CN109666604B - 一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法 - Google Patents

一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109666604B
CN109666604B CN201811583391.9A CN201811583391A CN109666604B CN 109666604 B CN109666604 B CN 109666604B CN 201811583391 A CN201811583391 A CN 201811583391A CN 109666604 B CN109666604 B CN 109666604B
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
proliferation agent
culture
highly concentrated
milk
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811583391.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109666604A (zh
Inventor
洪青
刘振民
李楠
雍靖怡
姜陈波
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bright Dairy and Food Co Ltd
Original Assignee
Bright Dairy and Food Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bright Dairy and Food Co Ltd filed Critical Bright Dairy and Food Co Ltd
Priority to CN201811583391.9A priority Critical patent/CN109666604B/zh
Publication of CN109666604A publication Critical patent/CN109666604A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109666604B publication Critical patent/CN109666604B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法，制备方法包括以下步骤：扩培：将类芽孢杆菌CGMCC No.8333种子液接种于脱脂乳培养基，摇床培养，获得纯培养物；离心：将纯培养物离心处理，取上清液；过柱：将上清液进行固相萃取过柱，流动相为20％～60％的甲醇溶液，收集流出液；蒸发：将收集的流出液进行蒸发，析出的物质即为高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。本发明提供的浓缩增殖剂制备方法简单，设备要求低，成本低廉；本发明制备的浓缩增殖剂对植物乳杆菌ST‑III在乳中的生长具有显著促进作用，极大的提高了ST‑III在实际产品开发中的应用潜力。

Description

一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法。
背景技术
植物乳杆菌ST-III对人体有着巨大的益生作用，如调节血脂、降低胆固醇、粘附肠道上皮细胞等功能，植物乳杆菌ST-III的全基因组于2010年测定，并在实际生产中得到广泛应用。然而，将植物乳杆菌ST-III添加到牛乳中培养，生物量很低，几乎没有生长，原因可能是无法利用牛乳自主合成某些必须营养物质。前期研究发现类芽孢杆菌CGMCC No.8333发酵制备的上清液对植物乳杆菌ST-III在乳中的生长具有显著促进作用，但存在发酵时间过长的问题，发酵16 h，牛乳pH从6.6降至5.3。常规的类芽孢杆菌CGMCC No.8333上清液浓缩方法，如加热或离心，对本专利得增殖剂效果都不理想，促进效果不明显，因为增殖剂中含有大量乳糖，加热或离心无法将乳糖有效结晶或分离出来，无法实现有效浓缩。因此通过一定手段提高增殖剂浓度以便能够大幅缩减ST-III的发酵时间具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法，以及该增值剂对植物乳杆菌ST-III的使用方法，该增值剂及使用方法对植物乳杆菌ST-III在乳中的生长具有显著的促进作用。
本发明为达到上述目的，具体通过以下技术方案得以实现的：
一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）扩培：将类芽孢杆菌CGMCC No.8333种子液以体积百分比为3%的比例接种于10%脱脂乳培养基，在温度为25~30℃，摇床转速为150~200 rpm的条件下培养96~144 h，获得纯培养物；
（2）离心：将步骤（1）所得纯培养物于4~15℃，以转速5000~10000 rpm离心，离心时间5~10 min，取上清液；
（3）过柱：将步骤（2）所得的上清液进行固相萃取过柱，流动相为20%~60%的甲醇溶液，收集流出液；
（4）蒸发：将步骤（3）所收集的流出液进行蒸发，析出的物质即为高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。
