CN111359010A - 用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物、其组织工程组合物使用盒及应用 - Google Patents

用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物、其组织工程组合物使用盒及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及生物医药技术领域，具体讲，涉及一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其组织工程组合物使用盒及应用。本发明的前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。本发明采用温度敏感性高分子材料复合干细胞，涂到人体后发生相转化，形成固体凝胶粘附到创面表面，同时将干细胞稳定的固定于凝胶中，通过添加粘结剂，从而使形成的凝胶可牢固的粘附于皮肤表面，修复皮肤损伤。

Description

用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物、其组织工程组 合物使用盒及应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体讲，涉及一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其组织工程组合物使用盒及应用。
背景技术
皮肤损伤是多种疾病或损伤导致的皮肤破损现象，表现为皮肤易反复破溃、部分皮肤功能丧失、易产生瘢痕等皮肤增生组织等。常见导致皮肤难治性破损的因素有糖尿病、微生物炎症及免疫性疾病所致的皮肤溃疡、烧烫伤、红斑狼疮、银屑病等。
目前，全球约有超过4.25亿的糖尿病患者。中国是全球糖尿病患病人数最多的国家。糖尿病足是糖尿病患者常见严重并发症之一，1999年世界卫生组织将糖尿病足定义为糖尿病因合并各种不同程度的末梢血管病变和神经病变，导致下肢感染、溃疡和(或)深部组织破坏。近6％的糖尿病患者并发糖尿病足溃疡，至少25％的糖尿病足溃疡难以治愈，导致了84％的与糖尿病相关的下肢截肢。溃疡、截肢、死亡是糖尿病足的三大最终结局。溃疡的发生被认为是截肢的前兆，而下肢截肢经常会导致糖尿病患者死亡，70％的患者在截肢手术后5年内死亡。糖尿病足溃疡的高截肢率和高死亡率，严重影响患者的生活质量，加重医疗保健系统及社会负担。目前，针对糖尿病足溃疡传统治疗方式的疗效及预后往往难以达到预期。
目前临床工作中采取多学科合作的方式，对于糖尿病足创面的内科治疗主要是控制血糖、调整抗生素抗感染、降血脂、改善微循坏、营养神经药物的使用。外科治疗，包括对于严重感染的慢性创面采取短时间内坏死组织清创，防止感染扩散致使下肢感染平面上移；蛆虫生物清创技术及臭氧化学清创技术将在控制感染的同时促进肉芽组织生长；针对感染控制后的难愈合创面采取植皮、皮瓣移植、皮肤牵张闭合器修复软组织缺损，或者应用脂肪移植、富血小板血浆及富血小板纤维蛋白等进行组织修复。但由于糖尿病患者足部溃疡形成难以愈合最主要的原因是由于局部血液循环障碍和机体免疫力降低，局部伤口感染，常见细菌耐药的形成。因此，糖尿病足的皮肤溃疡上述方法非常难以治愈。
干细胞是一类具有自我复制能力、多向分化能力的细胞，通过分化功能及分泌功能，促进血管生成及细胞外基质的重建，从而促进创面愈合。
发明专利申请201310265106.X公开了一种促进糖尿病皮肤创伤修复的复合制剂及其制备方法，该制剂包含温敏性水凝胶和骨髓间充质干细胞。发明专利ZL201710812388.9公开一种治疗难治性皮肤破损的生物凝胶剂及其应用，其中的干细胞培养添加剂由脐带间充质干细胞、中药提取物和血清组成。但目前采用干细胞治疗糖尿病足溃疡仍存在诸多问题，其中最主要的问题是干细胞无法稳定的固定并存活于糖尿病足溃疡创面上，如何通过合适的方式方法使干细胞稳定的固定、存活较长时间作用于溃疡创面，而不是很快脱落失活，就成为了解决干细胞局部治疗溃疡(如糖尿病足溃疡)创面问题的主要瓶颈。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一发明目的在于提供一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物。
本发明的第二发明目的在于提供该用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物的制备方法。
本发明的第三发明目的在于提供一种用于修复皮肤损伤组织工程组合物使用盒。
本发明的第四发明目的在于提供上述干细胞凝胶前体组合物和组织工程组合物使用盒制备得到的凝胶。
本发明的第五发明目的在于提供上述干细胞凝胶前体组合物和组织工程组合物使用盒的应用。
为了完成本发明的发明目的，采用的技术方案为：
