2A为对大鼠原代成骨细胞以不同浓度脂联素干预24h的结果的图；图2B为对大鼠成骨细胞以不同浓度脂联素干预8h、24h和48h的结果的图；图2C为对人成骨细胞以不同浓度脂联素干预24h和48h的结果的图；图2D为对大鼠破骨细胞以不同浓度脂联素干预24h的结果的图。*表示与对照比较P<0.05，**表示与对照比较P<0.01。
从图2A中可以看出：不同浓度脂联素注射24h后对原代大鼠成骨细胞[3H]游离胸苷的影响如下，自3μg/ml开始大鼠成骨细胞[3H]游离胸苷水平明显增加，到超生理剂量的30μg/ml时，游离胸苷水平较对照组增加了178%。即脂联素可促进大鼠成骨细胞的DNA合成和细胞增殖，且其促进作用随剂量增加而增强。
从图2B中可以看出：不同浓度脂联素干预8h、24h和48h后对原代大鼠成骨细胞[3H]游离胸苷的影响如下，脂联素促进大鼠成骨细胞的DNA合成和细胞增殖的作用可持续至给药后48h。
从图2C中可以看出：不同浓度脂联素干预24h和48h后对人成骨细胞，[3H]游离胸苷的影响如下，脂联素促进人成骨细胞的DNA合成和细胞增殖的作用可持续至给药后48h，且对人成骨细胞48h的作用强于对大鼠成骨细胞的影响。
从图2D中可以看出：不同浓度脂联素对大鼠破骨细胞活性的影响如下，脂联素可抑制大鼠破骨细胞的活性，且其作用随剂量增加而增强。
成骨细胞数目随脂联素浓度增加而增高，甚至当脂联素浓度增加至30μg/ml时，细胞数目增加了100%。
结论：成骨细胞数目和DNA合成随脂联素浓度增加而增高，作用时间超过48h。
实施例2普通动物干预实验
2μg/g脂联素尾静脉注射普通C57小鼠（雄性，4周龄，20-25g，购自解放军总医院动物房）4周、8周、12周，不同时间段每组6只，用微型CT（MicroCT）测骨皮质厚度、骨松质含量，结果显示脂联素有改善骨结构的作用。结果如图3所示。
由图3A可以看出，2μg/g脂联素注射4周、8周、12周后，小鼠骨松质容量均高于对照组，8周和12周的差异显著，8周骨松质含量达峰。
由图3B可以看出，2μg/g脂联素注射4周、8周、12周后，小鼠骨皮质厚度均高于对照组，8周和12周的差异显著，8周骨皮质厚度达峰。
实施例3线性骨折动物的脂联素干预
股骨线性骨折模型：将C57小鼠（雄性，4周龄，20-25g，购自解放军总医院动物房）随机分组，每组6只，对小鼠麻醉去毛，自股骨下端行纵型切口，暴露股骨下端，穿入1ml注射器针头，于股四头肌肌间隙进入，暴露股骨，用剪刀剪断股骨，形成线性骨折，缝合创面。
脂联素局部注射：分别在上述股骨线性骨折小鼠模型的左侧骨断端注射含10μg、20μg、50μg脂联素的生理盐水1～1.5ml，作为实验组。右侧骨断端不注射脂联素，作为对照组，对照组注射等量的生理盐水。另取一组给药骨形成蛋白作为骨形成蛋白组。观察动物的呼吸、循环稳定后，小心放置于饲养笼内，标记实验分组及时间于标签上，同等条件下单笼常规饲养4周、8周、12周后，处死小鼠并取出股骨，股骨照片如图4所示。另外，局部注射给药的骨生物力学-最大载荷如表1及图5所示。
表1
| 局部注射给药的最大载荷（N） | |
| 对照组 | 8.1 |
| 骨形成蛋白组 | 11.8* |
| 脂联素10μg组 | 10.0 |
| 脂联素20μg组 | 12.3* |
| 脂联素50μg组 | 15.1**△ |
*：与对照组存在统计学差异（P<0.05）；**与对照组存在统计学差异（P<0.01）；
△：与骨形成蛋白组存在统计学差异（P<0.05）
从图4可以看出，饲养2周后，对照组（A）、脂联素局部注射20μg组（B）和脂联素局部注射50μg组（C）的骨痂相比较，脂联素局部注射组（B和C）的骨痂形成明显优于对照组（A），且其作用随剂量增加而增大。脂联素局部注射50μg组（D）与对照组（E）的MicroCT相比，脂联素局部注射组（D）的骨折愈合速度明显优于对照组（E）。由表1及图5可以看出，各药物干预组均强于对照组，且存在显著差异；脂联素腹腔注射的骨生物力学强度随剂量的增加而增加，脂联素20μg组与骨形成蛋白组相当；脂联素50μg组优于脂联素20μg组和骨形成蛋白组。