作为上述制备方法的进一步优化，步骤（1）中培养的时间为120~144h。
作为上述制备方法的进一步优化，步骤（2）中离心的转速为6000~9000 rpm。
作为上述制备方法的进一步优化，步骤（3）中甲醇溶液的浓度为20~40%。
作为上述制备方法的进一步优化，步骤（4）中的蒸发为旋转蒸发或平行蒸发，蒸发加热温度为40~60℃，蒸发时间为1.5~3h。
本发明的一种利用上述任一的制备方法制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。
本发明的一种上述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，包括以下步骤：
（1）将所述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；
（2）将步骤（1）所得的增殖剂溶液以1:4的比例加入至原料乳中，混合均匀，在温度118~121℃条件下灭菌处理15~20min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将植物乳杆菌种子液以体积百分比为1%~2%的比例接种至步骤（2）所得培养乳中，混合均匀，静置培养即可。
作为上述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法的进一步优化，原料乳为生牛乳、脱脂牛乳和复原乳中的任意一种。
作为上述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法的进一步优化，步骤（3）中植物乳杆菌种子液是将植物乳杆菌ST-III纯培养物以1%~2%（v/v）比例接种至MRS培养基，静置培养获得。
作为上述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法的进一步优化，MRS培养基由以下组分组成：蛋白胨10.0 g/L、牛肉膏10.0g/L、酵母膏5.0 g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、葡萄糖20.0 g/L、吐温80 1.0 mL/L、乙酸钠 5.0 g/L、K2HPO4·3H2O 2.0 g/L、MgSO4·7H2O 0.58g/L、MnSO4·H2O 0.25 g/L、琼脂 18.0 g/L及蒸馏水1 L；MRS培养基的pH为6.2~6.6。
本发明的有益效果是：（1）本发明提供的浓缩增殖剂制备方法简单，设备要求低，成本低廉；（2）进行固相萃取过柱，将增殖剂进行高度浓缩，此过程时间短，5min左右即可完成，易于操作，所得的增殖剂能够大幅度缩短ST-III的生长时间，从原来的24h降低至8~12h；（3）本发明制备的浓缩增殖剂对植物乳杆菌ST-III在乳中的生长具有显著促进作用，极大的提高了ST-III在实际产品开发中的应用潜力。
生物材料保藏信息
本发明中的类芽孢杆菌为类芽孢杆菌BD3526，已于2013年10月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。该菌种的保藏编号为：CGMCC No.8333。该菌种的分类命名是类芽孢杆菌Paenibacillus sp. ，名称为BD3526。
具体实施方式
以下结合附图及实施例对本发明作进一步详细说明。
一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，包括以下步骤：（1）扩培：将类芽孢杆菌CGMCC No.8333种子液以体积百分比为3%的比例接种于10%脱脂乳培养基，在温度为25~30℃，摇床转速为150~200 rpm的条件下培养96~144 h，获得纯培养物；（2）离心：将步骤（1）所得纯培养物于4~15℃，以转速5000~10000 rpm离心，离心时间5~10 min，取上清液；（3）过柱：将步骤（2）所得的上清液进行固相萃取过柱，流动相为20%~60%的甲醇溶液，收集流出液；（4）蒸发：将步骤（3）所收集的流出液进行蒸发，析出的物质即为高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。
作为上述制备方法的进一步优化，步骤（1）中培养的时间为120~144h。步骤（1）脱脂乳培养基为常规的脱脂乳培养基，将脱脂乳粉（购自恒天然商贸（上海）有限公司的）溶解于水中混合即得，百分比为脱脂乳粉占脱脂乳粉和水总质量的质量百分比。培养时间较佳的为96~168h，更佳地为120~144小时，最佳的为120小时。
步骤（2）中离心温度更佳地为5~10℃，最佳的为10℃；离心转速更佳的为6000-9000 rpm，最佳的为8000 rpm。
步骤（3）中固相萃取柱为Waters Sep-Pak C18柱。甲醇溶液的浓度为20~40%。
步骤（4）中的蒸发为旋转蒸发或平行蒸发，蒸发加热温度为40~60℃，更佳的为45~55℃，蒸发时间为1.5~3h，更加的为2h。
本发明的一种利用上述任一的制备方法制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。