本发明提出一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，所述前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。
可选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括免疫调节剂或免疫增强剂；
所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌制剂，卡介苗，假单胞菌制剂，卡介菌多糖、核酸制剂，红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂，A群链球菌制剂，绿脓杆菌制剂，布氏菌制剂，胸腺肽，胸腺五肽，IL-2，干扰素，免疫核糖核酸，左旋咪唑，异丙肌苷，聚肌胞苷酸，聚肌尿苷酸；
优选的，所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌的无细胞制剂、卡介苗、胸腺肽、胸腺五肽、IL-2、干扰素、免疫核糖核酸、左旋咪唑、异丙肌苷、聚肌胞苷酸、聚肌尿苷酸。
可选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括抗生素，所述抗生素选自抗革兰氏阴性菌、抗革兰氏阳性菌、抗厌氧菌、抗真菌的抗生素的至少一种。
可选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括溶剂，所述溶剂选自生理盐水和磷酸缓冲液中的至少一种；
优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括干细胞无血清培养基；
优选的，所述干细胞无血清培养基在所述干细胞凝胶组合物中的质量百分比浓度为0.8～1.5％，优选1.04～1.35％。
可选的，所述干细胞选自间充质干细胞、脂肪干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞中的至少一种；
所述间充质干细胞来源于骨髓、脐带、脐血、胎盘、羊膜、牙髓或脂肪组织，优选脐带间充质干细胞；
优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×105～1×108个/mL的干细胞；优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×106～1×107个/mL的干细胞。
优选的，所述干细胞为第2～10代细胞；优选的，所述干细胞为第3～5代细胞。
可选的，所述温度敏感性高分子材料选自聚N-异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺衍生物、羟丁基壳聚糖、羟丁基壳聚糖衍生物、泊洛沙姆407、聚乳酸/羟基乙酸/聚乙二醇共聚物、聚乙二醇单甲醚-(癸二酸-D,L-乳酸)聚酯酸酐-聚乙二醇单甲醚三嵌段共聚物、纤维素、纤维素衍生物和聚乙二醇/聚己内酯嵌段共聚物；
优选的，所述温度敏感性高分子材料在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为1～15％，更优选2～9％。
可选的，所述粘合剂选自羧甲基纤维素、卡波姆、聚乙烯醇、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、白芨多糖、贻贝粘性蛋白、透明质酸钠中的至少一种；
优选的，所述粘合剂在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.25～5％，优选为0.5～4％。
可选的，所述凝胶相变温度调节剂选自泊洛沙姆188、聚山梨醇酯和聚乙二醇中的至少一种；
优选的，所述凝胶相变温度调节剂在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.5～10％，优选1～5％。
可选的，所述干细胞凝胶前体组合物的相变温度为20℃～37℃，优选为25～35℃。
本发明还涉及该干细胞凝胶前体组合物的制备方法，包括如下步骤：
当传代培养的干细胞长至60％～80％时，更换成无血清的DMEM培养基中培养6～12h，加入胰蛋白酶进行消化，然后收集细胞，离心后与所述温度敏感性高分子材料、所述粘合剂和所述凝胶相变温度调节剂混合，得到所述干细胞凝胶前体组合物。
本发明还涉及一种用于修复皮肤损伤的组织工程组合物使用盒，所述组织工程组合物使用盒中含有上述的干细胞凝胶前体组合物和薄膜；
优选的，所述组织工程组合物使用盒中还包括无菌纱布。
本发明的干细胞凝胶前体组合物的储存温度为1℃～24℃。
本发明的组织工程组合物使用盒的储存温度为1℃～24℃。
本发明还涉及上述干细胞凝胶前体组合物或上述组织工程组合物使用盒制备得到的干细胞凝胶。