脂联素腹腔注射：分别对上述股骨线性骨折小鼠模型使用10μg、20μg、50μg脂联素的生理盐水1～1.5ml腹腔注射给药一次。作为对照组，注射等量的生理盐水。另取一组给药骨形成蛋白作为骨形成蛋白组。观察动物的呼吸、循环稳定后，小心放置于饲养笼内，标记实验分组及时间于标签上，同等条件下单笼常规饲养4周、8周、12周后，处死并取出股骨。腹腔注射给药的骨生物力学-最大载荷如表2及图6所示。
表2
| 腹腔注射给药的最大载荷（N） | |
| 对照组 | 8.1 |
| 骨形成蛋白组 | 12* |
| 脂联素10μg组 | 9.8 |
| 脂联素20μg组 | 11.8* |
| 脂联素50μg组 | 14.9**△ |
*：与对照组存在统计学差异（P<0.05）；**与对照组存在统计学差异（P<0.01）；
△：与骨形成蛋白组存在统计学差异（P<0.05）
由表2及图6可以看出，各药物干预组均强于对照组，且存在显著差异；脂联素腹腔注射的骨生物力学强度随剂量的增加而增加，脂联素20μg组与骨形成蛋白组相当；脂联素50μg组优于20μg组和骨形成蛋白组。
脂联素皮下注射：分别对上述股骨线性骨折小鼠模型使用10μg、20μg、50μg脂联素的生理盐水1～1.5ml皮下注射给药一次。作为对照组，注射等量的生理盐水。另取一组给药骨形成蛋白作为骨形成蛋白组。观察动物的呼吸、循环稳定后，小心放置于饲养笼内，标记实验分组及时间于标签上，同等条件下单笼常规饲养4周、8周、12周后，处死并取出股骨。皮下注射给药的骨生物力学-最大载荷如表3及图7所示。
表3
| 皮下注射给药的最大载荷（N） | |
| 对照组 | 8.1 |
| 骨形成蛋白组 | 10.6* |
| 脂联素10μg组 | 9.5* |
| 脂联素20μg组 | 11.1* |
| 脂联素50μg组 | 14.5**△ |
*：与对照组存在统计学差异（P<0.05）；**与对照组存在统计学差异（P<0.01）；
△：与骨形成蛋白组存在统计学差异（P<0.05）
由表3及图7可以看出，各药物干预组均强于对照组，且存在显著差异；脂联素皮下注射的骨生物力学强度随剂量的增加而增加，脂联素20μg组与骨形成蛋白组相当；脂联素50μg组优于20μg组和骨形成蛋白组。
脂联素静脉注射：分别对上述股骨线性骨折小鼠模型使用10μg、20μg、50μg脂联素的生理盐水0.5ml尾静脉注射给药一次。作为对照组，注射等量的生理盐水。另取一组给药骨形成蛋白作为骨形成蛋白组。观察动物的呼吸、循环稳定后，小心放置于饲养笼内，标记实验分组及时间于标签上，同等条件下单笼常规饲养4周、8周、12周后，处死并取出股骨。静脉注射给药的骨生物力学-最大载荷如表4及图8所示。
表4
| 静脉注射给药的最大载荷（N） | |
| 对照组 | 8.1 |
| 骨形成蛋白组 | 10.3* |
| 脂联素10μg组 | 9.3 |
| 脂联素20μg组 | 11* |
| 脂联素50μg组 | 14.3**△ |
*：与对照组存在统计学差异（P<0.05）；**与对照组存在统计学差异（P<0.01）；
△：与骨形成蛋白组存在统计学差异（P<0.05）
由表4及图8可以看出，各药物干预组均强于对照组，且存在显著差异；脂联素静脉注射的骨生物力学强度随剂量的增加而增加，脂联素20μg组与骨形成蛋白组相当；脂联素50μg组优于20μg组和骨形成蛋白组。
实施例4骨缺损动物的脂联素干预
股骨骨缺损模型的制备：将C57小鼠（雄性，4周龄，20-25g，购自解放军总医院动物房）分笼饲养，适应性喂养1周，采用随机分组法将所有小鼠分组，每组6只。采用柴氏方法制作模型。具体地，每只小鼠称重后，以2%戊巴比妥钠（0.1mg/kg）从腹腔静推麻醉后仰卧位固定，先用剃刀脱除双侧后肢鼠毛。无菌条件下取左后肢中段外侧纵行切口，于股四头肌肌间隙进入，暴露股骨，造成中段骨干缺损模型，穿入1ml注射器针头固定。
含脂联素的骨渣填塞：分别在上述骨缺损小鼠模型的左侧骨缺损间植入含有10μg、20μg、50μg脂联素的骨渣，逐层闭合伤口，钢丝交叉结扎固定，作为实验组。于右侧同样手术处理，只是骨缺损中植入不含脂联素的骨渣，作为相应对照组。观察动物的呼吸、循环稳定后，小心放置于饲养笼内，标记实验分组及时间于标签上，同等条件下单笼常规饲养4周、8周、12周后，处死并取出股骨。含脂联素的骨渣填塞的骨生物力学-最大载荷如表5及图9所示。