本发明的一种上述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，包括以下步骤：（1）将所述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；（2）将步骤（1）所得的增殖剂溶液以1:4的比例加入至原料乳中，混合均匀，在温度118~121℃条件下灭菌处理15~20min，冷却至室温，获得培养乳；（3）将植物乳杆菌种子液以体积百分比为1%~2%的比例接种至步骤（2）所得培养乳中，混合均匀，静置培养即可。
原料乳为本领域常规，较佳的为生牛乳、脱脂牛乳和复原乳中的任意一种。植物乳杆菌种子液是将植物乳杆菌ST-III纯培养物以1%~2%（v/v）比例接种至MRS培养基，静置培养获得。
在符合本领域常识的基础上，上述的各优选条件可任意组合，即得本发明各较佳实例。
实施例1
一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）扩培：将类芽孢杆菌CGMCC No.8333种子液按3%（V/V）接种于10%脱脂乳培养基；温度30℃、摇床转速180 rpm条件下培养120 h；
（2）离心：将步骤（1）所得纯培养物于10℃，转速8000 rpm条件下离心10 min，取上清液；
（3）过柱：将步骤（2）所得的上清液进行固相萃取过柱，流动相为20%的甲醇溶液，收集流出液；
（4）蒸发：将步骤（3）所收集的流出液进行平行蒸发，温度45℃，时间2 h，析出的物质即为本发明提供的能够促进植物乳杆菌ST-III生长的高度浓缩增殖剂。
实施例2
一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）扩培：将类芽孢杆菌CGMCC No.8333种子液按3%（V/V）接种于10%脱脂乳培养基；温度30℃、摇床转速180 rpm的条件下培养144 h；
（2）离心：将步骤（1）所得纯培养物于温度10℃、转速10000 rpm条件下离心5 min，取上清液；
（3）过柱：将步骤（2）所得的发酵上清液进行固相萃取过柱，流动相为60%的甲醇溶液，收集流出液；
（4）蒸发：将步骤（3）所收集的流出液进行旋转蒸发，温度50℃，时间2 h，析出的物质即为能够促进植物乳杆菌ST-III生长的高度浓缩增殖剂。
实施例3
一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）扩培：将类芽孢杆菌CGMCC No.8333种子液按3%（V/V）接种于10%脱脂乳培养基；温度30℃、摇床转速180 rpm条件下培养132 h；
（2）离心：将步骤（1）所得纯培养物于温度4℃、转速10000 rpm条件下离心10min，取上清液；
（3）过柱：将步骤（2）所得的发酵上清液进行固相萃取过柱，流动相为40%的甲醇溶液，收集流出液；
（4）蒸发：将步骤（3）所收集的流出液进行平行蒸发，温度50℃，时间2 h，析出的物质即为能够促进植物乳杆菌ST-III生长的高度浓缩增殖剂。
实施例4
一种利用上述实施例1制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其对植物乳杆菌ST-III在乳中的促生长作用，其具体包括如下步骤：
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取实施例1制备的增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；取1mL增殖剂溶液加入至4 mL生牛乳中，混合均匀，在温度118℃条件下灭菌处理15 min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌种子液以2%（v/v）比例接种至步骤（2）所得的培养乳中，混合均匀，静置培养即可。35℃静置培养12 h后，牛乳出现凝乳现象。
其中，步骤（1）的MRS培养基为本领域常规培养基，由以下组分组成：蛋白胨10.0g/L、牛肉膏 10.0 g/L、酵母膏5.0 g/L、柠檬酸氢二铵 2.0 g/L、葡萄糖 20.0 g/L、吐温801.0 mL/L、乙酸钠5.0 g/L、K2HPO4·3H2O 2.0 g/L、MgSO4·7H2O 0.58 g/L、MnSO4·H2O0.25 g/L、琼脂 18.0 g/L、蒸馏水 1 L；MRS培养基的pH为6.2~6.6。
实施例5
一种利用上述实施例2制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其对植物乳杆菌ST-III在乳中的促生长作用，其具体包括如下步骤：
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取实施例2制备的增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；取1mL增殖剂溶液加入至4 mL生牛乳中，混合均匀，在温度118℃条件下灭菌处理15 min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌ST-III种子液以1%（v/v）比例接种步骤（2）所述的培养乳中，混合均匀，静置培养即可。35℃静置培养12 h后，牛乳出现凝乳现象。
实施例6
一种利用上述实施例3制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其对植物乳杆菌ST-III在乳中的促生长作用，其具体包括如下步骤：