本发明还涉及上述干细胞凝胶前体组合物或上述组织工程组合物使用盒在用于制备治疗皮肤损伤，包括但不限于糖尿病皮肤溃疡、微生物炎症及免疫性疾病所致的皮肤溃疡、烧伤、烫伤、红斑狼疮或银屑病的组织工程产品中的应用。
本发明至少具有以下有益的效果：
本发明采用温度敏感性高分子材料复合干细胞，在低温储存时是液体，涂到人体皮肤创面后发生相转化，形成固体凝胶粘附到创面表面，同时将干细胞稳定的固定于凝胶中，通过添加粘结剂，从而使形成的凝胶可牢固的粘附于皮肤表面，解决了现有材料中凝胶无法固定于损伤部位的皮肤表面的技术难题，从而制备得到了一种可将干细胞稳定粘附于破损皮肤表面的凝胶。
其次，本发明的干细胞凝胶前体组合物的材料采用具有生物相容性的可生物降解材料，在生物体内保持一定时间后自然降解成小分子排除体外。
最后，本发明的试剂盒中还有薄膜，薄膜可起到固定凝胶、保湿、隔离外界环境等效果。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本申请而不用于限制本发明的范围。如无特殊说明，所采用的制剂全部为市售制剂。
具体实施方式
本发明实施例提出一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。本发明实施例的凝胶前体组合物采用温度敏感性高分子材料和凝胶相变温度调节剂将该组合物的相变温度调节为25℃～40℃，从而可在涂到人体37℃表面后发生相转化，形成固体凝胶粘附到创面表面，同时将干细胞稳定的固定于凝胶中，通过粘结剂形成的凝胶牢固的粘附于损伤部位的皮肤表面，解决了现有材料中凝胶无法固定于损伤部位的皮肤表面的技术难题，从而制备得到了一种可将干细胞稳定粘附于破损皮肤表面的凝胶。本发明的凝胶不需要在使用过程中进行凝胶的合成，仅需要皮肤的温度即可形成稳定的凝胶，因此使用更加简便，形成的凝胶更加稳定，克服了在使用过程中应用手法等的问题造成所合成的凝胶性质发生差异。本发明的凝胶材料简单易得，并且充分利用了材料的优点，避免了单一材料的毒性，具有更好的生物相容性。
可选的，本发明实施例的干细胞凝胶前体组合物中还包括免疫调节剂或免疫增强剂。
具体的，免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌制剂，卡介苗，假单胞菌制剂，卡介菌多糖、核酸制剂，红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂，A群链球菌制剂，绿脓杆菌制剂，布氏菌制剂，胸腺肽，胸腺五肽，IL-2，干扰素，免疫核糖核酸，左旋咪唑，异丙肌苷，聚肌胞苷酸，聚肌尿苷酸；
优选的，免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌的无细胞制剂、卡介苗、胸腺肽、胸腺五肽、IL-2、干扰素、免疫核糖核酸、左旋咪唑、异丙肌苷、聚肌胞苷酸、聚肌尿苷酸。
当皮肤组织发生溃疡后，溃疡部位的血液循环不好，并且由于皮肤溃疡的病程较长，免疫力下降，由于皮肤溃疡经久不愈，经常使用抗生素，会发生抗生素耐药现象，从而使细菌感染非常难以控制，本发明实施例创新性的在凝胶中添加免疫调节剂或免疫增强剂，由于凝胶直接接触创面，因此免疫调节剂或免疫增强剂可直接作用于患处，激活巨噬细胞，吞噬细菌、真菌等微生物和坏死组织，从而促进愈合，显著增强了凝胶的抗菌活性。无细胞制剂由于破碎了细胞，提取了有效组分，极容易进入毛细血管，故可以迅速产生全身作用，更好地发挥免疫治疗作用，使得其治疗效果增强。
其中，免疫增强剂添加的质量为干细胞凝胶前体组合物质量的0.01％～10％。
本发明实施例的干细胞凝胶前体组合物中还包括抗生素，抗生素选自抗革兰氏阴性菌、抗革兰氏阳性菌、抗厌氧菌、抗真菌的抗生素的至少一种。如青霉素类、头孢霉素类、碳青酶烯类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类、喹诺酮类、硝咪唑类、林克胺类、林霉素类、酰氨醇类、抗真菌类的抗生素。添加抗生素可进一步增加凝胶的抗菌活性。
可选的，本发明实施例的干细胞凝胶前体组合物中包括溶剂，干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂作为溶质溶解于溶剂中，形成一种液体制剂。具体的，溶剂可选自生理盐水和磷酸缓冲液中的至少一种，也可选自其他与组织相容性较好的缓冲溶液。
可选的，本发明实施例的前体组合物中还包括干细胞无血清培养基，以促进干细胞的存活、保证细胞的活性。除无血清培养基外，也可添加其他的添加剂。
具体的，干细胞无血清培养基在干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.8～1.5％，优选为1.04～1.35％。