表5
*：与对照组存在统计学差异（P<0.05）；**与对照组存在统计学差异（P<0.01）
由表5及图9可以看出，各药物干预组均强于对照组，且存在显著差异；含脂联素的骨渣填塞的骨生物力学强度随剂量的增加而增加。
含脂联素的明胶海绵填塞：使用含10μg、20μg、50μg脂联素的医用明胶海绵填塞上述骨缺损小鼠模型的左侧骨缺损间，对侧为单纯医用明胶海绵垫压作为对照。观察动物的呼吸、循环稳定后，小心放置于饲养笼内，标记实验分组及时间于标签上，同等条件下单笼常规饲养4周、8周、12周后，处死并取出股骨。含脂联素的明胶海绵填塞的骨生物力学-最大载荷如表6及图10所示。
表6
*：与对照组存在统计学差异（P<0.05）；**与对照组存在统计学差异（P<0.01）
由表6及图10可以看出，各药物干预组均强于对照组，且存在显著差异；含脂联素的骨渣填塞的骨生物力学强度随剂量的增加而增加。
从以上各实施例可以看出，脂联素能够促进成骨细胞增殖和DNA合成，且其效果随脂联素浓度增加而增高，作用时间超过48h；脂联素还能够增加小鼠骨松质容量、增加骨皮质厚度，具有改善骨结构的作用；此外，脂联素能够促进小鼠骨缺损、线性骨折的修复愈合，促进骨痂生成，提高骨生物力学性能，对骨缺损、粉碎性骨折和线性骨折均有良好的治疗作用。因此，可以将脂联素用于制备促进骨愈合的药物中，特别是用于制备治疗骨折的药物中。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方案及实施例对本发明做了详尽的描述，但在本发明的基础上，所属技术领域的技术人员可以在不偏离本发明主旨的范围内对之进行修改和改进，这些修改或改进均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.脂联素在制备治疗骨折的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述骨折包括线性骨折、粉碎性骨折和骨缺损。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述骨折为四肢骨折。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述骨折为股骨骨折。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为含有脂联素的骨渣、含有脂联素的附着制剂、粉剂或注射剂。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的给药方式包括在骨间植入含有脂联素的骨渣、用含有脂联素的附着制剂填塞、含有脂联素的粉剂直接涂敷和注射给药中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述注射给药包括：在骨折断端局部注射给药、腹腔注射给药、皮下注射给药、肌肉注射给药及静脉注射给药中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，以每次0.05～1mg/kg体重脂联素的剂量局部注射给药，每月给药1～4次到每日给药1～3次。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，在腹腔注射给药、皮下注射给药、肌肉注射给药或静脉注射给药时，以每次0.2～20mg/kg体重脂联素的剂量给药，每月给药1～4次到每日给药1～3次。
10.一种用于治疗骨折的药物组合物，其含有100μg～1000mg脂联素和药学上可接受的辅料。
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|---|
| 税雪苹等: "脂联素对兔下颌快速牵张成骨的影响", 《中国组织工程研究与临床康复》 * |
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