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取实施例3制备的增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；取1mL增殖剂溶液加入至4 mL脱脂牛乳中，混合均匀，在温度118℃条件下灭菌处理15 min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌ST-III种子液以2%（v/v）比例接种步骤（2）所述的培养乳中，35℃静置培养12 h，牛乳出现凝乳现象。
实施例7
一种利用上述实施例3制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其对植物乳杆菌ST-III在乳中的促生长作用，其具体包括如下步骤：
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取实施例3制备的增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；取1mL增殖剂溶液加入至4 mL复原乳中，混合均匀，在温度118℃条件下灭菌处理15 min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌ST-III种子液以2%（v/v）比例接种步骤（2）所述的培养乳中，35℃静置培养12 h，牛乳出现凝乳现象。
对比例1
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取4 mL 生牛乳，1mL去离子水，充分混匀，温度118℃条件下灭菌处理15 min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌ST-III种子液以2%（v/v）比例接种步骤（2）所述的培养乳中，静止培养。35℃静置培养24 h，牛乳未出现凝乳现象。
对比例2
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取4 mL 生牛乳，取实施例1中步骤（2）所述的上清液1mL，充分混匀，温度118℃条件下灭菌处理15 min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌ST-III种子液以2%（v/v）比例接种步骤（2）所述的培养乳中，静置培养。35℃静置培养12h，牛乳未出现凝乳现象；静置培养24h，牛乳出现凝乳现象。
对比例3
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取实施例1中步骤（2）所述的上清液1mL，充分混匀，100℃，60 min加热处理，冷却至室温，离心去除乳糖，取上清液1mL添加至4 mL 生牛乳；
（3）将步骤（1）制备的植物乳杆菌ST-III种子液以2%（v/v）比例接种步骤（2）所述的生牛乳中，静置培养。35℃静置培养12h，牛乳未出现凝乳现象；静置培养24h，牛乳出现凝乳现象。
对比例4
（1）植物乳杆菌ST-III种子液的制备：无菌操作将ST-III纯培养物以2%（v/v）比例接种至MRS培养基，35℃静置培养18 h备用；
（2）取实施例1中步骤（2）所述的上清液1mL，充分混匀，10000 rpm，30min离心处理，去除菌体蛋白和乳糖，取上清液1mL添加至4 mL 生牛乳；
（3）将步骤（1）制备的种子液以2%（v/v）比例接种步骤（2）所述的生牛乳中，静置培养。35℃静置培养12h，牛乳未出现凝乳现象；静置培养24h，牛乳出现凝乳现象。
效果实施例
采用pH计测定乳培养液pH值；观察培养过程中培养基凝乳情况；利用MRS平板倾注法对乳培养基中的ST-III菌落计数，单位为log CFU/mL。结果如表1所示：
表1
Figure 529380DEST_PATH_IMAGE001
由表1可知，如实施例4中，添加本专利所述的高度浓缩增殖剂后，能够显著促进植物乳杆菌ST-III在牛乳基质中的生长，pH值从6.56降低至5.28，牛乳发生凝乳现象，极大提高了植物乳杆菌ST-III的生物量，潜在的增强了其应用范围。
本发明中的具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (9)

1.一种高度浓缩植物乳杆菌（ Lactobacillus plantarum ） 增殖剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）扩培：将类芽孢杆菌（ Paenibacillus. sp ） CGMCC No.8333种子液以体积百分比为3%的比例接种于10%脱脂乳培养基，在温度为25~30℃，摇床转速为150~200 rpm的条件下培养96~144 h，获得纯培养物；
（2）离心：将步骤（1）所得纯培养物于4~15℃，以转速5000~10000 rpm离心，离心时间5~10 min，取上清液；
（3）过柱：将步骤（2）所得的上清液进行固相萃取过柱，流动相为20%~40%的甲醇溶液，收集流出液；所述固相萃取柱为Waters Sep-Pak C18柱；
（4）蒸发：将步骤（3）所收集的流出液进行蒸发，析出的物质即为高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。
2.根据权利要求1所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中培养的时间为120~144h。