可选的，本发明实施例的干细胞选自间充质干细胞、脂肪干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞中的至少一种；其中，间充质干细胞是被认为最具有医学价值的干细胞种类之一。间充质干细胞可向上皮样细胞分化以保护创面。此外，间充质干细胞通过分泌生长因子和相关细胞因子促进伤口愈合，如表皮生长因子、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子、TGF-β、胰岛素生长因子1及IL-8等，通过减轻炎症反应、如降低炎性细胞因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，促进血管形成、组织再生及募集内源性干细胞，调节局部免疫水平及提高组织修复能力。此外，间充质干细胞也可直接分化成血管内皮细胞和皮肤组件，为创面提供有利修复的微环境，提高经皮氧分压，改善患肢血流情况，促进糖尿病足溃疡创面愈合，提高无截肢生存率，无明显不良反应。与其它治疗方法相比，间充质干细胞治疗伤口愈合速度更快，且血液循环功能改善程度更佳。间充质干细胞试验表明，局部外敷方式优于静脉注射，可加速糖尿病足溃疡创面的愈合。由于糖尿病足溃疡多伴有局部感染，且往往多种抗生素耐药，因此，间充质干细胞局部使用的同时，加用激活局部免疫细胞如激活巨噬细胞、HK细胞的免疫增强剂效果更佳。所述间充质干细胞来源于骨髓、脐带、脐血、胎盘、羊膜、牙髓或脂肪组织，优选脐带间充质干细胞。
可选的，本发明实施例的干细胞凝胶前体组合物中含有1×105～1×108个/mL的干细胞；优选的，含有1×106～1×107个/mL的干细胞。
可选的，本发明实施例的温度敏感性高分子材料选自聚N-异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺衍生物、羟丁基壳聚糖、羟丁基壳聚糖衍生物、泊洛沙姆407(P407)、聚乳酸/羟基乙酸/聚乙二醇共聚物、聚乙二醇单甲醚-(癸二酸-D,L-乳酸)聚酯酸酐-聚乙二醇单甲醚三嵌段共聚物、纤维素、纤维素衍生物和聚乙二醇/聚己内酯嵌段共聚物。本发明实施例的温度敏感性高分子材料可形成支架支撑干细胞，并且具有良好的生物相容性，将干细胞稳定的包覆于其内，具有良好的含水性，维持干细胞良好的生存环境，支持其存活。可选的，温度敏感性高分子材料在干细胞凝胶前体组合物中的浓度1～15wt％，更优选2～9wt％。如果温度敏感性高分子材料的含量过大，则凝胶化温度就太低，如果温度敏感性高分子材料的含量过小，则凝胶化温度就太高，并且对干细胞的支持不足。
可选的，本发明实施例的粘合剂选自羧甲基纤维素、卡波姆、聚乙烯醇、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、白芨多糖和贻贝粘性蛋白、透明质酸钠中的至少一种。通过添加粘合剂，使形成的凝胶可以牢固的附着于损伤的皮肤表面，对创伤进行修复。
可选的，粘合剂在组合物中的浓度为0.25～5wt％，优选为0.5～4％。如果粘合剂的含量适当地增加，则粘附效果好，如果粘合剂的含量过小，则粘附效果不佳。而如果粘合剂用量过大则会影响凝胶的性质，改变干细胞的环境，不利于干细胞存活。
可选的，本发明实施例的凝胶相变温度调节剂选自泊洛沙姆188(P188)、聚山梨醇酯和聚乙二醇中的至少一种；
可选的，凝胶相变温度调节剂在干细胞凝胶前体组合物中的浓度为0.5～10wt％，优选1～5wt％。凝胶相变温度调节剂可进一步调节凝胶前体的相变温度，将其控制在适宜的范围内，从而可在涂敷于皮肤表面后形成凝胶。如果凝胶相变温度调节剂的添加量过低，则对相变温度的调控作用有限；如果凝胶相变温度调节剂的添加量过高，则会影响凝胶的性质，改变干细胞的环境，不利于干细胞存活。可选的，相变温度是指膜脂发生相态转变的温度。在相变温度时，膜脂的流动性会随之改变，由液相转变为凝胶相。本发明实施例的干细胞凝胶前体组合物的相变温度为20℃～37℃，优选为25～37℃，更优选30～37℃。
本发明实施例还涉及该干细胞凝胶前体组合物的制备方法，包括如下步骤：
当传代培养的干细胞长至60％～80％时，更换成无血清的DMEM培养基中培养6～12h，加入胰蛋白酶进行消化，然后收集细胞，离心后与所述温度敏感性高分子材料、所述粘合剂和所述凝胶相变温度调节剂混合，得到所述干细胞凝胶前体组合物。
本发明实施例还涉及一种用于修复皮肤损伤的组织工程组合物使用盒，即含上述干细胞凝胶前体组合物和薄膜的试剂盒，薄膜可起到固定凝胶、保湿、隔离外界环境等效果。
具体的，薄膜的材质可选自透气的高分子材料薄膜。薄膜的厚度优选为0.1mm～2mm。
可选的，本发明实施例的试剂盒中还包括无菌纱布，用于进一步固定所形成的凝胶，隔离外界环境。
本发明实施例的干细胞凝胶前体组合物或组织工程组合物使用盒的储存温度1℃～25℃，优选1～15℃，从而可避免凝胶前体发生相变而失效。
本发明实施例的还涉及上述干细胞凝胶前体组合物或组织工程组合物使用盒在用于制备治疗糖尿病皮肤溃疡、微生物炎症及免疫性疾病所致的皮肤溃疡、烧伤、烫伤、红斑狼疮或银屑病的制剂中的应用。
实施例
一种干细胞凝胶前体组合物，溶剂为生理盐水，在低温条件(1～15℃)下，按比例加入各组分，组成及各成分的质量百分比组成如表1所示。其中，所用到的原料均为市售原料。
表1
Figure BDA0002500515690000101
实施例9：在实施例2的基础上添加短棒状杆菌的无细胞制剂，添加的量为干细胞凝胶前体组合物质量的0.1％。
效果评价方法为：
(1)相变温度的检测方法为：
取4mL干细胞凝胶前体组合物液于带温度计的试管中，将试管置于的恒温水浴锅中，恒温水浴锅从25℃开始缓慢升温，每隔15秒将试管反转观察凝胶化情况，待将试管反转但凝胶不流动时，记录此时温度计显示温度即为胶凝温度，每个样品平行测定3次。取平均值。
(2)粘附力：
取市售新鲜猪皮置生理盐水(37℃)中清洗干净，清洗的皮肤在2小时内使用。剪取一定面积的皮肤组织(2.5cm×2.5cm)，固定于聚乙烯薄膜上，并切除皮肤的表皮层形成1cm×1cm的创面，将0.5ml干细胞凝胶前体组合物产品均匀涂布于皮肤创面上，皮肤组织在温度37℃中放置20分钟，将经上述处理的皮肤组织固定于冲洗斜槽上，将斜槽的角度调至60度，调节蠕动泵流速为20mL/min，将皮肤组织用生理盐水冲洗5分钟，冲洗液收集于一已知重量的烧杯中，在70℃烘干，称重，组织粘附力用粘附百分率表示。
计算方法如下：
组织粘附百分率(Bg/％)Bg/％＝{[M-(G-g-m)]/M}x100％
式中M为样品的干量；g为空烧杯重；G为烧杯与烘干后残渣总重；m为同体积冲洗液所含固体物质的量(空白对照)。检测得到实验结果如表2所示。
表2
组别 相变温度(℃) 粘附力
实施例1 37 85％
实施例2 35 90％
实施例3 34 92％
实施例4 33 95％
实施例5 33 96％
实施例6 28 97％
实施例7 27 98％
实施例8 25 94％
对比例
按照实施例的方法制备对比例，具体组成如表3所示。
表3
Figure BDA0002500515690000111
Figure BDA0002500515690000121
得到实验结果如表4所示。
表4
组别 相变温度(℃) 粘附力
对比例1 36 50％
对比例2 37 75％
对比例3 36 80％
对比例4 35 49％
对比例5 37 80％
对比例6 36 85％
对比例7 36 80％
对比例8 45 30％
实验例
将实验动物：BKS.Cg-Dock7m+/+Leprdb/JNju基因型Ⅱ型糖尿病小鼠(南京大学模式动物研究所)分为6组，用脱毛膏将小鼠背部双侧毛发脱除，再用皮肤打孔器在双侧造开放圆形创口，每只小鼠造2个8mm的圆形全层皮肤切除伤口，小鼠颈部实用胶带固定，防止其舔舐药物。
模型组不给药，实施例2组、实施例9组、对比例5组、对比例7组、对比例9组分别给予实施例2、实施例9、对比例5、对比例7、对比例9的凝胶涂抹伤口，创伤模型制备完成后立即敷药，一次一天，连续给药7天，期间小鼠自由采食、饮水。
创口愈合率：分别于造模后7天，每组随机抽取3只小鼠，采用透明膜描记称量法，利用描绘创面的透明硫酸纸的质量与面积比例换算创面愈合率，创面愈合率＝(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积×100％。
得到的实验结果如表5所示。
表5
组别 n 创口愈合率(％)
模型组 10 55.24±3.45
实施例2 10 80.45±4.32
实施例9 10 85.53±5.12
对比例5 10 77.82±3.87
对比例7 10 73.53±4.14
对比例9 10 74.78±5.23
申请虽然以较佳实施例公开如上，但并不是用来限定权利要求，任何本领域技术人员在不脱离本申请构思的前提下，都可以做出若干可能的变动和修改，因此本申请的保护范围应当以本申请权利要求所界定的范围为准。

Claims (14)

1.一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。
2.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括免疫调节剂或免疫增强剂；
所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌制剂，卡介苗、假单胞菌制剂，卡介菌多糖、核酸制剂，红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂，A群链球菌制剂，绿脓杆菌制剂，布氏菌制剂，胸腺肽，胸腺五肽，IL-2，干扰素，免疫核糖核酸，左旋咪唑，异丙肌苷，聚肌胞苷酸，聚肌尿苷酸；
优选的，所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌的无细胞制剂、卡介苗、胸腺肽、胸腺五肽、IL-2、干扰素、免疫核糖核酸、左旋咪唑、异丙肌苷、聚肌胞苷酸、聚肌尿苷酸。