3.根据权利要求1所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）中离心的转速为6000~9000 rpm。
4.根据权利要求1所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述的蒸发为旋转蒸发或平行蒸发，蒸发加热温度为40~60℃，蒸发时间为1.5~3h。
5.一种利用权利要求1~4任一所述的制备方法制得的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂。
6.一种权利要求5所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将所述高度浓缩植物乳杆菌增殖剂溶于水中，浓度为1%，获得增殖剂溶液；
（2）将步骤（1）所得的增殖剂溶液以1:4的比例加入至原料乳中，混合均匀，在温度118~121℃条件下灭菌处理15~20min，冷却至室温，获得培养乳；
（3）将植物乳杆菌种子液以体积百分比为1%~2%的比例接种至步骤（2）所得培养乳中，混合均匀，静置培养即可。
7.根据权利要求6所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其特征在于，原料乳为生牛乳、脱脂牛乳和复原乳中的任意一种。
8.根据权利要求6所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其特征在于，步骤（3）中植物乳杆菌种子液是将植物乳杆菌ST-III纯培养物以1%~2%（v/v）比例接种至MRS培养基，静置培养获得。
9.根据权利要求8所述的高度浓缩植物乳杆菌增殖剂的使用方法，其特征在于，所述MRS培养基由以下组分组成：蛋白胨10.0 g/L、牛肉膏 10.0g/L、酵母膏5.0 g/L、柠檬酸氢二铵2.0g/L、葡萄糖20.0 g/L、吐温80 1.0 mL/L、乙酸钠 5.0 g/L、K2HPO4·3H2O 2.0 g/L、MgSO4·7H2O 0.58 g/L、MnSO4·H2O 0.25 g/L、琼脂 18.0 g/L及蒸馏水1 L；MRS培养基的pH为6.2~6.6。
CN201811583391.9A 2018-12-24 2018-12-24 一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法 Active CN109666604B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811583391.9A CN109666604B (zh) 2018-12-24 2018-12-24 一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811583391.9A CN109666604B (zh) 2018-12-24 2018-12-24 一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109666604A CN109666604A (zh) 2019-04-23
CN109666604B true CN109666604B (zh) 2022-05-06

Family

ID=66145932

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811583391.9A Active CN109666604B (zh) 2018-12-24 2018-12-24 一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109666604B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111500520B (zh) * 2020-06-02 2023-05-02 光明乳业股份有限公司 一种植物乳杆菌的培养方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102558307A (zh) * 2011-12-16 2012-07-11 浙江大学 一种八肽菌素及其制备与应用
CN102911257A (zh) * 2012-09-21 2013-02-06 无锡市第四人民医院 环脂肽类抗生素及其制备和应用
CN106148251A (zh) * 2016-09-21 2016-11-23 光明乳业股份有限公司 一种类芽孢杆菌发酵液及其制备方法和应用
CN108637010A (zh) * 2018-03-29 2018-10-12 上海金禾天地信息科技有限公司 一种同时显著降低镉、铅含量高效土壤修复方法
CN109796394A (zh) * 2018-12-27 2019-05-24 武汉科诺生物科技股份有限公司 一种从多粘类芽孢杆菌发酵液中提取植物生长激素的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9249076B2 (en) * 2012-09-21 2016-02-02 Butamax Advanced Biofuels Llc Recyclable extractant compositions