3.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括抗生素，所述抗生素选自抗革兰氏阴性菌、抗革兰氏阳性菌、抗厌氧菌、抗真菌的抗生素中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括溶剂，所述溶剂选自生理盐水和磷酸缓冲液中的至少一种；
优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括干细胞无血清培养基；
优选的，所述干细胞无血清培养基在所述干细胞凝胶组合物中的质量百分比浓度为0.8～1.5％，优选为1.04～1.35％。
5.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞选自间充质干细胞、脂肪干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞中的至少一种；
所述间充质干细胞来源于骨髓、脐带、脐血、胎盘、羊膜、牙髓或脂肪组织，优选脐带间充质干细胞；
优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×105～1×108个/mL的干细胞；更优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×106～1×107个/mL的干细胞。
进一步优选的，所述干细胞为第2～10代细胞；优选的，所述干细胞为第3～5代细胞。
6.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述温度敏感性高分子材料选自聚N-异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺衍生物、羟丁基壳聚糖、羟丁基壳聚糖衍生物、泊洛沙姆407、聚乳酸/羟基乙酸/聚乙二醇共聚物、聚乙二醇单甲醚-(癸二酸-D,L-乳酸)聚酯酸酐-聚乙二醇单甲醚三嵌段共聚物、纤维素、纤维素衍生物和聚乙二醇/聚己内酯嵌段共聚物；
优选的，所述温度敏感性高分子材料在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为1～15％，更优选2～9％。
7.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述粘合剂选自羧甲基纤维素、卡波姆、聚乙烯醇、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、白芨多糖、贻贝粘性蛋白、透明质酸钠中的至少一种；
优选的，所述粘合剂在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.25～5％，优选为0.5～4％。
8.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述凝胶相变温度调节剂选自泊洛沙姆188、聚山梨醇酯和聚乙二醇中的至少一种；
优选的，所述凝胶相变温度调节剂在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.5～10％，优选1～5％。
9.根据权利要求1～8任一项所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物的相变温度为20℃～37℃，优选为25～35℃。
10.一种如权利要求1～9任一项所述的干细胞凝胶前体组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
当传代培养的干细胞长至60％～80％时，更换成无血清的DMEM培养基中培养6～12h，加入胰蛋白酶进行消化，然后收集细胞，离心后与所述温度敏感性高分子材料、所述粘合剂和所述凝胶相变温度调节剂混合，得到所述干细胞凝胶前体组合物。
11.一种用于修复皮肤损伤的组织工程组合物使用盒，其特征在于，所述组织工程组合物使用盒中含有如权利要求1～9任一项所述的干细胞凝胶前体组合物和薄膜；
优选的，所述组织工程组合物使用盒中还包括无菌纱布。
12.根据权利要求1～9任一项所述的干细胞凝胶前体组合物或权利要求11所述的组织工程组合物使用盒，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物或所述组织工程组合物使用盒的储存温度为1℃～24℃。
13.如权利要求1～9任一项所述的干细胞凝胶前体组合物或如权利要求11所述的组织工程组合物使用盒制备得到的干细胞凝胶。
14.如权利要求1～9任一项所述的干细胞凝胶前体组合物或如权利要求11所述的组织工程组合物使用盒在用于制备治疗皮肤损伤，包括但不限于糖尿病皮肤溃疡、微生物炎症及免疫性疾病所致的皮肤溃疡、烧伤、烫伤、红斑狼疮或银屑病的组织工程产品中的应用。
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