EP2999801B1 (en) * 2013-05-20 2018-07-11 Biowish Technologies, Inc. Microbial-based waste water treatment compositions and methods of use thereof
CN106281953A (zh) * 2016-08-18 2017-01-04 安徽天乾健食品科技有限公司 一种有助于改善人体肠道环境促进健康的蓝莓果醋饮料及其制备方法
CN108239176B (zh) * 2016-12-27 2021-08-17 中国海洋大学 低分子量浒苔多糖及其制备方法、硫酸化低分子量浒苔多糖及其制备方法以及应用
CN107897368A (zh) * 2017-11-15 2018-04-13 光明乳业股份有限公司 一种益生菌发酵乳及其制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102558307A (zh) * 2011-12-16 2012-07-11 浙江大学 一种八肽菌素及其制备与应用
CN102911257A (zh) * 2012-09-21 2013-02-06 无锡市第四人民医院 环脂肽类抗生素及其制备和应用
CN106148251A (zh) * 2016-09-21 2016-11-23 光明乳业股份有限公司 一种类芽孢杆菌发酵液及其制备方法和应用
CN108637010A (zh) * 2018-03-29 2018-10-12 上海金禾天地信息科技有限公司 一种同时显著降低镉、铅含量高效土壤修复方法
CN109796394A (zh) * 2018-12-27 2019-05-24 武汉科诺生物科技股份有限公司 一种从多粘类芽孢杆菌发酵液中提取植物生长激素的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Microbiological screening assay for tylosin in pollen;Kochansky, J等;《JOURNAL OF APICULTURAL RESEARCH》;20150324;第45卷(第2期);第37-41页 *
Paenibacillus polymyxa CP7 菌抗革兰氏 阴性菌活性组分的分离和结构分析;陈海英;《中国农业科学》;20090610;第42卷(第6期);第2105-2110页 *
类芽孢杆菌B69中脂肽类化合物Pelgipeptins的分离鉴定及相关基因簇分析;丁锐;《中国博士学位论文全文数据库》;20121030;摘要 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109666604A (zh) 2019-04-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105670958B (zh) 一株低温生防菌株及其应用
CN106148251B (zh) 一种类芽孢杆菌发酵液及其制备方法和应用
CN102199050A (zh) 一种复合微生物肥料及其制备方法
CN111248409A (zh) 一种低盐豆瓣酱发酵方法
CN103509832B (zh) 一种以高浓度磷酸二氢钾为缓冲盐的发酵生产γ-氨基丁酸的方法
CN109666604B (zh) 一种高度浓缩植物乳杆菌增殖剂及其制备方法和使用方法
CN103290065A (zh) 一种利用自然界中分离出的微生物制备龙脑的方法
CN105916986A (zh) 由接种微生物形成的接种物，和使用其生产抗生素的方法
CN101230337A (zh) 亚硝酸还原酶的制备及亚硝酸还原酶制剂的制备方法
CN114231458B (zh) 一种提高瓜果类糖酸比的复合微生物菌剂及其制备方法和应用
CN104087526B (zh) 一种利用地衣芽孢杆菌控制白酒中土臭味的方法
CN114806976B (zh) 一种短乳杆菌及其抑菌物质制备方法
CN114634890B (zh) 一种固氮螺菌、其分离方法和应用
CN110283855B (zh) 一种提高嗜热链球菌210202菌株产gaba能力的方法
CN110257447B (zh) 一种提高乳酸乳球菌乳酸亚种菌株产gaba能力的方法
CN112646728B (zh) 泡盛曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用
CN110358702B (zh) 一株史雷克氏菌及其在降解呕吐毒素中的应用
CN107118885A (zh) 一种利用耐乙醇片球菌生产含gaba发酵酒的方法
WO2017206146A1 (zh) 假丝酵母菌菌株及其应用，以及加工普洱茶的方法
CN110951654A (zh) 一种植物乳杆菌增殖剂及其应用
CN105754908B (zh) 一种铜绿假单胞菌菌株及其应用
CN116515646B (zh) 一种塔宾曲霉及其在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用
CN105821098A (zh) 自絮凝发酵生产α-熊果苷
CN116515647B (zh) 一种溜曲霉及其在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用
CN114806956B (zh) 贝莱斯芽孢杆菌db219及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant